本申請(qǐng)要求2011年11月29日提交的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)系列號(hào)61/564,453、2011年11月22日提交的系列號(hào)61/562,689、和2011年06月14日提交的系列號(hào)61/520,709的優(yōu)先權(quán)，其所有內(nèi)容在此以其全文引入作為參考。

政府支持

本發(fā)明全部或部分是在政府支持的經(jīng)美國(guó)國(guó)稅局獲得的QTDP獎(jiǎng)項(xiàng)號(hào)D2491B1下做出的。政府在本發(fā)明中可能有某些權(quán)利。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及有用于治療和/或預(yù)防眼科疾病的化合物及其組合物。

背景技術(shù)：

視敏度減小或視力完全喪失可以起因于眼的前段和/或眼的后段中組織或結(jié)構(gòu)的功能不良所引起的多種眼病或障礙。在由于前段功能不良而發(fā)生的疾病中，常常涉及視覺(jué)周期中的畸變。視覺(jué)周期(還常稱作類視黃醇周期)包括一系列光驅(qū)動(dòng)和/或酶催化的反應(yīng)，由此通過(guò)在蛋白質(zhì)視蛋白和類視黃醇試劑11-順-視黃醛之間的共價(jià)成鍵形成光敏性生色團(tuán)(稱作視紫質(zhì))，隨后暴露于光，11-順-視黃醛轉(zhuǎn)化成全反式視黃醛，其然后可以再生成11-順-視黃醛以再次與視蛋白相互作用。許多視覺(jué)的、眼科的問(wèn)題可由于干擾這一周期而引起?，F(xiàn)在理解，這些問(wèn)題中至少有一些是由于不適當(dāng)?shù)牡鞍踪|(zhì)折疊，例如蛋白質(zhì)視蛋白的不適當(dāng)折疊。

哺乳動(dòng)物眼中主要的明暗光感受器是視桿細(xì)胞，其包括含有可對(duì)光敏感的蛋白質(zhì)分子(主要是視蛋白)的折疊膜。像哺乳動(dòng)物細(xì)胞中存在的其它蛋白質(zhì)一樣，視蛋白是在胞質(zhì)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(即，在核糖體上)中合成的，然后被傳導(dǎo)至視桿細(xì)胞的細(xì)胞膜。在一些情形，例如由于視蛋白質(zhì)的遺傳缺陷和突變，視蛋白可顯示不適當(dāng)?shù)恼郫B，所形成的構(gòu)象不能適當(dāng)?shù)夭迦胍晽U細(xì)胞的膜中或其他插入但然后不能與11-順-視黃醛適當(dāng)?shù)胤磻?yīng)以形成天然的視紫質(zhì)。在每種情形，其結(jié)果都是對(duì)患病動(dòng)物視知覺(jué)的中度到重度的干擾。

與不適當(dāng)?shù)囊暤鞍渍郫B有關(guān)的疾病和病癥包括色素性視網(wǎng)膜炎(RP)，其為一種進(jìn)行性眼神經(jīng)變性疾病(或一組疾病)，它影響據(jù)估計(jì)全球1到2百萬(wàn)人。在RP中，視網(wǎng)膜中的感光細(xì)胞受到損傷或破壞，導(dǎo)致外周視覺(jué)喪失(即視野收縮)和隨后部分或接近完全的失明。

在美國(guó)人口中，最常見(jiàn)的缺陷是由于視蛋白多肽鏈中第23號(hào)氨基酸的脯氨酸殘基被組氨酸殘基取代(稱作“P23H”)造成的，而這是視蛋白基因突變的結(jié)果。其結(jié)果是產(chǎn)生了蛋白質(zhì)的非穩(wěn)定形式，它在胞質(zhì)中錯(cuò)折疊并且聚結(jié)而不是被輸送到細(xì)胞表面。像很多其它的蛋白質(zhì)構(gòu)象病(PCDs)一樣，臨床上常見(jiàn)的與常染色體顯性RP相關(guān)的P23H視蛋白突變體是錯(cuò)折疊的并被保留在胞內(nèi)。據(jù)認(rèn)為錯(cuò)折疊蛋白質(zhì)的聚結(jié)導(dǎo)致光感受器損傷和細(xì)胞死亡。

近來(lái)的研究已鑒定了小分子，其穩(wěn)定與疾病有關(guān)的錯(cuò)折疊的突變蛋白質(zhì)。一些這樣的小分子被稱作“化學(xué)伴侶蛋白”，它們非特異地穩(wěn)定蛋白質(zhì)。這些小分子的實(shí)例包括甘油和三甲基氧化胺。對(duì)于治療眼病，它們不是很理想，因?yàn)檫@種治療通常需要高劑量，這可能產(chǎn)生毒性副作用。被稱作“藥理學(xué)伴侶蛋白”的其它試劑(其包括天然配體和底物類似物)通過(guò)結(jié)合特定部位而穩(wěn)定蛋白質(zhì)，并已經(jīng)針對(duì)很多錯(cuò)折疊蛋白質(zhì)進(jìn)行了鑒定，例如G-蛋白偶合受體。視蛋白是G-蛋白偶合受體的實(shí)例，其公認(rèn)的藥理性伴侶蛋白包括稱作類視黃醇的一類化合物。因此，一些類視黃醇化合物已顯示出穩(wěn)定突變體視蛋白質(zhì)(例如參見(jiàn)，美國(guó)專利出版物2004-0242704，以及Noorwez等，J.Biol.Chem.，279(16)：16278-16284(2004))。

視覺(jué)周期包括一系列酶催化的反應(yīng)，通常由光脈沖引發(fā)，由此視紫質(zhì)的可見(jiàn)發(fā)色團(tuán)(由視蛋白質(zhì)與11-順-視黃醛共價(jià)結(jié)合構(gòu)成)轉(zhuǎn)化成全反式異構(gòu)體，隨后從活化的視紫質(zhì)中釋放出來(lái)，以形成視蛋白和全反式視黃醛產(chǎn)物。視覺(jué)周期該部分發(fā)生在眼視網(wǎng)膜視桿細(xì)胞的外面部分。該周期的后繼部分發(fā)生在視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)中。此周期的組分包括多種酶，例如脫氫酶和異構(gòu)酶，以及用于在RPE和視桿細(xì)胞之間運(yùn)輸物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。

由于視覺(jué)周期的結(jié)果，產(chǎn)生了稱為視覺(jué)周期產(chǎn)物的多種產(chǎn)物。其中之一是視桿細(xì)胞中作為光脈沖接觸視紫質(zhì)的11-順-視黃醛部分的直接結(jié)果而產(chǎn)生的全反式視黃醛。全反式視黃醛在從活化的視紫質(zhì)中釋放出來(lái)后，可再生回成11-順-視黃醛，或可與另外全反式視黃醛分子和磷脂酰乙醇胺分子反應(yīng)，以生成N-亞視黃基-N-視黃基乙醇胺(稱作“A2E”)，它是一種發(fā)橙光的熒光團(tuán)，隨后可聚集在視桿細(xì)胞和視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)中。隨著A2E的積聚(視覺(jué)周期的正常后果)，它還可轉(zhuǎn)化成脂褐素，這是一種與幾種異常有關(guān)的毒性物質(zhì)，所述異常包括眼科病癥，諸如與年齡有關(guān)的濕性和干性黃斑變性(ARMD)。A2E也可證明對(duì)RPE有毒性，并與干性ARMD有關(guān)。

因?yàn)槎拘砸曈X(jué)周期產(chǎn)物的積聚是生理過(guò)程的正常部分，所以很可能所有的哺乳動(dòng)物，尤其是所有的人類，在整個(gè)生命中都具有某種程度的這種積累。但是，在眼部尤其視網(wǎng)膜的外科手術(shù)期間，需要長(zhǎng)時(shí)間的強(qiáng)光照明，例如，接近白內(nèi)障手術(shù)結(jié)束和植入新的晶狀體時(shí)，這些別樣的自然過(guò)程可因?yàn)橐曈X(jué)周期的天然產(chǎn)物的積聚而產(chǎn)生毒性。另外，由于亮光刺激造成的視紫質(zhì)的過(guò)度活化可經(jīng)由AP-1轉(zhuǎn)錄因子依賴的機(jī)制使感光細(xì)胞發(fā)生凋亡。因此，在手術(shù)之前、之中或之后(或其任何組合)需要可施用的試劑，其具有抑制視紫質(zhì)活化的效果，以及減少視覺(jué)周期產(chǎn)物的生成，否則它們會(huì)累積并導(dǎo)致對(duì)眼、尤其是對(duì)視網(wǎng)膜的毒性。

本發(fā)明通過(guò)提供小分子解決了這一需要，所述小分子非共價(jià)結(jié)合視蛋白或視蛋白的突變形式，用于治療和/或緩解此類病癥，如果不是完全阻止它們。重要地，這類試劑不是天然的類視黃醇，因此不受嚴(yán)格控制進(jìn)入視桿細(xì)胞，其中視蛋白的突變形式被合成和/或視覺(jué)周期產(chǎn)物別樣積累。因此，這類試劑在需要時(shí)可被基本上滴定以促進(jìn)突變視蛋白的適當(dāng)折疊和運(yùn)輸至細(xì)胞膜，或防止可視紫質(zhì)活化，其導(dǎo)致視覺(jué)周期產(chǎn)物例如全反式視黃醛過(guò)度積聚，反過(guò)來(lái)可導(dǎo)致有毒代謝產(chǎn)物。此類化合物可與11-順-視黃醛競(jìng)爭(zhēng)，通過(guò)束緊視蛋白的視黃醛結(jié)合袋減少全反式視黃醛，防止全反式視黃醛的過(guò)度積聚。因此，本發(fā)明提供的化合物的優(yōu)點(diǎn)是，它們不直接抑制11-順-視黃醛在眼中藉以生成的酶催過(guò)程(因此不促成視網(wǎng)膜變性)。而是，限制全反式視黃醛的形成，從而減少A2E的生成。最后，通過(guò)限制11-順-視黃醛結(jié)合視蛋白以形成視紫質(zhì)的能力，由強(qiáng)光刺激尤其是在眼科手術(shù)期間所引起的視紫質(zhì)活化也被減小了，從而防止了其導(dǎo)致的感光細(xì)胞死亡。

在多種眼病中以及隨著正常的老化，可發(fā)生感光細(xì)胞視覺(jué)色素蛋白(視蛋白)的錯(cuò)位。在這兩種情形，錯(cuò)位視蛋白的累積都導(dǎo)致感光細(xì)胞生存力的減弱。隨著時(shí)間的推移，這種錯(cuò)位視蛋白的累積導(dǎo)致視桿細(xì)胞和視錐細(xì)胞死亡、視網(wǎng)膜變性、和視力喪失。本發(fā)明通過(guò)提供校正感光細(xì)胞內(nèi)錯(cuò)位視蛋白的方法解決了這一問(wèn)題，該方法是使錯(cuò)位的視蛋白質(zhì)與可逆和/或非共價(jià)結(jié)合所述錯(cuò)位視蛋白質(zhì)的視蛋白結(jié)合劑接觸，并促進(jìn)所述視蛋白質(zhì)的適當(dāng)胞內(nèi)加工和傳送。這種錯(cuò)位校正解除了感光細(xì)胞的應(yīng)力，防止了在視力喪失的多種疾病中以及在暗光視覺(jué)和視桿細(xì)胞介導(dǎo)的周邊視覺(jué)、視錐細(xì)胞介導(dǎo)的中央視覺(jué)、及夜間視覺(jué)喪失的正常年齡相關(guān)性下降中感光細(xì)胞的生存力下降和死亡。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

發(fā)明概述

在一方面中，本發(fā)明提供了具有式I結(jié)構(gòu)的化合物，包括其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物和水合物，和所述化合物的組合物：

其中B、T、R¹、R²、R³、R⁴、R_a、R_b、和X如本文別處所述。

在相關(guān)方面，本發(fā)明涉及抑制視覺(jué)周期產(chǎn)物形成或積累的方法，其包括使視蛋白質(zhì)(opsin protein)與本文所述的化合物接觸，相對(duì)于不發(fā)生所述接觸，抑制所述視覺(jué)周期產(chǎn)物的形成。

在另一方面，本發(fā)明涉及通過(guò)防止哺乳動(dòng)物眼部手術(shù)期間視紫質(zhì)再生來(lái)減小與眼科手術(shù)有關(guān)的光毒性的方法，和/或通過(guò)分步防止光活化期間視紫質(zhì)形成來(lái)阻止或減慢毒性視覺(jué)周期產(chǎn)物的形成的方法，從而提供與視覺(jué)產(chǎn)物積聚有關(guān)的眼病例如濕性或干性ARMD的治療。

在又一方面，本發(fā)明涉及校正突變的視蛋白質(zhì)的適當(dāng)折疊和運(yùn)輸?shù)姆椒?，其包括使突變的視蛋白質(zhì)與化合物接觸，相對(duì)于不發(fā)生所述接觸，穩(wěn)定了蛋白質(zhì)合適的三維構(gòu)象，其中所述化合物具有式I結(jié)構(gòu)，包括其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物和水合物。

在一實(shí)施方案中，配體可逆地或非共價(jià)地與視蛋白選擇性結(jié)合。在另一實(shí)施方案中，配體在或者靠近視蛋白質(zhì)的11-順-視黃醛結(jié)合口袋處結(jié)合。在又一實(shí)施方案中，配體與視蛋白質(zhì)結(jié)合以便當(dāng)11-順-視黃醛與視蛋白質(zhì)在該配體存在下接觸時(shí)，抑制或減慢11-順-視黃醛與視蛋白質(zhì)的共價(jià)結(jié)合。在另一實(shí)施方案中，配體在視蛋白質(zhì)的視黃醛結(jié)合口袋中與視蛋白結(jié)合或者破壞11-順-視黃醛與視蛋白的視黃醛結(jié)合口袋的結(jié)合。在又一實(shí)施方案中，配體與視蛋白質(zhì)結(jié)合以便抑制11-順-視黃醛與視蛋白質(zhì)的共價(jià)結(jié)合。在另一實(shí)施方案中，哺乳動(dòng)物是人。

在另一實(shí)施方案中，減慢或阻止?jié)裥曰蚋尚訟RMD的進(jìn)展與降低視覺(jué)周期產(chǎn)物的水平有關(guān)，例如，由全反式視黃醛所形成的視覺(jué)周期產(chǎn)物，如脂褐素或N-亞視黃基-N-視黃基乙醇胺(A2E)。在又一實(shí)施方案中，減慢或阻止RP的進(jìn)展與校正突變體視蛋白的折疊有關(guān)。在另一實(shí)施方案中，施用是表面施用、局部施用(例如眼內(nèi)或眼周注射或植入)或全身性施用(例如口服、注射)。在又一實(shí)施方案中，光毒性與眼部操作(例如眼科手術(shù))有關(guān)。在又一實(shí)施方案中，施用在眼部手術(shù)之前、之中或之后進(jìn)行。

在多種眼病中以及隨著正常的老化，可發(fā)生感光細(xì)胞視覺(jué)色素蛋白(視蛋白)的錯(cuò)位。在這兩種情形，錯(cuò)位視蛋白的累積都導(dǎo)致感光細(xì)胞生存力的減弱。隨著時(shí)間的推移，這種錯(cuò)位視蛋白的累積導(dǎo)致視桿細(xì)胞和視錐細(xì)胞死亡、視網(wǎng)膜變性、和視力喪失。在一方面，本發(fā)明提供校正感光細(xì)胞內(nèi)錯(cuò)位視蛋白的方法，其包括使錯(cuò)位的視蛋白質(zhì)與可逆和/或非共價(jià)結(jié)合所述錯(cuò)位視蛋白質(zhì)的視蛋白結(jié)合劑接觸，以促進(jìn)所述視蛋白質(zhì)的適當(dāng)胞內(nèi)加工和傳送。這種錯(cuò)位校正降低了感光細(xì)胞的應(yīng)力，防止了在視力喪失的多種疾病中以及在暗光視覺(jué)和視桿細(xì)胞介導(dǎo)的周邊視覺(jué)、視錐細(xì)胞介導(dǎo)的中央視覺(jué)、及夜間視覺(jué)喪失的正常年齡相關(guān)性下降中感光細(xì)胞的生存力下降和死亡。

在各種實(shí)施方案中，眼部蛋白質(zhì)錯(cuò)位障礙是任何一種或多種的濕性或干性形式的黃斑變性、色素性視網(wǎng)膜炎、視網(wǎng)膜或黃斑營(yíng)養(yǎng)不良、斯塔加特(Stargardt)病、索斯比(Sorsby)營(yíng)養(yǎng)不良、常染色體顯性玻璃疣、貝斯特(Best)營(yíng)養(yǎng)不良、外周蛋白突變相關(guān)的黃斑營(yíng)養(yǎng)不良(peripherin mutation associate with macular dystrophy)、顯性形式的斯塔加特(Stargart)病、北卡羅來(lái)納黃斑營(yíng)養(yǎng)不良、光毒性、色素性視網(wǎng)膜炎、年齡有關(guān)的正常視力喪失和年齡有關(guān)的夜間視力正常喪失。

在另一實(shí)施方案中，所述方法進(jìn)一步涉及給哺乳動(dòng)物優(yōu)選人施用至少一種有效數(shù)量的另外試劑，所述試劑選自蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、從ER至高爾基體的蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑、Hsp90伴侶蛋白抑制劑、熱休克反應(yīng)活化劑、糖苷酶抑制劑、和組蛋白脫乙酰酶抑制劑。在又一實(shí)施方案中，視蛋白結(jié)合配體和另外的試劑同時(shí)服用。

在另一實(shí)施方案中，視蛋白結(jié)合配體和另外的試劑各自摻入到提供其長(zhǎng)期釋放的組合物中。在另一實(shí)施方案中，所述組合物是微球、納米球、納米乳狀液或植入物的一部分。在另一實(shí)施方案中，所述組合物還涉及施用礦物質(zhì)補(bǔ)充劑，至少一種抗炎劑，例如甾族化合物(如任何一種或多種的可的松、氫化可的松、潑尼松、潑尼松龍、甲潑尼松龍、曲安西龍、倍他米松、倍氯米松和地塞米松)，或至少一種抗氧化劑，例如維生素A、維生素C和維生素E。在各種實(shí)施方案中，視蛋白結(jié)合配體、抗炎劑、和/或抗氧化劑同時(shí)施用。

附圖簡(jiǎn)述

圖1顯示，相對(duì)于溶媒(DMSO)單獨(dú)存在的色素形成，在突變型蛋白產(chǎn)生期間用經(jīng)20μMβ-紫羅蘭酮處理P23H視蛋白的視網(wǎng)膜所處理時(shí)，500nm處吸收色素再生中的增加。

定義

在整個(gè)公開(kāi)中使用時(shí)，下列術(shù)語(yǔ)，除非另有說(shuō)明，否則應(yīng)理解為具有以下含義。

感光細(xì)胞視覺(jué)色素蛋白(例如視蛋白，尤其是人視蛋白)的“錯(cuò)位”是指發(fā)現(xiàn)合成的蛋白質(zhì)不在正常的或合適的細(xì)胞部位。

“藥理學(xué)伴侶蛋白”是指小分子量化合物，其以改變所述蛋白質(zhì)的折疊或構(gòu)象的方式與蛋白質(zhì)(通常與錯(cuò)折疊或解折疊的蛋白質(zhì))相互作用。這樣的相互作用對(duì)于蛋白質(zhì)的細(xì)胞命運(yùn)可以有不同的影響，包括但不限于導(dǎo)致功能蛋白的穩(wěn)定性增加和水平增高、非功能蛋白的穩(wěn)定性增加和水平增高，或者功能或非功能蛋白的穩(wěn)定性降低和水平下降。

“生產(chǎn)性伴侶蛋白”是指當(dāng)與蛋白質(zhì)相互作用時(shí)導(dǎo)致功能蛋白的水平增高的藥理學(xué)伴侶蛋白。

“反生產(chǎn)的、毀滅性或破壞性伴侶蛋白”是指一種藥理學(xué)伴侶蛋白，它與蛋白質(zhì)(通常與錯(cuò)折疊的或解折疊的蛋白質(zhì))相互作用，且這種相互作用導(dǎo)致功能或非功能蛋白的穩(wěn)定性降低和/或水平下降。

“蛋白酶體抑制劑”是指降低蛋白酶體活性例如降解泛素化蛋白的化合物。

“自噬抑制劑”是指減少細(xì)胞組分被該組分所位其中的細(xì)胞所降解的化合物。

“溶酶體抑制劑”是指減少大分子被溶酶體胞內(nèi)消化的化合物。在一實(shí)施方案中，溶酶體抑制劑降低溶酶體的蛋白分解活性。

“ER-高爾基體蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑”是指減少蛋白質(zhì)從ER(內(nèi)質(zhì)網(wǎng))向高爾基體，或從高爾基體向ER轉(zhuǎn)運(yùn)的化合物。

“HSP90伴侶蛋白抑制劑”是指降低熱休克蛋白90(HSP90)的伴侶蛋白活性的化合物。在一實(shí)施方案中，該抑制劑改變蛋白質(zhì)與HSP90 ATP/ADP口袋的結(jié)合。

“熱休克反應(yīng)活化劑”是指提高熱休克通道組分的伴侶蛋白活性或表達(dá)的化合物。熱休克通道組分包括但不限于HSP100、HSP90、HSP70、HSP60、HSP40和小的HSP家族成員。

“糖苷酶抑制劑”是指降低切割糖苷鍵的酶活性的化合物。

“組蛋白脫乙酰酶抑制劑”是指降低組蛋白脫乙酰化的酶活性的化合物。

“減小”或“增高”分別是指負(fù)向或正向的變化。在具體的實(shí)施方案中，該變化至少是在視蛋白結(jié)合配體不存在時(shí)所產(chǎn)生的蛋白質(zhì)初始水平的約10％、25％、50％、75％、或100％。

在本文使用時(shí)，術(shù)語(yǔ)“野生型構(gòu)象”是指其氨基酸序列沒(méi)有突變的蛋白質(zhì)的三維構(gòu)象或形狀。對(duì)于視蛋白，這意味著蛋白質(zhì)沒(méi)有引起錯(cuò)填補(bǔ)的突變，例如指定為P23H的突變(意指在從N-末端算起的23位殘基脯氨酸被組氨酸取代)?！耙吧蜆?gòu)象”的視蛋白具有視蛋白生物功能，包括但不限于，結(jié)合類視黃醇、視覺(jué)周期功能、和插入感光細(xì)胞膜中。

“試劑”是指小化合物(也稱作“化合物”)、多肽、多核苷酸、或其片段。除非本文對(duì)特定的試劑或化合物作專門說(shuō)明，術(shù)語(yǔ)化合物和試劑可互換地使用。

蛋白質(zhì)“校正的構(gòu)象”是指誘發(fā)蛋白質(zhì)采取具有至少一種與野生型蛋白質(zhì)相關(guān)的生物活性的構(gòu)象。

“錯(cuò)折疊視蛋白”是指蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)與野生型蛋白質(zhì)的構(gòu)象不同，以致于該錯(cuò)折疊的蛋白質(zhì)缺少與野生型蛋白質(zhì)相關(guān)的一種或多種生物活性。

“選擇性結(jié)合”是指化合物識(shí)別并結(jié)合樣品中例如生物樣品中的本發(fā)明的多肽，例如視蛋白，但它基本上不識(shí)別和結(jié)合其它分子，尤其是非視蛋白多肽。

“有效數(shù)量”或“治療有效量”是指試劑的水平足以對(duì)細(xì)胞、組織或者器官或患者發(fā)揮生理效應(yīng)。當(dāng)本文使用時(shí)，它是足以實(shí)行本發(fā)明的方法以實(shí)現(xiàn)預(yù)期結(jié)果的數(shù)量。

“藥理性伴侶蛋白”是指一種分子，它在接觸突變蛋白質(zhì)時(shí)，能夠促進(jìn)/穩(wěn)定該蛋白質(zhì)的適當(dāng)折疊，使得該蛋白質(zhì)的作用和功能比所述分子不存在時(shí)更像是野生型蛋白質(zhì)。

“對(duì)照”是指參照狀態(tài)。例如，在將接觸本發(fā)明試劑的細(xì)胞與未接觸該試劑的對(duì)應(yīng)細(xì)胞相比較時(shí)，后者是“對(duì)照”或“對(duì)照”細(xì)胞。

“治療”是指減小、抑制、減弱、削弱、阻?；蚍€(wěn)定疾病、優(yōu)選眼病(例如RP、AMD和/或光毒性)的發(fā)展或進(jìn)行。

“預(yù)防”是指降低受試者發(fā)展病癥、疾病或障礙(優(yōu)選眼病，例如RP、AMD和/或光毒性)的風(fēng)險(xiǎn)。

“競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合”意指本發(fā)明化合物和內(nèi)源性配體不能同時(shí)與靶標(biāo)結(jié)合。測(cè)定競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合的試驗(yàn)是本領(lǐng)域已知的，包括通過(guò)測(cè)量例如t_1/2測(cè)定本發(fā)明化合物和內(nèi)源性配體在結(jié)合中的劑量依賴性抑制。

“藥學(xué)上可接受的鹽”是由本發(fā)明化合物的一種酸性或堿性基團(tuán)所形成的鹽。示例性的鹽包括但不限于：硫酸鹽、檸檬酸鹽、乙酸鹽、草酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、酸式磷酸鹽、異煙酸鹽、乳酸鹽、水楊酸鹽、酸式檸檬酸鹽、酒石酸鹽、油酸鹽、鞣酸鹽、泛酸鹽、酒石酸氫鹽、抗壞血酸鹽、琥珀酸鹽、馬來(lái)酸鹽、龍膽酸鹽、富馬酸鹽、葡糖酸鹽、葡糖醛酸鹽、糖二酸鹽、甲酸鹽、苯甲酸鹽、谷氨酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽、和雙羥萘酸鹽(即，1，1′-亞甲基-雙-(2-羥基-3-萘甲酸鹽))。

術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的鹽”還指由具有酸性官能基(例如羧酸官能基)的本發(fā)明化合物和藥學(xué)上可接受的無(wú)機(jī)或有機(jī)堿所制備的鹽。合適的堿包括但不限于：堿金屬如鈉、鉀和鋰的氫氧化物；堿土金屬如鈣和鎂的氫氧化物；其它金屬如鋁和鋅的氫氧化物；氨和有機(jī)胺，例如未取代的或者羥基取代的一、二、或三烷基胺；二環(huán)己基胺；三丁胺；吡啶；N-甲基-N-乙胺；二乙胺；三乙胺；一、二、或三(2-羥基-低級(jí)烷基胺)，例如一、二、或三(2-羥基乙基)-胺、2-羥基-叔丁基胺或三(羥甲基)甲胺，N，N-二低級(jí)烷基-N-(羥基低級(jí)烷基)-胺，例如N，N-二甲基-N-(2-羥乙基)-胺、或三(2-羥乙基)胺；N-甲基-D-葡糖胺；以及氨基酸，例如精氨酸、賴氨酸等。

術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的鹽”還指由本文公開(kāi)的具有堿性官能基(例如氨基官能基)的化合物和藥學(xué)上可接受的無(wú)機(jī)或有機(jī)酸所制備的鹽，例如實(shí)施例1的化合物的鹽。合適的酸包括但不限于：硫酸氫鹽、檸檬酸、乙酸、草酸、鹽酸、溴化氫、碘化氫、硝酸、磷酸、異煙酸、乳酸、水楊酸、酒石酸、抗壞血酸、琥珀酸、馬來(lái)酸、苯磺酸、富馬酸、葡糖酸、葡糖醛酸、糖二酸、甲酸、苯甲酸、谷氨酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸和對(duì)甲苯磺酸。

本文所用的術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的賦形劑”表示適合施用到人體內(nèi)的一種或多種相容的固體或液體填料(tiller)、稀釋劑或包封物質(zhì)。術(shù)語(yǔ)“賦形劑”包括加到藥物組合物(pharmacological composition)中以進(jìn)一步促進(jìn)化合物施用的惰性物質(zhì)。賦形劑的實(shí)例包括但不限于碳酸鈣、磷酸鈣、多種糖和多種類型的淀粉、纖維素衍生物、明膠、植物油和聚乙二醇。

術(shù)語(yǔ)“載體”表示天然或合成的有機(jī)或無(wú)機(jī)成分，其與活性成分結(jié)合以促進(jìn)給藥。

術(shù)語(yǔ)“腸胃外”包括皮下、鞘內(nèi)、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)或輸注。

術(shù)語(yǔ)“視覺(jué)周期產(chǎn)物”是指作為視覺(jué)周期(反應(yīng)周期，其中視蛋白與11-順-視黃醛結(jié)合形成視紫質(zhì)，它接受光脈沖將11-順-視黃醛轉(zhuǎn)化成全反式視黃醛，后者隨后從分子中釋放以再生視蛋白，并隨后結(jié)合新的11-順-視黃醛以再生成視紫質(zhì))的一或多種反應(yīng)的天然產(chǎn)物所產(chǎn)生的化學(xué)實(shí)體。這類視覺(jué)周期產(chǎn)物包括但不限于：全反式視黃醛、脂褐素和A2E。

術(shù)語(yǔ)“光毒性”是指任何與視覺(jué)周期產(chǎn)物的產(chǎn)生和/或積累相伴隨的、有關(guān)的或因其引起的影響視覺(jué)的病癥。視覺(jué)周期產(chǎn)物包括但不限于全反式視黃醛、脂褐素或A2E。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，光毒性與眼睛暴露在大量光下或者很高的光強(qiáng)下有關(guān)，例如在視網(wǎng)膜手術(shù)操作期間所發(fā)生的。

術(shù)語(yǔ)“視蛋白”是指視蛋白質(zhì)，優(yōu)選哺乳動(dòng)物視蛋白質(zhì)，最優(yōu)選人視蛋白質(zhì)。在一實(shí)施方案中，視蛋白質(zhì)是野生型(即生理活性)的構(gòu)象。測(cè)定生理活性的一種方法是測(cè)定視蛋白結(jié)合11-順-視黃醛和形成活性視紫質(zhì)的能力。突變的視蛋白，例如P23H突變體，通常是錯(cuò)折疊的，其結(jié)合11-順-視黃醛的能力降低，因此很少形成或不形成視紫質(zhì)。在突變體視蛋白的構(gòu)象經(jīng)過(guò)校正(例如，通過(guò)與藥理學(xué)伴侶蛋白結(jié)合)后，該視蛋白正確地插入到視桿細(xì)胞的膜中，以使其構(gòu)象與非突變體視蛋白相同或基本上相同。這允許突變型視蛋白結(jié)合11-順-視黃醛以形成活性視紫質(zhì)。因此，執(zhí)行本發(fā)明的方法可減少視覺(jué)周期產(chǎn)物的形成。

“烷基”是指碳原子連續(xù)的非環(huán)狀的鏈，其可以被其它化學(xué)基團(tuán)取代。它也可以是分支的或未分支的、取代的或未取代的。

“低級(jí)烷基”是指支鏈或直鏈的非環(huán)狀烷基，其包含1-10個(gè)碳原子、優(yōu)選1-8個(gè)碳原子、更優(yōu)選1-6個(gè)碳原子。示例性的低級(jí)烷基包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、新戊基、異戊基、己基和辛基。

本文公開(kāi)的所有烷基、烯基或炔基可以被一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)取代：低級(jí)烷基、羥基、酯、酰胺基(amidyl)、氧代、羧基、甲酰胺基、鹵素、氰基、硝酸根、亞硝酸根、硫代硝酸根(thionitrate)、硫代亞硝酸根(thionitrite)、巰基和氨基(如同本文另處所定義)。

“鹵代烷基”是如指如本文定義的低級(jí)烷基、烯基、炔基、橋接的環(huán)烷基、環(huán)烷基或雜環(huán)基，其連接一個(gè)或多個(gè)如本文定義的鹵原子。示例性的鹵代烷基包括包括三氟甲基、氯甲基、2-溴丁基和1-溴-2-氯-戊基。

“烯基”是指可包含一個(gè)或多個(gè)碳-碳雙鍵的支鏈或直鏈的C₂-C₁₀烴(優(yōu)選C₂-C₈烴、更優(yōu)選C₂-C₆烴)。示例性的烯基包括丙烯基、丁烯-1-基、異丁烯基、戊烯-1-基、2，2-甲基丁烯-1-基、3-甲基丁烯-1-基、己烯(hexan)-1-基、庚烯-1-基和辛烯-1-基。

“低級(jí)烯基”是指可包含一個(gè)或兩個(gè)碳-碳雙鍵的支鏈或直鏈C₂-C₄烴。

“取代的烯基”是指可包含一個(gè)或多個(gè)碳-碳雙鍵的支鏈或直鏈的C₂-C₁₀烴(優(yōu)選C₂-C₈烴、更優(yōu)選C₂-C₆烴)，其中一個(gè)或多個(gè)氫原子已被一個(gè)或多個(gè)R¹⁰⁰基團(tuán)取代，其中各R¹⁰⁰獨(dú)立地是如本文定義的羥基、氧代、羧基、甲酰胺基、鹵素、氰基或氨基。

“炔基”是指可包含一個(gè)或多個(gè)碳-碳三鍵的不飽和、非環(huán)的C₂-C₁₀烴(優(yōu)選C₂-C₈烴、更優(yōu)選C₂-C₆烴)。示例性的炔基包括乙炔基、丙炔基、丁炔-1-基、丁炔-2-基、戊炔(pentyl)-1-基、戊炔-2-基、3-甲基丁炔-1-基、己炔(hexyl)-1-基、己炔-2-基、己炔-3-基和3，3-二甲基丁炔-1-基。

“低級(jí)炔基”是指可包含一個(gè)或兩個(gè)碳-碳三鍵的支鏈或直鏈C₂-C₄烴。

“橋接的環(huán)烷基”是指經(jīng)由相鄰或不相鄰原子稠合在一起的兩個(gè)或更多的環(huán)烷基、雜環(huán)基或其組合。橋接的環(huán)烷基可以是未被取代的或者被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)獨(dú)立選自以下基團(tuán)的取代基取代：烷基、烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、羥基、鹵素、羧基、烷基羧酸、芳基、酰胺基、酯、烷基羧酸酯、甲酰胺基、烷基甲酰胺基、氧代和硝基。示例性的橋接的環(huán)烷基包括金剛烷基、十氫萘基、奎寧環(huán)基、2，6-二氧雜雙環(huán)(3.3.0)辛烷、7-氧雜雙環(huán)(2.2.1)庚基和8-氮雜雙環(huán)(3.2.1)辛-2-烯基。

“環(huán)烷基”是指包含約3個(gè)至約10個(gè)碳原子的飽和或不飽和環(huán)狀烴。環(huán)烷基可以是未被取代的或者被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)獨(dú)立選自以下基團(tuán)的取代基取代：烷基、烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、烷基芳基氨基、芳基、酰胺基、酯、羥基、鹵素、羧基、烷基羧酸、烷基羧酸酯、甲酰胺基、烷基甲酰胺基、氧代、烷基亞磺?；拖趸Ｊ纠缘沫h(huán)烷基包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)己烯基和環(huán)庚-1，3-二烯基。

“雜環(huán)基環(huán)或基團(tuán)”是指具有約2個(gè)至約12個(gè)碳原子的飽和或不飽和的環(huán)或多環(huán)的烴基，其中1到約4個(gè)碳原子被一個(gè)或多個(gè)氮、氧和/或硫原子取代。硫可以為硫代(thio)、亞磺酰基或磺?；难趸癄顟B(tài)。雜環(huán)基環(huán)或基團(tuán)可以與芳族烴基稠合。雜環(huán)基團(tuán)可以是未被取代的或被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)獨(dú)立選自以下基團(tuán)的取代基取代：烷基、烷氧基、氨基、烷基硫基、芳基氧基、芳基硫基、芳基烷基、羥基、氧代、硫醛、鹵素、羧基、羧酸酯、烷基羧酸、烷基羧酸酯、芳基、芳基羧酸、芳基羧酸酯、酰胺基、酯、烷基羰基、芳基羰基、烷基亞磺?；?、甲酰胺基、烷基甲酰胺基、芳基甲酰胺基、磺酸、磺酸酯、磺酰胺、硝酸根和硝基。示例性的雜環(huán)基團(tuán)包括吡咯基、呋喃基、噻吩基、3-吡咯啉基、4，5，6-三氫-2H-吡喃基、吡啶基、1，4-二氫吡啶基、吡唑基、三唑基、嘧啶基、噠嗪基、噁唑基、噻唑基、噻吩并[2，3-d]嘧啶、4，5，6，7-四氫苯并[b]噻吩、咪唑基、吲哚基、噻吩基、呋喃基、四氫呋喃基、四唑基、吡咯啉基、吡咯烷基(pyrrolindinyl)、噁唑烷基(oxazolindinyl)、1，3-二氧戊環(huán)基(dioxolanyl)、咪唑啉基、咪唑烷基(imidazolindinyl)、吡唑啉基、吡唑烷基、異噁唑基、異噻唑基、1，2，3-噁二唑基、1，2，3-三唑基、1，3，4-噻二唑基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、哌啶基、1，4-二氧雜環(huán)己烷基(dioxanyl)、嗎啉基、1，4-二噻烷基、硫代碼啉基、吡嗪基、哌嗪基、1，3，5-三嗪基、1，3，5-三噻烷基、苯并(b)噻吩基、苯并咪唑基、苯并噻唑啉基、喹啉基和2，6-二氧雜雙環(huán)(3.3.0)辛烷。

“雜環(huán)化合物”是指包含至少一個(gè)芳基或雜環(huán)基環(huán)的單環(huán)和多環(huán)化合物。

“芳基”是指包含一個(gè)或兩個(gè)芳族環(huán)的單環(huán)、雙環(huán)、碳環(huán)或雜環(huán)系統(tǒng)。示例性的芳基包括苯基、吡啶基、萘基、喹啉基(quinoyl)、四氫萘基、呋喃基、茚滿基、茚基、吲哚基。芳基(包括雙環(huán)芳基)可以是未被取代的或者被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)獨(dú)立選自以下基團(tuán)的取代基取代：烷基、烷氧基、烷基硫基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、烷基芳基氨基、鹵素、氰基、烷基亞磺?；?、羥基、羧基、羧酸酯、烷基羧酸、烷基羧酸酯、芳基、芳基羧酸、芳基羧酸酯、烷基羰基、芳基羰基、酰胺基、酯、甲酰胺基、烷基甲酰胺基、氨甲?；?carbomyl)、磺酸、磺酸酯、磺酰胺基和硝基。示例性的取代的芳基包括四氟苯基、五氟苯基、磺酰胺、烷基磺酰基和芳基磺?；?。

“環(huán)烯基”是指可包含一個(gè)或多個(gè)碳-碳雙鍵的不飽和的環(huán)狀C₃-C₁₀烴(優(yōu)選C₃-C₈烴、更優(yōu)選C₃-C₆烴)。

“烷基芳基”是指如本文定義的烷基，其連接如本文定義的芳基。示例性的烷基芳基包括芐基、苯基乙基、羥基芐基、氟芐基和氟代苯基乙基。

“芳基烷基”是指如本文定義的芳基，其連接如本文定義的烷基。示例性的芳基烷基實(shí)例包括芐基、苯基乙基、4-羥基芐基、3-氟芐基和2-氟苯基乙基。

“芳基烯基”是指如本文定義的芳基，其連接如本文定義的烯基。示例性的芳基烯基包括苯乙烯基和丙烯基苯基。

“環(huán)烷基烷基”是指與如本文定義的烷基連接的如本文定義的環(huán)烷基。

“環(huán)烷基烷氧基”是指與如本文定義的烷氧基連接的如本文定義的環(huán)烷基。

“環(huán)烷基烷基硫基”是指與如本文定義的烷基硫基連接的如本文定義的環(huán)烷基。

“雜環(huán)基烷基”是指與如本文定義的烷基連接的如本文定義的雜環(huán)基。

“芳基雜環(huán)”是指包含如本文定義的芳基環(huán)的二環(huán)或三環(huán)，其經(jīng)由該芳基環(huán)的兩個(gè)相鄰的碳原子與如本文定義的雜環(huán)相連。示例性的芳基雜環(huán)包括二氫吲哚和1，2，3，4-四氫喹啉。

“烷基雜環(huán)”是指如本文定義的雜環(huán)基，其連接如本文定義的烷基。示例性的烷基雜環(huán)包括2-吡啶甲基和1-甲基哌啶-2-酮-3-甲基。

“烷氧基”是指R₅₀O-，其中R₅₀是如本文定義的烷基、烯基或炔基(優(yōu)選如本文定義的低級(jí)烷基或鹵代烷基)。示例性的烷氧基包括甲氧基、乙氧基、叔丁氧基、環(huán)戊氧基、三氟甲氧基、丙烯基氧基和炔丙氧基。

“芳氧基”是指R₅₅O-，其中R₅₅是如本文定義的芳基。示例性的芳氧基包括苯氧基、萘基氧基(napthyloxy)、喹啉基氧基、異喹嗪基氧基。

“烷基硫基”是指R₅₀S-，其中R₅₀是如本文定義的烷基。

“低級(jí)烷基硫基”是指如本文定義的低級(jí)烷基，其與如本文定義的硫基基團(tuán)連接。

“芳基烷氧基”或“烷氧基芳基”是指與如本文定義的芳基連接的如本文定義的烷氧基。示例性的芳基烷氧基包括芐氧基、苯基乙氧基和氯代苯基乙氧基。

“芳基烷基硫基”是指與如本文定義的芳基連接的如本文定義的烷基硫基。示例性的芳基烷硫基包括芐基硫基、苯基乙基硫基和氯代苯基乙基硫基。

“芳基烷基硫基烷基”是指與如本文定義的烷基連接的如本文定義的芳基烷基硫基。示例性的芳基烷基硫基烷基包括芐基硫基甲基、苯基乙基硫基甲基和氯代苯基乙基硫基甲基。

“烷基硫基烷基”是指與如本文定義的烷基連接的如本文定義的烷基硫基。示例性的烷基硫基烷基包括烯丙基硫基甲基、乙基硫基甲基和三氟乙基硫基甲基。

“烷氧基烷基”是指與如本文定義的烷基連接的如本文定義的烷氧基。示例性的烷氧基烷基包括甲氧基甲基、甲氧基乙基和異丙氧基甲基。

“烷氧基鹵代烷基”是指與如本文定義的鹵代烷基連接的如本文定義的烷氧基。示例性的烷氧基鹵代烷基包括4-甲氧基-2-氯丁基。

“環(huán)烷基氧基”是指R₅₄O-，其中R₅₄是如本文定義的環(huán)烷基或橋接的環(huán)烷基。示例性的環(huán)烷基氧基包括環(huán)丙基氧基、環(huán)戊基氧基和環(huán)己基氧基。

“環(huán)烷基硫基”是指R₅₄S-，其中R₅₄是如本文定義的環(huán)烷基或橋接的環(huán)烷基。示例性的環(huán)烷基硫基包括環(huán)丙基硫基、環(huán)戊基硫基和環(huán)己基硫基。

“鹵代烷氧基”是指如本文定義的烷氧基，其中該烷氧基上的一個(gè)或多個(gè)氫原子被如本文定義的鹵原子取代。示例性的鹵代烷氧基包括1，1，1-三氯乙氧基和2-溴丁氧基。

“羥基”是指-OH?！把趸笔侵?O-。“氧代”是指＝O。

“氧化基(oxylate)”是指-O^-R₇₇⁺，其中R₇₇是有機(jī)或無(wú)機(jī)的陽(yáng)離子。

“肟”是指＝N-OR₈₁，其中R₈₁是氫、烷基、芳基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、羧酸酯、烷基羰基、芳基羰基、甲酰胺基、烷氧基烷基或烷氧基芳基。

“腙”是指＝N-N(R₈₁)(R′₈₁)，其中R′₈₁獨(dú)立地選自R₈₁，且R₈₁如同本文所定義。

“肼基”是指H₂N-N(H)-。

“有機(jī)陽(yáng)離子”是指帶正電的有機(jī)離子。示例性的有機(jī)陽(yáng)離子包括烷基取代的銨陽(yáng)離子。

“無(wú)機(jī)陽(yáng)離子”是指帶正電的金屬離子。示例性的無(wú)機(jī)陽(yáng)離子包括I族金屬陽(yáng)離子，例如鈉、鉀、鎂和鈣。

“羥基烷基”是指與如本文定義的烷基連接的如本文定義的羥基。

“硝酸根”是指-O-NO₂，即，氧化的氮。

“硝基”是指基團(tuán)-NO₂，和“硝基化的”是指化合物已被其取代。

“腈”和“氰基”是指-CN。

“鹵素”或“鹵”是指碘(I)、溴(Br)、氯(Cl)、和/或氟(F)。

“亞胺”是指-C(＝N-R₅₁)-，其中R₅₁是氫原子、烷基、芳基或芳基雜環(huán)，其如本文所定義。

“胺”是指含有至少一個(gè)堿性氮原子的任何有機(jī)化合物。

“氨基”是指-NH₂、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、烷基芳基氨基或雜環(huán)，其如本文所定義。

“烷基氨基”是指R₅₀NH-，其中R₅₀是如本文定義的烷基。示例性的烷基氨基包括甲基氨基、乙基氨基、丁基氨基和環(huán)己基氨基。

“芳基氨基”是指R₅₅NH-，其中R₅₅是本文別處定義的芳基。

“二烷基氨基”是指R₅₂R₅₃N-，其中R₅₂和R₅₃各自獨(dú)立地是如本文定義的烷基。示例性的二烷基氨基包括二甲基氨基、二乙基氨基和甲基炔丙基氨基。

“二芳基氨基”是指R₅₅R₆₀N-，其中R₅₅和R₆₀各自獨(dú)立地是如本文定義的芳基。

“烷基芳基氨基”或“芳基烷基氨基”指R₅₂R₃₃N-，其中R₅₂是如本文定義的烷基，R₅₅是如本文定義的芳基。

“烷基芳基烷基氨基”是指R₅₂R₇₉N-，其中R₅₂是如本文定義的烷基，R₇₉是如本文定義的芳基烷基。

“烷基環(huán)烷基氨基”指R₅₂R₈₀N-，其中R₅₂是如本文定義的烷基，R₈₀是如本文定義的環(huán)烷基。

“氨基烷基”是指與如本文定義的烷基相連接的如本文定義的氨基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、烷基芳基氨基或雜環(huán)。示例性的氨基烷基包括二甲基氨基丙基、二苯基氨基環(huán)戊基和甲基氨基甲基。

“氨基芳基”是指與烷基氨基、芳基氨基或芳基烷基氨基連接的芳基。示例性的氨基芳基包括苯胺基、N-甲基苯胺基和N-芐基苯胺基。

“巰基”是指-SH?！傲蚧?thio)”是指-S-?！皝喕酋；笔侵?S(O)-。

“甲硫醛”是指-C(S)-?！傲蛉笔侵福絊?！盎酋；笔侵?S(O)₂-。

“磺酸”是指-S(O)₂OR₇₆，其中R₇₆是氫、有機(jī)陽(yáng)離子或無(wú)機(jī)陽(yáng)離子，其如本文所定義。

“烷基磺酸”是指與如本文定義的烷基連接的如本文定義的磺酸基。

“芳基磺酸”是指與如本文定義的芳基連接的如本文定義的磺酸基。

“磺酸酯”代表-S(O)₂OR₅₈，其中R₅₈是如本文定義的烷基、芳基或芳基雜環(huán)。

“磺酰胺基”是指-S(O)₂-N(R₅₁)(R₅₇)，其中R₅₁和R₅₇各自獨(dú)立地是如本文定義的氫原子、烷基、芳基或芳基雜環(huán)，或者R₅₁和R₅₇合起來(lái)是如本文定義的雜環(huán)、環(huán)烷基或橋接的環(huán)烷基。

“烷基磺酰胺基”是指與如本文定義的烷基連接的如本文定義的磺酰胺基。

“芳基磺酰胺基”是指與如本文定義的芳基連接的如本文定義的磺酰胺基。

“烷基硫基”是指R₅₀S-，其中R₅₀是如本文定義的烷基(優(yōu)選如本文定義的低級(jí)烷基)。

“芳硫基”是指R₅₅S-，其中R₅₅是如本文定義的芳基。

“芳基烷基硫基”是指與如本文定義的烷基硫基連接的如本文定義的芳基。

“烷基亞磺?；笔侵窻₅₀-S(O)-，其中R₅₀是如本文定義的烷基。

“烷基磺酰基”指的是R₅₀-S(O)₂-，其中R₅₀是如本文定義的烷基。

“烷基磺?；趸敝傅氖荝₅₀-S(O)₂-O-，其中R₅₀是如本文定義的烷基。

“芳基亞磺酰基”是指R₅₅-S(O)-，其中R₅₅是如本文定義的芳基。

“芳基磺?；笔侵窻₅₅-S(O)₂-，其中R₅₅是如本文定義的芳基。

“芳基磺?；趸笔侵窻₅₅-S(O)₂-O-，其中R₅₅是如本文定義的芳基。

“酰胺基”是指R₅₁C(O)N(R₅₇)-，其中R₅₁和R₅₇各自獨(dú)立地是氫原子、烷基、芳基或芳基雜環(huán)，其如本文所定義。

“酯”是指R₅₁C(O)R₈₂-，其中R₅₁是氫原子、烷基、芳基或芳基雜環(huán)，其如本文所定義，和R₈₂是氧或硫。

“氨甲酰基”是指-O-C(O)N(R₅₁)(R₅₇)，其中R₅₁和R₅₇各自獨(dú)立地是如本文定義的氫原子、烷基、芳基或芳基雜環(huán)，其中R₅₁和R₅₇合起來(lái)是如本文定義的雜環(huán)、環(huán)烷基或橋接的環(huán)烷基。

“羧基”指的是-C(O)OR₇₆，其中R₇₆是氫、有機(jī)陽(yáng)離子或無(wú)機(jī)陽(yáng)離子，其如本文所定義?！棒驶笔侵?C(O)-。

“烷基羰基”是指R₅₂-C(O)-，其中R₅₂是如本文定義的烷基。

“芳基羰基”是指R₅₅-C(O)-，其中R₅₅是如本文定義的芳基。

“芳基烷基羰基”指的是R₅₅-R₅₂-C(O)-，其中R₅₅是如本文定義的芳基，和R₅₂是如本文定義的烷基。

“烷基芳基羰基”是指R₅₂-R₅₅-C(O)-，其中R₅₅是如本文定義的芳基，和R₅₂是如本文定義的烷基。

“雜環(huán)烷基羰基”是指R₇₈C(O)-，其中R₇₈是如本文定義的雜環(huán)烷基。

“羧酸酯”是指-C(O)OR₅₈，其中R₅₈是如本文定義的烷基、芳基或芳基雜環(huán)。

“烷基羧酸”和“烷基羧基”是指與如本文定義的羧基連接的如本文定義的烷基。

“烷基羧酸酯”是指與如本文定義的羧酸酯基連接的如本文定義的烷基。

“烷基酯”是指與如本文定義的酯基連接的如本文定義的烷基。

“芳基羧酸”是指與如本文定義的羧基連接的如本文定義的芳基。

“芳基羧酸酯”和“芳基羧基”是指與如本文定義的羧酸酯基連接的如本文定義的芳基。

“芳基酯”是指與如本文定義的酯基連接的如本文定義的芳基。

“甲酰胺基”是指-C(O)N(R₅₁)(R₅₇)，其中R₅₁和R₅₇各自獨(dú)立地是如本文定義的氫原子、烷基、芳基或芳基雜環(huán)，或者R₅₁和R₅₇合起來(lái)是如本文定義的雜環(huán)、環(huán)烷基或橋接的環(huán)烷基。

“烷基甲酰胺基”是指與如本文定義的甲酰胺基連接的如本文定義的烷基。

“芳基甲酰胺基”是指與如本文定義的甲酰胺基連接的如本文定義的芳基。

“脲”是指-N(R₅₉)-C(O)N(R₅₁)(R₅₇)，其中R₅₁、R₅₇和R₅₉各自獨(dú)立地是如本文定義的氫原子、烷基、芳基或芳基雜環(huán)，或者R₅₁和R₅₇合起來(lái)是如本文定義的雜環(huán)、環(huán)烷基或橋接的環(huán)烷基。

“磷?；笔侵?P(R₇₀)(R₇₁)(R₇₂)，其中R₇₀是孤對(duì)電子、硫醛或氧代，且R₇₁和R₇₂各自獨(dú)立地是共價(jià)鍵、氫、低級(jí)烷基、烷氧基、烷基氨基、羥基、氧基或芳基，其如本文所定義。

“磷酸”是指-P(O)(OR₅₁)OH，其中R₅₁是氫原子、烷基、芳基或芳基雜環(huán)，其如本文所定義。“亞磷酸”指-P(O)(R₅₁)OH，其中R₅₁是氫原子、烷基、芳基或芳基雜環(huán)，其如本文所定義。

“甲硅烷基”是指-Si(R₇₃)(R₇₄)(R₇₅)，其中R₇₃、R₇₄和R₇₅各自獨(dú)立地是共價(jià)鍵、低級(jí)烷基、烷氧基、芳基或芳基烷氧基，其如本文所定義。

“有機(jī)酸”是指具有至少一個(gè)碳原子和一個(gè)或多個(gè)能對(duì)堿性基團(tuán)釋放質(zhì)子的官能基的化合物。有機(jī)酸優(yōu)選含有羧基、磺酸或磷酸部分。示例性的有機(jī)酸包括乙酸、苯甲酸、檸檬酸、樟腦磺酸、甲磺酸、?；悄懰?、氯膦酸(chlordronic acid)、草甘膦(glyphosphate)和亞甲膦酸。

“無(wú)機(jī)酸”是指不包含至少一個(gè)碳原子的化合物，且其能對(duì)堿性基團(tuán)釋放質(zhì)子。示例性的無(wú)機(jī)酸包括鹽酸、硫酸、硝酸和磷酸。

“有機(jī)堿”是指具有一個(gè)或多個(gè)能接受來(lái)自酸性基團(tuán)的質(zhì)子的官能基的含碳化合物。有機(jī)堿優(yōu)選含有胺基。示例性的有機(jī)堿包括三乙胺、芐基二乙胺、二甲基乙基胺、咪唑、吡啶和哌啶。

“獨(dú)立選擇的”基團(tuán)是在同一結(jié)構(gòu)中存在的基團(tuán)，它們不需要都代表相同的取代基。例如，當(dāng)兩個(gè)取代基表示為NOR_A且各R_A被說(shuō)是獨(dú)立地選自H、甲基、乙基等時(shí)，這意味著其中一個(gè)R_A是甲基，另一個(gè)R_A可以是甲基，但也可以是H或乙基(或任何其它所述的取代基)。

用于本發(fā)明方法中的一些化合物可以含有一個(gè)或多個(gè)手性中心，因此可以存在對(duì)映異構(gòu)和非對(duì)映異構(gòu)形式。本發(fā)明的范圍旨在包括所有異構(gòu)體本身、以及順和反式異構(gòu)體的混合物、非對(duì)映體混合物和對(duì)映體(旋光異構(gòu)體)的外消旋混合物的應(yīng)用。另外，有可能利用眾所周知的技術(shù)以分離各種形式，本發(fā)明的一些實(shí)施方案可能以指定的對(duì)映體或非對(duì)映體的純化或富集的物種為特征。

“藥物組合物”是指本文所述的一種或多種化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽與其它化學(xué)組分的混合物，所述其它化學(xué)組分例如藥學(xué)上可接受的載體和/或賦形劑。藥物組合物的目的促進(jìn)化合物向有機(jī)體施用。

本文所用的短語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的載體”表示涉及攜帶或運(yùn)輸主題試劑從身體的一個(gè)器官或部分到身體的另一器官或部分的藥學(xué)上可接受的物質(zhì)、組合物或媒介物，例如液體或固體填充劑、稀釋劑、賦形劑、溶劑或包封材料。從與制劑的其它成分相容并對(duì)患者無(wú)害意義上說(shuō)，各種載體必須是“可接受的”。一些能用作藥學(xué)上可接受的載體的物質(zhì)的實(shí)例包括糖，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，例如玉米淀粉和土豆淀粉；纖維素及其衍生物，例如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素和乙酸纖維素；粉狀黃蓍膠；麥芽；明膠；滑石；賦形劑，例如可可脂和栓劑蠟；油類，例如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油和大豆油；二醇類，例如丙二醇；多元醇，例如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；酯類，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；瓊脂；緩沖劑，例如氫氧化鎂和氫氧化鋁；藻酸；無(wú)熱原水；等滲鹽水；林格氏溶液；乙醇；磷酸鹽緩沖溶液；以及藥學(xué)制劑中所用的其它無(wú)毒的相容物質(zhì)。生理上可接受的載體不會(huì)對(duì)生物體引起顯著的刺激，并且不會(huì)消除所施用化合物的生物活性和性質(zhì)。

“溶劑化物”是由溶質(zhì)(例如金屬蛋白酶抑制劑)和溶劑(例如水)結(jié)合所形成的復(fù)合物。參見(jiàn)J.Honig等，The Van Nostrand Chemist’s Dictionary，第650頁(yè)(1953)。

術(shù)語(yǔ)“旋光異構(gòu)體”、“幾何異構(gòu)體”(例如，順和/或反式異構(gòu)體)、“立體異構(gòu)體”和“非對(duì)映異構(gòu)體”具有公認(rèn)的含義(例如參見(jiàn)Hawley′s Condensed Chemical Dictionary，第11版)。本發(fā)明化合物的具體保護(hù)形式及其它衍生物的例證并非意在限制。其它可用的保護(hù)基團(tuán)、鹽形式、前藥等的應(yīng)用屬于熟練的技術(shù)人員的能力范圍之內(nèi)。

“前藥”是藥物的一種形式，它在變成活性的、或者完全活性的藥理劑之前必須由代謝過(guò)程經(jīng)歷化學(xué)轉(zhuǎn)化。前藥在其攝入或吸收或其它施用形式下是無(wú)活性的，或者活性很小。例如，前藥可以被消化系統(tǒng)內(nèi)的細(xì)菌分解成產(chǎn)物，其至少一種產(chǎn)物會(huì)變成活性藥物?；蛘撸梢匀硎┯?，例如通過(guò)靜脈內(nèi)注射，并隨后被代謝成一種或多種活性分子。

發(fā)明詳述

根據(jù)本發(fā)明，已發(fā)現(xiàn)一些小分子配體能與視蛋白質(zhì)非共價(jià)地可逆結(jié)合，并抑制11-順-視黃醛與視蛋白視黃醛結(jié)合口袋的結(jié)合。這種對(duì)視黃醛結(jié)合的干擾減少了視覺(jué)周期產(chǎn)物(例如全反式視黃醛)的形成，從而抑制諸如脂褐素和A2E的化合物的產(chǎn)生，結(jié)果降低了可因這些物質(zhì)的累積而產(chǎn)生的毒性的風(fēng)險(xiǎn)和事件。作為藥理性伴侶蛋白的這類化合物也能促進(jìn)與RP有關(guān)的突變視蛋白的適當(dāng)折疊和運(yùn)輸。另外，經(jīng)視網(wǎng)膜暴露于強(qiáng)光(尤其是在視網(wǎng)膜手術(shù)期間)所引起的過(guò)度刺激和所致的視紫質(zhì)活化，通過(guò)抑制11-順-視黃醛結(jié)合和視紫質(zhì)形成，減少了感光細(xì)胞的死亡。

已報(bào)道一些合成的類視黃醇(結(jié)構(gòu)上與視黃醇(維生素A醇)相關(guān)的化合物)結(jié)合視蛋白。在本發(fā)明的實(shí)施方案中，已發(fā)現(xiàn)非類視黃醇小分子(分子量小于約1000道爾頓、小于800、小于600、小于500、小于400、或小于約300道爾頓的化合物)結(jié)合視蛋白。

本發(fā)明的特征在于組合物和方法，其有用于減少視覺(jué)周期產(chǎn)物的形成和這些產(chǎn)物體內(nèi)積累相關(guān)的毒性，降低與視紫質(zhì)過(guò)度活化相關(guān)的凋亡事件的概率，以及防止由于RP相關(guān)的突變視蛋白質(zhì)的異常加工和運(yùn)輸?shù)囊晽U細(xì)胞死亡。

感光細(xì)胞視覺(jué)色素蛋白質(zhì)(視蛋白)的錯(cuò)位可在多種眼病中發(fā)生，也發(fā)生于正常的老化。在這些情形，錯(cuò)位的視蛋白的累積導(dǎo)致感光細(xì)胞的生存力下降。隨著時(shí)間的推移，這種錯(cuò)位視蛋白的累積導(dǎo)致視桿細(xì)胞和視錐細(xì)胞死亡、視網(wǎng)膜變性、和視力喪失。

在一方面，本發(fā)明提供校正感光細(xì)胞內(nèi)錯(cuò)位視蛋白的方法，其包括使錯(cuò)位視蛋白質(zhì)與可逆和/或非共價(jià)結(jié)合所述錯(cuò)位視蛋白質(zhì)的視蛋白結(jié)合劑接觸，從而促進(jìn)所述視蛋白質(zhì)校正的胞內(nèi)加工和運(yùn)輸。這類視蛋白結(jié)合劑稱作“生產(chǎn)性伴侶蛋白”。

這種錯(cuò)位校正減小了感光細(xì)胞的應(yīng)力，防止了在視力喪失的多種疾病中以及在暗光視覺(jué)和視桿細(xì)胞介導(dǎo)的周邊視覺(jué)、視錐細(xì)胞介導(dǎo)的中央視覺(jué)、及夜間視覺(jué)喪失的正常年齡相關(guān)性下降中感光細(xì)胞的生存力下降和死亡。

在本發(fā)明的另一方面，視蛋白結(jié)合劑促進(jìn)了錯(cuò)位視蛋白質(zhì)的降解。這類視蛋白結(jié)合劑稱作“反生產(chǎn)的”、“毀滅性”或“破壞性伴侶蛋白”。

經(jīng)這樣的試劑增強(qiáng)錯(cuò)位視蛋白的降解，減少了錯(cuò)位視蛋白的數(shù)量，從而解除了感光細(xì)胞的應(yīng)力，防止了在視力喪失的疾病中以及在暗光視覺(jué)和視桿細(xì)胞介導(dǎo)的周邊視覺(jué)、視錐細(xì)胞介導(dǎo)的中央視覺(jué)、及夜間視覺(jué)喪失的正常年齡相關(guān)性下降中感光細(xì)胞的生存力下降和死亡。

在以上實(shí)施方案中，眼部蛋白質(zhì)錯(cuò)位障礙是一種或多種的濕性或干性形式的黃斑變性、色素性視網(wǎng)膜炎、視網(wǎng)膜或黃斑營(yíng)養(yǎng)不良、斯塔加特病、索斯比營(yíng)養(yǎng)不良、常染色體顯性玻璃疣、貝斯特營(yíng)養(yǎng)不良、外周蛋白突變相關(guān)的黃斑營(yíng)養(yǎng)不良、顯性形式的斯塔加特病、北卡羅來(lái)納黃斑營(yíng)養(yǎng)不良、光毒性、色素性視網(wǎng)膜炎、年齡有關(guān)的正常視力喪失和年齡有關(guān)的夜間視力正常喪失。

視蛋白，負(fù)責(zé)視覺(jué)的GPCR(G-蛋白偶合受體)，易與11-順-視黃醛一起重生以形成視覺(jué)色素視紫質(zhì)。該色素通過(guò)11-順-視黃醛的醛基與視蛋白中L-賴氨酸的ε-氨基之間的質(zhì)子化席夫堿的形成而產(chǎn)生(Matsumoto和Yoshizawa，Nature 1975 Dec 11；258(5535)：523-6)。

因此，本發(fā)明提供了小分子化合物的組合物和使用方法，所述化合物結(jié)合野生型及突變的視蛋白，與11-順-視黃醛競(jìng)爭(zhēng)或別的方式阻止它結(jié)合視蛋白以形成視紫質(zhì)，從而抑制11-順-視黃醛和其它的視覺(jué)周期產(chǎn)物的形成。

在一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供式I的視蛋白結(jié)合配體及其藥學(xué)上可接受的鹽：

其中X是：

1)C(R_i)(R_j)，或

2)氧；

T是：

1)CH₂，

2)CH₂CH₂，或

3)缺失；

R¹和R²獨(dú)立地是：

1)-CH₃，或

2)-CH₂CH₃；

R³是：

1)氫，

2)-CH₃，或

3)-CH₂CH₃；

R⁴是：

1)氫，或

2)-CH₃；

R_a和R_b各自獨(dú)立地是：

1)氫，

2)-CH₃，或

3)-CH₂CH₃；

R_i和R_j各自獨(dú)立地是：

1)氫，

2)氘核(deuteron)，

3)羥基，

4)氟，

5)烷氧基，

6)低級(jí)烷基，或

7)低級(jí)鹵代烷基；

R_i和R_j可以一起為氧代(＝O)

B是：

1)

2)

3)

4)

5)

5)

6)環(huán)烷基，

7)低級(jí)烷基，或

8)低級(jí)鹵代烷基；

R_e、R_f、R_g、R_h和R_k各自獨(dú)立地是：

1)氫，

2)低級(jí)烷基，

3)低級(jí)鹵代烷基，

4)鹵素，

5)硝基，

6)羥基，

7)烷氧基，

8)腈，

9)甲酰胺基，

10)芳基羰基，

11)氨基甲酰基，

12)酰胺基，

13)氨基，

14)烷基羰基，

15)脲，或

16)-C(NOH)NH₂；

R_l、R_m和R_n是：

1)-CR_e，或

2)氮；

但其中R_l、R_m和R_n中至少一個(gè)是氮，

Z是：

1)氧，或

2)硫；

包括其藥學(xué)上可接受的鹽/溶劑化物和水合物，在藥學(xué)上可接受的載體中。

在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述化合物具有式I的結(jié)構(gòu)，其中X是CR_iR_j，且R_i和R_j一起為氧代或R_i是羥基和R_j是氫或甲基，和其中R¹和R²各自獨(dú)立地是甲基或乙基，更優(yōu)選地，其中R¹和R²均是甲基，和R³是氫或甲基，最優(yōu)選地，其中R³是甲基。

在本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施例中，所述化合物具有式I的結(jié)構(gòu)，其中R¹和R²均是甲基，和R³是甲基或氫、更優(yōu)選甲基。在其他具體的實(shí)施方案中，T是CH₂且R_a和R_b獨(dú)立地是氫或甲基、優(yōu)選氫。

在具體實(shí)施方案中，式I的視蛋白結(jié)合化合物是(其中各化合物編號(hào)對(duì)應(yīng)于其制備實(shí)施例的編號(hào))：

(S)-苯基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物1)；

苯基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮(化合物2)；

(R)-苯基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物3)；

(S)-對(duì)甲苯基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物4)；

對(duì)甲苯基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮(化合物5)；

(S)-(3-氯-4-甲基苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物6)；

(3-氯-4-甲基苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮(化合物7)；

(R)-(3-氯-4-甲基苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物8)；

(S)-(3-氯苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物9)；

(3-氯苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮(化合物10)；

(R)-(3-氯苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物11)；

(S)-(4-氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物12)；

(4-氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮(化合物13)；

(R)-(4-氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物14)；

(S)-(4-(三氟甲基)苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物15)；

(4-(三氟甲基)苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮(化合物16)；

(R)-(4-(三氟甲基)苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物17)；

1-氟-4-(((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)苯(化合物18)；

(S)-(3，4-二氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物19)；

(3，4-二氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮(化合物20)；

(S)-呋喃-2-基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物21)；

呋喃-2-基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮(化合物22)；

(R)-呋喃-2-基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物23)；

(S)-噻吩-3-基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物24)；

噻吩-3-基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮(化合物25)；

(R)-噻吩-3-基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物26)；

2-氯-1-甲基-4-(((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)苯(化合物27)；

(S)-(4-(三氟甲氧基)苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物28)；

(4-(三氟甲氧基)苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮(化合物29)；

(R)-(4-(三氟甲氧基)苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物30)；

(S)-(3，4，5-三氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物31)；

(3，4，5-三氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮(化合物32)；

(R)-(3，4，5-三氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物33)；

(R)-環(huán)己基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物34)；

環(huán)己基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮(化合物35)；

(R)-(3，4-二氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物35)；

(R)-(3，4-二氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物36)；

(S)-呋喃-3-基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物37)；

呋喃-3-基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮(化合物38)；

(R)-呋喃-3-基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物39)；

(S)-(全氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物40)；

(全氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮(化合物41)；

4-((S)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)芐腈(化合物42)；

2-氟-4-((S)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)芐腈(化合物43)；

4-((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己烷羰基)芐腈(化合物44)；

2-氟-4-((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己烷羰基)芐腈(化合物45)；

(S)-((R)-2，2-二甲基環(huán)己基)(4-氟苯基)甲醇(化合物46)；

(2，2-二甲基環(huán)己基)(4-氟苯基)甲酮(化合物47)；

(R)-((R)-2，2-二甲基環(huán)己基)(4-氟苯基)甲醇(化合物48)；

(S)-(4-甲氧基-3-甲基苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物49)；

(4-甲氧基-3-甲基苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮(化合物50)；

4-((S)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)-2-甲基芐腈(化合物51)；

2-甲基-4-((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己烷羰基)芐腈(化合物52)；

4-((R)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)芐腈(化合物53)；

2-氟-4-((S)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)芐腈(化合物54)；

(S)-(3-氟-4-(三氟甲氧基)苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物55)；

(3-氟-4-(三氟甲氧基)苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮(化合物56)；

(R)-(3-氟-4-(三氟甲氧基)苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物57)；

4-((R)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)-2-甲基芐腈(化合物58)；

(R)-(4-氟苯基)((1R，6S)-1，2，2，6-四甲基環(huán)己基)甲醇(化合物59)；

4-((S)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)-2-(三氟甲基)芐腈(化合物60)；

2-(三氟甲基)-4-((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己烷羰基)芐腈(化合物61)；

(4-氟苯基)((1R，6S)-1，2，2，6-四甲基環(huán)己基)甲酮(化合物62)；

2-氟-N′-羥基-4-((R)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)苯甲脒(benzimidamide)(化合物63)；

(S)-(3，4-二氯苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物64)；

(S)-(3，4-二甲基苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物65)；

(S)-(4-氯-3-氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物66)；

4-((R)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)-2-(三氟甲基)芐腈(化合物67)；

(3，4-二氯苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮(化合物68)；

(3，4-二甲基苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮(化合物69)；

(4-氯-3-氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮(化合物70)；

(R)-(3，4-二氯苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物71)；

2-氟-5-((S)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)芐腈(化合物72)；

(S)-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物73)；

(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮(化合物74)；

(R)-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物75)；

3-((S)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)芐腈(化合物76)；

2-氯-4-((S)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)芐腈(化合物77)；

3-((R)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)芐腈(化合物78)；

2-氟-5-((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己烷羰基)芐腈(化合物79)；

(R)-(3，4-二甲基苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物80)；

2-氯-4-((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己烷羰基)芐腈(化合物81)；

2-氯-4-((R)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)芐腈(化合物82)；

(R)-(4-氯-3-氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇(化合物83)；

(R)-2-(3-氟苯基)-1-((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)乙醇(化合物84)；

(R)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1-((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)乙醇(化合物85)；

2-氟-5-((R)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)芐腈(化合物86)

包括其所有的藥學(xué)上可接受的鹽、水合物或溶劑化物。

使用ChemBioDraw 11.0.1.獲得所有化合物的名稱，以及基于不對(duì)稱誘導(dǎo)的Crams Rule指定由添加手性醛或酮所引起產(chǎn)品的新手性中心的立體化學(xué)(Cram and Elhafez，J.Am.Chem.Soc.，74：5828-5835(1952))。

本發(fā)明不包括下列化合物(如通過(guò)其標(biāo)示的CAS登記號(hào)表示)作為物質(zhì)的新成分(但要求保護(hù)在本發(fā)明的方法中使用)，本文統(tǒng)稱為排除化合物組：732298-38-3、732298-35-0、732298-29-2、603959-87-1、476689-64-2、409332-51-0、409332-50-9、379693-57-9、379688-87-6、379688-80-9、218957-96-1、172462-26-9、172462-25-8、172462-24-7、172462-23-6、172462-15-6、172462-09-8、172462-08-7、172462-07-6、172462-06-5、172462-05-4、172461-99-3、99992-18-4、83179-35-5、76038-07-8、3127-83-0、68303-75-3、68223-71-2、68223-70-1、68198-05-0、68198-04-9、68198-03-8、68198-02-7、61898-30-4、57935-16-7、52842-34-9、52842-33-8、52612-52-9、52612-42-7、26383-28-8、25915-54-2、17983-26-5、3212-56-4、1181557-84-5、1181557-80-1、1181557-79-8、923593-86-6、906428-86-2、861617-39-2、861588-12-7、861587-79-3、861340-01-4、861316-82-7、681467-29-8、681466-94-4、412021-03-5、314271-72-2、121666-35-1、120292-85-5、120292-84-4、120292-83-3、120173-55-9、120173-54-8、120173-46-8、120173-45-7、120173-34-4、120173-33-3、120173-32-2、81907-72-4、74458-72-3、74458-69-8、73855-22-8、59642-07-8、17983-22-1、16178-75-9和3664-75-3。

排除化合物組包含上述列表中的任何和所有的化合物，并通過(guò)其CAS(Chemical Abstracts Service)編號(hào)獨(dú)自地鑒定。

因此，本發(fā)明的方法使用式I的任何化合物以及其標(biāo)明取代基的同一物，且不排除使用排除化合物組的化合物。

然而，本發(fā)明的新化合物或物質(zhì)的組合物是式I的化合物以及其標(biāo)明取代基的同一物，不是排除化合物組的化合物。

本發(fā)明特別優(yōu)選的實(shí)施例化合物和使用所述化合物的方法，包括一種或多種選自下列的化合物：化合物2、5、7、8、10、11、12、13、16、19、20、24、25、29、31、32、33、36、37、38、42、43、44、45、49、52、54、62、68、69、70、74和75，包括其所有的藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物和水合物。

本發(fā)明的另一實(shí)施方案提供視蛋白結(jié)合化合物的視蛋白結(jié)合配體代謝物。這些代謝物包括但不限于視蛋白結(jié)合化合物及其視蛋白化合物的藥學(xué)上可接受的鹽的降解產(chǎn)物、水解產(chǎn)物、和葡糖苷酸加成物等。

本發(fā)明的另一實(shí)施方案提供制備本發(fā)明新化合物的方法和用于在這些方法中的中間體。反應(yīng)是在適合試劑的溶劑內(nèi)進(jìn)行，所用的物質(zhì)適合完成轉(zhuǎn)化。有機(jī)合成領(lǐng)域的技術(shù)人員會(huì)理解，分子中存在的官能度必須與所計(jì)劃的化學(xué)轉(zhuǎn)化一致。有時(shí)這需要由操作者對(duì)合成步驟的次序、需要的保護(hù)基團(tuán)及去保護(hù)的條件作出判斷。起始原料上的取代基可能與一些所述方法中所需的一些反應(yīng)條件不相容，但對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，與反應(yīng)條件相容的替代方法和取代基將是顯而易見(jiàn)的。硫、氮和氧保護(hù)基團(tuán)的使用已眾所周知地用于保護(hù)巰基、氨基和醇基在合成操作期間不發(fā)生不良反應(yīng)，很多這類保護(hù)基團(tuán)是已知的并描述于例如Greene和Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，第3版，John Wiley&Sons，New York(1999)。

具有一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱碳原子的本發(fā)明化合物可以以光學(xué)純對(duì)映體、純非對(duì)映體、對(duì)映體的混合物、非對(duì)映體的混合物、對(duì)映體的外消旋混合物、非對(duì)映體外消旋物或者非對(duì)映體外消旋物的混合物的形式存在。應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明在其范圍內(nèi)預(yù)期并包括所有這些異構(gòu)體及其混合物。

本文描述的化學(xué)反應(yīng)通常以制備本發(fā)明化合物最廣泛應(yīng)用的方式來(lái)披露。有時(shí)，反應(yīng)可能不適用于描述包括在公開(kāi)范圍內(nèi)的每個(gè)化合物。本領(lǐng)域技術(shù)人員容易識(shí)別這樣出現(xiàn)的化合物。在所有這類情形中，通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的常規(guī)修飾，例如通過(guò)干擾基團(tuán)的適當(dāng)保護(hù)、通過(guò)改變備選的常規(guī)試劑、通過(guò)反應(yīng)條件的常規(guī)修改，這些反應(yīng)可以成功地進(jìn)行，或者本文公開(kāi)的其它反應(yīng)或其它常規(guī)將適用于本發(fā)明相應(yīng)化合物的制備。在所有的制備方法中，起始原料都是已知的或是容易由已知起始原料制備的。

本發(fā)明的方法

本發(fā)明提供使用式I化合物減少毒性視覺(jué)周期產(chǎn)物的形成的方法，其包括使視蛋白質(zhì)與可逆結(jié)合所述視蛋白質(zhì)的小分子配體接觸，以抑制11-順-視黃醛在所述結(jié)合口袋中結(jié)合，從而減少與濕性或干性ARMD有關(guān)的毒性視覺(jué)周期產(chǎn)物的形成，并減少與由于強(qiáng)光刺激的視紫質(zhì)過(guò)度活化有關(guān)的感光細(xì)胞凋亡。

本發(fā)明還提供使用式I化合物治療、預(yù)防或減少哺乳動(dòng)物中光毒性風(fēng)險(xiǎn)的方法，其包括向有發(fā)展與視覺(jué)周期產(chǎn)物的形成和積累或感光細(xì)胞凋亡有關(guān)的眼科病癥的風(fēng)險(xiǎn)的哺乳動(dòng)物給藥。

本發(fā)明還提供使用式I化合物治療、預(yù)防或減少哺乳動(dòng)物中光毒性風(fēng)險(xiǎn)的方法，其包括向有發(fā)展與視覺(jué)周期產(chǎn)物的形成和積累或感光細(xì)胞凋亡有關(guān)的眼科病癥的風(fēng)險(xiǎn)的哺乳動(dòng)物施用有效數(shù)量的小分子配體，所述配體可逆結(jié)合(例如，在或者靠近視黃醛結(jié)合口袋處)所述哺乳動(dòng)物眼中存在的視蛋白質(zhì)，以例如抑制11-順-視黃醛在該結(jié)合口袋中結(jié)合，從而減小了光毒性和感光細(xì)胞凋亡。

本發(fā)明還提供一種使用式I化合物治療、預(yù)防或減少哺乳動(dòng)物中RP的風(fēng)險(xiǎn)的方法，其包括向處在與突變視蛋白的不適當(dāng)折疊和運(yùn)輸有關(guān)的RP風(fēng)險(xiǎn)之中的哺乳動(dòng)物施用有效數(shù)量的小分子配體，所述配體可逆結(jié)合(例如，在或者靠近視黃醛結(jié)合口袋處)所述哺乳動(dòng)物眼中存在的視蛋白質(zhì)，以例如抑制11-順-視黃醛在該結(jié)合口袋中結(jié)合，從而減小由RP引起的視覺(jué)喪失。

在這些方法的具體實(shí)施例中，當(dāng)所述的小分子配體存在和/或哺乳動(dòng)物是人時(shí)，該小分子配體選擇性結(jié)合視蛋白和/或小分子配體在所述視蛋白質(zhì)的視黃醛結(jié)合口袋中結(jié)合視蛋白，和/或該小分子配體結(jié)合所述視蛋白質(zhì)，從而在11-順-視黃醛與所述視蛋白質(zhì)接觸時(shí)，抑制所述11-順-視黃醛與所述視蛋白質(zhì)的共價(jià)結(jié)合。

在一實(shí)施方案中，光毒性與眼部操作例如眼科手術(shù)有關(guān)。所述試劑可以在所述手術(shù)之前、之中或之后(或在任何一個(gè)或多個(gè)這些時(shí)間)施用。

在本發(fā)明方法的具體實(shí)施方案中，天然的視蛋白質(zhì)存在于細(xì)胞中，例如視桿細(xì)胞，優(yōu)選哺乳動(dòng)物和更優(yōu)選人的細(xì)胞。在具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明的小分子配體抑制11-順-視黃醛在視蛋白的結(jié)合口袋內(nèi)的結(jié)合并減慢視覺(jué)周期，從而減少了全反式視黃醛、或由其形成的毒性視覺(jué)周期產(chǎn)物例如脂褐素或N-亞視黃基-N-視黃基乙醇胺(A2E)的形成。替代選擇地，通過(guò)抑制視紫質(zhì)形成，減少或防止了由視紫質(zhì)過(guò)度活化造成的感光細(xì)胞凋亡。另外，也減少了與RP相關(guān)的突變視蛋白質(zhì)的不適當(dāng)折疊和運(yùn)輸。

在本發(fā)明方法中，施用優(yōu)選是局部施用(例如用洗眼液)或全身施用(包括口服、眼內(nèi)注射或眼周注射)。作為優(yōu)選的實(shí)例，要治療的眼部病癥是光毒性，例如由于眼手術(shù)，例如視網(wǎng)膜或白內(nèi)障手術(shù)引起的光毒性。

也包括眼科用組合物，其包括在藥學(xué)上可接受的載體中的有效量的式I化合物，其中所述試劑可逆地非共價(jià)結(jié)合(例如，在或者靠近視黃醛結(jié)合口袋處)所述視蛋白質(zhì)，以抑制11-順-視黃醛在該口袋中結(jié)合，優(yōu)選地，其中小分子配體對(duì)視蛋白質(zhì)是選擇性的。

本發(fā)明還提供用于鑒別降低哺乳動(dòng)物眼中光毒性的小分子配體的篩選方法，其包括：

(a)使天然的視蛋白-蛋白質(zhì)與試驗(yàn)化合物在11-順-視黃醛存在下和在促進(jìn)試驗(yàn)化合物和11-順-視黃醛對(duì)所述天然視蛋白質(zhì)結(jié)合的條件下接觸；和

(b)相對(duì)于所述試驗(yàn)化合物不存在時(shí)的速度，測(cè)定視紫質(zhì)形成速度的可逆降低，

由此鑒別作為降低哺乳動(dòng)物眼中光毒性的小分子配體的試驗(yàn)化合物。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述試驗(yàn)化合物在結(jié)構(gòu)上與本文公開(kāi)的化合物相關(guān)。

式I化合物可以與其它試劑一起施用，所述其它試劑包括礦物質(zhì)補(bǔ)充劑、抗炎劑(例如甾族化合物、比如皮質(zhì)類甾醇)、和/或抗氧化劑。用于這樣施用的皮質(zhì)類甾醇選自可的松、氫化可的松、潑尼松，潑尼松龍、甲潑尼松龍、曲安西龍、倍他米松、倍氯米松和地塞米松。有用的抗氧化劑包括維生素A、維生素C和維生素E。

本發(fā)明的方法還考慮通過(guò)使用至少一種另外的試劑(除了式I化合物之外)降低光毒性，所述試劑選自蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、從ER至高爾基體的蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑、Hsp90伴侶蛋白抑制劑、熱休克反應(yīng)活化劑、糖苷酶抑制劑、和組蛋白脫乙酰酶抑制劑，其中該小分子視蛋白結(jié)合劑和另外的化合物以足以治療受治療者的數(shù)量同時(shí)施用或彼此相隔14天內(nèi)施用。

在本發(fā)明方法的具體實(shí)施例中，式I化合物與另外的化合物在彼此相隔10天內(nèi)、彼此相隔5天內(nèi)、彼此相隔24小時(shí)內(nèi)施用，優(yōu)選同時(shí)施用。在一個(gè)實(shí)施例中，小分子視蛋白結(jié)合劑和另外的化合物直接施用于眼中。這種施用可以是眼內(nèi)或玻璃體內(nèi)(intravitrial)施藥。在其它的實(shí)施例中，小分子視蛋白結(jié)合劑和另外的化合物各自摻入到提供其長(zhǎng)期釋放的組合物中，例如在所述組合物是微球、納米球、納米乳狀液或植入物的一部分。

如本文所述，用于本發(fā)明方法中的式I化合物可用來(lái)單獨(dú)使用或者與一種或多種另外的化合物組合使用，以治療或預(yù)防與視紫質(zhì)過(guò)度活化相關(guān)的病癥，例如光毒性，如由眼手術(shù)操作引起的光毒性。在一實(shí)施方案中，本發(fā)明的式I化合物在不沒(méi)有另外的活性化合物下施用。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明的式I化合物與另一活性化合物(例如本文所述的)組合和一起使用。在又一示例性的實(shí)施方案中，式I化合物與蛋白酶體抑制體MG132、自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤、溶酶體抑制劑氯化銨、ER-高爾基體轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑布雷菲德菌素A、Hsp90伴侶蛋白抑制劑格爾德霉素(Geldamycin)、熱休克反應(yīng)活化劑南蛇藤醇、糖苷酶抑制劑、和組蛋白脫乙酰抑制劑Scriptaid(斯克瑞泰)組合施用，可用于減少視覺(jué)周期產(chǎn)物的形成和由于視紫質(zhì)過(guò)度活化的細(xì)胞凋亡。

如本文所述，用于本發(fā)明方法中的式I化合物可用來(lái)單獨(dú)使用或者與一種或多種另外的化合物組合使用，以治療或預(yù)防與RP引起的視桿細(xì)胞死亡有關(guān)的突變視蛋白質(zhì)的異常加工和運(yùn)輸。在一實(shí)施方案中，本發(fā)明的式I化合物在不沒(méi)有另外的活性化合物下施用。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明的式I化合物與另一活性化合物(例如本文所述的)組合和一起使用。在又一示例性的實(shí)施方案中，式I化合物與蛋白酶體抑制體MG132、自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤、溶酶體抑制劑氯化銨、ER-高爾基體轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑布雷菲德菌素A、Hsp90伴侶蛋白抑制劑格爾德霉素、熱休克反應(yīng)活化劑南蛇藤醇、糖苷酶抑制劑、和組蛋白脫乙酰抑制劑Scriptaid組合施用，可用于減少或防止與RP有關(guān)的視桿細(xì)胞死亡和導(dǎo)致的失明。

如本文所述，用于本發(fā)明方法中的式I化合物可用來(lái)單獨(dú)使用或者與一種或多種另外的化合物組合使用，以治療或預(yù)防與源自全反式視黃醛的毒性視覺(jué)周期產(chǎn)物(例如脂褐素和A2E)的產(chǎn)生和積累相關(guān)的病癥，例如與濕性和干性ARMD相關(guān)的失明。在一實(shí)施方案中，本發(fā)明的式I化合物在不沒(méi)有另外的活性化合物下施用。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明的式I化合物與另一活性化合物(例如本文所述的)組合和一起使用。在又一示例性的實(shí)施方案中，式I化合物與蛋白酶體抑制體MG132、自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤、溶酶體抑制劑氯化銨、ER-高爾基體轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑布雷菲德菌素A、Hsp90伴侶蛋白抑制劑格爾德霉素、熱休克反應(yīng)活化劑南蛇藤醇、糖苷酶抑制劑、和組蛋白脫乙酰抑制劑Scriptaid組合施用，可用于減少毒性視覺(jué)周期產(chǎn)物代謝物的形成和由干性ARMD造成的感光細(xì)胞死亡。

在本發(fā)明一般的競(jìng)爭(zhēng)試驗(yàn)中，尋找束緊視蛋白質(zhì)的視黃醛結(jié)合口袋的化合物。因此，該試驗(yàn)尋求鑒別小分子視蛋白結(jié)合化合物(其在進(jìn)入視桿細(xì)胞的數(shù)量不受視網(wǎng)膜嚴(yán)格控制)，其競(jìng)爭(zhēng)或阻止11-順-視黃醛或9-順-視黃醛形成視紫質(zhì)或異視紫質(zhì)。隨著時(shí)間的推移，相對(duì)于11-順-視黃醛單獨(dú)存在時(shí)的速度，其減慢視紫質(zhì)的形成速度。在一實(shí)施方案中，該試驗(yàn)在11-順-視黃醛存在下進(jìn)行，并測(cè)量視紫質(zhì)的形成速度，作為測(cè)定視黃醛結(jié)合口袋的競(jìng)爭(zhēng)的方法，例如測(cè)定視紫質(zhì)在500nm處特征峰的增加速度。此方法不需要視紫質(zhì)的抗體。有用的化合物將顯示視紫質(zhì)形成速度至少約2到5倍的低于所述的試驗(yàn)化合物不存在時(shí)存在11-順-視黃醛所觀察到的視紫質(zhì)形成速度。

在本發(fā)明方法的具體實(shí)施方案中，錯(cuò)折疊的視蛋白質(zhì)包括在其氨基酸序列中的突變，例如突變T17M、P347S、R135W或P23H中的一種，優(yōu)選P23H。

優(yōu)選地，在本發(fā)明的任何方法中，視蛋白結(jié)合劑與視蛋白在其視黃醛結(jié)合口袋中結(jié)合。

在一方面，本發(fā)明提供抑制視覺(jué)周期產(chǎn)物的形成或積累的方法，其包括使視蛋白質(zhì)與降低所述視蛋白質(zhì)水合的化合物接觸，優(yōu)選其中所述化合物與一個(gè)或多個(gè)水分子競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合視蛋白。在這類方法的具體實(shí)施方案中，化合物通過(guò)例如氫鍵與視蛋白質(zhì)化學(xué)結(jié)合。

雖然認(rèn)為使用本發(fā)明公開(kāi)的任何化合物作為降低視蛋白結(jié)合口袋中水合的手段是此類方法的優(yōu)選實(shí)施方案，但通過(guò)減少視紫質(zhì)的形成來(lái)減少視覺(jué)周期產(chǎn)物的形成是本發(fā)明用來(lái)減少此類視覺(jué)周期產(chǎn)物形成(尤其是脂褐素和/或A2E的產(chǎn)生)的通用方法，并且通過(guò)減小所述水合用于治療眼病是本發(fā)明的一般目標(biāo)，并在范圍上不必只限于使用本文公開(kāi)的化合物，而是可以包括使用其它已知的或者仍然待知的化合物，只要它們?cè)诒景l(fā)明的方法中起作用且減少視蛋白的視黃醛結(jié)合口袋中的水合(即水的結(jié)合)。

應(yīng)當(dāng)指出，用在本發(fā)明方法中的本文公開(kāi)的化合物可能對(duì)于減少視蛋白的視黃醛結(jié)合口袋中的水合不起作用，但仍可以在本發(fā)明的一種或多種方法中起作用。例如，式I化合物可以結(jié)合蛋白質(zhì)的變構(gòu)部位，從而排除掉視黃醛結(jié)合位點(diǎn)處的視黃醛而不必減少水合，但由于從結(jié)合口袋中排除視黃醛仍能減少視覺(jué)周期產(chǎn)物(例如脂褐素和/或A2E)的形成，因此非共價(jià)地降低視覺(jué)周期的活性。

在本發(fā)明的任何組合物和方法的實(shí)施方案中，視蛋白結(jié)合劑(例如非類視黃醇結(jié)合劑)選擇性地結(jié)合視蛋白。這種選擇性不應(yīng)視為需要排他性，所述試劑可以結(jié)合其它蛋白質(zhì)以及結(jié)合視蛋白，但其結(jié)合視蛋白至少是選擇性的，由此，結(jié)合視蛋白的結(jié)合常數(shù)(或解離常數(shù))將低于結(jié)合其它蛋白質(zhì)(其也結(jié)合類視黃醇、例如視黃醛類似物)的平均值。優(yōu)選地，視蛋白結(jié)合劑是非共價(jià)結(jié)合視蛋白的非類視黃醇視蛋白結(jié)合劑。優(yōu)選地，視蛋白結(jié)合劑結(jié)合在或者靠近視蛋白視黃醛的結(jié)合口袋，在此天然配體11-順-視黃醛正常地結(jié)合。不希望受理論的束縛，在一實(shí)施方案中，結(jié)合口袋容納視黃醛或者本發(fā)明的試劑，但不同時(shí)容納二者。因此，當(dāng)本發(fā)明的試劑在或者靠近接合口袋處結(jié)合時(shí)，其它的類視黃醇，例如11-順-視黃醛，不能與視蛋白結(jié)合。本發(fā)明試劑在錯(cuò)折疊視蛋白分子的視黃醛結(jié)合口袋內(nèi)的結(jié)合，直接用于形成視蛋白分子的天然或野生型構(gòu)象，或者穩(wěn)定正確折疊的視蛋白質(zhì)，從而促進(jìn)現(xiàn)在正確折疊的視蛋白插入到視桿細(xì)胞的膜中。同樣，不希望受理論的束縛，所述插入可有助于維持視蛋白的野生型構(gòu)象，且視蛋白結(jié)合劑能自由地從結(jié)合口袋中擴(kuò)散出來(lái)，因此所述口袋可用于結(jié)合視黃醛以形成光敏性的視紫質(zhì)。

本發(fā)明的其它方法提供了使包含引起感光體功能降低的錯(cuò)折疊視蛋白質(zhì)的哺乳動(dòng)物眼中感光分子功能恢復(fù)的方法，其包括使所述錯(cuò)折疊的視蛋白質(zhì)與在或者靠近視黃醛結(jié)合口袋處可逆結(jié)合(例如非共價(jià)結(jié)合)的視蛋白結(jié)合劑(例如非類視黃醇)進(jìn)行接觸。在其它實(shí)施方案中，視蛋白結(jié)合劑與錯(cuò)折疊視蛋白質(zhì)的結(jié)合在所述結(jié)合口袋中競(jìng)爭(zhēng)11-順-視黃醛的結(jié)合。希望地，視蛋白結(jié)合劑的結(jié)合能恢復(fù)所述錯(cuò)折疊視蛋白質(zhì)的天然構(gòu)象。

在優(yōu)選的實(shí)施方案中，哺乳動(dòng)物的眼是人眼。在另外的實(shí)施方案中，所述的接觸通過(guò)向感染眼科病癥如以感光體功能降低為特征的病癥的哺乳動(dòng)物施用所述的視蛋白結(jié)合劑(例如非類視黃醇)來(lái)進(jìn)行。在各種實(shí)施方案中，所述病癥是濕性或干性形式的黃斑變性、糖尿病RP、視網(wǎng)膜或黃斑營(yíng)養(yǎng)不良、斯塔加特病、索斯比營(yíng)養(yǎng)不良、常染色性顯性玻璃疣、貝斯特營(yíng)養(yǎng)不良、外周蛋白突變相關(guān)的黃斑營(yíng)養(yǎng)不良、顯性形式的斯塔加特病、北卡羅來(lái)納黃斑營(yíng)養(yǎng)不良、光毒性(例如由于視網(wǎng)膜手術(shù))、或色素性視網(wǎng)膜炎。施用可以是局部施用或者全身施用，后者包括口服、眼內(nèi)注射或眼周注射。局部施用可以包括例如滴眼劑，其包含在合適藥物載體中的有效量的本發(fā)明試劑。

在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明還提供了穩(wěn)定突變的視蛋白質(zhì)的方法，其包括使所述突變的視蛋白質(zhì)與可逆地非共價(jià)結(jié)合(例如在視黃醛結(jié)合口袋處或其中)所述突變的視蛋白質(zhì)的非類視黃醇視蛋白結(jié)合劑相接觸，以防止類視黃醇在所述結(jié)合口袋中結(jié)合，從而穩(wěn)定所述突變的視蛋白質(zhì)。

本發(fā)明還提供改善哺乳動(dòng)物眼中感光體功能喪失的方法，其包括向受到11-順-視黃醛親和性下降的突變視蛋白質(zhì)折磨的哺乳動(dòng)物施用有效量的視蛋白結(jié)合劑，例如非類視黃醇，憑此所述視蛋白結(jié)合劑可逆地結(jié)合(例如非共價(jià)結(jié)合)所述突變視蛋白的視黃醛結(jié)合口袋，因此改善所述哺乳動(dòng)物眼中感光體功的喪失。在一實(shí)施方案中，接觸通過(guò)向受到所述感光體功能減退折磨的哺乳動(dòng)物施用所述的視蛋白結(jié)合劑進(jìn)行，其中所述施用可以是局部施用或全身施用，后者包括口服、眼內(nèi)注射或眼周注射，前者包括使用含本發(fā)明試劑的滴眼劑。這種感光體功能喪失可以是部分喪失或完全喪失，其中部分喪失可以是1％至99％之間的任何程度的喪失。此外，這種喪失可能是由于存在引起視蛋白錯(cuò)折疊的突變，例如其中突變是P23H突變。在另一實(shí)施方案中，施用視蛋白結(jié)合劑以改善與視蛋白質(zhì)錯(cuò)位有關(guān)的眼部病癥。在一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供治療干性形式的年齡有關(guān)的黃斑變性的受試者，其中眼感光細(xì)胞(例如視桿或視錐細(xì)胞)內(nèi)存在的至少一部分視蛋白是錯(cuò)位的。錯(cuò)位的蛋白質(zhì)不能插入到感光細(xì)胞的膜中，其中視覺(jué)需要其功能。向具有錯(cuò)位視蛋白質(zhì)的受試者施用視蛋白結(jié)合劑挽救了至少一部分視蛋白定位。因此，本發(fā)明有用于預(yù)防或治療與視蛋白錯(cuò)位有關(guān)的眼部病癥或緩解其癥狀。

本發(fā)明提供了治療和/或預(yù)防受試者(例如人類患者)中眼部病癥或其癥狀的方法，這些病癥包括但不限于：濕性或干性形式的黃斑變性、色素性視網(wǎng)膜炎、視網(wǎng)膜或黃斑營(yíng)養(yǎng)不良、斯塔加特病、索斯比營(yíng)養(yǎng)不良、常染色體顯性玻璃疣、貝斯特營(yíng)養(yǎng)不良、外周蛋白突變相關(guān)的黃斑營(yíng)養(yǎng)不良、顯性形式的斯塔加特病、北卡羅來(lái)納黃斑營(yíng)養(yǎng)不良、光毒性(例如由于視網(wǎng)膜手術(shù))、或色素性視網(wǎng)膜炎，所述方法包括向患有或有風(fēng)險(xiǎn)發(fā)展上述病癥之一或者與錯(cuò)折疊或錯(cuò)位的視蛋白質(zhì)表達(dá)有關(guān)的其它眼部病癥的受試者施用有效量的視蛋白結(jié)合劑，例如在本發(fā)明任何一項(xiàng)或多項(xiàng)篩選試驗(yàn)中測(cè)試時(shí)顯示陽(yáng)性活性的試劑。

這樣的方法還可以包括向所述受試者施用至少另一種選自以下的另外的試劑：蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、從ER至高爾基體的蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑、Hsp90伴侶蛋白抑制劑、熱休克反應(yīng)活化劑、糖苷酶抑制劑、和組蛋白脫乙酰酶抑制劑，其中視蛋白結(jié)合化合物和另外的化合物以足以治療受試者的數(shù)量同時(shí)施用或彼此在14天內(nèi)施用。

在此患者還可以包括影響蛋白質(zhì)折疊的突變，其中所述突變引起錯(cuò)折疊，例如視蛋白質(zhì)中的錯(cuò)折疊，且可以是本文別處敘述的任何突變，例如P23H突變。在其它實(shí)施方案中，患者具有與視蛋白質(zhì)錯(cuò)位有關(guān)的眼部病癥。錯(cuò)位的視蛋白不能插入感光細(xì)胞(例如視桿細(xì)胞或視錐細(xì)胞)的膜中。一般來(lái)說(shuō)，這種定位失敗只會(huì)影響患者眼細(xì)胞中存在的一部分視蛋白。

在本發(fā)明方法的具體實(shí)施例中，視蛋白結(jié)合化合物和另外的化合物在彼此相隔10天內(nèi)、更優(yōu)選彼此相隔5天內(nèi)、更加優(yōu)選彼此相隔24小時(shí)內(nèi)施用，且最優(yōu)選同時(shí)施用。在一實(shí)施例中，視蛋白結(jié)合化合物和另外的化合物直接施用于眼中。這種施用可以是眼內(nèi)給藥。在其它實(shí)施例中，視蛋白結(jié)合化合物和另外的化合物各自摻入到提供其長(zhǎng)期釋放的組合物中，例如在所述組合物是微球、納米球、或納米乳狀液的一部分。在一實(shí)施例中，組合物經(jīng)由實(shí)行長(zhǎng)期釋放的釋藥裝置施用。這類方法還考慮與本發(fā)明試劑一起施用維生素A補(bǔ)充劑。

如本文所述，有用于本發(fā)明方法中的視蛋白結(jié)合劑可單獨(dú)地使用或與一種或多種另外的化合物組合地使用，以治療或預(yù)防與下列有關(guān)的病癥：濕性或干性形式的黃斑變性、色素性視網(wǎng)膜炎、視網(wǎng)膜或黃斑營(yíng)養(yǎng)不良、斯塔加特病、索斯比營(yíng)養(yǎng)不良、常染色體顯性玻璃疣、貝斯特營(yíng)養(yǎng)不良、外周蛋白突變相關(guān)的黃斑營(yíng)養(yǎng)不良、顯性形式的斯塔加特病、北卡羅來(lái)納黃斑營(yíng)養(yǎng)不良、光毒性(例如由于視網(wǎng)膜手術(shù))、色素性視網(wǎng)膜炎或與錯(cuò)折疊或錯(cuò)位的視蛋白質(zhì)表達(dá)有關(guān)的其它眼部病癥。在一實(shí)施方案中，向鑒定患有或有風(fēng)險(xiǎn)發(fā)展這樣病癥的的受試者施用本發(fā)明的視蛋白結(jié)合化合物(例如，不能共價(jià)結(jié)合視蛋白的非類視黃醇或類視黃醇)。任選地，視蛋白結(jié)合劑與另一種治療藥物一起施用。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明的非類視黃醇視蛋白結(jié)合化合物與合成的類視黃醇(例如，如美國(guó)專利出版物號(hào)2004-0242704中公開(kāi)的)以及任選地與另一種活性化合物(例如，如本文描述的)組合使用。在又一示例性的實(shí)施方案中，視蛋白結(jié)合化合物與蛋白酶體抑制體MG132、自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤、溶酶體抑制劑如氯化銨、ER-高爾基體轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑布雷菲德菌素A、Hsp90伴侶蛋白抑制劑格爾德霉素、熱休克反應(yīng)活化劑南蛇藤醇、糖苷酶抑制劑、和/或組蛋白脫乙酰抑制劑Scriptaid，或任何其它試劑組合施用，所述其它試劑可在與11-順-視黃醛締合以形成視紫質(zhì)的生物化學(xué)功能構(gòu)象中穩(wěn)定突變的P23H視蛋白質(zhì)。

在具體的實(shí)施方案中，視蛋白結(jié)合化合物是非聚合的(例如小分子，如本文中用于本發(fā)明方法中所公開(kāi)的那些)化合物，其分子量小于約1000道爾頓、小于800、小于600、小于500、小于400，或小于約300道爾頓。在一些實(shí)施方案中，與未經(jīng)處理的對(duì)照細(xì)胞或蛋白質(zhì)相比，本發(fā)明化合物增加穩(wěn)定折疊和/或復(fù)合突變體蛋白質(zhì)的數(shù)量(例如來(lái)自細(xì)胞或細(xì)胞內(nèi))至少為10％、15％、20％、25％、50％、75％、或100％。

蛋白酶體抑制劑

26S蛋白酶體是多催化蛋白酶，它將泛素化蛋白切割成短肽。MG-132是一種可以使用的蛋白酶體抑制劑。MG-132特別適用于治療光毒性和涉及視覺(jué)周期產(chǎn)物(例如全反式視黃醛、A2E、脂褐素)的積累、蛋白質(zhì)聚集或蛋白質(zhì)錯(cuò)折疊的其它眼病。用于本發(fā)明方法中與本發(fā)明組合的其它蛋白酶體抑制劑包括乳胞素(lactocystin)(LC)、分裂乳胞素-3-內(nèi)酯(clasto-lactocystin-beta-lactone)、PSI(N-羧苯甲酰-Ile-Glu-(OtBu)-Ala-Leu-CHO)、MG-132(N-羧苯甲酰-Leu-Leu-Leu-CHO)、MG-115(N-羧苯甲酰-Leu-Leu-Nva-CHO)、MG-101(N-乙酰-Leu-Leu-norLeu-CHO)、ALLM(N-乙酰-Leu-Leu-Met-CHO)、N-羧苯甲酰-Gly-Pro-Phe-Leu-CHO、N-羧苯甲酰-Gly-Pro-Ala-Pho-CHO、N-羧苯甲酰-Leu-Leu-Phe-CHO、及它們的鹽和類似物。其它的蛋白酶體抑制劑及其應(yīng)用描述在美國(guó)專利號(hào)6,492,333中。

自噬抑制劑

自噬對(duì)于胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞組分降解是一種進(jìn)化上的保守機(jī)制，并在饑餓細(xì)胞中作為細(xì)胞生存的機(jī)制。在自噬期間，胞質(zhì)碎片變成被細(xì)胞膜包封，形成自噬泡，最終與溶酶體融合使其內(nèi)容物降解。自噬抑制劑可以與本發(fā)明的視蛋白結(jié)合或視蛋白穩(wěn)定的化合物組合使用。用于本發(fā)明方法中與本發(fā)明組合的自噬抑制劑包括但不限于3-甲基腺嘌呤、3-甲基腺苷、腺苷、岡田酸、N⁶-巰基嘌呤核苷(N⁶-MPR)、氨基硫化(aminothiolated)腺苷類似物、5-氨基-4-咪唑甲酰胺核苷(AICAR)、巴弗洛霉素A1、及它們的鹽和類似物。

溶酶體抑制劑

溶酶體是細(xì)胞蛋白降解的主要部位。通過(guò)受體介導(dǎo)的胞吞作用或胞飲作用進(jìn)入細(xì)胞的蛋白質(zhì)降解、和質(zhì)膜蛋白的降解發(fā)生在溶酶體內(nèi)。溶酶體抑制劑，例如氯化銨、亮抑酶肽、反-環(huán)氧琥珀?；?L-亮氨酰胺-(4-胍基)丁烷、L-蛋氨酸甲酯、氯化銨、甲胺、氯喹、及它們的鹽或類似物，有用于與本發(fā)明的視蛋白結(jié)合或視蛋白穩(wěn)定的化合物組合。

HSP90伴侶蛋白抑制劑

熱休克蛋白90(Hsp90)對(duì)于參與細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、增殖和生存的伴侶蛋白起作用，并且對(duì)于許多蛋白質(zhì)的構(gòu)象穩(wěn)定性和功能是至關(guān)重要的。Hsp-90抑制劑有用于與本發(fā)明方法中視蛋白結(jié)合或視蛋白穩(wěn)定的化合物組合。Hsp-90抑制劑包括苯醌安莎霉素抗生素，例如格爾德霉素和17-烯丙基氨基-17-脫甲氧基格爾德霉素(17-AAG)，它特異性結(jié)合Hsp90，改變其功能并促進(jìn)底物蛋白的蛋白降解。其它的Hsp-90抑制劑包括但不限于：根赤殼菌素、新生霉素、以及與Hsp90 ATP/ADP口袋結(jié)合的任何Hsp90抑制劑。

熱休克反應(yīng)活化劑

南蛇藤醇是醌甲基化物的三萜烯，它激活人的熱休克反應(yīng)。在與本發(fā)明方法的視蛋白結(jié)合或視蛋白穩(wěn)定的化合物組合中，南蛇藤醇及其它熱休克反應(yīng)活化劑有用于治療PCD。熱休克反應(yīng)活化劑包括但不限于南蛇藤醇、南蛇藤醇甲酯、二氫南蛇藤醇二乙酸酯、南蛇藤醇丁酯、二氫南蛇藤醇、及其鹽或類似物。

組蛋白脫乙酰酶抑制劑

基因表達(dá)的調(diào)節(jié)是由幾種機(jī)制介導(dǎo)的，包括通過(guò)動(dòng)態(tài)乙酰化和脫乙?；慕M蛋白翻譯后修飾。負(fù)責(zé)可逆的乙?；?脫乙酰化過(guò)程的酶分別是組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(HATs)和組蛋白脫乙酰酶(HDACs)。組蛋白脫乙酰酶抑制劑包括Scriptaid(斯克瑞泰)、APHA化合物8、阿匹西汀(Apicidin)、丁酸鈉，(-)-狄普特辛(Depudecin)、瑟汀諾(Sirtinol)、曲古抑菌素A、以及它們的鹽或類似物。這些抑制劑可以在本文公開(kāi)的方法中與本發(fā)明化合物組合使用。

糖苷酶抑制劑

糖苷酶抑制劑是一類化合物，其在與本發(fā)明的視蛋白結(jié)合或視蛋白穩(wěn)定的化合物組合施用時(shí)，有用于本發(fā)明的方法。粟精胺是從植物來(lái)源分離出的多羥基生物堿，它抑制酶催化的糖苷水解。粟精胺及其衍生物特別有用于治療光毒性或眼蛋白構(gòu)象障礙，例如RP。本發(fā)明方法中還有用的其它糖苷酶抑制劑，包括澳大利亞栗籽豆堿(australine)鹽酸鹽、6-乙酰氨基-6-脫氧-粟精胺(它是氨基己糖苷酶的強(qiáng)有力的抑制劑)、脫氧巖藻糖野尻霉素鹽酸鹽(DFJ7)、脫氧野尻霉素(DNJ)(其抑制糖苷酶I和II)、脫氧半乳糖野尻霉素鹽酸鹽(DGJ)(其抑制α-D-半乳糖苷酶)、脫氧甘露糖野尻霉素鹽酸鹽(DM1)、2R，5R-雙(羥甲基)-3R，4R-二羥基吡咯烷(DMDP)(也稱作2，5-二脫氧-2，5-亞氨基-D-甘露醇)、1，4-二脫氧-1，4-亞氨基-D-甘露醇鹽酸鹽、(3R，4R，5R，6R)-3，4，5，6-四羥基氮雜環(huán)庚烷鹽酸鹽(其抑制b-N-乙酰氨基葡糖苷酶)、1，5-二脫氧-1，5-亞氨基-木糖醇(其抑制β-糖苷酶)、以及甘露糖苷酶1的抑制劑幾夫堿?？捎糜谂c視蛋白結(jié)合或視蛋白穩(wěn)定的化合物組合的還有：N-丁基脫氧野尻霉素(EDNJ)、N-壬基DNJ(NDND、N-己基DNJ(I5TDNJ)、N-甲基脫氧野尻霉素(MDNJ)、以及本領(lǐng)域已知的其它糖苷酶抑制劑。糖苷酶抑制劑可從市場(chǎng)購(gòu)得，例如從Industrial Research Limited(Wellington，New Zealand)得到，其使用方法描述在例如美國(guó)專利號(hào)4,894,388、5,043,273、5,103,008、5,844,102、和6,831,176；以及美國(guó)專利出版物號(hào)20020006909中。

藥物組合物

本發(fā)明的特征在于藥物制劑，其包含化合物以及藥學(xué)上可接受的載體，其中所述化合物提供對(duì)視覺(jué)周期產(chǎn)物，例如全反式視黃醛或由11-順-視黃醛形成的其它產(chǎn)物的抑制作用。這類制劑兼有治療和預(yù)防應(yīng)用。在一實(shí)施方案中，藥物組合物包括視蛋白結(jié)合或穩(wěn)定的化合物(例如用實(shí)施例1的方法所鑒定的化合物)或其藥學(xué)上可接受的鹽；任選地與至少一種另外的化合物組合，所述另外的化合物是蛋白酶體抑制劑、自噬抑制劑、溶酶體抑制劑、蛋白質(zhì)由ER轉(zhuǎn)運(yùn)至高爾基體的抑制劑、Hsp90伴侶蛋白抑制劑、熱休克反應(yīng)活化劑、糖苷酶抑制劑、或組蛋白脫乙酰酶抑制劑。視蛋白結(jié)合或視蛋白穩(wěn)定的化合物優(yōu)選不是天然的或合成的類視黃醇。將視蛋白結(jié)合或視蛋白穩(wěn)定的化合物與另外的化合物配制在一起或分別配制。本發(fā)明化合物可以作為藥物組合物的一部分施用。非口服的組合物應(yīng)當(dāng)是無(wú)菌的，并在單位重量或體積中含有治療有效量的視蛋白結(jié)合或視蛋白穩(wěn)定的化合物，以適合給受試者施用。本發(fā)明的組合物和組合可以是藥物包裝的一部分，其中各化合物以各自的劑量數(shù)量存在。

短語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的”是指本發(fā)明的化合物、含這些化合物的組合物、和/或劑型，它們?cè)诤侠淼尼t(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)，適用于與人類和動(dòng)物的組織接觸，而沒(méi)有過(guò)度的毒性、刺激性、變應(yīng)性應(yīng)答、或其它問(wèn)題或并發(fā)癥，并與合理的利益/風(fēng)險(xiǎn)比相稱。

用于預(yù)防性或治療性給藥的本發(fā)明的非口服藥物組合物，應(yīng)當(dāng)是無(wú)菌的。滅菌容易通過(guò)滅菌過(guò)濾膜(例如0.2μm膜)過(guò)濾、γ射線照射、或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何其它的合適方法來(lái)完成。治療性的視蛋白結(jié)合或視蛋白穩(wěn)定的化合物組合物一般是放在有無(wú)菌入口的容器中，例如具有通過(guò)皮下注射針頭可刺穿的塞子的靜脈內(nèi)溶液袋或小瓶。這些組合物通常作為水溶液或用于重構(gòu)的凍干制劑貯存在單劑量或多劑量容器中，例如密封的安瓿或小瓶中?；衔锟梢匀芜x地與藥學(xué)上可接受的賦形劑組合。

藥物組合物的組分也能夠與本發(fā)明的分子混合，并彼此混合方式基本上沒(méi)有損害所期望藥效的相互作用。

本發(fā)明化合物可以被包含在藥學(xué)上可接受的賦形劑中。所述賦形劑優(yōu)選含有少量添加劑，例如提高等滲性和化學(xué)穩(wěn)定性的物質(zhì)。這些物質(zhì)在所用的劑量和濃度對(duì)于接受者沒(méi)有毒性，并包括緩沖劑，例如磷酸鹽、檸檬酸鹽、琥珀酸鹽、乙酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、和其它的有機(jī)酸或其鹽；三羥甲基氨基甲烷(TRIS)、碳酸氫鹽、碳酸鹽、和其它有機(jī)堿及其鹽；抗氧化劑，例如抗壞血酸；低分子量(例如小于約10個(gè)殘基)多肽，例如聚精氨酸、聚賴氨酸、聚谷氨酸和聚天冬氨酸；蛋白質(zhì)，例如血清白蛋白、明膠、或免疫球蛋白；親水性聚合物，例如聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚丙二醇(PPGs)、和聚乙二醇(PEGs)；氨基酸，例如甘氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、組氨酸、賴氨酸、或精氨酸；單糖、二糖、及其它碳水化合物，包括纖維素或其衍生物、葡萄糖、甘露糖、蔗糖、糊精或硫酸化的碳水化合物衍生物，例如肝素、硫酸軟骨素或硫酸葡聚糖；多價(jià)金屬離子，例如二價(jià)金屬離子，包括鈣離子、鎂離子和錳離子；螯合劑，例如乙二胺四乙酸(EDTA)；糖醇，例如甘露醇或山梨糖醇；抗衡離子，例如鈉或銨；和/或非離子表面活性劑，例如聚山梨醇酯或泊洛沙姆。其它添加劑可以包括例如穩(wěn)定劑、抗微生物劑、惰性氣體、流體和營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充物(即林格氏右旋糖)、電解質(zhì)補(bǔ)充物，它們可以以常規(guī)數(shù)量存在。

上述的組合物可以以有效量施用。所述有效量將取決于方式或施用、所治療的具體病癥和所期望的效果。它還取決于病癥的階段、受試者的年齡和身體狀況、同時(shí)治療的性質(zhì)(如果有的話)、以及醫(yī)務(wù)人員眾所周知的類似因素。對(duì)于治療應(yīng)用，它是足以實(shí)現(xiàn)醫(yī)學(xué)上所期望結(jié)果的量。

就患有或者有風(fēng)險(xiǎn)發(fā)展光毒性(例如由于眼手術(shù))的患者而言，有效量是足以減小視覺(jué)周期產(chǎn)物(例如全反式視黃醛、或脂褐素、或A2E)的形成和積累的速度或程度、以及防止由于視紫質(zhì)過(guò)度活化的感光細(xì)胞凋亡的量。在這方面，本發(fā)明化合物是每天約0.01mg/kg至每天約1000mg/kg。預(yù)期從約50至約2000mg/kg的劑量范圍是合適的。更低的劑量起因于某些給藥形式，例如靜脈內(nèi)給藥。在所用的初始劑量下受試者不充分響應(yīng)的事件中，可以采用患者耐受性允許程度的較高劑量(或通過(guò)不同的更局域化的遞送途徑的有效的更高劑量)。考慮每天多次劑量以達(dá)到本發(fā)明組合物適當(dāng)?shù)娜硭健?/p>

有多種給藥途徑可以利用。一般說(shuō)來(lái)，本發(fā)明的方法可以用醫(yī)學(xué)上可接受的任何給藥方式來(lái)實(shí)施，這是指產(chǎn)生活性化合物有效水平而不引起臨床上不可接受的不良反應(yīng)的任何方式。在一優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明組合物眼內(nèi)給藥。其它的給藥方式包括口服、直腸、局部、眼內(nèi)、頰、陰道內(nèi)、腦池內(nèi)、腦室內(nèi)、氣管內(nèi)、鼻內(nèi)、透皮、在植入物中或之上，或腸胃外途徑。含本發(fā)明成分的組合物可以加到生理流體例如玻璃體內(nèi)房水(humor)中。對(duì)于CNS給藥，多種技術(shù)可用于促進(jìn)治療物穿過(guò)血腦屏障的轉(zhuǎn)移，包括通過(guò)手術(shù)或注射法破壞、短暫打開(kāi)CNS脈管系統(tǒng)內(nèi)皮細(xì)胞之間的粘連接觸的藥物、和促進(jìn)通過(guò)這些細(xì)胞移位的化合物。對(duì)于預(yù)防性治療，口服給藥可以是優(yōu)選的，因?yàn)楸阌诨颊咭约敖o藥方案。

本發(fā)明的藥物組合物可根據(jù)需要任選地進(jìn)一步包含一種或多種另外的蛋白質(zhì)，包括血漿蛋白、蛋白酶及其它生物物質(zhì)，只要其給受試者施用時(shí)不產(chǎn)生不良作用。合適的蛋白質(zhì)或生物物質(zhì)可以通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知和可用的任何純化方法從人或哺乳動(dòng)物血漿中；從含有根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)重組DNA技術(shù)已引入表達(dá)人或哺乳動(dòng)物血漿蛋白基因的重組組織培養(yǎng)物、病毒、酵母、細(xì)菌等的上清液、提取物、或裂解物中；或從含有根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)基因技術(shù)已引入表達(dá)人血漿蛋白基因的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物或流體(例如血液、奶、淋巴液、或尿等)中得到。

本發(fā)明的藥物組合物可包含一種或多種pH緩沖化合物，以維持制劑的pH在反映生理pH的預(yù)定水平，例如在約5.0至約8.0的范圍內(nèi)(例如，6.0、6.5、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.8)。用于含水液體制劑中的pH緩沖化合物可以是氨基酸或氨基酸混合物，例如組氨酸或者氨基酸混合物諸如組氨酸和甘氨酸。替代選擇地，pH緩沖化合物優(yōu)選是維持制劑的pH在預(yù)定水平(例如在約5.0至約8.0的范圍)的試劑，且它不螯合鈣離子。這類pH緩沖化合物的說(shuō)明性實(shí)例包括但不限于咪唑和乙酸根離子。pH緩沖化合物可以以適合維持制劑的pH在預(yù)定水平上的任何數(shù)量存在。

本發(fā)明的藥物組合物還可以包含一種或多種滲透壓調(diào)節(jié)劑，即調(diào)節(jié)制劑的滲透性質(zhì)(例如，張度、滲量濃度和/或滲透壓)到接受者個(gè)體的血流和血細(xì)胞可接受水平的化合物。滲透調(diào)節(jié)劑可以是不與鈣離子螯合的試劑。滲透調(diào)節(jié)劑可以是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知或可得到的調(diào)節(jié)制劑滲透性質(zhì)的任何化合物。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以從經(jīng)驗(yàn)上確定用于本發(fā)明制劑中所指定的滲透調(diào)節(jié)劑的適應(yīng)性。合適類型的滲透調(diào)節(jié)劑的說(shuō)明性實(shí)例包括但不限于：鹽，例如氯化鈉和乙酸鈉；糖，例如蔗糖、葡萄糖、和甘露醇；氨基酸，例如甘氨酸；以及一種或多種這些試劑和/或幾類試劑的混合物。滲透調(diào)節(jié)劑可以以足以調(diào)節(jié)制劑滲透性質(zhì)的任何濃度存在。

包含本發(fā)明的視蛋白結(jié)合或視蛋白穩(wěn)定的化合物的組合物可含有多價(jià)金屬離子，例如鈣離子、鎂離子和/或錳離子。任何有助于穩(wěn)定該組合物和對(duì)接受者個(gè)體無(wú)不利影響的多價(jià)金屬離子均可使用。根據(jù)這兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)，熟練的技術(shù)人員可從經(jīng)驗(yàn)上確定合適的金屬離子，這些金屬離子的合適來(lái)源是已知的，包括有機(jī)和無(wú)機(jī)鹽。

本發(fā)明的藥物組合物也可以是非水液體制劑。任何合適的非水液體均可使用，只要它對(duì)其中含有的活性試劑提供穩(wěn)定性。優(yōu)選地，該非水液體是親水性液體。合適的非水液體的說(shuō)明性實(shí)例包括：甘油；二甲基亞砜(DMSO)；聚二甲基硅氧烷(PMS)；乙二醇類，例如乙二醇、二甘醇、三甘醇、聚乙二醇(″PEG″)200、PEG 300、和PEG 400；以及丙二醇類，例如二丙二醇、三丙二醇、聚丙二醇(″PPG″)425、PPG 725、PPG 1000、PEG 2000、PEG3000和PEG 4000。

本發(fā)明的藥物組合物還可以是混合的水/非水液體制劑。合適的非水液體制劑，例如上述的制劑，可以與任何水性液體制劑，例如上面描述的那些制劑，一起使用，只要所述混合的水/非水液體制劑為其中所包含的化合物提供穩(wěn)定性。優(yōu)選地，在這樣的制劑中非水液體是親水液體。合適的非水液體的說(shuō)明性實(shí)例包括：甘油；DMSO；EMS；乙二醇類，例如PEG 200、PEG 300、和PEG 400；以及丙二醇類，例如PPG 425、PPG 725、PEG 1000、PEG 2000、PEG 3000和PEG 4000。合適的穩(wěn)定制劑可允許活性劑在冷凍或非冷凍的液體狀態(tài)貯存。合適的液體制劑可在至少-70℃的溫度下貯存，但也可在至少0℃，或約0℃-約42℃的較高溫度下貯存，這取決于組合物的性質(zhì)。本領(lǐng)域技術(shù)人員普遍知道蛋白質(zhì)和多肽對(duì)pH、溫度和許多可能影響療效的其它因素的變化敏感。

在某些實(shí)施方案中，理想的給藥途徑可以是肺氣霧劑。制備含多肽的氣霧劑遞送系統(tǒng)的技術(shù)是本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的的。一般來(lái)說(shuō)，此類系統(tǒng)使用不會(huì)顯著損害抗體的生物學(xué)性質(zhì)例如互補(bǔ)位結(jié)合容量的組分(例如參見(jiàn)Sciarra和Cutie，“Aerosols”，Remington′s Pharmaceutical Sciences第18版，1990，pp 1694-1712；并入作為參考)。本領(lǐng)域技術(shù)人員為產(chǎn)生多肽氣溶膠可容易地調(diào)節(jié)各種參數(shù)和條件，無(wú)需求助于過(guò)多的實(shí)驗(yàn)。

其它的遞送系統(tǒng)可包括定時(shí)釋放、延緩釋放或持續(xù)釋放的遞送系統(tǒng)。這些系統(tǒng)可避免反復(fù)施用本發(fā)明的組合物，提高受試者和醫(yī)生的便利性。很多類型的釋藥系統(tǒng)是可用的，且是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的。它們包括基于聚合物的系統(tǒng)，例如聚交酯(美國(guó)專利號(hào)3,773,919；歐洲專利號(hào)58,481)、聚(丙交酯/乙交酯)、共聚草酸(copolyoxalates)聚己內(nèi)酯、聚酯酰胺、聚原酸酯、聚羥基丁酸如聚-D-(-)-3-羥基丁酸(歐洲專利號(hào)133,988)、L-谷氨酸和L-谷氨酸-γ-乙基酯的共聚物(Sidman，KR等，Biopolymers，22：547-556)、聚(甲基丙烯酸2-羥基乙酯)或乙烯-醋酸乙烯(Langer等，J.Biomed.Mater.Res.15：267-277；Langer，B.，Chem.Tech.12：98-105)、以及聚酐類。

持續(xù)釋放組合物的其它實(shí)例包括成型制品形式的半透性聚合物基質(zhì)，例如薄膜或微膠囊。遞送系統(tǒng)還包括非聚合物系統(tǒng)：脂質(zhì)，包括甾醇，例如膽固醇、膽固醇酯和脂肪酸或中性脂肪，例如甘油單酯、二酯或三酯；水凝膠釋藥系統(tǒng)，例如生物來(lái)源的生物可吸收的水凝膠(即，殼多糖水凝膠或殼聚糖水凝膠)；硅橡膠(Sylastic)系統(tǒng)；基于多肽的系統(tǒng)；蠟涂層；使用常規(guī)粘合劑和賦形劑的壓制片劑；和部分填充的植入物等。具體實(shí)例包括但不限于：(a)侵蝕(aerosional)系統(tǒng)，其中包含在基質(zhì)內(nèi)形式的試劑，例如在13.5.專利號(hào)No.4,452,775、4,667,014、4,748,034和5,239,660中描述的那些，和(b)擴(kuò)散系統(tǒng)，其中活性組分以受控的速度穿過(guò)聚合物，例如美國(guó)專利號(hào)3,832,253和3,854,480中所述。

可用于本發(fā)明方法和組合物的另一類遞送系統(tǒng)是膠體分散系統(tǒng)。膠體分散系統(tǒng)包括基于脂質(zhì)的系統(tǒng)，包括水包油乳劑、膠束、混合膠束、和脂質(zhì)體。脂質(zhì)體是人工的薄膜容器，它用作體內(nèi)或體外的遞送載體。0.2-4.0μm大小的大單層囊泡(vessels)(LUV)可在水性內(nèi)部中包封大量大分子，并以生物學(xué)活性形式遞送給細(xì)胞(Fraley，R.和Papahadjopoulos，D.，Trends Biochem.Sci.6：77-80)。

脂質(zhì)體可通過(guò)脂質(zhì)體與特異配體如單克隆抗體、糖、糖脂、或蛋白質(zhì)的偶合，靶向于特定的組織。脂質(zhì)體在市場(chǎng)上可由Gibco BRL得到，例如LIPOFECTIN^TM和LIPOFECTACE^TM，它們由陽(yáng)離子脂質(zhì)例如N-[1-(2，3-二油酰氧基)丙基]-N，N，N-三甲基氯化銨(DOTMA)和二甲基二(十八烷基)溴化銨(DDAB)形成。制備脂質(zhì)體的方法是本領(lǐng)域熟知的，并已描述在許多出版物中，例如在DE 3,218,121；Epstein等，Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)82：3688-3692(1985)；K.Hwang等，Proc.Natl，Acad.Sci.(USA)77：4030-4034(1980)；EP52,322；EP 36,676；EP 88,046；EP 143,949；EP 142,641；日本專利申請(qǐng)83-118008；美國(guó)專利號(hào)4,485,045和4,544,545；以及EP 102,324中。脂質(zhì)體也已由Gregoriadis，G.，Trends Biotechnol.，3：235-241綜述。

另一類媒介物是適合植入哺乳動(dòng)物接受者中的生物相容的微顆?；蛑踩胛铩Ｓ糜诟鶕?jù)本方法的示例性生物蝕解的植入物描述于PCT國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CTIUS/03307(出版物號(hào)WO95/24929，題目為″Polymeric Gene Delivery System″)。PCT/US/0307描述了生物相容性、優(yōu)選生物可降解的聚合物基質(zhì)，用于包含在適當(dāng)?shù)膯?dòng)子控制下的外源性基因。聚合物基質(zhì)可用于實(shí)現(xiàn)外源基因或基因產(chǎn)物在受試者中的持續(xù)釋放。

聚合物基質(zhì)優(yōu)選是微顆粒的形式，例如微球(其中試劑分散在整個(gè)固體聚合物基質(zhì)中)或微膠囊(其中試劑貯存在聚合物殼的核心中)。前述含藥物的聚合物的微膠囊描述在例如美國(guó)專利5,075,109中。用于包含試劑的聚合物基質(zhì)的其它形式包括薄膜、涂層、凝膠、植入物、和支架。選擇聚合物基質(zhì)裝置的尺寸和成分以便在基質(zhì)引入組織內(nèi)時(shí)產(chǎn)生有利的釋放動(dòng)力學(xué)。根據(jù)要使用的釋藥方法，進(jìn)一步選擇聚合物基質(zhì)的尺寸。優(yōu)選地，當(dāng)使用氣溶膠途徑時(shí)，聚合物基質(zhì)和成分包含在表面活性劑載體中?？蛇x擇聚合物基質(zhì)組合物，以具有有利的降解速度，以及形成生物粘附性物質(zhì)，以進(jìn)一步提高傳輸?shù)挠行浴＿€可以選擇基質(zhì)組合物不降解，而是在一段延長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)通過(guò)擴(kuò)散釋放。遞送系統(tǒng)也可以是生物相容的微球，它適合局部、位點(diǎn)特異性遞送。這類微球公開(kāi)在Chickering，D.B.等，Biotechnot.Bioeng，52：96-101；Mathiowitz，B.，等，Nature 386：410-414。

不可生物降解和可生物降解的聚合物基質(zhì)均可用于向受試者遞送本發(fā)明的組合物。這些聚合物可以是天然或合成的聚合物。選擇聚合物是基于所希望釋放的時(shí)期，通常在幾小時(shí)到一年或更長(zhǎng)的量級(jí)。通常地，最希望釋放的時(shí)期在幾小時(shí)到3至12個(gè)月。聚合物任選是可吸收高達(dá)其重量約90％的水的水凝膠形式，并任選是與多價(jià)離子或其它聚合物交聯(lián)的。

可用于形成生物可降解的遞送系統(tǒng)的示例性合成聚合物包括：聚酰胺、聚碳酸酯、聚烯烴(polyalkylenes)、聚亞烷基二醇(polyalkylene glycols)、聚氧化烯(polyalkylene oxides)、聚對(duì)苯二甲酸亞烷基酯、聚乙烯醇、聚乙烯醚、聚乙烯酯、聚鹵乙烯、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙交酯、聚硅氧烷、聚氨酯及其共聚物、烷基纖維素、羥烷基纖維素、纖維素醚、纖維素酯、硝化纖維素、丙烯酸和甲基丙烯酸酯的聚合物、甲基纖維素、乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羥丁基甲基纖維素、乙酸纖維素、丙酸纖維素、乙酸丁酸纖維素、乙酸鄰苯二甲酸纖維素、羧乙基纖維素、三乙酸纖維素、硫酸纖維素鈉鹽、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(甲基丙烯酸乙酯)、聚(甲基丙烯酸丁酯)、聚(甲基丙烯酸異丁酯)、聚(甲基丙烯酸己酯)、聚(甲基丙烯酸異癸酯)、聚(甲基丙烯酸月桂酯)、聚(甲基丙烯酸苯酯)、聚(丙烯酸甲酯)、聚(丙烯酸異丙酯)、聚(丙烯酸異丁酯)、聚(丙烯酸十八烷基酯)、聚乙烯、聚丙烯、聚(乙二醇)、聚(環(huán)氧乙烷)、聚(對(duì)苯二甲酸乙二醇酯)、聚(乙烯醇)、聚(醋酸乙烯酯)、聚(氯乙烯)、聚苯乙烯、聚(乙烯吡咯烷酮)、和乳酸與乙醇酸的聚合物、聚酐、聚原酸酯、聚(丁酸)、聚(戊酸)、和聚(丙交酯-共-己內(nèi)酯)、以及天然的聚合物，例如藻酸鹽和其它多糖，包括葡聚糖和纖維素、膠原、它們的化學(xué)衍生物(化學(xué)基團(tuán)如烷基、亞烷基的取代、加成、羥基化、氧化、和本領(lǐng)域技術(shù)人員常規(guī)進(jìn)行的其它修飾)，白蛋白和其它親水性蛋白質(zhì)，玉米醇溶蛋白和其它谷醇溶蛋白以及疏水性蛋白，它們的共聚物和混合物。一般來(lái)說(shuō)，這些物質(zhì)通過(guò)酶催水解或在體內(nèi)由于表面或骨架溶蝕與水接觸而降解。

眼部遞送的方法

本發(fā)明的組合物特別適合治療眼病或癥狀，例如光毒性，尤其是與眼外科手術(shù)有關(guān)的光毒性。

在一種方法中，本發(fā)明的組合物通過(guò)適合直接植入眼的玻璃體內(nèi)的眼用裝置施用。本發(fā)明組合物可以以持續(xù)釋放的組合物提供，例如在美國(guó)專利號(hào)5,672,659和5,595,760中描述的那些。這些裝置被發(fā)現(xiàn)可提供多種組合物的持久的控釋，以治療眼睛而沒(méi)有局部危害或全身副作用的風(fēng)險(xiǎn)。本發(fā)明眼部釋藥方法的目的是為了延長(zhǎng)植入物的持續(xù)時(shí)間，使眼內(nèi)裝置或植入物內(nèi)含有的藥物數(shù)量最大化，同時(shí)使其尺寸最小化。例如參見(jiàn)美國(guó)專利5,378,475、6,375,972、和6,756,058以及美國(guó)專利出版物20050096290和200501269448。這些植入物是生物可降解的和/或生物相容的植入物，也可以是不能生物降解的植入物。

生物可降解的眼植入物描述于例如美國(guó)專利出版號(hào)20050048099中。該植入物對(duì)于活性劑可以是可滲透的或不可滲透的，并可插入到眼室中，例如前眼室或后眼室中，或者可以植入鞏膜、跨脈絡(luò)膜空間、或玻璃體外的無(wú)血管區(qū)域。替代選擇地，為了遞送藥物，也可以使用充當(dāng)本發(fā)明組合物貯庫(kù)的隱形眼鏡。

在優(yōu)選的實(shí)施方案中，植入物可以放置在無(wú)血管區(qū)域，例如在鞏膜上，從而允許藥物經(jīng)鞏膜擴(kuò)散到所希望的治療部位，例如眼內(nèi)空間和眼斑處。此外，經(jīng)鞏膜擴(kuò)散的部位優(yōu)選在眼斑附近。用于遞送本發(fā)明組合物的植入物的實(shí)例包括但不限于，以下專利中描述的裝置：美國(guó)專利號(hào)3,416,530；3,828,777；4,014,335；4,300,557；4,327,725；4,853,224；4,946,450；4,997,652；5，147,647；164,188；5,178,635；5,300,114；5,322,691；5,403,901；5,443,505；5,466,466；5,476,511；5,516,522；5,632,984；5,679,666；5,710,165；5,725,493；5,743,274；5,766,242；5,766,619；5,770,592；5,773,019；5,824,072；5,824,073；5,830,173；5,836,935；5,869,079，5,902,598；5,904,144；5,916,584；6,001,386；6,074,661；6,110,485；6,126,687；6,146.366；6,251,090；和6,299,895，以及WO 01/30323和WO 01/28474，所有這些在此引入作為參考。

實(shí)例包括但不限于以下內(nèi)容：持續(xù)釋藥的遞送系統(tǒng)，它包括內(nèi)部?jī)?chǔ)庫(kù)，其包含有效獲得預(yù)期局部或全身生理或藥理效應(yīng)的有效量的試劑，試劑不能滲透通過(guò)的內(nèi)管，該內(nèi)管有第一端和第二端并覆蓋至少一部分內(nèi)部?jī)?chǔ)庫(kù)，該內(nèi)管由材料形成和有適當(dāng)尺寸以便內(nèi)管能支承其自身重量，不可滲透的膜位于內(nèi)管的第一端，該不可滲透的膜阻止試劑通過(guò)內(nèi)管第一端透出儲(chǔ)庫(kù)，和可滲透的膜位于內(nèi)管的第二端，該可滲透的膜允許試劑通過(guò)內(nèi)管的第二端擴(kuò)散出儲(chǔ)庫(kù)；用于施用本發(fā)明化合物至眼睛的片段的方法，該方法包括植入持續(xù)釋放裝置以遞送本發(fā)明化合物至眼的玻璃體，或可植入的持續(xù)釋放的裝置以施用本發(fā)明化合物至眼睛的片段的步驟；持續(xù)釋放藥物的遞送裝置包括：a)藥物核心，其包含治療有效數(shù)量的至少一種有效獲得診斷效果或有效獲得預(yù)期局部或全身生理或藥理效應(yīng)的第一試劑；b)對(duì)于試劑基本上不可透過(guò)的至少一個(gè)整體罩，它圍繞并限定了容納藥物核心的內(nèi)部隔室，該整體罩包括開(kāi)口頂端和至少一個(gè)圍繞該整體罩的至少部分開(kāi)口頂端的凹形槽；c)試劑可透過(guò)的可透性塞，該可透性塞位于整體罩的開(kāi)口頂端，其中所述凹槽與可透性塞相互作用以保持其在位并靠近開(kāi)口頂端，該可透性塞允許試劑通過(guò)該可透性塞透出藥物核心和整體罩的開(kāi)口頂端；和d)至少一種有效獲得診斷效果或有效獲得預(yù)期局部或全身生理或藥理效應(yīng)的第二試劑；或持續(xù)釋放藥物的遞送裝置，其包括：包含有效量的具有預(yù)期溶解度的試劑的內(nèi)核，和聚合物涂層，該聚合物層對(duì)試劑是可透的，其中該聚合物涂層完全覆蓋所述內(nèi)核。

用于眼部遞送的其它方法包括使用脂質(zhì)體以使本發(fā)明化合物靶向眼睛，并優(yōu)選靶向視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞和/或布魯赫膜。例如，化合物可以以上述方式與脂質(zhì)體復(fù)合，并利用靜脈注射將這種化合物/脂質(zhì)體復(fù)合物注射到眼部病癥(例如光毒性)的患者，以將化合物指向至所期望的眼組織或細(xì)胞。將脂質(zhì)體復(fù)合物直接注射到視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞和/或布魯赫膜的附近，也可提供復(fù)合物靶向某些形式的眼PCD。在具體的實(shí)施方案中，化合物經(jīng)眼內(nèi)持續(xù)遞送(例如VITRASERT或ENVISION)施用。在具體的實(shí)施方案中，化合物通過(guò)較后的球筋膜囊下注射遞送。在另一具體的實(shí)施方案中，包含本發(fā)明組合物的微乳顆粒遞送給眼組織以從布魯赫膜、視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞或二者處吸收脂質(zhì)。

納米粒子是膠體載體系統(tǒng)，它已顯示出通過(guò)延長(zhǎng)血清半衰期提高包封藥物的效力。聚氰基丙烯酸烷酯(PACAS)納米粒子是處于臨床研發(fā)中的聚合物膠體藥物遞送系統(tǒng)，如以下文獻(xiàn)中所述：Stella等，J.Pharm.Sci.，2000.89：p.1452-1464；Brigger等，Tnt.J.Pharm.，2001.214：p.37-42；Calvo等，Pharm.Res.，2001.18：p.1157-1166；和Li等，Biol.Pharm.Bull.，2001.24：p.662-665?？缮锝到獾木?羥基酸)，例如聚(乳酸)(PLA)和聚(丙交酯-共-乙交酯)(PLGA)的共聚物正廣泛用于生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用并已得到FDA的批準(zhǔn)用于某些臨床應(yīng)用。此外，PEG-PLGA納米粒子有很多理想的載體特征，包括：(i)被包封的試劑占總載體系統(tǒng)的相當(dāng)高的重量分?jǐn)?shù)(負(fù)載)；(ii)包封過(guò)程第一步中所用的試劑量是以相當(dāng)高的水平摻入到最終載體中(包埋效率)；(iii)載體具有被冷凍干燥并重構(gòu)形成無(wú)聚結(jié)的溶液的能力；(iv)載體是可生物降解的；(v)載體系統(tǒng)的尺寸小；和(vi)載體提高粒子的持久性。

納米粒子使用本領(lǐng)域已知的基本上任何可生物降解的殼來(lái)形成。在一實(shí)施方案中，使用聚合物，例如聚(乳酸)(PLA)或聚(乳酸-共-乙醇酸)(PLGA)。這些聚合物是生物相容和可生物降解的，并進(jìn)行修飾以便理想地提高納米粒子的光化學(xué)效力和循環(huán)壽命。在一實(shí)施方案中，聚合物用末端羧基(COOH)修飾，它增加粒子的負(fù)電荷并因此限制與帶負(fù)電的核酸適體的相互作用。納米粒子還用聚乙二醇(PEG)修飾，它也增加粒子在循環(huán)中的半衰期和穩(wěn)定性。替代選擇地，為了共價(jià)綴合胺修飾的適體，將COOH基團(tuán)轉(zhuǎn)化成N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)酯。

用于本發(fā)明的組合物和方法中的生物相容聚合物包括但不限于：聚酰胺、聚碳酸酯、聚烯烴、聚亞烷基二醇、聚氧化烯、聚對(duì)苯二甲酸亞烷基酯、聚乙烯醇、聚乙烯醚、聚乙烯酯、聚鹵乙烯、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙交酯、聚硅氧烷、聚氨酯及其共聚物、烷基纖維素、羥烷基纖維素、纖維素醚、纖維素酯、硝化纖維素、丙烯酸和甲基丙烯酸酯的聚合物、甲基纖維素、乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羥丁基甲基纖維素、乙酸纖維素、丙酸纖維素、乙酸丁酸纖維素、乙酸鄰苯二甲酸纖維素、羧乙基纖維素、三乙酸纖維素、硫酸纖維素鈉鹽、聚-甲基丙烯酸甲酯)、聚(甲基丙烯酸乙酯)、聚(甲基丙烯酸丁酯)、聚(甲基丙烯酸異丁酯)、聚(甲基丙烯酸己酯)、聚(甲基丙烯酸異癸酯)、聚(甲基丙烯酸月桂酯)、聚(甲基丙烯酸苯酯)、聚(丙烯酸甲酯)、聚(丙烯酸異丙酯)、聚(丙烯酸異丁酯)、聚(丙烯酸十八烷基酯)、聚乙烯、聚丙烯、聚(乙二醇)、聚(環(huán)氧乙烷)、聚(對(duì)苯二甲酸乙二醇酯)、聚(乙烯醇)、聚醋酸乙烯酯、聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚(乙烯吡咯烷酮)、聚透明質(zhì)酸、酪蛋白、明膠、明膠蛋白、聚酐、聚丙烯酸、藻酸鹽、殼聚糖、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(甲基丙烯酸乙酯)、聚(甲基丙烯酸丁酯)、聚(甲基丙烯酸異丁酯)、聚(甲基丙烯酸己酯)、聚(甲基丙烯酸異癸酯)、聚(甲基丙烯酸月桂酯)、聚(甲基丙烯酸苯酯)、聚(丙烯酸甲酯)、聚(丙烯酸異丙酯)、聚(丙烯酸異丁酯)、聚(丙烯酸十八烷基酯)及任何這些聚合物的組合物，在一實(shí)施方案中，本發(fā)明的納米粒子包括PEG-PLGA聚合物。

本發(fā)明的組合物也可以局部遞送。為了局部遞送，在批準(zhǔn)用于眼部遞送的任何藥學(xué)上可接受的賦形劑中提供組合物。優(yōu)選地，以滴劑形式將組合物遞送到眼的表面。對(duì)于一些應(yīng)用，組合物的遞送依賴于化合物穿過(guò)角膜擴(kuò)散至眼睛內(nèi)部。

本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)認(rèn)識(shí)到，使用本發(fā)明化合物治療光毒性或其它眼部病癥(例如RP)的治療方案可以直接了當(dāng)?shù)卮_定。這不是實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，而是在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中例行的最優(yōu)化問(wèn)題。裸鼠的體內(nèi)研究常常提供開(kāi)始優(yōu)化劑量和遞送方案的出發(fā)點(diǎn)。注射的頻率應(yīng)最初每周一次，如同在一些小鼠研究中所作的那樣。但是，取決于初始臨床試驗(yàn)所得到的結(jié)果和特定患者的需要，此頻率可以優(yōu)化地調(diào)節(jié)成從1天到每2周到每月一次。

人的劑量最初可通過(guò)從小鼠所用化合物的量外推來(lái)確定，如同本領(lǐng)域技術(shù)人員認(rèn)識(shí)到對(duì)照動(dòng)物模型來(lái)修改人的劑量是本領(lǐng)域的慣例。對(duì)于某些實(shí)施方案，預(yù)想劑量可以在以下范圍內(nèi)變化：從約1mg化合物/Kg體重至約5000mg化合物/Kg體重；或從約5mg/Kg體重至約4000mg/Kg體重或從約10mg/Kg體重至約3000mg/Kg體重；或從約50mg/Kg體重至約2000mg/Kg體重；或從約100mg/Kg體重至約1000mg/Kg體重；或從約150mg/Kg體重至約500mg/Kg體重。在其它實(shí)施方案中，該劑量可以約為1、5、10、25、50、75、100、150、10200、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950、1000、1050、1100、1150、1200、1250、1300、1350、1400、1450、1500、1600、1700、1800、1900、2000、2500、3000、3500、4000、4500、5000mg/Kg體重。在其它實(shí)施方案中，預(yù)想可以使用較低的劑量，例如劑量可以是約5mg化合物/Kg體重至約20mg化合物/Kg體重。在其它實(shí)施方案中，該劑量可以是約8、10、12、14、1615或18mg/Kg體重。當(dāng)然，正如在這類治療方案中的通常作法一樣，取決于初始臨床試驗(yàn)所得到的結(jié)果和特定患者的需要，此劑量可以上調(diào)或下調(diào)。

篩選試驗(yàn)

本發(fā)明有用的化合物是式(I)化合物，其可逆地結(jié)合天然的或突變的視蛋白質(zhì)，例如在或者靠近11-順-視黃醛結(jié)合口袋處結(jié)合。由這些小分子視蛋白結(jié)合劑形成的不可漂白的或可緩慢漂白的色素視紫質(zhì)會(huì)阻止與例如視覺(jué)周期產(chǎn)物的積累有關(guān)的光毒性以及由視紫質(zhì)過(guò)度激發(fā)引起的感光細(xì)胞凋亡。這種結(jié)合通常會(huì)抑制(如果不能阻止)類視黃醇，尤其是11-順-視黃醛，與結(jié)合口袋的結(jié)合，從而減少視覺(jué)周期產(chǎn)物例如全反式視黃醇的形成。許多方法可用來(lái)進(jìn)行篩選試驗(yàn)，以鑒別這些化合物。在一種方法中，視蛋白質(zhì)與非類黃醇的候選化合物或試驗(yàn)化合物在11-順-視黃醛或類視黃醇類似物存在下接觸，并測(cè)定發(fā)色團(tuán)的形成速率或產(chǎn)率。如果需要，給出非類黃醇與視蛋白的結(jié)合特征。優(yōu)選地，非類黃醇與視蛋白的結(jié)合是非共價(jià)的和可逆的。因此，視紫質(zhì)形成被非類視黃醇的抑制表明鑒定出成功的試驗(yàn)化合物。例如通過(guò)測(cè)量該蛋白質(zhì)在特征波長(zhǎng)(例如對(duì)于視紫質(zhì)為498nm)的吸收或者通過(guò)用任何標(biāo)準(zhǔn)方法(例如與配體結(jié)合的酶催活性)測(cè)量該蛋白質(zhì)生物活性的增加，測(cè)定視紫質(zhì)數(shù)量的增加。有用的化合物抑制11-順-視黃醛的結(jié)合(及視紫質(zhì)的形成)至少約10％、15％或20％，或者優(yōu)選25％、50％或75％，或者最優(yōu)選高達(dá)90％或甚至100％。

替代選擇地，用于本發(fā)明方法的化合物的功效可通過(guò)在施用試驗(yàn)化合物之前、之中或之后使哺乳動(dòng)物的眼暴露于高強(qiáng)度光源下，并隨后測(cè)定由于暴露在高強(qiáng)光源下所形成的視覺(jué)周期產(chǎn)物(例如，全反式順黃醛、A2E或脂褐素)的數(shù)量來(lái)確定，其中本發(fā)明化合物會(huì)減少曝光有關(guān)的視覺(jué)周期產(chǎn)物的數(shù)量。

總言之，通過(guò)本發(fā)明篩選方法所鑒定的優(yōu)選試驗(yàn)化合物是非類視黃醇，其對(duì)于視蛋白有選擇性，并以可逆的非共價(jià)的方式結(jié)合視蛋白質(zhì)。另外，將它們施用給別樣產(chǎn)生增加脂褐素的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，導(dǎo)致所述動(dòng)物眼中脂褐素的生成速度降低或積累減少。根據(jù)本發(fā)明方法鑒定的化合物有用于治療受試者例如人類患者的光毒性或其它眼部病癥。

用于預(yù)防光毒性以及AMD和色素性視網(wǎng)膜炎的本發(fā)明組合物，可以如前所述任選地與其它的療法組合。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例

以下進(jìn)一步描述非限制性實(shí)施例，以使本領(lǐng)域普通技術(shù)人員能利用本發(fā)明。

實(shí)施例1：(S)-苯基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

實(shí)施例1a：(S)-3，7-二甲基辛-1，6-二烯基乙酸酯

向配有冷凝器的50mL圓底燒瓶中，加入乙酸酐(6.1mL，64.8mmol)、乙酸鉀(0.51g，5.18mmol)和三乙胺(4.5mL，32.4mmol)。向攪拌的混合物中，慢慢地加入(S)-3，7-二甲基辛-6-烯醛(5.0g，32.4mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至120℃保持7.5小時(shí)。冷卻至室溫后，將反應(yīng)混合物倒入水(25mL)中，然后用甲苯(10mL)萃取。將有機(jī)層用飽和碳酸鈉水溶液(25mL x 2)和鹽水(25mL)洗滌。該物質(zhì)轉(zhuǎn)移到50毫升的圓底燒瓶中，并用甲苯(1mL)洗滌分液漏斗。將標(biāo)題化合物在甲苯(11ml)(15.7g)中的溶液直接用于下一步驟。質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 187(M+H⁺)。

實(shí)施例1b：(1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己烷甲醛

將實(shí)施例1a粗產(chǎn)物(6.36g，32.4mmol)于甲苯(11mL)(15.7g)的溶液加入85％的磷酸(12mL)。將混合物加熱至100℃保持4小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并連同加入甲苯(12mL)和水(24mL)，分離各層。水層用甲苯(12mL x 2)萃取。將合并的有機(jī)層用飽和碳酸氫鈉水溶液(50mL x 2)和鹽水(50mL x 2)洗滌。減壓下濃縮和蒸餾(沸點(diǎn)65-70℃)，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物，其為9∶1的差向異構(gòu)體混合物(2.51g，產(chǎn)率：50％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)(主要)δ9.63(d，J＝5.2Hz，1H)，2.03-1.91(m，1H)，1.83-1.75(m，1H)，1.64-1.60(m，1H)，1.54-1.48(m，1H)，1.40-1.35(m，1H)，1.24-1.14(m，1H)，1.02(s，3H)，0.97(s，3H)，0.95-0.84(m，2H)，0.81(d，J＝6.4Hz，3H)ppm。[α]_D²⁴＝+5.20°(c＝1.00，二氯甲烷)。

實(shí)施例1：(S)-苯基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

向苯基溴化鎂(3.0M，在二乙醚中)溶液中加入無(wú)水四氫呋喃(5mL)。將混合物冷卻至-78℃。在該溫度下緩慢加入實(shí)施例1b產(chǎn)物(154mg，1.0mmol)的無(wú)水四氫呋喃(2mL)溶液。在-78℃攪拌反應(yīng)1.5小時(shí)。加入飽和氯化銨水溶液(20mL)，并將該混合物用乙酸乙酯(15mL x4)萃取。將合并的有機(jī)層用鹽水(30mL)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝400∶1)純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(124mg，產(chǎn)率：53％)。Mp＝32-34℃；R_f0.3(25∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.40(d，J＝2H)，7.33-7.30(m，2H)，7.18(t，J＝7.4Hz，1H)，5.12(d，J＝5.6Hz，1H)，1.88-1.78(m，1H)，1.72(d，J＝5.6Hz，1H)，1.64-1.59(m，1H)，1.51-1.43(m，4H)，1.32-1.25(m，1H)，1.15(s，3H)，1.07(s，3H)，1.00-0.88(m，1H)，0.59(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(APCI+ve)m/z 215(M-H₂O+H⁺)；[α]_D²⁵＝+320.0°(c＝0.22，二氯甲烷)。

實(shí)施例2：苯基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮

向?qū)嵤├?產(chǎn)物(70mg，0.30mmol)于二氯甲烷(2mL)中的冷卻至0℃的溶液中，一份地加入戴斯-馬丁氧化劑(Dess-Martin periodinane)(230mg，0.54mmol)。將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?小時(shí)。加入二氯甲烷(30mL)，將混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液(30mL x 3)、鹽水(30mL)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。剩余物經(jīng)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝400∶1)純化，得到無(wú)色油，將其進(jìn)一步通過(guò)制備型薄層色譜法(石油醚/乙酸乙酯＝80∶1)純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(41mg，產(chǎn)率：59％)。R_f＝0.6(25∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃+H₂O)δ7.97-7.94(m，2H)，7.54(t，J＝8.0Hz，1H)，7.47-7.43(m，2H)，3.03(d，J＝10.8Hz，1H)，2.14-2.02(m，1H)，1.81-1.77(m，1H)，1.64-1.55(m，2H)，1.44-1.41(m，1H)，1.34-1.25(m，1H)，1.07-1.01(m，1H)，0.99(s，3H)，0.77(s，3H)，0.75(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 231(M+H⁺)；[α]_D¹⁵＝-2.87°(c＝0.216，二氯甲烷)。

實(shí)施例3：(R)-苯基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在氬氣下向攪拌的實(shí)施例2產(chǎn)物(24mg，0.104mmol)于無(wú)水四氫呋喃(3mL)的冷卻至0℃的溶液中，加入氫化鋁鋰(16mg，0.416mmol)。將所得混合物在0℃攪拌3小時(shí)。用乙酸乙酯(5mL)然后用水(20mL)淬滅反應(yīng)?；旌衔镉靡宜嵋阴?15mL x 3)萃取。將合并的有機(jī)物用鹽水洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。將剩余物通過(guò)快速柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝25∶1)純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(9.3mg，產(chǎn)率：39％)。R_f＝0.4(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ 7.41(d，J＝8.0Hz，2H)，7.31(t，J＝7.4Hz，2H)，7.20(t，J＝7.6Hz，1H)，5.27(br，1H)，1.92-1.85(m，1H)，1.77-1.73(m，1H)，1.67(d，J＝4.0Hz，1H)，1.50-1.39(m，3H)，1.25-1.17(m，1H)，1.13-1.10(m，2H)，1.07(d，J＝6.4Hz，3H)，1.04(s，3H)，0.38(s，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 255(M+Na⁺)；[α]_D¹⁸＝-35.5°(c＝0.186，二氯甲烷)。

實(shí)施例4：(S)-對(duì)甲苯基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在-78℃氮?dú)夥障?，向?qū)妆交V(p-tolyl magnesium)(6.42mL，6.42mmol)于無(wú)水四氫呋喃(2mL)的溶液中，逐滴加入實(shí)施例1b的產(chǎn)物(220.0mg，1.43mmol)。該溶液在-78℃攪拌1小時(shí)。通過(guò)加入飽和氯化銨水溶液(10mL)淬滅混合物。將混合物用乙酸乙酯萃取，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，然后減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯70∶1-＞50∶1)純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(110mg，產(chǎn)率：31％)。Mp＝78-79℃；R_f＝0.4(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.31(d，J＝8.0Hz，2H)，7.15(d，J＝8.0Hz，2H)，5.11(d，J＝5.6Hz，1H)，2.35(s，3H)，1.85-1.81(m，1H)，1.71(d，J＝5.6Hz，1H)，1.65-1.61(m，2H)，1.53-1.48(m，4H)，1.35-1.28(m，1H)，1.16(s，3H)，1.09(s，3H)，0.6(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 269(M+Na⁺)；[α]_D²⁵＝+6.67°(c＝0.36，二氯甲烷)。

實(shí)施例5：對(duì)甲苯基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮

在0℃向?qū)嵤├?產(chǎn)物(50.0mg，0.2mmol)的二氯甲烷(1.0mL)溶液中，加入碳酸氫鈉(17.1mg，0.2mmol)和戴斯-馬丁氧化劑(172.1mg，0.41mmol)。將混合物在0℃攪拌1小時(shí)，然后在室溫?cái)嚢?小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)，然后用二氯甲烷萃取混合物。將有機(jī)相用無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾并減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯80∶1-＞50∶1)純化，得到黃色油的標(biāo)題化合物(40mg，產(chǎn)率：82％)。R_f＝0.5(20∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.89(d，J＝8.0Hz，2H)，7.26(d，J＝8.8Hz，2H)，3.00-3.03(d，J＝11.2Hz，1H)，2.42(s，3H)，2.10-2.05(m，1H)，1.82-1.77(m，1H)，1.62-1.55(m，2H)，1.45-1.41(m，1H)，1.35-1.27(m，1H)，1.08-0.97(m，1H)，1.00(s，3H)，0.79(s，3H)，0.75(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 245(M+H⁺)；[α]_D²⁵＝-4.62°(c＝0.52，二氯甲烷)。

實(shí)施例6：(S)-(3-氯-4-甲基苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在-78℃氮?dú)夥障拢?-氯-4-甲基苯基溴化鎂(12.84mL，6.42mmol)于無(wú)水四氫呋喃(3.0mL)的溶液中，逐滴加入實(shí)施例1b產(chǎn)物(220.0mg，1.43mmol)的無(wú)水四氫呋喃(4.0mL)溶液。該溶液在-78℃攪拌1小時(shí)。通過(guò)加入飽和氯化銨水溶液(10mL)淬滅混合物。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯萃取，有機(jī)相經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯70∶1-＞50∶1)純化，得到黃色油的標(biāo)題化合物(250mg，產(chǎn)率：62％)。R_f＝0.4(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.39(s，1H)，7.21-7.16(m，2H)，5.07(d，J＝5.2Hz，1H)，2.37(s，3H)，1.88-1.79(m，1H)，1.73(d，J＝5.6Hz，1H)，1.69-1.62(m，1H)，1.56-1.42(m，3H)，1.40(d，J＝10.8Hz，1H)，1.34-1.25(m，1H)，1.16(s，3H)，1.08(s，3H)，1.03-0.89(m，1H)，0.62(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(APCI+ve)m/z 263(M-H₂O+H⁺)；[α]_D²⁵＝8.42°(c＝0.19，二氯甲烷)。

實(shí)施例7：(3-氯-4-甲基苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮

在0℃向?qū)嵤├?產(chǎn)物(50.0mg，0.18mmol)的二氯甲烷(1.0mL)溶液中，加入碳酸氫鈉(15.12mg，0.18mmol)和戴斯-馬丁氧化劑(151mg，0.36mmol)。將混合物在0℃攪拌1小時(shí)，然后在室溫?cái)嚢?小時(shí)。通過(guò)加入碳酸氫鈉水溶液(10mL)，將反應(yīng)混合物淬火。將混合物用二氯甲烷萃取，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾，并減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯80∶1-＞50∶1)純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(35.0mg，產(chǎn)率：70％)。Mp＝59-60℃；R_f＝0.5(20∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.94(d，J＝1.6Hz，1H)，7.76(dd，J＝8.4，1.6Hz，1H)，7.32(d，J＝8.4Hz，1H)2.95(d，J＝10.8Hz，1H)，2.44(s，3H)，2.09-2.06(m，1H)，1.82-1.78(m，1H)，1.60-1.55(m，2H)，1.46-1.42(m，1H)，1.36-1.26(m，1H)，1.05-1.00(m，1H)，0.99(s，3H)，0.79(s，3H)，0.75(d，J＝6.8Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 229(M+H⁺)；[α]_D²⁵＝-3.50°(c＝0.40，二氯甲烷)。

實(shí)施例8：(R)-(3-氯-4-甲基苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在0℃向氫化鋁鋰(18.7mg，0.49mmol)于無(wú)水四氫呋喃(2mL)的混合物中，滴加入實(shí)施例7產(chǎn)物(34.3mg，0.12mmol)的四氫呋喃(3mL)溶液。該反應(yīng)在0℃攪拌2小時(shí)。通過(guò)加入水(0.1mL)、氫氧化鈉水溶液(0.1mL)、然后加入水(0.3mL)，將反應(yīng)物淬火。混合物用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)相用無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾并減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯70∶1-＞60∶1)純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(24mg，產(chǎn)率：71.23％)。R_f＝0.4(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.39(s，1H)，7.18(d，J＝8.4Hz，1H)，7.15(d，J＝8.0Hz，1H)，5.20(s，1H)，2.34(s，3H)，1.86-1.85(m，1H)，1.77-1.73(m，1H)，1.67(s，1H)，1.57-1.08(m，6H)，1.09(d，J＝5.6Hz，3H)，1.05(s，3H)，0.41(s，3H)ppm；質(zhì)譜(El+ve)m/z 280(M⁺)；[α]_D²⁵＝+34.5°(c＝0.29，二氯甲烷)。

實(shí)施例9：(S)-(3-氯苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在-78℃氮?dú)庀孪?-溴氯苯(310.4mg，1.62mmol)于無(wú)水四氫呋喃(2mL)的溶液中，逐滴加入正丁基鋰(0.66mL，1.6M，在四氫呋喃中)。該反應(yīng)在-78℃攪拌1小時(shí)，隨后加入實(shí)施例1b的產(chǎn)物(250.0mg，1.62mmol)，并再繼續(xù)攪拌2小時(shí)。通過(guò)加入飽和氯化銨水溶液(15mL)，將反應(yīng)淬滅，并將混合物用二氯甲烷萃取。經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯70∶1-＞60∶1)純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(130.5mg，產(chǎn)率：30％)。R_f＝0.4(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.41(s，1H)，7.29(d，J＝8.4Hz，1H)，7.24(d，J＝8.0Hz，1H)，7.17(d，J＝7.6Hz，1H)，5.14(d，J＝4.8Hz，1H)，1.89-1.79(m，2H)，1.66-1.61(m，1H)，1.53-1.45(m，2H)，1.41(d，J＝10.8Hz，1H)，1.34-1.31(m，1H)，1.16(s，3H)，1.08(s，3H)，1.02-0.92(m，1H)，0.60(d，J＝6.8Hz，3H)ppm；¹³C NMR(400MHz，CDCl₃)δ149.212，132.980，128.142，124.919，124.116，122.012，69.464，58.649，41.543，35.937，33.427，31.008，28.083，21.366，21.114，20.762ppm；質(zhì)譜(El+ve)m/z266(M⁺)；[α]_D²⁵＝+9.44°(c＝0.36，二氯甲烷)。

實(shí)施例10：(3-氯苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮

在0℃向?qū)嵤├?的產(chǎn)物(50.0mg，0.19mmol)于二氯甲烷(1.0mL)的溶液中，加入碳酸氫鈉(15.9mg，0.19mmol)和戴斯-馬丁氧化劑(160.1mg，0.38mmol)。將混合物在0℃攪拌1小時(shí)，升溫至室溫，再攪拌2小時(shí)。然后向反應(yīng)混合物中加入碳酸氫鈉水溶液(10mL)，然后將反應(yīng)混合物用二氯甲烷萃取。將有機(jī)相用無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾并減壓濃縮。剩余物經(jīng)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯80∶1-＞50∶1)純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題產(chǎn)物(36.5mg，產(chǎn)率：72％)。R_f＝0.5(20∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.92(s，1H)，7.82-7.83(d，J＝8.0Hz，1H)，7.50-7.52(d，J＝8.8Hz，1H)，7.38-7.42(t，J＝8.0Hz，1H)，2.94-2.97(d，J＝11.2Hz，1H)，2.05-2.08(m，1H)，1.77-1.81(dd，J＝13.2，2.8Hz，1H)，1.54-1.60(m，3H)，0.98-1.03(m，2H)，0.97(s，3H)，0.65-0.72(m，6H)ppm；質(zhì)譜(El+ve)m/z 264.8(M⁺)；[α]_D²⁵＝-1.25°(c＝0.32，二氯甲烷)。

實(shí)施例11：(R)-(3-氯苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在0℃向氫化鋁鋰(45.3mg，1.19mmol)在無(wú)水四氫呋喃(4mL)的混合物中，逐滴加入實(shí)施例10產(chǎn)物(79mg，0.3mmol)的四氫呋喃(6mL)溶液。該反應(yīng)在0℃攪拌2小時(shí)。通過(guò)加入水(0.2mL)、氫氧化鈉水溶液(0.2mL)、然后加入水(0.6mL)，將反應(yīng)淬滅。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯萃取，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾，并減壓蒸發(fā)溶劑。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯70∶1-＞60∶1)純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(54mg，產(chǎn)率：68％)。Mp＝58-60℃；R_f＝0.4(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.44(s，1H)，7.31(t，J＝7.6Hz，1H)，7.24(d，J＝7.6Hz，1H)，7.19(d，J＝7.6Hz，1H)，5.26(s，1H)，1.94-1.86(m，1H)，1.79-1.76(m，1H)，1.73(d，J＝4.8Hz，1H)，1.49-1.38(m，3H)，1.24-1.09(m，3H)，1.08(d，J＝6.0Hz，3H)，1.07(s，3H)，0.40(s，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 289(M+Na⁺)；[α]_D²⁵＝+32.0°(c＝0.10，二氯甲烷)。

實(shí)施例12：(S)-(4-氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在-78℃氮?dú)夥障?，?-氟苯基溴化鎂(8.04mL，6.44mmol)于無(wú)水四氫呋喃(2.0mL)的溶液中，逐滴加入實(shí)施例1b產(chǎn)物(220.0mg，1.43mmol)的無(wú)水四氫呋喃(4.0mL)溶液。該溶液在-78℃攪拌1小時(shí)。通過(guò)在0℃加入飽和氯化銨水溶液(10mL)將混合物淬火。將該溶液用乙酸乙酯萃取，用無(wú)水硫酸鈉干燥，然后減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯70∶1-＞60∶1)純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(130mg，產(chǎn)率33％)。Mp＝55-57℃；R_f＝0.4(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.34-7.29(m，2H)，6.92(t，J＝8.4Hz，2H)，5.01(d，J＝5.6Hz，1H)，1.82-1.73(m，1H)，1.68(d，J＝5.2Hz，1H)，1.62-1.52(m，1H)，1.50-1.20(m，4H)，1.18(s，3H)，1.09(s，3H)，0.84-1.32(m，2H)，0.6(d，J＝6.4Hz，3H)ppm。¹³C NMR(400MHz，CDCl₃)δ162.4，159.9，143.5，143.5，126.3，114.7，114.5，70.5，59.7，42.6，37.0，34.4，32.0，29.1，22.4，22.2，21.7ppm；質(zhì)譜(El+ve)m/z 265(M⁺)；[α]_D²⁵＝+7.37°(c＝0.38，二氯甲烷)。

實(shí)施例13：(4-氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮

在0℃向?qū)嵤├?2的產(chǎn)物(60.0mg，0.24mmol)于二氯甲烷(1.0mL)的溶液中，加入碳酸氫鈉(20.1mg，0.24mmol)和戴斯-馬丁氧化劑(203.2mg，0.48mmol)。將混合物在0℃攪拌1小時(shí)，然后升溫至室溫，再攪拌2小時(shí)。通過(guò)加入碳酸氫鈉水溶液(10mL)使反應(yīng)猝滅。將混合物用二氯甲烷萃取，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾并減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯80∶1-＞50∶1)純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(60.0mg，產(chǎn)率：100％)。R_f＝0.5(20∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.99(dd，J＝8.4，5.2Hz，2H)，7.12(dd，J＝8.8，7.6Hz，2H)，2.97(d，J＝10.8Hz，1H)，2.09-2.02(m，1H)，1.82-1.77(m，1H)，1.57-1.54(m，2H)，1.46-1.42(m，1H)，1.33-1.25(m，1H)，1.06-0.95(m，1H)，0.98(s，3H)，0.6-0.89(m，6H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 249(M+H⁺)；[α]_D²⁵＝-4.80°(c＝0.50，二氯甲烷)。

實(shí)施例14：(R)-(4-氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

0℃下向氫化鋁鋰(33.0mg，0.87mmol)在四氫呋哺(2mL)的混合物中，逐滴加入于四氫呋喃(3mL)中的實(shí)施例13產(chǎn)物(54.0mg，0.22mmol)。該反應(yīng)在0℃攪拌2小時(shí)。通過(guò)加入水(0.1mL)、氫氧化鈉水溶液(0.1mL)、然后加入水(0.3mL)，將反應(yīng)淬滅。將混合物用乙酸乙酯萃取，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾并減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯70∶1-＞60∶1)純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(37mg，產(chǎn)率：67％)。R_f＝0.4(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.37(dd，J＝8.4，5.6Hz，2H)，7.0(t，J＝8.8Hz，2H)，5.25(s，1H)，1.88-1.83(m，1H)，1.77-1.73(m，1H)，1.69(d，J＝4.4Hz，1H)，1.57-1.08(m，6H)，1.06(d，J＝6.4Hz，3H)，1.02(s，3H)，0.38(s，3H)ppm；質(zhì)譜(El+ve)m/z 250(M⁺)；[α]_D²⁵＝+26.0°(c＝0.47，二氯甲烷)。

實(shí)施例15：(S)-(4-(三氟甲基)苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

將4-溴三氟甲苯(2.18g，9.70mmol)溶于無(wú)水四氫呋喃(10mL)中，并在40℃氮?dú)庀孪騇g(232.8mg，9.70mmol)和碘(5mg)在無(wú)水四氫呋喃(2mL)的攪拌混合物中加入，緩慢加入4-溴三氟甲苯(2.18g，9.70mmol)的無(wú)水溶液(10mL)。一旦完成加入，將反應(yīng)回流1小時(shí)。將反應(yīng)溶液冷卻至-78℃，然后加入于四氫呋喃(2mL)中的實(shí)施例1b產(chǎn)物(300mg，1.94mmol)。該反應(yīng)在-78℃攪拌2小時(shí)。通過(guò)加入飽和氯化銨水溶液(20mL)，將反應(yīng)淬滅。在升溫至室溫后，混合物用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)相經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥，然后減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯80∶1-＞50∶1)純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(270mg，產(chǎn)率：46％)。Mp＝63-66℃；R_f＝0.4(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.58(d，J＝8.4Hz，2H)，7.54(d，J＝8.0Hz，2H)，5.16(d，J＝4.8Hz，1H)，1.89-1.83(m，1H)，1.81(d，J＝5.2Hz，1H)，1.64(d，J＝13.2Hz，1H)，1.50-1.43(m，4H)，1.35-1.28(m，1H)，1.18(s，3H)，1.10(s，3H)，1.02-0.92(m，1H)，0.58(d，J＝6.0Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z283(M-H₂O+H⁺)；[α]_D²⁵＝+7.74°(c＝0.31，二氯甲烷)。

實(shí)施例16：(4-(三氟甲基)苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮

在0℃向?qū)嵤├?5的產(chǎn)物(217mg，0.72mmol)于二氯甲烷(3mL)的溶液中，加入碳酸氫鈉(60.8mg，0.72mmol)和戴斯-馬丁氧化劑(613.3mg，1.45mmol)。將混合物升溫至室溫并攪拌2小時(shí)。向反應(yīng)混合物中，加入碳酸氫鈉水溶液(20mL)，然后將混合物用二氯甲烷萃取，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾并減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯60∶1)純化，得到蠟狀固體標(biāo)題化合物(160mg，產(chǎn)率：74％)。Mp＝16-20℃R_f＝0.4(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.05(d，J＝8.0Hz，2H)，7.72(d，J＝8.0Hz，2H)，3.02(d，J＝11.2Hz，1H)，2.15-2.04(m，1H)，1.80(d，J＝13.6Hz，1H)，1.61-1.55(m，2H)，1.46-1.43(m，1H)，1.34-1.27(m，1H)，1.08-1.00(m，1H)，0.98(s，3H)，0.76(s，3H)，0.75(d，J＝6.0Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 299(M+H⁺)；[α]_D²⁵＝+1.00°(c＝0.20，二氯甲烷)。

實(shí)施例17：(R)-(4-(三氟甲基)苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在0℃向氫化鋁鋰(50.9mg，1.34mmol)于無(wú)水四氫呋喃(4mL)的混合物中，逐滴加入在無(wú)水四氫呋喃(6mL)中的實(shí)施例16產(chǎn)物(100mg，0.34mmol)。將反應(yīng)物加熱至室溫，攪拌1.5小時(shí)。通過(guò)加入水(0.1mL)、氫氧化鈉水溶液(0.1mL)和水(0.3mL)，將反應(yīng)淬火。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯萃取，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾，并真空濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯60∶1)純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(78mg，產(chǎn)率：76％)。Mp＝76-79℃；R_f＝0.4(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.56(d，J＝8.4Hz，2H)，7.53(d，J＝8.0Hz，2H)，5.31(s，1H)，1.94-1.84(m，1H)，1.79-1.76(m，2H)，1.48-1.41(m，3H)，1.24-1.11(m，3H)，1.08(d，J＝6.0Hz，3H)，1.05(s，3H)，0.33(s，3H)ppm；質(zhì)譜(El+ve)m/z 300(M⁺)；[α]_D²⁵＝+17.1°(c＝0.21，二氯甲烷)。

實(shí)施例18：1-氟-4-(((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)苯

在0℃向?qū)嵤├?2的產(chǎn)物(70mg，0.28mmol)于三氟乙酸(0.30mL)的溶液中，加入三乙基硅烷(71.6mg，0.62mmol)。將混合物升溫至室溫，并在室溫?cái)嚢?0分鐘。將反應(yīng)用碳酸氫鈉水溶液(5mL)處理，然后將混合物用乙酸乙酯萃取。將合并的有機(jī)層用飽和鹽水洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾并減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚)純化，隨后通過(guò)制備型HPLC純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(35mg，產(chǎn)率：53％)。R_f＝0.7(石油醚)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.16(dd，J＝7.2，6.0Hz，2H)，6.93(dd，J＝8.8，8.4Hz，2H)，2.80(d，J＝15.2Hz，1H)，2.32(dd，J＝15.6，6.8Hz，1H)，1.60(d，J＝13.6Hz，1H)，1.49-1.39(m，4H)，1.26-1.14(m，2H)，0.98-0.91(m，1H)，0.96(s，3H)，0.87(s，3H)，0.72(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(El+ve)m/z 234(M⁺)；[α]_D²⁵＝+4.21°(c＝0.19，二氯甲烷)。

實(shí)施例19：(S)-(3，4-二氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在室溫向碘(5mg)、鎂(0.26g，11mmol)、四氫呋喃(5mL)混合物中，滴加入4-溴-1，2-二氟苯(1.93g，10mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?分鐘，然后加熱回流2小時(shí)。將反應(yīng)冷卻至-78℃，加入實(shí)施例1b的產(chǎn)物(300mg，1.95mmol)。該反應(yīng)在-78℃攪拌2小時(shí)。反應(yīng)混合物用飽和氯化銨水溶液(5mL)淬火。將混合物用乙酸乙酯(30mL x 3)萃取，有機(jī)相用水(20mL)、鹽水(20mL)洗滌，并用無(wú)水硫酸鈉干燥。在真空濃縮后，將剩余物用硅膠色譜法純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(40mg，產(chǎn)率：8％)。Mp＝43.3-45.8℃；R_f＝0.5(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.26-7.21(m，1H)，7.11-7.08(m，2H)，5.04(d，J＝5.6Hz，1H)，1.82-1.74(m，1H)，1.75(d，J＝5.6Hz，1H)，1.64-1.60(m，1H)，1.50-1.44(m，3H)，1.36-1.25(m，2H)，1.12(s，3H)，1.05(s，3H)，0.96-0.94(m，1H)，0.57(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 251(M-H₂O+H⁺)；[α]_D²⁵＝+5.56°(c＝0.18，二氯甲烷)。

實(shí)施例20：(3，4-二氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮

在0℃向?qū)嵤├漠a(chǎn)物(18mg，0.067mmol)于二氯甲烷(10mL)的溶液中，加入碳酸氫鈉(6mg，0.067mmol)和戴斯-馬丁氧化劑(57mg，0.134mmol)。將反應(yīng)混合物升溫至室溫并攪拌過(guò)夜。用5％鹽酸(5mL)淬滅反應(yīng)，然后用二氯甲烷(20mL x 3)萃取。將合并的有機(jī)相用飽和碳酸氫鈉水溶液(20mL)、鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。將剩余物用制備薄層色譜法純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(11mg，產(chǎn)率：62％)。R_f＝0.7(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃+D₂O)δ7.82-7.73(m，2H)，7.25-7.22(m，1H)，2.91(d，J＝11.2Hz，1H)，2.08-2.01(m，1H)，1.81-1.77(m，1H)，1.57-1.54(m，2H)，1.44(d，J＝12.8Hz，1H)，1.32-1.28(m，1H)，1.02-0.95(m，4H)，0.77(s，3H)，0.73(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 267.6(M+H⁺)；[α]_D²⁵＝-3.33°(c＝0.12，二氯甲烷)。

實(shí)施例21：(S)-呋喃-2-基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在-78℃和氬氣氛下，向呋喃(198.6mg，2.92mmol)的無(wú)水四氫呋喃(12mL)的溶液中，逐滴加入正丁基鋰(1.83mL，1.6M)。然后向反應(yīng)溶液中加入實(shí)施例1b產(chǎn)物(300mg，1.94mmol)的四氫呋喃(2mL)溶液。該反應(yīng)在-78℃攪拌2小時(shí)，溫?zé)嶂潦覝夭⒃贁嚢?小時(shí)。通過(guò)加入飽和氯化銨水溶液(20mL)將反應(yīng)淬滅，將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，然后減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯60/1-＞40/1)純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(210mg，產(chǎn)率：48％)。R_f＝0.4(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.34(s，1H)，6.33(s，1H)，6.17(s，1H)，5.07(d，J＝6.4Hz，1H)，1.89(d，J＝6.4Hz，1H)，1.86-1.77(m，1H)，1.66(d，J＝13.6Hz，1H)，1.53-1.38(m，4H)，1.30-1.22(m，1H)，1.06-0.95(m，1H)，1.03(s，3H)，1.01(s，3H)，0.74(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 205(M-H₂O+H⁺)；[α]_D²⁵＝+0.87°(c＝0.23，二氯甲烷)。

實(shí)施例22：呋喃-2-基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮

在0℃向?qū)嵤├?1產(chǎn)物(120mg，0.54mmol)的二氯甲烷(2mL)的溶液中，加入碳酸氫鈉(45.3mg，0.54mmol)和戴斯-馬丁氧化劑(457.7mg，1.08mmol)。將混合物升溫至室溫并攪拌2.5小時(shí)。向反應(yīng)混合物中，加入飽和碳酸氫鈉水溶液(20mL)到該反應(yīng)，然后將混合物用二氯甲烷萃取。將有機(jī)相用無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾，然后在減壓下濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯60/1)純化，然后通過(guò)制備型HPLC純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(36mg，產(chǎn)率：30％)。Mp＝81-84℃；R_f＝0.5(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.58(s，1H)，7.17(d，J＝3.6Hz，1H)，6.52(t，J＝3.2Hz，1H)，2.75(d，J＝11.2Hz，1H)，2.07-2.02(m，1H)，1.77(d，J＝13.2Hz，1H)，1.59-1.53(m，2H)，1.44-1.40(m，1H)，1.32-1.25(m，1H)，1.04-0.93(m，1H)，1.00(s，3H)，0.85(s，3H)，0.76(d，J＝6.0Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 221(M+H⁺)；[α]_D²⁵＝-25.7°(c＝0.21，二氯甲烷)。

實(shí)施例23：(R)-呋喃-2-基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在0℃向氫化鋁鋰(20.7mg，0.54mmol)在無(wú)水四氫呋喃(1.5mL)中的混合物中，在0℃滴加入實(shí)施例22產(chǎn)物(100mg，0.40mmol)的無(wú)水四氫呋喃(2.5mL)溶液。該反應(yīng)在0℃攪拌1小時(shí)，此后加入另外的氫化鋁鋰(10mg，0.26mmol)。將反應(yīng)升溫至室溫并攪拌1小時(shí)。通過(guò)加入水(0.1mL)、氫氧化鈉水溶液(0.1mL)、然后加入另外的水(0.3mL)將反應(yīng)淬滅。混合物用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)相經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾，然后真空濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：1石油醚/乙酸乙酯70/1-＞50/1)純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(4.5mg，產(chǎn)率：14％)。R_f＝0.4(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.36(s，1H)，6.34(s，1H)，6.27(s，1H)，5.17-5.16(m，1H)，1.82-1.78(m，2H)，1.69(d，J＝13.6Hz，1H)，1.44-1.39(m，2H)，1.25-1.23(m，3H)，1.10(d，J＝6.4Hz，3H)，1.06-0.98(m，1H)，0.82(s，3H)，0.81(s，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 205(M-H₂O+H⁺)；[α]_D²⁵＝+37.3°(c＝0.15，二氯甲烷)。

實(shí)施例24：(S)-噻吩-3-基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在-40℃和氮?dú)夥障?，?-溴噻吩(476mg，2.92mmol)的無(wú)水己烷(5mL)的溶液中，滴加正丁基鋰。將無(wú)水四氫呋喃(0.5mL)轉(zhuǎn)移到燒瓶中，攪拌2小時(shí)。加入無(wú)水己烷(1.5mL)，然后將反應(yīng)溶液冷卻至-78℃，然后緩慢加入實(shí)施例1b的產(chǎn)物(300mg，1.94mmol)。該反應(yīng)在-78℃攪拌2小時(shí)，然后在室溫下過(guò)夜。加入飽和氯化銨水溶液(20mL)使混合物淬火。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯萃取，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，然后減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯60/1-＞40/1)純化，得到淡黃色油的標(biāo)題化合物(270mg，產(chǎn)率：58％)。R_f＝0.4(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.26(s，1H)，7.10(s，1H)，7.00(d，J＝4.8Hz，1H)，5.11(d，J＝6.0Hz，1H)，1.86-1.78(m，2H)，1.64(d，J＝12.8Hz，1H)，1.50-1.38(m，4H)，1.29-1.22(m，1H)，1.08(s，3H)，1.03(s，3H)，1.03-0.94(m，1H)，0.66(d，J＝6.4Hz，3H))ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 221(M-H₂O+H⁺)；[α]_D²⁵＝+15.8°(c＝0.24，二氯甲烷)。

實(shí)施例25：噻吩-3-基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮

在0℃向?qū)嵤├?3產(chǎn)物(170mg，0.71mmol)的二氯甲烷(3.5mL)溶液中，加入碳酸氫鈉(60.0mg，0.71mmol)和戴斯-馬丁氧化劑(605.7mg，1.43mmol)。將該混合物攪拌升溫至室溫并攪拌2小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入飽和碳酸氫鈉水溶液(20mL)，然后將其用二氯甲烷萃取。將有機(jī)相經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯80/1-＞60/1)純化，然后通過(guò)制備的薄層色譜法純化，得到為白色固體的約11比1比率的標(biāo)題化合物(100mg，產(chǎn)率：60％)和噻吩-2-基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮。Mp＝119-121℃；R_f＝0.5(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.03(s，1H)，7.57(d，J＝5.2Hz，1H)，7.30-7.29(m，1H)，2.75(d，J＝10.8Hz，1H)，2.09-2.02(m，1H)，1.78(d，J＝12.8Hz，1H)，1.60-1.54(m，2H)，1.44-1.41(m，1H)，1.32-1.24(m，1H)，1.04-0.95(m，1H)，1.00(s，3H)，0.83(s，3H)，0.75(d，J＝6.8Hz，3H))ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 237(M+H⁺)；[α]_D²⁵＝-14.0°(c＝0.28，二氯甲烷)。

實(shí)施例26：(R)-噻吩-3-基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在0℃向氫化鋁鋰(38.6mg，1.02mmol)在無(wú)水四氫呋喃(3mL)的混合物中，在0℃滴加實(shí)施例24產(chǎn)物(60mg，0.25mmol)的無(wú)水四氫呋喃(5mL)溶液。該反應(yīng)在0℃攪拌2小時(shí)。該反應(yīng)通過(guò)加入水(0.1mL)、氫氧化鈉水溶液(0.1mL)和水(0.3mL)淬滅。將混合物用乙酸乙酯萃取。將合并的有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，然后減壓濃縮。剩余物用硅膠柱色譜法在硅膠上(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯70/1-＞50/1)純化，然后進(jìn)一步通過(guò)制備的HPLC純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(30mg，產(chǎn)率：50％)。R_f＝0.4(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.26(s，1H)，7.19(s，1H)，7.03(d，J＝4.8Hz，1H)，5.28(s，1H)，1.88-1.78(m，1H)，173-1.71(m，2H)，1.45-1.43(m，2H)，1.35(d，J＝10.4Hz，1H)，1.27-1.20(m，2H)，1.11-1.04(m，1H)，1.05(d，J＝6.0Hz，3H)，0.96(s，3H)，0.63(s，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 221(M-H₂O+H⁺)；[α]_D²⁵＝+46.4°(c＝0.28，二氯甲烷)。

實(shí)施例27：2-氯-1-甲基-4-(((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)苯

在0℃向?qū)嵤├?的產(chǎn)物(80mg，0.28mmol)于三氟乙酸(0.30mL)的溶液中，加入三乙基硅烷(72.9mg，0.63mmol)。然后將混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)。將反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)淬滅，然后用乙酸乙酯萃取。將合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，然后用無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾，然后減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚)純化，然后進(jìn)一步經(jīng)制備型HPLC純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(49mg，產(chǎn)率：66％)。R_f＝0.7(10∶1石油醚)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.19(s，1H)，7.08(d，J＝7.6Hz，1H)，7.00(d，J＝7.6Hz，1H)，2.78(d，J＝15.6Hz，1H)，2.32(s，3H)，2.32-2.25(m，1H)，1.60(d，J＝13.2Hz，1H)，1.47-1.39(m，4H)，1.27-1.15(m，2H)，0.96(s，3H)，0.96-0.90(m，1H)，0.86(s，3H)，0.73(d，J＝6.0Hz，3H)ppm；[α]_D²⁵＝+5.71°(c＝0.35，二氯甲烷)。

實(shí)施例28：(S)-(4-(三氟甲氧基)苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

將1-溴-4-(三氟甲氧基)苯(1.95g，8.10mmol)溶解在無(wú)水四氫呋喃(8mL)中。氮?dú)庀孪蜴V(194.4mg，8.10mmol)和碘(5mg)于無(wú)水四氫呋喃(2mL)的攪拌混合物中，在0℃和N₂下加入1-溴-4-(三氟甲氧基)苯溶液(2mL)，然后將溶液加熱至40℃，滴加入其余部分的1-溴-4-(三氟甲氧基)苯溶液(6mL)。將反應(yīng)加熱以回流1小時(shí)，然后冷卻至-78℃，然后加入實(shí)施例1b的產(chǎn)物(250mg，1.62mmol)。該反應(yīng)在此溫度下攪拌2小時(shí)。在0℃通過(guò)加入飽和氯化銨水溶液(20mL)將混合物淬火。將溶液升溫至室溫，然后用乙酸乙酯萃取，經(jīng)硫酸鈉干燥和真空濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯80/1-＞60/1)純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(190mg，產(chǎn)率：39％)。Mp＝29-33℃；R_f＝0.4(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.42(d，J＝8.0 Hz，2H)，7.15(d，J＝8.0 Hz，2H)，5.10(d，J＝5.2Hz，1H)，1.87-1.80(m，1H)，1.77(d，J-5.6Hz，1H)，1.62(d，J-13.2Hz，1H)，1.50-1.38(m，4H)，1.31-1.23(m，1H)，1.14(s，3H)，1.06(s，3H)，1.00-0.89(m，1H)，0.58(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(El+ve)m/z 316(M⁺)；[α]_D²⁵＝-1.00°(c＝0.20，二氯甲烷)。

實(shí)施例29：(4-(三氟甲氧基)苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮

在0℃向?qū)嵤├?8產(chǎn)物(160mg，0.50mmol)的二氯甲烷(3.0mL)溶液中，加入碳酸氫鈉(42.5mg，0.50mmol)和戴斯-馬丁氧化劑(428.9mg，1.01mmol)。將混合物升溫至室溫并攪拌2小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入飽和碳酸氫鈉水溶液(15mL)，用二氯甲烷萃取有機(jī)物。將有機(jī)相用無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾并減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯80/1-＞60/1)純化，然后進(jìn)一步通過(guò)制備型薄層色譜法純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(125mg，產(chǎn)率：79％)。R_f＝0.5(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.02(d，J＝8.8Hz，2H)，7.28(d，J＝8.8Hz，2H)，2.99(d，J＝10.8Hz，1H)，2.10-2.03(m，1H)，1.80(d，J＝12.8Hz，1H)，1.61-1.55(m，2H)，1.46-1.42(m，1H)，1.34-1.26(m，1H)，1.04-0.98(m，1H)，0.98(s，3H)，0.78(s，3H)，0.75(d，J＝6.8Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 315(M+H⁺)；[α]_D²⁵＝-12.9°(c＝0.20，二氯甲烷)。

實(shí)施例30：(R)-(4-(三氟甲氧基)苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在0℃向氫化鋁鋰(48.2mg，1.27mmol)于無(wú)水四氫呋喃(4mL)的混合物中，逐滴加入實(shí)施例29產(chǎn)物(100mg，0.32mmol)的無(wú)水四氫呋喃(6mL)溶液。該反應(yīng)在0℃攪拌1.5小時(shí)。通過(guò)加入水(0.1mL)、氫氧化鈉水溶液(0.1mL)和另外的水(0.3mL)將反應(yīng)淬滅。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層收集，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯70/1-＞50/1)純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(55mg，產(chǎn)率：54％)。R_f＝0.4(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.43(d，J＝8.0Hz，2H)，7.16(d，J＝8.8Hz，2H)，5.26(s，1H)，1.91-1.83(m，1H)，1.77-1.75(m，2H)，1.50-1.36(m，3H)，1.26-1.10(m，3H)，1.06(d，J＝6.0Hz，3H)，1.03(s，3H)，0.36(s，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 299(M-H₂O+H⁺)；[α]_D²⁵＝-1.82°(c＝0.44，二氯甲烷)。

實(shí)施例31：(S)-(3，4，5-三氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

向在無(wú)水四氫呋喃(5ml)中的5-溴-1，2，3-三氟苯(2.11g，10mmol)中，滴加入碘(5mg)和鎂(0.26g，11mmol)的無(wú)水四氫呋喃(5mL)混合物。將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?分鐘，然后加熱回流2小時(shí)，此時(shí)鎂已耗盡。向冷卻至-78℃的該(3，4，5-三氟苯基)溴化鎂溶液中，加入實(shí)施例1b的產(chǎn)物(300mg，1.95mmol)，并將反應(yīng)在-78℃攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物用飽和氯化銨水溶液(5mL)淬火，然后將其用乙酸乙酯(30mL X 3)萃取，用水(20mL)、鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥，濃縮減壓。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(300mg，產(chǎn)率：54％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.02(t，J＝7.2Hz，2H)，4.99(d，J＝5.2Hz，1H)，1.81-1.76(m，2H)，1.65-1.61(m，1H)，1.49-1.44(m，3H)，1.32-1.25(m，2H)，1.11(s，3H)，1.04(s，3H)，0.96-0.93(m，1H)，0.57(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 269(M-H₂O+H⁺)；[α]_D²⁵＝+8.24°(c＝0.68，二氯甲烷)。

實(shí)施例32：(3，4，5-三氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮

在0℃向?qū)嵤├?1產(chǎn)物(240mg，0.84mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中，加入碳酸氫鈉(71mg，0.84mmol)和戴斯-馬丁氧化劑(712mg，1.68mmol)。反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢柽^(guò)夜。將反應(yīng)混合物用5％鹽酸(5mL)淬火，然后將有機(jī)物用乙酸乙酯(20mL X 3)萃取。將有機(jī)相用飽和碳酸氫鈉水溶液(20mL)、鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。將剩余物經(jīng)制備薄層色譜法純化，然后進(jìn)一步經(jīng)制備型HPLC純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(100mg，產(chǎn)率：42％)。Mp＝56.7℃；R_f＝0.7(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃+D₂O)δ7.61(t，J＝7.2Hz，2H)，2.84(d，J＝11.2Hz，1H)，2.07-2.03(m，1H)，1.82-1.77(m，1H)，1.59-1.55(m，2H)，1.44(d，J＝12.8Hz，1H)，1.33-1.28(m，1H)，1.02-0.98(m，1H)，0.96(s，3H)，0.78(s，6H)，0.73(d，J＝6.0Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 285(M+H⁺)；[α]_D²⁵＝-7.69°(c＝0.13，二氯甲烷)。

實(shí)施例33：(R)-(3，4，5-三氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在0℃向?qū)嵤├?2產(chǎn)物(52mg，0.18mmol)于四氫呋喃(10mL)的混合物中，加入氫化鋁鋰(21mg，0.55mmol)?；旌衔镌?℃攪拌3小時(shí)，然后將反應(yīng)用水淬滅。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(20mL x 3)萃取，將有機(jī)相用鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥，然后減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠色譜法純化，得到蠟狀固體的標(biāo)題化合物(29mg，產(chǎn)率：56％)。R_f＝0.4(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.05(t，J＝7.6Hz，2H)，5.18(s，1H)，1.90-1.79(m，2H)，1.75(d，J＝4.8Hz，1H)，1.50-1.45(m，2H)，1.32(d，J＝11.2Hz，1H)，1.25-1.09(m，3H)，1.06(s，3H)，1.04(s，3H)，0.40(s，3H)ppm；質(zhì)譜(El+ve)m/z 286(M⁺)；[α]_D²⁵＝+28.5°(c＝0.40，二氯甲烷)。

實(shí)施例34：(R)-環(huán)己基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

向冷卻至-78℃的環(huán)己基溴化鎂(1M四氫呋喃溶液)的攪拌溶液(4.9mL，4.88mmol)中，緩慢加入實(shí)施例1b產(chǎn)物(300mg，1.95mmol)的無(wú)水四氫呋喃(10mL)溶液。反應(yīng)在-78℃攪拌3小時(shí)，然后溫?zé)嶂潦覝夭⒘硗鈹嚢?小時(shí)。加入飽和氯化銨水溶液(30mL)以淬滅反應(yīng)，然后加入水(20mL)。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，將合并的有機(jī)相用鹽水(50mL×2)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。將剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯250/1-＞100/1)純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(243mg，產(chǎn)率：52％)。R_f＝0.7(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ3.42(dd，J＝10.0，4.8Hz，1H)，2.10(d，J＝12.8Hz，1H)，1.80-1.60(m，6H)，1.54-1.34(m，4H)，1.25-1.11(m，5H)，1.07-0.94(m，2H)，0.98(d，J＝6.0Hz，3H)，0.89(s，3H)，0.83(s，3H)，0.89-0.72(m，2H)ppm；¹³C NMR(100MHz，CDCl₃)δ75.5，52.7，44.1，42.6，37.2，34.1，31.6，30.7，29.9，29.1，26.5，26.2，26.1，23.0，22.4，21.1ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 261(M+Na⁺)；[α]_D²⁵＝+4.07°(c＝1.08，二氯甲烷)。

實(shí)施例35：環(huán)己基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮

向冷卻至0℃的實(shí)施例26產(chǎn)物(150mg，0.63mmol)的二氯甲烷(4ml)的攪拌溶液中，加入戴斯-馬丁氧化劑(535mg，1.26mmol)。將反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝?，攪?小時(shí)。加入飽和碳酸氫鈉水溶液(30mL)以淬滅反應(yīng)?；旌衔镉枚燃淄?30ml x 3)萃取，將合并的有機(jī)相用鹽水(100mL)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。將剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯250/1)純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(120mg，產(chǎn)率：81％)。R_f＝0.7(20∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ 2.36(t，J＝11.6Hz，1H)，2.19(d，J＝11.2Hz，1H)，1.95(d，J＝12.8Hz，1H)，1.90-1.80(m，3H)，1.73-1.68(m，3H)，1.52-1.42(m，3H)，1.40-1.33(m，1H)，1.31-1.16(m，4H)，1.07-0.98(m，1H)，0.95(s，3H)，0.91-0.84(m，1H)，0.86(s，3H)，0.71(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；¹³C NMR(100MHz，CDCl₃)δ217.9，64.9，53.8，42.1，35.0，34.3，32.1，30.2，29.0，26.6，26.4，25.9，25.5，21.8，21.5，20.9ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 237(M+H⁺)；[α]_D²⁵＝-90.0°(c＝0.90，二氯甲烷)。

實(shí)施例36：(R)-(3，4-二氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在0℃向?qū)嵤├?0的產(chǎn)物(52mg，0.2mmol)于四氫呋喃(6mL)的混合物中，加入氫化鋁鋰(23mg，0.6mmol)，將混合物在0℃攪拌3小時(shí)。將反應(yīng)用水淬滅，然后將有機(jī)物用乙酸乙酯(20mL x 3)萃取。將有機(jī)相用鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥，然后減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠色譜法純化，得到蠟狀標(biāo)題化合物(10mg，產(chǎn)率：19％)。R_f＝0.4(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.37-7.26(m，1H)，5.22(s，1H)，1.90-1.74(m，2H)，1.71(d，J＝4.4Hz，1H)，1.50-1.44(m，2H)，1.37-1.32(m，1H)，1.23-1.08(m，3H)，1.06(d，J＝6.0Hz，3H)，1.03(s，3H)，0.38(s，3H)ppm；質(zhì)譜(El+ve)m/z 268(M⁺)；[α]_D²⁵＝+43.3°(c＝0.12，二氯甲烷)。

實(shí)施例37：(S)-呋喃-3-基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在氮?dú)庀?，?-溴呋喃(429.2mg，2.92mmol)的無(wú)水四氫呋喃(13mL)溶液中，在-78℃加入正丁基鋰(1.83mL，1.6M)。反應(yīng)在-78℃攪拌2小時(shí)，然后加入實(shí)施例1b的產(chǎn)物(300mg，1.94mmol)。反應(yīng)在-78℃攪拌2小時(shí)。通過(guò)加入飽和氯化銨水溶液(20mL)將反應(yīng)淬滅，并將有機(jī)物用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)相經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥，然后減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯60/1-＞40/1)純化，得到淡黃色油的標(biāo)題化合物(175mg，產(chǎn)率：40％)。R_f＝0.4(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.37(s，1H)，7.30(s，1H)，6.31(s，1H)，5.03(d，J＝6.4Hz，1H)，1.84-1.77(m，1H)，1.67-1.65(m，2H)，1.49-1.39(m，3H)，1.28-1.20(m，2H)，1.05-0.97(m，7H)，0.77(d，J＝6.0Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 205(M-H₂O+H⁺)；[α]_D²⁵＝+1.33°(c＝0.30，二氯甲烷)。

實(shí)施例38：呋喃-3-基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮

在0℃向?qū)嵤├?7的產(chǎn)物(155mg，0.70mmol)的二氯甲烷(3.5mL)溶液中，加入碳酸氫鈉(58.8mg，0.70mmol)和戴斯-馬丁氧化劑(591.2mg，1.39mmol)。將混合物升溫至室溫并攪拌2小時(shí)。將飽和碳酸氫鈉水溶液(20mL)加入到反應(yīng)混合物中，然后將有機(jī)物用二氯甲烷萃取。將有機(jī)相經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥，然后減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯70/1-＞60/1)純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(90mg，產(chǎn)率：58％)。Mp＝114-116℃；R_f＝0.5(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.01(s，1H)，7.42(s，1H)，6.78(s，1H)，2.41(d，J＝10.8Hz，1H)，2.07-1.99(m，1H)，1.76(d，J＝13.2Hz，1H)，1.59-1.53(m，2H)，1.44-1.40(m，1H)，1.28-1.21(m，1H)，1.01-0.92(m，1H)，0.99(s，3H)，0.86(s，3H)，0.75(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 237(M+H⁺)；[α]_D²⁵＝-24.0°(c＝0.20，二氯甲烷)。

實(shí)施例39：(R)-呋喃-3-基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在0℃向氫化鋁鋰(48.2mg，1.27mmol)在無(wú)水四氫呋喃(4mL)的混合物中，逐滴加入實(shí)施例38產(chǎn)物(70mg，0.32mmol)的無(wú)水四氫呋喃(6mL)溶液。反應(yīng)在0℃攪拌2小時(shí)。通過(guò)加入水(0.1mL)、氫氧化鈉水溶液(0.1mL)和水(0.3mL)將反應(yīng)淬滅。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)相經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥，然后減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯70/1-＞50/1)純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(49mg，產(chǎn)率：69％)。R_f＝0.5(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.39-7.37(m，2H)，6.41(s，1H)，5.13(s，1H)，1.75-1.68(m，2H)，1.57(s，1H)，1.47-1.40(m，2H)，1.32-1.24(m，3H)，1.06-1.01(m，4H)，0.96(s，3H)，0.85(s，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 223(M+H⁺)；[α]_D²⁵＝+8.31°(c＝0.14，二氯甲烷)。

實(shí)施例40：(S)-(全氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

向碘(5mg)和鎂(0.26g，11mmol)在無(wú)水四氫呋喃(5mL)的混合物中，滴加入1-溴-2，3，4，5，6-五氟苯(2.47g，10mmol)。將混合物在室溫?cái)嚢?分鐘，然后回流2小時(shí)。向冷卻至-78℃的原位產(chǎn)生的(全氟苯基)溴化鎂溶液中，加入實(shí)施例1b的產(chǎn)物(300mg，1.95mmol)。反應(yīng)在-78℃攪拌2小時(shí)。通過(guò)加入飽和氯化銨水溶液(5mL)將反應(yīng)混合物淬火，然后將混合物用乙酸乙酯(30mL x 3)萃取，將合并的有機(jī)相用水(20mL)和鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。將剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法純化，得到半固體的標(biāo)題化合物(50mg，產(chǎn)率：8％)。¹H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.49(d，J＝8.4Hz，1H)，2.11-2.08(m，1H)，1.94-1.86(m，1H)，1.71-1.67(m，1H)，1.49-1.45(m，2H)，1.37-1.25(m，4H)，1.11(s，3H)，1.04(s，3H)，0.85(d，J＝6.4Hz，3H)。

實(shí)施例41：(全氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮

在0℃向?qū)嵤├?0的產(chǎn)物(50mg，0.16mmol)的二氯甲烷(4mL)溶液中，加入碳酸氫鈉(13.4mg，0.16mmol)和戴斯-馬丁氧化劑(132mg，0.31mmol)。將反應(yīng)混合物升溫至室溫并攪拌過(guò)夜。通過(guò)加入5％鹽酸(5mL)將反應(yīng)淬滅，然后將有機(jī)物用乙酸乙酯萃取(20mL x 3)，將有機(jī)相用飽和碳酸氫鈉(20mL)和鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥，然后減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法純化，得到黃色固體的標(biāo)題化合物(22.8mg，產(chǎn)率：45％)。Mp＝35.2-38℃；R_f＝0.6(10∶1石油醚/乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃+D₂O)δ2.68(d，J＝11.2Hz，1H)，2.13-2.09(m，1H)，1.78(dd，J＝2.4Hz 13.2Hz，1H)，1.55-1.50(m，2H)，1.39(d，J＝12.8Hz，1H)，1.31-1.24(m，1H)，1.06-0.98(m，1H)，0.94(s，3H)，0.89(d，J＝6.4Hz，3H)，0.86(s，3H)ppm；質(zhì)譜(El+ve)m/z 320(M⁺)；[α]_D²⁵＝-88.0°(c＝0.20，二氯甲烷)。

實(shí)施例42：4-((S)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)芐腈

在-78℃和氬氣下，向4-溴芐腈(708.0mg，3.89mmol)的無(wú)水四氫呋喃(15mL)溶液中，慢慢地加入正丁基鋰(2.43mL，3.89mmol)。在-78℃攪拌30分鐘后，緩慢加入實(shí)施例1b的產(chǎn)物(300mg，1.94mmol)。反應(yīng)在-78℃攪拌2.5小時(shí)。通過(guò)加入飽和氯化銨水溶液(20mL)使混合物淬火。在升溫至室溫后，將溶液用乙酸乙酯萃取，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，然后減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/∶乙酸乙酯50/1-＞20/1)純化，得到黃色固體的標(biāo)題化合物(260mg，產(chǎn)率：52％)。Mp＝124-127℃；R_f＝0.2(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.61-7.59(m，2H)，7.53(d，J＝7.6Hz，2H)，5.12(d，J＝5.2Hz，1H)，1.87-1.82(m，2H)，1.80-1.60(m，1H)，1.48-1.45(m，3H)，1.39(d，J＝10.8Hz，1H)，1.31-1.26(m，1H)，1.16(s，3H)，1.07(s，3H)，0.99-0.88(m，1H)，0.53(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 258(M+H⁺)；[α]_D²⁵＝+6.84°(c＝0.38，二氯甲烷)。

實(shí)施例43：2-氟-4-((S)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)芐腈

在室溫和氬氣下，向4-溴-2-氟芐腈(505.5mg，2.53mmol)在無(wú)水四氫呋喃(7mL)的溶液中，加入異丙基氯化鎂(1.27mL，2.53mmol)。攪拌40分鐘后，將反應(yīng)冷卻至-78℃，緩慢加入實(shí)施例1b的產(chǎn)物(300mg，1.94mmol)的無(wú)水四氫呋喃(2mL)的溶液。反應(yīng)在-78℃攪拌2小時(shí)。通過(guò)加入飽和氯化銨水溶液(20mL)使混合物淬火。在升溫至室溫后，將溶液用乙酸乙酯萃取，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，然后將其在減壓下濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/∶乙酸乙酯50/1-＞20/1)純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(210mg，產(chǎn)率：39％)。Mp＝114-116℃；R_f＝0.2(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.57-7.53(m，1H)，7.34-7.26(m，2H)，5.09(d，J＝4.8Hz，1H)，1.86-1.81(m，2H)，1.66-1.60(m，1H)，1.51-1.43(m，3H)，1.37(d，J＝11.2Hz，1H)，1.32-1.26(m，1H)，1.14(s，3H)，1.06(s，3H)，1.00-0.93(m，1H)，0.54(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 276(M+H⁺)；[α]_D²⁵＝+4.23°(c＝0.52，二氯甲烷)。

實(shí)施例44：4-((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己烷羰基)芐腈

在0℃向?qū)嵤├?2產(chǎn)物(190mg，0.74mmol)的二氯甲烷(4.5mL)溶液中，加入戴斯-馬丁氧化劑(626.0mg，1.48mmol)。將混合物升溫至室溫并攪拌2小時(shí)。通過(guò)加入飽和碳酸氫鈉水溶液(20mL)將反應(yīng)淬滅，然后將混合物用二氯甲烷萃取。將有機(jī)相經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥，然后減壓濃縮。剩余物通過(guò)制備TLC純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(150mg，產(chǎn)率：79％)。R_f＝0.5(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.03(d，J₁＝6.8Hz，J₂＝2.0Hz，2H)，7.77-7.75(m，2H)，2.99(d，J＝10.8Hz，1H)，2.12-2.05(m，1H)，1.83-1.78(m，1H)，1.61-1.56(m，2H)，1.47-1.42(m，1H)，1.33-1.25(m，1H)，1.07-0.97(m，4H)，0.75(s，3H)，0.74(s，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 256(M+H⁺)；[α]_D²⁵＝+12.5°(c＝0.41，二氯甲烷)。

實(shí)施例45：2-氟-4-((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己烷羰基)芐腈

在0℃向?qū)嵤├?3的產(chǎn)物(180mg，0.65mmol)于二氯甲烷(4mL)的溶液中，加入戴斯-馬丁氧化劑(554.3mg，1.31mmol)。將混合物升溫至室溫并攪拌2小時(shí)。通過(guò)加入飽和碳酸氫鈉水溶液(20mL)將反應(yīng)淬滅，然后將混合物用二氯甲烷萃取。將有機(jī)相經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥，然后減壓濃縮。剩余物通過(guò)制備TLC純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(160mg，產(chǎn)率90％)。Mp＝53-56℃；R_f＝0.5(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.82(dd，J1＝8.0Hz，J2＝1.6Hz，1H)，7.76-7.73(m，2H)，2.92(d，J＝11.2Hz，1H)，2.12-2.04(m，1H)，1.84-1.78(m，1H)，1.61-1.55(m，2H)，1.48-1.43(m，1H)，1.33-1.26(m，1H)，1.05-0.99(m，4H)，0.76(s，3H)，0.75(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 274(M+H⁺)；[α]_D²⁵＝+10.0°(c＝0.56，二氯甲烷)。

實(shí)施例46：(±)-(S)-((R)-2，2-二甲基環(huán)己基)(4-氟苯基)甲醇

實(shí)施例46a：6，6-二甲基-2-(三氟甲基磺酰氧基)環(huán)己-1-烯甲酸乙酯

在-20℃向氫化鈉(2.08g，52mmol)于二乙醚(120mL)的攪拌懸浮液中，加入2，2-二甲基-6-氧代環(huán)己烷甲酸乙酯(5.2g，26mmol)[Helvetica Chimica Acta，35，1752-6；1952]。將反應(yīng)混合物攪拌30分鐘。冷卻至-30℃后，逐滴加入三氟甲烷磺酸酐(10g，35.44mmol)，然后將反應(yīng)加熱至室溫，攪拌60分鐘。加入飽和氯化銨水溶液以淬滅反應(yīng)，然后將其用乙醚(50mL x 3)萃取。將合并的有機(jī)相用水(20mL)和鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(6.4g，產(chǎn)率：75％產(chǎn)率)。R_f＝0.8(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 331(M+H⁺)。

實(shí)施例46b：6，6-二甲基環(huán)己-1-烯甲酸乙酯

于室溫和氬氣氛下，向?qū)嵤├?6a的產(chǎn)物(6.4g，20mmol)和四(三苯基膦)鈀(0)(1.2g，1mmol)在二甲基甲酰胺(100mL)的攪拌混合物中，加入三乙基硅烷(5.9g，8.1ml，50mmol)。將反應(yīng)混合物在60℃攪拌2小時(shí)，然后冷卻至室溫。加入水以淬滅反應(yīng)，然后將其用二乙醚(50mL x 3)萃取。將合并的有機(jī)相用水(20mL)和鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮。將剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(5.3g)。R_f＝0.7(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.81(t，J＝4.0Hz，1H)，4.17(q，J＝7.2Hz，2H)，2.16-2.12(m，2H)，1.64-1.60(m，2H)，1.50-1.47(m，2H)，1.29(t，J＝7.2Hz，3H)，1.22(s，6H)ppm。

實(shí)施例46c：2，2-二甲基環(huán)己烷甲酸乙酯

在室溫和氫氣氣氛下將于甲醇(20mL)中的實(shí)施例46b的產(chǎn)物(5.3g，28mmol)攪拌過(guò)夜。將混合物過(guò)濾，然后在減壓下濃縮濾液。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(1.7g，產(chǎn)率：32％)。R_f＝0.6(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ4.15-4.08(m，2H)，2.15(dd，J＝10.8，4.4Hz，1H)，1.76-1.63(m，3H)，1.50-1.41(m，3H)，1.26(t，J＝3.6Hz，3H)，1.23-1.16(m，2H)，0.98(s，3H)，0.96(s，3H)ppm。

實(shí)施例46d：(2，2-二甲基環(huán)己基)甲醇

在-30℃和氬氣氛下，向氫化鋁鋰(416mg，11mmol)的無(wú)水四氫呋喃(15mL)的攪拌混合物中，加入于四氫呋喃(5mL)中的實(shí)施例46c的產(chǎn)物(1.0g，5.5mmol)。將反應(yīng)混合物在-30℃攪拌2小時(shí)，隨后將其慢慢地溫?zé)嶂潦覝?。加入水以淬滅反?yīng)，然后將其用二乙醚(50mL x 3)萃取。將合并的有機(jī)相用水(20mL)和鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(700mg，產(chǎn)率：70％)。R_f＝0.5(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ3.85-3.81(m，1H)，3.34-3.29(m，1H)，1.80-1.71(m，2H)，1.51-1.13(m，8H)，0.97(s，3H)，0.80(s，3H)ppm。

實(shí)施例46e：2，2-二甲基環(huán)己烷甲醛

在0℃和氬氣氛下，向?qū)嵤├?6d的產(chǎn)物(700mg，5.0mmol)和碳酸氫鈉(420mg，5.0mmol)于二氯甲烷(10mL)的攪拌混合物中，加入戴斯-馬丁氧化劑(3.14g，7.4mmol)。將反應(yīng)混合物在0℃攪拌2小時(shí)，然后緩慢升溫至室溫。將混合物在減壓下濃縮，剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(600mg，產(chǎn)率：85％產(chǎn)率)。R_f＝0.8(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ9.81(d，J＝2.4Hz，1H)，2.10-2.05(m，1H)，1.50-1.24(m，8H)，1.13(s，3H)，0.99(s，3H)ppm。

實(shí)施例46：(S)-((R)-2，2-二甲基環(huán)己基)(4-氟苯基)甲醇

在-78℃向?qū)嵤├?6e的產(chǎn)物(200mg，1.43mmol)于無(wú)水四氫呋喃(5mL)的溶液中，加入(4-氟苯基)溴化鎂(9.0mL，7.15mmol，0.8M)。將反應(yīng)混合物攪拌2小時(shí)，然后緩慢升溫至室溫。加入飽和氯化銨水溶液以淬滅反應(yīng)，然后將其用乙酸乙酯(20mL x 3)萃取，將合并的有機(jī)相用水(20mL)和鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥并在減壓下濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(135mg，產(chǎn)率：40％)。Mp＝105.2-108.5℃；R_f＝0.6(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.29-7.25(m，2H)，7.03-6.99(m，2H)，5.09(d，J＝4.0Hz，1H)，1.73-1.69(m，1H)，1.53(d，J＝4.4Hz，1H)，1.47-1.35(m，5H)，1.32-1.28(m，1H)，1.23-1.19(m，1H)，1.09(s，3H)，1.08(s，3H)，1.06-0.98(m，1H)ppm；質(zhì)譜(El+ve)m/z236(M)⁺。

實(shí)施例47：(2，2-二甲基環(huán)己基)(4-氟苯基)甲酮

在0℃和氬氣氛下，向?qū)嵤├?6的產(chǎn)物(125mg，0.53mmol)和碳酸氫鈉(45mg，0.53mmol)于二氯甲烷(10mL)的攪拌混合物中，加入戴斯-馬丁氧化劑(449mg，1.06mmol)。將反應(yīng)混合物在0℃攪拌2小時(shí)，隨后將其慢慢地溫?zé)嶂潦覝亍⒎磻?yīng)混合物在減壓下濃縮，剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(103mg，產(chǎn)率：83％)。R_f＝0.8(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.00-7.95(m，2H)，7.14-7.09(m，2H)，3.24(dd，J＝11.2，3.6Hz，1H)，1.83-1.74(m，2H)，1.60-1.49(m，4H)，1.35-1.28(m，2H)，1.02(s，3H)，0.86(s，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 235(M+H⁺)。

實(shí)施例48：(R)-((R)-2，2-二甲基環(huán)己基)(4-氟苯基)甲醇

在-78℃和氬氣氛下，向?qū)嵤├?7的產(chǎn)物(97mg，0.41mmol)于無(wú)水四氫呋喃(10mL)的攪拌混合物中，加入氫化鋁鋰(47mg，1.24mmol)。將反應(yīng)混合物在-78℃攪拌2小時(shí)，然后將其溫?zé)嶂潦覝?。加入水以淬滅反?yīng)，然后將其過(guò)濾，濾液在減壓下濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(60mg，產(chǎn)率：62％)。R_f＝0.6(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.28-7.24(m，2H)，7.03-6.99(m，2H)，4.58(dd，J＝8.0，3.2Hz，1H)，1.64(d，J＝3.2Hz，1H)，1.59-1.49(m，2H)，1.44-1.24(m，4H)，1.22(s，3H)，1.06-0.98(m，2H)，0.93(s，3H)，0.90-0.86(m，1H)ppm；質(zhì)譜(El+ve)m/z 236(M)⁺。

實(shí)施例49：(S)-(4-甲氧基-3-甲基苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在0℃向?qū)嵤├?b的產(chǎn)品化合物(150.0mg，0.972mmol)于四氫呋喃(5mL)的混合物中，加入4-甲氧基-3-甲基苯基)溴化鎂(0.5N，3.9mL，1.95mmol)，將混合物攪拌2小時(shí)。然后加入20mL氯化銨水溶液，并將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(10mL x 3)萃取。將有機(jī)層用鹽水洗滌，用無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝100∶1)純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(140mg，產(chǎn)率：50％)。R_f＝0.4(30∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.17(d，J＝8.4Hz，1H)，7.12(s，1H)，6.77(d，J＝8.4Hz，1H)，5.04(d，J＝5.6Hz，1H)，3.81(s，3H)，2.22(s，3H)，1.86-1.77(m，1H)，1.66(d，J＝6.0Hz，1H)，1.63-1.58(m，1H)，1.50-1.36(m，4H)，1.31-1.25(m，1H)，1.13(s，3H)，1.05(s，3H)，0.96-0.93(m，1H)，0.63(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(El+ve)m/z 276(M)⁺；[α]_D^26.2＝+7.14°(c＝0.14，二氯甲烷)。

實(shí)施例50：(4-甲氧基-3-甲基苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮

在-30℃向?qū)嵤├?9的產(chǎn)物(60.0mg，0.217mmol)的二氯甲烷(5mL)的溶液中，加入戴斯-馬丁氧化劑(165.7mg，0.391mmol)，將混合物攪拌2小時(shí)。加入另外的二氯甲烷(10ml)，將有機(jī)相用飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL x 2)、鹽水洗滌，用無(wú)水硫酸鈉干燥，然后減壓濃縮。剩余物通過(guò)制備型TLC(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝30∶1)純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(49mg，產(chǎn)率：82％)。R_f＝0.6(30∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.84(dd，J＝2.4Hz，J＝8.8Hz，1H)，7.79(d，J＝1.6Hz，1H)，6.84(d，J＝8.4Hz，1H)，3.89(s，3H)，2.97(d，J＝10.8Hz，1H)，2.26(s，3H)，2.09-2.03(m，1H)，1.80-1.76(m，1H)，1.61-1.53(m，2H)，1.44-1.40(m，1H)，1.34-1.25(m，1H)，1.06-0.96(m，1H)，0.99(s，3H)，0.78(s，3H)，0.73(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 275(M+H⁺)；[α]_D²⁵＝-7.32°(c＝0.41，二氯甲烷)。

實(shí)施例51：4-((S)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)-2-甲基芐腈

在-78℃向4-溴-2-甲基芐腈(494.4mg，2.52mmol)的四氫呋喃(6mL)溶液中，加入正丁基鋰(1.6mL，2.52mmol)，將混合物攪拌1小時(shí)。然后加入于四氫呋喃(2mL)中的實(shí)施例1b產(chǎn)物(300mg，1.94mmol)，并將混合物在-78℃攪拌1小時(shí)。加入飽和氯化銨水溶液(20mL)以淬滅反應(yīng)，然后將其用乙酸乙酯(10mL x 3)萃取。將合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，用無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝50∶1)純化，得到150mg的白色固體，將其通過(guò)制備型HPLC進(jìn)一步純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(32mg，產(chǎn)率：6％)。Mp＝111-113℃；R_f＝0.4(30∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.53(d，J＝8.0Hz，1H)，7.36(s，1H)，7.32(d，J＝8.0Hz，1H)，5.08(s，1H)，2.55(s，3H)，1.86-1.77(m，1H)，1.68-1.57(m，2H)，1.52-1.47(m，3H)，1.39(d，J＝10.8Hz，1H)，1.31-1.25(m，1H)，1.15(s，3H)，1.06(s，3H)，0.96-0.93(m，1H)，0.54(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z272(M+H⁺)；[α]_D^26.2＝+3.20°(c＝0.25，二氯甲烷)。

實(shí)施例52：2-甲基-4-((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己烷羰基)芐腈

在-10℃向?qū)嵤├?1的產(chǎn)物(100.0mg，0.368mmol)在二氯甲烷(10mL)的攪拌的溶液中，加入戴斯-馬丁氧化劑(281.3mg，0.663mmol)，將混合物攪拌2小時(shí)。加入另外的二氯甲烷(20mL)，將有機(jī)相用飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL x 2)和鹽水洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝100∶1)，得到72mg無(wú)色油，其通過(guò)制備型HPLC純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(50mg，產(chǎn)率：51％)。R_f＝0.4(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.85(s，1H)，7.82(d，J＝8.0Hz，1H)，7.70(d，J＝8.0Hz，1H)，2.97(d，J＝10.8Hz，1H)，2.63(s，3H)，2.09-2.04(m，1H)，1.83-1.79(m，1H)，1.60-1.56(m，2H)，1.46-1.42(m，1H)，1.33-1.26(m，1H)，1.07-0.96(m，1H)，0.97(s，3H)，0.75(s，3H)，0.75(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 270(M+H⁺)；[α]_D^27.5＝+7.43°(c＝0.35，二氯甲烷)。

實(shí)施例53：4-((R)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)芐腈

在-78℃和氬氣下，向氫化鋁鋰(10.8mg，0.26mmol)于無(wú)水四氫呋喃(1mL)的混合物中，加入實(shí)施例44的產(chǎn)物(45mg，0.18mmol)的無(wú)水四氫呋喃(1mL)溶液。攪拌反應(yīng)5小時(shí)。通過(guò)加入硫酸鈉和水的混合物使反應(yīng)猝滅。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，在減壓下蒸發(fā)揮發(fā)性有機(jī)物。剩余物通過(guò)制備型TLC(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝10∶1)純化，得到36mg黃色油，將其通過(guò)制備型TLC(洗脫劑：石油醚/二氯甲烷＝1∶1 x 3)進(jìn)一步純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(18mg，產(chǎn)率：39％)。Mp＝106-108℃；R_f＝0.2(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.62-7.60(m，2H)，7.55(d，J＝8.0Hz，2H)，5.32-5.30(m，1H)，1.91-1.88(m，1H)，1.81-1.76(m，2H)，1.51-1.40(m，3H)，1.25-1.10(m，3H)，1.08(d，J＝6.4Hz，3H)，1.05(s，3H)，0.29(s，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 240(M-H₂O+H⁺)；[α]_D²⁶＝+8.13°(c＝0.32，二氯甲烷)。

實(shí)施例54：2-氟-4-((S)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)芐腈

在-78℃和氬氣下，向氫化鋁鋰(6.0mg，0.16mmol)于無(wú)水四氫呋喃(1mL)的混合物中，加入實(shí)施例45產(chǎn)物(36mg，0.16mmol)的無(wú)水四氫呋喃(1.5mL)的溶液。將反應(yīng)攪拌2小時(shí)，之后加入另外的氫化鋁鋰(6.0mg)，并繼續(xù)攪拌另外的3小時(shí)。通過(guò)加入硫酸鈉和水使反應(yīng)猝滅。將反應(yīng)過(guò)濾，在減壓下蒸發(fā)有機(jī)揮發(fā)物。剩余物通過(guò)制備型TLC(洗脫劑：石油醚/二氯甲烷＝1∶1 x 2)純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(26mg，產(chǎn)率：59％)。Mp＝124-126℃；R_f＝0.2(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.57-7.54(m，1H)，7.37-7.30(m，2H)，5.29-5.27(m，1H)，1.94-1.77(m，3H)，1.49-1.39(m，3H)，1.25-1.09(m，3H)，1.07(d，J-6.4Hz，3H)，1.06(s，3H)，0.33(s，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 276(M+H⁺)；[α]_D²⁶＝+12.1°(c＝0.12，二氯甲烷)。

實(shí)施例55：(S)-(3-氟-4-(三氟甲氧基)苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在-78℃向4-溴-2-氟-1-(三氟甲氧基)苯(500mg，1.95mmol)于無(wú)水四氫呋喃(5mL)的溶液中，加入正丁基鋰(1.3mL，1.95mmol)，將混合物攪拌1小時(shí)。然后，向混合物中加入實(shí)施例1b產(chǎn)品(200mg，1.29mmol)的無(wú)水四氫呋喃(2mL)溶液，將其在-78℃攪拌1小時(shí)。通過(guò)加入飽和氯化銨水溶液(20mL)使反應(yīng)淬滅，然后將有機(jī)物乙酸乙酯(10mL x 3)萃取。將合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。剩余物用硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝200∶1)純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(49mg，產(chǎn)率：8％)。Mp＝60.3-62.2℃；R_f＝0.3(30∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.61-7.57(m，1H)，7.15-7.08(m，2H)，5.37(d，J＝4.8Hz，1H)，1.85-1.84(m，1H)，1.78(m，1H)，1.62-1.57(m，1H)，1.49-1.38(m，4H)，1.34-1.30(m，1H)，1.17(d，J＝2.8Hz，3H)，1.07(s，3H)，0.99-0.96(m，1H)，0.62(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；[α]_D^26.9＝+37.7°(c＝0.17，二氯甲烷)。

實(shí)施例56：(3-氟-4-(三氟甲氧基)苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮

在-20℃向?qū)嵤├?5的產(chǎn)物(130mg，0.38mmol)于二氯甲烷(5.0mL)的溶液中，加入戴斯-馬丁氧化劑(329mg，0.77mmol)，將混合物攪拌2小時(shí)。該反應(yīng)用飽和氯化銨水溶液(10mL)淬滅，用乙酸乙酯(5mL x 3)萃取有機(jī)物。將合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。剩余物用硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝100∶1)純化，得到淡粉紅色油的標(biāo)題化合物(35mg，產(chǎn)率：28％)。R_f＝0.6(30∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.64-7.60(m，1H)，7.46-7.42(m，1H)，7.25-7.20(m，1H)，2.98(d，J＝10.8Hz，1H)，2.10-2.08(m，1H)，1.80-1.76(m，1H)，1.57-1.51(m，2H)，1.41-1.37(m，1H)，1.32-1.26(m，1H)，1.04-1.00(m，1H)，0.94(s，3H)，0.86(d，J＝6.4Hz，3H)，0.77(s，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z333(M+H⁺)；[α]_D^27.8＝-21.8°(c＝0.22，二氯甲烷)。

實(shí)施例57：(R)-(3-氟-4-(三氟甲氧基)苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在-78℃向?qū)嵤├?6的產(chǎn)物(22.0mg，0.066mmol)的四氫呋喃(3mL)溶液中，加入氫化鋁鋰(15mg，0.397mmol)，將混合物在-78℃攪拌7.0小時(shí)，之后加入濕硫酸鈉以及二氯甲烷(10mL)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，減壓濃縮濾液。將剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(18mg，產(chǎn)率：81％)；R_f＝0.3(30∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.66-7.62(m，1H)，7.19-7.13(m，2H)，5.50(t，J＝3.8Hz 1H)，1.97-1.89(m，1H)，1.79(d，J＝4.8Hz，1H)，1.77-1.74(m，1H)，1.60-1.58(m，1H)，1.50-1.43(m，2H)，1.27-1.20(m，1H)，1.17-1.06(m，2H)，1.13(d，J＝6.4Hz，3H)，1.04(s，3H)，0.32(s，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z317(M-H₂O+H⁺)；[α]_D^25.9＝+13.3°(c＝0.15，二氯甲烷)。

實(shí)施例58：4-((R)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)-2-甲基芐腈

在-78℃向?qū)嵤├?2產(chǎn)物(35.0mg，0.13mmol)的四氫呋喃(4mL)溶液中，加入氫化鋰鋁(29.5mg，0.78mmol)，混合物在-78℃攪拌7.0小時(shí)。加入濕硫酸鈉以及二氯甲烷(10mL)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，減壓濃縮濾液，剩余物通過(guò)制備型TLC純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(18mg，產(chǎn)率：51％)Mp＝126.3-128.1℃；R_f＝0.4(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.53(d，J＝8.0Hz，1H)，7.38(s，1H)，7.33(d，J＝8.0Hz，1H)，5.26(s，1H)，2.55(s，3H)，1.90-1.80(m，1H)，1.77-1.76(m，2H)，1.47-1.38(m，3H)，1.25-1.10(m，3H)，1.07(d，J＝6.4Hz，3H)，1.05(s，3H)，0.31(s，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 272(M+H⁺)；[α]_D^26.3＝+26.3°(c＝0.16，二氯甲烷)。

實(shí)施例59：(R)-(4-氟苯基)((1R，6S)-1，2，2，6-四甲基環(huán)己基)甲醇

實(shí)施例59a：(s)-3，7-二甲基-2-亞甲基辛-6-烯醛

在室溫向(S)-3，7-二甲基辛-6-烯醛(3.0g，19.45mmol)的異丙醇(20mL)溶液中，加入37％甲醛水溶液(14.46mL，194.5mmol)、吡咯烷(1.61mL，19.45mmol)和丙酸(1.45mL，19.45mmol)。將混合物加熱至45℃并攪拌2小時(shí)。然后將反應(yīng)冷卻至0℃，并用飽和碳酸氫鈉水溶液(100mL)淬火。該混合物用二氯甲烷萃取，將合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝160∶1-＞110∶1)純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(3.2g，產(chǎn)率：98％)。R_f＝0.7(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ9.53(s，1H)，6.22(s，1H)，5.98(s，1H)，5.09-5.05(m，1H)，2.73-2.67(m，1H)，1.94-1.90(m，2H)，1.67(s，3H)，1.57(s，3H)，1.54-1.48(m，1H)，1.42-1.37(m，1H)，1.06(d，J＝6.8Hz，3H)ppm。

實(shí)施例59b：(3S)-2，3，7-三甲基辛-6-烯醛

于40℃和氫氣氛(58psi)下，將實(shí)施例59a的產(chǎn)物(2.4g，18.07mmol)和Pd/C(150mg，5％)在甲醇(16mL)中的混合物劇烈攪拌過(guò)夜。將混合物過(guò)濾并用甲醇和二氯甲烷洗滌固體。減壓蒸發(fā)溶劑，將剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝200∶1-＞150∶1)純化，得到無(wú)色油的包含異構(gòu)體混合物的標(biāo)題化合物(520mg，產(chǎn)率：17％)。R_f＝0.7(20∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)(主要)δ9.67(d，J＝10.8Hz，1H)，5.10-5.06(m，1H)，2.36-2.27(m，1H)，2.07-1.89(m，2H)，1.69(s，3H)，1.60(s，3H)，1.57-1.50(m，1H)，1.39-1.17(m，2H)，1.04(d，J＝6.8Hz，3H)，0.99(d，J＝6.8Hz，3H)ppm。

實(shí)施例59c：(S)-2，3，7-三甲基辛-1，6-二烯基乙酸酯

向乙酸酐(0.45mL，4.76mmol)、乙酸鉀(37.8mg，0.39mmol)和三乙胺(0.33mL，2.38mmol)的混合物中，緩慢加入實(shí)施例59b的產(chǎn)物(400mg，2.38mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至120℃過(guò)夜。冷卻至室溫后，將反應(yīng)混合物倒入水(10mL)中，有機(jī)物用二氯甲烷(15mL)萃取。將有機(jī)相用飽和碳酸氫鈉水溶液(15mL x 2)和鹽水(15mL)洗滌，然后用無(wú)水硫酸鈉干燥，然后在減壓下濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝140∶1)純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(298mg，產(chǎn)率：60％)。R_f＝0.7(20∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)(主要)δ6.94(s，1H)，5.10-5.05(m，1H)，2.14(s，3H)，1.91-1.85(m，1H)，1.68(s，3H)，1.59(s，3H)，1.57(s，3H)，1.39-1.16(m，4H)，0.96(d，J＝6.4Hz，3H)ppm。

實(shí)施例59d：(1R，6S)-1，2，2，6-四甲基環(huán)己烷甲醛

將實(shí)施例59c產(chǎn)物(292mg，1.39mmol)的甲苯(2mL)的溶液加入85％的磷酸水溶液(2mL)。將混合物加熱至100℃保持6小時(shí)。加入水(10mL)，分離各層。水層用甲苯(15mL x 3)萃取。將合并的有機(jī)相用飽和碳酸氫鈉水溶液(15mL x 2)和鹽水(15mL x 2)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝200∶1-＞130∶1)純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(148mg，產(chǎn)率：63％)。R_f＝0.7(20∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)(主要)δ9.61(s，1H)，1.61-1.45(m，3H)，1.24-1.12(m，3H)，0.96-0.86(m，1H)，0.86(s，3H)，0.83(s，3H)，0.82(s，3H)，0.73(d，J＝6.8Hz，3H)ppm。

實(shí)施例59：(R)-(4-氟苯基)((1R，6S)-1，2，2，6-四甲基環(huán)己基)甲醇

在-78℃和氬氣下，向4-氟苯基溴化鎂于無(wú)水四氫呋喃的溶液(4.85mL，0.8M，3.88mmol)中，逐滴加入實(shí)施例59d的產(chǎn)物(145mg，0.86mmol)的無(wú)水THF(2.5mL)溶液。在-78℃攪拌2小時(shí)后，將溶液混合物逐漸升溫至0℃，然后再攪拌一小時(shí)。通過(guò)加入飽和氯化銨水溶液(15mL)使混合物淬火。混合物用乙酸乙酯萃取，有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥，然后減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝100∶1-＞80∶1)純化，得到無(wú)色油，將其經(jīng)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/二氯甲烷＝90∶1-＞50∶1)進(jìn)一步純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(25mg，產(chǎn)率：11％)。R_f＝0.5(20∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.34-7.33(m，2H)，6.99-6.94(m，2H)，4.97(d，J＝3.2Hz，1H)，2.36-2.30(m，1H)，1.76(d，J＝4.0Hz，1H)，1.54-1.50(m，2H)，1.46-1.43(m，2H)，1.25-1.15(m，2H)，1.13(s，3H)，1.01(s，3H)，0.92(d，J＝6.8Hz，3H)，0.60(s，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 247(M-H₂O+H⁺)；[α]_D^25.9＝+0.91°(c＝0.22，二氯甲烷)。

實(shí)施例60：4-((S)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)-2-(三氟甲基)芐腈

在-20℃向4-溴-2-(三氟甲基)芐腈(486.3mg，1.94mmol)的四氫呋喃(4mL)的溶液中，加入異丙基氯化鎂(2M，0.97ml，1.94mmol)，將混合物攪拌1小時(shí)。然后，加入實(shí)施例1b產(chǎn)品(200mg，1.29mmol)的四氫呋喃(1mL)溶液，并將該混合物在-20℃攪拌1小時(shí)，然后升溫至室溫1小時(shí)。加入飽和氯化銨水溶液，將該混合物用乙酸乙酯(10mL x 3)萃取。將合并的有機(jī)相用鹽水(25mL)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。將剩余物通過(guò)柱色譜法純化，得到200mg淡黃色固體，將其通過(guò)制備型TLC進(jìn)一步純化，得到淡黃色固體的標(biāo)題化合物(170mg，產(chǎn)率：40％)。Mp＝151-153.3℃；R_f＝0.3(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.86(s，1H)，7.77(d，J＝8.4Hz，1H)，7.71(d，J＝8.0Hz，1H)，5.14(d，J＝5.2Hz，1H)，1.93(d，J＝5.2Hz，1H)，1.88-1.80(m，1H)，1.65-1.61(m，1H)，1.52-1.45(m，3H)，1.37(d，J＝11.2Hz，1H)，1.30-1.27(m，1H)，1.16(s，3H)，1.08(s，3H)，1.00-0.93(m，1H)，0.50(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 326(M+H⁺)；[α]_D^26.8＝+4.35°(c＝0.23，二氯甲烷)。

實(shí)施例61：2-(三氟甲基)-4-((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己烷羰基)芐腈

在-10℃向?qū)嵤├?0的產(chǎn)物(35mg，0.11mmol)的四氫呋喃(4mL)溶液中，加入戴斯-馬丁氧化劑(82mg，0.19mmol)，將混合物在-10℃攪拌4小時(shí)。將反應(yīng)過(guò)濾，然后在減壓下濃縮。剩余物通過(guò)制備型TLC純化，得到25mg無(wú)色油，將其通過(guò)制備型HPLC進(jìn)一步純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(16mg，產(chǎn)率：46％)。Mp＝81.6-82.4℃；R_f＝0.6(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.32(s，1H)，8.22(d，J＝8.4Hz，1H)，7.97(d，J＝8.0Hz，1H)，2.98(d，J＝11.2Hz，1H)，2.15-2.04(m，1H)，1.84-1.80(m，1H)，1.62-1.55(m，2H)，1.49-1.45(m，1H)，1.36-1.25(m，1H)，1.09-1.00(m，1H)，0.98(s，3H)，0.76(s，3H)，0.75(d，J＝7.2Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(El+ve)m/z 323(M⁺)；[α]_D^27.6＝+16.8°(c＝0.19，二氯甲烷)。

實(shí)施例62：(4-氟苯基)((1R，6S)-1，2，2，6-四甲基環(huán)己基)甲酮

在0℃向?qū)嵤├?9的產(chǎn)物(30mg，0.11mmol)的二氯甲烷(1mL)的溶液中，加入戴斯-馬丁氧化劑(96.4mg，0.23mmol)。將混合物升溫至室溫并攪拌2小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)，然后將混合物用二氯甲烷萃取，用鹽水洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/二氯甲烷＝90∶1)純化，得到白色固體標(biāo)題化合物(19mg，產(chǎn)率66％)。Mp＝49-51℃；R_f＝0.6(20∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.52-7.49(m，2H)，7.06-7.02(m，2H)，2.68-2.62(m，1H)，1.59-1.49(m，4H)，1.29(s，3H)，1.20-1.11(m，2H)，1.03(s，3H)，0.90(s，3H)，0.74(d，J＝6.8Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 263(M+H⁺)；[α]_D²⁶＝-0.84°(c＝0.24，二氯甲烷)。

實(shí)施例63：2-氟-N′-羥基-4-((R)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)苯甲脒

向?qū)嵤├?5的產(chǎn)物(26mg，0.095mmol)的吡啶(0.6mL)溶液中，加入鹽酸羥胺(19.9mg，0.29mmol)。將混合物在回流下攪拌4小時(shí)。加入水(10mL)，將有機(jī)物用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥，然后在減壓下濃縮，剩余物通過(guò)制備型TLC純化，得到白色固體標(biāo)題化合物(7.6mg，產(chǎn)率：26％)。Mp＝154-156℃；R_f＝0.5(1∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.82-7.68(m，3H)，5.17(bs，2H)，2.94(d，J＝10.4Hz，1H)，2.11-2.02(m，1H)，1.81-1.77(m，1H)，1.61-1.54(m，2H)，1.45-1.41(m，1H)，1.33-1.25(m，2H)，1.06-0.97(m，1H)，0.97(s，3H)，0.77(s，3H)，0.74(d，J＝6.8Hz，3H)ppm；(ESI+ve)m/z307(M+H⁺)。

實(shí)施例64：(S)-(3，4-二氯苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在-78℃向化合物4-溴-1，2-二氯苯(437.1mg，1.94mmol)的四氫呋喃(4mL)的攪拌溶液中，滴加入正丁基鋰(1.6M，1.3ml，1.94mmol)，將混合物在-78℃攪拌30分鐘。加入實(shí)施例1b的產(chǎn)物(200.0mg，1.29mmol)的四氫呋喃(1mL)溶液，將混合物溫?zé)嶂潦覝夭⒗^續(xù)攪拌1小時(shí)。加入飽和氯化銨水溶液(10mL)以淬滅反應(yīng)，然后將混合物用乙酸乙酯乙酸乙酯(10mL x 3)萃取。將合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝100∶1)純化，得到250mg白色固體，將其通過(guò)硅膠柱色譜法進(jìn)一步純化，得到白色固體標(biāo)題化合物(167mg，產(chǎn)率：43％)。Mp＝94.2-96.2℃；R_f＝0.4(30∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.49(s，1H)，7.37(d，J＝8.4Hz，1H)，7.22(d，J＝8.4Hz，1H)，5.03(d，J＝5.6Hz，1H)，1.85-1.77(m，2H)，1.65-1.58(m，1H)，1.49-1.43(m，3H)，1.34(d，J＝10.8Hz，，1H)，1.30-1.23(m，1H)，1.13(s，3H)，1.05(s，3H)，1.00-0.88(m，1H)，0.57(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 323(M+Na⁺)；[α]_D^27.3＝+6.90°(c＝0.29，二氯甲烷)。

實(shí)施例65：(S)-(3，4-二甲基苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在配有磁力攪拌棒、滴液漏斗(25mL)和回流冷凝器的50mL干燥的三頸圓底燒瓶中，在氬氣下放入鎂屑(129mg，5.3mmol)。將無(wú)水四氫呋喃(16mL)加入到滴液漏斗中，隨后加入4-溴-1，2-二甲基苯(888mg，4.8mmol)。將無(wú)水四氫呋喃(4mL)加入到該燒瓶中，隨后加入一部分4-溴-1，2-二甲基苯溶液(2mL)。然后將燒瓶加熱，直至溶劑開(kāi)始沸騰，此時(shí)開(kāi)始攪拌。將剩余部分的4-溴-1，2-二甲基苯溶液以這樣的速率滴加到燒瓶中，使得溶劑回流平緩(大約10分鐘)。在加入完成后，將反應(yīng)加熱回流30分鐘。將混合物冷卻至-78℃，通過(guò)注射器滴加入實(shí)施例1b產(chǎn)物(185mg，1.2mmol)的四氫呋喃(3mL)溶液。將反應(yīng)在-78℃攪拌2小時(shí)，然后使其逐漸升溫至室溫并攪拌過(guò)夜。加入飽和氯化銨水溶液(10mL)以淬滅反應(yīng)。加入水(20mL)，將混合物用乙酸乙酯(30mL x 3)萃取。將合并的有機(jī)相用鹽水(60mL)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。將剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝200∶1-＞20∶1)純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(67mg，產(chǎn)率：21％)。R_f＝0.5(20∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.14-7.06(m，3H)，5.06(d，J＝5.6Hz，1H)，2.27(s，3H)，2.24(s，3H)，1.88-1.77(m，1H)，1.68(d，J＝5.6Hz，1H)，1.63-1.57(m，1H)，1.51-1.41(m，4H)，1.33-1.24(m，1H)，1.13(s，3H)，1.06(s，3H)，1.00-0.86(m，1H)，0.62(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 243(M-H₂O+H⁺)；[α]_D^28.7＝+5.78°(c＝0.45，二氯甲烷)。

實(shí)施例66：(S)-(4-氯-3-氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在配有磁力攪拌棒、滴液漏斗(25mL)和回流冷凝器的50mL干燥的三頸圓底燒瓶中，在氬氣下放入鎂屑(129mg，5.3mmol)。將無(wú)水四氫呋喃(16mL)加入到滴液漏斗中，隨后加入4-溴-1-氯-2-氟苯(1.005g，4.8mmol)。將無(wú)水四氫呋喃(4mL)加入到該燒瓶中，隨后加入一部分4-溴-1-氯-2-氟苯溶液(2mL)。然后將燒瓶加熱，直至溶劑開(kāi)始沸騰，此時(shí)開(kāi)始攪拌。將剩余部分的4-溴-1，2-二甲基苯溶液以這樣的速率滴加到燒瓶中，使得溶劑回流平緩(大約10分鐘)。在加入完成后，將反應(yīng)加熱回流30分鐘。將混合物冷卻至-78℃，通過(guò)注射器滴加入實(shí)施例1b產(chǎn)物(185mg，1.2mmol)的四氫呋喃(3mL)溶液。將反應(yīng)在-78℃攪拌2小時(shí)，然后使其逐漸升溫至室溫并攪拌過(guò)夜。加入飽和氯化銨水溶液(10mL)以淬滅反應(yīng)。加入水(20mL)，將混合物用乙酸乙酯(30mL x 3)萃取。將合并的有機(jī)相用鹽水(60mL)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。將剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝200∶1-＞50∶1)純化，得到黃色油的標(biāo)題化合物(29mg，產(chǎn)率：8％)。R_f＝0.45(20∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.31(t，J＝8.0Hz，1H)，7.23(d，J＝11.6Hz，1H)，7.10(d，J＝8.4Hz，1H)，5.05(d，J＝5.6Hz，1H)，1.86-1.80(m，1H)，1.77(d，J＝5.6Hz，1H)，1.65-1.61(m，1H)，1.50-1.44(m，3H)，1.35(d，J＝10.8Hz，1H)，1.31-1.24(m，1H)，1.13(s，3H)，1.05(s，3H)，1.00-0.85(m，1H)，0.58(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 267(M-H₂O+H⁺)；[α]_D^29.5＝+5.41°(c＝0.37，二氯甲烷)。

實(shí)施例67：4-((R)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)-2-(三氟甲基)芐腈

在-78℃向?qū)嵤├?1的產(chǎn)物(33mg，0.10mmol)的四氫呋喃(4mL)溶液中，加入氫化鋰鋁(15.1mg，0.40mmol)，混合物在-78℃攪拌4小時(shí)。加入濕硫酸鈉，將反應(yīng)過(guò)濾。在減壓下濃縮濾液，剩余物通過(guò)制備型TLC純化，得到白色固體標(biāo)題化合物(30mg，產(chǎn)率：91％)。Mp＝118.5-119.2℃；R_f＝0.4(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.86(s，1H)，7.79-7.75(m，2H)，5.34(s，1H)，1.94-1.86(m，2H)，1.82-1.79(m，1H)，1.51-1.42(m，3H)，1.27-1.11(m，3H)，1.08(d，3H)，1.06(s，3H)，0.25(s，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 326(M+H⁺)；[α]_D^32.2＝+26.7°(c＝0.21，二氯甲烷)。

實(shí)施例68：(3，4-二氯苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮

在0℃向?qū)嵤├?4的產(chǎn)物(200mg，0.663mmol)的二氯甲烷(4mL)溶液中，加入戴斯-馬丁氧化劑(506.4mg，0.775mmol)，將混合物攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)用二氯甲烷(20mL)稀釋，有機(jī)相用飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL x 2)和鹽水(10mL)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝100∶1)純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(150mg，產(chǎn)率：75％)。R_f＝0.6(30∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.02(d，J＝2.0Hz，1H)，7.78(dd，J＝8.4Hz，J＝2.0Hz，1H)，7.53(d，J＝8.4Hz，1H)，2.91(d，J＝11.2Hz，1H)，2.10-2.01(m，1H)，1.81-1.77(m，1H)，1.59-1.54(m，2H)，1.45-1.41(m，1H)，1.33-1.25(m，1H)，1.06-098(m，1H)，0.96(s，3H)0.76-0.72(m，6H)ppm；質(zhì)譜(El+ve)m/z 298(M⁺)；[α]_D^32.8＝+3.82°(c＝0.68，二氯甲烷)。

實(shí)施例69：(3，4-二甲基苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮

將實(shí)施例65的產(chǎn)物(75mg，0.29mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液用戴斯-馬丁氧化劑(246mg，0.58mmol)處理。將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?小時(shí)。加入水(1.5mL)，接著加入氫氧化鈉水溶液(1.0M，3mL)。將雙層混合物在室溫下劇烈攪拌30分鐘。加入二氯甲烷(15mL)和水(15mL)，分離有機(jī)層。水層用二氯甲烷(15mL x 2)萃取。將合并的有機(jī)相經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。將剩余物通過(guò)制備型TLC(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝50∶1)純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(31mg，產(chǎn)率：41％)。R_f＝0.7(20∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.74(s，1H)，7.70(d，J＝7.6Hz，1H)，7.20(d，J＝7.6Hz，1H)，3.00(d，J＝10.8Hz，1H)，2.33(s，3H)，2.31(s，3H)，2.12-2.01(m，1H)，1.80-1.76(m，1H)，1.58-1.54(m，2H)，1.44-1.40(m，1H)，1.34-1.25(m，1H)，1.10-0.98(m，1H)，0.99(s，3H)，0.77(s，3H)，0.74(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 259(M+H⁺)；[α]_D^27.0＝-7.22°(c＝0.36，二氯甲烷)。

實(shí)施例70：(4-氯-3-氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮

將實(shí)施例66的產(chǎn)物(35mg，0.12mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液用戴斯-馬丁氧化劑(102mg，0.24mmol)處理。將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?小時(shí)。加入水(1mL)，接著加入氫氧化鈉水溶液(1.0M，2mL)。將雙層混合物在室溫下劇烈攪拌30分鐘。加入二氯甲烷(10mL)和水(15mL)，分離有機(jī)層。水層用二氯甲烷(15mL x 2)萃取。將合并的有機(jī)相經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。將剩余物通過(guò)制備型TLC純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(22mg，產(chǎn)率：65％)。R_f＝0.7(20∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.74-7.69(m，2H)，7.49(t，J＝7.8Hz，1H)，2.91(d，J＝11.2Hz，1H)，2.10-2.01(m，1H)，1.82-1.77(m，1H)，1.61-1.54(m，2H)，1.46-1.41(m，1H)，1.33-1.25(m，1H)，1.06-0.97(m，1H)，0.97(s，3H)，0.77(s，3H)，0.73(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(El+ve)m//z 283(M⁺)；[α]_D^32.1＝+1.00°(c＝0.20，二氯甲烷)。

實(shí)施例71：(R)-(3，4-二氯苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在-78℃向?qū)嵤├?8的產(chǎn)物(33mg，0.10mmol)的四氫呋喃(4mL)溶液中，加入氫化鋰鋁(15.1mg，0.40mmol)，混合物在-78℃攪拌7小時(shí)。然后，加入濕硫酸鈉，將反應(yīng)混合物過(guò)濾。在減壓下濃縮濾液，將剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(12mg，產(chǎn)率：40％)。R_f＝0.4(30∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.52(s，1H)，7.37(d，J＝8.4Hz，1H)，7.24(d，J＝8.4Hz，1H)，5.21(s，1H)，1.92-1.82(m，1H)，1.79-1.74(m，2H)，1.51-1.43(m，2H)，1.37-1.34(m，1H)，1.21-1.09(m，3H)，1.06(d，J＝6.4Hz，3H)，1.04(s，3H)，0.39(s，3H)ppm；質(zhì)譜(El+ve)m/z 300(M⁺)；[α]_D^23.8＝+21.8°(c＝0.11，二氯甲烷)。

實(shí)施例72：2-氟-5-((S)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)芐腈

在-20℃向2-氟-5-碘芐腈(479.2mg，1.94mmol)在四氫呋喃(4mL)的溶液中，加入異丙基氯化鎂(2N，0.97ml，1.94mmol)，并將混合物攪拌1小時(shí)。然后，加入實(shí)施例1b產(chǎn)品(200mg，1.29mmol)的四氫呋喃(0.5mL)溶液，并將該混合物在-20℃再攪拌1小時(shí)，然后升溫至室溫并攪拌1小時(shí)。用飽和氯化銨水溶液(10mL)將反應(yīng)淬滅，有機(jī)物用乙酸乙酯(10mL x 3)萃取。合并相用鹽水洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝50∶1)純化，得到白色固體標(biāo)題化合物(200mg，產(chǎn)率：48％)。Mp＝117.9-119.2℃；R_f＝0.2(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.69-7.67(m，1H)，7.64-7.60(m，1H)，7.15(d，J＝8.6Hz，1H)，5.06(d，J＝4.8Hz，1H)，1.85(d，J＝5.6Hz，1H)，1.83-1.76(m，1H)，1.64-1.60(m，1H)，1.50-1.44(m，3H)，1.32-1.23(m，2H)，1.14(s，3H)，1.06(s，3H)，1.00-0.89(m，1H)，0.53(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；(ESI+ve)m/z 276(M+H⁺)；[α]_D^27.0＝+27.1°(c＝0.31，二氯甲烷)。

實(shí)施例73：(S)-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在0℃和氬氣氛下，向4-溴-2-氟三氟甲苯(410.7mg，1.69mmol)的無(wú)水四氫呋喃(6mL)的溶液中，加入異丙基氯化鎂(0.85mL，1.69mmol)。溫?zé)嶂潦覝睾?，將反?yīng)攪拌40分鐘，然后將反應(yīng)冷卻至-78℃。緩慢加入實(shí)施例1b的產(chǎn)物(200mg，1.30mmol)的無(wú)水四氫呋喃(1mL)溶液，將反應(yīng)攪拌2小時(shí)。通過(guò)加入飽和氯化銨水溶液(15mL)使混合物淬火，在升溫至室溫后用乙酸乙酯萃取反應(yīng)。將有機(jī)相經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥，然后減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝90∶1-＞80∶1)純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(89mg，產(chǎn)率：17％)。Mp＝71-73℃；R_f＝0.5(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.55-7.51(m，1H)，7.30-7.25(m，2H)，5.09(d，J＝5.6Hz，1H)，1.84-1.79(m，2H)，1.65-1.61(m，1H)，1.50-1.46(m，3H)，1.39(d，J＝11.2Hz，1H)，1.31-1.25(m，1H)，1.15(s，3H)，1.07(s，3H)，1.0-0.90(m，1H)，0.57(d，J＝6.4Hz，3H)ppm：[α]_D^22.7＝+13.6°(c＝0.22，二氯甲烷)。

實(shí)施例74：(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲酮

在0℃向?qū)嵤├?3的產(chǎn)物(100mg，0.31mmol)的二氯甲烷(2mL)的溶液中，加入戴斯-馬丁氧化劑(266.3mg，0.63mmol)。將混合物升溫至室溫并攪拌2小時(shí)。加入飽和碳酸氫鈉水溶液(15mL)到反應(yīng)混合物中，然后將有機(jī)物用二氯甲烷萃取。將有機(jī)相經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥，然后減壓濃縮。剩余物經(jīng)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝100∶1)純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(86mg，產(chǎn)率：88％)。R_f＝0.7(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.82-7.80(m，1H)，7.76-7.70(m，2H)，2.94(d，J＝10.8Hz，1H)，2.12-2.03(m，1H)，1.83-1.78(m，1H)，1.61-1.52(m，2H)，1.47-1.43(m，1H)，1.34-1.26(m，1H)，1.07-0.97(m，1H)，0.97(s，3H)，0.77(s，3H)，0.75(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(El+ve)m/z 316(M⁺)；[α]_D^23.6＝+2.03°(c＝0.59，二氯甲烷)。

實(shí)施例75：(R)-(3-氟-4-(三氟甲基)苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在0℃向氫化鋁鋰(35.1mg，0.92mmol)于無(wú)水四氫呋喃(3mL)的混合物中，逐滴加入實(shí)施例74的產(chǎn)物(73.0mg，0.23mmol)的無(wú)水四氫呋喃(5mL)溶液。該反應(yīng)在0℃攪拌2小時(shí)。通過(guò)加入硫酸鈉和水的混合物使反應(yīng)猝滅。將反應(yīng)過(guò)濾，在減壓下濃縮濾液。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝70∶1)純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(58mg，產(chǎn)率：79.％)。Mp＝75-77℃；R_f＝0.5(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.54-7.51(m，1H)，7.33-7.29(m，2H)，5.28(s，1H)，1.93-1.77(m，3H)，1.52-1.39(m，3H)，1.25-1.10(m，3H)，1.07(d，J＝7.2Hz，3H)，1.05(s，3H)，0.35(s，3H)ppm；質(zhì)譜(El+ve)m/z 318(M⁺)；[α]_D^23.4＝+22.0°(c＝0.41，二氯甲烷)。

實(shí)施例76：3-((S)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)芐腈

于-78℃向3-溴芐腈(229.5mg，1.26mmol)在四氫呋喃(3mL)的攪拌溶液中，滴加正丁基鋰(1.6N，0.78mL，1.26mmol)，將混合物在-78℃攪拌1小時(shí)。加入實(shí)施例1b產(chǎn)物(150.0mg，0.97mmol)的四氫呋喃(1mL)的產(chǎn)物溶液，讓混合物升溫至室溫并再攪拌1小時(shí)。加入飽和氯化銨水溶液(10mL)到混合物中，并將有機(jī)物用乙酸乙酯(10mL x 3)萃取。將合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝50∶1)純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(100mg，產(chǎn)率：41％)。Mp＝105-107℃；R_f＝0.2(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.72(s，1H)，7.64(d，J＝7.6Hz，1H)，7.47(d，J＝7.6Hz，1H)，7.41(t，J＝7.6Hz，1H)，5.10(d，J＝5.2Hz，1H)，1.87-1.78(m，2H)，1.64-1.59(m，1H)，1.50-1.44(m，3H)，1.36(d，J＝10.8Hz，1H)，1.32-1.25(m，1H)，1.15(s，3H)，1.07(s，3H)，1.00-0.89(m，1H)，0.52(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；(ESI+ve)m/z258(M+H⁺)；[α]_D^24.2＝+18.3°(c＝1.54，二氯甲烷)。

實(shí)施例77：2-氯-4-((S)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)芐腈

在0℃和氬氣氛下，向4-溴-2-氯芐腈(364.9mg，1.69mmol)于無(wú)水四氫呋喃(6mL)的溶液中，加入異丙基氯化鎂(0.85mL，1.69mmol)。將反應(yīng)混合物溫?zé)岵⒃谑覝財(cái)嚢?0分鐘。在反應(yīng)冷卻至-78℃后，緩慢加入實(shí)施例1b的產(chǎn)品(200mg，1.30mmol)的無(wú)水四氫呋喃(1mL)溶液，將反應(yīng)攪拌2小時(shí)。加入飽和氯化銨水溶液(15mL)使混合物淬火，用乙酸乙酯萃取溶液。將合并的有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，然后減壓濃縮。剩余物用硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝40∶1-＞20∶1)純化，得到淺黃色固體的標(biāo)題化合物(47mg，產(chǎn)率：12％)。Mp＝139-141℃；R_f＝0.2(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.60(d，J＝8.8Hz，1H)，7.59(s，1H)，7.40(d，J＝8.0Hz，1H)，5.08(d，J＝5.2Hz，1H)，1.87-1.78(m，2H)，1.65-1.61(m，1H)，1.50-1.45(m，3H)，1.36(d，J＝11.2Hz，1H)，1.31-1.23(m，1H)，1.14(s，3H)，1.06(s，3H)，1.02-0.90(m，1H)，0.53(d，J＝6.0Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 274(M-H₂O+H⁺)；[α]_D^28.4＝+4.00°(c＝0.35，二氯甲烷)。

實(shí)施例78：3-((R)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)芐腈

在0℃向?qū)嵤├?6的產(chǎn)物(77mg，0.299mmol)于二氯甲烷(3mL)的溶液中，加入戴斯-馬丁氧化劑(253.8mg，0.598mmol)，將混合物升溫至室溫并攪拌2小時(shí)。將混合物過(guò)濾并減壓濃縮濾液。剩余物通過(guò)制備型TLC純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(56mg，產(chǎn)率：74％)。R_f＝0.5(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.23(s，1H)，8.18(d，J＝7.6Hz，1H)，7.82(d，J＝7.6Hz，1H)，7.60(t，J＝7.8Hz，1H)，2.96(d，J＝10.8Hz，1H)，2.14-2.02(m，1H)，1.83-1.79(m，1H)，1.61-1.55(m，2H)，1.46-1.43(m，1H)，1.34-1.25(m，1H)，1.08-0.99(m，1H)，0.97(s，3H)，0.76-0.74(m，6H)ppm；(ESI+ve)m/z 256(M+H⁺)；[α]_D^26.2＝+10.0°(c＝0.74，二氯甲烷)。

實(shí)施例79：2-氟-5-((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己烷羰基)芐腈

在0℃向?qū)嵤├?2的產(chǎn)物(70mg，0.254mmol)于二氯甲烷(3mL)的溶液中，加入戴斯-馬丁氧化劑(215.5mg，0.508mmol)，將混合物升溫至室溫并攪拌2小時(shí)。將混合物過(guò)濾，在減壓下濃縮濾液。將剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(49.7mg，產(chǎn)率：72％)。R_f＝0.4(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.26-8.21(m，2H)，7.32(t，J＝8.4Hz，1H)，2.91(d，J＝10.8Hz，1H)，2.13-2.01(m，1H)，1.83-1.79(m，1H)，1.61-1.55(m，2H)，1.47-1.43(m，1H)，1.34-1.25(m，1H)，1.07-1.00(m，1H)，0.97(s，3H)，0.76(s，3H)，0.73(d，J＝6.4Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(El+ve)m/z 273(M⁺)；[α]_D^25.8＝+9.46(c＝0.93，二氯甲烷)。

實(shí)施例80：(R)-(3，4-二甲基苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在-78℃和氬氣下，向?qū)嵤├?9的產(chǎn)品(42mg，0.16mmol)于無(wú)水四氫呋喃(3mL)的攪拌溶液中，一份地加入氫化鋁鋰(25mg，0.65mmol)。該反應(yīng)在-78℃攪拌3小時(shí)。將混合物用二乙醚(20mL)稀釋，加入濕硫酸鈉以淬滅反應(yīng)。將所得混合物再攪拌30分鐘，然后過(guò)濾。將濾液在減壓下濃縮，剩余物通過(guò)制備型TLC(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝30∶1)純化，得到33.8mg無(wú)色油，將其經(jīng)快速柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝50∶1)進(jìn)一步純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(25.6mg，產(chǎn)率：61％，10∶1醇差向異構(gòu)體的混合物)。R_f＝0.5(20∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；R_f＝0.5，于(20∶1)PE∶EA中。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)(主要異構(gòu)體)δ7.14(s，1H)，7.12(d，J＝8.0Hz，1H)，7.07(d，J＝7.6Hz，1H)，5.19(t，J＝3.4Hz，1H)，2.26(s，3H)，2.24(s，3H)，1.91-1.81(m，1H)，1.75-1.71(m，1H)，1.60(d，J＝4.8Hz，1H)，1.51-1.36(m，3H)，1.25-1.17(m，1H)，1.13-1.05(m，2H)，1.05(d，J＝6.4Hz，3H)，1.02(s，3H)，0.45(s，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 243(M-H₂O+H⁺)；[α]_D^25.8＝+32.9°(c＝0.31，二氯甲烷)。

實(shí)施例81：2-氯-4-((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己烷羰基)芐腈

在0℃向?qū)嵤├?7的產(chǎn)物(75mg，0.26mmol)于二氯甲烷(2mL)的溶液中，加入戴斯-馬丁氧化劑(217.9mg，0.51mmol)。將混合物升溫至室溫并攪拌2小時(shí)。加入飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)到反應(yīng)混合物中，然后用二氯甲烷萃取有機(jī)物。將有機(jī)相經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝60∶1)純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(60mg，產(chǎn)率：80％)。R_f＝0.5(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.04(s，1H)，7.91(d，J＝8.0Hz，1H)，7.79(d，J＝8.8Hz，1H)，2.93(d，J＝11.2Hz，1H)，2.12-2.05(m，1H)，1.81(dd，J1＝13.6Hz，J2＝3.2Hz，1H)，1.61-1.55(m，2H)，1.47-1.43(m，1H)，1.34-1.29(m，1H)，1.04-1.0(m，1H)，0.96(s，3H)，0.76(s，3H)，0.75(d，J＝6.8Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(El+ve)m/z 289(M⁺)；[α]_D^23.0＝+11.3°(c＝0.42，二氯甲烷)。

實(shí)施例82：2-氯-4-((R)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)芐腈

在-78℃和氬氣下，向氫化鋁鋰(10.8mg，0.26mmol)于無(wú)水四氫呋喃(1mL)的混合物中，加入實(shí)施例81的產(chǎn)物(51.2mg，0.18mmol)。將反應(yīng)在78℃攪拌3小時(shí)。通過(guò)加入硫酸鈉和水的混合物使反應(yīng)猝滅。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，并減壓濃縮濾液。剩余物通過(guò)制備型TLC純化，得到27mg無(wú)色油，其通過(guò)制備型TLC進(jìn)一步純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(17.2mg，產(chǎn)率：33％)。Mp＝116-118℃；R_f＝0.2(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.62(s，1H)，7.61(d，J＝8.4Hz，1H)，7.43(d，J＝8.0Hz，1H)，5.27(s，1H)，1.90-1.78(m，3H)，1.51-1.38(m，3H)，1.24-1.09(m，3H)，1.07(d，J＝6.4Hz，3H)，1.06(s，3H)，0.33(s，3H)ppm；質(zhì)譜(El+ve)m/z 291(M⁺)；[α]_D^25.6＝+4.50°(c＝0.22，二氯甲烷)。

實(shí)施例83：(R)-(4-氯-3-氟苯基)((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲醇

在-78℃和氬氣下，向?qū)嵤├?0的產(chǎn)物(100mg，0.35mmol)于無(wú)水四氫呋喃(5mL)的攪拌溶液中，一份地加入氫化鋁鋰(106mg，2.80mmol)。然后將混合物在-78℃攪拌3小時(shí)。將混合物溫?zé)嶂?℃，并攪拌另外的1.5小時(shí)，此后用二氯甲烷稀釋反應(yīng)混合物，加入濕硫酸鈉以淬滅反應(yīng)。將所得混合物再攪拌30分鐘，然后過(guò)濾。在減壓下濃縮濾液，將剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝100∶1)純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(42mg，產(chǎn)率：42％)。Mp＝61.1-63.6℃；R_f＝0.45(20∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.32(t，J＝7.8Hz，1H)，7.25(d，J＝11.2Hz，1H)，7.13(d，J＝8.4Hz，1H)，5.22(s，1H)，1.88-1.75(m，3H)，1.47-1.44(m，2H)，1.37-1.34(m，1H)，1.25-1.04(m，9H)，0.39(s，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 267(M-H₂O+H⁺)；[α]_D^25.4＝+27.5°(c＝0.48，二氯甲烷)。

實(shí)施例84：(R)-2-(3-氟苯基)-1-((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)乙醇

在配有磁力攪拌棒、滴液漏斗(25mL)和回流冷凝器的25mL干燥的三頸圓底燒瓶中，在氬氣下放入鎂屑(157.5mg，6.48mmol)。將無(wú)水四氫呋喃(10mL)加入到滴液漏斗中，隨后加入1-(溴甲基)-3-氟苯(1.23g，6.48mmol)。將無(wú)水四氫呋喃(3mL)和一部分1-(溴甲基)-3-氟苯溶液(5ml)加入到該燒瓶中，然后將其加熱到50℃，此時(shí)溶劑開(kāi)始沸騰。攪拌下將剩余部分的1-(溴甲基)-3-氟苯溶液滴加到燒瓶中。加入完成后，繼續(xù)回流2小時(shí)。將混合物冷卻至0℃，通過(guò)注射器滴加入實(shí)施例1b產(chǎn)物(250mg，1.62mmol)的四氫呋喃(5mL)溶液。將混合物升溫至室溫并攪拌2小時(shí)。加入飽和氯化銨水溶液(20mL)以淬滅反應(yīng)，有機(jī)物用乙酸乙酯(20mL x 3)萃取。有機(jī)相用鹽水(20mL)洗滌，減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法純化，得到160mg無(wú)色油，將其通過(guò)制備型HPLC進(jìn)一步純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(70mg，產(chǎn)率：16％)。R_f＝0.3(30∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.29-7.24(m，1H)，7.99(d，J＝7.6Hz，1H)，6.94-6.90(m，2H)，4.07(五重峰，J＝5.2Hz，1H)，2.99(dd，J＝9.6Hz，J＝13.6Hz，1H)，2.71(dd，J＝5.2Hz，J＝13.2Hz，1H)，1.80-1.72(m，1H)，1.70-1.66(m，1H)，1.48-1.41(m，2H)，1.35-1.30(m，1H)，1.26(d，J＝4.0Hz，1H)，1.16-1.09(m，1H)，1.15(d，J＝6.4Hz，3H)，1.06-0.97(m，1H)，0.94(d，J＝11.2Hz，1H)，0.88(s，3H)，0.79(s，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 247(M-H₂O+H⁺)；[α]_D²⁵＝+5.49°(c＝0.51，二氯甲烷)。

實(shí)施例85：(R)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1-((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)乙醇

在-78℃和氬氣下，向?qū)嵤├?6的產(chǎn)物(50mg，0.17mmol)于無(wú)水四氫呋喃(4mL)的攪拌溶液中，加入甲基鋰(1.6M，在二乙醚中，0.53mL，0.85mmol)。該反應(yīng)在-78℃攪拌1小時(shí)。加入飽和氯化銨水溶液(25mL)以淬滅反應(yīng)。將有機(jī)物用乙酸乙酯(20mL x 3)萃取，合并的有機(jī)相用鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。剩余物通過(guò)硅膠柱色譜法(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝50∶1)純化，得到無(wú)色油，將其通過(guò)制備型TLC(洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯＝30∶1)進(jìn)一步純化，得到無(wú)色油的標(biāo)題化合物(32.7mg，產(chǎn)率：61％)。R_f＝0.6(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.63(d，J＝8.4Hz，2H)，7.57(d，J＝8.4Hz，2H)，1.81(d，J＝7.6Hz，1H)，1.72(s，3H)，1.72-1.60(m，2H)，1.51-1.45(m，3H)，1.40-1.28(m，2H)，1.21(s，3H)，1.15(s，3H)，1.10-1.01(m，1H)，0.56(d，J＝6.8Hz，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z297(M-H₂O+H⁺)。

實(shí)施例86：2-氟-5-((R)-羥基((1R，6S)-2，2，6-三甲基環(huán)己基)甲基)芐腈

在-78℃向?qū)嵤├?9的產(chǎn)品(46.4mg，0.167mmol)于四氫呋喃(4mL)的溶液中，加入氫化鋰鋁(63.2mg，1.67mmol)。將混合物升溫至室溫并攪拌2.5小時(shí)。將反應(yīng)過(guò)濾，并減壓濃縮濾液。剩余物通過(guò)制備型TLC純化，得到21mg物質(zhì)，將其經(jīng)制備型HPLC進(jìn)一步純化，得到白色固體的標(biāo)題化合物(12mg，產(chǎn)率：26％)。Mp＝134.2-136.1℃；R_f＝0.3(10∶1)石油醚/∶乙酸乙酯)；¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.72-7.70(m，1H)，7.64-7.61(m，1H)，7.61(t，J＝8.8Hz，1H)，5.25(s，1H)，1.90-1.76(m，3H)，1.50-1.44(m，2H)，1.34(dd，J＝2.8Hz，J＝10.8Hz，1H)，1.25-1.10(m，3H)，1.06(t，J＝10.4Hz，3H)，1.03(s，3H)，0.32(S，3H)ppm；質(zhì)譜(ESI+ve)m/z 258(M-H₂O+H⁺)。

生物實(shí)施例

當(dāng)然應(yīng)理解，在實(shí)施本發(fā)明步驟時(shí)所提到的具體的緩沖劑、培養(yǎng)基、試劑、細(xì)胞、和培養(yǎng)條件等不是旨在限制，而是要理解為包括本領(lǐng)域普通技術(shù)人員會(huì)認(rèn)識(shí)到在所討論的具體上下文中感興趣的和有價(jià)值的所有有關(guān)的物質(zhì)。例如，常?？捎靡环N緩沖系統(tǒng)或培養(yǎng)基代替另一種并仍然達(dá)到類似(如果不相同)的結(jié)果。本領(lǐng)域的技術(shù)人員將有這樣的系統(tǒng)和方法的足夠知識(shí)，從而能夠在沒(méi)有過(guò)多的實(shí)驗(yàn)下做出這樣的替換，以最佳發(fā)揮其用于本文公開(kāi)的方法和步驟的目的。

本發(fā)明在以下非限制性實(shí)施例中將更詳細(xì)地描述。應(yīng)當(dāng)理解，這些具體方法和實(shí)施例決不是將本發(fā)明限制于本文中描述的實(shí)施方案，其他實(shí)施方案和應(yīng)用對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言將是毫無(wú)疑問(wèn)會(huì)想到的。

試劑

單克隆的抗視紫質(zhì)1D4抗體可以購(gòu)自British Columbia大學(xué)。

細(xì)胞系和培養(yǎng)條件

使用Flp-ln-T-Rex系統(tǒng)產(chǎn)生了表達(dá)視蛋白質(zhì)的穩(wěn)定細(xì)胞系。該穩(wěn)定的細(xì)胞在DMEM高葡萄糖培養(yǎng)基中在5％CO₂存在下于37℃生長(zhǎng)，所述培養(yǎng)基中補(bǔ)充了10％(v/v)胎牛血清、抗生素/抗真菌溶液、5μ/mL殺稻瘟素和潮霉素。對(duì)于所有的實(shí)驗(yàn)，均使細(xì)胞達(dá)到融合，并在更換培養(yǎng)基后用1μg/mL的四環(huán)素誘發(fā)產(chǎn)生視蛋白，然后加入化合物。將板培養(yǎng)48小時(shí)，然后收取細(xì)胞。

SDS-PAGE和蛋白質(zhì)印跡法

在SDS-PAGE凝膠上分離蛋白質(zhì)，和按(Noorwez等，J.Biol.Chem.279，16278-16284(2004))所述進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡。

本發(fā)明化合物在治療黃斑變性的體內(nèi)功效可通過(guò)本領(lǐng)域眾所周知的多種試驗(yàn)來(lái)證實(shí)。例如，選擇人類患者是基于黃斑變性的診斷，如在這一病癥粗略診斷中，或在其眼中已顯示出毒性視覺(jué)周期產(chǎn)物(如A2E、脂褐素或玻璃疣)的積累。給試驗(yàn)組施用本發(fā)明化合物，例如式I化合物，同時(shí)給對(duì)照組施用安慰劑，例如PBS或DMSO，對(duì)照組可以和試驗(yàn)組一樣大或者稍小。一次基礎(chǔ)或者連續(xù)基礎(chǔ)(例如每周或每天)或者按照一些其它預(yù)定的時(shí)間表施用試驗(yàn)化合物。

試驗(yàn)化合物的施用通常采用口服或腸胃外方式，且其數(shù)量能有效延緩黃斑變性的發(fā)展和/或復(fù)發(fā)。有效劑量一般是約1至5000mg或10至2000mg/kg。施用可以包括每天多次給藥。

試驗(yàn)化合物在延緩黃斑變性進(jìn)展的功效一般通過(guò)測(cè)量視敏度的增加(例如，使用早期治療糖尿病RP研究(ETDRS)圖(Lighthouse，Long Island，N.Y.))來(lái)確定。跟蹤和評(píng)價(jià)功效的其它方法是測(cè)量/監(jiān)測(cè)指示劑在患者眼中的自發(fā)熒光或吸收譜，所述指示劑例如N-亞視黃基-磷脂酰乙醇胺、二氫-N-亞視黃基-N-視黃基-磷脂酰乙醇胺、N-亞視黃基(retinylidene)-N-視黃基-磷脂酰乙醇胺、二氫-N-亞視黃基-N-視黃基-乙醇胺、和/或N-亞視黃基-磷脂酰乙醇胺。自發(fā)熒光用不同類型的儀器例如共焦掃描激光檢眼鏡進(jìn)行監(jiān)測(cè)。

脂褐素在視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)中的積累是視網(wǎng)膜多種變性疾病中常見(jiàn)的病理特征。在脂褐素顆粒中存在的基于維生素A的毒性熒光團(tuán)(A2E)涉及RPE和感光細(xì)胞的死亡。這些實(shí)驗(yàn)可采用顯示出加速脂褐素積累的動(dòng)物模型，以評(píng)價(jià)基于減少血清維生素A(視黃醇)的治療方法的效力。對(duì)攜帶斯塔加特病基因(ABCA4)中無(wú)效突變的小鼠施用試驗(yàn)化合物，產(chǎn)生血清視黃醇/視黃醇結(jié)合蛋白的減少和在RPE中A2E的積累及脂褐素自發(fā)熒光的抑止。

用于測(cè)試試驗(yàn)化合物在減少毒性色素如脂褐素積累的功效的試驗(yàn)動(dòng)物是可買到的。例如，已生產(chǎn)了顯示增加此類毒性產(chǎn)物產(chǎn)量的小鼠。這類小鼠已描述于文獻(xiàn)(例如參見(jiàn)Widder等，美國(guó)專利出版物2006/0167088)中，它們的價(jià)值和效用是本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的。

通過(guò)使用本領(lǐng)域眾所周知的方法(例如參見(jiàn)，Sieving等，PNAS，Vol.98，pp 1835-40(2001))，方便地進(jìn)行本發(fā)明化合物在防止光毒性中的功效顯示。

生物實(shí)施例1

視紫質(zhì)純化和再生

在含高葡萄糖、殺稻瘟素(5μg/ml)和潮霉素(100μg/ml)的DMEM中，將P23H細(xì)胞在10cm板中生長(zhǎng)融合。將細(xì)胞用四環(huán)素(1μg/ml)誘導(dǎo)，用DMSO(溶媒)或不同濃度的試驗(yàn)物(0.3μM、1μM、3μM、10μM、30μM和80μM)處理。24小時(shí)后，除去培養(yǎng)基，加入含化合物的新鮮培養(yǎng)基到該板，使用β-紫羅蘭酮(20μM)作為實(shí)驗(yàn)的陽(yáng)性對(duì)照。在第一次處理后48小時(shí)收獲細(xì)胞。關(guān)于此的所有操作在暗的紅光(＞660nm)下進(jìn)行。將細(xì)胞用PBS洗滌兩次，并在1mL含有9-順式-視黃醛(20μM)的PBS中室溫孵育1小時(shí)。再生后，將細(xì)胞用PBS洗滌，并在含有用于裂解的1％n-十二烷基-β-D麥芽糖苷和蛋白酶抑制劑(Roche)的PBS中，在4℃孵育1小時(shí)。在桌面貝克曼(Beckman)超速離心機(jī)中，將細(xì)胞裂解物在36,000xg離心10分鐘。除去上清液，評(píng)價(jià)所有樣品中的蛋白質(zhì)(DC蛋白測(cè)定，Biorad)。在4℃將等量蛋白質(zhì)(5g)裝在預(yù)先制備的1D4-偶聯(lián)的溴化氰活化的瓊脂糖(Sepharose)4B珠上1小時(shí)。簡(jiǎn)言之，將Sepharose 4B珠與識(shí)別視蛋白C-末端的1D4抗體結(jié)合。將珠子用PBS徹底洗滌3次，用磷酸鈉緩沖液(10mM，pH 6.0)洗滌2次，二者均含有0.1％的正十二烷基-β-D麥芽糖苷。該蛋白質(zhì)被洗脫在含有相應(yīng)于視蛋白質(zhì)的C-末端的合成9個(gè)氨基酸肽的磷酸鈉緩沖液中。從250到650nm的UV-可見(jiàn)光范圍以1nm的增量掃描，在分光光度計(jì)上分析了所洗脫的視紫質(zhì)。

表1包含β-紫羅蘭酮(參考化合物1)和測(cè)試化合物的結(jié)果，其中480-500nm的吸光度表示為超出DMSO對(duì)照組的增加倍數(shù)。圖1顯示根據(jù)生物學(xué)實(shí)施例1的使用參考化合物1的光譜結(jié)果。

表1