本發(fā)明屬于藥物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種含有氮烷基化、芳基化和?；瘉嗧縼啺泛?,2,5-噁二唑結(jié)構(gòu)的ido抑制劑及其制備方法。

背景技術(shù)：

吲哚胺-2,3-雙加氧酶(indoleamine-2,3-dioxygenase,ido)是1967年hayaishi小組首次在細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)的一種含有亞鐵血紅素的單體酶，cdna編碼蛋白由403氨基酸組成，分子量為45kda，它是延著色氨酸-犬尿氨酸途徑分解代謝的限速酶，并且在多種哺乳動(dòng)物的組織中具有廣泛的表達(dá)(hayaishio.etalscience,1969,164,389-396)。在腫瘤患者的細(xì)胞中，ido常作為誘導(dǎo)腫瘤微環(huán)境免疫耐受產(chǎn)生重要的生理作用，其介導(dǎo)的色氨酸(tryptophan,trp)-犬尿氨酸(kynurenine,kyn)代謝途徑參與了腫瘤免疫逃逸，而ido作為誘導(dǎo)腫瘤微環(huán)境免疫耐受也產(chǎn)生重要的作用。

色氨酸為哺乳動(dòng)物體內(nèi)重要的必須氨基酸之一，需要從食物中大量攝取，維持細(xì)胞活化和增殖，以及蛋白質(zhì)以及一些神經(jīng)遞質(zhì)的合成。因此，它的缺乏會(huì)導(dǎo)致一些重要的細(xì)胞的功能失常。ido在體內(nèi)能夠催化色氨酸轉(zhuǎn)化為n-甲酰犬尿氨酸，降解色氨酸的含量而造成色氨酸體內(nèi)的不足，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。而免疫組織學(xué)研究顯示，犬尿氨酸途徑能夠?qū)е屡d奮毒素喹啉酸的增多，還會(huì)導(dǎo)致阿茲海默等神經(jīng)系統(tǒng)疾病等多種嚴(yán)重的人類疾病(guilleming.j.etalneuropathol.andappl.neurobiol.2005,31,395–404)。

哺乳動(dòng)物體內(nèi)色氨酸限速酶主要有兩種：色氨酸雙加氧酶(tdo)和ido。1937年，kotake等從兔子腸中純化出蛋白，并首次發(fā)現(xiàn)tdo主要在哺乳動(dòng)物肝臟中表達(dá)，目前尚未發(fā)現(xiàn)他與免疫系統(tǒng)有密切聯(lián)系。tdo能夠催化犬尿氨酸途徑，使色氨酸轉(zhuǎn)變?yōu)閚-甲酰犬尿氨酸[higuchik.etalj.biochem.1937,25,71-77；shimizut.etalj.biol.chem.1978,253,4700-4706]。1978年，從兔子腸道中純化的酶，被鑒定是含有亞鐵血紅素的雙加氧酶(ido)，ido是肝臟以外唯一可以催化色氨酸分子中的吲哚氧化裂解，并延犬尿氨酸途徑分解代謝的酶，ido通常在粘膜較多的器官中表達(dá)，如肺，小腸和大腸，直腸，脾，腎，胃和腦等，分布比較廣泛(hayaishio.etal,proceedingsofthetenthfebsmeeting,1975,131–144)。在某些特殊或病理?xiàng)l件下，如妊娠，慢性感染，器官移植和腫瘤等，ido表達(dá)會(huì)明顯增加，參與介導(dǎo)局部的免疫抑制。

研究表明，ido在腫瘤微環(huán)境中可以通過以下幾種方式來(lái)抑制局部t細(xì)胞免疫 反應(yīng)：色氨酸耗竭、毒性代謝和誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性t細(xì)胞增殖。很多情況是在腫瘤中過渡表達(dá)，從而消耗局部的色氨酸，產(chǎn)生大量的犬尿氨酸等代謝產(chǎn)物。事實(shí)上，在無(wú)色氨酸或犬尿氨酸的培養(yǎng)條件下，t細(xì)胞會(huì)發(fā)生增殖抑制、活性降低甚至凋亡。而t細(xì)胞中存在一個(gè)對(duì)色氨酸水平非常敏感的調(diào)節(jié)點(diǎn)，ido的作用下，能夠使色氨酸消耗，從而導(dǎo)致t細(xì)胞停滯于g1期中期，從而抑制了t細(xì)胞的增殖，也抑制了t細(xì)胞的免疫應(yīng)答。而t細(xì)胞一旦停止增殖，可能就不會(huì)再被刺激作用，這是ido在體內(nèi)免疫作用機(jī)制(mellora.etalbiochem.biophys.res.commun.2005,338(1):20-24)(leronds.etalj.exp.med.2002,196(4):447-457)。

本領(lǐng)域尚需研發(fā)高活性的新型ido抑制劑，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)一類新型含有氮烷基化和芳基化亞砜亞胺和1,2,5-噁二唑結(jié)構(gòu)的化合物具有出乎意料的高ido抑制活性。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種新型的含有氮烷基化和芳基化亞砜亞胺和1,2,5-噁二唑結(jié)構(gòu)的化合物作為高效的ido酶抑制劑。

本發(fā)明的另一目的在于提供該化合物的制備方法。

本發(fā)明的第一方面，提供一種通式(i)化合物或其藥學(xué)上可以接受的鹽、其立體異構(gòu)體或其互變異構(gòu)體、或前藥：

式中，

r⁷和r⁸各自獨(dú)立為氫、取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c3-c10環(huán)烷基、取代或未取代的c2-c10烯基、取代或未取代的c3-c10炔基、取代或未取代的c6-c20芳基、或取代或未取代的c3-c14雜芳基；r⁷和r⁸可以一起可以形成三至八元環(huán)或三至八元雜環(huán)，其中雜原子可以是硫、氧、nh或nr^f；

r⁹為c6-c20芳基、c5-c20雜芳基；r⁹可以被一個(gè)或多個(gè)選自下組的基團(tuán)取代：鹵素、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、羥基、氨基、硝基、醛基、-cf3、-cn、-sf5、nr^ar^b、羧基、-cor^a、-co2c1-c6烷基、-conr^ar^b、-so2r^e、-so2nr^ar^b、-p(o)me2、-p(o)(ome)2；其中各r^a和各r^b各自獨(dú)立為氫、取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c3-c10環(huán)烷基、取代或未取代的c2-c10烯基、取代或未取代的c6-c20芳基、或取代或未取代的c3-c14雜芳基；r^a和r^b可以一起可以形成三至八元環(huán)或四至八元雜環(huán)，其中雜原子可以是硫、氧、nh或nr^g；

r²為c1-c12烷基、c6-c20芳基、c5-c20雜芳基、c1-c4烷基-苯基、c1-c4烷基-c5雜環(huán)、-c(o)or^e；-so2r^e、-so2nr^ar^b或-c(o)nr^ar^b；

x為一個(gè)單鍵、o，s、nh或nr^d；

環(huán)a為5元或6元含雜環(huán)；

r³和r⁴各自獨(dú)立為氫、取代或未取代的c1-c10烷基；r³和r⁴可以一起可以形成三至八元環(huán)或三至八元雜環(huán)，其中雜原子可以是硫、氧、nh或nr^h；

r¹、r^d、r^e、r^f、r^g、r^h獨(dú)立地為c1-c10烷基、c3-c10環(huán)烷基、c6-c20芳基、或c3-c14雜芳基；r¹可以被一個(gè)或多個(gè)選自下組的基團(tuán)取代：鹵素、羥基、氨基、硝基、氰基、醛基、羧基、烷氧基、-cf3、-sf5；

r¹和²可以被一個(gè)或多個(gè)鹵素、烷氧基和氰基取代；

r¹和r^d可以連接形成六至八元環(huán)；

r¹和r³可以連接形成五至八元環(huán)；

n為2至8的整數(shù)；

m為0、1或2。

在另一優(yōu)選例中，所述的“取代”指具有一個(gè)或多個(gè)選自下組的取代基：鹵素、羥基、-nh2、硝基、-cn、c1-c4烷基、c1-c4鹵代烷基、c1-c4烷氧基、c3-c6環(huán)烷基、c2-c4鏈烯基、c2-c4炔基、苯基、芐基。

在另一優(yōu)選例中，r²為c1-c12烷基、c6-c20芳基、c5-c20雜芳基、-so2r^e、或-c(o)nr^ar^b；

在另一優(yōu)選例中，r³和r⁴各自獨(dú)立為氫、

在另一優(yōu)選例中，n為2至6。

在另一優(yōu)選例中，x為nh。

在另一優(yōu)選例中，m為0。

在另一優(yōu)選例中，所述化合物如通式(ii)所示，

式中，

r⁹為c6-c20芳基、c5-c20雜芳基；r⁹可以被一個(gè)或多個(gè)選自下組的基團(tuán)取代：鹵素、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、羥基、氨基、硝基、醛基、-cf3、-cn、-sf5、nr^ar^b、羧基、-cor^a、-co2c1-c6烷基、-conr^ar^b、-so2r^e、-so2nr^ar^b；

其中，r^a、r^b、r³、r⁴、r¹的定義如上所述；

r²為c1-c12烷基、c6-c20芳基、c5-c20雜芳基、-c(o)or^e；-so2r^e、-so2nr^ar^b或-c(o)nr^ar^b；

n為2-6。

在另一優(yōu)先選例中，所述化合物如通式(iii)所示，

式中，

其中，r³、r⁴、r¹的定義如上所述；

r²為c1-c12烷基、c6-c20芳基、c5-c20雜芳基、-c(o)or^e；-so2r^e、-so2nr^ar^b或-c(o)nr^ar^b；

r¹和²可以被一個(gè)或多個(gè)鹵素、烷氧基和氰基取代

ar為c6-c10芳基、五元或六元雜芳基；ar可以被一個(gè)或多個(gè)選自下組的基團(tuán)取代：鹵素、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、羥基、-cf3、-cn、-sf5。

n為2-6。

在另一優(yōu)選例中，r¹為c1-c10烷基；

r²為c1-c12烷基、c6-c20芳基、c5-c20雜芳基、-so2r^e、-so2nr^ar^b或-c(o)nr^ar^b；

r³和r⁴各自獨(dú)立為氫；

ar為c6-c10芳基、五元或六元雜芳基；ar可以被一個(gè)或多個(gè)選自下組的基團(tuán)取代：鹵素、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、羥基、氨基、硝基、醛基、-cf3、-cn、-sf5。

在另一優(yōu)選例中，r¹為c1-c4烷基；

ar為c6-c10芳基、五元或六元雜芳基；ar可以被一個(gè)或多個(gè)選自下組的基團(tuán)取代：鹵素、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、羥基、-cf3、-cn、-sf5。

在另一優(yōu)選例中，所述的通式i化合物的前藥，如通式(iv)所示，

式中，

r¹、r²、r³、r⁴和r⁹的定義如上所述；

r^10a為取代或未取代的c6-c20芳基、取代或未取代的五元或六元雜芳基、取代或未取代的c1-c12烷基、取代或未取代的c1-c12烷氧基，取代或未取代的c3-c12環(huán)烷基，c3-c12環(huán)烷氧基、nr^ar^b；其中，r^a、r^b的定義如上所述；

其中，所述的“取代”指具有一個(gè)或多個(gè)選自下組的取代基：鹵素、羥基、-nh2、硝基、-cn、c1-c4烷基、c1-c4鹵代烷基、c1-c4烷氧基、c3-c6環(huán)烷基、c2-c4鏈烯基、c2-c4炔基、苯基、芐基。

在另一優(yōu)選例中，x、r¹、r²、r³、r⁴、r⁷、r⁸、r⁹、r^10a等各基團(tuán)分別獨(dú)立地為實(shí)施例中制備的式(i)、(ii)、(ii)和(iv)的各具體化合物中的相應(yīng)基團(tuán)。

在另一優(yōu)選例中，所述化合物為：

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(氮，硫-二甲基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((3-(硫-甲基-氮乙基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((3-(硫-甲基-氮異丙基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((3-(硫-甲基-氮環(huán)丙基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((3-(硫-甲基-氮(2,2,2-三氟乙基)亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((3-(硫-甲基-氮(2-氟乙基)亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(1-氧-3,4,5,6-四氫-1λ6,2-噻嗪-1-基)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((3-(硫-甲基-氮環(huán)丙基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((3-(硫-甲基-氮環(huán)丁基基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-苯基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(4-氟苯基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(4-氯苯基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(苯胺基甲酰)亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(甲基胺基甲酰)亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(異丙基胺基甲酰)亞砜 亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-苯基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(甲酰甲酯)亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(甲酰乙酯)亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(甲酰異丙酯)亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(甲磺?；?亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(苯磺?；?亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(氮-苯氨基磺酰基)亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(氨甲?；?亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-氯-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(氮，硫-二甲基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-氯-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((3-(硫-甲基-氮乙基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-三氟甲基苯基)-氮'-羥基-4-((3-(硫-甲基-氮異丙基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-三氟甲基苯基)-氮'-羥基-4-((3-(硫-甲基-氮環(huán)丙基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-氯-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((3-(硫-甲基-氮環(huán)丁基基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-氯-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-苯基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-三氟甲基苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(4-氟苯基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-氯-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(4-氯苯基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-氯-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(苯胺基甲酰)亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-氯-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(甲基胺基甲酰)亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-三氟甲基苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(異丙基胺基甲酰)亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-氯-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-苯基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-氯-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(甲酰甲酯)亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-三氟甲基苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(甲酰乙酯)亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-氯-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(甲酰異丙酯)亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-氯-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(甲磺酰基)亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-三氟甲基苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(苯磺?；?亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-氯-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(氮-苯氨基磺酰基)亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

(±)(z)-氮-(3-氯-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(氨甲?；?亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

在另一優(yōu)選例中，所述的化合物是實(shí)施例中所制備的化合物1-9。

在另一優(yōu)選例中，所述的化合物是外消旋體。

在另一優(yōu)選例中，所述的化合物是對(duì)映異構(gòu)體。

在另一優(yōu)選例中，所述藥學(xué)上可接受的鹽選自下組：鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、甲磺酸鹽、三氟甲磺酸鹽、苯磺酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽(甲苯磺酸鹽)、1-萘磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、蘋果酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、草酸鹽、琥珀酸鹽、富馬酸鹽、馬來(lái)酸鹽、苯甲酸鹽、水楊酸鹽、苯乙酸鹽、扁桃酸鹽。

本發(fā)明的第二方面，提供第一方面所述的通式(i)化合物的制備方法，包括以下步驟：

(a)化合物p1與r3obf4反應(yīng)，得到化合物p2；

(b)化合物p1與arb(oh)2和cu(oac)2反應(yīng)，得到化合物p3；

(c)化合物p2或p3在氫氧化鈉存在下(如氫氧化鈉水溶液)開環(huán)，得到終產(chǎn)物p4或p5,即通式(i)化合物。

本發(fā)明的通式(i)化合物也可由以下的制備方法獲得，包括以下步驟：

(a)化合物p1與r-n＝c＝o或clso2r²反應(yīng)，得到化合物p6或p7；

(b)化合物p6或p7在氫氧化鈉存在下(如氫氧化鈉水溶液)開環(huán)，得到終產(chǎn)物p8或p9,即通式(i)化合物。

本發(fā)明也提供了第三種通式(i)化合物的制備方法，包括以下步驟：

(a)化合物d在酸的催化下與化合物e和一個(gè)還原劑反應(yīng)，得到化合物f；

(b)化合物f在堿水解條件下(如氫氧化鈉水溶液)開環(huán)，得到終產(chǎn)物通式(i)化合物。

本發(fā)明也提供了第四種通式(i)化合物的制備方法，包括以下步驟：

各式中，r¹、r³、r⁴、r⁷、r⁸、r⁹、n、m、x及環(huán)a的定義如上所示。

本發(fā)明中以丙二氰為起始原料，經(jīng)過一系列的氧化，加成，環(huán)合、重氮化、取代等反應(yīng)得到化合物p1。

本發(fā)明的第三方面，提供第一方面所述的通式(i)化合物的用途，用于：

(i)制備吲哚胺-2,3-雙加氧酶抑制劑；

(ii)制備預(yù)防和/或治療吲哚胺-2,3-雙加氧酶介導(dǎo)的疾病的藥物；或

(iii)制備抗炎藥物。

在另一優(yōu)選例中，所述吲哚胺-2,3-雙加氧酶介導(dǎo)的疾病為ido介導(dǎo)的色氨酸代謝途徑的病理學(xué)特征的疾病。

在另一優(yōu)選例中，所述吲哚胺-2,3-雙加氧酶介導(dǎo)的疾病為癌癥、眼疾、心里障礙、抑郁癥、焦慮癥、老年癡呆癥和/或自身免疫性疾病。

在另一優(yōu)選例中，所述癌癥包括但不限于：結(jié)腸癌、乳腺癌、胃癌、肺癌、大腸癌、胰腺癌、卵巢癌、前列腺癌、腎癌、肝癌、腦癌、黑色素瘤、多發(fā)性骨髓瘤、慢性粒細(xì)胞性白血病、血液腫瘤、淋巴腫瘤，包括在其他遠(yuǎn)離腫瘤原發(fā)部位的組織或器官的轉(zhuǎn)移病變。

本發(fā)明的第四方面，提供一種藥物組合物，所述藥物組合物包含：

第一方面的通式(i)化合物或其藥學(xué)上可以接受的鹽、其立體異構(gòu)體或其互變異構(gòu)體、或其前藥；以及

藥學(xué)上可接受的載體。

本發(fā)明的第五方面，提供一種藥物組合物，所述藥物組合物包含：

第一方面所述的通式(i)化合物或其藥學(xué)上可以接受的鹽、其立體異構(gòu)體或其互變異構(gòu)體、或其前藥；以及

抗腫瘤藥物。

在另一優(yōu)選例中，所述抗腫瘤藥物包括但不限于癌癥的免疫治療藥物：pd-1抗體，ctla-4抗體，pd-l1抗體，pd-l2抗體，任何一種其它化療藥物或靶向治療藥物，例如hdac抑制劑和ep4拮抗劑。

本發(fā)明的第六方面，提供一種預(yù)防和/或治療吲哚胺-2,3-雙加氧酶介導(dǎo)的疾病的方法，包括對(duì)患者給予第一方面所述的通式(i)化合物或第四或第五方面所述的藥物組合物的步驟。

在另一優(yōu)選例中，所述吲哚胺-2,3-雙加氧酶介導(dǎo)的疾病為癌癥，所述方法進(jìn)一步包含對(duì)患者施用額外的抗癌劑(也稱為抗腫瘤藥物，所述抗腫瘤藥物如上所述)的步驟。

本發(fā)明的通式(i)化合物，具有抗腫瘤、治療神經(jīng)退行疾病(阿爾茨海默病)、抗炎等多種藥理活性。

應(yīng)理解，在本發(fā)明范圍內(nèi)中，本發(fā)明的上述各技術(shù)特征和在下文(如實(shí)施例)中具體描述的各技術(shù)特征之間都可以互相組合，從而構(gòu)成新的或優(yōu)選的技術(shù)方案。限于篇幅，在此不再一一贅述。

具體實(shí)施方案

本發(fā)明人經(jīng)過廣泛而深入地研究，首次意外研發(fā)出一種新型的包含亞砜亞胺和1,2,5-噁二唑結(jié)構(gòu)的化合物，該化合物可作為高效的ido酶抑制劑，用于預(yù)防和/或治療吲哚胺-2,3-雙加氧酶介導(dǎo)的疾病，也可作為抗炎藥物使用。在此基礎(chǔ)上，完成了本發(fā)明。

定義

術(shù)語(yǔ)“烷基”是指一價(jià)飽和脂族烴基，具有1至10個(gè)碳原子，包括直鏈和支鏈烴基，如甲基(即ch3-)、乙基(即ch3ch2-)、正丙基(即ch3ch2ch2-)、異丙基(即(ch3)2ch-)、正丁基(即ch3ch2ch2ch2-)、異丁基(即(ch3)2chch2-)、仲丁基(即 (ch3)(ch3ch2)ch-)、叔丁基(即(ch3)3c-)、正戊基(即ch3ch2ch2ch2ch2-)、新戊基(即(ch3)3cch2-)。在本發(fā)明中，該術(shù)語(yǔ)包括取代或未取代的烷基。

如本文所用，術(shù)語(yǔ)“取代或未取代的”指所述基團(tuán)可以是未取代的，或者所述基團(tuán)中的h被一個(gè)或多個(gè)(較佳地1-6個(gè)，更佳地1-3個(gè))取代基所取代。

如本文所用，所述的“取代”或“取代的”指所述基團(tuán)具有一個(gè)或多個(gè)(較佳地1-6個(gè)，更佳地1-3個(gè))選自下組的取代基：鹵素、羥基、-nh2、硝基、-cn、c1-c4烷基、c1-c4鹵代烷基、c1-c4烷氧基、c3-c6環(huán)烷基、c2-c4鏈烯基、c2-c4炔基、苯基、芐基。

如本文所用，術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”指取代或未取代的c3-c12環(huán)烷基。

如本文所用，術(shù)語(yǔ)“烷氧基”指-o-烷基，其中所述烷基可以是飽和或不飽和的、可以是支鏈、直鏈的、或環(huán)狀的。優(yōu)選地，烷氧基具有1-10個(gè)碳原子，較佳地1-6個(gè)碳原子。代表性的例子包括(但并不限于)：甲氧基、乙氧基、丙氧基。

如本文所用，術(shù)語(yǔ)“芳基”是指6至20個(gè)(較佳6-14個(gè))碳原子的單價(jià)芳香族碳環(huán)基團(tuán)，它具有單環(huán)(如苯基)或稠環(huán)(如萘基或蒽基)，如果連接點(diǎn)在芳香碳原上，稠環(huán)可能是非芳香性的(如2-苯并噁唑酮，2h-1,4-苯并噁嗪-3(4h)-酮-7-基等)。優(yōu)選的芳基包括苯基和萘基。該術(shù)語(yǔ)包括取代或未取代的形式，其中取代基的定義如上。

如本文所用，術(shù)語(yǔ)“烯基”是指具有2至10(如2至6或2至4)個(gè)碳原子的烯基，且具有至少1(如1至2)個(gè)不飽和烯鍵(＞c＝c＜)。這類基團(tuán)的例如有乙烯基、烯丙基、丁-3-烯基。如本文所用，術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”是指具有3至10個(gè)碳原子的、具有單環(huán)或多環(huán)(包括稠合體系，橋環(huán)體系和螺環(huán)體系)的環(huán)狀烷基。在稠環(huán)體系中，一個(gè)或多個(gè)環(huán)可以是環(huán)烷基、雜環(huán)的、芳基或雜芳基，只要連接位點(diǎn)是通過環(huán)烷基的環(huán)。合適的環(huán)烷基的例子包括：例如，金剛烷基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)辛基。

如本文所用，術(shù)語(yǔ)“鹵代”或“鹵素”是指氟、氯、溴和碘。

如本文所用，術(shù)語(yǔ)“雜芳基”是指環(huán)內(nèi)具有1至10個(gè)碳原子和1至4個(gè)選自氧、氮和硫的雜原子的芳香基團(tuán)，這樣的雜芳基可以是單環(huán)的(如吡啶基或呋喃基)或稠環(huán)(如吲嗪基(indolizinyl)或苯并噻吩基)，其中，所述稠環(huán)可以是非芳香性的和/或含有一個(gè)雜原子，只要連接點(diǎn)是通過芳香性雜芳基的原子。在一實(shí)施例中，雜芳基的環(huán)原子氮和/或硫任選地被氧化為n-氧化物(n-o)，亞磺?；蚧酋；?。優(yōu)選地雜芳基包括吡啶基、吡咯基、吲哚基、噻吩基和呋喃基。該術(shù)語(yǔ)包括取代或未取代的雜芳基。

如本文所用，術(shù)語(yǔ)“取代的雜芳基”是指被1至5個(gè)、優(yōu)選1至3個(gè)、更優(yōu)選1至2個(gè)的取代基所取代的雜芳基，所述取代基選自與取代的芳基所定義的相同取代基。

如本文所用，術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)”或“雜環(huán)的”或“雜環(huán)烷基”或“雜環(huán)基”是指飽和的、部分飽和的或不飽和的基團(tuán)(但不是芳香性的)，具有單環(huán)或稠環(huán)(包括橋環(huán)體系和螺環(huán)體系，環(huán)內(nèi)具有1至10個(gè)碳原子和1至4個(gè)選自氮、硫或氧的雜原子，在稠環(huán)體 系中，一個(gè)或多個(gè)環(huán)可以是環(huán)烷基、芳基或雜芳基，只要連接點(diǎn)通過非芳香性環(huán)。在一實(shí)施例中，雜環(huán)基團(tuán)的氮原子和/或硫原子任選地被氧化，以提供n-氧化物、亞磺?；突酋；糠?。

如本文所用，術(shù)語(yǔ)“取代的雜環(huán)的”或“取代的雜環(huán)烷基”或“取代的雜環(huán)基”是指被1到5(如1至3)個(gè)取代基所取代的雜環(huán)基團(tuán)，所述取代基與取代的環(huán)烷基所定義的取代基相同。

如本文所用，術(shù)語(yǔ)“立體異構(gòu)體”是指一個(gè)或多個(gè)立體中心的手性不同的化合物。立體異構(gòu)體包括對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體。

如本文所用，術(shù)語(yǔ)“互變異構(gòu)體”是指質(zhì)子位置不同的化合物的替代形式，如烯醇-酮和亞胺-烯胺互變異構(gòu)體，或雜芳基的互變異構(gòu)形式，所述雜芳基包含與環(huán)的-nh-部分和環(huán)的＝n-部分連接的環(huán)原子，如吡唑、咪唑、苯并咪唑、三唑和四唑。

“前藥”是指實(shí)施例化合物的任何衍生物，當(dāng)被施用于受試者時(shí)，其能夠直接或間接地提供實(shí)施例的化合物或其活性代謝物或殘余物。特別優(yōu)選的衍生物和前藥是那些，當(dāng)被施用于受試者時(shí)，提高實(shí)施例化合物的生物利用度(如口服給藥的化合物更容易被吸收進(jìn)入血液)或相對(duì)于母體種類提高母體化合物到生物區(qū)室(如腦或淋巴系統(tǒng))的運(yùn)送的衍生物和前藥。前藥包括本發(fā)明化合物的酯類形式。

本發(fā)明化合物

如本文所用，術(shù)語(yǔ)“本發(fā)明化合物”指具有本發(fā)明通式結(jié)構(gòu)的化合物，包括通式(i)或通式(ii)化合物、其外消旋體、其立體異構(gòu)體或其互變異構(gòu)體、或前藥、或其藥學(xué)上可以接受的鹽。應(yīng)理解，該術(shù)語(yǔ)還包括式(iii)及本發(fā)明說明書和權(quán)利要求中其它通式所示的化合物、其外消旋體、其立體異構(gòu)體或其互變異構(gòu)體、或其藥學(xué),上可以接受的鹽。

本發(fā)明涉及：這些化合物的外消旋混合物，富集任一種對(duì)映體的混合物，以及任一種分離的對(duì)映體。對(duì)于本發(fā)明的范圍，應(yīng)當(dāng)理解為，所述外消旋混合物指兩種r和s對(duì)映體50％:50％的混合物。所述分離的對(duì)映體應(yīng)理解為純的對(duì)映體(即100％)或者高度富集某種對(duì)映體(純度≥98％、≥95％、≥93％、≥90％、≥88％、≥85％、≥80％)的混合物。

典型地，本發(fā)明提供通式(i)化合物或其藥學(xué)上可以接受的鹽、其立體異構(gòu)體或其互變異構(gòu)體、或前藥，

式中，

r⁷和r⁸各自獨(dú)立為氫、取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c3-c10 環(huán)烷基、取代或未取代的c2-c10烯基、取代或未取代的c3-c10炔基、取代或未取代的c6-c20芳基、或取代或未取代的c3-c14雜芳基；r⁷和r⁸可以一起可以形成三至八元環(huán)或三至八元雜環(huán)，其中雜原子可以是硫、氧、nh或nr^f；

r⁹為c6-c20芳基、五元或六元雜芳基；r⁹可以被一個(gè)或多個(gè)選自下組的基團(tuán)取代：鹵素、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、羥基、氨基、硝基、醛基、-cf3、-cn、-sf5、nr^ar^b、羧基、-cor^a、-co2c1-c6烷基、-conr^ar^b、-so2r^a、-so2nr^ar^b、-p(o)me2、-p(o)(ome)2；其中各r^a和各r^b各自獨(dú)立為氫、取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c3-c10環(huán)烷基、取代或未取代的c2-c10烯基、取代或未取代的c6-c20芳基、或取代或未取代的c3-c14雜芳基；r^a和r^b可以一起可以形成三至八元環(huán)或四至八元雜環(huán)，其中雜原子可以是硫、氧、nh或nr^g；

r²為c1-c12烷基、c6-c20芳基、c5-c20雜芳基、-so2r^e、-so2nr^ar^b或-c(o)nr^ar^b；

x為一個(gè)單鍵、o，s、nh或nr^d；

r³和r⁴各自獨(dú)立為氫、取代或未取代的c1-c10烷基；r³和r⁴可以一起可以形成三至八元環(huán)或三至八元雜環(huán)，其中雜原子可以是硫、氧、nh或nr^h；

r¹、r^d、r^e、r^f、r^g、r^h獨(dú)立地為c1-c10烷基、c3-c10環(huán)烷基、c6-c20芳基、或c3-c14雜芳基；r¹可以被一個(gè)或多個(gè)選自下組的基團(tuán)取代：鹵素、羥基、氨基、硝基、氰基、醛基、羧基、烷氧基、-cf3、-sf5；

r¹和r^d可以連接形成六至八元環(huán)；

r¹和r³可以連接形成五至八元環(huán)；

n為2至8；

環(huán)a為1,2,5-噁二唑環(huán)；

m為0至2。

在另一優(yōu)選例中，所述通式(a)化合物為：

其中r¹為c1-c10烷基、c3-c10環(huán)烷基、c1-c10烯基、芳基、或雜芳基，r¹可以被一個(gè)或多個(gè)鹵素取代；

r²為c1-c12烷基、c6-c20芳基、c5-c20雜芳基、-so2r^e、-so2nr^ar^b或-c(o)nr^ar^b；

r¹⁰和r¹¹分別獨(dú)立為氫、鹵素、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、c2-c6炔基、羥基、氨基、硝基、氰基、醛基、-cf3、-cn、-sf5、nr^ar^b、羧基、-co2c1-c6烷基、-conr^ar^b、-so2r^a、so2nr^ar^b取代；r^a和r^b的定義如前所述；

n為1至8。

在另一優(yōu)選例中，本發(fā)明還提供了式(a)的前藥：

式中，各基團(tuán)的定義如上所述。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選地實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種通式(i)化合物或其藥學(xué)上可以接受的鹽、其立體異構(gòu)體或其互變異構(gòu)體、或前藥：

式中，

r⁷和r⁸各自獨(dú)立為氫、取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c3-c10環(huán)烷基、取代或未取代的c2-c10烯基、取代或未取代的c3-c10炔基、取代或未取代的c6-c20芳基、或取代或未取代的c3-c14雜芳基；r⁷和r⁸可以一起可以形成三至八元環(huán)或三至八元雜環(huán)，其中雜原子可以是硫、氧、nh或nr^f；

r⁹為c6-c20芳基、c5-c20雜芳基；r⁹可以被一個(gè)或多個(gè)選自下組的基團(tuán)取代：鹵素、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、羥基、氨基、硝基、醛基、-cf3、-cn、-sf5、nr^ar^b、羧基、-cor^a、-co2c1-c6烷基、-conr^ar^b、-so2r^e、-so2nr^ar^b、-p(o)me2、-p(o)(ome)2；其中各r^a和各r^b各自獨(dú)立為氫、取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c3-c10環(huán)烷基、取代或未取代的c2-c10烯基、取代或未取代的c6-c20芳基、或取代或未取代的c3-c14雜芳基；r^a和r^b可以一起可以形成三至八元環(huán)或四至八元雜環(huán)，其中雜原子可以是硫、氧、nh或nr^g；

r²為c1-c12烷基、c6-c20芳基、c5-c20雜芳基、c1-c4烷基-苯基、c1-c4烷基-c5雜環(huán)、-c(o)or^e；-so2r^e、-so2nr^ar^b或-c(o)nr^ar^b；

x為一個(gè)單鍵、o，s、nh或nr^d；

r³和r⁴各自獨(dú)立為氫、取代或未取代的c1-c10烷基；r³和r⁴可以一起可以形成三至八元環(huán)或三至八元雜環(huán)，其中雜原子可以是硫、氧、nh或nr^h；

r¹、r^d、r^e、r^f、r^g、r^h獨(dú)立地為c1-c10烷基、c3-c10環(huán)烷基、c6-c20芳基、或c3-c14雜芳基；r¹和r²可以被一個(gè)或多個(gè)選自下組的基團(tuán)取代：鹵素、羥基、氨基、硝基、氰基、醛基、羧基、烷氧基、-cf3、-sf5；

r¹和r²可以被一個(gè)或多個(gè)鹵素、烷氧基和氰基取代；

r¹和r²可以連接形成四至八元環(huán)；

r¹和r^d可以連接形成六至八元環(huán)；

r¹和r³可以連接形成五至八元環(huán)；

n為2至8的整數(shù)；

m為0、1或2。

在另一個(gè)優(yōu)選地實(shí)施方式中，本發(fā)明提供的所述化合物如通式(ii)所示，

式中，

r⁹為c6-c20芳基、c5-c20雜芳基；r⁹可以被一個(gè)或多個(gè)選自下組的基團(tuán)取代：鹵素、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、羥基、氨基、硝基、醛基、-cf3、-cn、-sf5、nr^ar^b、羧基、-cor^a、-co2c1-c6烷基、-conr^ar^b、-so2r^e、-so2nr^ar^b；

其中，r^a、r^b、r³、r⁴、r¹的定義如權(quán)利要求1所述；

r²為c1-c12烷基、c6-c20芳基、c5-c20雜芳基、c1-c4烷基-苯基、c1-c4烷基-c5雜環(huán)、-c(o)or^e；-so2r^e、-so2nr^ar^b或-c(o)nr^ar^b；

r¹和r²可以被一個(gè)或多個(gè)鹵素、烷氧基和氰基取代；

r¹和r²可以連接形成四至八元環(huán)；

n為2-6的整數(shù)。

在本發(fā)明另一個(gè)優(yōu)選地實(shí)施方式中，本發(fā)明提供的所述化合物如通式(iii)所示，

式中，

ar為苯環(huán)，五元或六元雜芳基，ar可以被一個(gè)或多個(gè)選自下組的基團(tuán)取代：鹵素、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、羥基、氨基、硝基、醛基、-cf3、-cn、-sf5、nr^ar^b、羧基、-cor^a、-co2c1-c6烷基、-conr^ar^b、-so2r^e、-so2nr^ar^b；

r²為c1-c12烷基、c6-c20芳基、c5-c20雜芳基、c1-c4烷基-苯基、c1-c4烷基-c5雜環(huán)、-c(o)or^e；-so2r^e、-so2nr^ar^b或-c(o)nr^ar^b；

r^a、r^b、r³、r⁴、r¹的定義如權(quán)利要求1所述；

r¹和r²可以被一個(gè)或多個(gè)鹵素、烷氧基和氰基取代；

r¹和r²可以連接形成四至八元環(huán)；

n為2-6的整數(shù)。

在本發(fā)明另一個(gè)優(yōu)選地實(shí)施方式中，r¹為c1-c4烷基；

r²為c1-c6烷基、苯基、c5-c20雜芳基、-c(o)or^e；-so2r^e、-so2nr^ar^b或-c(o)nr^ar^b；

r^a、r^b的定義如權(quán)利要求1所述；

r¹和r²可以連接形成四至八元環(huán)；

r³和r⁴各自獨(dú)立為氫；

n為2-6的整數(shù)。

在本發(fā)明另一個(gè)優(yōu)選地實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了所述的通式(i)化合物的前藥，如通式(iv)所示，

式中，

r¹、r²、r³、r⁴和r⁹的定義如權(quán)利要求1所述；

r^10a為取代或未取代的c6-c20芳基、取代或未取代的五元或六元雜芳基、取代或未取代的c1-c12烷基、取代或未取代的c1-c12烷氧基，取代或未取代的c3-c12環(huán)烷基，c3-c12環(huán)烷氧基、nr^ar^b；其中，r^a、r^b的定義如權(quán)利要求1所述，

其中，所述的“取代”指具有一個(gè)或多個(gè)選自下組的取代基：鹵素、羥基、-nh2、硝基、-cn、c1-c4烷基、c1-c4鹵代烷基、c1-c4烷氧基、c3-c6環(huán)烷基、c2-c4鏈烯基、c2-c4炔基、苯基、芐基。

在本發(fā)明所述的化合物有立體異構(gòu)體存在的情況下，本發(fā)明包括化合物的所有立體異構(gòu)體。

在本發(fā)明所述的化合物有互變異構(gòu)體存在的情況下，本發(fā)明包括化合物的所有互變異構(gòu)體。

本發(fā)明還包括所述化合物中的任何一個(gè)或多個(gè)氫原子被其穩(wěn)定同位素氘取代而產(chǎn)生的氘代化合物。

藥物組合物

本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，它包含安全有效量范圍內(nèi)的活性成分，以及藥學(xué)上可接受的載體。

本發(fā)明所述的“活性成分”是指本發(fā)明所述的通式(i)化合物或其藥學(xué)上可以接 受的鹽、其立體異構(gòu)體或其互變異構(gòu)體、或其前藥。

本發(fā)明所述的“活性成分”和藥物組合物可用作ido抑制劑。在另一優(yōu)選例中，用于制備預(yù)防和/或治療腫瘤的藥物。在另一優(yōu)選例中，用于制備預(yù)防和/或治療ido介導(dǎo)的疾病的藥物。

“安全有效量”指的是：活性成分的量足以明顯改善病情，而不至于產(chǎn)生嚴(yán)重的副作用。通常，藥物組合物含有1-2000mg活性成分/劑，更佳地，含有10-200mg活性成分/劑。較佳地，所述的“一劑”為一個(gè)藥片。

“藥學(xué)上可接受的載體”指的是：一種或多種相容性固體或液體填料或凝膠物質(zhì)，它們適合于人使用，而且必須有足夠的純度和足夠低的毒性?！跋嗳菪浴痹诖酥傅氖墙M合物中各組份能和本發(fā)明的活性成分以及它們之間相互摻和，而不明顯降低活性成分的藥效。

本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施例的化合物可以作為單獨(dú)活性藥劑給藥，也可以與一個(gè)或多個(gè)其它用于治療癌癥的試劑組合使用。本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施例的化合物與已知的治療劑和抗癌劑組合使用也是有效的，目前已知的化合物和其它抗癌劑或化療劑的組合在優(yōu)選實(shí)施例范圍之內(nèi)。這類藥劑的例子可參見《癌癥原理和實(shí)踐腫瘤學(xué)》(cancerprinciplesandpracticeofoncology)，v.t.devita和s.hellman(編者)，第6版(2001年2月15日)，lippincottwilliams&wilkins出版社?；谒幬锏奶厥庑再|(zhì)和所涉及的癌癥，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員能夠辨別有效的藥劑組合。這種抗癌劑包括(但不限于)如下：雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雄激素受體調(diào)節(jié)劑、視黃醇類受體調(diào)節(jié)劑、細(xì)胞毒性/細(xì)胞生長(zhǎng)抑制劑、抗增殖劑、異戊烯基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑、取乙酰酶(hdac)抑制劑、hmg-coa還原酶抑制劑和其他血管生成抑制劑、細(xì)胞增殖和生存信號(hào)抑制劑、凋亡誘導(dǎo)劑和干擾細(xì)胞周期檢查點(diǎn)(cellcyclecheckpoint)的試劑、ctla4抗體、pd-1抗體、pd-l1抗體等。優(yōu)選實(shí)施例的化合物與放射治療同時(shí)施用時(shí)也有效。

通常，優(yōu)選實(shí)施例的化合物將以治療有效量、通過具有類似作用的藥劑的任意一種可接受的模式施用。優(yōu)選實(shí)施例的化合物(即活性成分)的實(shí)際用量根據(jù)多個(gè)因素確定，如待治療疾病的嚴(yán)重程度、患者的年齡和相對(duì)健康程度、被使用化合物的效力、施用的路徑和形式，以及其他因素。該藥物可一天施用多次，優(yōu)選地，每天一次或兩次。所有這些因素都在主治醫(yī)生的考慮范圍內(nèi)。

優(yōu)選實(shí)施例的目的，治療有效劑量通常可以是對(duì)患者一次性施用或分次施用的每日總劑量，例如，每日約0.001至約1000毫克/公斤體重，優(yōu)選地，每日約1.0至約30毫克/千克體重。單位劑量組合物(dosageunitcomposition)可包含其劑量因數(shù)以形成每日劑量。劑型的選擇取決于各種因素，例如給藥模式和藥物物質(zhì)的生物利用度。通常，優(yōu)選實(shí)施例的化合物可作為藥物組合物通過以下任意一種路線給藥：口服、全身給藥(如透皮、鼻內(nèi)或通過栓劑)、或腸外給藥(如肌內(nèi)、靜脈內(nèi)或皮下)。優(yōu)選的給藥方式為口服，可根據(jù)苦的程度調(diào)節(jié)方便的日劑量。組合物可采取的形式為片劑、丸劑、膠囊、半固體、粉劑、緩釋制劑、溶液、懸浮液、酏劑、氣霧劑或任 何其他適當(dāng)?shù)慕M合物。另一種優(yōu)選的施用優(yōu)選實(shí)施例化合物的方式為吸入。這是一種將治療劑直接運(yùn)送給呼吸道的有效方法(參見，如美國(guó)專利號(hào)5,607,915)。

合適的藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑包括：如處理劑和藥物運(yùn)送改性劑和促進(jìn)劑，諸如磷酸鈣、硬脂酸鎂、滑石、單糖、二糖、淀粉、明膠、纖維素、甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素、葡萄糖、羥丙基-b-環(huán)糊精、聚乙烯吡咯烷酮、低熔點(diǎn)蠟、離子交換樹脂等，及其任意兩種或多種的組合。液體和半固體的賦形劑可以選自甘油、丙二醇、水、乙醇和各種油，包括石油、動(dòng)物油、植物油或合成來(lái)源，如花生油、豆油、礦物油、芝麻油等。優(yōu)選的液體載體，特別是用于可注射溶液的載體，包括水、鹽水、葡萄糖水性溶液和乙二醇。其它適宜的藥學(xué)上可接受的賦形劑在《雷明頓藥物科學(xué)》(remington’spharmaceuticalsciences),mackpub.co.,新澤西(1991)有描述，通過引用納入本文。

如本文所用，術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的鹽”是指通式i化合物的非毒性酸或堿土金屬鹽。這些鹽可在最終分離和純化通式i化合物時(shí)原位制得、或分別將合適的有機(jī)或無(wú)機(jī)酸或堿與堿性或酸性官能團(tuán)反應(yīng)制得。代表性的鹽包括，但不限于：乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、檸檬酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、二葡糖酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、葡萄糖庚酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、富馬酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、乳酸鹽、馬來(lái)酸鹽、甲磺酸鹽、煙酸鹽、2-萘基磺酸鹽、草酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠酸鹽、硫氰酸鹽、3-苯基丙酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽和十一烷酸鹽。此外，含氮的堿性基團(tuán)可被如下試劑季銨鹽化：烷基鹵化物，如甲基、乙基、丙基、丁基的氯化物、溴化物和碘化物；二烷基硫酸鹽，如二甲基、二乙基、二丁基和二戊基硫酸酯；長(zhǎng)鏈鹵化物如癸基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基的氯化物、溴化物和碘化物；芳烷基鹵化物如芐基和苯乙基溴化物等。由此得到水溶性或油溶性或可分散產(chǎn)品。可被用于形成藥學(xué)上可接受的酸加成鹽的酸的例子包括如鹽酸、硫酸、磷酸的無(wú)機(jī)酸，和如草酸、馬來(lái)酸、甲磺酸、琥珀酸、檸檬酸的有機(jī)酸。堿加成鹽可在最終分離和純化通式i的化合物時(shí)原位制得、或使羧酸部分分別與合適的堿(如藥學(xué)上可接受的金屬陽(yáng)離子的氫氧化物，碳酸鹽或碳酸氫鹽)或氨、或有機(jī)伯、仲或叔胺反應(yīng)制得。藥學(xué)上可接受的鹽包括，但不限于，基于堿金屬和堿土金屬的陽(yáng)離子，如鈉、鋰、鉀、鈣、鎂、鋁的鹽等，以及無(wú)毒的銨、季銨和胺陽(yáng)離子，包括，但不限于：銨、四甲基銨、四乙基銨、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、乙胺等。其它代表性的用于形成堿加成鹽的有機(jī)胺包括二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪等。

如本文所用，術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的前藥”是指那些優(yōu)選實(shí)施例的化合物的前藥，在體內(nèi)迅速轉(zhuǎn)化為上述通式所示的母體化合物的化合物，例如在血液中水解。在“t.higuchi和v.stella，作為新型運(yùn)送系統(tǒng)的前藥(pro-drugsasnoveldelivery systems)，a.c.s.15symposiumseries的14卷”和“edwardb.roche編，藥物設(shè)計(jì)中的生物可逆載體(bioreversiblecarriersindrugdesign)，美國(guó)藥學(xué)協(xié)會(huì)和pergamon出版社，1987年”中提供了完整的討論，這兩者都引入本文作為參考。

下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件如sambrook等人，分子克?。簩?shí)驗(yàn)室手冊(cè)(newyork:coldspringharborlaboratorypress,1989)中所述的條件，或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則百分比和份數(shù)按重量計(jì)算。

本發(fā)明的有益之處在于：

(1)提供一種結(jié)構(gòu)新穎的通式(i)化合物；

(2)本發(fā)明的化合物可以作為高效的ido酶抑制劑；

(3)合成方法溫和，操作簡(jiǎn)單易行，收率較高，易于衍生化，適合工業(yè)放大量生產(chǎn)；

(4)具有抗腫瘤、神經(jīng)退行性疾病(阿爾茨海默病)、抗炎等多種藥理活性。

除非另行定義，文中所使用的所有專業(yè)與科學(xué)用語(yǔ)與本領(lǐng)域熟練人員所熟悉的意義相同。此外，任何與所記載內(nèi)容相似或均等的方法及材料皆可應(yīng)用于本發(fā)明方法中。文中所述的較佳實(shí)施方法與材料僅作示范之用。

實(shí)施例1

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮’-羥基-4-((2-(氮，硫-二甲基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

第一步：4-氨基-氮’-羥基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

將丙二氰(3.2g,48.5mmol)溶于70ml水中，加熱至完全溶解。冰水浴冷卻下，加入亞硝酸鈉(3.8g,55mmol)和6n鹽酸(0.6ml)。在冰浴下反應(yīng)0.5小時(shí)后，升溫 至室溫反應(yīng)2小時(shí)。將反應(yīng)液繼續(xù)冰浴冷卻，將50％的鹽酸羥胺水溶液(9.9g,150mmol)滴加入反應(yīng)液，攪拌半小時(shí)后，升至室溫反應(yīng)1小時(shí)。加熱回流反應(yīng)2小時(shí)，反應(yīng)完全后，冰浴下，用8ml6n鹽酸調(diào)節(jié)ph至7.0。過濾沉淀，用水和乙酸乙酯各洗一次，干燥，得到白色化合物6.0g,收率93％。

¹³cnmr(75mhz,dmso-d6):δ154.4,144.0,140.0。

msesi:m/z＝144.0,[m+h]⁺.

第二步：4-氨基-氮-羥基-1,2,5-噁二唑-3-甲脒氯

將第一步產(chǎn)物(4.2g,29.4mmol)溶于30ml乙酸，分別加入水60ml，鹽酸15ml和氯化鈉(5.2g,88.2mmol)。冰浴下，滴加入溶于7ml水的亞硝酸鈉(2.0g,29.4mmol)，保持零度反應(yīng)1小時(shí)，后升溫至室溫反應(yīng)5小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，過濾沉淀，水洗一次，干燥，得白色固體化合物2.6g，收率55％。

¹³cnmr(75mhz,dmso-d6):δ154.4,142.3,126.9。

msesi：m/z＝160.9,[m+h]^-.

第三步：4-氨基-氮’-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

在60℃下,向第二步產(chǎn)物(41.99g，259.2mmol)的純水(800ml)溶液中批量加入3-溴-4-氟苯胺(54.179g，285.12mmol)。反應(yīng)混合液在60℃下攪拌10min，往該混合液中加入na2co3(41.2g,388.8mmol)的水(500ml)溶液。攪拌反應(yīng)20min后lcms顯示反應(yīng)完全。反應(yīng)混合液冷卻后過濾，用水洗，烘干得到灰色固體(70g，85％)。

¹hnmr(400mhz,acetone-d6)：δ8.10(dd,1h),7.78(m,1h),7.56(t,1h),6.15(s,1h)。

第四步：4-氨基-氮’-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,5-噁二唑--3-基)-1,2-4-噁二唑酮

在室溫下，將第三部產(chǎn)物(70g，221.5mmol)和cdi(39.8g，332.173mmol) 溶解于乙酸乙酯(600ml)中并升溫至60℃，攪拌反應(yīng)20分鐘；tlc監(jiān)測(cè)反應(yīng)完全，將反應(yīng)混合液冷卻至室溫，濃反應(yīng)液，將殘余物用pe:ea＝4:1打漿，得到灰白色固體(55g，收率為72％)。

¹hnmr(400mhz,acetone-d6)：δ8.09(dd,1h),7.83(m,1h),6.79(t,1h)。

第五步：4-(3-溴-4-氟苯基)-3-4-(((2-甲基硫)乙基)氨基)-1,2,5-惡二唑-3-基)-1,2-4-惡二唑酮的制備

室溫下，將4-氨基-氮’-(3-溴-4-氟苯基)-1,2,5-噁二唑--3-基)-1,2-4-噁二唑酮(3.0g，8.8mmol)溶解在dcm(20ml)中加入三乙基硅烷(3.1g，26.3mmol)和甲磺酸(2.4g,26.3mmol)，冰浴降溫至0℃，滴加2，2-二甲氧基甲硫基乙烷(2.4g，17.5mmol)。滴畢，在室溫下反應(yīng)2小時(shí)反應(yīng)完畢，用飽和碳酸氫鈉水溶液調(diào)到ph＝7，有機(jī)相用水洗(20ml×3)，飽和食鹽水洗(20ml×3)，分離有機(jī)項(xiàng)，干燥濃縮，得棕色固體(3.5g,96％)。

¹hnmr(300mhz,acetone-d6):δ8.08(d,1h),7.80(dd,1h),7.57(t,1h),6.14(s,1h),3.66(m,2h),2.80(m,2h),2.13(s,3h)。

第六步：4-(3-溴-4-氟苯基)-3-4-(((2-甲基硫)乙基)叔丁氧羰基氨基)-1,2,5-惡二唑-3-基)-1,2-4-惡二唑酮

將第五步產(chǎn)物(50mg,0.120mmol)溶于thf(2ml)中，加入二碳酸二叔丁酯(131mg,0.601mmol)，加入催化量4-二甲氨基吡啶(2mg),冰浴下攪拌，直到反應(yīng)完全，加入水(10ml)用乙酸乙酯萃取(10mlx3)萃取，用水洗(5ml)飽和食鹽水洗(5ml)硫酸鈉干燥，柱層析分離純化得到白色固體(60mg,100％收率)。

¹hnmr:(400mhz，cdcl3):δ7.71-7.69(m,1h),7.39-7.35(m,1h),7.22-7.14(m,1h),3.97-3.94(m,2h),2.83-2.80(m,2h),2.12(s,3h),1.53(s,9h)

第七步：(±)4-(3-溴-4-氟苯基)-3-4-(((2-(甲基亞砜)乙基)叔丁氧羰基氨基)-1,2,5-惡二唑-3-基)-1,2,4-惡二唑酮

將第六步產(chǎn)物(2.0g,3.9mmol)溶于20ml二氯甲烷和2ml甲醇，冰浴下加入mmpp(1.06g,2.15mmol)，室溫反應(yīng)1小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，加入20ml水，用 乙酸乙酯萃取3次，合并有機(jī)層，水(10ml)洗三次，飽和氯化鈉(10ml)洗一次，旋干溶劑，干燥，得黃色固體1.6g,收率77％。

¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.71(dd,1h),7.38(m,1h),7.22(t,1h),3.95(t,2h),2.82(t,2h),2.12(s,3h),1.50(s,9h).

第八步：(±)4-(3-溴-4-氟苯基)3-4-(((2-(甲基三氟乙?；鶃嗧縼啺?乙基)叔丁氧羰基氨基)-1,2,5-惡二唑-3-基)-1,2,4-惡二唑酮

將第七步產(chǎn)物(330mg,0.620mmol)加入反應(yīng)瓶中，加入cf3c(o)nh2(140mg,1.240mmol),mgo(99mg,2.479mmol)和rh(oac)2(10mg),在室溫下攪拌一分鐘，加入phi(oac)2(309mg,0.930mol)，室溫?cái)嚢柚钡絫lc監(jiān)測(cè)反應(yīng)完全。反應(yīng)中加入水(10ml)，用乙酸乙酯萃取(10mlx3)，用水洗(10ml)和飽和食鹽水洗(10ml),無(wú)水硫酸鈉干燥。柱層析分離純化，得到目標(biāo)化合物(300mg,75％收率)。

第九步：(±)4-(3-溴-4-氟苯基)3-4-(((2-(甲基亞砜亞胺)乙基)叔丁氧羰基氨基)-1,2,5-惡二唑-3-基)-1,2,4-惡二唑酮

將第八步產(chǎn)物(330mg,0.513mmol)溶于甲醇中(5ml),冰浴下，加入碳酸鉀(142mg,1.026mmol),攪拌15分鐘。tlc顯示反應(yīng)完全，正己烷：乙酸乙酯＝1:1。反應(yīng)液過濾，濾餅用二氯甲烷洗滌(10ml*2),濾液濃縮后得到白色(280mg,99％收率)。

¹hnmr:(400mhz,dmso-d6):δ8.00(s,1h),7.64-7.60(m,2h),4.03-3.99(m,2h),3.88(s,1h),3.42-3.40(m,2h),2.96(s,3h),1.48(s,9h)

第十步：(±)4-(3-溴-4-氟苯基)3-4-(((2-(甲基亞砜甲基亞胺)乙基)叔丁氧羰基氨基)-1,2,5-惡二唑-3-基)-1,2,4-惡二唑酮

將第九步產(chǎn)物(20mg,0.037mmol)溶于二氯甲烷中(2ml)，加入三甲基氧鎓四氟硼酸鹽(8mg,0.055mmol)，室溫下攪拌2小時(shí)，tlc顯示反應(yīng)完全，反應(yīng)液中加入水(10ml),乙酸乙酯(10ml)，然后用乙酸乙酯萃取(10mlx2)合并有機(jī)相，然后用水洗(10ml)，飽和食鹽水洗(10ml),硫酸鈉干燥。濃縮后柱 層析分離純化，得到目標(biāo)化合物(10mg,48％收率)。

¹hnmr:(400mhz,acetone-d6):δ7.96-7.94(m,1h),7.66-7.62(m,1h),7.53-7.49(m,1h),4.17(s,2h),3.64-3.57(m,1h),3.50-3.42(s,1h),2.97(s,3h),2.64(s,3h),1.54(s,9h)

第十一步：((±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮’-羥基-4-((2-(氮，硫-二甲基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

將第十步產(chǎn)物(20mg,0.037mmol)溶于二氯甲烷中(1ml)，加入10n的氯化氫/乙醇溶液(2ml)，室溫下攪拌2小時(shí)，反應(yīng)完全后，直接濃縮干，所得殘留物溶于四氫呋喃中(2ml),加入2m氫氧化鈉水溶液(0.2ml)，室溫?cái)嚢?0分鐘。tlc顯示反應(yīng)完全(二氯甲烷：甲醇＝20:1)，加入2m鹽酸調(diào)節(jié)ph＝5，反應(yīng)液中加入水(10ml),乙酸乙酯(10ml)，然后用乙酸乙酯萃取(10mlx2)合并有機(jī)相，然后用水洗(10ml)，飽和食鹽水洗(10ml),硫酸鈉干燥。濃縮后柱層析分離純化，得到目標(biāo)化合物(10mg,52％收率)。

¹hnmr:(400mhz,acetone-d6):δ10.78(s,1h),8.10(s,1h),7.31-7.29(m,1h),7.17-7.13(m,1h),7.02-6.98(m,1h),4.28-4.27(m,2h),4.02-4.04(m,2h),3.84(s,3h),2.92(s,3h)

ms(esi):[m+h]⁺m/z＝435.0

實(shí)施例2

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮’-羥基-4-((3-(硫-甲基-氮乙基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

根據(jù)實(shí)施例1制備方法，將第十步的試劑用三乙基氧鎓四氟硼酸鹽取代，再運(yùn)用第十一步的條件得到目標(biāo)化合物。

¹hnmr:(400mhz,acetone-d6):δ10.85(s,1h),8.12(s,1h),7.28-7.26(m,1h),7.17-7.13(m,1h),7.02-6.98(m,1h),6.64(s,1h),3.81(s,2h),3.57(s,1h),3.43-3.40(m,1h),3.31-3.06(m,5h),1.11-1.05(m,3h).

ms(esi):[m+h]⁺m/z＝449.0

實(shí)施例3

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-(2-(硫-甲基-氮-苯基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

第一步：(±)4-(3-溴-4-氟苯基)3-4-(((2-(甲基亞砜苯基亞胺)乙基)叔丁氧羰基氨基)-1,2,5-惡二唑-3-基)-1,2,4-惡二唑酮

將實(shí)施例1第九步的產(chǎn)物(20mg,0.037mmol)溶于二氯甲烷中(2ml)，加入苯硼酸(8mg,0.055mmol)，醋酸銅(5mg)室溫下攪拌2小時(shí)，tlc顯示反應(yīng)完全，反應(yīng)液中加入水(10ml),乙酸乙酯(10ml)，然后用乙酸乙酯萃取(2x10ml)合并有機(jī)相，然后用水洗(10ml)，飽和食鹽水洗(10ml),硫酸鈉干燥。濃縮后柱層析分離純化，得到目標(biāo)化合物(15mg,66％收率)

¹hnmr(400mhz，acetone-d6):δ7.93-7.91(m,1h),7.62-7.58(m,1h),7.51-7.47(m,1h),7.23-7.12(m,2h),6.96(d,2h),6.92-6.89(m,1h),4.29(s,2h),3.87-3.80(m,1h),3.76-3.68(m,1h),3.21(s,3h),1.51(s,9h)

第二步：(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-氮-苯基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

將第一步產(chǎn)物(10mg,0.016mmol)溶于二氯甲烷中(1ml)，加入10m的氯化氫/乙醇溶液(2ml)，室溫下攪拌2小時(shí)，反應(yīng)完全后，直接濃縮干，所得殘留物溶于四氫呋喃中(2ml),加入2m氫氧化鈉水溶液(0.2ml)，室溫?cái)嚢?0分鐘。tlc顯示反應(yīng)完全，加入2m鹽酸調(diào)節(jié)ph＝5，反應(yīng)液中加入水(10ml),乙酸乙酯(10ml)，然后用乙酸乙酯萃取(2x10ml)合并有機(jī)相，然后用水洗(10ml)，飽和食鹽水洗(10ml),硫酸鈉干燥。濃縮后柱層析分離純化，得到目標(biāo)化合物(5mg,63％收率)

¹hnmr(400mhz,acetone-d6):δ10.80(s,1h),8.13(s,1h),7.29-7.27(m,1h), 7.19-7.13(m,3h),7.04-7.01(m,3h),6.89-6.85(m,1h),6.55(s,1h),3.91-3.87(m,2h),3.72-3.61(m,2h),3.20(s,3h)

ms(esi):[m+h]⁺m/z＝497.0

實(shí)施例4

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(苯胺基甲酰)亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

第一步：(±)4-(3-溴-4-氟苯基)3-4-(((2-硫-甲基-氮-(苯胺基甲酰)亞砜亞胺)乙基)叔丁氧羰基氨基)-1,2,5-惡二唑-3-基)-1,2,4-惡二唑酮

將實(shí)施例1第九步的產(chǎn)物(20mg,0.037mmol)溶于四氫呋喃中(2ml)，加入苯基異氰酸酯(9mg,0.073mmol)室溫?cái)嚢柽^夜，加入碳酸氫鈉水溶液(10ml)乙酸乙酯(10ml)，用乙酸乙酯萃取(10mlx2),合并有機(jī)相，用水洗(10ml)，飽和食鹽水洗(10ml)，濃縮有機(jī)相。柱層析分離純化得到目標(biāo)化合物(20mg,82％收率)

¹hnmr(400mhz,acetone-d6):δ8.24(s,1h),7.96-7.95(m,1h),7.66-7.58(m,3h),7.50-7.46(m,1h),7.26-7.22(m,2h),6.97-6.93(m,1h),4.36(s,2h),4.09-4.02(m,1h),3.96-3.86(m,1h),3.41(s,3h),1.51(s,9h)

第二步:(±)4-(3-溴-4-氟苯基)3-4-(((2-硫-甲基-氮-(苯胺基甲酰)亞砜亞胺)乙基)叔丁氧羰基氨基)-1,2,5-惡二唑-3-基)-1,2,4-惡二唑酮

將第一步產(chǎn)物(20mg,0.030mmol)加入10nhcl/etoh(3ml)，室溫?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)完全后，直接濃縮干，得到目標(biāo)化合物(20mg,100％收率)

¹hnmr(400mhz，acetone-d6):δ8.10(s,1h),7.98-7.97(m,1h),7.72-7.68(m,1h),7.60(d,2h),7.54-7.50(m,1h),6.61(s,1h),4.03-4.00(m,2h),3.94-3.88(m,2h),3.64-3.60(m,1h),3.46(s,3h)

第三步:(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(苯胺基甲酰)亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

將第二步產(chǎn)物(20mg,0.035mmol)溶于四氫呋喃(2ml)，加入2m氫氧化鈉水溶液(0.2ml)，室溫?cái)嚢?0分鐘。tlc顯示反應(yīng)完全，加入2mol/l鹽酸調(diào)節(jié)ph＝5，反應(yīng)液中加入水(10ml),乙酸乙酯(10ml)，然后用乙酸乙酯萃取(2x10ml)合并有機(jī)相，然后用水洗(10ml)，飽和食鹽水洗(10ml),硫酸鈉干燥。濃縮后柱層析分離純化，得到目標(biāo)化合物(10mg,52％收率)

¹hnmr(400mhz,acetone-d6):δ10.70(s,1h),8.19(s,1h),8.14(s,1h),7.61(d,2h),7.30-7.28(m,4h),7.26-7.22(m,2h),7.16-7.12(m,1h),7.02-6.98(m,1h),6.96-6.93(m,1h),6.57(s,1h),3.95-3.85(m,3h),3.81-3.74(m,1h),3.44(s,3h)

ms(esi):[m+h]⁺m/z＝540.1

實(shí)施例5

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(甲酰甲酯)亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

第一步：(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(羰基咪唑)亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(化合物r)的制備：

室溫下，將(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-惡二唑-3-甲脒(500mg,1.19mol)溶于20ml乙酸乙酯，加入羰基二咪唑 (579mg,3.57mmol)，然后60°攪拌5小時(shí)，將溶劑蒸干，加入20ml水，用乙酸乙酯萃取(3x30ml)，合并有機(jī)層，飽和食鹽水系，無(wú)水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，過柱(二氯甲烷:甲醇＝100:5)，濃縮，干燥，得白色固體。

¹hnmr(400mhz,acetone-d6):δ8.09(m,2h),7.78(m,1h),7.55(t,1h),7.46(s,1h),6.93(s,1h),6.46(t,1h),4.20(m,2h),4.10(m,2h),3.65(s,3h)。

第二步：(±)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(甲酰甲酯)亞砜亞胺)乙基)氨基)-1，2，5-噁二唑-3-甲脒

將第一步產(chǎn)物(30mg,0.055mmol)溶于3ml甲醇，冰浴下，加入2n氫氧化鈉溶液1ml。室溫?cái)嚢?h,用6n鹽酸溶液調(diào)節(jié)ph＝7.加入20ml水，用乙酸乙酯萃取(3x20ml)，有機(jī)層合并，水，飽和食鹽水各洗一次，濃縮溶劑，制備柱色譜分離(dcm:meoh＝20:1),得目標(biāo)化合物(10mg,38％).

¹hnmr(400mhz,acetone-d6):δ10.76(s,1h),8.10(s,1h),7.30(m,1h),7.16(t,1h),7.02(m,1h),3.93(m,2h),3.89(s,1h),3.79(s,1h),3.64(s,3h),3.47(s,3h),3.65(s,3h)。

ms(esi):[m+h]⁺m/z＝480.7

實(shí)施例6

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(甲酰乙酯)亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

根據(jù)實(shí)施例5制備方法，將實(shí)施例5第一步產(chǎn)物(30mg,0.055mmol)溶于3ml乙醇，冰浴下，加入2n氫氧化鈉溶液1ml。室溫?cái)嚢?h,用6n鹽酸溶液調(diào)節(jié)ph＝7.加入20ml水，用乙酸乙酯萃取(3x20ml)，有機(jī)層合并，水，飽和食鹽水各洗一次，濃縮溶劑，制備柱色譜分離(dcm:meoh＝20:1),得目標(biāo)化合物(14mg,51％).

¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ9.96(s,1h),7.82(t,1h),7.26(dd,1h),7.05(t,1h), 6.94(m,1h),6.84(s,1h),4.29(m,2h),4.00(m,1h),3.90(m,1h),3.64(m,1h),3.52(m,1h),3.41(s,3h)。

ms(esi):[m+h]⁺m/z＝494.7

實(shí)施例7

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(甲酰異丙酯)亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

根據(jù)實(shí)施例5制備方法，將實(shí)施例5第一步產(chǎn)物(30mg,0.055mmol)溶于3ml異丙醇，冰浴下，加入2n氫氧化鈉溶液1ml。室溫?cái)嚢?h,用6n鹽酸溶液調(diào)節(jié)ph＝7.加入20ml水，用乙酸乙酯萃取(3x20ml)，有機(jī)層合并，水，飽和食鹽水各洗一次，濃縮溶劑，制備柱色譜分離(dcm:meoh＝20:1),得化合物tm(10mg,37％).

¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ10.07(s,1h),7.96(s,1h),7.24(m,1h),7.05(t,1h),6.93(m,1h),6.81(s,1h),5.03(m,1h),4.04(m,1h),3.89(m,1h),3.62(m,1h),3.58(m,1h),3.42(s,3h),1.34(d,3h),1.26(m,3h)。

ms(esi):[m+h]⁺m/z＝506.7

實(shí)施例8

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(甲磺?；?亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

將化合物實(shí)施例1第九步的產(chǎn)物(30mg,0.055mmol)和三乙胺(15ul)溶于3ml二氯甲烷中，冰浴下，加入甲基磺酰氯(6.4ul)，反應(yīng)十分鐘后，加入20ml水淬滅，用二氯甲烷萃取(3x20ml)，合并有機(jī)層，鹽水洗一次，干燥，過濾，旋干溶劑，過柱(dcm:meoh＝100:5)，得到粗產(chǎn)物35mg。將粗產(chǎn)物(35mg,0.056 mmol溶于1ml二氯甲烷和1ml三氟乙酸中，室溫反應(yīng)三小時(shí)。旋干溶劑，加入水20ml，用二氯甲烷萃取(3x20ml)，合并有機(jī)層，鹽水洗，無(wú)水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，的粗產(chǎn)物(25mg)。將上一步粗產(chǎn)物溶于2ml四氫呋喃溶液中，加入0.5ml2n氫氧化鈉水溶液，室溫?cái)嚢?.5小時(shí)，用2nhcl調(diào)節(jié)至ph＝7,加水20ml，乙酸乙酯萃取(3x20ml)，和并有機(jī)層，鹽水洗，無(wú)水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，過柱(dcm:meoh＝100:5)，得到白色固體(20mg,84％)

¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ9.28(s,1h),8.34(s,1h),7.52(,1h),7.01(t,1h),6.95(m,1h),6.87(s,1h),3.98(m,2h),3.95(m,1h),3.92(m,1h),3.54(m,1h),3.23(s,3h)。

ms(esi):[m+h]⁺m/z＝499.0

實(shí)施例9

(±)(z)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-(氨甲?；?亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒

冰浴下，將(±)-氮-(3-溴-4-氟苯基)-氮'-羥基-4-((2-(硫-甲基-氮-氰基亞砜亞胺)乙基)氨基)-1,2,5-噁二唑-3-甲脒(20mg,0.045mmol)溶于2mldmso溶液中，然后加入無(wú)水碳酸鉀(63mg,0.45mmol)，緩慢滴加入0.5ml雙氧水，室溫反應(yīng)0.5小時(shí)。加入硫代硫酸鈉水溶液20ml,淬滅后，用二氯甲烷萃取(3x20ml)，合并有機(jī)層，飽和食鹽水洗，無(wú)水硫酸鈉干燥，過濾，旋干，過柱(dcm:meoh＝100:5)，旋干，得到白色固體(14mg,67％)

¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ9.45(s,1h),7.52(,1h),7.01(t,1h),6.92(m,1h),5.00(s，2h),3.96(m,2h),3.75(m,1h),3.66(m,1h),3.32(s,3h)。

ms(esi):[m+h]⁺m/z＝466.0

實(shí)施例10手性異構(gòu)體的拆分

使用安捷倫1260半制備液相色譜儀進(jìn)行手性拆分：

實(shí)施例1的拆分：

手性柱：大賽璐chiralcelic4.6*250mm,填料粒徑5μm；流速1ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)254nm；收集單一對(duì)映體；

條件1：將實(shí)施例1樣品1mg溶于1ml正己烷和異丙醇混合溶液中 (hexane:iproh＝8:2)，進(jìn)樣量10μl，洗脫液hexane:etoh＝88:12(體積比)；兩個(gè)光學(xué)異構(gòu)體出峰時(shí)間分別為14.251分鐘和16.905分鐘；

條件2：將將實(shí)施例1樣品1mg溶于1ml正己烷和異丙醇混合溶液中(hexane:iproh＝8:2)，進(jìn)樣量10μl，洗脫液hexane:iproh＝75:25(體積比)；兩個(gè)光學(xué)異構(gòu)體出峰時(shí)間分別為11.180分鐘和13.978分鐘。

實(shí)施例2的拆分：

手性柱：大賽璐chiralcelic4.6*250mm,填料粒徑5μm；流速1ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)254nm；收集單一對(duì)映體；

條件1：將200微升實(shí)施例2的dmso溶液(10mmol/l)用異丙醇稀釋至1ml，進(jìn)樣量10μl，洗脫液hexane:etoh＝88:12(體積比)；兩個(gè)光學(xué)異構(gòu)體出峰時(shí)間分別為11.188分鐘和13.786分鐘；

條件2：將200微升實(shí)施例2的dmso溶液(10mmol/l)用異丙醇稀釋至1ml，進(jìn)樣量10μl，洗脫液hexane:iproh＝80:20(體積比)；兩個(gè)光學(xué)異構(gòu)體出峰時(shí)間分別為11.655分鐘和15.261分鐘。

實(shí)施例3的拆分：

手性柱：大賽璐chiralcelod-h4.6*250mm,填料粒徑5μm；流速1ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)254nm；收集單一對(duì)映體；

條件：將實(shí)施例3樣品1mg溶于1ml正己烷和異丙醇混合溶液中(hexane:iproh＝8:2)，進(jìn)樣量5μl，洗脫液hexane:etoh＝60:40(體積比)；兩個(gè)光學(xué)異構(gòu)體出峰時(shí)間分別為9.842分鐘和16.879分鐘。

實(shí)施例11

活性測(cè)試

(1)ido蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)及純化方法

首先pcr擴(kuò)增ido基因，擴(kuò)增的pcr產(chǎn)物回收，然后將pet28a質(zhì)粒(購(gòu)自上海寶曼生物科技有限公司)和ido膠回收產(chǎn)物用ecori和xhoi兩種限制性內(nèi)切酶進(jìn)行酶切(37℃，酶切2h)，跑膠，回收，t4連接酶鏈接過夜連接產(chǎn)物加入到dh5α感受態(tài)，冰上放置30min，42℃熱擊90s，搖菌涂板，挑取單克隆，pcr鑒定，測(cè)序鑒定，全部正確，即pet28a-ido質(zhì)粒構(gòu)建成功。

將構(gòu)建好的含有pet28a-ido質(zhì)粒的bl21，37℃大搖至od600為0.6-0.8，加入至終濃度為7μm的氯高鐵血紅素和1mm的iptg(異丙基-β-d-硫代半乳糖苷)，28℃誘導(dǎo)4h；誘導(dǎo)后，4℃，6000rpm離心收集菌體，收集的菌體用20mmpbs(ph6.5)清洗一次，再離心收集菌體。

將收集的菌體用裂解液(20mmpbsph6.5)重新懸起，超聲裂解(功率40％裂解 20min，冰上放置)，將裂解后的細(xì)菌，13000rpm離心15min，棄去沉淀，保留上清；將鎳柱用裂解液(20mmpbsph6.5)平衡3個(gè)柱體積，然后將裂解上清上樣到鎳柱上，上樣之后，用漂洗液(20mmpbsph6.5，20mm咪唑)清洗4個(gè)柱體積，最后用洗脫液(20mmpbsph6.5，250mm咪唑)洗脫蛋白；將洗脫的蛋白溶液進(jìn)行透析4h，透析溶液為20mmpbsph6.5，透析之后蛋白樣品濃縮，分裝，液氮速凍，放入-80℃保存?zhèn)溆谩?/p>

(2)ido酶抑制活性測(cè)試方法

首先將化合物進(jìn)行3倍梯度稀釋，各個(gè)濃度取1μl加入到96孔板中；加入50μl配好的ido酶溶液(終濃度600ng/100μl)：加入25μl底物1混合溶液，加入25μl的底物2混合溶液起始反應(yīng)。最后od321nm讀數(shù)60min。

(3)細(xì)胞活性測(cè)試方法

hela細(xì)胞(100μl)接種在96孔板上，接種量為每個(gè)孔5×10³，生長(zhǎng)過夜。第二天，化合物稀釋后，取1μl加入到96孔板中，然后將含有人的干擾素γ(終濃度50ng/ml)的培養(yǎng)基100μl加入到96孔板中，使最終體積為200μl。48小時(shí)孵化后，每個(gè)孔取140μl上清液轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的96孔板上。10μl6.1n三氯乙酸加入每個(gè)孔混合，50℃孵化30分鐘，ido催化n甲酰犬尿素為犬尿素。反應(yīng)混合物2500轉(zhuǎn)離心10分鐘去掉沉淀物。每個(gè)孔100μl上清液轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的96孔板與100μl2％二甲氨基苯甲醛乙酸溶液混合。犬尿素分離后，用spectramaxi3reader在480nm測(cè)定數(shù)值。

各化合物的ido酶抑制活性和細(xì)胞抑制活性的測(cè)試結(jié)果如表1所示。

表1ido酶和細(xì)胞抑制活性測(cè)試結(jié)果

上述結(jié)果表明，本發(fā)明化合物(包括外消旋體和對(duì)映異構(gòu)體)均具有優(yōu)異的針對(duì)ido酶和細(xì)胞的抑制活性，特別是化合物2在ido細(xì)胞抑制活性中有出意料的高活性。