本發(fā)明屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及式i或式ii所示的苯并惡嗪酮衍生物及其制備方法和其在相關(guān)疾病中的應(yīng)用，主要涉及腫瘤、心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病、代謝性疾病、炎性疾病等。

背景技術(shù)：

腫瘤是對人類健康危害最大的疾病之一，嚴(yán)重影響人們生活質(zhì)量。近年來，化學(xué)藥物作為治療腫瘤的重要手段之一，已經(jīng)取得巨大的進(jìn)步和發(fā)展。目前，已開發(fā)出很多具有不同作用機(jī)制的抗腫瘤藥物，但是這些藥物在臨床使用中表現(xiàn)出許多缺陷，比如選擇性差、毒副作用大、快速產(chǎn)生耐藥性等。因此，新型抗腫瘤藥物的研究與開發(fā)尤為重要。

苯并惡嗪酮衍生物是一類重要的含氮雜環(huán)化合物，該骨架廣泛存在于天然產(chǎn)物、生物活性分子和藥物分子中。研究表明，此類化合物具有良好而廣泛的藥理活性，可用于抗炎、抗腫瘤、抗血栓形成、減肥、代謝紊亂和神經(jīng)退行性疾病等的治療。例如，化合物a是組蛋白去乙酰化酶(hdac)抑制劑，用于治療癌癥和炎癥?？铺厮贯t(yī)藥品公司開發(fā)的化合物cx-614正在處于研究階段，有望成為帕金森綜合癥和阿爾茨海默癥治療藥物。

由于苯并惡嗪酮衍生物在有機(jī)化學(xué)和醫(yī)藥領(lǐng)域具有重要的作用，因此關(guān)于該骨架的合成研究較多。傳統(tǒng)的合成方法是利用官能化的鄰羥基苯甲酰胺衍生物與醛或酮在酸性條件下反應(yīng)。近年來，新的合成策略被報道，包括官能化鄰羥基苯甲醛和亞胺的直接亞胺?；磻?yīng)(dia)，環(huán)化亞胺、鄰氟代酰氯和含氧親核試劑的三組分反應(yīng)，以及過渡金屬(如銅、鈀、錫、鈷等)催化的交叉脫氫偶聯(lián)反應(yīng)、分子內(nèi)的多米諾反應(yīng)、氧化脫芳化反應(yīng)、脫乙?；磻?yīng)、自由化反應(yīng)等。以上所述的合成方法由于反應(yīng)條件苛刻、收率低、成本高、重金屬殘留等缺陷，無法實現(xiàn)工業(yè)化大量生產(chǎn)制備，限制了其在醫(yī)藥生產(chǎn)上的應(yīng)用。

本發(fā)明合成一系列結(jié)構(gòu)新穎的苯并惡嗪酮衍生物，并對其進(jìn)行了腫瘤細(xì)胞毒性試驗，證明該類苯并惡嗪酮衍生物具有腫瘤抑制活性。

苯并惡嗪酮衍生物結(jié)構(gòu)新穎，表現(xiàn)出優(yōu)良的抗腫瘤活性。目前還沒有經(jīng)濟(jì)、高效的合成工藝，更無相關(guān)大批量生產(chǎn)制備工藝報道。本發(fā)明通過高效、經(jīng)濟(jì)、環(huán)保的合成方法提供苯并惡嗪酮衍生物，為腫瘤、心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病、代謝性疾病、炎性疾病等相關(guān)疾病的預(yù)防和治療提供新策略。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一系列結(jié)構(gòu)新穎的苯并惡嗪酮衍生物及其制備方法和醫(yī)藥用途。

本發(fā)明提供的苯并惡嗪酮衍生物是式i或式ii所示的化合物。

r¹和r⁶相同或不相同代表氫、c1-c8直鏈飽和烷基、c2-c8直鏈不飽和烷基、c3-c8支鏈飽和烷基、c3-c8支鏈不飽和烷基、c3-c6的環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)芳基、飽和雜環(huán)。

y選自o或s中的一種。

z選自o、nh或s中的一種。

x代表羥基、鹵素、cn、or⁷、ocf3、scf3、sr⁷、nr⁷r⁸、no2、c1-c8直鏈飽和烷基、c2-c8直鏈不飽和烷基、c3-c8支鏈飽和烷基、c3-c8支鏈不飽和烷基、c3-c6的環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)芳基、飽和雜環(huán)；其中所述r⁷和r⁸同時或不同時為氫、c1-c8直鏈飽和烷基、c2-c8直鏈不飽和烷基、c3-c8支鏈飽和烷基、c3-c8支鏈不飽和烷基、c3-c6的環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)芳基、飽和雜環(huán)。

r²、r³、r⁴與r⁵相同或不相同，分別獨(dú)立代表氫、鹵素、cn、ch3、cf3、or⁹、ocf3、scf3、sr⁹、nr⁹r¹⁰、no2、cor⁹、coor⁹、conr⁹r¹⁰、so3r⁹、so2nr⁹r¹⁰、c1-c8直鏈飽和烷基、c2-c8直鏈不飽和烷基、c3-c8支鏈飽和烷基、c3-c8支鏈不飽和烷基、c3-c6的環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)芳基、飽和雜環(huán)；其中所述r⁹和r¹⁰同時或不同時為氫、c1-c8直鏈飽和烷基、c2-c8直鏈不飽和烷基、c3-c8支鏈飽和烷基、c3-c8支鏈不飽和烷基、c3-c6的環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)芳基、飽和雜環(huán)。

所述芳基為苯基、取代苯基，其中取代苯基的取代基位于苯環(huán)的各個位置，是單取代或多取代，取代基為鹵素、c1-c4直鏈烷基、c1-c4支鏈烷基、c1-c4直鏈烷氧基、c1-c4支鏈烷氧基、氰基、硝基、羥基、氨基、羧基、甲酯基、乙酯基、三氟甲基。

所述雜環(huán)芳基為呋喃、嘧啶、咪唑、吡唑、吡啶、三唑、噻唑、吲哚、吲唑、苯并咪唑，雜環(huán)上的取代基位于雜環(huán)的各個位置，是單取代或多取代，取代基為鹵素、c1-c4直鏈烷基、c1-c4支鏈烷基、c1-c4直鏈烷氧基、c1-c4支鏈烷氧基、氰基、羥基、氨基、羧基、甲酯基、乙酯基、三氟甲基。

所述飽和雜環(huán)為哌啶、哌嗪、甲基哌嗪、吡咯、嗎啉，雜環(huán)上的取代基位于雜環(huán)的各個位置，是單取代或多取代，取代基為鹵素、c1-c4直鏈烷基、c1-c4支鏈烷基、c1-c4直鏈烷氧基、c1-c4支鏈烷氧基、氰基、羥基、氨基、羧基、甲酯基、乙酯基、三氟甲基。

本發(fā)明另一個目的是提供式i或式ii所示的化合物的制備方法：

式i或式ii所示化合物的合成方法如下：

起始原料1與?；噭┓磻?yīng)得到化合物2，其中所用?；噭┻x自氯化亞砜、草酰氯五氯化磷中的一種，用量為1-5當(dāng)量；溶劑選自二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃中的中的一種；溫度為所用溶劑的回流溫度。

中間體2與胺和堿在室溫下反應(yīng)得到化合物3，其中所用的堿選自三乙胺、n，n-二異丙基乙胺、吡啶中的一種，用量為4-6當(dāng)量；溶劑選自二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃中的中的一種；溫度為室溫。

中間體3與氧化劑和堿在加熱條件下反應(yīng)得到式i或式ii化合物，其中所用的氧化劑選自過氧化氫、過氧化叔丁醇、過氧化二叔丁基、過氧化異丙苯、間氯過氧化苯甲酸、過硫酸鈉中的一種，用量為2-10當(dāng)量；堿選自氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鉀、碳酸鈉、氫氧化鋰、碳酸銫、甲醇鈉、乙醇鈉中的一種，用量為1-6當(dāng)量；溶劑選自二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、乙酸乙酯、乙腈、1，2-二氯乙烷、1，4-二氧六環(huán)中的一種；溫度為25～100℃。

本發(fā)明的又一目的在于提供上述化合物或其藥學(xué)上可以接受的鹽、酯或前藥用于制備相關(guān)疾病的預(yù)防與治療藥物：主要涉及腫瘤、心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病、代謝類疾病、炎性疾病等。

具體實施方式

以下通過實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但是本發(fā)明不限于下述的實施例。

實施例1本發(fā)明部分化合物合成，包括ia-ih，以化合物ia為例

n-芐基-2-羥基-5-甲氧基苯甲酰胺的制備：

將5-甲氧基水楊酸1g(5.95mmol)溶于溶于30ml無水二氯甲烷中，加入氯化亞砜2.14g(10.7mmol)，n，n-二甲基甲酰胺1滴，升溫至回流反應(yīng)2h后，冷卻至室溫，旋干除去溶劑，用無水二氯甲烷溶解，滴加到含有三乙胺1.85g(17.80mmol)和芐胺0.76g(7.14mmol)的無水二氯甲烷溶液中。滴加完畢后室溫攪拌5min，旋干得粗品，柱層析純化的白色固體n-芐基-2-羥基-5-甲氧基苯甲酰胺1.27g，收率83％。¹hnmr(300mhz，dmso)δ12.62(s，1h)，7.36-7.32(m，5h)，7.22(d，j＝9.3hz，1h)，6.47(d，j＝1.8hz，1h)，6.37(dd，j＝9.0，2.4hz，1h)，6.33(s，1h)，4.61(d，j＝5.7hz，2h)，3.80(s，3h)；esi-ms(m/z)：258.2[m+h]⁺.

2-羥基-6-甲氧基-2-苯基-2，3-二氫-4h-苯并惡嗪酮的制備(ia)：

n-芐基-2-羥基-5-甲氧基苯甲酰胺1g(3.89mmol)溶于30ml1，2二氯乙烷中，加入過氧化氫2.20g(19.45mmol)，碳酸鉀1.07g(7.78mmol)，升溫至50℃反應(yīng)2h后，冷卻至室溫，旋干得粗品，柱層析純化的白色固體2-羥基-6-甲氧基-3-苯基-2，3-二氫-4h-苯并惡嗪酮0.97g，收率93％。m.p.202-203℃，¹hnmr(300mhz，dmso)δ11.95(brs，2h)，8.13-8.02(m，4h)，7.85(d，j＝6.6，hz，1h)，7.46(t，j＝6.9hz，1h)，7.03-6.95(m，2h)，3.90(s，3h)；¹³cnmr(75mhz，dmso)δ165.5，164.7，156.9，137.9，134.3，133.0，131.0，129.6，128.2，119.7，119.0，117.2，52.6；hrms(esi)calculatedforc15h14no4⁺[m+h]⁺272.0917，found272.0918.

2-羥基-6-硝基-2-苯基-2，3-二氫-4h-苯并惡嗪酮(ib)

參照ia的合成方法，產(chǎn)物為棕紅色固體，收率90％.m.p.218-219℃；¹hnmr(300mhz，dmso)δ15.62(brs，2h)，8.71(s，1h)，8.07-7.95(m，3h)，7.61(s，3h)，6.49(d，j＝5.4hz，1h)；¹³cnmr(75mhz，dmso)δ177.5，165.1，165.0，134.0，132.7，129.0，128.8，128.4，127.8，122.9，118.6，116.9；hrms(esi)calculatedforc14h11n2o5⁺[m+h]⁺287.0662，found287.0665.

n-芐基-2-羥基-2-苯基-3，4-二氫-2h-苯并惡嗪酮-6-磺酸胺(ic)

參照ia的合成方法，產(chǎn)物為黃色固體，收率83％.m.p.169-172℃；¹hnmr(300mhz，dmso)δ14.52(brs，2h)，8.22(s，1h)，8.01(d，j＝7.2hz，2h)，7.81-7.79(m，1h)，6.64-7.53(m，4h)，7.25(brs，5h)，6.78(d，j＝8.7hz，1h)，3.90(d，j＝5.7hz，2h)；¹³cnmr(75mhz，dmso)δ168.8，165.6，138.4，134.5，133.1，131.9，131.0，129.7，129.3，129.0，128.6，128.3，128.0，127.5，125.6，121.0，118.6，46.6；hrms(esi)calculatedforc21h19n2o5s⁺[m+h]⁺411.1009，found411.1013.

2-羥基-2-(4-甲氧基苯基)-2，3-二氫-4h-苯并惡嗪酮(id)

參照ia的合成方法，產(chǎn)物為白色固體，收率68.9％.m.p.85-87℃，1h-nmr(300mhz，dmso)，δ11.18(s，1h)，9.01(s，1h)，7.34-7.29(m，3h)，7.06-7.04(m，1h)，4.01-3.96(t，j＝6.3hz，2h)，1.74-1.69(m，2h)，1.41(m，2h)，1.26(m，8h)，0.86-0.38(m，3h)；¹³cnmr(75mhz，dmso)：δ164.37，159.03，134.58，129.94，119.43，117.86，113.02，68.05，31.69，29.19，29.12，29.09，25.96，22.54，14.48；hrms(esi)calculatedforc15h24no3[m+h]⁺266.1751，found266.1747.

2-(1，3-苯并惡唑-5-基)-2-羥基--2，3-二氫-4h-苯并惡嗪酮(ie)

參照ia的合成方法，產(chǎn)物為黃色固體，收率91％.m.p.213-215℃；¹hnmr(300mhz，dmso)δ14.00(brs，2h)，7.87-7.84(m，1h)，7.62-7.60(m，1h)，7.46(brs，1h)，7.35-7.30(m，1h)，7.07-7.04(m，1h)，6.88-6.84(m，1h)，6.78-6.74(m，1h)，6.14(s，2h)；¹³cnmr(75mhz，dmso)δ166.3，151.0，147.8，134.0，132.2，130.5，123.3，118.6，118.1，117.3，116.8，115.9，108.2，107.6，102.0；hrms(esi)calculatedforc15h12no5⁺[m+h]⁺286.0710，found286.0710.

2-羥基-2-(2-氯苯基)-2，3-二氫-4h-苯并惡嗪酮(if)

參照ia的合成方法，產(chǎn)物為黃色固體，收率91％.m.p.137-138℃；¹hnmr(300mhz，dmso)δ11.99(brs，2h)，7.71(d，j＝7.8hz，1h)，7.50-7.42(m，3h)，7.38-7.30(m，2h)，6.86-6.77(m，2h)；¹³cnmr(75mhz，dmso)δ167.2，165.4，159.5，136.8，135.1，133.8，131.1，130.1，129.0，127.8，119.1，118.1，116.6；hrms(esi)calculatedforc14h11clno3⁺[m+h]⁺276.0422，found276.0419.

4-(2-羥基-2，3-二氫-4h-苯并惡嗪酮)-苯甲酸甲酯(ig)

參照ia的合成方法，產(chǎn)物為黃色固體，收率98％.m.p.189-191℃；¹hnmr(300mhz，dmso)δ12.60(brs，2h)，7.90(d，j＝6.1hz，2h)，7.83(d，j＝7.8hz，1h)，7.36(t，j＝7.2hz，1h)，7.05(d，j＝8.7hz，2h)，6.92(d，j＝8.4hz，1h)，7.85(t，j＝7.2hz，1h)；¹³cnmr(75mhz，dmso)δ168.1，165.2，165.0，163.3，134.6，131.3，130.3，119.4，119.2，118.1，114.6，114.2，56.0；hrms(esi)calculatedforc16h14no5⁺[m+h]⁺300.0866，found300.0866.

2-羥基-2-(2-呋喃基)-2，3-二氫-4h-苯并惡嗪酮(ih)

參照ia的合成方法，產(chǎn)物為黃色固體，收率83％.m.p.202-203℃；¹hnmr(300mhz，dmso)δ14.00(brs，2h)，7.87-7.85(m，1h)，7.61(d，j＝8.1hz，1h)，7.46(s，1h)，7.35-7.30(m，1h)，7.05-7.03(m，1h)，6.87-6.84(m，1h)，6.77-6.75(m，1h)；¹³cnmr(75mhz，dmso)δ151.5，148.3，134.5，130.9，124.0，119.1，118.6，117.8，116.5，108.6，108.2，102.5；hrms(esi)calculatedforc12h9no4na⁺[m+na]⁺254.0424，found254.0426.

實施例2化合物ia-ih抗腫瘤活性實驗。

實驗材料

細(xì)胞株：人宮頸癌細(xì)胞hela和人乳腺癌細(xì)胞mcf-7；樣品：化合物ia-ih加入適量dmso配置成濃度為10^-2m溶液，臨用前用培養(yǎng)基稀釋至相應(yīng)濃度。

實驗方法

細(xì)胞消化、計數(shù)，每孔2.5×10³個細(xì)胞，點(diǎn)在96孔板中，每孔總體積為100μl，培養(yǎng)24h；將待測樣品用培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)?shù)臐舛龋靠?00μl，設(shè)3復(fù)孔。培養(yǎng)72h后加入20μl5mg/mlmtt溶液，孵育4h后，將孔內(nèi)液體全部吸出，加入100μldmso，全波長酶標(biāo)儀測吸光度；抑制率＝(1-給藥組平均吸光度值/對照組平均吸光度值)×100％。

實驗結(jié)果

化合物ia-ih在10μm時對人宮頸癌細(xì)胞hela和人乳腺癌細(xì)胞mcf-7有抑制作用，表明該類化合物具有較好的抗腫瘤活性。

具體結(jié)果如表所示：

表：本發(fā)明部分化合物的抗腫瘤活性