本發(fā)明涉及新穎的糖基橙皮素，更具體而言，涉及雜味顯著地降低的糖基橙皮素及其制造方法以及用途。再者，盡管下文詳述，本說(shuō)明書(shū)中所說(shuō)的糖基橙皮素是指，糖類(lèi)結(jié)合于橙皮素的化合物整體(以下稱(chēng)為“有橙皮素骨架的化合物”。)，作為其具體例，可舉出橙皮苷、有構(gòu)成橙皮苷的蕓香糖的鼠李糖基脫離的結(jié)構(gòu)的7-O-β-葡萄糖基橙皮素、及糖類(lèi)(例如D-葡萄糖、D-果糖、或者D-半乳糖等的糖類(lèi))等摩爾以上α-鍵合于橙皮苷的α-糖基橙皮苷等。
背景技術(shù)：
在維生素類(lèi)之內(nèi)、已知維生素P在生物體內(nèi)，與維生素C的生理作用、例如對(duì)于作為生物體結(jié)締組織的主成分的膠原的合成必要的脯氨酸或賴(lài)氨酸的羥基化反應(yīng)相關(guān)，還與將細(xì)胞色素C的Fe+++還原為Fe++等的氧化還原反應(yīng)相關(guān)，再者知道，與由白細(xì)胞增加的免疫增強(qiáng)作用相關(guān)，在生物體的健康維持、增進(jìn)中也擔(dān)負(fù)重要的作用。
作為維生素P已知的橙皮苷是有由鼠李糖和葡萄糖組成的蕓香糖與橙皮素結(jié)合的結(jié)構(gòu)的下述化學(xué)式1所示的化合物，是多含于柑橘類(lèi)的果皮等中的類(lèi)黃酮的一種，作為有毛細(xì)血管的強(qiáng)化、出血預(yù)防、血壓調(diào)節(jié)等的生理功能的維生素P很早就知，在食品、化妝品、藥品等中廣泛利用。
化學(xué)式1：
【化1】
橙皮苷(化學(xué)式1)
作為橙皮苷的用途，不單單是作為營(yíng)養(yǎng)素的維生素P強(qiáng)化劑，自其化學(xué)結(jié)構(gòu)、生理作用，其單獨(dú)或與其他維生素類(lèi)等聯(lián)用，例如，向作為氧化防止劑、穩(wěn)定劑、品質(zhì)改良劑、紫外線吸收劑等各種食品，另外，向?qū)Τ绕ぼ沼懈惺苄缘牟《拘约膊?、?xì)菌性疾病、循環(huán)器疾病、惡性腫瘤等的疾病的預(yù)防劑、治療劑、即作為橙皮苷感受性疾病劑藥品，再者作為穩(wěn)定劑、氧化防止劑、紫外線吸收劑、黑染料生成抑制劑等，美肌劑、色白劑、抗老化劑等的化妝品，其用途范圍極廣。
但是，橙皮苷難溶于水，于室溫在50L的水中僅微溶1g左右(約0.002w/v％)，使用上極其困難。
作為改善其的方法，例如，在專(zhuān)利文獻(xiàn)1中公開(kāi)了，通過(guò)使糖轉(zhuǎn)移酶作用于含有橙皮苷和淀粉部分分解物的溶液，而使水溶性提高，亦無(wú)毒性的疑慮，在生物體內(nèi)容易地水解，發(fā)揮橙皮苷原本的生理功能的α-糖基橙皮苷及其制造方法。
作為α-糖基橙皮苷的代表例的α-葡萄糖基橙皮苷(別名：酶處理橙皮苷、糖轉(zhuǎn)移橙皮苷、水溶性橙皮苷、或者糖轉(zhuǎn)移維生素P)是1分子葡萄糖α-鍵合于橙皮苷的蕓香糖結(jié)構(gòu)中的葡萄糖的，下述化學(xué)式2所示的化合物，作為將其作為主成分含有的制品，例如，有糖轉(zhuǎn)移橙皮苷(商品名“林原橙皮苷(注冊(cè)商標(biāo))S”、株式會(huì)社林原銷(xiāo)售)在市售。
化學(xué)式2：
【化2】
α-糖基橙皮苷(化學(xué)式2)
另外得知，在以往的α-糖基橙皮苷含有物中，殘留有作為其制造原料的橙皮苷，這成為α-糖基橙皮苷的水溶性的降低的原因，作為改善其的嘗試，已知通過(guò)使構(gòu)成橙皮苷的蕓香糖結(jié)構(gòu)的鼠李糖基脫離，將橙皮苷變換為水溶性極其高的下述化學(xué)式3所示的7-O-β-葡萄糖基橙皮素。例如，在專(zhuān)利文獻(xiàn)2中公開(kāi)了，與高濃度的α-葡萄糖基橙皮苷一同使α-L-鼠李糖苷酶(EC 3.2.1.40)作用于含有橙皮苷的溶液，將橙皮苷變換為7-O-β-葡萄糖基橙皮素，使殘留的橙皮苷含量降低，制造使水溶性提高的α-葡萄糖基橙皮苷高含有物的方法。
化學(xué)式3：
【化3】
7-O-β-葡萄糖基橙皮素(化學(xué)式3)
但是，以往的含有橙皮苷、α-葡萄糖基橙皮苷、7-O-β-葡萄糖基橙皮素等的所謂糖基橙皮素的糖基橙皮素含有物(以下有時(shí)也簡(jiǎn)稱(chēng)為 “以往品”)有特有的苦味(含澀味、蘞味、收斂味)和不喜好的后味、即雜味，以往，作為改善此缺點(diǎn)的手段，例如，在專(zhuān)利文獻(xiàn)3中公開(kāi)了向含作為糖基橙皮素的α-糖基橙皮苷(別名：水溶性橙皮苷)的飲料添加蘋(píng)果酸的方法。
但是，至今，還未提供可充分滿足改善以往品特有的雜味的程度的糖基橙皮素制品。
【現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)】
【專(zhuān)利文獻(xiàn)】
專(zhuān)利文獻(xiàn)1：專(zhuān)利第3060227號(hào)公報(bào)
專(zhuān)利文獻(xiàn)2：專(zhuān)利第3833811號(hào)公報(bào)
專(zhuān)利文獻(xiàn)3：特開(kāi)2011-126849號(hào)公報(bào)
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
【發(fā)明要解決的技術(shù)課題】
本發(fā)明為解決上述缺點(diǎn)而以提供與以往品比雜味顯著地降低的糖基橙皮素及其制造方法以及用途作為課題。
【解決課題的技術(shù)方案】
本發(fā)明人等關(guān)注作為以往品的缺點(diǎn)的雜味，以解決此缺點(diǎn)作為課題而重復(fù)銳意研究努力。即，本發(fā)明人等建立了在該過(guò)程中，以往品的雜味是在該制造原料中原本就含成為雜味的原因的物質(zhì)(以下有時(shí)簡(jiǎn)寫(xiě)為“雜味的原因物質(zhì)”)，還是在該制造工序中生成雜味原因物質(zhì)的假說(shuō)。以此假說(shuō)為基礎(chǔ)、本發(fā)明人等對(duì)于降低以往品中的雜味的手段進(jìn)行各種探討的結(jié)果，新穎地發(fā)現(xiàn)，如果在糖基橙皮素的制造工序中使還原劑共存，則得到與以往品比雜味顯著地降低的糖基橙皮素。再者，本發(fā)明人等新穎地發(fā)現(xiàn)，這樣的糖基橙皮素與以往品比，著色或臭氣也顯著地降低。再者，本發(fā)明人等發(fā)現(xiàn)，對(duì)于如此得到的糖基橙皮素的諸特性，當(dāng)與以往品詳細(xì)地比較探討時(shí)，(A)兩者雖然均為以糖基橙皮素作為主成分，但作為作為微量成分的芳香族醛的一種的糠醛(根據(jù)IUPAC命名法說(shuō)是2-呋喃羧基醛)的含量上有差異，(B)雜味顯著地降低的本發(fā)明的糖基橙皮素與以往品比，糠醛含量顯著地低，換言之，發(fā)現(xiàn)與以往品比糠醛含量顯著地低的是雜味顯著地降低的糖基橙皮素。本發(fā)明人等基于這些見(jiàn)解新穎地發(fā)現(xiàn)，糠醛含量可成為用于得到雜味顯著地降低的糖基橙皮素的指標(biāo)。
本發(fā)明人等基于上述一系列的見(jiàn)解，作為用于得到作為以往品的缺點(diǎn)的雜味顯著地降低的糖基橙皮素的指標(biāo)，關(guān)注了所述糖基橙皮素中所含的糠醛，作為用于得到此糠醛含量顯著地降低的糖基橙皮素的手段，通過(guò)將還原劑在該制造工序中使用，得到與以往品比雜味顯著地降低的糖基橙皮素、確立其制造方法以及用途，從而完成本發(fā)明。
即，本發(fā)明通過(guò)提供基本上不含糠醛的糖基橙皮素，解決了上述的課題。本說(shuō)明書(shū)中所說(shuō)的基本上不含糠醛是指，與以往品比，糠醛含量顯著地低的水平的糖基橙皮素。具體而言是指，由使用后述的實(shí)驗(yàn)1的“(1)糠醛的含量”所示的氣相層析儀質(zhì)量(GC/MS)分析裝置的分析方法(以下簡(jiǎn)寫(xiě)為“GC/MS分析法”)測(cè)定時(shí)，通常是不足200ppb(其中，1ppb是10億分之1)、適宜地不足100ppb、更適宜地不足50ppb、再者適宜地不足30ppb、還更適宜地不足20ppb、特別適宜地不足15ppb、再特別最適地不足10ppb。再者，本發(fā)明的糖基橙皮素之內(nèi)、糠醛含量降低至低于GC/MS分析法的檢測(cè)界限的是與以往品比雜味顯著地降低、同時(shí)著色也顯著地降低的極其高品質(zhì)的糖基橙皮素。但是，由于將本發(fā)明的糖基橙皮素在醫(yī)藥、精密機(jī)器等的領(lǐng)域中利用時(shí)，不必然額外要求使用最高純度的糖基橙皮素、在食品、嗜好品、化妝品、工業(yè)用原料及材料、飼料、餌料、衣料、雜貨(含日用品)、或者塑料制品等的領(lǐng)域中利用時(shí)，不必然必要最高純度的糖基橙皮素，所以沒(méi)必要使糠醛含量降低至檢測(cè)界限以下的水平或，也沒(méi)必要不含有糠醛。從而，本發(fā)明的糖基橙皮素基本上不含糠醛即可，只要可達(dá)成本發(fā)明的期望的目的，就也可含有與以往品比顯著地少的量、或者檢測(cè)界限以下的糠醛。
另外，本發(fā)明通過(guò)提供包括(A)調(diào)制含有橙皮苷及淀粉部分分解物的水溶液的工序、(B)使糖轉(zhuǎn)移酶作用于得到的水溶液而生成 含α-葡萄糖基橙皮苷的糖基橙皮素的工序、及(C)采集生成的糖基橙皮素的工序的糖基橙皮素的制造方法，將上述(A)乃至(C)的1或2以上的工序在還原劑的存在下實(shí)施，或向上述(A)乃至(C)的1或2以上的工序之前的始發(fā)原料及/或其后的結(jié)果物添加還原劑的糖基橙皮素的制造方法，解決了上述的課題。
再者，本發(fā)明通過(guò)提供含本發(fā)明的糖基橙皮素的、食品、嗜好品、化妝品、藥品、準(zhǔn)藥品、化學(xué)品、工業(yè)用原料及材料、飼料、餌料、衣料、雜貨(含日用品)、或者塑料制品，解決了上述的課題。
另外，本發(fā)明通過(guò)提供使糖基橙皮素含有物和還原劑接觸作為特征的糖基橙皮素含有物的雜味降低方法，解決了上述的課題。
【發(fā)明效果】
本發(fā)明涉及的糖基橙皮素，與以往品不同地，有雜味顯著地降低的優(yōu)良的特征。另外，由本發(fā)明的糖基橙皮素的制造方法或本發(fā)明的糖基橙皮素含有物的雜味降低方法實(shí)現(xiàn)可工業(yè)上大量并且穩(wěn)定地以高收率、而且容易并且廉價(jià)地提供與以往品比雜味顯著地降低的糖基橙皮素的優(yōu)良實(shí)益。從而，由本發(fā)明的糖基橙皮素還可適宜地應(yīng)用于以往品由于其雜味，或者雜味和著色、再者由于臭氣而使用困難或有障礙的物品。而且，本發(fā)明的糖基橙皮素與以往品比，即使在加熱時(shí)，雜味也顯著地降低，同時(shí)著色或臭氣也顯著地降低，所以可為經(jīng)加熱工序制造的物品，實(shí)現(xiàn)可提供更高品質(zhì)的優(yōu)良的實(shí)益。
【實(shí)施方式】
以下，盡管對(duì)于本發(fā)明的實(shí)施方式進(jìn)行說(shuō)明，但它們終究是在實(shí)施本發(fā)明上優(yōu)選的實(shí)施方式的例示，本發(fā)明不限于這些實(shí)施方式。
本發(fā)明涉及的糖基橙皮素盡管在以糖基橙皮素作為主成分方面與以往品有共同點(diǎn)，但為與以往品比雜味顯著地降低的新穎的糖基橙皮素。
即，本發(fā)明中所說(shuō)的糖基橙皮素是指含作為有橙皮素骨架的化合物的(1)α-糖基橙皮苷(α-葡萄糖基橙皮苷等)及(2)橙皮苷及7-O-β- 葡萄糖基橙皮素的一方或雙方作為主成分的組合物、即，糖基橙皮素混合物，此外，含被認(rèn)為來(lái)源于其制造原料，或在其制造工序中派生生成的(3)柚皮蕓香苷、香葉木苷、新枳屬苷、葡萄糖基柚皮蕓香苷等的類(lèi)黃酮、及(4)鹽類(lèi)等的微量成分。本發(fā)明的糖基橙皮素中的上述(1)及(2)的成分的合計(jì)比例(質(zhì)量％)(以下，如無(wú)特別說(shuō)明，也簡(jiǎn)稱(chēng)為“糖基橙皮素含量”)通常是每干燥固體物90質(zhì)量％以上且不足100質(zhì)量％、適宜地93質(zhì)量％以上且不足100質(zhì)量％、更適宜地95質(zhì)量％以上且不足100質(zhì)量％、再者97質(zhì)量％以上且不足100質(zhì)量％、98質(zhì)量％以上且不足100質(zhì)量％(以下，在本申請(qǐng)說(shuō)明書(shū)中，如無(wú)特別說(shuō)明，將“質(zhì)量％”簡(jiǎn)寫(xiě)為“％”)。
將本發(fā)明的糖基橙皮素在醫(yī)藥、精密機(jī)器等的領(lǐng)域中利用時(shí)，不必然額外要求最高純度的糖基橙皮素，即，即使是比較低純度的糖基橙皮素，在不發(fā)生特別的障礙的食品、嗜好品、化妝品、工業(yè)用原料及材料、飼料、餌料、衣料、雜貨(含日用品)、或者塑料制品等的領(lǐng)域中利用時(shí)，考慮它們的最終形態(tài)，為了更廉價(jià)地提供這些物品，本發(fā)明的糖基橙皮素的純度、即，每干燥固體物的糖基橙皮素含量的上限，通?？稍诠I(yè)上比較大量、廉價(jià)并且容易地提供的99％、為了更廉價(jià)地提供可低至98％的含量，為了再更廉價(jià)地提供可低至97％以下的含量。但是，在本發(fā)明的糖基橙皮素的每干燥固體物的糖基橙皮素含量低時(shí)，與高含量的比，必然會(huì)大量使用，結(jié)果，操作變得煩瑣，處理性變差，糖基橙皮素含量的下限，通常優(yōu)選是90％以上、適宜地93％以上、更適宜地95％以上、更適宜地97質(zhì)量％以上。
作為本發(fā)明的糖基橙皮素的適宜的實(shí)施方式，在糖基橙皮素是α-葡萄糖基橙皮苷等的α-糖基橙皮苷時(shí)，可例示每干燥固體物的α-糖基橙皮苷含量是50％以上且不足100％。
另外，當(dāng)將本發(fā)明的糖基橙皮素作為α-葡萄糖基橙皮苷的給源提供時(shí)，本發(fā)明的糖基橙皮素中的α-葡萄糖基橙皮苷含量的上限在更廉價(jià)地提供本發(fā)明的糖基橙皮素時(shí)，通常是可在工業(yè)上比較大量、廉價(jià)并且容易地提供的90％以下，更廉價(jià)地85％以下，再更廉價(jià)地可為80％以下的低含量。另外，α-葡萄糖基橙皮苷含量的下限，由與上述糖基橙皮素含量同樣的理由，通常優(yōu)選是60％以上、65％以上、或者70％以上。特別地，作為本發(fā)明的糖基橙皮素的適宜的實(shí)施方式可例示每干燥固體物含有60～90％的α-葡萄糖基橙皮苷。
以上述的本發(fā)明的糖基橙皮素的糖基橙皮素含量可使用在本領(lǐng)域中廣泛使用的測(cè)定機(jī)器求出。如顯示其一例，采樣本發(fā)明的糖基橙皮素的一部分，由純化水例如，稀釋或溶解至0.1w/w％，由市售的0.45μm膜濾器過(guò)濾后，將濾液供于由下述條件的高效液相層析(以下稱(chēng)為“HPLC”。)分析，將試劑橙皮苷(和光純藥工業(yè)株式會(huì)社銷(xiāo)售)作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)使用，基于UV280nm處的層析譜中出現(xiàn)的各峰的面積和對(duì)應(yīng)于各峰的橙皮苷、α-糖基橙皮苷(α-葡萄糖基橙皮苷等)、及7-O-β-葡萄糖基橙皮素等的各糖基橙皮素的分子量算出。如果顯示糖基橙皮素的定量的概要?jiǎng)t如下。
<HPLC分析條件>
·HPLC裝置：“LC-20AD”(株式會(huì)社島津制作所制)
·脫氣器：“DGU-20A3”(株式會(huì)社島津制作所制)
·柱：“CAPCELL PAK C18UG 120”(株式會(huì)社資生堂制)
·樣品注入量：10μl
·溶離液：水/乙腈/醋酸(80/20/0.01(容積比))
·流速：0.7ml/分
·溫度：40℃
·檢測(cè)：UV檢測(cè)器“SPD-20A”(株式會(huì)社島津制作所制)
·測(cè)定波長(zhǎng)：280nm
·數(shù)據(jù)處理裝置：“ChromatoPacC-R7A”(株式會(huì)社島津制作所制)
<糖基橙皮素的定量>
(1)橙皮苷含量：用HPLC分析，基于其峰面積與指定濃度的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的試劑橙皮苷(和光純藥工業(yè)株式會(huì)社銷(xiāo)售)的峰面積的比算出。
(2)α-葡萄糖基橙皮苷含量：用HPLC分析，基于其峰面積與指定濃度的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的試劑橙皮苷(和光純藥工業(yè)株式會(huì)社銷(xiāo)售)的峰面積的比和α-葡萄糖基橙皮苷和橙皮苷的分子量比算出。
(3)7-O-β-葡萄糖基橙皮素含量：用HPLC分析，基于其峰面積與指定濃度的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的試劑橙皮苷(和光純藥工業(yè)株式會(huì)社銷(xiāo)售)的峰面積的比和7-O-β-葡萄糖基橙皮素與橙皮苷的分子量比算出。
(4)此外的糖基橙皮素含量：用HPLC分析，基于其峰面積與指定濃度的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的試劑橙皮苷(和光純藥工業(yè)株式會(huì)社銷(xiāo)售)的峰面積的比和此外的糖基橙皮素與橙皮苷的分子量比算出。
本發(fā)明的糖基橙皮素中的，每干燥固體物的糖基橙皮素含量是指相對(duì)于作為樣品使用的本發(fā)明的糖基橙皮素的以無(wú)水物換算的質(zhì)量的，在上述(1)乃至(4)中求出的總糖基橙皮素含量的比例(％)。
本發(fā)明的糖基橙皮素是與以往品比雜味顯著地降低的糖基橙皮素，是以糠醛含量作為指標(biāo)得到的，基本上不含糠醛的糖基橙皮素。換言之，本發(fā)明的糖基橙皮素中的糠醛含量是用于得到雜味顯著地降低的糖基橙皮素的指標(biāo)，在本說(shuō)明書(shū)中公開(kāi)了，制造以此糠醛含量作為指標(biāo)而雜味顯著地降低的糖基橙皮素的方法。不言自明，糠醛含量越低，越是雜味顯著地降低的糖基橙皮素。
再者，本發(fā)明人等在對(duì)于本發(fā)明的糖基橙皮素各種探討的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的糖基橙皮素之內(nèi)、基本上不含糠醛，同時(shí)基本上不含作為苯酚醚的一種的4-乙烯基苯甲醚(別名：4-甲氧基苯乙烯)(以下簡(jiǎn)寫(xiě)為“4-VA”)在本發(fā)明的糖基橙皮素之中，雜味自不必說(shuō)，著色也顯著地降低。4-VA被推定為是因本發(fā)明的糖基橙皮素的制造原料而生成的成分，本發(fā)明的糖基橙皮素中的含量通常每干燥固體物不足30ppb，4-VA含量是，在糠醛含量不足200ppb的中，通常處于與糠醛含量并行的關(guān)系。再者，基本上不含4-VA是指，與糠醛的情況同樣、與以往品比，4-VA含量顯著地低的水平。更具體而言是指，本發(fā)明的糖基橙皮素中的4-VA含量，當(dāng)由使用后述的實(shí)驗(yàn)1的“(2)4-VA的含量”所示的GC/MS分析裝置的分析方法測(cè)定時(shí)，通常是，每干燥 固體物不足30ppb、適宜地不足15ppb、更適宜地不足10ppb、再者適宜地不足5ppb、更還適宜地不足3ppb、更還適宜地不足2ppb。
再者，本發(fā)明的糖基橙皮素有使作為以往品的缺點(diǎn)的雜味顯著地降低的優(yōu)良特征。即，本發(fā)明的糖基橙皮素有不僅本身與以往品比雜味顯著地降低，將其作為水溶液加熱時(shí)也與以往品比雜味顯著地降低的優(yōu)良特征。本發(fā)明的糖基橙皮素的雜味可由使用后述的“實(shí)驗(yàn)2：感官試驗(yàn)”所示的評(píng)委的感官試驗(yàn)研究。
另外，本發(fā)明的糖基橙皮素有與以往品比著色(以下有時(shí)稱(chēng)為“著色度”)也顯著地降低的優(yōu)良特征。本發(fā)明的糖基橙皮素的著色度由后述的實(shí)驗(yàn)1的“(2)色調(diào)和著色度”所示的方法測(cè)定，顯示其概要?jiǎng)t如下。即，將含有指定濃度本發(fā)明的糖基橙皮素的水溶液在密閉容器中加熱處理后，肉眼觀察處理液的色調(diào)，同時(shí)由分光光度計(jì)測(cè)定在波長(zhǎng)420nm處的吸光度(OD420nm)及波長(zhǎng)720nm處的吸光度(OD720nm)，求出兩波長(zhǎng)處的吸光度的差(OD420nm-OD720nm)，將該測(cè)定值作為著色度。作為本發(fā)明的糖基橙皮素的適宜的實(shí)施方式，可例示上述吸光度的差不足0.24、適宜地0.20以下，更適宜地0.17以下，再更適宜地0以上0.15以下。再者，在本測(cè)定法中，加熱所述糖基橙皮素的水溶液，鑒于以往品有由加熱而著色度顯著地增大的缺點(diǎn)，以高精確度評(píng)價(jià)本發(fā)明的糖基橙皮素自體的著色及由加熱的著色的程度的目的設(shè)定。
再者，作為本發(fā)明的糖基橙皮素的適宜的實(shí)施方式，可例示作為1w/w％水溶液，在密閉容器中于100℃加熱30分鐘后，冷卻為20℃時(shí)的電傳導(dǎo)度不足10μS/cm、適宜地不足8μS/cm、更適宜地不足6μS/cm、更適宜地超0μS/cm不足4.5μS/cm的糖基橙皮素。電傳導(dǎo)度可由廣泛使用的電傳導(dǎo)度計(jì)測(cè)定。以往品通常顯示超10μS/cm的電傳導(dǎo)度，所以本發(fā)明的糖基橙皮素有與以往品比，離子性化合物含量少的特征。再者，在本測(cè)定法中，加熱本發(fā)明的糖基橙皮素的水溶液的理由鑒于上述著色度的行為而設(shè)定。
另外，作為本發(fā)明的糖基橙皮素的適宜的實(shí)施方式，可例示作為 左右所述糖基橙皮素的電傳導(dǎo)度的離子性化合物的鈣、鉀、鎂、及鈉含量與以往品比低。本發(fā)明的糖基橙皮素中的鈣、鉀、鎂、及鈉含量，例如，可用在本領(lǐng)域中廣泛使用的高頻率衍生結(jié)合等離子體發(fā)光分光分析法測(cè)定。作為本發(fā)明的糖基橙皮素，當(dāng)用上述分析法測(cè)定時(shí)，可例示所述糖基橙皮素的每干燥固體物的鈣、鉀、鎂、及鈉含量各自是1ppm以下，0.1ppm以下，0.2ppm以下，及0.4ppm以下。更適宜地可例示鈣、鉀、鎂、及鈉含量各自是0.6ppm以下，0.06ppm以下，0.1ppm以下，及0.3ppm以下。再者適宜地可例示鈣、鉀、鎂、及鈉含量各自是0ppm以上0.5ppm以下，0ppm以上0.05ppm以下，0ppm以上0.08ppm以下，及0ppm以上0.2ppm以下。
如此，本發(fā)明的糖基橙皮素與以往品比，電傳導(dǎo)度降低，鈣、鉀、鎂、及鈉等的金屬元素(金屬離子)的濃度降低，所以判斷鹽類(lèi)、或者，此外的離子性成分等的生理學(xué)容許性的離子性化合物含量降低。
接下來(lái)，對(duì)于本發(fā)明涉及的糖基橙皮素的制造方法和糖基橙皮素含有物的雜味降低方法依次進(jìn)行說(shuō)明。
本發(fā)明的制造方法是包括(A)調(diào)制含有橙皮苷及淀粉部分分解物的水溶液的工序、(B)使糖轉(zhuǎn)移酶作用于得到的水溶液而生成含α-葡萄糖基橙皮苷的糖基橙皮素的工序、及(C)采集生成的糖基橙皮素的工序的糖基橙皮素的制造方法，其為通過(guò)將上述(A)乃至(C)的1或2以上的工序在還原劑的存在下實(shí)施，或向上述(A)乃至(C)的1或2以上的工序之前的始發(fā)原料及/或上述工序后的結(jié)果物添加還原劑來(lái)制造糖基橙皮素的方法。以下，對(duì)于在所述制造方法中使用的制造原料、酶反應(yīng)(糖轉(zhuǎn)移反應(yīng)等)、還原劑處理、及純化方法依次進(jìn)行說(shuō)明。
(制造原料)
作為制造原料的橙皮苷，在以往品的制造中使用的橙皮苷的均可使用，高純度的橙皮苷當(dāng)然不用說(shuō)，可適宜組合使用含有比較低純度的橙皮苷的植物來(lái)源的提取物、榨汁液、或者其部分純化物等的1種或2種以上。作為含有上述橙皮苷的植物，例如，可例示蜜柑類(lèi)、橙 類(lèi)、香酸柑橘類(lèi)、雜柑橘類(lèi)、桔柑類(lèi)、紅橘類(lèi)、文旦類(lèi)、金柑類(lèi)、酸橙類(lèi)等的屬于蜜柑科蜜柑屬的柑橘類(lèi)，作為含有橙皮苷的部位，可例示它們的果實(shí)、果皮、種子、未成熟果等。
作為制造原料的淀粉部分分解物，在使后述的糖轉(zhuǎn)移酶作用之時(shí)，只要可向橙皮苷糖轉(zhuǎn)移，生成作為糖基橙皮素的α-糖基橙皮苷即可，例如，適宜選擇直鏈淀粉、糊精、環(huán)糊精、麥芽寡糖等的淀粉部分分解物、再者，選自液化淀粉、糊化淀粉等的1種或2種以上的淀粉部分分解物。
另外，在后述的酶反應(yīng)中使用的淀粉部分分解物的使用量使用相對(duì)于原料的橙皮苷的質(zhì)量，選自通常約0.1～約150倍、適宜地約1～約100倍、更適宜地約2～約50倍的范圍的量。在酶反應(yīng)中，將淀粉部分分解物來(lái)源的糖向橙皮苷糖轉(zhuǎn)移，使α-糖基橙皮苷有效率地生成，而且，為了酶反應(yīng)系統(tǒng)中盡可能不殘留未反應(yīng)橙皮苷，優(yōu)選使用相對(duì)于橙皮苷過(guò)量的淀粉部分分解物。理由是，在后述的純化工序中，淀粉部分分解物及來(lái)源于其的糖類(lèi)等可與α-糖基橙皮苷比較容易地分離，與此相對(duì)，橙皮苷與α-糖基橙皮苷一起行為，難以與α-糖基橙皮苷分離，所以水溶性極低，如果未反應(yīng)的橙皮苷的殘留量多，則會(huì)發(fā)生作為整體得到的糖基橙皮素的水溶性變低的不適情況。
(酶反應(yīng))
本發(fā)明中所說(shuō)的酶反應(yīng)是指使糖轉(zhuǎn)移酶作用于作為上述制造原料的橙皮苷和淀粉部分分解物而使α-糖基橙皮苷生成的酶反應(yīng)。
作為使用酶反應(yīng)的糖轉(zhuǎn)移酶，可例示α-葡萄糖苷酶(EC 3.2.1.20)、環(huán)麥芽糖糊精－葡聚糖轉(zhuǎn)移酶(EC 2.4.1.19、以下也稱(chēng)為“CGTase”)、α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)等。作為α-葡萄糖苷酶，將豬的肝臟、蕎麥的種子等的動(dòng)植物組織來(lái)源的酶、或者屬于毛霉(Mucor)屬、青霉(Penicillium)屬、黑曲霉(Aspergillus niger)等的曲霉(Aspergillus)屬等的真菌培養(yǎng)物來(lái)源的、或者屬于酵母(Saccharomyces)屬等的酵母等的微生物在營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基中培養(yǎng)而得到的培養(yǎng)物來(lái)源，但作為CGTase，例如，可例示芽孢桿菌(Bacillus)屬、土芽孢桿菌(Geobacillus)屬、克雷伯菌(Klebsiella)屬、類(lèi)芽孢桿菌(Paenibacillus)屬、熱球菌(Thermococcus)屬、嗜熱厭氧桿菌(Thermoanaerobacter)屬、短桿菌(Brevibacterium)屬、火球菌(Pyrococcus)屬、短芽孢桿菌(Brevibacillus)屬、及酵母(Saccharomyces)屬來(lái)源的。作為α-淀粉酶，可適宜組合使用屬于土芽孢桿菌(Geobacillus)屬等的細(xì)菌、或者屬于黑曲霉(Aspergillus niger)等的曲霉(Aspergillus)屬等的真菌培養(yǎng)物來(lái)源的1種或2種以上的。這些糖轉(zhuǎn)移酶，只要可達(dá)成本發(fā)明的目的，就可采用天然或基因重組型的任何，在有市售品時(shí)，也可適宜使用它們。另外，上述糖轉(zhuǎn)移酶均沒(méi)必要必然純化而使用，通常，只要即使是粗酶也可達(dá)成本發(fā)明的目的，就均可使用。
另外，當(dāng)使用上述天然或基因重組型的糖轉(zhuǎn)移酶時(shí)，通過(guò)采用對(duì)于它們糖轉(zhuǎn)移酶適宜的淀粉部分分解物，可提高α-糖基橙皮苷的生成率。
在使用上述α-葡萄糖苷酶時(shí)，麥芽糖、麥芽三糖、麥芽四糖等的麥芽寡糖、或者右旋糖－當(dāng)量(DE)約10～約70的淀粉部分分解物，但在使用CGTase時(shí)，α-、β-或γ-環(huán)糊精或DE1以下的淀粉糊化物至DE約60的淀粉部分分解物，再者，在使用α-淀粉酶時(shí)，適宜地使用DE1以下的淀粉糊化物至DE約30的糊精等的淀粉部分分解物。
作為酶反應(yīng)時(shí)的含有橙皮苷的溶液，適宜地使用以?xún)?yōu)選盡可能高濃度含有橙皮苷，例如，使橙皮苷呈懸浮狀或高溫溶解于水等的溶劑、或者，使用堿劑以超越pH7.0的堿性pH溶解的溶液狀高濃度含有橙皮苷的溶液。作為堿劑，可適宜使用約0.1～約1.0N的氫氧化鈉水溶液、氫氧化鉀水溶液、碳酸鈉水溶液、氫氧化鈣水溶液、氨水等的1種或2種以上的強(qiáng)堿性水溶液。
將橙皮苷使用堿劑以溶液狀使用時(shí)的橙皮苷濃度通常是約0.005w/v％以上、優(yōu)選為，約0.05～10w/v％、更優(yōu)選為，約0.5～約10w/v％、更更優(yōu)選是約1～約10w/v％。
一方面，在不使用堿劑而以懸浮狀使用橙皮苷時(shí)，使橙皮苷懸浮 于水等的溶劑而作為懸浮狀橙皮苷，此時(shí)的橙皮苷濃度通常設(shè)為約0.1～約2w/v％、更適宜地約0.2～約2w/v％、更適宜地約0.3～約2w/v％。
盡管使糖轉(zhuǎn)移酶作用于橙皮苷和淀粉部分分解物之時(shí)的溫度和時(shí)間依賴(lài)于酶反應(yīng)中使用的橙皮苷和淀粉部分分解物的濃度、及糖轉(zhuǎn)移酶的種類(lèi)、最適溫度、最適pH、或者作用量等而變化，通常設(shè)為約50～約100℃、適宜地約60～約90℃、更適宜地約70～約90℃、及約5～約100小時(shí)、適宜地約10～約80小時(shí)、更適宜地約20～約70小時(shí)的范圍。
另外，盡管使糖轉(zhuǎn)移酶作用于高濃度含有橙皮苷的堿性溶液之時(shí)的pH和溫度依賴(lài)于糖轉(zhuǎn)移酶的種類(lèi)、最適pH、最適溫度、或者作用量、及橙皮苷的濃度等而變化，但設(shè)為糖轉(zhuǎn)移酶可作用的盡可能高pH、高溫、具體而言，pH約7.5～約10、適宜地pH約8～約10、及pH約40～約80℃、更適宜地pH約50～約80℃的范圍再者，堿性溶液中的橙皮苷由于容易引起分解，為防止這個(gè)，盡可能在遮光下、優(yōu)選在厭氧下保持橙皮苷。
再者，盡管使糖轉(zhuǎn)移酶作用于懸浮狀橙皮苷之時(shí)的pH依賴(lài)于糖轉(zhuǎn)移酶的種類(lèi)、最適溫度、最適pH、或者作用量、及懸浮狀橙皮苷的濃度等而變化，但通常設(shè)為pH約4～約7、適宜地pH約4.5～約6.5的范圍。
另外，若有進(jìn)一步需要，為提高酶反應(yīng)前的橙皮苷的溶解度，使向橙皮苷的糖轉(zhuǎn)移反應(yīng)變得容易，可隨意向高含有橙皮苷的溶液、特別地，向高含有橙皮苷的水溶液適量共存與水相溶性高的有機(jī)溶劑、例如，使甲醇、乙醇、n-丙醇、異-丙醇、n-丁醇、丙酮醇、丙酮等的低級(jí)醇、低級(jí)酮等的1種或2種以上。
酶量和反應(yīng)時(shí)間密切相關(guān)，通常，自經(jīng)濟(jì)性的觀點(diǎn)來(lái)看，根據(jù)使用以約5～約150小時(shí)、適宜地約10～約100小時(shí)、更適宜地約20～約80小時(shí)結(jié)束酶反應(yīng)的酶量的糖轉(zhuǎn)移酶的種類(lèi)適宜設(shè)定即可。另外，可適宜實(shí)施使用固定化的糖轉(zhuǎn)移酶以批式重復(fù)反應(yīng)，或也可以連續(xù)式 反應(yīng)。
在上述糖轉(zhuǎn)移酶反應(yīng)后得到的含有α-糖基橙皮苷和橙皮苷的酶反應(yīng)液，根據(jù)需要，直接，或者，由多孔性合成吸附樹(shù)脂純化后，由葡萄糖淀粉酶(EC 3.2.1.3)、或者β-淀粉酶(EC 3.2.1.2)等的淀粉酶部分水解，可使α-糖基橙皮苷的α-D-葡萄糖基的數(shù)降低。例如，當(dāng)作用葡萄糖淀粉酶時(shí)，可水解α-麥芽糖基橙皮苷以上的高分子，使葡萄糖生成的同時(shí)使α-葡萄糖基橙皮苷生成、蓄積。另外，當(dāng)作用β-淀粉酶時(shí)，可水解α-麥芽三糖基橙皮苷以上的高分子，使麥芽糖生成的同時(shí)，使含α-葡萄糖基橙皮苷和α-麥芽糖基橙皮苷的混合物生成、蓄積。
一方面，可通過(guò)使葡萄糖淀粉酶和α-L-鼠李糖苷酶同時(shí)或者其任一方先依次作用于糖轉(zhuǎn)移酶反應(yīng)后得到的含有α-糖基橙皮苷和橙皮苷的酶反應(yīng)液，使α-糖基橙皮苷的蕓香糖結(jié)構(gòu)中的等摩爾以上α-鍵合的葡萄糖的葡萄糖脫離，將α-糖基橙皮苷變換為α-葡萄糖基橙皮苷而提高α-葡萄糖基橙皮苷含量的同時(shí)，通過(guò)將水溶性低的橙皮苷轉(zhuǎn)變?yōu)樗苄愿叩?-O-β-單葡萄糖基橙皮素而作為水溶性高的糖基橙皮素。
與糖轉(zhuǎn)移酶同樣、對(duì)于葡萄糖淀粉酶和α-L-鼠李糖苷酶，也與它們酶量和酶反應(yīng)時(shí)間有密切的關(guān)系，通常，自經(jīng)濟(jì)性的觀點(diǎn)來(lái)看，根據(jù)使用以約5～約150小時(shí)、適宜地約10～約100小時(shí)、更適宜地約20～約80小時(shí)結(jié)束酶反應(yīng)的酶量的酶的種類(lèi)適宜設(shè)定即可。另外，可適宜實(shí)施使用固定化的α-L-鼠李糖苷酶以批式重復(fù)反應(yīng)，或也可以連續(xù)式不中途停止地反應(yīng)。
(還原劑處理)
還原劑處理是指使用還原劑使糖基橙皮素的雜味顯著地降低的處理，是指將后述的還原劑(A)調(diào)制含有橙皮苷及淀粉部分分解物的水溶液的工序、(B)使糖轉(zhuǎn)移酶作用于得到的水溶液而生成含α-葡萄糖基橙皮苷的糖基橙皮素的工序、及(C)采集生成的糖基橙皮素的工序的1或2以上的工序中使用，或向上述(A)乃至(C)的1或2以上的工序之前的始發(fā)原料及/或上述工序后的結(jié)果物添加其指定量。
還原劑只要可達(dá)成本發(fā)明的期望的目的，就無(wú)特別的限制，在本領(lǐng)域中廣泛使用的無(wú)機(jī)系及有機(jī)系的還原劑均可使用。但是，由于本發(fā)明的糖基橙皮素主要以適用于人作為前提，所以?xún)?yōu)選使用安全性高的、穩(wěn)定性、處理性的優(yōu)良的還原劑。
作為適宜地使用的還原劑的具體，例如，可例示羥基胺類(lèi)、肼系化合物、二氧化氯、氫、氫化合物(硫化氫、硼氫化鈉、氫化鋁鋰、氫化鋁鉀等)、硫化合物(二氧化硫、二氧化硫脲、硫代硫酸鹽、亞硫酸鹽、硫酸鐵、過(guò)硫酸鈉、過(guò)硫酸鉀、過(guò)硫酸銨、亞硫酸鈣等)、亞硝酸鹽、氯化錫、氯化鐵、碘化鉀、過(guò)氧化氫、稀釋過(guò)氧化苯甲酰、過(guò)氧化氫、亞氯酸鈉等亞氯酸鹽等的無(wú)機(jī)系還原劑，又可例示苯酚類(lèi)、胺類(lèi)、醌類(lèi)、聚胺類(lèi)、蟻酸及其鹽類(lèi)、草酸及其鹽類(lèi)、檸檬酸及其鹽類(lèi)、二氧化硫脲、還原性糖質(zhì)、過(guò)氧化苯甲酰、過(guò)硫酸苯甲酰、氫化二異丁基鋁、兒茶素、槲皮素、生長(zhǎng)酚、沒(méi)食子酸及其酯、乙二胺四醋酸(EDTA)、二硫蘇糖醇、還原型谷胱甘肽、及多酚類(lèi)等的有機(jī)系還原劑。上述無(wú)機(jī)系及有機(jī)系的還原劑可適宜組合使用它們的1種或2種以上。
在上述無(wú)機(jī)系及有機(jī)系的還原劑之內(nèi)，由于前者的還原劑可提供以往品原本有的雜味顯著地降低、異臭也降低的高品質(zhì)的糖基橙皮素，所以更可適宜地使用。再者，雖然其理由不明，但推測(cè)如下。即認(rèn)為是否是由于有機(jī)系還原劑是有機(jī)物，本身有成為雜味或著色的原因的擔(dān)憂，有機(jī)系還原劑或其分解物在本發(fā)明的糖基橙皮素的制造工序中被不完全地除去而殘留，它們給糖基橙皮素的品質(zhì)負(fù)面的影響。
在無(wú)機(jī)系還原劑之內(nèi)、由SO2-離子、HSO3-離子、SO32-離子、S2O42-離子、或者S2O72-離子和金屬離子構(gòu)成的，所謂、亞硫酸鹽(也稱(chēng)為亞硫酸鹽類(lèi)。)在安全性、穩(wěn)定性、及處理性的方面優(yōu)良，所以是可在本發(fā)明中更適宜地使用的還原劑。特別地，作為無(wú)機(jī)系還原劑的亞硫酸鈉、亞硫酸鉀、亞硫酸氫鈉、次硫酸鈉、次硫酸鉀、焦亞硫酸鈉、焦亞硫酸鉀、偏亞硫酸鈉、偏亞硫酸鉀、偏亞硫酸氫鈉、及偏亞硫酸氫鉀等的亞硫酸鹽可在本發(fā)明中最適宜地使用。
另外，雖然上述還原劑是對(duì)于糖基橙皮素的制造工序中的1工序、或者該工序之前的始發(fā)原料及/或其后的結(jié)果物適用，但當(dāng)將其適量適宜小分使用于2個(gè)以上的工序、或者它們工序之前的始發(fā)原料及/或其后的結(jié)果物時(shí)，可以更少的量的還原劑有效達(dá)成本發(fā)明的期望的目的。
作為上述還原劑的添加量，以合計(jì)，在上述(A)乃至(C)的各自的工序中，使用相對(duì)于在上述(B)酶反應(yīng)后(當(dāng)在糖轉(zhuǎn)移酶以外使用其他酶時(shí)表示它們?nèi)拿阜磻?yīng)結(jié)束后)得到的酶反應(yīng)液質(zhì)量，選自相當(dāng)于通常0.001％以上、適宜地是0.01～3％、更適宜地是0.01～1％、再者適宜地是0.01～0.5％的范圍的量。再者，在上述(C)的工序前添加還原劑時(shí)，通常，殘留的還原劑被用純化工序基本上除去，所以在作為最終制品得到的糖基橙皮素中基本上檢測(cè)不到。上述全工序中添加的還原劑的量相對(duì)于在酶反應(yīng)后得到的酶反應(yīng)液質(zhì)量，通常經(jīng)1次乃至分成多次添加至合計(jì)成為0.001％以上、適宜地0.01％以上、更適宜地0.01～1％的范圍。添加時(shí)的溫度通常是在上述(A)乃至(C)的工序中采用的溫度，另行也可為高于該溫度的溫度。具體而言，可例示室溫以上的溫度、適宜地50℃以上、更適宜地70℃以上、更適宜地80℃以上、再者適宜地90～120℃。
(純化方法)
如此得到的酶反應(yīng)溶液可直接作為本發(fā)明的糖基橙皮素使用。但是，通常，酶反應(yīng)溶液可通過(guò)適宜組合使用在本領(lǐng)域中公知的區(qū)分方法、過(guò)濾方法、多孔性合成樹(shù)脂等的純化方法、濃縮方法、噴霧方法、干燥方法等的1種或2種以上的手段，作為處于液狀、固狀、粉末狀等的形態(tài)的糖基橙皮素。
作為上述多孔性合成樹(shù)脂，是指多孔性且有廣大的吸附表面積，并且非離子性的苯乙烯-二乙烯基苯聚合物、苯酚-福爾馬林樹(shù)脂、丙烯酸樹(shù)脂、甲基丙烯酸樹(shù)脂等的合成樹(shù)脂，例如，可例示市售的Rohm&Haas公司制的商品名：AmberliteXAD-1、AmberliteXAD-2、AmberliteXAD-4、AmberliteXAD-7、AmberliteXAD-8、AmberliteXAD-11、及AmberliteXAD-12等的樹(shù)脂；三菱化學(xué)株式會(huì) 社制的商品名：DIAIONHP-10、DIAIONHP-20、DIAIONHP-30、DIAIONHP-40、DIAIONHP-50、DIAIONHP-2MG、SEPABEADSSP70、SEPABEADSSP207、SEPABEADSSP700、SEPABEADSSP800等的樹(shù)脂；及IMACTI公司制的商品名：IMACTISyn-42、IMACTISyn-44、及IMACTISyn-46等的樹(shù)脂。
當(dāng)由使用多孔性合成吸附劑的純化方法時(shí)，使酶反應(yīng)液通過(guò)填充了多孔性合成吸附劑的柱，則糖基橙皮素吸附于多孔性合成吸附劑，與此相對(duì)，殘留的淀粉部分分解物或水溶性糖類(lèi)等不吸附而直接自柱流出。此時(shí)、作為糖基橙皮素的橙皮苷、7-O-β-葡萄糖基橙皮素、及α-糖基橙皮苷通常一起行為，無(wú)法由多孔性合成吸附劑個(gè)別地分離它們。但是，盡管操作變得煩瑣，收率降低，但將選擇性吸附到填充了多孔性合成吸附劑的柱的糖基橙皮素用稀堿、水等的溶劑清洗后，使通過(guò)比較少量的有機(jī)溶劑或有機(jī)溶劑與水的混合液、例如，甲醇水溶液、乙醇水溶液等，則α-糖基橙皮苷最初自柱溶出，接下來(lái)，通過(guò)增加通液量或提高有機(jī)溶劑濃度而未反應(yīng)橙皮苷溶出。將由此得到的含有糖基橙皮素的溶出液蒸餾處理，餾去有機(jī)溶劑后，濃縮至期望的濃度，則得到橙皮苷含量降低的本發(fā)明的糖基橙皮素。再者，由上述有機(jī)溶劑的糖基橙皮素的溶出操作也同時(shí)成為多孔性合成吸附劑的再生操作，從而有使使用的多孔性合成吸附劑的重復(fù)使用成為可能的益處。
另外，在酶反應(yīng)結(jié)束后至使酶反應(yīng)液接觸多孔性合成吸附劑之間，例如，可通過(guò)組合將對(duì)反應(yīng)液加溫而發(fā)生的不溶物過(guò)濾除去，或用硅酸鋁酸鎂、鋁酸鎂等處理而吸附除去反應(yīng)液中的蛋白性物質(zhì)等，或用強(qiáng)酸性離子交換樹(shù)脂(H型)、中堿性或弱堿性離子交換樹(shù)脂(OH型)等處理而脫鹽等的純化方法來(lái)提高糖基橙皮素含量，制造液狀的本發(fā)明的糖基橙皮素。
再者，也可隨意將上述液狀的糖基橙皮素由公知的干燥方法干燥而粉末化而作為粉末狀的糖基橙皮素。
如此，可制造作為以往品的缺點(diǎn)的特有的雜味有效顯著地降低的糖基橙皮素。另一方面，根據(jù)本發(fā)明人等確認(rèn)，未進(jìn)行上述還原劑處 理的以往品特有的雜味如果僅適用上述純化方法則基本上不變化。即，在以往品的制造工序中廣泛使用的，例如，使用上述多孔性合成吸附劑的純化方法不僅是淀粉部分分解物或水溶性糖類(lèi)，有也可同時(shí)除去水溶性的鹽類(lèi)等的混雜物的益處，但無(wú)論如何驅(qū)使這樣的純化方法，也難以顯著地降低以往品特有的雜味。作為推定的理由認(rèn)為，是否是糖基橙皮素中所含的雜味的原因物質(zhì)的向多孔性合成吸附劑的吸脫離的行為與糖基橙皮素同樣，從而無(wú)法與糖基橙皮素分離。
另外，本發(fā)明的糖基橙皮素與以往品比，雜味顯著地降低，電傳導(dǎo)度也低的，與電傳導(dǎo)度相關(guān)的離子性化合物含量降低。再者，作為離子性化合物，例如，可舉出作為原材料的橙皮苷中原本就含的柚皮蕓香苷、香葉木苷、新枳屬苷、或者，作為酶反應(yīng)生成物的葡萄糖基柚皮蕓香苷、葡萄糖基新枳屬苷等的化合物或其分解物、或者，與其分解物有密切的關(guān)聯(lián)性的化合物、再者被認(rèn)為源于糖基橙皮素的制造原料，或者在該制造工序中派生生成的、在本發(fā)明中作為指標(biāo)的糠醛為代表，糠基醇、及羥甲基糠醛等的糠醛類(lèi)或其鹽類(lèi)等之外、在溶液狀態(tài)下使鈣、鉀、鎂、及鈉等的金屬的陽(yáng)離子游離的化合物等。再者，上述柚皮蕓香苷、香葉木苷、新枳屬苷、葡萄糖基柚皮蕓香苷、葡萄糖基新枳屬苷等的成分通常是微量含在本發(fā)明的糖基橙皮素中。
如上所述，糠醛含量顯著地降低的本發(fā)明的糖基橙皮素是與以往品比雜味顯著地降低的高品質(zhì)的糖基橙皮素。
雖然由本發(fā)明的糖基橙皮素的制造方法得到雜味顯著地降低的糖基橙皮素的機(jī)制不明，但推定則如下。
(1)在制造本發(fā)明的糖基橙皮素時(shí)，來(lái)源于其制造原料中存在雜味的原因物質(zhì)，還原劑作用于它們而將該原因物質(zhì)掩蔽、分解乃至修飾，從而得到雜味顯著地降低的糖基橙皮素。
(2)在本發(fā)明的糖基橙皮素的制造工序中，還原劑降低乃至抑制生成雜味的原因物質(zhì)，或?qū)⑸傻碾s味的原因物質(zhì)掩蔽、分解乃至修飾，從而得到雜味顯著地降低的糖基橙皮素。
(3)上述(1)及(2)所示的雜味的原因物質(zhì)被還原劑修飾，變 得容易由多孔性合成吸附劑等的純化工序與糖基橙皮素分離，結(jié)果，得到雜味顯著地降低的糖基橙皮素。
再者，本發(fā)明的糖基橙皮素含有物的雜味降低方法是通過(guò)使糖基橙皮素含有物和還原劑接觸來(lái)使糖基橙皮素含有物的雜味降低方法。再者，本發(fā)明的糖基橙皮素含有物的雜味降低方法中所說(shuō)的，糖基橙皮素含有物是指含糖基橙皮素作為主成分的糖基橙皮素含有物整體。另外，由所述方法還可有效顯著地降低糖基橙皮素含有物的著色。糖基橙皮素含有物與還原劑的接觸相比以固狀接觸，更優(yōu)選使用水等的適宜溶劑在溶液狀態(tài)或懸浮狀態(tài)下進(jìn)行。另外，作為使接觸上述還原劑的糖基橙皮素，可例示含有選自橙皮苷、α-糖基橙皮苷、及7-O-β-葡萄糖基橙皮素的1種或2種以上的糖基橙皮素。作為上述糖基橙皮素含有物，可例示每干燥固體物含有通常70％以上且不足100％、更適宜地80％以上且不足100％、再者適宜地90％以上且不足100％糖基橙皮素的糖基橙皮素。
另外，在本發(fā)明的糖基橙皮素含有物的雜味降低方法中使用的還原劑可使用與本發(fā)明的糖基橙皮素的制造方法中同樣的。另外，還原劑的使用量以每糖基橙皮素的干燥固體物通常0.00001％以上、適宜地0.0001～0.5％、更適宜地0.001～0.4％、更還適宜地0.001～0.3％的范圍添加，將它們均一地混合，通過(guò)使糖基橙皮素和還原劑接觸，可顯著地降低以往品特有的雜味。
如此得到的本發(fā)明的糖基橙皮素可以例如，液狀、糊狀、固狀、顆粒狀、粉末狀等的各種形態(tài)提供。
由本發(fā)明的糖基橙皮素的制造方法及糖基橙皮素含有物的雜味降低方法得到的糖基橙皮素本身雜味顯著地降低的同時(shí)，著色也顯著地降低，再者臭氣也顯著地降低，而且，熱穩(wěn)定性也優(yōu)良，所以即使例如于80～100℃的高溫加熱30分鐘以上，另外，即使將使含有所述糖基橙皮素的工序或含有其的食品、嗜好品、化妝品、藥品(感受性疾病劑等)、準(zhǔn)藥品、化學(xué)品、工業(yè)用原料及材料、飼料、餌料、衣料、雜貨(含日用品)、或者塑料制品于室溫乃至若干高于室溫的溫度經(jīng) 數(shù)十分鐘～數(shù)個(gè)月保存，也與使用以往品時(shí)比，發(fā)揮雜味顯著地降低的同時(shí)，著色及臭氣也顯著地降低的優(yōu)良的特征。從而，本發(fā)明的糖基橙皮素與有酸味、來(lái)自鹽的味、澀味、鮮味、苦味等的呈味的各種物質(zhì)良好調(diào)和，耐酸性、耐熱性也大，所以可在含特定保健用食品等的含健康輔助食品等的食物整體的，例如，調(diào)味料、和點(diǎn)心、洋點(diǎn)心、冰點(diǎn)心、飲料(綠茶、紅茶、藥草茶等的茶飲料、果汁飲料、清涼飲料、咖啡、可可、飲料劑等)、醇類(lèi)(日本酒、洋酒等)、涂抹醬、軟糖、腌菜、瓶罐裝、畜肉加工品、魚(yú)肉－水產(chǎn)加工品、乳－卵加工品、蔬菜加工品、果實(shí)加工品、谷類(lèi)加工品等的廣泛圍內(nèi)有利地利用。另外，也可有利地實(shí)施在家畜、家禽、蜜蜂、蠶、魚(yú)等的飼育動(dòng)物的飼料、餌料等中以維生素P強(qiáng)化劑、嗜好性改善等的目的配合利用。
再者，本發(fā)明的糖基橙皮素近來(lái)、也可適宜配合于作為集合關(guān)注的所謂美容食品，另外，也可適宜配合成各種美容食品或食品使用。
另外，本發(fā)明的糖基橙皮素可有利地實(shí)施為可以露、霜、乳液、凝膠、粉末、膏、塊等的形態(tài)配合進(jìn)皂、化妝皂、漢方皂、肌洗粉、洗顏霜、洗顏泡沫、面部清洗劑、沐浴乳、身體清洗劑、洗發(fā)水、潤(rùn)發(fā)乳、洗發(fā)粉等的清潔用化妝品；定型液、吹發(fā)劑、美發(fā)劑、護(hù)發(fā)霜、發(fā)油、發(fā)膠、整發(fā)液、養(yǎng)發(fā)液、發(fā)露、養(yǎng)毛料、染毛料、頭皮用處理等的頭發(fā)化妝品；化妝水、雪花霜、潤(rùn)膚霜、潤(rùn)膚露、面膜用化妝料(膠狀剝除類(lèi)型、膠狀擦拭型、糊狀洗流型、粉末狀等)、卸妝霜、冷霜、護(hù)手霜、護(hù)手露、乳液、保濕液、刮胡后潤(rùn)膚露、刮胡露、刮胡前潤(rùn)膚露、刮胡后潤(rùn)膚霜、刮胡后潤(rùn)膚泡沫、刮胡前潤(rùn)膚霜、化妝用油、嬰兒油等的基礎(chǔ)化妝品；粉底(液狀、霜狀、固型等)、滑石粉末、嬰兒爽身粉、身體粉末、香粉、妝前打底、蜜粉(霜狀、糊狀、液狀、固型、粉末等)、眼影、眼霜、睫毛膏、眉墨、睫毛化妝料、腮紅、頰化妝水等的上妝化妝品；香水、練香水、粉末香水、古龍水、古龍香水、淡香水等的芳香化妝品；助曬霜、助曬露、助曬油、防曬霜、防曬露、防曬油等的曬或防曬化妝品；修指甲劑、修趾甲劑、彩色指甲油、烤漆指甲油、去釉光水、護(hù)甲霜、指甲化妝料等的指甲化 妝品；眼線化妝品；口紅、唇膏、練紅、唇蜜等的口唇化妝品；口臭防止劑、牙膏、漱口劑等的口腔化妝品；浴鹽、浴油、浴用化妝料等的入浴用化妝品；再者美肌劑、色白劑、老化的抑制劑/防止劑等而利用，再者，也可配合進(jìn)作為紫外線吸收劑、劣化防止劑等塑料制品等而利用。再者，本發(fā)明的糖基橙皮素可有利地實(shí)施為，適宜配合進(jìn)煙草、含口的劑、肝油滴劑、復(fù)合維生素劑、口中清涼劑、口中香錠、漱口藥、經(jīng)管營(yíng)養(yǎng)劑、內(nèi)服藥、注射劑等的各種固狀、糊狀、液狀的嗜好品、感受性疾病的預(yù)防－治療劑等的感受性疾病劑等而利用。另外，本發(fā)明的糖基橙皮素也可適宜地適用于化學(xué)品、工業(yè)用原料及材料、飼料、餌料、衣料、雜貨(含日用品)、或者塑料制品。
本發(fā)明的糖基橙皮素相對(duì)于上述各種的組合物或物品的總質(zhì)量，通常以約0.0001％以上、適宜地約0.001～約50％、更適宜地約0.01～約30％、再者適宜地約0.01～約20％、更還適宜地約0.01～約10％的范圍使用。
另外，本說(shuō)明書(shū)中所說(shuō)的感受性疾病是指由糖基橙皮素預(yù)防或治療的疾病整體，例如，可例示由糖基橙皮素預(yù)防或治療的病毒性疾病、細(xì)菌性疾病、外傷性疾病、免疫性疾病、風(fēng)濕癥、糖尿病、過(guò)敏性疾病、脂質(zhì)代謝異常癥、循環(huán)器疾病、惡性腫瘤等的糖基橙皮素感受性疾病。糖基橙皮素感受性疾病的預(yù)防劑、治療劑可根據(jù)其目的適宜選擇其形狀，例如，可例示噴霧劑、點(diǎn)眼劑、點(diǎn)鼻劑、漱口劑、注射劑等的液劑、軟膏、泥敷劑、如霜一樣的膏劑、再者粉劑、散劑、顆粒、錠劑、膠囊劑等的固劑等。當(dāng)調(diào)制制劑時(shí)，根據(jù)需要，也可隨意聯(lián)用其他成分、例如藥效成分、生理活性物質(zhì)、抗生物質(zhì)、輔助劑、增量劑、賦形劑、穩(wěn)定劑、著色劑、著香劑、保存劑、殺菌劑、抑菌劑等的1種或2種以上。
本發(fā)明的糖基橙皮素的施用量可由含量、施用途徑、施用頻度、癥狀等適宜調(diào)節(jié)。通常，本發(fā)明的糖基橙皮素，以干燥固體物換算，以成人每1天約0.001～約10g、適宜地約0.01～約5g、更適宜地約0.05～約1g的范圍使用。
作為將本發(fā)明的糖基橙皮素配合到各種組合物的方法，可在至完成它們各種組合物的工序，例如，單獨(dú)或適宜組合使用混合、混捏、溶解、浸漬、滲透、分布、涂布、噴霧、注入等的公知的1種或2種以上的方法。作為上述各種組合物，例如，可例示食品、嗜好品、化妝品、藥品(感受性疾病劑等)、準(zhǔn)藥品、化學(xué)品、工業(yè)用原料及材料、飼料、餌料、衣料、雜貨(含日用品)、或者塑料制品。向上述各種組合物配合本發(fā)明的糖基橙皮素的組合物與配合以往品的比，實(shí)現(xiàn)即使在既述的溫度范圍保持或保存數(shù)十分鐘～數(shù)個(gè)月間時(shí)，雜味和著色自不必說(shuō)，臭氣都有效顯著地降低的實(shí)益。另外，本發(fā)明的糖基橙皮素與以往品同樣、不僅可作為維生素P強(qiáng)化劑，還可作為高品質(zhì)并且安全性的高的天然型的氧化防止劑、穩(wěn)定劑、品質(zhì)改良劑、預(yù)防劑、治療劑、或者紫外線吸收劑等，各種化合物或組合物有利地利用。
以下，對(duì)于本發(fā)明的糖基橙皮素由實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步詳細(xì)地說(shuō)明。
【試驗(yàn)】
<實(shí)驗(yàn)1：粉末狀糖基橙皮素的性質(zhì)>
在后述的實(shí)施例1的方法中，除了將作為還原劑的焦亞硫酸鈉使用0.1、0.09、0.07或0.04％的以外，以與實(shí)施例1的方法同樣調(diào)制4種粉末狀糖基橙皮素(被驗(yàn)樣品5～8:本發(fā)明)，同時(shí)作為對(duì)照，在實(shí)施例1、3、4、及5的方法中，除未使用還原劑以外，與它們實(shí)施例的方法同樣地調(diào)制4種粉末狀糖基橙皮素(被驗(yàn)樣品1～4：以往品)。再者，被驗(yàn)樣品1～4之內(nèi)、被驗(yàn)樣品1是與后述的參考例1中得到的粉末狀糖基橙皮素同等品。
(1)糠醛的含量
對(duì)于被驗(yàn)樣品1～8的各自，使用下述順序及裝置求出糠醛含量。
<A.樣品的調(diào)制>
(A)將作為被驗(yàn)樣品的上述粉末狀糖基橙皮素的任何以干燥固體物換算0.5g采集到50mL容積附共栓三角形瓶中。
(B)接下來(lái)，將去離子水5.0mL加到各粉末狀糖基橙皮素而溶 解，作為替代品物質(zhì)(分析時(shí)用于研究被驗(yàn)樣品的回收率的指標(biāo))，加濃度0.0025％的環(huán)己醇20μL。
(C)再者，添加溶解1.5g氯化鈉，加3mL二乙基醚(試劑特級(jí)、和光純藥工業(yè)株式會(huì)社銷(xiāo)售)，以700rpm攪拌10分鐘。
(D)將全量移取至分液漏斗，靜置10分鐘后，回收二乙基醚相，用硫酸鈉無(wú)水鹽脫水后，在氮?dú)饬飨?、濃縮至約200μL。
(E)采集濃縮液1μL，供于GC/MS分析裝置。
(F)作為對(duì)照，除了代替粉末狀糖基橙皮素而使用試劑級(jí)糠醛(試劑特級(jí)、東京化成工業(yè)株式會(huì)社銷(xiāo)售)的以外，與被驗(yàn)樣品同樣地，進(jìn)行(A)乃至(E)的處理。
<GC/MS分析條件>
·GC/MS分析裝置：“Clarus SQ8T GC/MS”(PerkinElmer公司制)
·柱：VF-WAXms[柱長(zhǎng)30m×內(nèi)徑0.25mm、膜厚0.25μm](AGILENT J&W公司制)
·檢測(cè)器：質(zhì)譜分析器
·載體：氦氣體
·線速度35cm/秒
·升溫條件：于40℃保持3分鐘，以5℃/分的比例升溫至40℃～80℃，以10℃/分的比例升溫至80℃～200℃，于200℃保持7分鐘，以10℃/分的比例升溫至200℃～220℃，再者，于220℃保持8分鐘。
·替代品物質(zhì)：環(huán)己醇(試劑一級(jí)、片山化學(xué)工業(yè)株式會(huì)社銷(xiāo)售)
·內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：二十一烷(GC用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、東京化成工業(yè)株式會(huì)社銷(xiāo)售)
·提取溶劑：二乙基醚(試劑特級(jí)、和光純藥工業(yè)株式會(huì)社銷(xiāo)售)
<B.樣品中的糠醛的定量>
以對(duì)用GC/MS分析法得到的對(duì)照的試劑特級(jí)糠醛(和光純藥株式會(huì)社銷(xiāo)售)的測(cè)定數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)制成標(biāo)準(zhǔn)曲線，基于其求出被驗(yàn)樣品的糠醛含量。
(2)4-VA的含量
對(duì)于被驗(yàn)樣品1～8各自，使用下述試劑、順序、及裝置測(cè)定4-VA含量。再者，其測(cè)定方法基于2006年7月28日、食安基發(fā)第0728008號(hào)厚生勞動(dòng)省醫(yī)藥食品局食品安全部基準(zhǔn)審查課長(zhǎng)通知“對(duì)于清涼飲用水中的苯”進(jìn)行。
<A.試劑、各種溶液的調(diào)制>
(A)氯化鈉(水質(zhì)試驗(yàn)用、和光純藥工業(yè)株式會(huì)社銷(xiāo)售)
(B)環(huán)己醇標(biāo)準(zhǔn)原液的調(diào)制
使環(huán)己醇(試劑一級(jí)、片山化學(xué)工業(yè)株式會(huì)社銷(xiāo)售)溶解于甲醇(局方一般試驗(yàn)法用)而調(diào)制0.01質(zhì)量％環(huán)己醇溶液(以下也稱(chēng)為“環(huán)己醇標(biāo)準(zhǔn)原液”)。
(C)內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)液
使用上述環(huán)己醇標(biāo)準(zhǔn)原液和甲醇調(diào)制0.0004質(zhì)量％環(huán)己醇溶液(以下稱(chēng)為“內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)液1”。)及0.00004質(zhì)量％環(huán)己醇溶液(以下稱(chēng)為“內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)液2”。)。
(D)標(biāo)準(zhǔn)原液的調(diào)制
使4-VA(和光純藥工業(yè)株式會(huì)社銷(xiāo)售)溶解于甲醇，各自調(diào)制0.0005質(zhì)量％4-VA溶液(以下稱(chēng)為“標(biāo)準(zhǔn)液A”。)及0.00005質(zhì)量％4-VA溶液(以下稱(chēng)為“標(biāo)準(zhǔn)液B”。)。
(E)標(biāo)準(zhǔn)曲線制成用標(biāo)準(zhǔn)原液的調(diào)制
使用上述標(biāo)準(zhǔn)液A、B、上述內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)液1、及甲醇調(diào)制4-VA濃度是0.05、0.1、0.2、0.5或1.0μg/mL的5種標(biāo)準(zhǔn)曲線制成用混合標(biāo)準(zhǔn)原液。
(F)標(biāo)準(zhǔn)曲線制成用標(biāo)準(zhǔn)液的調(diào)制
向20mL容積頂部空間瓶5瓶中各自加10mL超純水，再加10μL上述5種標(biāo)準(zhǔn)曲線制成用混合標(biāo)準(zhǔn)原液的任何，再添加氯化鈉3.0g，立即密栓，攪拌溶解，調(diào)制5種標(biāo)準(zhǔn)曲線制成用標(biāo)準(zhǔn)液。
<B.被驗(yàn)樣品的調(diào)制>
在20mL容積頂部空間瓶8瓶中精秤以干燥固體物換算0.20g的 被驗(yàn)樣品1～8的任何，向其加全量超純水作為10.0g，攪拌溶解。向得到的水溶液加10μL上述內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)液2，再添加3.0g氯化鈉，立即密栓，攪拌溶解，調(diào)制含被驗(yàn)樣品1～8的任何的8種被驗(yàn)樣品。
<C.4-VA的定量方法>
(A)測(cè)定條件
<GC/MS分析條件>
·GC/MS分析裝置：“Clarus SQ8T GC/MS”(PerkinElmer公司制)
·頂部空間采樣機(jī)：“TurboMatrix Trap 40”
·柱：VF-WAXms[柱長(zhǎng)30m×內(nèi)徑0.25mm、膜厚0.25μm)(AGILENT J&W公司制)
·檢測(cè)器：質(zhì)譜分析器
·載體：氦氣體
·線速度：35cm/秒
·柱注入口溫度：200℃
·升溫條件：于40℃保持3分鐘，以5℃/分的比例升溫至40℃～80℃，以10℃/分的比例升溫至80℃～200℃，于200℃保持7分鐘，以10℃/分的比例升溫至200℃～220℃，再者，于220℃保持8分鐘。
·瓶烘箱溫度：60℃
·針溫度：140℃
·轉(zhuǎn)移線溫度：205℃
·瓶加熱時(shí)間：30分鐘
<檢測(cè)法>
·離子化[Electron Impact(EI)]法
·SIM選擇離子(Selected Ion Monitoring)
m/z 134，119(4-VA)
m/z 82，57[環(huán)己醇(試劑一級(jí)、片山化學(xué)工業(yè)株式會(huì)社銷(xiāo)售)]
(B)4-VA的定量
基于上述8種被驗(yàn)樣品及上述5種標(biāo)準(zhǔn)曲線制成用混合標(biāo)準(zhǔn)液中 的4-VA和內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)(環(huán)己醇)的峰高比及另行制成的4-VA的標(biāo)準(zhǔn)曲線，求出上述被驗(yàn)樣品中的4-VA濃度，基于其算出被驗(yàn)樣品1～8中的4-VA含量。
(3)色調(diào)和著色度
對(duì)于被驗(yàn)樣品1～8的水溶液各自，肉眼觀察色調(diào)，同時(shí)由下述順序，求出著色度。即，對(duì)于被驗(yàn)樣品1～8各自，作為1w/w％水溶液，將其40mL在密閉容器(50mL容積)中于100℃加熱30分鐘后，作為27℃，放入寬度1cm的池，由分光光度計(jì)(商品名“UV-2600”、島津制作所制)測(cè)定波長(zhǎng)420nm處的吸光度(OD420nm)及波長(zhǎng)720nm處的吸光度(OD720nm)，求出兩波長(zhǎng)處的吸光度的差(OD420nm-OD720nm)，將該值作為著色度。
(4)電傳導(dǎo)度
對(duì)于被驗(yàn)樣品1～8各自，溶解于純水至成為1w/w％水溶液，在密閉容器中于100℃加熱30分鐘后，冷卻為20℃，由電傳導(dǎo)度計(jì)(商品名“CM-50AT”、東亞DKK公司制)測(cè)定在20℃的電傳導(dǎo)度。
(5)離子性化合物的含量
由于定量離子性化合物不容易，作為簡(jiǎn)便法，由下述方法求出陽(yáng)離子金屬元素的含量。即，對(duì)于被驗(yàn)樣品1～8各自，在50mL容器(商品名“Falcon管”、日本Becton Dickinson公司制)中精秤約0.5g，加熱溶解于超純水20mL中，向其添加0.54mL精密分析用的60w/w％硝酸水溶液，于70℃加熱14小時(shí)，至室溫冷卻后，用超純水將全量作為50m，在下述分析裝置和測(cè)定條件下求出金屬元素含量。再者，對(duì)照僅使用超純水。
<裝置及測(cè)定條件>
·誘導(dǎo)結(jié)合等離子體發(fā)光分光分析裝置：“CIROS-120”
(Spectro公司制)
·等離子體電力：1,400W
·等離子體氣體(Ar)：13.0L/分
·輔助氣體(Ar)：1.0L/分
·噴霧器氣體(Ar)：1.0L/分
·泵動(dòng)作：1.0mL/分
·金屬元素含量(ppm)的算出方法：
{(被驗(yàn)樣品的測(cè)定值)-(對(duì)照的測(cè)定值)}×稀釋倍率
上述(1)乃至(5)的結(jié)果示于表1。再者，被驗(yàn)樣品1～8的糖基橙皮素的組成與實(shí)施例1、3、4或5中所示的基本上相同，所以在表1中省略其記載。
【表1】
*與比較例1的方法中制造的以往的糖基橙皮素含量組合物相同
*＊比對(duì)照的被驗(yàn)樣品1～4呈的淡黃色淡的色調(diào)
如從表1可知，被驗(yàn)樣品1～4的糠醛含量均超300ppb，與此相對(duì)，被驗(yàn)樣品5～8均為約10ppb。另外，被驗(yàn)樣品1～4的4-VA含量均超40ppb，與此相對(duì)，被驗(yàn)樣品5～8均為約2ppb以下。
另外，如表1所示，被驗(yàn)樣品1～4(對(duì)照)的水溶液的色調(diào)(由肉眼觀察)是淡黃色，但被驗(yàn)樣品5～8(本發(fā)明)的水溶液是與對(duì)照比明顯淡的色調(diào)。另外，由分光光度計(jì)的著色度是，被驗(yàn)樣品1～4的水溶液的著色度均為0.24以上，與此相對(duì)，被驗(yàn)樣品5～8的水溶液均為0.20以下從而是低值。再者，被驗(yàn)樣品5～8的著色度是使用的還原劑的量越多越顯示低值。
再者，如從表1可知，被驗(yàn)樣品1～4的水溶液的電傳導(dǎo)度是約11～約12μS/cm而超10μS/cm，與此相對(duì)，被驗(yàn)樣品5～8的水溶液是約3～約7μS/cm而不足10μS/cm。
再者，如從表1可知，被驗(yàn)樣品5～8的金屬元素(鈣、鉀、鎂、及鈉)含量均比被驗(yàn)樣品1～4明顯低，結(jié)果與電傳導(dǎo)度的測(cè)定結(jié)果良好整合。
自以上的結(jié)果確證，使用還原劑制造的本發(fā)明的糖基橙皮素，與以往品比，糠醛含量、4-VA含量、著色度顯著地降低，電傳導(dǎo)度或金屬元素含量也明顯降低。
<實(shí)驗(yàn)2：感官試驗(yàn)>
使用本發(fā)明的糖基橙皮素和以往品進(jìn)行下述的感官試驗(yàn)。
(1)感官試驗(yàn)的概要和被驗(yàn)樣品的調(diào)制
作為本發(fā)明的糖基橙皮素的代表例，實(shí)驗(yàn)1中使用的被驗(yàn)樣品5～8之內(nèi)、糠醛含量、著色度、電傳導(dǎo)度、及金屬元素含量的各自顯示位于中間的值的被驗(yàn)樣品6和作為以往品的代表例，在實(shí)驗(yàn)1中使用的被驗(yàn)樣品1～4之內(nèi)、使用糠醛含量、著色度、電傳導(dǎo)度、及金屬元素含量顯示最低值的被驗(yàn)樣品1進(jìn)行以28～59歲的健康的男女8人(女性2人、男性6人)作為評(píng)委的下述(2)所示的感官試驗(yàn)。即，將以往品(被驗(yàn)樣品1)和本發(fā)明的糖基橙皮素(被驗(yàn)樣品6)于室溫溶解于RO水(通過(guò)逆滲透膜的水)至各自成為1w/w％水溶液，作為非加熱被驗(yàn)樣品1、6，這些在供于下述試驗(yàn)之前儲(chǔ)存于密閉容器中。另外，將非加熱被驗(yàn)樣品1、6各自放入容器而密閉，在沸騰水浴中加熱30分鐘，冷卻至室溫(以下稱(chēng)為“加熱處理”。)而作為加熱被驗(yàn)樣品1、6。
(2)感官試驗(yàn)
對(duì)于各評(píng)委，對(duì)于調(diào)整至室溫的、在上述(1)中得到的非加熱被驗(yàn)樣品1、6(各10mL)及加熱被驗(yàn)樣品1、6(各10mL)，在試飲前，各自評(píng)價(jià)(a)著色和(b)臭氣。其后，對(duì)于各評(píng)委，在試飲各被驗(yàn)樣品前用白開(kāi)水漱口后，對(duì)于(c)苦味(含澀味、蘞味、收斂味)、(d)后味、及(e)試飲時(shí)的臭氣各自進(jìn)行評(píng)價(jià)。評(píng)價(jià)基準(zhǔn)如下述表2(表中，“以往品”是指“被驗(yàn)樣品1”。)所示，對(duì)于非加熱被驗(yàn)樣品6，以非加熱被驗(yàn)樣品1作為對(duì)照，對(duì)于加熱被驗(yàn)樣品6，以加熱被驗(yàn)樣品1作為對(duì)照，各評(píng)委評(píng)價(jià)上述(a)乃至(e)的評(píng)價(jià)項(xiàng)目。結(jié)果各自示于表3、表4。
(評(píng)價(jià)基準(zhǔn))
【表2】
(3)感官試驗(yàn)的結(jié)果
【表3】非加熱被驗(yàn)樣品6的評(píng)分分布
【表4】加熱被驗(yàn)樣品6的評(píng)分分布
再者，在表3、4所示的評(píng)價(jià)結(jié)果中，未顯示對(duì)于以往品(加熱/非加熱被驗(yàn)樣品1：對(duì)照)自體的(a)著色、(b)臭氣、(c)苦味、(d)后味、及(e)臭氣的評(píng)價(jià)結(jié)果，但如評(píng)價(jià)基準(zhǔn)所示，表3及表4所示的評(píng)價(jià)結(jié)果是以以往品作為基準(zhǔn)評(píng)價(jià)本發(fā)明的糖基橙皮素，所以以往品的評(píng)價(jià)結(jié)果，對(duì)于各評(píng)價(jià)項(xiàng)目，以評(píng)價(jià)基準(zhǔn)顯示的評(píng)分(5階段評(píng)價(jià))說(shuō)是中間的“3”。
一方面，如從表3的評(píng)價(jià)結(jié)果可知，非加熱被驗(yàn)樣品6、即，未進(jìn)行加熱處理的本發(fā)明的糖基橙皮素是，對(duì)于(a)著色、(b)臭氣、(c)苦味、(d)后味、及(e)臭氣的各評(píng)價(jià)項(xiàng)目，在5階段評(píng)價(jià)中被評(píng)價(jià)為最高的“1”的評(píng)委數(shù)各自是，8人中，4人、3人、0人、3人、及4人(合計(jì)14人)。一方面，表4的評(píng)價(jià)結(jié)果所示的加熱被驗(yàn)樣品6、即，加熱處理的本發(fā)明的糖基橙皮素是，對(duì)于(a)著色、(b)臭氣、(c)苦味、(d)后味、及(e)臭氣的評(píng)價(jià)項(xiàng)目，在5階段評(píng)價(jià)中被評(píng)價(jià)為最高的“1”的評(píng)委數(shù)各自是，8人中，4人、5人、7人、4人、及4人(合計(jì)24人)。結(jié)果顯示，本發(fā)明的糖基橙皮素是與以往品比不僅雜味、著色，臭氣也有效降低的高品質(zhì)的糖基橙皮素。
同樣地，如從表3的評(píng)價(jià)結(jié)果可知，非加熱被驗(yàn)樣品6(未進(jìn)行加熱處理的本發(fā)明的糖基橙皮素)是，對(duì)于(a)著色、(b)臭氣、(c)苦味、(d)后味、及(e)臭氣的評(píng)價(jià)項(xiàng)目，在5階段評(píng)價(jià)中被評(píng)價(jià)為最低的“5”及比其最低水平高1階段的“4”的評(píng)委數(shù)均為0人(合計(jì)0人)。一方面，如從表4的評(píng)價(jià)結(jié)果可知，加熱被驗(yàn)樣品6(加熱處理的本發(fā)明的糖基橙皮素)是，對(duì)于(a)著色、(b)臭氣、(c)苦味、(d)后味、及(e)臭氣的評(píng)價(jià)項(xiàng)目，在5階段評(píng)價(jià)中被評(píng)價(jià)為最低的“5”及其比最低水平高1階段的“4”的評(píng)委數(shù)均為0人(合計(jì)0人)。結(jié)果顯示，本發(fā)明的糖基橙皮素是，與以往品比，不僅雜味、著色，臭氣也有效降低的高品質(zhì)的糖基橙皮素。
自這些的結(jié)果確證，本發(fā)明的糖基橙皮素與以往品比，無(wú)論加熱/非加熱，在(a)著色、(b)臭氣、(c)苦味、(d)后味、及(e)臭氣的全部評(píng)價(jià)項(xiàng)目中顯著地優(yōu)良，同時(shí)其優(yōu)劣的差在加熱時(shí)，作為更顯著的差呈現(xiàn)。
再者，當(dāng)將對(duì)于上述實(shí)驗(yàn)2的“(1)被驗(yàn)樣品的調(diào)制”中所示的被驗(yàn)樣品5、7、及8也供于與實(shí)驗(yàn)2的“(2)感官試驗(yàn)”同樣的感官試驗(yàn)時(shí)，得到與上述被驗(yàn)樣品6大致相同的結(jié)果。
如此確證，本發(fā)明的糖基橙皮素在以往品特有的苦味(含澀味、蘞味、收斂味)和后味、即，雜味上顯著地降低，同時(shí)著色顯著地降低。再者確證，本發(fā)明的糖基橙皮素與以往品比，臭氣也顯著地降低。
<實(shí)驗(yàn)3：糖基橙皮素的雜味、著色與糠醛及4-VA的含量的關(guān)系>
以研究糖基橙皮素的雜味、著色與糠醛及4-VA的含量的關(guān)系的目的進(jìn)行下述的試驗(yàn)。
(1)被驗(yàn)樣品的調(diào)制
基于后述的實(shí)施例4的方法及參考例1的方法，調(diào)制本發(fā)明的糖基橙皮素(以下稱(chēng)為“樣品A”。)和以往品(以下稱(chēng)為“樣品B”。)。接下來(lái)，為方便起見(jiàn)、將樣品A、B以適宜比例配合，調(diào)制糠醛含量階段性地不同的，表5所示的3種糖基橙皮素樣品(以下稱(chēng)為“被驗(yàn)樣品9～11”。)。
(2)糠醛及4-VA的含量
根據(jù)實(shí)驗(yàn)1的(1)和(2)所示的測(cè)定方法各自測(cè)定被驗(yàn)樣品9～11的糠醛含量和4-VA含量。
(3)著色判斷試驗(yàn)
以28～57歲的健康的男女9人(女性2人、男性7人)作為評(píng)委，使用被驗(yàn)樣品9～11及樣品B(以下稱(chēng)為“對(duì)照”。)進(jìn)行對(duì)著色的評(píng)價(jià)試驗(yàn)。即，將被驗(yàn)樣品9～11及對(duì)照各自于室溫溶解于蒸餾水至成為1w/w％水溶液，將它們由各評(píng)委進(jìn)行肉眼觀察，各評(píng)委對(duì)于各被驗(yàn)樣品，與對(duì)照比，當(dāng)被評(píng)價(jià)為“著色降低”時(shí)判斷為“判斷A1”、當(dāng)被評(píng)價(jià)為“著色未降低”時(shí)判斷為“判斷B1”，結(jié)果示于表5。
(4)感官試驗(yàn)
以上述男女9人作為評(píng)委，進(jìn)行對(duì)于被驗(yàn)樣品9～11及對(duì)照的雜味感官試驗(yàn)。即，將被驗(yàn)樣品9～11及對(duì)照各自于室溫溶解于蒸餾水至成為1w/w％水溶液，將它們由各評(píng)委試飲，各評(píng)委對(duì)各被驗(yàn)樣品，與對(duì)照比，在被評(píng)價(jià)為“雜味改善”時(shí)判斷為“判斷A2”、在被評(píng)價(jià)為“雜味未改善”時(shí)判斷為“判斷B2”，結(jié)果示于表5。
【表5】
注：表中，“判斷A1”表示，在著色判斷試驗(yàn)中，由各評(píng)委與對(duì)照比評(píng)價(jià)為“著色降低的”，“判斷B1”表示評(píng)價(jià)為“著色未降低”。另外，“判斷A2”表示，在感官試驗(yàn)中，由各評(píng)委與對(duì)照比評(píng)價(jià)為“雜味改善”，“判斷B2”表示評(píng)價(jià)為“雜味未改善”。
如從表5的結(jié)果可知，糖基橙皮素的雜味是，以糠醛含量200ppb近傍為界顯著并且顯著地改善，以4-VA含量30ppb近傍為界顯著并且顯著地改善。另外，對(duì)于糖基橙皮素的著色也同樣。自這些的結(jié)果強(qiáng)地提示，糠醛含量和4-VA含量可作為用于辨別雜味顯著地降低、而且著色顯著地降低的糖基橙皮素的指標(biāo)，只要辨別出糠醛含量是200ppb以下，4-VA含量是30ppb以下，就得到與以往品比雜味顯著地降低，再者著色也顯著地降低的糖基橙皮素。
順便而言，對(duì)于既述的實(shí)驗(yàn)1的表1、后述的實(shí)施例1～7、及參考例1中所示的多個(gè)粉末狀糖基橙皮素的雜味與糠醛含量及4-VA含量的關(guān)系進(jìn)行綜合而示于下述表6。表6中，作為本發(fā)明的糖基橙皮素的被驗(yàn)樣品5～8、及實(shí)施例1～7的粉末狀糖基橙皮素(以下綜合稱(chēng)為“本發(fā)明的被驗(yàn)樣品”。)的糠醛含量是191ppb以下，4-VA含量是28.7ppb以下，它們均為，以往品特有的雜味顯著地降低。與此相比，對(duì)照1～5的被驗(yàn)樣品1～4、及參考例1的粉末狀糖基橙皮素(以下綜合稱(chēng)為“對(duì)照的被驗(yàn)樣品”。)的糠醛含量是308ppb以上、4-VA含量是40.0ppb以上，它們均有以往品特有的雜味。
綜合于上述表6的實(shí)驗(yàn)及實(shí)施例、參考例的結(jié)果與實(shí)驗(yàn)3的結(jié)果良好整合，基于這些一系列的結(jié)果判斷，以糠醛含量及/或4-VA含量作為指標(biāo)，只要辨別出糠醛含量不足200ppb及/或4-VA含量不足30ppb，就可得到與以往品比雜味顯著地降低的糖基橙皮素。
【表6】
注：表中，附有“*”的表示從本說(shuō)明書(shū)中的表1精選的。另外，“○”表示以往品特有的雜味顯著地降低，“×”表示有以往品特有的雜味。
從上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，本發(fā)明的糖基橙皮素與以往品比，雜味顯著地降低，再者著色或臭氣也顯著地降低，所以本身作為雜味顯著地降低，著色、再者臭氣也顯著地降低的食品極其有用，同時(shí)亦可無(wú)不適地使用于以往品由于其雜味或者，雜味和著色、再者由于臭氣而無(wú)法使用，不可避免地導(dǎo)致品質(zhì)降低的各種食品、嗜好品、化妝品、藥品(感受性疾病劑等)、準(zhǔn)藥品、化學(xué)品、工業(yè)用原料及材料、飼料、餌料、衣料、雜貨(含日用品)、塑料制品等的用途。
以下，基于實(shí)施例及參考例更詳細(xì)地說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明不限于這些。
【實(shí)施例】
【實(shí)施例1】
<粉末狀糖基橙皮素>
將1N氫氧化鈉水溶液4質(zhì)量份加溫到80℃，維持著此溫度，加橙皮苷1質(zhì)量份及糊精(DE20)7質(zhì)量份，邊攪拌30分鐘邊溶解，pH作為9.0，向其每g糊精加30單位嗜熱脂肪土芽孢桿菌(Geobacillus stearothermophilus)Tc-91株(日本國(guó)〒305-8566茨城縣筑波市東1丁目第1地1中央第6所在的獨(dú)立行政法人制品評(píng)價(jià)技術(shù)基盤(pán)機(jī)構(gòu)專(zhuān)利生物保藏中心(舊名稱(chēng)：獨(dú)立行政法人產(chǎn)業(yè)技術(shù)綜合研究所專(zhuān)利生物保藏中心)，保藏號(hào)FERM BP-11273，國(guó)內(nèi)保藏日：1973年7月30日，國(guó)際保藏日：2010年8月6日)來(lái)源的CGTase，維持pH6.9、50℃著進(jìn)行反應(yīng)18小時(shí)，將橙皮苷的約70％變換為α-糖基橙皮苷。接下來(lái)，對(duì)于得到的酶反應(yīng)液，添加0.05％作為還原劑的焦亞硫酸鈉，于100℃加熱30分鐘而使殘留的酶加熱失活之后，每1g酶反應(yīng)液的固體成分加100單位葡萄糖淀粉酶(商品名“Glucozyme”、Nagase ChemteX公司制)，維持pH5.0、55℃著進(jìn)行反應(yīng)5小時(shí)，使α-葡萄糖基橙皮苷生成。對(duì)得到的酶反應(yīng)液加熱而使殘留的酶失活，過(guò)濾，將濾液以SV2通液至填充多孔性合成吸附劑、商品名“DIAIONHP-10”(三菱化學(xué)株式會(huì)社銷(xiāo)售)的柱。結(jié)果，溶液中的α-葡萄糖基橙皮苷和未反應(yīng)橙皮苷吸附于多孔性合成吸附劑，D-葡萄糖、鹽類(lèi)等不吸附而流出。接下來(lái)，使純化水通過(guò)柱，清洗柱后，階段性地提高乙醇水溶液濃度地再通液，采集含有α-葡萄糖基橙皮苷的級(jí)分，減壓濃縮，粉末化，以每固體物相對(duì)于原料的橙皮苷質(zhì)量約70％的收率得到淡黃色的粉末狀糖基橙皮素。再者，本例中得到的粉末狀糖基橙皮素含有α-葡萄糖基橙皮苷80.0％、橙皮苷12.3％、及此外的成分7.7％。
再者，本品的糠醛含量是12ppb、4-VA含量是2ppb、著色度是0.19、及電傳導(dǎo)度是約6μS/cm。另外，本品是每干燥固體物含有各自約0.4ppm、約0.05ppm、約0.1ppm、及約0.1ppm的鈣、鉀、鎂、及鈉。
本品與以往品比，雜味顯著地降低，同時(shí)著色或臭氣也顯著地降 低、此外在90～100℃的比較高溫的條件下加熱30分鐘后也與以往品比，雜味顯著地降低自不必說(shuō)，還有著色或臭氣也有效顯著地降低的優(yōu)良特性。從而，將含有本品的食品、化妝品、藥品(感受性疾病劑等)、準(zhǔn)藥品、化學(xué)品、工業(yè)用原料及材料、飼料、餌料、衣料、雜貨(含日用品)、或者塑料制品在上述溫度范圍或低于其的溫度，數(shù)十分鐘～數(shù)個(gè)月間保持或保存時(shí)，實(shí)現(xiàn)與使用以往品時(shí)比，雜味顯著地降低，再者著色或臭氣也顯著地降低的優(yōu)良的實(shí)益。另外，本品與以往品同樣、不僅可作為維生素P強(qiáng)化劑，還可作為安全性的高的天然型的氧化防止劑、穩(wěn)定劑、品質(zhì)改良劑、預(yù)防劑、治療劑、紫外線吸收劑等，食品、嗜好品、飼料、餌料、化妝品、藥品(感受性疾病劑等)、準(zhǔn)藥品、化學(xué)品、工業(yè)用原料及材料、飼料、餌料、衣料、雜貨(含日用品)、或者塑料制品等的各種組合物有利地利用。
【實(shí)施例2】
<粉末狀糖基橙皮素>
將1N氫氧化鈉水溶液4質(zhì)量份加溫到80℃，維持著此溫度，向其依次添加橙皮苷1質(zhì)量份、糊精(DE10)4質(zhì)量份、及亞硫酸鈉0.06質(zhì)量份，攪拌30分鐘而溶解，用0.01N鹽酸溶液中和后立即，每g糊精加20單位嗜熱脂肪土芽孢桿菌(Geobacillus stearothermophilus)Tc-91株(獨(dú)立行政法人制品評(píng)價(jià)技術(shù)基盤(pán)機(jī)構(gòu)、專(zhuān)利生物保藏中心保藏號(hào)FERM BP-11273)來(lái)源的CGTase，維持pH6.0、75℃，攪拌著反應(yīng)24小時(shí)。采樣得到的酶反應(yīng)液，用HPLC分析時(shí)，橙皮苷的約69％變換為α-糖基橙皮苷。接下來(lái)，向得到的酶反應(yīng)液添加焦亞硫酸鈉作為還原劑至成為0.03％，于90℃加熱120分鐘后，每g所述中間生成物加50單位葡萄糖淀粉酶(商品名“Glucozyme”、Nagase ChemteX公司制)，維持pH5.0、55℃著反應(yīng)10小時(shí)，使α-葡萄糖基橙皮苷生成。加熱得到的酶反應(yīng)液而使殘留的酶失活，過(guò)濾，將濾液以SV2通液至填充了多孔性合成吸附劑、商品名“DIAIONHP-10”(三菱化學(xué)株式會(huì)社銷(xiāo)售)的柱。結(jié)果，溶液中的α-葡萄糖基橙皮苷 和未反應(yīng)橙皮苷吸附到多孔性合成吸附劑，糖類(lèi)或鹽類(lèi)等不吸附而流出。接下來(lái)，使純化水通過(guò)柱，清洗柱后，階段性地提高乙醇水溶液濃度地再通液，采集含有α-葡萄糖基橙皮苷的級(jí)分，減壓濃縮，粉末化，以每固體物相對(duì)于原料的橙皮苷質(zhì)量約68％的收率得到淡黃色的粉末狀糖基橙皮素。再者，本例中得到的粉末狀糖基橙皮素含有α-葡萄糖基橙皮苷77.0％、橙皮苷15.5％、及此外的成分7.5％。
本品的糠醛含量是11ppb，4-VA含量是1.5ppb、著色度是0.14、及電傳導(dǎo)度是約4μS/cm。另外，本品是，每干燥固體物各自含有約0.4ppm、約0.06ppm、約0.1ppm、及約0.1ppm鈣、鉀、鎂、及鈉。
本品與以往品比，雜味顯著地降低，同時(shí)著色或臭氣也顯著地降低，此外在90～100℃的比較高溫的條件下加熱30分鐘后也與以往品比，雜味顯著地降低自不必說(shuō)，還有著色或臭氣也有效顯著地降低的優(yōu)良特性。從而，將含有本品的食品、化妝品、藥品(感受性疾病劑等)、準(zhǔn)藥品、化學(xué)品、工業(yè)用原料及材料、飼料、餌料、衣料、雜貨(含日用品)、或者塑料制品在上述溫度范圍或低于其的溫度，數(shù)十分鐘～數(shù)個(gè)月間保持或保存時(shí)，實(shí)現(xiàn)與使用以往品時(shí)比，雜味顯著地降低，再者著色或臭氣也顯著地降低的優(yōu)良的實(shí)益。另外，本品與以往品同樣、不僅作為維生素P強(qiáng)化劑，還可作為安全性的高的天然型的氧化防止劑、穩(wěn)定劑、品質(zhì)改良劑、預(yù)防劑、治療劑、紫外線吸收劑等，食品、嗜好品、化妝品、藥品(感受性疾病劑等)、準(zhǔn)藥品、化學(xué)品、工業(yè)用原料及材料、飼料、餌料、衣料、雜貨(含日用品)、或者塑料制品等的各種組合物有利地利用。
【實(shí)施例3】
<粉末狀糖基橙皮素>
將1N氫氧化鈉水溶液4質(zhì)量份加溫到80℃，維持著此溫度，向其依次添加作為還原劑亞硫酸鈉0.1質(zhì)量份、橙皮苷1質(zhì)量份、及糊精(DE10)4質(zhì)量份，攪拌30分鐘著溶解，向其加0.01N鹽酸溶液而中和后，立即每g糊精加20單位嗜熱脂肪土芽孢桿菌(Geobacillus stearothermophilus)Tc-91株(獨(dú)立行政法人制品評(píng)價(jià)技術(shù)基盤(pán)機(jī)構(gòu)、專(zhuān)利生物保藏中心保藏號(hào)FERM BP-11273)來(lái)源的CGTase，維持pH6.0、75℃，攪拌著反應(yīng)24小時(shí)時(shí)，橙皮苷的約72％變換為α-糖基橙皮苷。加熱得到的酶反應(yīng)液而使殘留的酶失活，過(guò)濾，將濾液以SV2通液至填充了多孔性合成吸附劑、商品名“DIAIONHP-20”(三菱化學(xué)株式會(huì)社銷(xiāo)售)的柱。結(jié)果，溶液中的α-糖基橙皮苷和未反應(yīng)橙皮苷吸附到多孔性合成吸附劑，D-葡萄糖、鹽類(lèi)等不吸附而流出。接下來(lái)，使純化水通過(guò)柱，清洗柱后，階段性地提高乙醇水溶液濃度地再通液，采集含有α-糖基橙皮苷的級(jí)分，減壓濃縮，粉末化，以每固體物相對(duì)于原料的橙皮苷質(zhì)量約71％的收率得到淡黃色的粉末狀糖基橙皮素。再者，本例中得到的粉末狀糖基橙皮素含有α-糖基橙皮苷76.0％、橙皮苷18.5％、及此外的成分5.5％。
本品的糠醛含量是10ppb、4-VA含量是3.0ppb、著色度是0.17、及電傳導(dǎo)度是約4μS/cm。另外，本品是，每干燥固體物各自含有約0.3ppm、約0.04ppm、約0.1ppm、及約0.05ppm的鈣、鉀、鎂、及鈉。
本品與以往品比，雜味顯著地降低，同時(shí)著色或臭氣也顯著地降低，此外在90～100℃的比較高溫的條件下加熱30分鐘后也與以往品比，雜味顯著地降低自不必說(shuō)，還有著色或臭氣也有效顯著地降低的優(yōu)良特性。從而，將含有本品的食品、化妝品、藥品(感受性疾病劑等)、準(zhǔn)藥品、化學(xué)品、工業(yè)用原料及材料、飼料、餌料、衣料、雜貨(含日用品)、或者塑料制品在上述溫度范圍或低于其的溫度，數(shù)十分鐘～數(shù)個(gè)月間保持或保存時(shí)，實(shí)現(xiàn)與使用以往品時(shí)比，雜味顯著地降低，再者著色或臭氣也顯著地降低的優(yōu)良的實(shí)益。另外，本品與以往品同樣、不僅作為維生素P強(qiáng)化劑，還可作為安全性的高的天然型的氧化防止劑、穩(wěn)定劑、品質(zhì)改良劑、預(yù)防劑、治療劑、紫外線吸收劑等，食品、嗜好品、化妝品、藥品(抗感受性疾病劑等)、準(zhǔn)藥品、化學(xué)品、工業(yè)用原料及材料、飼料、餌料、衣料、雜貨(含日用品)、及塑料制品等的各種組合物有利地利用。
【實(shí)施例4】
<粉末狀糖基橙皮素>
將橙皮苷1質(zhì)量份、糊精(DE8)10質(zhì)量份、及作為還原劑焦亞硫酸鈉0.05質(zhì)量份添加到水50質(zhì)量份，pH9.5、于90℃加熱70分鐘，接下來(lái)，每g糊精加30單位嗜熱脂肪土芽孢桿菌(Geobacillus stearothermophilus)Tc-91株(獨(dú)立行政法人制品評(píng)價(jià)技術(shù)基盤(pán)機(jī)構(gòu)、專(zhuān)利生物保藏中心保藏號(hào)FERM BP-11273)來(lái)源的CGTase，維持pH8.2、65℃著攪拌而保持40小時(shí)，在此酶反應(yīng)結(jié)束直前，向酶反應(yīng)液添加焦亞硫酸鈉作為還原劑至成為0.05％，于85℃加熱，使酶失活之后，每g酶反應(yīng)液固體物加100單位葡萄糖淀粉酶(商品名“Glucozyme”、Nagase ChemteX公司制)，維持pH5.0、55℃著反應(yīng)5小時(shí)，使α-葡萄糖基橙皮苷生成。對(duì)得到的酶反應(yīng)液加熱而使殘留的酶失活。接下來(lái)，向得到的酶反應(yīng)液，添加0.5質(zhì)量份作為α-L-鼠李糖苷酶橙皮苷酶(商品名“可溶性橙皮苷酶<田邊>2號(hào)”、田邊制藥制)，調(diào)整到pH4，于55℃反應(yīng)24小時(shí)，向得到的酶反應(yīng)液添加焦亞硫酸鈉0.01質(zhì)量份，加熱而使酶失活之后，過(guò)濾，將濾液以SV2通液至填充了多孔性合成吸附劑、商品名“DIAIONHP-10”(三菱化學(xué)株式會(huì)社銷(xiāo)售)的柱。結(jié)果，溶液中的α-葡萄糖基橙皮苷、7-O-β-葡萄糖基橙皮素、及未反應(yīng)橙皮苷吸附到多孔性合成吸附劑，D-葡萄糖、鹽類(lèi)等不吸附而流出。接下來(lái)，使純化水通過(guò)柱，清洗柱后，階段性地提高乙醇水溶液濃度地再通液，采集含有α-葡萄糖基橙皮苷的級(jí)分，減壓濃縮，粉末化，以每固體物相對(duì)于原料的橙皮苷質(zhì)量約70％的收率得到淡黃色的粉末狀糖基橙皮素。再者，本例中得到的粉末狀糖基橙皮素含有α-葡萄糖基橙皮苷81.9％、橙皮苷0.5％、7-O-β-葡萄糖基橙皮素8.9％、及其他成分8.7％。
本品的糠醛含量是9ppb、4-VA含量是2.0ppb、著色度是0.16、及電傳導(dǎo)度是約4μS/cm。另外，本品是，每干燥固體物各自含有約0.3ppm、約0.03ppm、約0.05ppm、及約0.05ppm的鈣、鉀、鎂、及 鈉。
本品與以往品比，雜味顯著地降低，同時(shí)著色或臭氣也顯著地降低，此外在90～100℃的比較高溫的條件下加熱30分鐘后也與以往品比，雜味顯著地降低自不必說(shuō)，還有著色或臭氣也有效顯著地降低的優(yōu)良特性。從而，將含有本品的食品、化妝品、藥品(感受性疾病劑等)、準(zhǔn)藥品、化學(xué)品、工業(yè)用原料及材料、飼料、餌料、衣料、雜貨(含日用品)、或者塑料制品在上述溫度范圍或低于其的溫度，數(shù)十分鐘～數(shù)個(gè)月間保持或保存時(shí)，實(shí)現(xiàn)與使用以往品時(shí)比，雜味顯著地降低，再者著色或臭氣也顯著地降低的優(yōu)良的實(shí)益。另外，本品與以往品同樣、不僅作為維生素P強(qiáng)化劑，還可作為安全性的高的天然型的氧化防止劑、穩(wěn)定劑、品質(zhì)改良劑、預(yù)防劑、治療劑、紫外線吸收劑等，食品、嗜好品、化妝品、藥品(抗感受性疾病劑等)、準(zhǔn)藥品、化學(xué)品、工業(yè)用原料及材料、飼料、餌料、衣料、雜貨(含日用品)、及塑料制品等的各種組合物有利地利用。
【實(shí)施例5】
<粉末狀糖基橙皮素>
將橙皮苷50質(zhì)量份和作為還原劑次硫酸鈉1質(zhì)量份于80℃加熱溶解于0.25N氫氧化鈉水溶液90質(zhì)量份，添加DE8的糊精150質(zhì)量份而溶解，調(diào)整到pH9.0后，每1質(zhì)量份糊精加15單位嗜熱脂肪土芽孢桿菌(Geobacillus stearothermophilus)Tc-91株(獨(dú)立行政法人制品評(píng)價(jià)技術(shù)基盤(pán)機(jī)構(gòu)、專(zhuān)利生物保藏中心保藏號(hào)FERM BP-11273)來(lái)源的CGTase，加溫至60℃著調(diào)整到pH8.3，反應(yīng)6小時(shí)。其后，調(diào)整到pH7.0，加溫到68℃而反應(yīng)40小時(shí)。酶反應(yīng)結(jié)束后，使酶加熱失活之后，過(guò)濾而得到酶反應(yīng)液。將酶反應(yīng)液由HPLC分析時(shí)，反應(yīng)前液中的橙皮苷的72％變換為α-葡萄糖基橙皮苷，其余28％保持未反應(yīng)。向酶反應(yīng)液添加2質(zhì)量份作為α-L-鼠李糖苷酶橙皮苷酶(商品名“可溶性橙皮苷酶<田邊>2號(hào)”、田邊制藥制)，調(diào)整到pH4，于55℃反應(yīng)24小時(shí)之后，加1質(zhì)量份葡萄糖淀粉酶(商品名“Glucozyme”、Nagase ChemteX公司制)，再于55℃反應(yīng)24小時(shí)。酶反應(yīng)結(jié)束后，對(duì)得到的酶反應(yīng)液加熱而使酶加熱失活，經(jīng)填充了中間極性多孔性吸附樹(shù)脂(商品名“AmberliteXAD-7”、Rohm and Haas公司制)的柱，水洗柱，用80v/v％乙醇水溶液溶出樹(shù)脂吸附成分。除去溶出液中的乙醇后，冷凍干燥，得到含α-葡萄糖基橙皮苷82.0％、7-O-β-葡萄糖基橙皮素8.0％、橙皮苷1.0％、及其他成分9.0％的粉末狀糖基橙皮素。
本品的糠醛含量是10ppb、4-VA含量是1.5ppb、著色度是0.15、及電傳導(dǎo)度不足10μS/cm。另外，本品是，每干燥固體物各自含有約0.4ppm、約0.04ppm、約0.1ppm、及約0.2ppm的鈣、鉀、鎂、及鈉。
本品與以往品比，雜味顯著地降低，同時(shí)著色或臭氣也顯著地降低，此外在90～100℃的比較高溫的條件下加熱30分鐘后也與以往品比，雜味顯著地降低自不必說(shuō)，還有著色或臭氣也有效顯著地降低的優(yōu)良特性。從而，將含有本品的食品、化妝品、藥品(感受性疾病劑等)、準(zhǔn)藥品、化學(xué)品、工業(yè)用原料及材料、飼料、餌料、衣料、雜貨(含日用品)、或者塑料制品在上述溫度范圍或低于其的溫度，數(shù)十分鐘～數(shù)個(gè)月間保持或保存時(shí)，實(shí)現(xiàn)與使用以往品時(shí)比，雜味顯著地降低，再者著色或臭氣也顯著地降低的優(yōu)良的實(shí)益。另外，本品與以往品同樣、不僅作為維生素P強(qiáng)化劑，還可作為安全性的高的天然型的氧化防止劑、穩(wěn)定劑、品質(zhì)改良劑、預(yù)防劑、治療劑、紫外線吸收劑等，食品、嗜好品、化妝品、藥品(抗感受性疾病劑等)、準(zhǔn)藥品、化學(xué)品、工業(yè)用原料及材料、飼料、餌料、衣料、雜貨(含日用品)、及塑料制品等的各種組合物有利地利用。
【實(shí)施例6】
<粉末狀糖基橙皮素>
對(duì)于酶反應(yīng)液，除了添加0.001％的作為還原劑的偏亞硫酸鉀以外，與實(shí)施例1同樣地，以每固體物相對(duì)于原料的橙皮苷質(zhì)量約69％的收率得到淡黃色的粉末狀糖基橙皮素。再者，本例中得到的粉末狀糖基橙皮素含有α-葡萄糖基橙皮苷79.5％、橙皮苷13.8％、及此外的 成分6.7％。
本品的糠醛含量是180ppb、4-VA含量是20ppb、著色度是0.23、及電傳導(dǎo)度不足10μS/cm。另外，本品是，每干燥固體物各自含有約0.5ppm、約0.08ppm、約0.1ppm、及約0.3ppm的鈣、鉀、鎂、及鈉。
本品盡管與實(shí)施例1～5中得到的粉末狀糖基橙皮素比差，但與以往品比，雜味顯著地降低，同時(shí)著色或臭氣也顯著地降低，此外在90～100℃的比較高溫的條件下加熱30分鐘后也與以往品比，雜味顯著地降低自不必說(shuō)，還有著色或臭氣也有效顯著地降低的優(yōu)良特性。從而，將含有本品的食品、化妝品、藥品(感受性疾病劑等)、準(zhǔn)藥品、化學(xué)品、工業(yè)用原料及材料、飼料、餌料、衣料、雜貨(含日用品)、或者塑料制品在上述溫度范圍或低于其的溫度，數(shù)十分鐘～數(shù)個(gè)月間保持或保存時(shí)，實(shí)現(xiàn)與使用以往品時(shí)比，雜味顯著地降低，再者著色或臭氣也顯著地降低的優(yōu)良的實(shí)益。另外，本品與以往品同樣、不僅作為維生素P強(qiáng)化劑，還可作為安全性的高的天然型的氧化防止劑、穩(wěn)定劑、品質(zhì)改良劑、預(yù)防劑、治療劑、紫外線吸收劑等，食品、嗜好品、化妝品、藥品(感受性疾病劑等)、準(zhǔn)藥品、化學(xué)品、工業(yè)用原料及材料、飼料、餌料、衣料、雜貨(含日用品)、及塑料制品等的各種組合物有利地利用。
【實(shí)施例7】
<粉末狀糖基橙皮素>
除了將偏亞硫酸鉀代替為亞硫酸氫鈉以外與實(shí)施例6同樣地，以干燥以每固體物相對(duì)于原料的橙皮苷質(zhì)量約65％的收率得到淡黃色的粉末狀糖基橙皮素。再者，本例中得到的粉末狀糖基橙皮素含有α-葡萄糖基橙皮苷77.2％、橙皮苷16.5％、及此外的成分6.3％。
本品的糠醛含量是191ppb、4-VA含量是28.7ppb、著色度是0.23、及電傳導(dǎo)度不足10μS/cm。另外，本品是，每干燥固體物各自含有約0.5ppm、約0.07ppm、約0.09ppm、及約0.4ppm的鈣、鉀、鎂、及鈉。
本品盡管與實(shí)施例1～5中得到的粉末狀糖基橙皮素的性質(zhì)比差，但本品與以往品比，雜味顯著地降低，同時(shí)著色或臭氣也顯著地降低，此外在90～100℃的比較高溫的條件下加熱30分鐘后也與以往品比，雜味顯著地降低自不必說(shuō)，還有著色或臭氣也有效顯著地降低的優(yōu)良特性。從而，將含有本品的食品、化妝品、藥品(感受性疾病劑等)、準(zhǔn)藥品、化學(xué)品、工業(yè)用原料及材料、飼料、餌料、衣料、雜貨(含日用品)、或者塑料制品在上述溫度范圍或低于其的溫度，數(shù)十分鐘～數(shù)個(gè)月間保持或保存時(shí)，實(shí)現(xiàn)與使用以往品時(shí)比，雜味顯著地降低，再者著色或臭氣也顯著地降低的優(yōu)良的實(shí)益。另外，本品與以往品同樣、不僅作為維生素P強(qiáng)化劑，還可作為安全性的高的天然型的氧化防止劑、穩(wěn)定劑、品質(zhì)改良劑、預(yù)防劑、治療劑、紫外線吸收劑等，食品、嗜好品、化妝品、藥品(感受性疾病劑等)、準(zhǔn)藥品、化學(xué)品、工業(yè)用原料及材料、飼料、餌料、衣料、雜貨(含日用品)、及塑料制品等的各種組合物有利地利用。
【實(shí)施例8】
<糖基橙皮素含有物的雜味降低方法>
向后述的參考例1中得到的粉末狀糖基橙皮素，其每干燥固體物添加0.03質(zhì)量％亞硫酸鈉、次硫酸鈉、焦亞硫酸鉀、或者焦亞硫酸鈉，均一地?cái)嚢瑁訜?，純化，得到粉末狀糖基橙皮素?/p>
盡管本法是向參考例1中得到的粉末狀糖基橙皮素僅添加還原劑的極其簡(jiǎn)易的方法，但有可顯著地降低以往品特有的雜味的優(yōu)良益處。由本法得到的粉末狀糖基橙皮素不僅雜味顯著地降低，著色或臭氣也顯著地降低，所以將所述粉末狀糖基橙皮素を配合到各種食品而加熱處理、或者，作為溶液狀態(tài)后，經(jīng)比較長(zhǎng)期間加熱保存時(shí)，也無(wú)源于本品的雜味自不必說(shuō)，著色及臭氣也有效顯著地降低。
【實(shí)施例9】
<混合甜味料>
將異構(gòu)化液糖100質(zhì)量份、白糖2質(zhì)量份、及由實(shí)施例1的方法得到的粉末狀糖基橙皮素1質(zhì)量份于80℃加熱30分鐘處理而得到維生素P強(qiáng)化液狀混合甜味料。
本品是以往品特有的雜味、著色、臭氣有效降低的維生素P強(qiáng)化液狀混合甜味料。從而，使用本品加熱烹調(diào)各種食品時(shí)，也感覺(jué)不到源于本品的雜味、著色、臭氣，所以實(shí)現(xiàn)對(duì)食物原料的風(fēng)味、色調(diào)無(wú)損害的益處。
【實(shí)施例10】
<硬糖果>
將α,α-海藻糖(注冊(cè)商標(biāo)“Treha”、株式會(huì)社林原銷(xiāo)售)10質(zhì)量份和水20質(zhì)量份于155℃的減壓下濃縮至水分約2％以下，接下來(lái)，冷卻至120℃，向其適量混合檸檬酸0.5質(zhì)量份及用實(shí)施例2的方法得到的粉末狀糖基橙皮素0.01質(zhì)量份及檸檬香料，接下來(lái)根據(jù)常規(guī)方法成形、包裝而得到維生素P強(qiáng)化硬糖果。
本品與使用以往品調(diào)制的硬糖果不同，以往品特有的雜味、著色、臭氣有效降低，所以是檸檬風(fēng)味和硬糖果的透明感未受損害的維生素P強(qiáng)化硬糖果。
【實(shí)施例11】
<膠囊劑>
均一地混合醋酸鈣1水鹽10質(zhì)量份、L-乳酸鎂3水鹽50質(zhì)量份、麥芽糖57質(zhì)量份、用實(shí)施例3的方法得到的粉末狀糖基橙皮素20質(zhì)量份及含有二十碳五烯酸20％的γ-環(huán)糊精包接化合物12質(zhì)量份，經(jīng)顆粒成形機(jī)作為顆粒后，根據(jù)常規(guī)方法封入明膠膠囊，得到每1膠囊含有150mg內(nèi)容物的膠囊劑。
本品可作為在室溫乃至高于室溫的溫度經(jīng)比較長(zhǎng)期間保存后，也基本上確認(rèn)不到源于本品的雜味、著色、臭氣的增大乃至變化的高品質(zhì)的血中膽甾醇降低劑、免疫賦活劑、美肌劑等，并可作為感受性疾 病的預(yù)防劑、治療劑、健康增進(jìn)用食物等有利地利用。
【實(shí)施例12】
<浴用劑>
將DL-乳酸鈉21質(zhì)量份、丙酮酸鈉8質(zhì)量份、實(shí)施例4的方法中得到的粉末狀糖基橙皮素5質(zhì)量、著色料、及香料適量混合，得到浴用劑。
本品在入浴用的熱水中100～10,000倍稀釋而使用。在使用本品時(shí)，即使入浴用的熱水在循環(huán)式的情況中，將本品投入熱水后經(jīng)過(guò)1小時(shí)以上后，也與投入后立即比，基本上確認(rèn)不到源于本品的著色、臭氣的增大乃至變化，是配合到本品的香料的香味未受損害的高品質(zhì)的浴用劑。
【實(shí)施例13】
<乳液>
將聚氧乙烯山萮基醚0.5質(zhì)量份、四油酸聚氧乙烯山梨糖醇酯1質(zhì)量份、親油型單硬脂酸甘油1質(zhì)量份、丙酮酸0.5質(zhì)量份、山萮基醇0.5質(zhì)量份、鱷梨油1質(zhì)量份、用實(shí)施例1的方法得到的粉末狀糖基橙皮素1質(zhì)量份、維生素E及防腐劑的適量根據(jù)常規(guī)方法加熱溶解，向其加L-乳酸鈉1質(zhì)量份、1,3-丁二醇5質(zhì)量份、羧基乙烯基聚合物0.1質(zhì)量份、及純化水85.3質(zhì)量份，經(jīng)勻漿機(jī)乳化，再加適量香料而攪拌，混合而制造乳液。
本品即使在室溫或略高于室溫的溫度環(huán)境下比較長(zhǎng)期間保存，也基本上確認(rèn)不到源于本品的雜味、著色、臭氣的增大乃至變化，是配合到本品的香料的香味未受損害的高品質(zhì)的乳液。
【實(shí)施例14】
<維生素P強(qiáng)化劑>
相對(duì)于實(shí)施例4的方法中得到的粉末狀糖基橙皮苷1質(zhì)量份，添 加合計(jì)0.0005質(zhì)量份選自亞硫酸鈉、次硫酸鈉、焦亞硫酸鉀、及焦亞硫酸鈉的1種或2種以上，均一地混合而得到作為健康輔助食物的15種維生素P強(qiáng)化劑。
本品均為，即使在室溫～比較高溫的環(huán)境下保存數(shù)十分鐘～數(shù)個(gè)月間后，添加到綠茶、紅茶、咖啡、可可等的飲料而飲用，也基本上確認(rèn)不到源于本品的雜味、著色、臭氣的增大乃至變化的保存穩(wěn)定性及熱穩(wěn)定性?xún)?yōu)良的維生素P強(qiáng)化劑。
【實(shí)施例15】
<美容食品>
將實(shí)施例1～7中得到的粉末狀糖基橙皮素的任何10質(zhì)量份、蔗糖3質(zhì)量份、麥芽糖醇1質(zhì)量份、及糊精15質(zhì)量份攪拌混合，向條狀的遮光－防濕性包裝容器各收容5g，得到8種本發(fā)明的粉末狀美容食品。
本品由于雜味、著色、臭氣有效降低，所以可無(wú)不快感而日常經(jīng)口攝取利用。本品可每天，將其1～2包添加到水、茶、紅茶、咖啡等的各種飲料或其他食品而日常經(jīng)口攝取。
【實(shí)施例16】
<美容食品>
將實(shí)施例14中得到的15種維生素P強(qiáng)化劑的任何2質(zhì)量份、麥芽糖2質(zhì)量份、純化水20質(zhì)量份、及適量的pH調(diào)制劑混合攪拌，調(diào)整到pH7.2，精密過(guò)濾，無(wú)菌地填充到無(wú)菌容器，得到15種本發(fā)明的液狀美容食品。
本品由于雜味、著色、臭氣降低，可無(wú)不快感而日常經(jīng)口攝取利用。本品通過(guò)每天日常經(jīng)口攝取50～200mL，可使皮膚維持健康的狀態(tài)。
<參考例1>
<粉末狀糖基橙皮素>
作為以往的粉末狀糖基橙皮素的制造方法，在實(shí)施例1的粉末狀糖基橙皮素的制造方法中，除了作為還原劑不使用焦亞硫酸鈉的以外，與實(shí)施例1同樣地，得到粉末狀糖基橙皮素。再者，本例中得到的粉末狀糖基橙皮素含有α-葡萄糖基橙皮苷77.0％、橙皮苷15.5％、及此外的成分7.5％。
本品的糠醛含量是310ppb、4-VA含量是40ppb、著色度是0.24、及電傳導(dǎo)度是約11μS/cm。另外，本品是，每干燥固體物各自含有約3ppm、約0.2ppm、約0.4ppm、及約1ppm的鈣、鉀、鎂、及鈉。
使如此得到的粉末狀糖基橙皮素的適量溶解于水而試飲時(shí)，有以往品特有的雜味、著色，不快的臭氣也強(qiáng)。
如此，不使用本發(fā)明中使用的還原劑制造的糖基橙皮素與本發(fā)明涉及的糖基橙皮素比，至少在雜味和著色及臭氣的方面明顯劣。
【工業(yè)實(shí)用性】
與以往品比，雜味顯著地降低，同時(shí)著色或臭氣也顯著地降低的本發(fā)明的糖基橙皮素，通過(guò)在以往品的制造工序中的任何的工序中僅添加還原劑，即可工業(yè)上大量并且廉價(jià)地穩(wěn)定提供，所以適用以往品的領(lǐng)域自不必說(shuō)，在由于以往品特有的雜味、或者由于雜味和著色、再者臭氣而適用困難或有障礙的領(lǐng)域中變得能無(wú)障礙地容易地適用。如此，本發(fā)明給本領(lǐng)域帶來(lái)的影響甚大，本發(fā)明的產(chǎn)業(yè)上的利用可能性極大。