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天維菌素衍生物的制備方法及用途與流程

文檔序號:11804055閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.4”-O-glucosyl tenvermectins A/B的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:

1)制備紅色糖多孢菌種子液:取保藏號為ATCC 11635的紅色糖多孢菌菌株Saccharopolyspora erythraea,劃線接種于YMS固體培養(yǎng)基上,在20-28℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5-7天,將活化后的菌種轉(zhuǎn)接于液體培養(yǎng)基中,置于20-28℃,250rpm的水平搖床中培養(yǎng)40小時,得到種子液;

2)制備4”-O-glucosyl tenvermectins A/B:將種子液轉(zhuǎn)接于轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基中,培養(yǎng)24小時后加入用有機溶劑溶解的轉(zhuǎn)化底物天維菌素A/B,在20-28℃,250rpm的條件下轉(zhuǎn)化培養(yǎng)150小時后,得到發(fā)酵液;采用萃取劑萃取發(fā)酵液并回收萃取劑后經(jīng)過色譜分離得到4”-O-glucosyl tenvermectins A/B純品;所述4”-O-glucosyl tenvermectins A/B的化學(xué)結(jié)構(gòu)表征為:

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的4”-O-glucosyl tenvermectinsA/B的制備方法,其特征在于,所述步驟1)中液體培養(yǎng)基的制備方法為:取葡萄糖10g、酵母抽提物2g、牛肉抽提物2g和蛋白胨3g,用蒸餾水定容至1000ml后,用1mol/l的NaOH調(diào)節(jié)pH至7.0,采用250ml三角瓶每瓶分裝40ml,在121℃、0.15MPa條件下滅菌20min。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的4”-O-glucosyl tenvermectinsA/B的制備方法,其特征在于,所述步驟2)的轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基包括碳氮比不同的M-1培養(yǎng)基、M-2培養(yǎng)基、M-3培養(yǎng)基和M-4培養(yǎng)基,其中,

M-1培養(yǎng)基的組分為:葡萄糖5g、紅糖10g、胰蛋白胨5g、酵母抽提物2.5g、乙二胺四乙酸鈉0.036g、甜菜堿1.2g和丙酸鈉0.11g;

M-2培養(yǎng)基的組分為:工業(yè)葡萄糖44g、牛肉膏5.0g、蛋白胨6.0g、酵母抽提物4g、酪蛋白胨3.0g、熱炸黃豆餅粉11.0g、NaCl 1.5g和K2HPO4 0.5g;

M-3培養(yǎng)基的組分為:葡萄糖50g、黃豆餅粉5g、酵母抽提物5g、蛋白胨4g、NaCl 5g、K2HPO4 2g和KH2PO4 1g;

M-4培養(yǎng)基的組分為:工業(yè)葡萄糖50g、NaCl 5g、(NH4)2SO4 2g、CaCO3 6g和大豆粉30g;

以上組分用蒸餾水定容至1000ml后,用1mol/l的NaOH調(diào)節(jié)pH至7.0-7.2,250ml三角瓶每瓶分裝40ml,在121℃、0.15MPa條件下滅菌20min。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的4”-O-glucosyl tenvermectinsA/B的制備方法,其特征在于,所述步驟2)的有機溶劑包括甲醇、乙醇、DMSO中的一種或幾種。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的4”-O-glucosyl tenvermectinsA/B的制備方法,其特征在于,所述步驟2)的萃取劑包括乙酸乙酯、正丁醇、醋酸異丁酯、乙醚、石油醚、二氯甲烷或三氯甲烷中的一種或幾種。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的4”-O-glucosyl tenvermectins A/B的制備方法,其特征在于,所述步驟2)的純化包括反相高效液相色譜層析。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的4”-O-glucosyl tenvermectins A/B的制備方法,其特征在于,所述步驟2)的純化還包括硅膠柱層析。

8.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的4”-O-glucosyl tenvermectins A/B的用途,其特征在于,4”-O-glucosyl tenvermectins A/B用于制備防治農(nóng)林害蟲或害螨藥物。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的4”-O-glucosyl tenvermectins A/B的用途,其特征在于,所述農(nóng)林害蟲包括鱗翅目菜蛾科、鱗翅目夜蛾科、鱗翅目枯葉蛾科、鱗翅目螟蟲科、鞘翅目叩甲科、墊刃目滑刃總科中的一種或多種;所述害螨包括葉螨類害蟲。

10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的4”-O-glucosyl tenvermectins A/B的用途,其特征在于,所述4”-O-glucosyl tenvermectins A/B包括單一的4”-O-glucosyl tenvermectinA、單一的4”-O-glucosyl tenvermectin B或兩者的混合物。

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