本發(fā)明屬于藥物學(xué)領(lǐng)域，涉及藥物合成和藥理學(xué)領(lǐng)域。具體而言，涉及一類新型截短側(cè)耳素衍生物及其制備方法和在制藥中的應(yīng)用，特別是在制備抗癌藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：
截短側(cè)耳素(pleuromutilin,1,)是由擔(dān)子菌產(chǎn)生的一種三環(huán)二萜類抗生素，主要作用于50S核糖體亞基，通過抑制肽基轉(zhuǎn)移酶的活性而使細(xì)菌的蛋白質(zhì)合成受阻[MolMicrobiol.2001.41(5):1091–1099；MolMicrobiol.2004,54(5):1287-1294.]。人們已成功開發(fā)了半合成截短側(cè)耳素類衍生物泰妙菌素(tiamulin,2)和沃尼妙林(valnemulin,3),以及Azamulin(4)和Retapamulin（5）兩個(gè)人用妙林類抗生素。該類化合物由于具有作用機(jī)制獨(dú)特且不易與傳統(tǒng)抗生素產(chǎn)生交叉耐藥等優(yōu)點(diǎn)[ProcNatlAcadSciUSA.2007,104(11):4291-4296.]，已成為開發(fā)新型人用抗生素的先導(dǎo)化合物。截至目前，國內(nèi)外有關(guān)妙林衍生物的文獻(xiàn)多涉及抗菌活性。為了充分開發(fā)利用該類化合物的藥用價(jià)值，進(jìn)一步擴(kuò)大臨床應(yīng)用范圍，一些藥物學(xué)家針對已上市的妙林類抗生素，在抗腫瘤、抗炎等領(lǐng)域進(jìn)行了探索性研究。Baggetto等人的研究表明，一定濃度的泰妙菌素（0.1～10μmol·L-1）與抗癌藥物聯(lián)用，可抑制腫瘤細(xì)胞的ATP酶和細(xì)胞膜上藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體的活性，從而增加腫瘤細(xì)胞對抗癌藥物的敏感性[BioorgMedChemLett.2003,13(10):1751-1753.]。后來的研究表明，Azamulin在體外可選擇性抑制引起腫瘤多藥耐藥的CYP3A蛋白[DrugMetabDispos.2004,32(1):105-112.]。Kaura等人通過構(gòu)象限制策略，設(shè)計(jì)合成了含有二酮結(jié)構(gòu)八元環(huán)的妙林衍生物，以模擬絲氨酸蛋白酶催化反應(yīng)的過渡態(tài)[Bioorg&Med.ChemLett.2002,12(17):2359-2362.]。Deng等人深入研究了沃尼妙林的抗炎作用機(jī)制，發(fā)現(xiàn)其能夠抑制誘導(dǎo)型一氧化氮合酶與環(huán)氧合酶-2的表達(dá)，從而抑制一氧化氮和前列腺素E2的生成[Immunopharmacology.2009,9(7-8):810-816.]。然而這些研究都是基于已知的抗菌藥物，并沒有針對抗癌活性進(jìn)行合成及生物活性評價(jià)。本發(fā)明將提供一類結(jié)構(gòu)新穎、具有抗癌活性的新型截短側(cè)耳素類化合物。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明涉及的一類截短側(cè)耳素衍生物是首次合成并報(bào)道的新類型化合物。本發(fā)明人經(jīng)過深入研究，首次發(fā)現(xiàn)具有通式（I）的化合物具有良好的體外抗腫瘤活性，特別適合作為新型抗癌藥物用于結(jié)直腸癌的治療。因此本發(fā)明的目的是提供一種具有如下通式（I）所示的新型截短側(cè)耳素化合物；本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供上述通式（I）所示化合物的制備方法；本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供具有抗癌活性的新型截短側(cè)耳素類化合物在制備治療結(jié)直腸癌疾病的藥物中的用途。本發(fā)明提供一類全新結(jié)構(gòu)的截短側(cè)耳素類化合物，即如通式（I）所示的新型截短側(cè)耳素類化合物：其中R1、R2、R3、R4各自獨(dú)立地選自氫、（取代）氨基、甲基、鹵素、三氟甲基、苯基、苯氧基、C1-C4烷基和烷氧基中，并優(yōu)選氫、二甲氨基、二乙氨基、甲基、氟、氯、溴、三氟甲基、苯基、苯氧基、甲氧基、叔丁基和二氧亞甲基。優(yōu)選的，本發(fā)明的通式（I）所示的化合物中具有代表性的化合物結(jié)構(gòu)式如下：表1本發(fā)明代表化合物1-15結(jié)構(gòu)式術(shù)語“鹵素”代表氟、氯、溴。本發(fā)明還提供一種抗腫瘤藥物組合物，其包含一種或多種所述的截短側(cè)耳素類化合物作為活性成分。將本發(fā)明的通式（I）化合物以及其藥物組合物用于制備抗腫瘤藥物時(shí)，可以單獨(dú)使用，或者按照制藥學(xué)上的常規(guī)方法，將其與可藥用的賦形劑、稀釋劑等混合，制成口服給藥的片劑、膠囊劑、顆粒劑或糖漿劑、或者制成非口服方式給藥的擦劑、栓劑或注射劑等。下面具體描述本發(fā)明具體化合物的制備方法，但這些具體方法并不限定本發(fā)明的范圍。本發(fā)明化合物可通過如下方法制得，然而該方法的條件，例如反應(yīng)物、溶劑、酸、堿、所用化合物的量、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間等不限定于以下描述。還可以任選將本發(fā)明說明書中描述的或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的各種合成方法的組合來方便制備本發(fā)明的化合物，本發(fā)明所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員可以容易地進(jìn)行上述組合。采用以下流程制備化合物1-15：取代的苯甲酰氯與乙胺在非質(zhì)子性溶劑（如四氫呋喃、二氯甲烷等），堿（如三乙胺、碳酸鉀等）作用下生成酰胺中間體；酰胺中間體經(jīng)四氫鋁鋰還原后，再與對甲苯磺?；蟮慕囟虃?cè)耳素反應(yīng)得到系列化合物1-15。其中對甲苯磺?；慕囟虃?cè)耳素的制備是參考文獻(xiàn)方法[WorldNotesonAntibiotics，2008,29（1）：28～31.]，以截短側(cè)耳素為原料，在二氯甲烷中與對甲苯磺酰氯反應(yīng)，三乙胺為縛酸劑，于室溫下反應(yīng)得到。其中，R1、R2、R3、R4各自獨(dú)立地選自氫、二甲氨基、二乙氨基、甲基、氟、氯、溴、三氟甲基、苯基、苯氧基、甲氧基、叔丁基和二氧亞甲基之中。最優(yōu)的反應(yīng)條件是：a:三乙胺，二氯甲烷，室溫反應(yīng)15小時(shí)；b:四氫呋喃，室溫或回流反應(yīng)5小時(shí)；c:碳酸鉀，碘化鉀，丙酮，回流2小時(shí)。具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步闡釋，但這些實(shí)施例絕不是對本發(fā)明的任何限制。所有實(shí)施例中，核磁共振譜用VarianMercury400和600核磁共振儀記錄，化學(xué)位移以δ（ppm）表示；質(zhì)譜用BrukerESQUIRE-3000型質(zhì)譜儀記錄，電噴霧電離（ESI）；分離用硅膠未說明的均為200-300目。實(shí)施例（一）制備實(shí)施例實(shí)施例1：2-(N-（4-二甲胺基）苯基-N-乙基氨基)乙酸(3aS,4R,5S,6S,8R,9R,9aR,10R)-6-乙烯基十氫-5-羥-4,6,9,10-四甲基-1-氧代-3a,9-丙醇-3aH-環(huán)戊二烯并環(huán)辛烯-8-基酯（系列化合物1）的合成（1）4-二甲氨基-N-乙基苯甲酰胺的合成在50mL的三口瓶中，插入溫度計(jì)，將4-二甲氨基苯甲酸（1.65g，10mmol），DMF（0.6mL，催化量）溶于15mL的二氯甲烷中，磁力攪拌，加入DMAP，氮?dú)獗Ｗo(hù)，冷卻到0-5℃下用滴液漏斗慢慢滴入草酰氯（12mmol，1.02mL）。滴完后逐漸恢復(fù)到室溫，攪拌一小時(shí)，TLC檢測原料酸已反應(yīng)完全。在另一50mL的三口瓶中分別加入乙氨水溶液（2.6mL，30mmol），三乙胺（10mL）和二氯甲烷（10mL），攪拌并用冰水浴冷卻到0-5℃。將上述制備的酰氯溶液緩慢滴入含有乙胺的混合液中，滴完后撤走冰水浴，逐漸恢復(fù)到室溫。在室溫下攪拌反應(yīng)約15小時(shí)，TLC法監(jiān)測反應(yīng)基本完成。停止反應(yīng)，用CH2Cl2(25mL×3)萃取，無水Na2SO4干燥有機(jī)相。過濾后減壓濃縮，殘留物用CH2Cl2:CH3OH=5:3的混合劑20mL重結(jié)晶，得到無色透明大顆粒晶體（0.771g）。產(chǎn)率44.16%。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ:1.23(t,,3H),3.02(m,3H),3.47(m,2H),6.00(s,,1H),6.70(d,2H),7.67(d,2H)。（2）4-二甲氨基-N-乙基苯甲胺的制備在50mL的三口瓶中加入10mL經(jīng)過Na處理的無水四氫呋喃（THF）和LiAlH4（0.0949g，2.5mmol）攪拌溶解，冰水浴中冷卻到0-5℃。在N2保護(hù)下，滴加上述酰胺（1mmol）的THF溶液（10mL）。控制溫度在0-5℃，滴完后恢復(fù)到室溫，攪拌反應(yīng)5小時(shí)后加水終止反應(yīng)。硅藻土過濾，乙酸乙酯萃取三次，無水Na2SO4干燥。過濾濃縮后，可以直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。（3）系列化合物1的制備在50mL的單口瓶中加入4-二甲胺基-N-乙基苯甲胺（1mmol），對甲苯磺酰基取代的截短側(cè)耳素（0.64g，1.2mmol），無水K2CO3（0.35g，2.5mmol）,催化量的KI（0.2mmol），乙腈20mL，攪拌并加熱回流3小時(shí)。TLC監(jiān)測（展開劑用二氯甲烷與乙酸乙酯系統(tǒng)）3h反應(yīng)基本完成。加水（20mL）除去K2CO3和KI，用CH2Cl2（15mL×3）萃取，合并有機(jī)相，無水NaSO4干燥。過濾濃縮后，用硅膠柱層析法純化產(chǎn)品，流動相為二氯甲烷：乙酸乙酯=2:1，得淺黃色油狀產(chǎn)品0.207g，產(chǎn)率為38.4%。1HNMR(600MHz;CDCl3;TMS為內(nèi)標(biāo)):δ0.63(d,J=6.8Hz,3H),0.73(d,J=6.8Hz,3H),0.92(t,3H),1.11–1.12(m,1H),1.16(s,3H),1.23–1.28(m,2H),1.30–1.40(m,1H),1.41(s,3H),1.44–1.51(m,5H),1.64(dd,J=10Hz,J=7.2Hz,2H),2.03–2.08(m,3H),2.15(m,2H),2.92(s,6H),2.21–2.30(m,3H),3.09(s,2H),3.34(d,J=6.4Hz,1H),4.48(s,2H),5.17–5.21(d,J=8.8Hz,1H),5.32–5.34(d,J=6.4Hz,1H),5.76–5.78(d,J=4.2Hz,1H),6.43(dd,J=17.2Hz,J=10.8Hz,1H),6.66-6.67(dd,J=6Hz,2H),7.16-7.17(s,J=6Hz,2H)。ESI-MS:539.4(M+H+).實(shí)施例2：2-(N-（4-二乙胺基）苯基-N-乙基氨基)乙酸(3aS,4R,5S,6S,8R,9R,9aR,10R)-6-乙烯基十氫-5-羥-4,6,9,10-四甲基-1-氧代-3a,9-丙醇-3aH-環(huán)戊二烯并環(huán)辛烯-8-基酯（系列化合物2）的合成（1）對-二乙氨基-N-乙基苯甲酰胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲酰胺的合成。原料酸的投料量為10mmol，后處理采用石油醚：乙酸乙酯=1:1重結(jié)晶得到的無色透明的大顆粒晶體產(chǎn)品0.64g，產(chǎn)率為29%。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ:1.16(t,6H),1.21(t,3H),3.35(m,2H),3.46(m,4H),6.11(s,1H),6.62(d,2H),7.65(d,2H)。（2）對-二乙氨基-N-乙基苯甲胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲胺的合成。反應(yīng)混合物未經(jīng)純化，直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。（3）系列化合物2的制備實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中系列化合物1的合成。4-二乙胺基-N-乙基苯甲胺與對甲苯磺?；〈慕囟虃?cè)耳素反應(yīng)。粗產(chǎn)物用硅膠柱層析法純化，流動相為二氯甲烷：乙酸乙酯=4:1，得產(chǎn)品0.543g，產(chǎn)率為33.02%。1HNMR(600MHz;CDCl3;):δ0.63(d,J=6.8Hz,3H),0.73(d,J=6.8Hz,3H),1.04-1.07(t,3H)，1.11–1.12(m,1H),1.13-1.15(t,6H),1.16(s,3H),1.23–1.28(m,2H),1.30–1.40(m,1H),1.41(s,3H),1.44–1.51(m,5H),1.64(dd,J=10Hz,J=7.2Hz,2H),2.03–2.08(m,3H),2.64-2.70(m,2H),2.21–2.30(m,3H),3.09(s,2H),3.32-3.34(m,4H),3.34(d,J=6.4Hz,1H),4.48(s,2H),5.17–5.21(d,J=8.8Hz,1H),5.32–5.34(d,J=6.4Hz,1H),5.76–5.78(d,J=4.2Hz,1H),6.43(dd,J=17.2Hz,J=10.8Hz,1H),6.59-6.61(dd,J=12Hz,2H),7.11-7.13(dd,J=12Hz,2H).ESI-MS:567.4(M+H+).實(shí)施例3：2-(N-（3-氯）苯基-N-乙基氨基)乙酸(3aS,4R,5S,6S,8R,9R,9aR,10R)-6-乙烯基十氫-5-羥-4,6,9,10-四甲基-1-氧代-3a,9-丙醇-3aH-環(huán)戊二烯并環(huán)辛烯-8-基酯（Ⅰc）的合成（1）3-氯-N-乙基苯甲酰胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲酰胺的合成。原料酸的投料量為10mmol，產(chǎn)量0.92g，產(chǎn)率50.3%，使用柱層析色譜法分離，流動相為：石油醚：乙酸乙酯=2:1，熔點(diǎn)為：78-82℃。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ:1.30(t,3H),3.53(m,2H),6.18(s,1H),7.38(t,1H),7.51(d,1H),7.69(d,1H),7.80(s,1H)。（2）3-氯-N-乙基苯甲胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲胺的合成。反應(yīng)混合物未經(jīng)純化，直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。（3）系列化合物3的合成實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中系列化合物1的合成。用硅膠柱層析法純化，流動相為二氯甲烷：乙酸乙酯=10:1，得產(chǎn)品0.831g，產(chǎn)率為78%。m/z=529.4,1HNMR(600MHz;CDCl3):δ0.63(d,J=6.8Hz,3H),0.73(d,J=6.8Hz,3H),1.09-1.11(t,3H)，1.11–1.12(m,1H),1.16(s,3H),1.23–1.28(m,2H),1.30–1.40(m,1H),1.41(s,3H),1.44–1.51(m,5H),1.64(dd,J=10Hz,J=7.2Hz,2H),2.03–2.08(m,3H),2.21–2.30(m,3H),2.72-2.75(m,2H),3.09(s,2H),3.34(d,J=6.4Hz,1H),4.48(s,2H),5.17–5.21(d,J=8.8Hz,1H),5.32–5.34(d,J=6.4Hz,1H),5.76–5.78(d,J=4.2Hz,1H),6.43(dd,J=17.2Hz,J=10.8Hz,1H),7.26-7.31(m,1H),7.34-7.37(m2H),7.392(s,1H).ESI-MS:529.4(M+H+).實(shí)施例4：2-(N-（4-甲基）苯基-N-乙基氨基)乙酸(3aS,4R,5S,6S,8R,9R,9aR,10R)-6-乙烯基十氫-5-羥-4,6,9,10-四甲基-1-氧代-3a,9-丙醇-3aH-環(huán)戊二烯并環(huán)辛烯-8-基酯（系列化合物4）的合成（1）對甲基-N-乙基苯甲酰胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲酰胺的合成。原料酸的投料量為10mmol，產(chǎn)量1.48g，產(chǎn)率63.6%，使用柱層析色譜法分離，流動相為：石油醚：乙酸乙酯=2:1，熔點(diǎn)為：93-96℃。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ:1.25(t,3H),2.04(s,3H),3.51(m,2H),6.19(s,1H),7.24(d,2H),7.67(d,2H)。（2）對甲基-N-乙基苯甲胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲胺的合成。反應(yīng)混合物未經(jīng)純化，直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。（3）系列化合物4的合成實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中系列化合物1的合成。粗產(chǎn)品用硅膠柱層析法純化，流動相為二氯甲烷：乙酸乙酯=4:1，得產(chǎn)品0.185g，產(chǎn)率為18.16%。1HNMR(400MHz;CDCl3):δ0.63(d,J=6.8Hz,3H),0.73(d,J=6.8Hz,3H),1.04-1.07(t,3H),1.11–1.12(m,1H),1.16(s,3H),1.23–1.28(m,2H),1.30–1.40(m,1H),1.41(s,3H),1.44–1.51(m,5H),1.64(dd,J=10Hz,J=7.2Hz,2H),2.03–2.08(m,3H),2.64-2.70(m,2H),2.21–2.30(m,3H),2.33(s,3H),3.09(s,2H),3.34(d,J=6.4Hz,1H),4.48(s,2H),5.17–5.21(d,J=8.8Hz,1H),5.32–5.34(d,J=6.4Hz,1H),5.76–5.78(d,J=4.2Hz,1H),6.43(dd,J=17.2Hz,J=10.8Hz,1H),7.22-7.24(dd,J=8Hz,1H),7.65-7.67(dd,J=8Hz,1H).ESI-MS:509.6(M+H+).實(shí)施例5：2-(N-（4-三氟甲基）苯基-N-乙基氨基)乙酸(3aS,4R,5S,6S,8R,9R,9aR,10R)-6-乙烯基十氫-5-羥-4,6,9,10-四甲基-1-氧代-3a,9-丙醇-3aH-環(huán)戊二烯并環(huán)辛烯-8-基酯（系列化合物5）的合成（1）4-三氟甲基-N-乙基苯甲酰胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲酰胺的合成。原料酸的投料量為10mmol，重結(jié)晶得產(chǎn)品1.97g，產(chǎn)率90.8%，熔點(diǎn)為：116-120℃。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ:1.18(t,3H),3.43(m,3H),6.19(s,1H),7.59(d,2H),7.77(d,2H)。（2）4-三氟甲基-N-乙基苯甲胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲胺的合成。反應(yīng)混合物未經(jīng)純化，直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。（3）系列化合物5的合成實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中系列化合物1的合成。粗品用硅膠柱層析法純化，流動相為二氯甲烷：乙酸乙酯=20:1，產(chǎn)率為42.1%。1HNMR(600MHz;CDCl3):δ0.63(d,J=6.8Hz,3H),0.73(d,J=6.8Hz,3H),1.04-1.07(t,3H),1.11–1.12(m,1H),1.16(s,3H),1.23–1.28(m,2H),1.30–1.40(m,1H),1.41(s,3H),1.44–1.51(m,5H),1.64(dd,J=10Hz,J=7.2Hz,2H),2.03–2.08(m,3H),2.64-2.70(m,2H),2.21–2.30(m,3H),3.09(s,2H),3.34(d,J=6.4Hz,1H),4.48(s,2H),5.17–5.21(d,J=8.8Hz,1H),5.32–5.34(d,J=6.4Hz,1H),5.76–5.78(d,J=4.2Hz,1H),6.43(dd,J=17.2Hz,J=10.8Hz,1H),7.22-7.24(dd,J=12Hz,1H),7.65-7.67(dd,J=12Hz,1H).ESI-MS:563.3(M+H+).實(shí)施例6：2-(N-（3-三氟甲基）苯基-N-乙基氨基)乙酸(3aS,4R,5S,6S,8R,9R,9aR,10R)-6-乙烯基十氫-5-羥-4,6,9,10-四甲基-1-氧代-3a,9-丙醇-3aH-環(huán)戊二烯并環(huán)辛烯-8-基酯（系列化合物6）的合成（1）間三氟甲基-N-乙基苯甲酰胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲酰胺的合成。原料酸的投料量為10mmol，重結(jié)晶得產(chǎn)品1.69g，產(chǎn)率62.6%。熔點(diǎn)為：85-88℃，1HNMR(400MHz,CDCl3)δ:1.28(t,3H),3.52(m,2H),6.23(s,1H),7.57(t,1H),7.74(d,1H),7.95(d,1H),8.02(s,1H)。（2）間三氟甲基-N-乙基苯甲胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲胺的合成。反應(yīng)混合物未經(jīng)純化，直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。（3）系列化合物6的合成實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中系列化合物1的合成。粗品用硅膠柱層析法純化，流動相為二氯甲烷：乙酸乙酯=20:1，產(chǎn)率為38.5%。1HNMR(600MHz;CDCl3):δ0.63(d,J=6.8Hz,3H),0.73(d,J=6.8Hz,3H),1.09-1.11(t,3H)，1.11–1.12(m,1H),1.16(s,3H),1.23–1.28(m,2H),1.30–1.40(m,1H),1.41(s,3H),1.44–1.51(m,5H),1.64(dd,J1=10Hz,J2=7.2Hz,2H),2.03–2.08(m,3H),2.21–2.30(m,3H),2.72-2.75(m,2H),3.09(s,2H),3.34(d,J=6.4Hz,1H),4.48(s,2H),5.17–5.21(d,J=8.8Hz,1H),5.32–5.34(d,J=6.4Hz,1H),5.76–5.78(d,J=4.2Hz,1H),6.43(dd,J=17.2Hz,J=10.8Hz,1H),7.53-7.57(m,1H),7.71-7.72(m,1H),7.94-7.95(m,1H),8.00(s,1H).ESI-MS:563.3(M+H+).實(shí)施例7：2-(N-（3-氟）苯基-N-乙基氨基)乙酸(3aS,4R,5S,6S,8R,9R,9aR,10R)-6-乙烯基十氫-5-羥-4,6,9,10-四甲基-1-氧代-3a,9-丙醇-3aH-環(huán)戊二烯并環(huán)辛烯-8-基酯（系列化合物7）的合成（1）3-氟-N-乙基苯甲酰胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲酰胺的合成。原料酸的投料量為10mmol，重結(jié)晶得產(chǎn)品1.25g，產(chǎn)率74.9%，熔點(diǎn)為：50-53℃。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ:1.23(t,3H),3.45(m,2H),6.27(s,1H),7.14(t,1H),7.34(d,1H),7.39(d,1H),7.49(s,1H)。（2）3-氟-N-乙基苯甲胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲胺的合成。反應(yīng)混合物未經(jīng)純化，直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。（3）系列化合物7的合成實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中系列化合物1的合成。粗品用硅膠柱層析法純化，流動相為二氯甲烷：乙酸乙酯=2:1，產(chǎn)率為46.4%。1HNMR(600MHz;CDCl3):δ0.63(d,J=6.8Hz,3H),0.73(d,J=6.8Hz,3H),0.09-1.11(t,3H),1.11–1.12(m,1H),1.16(s,3H),1.23–1.28(m,2H),1.30–1.40(m,1H),1.41(s,3H),1.44–1.51(m,5H),1.64(dd,J1=10Hz,J2=7.2Hz,2H),2.03–2.08(m,3H),2.21–2.30(m,3H),2.72-2.75(m,2H),3.09(s,2H),3.34(d,J=6.4Hz,1H),4.48(s,2H),5.17–5.21(d,J=8.8Hz,1H),5.32–5.34(d,J=6.4Hz,1H),5.76–5.78(d,J=4.2Hz,1H),6.43(dd,J=17.2Hz,J=10.8Hz,1H),7.16-7.19(m,1H),7.37-7.41(m,1H),7.47-7.51(m,2H).ESI-MS:513.4(M+H+).實(shí)施例8：2-(N-（4-叔丁基）苯基-N-乙基氨基)乙酸(3aS,4R,5S,6S,8R,9R,9aR,10R)-6-乙烯基十氫-5-羥-4,6,9,10-四甲基-1-氧代-3a,9-丙醇-3aH-環(huán)戊二烯并環(huán)辛烯-8-基酯（系列化合物8）的合成（1）4-叔丁基-N-乙基苯甲酰胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲酰胺的合成。原料酸的投料量為10mmol，產(chǎn)率：76.8%，熔點(diǎn)為：68-71℃。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ:1.21(t,3H),1.31(s,9H),3.48(m,2H),6.18(s,1H),7.42(d,2H),7.68(d,2H)。（2）4-叔丁基-N-乙基苯甲胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲胺的合成。反應(yīng)混合物未經(jīng)純化，直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。（3）系列化合物8的合成實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中系列化合物1的合成。粗品用硅膠柱層析法純化，流動相為二氯甲烷：乙酸乙酯=4:1，產(chǎn)率為62.5%。1HNMR(600MHz;CDCl3):δ0.63(d,J=6.8Hz,3H),0.73(d,J=6.8Hz,3H),1.04-1.07(t,3H),1.11–1.12(m,1H),1.16(s,3H),1.513(s,9H),1.23–1.28(m,2H),1.30–1.40(m,1H),1.41(s,3H),1.44–1.51(m,5H),1.64(dd,J1=10Hz,J2=7.2Hz,2H),2.03–2.08(m,3H),2.64-2.70(m,2H),2.21–2.30(m,3H),3.09(s,2H),3.34(d,J=6.4Hz,1H),4.48(s,2H),5.17–5.21(d,J=8.8Hz,1H),5.32–5.34(d,J=6.4Hz,1H),5.76–5.78(d,J=4.2Hz,1H),6.43(dd,J=17.2Hz,J=10.8Hz,1H),7.22-7.24(dd,J=12Hz,1H),7.65-7.67(dd,J=12Hz,1H).ESI-MS:551.3(M+H+).實(shí)施例9：2-(N-（3-溴-4-甲基）苯基-N-乙基氨基)乙酸(3aS,4R,5S,6S,8R,9R,9aR,10R)-6-乙烯基十氫-5-羥-4,6,9,10-四甲基-1-氧代-3a,9-丙醇-3aH-環(huán)戊二烯并環(huán)辛烯-8-基酯（系列化合物9）的合成（1）3-溴-4-甲基-N-乙基苯甲酰胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲酰胺的合成。產(chǎn)率：80.2%，熔點(diǎn)為：82-86℃，1HNMR(400MHz,CDCl3)δ:1.23(t,3H),2.41(s,3H),3.46(m,2H),6.22(s,1H),7.24(d,1H),7.57(d,1H),7.91(s,1H)。（2）3-溴-4-甲基-N-乙基苯甲胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲胺的合成。反應(yīng)混合物未經(jīng)純化，直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。（3）系列化合物9的合成實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中系列化合物1的合成。粗品用硅膠柱層析法純化，流動相為二氯甲烷：乙酸乙酯=4:1，產(chǎn)率為55.2%。1HNMR(600MHz;CDCl3):δ0.63(d,J=6.8Hz,3H),0.73(d,J=6.8Hz,3H),1.09-1.11(t,3H),1.11–1.12(m,1H),1.16(s,3H),1.23–1.28(m,2H),1.30–1.40(m,1H),1.41(s,3H),1.44–1.51(m,5H),1.64(dd,J=10Hz,J=7.2Hz,2H),2.03–2.08(m,3H),2.21–2.30(m,3H),2.476(s,3H),2.72-2.75(m,2H),3.09(s,2H),3.34(d,J=6.4Hz,1H),4.48(s,2H),5.17–5.21(d,J=8.8Hz,1H),5.32–5.34(d,J=6.4Hz,1H),5.76–5.78(d,J=4.2Hz,1H),6.43(dd,J=17.2Hz,J=10.8Hz,1H),7.27-7.29(d,1H),7.58-7.59(m,1H),7.91(m,1H).ESI-MS:587.3(M+H+).實(shí)施例10：2-(N-（3，4，5-三甲氧基）苯基-N-乙基氨基)乙酸(3aS,4R,5S,6S,8R,9R,9aR,10R)-6-乙烯基十氫-5-羥-4,6,9,10-四甲基-1-氧代-3a,9-丙醇-3aH-環(huán)戊二烯并環(huán)辛烯-8-基酯（系列化合物10）的合成（1）3，4，5-三甲氧基-N-乙基苯甲酰胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲酰胺的合成。原料酸的投料量為10mmol，產(chǎn)率74.2%。熔點(diǎn)為：105-108℃，1HNMR(400MHz,CDCl3)δ:1.23(t,3H),3.47(m,2H),3.87(s,9H),6.15(s,1H),6.97(s,2H)。（2）3，4，5-三甲氧基-N-乙基苯甲胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲胺的合成。反應(yīng)混合物未經(jīng)純化，直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。（3）系列化合物10的合成實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中系列化合物1的合成。粗品用硅膠柱層析法純化，流動相為石油醚：乙酸乙酯=2:1，產(chǎn)率為42.6%。1HNMR(600MHz;CDCl3):δ0.63(d,J=6.8Hz,3H),0.73(d,J=6.8Hz,3H),.09-1.11(t,3H),1.11–1.12(m,1H),1.16(s,3H),1.23–1.28(m,2H),1.30–1.40(m,1H),1.41(s,3H),1.44–1.51(m,5H),1.64(dd,J1=10Hz,J2=7.2Hz,2H),2.03–2.08(m,3H),2.21–2.30(m,3H),2.72-2.75(m,2H),3.09(s,2H),3.34(d,J=6.4Hz,1H),3.85(s,9H),4.48(s,2H),5.17–5.21(d,J=8.8Hz,1H),5.32–5.34(d,J=6.4Hz,1H),5.76–5.78(d,J=4.2Hz,1H),6.43(dd,J=17.2Hz,J=10.8Hz,1H),6.58(s,2H).ESI-MS:585.4(M+H+).實(shí)施例11：2-(N-（4-苯氧基）苯基-N-乙基氨基)乙酸(3aS,4R,5S,6S,8R,9R,9aR,10R)-6-乙烯基十氫-5-羥-4,6,9,10-四甲基-1-氧代-3a,9-丙醇-3aH-環(huán)戊二烯并環(huán)辛烯-8-基酯（系列化合物11）的合成（1）4-苯氧基-N-乙基苯甲酰胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲酰胺的合成。原料酸的投料量為10mmol，產(chǎn)率83.8%。熔點(diǎn)為：104-107℃，1HNMR(400MHz,CDCl3)δ:1.24(t,3H),3.49(m,2H),6.09(s,1H),6.98(d,2H),7.25(t,1H),7.54(s,1H),7.58(d,1H)。（2）4-苯氧基-N-乙基苯甲胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲胺的合成。反應(yīng)混合物未經(jīng)純化，直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。（3）系列化合物11的合成實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中系列化合物1的合成。粗品用硅膠柱層析法純化，流動相為石油醚：乙酸乙酯=3:1，產(chǎn)量為1.18g，產(chǎn)率為23.6%。1HNMR(600MHz;CDCl3):δ0.63(d,J=6.8Hz,3H),0.73(d,J=6.8Hz,3H),1.09-1.11(t,3H),1.11–1.12(m,1H),1.16(s,3H),1.23–1.28(m,2H),1.30–1.40(m,1H),1.41(s,3H),1.44–1.51(m,5H),1.64(dd,J1=10Hz,J2=7.2Hz,2H),2.03–2.08(m,3H),2.21–2.30(m,3H),2.72-2.75(m,2H),3.09(s,2H),3.34(d,J=6.4Hz,1H),4.48(s,2H),5.17–5.21(d,J=8.8Hz,1H),5.32–5.34(d,J=6.4Hz,1H),5.76–5.78(d,J=4.2Hz,1H),6.43(dd,J=17.2Hz,J=10.8Hz,1H),6.93-6.94(dd,J=6Hz,2H),6.98-6.99(d,2H),7.07-7.09(t,1H),7.27-7.29(dd,J=12,2H),7.30-7.33(t,2H).ESI-MS:587.4(M+H+).實(shí)施例12：2-(N-苯基-N-乙基氨基)乙酸(3aS,4R,5S,6S,8R,9R,9aR,10R)-6-乙烯基十氫-5-羥-4,6,9,10-四甲基-1-氧代-3a,9-丙醇-3aH-環(huán)戊二烯并環(huán)辛烯-8-基酯（系列化合物12）的合成（1）N-乙基苯甲酰胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲酰胺的合成。原料苯甲酰氯的投料量為10mmol，產(chǎn)率82.2%。熔點(diǎn)為：65-68℃，1HNMR(400MHz,CDCl3)δ:1.23(t,3H),3.48(m,2H),6.29(s,1H),7.38(t,2H),7.46(t,1H),7.74(d,2H)。（2）N-乙基苯甲胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲胺的合成。反應(yīng)混合物未經(jīng)純化，直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。（3）系列化合物12的合成實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中系列化合物1的合成。粗品用硅膠柱層析法純化，流動相為石油醚：乙酸乙酯=3:1，產(chǎn)率為44.3%。1HNMR(600MHz;CDCl3):δ0.63(d,J=6.8Hz,3H),0.73(d,J=6.8Hz,3H),1.09-1.11(t,3H),1.11–1.12(m,1H),1.16(s,3H),1.23–1.28(m,2H),1.30–1.40(m,1H),1.41(s,3H),1.44–1.51(m,5H),1.64(dd,J1=10Hz,J2=7.2Hz,2H),2.03–2.08(m,3H),2.21–2.30(m,3H),2.72-2.75(m,2H),3.09(s,2H),3.34(d,J=6.4Hz,1H),4.48(s,2H),5.17–5.21(d,J=8.8Hz,1H),5.32–5.34(d,J=6.4Hz,1H),5.76–5.78(d,J=4.2Hz,1H),6.43(dd,J=17.2Hz,J=10.8Hz,1H),7..23-7.24(d,2H),7.27-7.29(t,1H),7.31-7.33(t,2H).ESI-MS:495.3(M+H+).實(shí)施例13：2-(N-（3-甲基）苯基-N-乙基氨基)乙酸(3aS,4R,5S,6S,8R,9R,9aR,10R)-6-乙烯基十氫-5-羥-4,6,9,10-四甲基-1-氧代-3a,9-丙醇-3aH-環(huán)戊二烯并環(huán)辛烯-8-基酯（系列化合物13）的合成（1）3-甲基-N-乙基苯甲酰胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲酰胺的合成。原料酸的投料量為10mmol，產(chǎn)率78.4%。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ:1.20(t,3H),2.33(s,3H),3.44(m,2H),6.62(s,1H),7.24(d,1H),7.25(t,1H),7.54(s,1H),7.58(d,1H)。（2）3-甲基-N-乙基苯甲胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲胺的合成。反應(yīng)混合物未經(jīng)純化，直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。（3）系列化合物13的合成實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中系列化合物1的合成。粗品用硅膠柱層析法純化，流動相為石油醚：乙酸乙酯=3:1，產(chǎn)率為：48.3%。1HNMR(600MHz;CDCl3):δ0.63(d,J=6.8Hz,3H),0.73(d,J=6.8Hz,3H),1.09-1.11(t,3H),1.11–1.12(m,1H),1.16(s,3H),1.23–1.28(m,2H),1.30–1.40(m,1H),1.41(s,3H),1.44–1.51(m,5H),1.64(dd,J=10Hz,J=7.2Hz,2H),2.03–2.08(m,3H),2.21–2.30(m,3H),2.36(s,3H),2.72-2.75(m,2H),3.09(s,2H),3.34(d,J=6.4Hz,1H),4.48(s,2H),5.17–5.21(d,J=8.8Hz,1H),5.32–5.34(d,J=6.4Hz,1H),5.76–5.78(d,J=4.2Hz,1H),6.43(dd,J=17.2Hz,J=10.8Hz,1H),7.03-7.10(dd,2H),7.139(s,1H),7.15-7.18(t,1H).ESI-MS:509.4(M+H+).實(shí)施例14：2-(N-聯(lián)苯基-N-乙基氨基)乙酸(3aS,4R,5S,6S,8R,9R,9aR,10R)-6-乙烯基十氫-5-羥-4,6,9,10-四甲基-1-氧代-3a,9-丙醇-3aH-環(huán)戊二烯并環(huán)辛烯-8-基酯（系列化合物14）的合成（1）4-苯基-N-乙基苯甲酰胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲酰胺的合成。熔點(diǎn)為：170-173℃，產(chǎn)率72.4%，1HNMR(400MHz,CDCl3)δ:1.28(t,3H),3.53(m,2H),6.16(s,1H),7.40(t,1H),7.48(t,2H),7.60(d,2H),7.66(d,2H),7.83(d,2H)。（2）4-苯基-N-乙基苯甲胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲胺的合成。反應(yīng)混合物未經(jīng)純化，直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。（3）系列化合物14的合成實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中系列化合物1的合成。粗品用硅膠柱層析法純化，流動相為石油醚：乙酸乙酯=3:1，產(chǎn)率為：27.8%。ESI-MS:571.4(M+H+).實(shí)施例15：2-(N-（3,4-亞甲二氧基）苯基-N-乙基氨基)乙酸(3aS,4R,5S,6S,8R,9R,9aR,10R)-6-乙烯基十氫-5-羥-4,6,9,10-四甲基-1-氧代-3a,9-丙醇-3aH-環(huán)戊二烯并環(huán)辛烯-8-基酯（系列化合物15）的合成（1）3,4-亞甲二氧基苯甲酰胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲酰胺的合成。熔點(diǎn)為：83-85℃，產(chǎn)率68.4%，1HNMR(400MHz,CDCl3)δ:1.24(t,3H),3.47(m,2H),5.96(s,1H),6.02(s,2H),6.81(d,1H),7.26(s,1H),7.28(d,1H)。（2）3,4-亞甲二氧基苯甲胺的合成實(shí)驗(yàn)操作同實(shí)施例1中4-二甲氨基-N-乙基苯甲胺的合成。反應(yīng)混合物未經(jīng)純化，直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。（3）系列化合物14的合成實(shí)驗(yàn)步驟同實(shí)施例1中系列化合物1的合成。粗品用硅膠柱層析法純化，流動相為石油醚：乙酸乙酯=2:1，產(chǎn)量61mg，產(chǎn)率為11.3%。1HNMR(600MHz;CDCl3):δ0.63(d,J=6.8Hz,3H),0.73(d,J=6.8Hz,3H),1.09-1.11(t,3H),1.11–1.12(m,1H),1.16(s,3H),1.23–1.28(m,2H),1.30–1.40(m,1H),1.41(s,3H),1.44–1.51(m,5H),1.64(dd,J1=10Hz,J2=7.2Hz,2H),2.03–2.08(m,3H),2.21–2.30(m,3H),2.36(s,3H),2.72-2.75(m,2H),3.09(s,2H),3.34(d,J=6.4Hz,1H),4.48(s,2H),5.17–5.21(d,J=8.8Hz,1H),5.32–5.34(d,J=6.4Hz,1H),5.76–5.78(d,J=4.2Hz,1H),5.93(s,2H),6.43(dd,J1=17.2Hz,J2=10.8Hz,1H),6.70-6.71(d,1H),6.73-6.74(d,1H),6.86(s,1H).ESI-MS:539.4(M+H+).（二）實(shí)驗(yàn)實(shí)施例體外抗癌活性測定（1）實(shí)驗(yàn)方法在96孔板上放置培養(yǎng)好的人結(jié)直腸癌細(xì)胞株（HCT116,DLD-1,HT-29,RKO,Colo320,SW837,SNU-C1等），加入一定濃度的待測化合物后，在37℃下孵育18-24小時(shí)后觀察結(jié)果，以待測化合物癌細(xì)胞的抑制率來測定抗癌活性，對活性較好的化合物進(jìn)而測定其IC50值。（2）實(shí)驗(yàn)用陽性對照藥為測試公司提供的內(nèi)部活性化合物，其在篩選模型中的IC50在20-30nmol·L-1范圍。（3）首先在μmol·L-1水平對合成的15個(gè)化合物進(jìn)行了初步篩選，結(jié)果發(fā)現(xiàn)它們對RKO、Colo320和HT-29三種腫瘤細(xì)胞均有抑制活性，抑制率在50～100%之間。（4）分別測定了抑制率最高的化合物11和13的IC50值，測試結(jié)果見表2。表2化合物11和13對人結(jié)直腸癌細(xì)胞抑制活性(IC50值)由表2可知，本發(fā)明所合成的化合物，特別是化合物11和13具有較好的抗腫瘤活性，可用于制備治療腫瘤特別是結(jié)直腸腫瘤的藥物。