本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種制備烏索酸衍生物FZU-03,010的方法及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：
近年來(lái)，天然產(chǎn)物由于其豐富的來(lái)源和多樣的生物學(xué)特性吸引越來(lái)越多的關(guān)注。其中，五環(huán)三萜類化合物廣泛存在于自然界中，具有極高的藥用價(jià)值，如可抗氧化、抗炎、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等，尤其是抗癌方面的藥理作用，開(kāi)發(fā)意義重大。因此，他們將成為一個(gè)發(fā)展新的候選藥物的關(guān)鍵來(lái)源。烏索酸（UA）是一種五環(huán)三萜類化合物，廣泛存在于多科植物中。烏索酸（UA）具有多方面的生物活性，包括抗炎、抗氧化、抗癌、抗菌等，其顯著的抗腫瘤和化學(xué)預(yù)防作用已被深入研究。此外，UA因其能顯著提高人體免疫功能越來(lái)越受人們關(guān)注。所有這些研究結(jié)果表明，UA具有極高的潛在臨床應(yīng)用價(jià)值。在腫瘤治療領(lǐng)域，大量結(jié)果表明UA參與了人體的一系列抗癌活動(dòng)，如抑制腫瘤的發(fā)生，遏制癌細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡等。然而，UA溶解度差、代謝快、生物利用度低、抗癌活性不夠高等缺點(diǎn)制約其在臨床上的進(jìn)一步應(yīng)用。因此，在UA結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上進(jìn)行合理的結(jié)構(gòu)修飾，合成新的具有高抗腫瘤活性和成藥性的UA衍生物具有重要意義。目前雖然有報(bào)道眾多的UA衍生物，且多數(shù)在其3位羥基和28位的羧基進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾（如CN102250188A，CN101928322A，CN102558282A等），但還存在制備步驟繁瑣、合成成本高、成藥性差等問(wèn)題，至今未有批準(zhǔn)上市的藥物。我們以烏索酸為起始原料，合成出大量的UA衍生物，進(jìn)行抗腫瘤構(gòu)效關(guān)系，篩選得到高抗腫瘤活性的烏索酸衍生物FZU-03,010。再進(jìn)一步優(yōu)化合成方法，使反應(yīng)操作簡(jiǎn)單，易于處理，且可以大量獲得。本發(fā)明探索合成了一種具有極高成藥性的化合物，同時(shí)也為其他同類化合物的合成提供新的解決思路和方案。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于合成一種具有高的抗癌活性的哌嗪修飾的烏索酸衍生物。該衍生物活性測(cè)試結(jié)果表明其對(duì)于白血病、乳腺癌和肺癌細(xì)胞具有顯著的抑制活性。且制備方法簡(jiǎn)單，易于處理，副產(chǎn)物少，可以大批量生產(chǎn)制備。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：一種哌嗪修飾的烏索酸衍生物，其結(jié)構(gòu)式如下：。一種制備如權(quán)利要求1所述的哌嗪修飾的烏索酸衍生物的方法，包括以下步驟：1）將烏索酸：溶解于丙酮中，0℃下逐滴加入瓊斯試劑，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)半個(gè)小時(shí)，得到黃色液體；將反應(yīng)液滴入水中，抽濾得到白色固體：；2）將步驟1）得到的白色固體FZU-0000-018溶解于惰性溶劑中，0℃下加入強(qiáng)堿，攪拌半小時(shí)至均勻后加入甲酸乙酯，室溫反應(yīng)24小時(shí)得黃色固體，經(jīng)純化得淺紅色固體：；3）將步驟2）得到的淺紅色固體FZU-0000-041溶解于乙醇中，加入鹽酸肼，在90℃下反應(yīng)3小時(shí)，反應(yīng)完成后旋干溶劑經(jīng)純化得白色固體：；4）將步驟3）得到的化合物白色固體FZU-0007-005溶解于有機(jī)溶劑中，在冰水浴中加入草酰氯反應(yīng)過(guò)夜后，旋干溶劑后用有機(jī)溶劑溶解，加入哌嗪反應(yīng)一天，蒸去溶劑，加入去離子水，用二氯甲烷萃取，合并有機(jī)層，Na2SO4干燥，旋干溶劑，用硅膠柱純化，洗脫劑體積比：CH2Cl2:MeOH=10:1，得烏索酸衍生物：。步驟2）所述的惰性溶劑包括苯和甲苯中的一種。步驟2）所述的的強(qiáng)堿包括氫化鈉、甲醇鈉和叔丁醇鉀中的一種。步驟2）所述的的有機(jī)溶劑包括氯仿、二氯甲烷和乙酸乙酯中的一種。一種如上所述的哌嗪修飾的烏索酸衍生物在制備治療白血病、乳腺癌和肺癌的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的顯著優(yōu)點(diǎn)在于：本發(fā)明以烏索酸為起始原料，經(jīng)過(guò)四步反應(yīng)制得哌嗪修飾的烏索酸衍生物。該方法所用試劑為實(shí)驗(yàn)室常用試劑，且產(chǎn)物純化方法較為簡(jiǎn)便，得到具有高抗腫瘤活性的哌嗪修飾的烏索酸衍生物。此外，該反應(yīng)操作簡(jiǎn)單，易于處理，可以大量獲得具有高抗腫瘤活性的哌嗪修飾的烏索酸衍生物，以供醫(yī)藥研發(fā)的使用。附圖說(shuō)明圖1為本發(fā)明的合成路線。具體實(shí)施方式為了使本發(fā)明所述的內(nèi)容更加便于理解，下面結(jié)合具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明所述的技術(shù)方案做進(jìn)一步的說(shuō)明，但是本發(fā)明不僅限于此。實(shí)施例1一種哌嗪修飾的烏索酸衍生物的制備方法，包括以下步驟：1）在250mL燒瓶中加入10g烏索酸和70mL丙酮，0℃下逐滴加15mL瓊斯試劑，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)半個(gè)小時(shí)；點(diǎn)TLC板確定反應(yīng)程度，待確定反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液滴入水中，經(jīng)抽濾，干燥等步驟最后得到9g白色固體FZU-0000-018；1HNMR(400MHz,CDCl3)δ5.26(t,J=3.5Hz,1H),2.61?2.47(m,1H),2.43?2.31(m,1H),2.22?2.20(m,1H),2.05?1.82(m,5H),1.69?1.67(m,4H),1.57?1.38(m,6H),1.38?1.27(m,5H),1.25(s,3H),1.08(s,3H),1.05(s,3H),1.02(s,3H),0.94(d,J=5.6Hz,3H),0.86(d,J=6.4Hz,3H),0.82(s,3H).HRMS(ESI)calcdforC30H46NaO3[M+Na]+,477.3339;found,477.3340.2）在200mL燒瓶中，將3g化合物FZU-0000-018溶解于20mL苯中，0℃下加入1.8g的甲醇鈉，攪拌均勻后半小時(shí)加入3.4g的甲酸乙脂，室溫反應(yīng)24小時(shí)得黃色固體，經(jīng)重結(jié)晶得2.5g淺紅色固體FZU-0000-041；1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.50(s,1H),5.28(s,1H),2.20(d,J=11.0Hz,1H),2.04?1.76(m,5H),1.65?1.52(m,6H),1.48?1.42(m,6H),1.26(s,6H),1.11?1.06(m,6H),1.03(s,3H),1.01(s,3H),0.95(s,J=5.3Hz,3H),0.86(d,J=7.3Hz,3H),0.66(s,3H).HRMS(ESI)calcdforC31H46NaO4[M+Na]+,505.3288;found,505.3280.3）在100mL燒瓶中，將1g的化合物FZU-0000-041溶解于10mL乙醇中，加入140mg的鹽酸肼，在90℃下反應(yīng)3小時(shí)，反應(yīng)完成后旋干溶劑經(jīng)重結(jié)晶940mg白色固體：FZU-0007-005；1HNMR(400MHz,CDCl3)δ9.13(s,1H),7.19(s,1H),5.31(s,1H),2.59(d,J=14.7Hz,1H),2.25(d,J=10.7Hz,1H),2.10?1.97(m,4H),1.76?1.66(m,4H),1.56?1.44(m,3H),1.29?1.27(m,3H),1.26(s,3H),1.16(s,3H),1.11(...