相關(guān)申請

本申請要求于2014年11月5日提交的美國臨時申請62/075,505的優(yōu)先權(quán)，該申請全文以引用方式并入本文。

本申請整體涉及亞氨基糖，具體地講，涉及n-取代的脫氧野尻霉素化合物。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

一個實(shí)施方案可為式ia的化合物：或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中r可為

a)其中環(huán)的一個或多個ch基團(tuán)可任選地被n取代；或者

b)其中x6可為o或s；

w1-w4中的每一者可獨(dú)立地選自h和c1-c3烷基基團(tuán)，諸如甲基、乙基和丙基；

r1可為烷基基團(tuán)，諸如c1-c20或c1-c12烷基基團(tuán)；

x1-x5中的每一者可獨(dú)立地選自h、n3、no2、

nh2、和包含含雜原子的環(huán)的基團(tuán)，

其中r2和r3中的每一者獨(dú)立地選自h、烷基(諸如c1-c4或c1-c3烷基)或羥烷基(諸如c1-c4或c1-c3羥烷基)；r4和r5各自為h，或者r4和r5一起為＝n-oh，前提條件是x1-x5中的至少一者為或包含含雜原子的環(huán)的基團(tuán)；或者其中x1-x5中的每一者獨(dú)立地選自h、n3、no2和nh2，并且其中x1-x5中的相鄰兩者形成含雜原子的環(huán)。

在式ia的化合物的一些實(shí)施方案中，w1-w4中的每一者為氫。

在式ia的化合物的一些實(shí)施方案中，r可為在這種r的一些情況下，r的環(huán)的一個或多個ch基團(tuán)可任選地被n取代。而在這種r的一些其它情況下，r的環(huán)的ch基團(tuán)均不被n取代。

在這種r的一些實(shí)施方案中，r1可為c3-c10烷或c4-c9或c5-c9或c5-c7烷基基團(tuán)，如c6烷基基團(tuán)。

在一些實(shí)施方案中，x1-x5中的一者可為在這種情況下，在一些實(shí)施方案中，r2和r3各自可為甲基并且r4和r5各自可為h。在一些其它實(shí)施方案中，r2可為c1-c3羥烷基，諸如羥甲基、羥乙基或羥丙基，并且r3、r4和r5中的每一者可為h。而在一些其它實(shí)施方案中，r2和r3各自為h并且r4和r5一起為＝n-oh。

在一些實(shí)施方案中，x1-x5中的一者可為包含含雜原子的環(huán)的基團(tuán)。在一些實(shí)施方案中，這種含雜原子的環(huán)可含有至少一個選自n和o的形成環(huán)的原子。

在一些實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)可直接鍵合到r的環(huán)。而在一些其它實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)可通過c1-c3烷基基團(tuán)鍵合到r的環(huán)。

在一些實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)可為三元環(huán)、四元環(huán)、五元環(huán)、六元環(huán)或七元環(huán)。在一些實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)可為五元環(huán)或六元環(huán)。

在一些實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)可為共軛環(huán)。而在一些其它實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)可為非共軛環(huán)。在一些實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)可包含至少一個形成環(huán)的氮原子。在一些實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)可包含兩個或更多個形成環(huán)的氮原子。在一些實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)含有形成環(huán)的氧原子。在一些實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)可包含至少一個形成環(huán)的氮原子和至少一個形成環(huán)的氧原子。

在一些實(shí)施方案中，包含含雜原子的環(huán)的基團(tuán)可選自以下各項(xiàng)：

在一些實(shí)施方案中，x2或x3可為或包含含雜原子的環(huán)的基團(tuán)。在這種情況下，x4和x5可各自獨(dú)立地選自h和no2，其中x4和x5中的至少一者為h。

在一些實(shí)施方案中，x3可為或包含含雜原子的環(huán)的基團(tuán)。在這種情況下，x5可為no2或h。

在一些實(shí)施方案中，x1-x5中的不超過兩者可不為h。在一些實(shí)施方案中，x1-x5中的至少兩者或至少三者可為h。在一些實(shí)施方案中，x1-x5中的兩者、三者或四者可為h。

在一些實(shí)施方案中，選自x1-x5的相鄰基團(tuán)中的兩者可形成含雜原子的環(huán)。這種含雜原子的環(huán)可包括一個或多個形成環(huán)的雜原子，諸如n和o。例如，x1和x2、x2和x3、x3和x4或者x4和x5可形成含雜原子的環(huán)。在一些實(shí)施方案中，x3和x或者x4和x5可形成含雜原子的環(huán)。在一些實(shí)施方案中，r可選自以下基團(tuán)：

在一些實(shí)施方案中，x1-x5中不形成含雜原子的環(huán)的那些部分各自可為h。而在一些其它實(shí)施方案中，x1-x5中不形成含雜原子的環(huán)的那些部分中的至少一者可為no2或nh2，而x1-x5中不形成含雜原子的環(huán)的其余部分(若有的話)可為h。在一些實(shí)施方案中，x1-x5中不形成含雜原子的環(huán)的那些部分中的一者可為no2或nh2，而x1-x5中不形成含雜原子的環(huán)的其余部分可為h。

在一些實(shí)施方案中，r可為其中x6可為o或者s。在一些實(shí)施方案中，x6可為o。在一些實(shí)施方案中，r1可為c6-c10烷基。對于這種r，r1可為c4-c12或c5-c11或c6-c10或者c7-c9烷基基團(tuán)，如c8烷基基團(tuán)。

另一個實(shí)施方案可為包含式ia的化合物及其藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物，如口服藥物組合物。

具體實(shí)施方式

下面描述各種實(shí)施方案。應(yīng)當(dāng)注意，特定實(shí)施方案不旨在作為窮盡性描述，或作為對本文討論的更廣泛方面的限制。結(jié)合具體實(shí)施方案描述的一個方面不必限于該實(shí)施方案，并且可以任何其它實(shí)施方案來實(shí)施。

術(shù)語定義

如本文所用，“約”將被本領(lǐng)域的技術(shù)人員理解，并且在某種程度上將根據(jù)其使用的情形而變化。如果該術(shù)語的使用對本領(lǐng)域的技術(shù)人員而言不清楚，考慮到其使用的情形，“約”將意味著具體術(shù)語的至多正負(fù)10％。

在描述要素的情形中(特別是在隨附權(quán)利要求書的情形中)使用術(shù)語“一”和“一種”和“所述”和類似的指示詞應(yīng)被解釋為涵蓋單數(shù)和復(fù)數(shù)兩者，除非本文另有說明或明顯與情形相矛盾。除非本文另有說明，否則本文中值的范圍的列舉僅旨在用作單獨(dú)提及落在該范圍內(nèi)中的每一個單獨(dú)值的簡寫方法，并且將每個單獨(dú)值并入本說明書中，如同在本文中單獨(dú)列舉一樣。本文描述的所有方法可以任何合適的順序進(jìn)行，除非本文另有說明或明顯與情形相矛盾。使用本文提供的任何和所有示例或示例性語言(例如，“諸如”)僅旨在更好地闡明實(shí)施方案，并不對權(quán)利要求書的范圍構(gòu)成限制，除非另有說明。說明書中的任何語言都不應(yīng)被解釋為表示任何非請求保護(hù)的要素是必不可少的。

一般來講，“取代的”是指烷基、烯基、炔基、芳基或醚基基團(tuán)發(fā)生如下變化：如下文定義(例如，在烷基基團(tuán)中)，鍵合到其中含有的氫原子的一個或多個鍵被鍵合到非氫原子或非碳原子的鍵代替。取代的基團(tuán)還包括如下基團(tuán)：其中一個或多個鍵合到碳原子或氫原子的鍵被一個或多個鍵合到雜原子的鍵(包括雙鍵或三鍵)代替。因此，除非另有說明，否則取代的基團(tuán)將被一個或多個取代基取代。在一些實(shí)施方案中，取代的基團(tuán)被1、2、3、4、5或6個取代基取代。取代基基團(tuán)的示例包括：鹵素類(即，f、cl、br和i)；羥基類；烷氧基、鏈烯氧基、炔氧基、芳氧基、芳烷氧基、雜環(huán)氧基和雜環(huán)基烷氧基；羰基(氧代)；羧基類；酯類；聚氨酯類；肟類；羥胺類；烷氧基胺類；芳烷氧基胺類；硫醇類；硫化物類；亞砜類；砜類；磺?；?；磺酰胺類；胺類；n-氧化物類；肼類；酰肼類；腙類；疊氮化物類；酰胺類；脲類；脒類；胍類；烯胺類；酰亞胺類；異氰酸酯類；異硫氰酸酯類；氰酸酯類；硫氰酸酯類；亞胺類；硝基基團(tuán)類；腈類(即，cn)；等等。

如本文所用，“烷基基團(tuán)”包括具有1至約20個碳原子(通常為1個至12個碳原子，在一些實(shí)施方案中為1至8個碳原子)的直鏈和支鏈烷基基團(tuán)。如本文所用，“烷基基團(tuán)”包括如下定義的環(huán)烷基基團(tuán)。烷基基團(tuán)可以是取代的或未取代的。直鏈烷基基團(tuán)的示例包括甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基、正庚基和正辛基基團(tuán)。支鏈烷基基團(tuán)的示例包括但不限于異丙基、仲丁基、叔丁基、新戊基和異戊基基團(tuán)。代表性的取代的烷基基團(tuán)可用例如氨基、硫代基、羥基、氰基、烷氧基和/或鹵代基團(tuán)(諸如，f、cl、br和i基團(tuán))取代一次或多次。如本文所用，術(shù)語“鹵代烷基”為具有一個或多個鹵代基團(tuán)的烷基基團(tuán)。在一些實(shí)施方案中，鹵代烷基是指全鹵代烷基基團(tuán)。如本文所用，環(huán)烷基基團(tuán)是環(huán)狀烷基基團(tuán)，諸如但不限于環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基和環(huán)辛基基團(tuán)。在一些實(shí)施方案中，環(huán)烷基基團(tuán)具有3至8個環(huán)元(ringmember)，而在其它實(shí)施方案中，環(huán)碳原子數(shù)為3至5、6或7。環(huán)烷基基團(tuán)可以是取代的或未取代的。環(huán)烷基基團(tuán)還包括多環(huán)狀環(huán)烷基基團(tuán)，諸如但不限于降莰基、金剛烷基、冰片基、莰烯基、異莰烯基和蒈烯基基團(tuán)；以及稠環(huán)，諸如但不限于十氫化萘基；等等。環(huán)烷基基團(tuán)還包括被如上限定的直鏈或支鏈烷基基團(tuán)取代的環(huán)。代表性的取代的環(huán)烷基基團(tuán)可以是單取代的或多于一次取代的，諸如但不限于：2,2-、2,3-、2,4-、2,5-或2,6-二取代的環(huán)己基基團(tuán)或者單取代、二取代或三取代的降莰基或環(huán)庚基基團(tuán)，其可被例如烷基、烷氧基、氨基、硫代基、羥基、氰基和/或鹵代基團(tuán)取代。

如本文所用，烯基基團(tuán)為具有2至約20個碳原子并且還包含至少一個雙鍵的直鏈、支鏈或環(huán)狀烷基基團(tuán)。在一些實(shí)施方案中，烯基基團(tuán)具有1至12個碳原子，或通常具有1至8個碳原子。烯基基團(tuán)可以是取代的或未取代的。烯基基團(tuán)包括例如乙烯基、丙烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、異丁烯基、環(huán)己烯基、環(huán)戊烯基、環(huán)己二烯基、丁間二烯基、戊二烯基和己二烯基基團(tuán)等。類似于烷基基團(tuán)，烯基基團(tuán)可以是取代的。二價烯基基團(tuán)，即具有兩個附接點(diǎn)的烯基基團(tuán)包括但不限于ch-ch＝ch2、c＝ch2或c＝chc3。

如本文所用，“芳基”或“芳族”基團(tuán)是不含雜原子的環(huán)狀芳族烴。芳基基團(tuán)包括單環(huán)、雙環(huán)和多環(huán)環(huán)系。因此，芳基基團(tuán)包括但不限于苯基、薁基、庚搭烯基、亞聯(lián)苯基、苯并二茚基、芴基、菲基、三亞苯基、芘基、萘并萘基、屈基、聯(lián)苯基、蒽基、茚基、茚滿基、并環(huán)戊二烯基和萘基基團(tuán)。在一些實(shí)施方案中，芳基基團(tuán)在基團(tuán)的環(huán)部分含有6至14個碳原子，在其它實(shí)施方案中，含有6至12個或甚至6至10個碳原子。短語“芳基基團(tuán)”包括含稠環(huán)的基團(tuán)，諸如稠合芳族-脂族環(huán)系(例如，茚滿基、四氫萘基等)。芳基基團(tuán)可以是取代的或未取代的。

如本文所用，雜烷基基團(tuán)包括如上限定的直鏈和支鏈烷基基團(tuán)，還包括1、2、3、4、5或6個獨(dú)立地選自氧、硫和氮的雜原子。因此，雜烷基基團(tuán)包括1至12個碳原子、1至10個碳，或者在一些實(shí)施方案中，包括1至8個或1、2、3、4、5或6個碳原子，或其中的任何范圍(例如，1至4個)。雜烷基基團(tuán)的示例包括但不限于-(ch2ch2o)1-5ch3、-(ch2)1-6o(ch2)1-6ch3、-(ch2)1-6nra(ch2)1-6ch3、-(ch2)1-6s(ch2)1-6ch3、-(ch2)1-6o(ch2)1-6o(ch2)1-6ch3、-(ch2)1-6nra(ch2)1-6nra(ch2)1-6ch3、-(ch2)1-6o(ch2)1-6o(ch2)1-6o(ch2)1-6ch3、-(ch2)1-6nra(ch2)1-6nra(ch2)1-6nra(ch2)1-6ch3，其中雜烷基基團(tuán)中的碳原子總數(shù)為1至12個，并且r^a為氫或取代的或未取代的烷基、烯基、芳基或芳烷基基團(tuán)。雜烷基基團(tuán)的其它示例包括但不限于在單個基團(tuán)中具有不同雜原子的基團(tuán)。雜烷基基團(tuán)

的這些示例包括但不限于-(ch2)1-6s(ch2)1-6o(ch2)1-6、-(ch2)1-6nra(ch2)1-6)o(ch2)1-6、-(ch2)1-6o(ch2)1-6nra(ch2)1-6s(ch2)1-6、-(ch2)1-6nra(ch2)1-6o(ch2)1-6s(ch2)1-6，其中雜烷基基團(tuán)中的碳原子總數(shù)為1至12個。在一些實(shí)施方案中，雜烷基包括但不限于聚氧乙烯基團(tuán)，諸如-(och2ch2-)1-5ch3，例如，-o(ch2)2o(ch2)2och3、-o(ch2)2o(ch2)2o(ch2)2och3、-o(ch2)2o(ch2)2o(ch2)2o(ch2)och3。

如本文所用，芳烷基基團(tuán)是取代的芳基基團(tuán)，其中如上限定的烷基基團(tuán)具有被鍵合到如上限定的芳基基團(tuán)的鍵代替的該烷基基團(tuán)的氫鍵或碳鍵。在一些實(shí)施方案中，芳烷基基團(tuán)含有7至14個碳原子、7至10個碳原子，例如7、8、9或10個碳原子或其中的任何范圍(例如，7至8個)。芳烷基基團(tuán)可以是取代的或未取代的。取代的芳烷基基團(tuán)可在基團(tuán)的烷基、芳基或者烷基和烷基兩個部分被取代。代表性的取代的和未取代的烷芳基基團(tuán)包括但不限于烷基苯基，諸如甲基苯基、(氯甲基)苯基、氯(氯甲基)苯基；或者稠合烷芳基基團(tuán)，如5-乙基萘基。

如本文所用，雜環(huán)基基團(tuán)為含有3個或更多個環(huán)元的非芳族環(huán)化合物，其中一個或多個環(huán)元為雜原子，諸如但不限于n、o和s。在一些實(shí)施方案中，雜環(huán)基基團(tuán)含有1、2、3或4個雜原子。在一些實(shí)施方案中，雜環(huán)基基團(tuán)包括具有3至16個環(huán)元的單環(huán)狀環(huán)、雙環(huán)狀環(huán)或三環(huán)狀環(huán)，而其它這種基團(tuán)具有3至6個、3至10個、3至12個或3至14個環(huán)元。雜環(huán)基基團(tuán)包括部分不飽和環(huán)系和飽和環(huán)系，諸如咪唑啉基和咪唑烷基基團(tuán)。該短語還包括含有雜原子的橋連聚環(huán)狀環(huán)系，諸如但不限于奎寧基。該短語還包括具有其它基團(tuán)(諸如，鍵合到環(huán)元中的一者的烷基、氧代基或鹵代基團(tuán))的雜環(huán)基基團(tuán)，被稱為“取代的雜環(huán)基基團(tuán)”。雜環(huán)基基團(tuán)包括但不限于氮丙啶基、氮雜環(huán)丁烷基、吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、噻唑烷基、四氫噻吩基、四氫呋喃基、二氧雜環(huán)戊烯基、吡咯啉基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、硫代嗎啉基、四氫吡喃基和四氫硫代吡喃基基團(tuán)。代表性的取代的雜環(huán)基基團(tuán)可以是單取代的或多于一次取代的，諸如但不限于2-、3-、4-、5-或6-取代的或被諸如上文所列的那些各種取代基二取代的嗎啉基基團(tuán)。如果化學(xué)上可能的話，一個或多個雜原子也可以是氧化形式。

如本文所用，雜芳基基團(tuán)是含有5個或更多個環(huán)元的芳族環(huán)化合物，其中一個或多個環(huán)元為雜原子，諸如但不限于n、o和s。雜芳基基團(tuán)包括但不限于諸如以下的基團(tuán)：吡咯基、吡唑基、三唑基、四唑基、惡唑基、異惡唑基、噻唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、噻吩基、苯并噻吩基、呋喃基、咪唑基、苯并呋喃基、吲哚基、氮雜吲哚基(吡咯并吡啶基)、吲唑基、苯并咪唑基、咪唑并吡啶基(氮雜苯并咪唑基)、吡啶吡啶基、三唑并吡啶基、苯并三唑基、苯并惡唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、咪唑并吡啶基、異惡唑并吡啶基、硫萘基、嘌呤基、黃嘌呤基、腺嘌呤基、鳥嘌呤基、喹啉基、異喹啉基、四氫喹啉基、喹喔啉基和喹唑啉基基團(tuán)。雜芳基基團(tuán)包括其中所有環(huán)為芳族的稠環(huán)化合物，諸如吲哚基基團(tuán)；并且包括其中僅一個環(huán)為芳族的稠環(huán)化合物，諸如2,3-二氫吲哚基基團(tuán)。短語“雜芳基基團(tuán)”包括稠環(huán)化合物并且還包括具有鍵合到一個環(huán)元上的其它基團(tuán)(諸如，烷基基團(tuán))的雜芳基基團(tuán)，被稱為“取代的雜芳基基團(tuán)”。代表性的取代的雜芳基基團(tuán)可被諸如上文所列的那些各種取代基取代一次或多次。如果化學(xué)上可能的話，一個或多個雜原子也可以是氧化形式。

如本文所用，本文所用的術(shù)語“鹵素”或“鹵代物”是指溴、氯、氟或碘。在一些實(shí)施方案中，鹵素為氟。在其它實(shí)施方案中，鹵素為氯或溴。本文所用的術(shù)語“鹵化物”是指鹵素陰離子，諸如溴化物、氯化物、氟化物和碘化物。在一些實(shí)施方案中，鹵化物為氯化物或碘化物。

如本文所用，術(shù)語“烷氧基”是指鍵合到氧原子的取代的或未取代的烷基基團(tuán)。示例包括但不限于甲氧基和乙氧基。代表性的取代的烷氧基基團(tuán)可被諸如上文所列的那些取代基取代一次或多次，諸如甲氧基甲基和氟代甲氧基。如本文所用，術(shù)語“羥烷基”是指用一個或多個羥基基團(tuán)封端的烷基基團(tuán)。

如本文所用，術(shù)語“共軛的”是指含有至少兩個具有sp²-雜化(或也可任選地為sp-雜化)的相鄰c原子的基團(tuán)，如環(huán)狀基團(tuán)或環(huán)，并且其中這些c原子中的一者或多者還可被諸如n或o的雜原子取代。在最簡單的情況下，這可以是例如具有交替的c-c單鍵和雙鍵(或三鍵)的基團(tuán)，但也包括芳族基團(tuán)。

如本文所用，術(shù)語“病毒感染”描述的是一種患病狀態(tài)，其中病毒侵入健康細(xì)胞，使用細(xì)胞的繁殖機(jī)制來增殖或復(fù)制，釋放病毒顆粒，并用新產(chǎn)生的子代病毒感染其它細(xì)胞。某些病毒引起的潛伏性感染也是病毒感染的可能結(jié)果。如本文所用，術(shù)語“治療或預(yù)防病毒感染”是指抑制特定病毒的復(fù)制、抑制病毒傳播或防止病毒在其宿主中建立，并且改善或減輕病毒感染引起的疾病癥狀。如果病毒載量減少，死亡率和/或發(fā)病率降低，則認(rèn)為治療具有治療性。

ic50或ic90(抑制濃度50或90)也被稱為有效濃度或者ec50或ec90，是用來使病毒載量分別減少50％或90％的治療劑(如亞氨基糖)濃度。

cc50(細(xì)胞毒性濃度50)是導(dǎo)致50％的宿主細(xì)胞死亡的治療劑(如亞氨基糖)濃度。

denv代表登革熱病毒。

veev代表委內(nèi)瑞拉馬腦炎病毒。

iv代表靜脈內(nèi)。

ig代表胃內(nèi)。

ip代表腹膜內(nèi)。

im代表肌肉內(nèi)。

sq代表皮下。

pfu代表噬菌斑形成單位。

pbs代表磷酸鹽緩沖鹽水。

uv-5是指下式的化合物：

相關(guān)文獻(xiàn)

以下專利文獻(xiàn)的全文以引用方式并入本文，這些文獻(xiàn)可用于理解本公開：美國專利號6,545,021、6,809,803、6,689,759、6,465,487、5,622,972、8,450,345、8,426,445、8,748,460、8.975,280；美國專利申請公布號2011-0065754、2011-0065753、2011-0065752；pct申請公布wo1999/040916、wo2014/143999、wo2014/179424、wo2014/179438、wo2015/039010。如果這些文獻(xiàn)中的任何定義與本文中提供的定義矛盾，以本文提供的定義為準(zhǔn)。

公開內(nèi)容

本發(fā)明人研發(fā)了新型亞氨基糖化合物。由于可將該新型化合物歸為脫氧野尻霉素衍生物，因此該新型化合物可具有先前已知的脫氧野尻霉素衍生物(諸如，正丁基脫氧野尻霉素，也被稱為nb-dnj、uv-1、或miglustat；或者n-甲氧基壬基脫氧野尻霉素，也被稱為uv-4)的至少一種常見效用。例如，已經(jīng)表明一些脫氧野尻霉素衍生物對至少一種病毒具有活性。因此，所研發(fā)的新型亞氨基糖化合物可用作抗病毒劑。

例如，該新型亞氨基糖化合物(諸如uv-30和uv-60)可能對一種或多種病毒有效。例如，uv-30和uv-60可用于抵抗登革熱病毒和/或?qū)儆谂げ《究频牟《?，如委?nèi)瑞拉馬腦炎病毒。

因此，該新型亞氨基糖化合物(諸如uv-30和uv-60)可用于治療由一種或多種病毒引起的疾病或病癥或者與一種或多種病毒相關(guān)的疾病或病癥。例如，uv-30和uv-60可用于治療由登革熱病毒和/或?qū)儆谂げ《究频牟《?諸如委內(nèi)瑞拉馬腦炎病毒)引起的疾病或病癥或者與這些病毒相關(guān)的疾病或病癥。在某些實(shí)施方案中，脫氧野尻霉素衍生物(諸如uv-30和uv-60)可增加感染一種或多種病毒的受試者的存活率或生存概率。例如，uv-30和uv-60可增加感染登革熱病毒和/或?qū)儆谂げ《究频牟《?諸如委內(nèi)瑞拉馬腦炎病毒)的受試者的存活率或生存概率。

登革熱病毒

登革熱病毒屬于黃病毒科的黃病毒屬，可引起登革熱。登革熱病毒包括四種密切相關(guān)的血清型，通常被稱為登革熱1、登革熱2、登革熱3和登革熱4。從一種血清型感染恢復(fù)后，可獲得對該血清型的終生免疫，但對其它三種血清型感染，僅具有部分和短暫的保護(hù)作用。有充分的證據(jù)表明，后繼感染會增加患更嚴(yán)重疾病的風(fēng)險，包括登革休克綜合征(dss)或登革出血熱(dhf)。在美洲和亞洲，四種登革熱病毒都是引發(fā)地方病的因素，dss/dhf病例的不斷增加引起了越來越多的關(guān)注。在若干國家，dss/dhf已經(jīng)成為兒童住院和死亡的主要原因。據(jù)報道，2007年美洲有超過89萬的登革熱報告病例，其中有26000例為dss/dhf。

登革熱主要通過埃及伊蚊(aedesaegypti)傳播，是人類中最常見的蚊媒病毒性疾病。全球有25億人(占世界人口的40％)生活在溫暖地區(qū)，在這些地區(qū)埃及伊蚊常見，因此可傳播登革熱。隨著熱帶城市快速增長，這些城市中的人類和蚊子數(shù)量也不斷增長，從而造成越來越多的人接觸到這一媒介。蚊子媒介和病毒的地域擴(kuò)展已導(dǎo)致了全球登革熱疫情復(fù)蘇以及dss/dhf的出現(xiàn)。

披膜病毒科

披膜病毒科包括甲病毒屬和風(fēng)疹病毒屬。

甲病毒屬包括以下病毒：辛德畢斯病毒、塞姆利基森林病毒、奧尼翁-尼翁病毒、基孔肯雅病毒、馬雅羅病毒、羅斯河病毒、巴馬哈森林病毒、東部馬腦炎病毒、西部馬腦炎病毒和委內(nèi)瑞拉馬腦炎病毒。風(fēng)疹病毒屬包括風(fēng)疹病毒。

可由屬于披膜病毒科的病毒引起的或與這種病毒相關(guān)的疾病和病癥包括但不限于辛德比斯熱、奧尼翁-尼翁熱、基孔肯雅病、羅斯河熱、巴馬哈森林病毒感染、東部馬腦炎、西部馬腦炎、委內(nèi)瑞拉馬腦炎和風(fēng)疹?？筛腥緦儆谂げ《究频牟《镜膭游锇棺祫游?，諸如鳥類和哺乳動物，包括靈長類動物、人類、嚙齒動物、牲畜(諸如綿羊和山羊)和馬類(諸如馬、斑馬和驢)；以及無脊椎動物。

脫氧野尻霉素衍生物

一個實(shí)施方案可為式ia的化合物：

或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中r可為

a)其中環(huán)的一個或多個ch基團(tuán)可任選地被n取代；或者

b)其中x6可為o或s；

w1-w4中的每一者可獨(dú)立地選自h和c1-c3烷基基團(tuán)，諸如甲基、乙基和丙基；

r1可為烷基基團(tuán)，諸如c1-c20或c1-c12烷基基團(tuán)，所述烷基基團(tuán)可以是支鏈的或非支鏈的；

x1-x5中的每一者可獨(dú)立地選自h、n3、no2、nh2、和包含含雜原子的環(huán)的基團(tuán)，

其中r2和r3中的每一者獨(dú)立地選自h、烷基(諸如c1-c4或c1-c3烷基)或羥烷基(諸如c1-c4或c1-c3羥烷基)；r4和r5各自為h，或者r4和r5一起為＝n-oh，前提條件是x1-x5中的至少一者為或包含含雜原子的環(huán)的基團(tuán)；或者其中x1-x5中的每一者獨(dú)立地選自h、n3、no2和nh2，并且其x1-x5中的相鄰兩者形成含雜原子的環(huán)。

在一些實(shí)施方案中，x1-x5均不為n3。

在一些實(shí)施方案中，x1-x5均不為nh2。

在一些實(shí)施方案中，x1-x5均不為n3或nh2。

在式ia的化合物的一些實(shí)施方案中，w1-w4中的每一者為氫。

在式ia的化合物的一些實(shí)施方案中，r可為

在這種r的一些情況下，r的環(huán)的一個或多個形成環(huán)的ch基團(tuán)可任選地被n取代。這些化合物的非限制性示例包括來自下表1的化合物0102、0105、0106、0107、0108、0109、0110、0122、0123。而在這種r的一些其它情況下，r的環(huán)的形成環(huán)的ch基團(tuán)均不被n取代。這些化合物的非限制性示例包括來自下表1的化合物0047、0060、0069、0073、0077、0079、0080、0081、0082、0083、0084、0086、0087、0088、0089、0090、0098、0099、0100、0101、0103、0104、0124、0125、0126、0127、0128、0129、0130、0131、0132、0133、0134、0135、0136、0139、0142、0143、0153、0154、0157、0158、0160、0162、0163、0164、0165、0166、0167、0168、0177、0178、0179、0180、0181、0182、0183、0184、0185、0188、0198、0241、0242、0243、0244、0245和0246。

在這種r的一些實(shí)施方案中，r1可為c3-c10或c4-c9或c5-c9或c5-c7烷基基團(tuán)，如c6烷基基團(tuán)。在某些實(shí)施方案中，r1可為非支鏈的c3-c10或c4-c9或c5-c9或c5-c7烷基基團(tuán)，如非支鏈的c6烷基基團(tuán)。

在一些實(shí)施方案中，x1-x5中的一者可為在這種情況下，在一些實(shí)施方案中，r2和r3各自可為甲基并且r4和r5各自可為h。在一些其它實(shí)施方案中，r2可為c1-c3羥烷基，諸如羥甲基、羥乙基或羥丙基，并且r3、r4和r5中的每一者可為h。而在一些其它實(shí)施方案中，r2和r3各自為h并且r4和r5一起為＝n-oh。

在一些實(shí)施方案中，x1-x5中的一者可為包含含雜原子的環(huán)的基團(tuán)。在一些實(shí)施方案中，這種含雜原子的環(huán)可含有至少一個選自n和o的形成環(huán)的原子。

在一些實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)可直接鍵合到r的環(huán)上。這種化合物的非限制性示例包括來自下表1的化合物0047、0060、0069、0077、0079、0080、0081、0082、0083、0084、0087、0088、0089、0090、0106、0107、0108、0109、0110、0125、0126、0127、0128、0129、0130、0131、0132、0133、0134、0135、0139、0142、0143、0158、0160、0166、0183、0184、0185、0188、0198、0241、0242、0243、0244、0245。

而在一些其它實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)可通過c1-c3烷基基團(tuán)鍵合到r的環(huán)。這些化合物的非限制性示例包括來自下表1的化合物。

在一些實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)可為三元環(huán)、四元環(huán)、五元環(huán)、六元環(huán)、七元環(huán)或八元環(huán)。在一些實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)可為五元環(huán)或六元環(huán)。

在一些實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)可為共軛環(huán)，所述共軛環(huán)可為例如四元共軛環(huán)、五元共軛環(huán)或六元共軛環(huán)。這種化合物的非限制性示例包括來自下表1的化合物0047、0060、0069、0077、0079、0080、0081、0082、0083、0084、0086、0087、0088、0089、0090、0106、0107、0108、0109、0110、0125、0126、0127、0128、0130、0131、0132、0142、0143、0157、0158、0160、0166、0183、0184、0185、0188、0198、0241、0243、0244、0245。

在一些其它實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)可為非共軛環(huán)，所述非共軛環(huán)可為三元環(huán)、四元環(huán)、五元環(huán)、六元環(huán)或七元環(huán)。這種化合物的非限制性示例包括來自下表1的化合物0129、0133、0134、0135、0139、0153、0154、0162、0163、0164、0165、0177、0178、0179、0180、0181、0182。

在一些實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)可包含至少一個形成環(huán)的氮原子。這種化合物的非限制性示例包括來自下表1的化合物0047、0060、0077、0079、0080、0081、0082、0083、0084、0087、0088、0089、0090、0106、0107、0108、0109、0110、0125、0126、0127、0128、0129、0130、0131、0132、0133、0134、0135、0139、0142、0143、0153、0154、0157、0158、0159、0160、0162、0163、0164、0165、0166、0177、0178、0179、0180、0181、0182、0183、0184、0185、0188、0198、0241、0242、0243、0244、0245。

在一些實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)可包含兩個或更多個形成環(huán)的氮原子。這種化合物的非限制性示例包括來自下表1的化合物0047、0060、0077、0079、0080、0081、0082、0083、0084、0087、0088、0089、0090、0106、0107、0108、0109、0110、0125、0126、0127、0128、0131、0132、0133、0134、0135、0139、0142、0143、0153、0157、0158、0159、0160、0162、0166、0179、0180、0188、0241、0242。

在一些實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)含有形成環(huán)的氧原子。這種化合物的非限制性示例包括來自下表1的化合物0069、0129、0130、0154、0177、0178、0184、0185、0198、0245。

在一些實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)可包含至少一個形成環(huán)的氮原子和至少一個形成環(huán)的氧原子。這種化合物的非限制性示例包括來自下表1的化合物0129、0130、0154、0177、0178、0184、0185、0198、0245。

在一些實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)可為取代的環(huán)，即含有至少一個取代基(諸如c1-c3烷基基團(tuán))的環(huán)。在一些實(shí)施方案中，這種取代基可在含雜原子的環(huán)的雜原子上。這些化合物的非限制性示例包括來自下表1的化合物0135、0139、0162、0179、0180。

在一些實(shí)施方案中，包含含雜原子的環(huán)的基團(tuán)可選自以下各項(xiàng)：

在一些實(shí)施方案中，x2和x3中的一者可為或包含含雜原子的環(huán)的基團(tuán)。在這種情況下，x2和x3中的其它部分可為h。在某些實(shí)施方案中，x4和x5可各自獨(dú)立地選自h和no2，其中x4和x5中的至少一者為h。例如，在一些實(shí)施方案中，x4可為n02并且x5可為h。在一些實(shí)施方案中，x4可為h并且x5可為n02。在一些實(shí)施方案中，x4和x5可都為h。x1可為h。

在一些實(shí)施方案中，x3可為或包含含雜原子的環(huán)的基團(tuán)。在這種情況下，x5可為no2或h。x1、x2和x4各自可為h。

在一些實(shí)施方案中，x1-x5中的不超過兩者可不為h。在一些實(shí)施方案中，x1-x5中的至少兩者或至少三者可為h。在一些實(shí)施方案中，x1-x5中的兩者、三者或四者可為h。

在一些實(shí)施方案中，選自x1-x5的相鄰基團(tuán)中的兩者可形成含雜原子的環(huán)，即含有至少一個形成環(huán)的雜原子的環(huán)，所述雜原子可為例如n或o。含雜原子的環(huán)可為例如含雜原子的共軛環(huán)。

在一些實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)可為含氮的環(huán)。在一些實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)可為五元環(huán)或六元環(huán)。在一些實(shí)施方案中，x1-x5中的其余部分各自可為h。而在一些其它實(shí)施方案中，x1-x5中的其余部分中的至少一者可選自n3、no2和nh2。在一些實(shí)施方案中，x1-x5中的其余部分中的一者可為no2，而x1-x5中的剩余兩者各自可為h。

在一些實(shí)施方案中，x1和x2、x2和x3、x3和x4、或者x4和x5可形成含雜原子的環(huán)。而在一些實(shí)施方案中，x3和x4、或者x4和x5可形成含雜原子的環(huán)。在這種情況下，在一些實(shí)施方案中，x1-x5中的其余三者各自可為h。而在一些其它實(shí)施方案中，x1-x5中的其余部分中的一者例如x1可為no2，而剩余兩者各自可為h。在一些實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)可包含至少兩個形成環(huán)的氮。

在一些實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)還可包含至少一個形成環(huán)的氧原子。

在一些實(shí)施方案中，含雜原子的環(huán)可包含至少一個形成環(huán)的氮和至少一個形成環(huán)的氧。

這些化合物(其中選自x1-x5的相鄰基團(tuán)中的兩者可形成含雜原子的環(huán))的非限制性示例包括來自下表1的化合物0098、0099、0100、0101、0102、0103、0104、0105、0122、0123、0124。

在一些實(shí)施方案中，r可選自以下基團(tuán)：

在一些實(shí)施方案中，x1-x5中不形成含雜原子的環(huán)的那些部分各自可為h。而在一些其它實(shí)施方案中，x1-x5中不形成含雜原子的環(huán)的那些部分中的至少一者可為no2或nh2，而x1-x5中不形成含雜原子的環(huán)的其余部分(若有的話)可為h。在一些實(shí)施方案中，x1-x5中不形成含雜原子的環(huán)的那些部分中的一者可為no2或nh2，而x1-x5中不形成含雜原子的環(huán)的其余部分可為h。

在一些實(shí)施方案中，r可為其中x6可為o或s。在一些實(shí)施方案中，x6可為o。在一些實(shí)施方案中，r1可為c6-c10烷基。對于這種r，r1可為c4-c12或c5-c11或c6-c10或者c7-c9烷基基團(tuán)，如c8烷基基團(tuán)。在某些實(shí)施方案中，r1可為c4-c12或c5-c11或c6-c10或c7-c9非支鏈烷基基團(tuán)，如非支鏈c8烷基基團(tuán)。

在一些實(shí)施方案中，式ia的化合物可為表1中所示的化合物。

在一些實(shí)施方案中，式ia的化合物可為藥物組合物(諸如口服藥物組合物)的一部分，所述藥物組合物還可包含一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑。

脫氧野尻霉素衍生物可按照下文的實(shí)施例所述那樣合成。合成脫氧野尻霉素衍生物的方法例如在美國專利號5,622,972、5,200,523、5,043,273、4,994,572、4,246,345、4,266,025、4,405,714和4,806,650以及美國專利申請公布號2007/0275998中有所公開，這些文獻(xiàn)均以引用方式并入本文。

在一些實(shí)施方案中，脫氧野尻霉素衍生物(諸如式ia的化合物)可為衍生自無機(jī)酸或有機(jī)酸的鹽形式。

用于制備鹽形式的藥學(xué)上可接受的鹽和方法例如在bergeetal.j.pharm.sci.66:1-18,1977(berge等人，《藥物科學(xué)雜志》，第66卷，第1-18頁，1977年)中有所公開。合適的鹽的示例包括但不限于以下鹽：醋酸鹽、己二酸鹽、藻朊酸鹽、檸檬酸鹽、天冬氨酸鹽、苯酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、二葡糖酸鹽、環(huán)戊烷基丙酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、葡庚酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、延胡索酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙二石黃酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、甲磺酸鹽、占替諾煙酸鹽、2-萘磺酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯丙酸鹽、苦味酸鹽、三甲基乙酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽和十一酸鹽。

在一些實(shí)施方案中，脫氧野尻霉素衍生物也可以前藥形式使用。dnj衍生物的前藥(諸如6-磷酸化的dnj衍生物)在美國專利號5,043,273和5,103,008中有所公開。

在一些實(shí)施方案中，脫氧野尻霉素衍生物(諸如式ia的化合物)可用作組合物的一部分，所述組合物還包含可用于將組合物遞送到動物體的藥學(xué)上可接受的載體和/或組分。用于將組合物遞送到人體的許多藥學(xué)上可接受的載體以及用于將組合物遞送到其它動物(諸如牛)體的組分是本領(lǐng)域已知的。將這類載體和組分添加到本發(fā)明的組合物中在本領(lǐng)域的技術(shù)人員的水平之內(nèi)。在一些實(shí)施方案中，藥物組合物可基本上由脫氧野尻霉素衍生物(諸如式ia的化合物)組成，這意味著脫氧野尻霉素衍生物是組合物中唯一的活性成分。

而在一些實(shí)施方案中，脫氧野尻霉素衍生物(諸如式ia的化合物)可與一種或多種另外的抗病毒化合物一起施用。

在一些實(shí)施方案中，脫氧野尻霉素衍生物(諸如式ia的化合物)可用于脂質(zhì)體組合物中，所述脂質(zhì)體組合物諸如在美國公布號2008/0138351、2009/0252785和2010/0266678中有所公開。

在一些實(shí)施方案中，脫氧野尻霉素(dnj)衍生物(諸如化合物uv-0030或化合物uv-0060)可施用于受病毒感染的細(xì)胞或動物。dnj衍生物(諸如化合物uv-0030或化合物uv-0060)可抑制病毒的形態(tài)發(fā)生，或者其可治療個體。所述治療可減少、減輕或縮小動物中的病毒感染。

在一些實(shí)施方案中，可施用dnj衍生物(諸如化合物uv-0030或化合物uv-0060)的動物可以是感染登革熱病毒的動物，所述動物可以是脊椎動物，諸如哺乳動物，所述哺乳動物可以是例如嚙齒動物或靈長類動物，諸如人類。

在一些實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明方法施用于動物或動物細(xì)胞的dnj衍生物(諸如化合物uv-0030或化合物uv-0060)的量可為有效抑制細(xì)胞中登革熱病毒的形態(tài)發(fā)生的量。本文所用的術(shù)語“抑制”可指在不存在亞氨基糖的情況下表現(xiàn)出的生物活性的可檢測到的降低和/或消除。術(shù)語“有效量”可指實(shí)現(xiàn)指定效果所必需的dnj衍生物(諸如化合物uv-0030或化合物uv-0060)的量。本文所用的術(shù)語“治療”可指減少或減輕受試者的癥狀、防止癥狀惡化或發(fā)展、抑制或消除致病因子，或者預(yù)防未感染登革熱病毒的受試者發(fā)生與登革熱病毒相關(guān)的感染或疾病。

而在一些實(shí)施方案中，可施用dnj衍生物(諸如化合物uv-0030或化合物uv-0060)的動物可以是感染屬于披膜病毒科的病毒(諸如委內(nèi)瑞蘭馬腦炎病毒)的動物。這種動物可以是脊椎動物，諸如鳥類或哺乳動物，包括靈長類動物、人類、嚙齒動物、牲畜(諸如綿羊和山羊)或馬類(諸如馬、斑馬和驢)；或者無脊椎動物。

施用于細(xì)胞或動物的dnj衍生物(諸如化合物uv-0030或化合物uv-0060)的量可為有效抑制屬于披膜病毒科的病毒的形態(tài)發(fā)生的量。本文所用的術(shù)語“抑制”可指在不存在亞氨基糖的情況下表現(xiàn)出的生物活性可檢測到的降低和/或消除。術(shù)語“有效量”可指實(shí)現(xiàn)指定效果所必需的dnj衍生物(諸如化合物uv-0030或化合物uv-0060)的量。本文所用的術(shù)語“治療”可指減少或減輕受試者的癥狀、防止癥狀惡化或發(fā)展、抑制或消除致病因子，或者預(yù)防未感染屬于披膜病毒科的病毒的受試者發(fā)生與該病毒相關(guān)的感染或疾病。

因此，例如治療由病毒引起的疾病或與病毒相關(guān)的疾病可包括破壞感染因子、抑制或干擾其生長或成熟以及減輕或中和其病理作用?？墒┯糜诩?xì)胞或動物的dnj衍生物(諸如化合物uv-0030或化合物uv-0060)的量優(yōu)選地為不會引起超過施用帶來的益處的毒性作用的量。

藥物組合物中活性成分的實(shí)際劑量水平可變化，以便施用能夠有效實(shí)現(xiàn)具體患者所需治療反應(yīng)的一種或多種活性化合物的量。

治療由病毒(可為例如登革熱病毒或?qū)儆谂げ《究频牟《荆T如veev病毒)引起的疾病或與該病毒相關(guān)的疾病可包括破壞感染因子、抑制或干擾其生長或成熟以及中和其病理作用。

所選擇的劑量水平可取決于dnj衍生物(諸如化合物uv-0030或化合物uv-0060)的活性、施用途徑、所治療病癥的嚴(yán)重程度以及所治療患者的病情和先前病史。如果需要，可將有效日劑量分成多次劑量(例如每天兩次至四次的劑量)，以供施用。但應(yīng)當(dāng)理解，用于任何具體患者的特定劑量水平可取決于多種因素，包括體重、總體健康狀況、飲食、施用時間和途徑，以及與其它治療劑的組合情況和所治療病癥或疾病的嚴(yán)重程度。成人的劑量范圍可為每10千克體重約1微克至約20克、或約1微克至約10克、或約1微克至約5克、或約1微克至約1克、或介于約10mg和100mg之間的dnj衍生物，或者可為這些范圍內(nèi)的任何值或子范圍。在一些實(shí)施方案中，總?cè)談┝靠蔀?.1mg/kg體重至600mg/kg體重、或0.5mg/kg體重至500mg/kg體重、或1mg/kg體重至400mg/kg體重、或1mg/kg體重至350mg/kg體重、或1mg/kg體重至60mg/kg體重、或2mg/kg體重至50mg/kg體重、或3mg/kg體重至30mg/kg體重，或者可為這些范圍內(nèi)的任何值或子范圍。日劑量可以每天一次或多次施用事件施用。例如，在一些實(shí)施方案中，日劑量可以每天兩次施用事件、每天三次施用事件或每天四次施用事件分配。當(dāng)然，應(yīng)當(dāng)施用于細(xì)胞或動物的dnj衍生物的量可取決于本領(lǐng)域的技術(shù)人員熟知的許多因素，諸如dnj衍生物的分子量和施用途徑。

可用于本發(fā)明方法的藥物組合物可以口服固體制劑、眼用制劑、栓制劑、氣霧制劑、局部制劑或其它類似制劑全身施用。例如，其可為粉末、片劑、膠囊、錠劑、凝膠、溶液、懸浮液、糖漿等的物理形式。除了dnj衍生物之外，這種藥物組合物還可含有藥學(xué)上可接受的載體以及已知能夠增強(qiáng)和促進(jìn)藥物施用的其它成分。還可使用其它可能的制劑，諸如納米顆粒、脂質(zhì)體、重封閉紅細(xì)胞以及基于免疫學(xué)的系統(tǒng)來施用dnj衍生物。這種藥物組合物可通過多種途徑施用。本文所用的術(shù)語“腸胃外”包括皮下、靜脈內(nèi)、動脈內(nèi)、鞘內(nèi)注射和輸注技術(shù)，但不限于此。以舉例的方式，藥物組合物可口服、局部、腸胃外、全身施用或通過肺部途徑施用。

這些組合物可以單次劑量施用或以不同時間施用的多次劑量施用。因?yàn)榻M合物對病毒的抑制作用可能持續(xù)，所以可調(diào)節(jié)給藥方案，使得病毒繁殖被阻止，同時宿主細(xì)胞受到最低限度的影響。以舉例的方式，動物可每周施用一次本發(fā)明組合物的劑量，由此病毒繁殖被阻止整周，而宿主細(xì)胞功能每周僅在短時間內(nèi)被抑制一次。

在許多實(shí)施方案中，包含dnj衍生物和藥學(xué)上可接受的賦形劑的口服藥物組合物可能是優(yōu)選的。

本文描述的實(shí)施方案通過以下操作實(shí)施例進(jìn)一步說明，但決不限于這些操作實(shí)施例。

工作實(shí)施例

實(shí)施例1：合成uv-0060(也稱uv-60)

表2：合成uv-0060

實(shí)施例2：合成uv-0030(也稱uv-30)

制備8-溴辛-1-醇(化合物-2)(sut-ma1102-086)

步驟-1：

在0℃下，向化合物-1(100g，0.76mol)在甲苯(1200ml)中的溶液中加入47％hbr(600ml)水溶液保持20分鐘，將反應(yīng)混合物加熱至80℃保持6小時。在原料消耗后(通過tlc)，用冰水(icecoldwater)(500ml)淬滅反應(yīng)物料，然后將化合物萃取至etoac(2×1000ml)中，并且合并的有機(jī)層經(jīng)無水na2so4干燥，過濾并減壓濃縮。所得殘余物通過硅膠柱層析純化，用10-15％etoac/己烷洗脫，得到為黃色液體的2(110g，68.7％)。

tlc：20％etoac/己烷(rf：0.5)

1hnmr(500mhz,cdc13,δinppm)δ3.62(m,2h),3.40(m,2h),1.85-1.80(m,2h)。1.60-1.57(m,2h),1.50-1.25(n,8h)。

制備(8-溴辛氧基)(叔丁基)二甲基硅烷)(化合物-3)(sut-ma1202-063)

步驟-2：

向化合物-2(25.0g，0.111mol)在二氯甲烷(dcm，375ml)的攪拌溶液中加入tea(23.3ml，0.166mol)、dmap(677mg，0.005mol)，并且冷卻至0℃，然后在一段20分鐘的時間內(nèi)緩慢加入叔丁基二甲基氯硅烷(tbdmscl)(21.9g，0.144mol)，得到的反應(yīng)混合物在室溫下攪拌12小時。在原料完全消耗后(通過tlc)，用飽和nh4cl溶液(200ml)淬滅反應(yīng)物料。化合物用dcm(2×100ml)萃取，并且合并的有機(jī)層用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮。所得殘余物通過硅膠柱層析純化、用3-5％etoac/己烷洗脫，得到為粘稠糖漿狀的3(25g，66.4％)。

tlc：30％etoac/己烷(rf：0.7)

1hnmr(500mhz,cdc13,δinppm)δ3.6(m,2h),3.40(m,2h),1.85-1.80(m,2h)。1.58-1.40(m,4h),1.35(m,6h),0.95(s,9h),0.02(s,6h)。

制備叔丁基(8-(呋喃-2-基)辛氧基)二甲基硅烷(化合物5)(sut-ma1102-093)

步驟-3：

向呋喃(60.0g，0.88mol)在thf(1100ml)中的攪拌溶液中加入2,2-聯(lián)吡啶(615mg)，并且冷卻至0℃，然后在一段30分鐘的時間內(nèi)緩慢加入n-buli(385ml，0.61mol，1.6m)，并且攪拌1小時。將反應(yīng)物料冷卻至0℃，用30分鐘的時間緩慢加入化合物-3(60g，0.17mol，在100ml的thf中)，將反應(yīng)混合物逐漸溫?zé)嶂潦覝夭⑶覕嚢?2小時。在原料完全消耗后，通過tlc監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)程，用飽和nh4cl溶液(300ml)淬滅反應(yīng)物料，并且用乙酸乙酯(2×500ml)萃取該化合物，用na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到5(60g，粗產(chǎn)物)，所得粗化合物無需任何進(jìn)一步純化直接用于下一階段。

tlc：30％etoac/dcm(rf：0.7)

制備8-(呋喃-2-基)辛-1-醇(化合物-6)

步驟-4：

在0℃下用1小時的時間向5(100.0g，粗產(chǎn)物)在thf(1000ml)中的攪拌溶液中緩慢加入tbaf(600ml，1m在thf中)，將反應(yīng)混合物緩慢升溫至室溫，攪拌12小時。在原料完全消耗后(通過tlc)，用飽和nh4cl溶液(300ml)淬滅反應(yīng)物料，并且用etoac(2×500ml)萃取化合物。將合并的有機(jī)層用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮。所得殘余物通過硅膠柱層析純化、用15％etoac/己烷洗脫，得到為粘稠糖漿狀的6(45g，74.8％)。

tlc：30％etoac/己烷(rf:0.40)

1hnmr(400mhz,cdc13,δ單位ppm)δ7.3(d,1h),6.3(s,1h),6.0(s,1h)。3.65(m,2h),2.63(m,2h),1.72-1.50(m,4h),1.4-1.25(m,6h)。

制備8-(呋喃-2-基)辛醛(化合物-7)(sut-ma1202-073)

步驟-5：

在0℃下向化合物6(10.0g，0.051mol)在dcm(200ml)中的攪拌溶液中緩慢加入dmp(26.0g，0.061mol)，并且用1小時時間溫?zé)嶂潦覝?rt)。在原料完全消耗后(通過tlc)，用飽和nahco3溶液猝滅反應(yīng)物料，并且用dcm(2×100ml)萃取化合物。將合并的有機(jī)層用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮。所得殘余物通過硅膠柱層析純化、用10％etoac/己烷洗脫，得到粘稠糖漿狀的化合物-7(5.7g，56.4％)。

tlc：20％etoac/己烷(rf:0.6)

1hnmr(500mhz,cdc13,δ單位ppm)δ9.8(s,1h),7.30(d,1h),6.23(s,1h)。5.95(s,1h),2.60(m,2h),2.40(m,2h),1.70-1.60(m,4h),1.40-1.30(m,6h)。

制備(2r,3r,4r,5s)-1-(8-(呋喃-2-基)辛基)-2-(羥甲基)哌啶-3,4,5-三醇(uv-30或uv-0030)(sut-ma1202-074)

步驟-6：

在室溫下，向7(5.7g，0.029mol)在meoh(150ml)的攪拌溶液中加入dnj(3.83g，0.023mol)、acoh(催化劑)，并且攪拌10分鐘，然后加入nacnbh3(2.8g，0.044mol)，將所得反應(yīng)混合物攪拌16小時。在原料完全消耗后(通過tlc)，在減壓下除去所有揮發(fā)物，所得殘余物通過硅膠柱層析純化、用10-30％meoh/etoac洗脫，得到作為低熔點(diǎn)固體的uv-30(2.2g，22％)。

tlc：20％meoh/dcm(rf：0.4)

1hnmr(400mhz,cd3odδ單位ppm)δ7.30(s,1h),6.30(s,1h),6.0(s,1h)。3.85(m,2h),3.5(m,1h),3.40-3.25(m,1h),3.20-3.12(t,1h),3.0(m,1h),2.90-2.75(m,1h),2.70-2.52(m,3h),2.25-2.10(m,2h),1.70-1.40(m,4h),1.40-1.25(m,8h)。

hplc-elsd純度：99.72％

質(zhì)量(m/z)：342(m++h)

通過hplc-uv測定，已經(jīng)合成了具有可接受純度的uv-0030用于r&d研究(>90％)。

實(shí)施例3：合成uv-0031

化合物5：

在0℃下，在一段40分鐘的時間內(nèi)，向噻吩(40.0g，0.476mol)在無水thf(800ml)和2,2-聯(lián)吡啶(800mg)的攪拌溶液中緩慢加入n-buli(179ml，0.285mol)，并且在相同溫度下攪拌1小時，然后緩慢加入8-(溴辛氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(如用于uv-0030的方案所示制備)(32.3g，0.095mol)在thf(50ml)中的溶液，并且將所得反應(yīng)混合物在室溫(rt)下攪拌16小時。在原料完全消耗后(通過tlc)，用飽和nh4cl溶液(200ml)淬滅反應(yīng)物料，并且用etoac(2×250ml)萃取化合物。將合并的有機(jī)層用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到為粘稠糖漿狀的化合物5(33.0g)。該方案以類似的規(guī)模重復(fù)以提供另外的材料。粗化合物不經(jīng)進(jìn)一步純化用于下一階段。

化合物6：

在0℃下，用20分鐘的時間向5(35.0g，粗產(chǎn)物)在thf(700ml)中的攪拌溶液中緩慢加入tbaf(300ml，1.0m，在thf中)，緩慢溫?zé)嶂潦覝夭⑶覕嚢?2小時。在原料完全消耗后(通過tlc)，用冰水(250ml)淬滅反應(yīng)物料，并且用etoac(2×150ml)萃取化合物。將合并的有機(jī)層用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮。所得粗化合物通過柱層析純化、用15％etoac/己烷洗脫，得到為粘稠糖漿狀的化合物6(19g，83.7)。

化合物7：

在10℃下，向化合物6(12.0g，0.056mol)在chcl3(240ml)的攪拌溶液中緩慢加入pcc(30.5g，0.141mol)，并且用4小時時間溫?zé)嶂潦覝?。在原料完全消耗?通過tlc)，過濾并且減壓濃縮反應(yīng)物料。所得殘余物通過硅膠柱層析純化，用10％etoac/己烷洗脫，得到為濃稠糖漿狀的7(8.3g，69.7％)。

制備uv-0031：

在室溫下，向7(8.3g，0.039mol)在meoh(250ml)的攪拌溶液中加入dnj(5.2g，0.031mol)、acoh(催化劑)，并且攪拌10分鐘，然后加入nacnbh3(3.7g，0.059mol)，將所得反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16小時。在原料完全消耗后(通過tlc)，減壓除去揮發(fā)物。所得殘余物通過硅膠柱層析純化、用10-30％meoh/etoac洗脫，得到為低熔點(diǎn)固體的uv-0031(2.2g，15.6％)。tlc：20％meoh/dcm(rf:0.3)；1hnmr(400mhz,cd3odδ單位ppm)δ7.15(d,1h),6.90(d,1h),6.75(m,1h)。3.85(m,2h),3.5(m,1h),3.40-3.30(m,1h),3.20-3.12(t,1h),3.0(m,1h),2.90-2.75(m,2h),2.60(m,1h),2.25-2.10(m,2h),1.72-1.45(m,4h),1.40-1.25(m,8h)；hplc-elsd純度：98.22％,[m+h]⁺358.4。hplc-elsd純度：98.22％(柱：acquityuplchss-t3{100×2.1mm，1.8μ}；rt4.07min；acn：0.025％tfa；0.5ml/min)。

實(shí)施例4：合成uv-0047

步驟-1：在室溫下，向1(10g，54.94mmol)在1,4-二氧雜環(huán)己烷(1,4dioxane)(200ml)的攪拌溶液中加入6-氨基己醇(2.0當(dāng)量)，并且攪拌20分鐘。在室溫下向其中加入tea(3.0當(dāng)量)，并且將所得反應(yīng)混合物用16小時時間溫?zé)嶂?5℃。在原料完全轉(zhuǎn)化后(通過tlc監(jiān)測)，減壓除去揮發(fā)物以得到粗料。將粗料通過硅膠快速柱層析純化，得到16g為黃色粘稠糖漿狀的化合物-2。

步驟-2：在室溫下，在密封管中，向2(500mg，1.78mmol)在甲苯(5ml)的攪拌溶液中加入tms乙炔(5ml)，并且所得反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?0℃，保持48小時。在原料完全消耗后(通過tlc)，減壓濃縮揮發(fā)物，得到粗料，將粗料通過柱層析純化、用10-15％etoac/dcm洗脫，得到603mg(產(chǎn)率：90％)為黃色固體的化合物-3。類似地，2.0g化合物-2得到2.4g(產(chǎn)率：90％)為黃色固體的化合物-3。在10.0g化合物-2上完成相同的反應(yīng)，得到11.0g為黃色固體的3。

步驟-3：在0℃下，向3(600mg，1.59mmol)在thf(10ml)的攪拌溶液中緩慢加入1mtbaf(3.0當(dāng)量)，并且將所得反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝夭⑶覕嚢?小時。在原料完全轉(zhuǎn)化后(通過tlc監(jiān)測)，用冰水猝滅反應(yīng)物料，并且用etoac(2×30ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液用鹽水洗滌，用無水na2so4干燥，并且減壓濃縮，得到480mg(粗產(chǎn)物)為黃色固體的化合物-4。類似地，2.4g化合物-3得到1.9g(粗產(chǎn)物)為黃色固體的化合物-4。在11.0g化合物-3上完成相同的反應(yīng)，得到9.0g為黃色固體的4。

步驟-4：在10℃下，向4(250mg，0.81mmol)在chcl3(10ml)的攪拌溶液中加入pcc(2.5當(dāng)量)，緩慢溫?zé)嶂潦覝夭⑶覕嚢?小時。在原料完全消耗后(通過tlc監(jiān)測)，將反應(yīng)物料通過硅藻土床過濾并且用dcm(20ml)洗滌，減壓濃縮濾液，得到粗產(chǎn)物。將粗料通過硅膠柱層析純化，得到100mg為黃色固體的5。類似地，5.0g化合物-4得到2.0g為黃色固體的化合物-5。

步驟-5：室溫下，向化合物5(100mg，0.33mmol)在meoh(5ml)的攪拌溶液中加入dnj(0.8當(dāng)量)、acoh(催化劑)，攪拌10分鐘。向其中加入nacnbh3(1.5當(dāng)量)，并且在室溫下攪拌16小時。在原料完全消耗后(通過tlc監(jiān)測)，減壓濃縮揮發(fā)物，得到粗產(chǎn)物。粗料通過硅膠柱層析純化、用20％meoh-etoac洗脫，得到60mg為黃色粘稠糖漿狀的uv-47。類似地，2.0g化合物-5得到1.0g為黃色低熔點(diǎn)固體的uv-47。uplc純度96.49％；(柱：acquityuplcbehc-18{50×2.1mm，1.7μ}；rt1.49min；acn：0.025％tfa(aq)；0.5ml/min；lcms[m+h]+451.6。

實(shí)施例5：合成uv-0069

制備2：

將1(2.0g，11.00mmol)、dcm(40ml)、dmp(1.5當(dāng)量)在0℃下保持5分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且在室溫下攪?小時。純化后得到1.5g的2。制備3：

將2(1.5g，8.80mmol)、無水thf(30ml)、0.5m乙炔基溴化鎂在thf(2.0當(dāng)量)中的溶液在-30℃下保持1小時；用30分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝兀⑶以谑覝叵聰嚢?小時。純化后得到1.0g的3。

制備4：

將3(500mg，2.56mmol)、dcm(10ml)、tea(2.0當(dāng)量)、tbdmscl(1.2當(dāng)量)在0℃下保持5分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且在室溫下攪?0小時。純化后得到500mg的4。

制備5：

將4(500mg，1.6mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(20ml)、tea(3.0當(dāng)量)、6-氨基己醇(1.5當(dāng)量)在室溫下保持5分鐘；用10分鐘時間逐漸升至70℃，并且在70℃下攪拌16小時。純化后得到520mg的5。

制備6：

將5(520mg，1.28mmol)、chcl3(20ml)、pcc(2.5當(dāng)量)在10℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且在室溫下攪?小時。純化后得到200mg的6。

制備7：

將6(200mg，0.49mmol)、meoh(10ml)、dnj(0.8當(dāng)量)、acoh(催化劑)在室溫下保持30分鐘，加入nacnbh3(1.5當(dāng)量)在室溫下保持16小時。純化后得到100mg的7。

制備uv-0069：

將7(100mg，0.18mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)、4mhcl在1,4-二氧雜環(huán)己烷(2ml)的溶液在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝兀⑶以谑覝叵聰嚢?6小時。通過tlc觀察，形成了主要的極性產(chǎn)物。lcms顯示66％的產(chǎn)物形成?；谫|(zhì)量純化[柱：ascentisc-18(250×21.2mm，10μ)(60mg負(fù)載；ch3cn：0.05％tfa；t/b％：0.1/90、2/80、15/70、25/20、30/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到20mg的uv-0069。uplc純度98.75％(柱：acquityuplcbehc-18{2.1×50mm，1.7μ}；rt1.60min；acn：0.025％tfa(aq)；0.5ml/min)，[m+h]⁺438.5。在¹h-nmr中觀察到的多重性和化學(xué)位移符合指定結(jié)構(gòu)的預(yù)期模式。

實(shí)施例6：合成uv-0073

步驟-1：在室溫下，向1(1.0g，6.0mmol)在1,4-二氧雜環(huán)己烷(20ml)的攪拌溶液中加入6-氨基己醇(1.5當(dāng)量)，攪拌20分鐘。向其中加入tea(3.0當(dāng)量)，并且將所得反應(yīng)混合物用16小時時間溫?zé)嶂?5℃。在原料完全轉(zhuǎn)化后(通過tlc監(jiān)測)，減壓除去揮發(fā)物，得到粗材料。將粗材料通過硅膠快速柱層析純化，得到1.1g為黃色固體的化合物-2。1hnmr數(shù)據(jù)與產(chǎn)品一致。類似地，4.0g化合物-1得到4.5g為黃色固體的化合物-2。在8.0g化合物1上進(jìn)行相同的反應(yīng)，得到10.0g為黃色固體的2。

步驟-2：在0℃下，向2(1.0g，3.80mmol)在dcm(20ml)的攪拌溶液中加入dmp(1.2當(dāng)量)，緩慢溫?zé)嶂潦覝夭⑶覕嚢?小時。完全消耗原料后(通過tlc監(jiān)測)。將反應(yīng)物料用飽和nahco3淬滅并用dcm(2×40ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液用鹽水洗滌，用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物通過硅膠柱層析純化，得到700mg為黃色粘稠糖漿狀的3。類似地，12.0g化合物-2得到9.0g為黃色固體的化合物-3。

步驟-3：在室溫下，向化合物3(700mg，3.06mmol)在meoh(20ml)的攪拌溶液中加入dnj(0.8當(dāng)量)、acoh(催化劑)，攪拌10分鐘。向其中加入nacnbh3(1.5當(dāng)量)，并且在室溫下攪拌。在原料完全消耗后(通過tlc監(jiān)測)，減壓濃縮揮發(fā)物，得到粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)物通過硅膠柱層析純化、用20％meoh-etoac洗脫，得到350mg為黃色固體的uv-48。類似地，9.0g化合物-3得到4.0g為黃色固體的uv-48。hplc純度：94.85％。將該固體用etoac(150ml)磨碎，得到3.5g為黃色固體的uv-48。1hnmr數(shù)據(jù)與產(chǎn)品一致。hplc純度：95％，lcmsm+h+409.6。

制備四乙?；?uv-48：

將uv-48(300mg，0.73mmol)、chcl3(5ml)、吡啶(5ml)、ac2o(10當(dāng)量)在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝兀⑶以谑覝叵聰嚢?2小時。處理得到400mg的四乙?；?uv-48。

制備uv-0073(也稱uv-73)：

將四乙酰基-uv-48(400mg，0.69mmol)、etoh(5ml)、50％aqnh2oh(2.0當(dāng)量)在室溫下保持5小時，加入50％aqnh2oh(4.0當(dāng)量)，在室溫下保持16小時。粗產(chǎn)物lcms顯示68％的產(chǎn)物形成。制備型hplc純化[柱：ascentisc-18(250×21.2mm，10μ)(每次注射100mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4oac；t/b％：0.1/90、2/80、12/50、20/20、25/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到100mg的含有乙酸銨的uv-0073，因此通過第二次制備型純化再純化，得到70mg的uv-0073，uplc純度95.54％[柱：acquityuplchss-t3(100×2.1mm，1.8μ)；rt2.87min；acn：0.025％tfa(aq)；0.5ml/min)]，lcms[m+h]+442.5。

實(shí)施例7：合成uv-0077

制備2和3：

將1(500mg，2.90mmol)、1,2,3-三唑(3.0當(dāng)量)、cu(2.5當(dāng)量)、k2co3(2.0當(dāng)量)在室溫下保持5分鐘；用20分鐘時間逐漸加熱至160℃，并且在160℃下攪拌16小時。通過tlc觀察兩個極點(diǎn)。將反應(yīng)混合物用水稀釋并且用etoac(2×40ml)萃取。將合并的有機(jī)層用水洗滌并用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物通過硅膠柱層析純化[使用100-200目，化合物-2用40％etoac-己烷洗脫，化合物-3用60％etoac-己烷洗脫]，得到320mg的2和250毫克的3。

制備4：

將int-a(見下文，也稱為int-1，700mg，0.97mmol)、meoh(30ml)、2(0.8當(dāng)量)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)在室溫下保持20小時。處理和柱純化得到120mg的4。

制備uv-0077(也稱為uv-77)：

將4(120mg，0.13mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(2ml)、4mhcl在1,4-二氧雜環(huán)己烷(1ml)的溶液在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且在室溫下攪?6小時。制備型hplc純化[柱：x-selectcshc-18(250×19mm，5μ)(每次注射50mg；ch3cn：5mmnh4oac；t/b％：0.1/90、2/90、12/60、17/50、22/40、25/30、30/20、35/20、40/10、45/10；作為流動相：流量：15ml/min)]，得到6.0mg的uv-0077，uplc純度98.78％(柱：acquityuplcbehc-18{2.1×50mm，1.7μ}；rt1.34min；acn：0.025％tfa(aq)；0.5ml/min)，lcms[m+h]⁺406.7。1h-nmr顯示約2％乙酸銨。

合成int-a(int-1)：

制備1：

在0℃下，向(2r,3r,4r,5s)-2-(羥甲基)哌啶-3,4,5-三醇鹽酸鹽dnj(25g，125.62mmol)在飽和nahco3溶液(300ml)的攪拌溶液中滴加氯甲酸芐酯(50％在甲苯中，42.8ml，125.62mmol)。將反應(yīng)混合物用15分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝兀缓髷嚢?小時。通過tlc監(jiān)測反應(yīng)；完成反應(yīng)后，將反應(yīng)混合物用水(500ml)稀釋，用ch2cl2(3×300ml)洗滌并且分離。用etoac(5×300ml)萃取水層。用硫酸鈉干燥合并的有機(jī)萃取物，過濾并且真空濃縮，得到為粘稠糖漿狀的化合物1(30g，80.8％)。該粗產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化即可用于下一步驟。

制備2：

在0℃下，在氬氣氛下，向1(30g，101.10mmol)在chcl3(600ml)的攪拌溶液中加入tbsotf(139.6ml，606.06mmol)和2,6-二甲基吡啶(117.5ml，1011.00mmol)。將反應(yīng)混合物用15分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝兀⑶覕嚢?6小時。通過tlc監(jiān)測反應(yīng)；完成反應(yīng)后，將反應(yīng)混合物用水(500ml)稀釋，并且用ch2cl2(3×300ml)萃取。用硫酸鈉干燥合并的有機(jī)萃取物，過濾并且真空濃縮，得到粗產(chǎn)物。通過硅膠柱層析純化粗產(chǎn)物[使用100-200目，用3％etoac-己烷洗脫]，得到為無色粘稠糖漿狀的化合物2(50g，66.22％)。

制備3：

在氬氣氛下，在室溫下向2(50g，10.61mmol)在乙酸乙酯(500ml)的攪拌溶液中加入10％pd/c(10g，50％濕度)。將反應(yīng)混合物保持在氫氣氛下(氣球)并且攪拌24小時。通過tlc監(jiān)測反應(yīng)；完成反應(yīng)后，將反應(yīng)混合物通過硅藻土墊過濾。將濾液減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物，通過硅膠柱層析純化粗產(chǎn)物[使用100-200目，用3％etoac-己烷洗脫]，得到為粘稠糖漿狀的化合物3(41.6g，96.1％)。

制備5：

在氬氣氛下，在室溫下向己烷-1,6-二醇(6.50g，423.72mmol)在氯仿(1000ml)的攪拌溶液中加入pcc(55g，254.24mmol)和硅藻土(50g)，并且攪拌3小時。通過tlc監(jiān)測反應(yīng)；完成反應(yīng)后，過濾反應(yīng)混合物，減壓濃縮濾液，得到粗產(chǎn)物，通過硅膠柱層析純化粗產(chǎn)物[使用100-200目，用40％etoac-己烷洗脫]，得到為粘稠糖漿狀的化合物5(10g，20.18％)。

制備4：

在氬氣氛下，在0℃下向化合物3(40g，64.51mmol)在甲醇(800ml)的攪拌溶液中加入化合物5(9.05g，77.42mmol)和乙酸(催化劑)，并且攪拌30分鐘。將反應(yīng)混合物用15分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，加入氰基硼氫化鈉(6.09g，96.71mmol)并且攪拌16小時。通過tlc監(jiān)測反應(yīng)；完成反應(yīng)后，真空除去揮發(fā)物。將殘余物用水(200ml)稀釋，

并且用etoac(3×200ml)萃取。用硫酸鈉干燥合并的有機(jī)萃取物，過濾并且真空濃縮，得到粗產(chǎn)物，通過硅膠柱層析純化粗產(chǎn)物[使用100-200目，用10％etoac-己烷洗脫]，得到為無色粘稠糖漿狀的化合物4(35g，75.3％)。

制備int-1：

在-78℃下，在氬氣氛下向草酰氯(3.57ml，40.8mmol)在thf(200ml)的攪拌溶液中加入dmso(3.57ml，50.4mmol)并且攪拌15分鐘。向其中逐滴加入4(14g，19.4mmol)在thf(30ml)中的溶液并且攪拌30分鐘。然后在-78℃下加入三乙胺(10.65ml，104.2mmol)，用1小時時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?。通過tlc監(jiān)測反應(yīng)；完成反應(yīng)后，將反應(yīng)混合物用冰水(100ml)淬滅并且用etoac(3×100ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取物用硫酸鈉干燥，過濾并且真空濃縮，得到粗產(chǎn)物。通過硅膠柱層析純化粗產(chǎn)物[使用100-200目，用10％etoac-己烷洗脫]，得到無色糖漿狀的int-1(10g，71.9％)。

¹hnmr(500mhz,cdcl3)：δ9.78(s,1h),3.96-3.94(m,1h),3.77-3.61(m,3h)。3.52(dd,j＝10.0,5.5hz,1h),2.92-2.78(m,2h),2.75-2.64(m,3h),2.43(t,j＝7.2hz,2h),1.69-1.61(m,2h),1.52-1.43(m,2h),1.38-1.30(m,2h),0.95-0.85(m,36h),0.12-0.02(m,24h)

實(shí)施例8：合成uv-0079

制備2：

將1(2.0g，9.17mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(40ml)、tea(3.0當(dāng)量)、氨基己醇(1.2當(dāng)量)在室溫下保持5分鐘；用10分鐘時間加熱至80℃并且攪拌16小時。處理和柱純化得到2.0g的2。用1(8.0g，36.68mmol)、1,4-二烷(160ml)、tea(3.0當(dāng)量)、氨基己醇(1.2當(dāng)量)重復(fù)制備，在室溫下保持5分鐘；用10分鐘時間緩慢加熱至80℃并且攪拌16小時。處理和柱純化得到7.5g的2。

制備3：

在室溫下，將2(100mg，0.31mmol)、1,2,4-三唑(3.0當(dāng)量)、cu(2.5當(dāng)量)、k2co3(2.0當(dāng)量)用20分鐘時間逐漸升溫至160℃并且攪拌16小時。柱純化得到20mg的3。用2(2.0g，6.30mmol)、1,2,4-三唑(3.0當(dāng)量)、cu(2.5當(dāng)量)、k2co3(2.0當(dāng)量)在室溫下重復(fù)反應(yīng)，用20分鐘時間逐漸加熱至160℃，并且攪拌16小時，柱純化得到400mg的3。

制備4：

草酰氯(2.1當(dāng)量)、thf(5.0ml)、dmso(2.6當(dāng)量)在-78℃下保持30分鐘，在-78℃下加入3(100mg，0.32mmol)保持30分鐘，在-78℃下加入tea(5.4當(dāng)量)保持30分鐘，用30分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝夭⑶覕嚢?小時。處理和柱純化得到80mg的4。用草酰氯(2.1當(dāng)量)、thf(5.0ml)、dmso(2.6當(dāng)量)在-78℃下保持30分鐘，在-78℃下加入3(300mg，0.98mmol)保持30分鐘，在-78℃下加入tea(5.4當(dāng)量)保持30分鐘，重新制備，用30分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝夭⑶覕嚢?小時。處理和柱純化得到230mg的4。

制備uv-0079(也稱為uv-79)：

將4(315mg，1.03mmol)、meoh(10ml)、dnj(0.8當(dāng)量)、acoh(催化劑)在室溫下保持20分鐘，加入nacnbh3(1.5當(dāng)量)在室溫下保持16小時。粗產(chǎn)物lcms顯示82％的產(chǎn)物形成。

制備型hplc純化[柱：ascentisc-18(250×21.2mm，10μ)(每次注射75mg負(fù)載；ch3cn：0.05％tfa；t/b％：0.1/95、15/70、25/50、30/0、35/0；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到75mg具有微量溶劑的uv-0079。凍干后得到72mg的uv-0079，具有99.0％的uplc純度[柱：acquitybehc-18{50×2.1mm，1.7μ}；rt1.45min；acn：0.025％tfa(aq)；0.5ml/min)]，[m+h]⁺451.1]。

實(shí)施例8：合成uv-0080

制備2：

將1(200mg，1.28mmol)、acoh(5ml)、原甲酸三乙酯(5.0當(dāng)量)、tms-n3(5.0當(dāng)量)在0℃下保持5分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?0℃并且攪拌4小時。處理和柱純化得到200mg的2。用1(1.0g，6.41mmol)、acoh(20ml)、原甲酸三乙酯(5.0當(dāng)量)、tms-n3(5.0當(dāng)量)再次制備，在0℃下保持5分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?0℃并且攪拌4小時。處理和柱純化得到900mg的2。

制備3：

將2(1.1g，5.26mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(20ml)、tea(3.0當(dāng)量)、氨基己醇(1.2當(dāng)量)在室溫下保持5分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?0℃并且攪拌16小時。處理和柱純化得到1.0g的3。

制備4：

將草酰氯(2.1當(dāng)量)、thf(10ml)、dmso(2.6當(dāng)量)在-78℃下保持10分鐘，加入3(700mg，2.29mmol)在-78℃下保持20分鐘，加入tea(5.4當(dāng)量)在-78℃下保持1小時，用1小時時間逐漸溫?zé)嶂潦覝夭⑶覕嚢?小時。處理和柱純化得到650mg的4。

制備uv-0080(也稱為uv-80)：

將4(650mg，2.13mmol)、meoh(20ml)、dnj(0.8當(dāng)量)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)在室溫下保持16小時，lcms顯示70％產(chǎn)物形成。制備型hplc純化[柱：ascentisc-18(250×21.2mm，10μ)(100mg負(fù)載；ch3cn：0.05％tfa；t/b％：0.1/95、2/95、10/65、20/50、30/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到314mg(29％產(chǎn)率)的uv-0080，uplc純度99.81％[柱：acquitybehc-18{50×2.1mm，1.7μ}；rt1.45min；acn：0.025％tfa(aq)；0.5ml/min]，lcms[m+h]⁺452.1。

實(shí)施例9：合成uv-0081

制備3：

將2(100mg，0.31mmol)、吡唑(3.0當(dāng)量)、cu(2.5當(dāng)量)、k2co3(2.0當(dāng)量)在室溫下保持5分鐘；用20分鐘時間加熱至160℃并且攪拌16小時。處理和柱純化得到30mg的3。用2(2.0g，6.30mmol)、吡唑(3.0當(dāng)量)、cu(2.5當(dāng)量)、k2co3(2.0當(dāng)量)再次制備，在室溫下保持5分鐘；用20分鐘時間加熱至160℃并且攪拌16小時。處理和柱純化得到700mg的3。

制備4：

將草酰氯(2.1當(dāng)量)、thf(5.0ml)、dmso(2.6當(dāng)量)在-78℃下保持30分鐘，加入3(100mg，0.32mmol)在-78℃下保持30分鐘，加入tea(5.4當(dāng)量)在-78℃下保持30分鐘，用1小時時間逐漸溫?zé)嶂潦覝夭⑶覕嚢?小時。處理和柱純化得到90mg的4。用草酰氯(2.1當(dāng)量)、thf(10.0ml)、dmso(2.6當(dāng)量)再次制備，在-78℃下保持30分鐘，在-78℃下加入3(600mg，1.98mmol)保持30分鐘，在-78℃下加入tea(5.4當(dāng)量)保持30分鐘，用1小時時間逐漸溫?zé)嶂潦覝夭⑶覕嚢琛?小時后，將反應(yīng)物料用水淬滅并且用etoac(2×50ml)萃取。將合并的有機(jī)層用水洗滌并用無水na2s04干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗料，將粗料通過硅膠柱層析純化[使用100-200硅膠，用30％etoac-己烷洗脫]，得到500mg的4。

制備uv-0081(也稱為uv-81)：

將4(500mg，1.65mmol)、meoh(20ml)、dnj(0.8當(dāng)量)、acoh(催化劑)在室溫下保持20分鐘，加入nacnbh3(1.5當(dāng)量)在室溫下攪拌16小時。lcms顯示72％的產(chǎn)物形成。用acn：h2o(1:1)(60ml)、acn(40ml)和etoac(40ml)磨碎粗料得到105mg的uv-0081，uplc純度95.86％[(柱：acquitybehc-18{50×2.1mm，1.7μ}；rt1.70min；acn：0.025％tfa(aq)；0.5ml/min)]，[m+h]⁺450.1

實(shí)施例10：合成uv-0082

制備2：

將1(200mg，1.41mmol)、dmso(3ml)、1,2,4-三唑(1.1當(dāng)量)、k2co3(3.0當(dāng)量)在室溫下保持5分鐘；用10分鐘時間逐漸加熱至80℃，并且攪拌16小時。處理和柱純化得到120mg的2。

制備2：

將1(2.0g，14.1mmol)、dmso(20ml)、1,2,4-三唑(1.1當(dāng)量)、k2co3(3.0當(dāng)量)在室溫下保持5分鐘；用10分鐘時間逐漸加熱至80℃，并且攪拌16小時。處理和柱純化得到1.6g的2。

制備3：

將2(1.5g，8.42mmol)、meoh(30ml)、pd/c(1.0g)在室溫和h2氛圍下(氣球壓力)保持16小時。處理和柱純化得到1.2g的3。

制備4：

將3(160mg，1.00mmol)、meoh(30ml)、int-1(也稱為int-a，見上面，900mg，1.25mmol)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)在室溫下保持20小時。處理和柱純化得到700mg的4。

制備uv-0082(也稱為uv-82)：

將4(700mg，0.81mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(10ml)、4mhcl在1,4-二氧雜環(huán)己烷(4ml)的溶液在0℃下保持10分鐘，用20分鐘時間溫?zé)嶂潦覝?，并且攪?6小時。用etoac(60ml)和et2o(80ml)研磨粗產(chǎn)物，得到220mg(50％產(chǎn)率)的uv-0082，uplc純度為95.75％[柱：acquitybehc-18{50×2.1mm，1.7μ}；rt1.10min；acn：0.025％tfa(aq)；0.5ml/min)]，lcms[m+h]+406.5。

實(shí)施例11：合成uv-0083

制備2：

向1(200mg，1.44mmol)、acoh(5ml)、原甲酸三乙酯(5.0當(dāng)量)混合物中加入tms-n3(5.0當(dāng)量)，在0℃下保持10分鐘；將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸升溫至80℃，并且攪拌4小時。處理和柱純化得到100mg(37％產(chǎn)率)的2。向1(2.0g，14.49mmol)、acoh(20ml)、原甲酸三乙酯(5.0當(dāng)量)混合物中加入tms-n3(5.0當(dāng)量)再次制備，在0℃下保持10分鐘；將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸升溫至80℃，并且攪拌4小時。處理和柱純化得到1.2g(40％產(chǎn)率)的2。

制備3：

將2(1.0g，5.23mmol)、meoh(20ml)、pd/c(1.0g)在室溫和h2氣氛下(氣球壓力)保持24小時。處理和柱純化得到600mg(71％產(chǎn)率)的3。

制備4：

將int-a(參見上面，700mg，0.97mmol)、meoh(30ml)、4(0.8當(dāng)量)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)在室溫下保持20小時。處理和柱純化得到410mg(48％產(chǎn)率)的4。

制備uv-0083(也稱為uv-83)：

將5(410mg，0.50mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(4ml)、4mhcl在1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)的溶液在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且攪?6小時。制備型hplc純化[柱：ascentisc-18(250×21.2mm，10μ)(60mg負(fù)載；ch3cn：0.05％tfa；t/b％：0.1/90、2/90、15/70、25/30、30/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到100mg的uv-0083，uplc純度為98.4％[柱：acquitybehc-18{50×2.1mm，1.7μ}；rt1.32min；acn：0.025％tfa(aq)；0.5ml/min)]，[m+h¹⁺407.6。

實(shí)施例12：合成uv-0084

制備2：

將1(200mg，1.41mmol)、dmso(3ml)、吡唑(1.1當(dāng)量)、k2co3(3.0當(dāng)量)在室溫下保持10分鐘；所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?0℃，并且攪拌16小時。處理和柱純化得到150mg的2。用1(3.0g，21.5mmol)、dmso(30ml)、吡唑(1.1當(dāng)量)、k2co3(3.0當(dāng)量)再次制備，在室溫下保持10分鐘；所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?0℃，并且攪拌16小時。純化得到2.1g的2。

制備3：

將2(2.0g，10.15mmol)、meoh(40ml)、pd/c(1.0g)在室溫和氫氣球壓力下保持16小時。純化得到1.5g的3。

制備4：

將3(160mg，1.00mmol)、meoh(30ml)、int-1(900mg，1.25mmol)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)在室溫下保持20小時。純化得到700mg的4。

制備uv-0084(也稱為uv-84)：

將4(700mg，0.81mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(10ml)、4mhcl在1,4-二氧雜環(huán)己烷(4ml)的溶液在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝兀⑶覕嚢?6小時。用etoac(60ml)和et2o(80ml)研磨粗產(chǎn)物，得到260mg(46％產(chǎn)率)的uv-0084，uplc純度為95.52％[柱：acquitybehc-18{50×2.1mm，1.7μ}；rt1.21min；acn：0.025％tfa(aq)；0.5ml/min)]，[m+h]⁺405.3。

實(shí)施例13：合成uv-0086

制備2：

將int-a(參見上面，700mg，0.97mmol)、meoh(30ml)、1(0.8當(dāng)量，按照uv-0077所述制備的所需的異構(gòu)體)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)在室溫下保持20小時。處理和柱純化得到250mg的2。

制備uv-0086(也稱為uv-86)：

5(250mg，0.29mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(2ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(3ml)三者混合在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且攪?6小時。制備型hplc純化[柱：ascentisc-18(250×21.2mm，10μ)(75mg負(fù)載；ch3cn：0.05％tfa；t/b％：0.1/90、2/80、15/70、25/20、30/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到8.0mg的uv-0086，uplc純度為98.29％[(柱：acquityuplchss-t3{100×2.1mm，1.8μ}；rt3.13min；acn：0.025％tfa(aq)；0.5ml/min)]，[m+h]⁺406.6。

實(shí)施例14：合成uv-0087

制備2：

1(500mg，3.50mmol)、acn(10ml)、k2co3(3.0當(dāng)量)、1h-四唑(1.5當(dāng)量)在密封管中混合，在室溫下保持5分鐘；用20分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?10℃，并且攪拌16小時。

通過柱層析純化，得到300mg(44.3％產(chǎn)率)的2(通過1h-nmr和noe證實(shí))。1(3.0g，21.00mmol)、acn(60ml)、k2co3(3.0當(dāng)量)、1h-四唑(1.5當(dāng)量)在密封管中混合，在室溫下保持5分鐘；逐漸溫?zé)嶂?10℃保持20分鐘，并且攪拌16小時，再次制備2。通過柱層析純化得到1.90g(47.5％產(chǎn)率)的2。

制備4：

將2(1.0g，5.23mmol)、meoh(20ml)、pd/c(1.0g)在室溫和h2(氣球壓力)下保持24小時。處理和柱純化后得到700mg(83％產(chǎn)率)的4。

制備5：

int-a(參見上面，700mg，0.97mmol)、meoh(30ml)、4(0.8當(dāng)量)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)混合，在室溫下保持20小時。處理和柱純化得到400mg(46％產(chǎn)率)的5。

制備uv-0087(也稱為uv-87)：

5(400mg，0.44mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(4ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(5ml)三者混合在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且攪?6小時。制備型hplc純化[柱：ascentisc-18(250×21.2mm，10μ)(75mg負(fù)載；ch3cn：0.05％tfa；t/b％：0.1/95、15/70、25/50、35/0、45/0；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到128mg(65％產(chǎn)率)的uv-0087，uplc純度為99.9％[(柱：acquitybehc-18{50×2.1mm，1.7μ}；rt1.49min；acn：0.025％tfa(aq)；0.5ml/min)]，lcms[m+h]⁺407.1。

實(shí)施例15：合成uv-0089

制備化合物2：

將4-氟-3-硝基胺基苯(200mg，1.28mmol)、acoh(5ml)、原甲酸三乙酯(5.0當(dāng)量)、甲酰肼(5.0當(dāng)量)在0℃下保持10分鐘；所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?0℃，并且在相同的溫度下攪拌。24小時后，通過tlc觀察到原料完全消耗，并且觀察到兩種極性產(chǎn)物。減壓除去揮發(fā)物，得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物通過硅膠(100-200目)快速柱層析純化、用5％meoh-dcm洗脫，得到100mg(37.5％產(chǎn)率)為紅色固體的化合物2。再次制備：將4-氟-3-硝基胺基苯(2.0g，12.82mmol)、acoh(15ml)、原甲酸三乙酯(5.0當(dāng)量)、甲酰肼(5.0當(dāng)量)0℃下保持10分鐘；所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?0℃，并且攪拌24小時。通過tlc監(jiān)測到原料完全被消耗并觀察到兩種極性產(chǎn)物。減壓除去揮發(fā)物，得到粗產(chǎn)物，將粗產(chǎn)物通過硅膠(100-200目)快速柱層析純化、用5％meoh-dcm洗脫，得到1.1g(41.3％產(chǎn)率)為紅色固體的化合物2。

制備3：

2(300mg，0.41mmol)、int-b(參見下面，1.0當(dāng)量)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(10ml)、tea(5.0ml)在室溫下混合，所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?0℃，并且攪拌16小時。在16小時后，通過tlc監(jiān)測到原料被完全消耗，并且觀察到新的非極性產(chǎn)物。減壓除去揮發(fā)物，得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物通過硅膠(100-200目)快速柱層析純化、用70％etoac-己烷洗脫，得到200mg(52.9％產(chǎn)率)為紅色粘稠糖漿狀的化合物3。

制備uv-0089(也稱為uv-89)：

將3(200mg，0.22mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(10ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(2.0ml)在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且攪?4小時。通過lcms監(jiān)測反應(yīng)。34小時后，粗產(chǎn)物lcms顯示74％的產(chǎn)物形成。減壓除去揮發(fā)物，得到120mg粗料。所得粗料通過制備型hplc純化[柱：ascentisc-18(250×20mm，5μ)(60mg負(fù)載；c3cn：0.05％tfa；t/b％：0.1/95、2/98、15/70、25/30、30/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到20.5mg(20.2％產(chǎn)率)為橘紅色粘稠糖漿狀的uv-0089。1h-nmr顯示所有所需的峰以及痕量的溶劑峰。在凍干后得到20mg為橘紅色糖漿狀的純uv-0089，hplc純度為99.03％[柱：eclipse-xdb-c18(150×4.6mm，5.0μm)；rt5.94min；acn：0.025％tfa(aq)；1.0ml/min)]，lcms[m+h]⁺451.1。

合成int-b：

制備2：

在氬氣氛和室溫下，向1(20g，27.78mmol，按int-a制備)在ch2ci2(400ml)的攪拌溶液中加入三乙胺(16.64ml，119.44mmol)。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，逐滴加入甲磺酰氯(2.82ml，36.11mmol)。將反應(yīng)混合物用15分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且攪?小時。通過tlc監(jiān)測反應(yīng)；完成反應(yīng)后，將反應(yīng)混合物用冰水(100ml)稀釋，并且用ch2cl2(3×100ml)萃取。用硫酸鈉干燥合并的有機(jī)萃取物，過濾并且真空濃縮，得到23g為無色黏糖漿狀的化合物2。將該粗產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步純化而用于下一步驟。

制備3：

在室溫和氬氣氛下，向2(23g粗產(chǎn)物)在dmf(150ml)的攪拌溶液中加入鄰苯二甲酰亞胺鉀(8.13g，43.95mmol)。將反應(yīng)混合物在60℃下加熱30分鐘,并且攪拌16小時。通過tlc監(jiān)測反應(yīng)；反應(yīng)完成后，將反應(yīng)物用30分鐘時間緩慢冷卻至室溫，并且用冰水(100ml)稀釋。產(chǎn)物用etoac(3×100ml)萃取，有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾并且真空濃縮，得到粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物通過硅膠柱層析純化[使用100-200目，用10％etoac-己烷洗脫]，得到18g無色黏糖漿狀的3(兩步之后純度為76％)。

制備int-b：

在室溫和氬氣氛下，向3(18g，19.74mmol)在乙醇(360ml)的攪拌溶液中加入水合肼(4.93ml，98.68mmol)，并且攪拌16小時。通過tlc監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)程；反應(yīng)完成后，將反應(yīng)混合物減壓濃縮。將所得殘余物用冰水(100ml)稀釋，并且用etoac(3×100ml)萃取。用硫酸鈉干燥合并的有機(jī)萃取物，過濾并且真空濃縮，得到13g為無色黏糖漿狀的int-b(91％)。該物質(zhì)無需進(jìn)一步純化即可用于下一步驟。

實(shí)施例16：合成uv-0090

制備2：

將1(200mg，1.44mmol)、acoh(5ml)、原甲酸三乙酯(5.0當(dāng)量)、甲酰肼(5.0當(dāng)量)在0℃下保持10分鐘；將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸升溫至80℃，并且攪拌4小時。處理和柱純化得到120mg(43％產(chǎn)率)的2。將1(2.0g，14.49mmol)、acoh(20ml)、原甲酸三乙酯(5.0當(dāng)量)、甲酰肼(5.0當(dāng)量)在0℃下保持10分鐘；將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸升溫至80℃，并且攪拌4小時，再次制備。處理和柱純化得到1.2g(43％產(chǎn)率)的2。

制備3：

2(1.2g，6.12mmol)、meoh(20ml)、pd/c(1.0g)混合，h2(氣球壓力)，在室溫下保持16小時。處理和柱純化得到600mg(47％產(chǎn)率)的3。

制備4：

將int-1(也稱為int-a，參見上面，700mg，0.97mmol)、meoh(30ml)、3(0.8當(dāng)量)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)在室溫下混合。處理和柱純化得到400mg(47.6％產(chǎn)率)的4。

制備uv-0090(也稱為uv-90)：

將4(400mg，0.57mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(3ml)在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且攪?6小時。制備型hplc純化[柱：x-selectcshc-18(250×19mm，5μ)(70mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4oac；t/b％：0.1/95、2/95、10/70、15/50、25/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，隨后凍干，得到20mg的uv-0090，uplc純度為99.42％[柱：acquityuplchss-t3{100×2.1mm，1.8μ}；rt2.87min；acn：0.025％tfa(aq)；0.5ml/min]，lcms[m+h]⁺406.6，¹h-nmr顯示凍干后的3.4％nh4oac。

實(shí)施例17：合成uv-0106

制備2：

在室溫下，將1(500mg，2.27mmol)、1h-1,2,4-三唑(9.0當(dāng)量)、cu粉(2.1當(dāng)量)、k2co3(2.0當(dāng)量)混合于密封管中，用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?50℃，并且攪拌4小時。4小時后，通過tlc監(jiān)測到原料被完全消耗并且觀察到一種極性產(chǎn)物。反應(yīng)物用冰水稀釋并且用etoac(2×30ml)萃取。將合并的有機(jī)層用na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物通過硅膠快速層析純化[使用100-200目，用100％etoac洗脫]，得到500mg為白色固體的2。

制備3：

將int-a(參見上面，1.0g，1.30mmol)、meoh(20ml)、2(2.0當(dāng)量)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)在室溫下保持16小時。通過tlc觀察到一種主要的非極性產(chǎn)物以及未反應(yīng)的原料。減壓除去揮發(fā)物；將殘余物用冰水(10ml)淬滅并且用etoac(20ml)萃取。分離的有機(jī)層用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗料。通過柱層析100-200目硅膠、用20％etoac-己烷洗脫來分離主要的非極性產(chǎn)物，得到250mg為粘稠糖漿狀的3。

制備uv-0106：

將3(250mg，0.29mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷(2.5ml)溶液在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且攪?6小時。原料完全消耗后(通過tlc監(jiān)測),減壓除去揮發(fā)物，得到粗產(chǎn)物，將粗產(chǎn)物通過制備型hplc純化[柱：ymcactusc-18(250×20mm，5μ)(70mg負(fù)責(zé)；ch3cn：5mmnh4hco3；t/b％：0.1/95、3/95、15/50、25/30、30/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到69.5mg(60％產(chǎn)率)為無色粘稠糖漿狀的uv-0106，uplc純度為99.73％[柱：acquityuplchss-t3{100×2.1mm，1.8μ}；rt3.45min；acn：0.025％tfa(aq)；0.5ml/min)]，lcms[m+h]⁺407.1。

實(shí)施例18：合成uv-0107

制備2：

在室溫下，將1(250mg，1.23mmol)、吡唑(9.0當(dāng)量)、cu粉(2.1當(dāng)量)、k2co3(2.0當(dāng)量)混合于密封管中，用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?50℃并且攪拌4小時。4小時后，通過tlc監(jiān)測到原料完全消耗并且觀察到一種極性產(chǎn)物。反應(yīng)物用冰水稀釋并且用etoac(2×30ml)萃取。

將合并的有機(jī)層經(jīng)na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物，將粗產(chǎn)物通過硅膠快速層析純化[使用100-200目，用100％etoac洗脫]，得到100mg(55％產(chǎn)率)為白色固體的2。

制備3：

將int-a(600g，0.83mmol)、meoh(15ml)、2(0.8當(dāng)量)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)在室溫下保持16小時。通過tlc觀察到一種主要的非極性產(chǎn)物以及未反應(yīng)的原料。減壓除去揮發(fā)物；將殘余物用冰水(10ml)淬滅并且用etoac(20ml)萃取。分離的有機(jī)層經(jīng)無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物，將粗產(chǎn)物通過硅膠柱層析純化[使用100-200目，用20％etoac-己烷洗脫]，得到240mg為粘稠糖漿狀的3。

制備uv-0107：

將3(240mg，1.0當(dāng)量)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(8ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(2.0ml)在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且攪?6小時。原料完全消耗后(通過tlc監(jiān)測)，減壓除去揮發(fā)物，得到粗料。制備型hplc純化[柱：ymcactusc-18(250×20mm，5μ)(60mg負(fù)載；ch3cn：0.05％tfa；t/b％：0.1/98、3/98、15/80、25/50、30/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/mm)]，得到44.9mg(40％產(chǎn)率)為白色固體的uv-0107(基于1h-nmr中化學(xué)位移變化的tfa鹽)，hplc純度為99.77％[柱：acquityuplchss-t3{100×2.1mm，1.8μ}；rt3.55min；acn：0.025％tfa(aq)；0.5ml/min]，lcms[m+h]⁺406.2。

實(shí)施例19：合成uv-0109

制備2：

在150℃下，1(1g，4.54mmol)、咪唑(1當(dāng)量)、cu粉(2.1當(dāng)量)、k2co3(2.0當(dāng)量)、dmso(4.0ml)在密封管中混合。4小時后，通過tlc監(jiān)測到原料被完全消耗并且觀察到一種主要的極性產(chǎn)物。反應(yīng)物用冰水稀釋并且用etoac(2×50ml)萃取。將合并的有機(jī)層經(jīng)na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物。所得粗產(chǎn)物通過硅膠快速層析純化[使用100-200目，用5％meoh-dcm洗脫]，得到180mg為白色固體的2。

制備3：

將int-a(參見上面，647mg，0.90mmol)、meoh(15ml)、2(0.8當(dāng)量)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)在室溫下保持16小時。通過tlc觀察到一種主要的非極性產(chǎn)物以及未反應(yīng)的原料兩者。減壓除去揮發(fā)物。將殘余物用冰水(30ml)淬滅并且用etoac(2×30ml)萃取。分離的有機(jī)層用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗材料。主要的非極性產(chǎn)物通過柱層析分離[使用100-200目，用3％meoh-dcm洗脫]，得到170mg(22％產(chǎn)率)為粘稠糖漿狀的3。

制備uv-0109：

將3(170mg，0.19mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(3ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(2.0ml)在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且攪拌?6小時后，通過tlc監(jiān)測到原料完全消耗并且觀察到一種極性產(chǎn)物。減壓除去揮發(fā)物，得到100mg粗料，其之后通過制備型hplc純化[柱：x-selectcshc-18(250×19mm，5μ)(50mg負(fù)載；ch3cn：0.05％tfa；t/b％：0.1/98、2/98、10/85、15/80、20/10、25/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到50mg(63％產(chǎn)率)的uv-0109，hplc純度為95.63％[柱：zorbaxsbc-18(150×4.6mm，3.5μm)；rt1.86min；acn：0.5％tfa(aq)；1.0ml/min)]以及l(fā)cms[m+h]⁺406。

實(shí)施例20：合成uv-0110

制備1：

通過所述醇的swem氧化制備中間體a(見上文，int-a，也稱為int-1)。將常用中間體醇(1.0g，1.30mmol)、meoh(20ml)、5-碘吡啶-2-胺(0.8當(dāng)量)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)在室溫下保持16小時。通過tlc觀察到一種主要的非極性產(chǎn)物以及未反應(yīng)的原料兩者。減壓除去揮發(fā)物。將殘余物用冰水(10ml)淬滅并且用etoac(20ml)萃取。分離的有機(jī)層用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗材料。主要的非極性產(chǎn)物通過柱層析分離[使用100-200目，用20％etoac-己烷洗脫]，得到350mg為粘稠糖漿狀的1。將int-a(2.0g，2.60mmol)、meoh(40ml)、5-碘吡啶-2-胺(0.8當(dāng)量)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)在室溫下混合，重復(fù)制備。16小時后，通過tlc觀察到一種主要的非極性產(chǎn)物以及未反應(yīng)的原料。減壓除去揮發(fā)物。將殘余物用冰水(10ml)淬滅并且用etoac(40ml)萃取。分離的有機(jī)層用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗材料。柱層析[使用100-200目，用20％etoac-己烷洗脫]后得到700mg為粘稠糖漿狀的1。

制備4：

將3(250mg，1.28mmol)、dcm(5ml)、tea(3.0當(dāng)量)、(boc)2o(1.2當(dāng)量)、dmap(催化劑)在室溫下混合。4小時后，通過tlc觀察到一種主要的非極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用冰水(10ml)淬滅并且用dcm(20ml)萃取。分離的有機(jī)層用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到300mg為粘稠糖漿狀的4。將3(500mg，2.56mmol)、dcm(10ml)、tea(3.0當(dāng)量)、(boc)2o(1.2當(dāng)量)、dmap(催化劑)在室溫下混合，重復(fù)制備。4小時后，通過tlc觀察到一種主要的非極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用冰水(10ml)淬滅并且用dcm(20ml)萃取。分離的有機(jī)層用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到500mg為濃稠糖漿狀的4。所得粗料未經(jīng)進(jìn)一步純化即可用于下一步驟。

制備2：

在室溫下，混合1(50mg，0.05mmol)、4(1.0當(dāng)量)、甲苯(3.0當(dāng)量)、etoh(1.5ml)、飽和na2co3(0.75ml)，用氬氣脫氣30分鐘，加入pd(dppf)cl2(0.1當(dāng)量)，用氬氣脫氣30分鐘，將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸升溫至80℃并且攪拌4小時。4小時后，通過tlc觀察到原料被完全消耗并且觀察到一種主要的極性產(chǎn)物。反應(yīng)物用冰水稀釋并且用etoac(2×10ml)萃取。將合并的有機(jī)層經(jīng)na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物。所得粗料通過硅膠快速層析純化[使用100-200目，用40％etoac在己烷中洗脫]，得到18mg為無色粘稠糖漿狀的2。在室溫下，混合1(500mg，0.50mmol)、4(1.0當(dāng)量)、甲苯(10ml)、etoh(5ml)、飽和na2co3(2.5ml)，用氬氣脫氣30分鐘，加入pd(dppf)cl2(0.1當(dāng)量)，用氬氣脫氣30分鐘，將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸升溫至80℃并且攪拌4小時，重復(fù)制備。4小時后，通過tlc觀察到原料被完全消耗并且觀察到一種主要的極性產(chǎn)物。反應(yīng)物用冰水稀釋并且用etoac(2×20ml)萃取。將合并的有機(jī)層經(jīng)na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物。所得粗料通過硅膠快速層析純化[使用100-200目，用40％etoac在己烷中洗脫]，得到320mg為無色粘稠糖漿狀的2。

制備uv-0110：

2(330mg，0.34mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(3ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(3.0ml)混合，在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且攪?6小時。減壓除去揮發(fā)物，得到200mg的粗料，之后將其通過制備型hplc純化[柱：x-selectcshc-18(250×19mm，5μ)(50mg負(fù)載；ch3cn：5mμnh4hco3；t/b％：0.1/95、2/95、15/70、25/55、30/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到78mg(56％產(chǎn)率)為白色固體的uv-0110，hplc純度為99.62％[柱：ymc-triart-c-18(150×4.6mm，3.0μm)；rt5.77min；acn：0.05％tfa(aq)；1.0ml/min)]以及l(fā)cms[m+h]⁺406。

實(shí)施例21：合成uv-0125

制備2：

1(200mg，1.16mmol)、dcm(15ml)、dmp(1.5當(dāng)量)混合，在0℃下保持20分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且攪?小時。2小時后，通過tlc觀察到非極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用水淬滅并且用dcm(2×20ml)萃取。將合并的有機(jī)層用飽和nahco3、水洗滌，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物，通過硅膠柱層析純化該粗產(chǎn)物[使用100-200目，用10％的etoac-己烷洗脫]，得到150mg2。1(2g，11.6mmol)、dcm(100ml)、dmp(1.5當(dāng)量)混合，在0℃下保持20分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且攪?小時，重復(fù)制備，通過tlc觀察到非極性產(chǎn)物。將反應(yīng)混合物用水淬滅并且用dcm(2×100ml)萃取。將合并的有機(jī)層用飽和nahco3、水洗滌，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物，通過硅膠柱層析純化該粗產(chǎn)物[使用100-200目，用10％的etoac-己烷洗脫]，得到1.5g2。

制備4：

2(400mg，2.35mmol)、etoh(4ml)、乙二醛(40％aq，1.5當(dāng)量)、nh4oac(4當(dāng)量)、acoh(6ml)混合，在室溫下保持10分鐘；然后用1分鐘時間將溫度升至80℃，并且攪拌8小時。8小時后，通過tlc觀察到極性產(chǎn)物和原料。將揮發(fā)物蒸發(fā)并且將殘余物用飽和nahco3淬滅并且用etoac(2×50ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物，通過硅膠柱層析純化該粗產(chǎn)物[使用100-200目，用30％的etoac-己烷洗脫]，得到100mg4。

制備5：

4(100mg，0.48mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(10ml)、tea(2ml)、int-b(1.2當(dāng)量)室溫混合，將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?0℃，并且攪拌16小時。16小時后，通過tlc觀察到極性產(chǎn)物。將揮發(fā)物蒸發(fā)并且將殘余物用水淬滅并且用etoac(2×50ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物，通過硅膠柱層析純化該粗產(chǎn)物[使用100-200目，用30％的etoac-己烷洗脫]，得到300mg5。

制備uv-0125：

5(300mg，0.33mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(2.0ml)混合，在0℃下保持20分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且攪?6小時。16小時后，粗lcms顯示出60％的產(chǎn)物形成。減壓除去揮發(fā)物，得到200mg粗材料。制備型hplc純化[柱：ymcactusc-18(250×20mm，5μ)(75mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4hco3；t/b％：0.1/95、2/95、8/70、20/30、20.01/0、27/0；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到25mg橘紅色固體狀的uv-0125，hplc純度為96.12％[柱：zorbaxsbc-18(150×4.6mm，3.5μm)；rt5.66mm；acn：0.5％tfa(aq)；1.0ml/min)]，lcms[m+h]+450.1。

實(shí)施例22：合成uv-0126

制備2：

1(300mg，2.05mmol)、dcm(10ml)、tea(3.0當(dāng)量)、(boc)2o(1.2當(dāng)量)混合，在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且攪拌?6小時后，通過tlc觀察到非極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用水淬滅并且用etoac(2×20ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物，通過硅膠柱層析純化該粗產(chǎn)物[使用100-200目，用20％的etoac-己烷洗脫]，得到320mg白色固體狀的2。用1(1g，6.83mmol)、dcm(20ml)、tea(3.0當(dāng)量)、(boc)2o(1.2當(dāng)量)混合，0℃至室溫，重復(fù)制備。16小時后，通過tlc觀察到一種非極性產(chǎn)物。將反應(yīng)混合物用水淬滅并且用etoac(2×30ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物，通過硅膠柱層析純化該粗產(chǎn)物[使用100-200目，用20％的etoac-己烷洗脫]，得到1.2g白色固體狀的2。

制備3：

常見的int-c(150mg，0.15mmol，參見下文)、etoh：甲苯：水(1:1:1，5ml)、2(1.0當(dāng)量)混合，在室溫下脫氣30分鐘，加入na2co3(3.0當(dāng)量)、pd(dppf)c12(0.1當(dāng)量)，在室溫下脫氣30分鐘，在15分鐘內(nèi)溫度升高至80℃并且攪拌。4小時后，通過tlc觀察到非極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用水淬滅并且用etoac(2×10ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物，通過硅膠柱層析純化該粗產(chǎn)物[使用100-200目，用10％的etoac-己烷洗脫]，得到30mg黃色粘稠糖漿狀的3。用常見的int-c(1.0g，1.03mmol)、

etoh：甲苯：水(1:1:1，20ml)、2(1.0當(dāng)量)混合，在室溫下，脫氣30分鐘，加入na2co3(3.0當(dāng)量)、pd(dppf)c12(0.1當(dāng)量)，在室溫下，脫氣30分鐘，在15分鐘內(nèi)將溫度升高至80℃并且攪拌4小時，重復(fù)制備。通過tlc觀察到非極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用水淬滅并且用etoac(2×10ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物，通過硅膠柱層析純化該粗產(chǎn)物[使用100-200目，用10％的etoac-己烷洗脫]，得到130mg黃色粘稠糖漿狀的3。

制備uv-0126

3(150mg，0.14mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(1.5ml)混合，在0℃下保持15分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝兀⑶覕嚢?4小時。24小時后，減壓除去揮發(fā)物，得到100mg粗物質(zhì)。制備型hplc純化[柱：x-selectcshc-18(250×19mm，5μ)(75mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4hco3；t/b％：0.1/95、2/95、8/70、22/30、25/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到約10mg橘紅色粘稠糖漿狀的uv-0126(hplc純度96.649％[柱：xselectcshc18(150×4.6mm，3.5μm)；rt7.17min；acn：5mmnh4oac(aq)；1.0ml/min)]，lcms[m+h]⁺450.4。

制備常見中間體c(int-c)：

在氬氣氛圍下，將2-(4-氟-3-硝基苯基)-4,4,5,5-四甲基-l,3,2-氧雜環(huán)戊硼烷(1.48g，5.56mmol)和int-b(5.0g，6.95mmol)的1,4-二氧雜環(huán)己烷(100ml)和三乙胺(25ml)的攪拌溶液用30分鐘時間加熱至60℃，并且攪拌16小時。通過tlc監(jiān)測反應(yīng)。反應(yīng)完成后，真空除去揮發(fā)物。將殘余物用水(50ml)稀釋，并且用etoac(3×50ml)萃取。用硫酸鈉干燥合并的有機(jī)萃取物，過濾并且真空濃縮，得到黃色黏糖漿狀的int-c(5.0g)該粗料無需進(jìn)一步純化即可用于下一步驟。

¹hnmr(500mhz,cdcl3)：δ8.64(d,j＝1.4hz,1h),8.17(brs,1h),7.81dd,j＝8.5,1.3hz,1h)。6.81(d,j＝8.7hz,1h),4.59-4.54(m,1h),4.26-4.24(m,1h),4.09-3.99(m,1h),3.94-3.84(m,3h),3.81-3.60(m,3h),3.55-3.28(m,5h),3.24-3.13(m,1h),1.99-1.88(m,1h),1.79-1.72(m,2h),1.55-1.48(m,2h),1.34(s,12h),0.93-0.90(m,36h),0.17-0.11(m,24h)

實(shí)施例23：合成uv-0127

制備2：

常見的int-c(700mg，0.72mmol)、etoh：甲苯：水(1:1:1，15ml)、2(1.0當(dāng)量)混合，在室溫下脫氣30分鐘，加入na2co3(3.0當(dāng)量)、pd(dppf)c12(0.1當(dāng)量)將反應(yīng)混合物在室溫下氬氣吹掃30分鐘；將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?0℃，并且攪拌7小時；通過tlc監(jiān)測到原料完全消耗并且觀察到極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用冰水稀釋并且用dcm(2×30ml)萃取。經(jīng)na2so4干燥合并的有機(jī)層，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物。通過硅膠柱層析純化所得粗產(chǎn)物[使用100-200目，用20％的etoac-己烷洗脫]，得到300mg2。

制備uv-0127：

2(200mg，0.21mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(2.0ml)混合，在0℃下保持15分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且攪拌?4小時后，粗lcms顯示85％的產(chǎn)物形成。減壓除去揮發(fā)物，得到150mg粗物質(zhì)，之后通過制備型hplc純化該粗物質(zhì)[柱：x-selectcshc-18(250×19mm，5μ)(75mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4hco3；t/b％：0.1/95、2/95、10/65、22/30、25/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到36mg黃色固體狀的uv-0127，hplc純度為98.77％[柱：zorbaxsbc-18(150×4.6mm，3.5μm)；rt6.15mm；acn：0.5％tfa(aq)；1.0ml/min)]，lcms[m+h]⁺462.1。

實(shí)施例24：合成uv-0128

制備2：

常見的int-c(350mg，0.36mmol，參見上文)、etoh：甲苯：水(1:1:1，10ml)、1(1.0當(dāng)量)室溫混合，并且將反應(yīng)混合物在氬氣下吹掃30分鐘，加入na2co3(3.0當(dāng)量)、pd(dppf)cl2(0.1當(dāng)量)并且在氬氣下吹掃30分鐘；將所得反應(yīng)混合物用15分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?0℃并且攪拌7小時。7小時后，通過tlc監(jiān)測到原料完全消耗并且觀察到極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用冰水稀釋并且用dcm(2×30ml)萃取。經(jīng)na2so4干燥合并的有機(jī)層，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物。通過硅膠柱層析純化所得粗產(chǎn)物[使用100-200目，用20％的etoac-己烷洗脫]，得到200mg2。

制備uv-0128：

2(200mg，0.21mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(2.0ml)混合，在0℃下保持15分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且攪?4小時。24小時后，粗lcms顯示出90％的產(chǎn)物形成。減壓除去揮發(fā)物，得到120mg粗物質(zhì)。制備型hplc純化[柱：x-selectcshc-18(250×19mm，5μ)(75mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4hco3；t/b％：0.1/95、2/95、10/65、22/30、25/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到42.2mg黃色固體狀的uv-0128(hplc純度97.61[(柱：zorbaxsbc-18(150×4.6mm，3.5μm)；rt6.35min；acn：0.5％tfa(aq)；1.0ml/min)]，lcms[m+h]⁺462.1)。

實(shí)施例25：合成uv-0128(替代)

制備3：

1(500mg，1.87mmol)、etoh：甲苯：水(1:1:1，15ml)、2(1.2當(dāng)量)混合，在室溫下脫氣30分鐘，加入na2co3(3.0當(dāng)量)、pd(dppf)2cl2(0.1當(dāng)量)，在室溫下脫氣30分鐘，將所得反應(yīng)混合物用15分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?0℃，并且攪拌2小時。2小時后，通過tlc觀察到非極性產(chǎn)物。將反應(yīng)用水淬滅并且用etoac(2×30ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物，通過硅膠柱層析純化該粗產(chǎn)物[使用100-200目，用30％的etoac-己烷洗脫]，得到380mg黃色固體狀的3。

制備5：

3(380mg，1.73mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(15ml)、tea(3.0當(dāng)量)、4(1.5當(dāng)量)室溫混合，將所得反應(yīng)混合物用15分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?0℃，并且攪拌4小時。4小時后，通過tlc觀察到一種極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用水淬滅并且用etoac(2×30ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物，通過硅膠柱層析純化該粗產(chǎn)物[使用100-200目，用50％的etoac-己烷洗脫]，得到400mg黃色固體狀的5。

制備6：

草酰氯(2.0當(dāng)量)、thf(5.0ml)、dmso(4.0當(dāng)量)混合，在-78℃下保持10分鐘，加入5(200mg，0.63mmol)，在-78℃下保持20分鐘，加入tea(4.0當(dāng)量)，在-78℃下保持1小時，溫度用1小時時間升至室溫并且攪拌2小時。3小時后，通過tlc監(jiān)測到原料完全消耗并且觀察到非極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用冰水稀釋并且用etoac(2×20ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗物質(zhì)，通過使用20％的etoac-己烷洗脫的硅膠(100-200)快速柱層析純化該粗物質(zhì)，得到180mg無色粘稠糖漿狀的6。

制備uv-0128：

6(180mg，0.57mmol)、meoh(10ml)、thf(5ml)、dnj(0.8當(dāng)量)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)混合，在室溫下保持16小時。粗lcms顯示87％的產(chǎn)物形成。減壓除去揮發(fā)物，得到250mg粗物質(zhì)，其純化前的hplc純度為87.27％[柱：xselectcshc18(150×4.6mm，3.5μm)；rt8.52min；acn：5mmnh4hco3(aq)；1.0ml/min)]，lcms[m+h]⁺462.2。

實(shí)施例26：合成uv-0129

制備3：

1(1.0g，6.41mmol)、2(1.5當(dāng)量)、dipea(5ml)、dma(10ml)室溫混合，將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?00℃，并且攪拌16小時。16小時后，通過tlc觀察到非極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用水淬滅并且用etoac(2×30ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗物質(zhì)。通過硅膠柱層析純化所得粗物質(zhì)[使用100-200目，用50％的etoac-己烷洗脫]，得到500mg黃色固體狀的3。

1hnmr數(shù)據(jù)符合預(yù)期。

制備4：

3(100mg，0.44mmol)、tea(5ml)、int-b(1.2當(dāng)量)在密封管中室溫混合，將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?00℃并且攪拌。在16小時后，通過tlc觀察到非極性產(chǎn)物以及原料(1:1)。將反應(yīng)混合物用水淬滅并且用etoac(2×30ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗物質(zhì)，通過硅膠柱層析純化該粗物質(zhì)[使用100-200目，用20％的etoac-己烷洗脫]，得到250mg黃色粘稠糖漿狀的4。

制備uv-0129：

4(250mg，0.27mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(2.5ml)混合，在0℃下保持15分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且攪?4小時。粗lcms顯示出88％的產(chǎn)物形成。減壓除去揮發(fā)物，得到180mg粗物質(zhì)。制備型hplc純化[柱：x-selectcshc-18(250×19mm，5μ)(75mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4hco3；t/b％：0.1/95、2/95、10/65、20/30、25/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到53.4mg橘紅色粘稠糖漿狀的uv-0129，其hplc純度為99.27％[柱：zorbaxsbc-18(150×4.6mm，3.5μm)；rt4.88mm；acn：0.5％tfa(aq)；1.0ml/min)]，lcms[m+h]⁺469.1)。

實(shí)施例27：合成uv-0131

制備2：

1(1.0g，6.4mmol)、acoh(5ml)、原甲酸三乙酯(5.0當(dāng)量)、tms-n3(3.0當(dāng)量)在密封管中室溫混合，將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?0℃，并且攪拌4小時。4小時后，通過tlc觀察到一種極性產(chǎn)物。將反應(yīng)混合物減壓蒸發(fā)并且溶于dcm中。用飽和nahco3溶液洗滌有機(jī)層。經(jīng)無水na2so4干燥有機(jī)層，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物，通過硅膠柱層析純化該粗產(chǎn)物[使用100-200目，用40％的etoac-己烷洗脫]，得到800mg灰白色固體狀的2。

制備3：

2(150mg，0.71mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(10ml)、tea(5.0當(dāng)量)、int-b(1.2當(dāng)量)室溫混合，將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?0℃，并且攪拌16小時。16小時后，通過tlc觀察到一種新的非極性產(chǎn)物。將反應(yīng)混合物減壓蒸發(fā)并且用水淬滅。用etoac(2×20ml)萃取水層。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物，通過硅膠柱層析純化該粗產(chǎn)物[使用100-200目，用20％的etoac-己烷洗脫]，得到300mg黃色粘稠糖漿狀的3。

制備uv-0131：

3(300mg，0.31mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(3.0ml)混合，在0℃下保持15分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且攪?4小時。24小時后，粗lcms顯示出73％的產(chǎn)物形成。減壓除去揮發(fā)物，得到150mg粗物質(zhì)。制備型hplc純化[柱：ymcactusc-18(250×20mm，5μ)(75mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4hco3；t/b％：0.1/95、2/95、8/60、20/30、30/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到35mg黃色固體的uv-0131，其hplc純度為97.49％[柱：zorbaxsbc-18(150×4.6mm，3.5μm)；rt6.72min；acn：0.5％tfa(aq)；1.0ml/min)]，lcms[m+h]+452.2。

實(shí)施例28：合成uv-0132

制備關(guān)鍵氟化中間體：

1(800mg，0.78mmol)、thf:tea(1:1，40ml)、2(int-b，如方案中如2所示，1.2當(dāng)量)室溫混合；將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?0℃，并且攪拌16小時。通過tlc觀察到非極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用水淬滅并且用etoac(2×30ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物，通過硅膠柱層析純化該粗產(chǎn)物[使用100-200目，用10％的etoac-己烷洗脫]，得到1.6g黃色粘稠糖漿狀的氟化中間體。

制備3：

關(guān)鍵int(也稱為關(guān)鍵氟化中間體，300mg，0.35mmol)、dmso(5ml)、1h-1,2,4-三唑(1.5當(dāng)量)、k2co3(2.5當(dāng)量)室溫混合，將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?30℃，并且攪拌16小時。通過tlc觀察到極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用水淬滅并且用etoac(2×20ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗物質(zhì)，通過硅膠柱層析純化該粗物質(zhì)[100-200目，用10％的etoac-己烷洗脫]，得到150mg黃色粘稠糖漿狀的3。

制備uv-0132：

3(150mg，0.35mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(2.0ml)混合，在0℃下保持15分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝兀⑶覕嚢?4小時。粗lcms顯示出83％的產(chǎn)物形成。減壓除去揮發(fā)物，得到100mg粗物質(zhì)。制備型hplc純化[柱：ymcactusc-18(250×20mm，5μ)(50mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4oac；t/b％：0.1/95、2/95、10/55、22/30、22.01/0、30/0；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到18.9mg黃色固體狀的uv-0132，其hplc純度為99.87％[柱：atlantist3(150×4.6mm，3.0μm)；rt7.65min；acn：5mmnh4oac(aq)；1.0ml/min)]，lcms[m+h]⁺451.1。

實(shí)施例29：合成uv-0133

制備2

如uv-0132制備的關(guān)鍵氟化中間體(300mg，0.35mmol)、dmso(5ml)、3(1.5當(dāng)量)、k2co3(2.5當(dāng)量)室溫混合；將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸升溫至130℃并且攪拌16小時。通過tlc觀察到一種極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用水淬滅并且用etoac(2×20ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物，通過硅膠柱層析純化該粗產(chǎn)物[100-200目，用30％的etoac-己烷洗脫]，得到200mg黃色粘稠糖漿狀的2。

制備uv-0133：

2(200mg，0.19mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(3.0ml)混合，在0℃下保持15分鐘；用10分鐘時間漸溫?zé)嶂潦覝兀⑶覕嚢?4小時。24小時后，粗lcms顯示出70％的產(chǎn)物形成。減壓除去揮發(fā)物，得到150mg粗物質(zhì)。制備型hplc純化[柱：x-selectcshc-18(250×19mm，5μ)(50mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4hco3；t/b％：0.1/95、2/95、15/65、25/30、30/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到71.5mg黃色固體狀的uv-0133，其hplc純度為99.25％[柱：xselectcshc18(150×4.6mm，3.5μm)；rt6.76min；acn：5mmnh4oac(aq)；1.0ml/min)]，lcms[m+h]+468.1。

實(shí)施例30：合成uv-0136

制備2：

在氬氣氛下，在室溫下向int-b(4g，5.55mmol)的1,4-二氧雜環(huán)己烷(30ml)的攪拌溶液中加入三乙胺(tea，20ml)和(4-氟-3-硝基苯基)甲醇(665mg，3.89mmol)。將反應(yīng)混合物在30分鐘內(nèi)加熱至70℃并且保持6小時。通過tlc監(jiān)測反應(yīng)。反應(yīng)完成后，真空除去揮發(fā)物以得到粗物質(zhì)，通過硅膠柱層析純化該粗物質(zhì)[使用100-200目，用20％etoac-己烷洗脫]，得到橘色糖漿狀的化合物2(2g，42％)。

制備3：

在氬氣氛下，在0℃下向化合物2(1.2g，1.38mmol)的ch2cl2(30ml)的攪拌溶液中逐滴加入三乙胺(0.57ml，4.13mmol)和甲磺酰氯(0.13ml，1.65mmol)。將反應(yīng)混合物用15分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且攪?小時。通過tlc監(jiān)測反應(yīng)；完全反應(yīng)后，將反應(yīng)混合物用水(30ml)淬滅，并且用ch2cl2(3×30ml)萃取。用硫酸鈉干燥合并的有機(jī)萃取物，過濾并且真空濃縮，得到黃色黏糖漿狀的甲磺酰中間體3(1.2g)。該物質(zhì)無需進(jìn)一步純化即可用于下一步驟。

制備4：

在室溫下，向甲磺酰中間體3(500mg)中加入2.0mn,n-二甲胺的thf(5ml)溶液；將密封管中的所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?0℃并且攪拌4小時。通過tlc觀察到一種極性產(chǎn)物。將反應(yīng)混合物用水淬滅并且用etoac(2×30ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗物質(zhì)，通過硅膠柱層析純化該粗物質(zhì)[使用100-200目，用30％的etoac-己烷洗脫]，得到300mg黃色粘稠糖漿狀的4。

制備uv-0136：

4(300mg，0.33mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(3.0ml)混合，在0℃下保持15分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且攪?4小時。24小時后，粗lcms顯示出67％的產(chǎn)物形成。減壓除去揮發(fā)物，得到150mg粗物質(zhì)。制備型hplc純化[柱：ymcactusc-18(250×20mm，5μ)(75mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4hco3；t/b％：0.1/90、2/90、10/65、20/30、30/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到39.7mg黃色粘稠糖漿狀的uv-0136，其hplc純度為95.03％[柱：zorbaxsbc-18(150×4.6mm，3.5μm)；rt5.91min；acn：0.5％tfa(aq)；1.0ml/min)]，lcms[m+h]⁺441.2。

實(shí)施例31：合成uv-0136(替代)

制備3：

在室溫下，向1(10g，86.20mmol)、甲苯(200ml)加入2(1.0當(dāng)量)；將所得反應(yīng)混合物用15分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?00℃，并且攪拌4小時。通過tlc觀察到非極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用水淬滅并且用etoac(2×100ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗物質(zhì)，通過硅膠柱層析純化該粗物質(zhì)[使用100-200目，用50％的etoac-己烷洗脫]，得到10g白色固體狀的3。

制備4：

3(5.0g，20.24mmol)、dcm(100ml)、tea(3.0當(dāng)量)、tbdms-cl(1.2當(dāng)量)混合，在0℃下保持20分鐘；用15分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝兀⑶覕嚢?小時。通過tlc觀察到非極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用水淬滅并且用dcm(2×60ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗物質(zhì)，通過硅膠柱層析純化該粗物質(zhì)[100-200目，用20％的etoac-己烷洗脫]，得到4.0g無色粘稠糖漿狀的4。

制備5：

4(4.0g，11.08mmol)、etoh(80ml)、nh2nh2.h2o(5.0當(dāng)量)混合，在室溫下保持16小時。通過tlc監(jiān)測到原料完全消耗并且觀察到極性產(chǎn)物。減壓濃縮揮發(fā)物，并且將殘余物用冰水稀釋，并且用etoac(2×60ml)萃取。用na2so4干燥有機(jī)層，過濾并且減壓濃縮，得到2.0g無色粘稠糖漿狀的5。

制備7：

5(2.0g，8.65mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(30ml)、tea(3.0當(dāng)量)、6(0.8當(dāng)量)室溫混合；將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?0℃，并且攪拌16小時。通過tlc觀察到一種極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用水淬滅并且用etoac(2×50ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗物質(zhì)，通過硅膠柱層析純化該粗物質(zhì)[100-200目，用50％的etoac-己烷洗脫]，得到600mg黃色粘稠糖漿狀的7。

制備8：

7(600mg，1.57mmol)、dcm(15ml)、tea(3.0當(dāng)量)、mscl(1.2當(dāng)量)混合，在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝兀⑶覕嚢?小時。2小時后，通過tlc監(jiān)測到原料完全消耗并且觀察到非極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用冰水稀釋并且用dcm(2×20ml)萃取。用na2so4干燥有機(jī)層，過濾并且減壓濃縮，得到700g黃色粘稠糖漿狀的8(粗產(chǎn)物)。

制備9：

8(700mg)的thf(5ml)溶液、二甲基胺(5ml，2m，溶于thf中)室溫混合；將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸升溫至60℃，并且在密封管中攪拌2小時。通過tlc監(jiān)測到原料完全消耗并且觀察到極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用冰水稀釋并且用etoac(2×20ml)萃取。用na2so4干燥合并的有機(jī)層，過濾并且減壓濃縮，得到粗物質(zhì)，通過硅膠柱層析純化該粗物質(zhì)[100-200目，用80％的etoac-己烷洗脫]，得到400mg黃色粘稠糖漿狀的9。

制備10：

在室溫下向9(400mg，0.97mmol)的thf(10ml)溶液中加入tbaf(1.2當(dāng)量，1.0m溶于thf中)并且攪拌。4小時后，通過tlc監(jiān)測到原料完全消耗并且觀察到主要的極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用冰水稀釋，并且用etoac(2×30ml)萃取。將合并的有機(jī)層用水洗滌并且用na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到300mg粗10。

制備11：

草酰氯(2.0當(dāng)量)、thf(5.0ml)、dmso(4.0當(dāng)量)混合，在-78℃下保持10分鐘，加入10(300mg，1.02mmol)，在-78℃下保持20分鐘，加入tea(4.0當(dāng)量)，在-78下保持1小時，溫?zé)嶂潦覝亍?小時后，通過tlc監(jiān)測到原料完全消耗并且觀察到非極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用冰水稀釋并且用etoac(2×20ml)萃取。將合并的有機(jī)層用水洗滌并且用na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到200mg黃色粘稠糖漿狀的11。制備uv-0136：

11(200mg，0.68mmol)、meoh(10ml)、dnj(0.8當(dāng)量)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)室溫混合。16小時后，粗lcms顯示77％的產(chǎn)物形成。減壓除去揮發(fā)物，得到200mg粗物質(zhì)，其hplc純度為77.26％[柱：xselectcshc18(150×4.6mm，3.5μm)；rt7.88min；acn：5mmnh4hco3(aq)；1.0ml/min)]，lcms[m+h]⁺441.1。

實(shí)施例32：合成uv-0139

制備4：

關(guān)鍵氟化中間體(如uv-0132制備，800mg，0.85mmol)、dmso(10ml)、3(1.5當(dāng)量)、k2co3(2.5當(dāng)量)室溫混合；將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸升溫至60℃并且攪拌2小時。2小時后，通過tlc觀察到極性點(diǎn)(polarspot)以及未反應(yīng)的原料。將反應(yīng)物用水淬滅并且用etoac(2×30ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗物質(zhì)，通過硅膠柱層析純化該粗物質(zhì)[使用100-200目，用70％的etoac-己烷洗脫]，得到400mg黃色粘稠糖漿狀的4。

制備uv-0139：

4(400mg，0.42mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(4.0ml)混合，在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝兀⑶覕嚢?8小時。粗lcms顯示出78％的產(chǎn)物形成。減壓除去揮發(fā)物，得到200mg粗物質(zhì)。制備型hplc純化[柱：x-selectcshc-18(250×19mm，5μ)(75mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4hco3；t/b％：0.1/95、2/95、8/65、20/30、25/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到41mg橘紅色粘稠糖漿狀的uv-0139，并且凍干后為30mg，其hplc純度為98.29％[柱：xselectcshc18(150×4.6mm，3.5μm)；rt4.16min；acn：5mmnh4oac(aq)；1.0ml/min)]，[m+h]⁺482.2，[m+na]⁺504.2作為基峰。

實(shí)施例33：合成uv-0142

制備2：

1(1.0g，6.40mmol)、dmso(10ml)、k2co3(3.0當(dāng)量)、吡唑(2.0當(dāng)量)室溫混合，將所得反應(yīng)混合物用20分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?50℃，并且攪拌16小時。通過tlc觀察到一種極性產(chǎn)物。將反應(yīng)混合物用水淬滅并且用etoac(2×30ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗物質(zhì)，通過硅膠柱層析純化該粗物質(zhì)[100-200目，用30％的etoac-己烷洗脫]，得到800mg灰白色固體狀的2。

制備3：

int-a(參見上文，750mg，1.04mmol)、meoh(20ml)、2(0.8當(dāng)量)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)室溫混合。16小時后，通過tlc觀察到一種非極性產(chǎn)物。減壓除去揮發(fā)物；將殘余物用水淬滅并且用etoac(2×30ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗物質(zhì)，通過硅膠柱層析純化該粗物質(zhì)[使用100-200目，用10％的etoac-己烷洗脫]，得到350mg黃色粘稠糖漿狀的3。

制備uv-0142：

3(350mg，0.38mmol)的1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)溶液、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(4.0ml)混合，在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝兀⑶覕嚢?4小時。粗lcms顯示出85％的產(chǎn)物形成。減壓除去揮發(fā)物，得到180mg粗物質(zhì)。制備型hplc純化[柱：x-selectcshc-18(250×19mm，5μ)(75mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4hco3；t/b％：0.1/95、2/95、10/60、20/30、30/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到62.1mg黃色粘稠糖漿狀的uv-0142，其hplc濃度為99.71％[柱：xselectcshc18(150×4.6mm，3.5μm)；rt7.73min；acn：5mmnh4oac(aq)；1.0ml/min)]，lcms[m+h]⁺450.0。

實(shí)施例34：合成uv-0143

制備2：

在室溫下，向1(500mg，3.20mmol)、dmso(5ml)中加入k2co3(3.0當(dāng)量)、1h-四唑(2.0當(dāng)量)；將所得反應(yīng)混合物用20分鐘時間逐漸升溫至150℃并且攪拌48小時。通過tlc觀察一種極性產(chǎn)物以及原料。將反應(yīng)混合物用水淬滅并且用etoac(2×30ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗物質(zhì)，通過硅膠柱層析純化該粗物質(zhì)[使用100-200目，用30％的etoac-己烷洗脫]，得到160mg灰白色固體狀的2。

制備3：

int-a(750mg，1.04mrnol)、meoh(20ml)、2(0.8當(dāng)量)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)室溫混合。16小時后，通過tlc觀察到一種非極性產(chǎn)物。減壓濃縮揮發(fā)物；將殘余物用水淬滅并且用etoac(2×30ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗物質(zhì)，通過硅膠柱層析純化該粗物質(zhì)[使用100-200目，用10％的etoac-己烷洗脫]，得到250mg黃色粘稠糖漿狀的3。制備uv-0143：

3(350mg，0.38mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(4.0ml)混合，在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝兀⑶覕嚢?4小時。粗lcms顯示出83％的產(chǎn)物形成。減壓除去揮發(fā)物，得到162mg粗物質(zhì)。制備型hplc純化[柱：x-selectcshc-18(250×19mm，5μ)(75mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4hco3；t/b％：0.1/95、2/95、10/60、20/30、30/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到23.8mg黃色粘稠糖漿狀的uv-0143，其hplc純度為98.79％[柱：xselectcshc18(150×4.6mm，3.5μm)；rt7.17min；acn：5mmnh4oac(aq)；1.0ml/min)]，lcms[m+h]⁺452.1。

實(shí)施例35：合成uv-0153

制備4：

甲磺酰中間體3(650mg)、boc-哌嗪(過量當(dāng)量)、thf(10ml)室溫混合；將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?0℃并且攪拌6小時。通過tlc觀察到一種極性產(chǎn)物。將反應(yīng)混合物用水淬滅并且用etoac(2×30ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗物質(zhì)，將粗物質(zhì)通過硅膠柱層析純化[100-200目，用30％的etoac-己烷洗脫]得到350mg黃色粘稠糖漿狀的4。

制備uv-0153：

4(350mg，0.33mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(4.0ml)混合，在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝兀⑶覕嚢?4小時。粗lcms顯示出73％的產(chǎn)物形成。減壓除去揮發(fā)物，得到200mg粗物質(zhì)。制備型hplc純化[柱：x-selectcshc-18(250×19mm，5μ)(75mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4hco3；t/b％：0.1/95、2/95、10/65、20/35、30/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到35mg黃色粘稠糖漿狀的uv-0153，其hplc純度為99.26％[柱：zorbaxsbc-18(150×4.6mm，3.5μm)；rt5.39min；acn：0.5％tfa(aq)；1.0ml/min)]，lcms[m+h]⁺482.2。

實(shí)施例36：合成uv-0154

制備4：

向甲磺酰中間體3(650mg)的thf溶液中加入嗎啉(超過當(dāng)量，10ml)，在室溫下；所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?0℃并且攪拌6小時。通過tlc觀察到一種極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用水淬滅并且用etoac(2×30ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗物質(zhì)，通過硅膠柱層析純化該粗物質(zhì)[使用100-200目，用30％的etoac-己烷洗脫]，得到250mg黃色粘稠糖漿狀的4。

制備uv-0154：

向4(250mg，0.26mmol)的1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)溶液中加入4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(4.0ml)，在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝夭⑶覕嚢琛?4小時后，粗lcms顯示78％的產(chǎn)物形成。減壓除去揮發(fā)物，得到200mg粗物質(zhì)。制備型hplc純化[柱：x-selectcshc-18(250×19mm，5μ)(75mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4hco3；t/b％：0.1/95、2/95、10/65、20/35、30/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到約35mg黃色粘稠糖漿狀的uv-0154，其hplc純度為99.58％(柱：zorbaxsbc-18(150×4.6mm，3.5μm)；rt5.66mm；acn：0.5％tfa(aq)；1.0ml/min)]，lcms[m+h]⁺483.1。

實(shí)施例37：合成uv-0157

制備2和3：

在室溫下向1(1.0g，6.40mmol)、dmso(10ml)中加入k2co3(3.0當(dāng)量)、1h-1,2,3-三唑(1.2當(dāng)量)；將所得反應(yīng)混合物用20分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?50℃，并且攪拌24小時。通過tlc觀察到兩種極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用水淬滅并且用etoac(2×40ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗物質(zhì)。通過硅膠柱層析[100-200目，用20％和50％etoac-己烷洗脫]來分離兩種極性產(chǎn)物，得到300mg和320mg灰白色固體狀的相應(yīng)異構(gòu)體。

制備5：

int-a(參見上文，800mg，1.11mmol)、meoh(20ml)、2(0.8當(dāng)量較小極性異構(gòu)體)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)室溫混合。16小時后，通過tlc觀察到一種非極性產(chǎn)物。減壓濃縮揮發(fā)物；將殘余物用水淬滅并且用etoac(2×30ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗物質(zhì)，通過硅膠柱層析純化該粗物質(zhì)[使用100-200目，用10％的etoac-己烷洗脫]，得到300mg黃色粘稠糖漿狀的5。

制備uv-0157：

向5(300mg，0.32mmol)的1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)溶液中加入4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(3.0ml)中，在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且攪?4小時。粗lcms顯示出80％的產(chǎn)物形成。減壓除去揮發(fā)物，得到170mg粗物質(zhì)。制備型hplc純化[柱：x-selectcshc-18(250×19mm，5μ)(100mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4hco3；t/b％：0.1/95、2/95、10/70、25/30、30/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到69.9mg黃色粘稠糖漿狀的uv-0157，其hplc純度為99.57％[柱：xselectcshc18(150×4.6mm，3.5μ)；rt7.77min；acn：5mmnh4oac(aq)；1.0ml/min)]，lcms[m+h]⁺451.1。

實(shí)施例38：合成uv-0158

制備4：

int-a(參見上文，800mg，1.11mmol)、meoh(20ml)、1(0.8當(dāng)量的從針對uv-0157所述的異構(gòu)體混合物中純化出的較大極性的異構(gòu)體)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)室溫混合。16小時后，通過tlc觀察到一種非極性產(chǎn)物。減壓濃縮揮發(fā)物；將殘余物用水淬滅并且用etoac(2×30ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗物質(zhì)，通過硅膠柱層析純化該粗物質(zhì)[使用100-200目，用10％的etoac-己烷洗脫]，得到200mg黃色粘稠糖漿狀的2。

制備uv-0158：

向2(200mg，0.21mmol，三唑反應(yīng)的較大極性產(chǎn)物)的1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)溶液中加入4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(3.0ml)，在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝兀⑶覕嚢?4小時。粗lcms顯示出83％的產(chǎn)物形成。減壓除去揮發(fā)物，得到120mg粗物質(zhì)。制備型hplc純化[柱：x-selectcshc-18(250×19mm，5μ)(75mg負(fù)載；ch3cn：5mμnh4hco3；t/b％：0.1/95、2/95、10/70、20/35、25/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到22.2mg黃色固體狀的uv-0158，hplc純度為98.15％[柱：xselectcshc18(150×4.6mm，3.5μ)；rt7.09min；acn：5mmnh4oac(aq)；1.0ml/min)]，lcms[m+h]⁺451.2。

實(shí)施例39：合成uv-0160

制備2：

1(500mg，2.56mmol)、tea(10ml)、1h-四唑(10當(dāng)量)在密封管中室溫混合；將反應(yīng)混合物用20分鐘時間逐漸升溫至120℃并且攪拌48小時。通過tlc觀察到兩種極性產(chǎn)物以及少量原料。將反應(yīng)物用水淬滅并且用etoac(2×30ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗物質(zhì)，通過硅膠柱層析純化該粗物質(zhì)[100-200目，用50-70％的etoac-己烷洗脫]得到180mg灰白色固體狀的2。

制備3：

2(180mg，0.87mmol)、meoh(20ml)、int-a(1.0當(dāng)量)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)室溫混合。16小時后，通過tlc觀察到非極性產(chǎn)物以及未反應(yīng)的胺(2)。減壓濃縮揮發(fā)物；將殘余物用水淬滅并且用etoac(2×50ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗物質(zhì)，通過硅膠柱層析純化該粗物質(zhì)[使用100-200目，用20％的etoac-己烷洗脫]，得到200mg3。

制備uv-0160：

向3(200mg，0.22mmol)的1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)溶液中加入4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(2.0ml)，在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且攪?4小時。粗lcms顯示出85％的所需產(chǎn)物。減壓除去揮發(fā)物，得到120mg粗物質(zhì)。制備型hplc純化[柱：x-selectcshc-18(250×19mm，5μ)(50mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4hco3；t/b％：0.1/95、2/95、10/70、20/35、28/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到約20mg黃色粘稠糖漿狀的uv-0160，其hplc純度為97.77％

[柱：xselectcshci8(150×4.6mm，3.5μm)；rt7.96min；acn：5mmnh4oac(aq)；1.0ml/min)]，lcms[m+h]⁺452.1。

實(shí)施例40：合成uv-0162

制備4：

甲磺酰中間體3(660mg)、thf(4ml)、n-甲基哌嗪(2ml)在密封管中室溫混合；將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂?0℃并且攪拌4小時。通過tlc觀察到極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用水淬滅并且用etoac(2×50ml)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，并且用無水na2so4干燥，過濾并且減壓濃縮，得到粗物質(zhì)，將粗物質(zhì)通過硅膠柱層析純化[100-200目，用30％的etoac-己烷洗脫]得到400mg黃色粘稠糖漿狀的4。

制備uv-0162：

4(400mg，0.42mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(10ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(2.0ml)混合，在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且攪?6小時。粗lcms顯示出70％的產(chǎn)物形成。減壓除去揮發(fā)物，得到300mg粗物質(zhì)。制備型hplc純化[柱：x-selectcshc-18(250×19mm，5μ)(100mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4hco3；t/b％：0.1/90、2/90、8/70、20/40、30/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到60mguv-0162，其hplc純度為99.42％(柱：atlantist3(150×4.6mm，3.0μm)；rt7.20mm；acn：5mmnh4oac(aq)；1.0ml/min)]，lcms[m+h]⁺496.2。

實(shí)施例41：合成uv-0163

制備4：

在室溫下，向甲磺酰中間體3(600mg)的thf(20ml)溶液中加入哌啶(2ml)；將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸升溫至60℃并且攪拌3小時。3小時后，通過tlc監(jiān)測到原料完全消耗并且觀察到新的極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用冰水稀釋并且用etoac(2×20ml)萃取。經(jīng)na2so4干燥合并的有機(jī)層，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物。通過使用10％etoac-己烷洗脫的硅膠(100-200)快速柱層析純化所得粗物質(zhì)，得到300mg黃色粘稠糖漿狀的4。

制備uv-0163：

4(300mg，0.32mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(2.0ml)混合，在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且攪?6小時。粗lcms顯示出87％的產(chǎn)物形成。減壓除去揮發(fā)物，得到250mg粗物質(zhì)。制備型hplc純化[柱：ymcactusc-18(250×20mm，5μ)(75mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4hco3；t/b％：0.1/95、2/95、8/70、25/35、30/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到35mguv-0163，其hplc純度為99.18％[柱：xselectcshc18(150×4.6mm，3.5μm)；rt7.97min；acn：5mmnh4oac(aq)；1.0ml/min)]，lcms[m+h]⁺481.1。

實(shí)施例42：合成uv-0165

制備4：

在室溫下，向甲磺酰中間體3(600mg)的thf(20ml)溶液中加入吡咯烷(2ml)；將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸升溫至60℃并且攪拌3小時。通過tlc監(jiān)測到原料完全消耗并且觀察到新的極性產(chǎn)物。將反應(yīng)物用冰水稀釋并且用etoac(2×20ml)萃取。經(jīng)na2so4干燥合并的有機(jī)層，過濾并且減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物。通過使用10％etoac-己烷洗脫的硅膠(100-200)快速柱層析純化所得粗物質(zhì)，得到320mg黃色粘稠糖漿狀的4。

制備uv-0165：

向4(320mg，0.34mmol)的1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)溶液中加入4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(2.0ml)，在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并且攪?6小時。粗lcms顯示出78％的所需物質(zhì)。減壓除去揮發(fā)物，得到300mg粗物質(zhì)。制備型hplc純化[柱：ymcactusc-18(250×20mm，5μ)(75mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4hco3；t/b％：0.1/95、2/95、8/70、25/35、30/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到35mguv-0165，其hplc純度為98.22％[柱：xselectcshc18(150×4.6mm，3.5μm)；rt7.25min；acn：5mmnh4oac(aq)；1.0ml/min)]；lcms[m+h]⁺467.1。

實(shí)施例43：合成uv-0168

制備2：

在室溫下，向int-b(參見上文，1.2g，1.66mmol)的1,4-二氧雜環(huán)己烷(20ml)溶液中加入tea(10ml)、1(0.8當(dāng)量)；將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸加熱至80℃，再攪拌16小時。16小時后，通過tlc觀察到非極性產(chǎn)物。用水淬滅反應(yīng)，并用etoac(2×50ml)進(jìn)行萃取。將合并的有機(jī)層用水洗滌，并用無水na2so4干燥，然后過濾并減壓濃縮，得到粗材料，將該粗材料通過硅膠柱層析純化[使用100-200目，用20％etoac-己烷洗脫]，得到600mg黃色粘稠糖漿狀的2。

制備3：

在0℃下向2(600mg，0.68mmol)的dcm(15ml)溶液中加入tea(3.0當(dāng)量)、mscl(1.2當(dāng)量)并保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸加熱至室溫，再攪拌2小時。2小時后，原料完全消耗，通過tlc觀察到新的非極性產(chǎn)物。用冰水稀釋反應(yīng)，并用dcm(2×20ml)進(jìn)行萃取。將有機(jī)層用na2so4干燥、過濾并減壓濃縮，得到700mg黃色粘稠糖漿狀的3，其無需純化即可用于下一反應(yīng)中。

制備4：

在室溫下，向3(700mg，粗產(chǎn)物)的thf(5ml)溶液中加入n,n-二甲胺(3ml，1m的thf溶液)；將所得反應(yīng)混合物在密封管中用10分鐘時間逐漸加熱至60℃，再攪拌3小時。原料完全消耗，通過tlc觀察到一種新的極性產(chǎn)物。用冰水稀釋反應(yīng)，并用etoac(2×20ml)進(jìn)行萃取。將合并的有機(jī)層用na2so4干燥，然后過濾并減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物。將所得粗產(chǎn)物通過硅膠(100-200)快速柱層析，用20％etoac-己烷洗脫純化，得到400mg黃色粘稠糖漿狀的4。

制備uv-0168：

在0℃下向4(400mg，0.42mmol)的1,4-二氧雜環(huán)己烷(6ml)溶液中加入4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(4.0ml)并保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸加熱至室溫，再攪拌16小時。lcms顯示出81％的所需物質(zhì)。減壓去除揮發(fā)物，得到300mg粗材料。制備型hplc純化[x-selectcshc-18(250×19mm，5μ)(75mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4hco3；t/b％：0.1/95、2/95、8/75、22/35、28/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]得到50mguv-0168，通過hplc測得純度為97.930％[色譜柱：xselectcshc18(150×4.6mm，3.5μm)；rt8.17min；acn：5mmnh4oac(水溶液)；1.0ml/min]，[m+h]⁺441.1，463.1[m+na]⁺基峰。

實(shí)施例44：合成uv-0246

制備4：

在室溫下向密封管中加入甲磺酰中間體3(660mg)的thf(4ml)溶液、1,3-噁唑烷.hcl(1.2當(dāng)量)、dipea(2ml)；將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸加熱至60℃，再攪拌4小時。4小時后，通過tlc觀察到一個極性點(diǎn)以及其它非極性雜質(zhì)。用水淬滅反應(yīng)物質(zhì)，并用etoac(2×50ml)進(jìn)行萃取。將合并的有機(jī)層用水洗滌，并用無水na2so4干燥，然后過濾并減壓濃縮，得到粗材料，將該粗材料通過硅膠柱層析純化[使用100-200目，用30％etoac-己烷洗脫]，得到150mg黃色粘稠糖漿狀的4。制備uv-0246：

將4(150mg，0.16mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(2.0ml)在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸加熱至室溫，再攪拌16小時。16小時后，粗產(chǎn)物lcms顯示出80％的產(chǎn)物形成。減壓去除揮發(fā)物，得到125mg粗材料。制備型hplc純化[色譜柱：x-selectcshc-18(250×19mm，5μ)(100mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4hco3；t/b％：0.1/95、2/95、10/70、20/35、25/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到約20mguv-0246，通過hplc測得純度為98.17％，通過lcms得到[m+h]+457.1。

實(shí)施例45：合成uv-0178

制備4：

在室溫下向密封管中加入3(660mg粗產(chǎn)物)、thf(4ml)、1,2-噁唑烷.hcl(1.2當(dāng)量)、dipea(2ml)；將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸加熱至60℃，再攪拌4小時。通過tlc觀察到極性產(chǎn)物點(diǎn)。用水淬滅反應(yīng)，并用etoac(2×50ml)進(jìn)行萃取。將合并的有機(jī)層用水洗滌并用無水na2so4干燥，然后過濾并減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物。

將所得粗產(chǎn)物通過硅膠柱層析純化[使用100-200目，用30％etoac-己烷洗脫]，得到250mg黃色粘稠糖漿狀的4。

制備uv-0178：

將4(250mg，0.26mmol)的1,4-二氧雜環(huán)己烷(10ml)溶液、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(2.0ml)在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸加熱至室溫，再進(jìn)行攪拌。16小時后，粗產(chǎn)物lcms顯示出88％的產(chǎn)物形成。減壓去除揮發(fā)物，得到200mg粗材料。制備型hplc純化[色譜柱：x-selectcshc-18(250×19mm，5μ)(100mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4hco3；t/b％：0.1/90、2/90、8/70、20/30、30/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到20mguv-0178，通過hplc測得純度為99.45％[色譜柱：atlantist3(150×4.6mm，3.0μm)；rt7.81mm；acn：5mmnh4oac(水溶液)；1.0ml/min]，通過lcms得到[m+h]⁺469.1。

實(shí)施例46：合成uv-0183

制備3：

在室溫下加入int-c(參見上文，800mg，粗產(chǎn)物)、etoh：甲苯：水(1:1:1，20ml)、2(1.5當(dāng)量)；將反應(yīng)混合物在室溫下用氬氣吹掃30分鐘；在室溫下加入na2co3(3.0當(dāng)量)、pd(dppf)2cl2(0.1當(dāng)量)，并再次用氬氣吹掃30分鐘，將反應(yīng)混合物加熱至60℃并攪拌4小時。通過tlc觀察到一種主要的極性產(chǎn)物。用水淬滅反應(yīng)，并用etoac(2×30ml)進(jìn)行萃取。將合并的有機(jī)層用水洗滌，并用無水na2so4干燥，然后過濾并減壓濃縮，得到粗材料，將該粗材料通過硅膠柱層析純化[100-200目，用10％etoac-己烷洗脫]，得到500mg黃色粘稠糖漿狀的3。

制備uv-0183：

將3(500mg，0.54mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(8ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(5.0ml)在0℃下保持10分鐘；用10分鐘時間逐漸加熱至室溫，再攪拌16小時。lcms顯示出80％的所需物質(zhì)。減壓去除揮發(fā)物，得到350mg粗材料。制備型hplc純化[色譜柱：x-selectcshc-18(250×19mm，5μ)(100mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4hco3；t/b％：0.1/95、2/95、8/75、22/35、28/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)]，得到50mguv-0183，通過hplc測得純度為95.765％(色譜柱：xselectcshc18(150×4.6mm，3.5μm)；rt8.60min；acn：5mmnh4oac(水溶液)；1.0ml/min)]，[m+h]⁺461.1，[m+na]⁺483.1基峰。

實(shí)施例47：合成uv-0241

制備2：

加入常用int-c(800mg，0.82mmol)、etoh：甲苯：水(1:1:1，20ml)、1(3-溴噠嗪，1.0當(dāng)量)，并且在室溫下用氬氣吹掃30分鐘；在室溫下加入na2co3(3.0當(dāng)量)、pd(dppf)2cl2(0.1當(dāng)量)，在室溫下在氬氣下脫氣30分鐘，將所得反應(yīng)混合物用10分鐘時間逐漸加熱至60℃，再攪拌4小時。通過tlc觀察到一個極性產(chǎn)物點(diǎn)。用水淬滅反應(yīng)物質(zhì)，并用etoac(2×30ml)進(jìn)行萃取。將合并的有機(jī)層用水洗滌，并用無水na2so4干燥，然后過濾并減壓濃縮，得到粗材料，將該粗材料通過硅膠柱層析純化[使用100-200目，用30％etoac-己烷洗脫]，得到300mg黃色粘稠糖漿狀的2。

制備uv-0241：

將2(300mg，0.32mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(3.0ml)在0℃下保持20分鐘，用15分鐘時間逐漸加熱至室溫，再攪拌16小時。通過tlc監(jiān)測反應(yīng)。lcms顯示出81％的產(chǎn)物形成。減壓去除揮發(fā)物，得到130mg粗材料。hplc純化(色譜柱：x-selectcshc-18(250×19mm，5μ)(130mg負(fù)載；ch3cn：5mmnh4hco3；t/b％：0.1/90、2/90、10/70、20/35、25/10、35/10；作為流動相；流量：15ml/min)，得到25mg棕褐色固體狀的uv-0241，通過hplc測得純度為97.16％(色譜柱：x-selectcshc-18(150×4.6mm，3.5μm)；rt7.85min；acn:nh4oac；1.0ml/min)，通過lcms得到[m+h]+462.1。

實(shí)施例48：合成uv-0243

制備2：

在室溫下加入常用int-c(800mg，0.82mmol)、etoh：甲苯：水(1:1:1，20ml)、1(1.0當(dāng)量)；將反應(yīng)混合物在室溫下用氬氣吹掃30分鐘；加入na2co3(3.0當(dāng)量)、pd(dppf)2cl2(0.1當(dāng)量)并用氬氣再次吹掃30分鐘；用10分鐘時間逐漸加熱至60℃，再攪拌4小時。通過tlc觀察到極性點(diǎn)。用水淬滅反應(yīng)混合物，并用etoac(2×30ml)進(jìn)行萃取。將合并的有機(jī)層用水洗滌，并用無水na2so4干燥，然后過濾并減壓濃縮，得到粗材料，將該粗材料通過硅膠柱層析純化[使用100-200目，用30％etoac-己烷洗脫]，得到320mg黃色粘稠糖漿狀的2。

制備uv-0243：

向2(320mg，0.34mmol)的1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)溶液中加入4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(3.2ml)，在0℃下保持20分鐘；用20分鐘時間逐漸加熱至室溫，再攪拌16小時。通過tlc監(jiān)測反應(yīng)。lcms顯示出93％的產(chǎn)物形成。減壓去除揮發(fā)物，得到150mg粗材料，將其用二乙醚(2×50ml)研磨并干燥，得到50mguv-0243。研磨前的hplc純度(色譜柱：x-selectcshc-18(150×4.6mm，3.5μm)；rt8.19min；acn:5mmnh4hco3；1.0ml/min)為93.49％，通過lcms得到[m+h]+461.2。

實(shí)施例49：合成uv-0244

制備1：

在室溫下，向int-c(800mg，0.82mmol)在etoh：甲苯：水(1:1:1，20ml)中的攪拌溶液中加入4-溴吡啶(1.0當(dāng)量)，將反應(yīng)混合物在室溫下用氬氣吹掃30分鐘；加入na2co3(3.0當(dāng)量)、pd(dppf)2cl2(0.1當(dāng)量)并用氬氣再次吹掃30分鐘；用10分鐘時間逐漸加熱至60℃，再攪拌4小時。通過tlc觀察到一個極性產(chǎn)物。用水淬滅反應(yīng)物質(zhì)，并用etoac(2×30ml)進(jìn)行萃取。將合并的有機(jī)層用水洗滌，并用無水na2so4干燥，然后過濾并減壓濃縮，得到粗材料，將該粗材料通過硅膠柱層析純化[使用100-200目，用30％etoac-己烷洗脫]，得到300mg黃色粘稠糖漿狀的1。

制備uv-0244：

向1(300mg，0.32mmol)在1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)中的攪拌溶液中加入4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(3.0ml)，在0℃下于氬氣氣氛中保持20分鐘；用20分鐘時間逐漸加熱至室溫，再攪拌16小時。通過tlc監(jiān)測反應(yīng)。lcms顯示出95％的產(chǎn)物形成。減壓去除揮發(fā)物，得到150mg粗材料，將其用二乙醚(2×50ml)研磨并干燥，得到50mguv-0244。研磨前hplc純度(色譜柱：x-selectcshc-18(150^×4.6mm，3.5μm)；rt8.12min；acn:5mmnh4hco3；1.0ml/min)為95.08％，通過lcms得到[m+h]+461.2。

實(shí)施例50：合成uv-0098

制備2：

將int-a(由如上所述的羥基前體制備，500mg，0.69mmol)、meoh(15ml)、3h-苯并咪唑-5-基胺(0.8當(dāng)量)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)在室溫下反應(yīng)。16小時后，原料被消耗，通過tlc觀察到一個主要非極性產(chǎn)物點(diǎn)。減壓去除揮發(fā)物，得到粗材料，將其通過硅膠(100-200目)快速柱層析純化(用20％etoac-己烷洗脫)，得到200mg無色粘稠糖漿狀的2。通過類似方法進(jìn)行的另一制備則得到90mg。這些產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化即可用于后續(xù)步驟。

制備uv-0098：

將2(90mg，0.10mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(3ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(1.0ml)在0℃下混合，然后升至室溫。16小時后，lcms顯示出30％的產(chǎn)物形成。減壓去除揮發(fā)物，得到35mg粗產(chǎn)物。用2(200mg)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(10ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(3.0ml)進(jìn)行的另一制備得到150mg粗產(chǎn)物。

通過制備型hplc純化組合批次得到15mg白色固體狀的uv-0098，通過hplc測得其純度為96.18％，通過lcms得到[m+h]+379.4。

實(shí)施例51：合成uv-0099

制備2：

將1(1.0g，6.13mmol)、dcm(30ml)、dmap(催化劑)、tea(3當(dāng)量)、(boc)2o(1.2當(dāng)量)在室溫下反應(yīng)。16小時后，通過tlc觀察到非極性產(chǎn)物。用冰水淬滅反應(yīng)，并用dcm(2×10ml)進(jìn)行萃取。將有機(jī)層用無水na2so4干燥，然后過濾并減壓濃縮，得到粗材料，將該粗材料通過硅膠柱層析純化[使用100-200目，用10％etoac-己烷洗脫]，得到1g的2。

制備3：

將2(500mg，1.90mmol)、meoh(15ml)、10％pd/c(200mg)在氫氣氣球壓力下于室溫下進(jìn)行反應(yīng)。6小時后，通過tlc觀察到極性產(chǎn)物。將反應(yīng)體系過濾，并濃縮濾液，得到300mg的3。

制備4：

將int-a(由如上所述的羥基1前體制備，929mg，1.29mmol)、meoh(20ml)、3(0.8當(dāng)量)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)在室溫下反應(yīng)。16小時后，通過tlc觀察到非極性產(chǎn)物。減壓濃縮揮發(fā)物；用水淬滅殘余物，并用etoac(2×30ml)進(jìn)行萃取。將合并的有機(jī)層用水洗滌，并用無水na2so4干燥，然后過濾并減壓濃縮，得到粗材料，將該粗材料通過硅膠柱層析純化[使用100-200目，用10％etoac-己烷洗脫]，得到300mg的4。

制備uv-0099：

將4(300mg，0.32mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(2ml)在0℃下混合，然后升至室溫。16小時后，粗產(chǎn)物lcms顯示出95％的產(chǎn)物形成。減壓去除揮發(fā)物，得到200mg粗材料。通過制備型hplc得到47.3mg棕色粘稠糖漿狀的uv-0099，通過hplc測得其純度為96.87％，通過lcms得到[m+h]+379.1。

實(shí)施例52：合成uv-0100

制備2：

將int-a(由羥基前體制備，1.2當(dāng)量)、meoh(5ml)、1h-吲唑-5-胺(0.03g，0.22mmol)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)在室溫下反應(yīng)。16小時后，原料被消耗，通過tlc觀察到一個主要非極性產(chǎn)物。減壓去除揮發(fā)物，得到粗材料，將其通過硅膠(100-200目)快速柱層析純化(用20％etoac-己烷洗脫)，得到80mg無色粘稠糖漿狀的2。

制備uv-0100：

將2(80mg，0.09mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(3ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(1.0ml)在0℃下混合，然后升至室溫。16小時后，lcms顯示出75％的產(chǎn)物形成。減壓去除揮發(fā)物。通過制備型hplc得到25.0mg白色固體狀的uv-0100，通過hplc測得其純度為97.52％，通過lcms得到[m+h]+379.5。

實(shí)施例53：合成uv-0101

制備2：

將1(1.0g，6.17mmol)、dcm(30ml)、dmap(催化劑)、tea(3當(dāng)量)、(boc)2o(1.2當(dāng)量)在室溫下反應(yīng)。16小時后，通過tlc觀察到非極性產(chǎn)物。用冰水淬滅反應(yīng)，并用dcm(2×10ml)進(jìn)行萃取。將有機(jī)層用無水na2so4干燥，然后過濾并減壓濃縮，得到粗材料，將該粗材料通過硅膠柱層析純化[使用100-200目，用10％etoac-己烷洗脫]，得到1g的2。

制備3：

將2(100mg，0.38mmol)、etoh:h2o(1:1，5ml)、fe粉(3當(dāng)量)、nh4cl(5當(dāng)量)在室溫下混合，然后升至80℃。2小時后，通過tlc觀察到極性產(chǎn)物。用冰水淬滅反應(yīng)，并用etoac(2×10ml)進(jìn)行萃取。將有機(jī)層用無水na2so4干燥，然后過濾并減壓濃縮，得到粗材料，將該粗材料通過硅膠柱層析純化[使用100-200目，用15％etoac-己烷洗脫]，得到50mg的3。用500mg的2再次制備得到250mg的3。

制備4：

將int-a(929mg，1.29mmol)、meoh(20ml)、3(0.8當(dāng)量)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)在室溫下反應(yīng)。16小時后，通過tlc觀察到非極性產(chǎn)物點(diǎn)。減壓濃縮揮發(fā)物。用水淬滅殘余物，并用etoac(2×50ml)進(jìn)行萃取。將合并的有機(jī)層用水洗滌，并用無水na2so4干燥，然后過濾并減壓濃縮，得到粗材料，將該粗材料通過硅膠柱層析純化[使用100-200目，用10％etoac-己烷洗脫]，得到220mg的4。

制備uv-0101：

將4(220mg，0.23mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(4ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(2ml)在0℃下混合，然后升至室溫。16小時后，粗產(chǎn)物lcms顯示出85％的產(chǎn)物形成。減壓去除揮發(fā)物，得到200mg粗材料。通過制備型hplc得到12.0mg棕色糖漿狀的uv-0101，通過hplc測得其純度為97.20％，通過lcms得到[m+h]+378.3。

實(shí)施例54：合成uv-0102

制備6：

將int-b(如方案中的4所示，根據(jù)所述進(jìn)行制備，100mg，0.13mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)、tea(1.0ml)、5(1.0當(dāng)量)在室溫下混合，并將溫度升至90℃。24小時后，通過tlc觀察到極性產(chǎn)物。用冰水稀釋反應(yīng)，并用etoac(2×10ml)進(jìn)行萃取。將合并有機(jī)層用na2so4干燥，然后過濾并減壓濃縮，得到50mg(粗產(chǎn)物)無色粘稠糖漿狀的6。用300mg的4(int-b，0.39mmol)再次制備得到300mg的6。合并產(chǎn)物，通過制備型hplc得到130mg的6。

制備uv-0102：

將2(130mg，0.15mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(5ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(1.3ml)在0℃下混合，然后升至室溫。16小時后，粗產(chǎn)物lcms顯示出85％的產(chǎn)物形成。減壓去除揮發(fā)物，得到90mg粗材料，將其通過制備型hplc純化得到23.2mg白色固體狀的uv-0102，通過hplc測得純度為99.42％，通過lcms得到[m+h]+381.4。

實(shí)施例55：合成uv-0104

制備1：

將int-a(300mg，0.41mmol)、meoh(10ml)、6-苯并惡唑胺(0.8當(dāng)量)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)在室溫下反應(yīng)。16小時后，原料被消耗，通過tlc觀察到一個主要非極性產(chǎn)物。減壓去除揮發(fā)物，得到粗材料，將其通過硅膠(100-200目)快速柱層析純化(用20％etoac-己烷洗脫)，得到200mg(42％收率)無色粘稠糖漿狀的1。用1.2gint-a進(jìn)行的另一制備得到800mg無色粘稠糖漿狀的1。

制備uv-0104：

將1(100mg，0.10mmol)、thf(10ml)、csf(5.0當(dāng)量)、tbaf(催化劑)在0℃下混合，然后升至室溫。16小時后，原料被消耗，通過tlc觀察到極性產(chǎn)物點(diǎn)。lcms顯示出32％的產(chǎn)物形成。減壓去除揮發(fā)物，得到粗材料。用200mg的1(0.20mmol)進(jìn)行另一制備。將產(chǎn)物合并，通過制備型hplc純化，隨后重復(fù)凍干，得到12.5mg無色粘稠糖漿狀的uv-0104，含有約4.5％nh4oac。通過hplc測得純度為98.09％，通過lcms得到[m+h]+380.4。

實(shí)施例56：合成uv-0105

制備2：

將9h-嘌呤-2-胺(120mg，0.92mmol)、int-a(1.2當(dāng)量)、meoh(20ml)、acoh(催化劑)、nacnbh3(1.5當(dāng)量)在室溫下反應(yīng)。16小時后，原料被消耗，通過tlc觀察到一個主要非極性產(chǎn)物。減壓去除揮發(fā)物，得到粗材料，將其通過柱層析純化[使用00-200目，用100％etoac洗脫]，得到150mg無色粘稠糖漿狀的2。

制備uv-0105：

將2(150mg，0.16mmol)、1,4-二氧雜環(huán)己烷(3ml)、4mhcl的1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液(1.5ml)在0℃下混合，然后升至室溫。16小時后，原料消耗，通過tlc觀察到一個極性產(chǎn)物點(diǎn)。lcms顯示出32％的產(chǎn)物形成。減壓去除揮發(fā)物，得到100mg粗材料，通過制備型hplc純化得到8.1mg無色粘稠糖漿狀的uv-0105，通過hplc測得純度為95.12％，通過lcms得到[m-h]-379.2。

實(shí)施例57：細(xì)胞毒性和體外抗病毒活性

細(xì)胞毒性：為了確定化合物在vero細(xì)胞中的細(xì)胞毒性，使用celltiter-glo發(fā)光細(xì)胞活力測定(普洛麥格公司(promega))。在6-8個濃度下對化合物進(jìn)行三次重復(fù)測試。對照條件包括僅經(jīng)過媒介物處理的細(xì)胞(設(shè)定位100％存活細(xì)胞)、dmso-殺死的細(xì)胞(作為細(xì)胞死亡誘導(dǎo)對照)以及無細(xì)胞(對應(yīng)于0％存活細(xì)胞)。在培養(yǎng)3-5天后，通過每個樣品中相對光單位(rlu)的變化/減少來反映atp的存在量(指示代謝活性細(xì)胞)，從而測量細(xì)胞毒性?；诮?jīng)化合物處理的樣品的rlu，使用僅媒介物對照作為100％存活率并且使用無細(xì)胞作為0％存活率，來計算50％細(xì)胞的細(xì)胞毒性(cc50)值。

體外抗病毒活性：為了測試化合物減少病毒復(fù)制的能力，進(jìn)行病毒產(chǎn)量測定，并且從病毒感染的vero細(xì)胞產(chǎn)生的上清液樣品用不同濃度的每個小分子孵育，隨后通過標(biāo)準(zhǔn)噬菌斑計算。針對登革熱病毒(denv2血清型，新幾內(nèi)亞c菌株)或委內(nèi)瑞蘭馬腦炎病毒(veevtc-83菌株)，以6種濃度測試化合物。該測定用于確定在預(yù)定濃度的化合物存在下生長后病毒滴度的降低。在產(chǎn)量測定中，測試的濃度從125μm開始，兩倍稀釋，并且每個濃度一式兩份地進(jìn)行測試。在感染前1小時向細(xì)胞中加入化合物稀釋液，將病毒加入單層，感染3至5天(分別為veev和denv)。培養(yǎng)期后，收集上清液并澄清細(xì)胞碎片，隨后使用噬菌斑測定分析病毒含量。在用于測定滴度的噬菌斑測定中，將vero細(xì)胞接種到24孔板中并使其粘附過夜。第二天，將來自產(chǎn)量降低測定的每個收獲的上清液連續(xù)稀釋10倍，除去生長培養(yǎng)基，用稀釋的上清液感染細(xì)胞1小時。對于veev測定，1小時后除去接種物并加入1％低熔點(diǎn)瓊脂糖。2天后，固定細(xì)胞，并用結(jié)晶紫染色。噬菌斑呈現(xiàn)為紫色細(xì)胞層中的清晰斑點(diǎn)或淺紫色細(xì)胞層上的深紫色斑點(diǎn)。對噬菌斑進(jìn)行計數(shù)，并測定ic50。對于denv測定，感染后，加入0.8％甲基纖維素而不除去接種物。將板孵育四天，固定細(xì)胞，并在乙醇和甲醇的80％/20％(v/v)混合物中進(jìn)行透化處理。加入denve特異性抗體(得自atcc的單克隆抗體4g2)并保持1小時。洗滌后，加入hrp綴合的山羊抗小鼠抗體并保持1小時。用不溶性過氧化物酶底物(trueblue)顯現(xiàn)病毒感染的病灶，對噬菌斑進(jìn)行計數(shù)，并計算ic50。基于與野生型滴度(無化合物對照)相比的病毒產(chǎn)量減少百分比，使用4pl曲線生成50％抑制濃度(ic50)，并且使用xlfit方程205進(jìn)行計算。

表3顯示了細(xì)胞毒性和體外抗病毒活性(針對登革熱和委內(nèi)瑞蘭馬腦炎病毒)結(jié)果。

實(shí)施例58：類藥性

美國華盛頓和法國的克雷普公司(cerep,washingtonusa,andfrance)使用標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行體外試驗(yàn)，測定類藥性(溶解度、微粒體穩(wěn)定性、血漿蛋白結(jié)合、a-b外排、細(xì)胞色素cyp4503a4，herg結(jié)合和ames)。在線提供測定方案，網(wǎng)址為

http://www.cerep.fr/cerep/users/pages/catalog/profiles/catalog.asp，并使用cerep標(biāo)準(zhǔn)程序和濃度進(jìn)行所有測定。

uv-0060的體內(nèi)藥代動力學(xué)參數(shù)和口服生物利用度由中國臺灣的歐陸公司(eurofins,cereppanlabs,taiwan)測定。使用雄性sprague-dawley大鼠進(jìn)行口服和靜脈內(nèi)施用后的藥代動力學(xué)研究。將試驗(yàn)制品配制在2％dmso/0.9％nacl中，并且以10mg/kg口服(po)并且以5mg/kg靜脈內(nèi)(iv)施用于多個3只大鼠組。給藥體積為：po為10ml/kg，iv為5ml/kg。使用體重220±20g的大鼠。在靜脈內(nèi)注射后3、10、30、60、120、240、360、720和1440分鐘時以及在口服施用后10、30、60、120、240、360、720和1440分鐘時收獲血樣。將血液收集在涂有肝素鋰的管中，輕輕混合，然后保存在冰上，并且在收集后1小時內(nèi)在4℃以2,500xg離心15分鐘。收獲血漿，并且冷凍于-80℃，直到進(jìn)一步處理。使用奧昔布寧作為內(nèi)標(biāo)，生成3ng/ml至10000ng/ml的血漿校準(zhǔn)曲線。在不含藥物的血漿的等分試樣中以指定的濃度水平加入測試化合物。通過乙腈沉淀處理血漿樣品，并通過hplc/ms/ms進(jìn)行分析。使用相同的程序?qū)⒓铀幍难獫{樣品與未知血漿樣品一起處理。執(zhí)行hplc/ms/ms分析，采用電噴霧電離，以正離子模式進(jìn)行多反應(yīng)監(jiān)測。hplc色譜柱為agilentporoshell120ec-cis柱，2.7μm(3.0×50mm，23℃)，具有乙腈/水/甲酸流動相梯度。以1/x2加權(quán)線性擬合標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)。

表4顯示了uv-5和uv-0060的類藥性測定結(jié)果。

表4：

表5顯示了嚙齒類物種的體內(nèi)adme參數(shù)的結(jié)果。

表5：

雖然前述內(nèi)容是指具體的優(yōu)選實(shí)施方案，但應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明不限于此。本領(lǐng)域的技術(shù)人員將會想到，可以對所公開的實(shí)施方案進(jìn)行各種修改，并且這些修改旨在包含在本發(fā)明的范圍內(nèi)。

本說明書中引用的所有出版物、專利申請和專利的全文以引用方式并入本文。