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一種基于腺病毒載體表達(dá)全長(zhǎng)西妥昔單抗治療腫瘤的方法與流程

文檔序號(hào):12346456閱讀:來源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種表達(dá)全長(zhǎng)西妥昔單克隆抗體的方法,其特征在于,所述方法包括:應(yīng)用腺病毒表達(dá)全長(zhǎng)西妥昔單克隆抗體。

2.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,由腺病毒載體來形成所述的腺病毒,所述的腺病毒載體中包含表達(dá)西妥昔單克隆抗體的元件。

3.如權(quán)利要求2所述的方法,其特征在于,形成所述腺病毒的腺病毒載體以E1和E3缺失的黑猩猩型AdC68載體或E1和E3缺失的人Hu5載體作為骨架載體。

4.如權(quán)利要求2或3所述的方法,其特征在于,所述的表達(dá)西妥昔單克隆抗體的元件依次包括:?jiǎn)?dòng)子,信號(hào)肽1編碼序列,西妥昔單克隆抗體重鏈編碼序列,連接序列,信號(hào)肽2編碼序列,西妥昔單克隆抗體輕鏈編碼序列,終止子。

5.如權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,所述的啟動(dòng)子包括:CASI啟動(dòng)子,CMV啟動(dòng)子;較佳地為CASI啟動(dòng)子;或

所述的終止子包括:SV40 PloyA,BGH PloyA;較佳地為SV40 PloyA。

6.如權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,所述的信號(hào)肽1或信號(hào)肽2是分泌信號(hào)肽;較佳地包括:HLA-A*0201信號(hào)肽;較佳地,所述的信號(hào)肽1和信號(hào)肽2相同或不同。

7.如權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,所述的連接序列包括:F2A,2A,IRES;較佳地為F2A。

8.如權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,所述的西妥昔單克隆抗體重鏈編碼序列如SEQ ID NO:1中第1-1356位所示,或所述的西妥昔單克隆抗體 輕鏈編碼序列如SEQ ID NO:1第1357-1998位所示。

9.如權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,形成所述的腺病毒載體以E1和E3缺失的黑猩猩型AdC68載體或人AdHu5載體作為骨架載體,所述的表達(dá)西妥昔單克隆抗體的元件被插入到該載體中被刪除的E1區(qū)域。

10.一種腺病毒表達(dá)載體,其特征在于,該載體以E1和E3缺失的黑猩猩型AdC68載體或人AdHu5載體作為骨架載體;且依次包括以下表達(dá)西妥昔單克隆抗體的元件:?jiǎn)?dòng)子,信號(hào)肽1編碼序列,西妥昔單克隆抗體重鏈編碼序列,連接序列,信號(hào)肽2編碼序列,西妥昔單克隆抗體輕鏈編碼序列,終止子。

11.如權(quán)利要求10所述的腺病毒表達(dá)載體,其特征在于,所述表達(dá)西妥昔單克隆抗體的元件被插入到該載體中被刪除的E1區(qū)域。

12.如權(quán)利要求10所述的腺病毒表達(dá)載體,其特征在于,所述的啟動(dòng)子包括:CASI啟動(dòng)子,CMV啟動(dòng)子;較佳地為CASI啟動(dòng)子;或

所述的終止子包括:SV40 PloyA。

13.如權(quán)利要求10所述的腺病毒表達(dá)載體,其特征在于,所述的信號(hào)肽1或信號(hào)肽2是分泌信號(hào)肽;較佳地包括:HLA-A*0201信號(hào)肽;較佳地,所述的信號(hào)肽1和信號(hào)肽2相同或不同。

14.如權(quán)利要求10所述的腺病毒表達(dá)載體,其特征在于,所述的連接序列包括:F2A,2A,IRES;較佳地為F2A。

15.如權(quán)利要求10所述的腺病毒表達(dá)載體,其特征在于,所述的西妥昔單克隆抗體重鏈編碼序列如SEQ ID NO:1中第1-1356位所示,或所述的西妥昔單克隆抗體輕鏈編碼序列如SEQ ID NO:1第1357-1998位所示。

16.如權(quán)利要求10所述的腺病毒表達(dá)載體,其特征在于,以E1和E3缺失的黑猩猩型AdC68載體作為骨架載體時(shí),所述腺病毒表達(dá)西妥昔單抗的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示;或

以E1和E3缺失的人pHu5載體作為骨架載體時(shí),所述腺病毒表達(dá)西妥昔單抗的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。

17.權(quán)利要求10-16任一所述的腺病毒表達(dá)載體的用途,用于制備腺病毒,所述的腺病毒能表達(dá)全長(zhǎng)西妥昔單克隆抗體。

18.一種腺病毒,其特征在于,所述腺病毒由權(quán)利要求10-16任一所述的腺病毒表達(dá)載體制備而成。

19.權(quán)利要求18所述的腺病毒的用途,用于制備抗腫瘤藥物。

20.一種抗腫瘤藥物,其特征在于,所述抗腫瘤藥物包括:權(quán)利要求18所述的腺病毒,以及藥學(xué)上可接受的載體。

21.一種用于表達(dá)全長(zhǎng)西妥昔單克隆抗體的試劑盒,其特征在于,所述的試劑盒中包括:權(quán)利要求10-16任一所述的腺病毒表達(dá)載體,或權(quán)利要求18所述的腺病毒;或權(quán)利要求19所述的抗腫瘤藥物。

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