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一種酶法水解商陸皂苷甲制備商陸皂苷乙的方法與流程

文檔序號:11809535閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種酶法水解商陸皂苷甲制備商陸皂苷乙的方法,其特征在于按照以下步驟進(jìn)行:

1)取20-50mg的商陸皂苷甲置于反應(yīng)瓶中,按照10:1:0.5的體積比依次加入緩沖液、β-葡萄糖苷酶溶液和激活劑后共孵育,以TLC法監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)行;

2)商陸皂苷乙的制備:將上述轉(zhuǎn)化液于4℃下20000g離心10min,沉淀和上清液用等倍體積乙酸乙酯處理,40-50℃減壓濃縮后溶于等體積甲醇,過制備型色譜柱即得到商陸皂苷乙。

2.如權(quán)利要求1所述的酶法水解商陸皂苷甲制備商陸皂苷乙的方法,其特征在于:所述緩沖液為磷酸鹽緩沖液、乙酸鹽緩沖液或檸檬酸緩沖液,所述激活劑為CaCl2溶液。

3.如權(quán)利要求1所述的酶法水解商陸皂苷甲制備商陸皂苷乙的方法,其特征在于:β-葡萄糖苷酶來源于蝸牛酶固體制劑。

4.如權(quán)利要求1所述的酶法水解商陸皂苷甲制備商陸皂苷乙的方法,其特征在于:步驟1)中優(yōu)選條件為:β-葡萄糖苷酶的濃度為5-20mg/ml,底物商陸皂苷甲的濃度為2-5mM,激活劑濃度為10-20mM,所用pH值為5.5-7.0,反應(yīng)溫度為20-40℃,反應(yīng)時(shí)間為1-12h。

5.如權(quán)利要求1所述的酶法水解商陸皂苷甲制備商陸皂苷乙的方法,其特征在于:所述步驟2)中處理沉淀的有機(jī)溶劑為甲醇、乙酸乙酯或二氯甲烷。

6.如權(quán)利要求1所述的酶法水解商陸皂苷甲制備商陸皂苷乙的方法,其特征是:上述酶處理商陸皂苷甲后,使得二糖苷選擇性的轉(zhuǎn)化為單糖苷,在優(yōu)選條件下,轉(zhuǎn)化率達(dá)到98%以上。

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