本發(fā)明屬于醫(yī)藥化工領(lǐng)域，涉及一類新的雙環(huán)取代吡唑酮偶氮類衍生物、其制備方法及用途。例如其在作為血小板生成素(TPO)模擬物用于血小板生成促進劑和/或巨核細胞生成促進劑的用途。
背景技術(shù)：
血小板生成素(TPO)是跨膜信號蛋白龐大家族(總稱細胞因子)中的一員，在血小板生成過程中扮演著重要角色，是巨核細胞增殖、分化、成熟以及血小板產(chǎn)生的最基本的調(diào)控因子(Kuteretal.Proc.NatAcadSciUSA.1994,91:11104)。巨核細胞生成是指血小板釋放進入血液循環(huán)以前的巨核細胞系細胞增殖、分化和成熟的過程。目前已發(fā)現(xiàn)至少有8種細胞因子參與巨核細胞的發(fā)育和成熟，而TPO則作用于巨核細胞發(fā)育和成熟的全過程(KaushanskyK.NEngJMed.1998，10：74)。此外，TPO還可作用于原始造血干細胞，廣泛擴增干細胞的數(shù)量，并加速干細胞進入細胞周期。當(dāng)TPO結(jié)合到其受體C-mpl，TPO啟動下游的信號傳導(dǎo)并引發(fā)巨核細胞的成活、增殖和分化，相似的信號也傳遞到無核的血小板，雖然這種信號不能誘導(dǎo)血小板的成活、增殖和分化，但是卻能加強血小板的止血功能(OdaA，MiyakawaY，DrakevBJ，etat.ThrombosisandHaemostasis.1999，82：377)。研究發(fā)現(xiàn)：TPO在血小板減少的情況下是主要的體液調(diào)節(jié)器。多項動物實驗顯示其能夠增加血小板數(shù)量、血小板大小并能夠增加同位素結(jié)合到血小板中的作用(Metcalf.Nature.1994,369:519)。TPO被認為主要通過以下幾個途徑影響巨核細胞生成：1)引起巨核細胞 大小和數(shù)量的增加；2)增加DNA內(nèi)含物；3)增加巨核細胞的有絲分裂；4)導(dǎo)致巨核細胞成熟的增加；5)在骨髓中以乙酰膽堿酯酶陽性細胞形式導(dǎo)致細胞前體百分比增加。由于血小板具有凝血止血作用，并且當(dāng)其數(shù)量非常低時，患者會有大量出血而死亡的風(fēng)險，所以具有增加血小板數(shù)量和大小作用的TPO成為診斷和治療各種血液疾病以及癌癥或淋巴瘤治療中骨髓移植、放化療導(dǎo)致的血小板減少的治療中為最為有效的基本手段(Harker，CurrOpinHematol.1999，6:127)。為解決患者體內(nèi)血小板減少的嚴重問題，科研工作者長期以來一直在不斷尋找能夠治療血小板減少癥的活性TPO類似物。WO964018、WO9825965等首先公開了具有增加血小板功能的多肽類似物。2008年8月，安進公司開發(fā)的用于治療慢性特發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP)的促血小板生成藥物羅米司亭(Romiplostim，Nplate)在美國上市，該藥物是FDA批準的第一個血小板生成素擬肽藥物，也是第一個用于治療慢性特發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP)的促血小板生成藥物，同樣能升高并維持血小板數(shù)量。2009年初該藥物也在歐洲獲得批準。臨床研究發(fā)現(xiàn)，該藥物具有嚴重的相關(guān)不良反應(yīng)，主要有骨髓網(wǎng)硬蛋白沉積、停用后血小板減少癥惡化。其他用藥風(fēng)險包括由于血小板過度升高而引起血凝塊。另外，如果患者骨髓發(fā)育不良而服用本品，可能引起急性白血病。因此，一些小分子TPO類似物相繼被發(fā)現(xiàn)和公開報道(WO0028987、WO0153267、WO0035446、WO2006064957等)。GSK公司開發(fā)的艾曲波帕是首個獲準治療成人慢性ITP患者的口服非肽類血小板生成素(TPO)受體激動劑，結(jié)合于骨髓巨核細胞上TPO受體的跨膜區(qū)，引起細胞質(zhì)的酪氨酸激酶JAK2和Tyk2的活化，隨后引起信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，促使STAT5、MAPK、PI3K激酶磷酸化，誘導(dǎo)巨核細胞從骨髓祖細胞的增殖和分化，刺激血小板的生成(TerryGernsheimer.ChronicIdiopathicThrombocytopenicPurpura:MechanismsofPathogenesis.TheOncologist,2009,14:14-21)。雖然目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的一些小分子TPO類似物對血小板減少癥的治療做出了很大的貢獻，但仍需要開發(fā)出更多療效更好，副作用更低的TPO類似物，為血小板減少癥的治療提供更多更廣的TPO受體激動劑的思路和選擇。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明意在提供一系列可用作TPO模擬物的小分子，設(shè)計了具有式I所示結(jié)構(gòu)的一系列新的雙環(huán)取代吡唑酮偶氮類化合物并公開了其制備方法。生物活性試驗表明，具有式I結(jié)構(gòu)的雙環(huán)取代吡唑酮偶氮類化合物是更為有效的TPO模擬物和/或具有良好的體內(nèi)藥物動力學(xué)行為。本發(fā)明的一個方面涉及式I所示結(jié)構(gòu)的化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物,其中，R獨立地選自芳基、雜芳基或含1－3個雜原子的3－8元雜環(huán)，其中所述的芳基、雜芳基或雜環(huán)上的氫原子任選被一個或多個選自烷基、鹵素、羥基、四唑基、咪唑、磺酸、羧酸或羧酸酯的取代基所取代；R1－R3各自獨立地選自氫、烷基、鹵素、硝基、氨基、炔基、羥基，且R1和R2，或者R2和R3至少有一組與直接相連的苯環(huán)上的C原 子一起形成4-8元飽和或不飽和脂肪環(huán)、芳環(huán)、雜環(huán)或雜芳環(huán)，所述的雜環(huán)或雜芳環(huán)含有1－4個雜原子，其中所述的雜原子可任意選自N、O、S原子，所述的脂肪環(huán)、芳環(huán)、雜環(huán)、雜芳環(huán)上的氫原子可以進一步被取代基取代，取代基選自羥基、鹵素、氨基、烷基、烷氧基或羧基；R4－R8各自獨立地選自氫、烷基、烷氧基、鹵代烷氧基、鹵代烷基、鹵素、硝基、氨基、炔基、烯基、羥基、羧基、氰基，或者任意相鄰的R4－R8與直接相連的苯環(huán)上的C原子一起形成4－8元飽和或不飽和脂肪環(huán)、芳環(huán)、雜環(huán)或雜芳環(huán)，所述的雜環(huán)或雜芳環(huán)含有1－4個雜原子，其中所述的雜原子可任意選自N、O、S原子，所述的脂肪環(huán)、芳環(huán)、雜環(huán)、雜芳環(huán)上的氫原子可以進一步被取代基取代，取代基選自羥基、鹵素、氨基、烷基、烷氧基或羧基。所述溶劑合物可以為水合物、乙醇合物或丙酮合物等。這些溶劑合物可以通過在相應(yīng)的溶劑中結(jié)晶獲得。根據(jù)本發(fā)明任一項所述的式I化合物，其中所述的式I化合物選自式I(A):其中，R、R1及R4－R8如前所述，n從0－4。根據(jù)本發(fā)明任一項所述的式I化合物，其中所述的式I化合物選自式I(B):其中，R及R3－R8如前所述，n從0－4(例如0、1、2、3、或4)。根據(jù)本發(fā)明任一項所述的式I化合物，其中所述的鹵素選自氟、氯、溴或碘。在一個實施方案中，其中所述的鹵素選自氟。根據(jù)本發(fā)明任一項所述的式I化合物，其中所述的烷基是直鏈或支鏈的烷基基團。根據(jù)本發(fā)明任一項所述的式I化合物，其中所述的烷基選自甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、戊基和己基。在一個實施方案中，其中所述的烷基選自甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基和叔丁基。在一個實施方案中，其中所述的烷基選自甲基。根據(jù)本發(fā)明任一項所述的式I化合物，其選自下面的表1所示的化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物：表1：本發(fā)明的部分具體的化合物本發(fā)明另一方面涉及本發(fā)明式I化合物的制備方法，其包括以下步驟：a)由相應(yīng)的鹵代物與相應(yīng)的硼酸或硼酸酯化合物進行Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)，再經(jīng)還原劑還原得到相應(yīng)的胺(中間體I)：或者或者b)取代苯胺與亞硝酸鈉在酸性溶液中進行重氮化反應(yīng)，再加入氯化亞錫還原得到肼，然后與乙酰乙酸酯類化合物加熱縮合得到中間體II：c)由中間體I與亞硝酸鈉在酸性溶液中進行重氮化反應(yīng)，再與中間體II在堿性溶液中反應(yīng)制得相應(yīng)的化合物：其中，R及R1-R8如前所述；X為鹵素，優(yōu)選Br和I。所述還原劑選自Pd-C/甲酸銨、氯化銨/還原鐵粉、Pd-C/氫氣、SnCl2/濃鹽酸中的一種或多種。所述乙酰乙酸酯類化合物選自乙酰乙酸甲酯、乙酰乙酸乙酯、乙酰乙酸異丙酯、乙酰乙酸叔丁酯、乙酰乙酸-3-戊酯中的一種或多種，優(yōu)選乙酸乙酯甲酯和乙酰乙酸乙酯。所述酸性溶液選自乙酸、硫酸、鹽酸中的一種或多種配制的溶液，在一個實施例中選自鹽酸。所述堿性溶液選自碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、碳酸鈉、碳酸鉀中的一種或多種配制的溶液，在一個實施例中優(yōu)選碳酸氫鈉、碳酸氫鉀。本發(fā)明的再一方面涉及一種藥物組合物，其包含本發(fā)明的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，以及任選的一種或多種藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。本發(fā)明的再一方面涉及一種藥用組合物，其包括有效劑量的本發(fā)明的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，以及任選的一種或多種藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。該藥用組合物可以進一步含有有效量的選自下列的藥物：集落刺激因子、細胞因子、趨化因子、白介素或細胞因子受體激動劑等。該藥物組合物在治療血小板減少癥藥物中的用途。本發(fā)明的再一方面涉及本發(fā)明的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物在制備或作為TPO受體激動劑中的用途。本發(fā)明的再一方面涉及本發(fā)明的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物在制備用于治療和/或預(yù)防和/或輔助治療哺乳動物(包括人)的與血小板減少相關(guān)的疾病或病癥的藥物中的用途；具體地，所述與血小板減少相關(guān)的疾病或病癥是如下疾病，或者由如下疾病導(dǎo)致或引起：特發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP)、化療或放療后的骨髓抑制、器官移植、骨髓移植、肝或干細胞移植、骨髓異常增生綜合征、再生障礙性貧血或白血病。本發(fā)明的再一方面涉及本發(fā)明的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物在作為或者制備促進血小板和/或巨核細胞生成的藥物或試劑中的用途。本發(fā)明的再一方面涉及本發(fā)明的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物在制備止血和/或凝血或者輔助止血和/或凝血的藥物或試劑中的用途。本發(fā)明的再一方面涉及一種在體內(nèi)或體外促進血小板生成或者調(diào)節(jié)血小板水平的方法，包括使用有效量的本發(fā)明任一項所述的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物的步驟。本發(fā)明的再一方面涉及一種在體內(nèi)或體外促進巨核細胞生成或者調(diào)節(jié)巨核細胞水平的方法，包括使用有效量的本發(fā)明任一項所述的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物的步驟。本發(fā)明的再一方面涉及一種治療和/或預(yù)防和/或輔助治療哺乳動物(包括人)的與血小板減少相關(guān)的疾病或病癥的方法，包括使用有效量的本發(fā)明任一項所述的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物的步驟；具體地，所述與血小板減少相關(guān)的疾病或病癥是如下疾病，或者由如下疾病導(dǎo)致或引起：特發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP)、化療或放療后的骨髓抑制、器官移植、骨髓移植、肝或干細胞移植、骨髓異常增生綜合征、再生障礙性貧血或白血病。本發(fā)明的再一方面涉及一種止血或凝血的或者輔助止血和/或凝血的方法，包括使用有效量的本發(fā)明任一項所述的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物的步驟。本發(fā)明任一方面或該方面的任一實施方案所具有的特征同樣適用于其它方面或該其它方面的任一實施方案，只要它們不會相互矛盾，當(dāng)然在相互之間適用時，必要的話可對相應(yīng)特征作適當(dāng)修飾。下面對本發(fā)明作進一步的描述。本發(fā)明所引述的所有文獻，它們的全部內(nèi)容通過引用并入本文，并且如果這些文獻所表達的含義與本發(fā)明不一致時，以本發(fā)明的表述為準。此外，本發(fā)明使用的各種術(shù)語和短語具有本領(lǐng)域技術(shù)人員 公知的一般含義，即便如此，本發(fā)明仍然希望在此對這些術(shù)語和短語作更詳盡的說明和解釋，提及的術(shù)語和短語如有與公知含義不一致的，以本發(fā)明所表述的含義為準。在本發(fā)明的式I化合物中，術(shù)語“鹵素”或“鹵代”是指氟、氯、溴和碘。所述芳基可以是苯基，所述雜環(huán)例如是吡啶環(huán)、呋喃環(huán)、噻唑環(huán)、吡唑環(huán)，所述雜芳環(huán)例如是茚環(huán)、萘環(huán)、苯并呋喃環(huán)、苯并噻吩環(huán)、苯并吡咯環(huán)等。本發(fā)明中所采用的術(shù)語“烷基”、“烯基”和“炔基”具有本領(lǐng)域公知的一般含義，它們是直鏈或支鏈的烴基基團，例如但不限于甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、烯丙基、丙烯基、丙炔基等，并且所述的“烷基”、“烯基”和“炔基”可以統(tǒng)稱為“烴基”或“鏈烴基”。在本發(fā)明合成式I化合物的方法中，反應(yīng)所用的各種原材料是本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)已有知識可以制備得到的，或者是可以通過文獻公知的方法制得的，或者是可以通過商業(yè)購得的。以上反應(yīng)方案中所用的中間體、原材料、試劑、反應(yīng)條件等均可以根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已有知識作適當(dāng)改變的?；蛘?，本領(lǐng)域技術(shù)人員也可以根據(jù)本發(fā)明第二方面方法合成本發(fā)明未具體列舉的其它式I化合物。本發(fā)明的式I化合物可以與其它藥物活性成分組合使用，只要它不產(chǎn)生其他不利作用，例如過敏反應(yīng)。本發(fā)明式I所示的活性化合物可以單獨作為治療藥物使用，或者可以與一種或多種其他具有同類或協(xié)同作用機制的小分子或肽類藥物聯(lián)合使用。聯(lián)合治療通過將各個治療組分同時、順序或隔開給藥來實現(xiàn)。本文所用的術(shù)語“組合物”意指包含指定量的各指定成分的產(chǎn)品，以及直接或間接從指定量的各指定成分的組合產(chǎn)生的任何產(chǎn)品。本發(fā)明的式I化合物可以以衍生自無機酸或有機酸的藥學(xué)上可 接受的鹽的形式使用。術(shù)語“藥學(xué)上可接受的鹽”指在可靠的醫(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)，適合用于與人類和低等動物的組織接觸而不出現(xiàn)過度的毒性、刺激、過敏反應(yīng)等，且與合理的效果/風(fēng)險比相稱的鹽。藥學(xué)上可接受的鹽是本領(lǐng)域公知的。所述鹽可通過使本發(fā)明化合物的酸性官能團與合適的有機堿或無機堿反應(yīng)。在本發(fā)明化合物的最終分離和純化過程中原位制備或者單獨制備。所述的堿例如藥學(xué)上可接受的金屬陽離子的氫氧化物、有機伯胺、仲胺或叔胺等。藥學(xué)上可接受的鹽還包括但不限于基于堿金屬或堿土金屬的陽離子如鋰、鈉、鉀、鈣、鎂和鋁鹽等，以及無毒的季銨和胺陽離子，包括銨、四甲基銨、四乙基銨、甲基銨、二甲基銨、三甲基銨、三乙基銨、二乙基銨和乙基銨等。可改變本發(fā)明藥物組合物中各活性成分的實際劑量水平，以便所得的活性化合物量能有效針對具體患者、組合物和給藥方式得到所需的治療反應(yīng)。劑量水平須根據(jù)具體化合物的活性、給藥途徑、所治療病況的嚴重程度以及待治療患者的病況和既往病史來選定。但是，本領(lǐng)域的做法是，化合物的劑量從低于為得到所需治療效果而要求的水平開始，逐漸增加劑量，直到得到所需的效果。當(dāng)用于上述治療和/或預(yù)防或其他治療和/或預(yù)防時，治療和/或預(yù)防有效量的一種本發(fā)明化合物可以以純形式應(yīng)用，或者以藥學(xué)上可接受的鹽、酯或前藥形式(在存在這些形式的情況下)應(yīng)用?；蛘?，所述化合物可以以含有該目標(biāo)化合物與一種或多種藥物可接受賦形劑的藥物組合物給藥。詞語“治療和/或預(yù)防有效量”的本發(fā)明化合物指以適用于任何醫(yī)學(xué)治療和/或預(yù)防的合理效果/風(fēng)險比治療障礙的足夠量的化合物。但應(yīng)認識到，本發(fā)明化合物和組合物的總?cè)沼昧宽氂芍髟\醫(yī)師在可靠的醫(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)作出決定。對于任何具體的患者，具體的治療有效劑量水平須根據(jù)多種因素而定，所述因素包括所治療的障礙和該障礙的嚴重程度；所采用的具體化合物的活性；所采用的具體組合物；患者的年齡、體重、一般健康 狀況、性別和飲食；所采用的具體化合物的給藥時間、給藥途徑和排泄率；治療持續(xù)時間；與所采用的具體化合物組合使用或同時使用的藥物；及醫(yī)療領(lǐng)域公知的類似因素。例如，本領(lǐng)域的做法是，化合物的劑量從低于為得到所需治療效果而要求的水平開始，逐漸增加劑量，直到得到所需的效果。一般說來，本發(fā)明式I化合物用于哺乳動物特別是人的劑量可以介于0.001～1000mg/kg體重/天，例如介于0.01～100mg/kg體重/天，例如介于0.01～10mg/kg體重/天。運用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉的藥物載體可以制備成含有效劑量的本發(fā)明化合物的藥物組合物。因此本發(fā)明還提供包含與一種或多種無毒藥物可接受載體配制在一起的本發(fā)明化合物的藥物組合物。所述藥物組合物可特別專門配制成以固體或液體形式供口服給藥、供胃腸外注射或供直腸給藥。所述的藥物組合物可配制成許多劑型，便于給藥，例如，口服制劑(如片劑、膠囊劑、溶液或混懸液)；可注射的制劑(如可注射的溶液或混懸液，或者是可注射的干燥粉末，在注射前加入注射水可立即使用)。所述的藥物組合物中載體包括：口服制劑使用的粘合劑(如淀粉，通常是玉米、小麥或米淀粉，明膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮)，稀釋劑(如乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纖維素和/或甘油)，潤滑劑(如二氧化硅、滑石、硬脂酸或其鹽，通常是硬脂酸鎂或硬脂酸鈣，和/或聚乙二醇)，以及如果需要，還含有崩解劑，如淀粉、瓊脂、海藻酸或其鹽，通常是藻酸鈉，和/或泡騰混合物，助溶劑、穩(wěn)定劑、懸浮劑、色素、矯味劑等，可注射的制劑使用的防腐劑、加溶劑、穩(wěn)定劑等；局部制劑用的基質(zhì)、稀釋劑、潤滑劑、防腐劑等。藥物制劑可以經(jīng)口服或胃腸外方式(例如靜脈內(nèi)、皮下、腹膜內(nèi)或局部)給藥，如果某些藥物在胃部條件下是不穩(wěn)定的，可以將其配制成腸衣片劑。更具體地說，本發(fā)明的藥物組合物可通過口服、直腸、胃腸外、 陰道內(nèi)、局部(如通過散劑、軟膏劑或滴劑)、口頰給予人類和其他哺乳動物，或者作為口腔噴霧劑或鼻腔噴霧劑給予。本文所用術(shù)語“胃腸外”指包括靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、腹膜內(nèi)、胸骨內(nèi)、皮下和關(guān)節(jié)內(nèi)注射和輸液的給藥方式。適合于胃腸外注射的組合物可包括生理上可接受的無菌含水或非水溶液劑、分散劑、混懸劑或乳劑，及供重構(gòu)成無菌可注射溶液劑或分散劑的無菌散劑。合適的含水或非水載體、稀釋劑、溶劑或媒介物的實例包括水、乙醇、多元醇(丙二醇、聚乙二醇、甘油等)、植物油(如橄欖油)、可注射有機酯如油酸乙酯及它們的合適混合物。這些組合物也可含有輔料，如防腐劑、濕潤劑、乳化劑和分散劑。通過各種抗細菌劑和抗真菌劑，例如尼泊金酯類、三氯叔丁醇、苯酚、山梨酸等，可確保防止微生物的作用。還包括等滲劑，例如糖類、氯化鈉等。通過使用能延遲吸收的物質(zhì)，例如單硬脂酸鋁和明膠，可達到可注射藥物形式的延長吸收?；鞈覄┲谐钚曰衔锿膺€可含有懸浮劑，例如乙氧基化異十八醇、聚氧乙烯山梨醇和聚氧乙烯失水山梨糖醇酯、微晶纖維素、偏氫氧化鋁、膨潤土、瓊脂和黃蓍膠或者這些物質(zhì)的混合物等。在一些情況下，為延長藥物的作用，期望減慢皮下或肌內(nèi)注射藥物的吸收。這可通過使用水溶性差的晶體或無定形物質(zhì)的液體混懸劑來實現(xiàn)。這樣，藥物的吸收速度取決于其溶解速度，而溶解速度又可取決于晶體大小和晶型。或者，胃腸外給藥的藥物形式的延遲吸收通過將該藥物溶解于或懸浮于油媒介物中來實現(xiàn)?？勺⑸滟A庫制劑形式可通過在生物可降解聚合物如聚丙交酯-聚乙交酯中形成藥物的微膠囊基質(zhì)來制備?？筛鶕?jù)藥物與聚合物之比和所采用的具體聚合物的性質(zhì)，對藥物釋放速度加以控制。其他生物可降解聚合物的實例包括聚原酸酯類和聚酐類?？勺⑸滟A庫制劑也可通過將藥物包埋于能與身體組織相容的脂質(zhì)體或微乳中來 制備?？勺⑸渲苿┛衫缤ㄟ^用濾菌器過濾或通過摻入無菌固體組合物形式的滅菌劑來滅菌，所述固體組合物可在臨用前溶解或分散于無菌水或其他無菌可注射介質(zhì)。本發(fā)明化合物或其組合物可用口服方法或非胃腸道給藥方式?？诜o藥形式可以是片劑、膠囊劑、包衣劑，腸道外用藥制劑有注射劑和栓劑等。這些制劑是按照本領(lǐng)域的技術(shù)人員所熟悉的方法制備的。為了制造片劑、膠囊劑、包衣劑所用的輔料是常規(guī)用的輔料，例如淀粉、明膠、阿拉伯膠，硅石，聚乙二醇，液體劑型所用的溶劑如水、乙醇、丙二醇、植物油(如玉米油、花生油、橄欖油等)。含有本發(fā)明化合物的制劑中還有其它輔料，例如表面活性劑，潤滑劑，崩解劑，防腐劑，矯味劑和色素等。在片劑、膠囊劑、包衣劑、注射劑和栓劑中含有本發(fā)明式I化合物的劑量是以單元劑型中存在的化合物量計算的。在單元劑型中本發(fā)明式I化合物一般含量為0.1－1000mg，優(yōu)選的單元劑型含有1－100mg，更優(yōu)選的單元劑型含有5－20mg。具體地說，本發(fā)明可以提供的供口服給藥的固體劑型包括膠囊劑、片劑、丸劑、散劑和顆粒劑。在此類固體劑型中，活性化合物可與至少一種惰性的藥物可接受賦形劑或載體如檸檬酸鈉或磷酸二鈣和/或以下物質(zhì)混合：a)填充劑或增量劑如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和硅酸；b)粘合劑如羧甲基纖維素、海藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯樹膠；c)保濕劑如甘油；d)崩解劑如瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸鹽和碳酸鈉；e)溶液阻滯劑如石蠟；f)吸收加速劑如季銨化合物；g)濕潤劑如鯨蠟醇和甘油單硬脂酸酯；h)吸附劑如高嶺土和膨潤土以及i)潤滑劑如滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、十二烷基硫酸鈉和它們的混合物。在膠囊劑、片劑和丸劑的情況下，所述劑型中也可包含緩沖劑。相似類型的固體組合物使用賦形劑例如乳糖及高分子量聚乙 二醇等，也可用作軟膠囊和硬膠囊中的填充物。片劑、糖衣丸劑、膠囊劑、丸劑和顆粒劑的固體劑型可與包衣和殼料如腸溶衣材和醫(yī)藥制劑領(lǐng)域公知的其他衣材一起制備。這些固體劑型可任選含有遮光劑，且其組成還可使其只是或優(yōu)先地在腸道的某個部位任選以延遲方式釋放活性成分?？梢允褂玫陌窠M合物的實例包括高分子物質(zhì)和蠟類。如果適合，活性化合物也可與一種或多種上述賦形劑配成微囊形式。供口服給藥的液體劑型包括藥學(xué)上可接受的乳劑、溶液劑、混懸劑、糖漿劑和酏劑。液體劑型除含有活性化合物外還可含有本領(lǐng)域常用的惰性稀釋劑，例如水或其他溶劑，增溶劑和乳化劑例如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、芐醇、苯甲酸芐酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油類(特別是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄欖油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氫糠醇、聚乙二醇和脫水山梨糖醇的脂肪酸酯及它們的混合物?？诜M合物除包含惰性稀釋劑外還可包含輔料，例如濕潤劑、乳化劑和懸浮劑、甜味劑、矯味劑和香味劑。本發(fā)明的化合物及其組合物還考慮用于局部給藥。供局部給予本發(fā)明化合物的劑量形式包括散劑、噴霧劑、軟膏劑和吸入劑。在無菌條件下將活性化合物與藥學(xué)上可接受的載體和任何所需的防腐劑、緩沖劑或推進劑混合。眼用制劑、眼軟膏劑、散劑和溶液劑也被考慮在本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明化合物也可以脂質(zhì)體形式給藥。如本領(lǐng)域所公知，脂質(zhì)體通常用磷脂或其他脂類物質(zhì)制得。脂質(zhì)體由分散于含水介質(zhì)中的單層或多層水化液晶所形成。任何能夠形成脂質(zhì)體的無毒、生理上可接受和可代謝的脂質(zhì)均可使用。脂質(zhì)體形式的本發(fā)明組合物除含有本發(fā)明化合物外，還可含有穩(wěn)定劑、防腐劑、賦形劑等。優(yōu)選的脂類是天然和合成的磷脂和磷脂酰膽堿(卵磷脂)，它們可單獨或者混合使用。形成脂質(zhì)體的方法是本領(lǐng)域公知的。具體實施方式下面將結(jié)合實施例對本發(fā)明的實施方案進行詳細描述。本領(lǐng)域技術(shù)人員將會理解，下面的實施例僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限定本發(fā)明的范圍。實施例中未注明具體技術(shù)或條件者，按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻所描述的技術(shù)或條件(例如參考J.薩姆布魯克等著，黃培堂等譯的《分子克隆實驗指南》，第三版，科學(xué)出版社)或者按照產(chǎn)品說明書進行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市購獲得的常規(guī)產(chǎn)品。在本發(fā)明中，除非另外說明，其中：(i)溫度以攝氏度(℃)表示，操作在室溫或溫度環(huán)境下進行；(ii)有機溶劑用無水硫酸鈉干燥，溶劑的蒸發(fā)用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓蒸發(fā)，浴溫不高于60℃；(iii)反應(yīng)過程用薄層色譜(TLC)或LC-MS跟蹤；(iv)終產(chǎn)物具有滿意的質(zhì)子核磁共振光譜(1H-NMR)和質(zhì)譜(MS)數(shù)據(jù)。實施例1：(Z)-4-(7-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-6-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-5-基)苯甲酸(化合物1)的合成：a.4-(7-硝基-6-甲氧基-2,3-二氫-1氫-茚-5-基)苯甲酸的合成:將6-溴-4-硝基-2,3-二氫-5-茚醇(2.57g，10mmol)、碳酸鉀(1.66g，12mmol)在100ml丙酮中混合均勻，再向其中加入碘甲烷(3.55g，25mmol)，氮氣保護下，避光，40℃反應(yīng)8h，TLC檢測原料點消失，減壓濃縮后，用200ml水稀釋，過濾，濾餅用水洗滌數(shù)次，減壓干燥，定量產(chǎn)率得到6-溴-4-硝基-5-甲氧基-2,3-二氫茚。取6-溴-4-硝基-5-甲氧基-2,3-二氫茚(1.36g，5mmol)、4-羧基苯硼酸頻那醇酯(2.0g，8mmol)在20ml1,4-二氧六環(huán)中混合均勻，加入4ml碳酸鈉水溶液(2mol/L)。氮氣置換3次后，再向其中加入四三苯基膦鈀(0.36g，0.31mmol)，氮氣保護下，105℃加熱回流，反應(yīng)28h，TLC檢測原料反應(yīng)完全。80℃減壓濃縮后，加入100ml鹽酸溶液(3mol/L濃度)，100ml乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯層，無水硫酸鈉干燥，經(jīng)柱層析得4-(6-甲氧基-7-硝基-2,3-二氫-1氫-茚-5-基)苯甲酸(1.06g，產(chǎn)率：68％)。b.4-(7-氨基-6-羥基-2,3-二氫-1氫-茚-5-基)苯甲酸氫溴酸鹽的合成:將4-(6-甲氧基-7-硝基-2,3-二氫-1氫-茚-5-基)苯甲酸(0.63g，2mmol)溶解于100ml乙醇中，加入0.4gPd-C和甲酸銨(1.3g，20mmol)，80℃回流1.5h，TLC檢測原料反應(yīng)完全，降至室溫后過濾，濾液減壓濃縮得目標(biāo)產(chǎn)物4-(7-氨基-6-甲氧基-2,3-二氫-1 氫-茚-5-基)苯甲酸(0.54g，產(chǎn)率96％)。將4-(7-氨基-6-甲氧基-2,3-二氫-1氫-茚-5-基)苯甲酸(0.47g，2mmol)溶解于15ml氫溴酸溶液中(濃度40％)，120℃回流14h，TLC檢測原料反應(yīng)完全，減壓蒸出溶劑得0.53g褐色固體，接轉(zhuǎn)入下步反應(yīng)。c.1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-1氫-吡唑-5(4氫)酮的合成將3,4-二甲基苯胺(12.2g，0.1mol)在50ml濃鹽酸和20ml水中混合均勻,降溫至0℃以下，機械攪拌下，向其中滴加亞硝酸鈉的水溶液(7.6g，0.11mol)，維持反應(yīng)溫度在0℃，繼續(xù)攪拌0.5h，再向其中加入氯化亞錫(56.5g，0.25mol)的濃鹽酸溶液(20ml)，自然升至室溫，TLC監(jiān)測原料反應(yīng)完全。抽濾，濾餅干燥得3,4-二甲基苯肼鹽酸鹽(11.8g)。將3,4-二甲基苯肼鹽酸鹽(8.7g，50mmol)，溶解于100ml冰乙酸中，加入乙酰乙酸乙酯(6.5g，50mmol)和醋酸鈉(4.1g，50mmol)，120℃回流反應(yīng)7h，TLC檢測原料反應(yīng)完全。減壓蒸出冰乙酸，加入100ml水，100ml乙酸乙酯萃取4次，合并乙酸乙酯層并無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮后得1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-1氫-吡唑-5(4氫)酮(8.3g，產(chǎn)率82％)d.(Z)-4-(7-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-6-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-5-基)苯甲酸(化合物1)的合成：將4-(7-氨基-6-羥基-2,3-二氫-1氫-茚-5-基)苯甲酸氫溴酸鹽(0.5g，1.43mmol)溶解于15ml濃鹽酸中，降溫至0℃，向其中緩慢滴加NaNO2(0.11g，1.51mmol)水溶液(10ml)，保溫反應(yīng)0.5h，TLC檢測原料反應(yīng)完全。再向其中加入1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-1氫-吡唑-5(4氫)酮(0.29g,1.43mmol)，反應(yīng)15min，控制反應(yīng)溫度0℃，用飽和碳酸氫鈉調(diào)節(jié)pH值為9左右，加入10ml無水乙醇，自然升至室溫繼續(xù)反應(yīng)24h后，TLC檢測原料反應(yīng)完全，過濾，所得濾餅用40ml鹽酸溶液(濃度2mol/L)洗滌數(shù)次，甲醇打漿，二氯甲烷打漿，抽濾得(Z)-4-(7-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-6-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-5-基)苯甲酸(0.33mg，產(chǎn)率44％)。1H-NMR(600MHz,DMSO-d6,δppm)：13.82(s,1H),12.98(s,1H),9.40(s,1H),8.01(d,2H，J＝8.0Hz),7.70(d,1H，J＝1.2Hz),7.67(d,2H，J＝8.0Hz),7.63(dd,1H)，7.18(d,1H，J＝8.4Hz),7.05(s,1H),3.28(t,2H),2.86(t,2H),2.27(s,3H)，2.25(s,3H),2.21(s,3H),2.08(m,2H)。ESI-MS(m/z):[M+H]+483.3，[M-H]-481.3。實施例2：(Z)-4-(6-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-5-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-4-基)苯甲酸的(化合物2)的合成：與制備化合物1類似的方法，以4-溴-6-硝基-2,3-二氫-5-茚醇為原料，可以得到(Z)-4-(6-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-5-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-4-基)苯甲酸(化合物2)。ESI-MS(m/z):[M+H]+483.3，[M-H]-481.3。實施例3：(Z)-3-(7-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-6-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-5-基)苯甲酸(化合物3)的合成與實施例1中所述類似的制備步驟，以3-羧基苯硼酸為原料，可以得到(Z)-3-(7-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二 氫-吡唑-4-亞基)肼基)-6-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-5-基)苯甲酸(化合物3)。1H-NMR(600MHz,DMSO-d6,δppm)：13.84(s,1H),13.03(s,1H),9.37(s,1H),8.13(s,1H),7.93(d,1H，J＝7.8Hz),7.79(d,1H，J＝7.8Hz),7.71(s,1H),7.68(dd,1H),7.59(t,1H),7.19(d,1H,J＝7.8Hz),7.05(s,1H),3.30(t,2H),2.87(t,2H),2.29(s,3H)，2.26(s,3H),2.22(s,3H),2.09(m,2H)。ESI-MS(m/z):[M+H]+483.2，[M-H]-481.3。實施例4：(Z)-3-(6-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-5-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-4-基)苯甲酸(化合物4)的合成與實施例1中所述類似的制備步驟，以3-羧基苯硼酸和4-溴-6-硝基-2,3-二氫-5-茚醇為原料，可以得到(Z)-3-(6-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-5-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-4-基)苯甲酸(化合物4)。ESI-MS(m/z):[M+H]+483.2，[M-H]-481.3。實施例5：(Z)-5-(7-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-6-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-5-基)-2-氟苯甲酸(化合物5)的合成a.5-(7-硝基-6-甲氧基-2,3-二氫-1氫-茚-5-基)-2-氟苯甲酸的合成:與化合物1中制備4-(7-硝基-6-甲氧基-2,3-二氫-1氫-茚-5-基)苯甲酸類似的方法，以4-氟-3-羧基苯硼酸為原料，可以得到5-(7-硝基-6-甲氧基-2,3-二氫-1氫-茚-5-基)-2-氟苯甲酸。b.5-(7-氨基-6-羥基-2,3-二氫-1氫-茚-5-基)-2-氟-苯甲酸氫溴酸鹽的合成:將5-(7-硝基-6-甲氧基-2,3-二氫-1氫-茚-5-基)-2-氟苯甲酸(1.9g，5.74mmol)溶解于150ml乙醇和50ml水的混合溶液中，加入還原鐵粉(1.54g，27.5mmol)和氯化銨(1.49g，27.8mmol)，80℃回流2.5h，TLC檢測原料反應(yīng)完全，降至室溫后過濾，濾液減壓濃縮得目標(biāo)產(chǎn)物5-(7-氨基-6-甲氧基-2,3-二氫-1氫-茚-5-基)-2-氟-苯甲酸(1.5g，產(chǎn)率92％)。將5-(7-氨基-6-甲氧基-2,3-二氫-1氫-茚-5-基)-2-氟-苯甲酸(0.57g，2mmol)溶解于15ml氫溴酸溶液中(濃度40％)，120℃ 回流14h，TLC檢測原料反應(yīng)完全，減壓蒸出溶劑得0.7g褐色固體，直接進行下步反應(yīng)。c.(Z)-5-(7-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-6-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-5-基)-2-氟苯甲酸：與實施例1中所述類似的制備步驟，以5-(7-氨基-6-羥基-2,3-二氫-1氫-茚-5-基)-2-氟-苯甲酸氫溴酸鹽為原料，可以得到(Z)-5-(7-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-6-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-5-基)-2-氟苯甲酸(化合物5，產(chǎn)率41％)。1H-NMR(600MHz,DMSO-d6,δppm)：13.84(s,1H),13.03(s,1H),9.37(s,1H),8.07(s,1H),7.83(s,1H),7.77(d,1H，J＝7.8Hz),7.60(dd,1H),7.45(s,1H),7.24(t,1H),7.09(s,1H),2.92(t,2H),2.87(t,2H),2.29(s,3H)，2.26(s,3H),2.22(s,3H),2.09(m,2H)。ESI-MS(m/z):[M+H]+501.2，[M-H]-499.3。實施例6：(Z)-5-(6-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-5-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-4-基)-2-氟苯甲酸(化合物6)的合成與實施例1中所述類似的制備步驟，以4-氟-3-羧基苯硼酸和4-溴-6-硝基-2,3-二氫-5-茚醇為原料，可以得到(Z)-5-(6-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡 唑-4-亞基)肼基)-5-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-4-基)-2-氟苯甲酸(化合物6)。ESI-MS(m/z):[M+H]+501.2，[M-H]-499.3。實施例7：(Z)-5-(4-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-3-羥基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-2-氟苯甲酸(化合物7)的合成與實施例1中所述類似的制備步驟，以4-氟-3-羧基苯硼酸和3-溴-1-硝基-5,6,7,8-四氫萘-2-酚為原料，可以得到(Z)-5-(4-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-3-羥基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-2-氟苯甲酸(化合物7)。1H-NMR(600MHz,DMSO-d6,δppm)：13.73(s,1H),13.31(s,1H),8.93(s,1H),7.68(s,1H),7.66(d,1H，J＝8.4Hz),7.62(d,1H，J＝8.4Hz),7.49(Broads,1H),7.42(s,1H),7.40(t,1H),7.18(d,1H,J＝8.4Hz),3.17(m,2H),2.77(t,2H),2.32(s,3H)，2.25(s,3H),2.22(s,3H),1.68(m,2H)，1.60(m,2H)。ESI-MS(m/z):[M+H]+515.3，[2M-H]-1027.0。實施例8：(Z)-5-(3-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-2-羥基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)-2-氟苯甲酸(化合物8)的合成與實施例1中所述類似的制備步驟，以4-氟-3-羧基苯硼酸和1-溴-3-硝基-5,6,7,8-四氫萘-2-酚為原料，可以得到(Z)-5-(3-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-2-羥基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)-2-氟苯甲酸(化合物8)。ESI-MS(m/z):[M+H]+515.3，[M-H]-513.1。實施例9：(Z)-3-(4-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-3-羥基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)苯甲酸(化合物9)的合成:與實施例1中所述類似的制備步驟，以3-羧基苯硼酸和3-溴-1- 硝基-5,6,7,8-四氫萘-2-酚為原料，可以得到(Z)-3-(4-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-3-羥基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)苯甲酸(化合物9)。1H-NMR(600MHz,DMSO-d6,δppm)：13.74(s,1H),13.13(s,1H),8.86(s,1H),7.96(d,1H，J＝7.2Hz),7.76(s,1H),7.68(s,1H),7.62(d,1H，J＝7.2Hz),7.60(d,1H，J＝7.8Hz),7.48(d,1H，J＝7.2Hz),7.43(s,1H),7.18(d,1H,J＝7.8Hz),2.78(t,2H),2.33(s,3H)，2.25(s,3H),2.22(s,3H),2.20(m,2H),1.69(m,2H)，1.60(m,2H)。ESI-MS(m/z):[M+H]+497.3，[M-H]-495.6。實施例10：(Z)-3-(3-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-2-羥基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)苯甲酸(化合物10)的合成與實施例1中所述類似的制備步驟，以3-羧基苯硼酸和1-溴-3-硝基-5,6,7,8-四氫萘-2-酚為原料，可以得到(Z)-3-(3-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-2-羥基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)苯甲酸(化合物10)。ESI-MS(m/z):[M+H]+497.3，[M-H]-495.6。實施例11：(Z)-3-(7-(2-(1-(3-乙炔基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-6-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-5-基)苯甲酸(化合物11)的合成：與實施例1中所述類似的制備步驟，以3-羧基苯硼酸和3-氨基苯乙炔為原料，可以得到(Z)-3-(7-(2-(1-(3-乙炔基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-6-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-5-基)苯甲酸(化合物11)。ESI-MS(m/z):[M+H]+479.2,[M-H]-477.3。實施例12：(Z)-3-(6-(2-(1-(3-乙炔基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-5-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-4-基)苯甲酸(化合物12)的合成：與實施例1中所述類似的制備步驟，以4-溴-6-硝基-2,3-二氫-5-茚醇、3-羧基苯硼酸和3-氨基苯乙炔為原料，可以得到(Z)-3-(6-(2-(1-(3-乙炔基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-5-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-4-基)苯甲酸(化合物 12)。ESI-MS(m/z):[M+H]+479.2,[M-H]-477.3。實施例13：(Z)-3-(7-(2-(1-(2,3-二氫-1-茚滿-5-基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-6-羥基-2,3-二氫-1-茚滿-5-基)苯甲酸(化合物13)：a.3-(7-硝基-6-甲氧基-2,3-二氫-1氫-茚-5-基)苯甲酸的合成:取6-溴-4-硝基-5-甲氧基-2,3-二氫茚(1.36g，5mmol)、3-羧基苯硼酸頻那醇酯(2.0g，8mmol)在20ml1,4-二氧六環(huán)中混合均勻，加入4ml碳酸鈉水溶液(濃度2mol/L)。氮氣置換3次后，再向其中加入四三苯基膦鈀(0.36g，0.31mmol)，氮氣保護下，105℃加熱回流，反應(yīng)28h，TLC檢測原料反應(yīng)完全。80℃減壓濃縮后，加入100ml鹽酸溶液(3N濃度)，100ml乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯層，無水硫酸鈉干燥，柱層析得3-(6-甲氧基-7-硝基-2,3-二氫-1氫-茚-5-基)苯甲酸(1.01g，產(chǎn)率65％)。b.3-(7-氨基-6-羥基-2,3-二氫-1氫-茚-5-基)苯甲酸氫溴酸鹽的合成:與實施例1中類似的方法，從3-(6-甲氧基-7-硝基-2,3-二氫-1氫-茚-5-基)苯甲酸可以定量產(chǎn)率得到3-(7-氨基-6-羥基-2,3-二氫-1氫-茚-5-基)苯甲酸氫溴酸鹽。c.1-(2,3-二氫-1H-茚-5-基)-3-甲基-1氫-吡唑-5(4氫)酮的合成將2,3-二氫-1H-茚-5胺(13.3g，0.1mol)在50ml濃鹽酸和20ml水中混合均勻,降溫至0℃以下，機械攪拌下，向其中滴加亞硝酸鈉的水溶液(7.6g，0.11mol)，維持反應(yīng)溫度在0℃，繼續(xù)攪拌0.5h，再向其中加入氯化亞錫(56.5g，0.25mol)的濃鹽酸溶液(20ml)，自然升至室溫，TLC監(jiān)測原料反應(yīng)完全。抽濾，濾餅干燥得2,3-二氫-1H-茚-5-肼鹽酸鹽(13.0g)。將2,3-二氫-1H-茚-5-肼鹽酸鹽(9.2g，50mmol)，溶解于100ml冰乙酸中，加入乙酰乙酸乙酯(6.5g，50mmol)和醋酸鈉(4.1g，50mmol)，120℃回流反應(yīng)7h，TLC檢測原料反應(yīng)完全。減壓蒸出冰乙酸，加入100ml水，100ml乙酸乙酯萃取4次，乙酸乙酯層無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮后得1-(2,3-二氫-1H-茚-5-基)-3-甲基-1氫-吡唑-5(4氫)酮(8.6g，產(chǎn)率80％)d.(Z)-3-(7-(2-(1-(2,3-二氫-1-茚滿-5-基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-6-羥基-2,3-二氫-1-茚滿-5-基)苯甲酸(化合物13)的合成：與實施例1中類似的方法，以1-(2,3-二氫-1H-茚-5-基)-3-甲基-1氫-吡唑-5(4氫)酮和3-(7-氨基-6-羥基-2,3-二氫-1氫-茚-5-基)苯甲酸氫溴酸鹽為原料可以得到(Z)-3-(7-(2-(1-(2,3-二氫-1-茚滿-5-基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-6-羥基-2,3-二氫-1-茚滿-5-基)苯甲酸(化合物13，產(chǎn)率57％)。1H-NMR(600MHz,DMSO-d6,δppm)：13.84(s,1H),13.32(s,1H),9.36(s,1H),8.12(s,1H),7.93(d,1H，J＝7.8Hz),7.78(s,1H),7.79(d,1H，J＝7.8Hz),7.67(d,1H，J＝8.4Hz),7.59(t,1H),7.27(d，1H，J＝8.4Hz),7.05(s,1H),3.29(t,2H),2.88(m,6H),2.29(s,3H),2.08(m,2H),2.04(m,2H)。ESI-MS(m/z):[M+H]+495.6，[M-H]-493.6。實施例14：(Z)-3-(4-(2-(1-(2,3-二氫-1H-茚-5-基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-3-羥基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)苯甲酸(化合物14)的合成：與化合物13的制備類似的方法，以7-溴-6-甲氧基-5-硝基1,2,3,4-四氫萘為原料，可以得到(Z)-3-(4-(2-(1-(2,3-二氫-1H-茚-5-基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-3-羥基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)苯甲酸(化合物14)。1H-NMR(600MHz,DMSO-d6,δppm)：13.72(s,1H),13.01(s,1H),8.85(s,1H),7.97(d,1H，J＝7.8Hz),7.77(s,1H),7.75(s,1H),7.65(d,1H，J＝8.4Hz),7.60(t,1H),7.48(d,1H，J＝7.8Hz),7.42(s,1H),7.25(s,1H),2.89(t,2H),2.86(t,2H),2.77(m,2H),2.32(s,3H),2.20(m,2H),2.02(m,2H),1.68(m,2H),1.59(m,2H)。ESI-MS(m/z):[M+H]+509.3，[M-H]-507.6。實施例15：(Z)-5-(7-(2-(1-(2,3-二氫-1-茚滿-5-基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-6-羥基-2,3-二氫-1-茚滿-5-基)-2-氟苯甲酸(化合物15)的合成與化合物5的制備類似的方法，以2,3-二氫-1-氫茚-5-胺為原料，可以得到(Z)-5-(7-(2-(1-(2,3-二氫-1-茚滿-5-基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-6-羥基-2,3-二氫-1-茚滿-5-基)-2-氟苯甲酸(化合物15)。1H-NMR(600MHz,DMSO-d6,δppm)：13.82(s,1H),13.32(s,1H),9.37(s,1H),8.02(s,1H),7.76(s,1H),7.68(d,1H，J＝7.2Hz),7.76(s,1H),7.68(s,1H),7.40(m，1H),7.27(m,1H),7.02(s,1H),3.27(m,2H),2.88(m,6H),2.28(s,3H),2.04(m,4H)。ESI-MS(m/z):[M+H]+513.3，[M-H]-511.5。實施例16：(Z)-5-(6-(2-(1-(2,3-二氫-1-茚滿-5-基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-5-羥基-2,3-二氫-1-茚滿-4-基)-2-氟苯甲酸(化合物16)的合成與化合物5的合成類似的方法，以2,3-二氫-1-氫茚-5-胺和4-溴-6-硝基-2,3-二氫-5-茚醇為原料，可以得到(Z)-5-(6-(2-(1-(2,3-二氫-1-茚滿-5-基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-5-羥基-2,3-二氫-1-茚滿-4-基)-2-氟苯甲酸(化合物16)。ESI-MS(m/z):[M+H]+513.3，[M-H]-511.5。實施例17：(Z)-5-(4-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-3-羥基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-呋喃-2-甲酸(化合物17)的合成a.5-(3-芐氧基-4-硝基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-呋喃-2-甲酸的合成:將3-溴-1-硝基-5,6,7,8-四氫萘-2-酚(3.5g，12.86mmol)在50ml乙腈和5mlDMF中混合均勻，加入K2CO3(4.44g，32.16mmol)，N2置換空氣3次，再向反應(yīng)液中加入氯芐(1.8g，14.15mmol)，N2保護下，油浴83℃反應(yīng)。TLC跟蹤檢測至原料3-溴-1-硝基 -5,6,7,8-四氫萘-2-酚完全反應(yīng)完全，減壓蒸出乙腈后，加入飽和NH4Cl水溶液100ml，過濾，濾餅水洗數(shù)次，干燥得6-芐氧基-7-溴-5-硝基-1,2,3,4-四氫萘(3.8g，產(chǎn)率81.5％)。6-芐氧基-7-溴-5-硝基-1,2,3,4-四氫萘(1.13g，3.12mmol)，5-醛基呋喃-2-硼酸(873mg，6.24mmol)，Na2CO3(992mg，9.16mmol)在甲苯(40ml)，無水乙醇(40ml)和水(40ml)的混合溶液中混合均勻，N2置換空氣3次，加入Pd(dppf)Cl2(184mg，0.25mmol)，N2保護下，油浴80℃反應(yīng)。TLC跟蹤至原料6-芐氧基-7-溴-5-硝基-1,2,3,4-四氫萘反應(yīng)完全，加入100ml乙酸乙酯萃取，并用無水硫酸鈉干燥有機相，減壓濃縮后柱層析得5-(3-芐氧基-4-硝基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-呋喃-2-甲醛(794mg，產(chǎn)率72.0％)。b.5-(4-氨基-3-羥基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-呋喃-2-甲酸的合成:將5-(3-芐氧基-4-硝基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-呋喃-2-甲醛(7.94g，21mmol)溶于100ml的NaOH(濃度10％)水溶液中，加入AgNO3(3.58g，21mmol)，升溫至60℃，攪拌反應(yīng)4h，LC-MS檢測反應(yīng)完成，過濾，濾液用3NHCl調(diào)pH值2左右，等量乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉干燥有機相，減壓蒸除溶劑得5-(3-芐氧基-4-硝基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-呋喃-2-甲酸(6.45g，77.9％產(chǎn)率)。將5-(3-芐氧基-4-硝基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-呋喃-2-甲酸(1.9g，4.83mmol)溶解于500ml乙酸乙酯中，加入到2L的高壓反應(yīng)釜中，加入10％的Pd/C，氫氣置換，1.0Mpa的壓力下，進行室溫催化加氫，反應(yīng)18h后，LC-MS監(jiān)測反應(yīng)完全，過濾，濾液減 壓蒸干得5-(4-氨基-3-羥基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-呋喃-2-甲酸粗品(1.0g，產(chǎn)率56.8％)。直接進行下步反應(yīng)。c.(Z)-5-(4-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-3-羥基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-呋喃-2-甲酸(化合物17)的合成:5-(4-氨基-3-羥基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-呋喃-2-甲酸(600mg，2.20mmol)溶于40ml鹽酸(1mol/L)溶液中，降溫至0℃以下，向其中緩慢滴加NaNO2(182mg,2.63mmol)的40ml水溶液，滴畢，保溫反應(yīng)30min，TLC檢測原料消失，再向反應(yīng)液中加入1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-1氫吡咯-5-(4氫)酮(533mg,2.63mmol)，15min后用飽和的碳酸氫鈉溶液調(diào)pH8左右，加入40ml無水乙醇，自然升至室溫反應(yīng)。24h后LC-MS檢測原料反應(yīng)完全。過濾，濾餅水混懸，調(diào)PH5左右，再過濾，濾餅干燥后柱層析得目標(biāo)產(chǎn)物(Z)-5-(4-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-3-羥基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-呋喃-2-甲酸(化合物17)(190mg，產(chǎn)率17.8％)。1H-NMR(600MHz,DMSO-d6,δppm)：13.70(s,1H),13.06(s,1H),9.56(s,1H),7.69(s,1H),7.62(d,1H，J＝7.8Hz),7.48(s,1H),7.34(d,1H，J＝3.0Hz),7.19(d,1H，J＝8.4Hz),6.72(d,1H，J＝3.0Hz),2.77(m,2H),2.45(t,2H),2.32(s,3H)，2.26(s,3H),2.22(s,3H),1.70(m,2H)，1.65(m,2H)。ESI-MS(m/z):[M-H]-485.3。實施例18：(Z)-5-(3-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-2-羥基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)-呋喃-2-甲酸(化合物18)的合成a.5-(2-甲氧基-3-硝基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-呋喃-2-甲酸的合成:5-溴-6-甲氧基-7-硝基-1,2,3,4-四氫萘(6.0g，20.97mmol)，5-醛基呋喃-2-硼酸(5.87g，41.94mmol)，Na2CO3(6.67g，62.91mmol)，在甲苯(80ml)，無水乙醇(80ml)和水(80ml)的混合溶液中混合均勻，N2置換3次，加入醋酸鈀(377mg，1.68mmol)和配體2-雙環(huán)己基膦-2',6'-二甲氧基聯(lián)苯(1.377g，3.36mmol)，N2保護下，油浴80℃反應(yīng)。TLC跟蹤檢測至原料5-溴-6-甲氧基-7-硝基-1,2,3,4-四氫萘反應(yīng)完全，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉干燥有機相，柱層析得5-(2-甲氧基-3-硝基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-呋喃-2-醛(5.338g，產(chǎn)率84.5％)。5-(2-甲氧基-3-硝基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-呋喃-2-醛(2.408g，7.99mmol)溶于20ml10％的NaOH水溶液中，加入AgNO3 (1.36g，7.99mmol)，升溫至60℃，4h后，LC-MS檢測反應(yīng)完全，過濾，濾液用1mol的HCl調(diào)pH值2左右，過濾得5-(2-甲氧基-3-硝基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-呋喃-2-甲酸(2.11g，產(chǎn)率83.1％)。b.5-(2-羥基-3-氨基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-呋喃-2-甲酸的合成:將5-(2-甲氧基-3-硝基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-呋喃-2-甲酸(1.02g，3.2mmol)溶于15ml無水乙醇中，室溫滴加氯化亞錫(2.13g，11.2mmol)的濃鹽酸溶液，TLC跟蹤檢測至反應(yīng)完全。減壓濃縮，6mol/L的NaOH溶液調(diào)pH10左右，過濾，濾液用6mol/L的HCl溶液調(diào)pH值5左右，有大量固體析出，過濾干燥得5-(2-甲氧基-3-氨基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-呋喃-2-甲酸(850mg，92.0％產(chǎn)率)。N2保護下，將5-(2-甲氧基-3-氨基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-呋喃-2-甲酸(1.22g，4.25mmol)溶于干燥的二氯甲烷(30ml)中，降溫至-78℃，將三溴化硼(2ml，21.25mmol)緩慢滴入反應(yīng)體系中，完全滴完后自然升至室溫。LC-MS檢測原料5-(2-甲氧基-3-氨基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-呋喃-2-甲酸消失，加入4ml甲醇淬滅，蒸除溶劑，加入30ml水，用6mol/L的NaOH調(diào)pH值10左右，再用6mol/L的HCl調(diào)pH值5左右，過濾得5-(2-羥基-3-氨基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-呋喃-2-甲酸(1.1g，產(chǎn)率95.0％)。c.(Z)-5-(3-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-2-羥基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)-呋喃-2-甲酸(化合物18)的合成:將5-(2-羥基-3-氨基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-呋喃-2-甲酸(1.0g，3.66mmol)，溶于40ml1mol/l的HCl溶液中，降溫至0℃以下，向其中緩慢滴加NaNO2(303mg，4.39mmol)的40ml水溶液；滴畢，維持該反應(yīng)溫度繼續(xù)反應(yīng)30min，TLC跟蹤原料5-(2-羥基-3-氨基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-呋喃-2-甲酸反應(yīng)完全。加入1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-1氫吡咯-5-(4氫)酮(740mg，3.66mmol)，15min后用飽和的碳酸氫鈉溶液調(diào)pH8左右，加入40ml無水乙醇，自然升至室溫反應(yīng)。24h后LC-MS檢測原料反應(yīng)完全。過濾，濾餅用水混懸，調(diào)PH值5左右，再過濾，濾餅干燥后柱層析得目標(biāo)產(chǎn)物(Z)-5-(3-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-2-羥基-5,6,7,8-四氫萘-1-基)-呋喃-2-甲酸(化合物18)(192mg，產(chǎn)率10.8％)。1H-NMR(600MHz,DMSO-d6,δppm)：13.70(s,1H),13.05(s,1H),9.55(s,1H),7.68(s,1H),7.62(d,1H，J＝7.8Hz),7.48(s,1H),7.34(d,1H，J＝3.0Hz),7.19(d,1H，J＝7.8Hz),6.72(d,1H，J＝3.0Hz),2.75(m,2H),2.45(t,2H),2.31(s,3H)，2.26(s,3H),2.22(s,3H),1.70(m,2H)，1.65(m,2H)。ESI-MS(m/z):[M+H]+487.2，[M-H]-485.3。實施例19：(Z)-5-(7-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-6-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-5-基)-呋喃-2-甲酸(化合物19)的合成與化合物17類似的合成方法，以6-溴-4-硝基-2，3-二氫-1氫茚-5-醇為原料，可以得到(Z)-5-(7-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-6-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-5-基)-呋喃-2-甲酸(化合物19)。1H-NMR(600MHz,DMSO-d6,δppm)：13.75(s,1H),13.07(s,1H),9.65(s,1H),7.68(s,1H),7.62(d,1H，J＝7.2Hz),7.39(s,1H),7.32(d,1H，J＝2.4Hz),7.16(d,1H，J＝7.8Hz),7.07(d,1H，J＝2.4Hz),3.18(m,2H),2.85(t,2H),2.24(s,3H)，2.22(s,3H),2.20(s,3H),2.06(m,2H)。ESI-MS(m/z):[M+H]+473.3。實施例20：(Z)-5-(6-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-5-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-4-基)-呋喃-2-甲酸(化合物20)的合成與化合物17類似的合成方法，以4-溴-6-硝基-2，3-二氫-1氫茚-5-醇為原料，可以得到(Z)-5-(6-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-5-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-4-基)-呋喃-2-甲酸(化合物20)。ESI-MS(m/z):[M+H]+473.3，[M-H]-471.5。實施例21：(Z)-4-(2-(6-(3-(2H-四唑-5-基)苯基)-5-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-4-基)肼叉)-1-(3,4-二甲苯基)-3-甲基-1氫-吡唑-5(4氫)-酮(化合物21)的合成a.5-(3-溴苯基)-1H-四唑的合成:在氮氣保護下，在100ml的圓地?zé)恐袑?-溴苯甲腈(3.6g，20mmol)溶于20ml的DMF中，然后向該體系加入1.43g疊氮鈉和1.2g氯化銨。將該反應(yīng)液加熱到100℃反應(yīng)3小時，冷卻到室溫后倒入20ml冰水中，然后加入0.4ml濃鹽酸，有白色固體析出，將該固體濾出，干燥得3.2g產(chǎn)品(產(chǎn)率72％)。b.2-(6-(芐氧基)-7-硝基-2,3-二氫-1H-茚-5-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼酸酯的合成:在100ml的圓底燒瓶中，將5-(芐氧基)-6-溴-4-硝基-2,3-二氫-1H-茚(4.2g，12.1mmol)溶于50ml的乙二醇二甲醚，然后加入4.95g雙聯(lián)頻那醇硼酸酯，氮氣置換三次，加入0.765g四三苯基磷鈀和3.15g醋酸鉀，然后攪拌加熱到80℃反應(yīng)8小時，冷卻到室溫，加入100ml乙酸乙酯，用飽和的食鹽水洗滌三次，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮后，快速硅膠柱層析(V石油醚：V乙酸乙酯＝10：1)，得到目標(biāo)產(chǎn)物2-(6-(芐氧基)-7-硝基-2,3-二氫-1H-茚-5-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼酸酯(4.5g，產(chǎn)率94％)。c.5-(3-(6-(芐氧基)-7-硝基-2,3-二氫-1H-茚-5-基)苯基)-1H-四唑的合成:在100ml圓底燒瓶中，將2-(6-(芐氧基)-7-硝基-2,3-二氫-1H-茚-5-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼酸酯(4.5g,)溶于50ml的1,4-二氧六環(huán)和25ml水中，加入2.3g5-(3-溴苯基)-1H-四唑，氮氣置換三次,加入0.37gPd(dppf)Cl2和3.27g碳酸鈉。再次氮氣置換，然后氮氣保護下加熱到100℃反應(yīng)5h，將反應(yīng)液冷卻到室溫，用100ml的乙酸乙酯稀釋，然后飽和食鹽水洗滌三次，有機層用無水硫酸鈉干燥，過濾，濾液蒸出溶劑，快速柱層析分離得到灰色固體5-(3-(6-(芐氧基)-7-硝基-2,3-二氫-1H-茚-5-基)苯基)-1H-四唑(2.5g，產(chǎn)率59％)。d.(Z)-4-(2-(6-(3-(2H-四唑-5-基)苯基)-5-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-4-基)肼叉)-1-(3,4-二甲苯基)-3-甲基-1氫-吡唑-5(4氫)-酮(化合物21)的合成：與化合物17類似的合成方法，以5-(3-(6-(芐氧基)-7-硝基-2,3-二氫-1H-茚-5-基)苯基)-1H-四唑為原料，先經(jīng)還原脫芐，再與1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-1氫吡咯-5-(4氫)酮反應(yīng)可以得到(Z)-4-(2-(6-(3-(2H-四唑-5-基)苯基)-5-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-4-基)肼叉)-1-(3,4-二甲苯基)-3-甲基-1氫-吡唑-5(4氫)-酮(化合物21)。ESI-MS(m/z):[M+H]+431.3；[M-H]-429.2。實施例22：(Z)-4-(2-(7-(3-(2H-四唑-5-基)苯基)-6-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-5-基)肼叉)-1-(3,4-二甲苯基)-3-甲基-1氫-吡唑-5(4氫)-酮(化合物22)的合成與化合物21類似的合成方法，以5-(芐氧基)-4-溴-6-硝基-2,3- 二氫-1H-茚為原料，可以得到(Z)-4-(2-(7-(3-(2H-四唑-5-基)苯基)-6-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-5-基)肼叉)-1-(3,4-二甲苯基)-3-甲基-1氫-吡唑-5(4氫)-酮(化合物22)。ESI-MS(m/z):[M+H]+431.3；[M-H]-429.2。實施例23：(Z)-2-(7-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-6-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-5-基)-噻唑-5-甲酸(化合物23)的合成與化合物21類似的合成方法，以2-溴噻唑-5-甲酸為原料，可以得到(Z)-2-(7-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-6-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-5-基)-噻唑-5-甲酸(化合物23)。ESI-MS(m/z):[M-H]-488.3。實施例24：(Z)-2-(6-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-5-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-4-基)噻唑-5-甲酸(化合物24)的合成與化合物21類似的合成方法，以2-溴噻唑-5-甲酸和5-(芐氧基)-4-溴-6-硝基-2,3-二氫-1H-茚為原料，可以得到(Z)-2-(6-(2-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-5-羥基-2,3-二氫-1H-茚滿-4-基)噻唑-5-甲酸(化合物24)。ESI-MS(m/z):[M-H]-488.3。實施例25：(Z)-5-(4-(2-(1-(2,3-二氫-1-氫茚-5-基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-吡唑-4-亞基)肼基)-3-羥基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-2-氟苯甲酸(化合物25)的合成：與化合物5的合成類似的方法，以2,3-二氫-1-氫茚-5-胺和3-溴-1-硝基-5,6,7,8-四氫萘-2-醇為原料，可以得到(Z)-5-(4-(2-(1-(2,3-二氫-1-氫茚-5-基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二 氫-吡唑-4-亞基)肼基)-3-羥基-5,6,7,8-四氫萘-2-基)-2-氟苯甲酸(化合物25)。ESI-MS(m/z):[M+H]+527.3，[M-H]-525.1。實施例26：生物學(xué)活性試驗通過以下試驗來測定本發(fā)明所述化合物在體外對穩(wěn)轉(zhuǎn)TPO受體的細胞32D-MPL促增殖作用，以及對體內(nèi)裸鼠中空纖維管模型上的促細胞增殖作用。穩(wěn)轉(zhuǎn)TPO受體的32D-MPL細胞，是特異性依賴TPO才能增殖的，當(dāng)沒有TPO維持時，32D-MPL細胞會發(fā)生凋亡，從生物學(xué)角度來說，一個化合物如果能夠替代TPO維持細胞的增殖，該化合物即為TPO受體的激動劑。例如參見KimM-J,ParkSH,OpellaSJetal.NMRstructuralstudiesofinteractionsofasmall,nonpeptidylTpomimicwiththethrombopoietinreceptorextracellularjuxtamembraneandtransmembranedomains.JBiolChem2007；282:14253–14261。試驗樣品：實施例1-25合成的化合物1-25。陽性對照藥物：3′-{(2Z)-2-[1-(3,4-二甲苯基)-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫-4H-吡唑-4-亞基]肼基}-2′-羥基-3-聯(lián)苯基甲酸)，亦如下式所示：A)藥物體外對穩(wěn)轉(zhuǎn)TPO受體的32D-MPL細胞促增殖作用該試驗參考TakanoriNakamura等描述的方法進行(Takanori Nakamura,YoshitakaMiyakawa,etal.Anovelnonpeptidylhumanc-Mplactivatorstimulateshumanmegakaryopoiesisandthrombopoiesis.BLOOD2006,107(11):4300-4307)。鼠骨髓32D細胞(購自美國ATCC)(CRL-11346TM)穩(wěn)轉(zhuǎn)入表達TPO受體(c-MPL)的質(zhì)粒pcDNA3.1，得到穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株32D-MPL，細胞培養(yǎng)條件是RPMI-1640培養(yǎng)基(含1.5g/L碳酸氫鈉，2mML-谷氨酰胺，4.5g/L葡萄糖，10mMHEPES，1.0mM丙酮酸鈉，2.5ng/mL重組鼠IL-3)，添加10％胎牛血清，在37℃含5％二氧化碳的飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。在體外細胞增殖活性分析中，32D-MPL細胞接種96孔板，然后用不同濃度的陽性對照藥物和各化合物作用72h。隨后用MTT方法檢測細胞增殖情況，用GraghPadPrism軟件的4-參數(shù)回歸方程計算EC50。結(jié)果見表2。B)藥物對裸鼠體內(nèi)32D-MPL細胞促增殖作用從中國科學(xué)院上海實驗動物中心購買5-6周齡的BALB/Cnu/nu雌性裸鼠；聚偏氟乙烯中空纖維管購自美國Spectrumlabs公司，中空管參數(shù)為外部直徑1.2mm，內(nèi)部直徑1.0mm，阻隔分子量為大于500kDa。將32D-MPL細胞懸液(1*107個/ml細胞密度)注入中空纖維管中，然后再通過熱融封的方法將中空纖維管封成2cm長的短管。這些短管再接種到裸鼠皮下，接種好的裸鼠隨機分組，每組6只，對照組給予溶劑，試驗組給予陽性對照藥物或各受試化合物，口服，每天1次。第3天試驗結(jié)束時將裸鼠處死，將纖維管內(nèi)的細胞收集起來，用培養(yǎng)液重懸，隨后用MTT方法檢測細胞增殖情況，用GraghPadPrism軟件的4-參數(shù)回歸方程計算EC50。結(jié)果見表2。表2：化合物的體內(nèi)和體外活性數(shù)據(jù)注：ND即NotDetermined,表示未進行該化合物的體內(nèi)藥效試驗。從表2的試驗結(jié)果中可見，本發(fā)明化合物具有較好的體外生物學(xué)活性，特別是化合物20、19、18、17、3對構(gòu)建的含TPO受體的32D-MPL細胞增值的EC50小于100nM。并且表2的試驗結(jié)果顯示，本發(fā)明的部分化合物具有良好的體內(nèi)促32D-MPL細胞增殖效果，尤其是化合物20、19兩個化合物表現(xiàn)出 的體內(nèi)活性優(yōu)于對照化合物。盡管本發(fā)明的具體實施方式已經(jīng)得到詳細的描述，本領(lǐng)域技術(shù)人員將會理解。根據(jù)已經(jīng)公開的所有教導(dǎo)，可以對那些細節(jié)進行各種修改和替換，這些改變均在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。本發(fā)明的全部范圍由所附權(quán)利要求及其任何等同物給出。