專利名稱：環(huán)胺衍生物及其作為藥物的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新穎的環(huán)胺衍生物。
本發(fā)明也涉及化學(xué)因子受體拮抗劑，它們是例如下述的疾病的有效治療劑和/或預(yù)防劑動脈粥樣硬化、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、氣喘、潰瘍性結(jié)腸炎、腎炎(腎病)、多發(fā)性硬化、肺纖維癥、心肌炎、肝炎、胰腺炎、肉樣瘤病、克羅恩氏病、子宮內(nèi)膜異位、充血性心力衰竭、病毒性腦膜炎、腦梗塞、神經(jīng)病、川崎病和敗血癥，這些疾病中血液單核細胞和淋巴細胞等白細胞的組織浸潤作用在疾病地發(fā)生、發(fā)展或維持中起主要作用。
有關(guān)領(lǐng)域的說明
化學(xué)因子是一類分子量為6-15kD的炎性/免疫調(diào)節(jié)性多肽因子，是在炎性部位由多種類型細胞產(chǎn)生的，例如巨噬細胞、單核細胞、嗜曙紅細胞、嗜中性白細胞、成纖維細胞、血管內(nèi)皮細胞、平滑肌細胞和肥大細胞?；瘜W(xué)因子可以分為兩個主要的小類，CXC化學(xué)因子(或α化學(xué)因子)和CC化學(xué)因子(或β化學(xué)因子)，分類依據(jù)是四個保存的半胱氨酸殘基的共同位置和編碼它們的基因的染色體位置差異。CXC化學(xué)因子的前兩個半胱氨酸被一個氨基酸分開，CC化學(xué)因子的前兩種半胱氨酸是相鄰的。例如，IL-8(白介素-8的縮寫)是一種CXC化學(xué)因子，而CC化學(xué)因子包括MIP-1α/β(巨噬細胞炎性蛋白-1α/β的縮寫)、MCP-1(單核細胞化學(xué)引誘蛋白-1的縮寫)和RANTES(正常T細胞表達和分泌的活化調(diào)節(jié)的縮寫)。也有不屬于這兩小類之一的化學(xué)因子。它們是lymphotactin，僅具有兩個半胱氨酸，因此定義為C化學(xué)因子；和fractalkine，在粘蛋白結(jié)構(gòu)中具有一個化學(xué)因子樣結(jié)構(gòu)域，其中前兩個半胱氨酸被三個氨基酸分開，因此定義為CX3C化學(xué)因子。這些化學(xué)因子促進趨化性、細胞移行，提高整聯(lián)蛋白等細胞粘連分子的表達和細胞粘連，被認為是密切參與白細胞向炎性組織等病原部位粘連和浸潤的蛋白因子(參考文獻例如Vaddi，K.等，《化學(xué)因子論文》，Academic Press，1997；《化學(xué)引誘劑配體及其受體》，Horuk，R.，Ed.，CRC Press，1996；Ward，G.W.等，《生物化學(xué)雜志》，1998，333，457；Luster，A.D.，《新英格蘭醫(yī)學(xué)雜志》，1998，338，436；Baggiolini，M.，《自然》，1998，392，565；Rollins，B.J.，《血液》，1997，90，909；Alam，R.，《變態(tài)反應(yīng)臨床免疫學(xué)雜志》，1997，99，273；Hancock，W.W.，《美國病理學(xué)雜志》，1996，148，681；Taub，D.D.，《細胞因子與生長因子評論》，1996，7，335；Strieter，R.M.等，《免疫學(xué)雜志》，1996，156，3583；Furie，M.B.等，《美國病理學(xué)雜志》，1995，146，1287；Schall，T.J.等，《免疫學(xué)中的流行觀點》，1994，6，865；Edginton，S.M.，《生物工程》，1993，11，676)。
例如，MIP-1α導(dǎo)致細胞內(nèi)鈣離子濃度水平短暫升高，誘導(dǎo)T淋巴細胞、B淋巴細胞的移行(例如參見Taub，D.D.等，《科學(xué)》，1993，260，355；Schall，T.J.等，《實驗醫(yī)學(xué)雜志》，1993，177，1821)和嗜曙紅細胞的移行(例如參見Rot，A.等，《實驗醫(yī)學(xué)雜志》，1992，176，1489)，自然殺傷細胞的趨化性(例如參見Maghazachi，A.A.等，《免疫學(xué)雜志》，1994，153，4969)，整聯(lián)蛋白的表達(例如參見Vaddi，K.等，《免疫學(xué)雜志》，1994，153，4721)，和破骨細胞的分化(例如參見Kukita，T.等，《實驗室研究》，1997，76，399)。MIP-1α也增加B細胞內(nèi)IgE和IgG4的產(chǎn)生(例如參見Kimata，H.等，《實驗醫(yī)學(xué)雜志》，1996，183，2397)和抑制造血干細胞的增殖(例如參見Mayani，H.等，《實驗血液學(xué)》，1995，23，422；Keller，J.R.等《血液》，1994，84，2175；Eaves，C.J.等，《美國國家科學(xué)院院報》，1993，90，12015；Bodine，D.M.等，《血液》，1991，78，914；Broxmeyer，H.E.等，《血液》，1990，76，1110)。
關(guān)于MIP-1α的體內(nèi)活性和在發(fā)病機理中的作用，據(jù)報道，它在兔子內(nèi)是一種熱原(例如參見Davatelis，G.等，《科學(xué)》1989，243，1066)；MIP-1α注入小鼠足墊導(dǎo)致炎性反應(yīng)，例如嗜中性白細胞和單核細胞的浸潤(例如參見Alam，R.等，《免疫學(xué)雜志》1994，152，1298)；MIP-1α中和抗體對下列動物模型具有抑制作用或治療作用肉芽腫(例如參見Lukacs，N.W.等，《實驗醫(yī)學(xué)雜志》1993，177，1551)，氣喘(例如參見Lukacs，N.W.等，《歐洲免疫學(xué)雜志》1995，25，245；Lukacs，N.W.等，《免疫學(xué)雜志》1997，158，4398)，多發(fā)性硬化(例如參見Karpus，W.J.等，《免疫學(xué)雜志》1995，155，5003；Karpus，W.J.等，《白細胞生物學(xué)雜志》1997，62，681)，自發(fā)性肺纖維癥(例如參見Smith，R.E.等，《免疫學(xué)雜志》1994，153，4704；Smith，R.E.，《生物學(xué)信號》1996，5，223)，急性肺損傷(例如參見Shanley，T.P.等，《免疫學(xué)雜志)》1995，154，4793；Standiford，T.J.等，《免疫學(xué)雜志》1995，155，1515)，和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(例如參見Kasama，T.等，《臨床研究雜志》1995，95，2868)；柯薩奇病毒誘發(fā)的小鼠心肌炎和角膜基質(zhì)皰疹被破裂的MIP-1α基因抑制(例如參見Cook，D.N.等，《科學(xué)》1995，269，1583；Tumpey，T.M.等，《病毒學(xué)雜志》1998，72，3705)；下列患者觀察到MIP-1α的顯著表達慢性肺部炎性疾病(例如參見Standiford，T.J.等，《免疫學(xué)雜志》1993，151，2852)，過敏性肺炎(例如參見Denis，M.，《Am.J.Respir.Crit.Care Med.》1995，151，164)，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(例如參見Koch，A.E.等，《臨床研究雜志》1994，93，921)，傳染性腦膜炎(例如參見Lahrtz，F(xiàn).等，《神經(jīng)免疫學(xué)雜志》1998，85，33)，和慢性肌肉炎癥(例如參見Adams，E.M.等，《Proc.Assoc.Am.Physicians》1997，109，275)。這些研究指出，MIP-1α密切參與了不同白細胞亞型的局部吸引作用和所致炎性反應(yīng)的發(fā)生、發(fā)展和維持。
MCP-1(已知也叫MCAF(巨噬細胞趨化性與活化因子的縮寫)或JE)是一種由單核細胞/巨噬細胞、平滑肌細胞、成纖維細胞和血管內(nèi)皮細胞產(chǎn)生的CC化學(xué)因子，它引起下列細胞的細胞移行和細胞粘連單核細胞(例如參見Valente，A.J.等，《生物化學(xué)》1988，27，4162；Matsushima，K.等，《實驗醫(yī)學(xué)雜志》，1989，169，1485；Yoshimura，T.等，《免疫學(xué)雜志》，1989，142，1956；Rollins，B.J.等，《美國國家科學(xué)院院報》，1988，85，3738；Rollins，B.J.等，《血液》，1991，78，1112；Jiang，Y.等，《免疫學(xué)雜志》，1992，148，2423；Vaddi，K.等，《免疫學(xué)雜志》，1994，153，4721)，記憶T淋巴細胞(例如參見Carr，M.W.等，《美國國家科學(xué)院院報》，1994，91，3652)，T淋巴細胞(例如參見Loetscher，P.等，《美國實驗生物學(xué)會聯(lián)合會會志》，1994，8，1055)，和自然殺傷細胞(例如參見Loetscher，P.等，《免疫學(xué)雜志》，1996，156，322；Allavena，P.等，《歐洲免疫學(xué)雜志》，1994，24，3233)，以及介導(dǎo)嗜堿細胞釋放組胺(例如參見Alam，R.等，《臨床研究雜志》，1992，89，723；Bischoff，S.C.等，《實驗醫(yī)學(xué)雜志》，1992，175，1271；Kuna，P.等，《實驗醫(yī)學(xué)雜志》，1992，175，489)。
另外，在某些疾病中報道了MCP-1的高度表達，在這些疾病中，單核細胞/巨噬細胞和/或T細胞的蓄積對疾病的發(fā)生或發(fā)展來說被認為是重要的，例如動脈粥樣硬化(例如參見Hayes，I.M.等，《Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.》，1998，18，397；Takeya，M.等，《人的病理學(xué)》，1993，24，534；Yla-Herttuala，S.等，《美國國家科學(xué)院院報》，1991，88，5252；Nelken，N.A.，《臨床研究雜志》，1991，88，1121)，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(例如參見Koch，A.E.等，《臨床研究雜志》，1992，90，772；Akahoshi，T.等，《類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎》，1993，36，762；Robinson，E.等，《臨床實驗免疫學(xué)》，101，398)，腎炎(例如參見Noris，M.等，《實驗室研究》，1995，73，804；Wada，T.等，《腎炎研究》，1996，49，761；Gesualdo，L.等，《腎炎研究》，1997，51，155)，腎病(例如參見Saitoh，A.等，《臨床實驗室分析雜志》，1998，12，1；Yokoyama，H.等，《白細胞生物學(xué)雜志》，1998，63，493)，肺纖維癥、肺肉樣瘤病(例如參見Sugiyama，Y.等，《內(nèi)科學(xué)》，1997，36，856)，氣喘(例如參見Karina，M.等，《變應(yīng)性學(xué)臨床免疫學(xué)研究雜志》，1997，7，254；Stephene，T.H.，《Am.J.Respir.Crit.CareMed.》，1997，156，1377；Sousa，A.R.等，《美國呼吸細胞分子生物學(xué)雜志》，1994，10，142)，多發(fā)性硬化(例如參見McManus，C.等，《神經(jīng)免疫學(xué)雜志》，1998，86，20)，牛皮癬(例如參見Gillitzer，R.等，《皮科學(xué)研究雜志》，1993，101，127)，炎性腸疾病(例如參見Grimm，M.C.等，《白細胞生物學(xué)雜志》，1996，59，804；Reinecker，H.C.等，《胃腸病學(xué)》，1995，106，40)，心肌炎(例如參見Seino，Y.等，《細胞因子》，1995，7，301)，子宮內(nèi)膜異位(例如參見Jolicoeur，C.等，《美國病理學(xué)雜志》，1998，152，125)，腹膜內(nèi)粘連(例如參見Zeyneloglu，H.B.等，《人的生殖》，1998，13，1194)，充血性心力衰竭(例如參見Aurust，P.等，《循環(huán)》，1998，97，1136)，慢性肝疾病(例如參見Marra，F(xiàn).等，《美國病理學(xué)雜志》，1998，152，423)，病毒性腦膜炎(例如參見Lahrtz，F(xiàn).等，《歐洲免疫學(xué)雜志》，1997，27，2484)，川崎病(例如參見Wong，M.等，《風(fēng)濕病學(xué)雜志》，1997，24，1179)，和敗血癥(例如參見Salkowski，C.A.等，《感染性免疫學(xué)》，1998，66，3569)。而且據(jù)報道，抗MCP-1抗體顯示對下列動物模型的抑制作用或治療作用類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(例如參見Schimmer，R.C.等，《免疫學(xué)雜志》，1998，160，1466；Schrier，D.J.，《白細胞生物學(xué)雜志》，1998，63，359；Ogata，H.等，《病理學(xué)雜志》，1997，182，106)，多發(fā)性硬化(例如參見Karpus，W.J.等，《白細胞生物學(xué)雜志》，1997，62，681)，腎炎(例如參見Lloyd，C.M.等，《實驗醫(yī)學(xué)雜志》，1997，185，1371；Wada，T.等，《美國實驗生物學(xué)會聯(lián)合會會志》，1996，10，1418)，氣喘(例如參見Gonzalo，J.-A.等，《實驗醫(yī)學(xué)雜志》，1998，188，157；Lukacs，N.W.等，《免疫學(xué)雜志》，1997，158，4398)，動脈粥樣硬化(例如參見Guzman，L.A.等，《循環(huán)》，1993，88(增刊)，I-371)，延遲型過敏癥(例如參見Rand，M.L.等，《美國病理學(xué)雜志》，1996，148，855)，肺動脈高血壓(例如參見Kimura，H.等，《實驗室研究》，1998，78，571)，和腹膜內(nèi)粘連(例如參見Zeyneloglu，H.B.等，《美國產(chǎn)科學(xué)與婦科學(xué)雜志》，1998，179，438)。也有報道MCP-1的肽拮抗劑MCP-1(9-76)抑制小鼠模型關(guān)節(jié)炎(例如參見Gong，J.-H.，《實驗醫(yī)學(xué)雜志》，1997，186，131)，以及對MCP-1缺陷小鼠的研究表明，MCP-1是體內(nèi)單核細胞募集所必需的(例如參見Lu，B.等，《實驗醫(yī)學(xué)雜志》，1998，187，601；Gu，L.等，《Moll.Cell》，1998，2，275)。
這些資料指出，MIP-1α和MCP-1等化學(xué)因子將單核細胞和淋巴細胞吸引到疾病部位，介導(dǎo)它們的活化作用，因此被認為密切參與了與單核細胞和淋巴細胞密切有關(guān)的疾病的發(fā)生、發(fā)展和維持，例如動脈粥樣硬化、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、氣喘、潰瘍性結(jié)腸炎、腎炎(腎病)、多發(fā)性硬化、肺纖維癥、心肌炎、肝炎、胰腺炎、肉樣瘤病、克羅恩氏病、子宮內(nèi)膜異位、充血性心力衰竭、病毒性腦膜炎、腦梗塞、神經(jīng)病、川崎病和敗血癥(例如參見Rovin，B.H.等，《美國腎疾病雜志》，1998，31，1065；Lloyd，C.等，《腎性高血壓中的流行觀點》，1998，7，281；Conti，P.等，《Allergy and AsthmaProc.》，1998，19，121；Ransohoff，R.M.等，《神經(jīng)科學(xué)趨勢》，1998，21，154；MacDermott，R.P.等，《炎性腸疾病》，1998，4，54)。因此，抑制化學(xué)因子對靶細胞的作用的藥物可能是這些疾病的有效治療和/或預(yù)防藥。
編碼特異性化學(xué)因子受體的基因已經(jīng)被克隆，現(xiàn)在知道，這些受體是與G蛋白偶聯(lián)的七種跨膜受體，存在于不同的白細胞種群上。迄今，已經(jīng)鑒定了至少五種CXC化學(xué)因子受體(CXCR1-CXCR5)和八種CC化學(xué)因子受體(CCR1-CCR8)。例如，IL-8是CXCR1和CXCR2的配體，MIP-1α是CCR1和CCR5的配體，MCP-1是CCR2A和CCR2B的配體(參考文獻例如Holmes，W.E.等，《科學(xué)》，1991，253，1278-1280；Murphy，P.M.等，《科學(xué)》，253，1280-1283；Neote，K.等，《細胞》，1993，72，415-425；Charo，I.F.等，《美國國家科學(xué)院院報》，1994，91，2752-2756；Yamagami，S.等，《生物化學(xué)與生物物理學(xué)研究通訊》，1994，202，1156-1162；Combadier，C.等，《生物化學(xué)雜志》，1995，270，16491-16494；Power，C.A.等，《生物化學(xué)雜志》，1995，270，19495-19500；Samson，M.等，《生物化學(xué)》，1996，35，3362-3367；Murphy，P.M.，《免疫學(xué)年鑒》，1994，12，592-633)。據(jù)報道，肺部炎癥和肉芽腫形成在CCR1缺陷小鼠中被抑制了(見Gao，J.-L.等，《實驗醫(yī)學(xué)雜志》，1997，185，1959；Gerard，C.等，《臨床研究雜志》，1997，100，2022)，巨噬細胞的募集和動脈粥樣硬化損害的形成在CCR2缺陷小鼠中減少了(見Boring，L.等，《自然》，1998，394，894；Kuziel，W.A.等，《美國國家科學(xué)院院報》，1997，94，12053；Kurihara，T.等，《實驗醫(yī)學(xué)雜志》，1997，186，1757；Boring，L.等，《臨床研究雜志》，1997，100，2552)。因此，抑制MIP-1α和/或MCP-1等化學(xué)因子與這些受體結(jié)合的化合物、也就是化學(xué)因子受體拮抗劑可用作抑制MIP-1α和/或MCP-1等化學(xué)因子對靶細胞作用的藥物，但是已知還沒有藥物具有這樣的作用。
由本發(fā)明所提供的環(huán)胺衍生物是相當(dāng)新穎的。最近報道，下列化合物對CXCR1、CXCR4、CCR1、CCR2、CCR3和CCR5等化學(xué)因子受體具有拮抗活性二苯基甲烷衍生物(WO 9724325；Hesselgesser，J.等，《生物化學(xué)雜志》，1998，273，15687)，哌啶衍生物(JP 9-249566)，咪唑并苯并二氮雜_衍生物(JP 9-249570)，苯并吖辛因衍生物(JP 9-255572)，具有環(huán)氨基的三環(huán)化合物(WO 9804554)，吩噻嗪衍生物(Bright，C.等，《生物有機與醫(yī)藥化學(xué)快報》，1998，8，771)，哌嗪衍生物(WO 9744329)，苯并咪唑衍生物(WO9806703)，偏端霉素類似物(Howard，O.M.Z.等，《醫(yī)藥化學(xué)雜志》，1998，41，2184)，雙吖啶衍生物(WO 9830218)，螺取代的氮雜環(huán)(WO 9825604；WO9825605)，取代的芳基哌嗪(WO 9825617)，氨基喹啉衍生物(WO 9827815)，3-芳基哌啶衍生物(WO 9831364)，己酰胺衍生物(WO 9838167)，和其他小分子(WO 9744329；WO 9802151；WO 9804554)。不過，這些化合物不同于本發(fā)明的化合物。
發(fā)明概述
因此，本發(fā)明的一個目的是提供抑制MIP-1α和/或MCP-1等化學(xué)因子與其靶細胞上受體結(jié)合的小分子化合物。
本發(fā)明的另一個目的是建立抑制MIP-1α和/或MCP-1等化學(xué)因子與靶細胞上受體結(jié)合和/或抑制其對靶細胞的作用的方法。
本發(fā)明還有一個目的是提出用于疾病治療的方法，該疾病的病因之一是MIP-1α和/或MCP-1等化學(xué)因子與靶細胞上受體的結(jié)合。
作為深入研究的結(jié)果，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，具有芳烷基的環(huán)胺衍生物、其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽或其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽對抑制MIP-1α和/或MCP-1等化學(xué)因子與靶細胞受體的結(jié)合具有極佳的活性，從而完成了本發(fā)明。
也就是說，本發(fā)明是下式(I)化合物
其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽(發(fā)明1)，
其中R1是苯基、C3-C8環(huán)烷基或具有1-3個雜原子的芳族雜環(huán)基，雜原子選自由氧原子、硫原子、氮原子或其組合組成的組，其中該苯基或芳族雜環(huán)基可以與苯環(huán)或具有1-3個雜原子的芳族雜環(huán)基稠合形成稠合環(huán)，雜原子選自由氧原子、硫原子、氮原子或其組合組成的組，該苯基、C3-C8環(huán)烷基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)可以被一個或多個下列取代基取代鹵原子、羥基、氰基、硝基、羧基、氨基甲?；?、C1-C6烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C6烯基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、C3-C5亞烷基、C2-C4亞烷氧基、C1-C3亞烷二氧基、苯基、苯氧基、苯硫基、芐基、芐氧基、苯甲酰氨基、C2-C7烷酰基、C2-C7烷氧羰基、C2-C7烷酰氧基、C2-C7烷酰氨基、C2-C7N-烷基氨基甲?；?、C4-C9 N-環(huán)烷基氨基甲?；1-C6烷磺?；3-C8(烷氧羰基)甲基、N-苯基氨基甲酰基、哌啶子基羰基、嗎啉代羰基、1-吡咯烷基羰基、由式-NH(C＝O)O-代表的二價基團、由式-NH(C＝S)O-代表的二價基團、氨基、單(C1-C6烷基)氨基、或二(C1-C6烷基)氨基，其中該苯基、C3-C8環(huán)烷基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基可選地被一個或多個鹵原子、羥基、氨基、三氟甲基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基取代；
R2是氫原子、C1-C6烷基、C2-C7烷氧羰基、羥基或苯基，其中該C1-C6烷基或苯基可以被一個或多個鹵原子、羥基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基取代，且當(dāng)j＝0時，R2不是羥基；
j代表0-2的整數(shù)；
k代表0-2的整數(shù)；
m代表2-4的整數(shù)；
n代表0或1；
R3是氫原子或可選被一個或兩個苯基取代的C1-C6烷基，該苯基各自可以被一個或多個鹵原子、羥基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基取代；
R4和R5是彼此相同或不同的，是氫原子、羥基、苯基或C1-C6烷基，其中該C1-C6烷基可選地被一個或多個下列取代基取代鹵原子，羥基，氰基，硝基，羧基，氨基甲酰基，巰基，胍基，C3-C8環(huán)烷基，C1-C6烷氧基，C1-C6烷硫基，可選被一個或多個鹵原子、羥基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或芐氧基取代的苯基，苯氧基，芐氧基，芐氧羰基，C2-C7烷?；珻2-C7烷氧羰基，C2-C7烷酰氧基，C2-C7烷酰氨基，C2-C7N-烷基氨基甲?；?，C1-C6烷磺?；被?，單(C1-C6烷基)氨基，二(C1-C6烷基)氨基，或具有1-3個雜原子且可選與苯環(huán)稠合的芳族雜環(huán)基，雜原子選自由氧原子、硫原子、氮原子或其組合組成的組，或者R4和R5一起形成3至6元環(huán)烴；
p代表0或1；
q代表0或1；
G是由下式代表的基團-CO-、-SO2-、-CO-O-、-NR7-CO-、-CO-NR7-、-NH-CO-NH-、-NH-CS-NH-、-NR7-SO2-、-SO2-NH-、-NH-CO-O-、或-O-CO-NH-，其中R7是氫原子或C1-C6烷基，或者R7與R5一起代表C2-C5亞烷基；
R6是苯基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烯基、芐基或具有1-3個雜原子的芳族雜環(huán)基，雜原子選自由氧原子、硫原子、氮原子或其組合組成的組，其中該苯基、芐基或芳族雜環(huán)基可以與苯環(huán)或具有1-3個雜原子的芳族雜環(huán)基稠合形成稠合環(huán)，雜原子選自由氧原子、硫原子、氮原子或其組合組成的組，該苯基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烯基、芐基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)可以被一個或多個下列取代基取代鹵原子、羥基、巰基、氰基、硝基、氰硫基、羧基、氨基甲?；?、三氟甲基、C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基、C2-C6烯基、C1-C6烷氧基、C3-C8環(huán)烷氧基、C1-C6烷硫基、C1-C3亞烷二氧基、苯基、苯氧基、苯氨基、芐基、苯甲?；?、苯亞磺酰基、苯磺酰基、3-苯脲基、C2-C7烷?；?、C2-C7烷氧羰基、C2-C7烷酰氧基、C2-C7烷酰氨基、C2-C7N-烷基氨基甲?；?、C1-C6烷磺酰基、苯基氨基甲?；，N-二(C1-C6烷基)氨磺酰基、氨基、單(C1-C6烷基)氨基、二(C1-C6烷基)氨基、芐氨基、C2-C7(烷氧羰基)氨基、C1-C6(烷磺酰)氨基、或雙C1-C6(烷磺酰)氨基，其中該苯基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烯基、芐基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基可選地被一個或多個鹵原子、氰基、羥基、氨基、三氟甲基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、單(C1-C6烷基)氨基或二(C1-C6烷基)氨基取代。
本發(fā)明也是一種方法，該方法使用含有治療上有效量的由上式(I)代表的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽的藥物制劑抑制化學(xué)因子與靶細胞受體結(jié)合和/或抑制其對靶細胞的作用(發(fā)明2)。
這里，由上式(I)代表的化合物具有抑制MIP-1α和/或MCP-1等化學(xué)因子與靶細胞受體結(jié)合的活性和抑制由MIP-1α和/或MCP-1等化學(xué)因子引起的細胞生理學(xué)活性的活性。
優(yōu)選實施方式的說明
(1)發(fā)明1
上式(I)中，R1是苯基、C3-C8環(huán)烷基或具有1-3個雜原子的芳族雜環(huán)基，雜原子選自由氧原子、硫原子、氮原子或其組合組成的組，其中該苯基或芳族雜環(huán)基可以與苯環(huán)或具有1-3個雜原子的芳族雜環(huán)基稠合形成稠合環(huán)，雜原子選自由氧原子、硫原子、氮原子或其組合組成的組，該苯基、C3-C8環(huán)烷基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)可以被一個或多個下列取代基取代鹵原子、羥基、氰基、硝基、羧基、氨基甲?；?、C1-C6烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C6烯基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、C3-C5亞烷基、C2-C4亞烷氧基、C1-C3亞烷二氧基、苯基、苯氧基、苯硫基、芐基、芐氧基、苯甲酰氨基、C2-C7烷酰基、C2-C7烷氧羰基、C2-C7烷酰氧基、C2-C7烷酰氨基、C2-C7N-烷基氨基甲酰基、C4-C9N-環(huán)烷基氨基甲?；?、C1-C6烷磺酰基、C3-C8(烷氧羰基)甲基、N-苯基氨基甲?；?、哌啶子基羰基、嗎啉代羰基、1-吡咯烷基羰基、由式-NH(C＝O)O-代表的二價基團、由式-NH(C＝S)O-代表的二價基團、氨基、單(C1-C6烷基)氨基、或二(C1-C6烷基)氨基。
R1代表的“C3-C8環(huán)烷基”指的是一種環(huán)狀烷基，例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基和環(huán)辛基，具體包括環(huán)丙基、環(huán)戊基和己基。
R1代表的“具有1-3個雜原子的芳族雜環(huán)基，雜原子選自由氧原子、硫原子、氮原子或其組合組成的組”具體例如噻吩基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、異噻唑基、吡啶基、嘧啶基、三嗪基、三唑基、噁二唑基(呋咱基)、噻二唑基等，優(yōu)選包括噻吩基、呋喃基、吡咯基、異噁唑基和吡啶基。
R1代表的“稠合環(huán)”指的是，苯基或具有1-3個雜原子的芳族雜環(huán)基，雜原子選自由氧原子、硫原子和/或氮原子組成的組，通過在任意可能的位置與苯環(huán)或具有1-3個雜原子的芳族雜環(huán)基，雜原子選自由氧原子、硫原子、氮原子組成的組，進行稠合作用所得到的環(huán)，適當(dāng)?shù)睾途唧w例如萘基、吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并三唑基、苯并噁二唑基(苯并呋咱基)和苯并噻二唑基。
其中，苯基和異噁唑基可以列為R1代表的優(yōu)選具體實例。
作為R1中苯基、C3-C8環(huán)烷基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基的“鹵原子”包括氟原子、氯原子、溴原子和碘原子，適當(dāng)?shù)匕ǚ?、氯原子和溴原子?br> 作為R1的取代基的“C1-C6環(huán)烷基”指的是C1-C6直鏈或支鏈烷基，例如甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基、正庚基、正辛基、異丙基、異丁基、仲丁基、叔丁基、異戊基、新戊基、叔戊基、異己基、2-甲基戊基、1-乙基丁基等，適當(dāng)?shù)鼐唧w包括甲基、乙基、丙基和異丙基。
作為R1的取代基的“C3-C8環(huán)烷基”與上述R1代表的“C3-C8環(huán)烷基”所定義的相同，優(yōu)選的具體實例也可以給出相同的實例。
作為R1的取代基的“C2-C6烯基”指的是C2-C6直鏈或支鏈烯基，例如乙烯基、烯丙基、1-丙烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-甲基-1-丙烯基、4-戊烯基、5-己烯基、4-甲基-3-戊烯基等，適當(dāng)?shù)鼐唧w包括乙烯基和2-甲基-1-丙烯基。
作為R1的取代基的“C1-C6烷氧基”指的是由上述C1-C6烷基和氧基組成的基團，具體例如甲氧基和乙氧基。
作為R1的取代基的“C1-C6烷硫基”指的是由上述C1-C6烷基和硫基組成的基團，具體例如甲硫基和乙硫基。
作為R1的取代基的“C3-C5亞烷基”指的是C3-C5二價亞烷基，例如三亞甲基、四亞甲基、五亞甲基和1-甲基三亞甲基，具體例如三亞甲基和四亞甲基。
作為R1的取代基的“C2-C4亞烷氧基”指的是由上述C2-C4二價亞烷基和氧基組成的基團，例如亞乙氧基(-CH2CH2O-)、三亞甲氧基(-CH2CH2CH2O-)、四亞甲氧基(-CH2CH2CH2CH2O-)和1，1-二甲基亞乙氧基(-CH2C(CH3)2O-)，具體例如亞乙氧基和三亞甲氧基。
作為R1的取代基的“C1-C3亞烷二氧基”指的是由C1-C3二價亞烷基和兩個氧基組成的基團，例如亞甲二氧基(-OCH2O-)、亞乙二氧基(-OCH2CH2O-)、三亞甲二氧基(-OCH2CH2CH2O-)和亞丙二氧基(-OCH2CH(CH3)O-)，具體例如亞甲二氧基和亞乙二氧基。
作為R1的取代基的“C2-C7烷?；敝傅氖荂2-C7直鏈或支鏈烷酰基，例如乙酰基、丙?；?、丁?；?、戊?；?、己酰基、庚酰基、異丁?；?、3-甲基丁?；?、2-甲基丁酰基、新戊?；?、4-甲基戊酰基、3，3-二甲基丁?；?-甲基己?；龋渲袃?yōu)選的和具體的實例包括乙?；?。
作為R1的取代基的“C2-C7烷氧羰基”指的是由上述C1-C6烷氧基和羰基組成的基團，優(yōu)選地和具體例如甲氧羰基和乙氧羰基。
作為R1的取代基的“C2-C7烷酰氧基”指的是由上述C2-C7烷?；脱趸M成的基團，具體例如乙酰氧基。
作為R1的取代基的“C2-C7烷酰氨基”指的是由上述C2-C7烷?；桶被M成的基團，具體例如乙酰氨基。
作為R1的取代基的“C2-C7N-烷基氨基甲酰基”指的是由上述C1-C6烷基和氨基甲?；M成的基團，具體例如N-甲基氨基甲?；蚇-乙基氨基甲?；?。
作為R1的取代基的“C4-C9N-環(huán)烷基氨基甲酰基”指的是由上述C3-C8環(huán)烷基和氨基甲?；M成的基團，具體例如N-環(huán)戊基氨基甲?；蚇-環(huán)己基氨基甲?；?br> 作為R1的取代基的“C1-C6烷磺?；敝傅氖怯缮鲜鯟1-C6烷基和磺?；M成的基團，優(yōu)選地和具體例如甲磺?；?br> 作為R1的取代基的“C3-C8(烷氧羰基)甲基”指的是由上述C2-C7烷氧羰基和甲基組成的基團，優(yōu)選地和具體例如(甲氧羰基)甲基和(乙氧羰基)甲基。
作為R1的取代基的“單(C1-C6烷基)氨基”指的是被上述C1-C6烷基之一取代的氨基，優(yōu)選地和具體例如甲氨基和乙氨基。
作為R1的取代基的“二(C1-C6烷基)氨基”指的是被相同或不同的兩個上述C1-C6烷基取代的氨基，優(yōu)選地和具體例如二甲氨基、二乙氨基和N-乙基-N-甲氨基。
其中，鹵原子、羥基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、C2-C4亞烷氧基、亞甲二氧基、N-苯基氨基甲?；?、氨基、單(C1-C6烷基)氨基和二(C1-C6烷基)氨基可以列為R1中苯基、C3-C8環(huán)烷基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基的優(yōu)選具體實例。
而且，上述R1中苯基、C3-C8環(huán)烷基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基可選地被一個或多個鹵原子、羥基、氨基、三氟甲基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基取代。鹵原子、C1-C6烷基和C1-C6烷氧基與上述R1中苯基、C3-C8環(huán)烷基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基所定義的相同，并且相同的實例可以列為優(yōu)選的具體實例。
上式(I)中，R2代表氫原子、C1-C6烷基、C2-C7烷氧羰基、羥基或苯基，其中該C1-C6烷基或苯基可以被一個或多個鹵原子、羥基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基取代，且當(dāng)j＝0時，R2不是羥基。
R2代表的C1-C6烷基和C2-C7烷氧羰基與上述R1中苯基、C3-C8環(huán)烷基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基所定義的相同，并且相同的實例可以列為優(yōu)選的具體實例。
作為R2中C1-C6烷基或苯基的取代基的鹵原子、C1-C6烷基和C1-C6烷氧基與上述R1中苯基、C3-C8環(huán)烷基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基所定義的相同，并且相同的實例可以列為優(yōu)選的具體實例。
其中，氫原子是R2代表的優(yōu)選具體實例。
上式(I)中，j代表0-2的整數(shù)。特別優(yōu)選的j是0。
上式(I)中，k代表0-2的整數(shù)，m代表2-4的整數(shù)。優(yōu)選使用的是2-取代的吡咯烷、其中k是0且m是3，3-取代的吡咯烷、其中k是1且m是2，3-取代的哌啶、其中k是1且m是3，4-取代的哌啶、其中k是2且m是2，或3-取代的六氫氮雜_、其中k是1且m是4。
上式(I)中的n代表0或1。
尤其，3-酰氨基吡咯烷、其中k是1、m是2且n是0，和4-(酰氨甲基)哌啶、其中k是2、m是2且n是1可以列為特別優(yōu)選的實例。
上式(I)中的R3代表氫原子或可選被一個或兩個苯基取代的C1-C6烷基，該苯基各自可以被一個或多個鹵原子、羥基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基取代。
R3代表的C1-C6烷基與上述R1中苯基、C3-C8環(huán)烷基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基所定義的相同，具體例如甲基、乙基和丙基。
R3中C1-C6烷基的取代基是苯基，作為該苯基取代基的鹵原子、C1-C6烷基和C1-C6烷氧基與上述R1中苯基、C3-C8環(huán)烷基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基所定義的相同，并且相同的實例可以列為優(yōu)選的具體實例。
其中，氫原子是R3代表的優(yōu)選具體實例。
上式(I)中，R4和R5是彼此相同或不同的，是氫原子、羥基、苯基或C1-C6烷基，其中該C1-C6烷基可選地被一個或多個下列取代基取代鹵原子，羥基，氰基，硝基，羧基，氨基甲?；?，巰基，胍基，C3-C8環(huán)烷基，C1-C6烷氧基，C1-C6烷硫基，可選被一個或多個鹵原子、羥基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或芐氧基取代的苯基，苯氧基，芐氧基，芐氧羰基，C2-C7烷?；?，C2-C7烷氧羰基，C2-C7烷酰氧基，C2-C7烷酰氨基，C2-C7N-烷基氨基甲?；珻1-C6烷磺?；?，氨基，單(C1-C6烷基)氨基，二(C1-C6烷基)氨基，或具有1-3個雜原子且可選與苯環(huán)稠合的芳族雜環(huán)基，雜原子選自由氧原子、硫原子、氮原子或其組合組成的組，或者R4和R5一起形成3至6元環(huán)烴。
R4和R5代表的C1-C6烷基與上述R1中苯基、C3-C8環(huán)烷基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基所定義的相同，并且相同的實例可以列為優(yōu)選的具體實例。
作為R4和R5中C1-C6烷基取代基的鹵原子、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、C2-C7烷酰基、C2-C7烷氧羰基、C2-C7烷酰氧基、C2-C7烷酰氨基、C2-C7N-烷基氨基甲?；?、C1-C6烷磺?；?C1-C6烷基)氨基和二(C1-C6烷基)氨基上述R1中苯基、C3-C8環(huán)烷基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基所定義的相同，并且相同的實例可以列為優(yōu)選的具體實例。
作為R4和R5中C1-C6烷基取代基的C3-C8環(huán)烷基和具有1-3個雜原子的芳族雜環(huán)基，雜原子選自由氧原子、硫原子、氮原子或其組合組成的組，與上述R1代表的基團所定義的相同，并且相同的實例可以列為優(yōu)選的具體實例。
R4和R5中C1-C6烷基的取代基是苯基，作為該苯基取代基的鹵原子、C1-C6烷基和C1-C6烷氧基與上述R1中苯基、C3-C8環(huán)烷基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基所定義的相同，并且相同的實例可以列為優(yōu)選的具體實例。
由R4、R5和相鄰碳原子組成的“3至6元環(huán)烴”包括環(huán)丙烷、環(huán)丁烷、環(huán)戊烷和環(huán)己烷。
其中，氫原子和C1-C6烷基可以列為R4和R5的優(yōu)選具體實例。
上式(I)中，p代表0或1，q代表0或1。特別優(yōu)選的是p和q都是0。
上式(I)中，G是由下式代表的基團-CO-、-SO2-、-CO-O-、-NR7-CO-、-CO-NR7、-NH-CO-NH-、-NH-CS-NH-、-NR7-SO2-、-SO2-NH-、-NH-CO-O-或-O-CO-NH-，其中R7是氫原子或C1-C6烷基，或者R7與R5一起代表C2-C5亞烷基。
上式中，-CO-指羰基，-SO2-指磺?；?，-CS-指硫代羰基。優(yōu)選的基團具體例如由式-NR7-CO-和-NH-CO-NH-代表的基團。
R7代表的C1-C6烷基與上述R1中苯基、C3-C8環(huán)烷基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基所定義的相同，并且相同的實例可以列為優(yōu)選的具體實例。
由R5和R7組成的“C2-C5亞烷基”指的是C2-C5直鏈或支鏈亞烷基，例如亞甲基、亞乙基、亞丙基、三亞甲基、四亞甲基、1-甲基三亞甲基、五亞甲基等，適當(dāng)?shù)睾途唧w包括亞乙基、三亞甲基和四亞甲基。
氫原子是R7代表的優(yōu)選具體實例。
上式(I)中，R6是苯基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烯基、芐基或具有1-3個雜原子的芳族雜環(huán)基，雜原子選自由氧原子、硫原子、氮原子或其組合組成的組，其中該苯基、芐基或芳族雜環(huán)基可以與苯環(huán)或具有1-3個雜原子的芳族雜環(huán)基稠合形成稠合環(huán)，雜原子選自由氧原子、硫原子、氮原子或其組合組成的組，并且該苯基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烯基、芐基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)可以被一個或多個下列取代基取代鹵原子、羥基、巰基、氰基、硝基、氰硫基、羧基、氨基甲?；?、三氟甲基、C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基、C2-C6烯基、C1-C6烷氧基、C3-C8環(huán)烷氧基、C1-C6烷硫基、C1-C3亞烷二氧基、苯基、苯氧基、苯氨基、芐基、苯甲?；?、苯亞磺酰基、苯磺?；?-苯脲基、C2-C7烷?；?、C2-C7烷氧羰基、C2-C7烷酰氧基、C2-C7烷酰氨基、C2-C7N-烷基氨基甲?；1-C6烷磺?；⒈交被柞；?、N，N-二(C1-C6烷基)氨磺?；?、氨基、單(C1-C6烷基)氨基、二(C1-C6烷基)氨基、芐氨基、C2-C7(烷氧羰基)氨基、C1-C6(烷磺酰)氨基、或雙C1-C6(烷磺酰)氨基。
R6代表的C3-C8環(huán)烷基、具有1-3個雜原子的芳族雜環(huán)基和稠合環(huán)，雜原子選自由氧原子、硫原子、氮原子或其組合組成的組，與上述R1所定義的相同，并且相同的實例可以列為優(yōu)選的具體實例。
R6代表的“C3-C8環(huán)烯基”指的是環(huán)狀烯基，例如環(huán)丁烯基、環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基、環(huán)庚烯基和環(huán)辛烯基，具體包括1-環(huán)戊烯基和1-環(huán)己烯基。
其中，苯基、呋喃基和噻吩基可以列為R6代表的優(yōu)選具體實例。
作為R6中苯基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烯基、芐基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基的鹵原子、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、C1-C3亞烷二氧基、C2-C7烷?；?、C2-C7烷氧羰基、C2-C7烷酰氧基、C2-C7烷酰氨基、C2-C7N-烷基氨基甲?；?、C1-C6烷磺酰基、單(C1-C6烷基)氨基和二(C1-C6烷基)氨基與上述R1中苯基、C3-C8環(huán)烷基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基所定義的相同，并且相同的實例可以列為優(yōu)選的具體實例。
作為R6的取代基的C3-C8環(huán)烷基與上述R1代表的C3-C8環(huán)烷基所定義的相同，其中優(yōu)選的具體實例可以給出相同的實例。
作為R6的取代基的“C3-C8環(huán)烷氧基”指的是由上述C3-C8環(huán)烷基和氧基組成的基團，具體例如環(huán)丙氧基、環(huán)戊氧基和環(huán)己氧基。
作為R6的取代基的“N，N-二(C1-C6烷基)氨磺?；敝傅氖潜幌嗤虿煌膬蓚€上述C1-C6烷基取代的氨磺酰基，優(yōu)選地和具體例如N，N-二甲基氨磺?；，N-二乙基氨磺?；蚇-乙基-N-甲基氨磺?；?br> 作為R6的取代基的“C2-C7(烷氧羰基)氨基”指的是由上述C2-C7烷氧羰基和氨基組成的基團，具體例如(甲氧羰基)氨基和(乙氧羰基)氨基。
作為R6的取代基的“C1-C6(烷磺酰)氨基”指的是由上述C1-C6烷磺?；桶被M成的基團，具體例如(甲磺酰)氨基。
作為R6的取代基的“雙(C1-C6烷磺酰)氨基”指的是被相同或不同的兩個上述C1-C6烷磺?；〈陌被瑑?yōu)選地和具體例如雙(甲磺酰)氨基。
其中，鹵原子、巰基、硝基、氰硫基、三氟甲基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、苯基、苯磺?；?、C2-C7烷酰氨基或氨基可以列為上述R6中苯基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烯基、芐基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基的優(yōu)選具體實例。
而且，上述R6中苯基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烯基、芐基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基可選地被一個或多個鹵原子、氰基、羥基、氨基、三氟甲基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、單(C1-C6烷基)氨基或二(C1-C6烷基)氨基取代。
該鹵原子、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、單(C1-C6烷基)氨基和二(C1-C6烷基)氨基與上述R1中苯基、C3-C8環(huán)烷基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基所定義的相同，并且相同的實例可以列為優(yōu)選的具體實例。
(2)發(fā)明2
由上式(I)代表的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽可用于制備本發(fā)明的化學(xué)因子受體拮抗劑，方法是將治療上的有效量與載體和/或稀釋劑配制成藥物組合物。因此，由上式(I)表示的環(huán)胺衍生物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽可以口服或胃腸外給藥，例如靜脈內(nèi)、皮下、肌內(nèi)、經(jīng)皮或直腸內(nèi)給藥。
實現(xiàn)口服給藥的劑型可以是片劑、丸劑、顆粒、藥粉、溶液、混懸液、膠囊等。
制備片劑的方法例如可以使用賦形劑，如乳糖、淀粉和晶性纖維素；黏合劑，如羧甲基纖維素、甲基纖維素和聚乙烯吡咯烷酮；崩解劑，如藻酸鈉、碳酸氫鈉和月桂基硫酸鈉等。
丸劑、藥粉和顆粒劑可以用上述賦形劑按照標(biāo)準(zhǔn)方法制備。溶液或混懸液可以用甘油三辛酸酯和甘油三乙酸酯等甘油酯或乙醇等醇類按照標(biāo)準(zhǔn)方法制備。膠囊可以通過將顆粒、藥粉或溶液裝填在明膠等內(nèi)進行制備。
皮下、肌內(nèi)或靜脈內(nèi)制劑可以用含水或不含水溶液制成注射劑。含水溶液例如可以包括等滲的氯化鈉溶液。不含水溶液例如可以包括丙二醇、聚乙二醇、橄欖油、油酸乙酯等，可選地可以加入抗菌劑和穩(wěn)定劑。注射劑的滅菌方法可以是通過細菌濾器過濾或結(jié)合使用消毒劑。
經(jīng)皮給藥可以是軟膏或霜劑的劑型，軟膏可以用蓖麻油和橄欖油等脂肪油或凡士林按照標(biāo)準(zhǔn)方法制備，霜劑可以用脂肪油或二甘醇和脂肪酸的脫水山梨醇酯等乳化劑進行制備。
直腸內(nèi)給藥可以使用標(biāo)準(zhǔn)的栓劑，用明膠軟膠囊等制得。
本發(fā)明的環(huán)胺衍生物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽的給藥劑量因疾病類型、給藥途徑、患者年齡與性別、和疾病的嚴(yán)重性而異，不過1-500mg/天對普通成人來說是合適的。
(3)貫穿發(fā)明1和發(fā)明2的共同物質(zhì)
上式(I)中環(huán)胺化合物的優(yōu)選具體實例包括具有下表1.1-1.201所示取代基的化合物。
表1.1-1.201中，“手性”指的是環(huán)胺上不對稱碳原子的構(gòu)型?！癛”表示不對稱碳原子具有R構(gòu)型，“S”表示不對稱碳原子具有S構(gòu)型，“-”指的是外消旋物或含氮環(huán)上不具有不對稱碳原子的化合物。
表1.1
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表1.200
表1.201
本發(fā)明也可以使用該環(huán)胺化合物的酸加成鹽，其中的酸例如包括無機酸，如鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、碳酸等，以及有機酸，如馬來酸、檸檬酸、蘋果酸、酒石酸、富馬酸、甲磺酸、三氟乙酸、甲酸等。
而且，本發(fā)明也可以使用該環(huán)胺化合物的C1-C6烷基加成鹽，例如1-(4-氯芐基)-1-甲基-4-[{N-(3-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶鎓碘化物，其中的烷基例如包括甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基、正庚基、正辛基、異丙基、異丁基、仲丁基、叔丁基、異戊基、新戊基、叔戊基、2-甲基戊基、1-乙基丁基等，適當(dāng)?shù)鼐唧w包括甲基和乙基。作為銨陽離子的反離子的優(yōu)選具體實例，可以列舉鹵陰離子，例如氟、氯、溴或碘。
本發(fā)明可以使用由上式(I)代表的化合物的外消旋物和所有可能的旋光活性形式。
由上述通式(I)代表的化合物可以按照下面給出的任意一般制備方法合成。
制備方法1
該方法要求，將一當(dāng)量由下式(II)代表的化合物
(其中R1、R2、R3、j、k、m和n是分別如上式(I)所定義的)用0.1-10當(dāng)量由下式(III)代表的羧酸或其反應(yīng)性衍生物進行處理
(其中R4、R5、R6、G、p和q是分別如上式(I)所定義的)，反應(yīng)在有或沒有溶劑的存在下進行。
上式(III)中羧酸的反應(yīng)性衍生物包括常用于有機化學(xué)合成的高度反應(yīng)性羧酸衍生物，例如酰鹵、酸酐、混合酸酐。
使用適量下列試劑可以使該反應(yīng)進行得更順利脫水劑、如分子篩，偶聯(lián)劑、如二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)、N-乙基-N’-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺(EDCI或WSC)、羰基二咪唑(CDI)、N-羥基琥珀酰亞胺(HOSu)、N-羥基苯并三唑(HOBt)、苯并三唑-1-基氧基三(吡咯烷基)六氟磷酸鏻(PyBOP_)、2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基六氟磷酸脲(HBTU)、2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基四氟硼酸脲(TBTU)、2-(5-降冰片烯-2，3-二羧基亞氨基)-1，1，3，3-四甲基四氟硼酸脲(TNTU)、O-(N-琥珀酰亞胺基)-1，1，3，3-四甲基四氟硼酸脲(TSTU)、溴三(吡咯烷基)六氟磷酸鏻(PyBroP_)等，或基質(zhì)，包括無機鹽、如碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉等，胺、如三乙胺、二異丙基乙胺和吡啶等，或聚合物載體基質(zhì)、如(哌啶子基甲基)聚苯乙烯、(嗎啉代甲基)聚苯乙烯、(二乙氨基甲基)聚苯乙烯、聚(4-乙烯基吡啶)等。
制備方法2
該方法要求，將1當(dāng)量由下式(IV)給出的烷基化劑
(其中R1、R2和j是分別如上式(I)所定義的；X代表鹵原子、烷磺酰氧基或芳磺酰氧基)用0.1-10當(dāng)量由下式(V)代表的化合物進行處理
(其中R3、R4、R5、R6、G、k、m、n、p和q是分別如上式(I)所定義的)，反應(yīng)在有或沒有溶劑的存在下進行。
如果存在類似于上述制備方法1所用的基質(zhì)，該反應(yīng)能進行得更順利。另外，這些制備方法中的反應(yīng)也可以用碘化物促進其進行，例如碘化鉀、碘化鈉等。
上式(IV)中，X代表鹵原子、烷磺酰氧基、芳磺酰氧基。該鹵原子優(yōu)選包括氯、溴和碘原子。烷磺酰氧基的適當(dāng)具體實例包括甲磺酰氧基、三氟甲基磺酰氧基等。芳磺酰氧基的優(yōu)選具體實例包括甲苯磺酰氧基。
制備方法3
該方法要求，將1當(dāng)量由下式(VI)代表的醛
(其中R1和R2是分別如上式(I)所定義的；j代表1或2)或由下式(VII)代表的醛
R1-CHO (VII)
(其中R1是如上式(I)所定義的；j代表0)用0.1-10當(dāng)量由式(V)代表的化合物進行處理，反應(yīng)在還原性條件下，在有或沒有溶劑的存在下進行。
該反應(yīng)一般被稱為還原性胺化反應(yīng)，該還原性條件可以由催化氫化提供，其中使用含有一種金屬的催化劑、例如鈀、鉑、鎳、銠等，使用復(fù)合氫化物、例如氫化鋰鋁、硼氫化鈉、氰基硼氫化鈉、三乙酰氧基硼氫化鈉等，硼烷，或由電解還原提供。
制備方法4
該方法要求，將一當(dāng)量由下式(VIII)代表的化合物
(其中R1、R2、R3、R4、R5、R7、j、k、m、n、p和q是分別如上式(I)所定義的)用0.1-10當(dāng)量由下式(IX)代表的羧酸或磺酸或其反應(yīng)性衍生物進行處理
HO-A-R6 (IX)
(其中R6是如上式(I)所定義的；“A”代表羰基或磺?；?，反應(yīng)在有或沒有溶劑的存在下進行。
上式(IX)中羧酸或磺酸的反應(yīng)性衍生物包括常用于有機化學(xué)合成的高度反應(yīng)性羧酸或磺酸衍生物，例如酰鹵、酸酐、混合酸酐。
使用適量類似于制備方法1所用的脫水劑、偶聯(lián)劑或基質(zhì)可以使該反應(yīng)進行得更順利。
制備方法5
該方法要求，將1當(dāng)量由上式(VIII)代表的化合物用0.1-10當(dāng)量由下式(X)代表的異氰酸酯或異硫氰酸酯進行處理
Z＝C＝N-R6(X)
(其中R6是如上式(I)所定義的；Z代表氧原子或硫原子)，反應(yīng)在有或沒有溶劑的存在下進行。
制備方法6
該方法要求，將1當(dāng)量由下式(XI)代表的化合物
(其中R1、R2、R3、R4、R5、j、k、m、n、p和q是分別如上式(I)所定義的；“A”代表羰基或磺?；?用0.1-10當(dāng)量由下式(XII)代表的胺進行處理
R6-NH2 (IX)
(其中R6是如上式(I)所定義的)，反應(yīng)在有或沒有溶劑的存在下進行。
使用適量類似于制備方法1所用的脫水劑、偶聯(lián)劑或基質(zhì)可以使該反應(yīng)進行得更順利。
在一般有機化學(xué)合成中，如果用于參加上述各制備方法的反應(yīng)物含有在各反應(yīng)條件下反應(yīng)的取代基或者被認為對反應(yīng)產(chǎn)生不利影響，該官能團可以用已知的適當(dāng)保護基團保護起來，然后進行上述制備反應(yīng)，再用已知操作進行去保護，得到所需化合物。
而且，本發(fā)明化合物可以通過進一步轉(zhuǎn)化由上述制備方法1-6制得的化合物的取代基進行制備，轉(zhuǎn)化使用已知的常用于有機化學(xué)合成的反應(yīng)，例如烷基化、?；?、還原等。
上述各制備方法都可以使用反應(yīng)溶劑，例如鹵代烴，如二氯甲烷、氯仿等；芳族烴，如苯、甲苯等；醚，如二乙醚、四氫呋喃等；酯，如乙酸乙酯；極性非質(zhì)子傳遞溶劑，如二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、乙腈等；醇，如甲醇、乙醇、異丙醇等。
各制備方法中的反應(yīng)溫度應(yīng)當(dāng)在-78℃至+150℃范圍內(nèi)，優(yōu)選為0℃-100℃。反應(yīng)完成后，可以進行常用的分離和純化操作，例如濃縮、過濾、萃取、固相萃取、重結(jié)晶、色譜等，以分離所需的由上式(I)代表的環(huán)胺化合物。利用常用方法可將它們轉(zhuǎn)化為藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或C1-C6烷基加成鹽。
潛在的工業(yè)實用性
含有抑制MIP-1α和/或MCP-1等化學(xué)因子對靶細胞作用的本發(fā)明環(huán)胺化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽的化學(xué)因子受體拮抗劑，可用作下列疾病的治療劑和/或預(yù)防劑動脈粥樣硬化、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、氣喘、潰瘍性結(jié)腸炎、腎炎(腎病)、多發(fā)性硬化、肺纖維癥、心肌炎、肝炎、胰腺炎、肉樣瘤病、克羅恩氏病、子宮內(nèi)膜異位、充血性心力衰竭、病毒性腦膜炎、腦梗塞、神經(jīng)病、川崎病、敗血癥等，這些疾病中血液單核細胞、淋巴細胞等的組織浸潤作用在疾病的發(fā)生、發(fā)展和維持中起主要作用。
實施例
現(xiàn)在用下列實施例對本發(fā)明進行具體描述。不過，本發(fā)明不限于這些實施例中描述的這些化合物。這些實施例中的化合物編號與列在表1.1-1.201中的適當(dāng)優(yōu)選化合物實例編號是一致的。
參考例1二鹽酸3-氨基-1-(4-氯芐基)吡咯烷
向3-[(叔丁氧羰基)氨基]吡咯烷(4.81g，25.8mmol)的DMF(50ml)溶液中加入4-氯芐基氯(4.15g，25.8mmol)和iPr2NEt(6.67g，51.6mmol)。反應(yīng)混合物在70℃下攪拌15小時，在減壓下除去溶劑。重結(jié)晶(CH3CN，50ml)得到所需物質(zhì)3-(叔丁氧羰基)氨基-1-(4-氯芐基)吡咯烷，為淡黃色固體(6.43g，80.2％)1H NMR(CDCl3，300Mhz)δ1.37(s，9H)，1.5-1.7(br，1H)，2.1-2.4(m，2H)，2.5-2.7(m，2H)，2.83(br，1H)，3.57(s，2H)，4.1-4.3(br，1H)，4.9-5.1(br，1H)，7.15-7.35(br，4H)；純度用RPLC/MS測定(98％)；ESI/MS m/e 311.0(M++H，C16H24ClN2O2).
將3-(叔丁氧羰基)氨基-1-(4-氯芐基)吡咯烷(6.38g，20.5mmol)的CH3OH(80ml)溶液用1N HCl-Et2O(100ml)處理，在25℃下攪拌15小時。在減壓下除去溶劑，得到一固體，用重結(jié)晶法(1∶2 CH3OH-CH3CN，150ml)純化，得到二鹽酸3-氨基-1-(4-氯芐基)吡咯烷，為白色粉末(4.939g，84.9％)1H NMR(d6-DMSO，300Mhz)δ3.15(br，1H)，3.3-3.75(br-m，4H)，3.9(br，1H)，4.05(br，1H)，4.44(br，1H)，4.54(br，1H)，7.5-7.7(m，4H)，8.45(br，1H)，8.60(br，1H)；純度用RPLC/MS測定(99％)；ESI/MS m/e 211.0(M++H，C11H16ClN2).
依據(jù)上述方法，分別使用相應(yīng)的試劑，也制備了旋光活性的二鹽酸(R)-3-氨基-1-(4-氯芐基)吡咯烷和二鹽酸(S)-3-氨基-1-(4-氯芐基)吡咯烷。產(chǎn)物與外消旋物顯示相同的1H NMR。
實施例13-(N-苯甲?；拾滨?氨基-1-(4-氯芐基)吡咯烷(1號化合物)的制備
向二鹽酸3-氨基-1-(4-氯芐基)吡咯烷(14.2mg，0.050mmol)與Et3N(15.2mg)的CHCl3(2.5ml)溶液中加入N-苯甲?；拾彼?9.9mg，0.055mmol)、鹽酸3-乙基-1-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺(EDCI)(10.5mg)和1-羥基苯并三唑水合物(HOBt)(7.4mg)。反應(yīng)混合物在25℃下攪拌16小時，用2N NaOH水溶液(2ml×2)和鹽水(1ml)洗滌。通過PTFE濾膜過濾后，在減壓下除去溶劑，得到3-(N-苯甲?；拾滨?氨基-1-(4-氯芐基)吡咯烷(1號化合物)，為淡黃色油(17.7mg，95％)。純度用RPLC/MS測定(95％)；ESI/MSm/e 372.0(M++H，C20H22ClN3O2)
實施例2-32
依據(jù)實施例1的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表2中。
表2
*TFA鹽的產(chǎn)量
參考例2(R)-3-[N-(叔丁氧羰基)甘氨酰]氨基-1-(4-氯芐基)吡咯烷的制備
搖動二鹽酸(R)-3-氨基-1-(4-氯芐基)吡咯烷(4.54g，16.0mmol)、2NNaOH溶液(80ml)和乙酸乙酯(80ml)的混合物，分離有機層，含水層用乙酸乙酯萃取(80ml×2)。合并了的有機層經(jīng)無水硫酸鈉干燥，過濾，并蒸發(fā)，得到游離的(R)-3-氨基-1-(4-氯芐基)吡咯烷(3.35g，99％)。
將(R)-3-氨基-1-(4-氯芐基)吡咯烷(3.35g，16mmol)的CH2Cl2(80ml)溶液用Et3N(2.5ml，17.6mmol)、N-叔丁氧羰基甘氨酸(2.79g，16.0mmol)、EDCI(3.07g，16.0mmol)和HOBt(2.16g，16mmol)處理。反應(yīng)混合物在25℃下攪拌16小時后，加入2N NaOH溶液(80ml)。分離有機層，含水層用二氯甲烷萃取(100ml×3)。合并了有機層用水(100ml×2)和鹽水(100ml)洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥，過濾，并濃縮。柱色譜(SiO2，乙酸乙酯)得到所需的(R)-3-[N-(叔丁氧羰基)甘氨酰]氨基-1-(4-氯芐基)吡咯烷(5.40g，92％)。
參考例3(R)-1-(4-氯芐基)-3-(甘氨酰氨基)吡咯烷的制備
向(R)-3-[N-(叔丁氧羰基)甘氨酰]氨基-1-(4-氯芐基)吡咯烷(5.39g，14.7mmol)的甲醇(60ml)溶液中加入4N HCl的二噁烷(38ml)溶液。溶液在室溫下攪拌2小時。反應(yīng)混合物濃縮，加入2N NaOH溶液(80ml)?；旌衔镉枚燃淄檩腿?80ml×3)，合并了的有機萃取液經(jīng)無水硫酸鈉干燥，并濃縮。柱色譜(SiO2，EtOAc/EtOH/Et3N＝90/5/5)得到(R)-1-(4-氯芐基)-3-(甘氨酰氨基)吡咯烷(3.374g，86％)1H NMR(CDCl3，270Mhz)δ1.77(dd，J＝1.3 and 6.9Hz，1H)，2.20-3.39(m，2H)，2.53(dd，J＝3.3 and 9.6Hz，1H)，2.62(dd，J＝6.6 and9.6Hz，1H)，2.78-2.87(m，1H)，3.31(s，2H)，3.57(s，2H)，4.38-4.53(br，1H)，7.18-7.32(m，4H)，7.39(br.s，1H).
依據(jù)參考例2和3的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，也合成了其他3-酰氨基-1-(4-氯芐基)吡咯烷。
(S)-1-(4-氯芐基)-3-(甘氨酰氨基)吡咯烷3.45g，79％(2步)。
(R)-3-(β-丙氨酰氨基)-1-(4-氯芐基)吡咯烷3.79g，85％(2步)。
(S)-3-(β-丙氨酰氨基)-1-(4-氯芐基)吡咯烷3.72g，86％(2步)。
(R)-3-[(S)-丙氨酰氨基]-1-(4-氯芐基)吡咯烷368mg，65％(2步)。
(R)-3-[(R)-丙氨酰氨基]-1-(4-氯芐基)吡咯烷425mg，75％(2步)。
(R)-3-[(2S)-2-氨基-3-噻吩基丙酰]氨基-1-(4-氯芐基)吡咯烷566mg，78％(2步)。
(R)-3-[(2R)-2-氨基-3-噻吩基丙酰]氨基-1-(4-氯芐基)吡咯烷585mg，81％(2步)。
(R)-3-(2-氨基-2-甲基丙酰]氨基-1-(4-氯芐基)吡咯烷404mg，66％(2步)。
(R)-3-[(2S)-2-氨基-4-(甲磺?；?丁酰]氨基-1-(4-氯芐基)吡咯烷535mg，72％(2步)。
而且，依據(jù)參考例1、2和3的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，也合成了(R)-3-(甘氨酰氨基)-1-(4-甲基芐基)吡咯烷、(R)-1-(4-溴芐基)-3-(甘氨酰氨基)吡咯烷、(R)-1-(2，4-二甲基芐基)-3-(甘氨酰氨基)吡咯烷和(R)-1-(3，5-二甲基異噁唑-4-基甲基)-3-(甘氨酰氨基)吡咯烷。
(R)-3-(甘氨酰氨基)-1-(4-甲基芐基)吡咯烷4.65g，以3-[(叔丁氧羰基)氨基]吡咯烷為原料的產(chǎn)率為62％。
(R)-1-(4-溴芐基)-3-(甘氨酰氨基)吡咯烷2.55g，以(R)-3-氨基-1-(4-溴芐基)吡咯烷為原料的產(chǎn)率為68％；1H NMR(CDCl3，270MHz)δ1.37-1.78(m，3H)，2.23-2.39(m，2H)，2.50-2.67(m，2H)，2.80-2.89(m，1H)，3.32(s，2H)，3.58(s，2H)，4.39-4.55(m，1H)，7.21(d，J＝6.5Hz，2H)，7.45(d，J＝6.5Hz，2H).
(R)-1-(2，4-二甲基芐基)-3-(甘氨酰氨基)吡咯烷1.56g，以3-[(叔丁氧羰基)氨基]吡咯烷為原料的產(chǎn)率為58％；1H NMR(CDCl3，270MHz)δ1.55-1.78(m，3H)，2.30(s，3H)，2.23-2.31(m，2H)，2.33(s，3H)，2.51-2.63(m，2H)，2.78-2.87(m，1H)，3.30(s，2H)，3.55(s，2H)，4.38-4.60(m，1H)，6.95(d，J＝7.6Hz，1H)，6.97(s，1H)，7.13(d，J＝7.6Hz，1H)，7.43(br-s，1H).
(R)-1-(3，5-二甲基異噁唑-4-基甲基)-3-(甘氨酰氨基)吡咯烷3.14g，以3-[(叔丁氧羰基)氨基]吡咯烷為原料的產(chǎn)率為45％。
實施例33(S)-3-[N-{3，5-雙(三氟甲基)苯甲?；鶀甘氨酰]氨基-1-(4-氯芐基)吡咯烷(5號化合物)的制備
向(S)-1-(4-氯芐基)-3-(甘氨酰氨基)吡咯烷(0.050mmol)與三乙胺(0.070mmol)的氯仿(1.0ml)溶液中加入3，5-雙(三氟甲基)苯甲酰氯(0.060mmol)的氯仿(0.4ml)溶液。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2.5小時后，加入(氨甲基)聚苯乙烯樹脂(1.04mmol/g，50mg，50mmol)，混合物在室溫下攪拌12小時。反應(yīng)混合物過濾，樹脂用二氯甲烷(0.5ml)洗滌。合并濾液和洗液，加入二氯甲烷(4ml)，溶液用2N NaOH水溶液(0.5ml)洗滌，得到(S)-3-[N-{3，5-雙(三氟甲基)苯甲?；鶀甘氨酰]氨基-1-(4-氯芐基)吡咯烷(5號化合物)(14.4mg，57％)。純度用RPLC/MS測定(97％)；ESI/MS m/e 508.0(M++H，C22H20ClF6N3O2)
實施例34-239
依據(jù)實施例33的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表3中。
表3
實施例240(R)-3-[N-{3-氟-5-(三氟甲基)苯甲?；鶀甘氨酰]氨基-1-(3，5-二甲基異噁唑-4-基甲基)吡咯烷(1191號化合物)的制備
向(R)-1-(3，5-二甲基異噁唑-4-基甲基)-3-(甘氨酰氨基)吡咯烷(0.050mmol)與(哌啶子基甲基)聚苯乙烯(58mg)在氯仿(0.2ml)與二氯甲烷(0.75ml)中的混合物中加入3-氟-5-(三氟甲基)苯甲酰氯(0.058mmol)的二氯甲烷(1ml)溶液。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時后，加入甲醇(1.0ml)，混合物在室溫下攪拌30分鐘。將反應(yīng)混合物裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH(16ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(6ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮，得到(R)-3-[N-{3-氟-5-(三氟甲基)苯甲?；鶀甘氨酰]氨基-1-(3，5-二甲基異噁唑-4-基甲基)吡咯烷(1191號化合物)(19.5mg，88％)。純度用RPLC/MS測定(100％)；ESI/MS m/e 443.2(M++H，C20H22F4N4O3)
實施例241-265
依據(jù)實施例240的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表4中。
表4
實施例266(R)-1-(4-氯芐基)-3-[{N-(4-(二甲氨基)苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷(952號化合物)的制備
將(R)-1-(4-氯芐基)-3-(甘氨酰氨基)吡咯烷(13.8mg，0.052mmol)的CHCl3(2ml)溶液用Et3N(0.021ml，0.15mmol)、4-(二甲氨基)苯甲酸(10mg，0.061mmol)、EDCI(10.2mg，0.053mmol)和HOBt(7.5mg，0.055mmol)處理。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16小時。溶液用2N NaOH水溶液(2ml×2)和鹽水(2ml)洗滌，用CH2Cl2(3ml)通過PTFE膜過濾進行干燥。濃縮得到所需物質(zhì)(952號化合物)(24.9mg，定量)。純度用RPLC/MS測定(91％)；ESI/MS m/e415.0(M++H，C22H27ClN4O2)
實施例267-347
依據(jù)實施例266的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。必要時使用固相萃取法(VarianTM SCX柱)或色譜法(HPLC-C18)得到所需物質(zhì)。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表5中。
表5
*TFA鹽的產(chǎn)量
實施例348(R)-1-(4-氯芐基)-3-[{N-(2-氨基-5-氯苯甲?；?甘氨酰)氨基]吡咯烷(1084號化合物)的制備
將(R)-1-(4-氯芐基)-3-(甘氨酰氨基)吡咯烷(0.050mmol)的CHCl3(2ml)溶液用2-氨基-5-氯苯甲酸(0.060mmol)和二異丙基碳二亞胺(0.060mmol)處理。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌15小時。將反應(yīng)混合物裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH(15ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮，得到(R)-1-(4-氯芐基)-3-[{N-(2-氨基-5-氯苯甲酰基)甘氨酰}氨基]吡咯烷(1084號化合物)(12.7mg，60％)。純度用RPLC/MS測定(87％)；ESI/MS m/e421.0(M++H，C20H22Cl2N4O2)
實施例349-361
依據(jù)實施例348的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。如果殘留原料胺，在室溫下用異氰酰甲基化的聚苯乙烯(50mg)的CHCl3(1ml)溶液處理，過濾，并濃縮，得到所需物質(zhì)。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表6中。
表6
實施例362(R)-1-(4-氯芐基)-3-[{N-(3-溴-4-甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷(1098號化合物)的制備
將(R)-1-(4-氯芐基)-3-(甘氨酰氨基)吡咯烷(0.050mmol)的CHCl3(1.35ml)與叔丁醇(0.15ml)溶液用3-溴-4-甲基苯甲酸(0.060mmol)、二異丙基碳二亞胺(0.060mmol)和HOBt(0.060mmol)處理。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌15小時。將反應(yīng)混合物裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH/CHCl3 1∶1(12ml)和CH3OH(12ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮，得到(R)-1-(4-氯芐基)-3-[{N-(3-溴-4-甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷(1098號化合物)(11.6mg，50％)。純度用RPLC/MS測定(94％)；ESI/MS m/e 466.0(M++H，C21H23BrClN3O2)
實施例363-572
依據(jù)實施例362的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。必要時使用制備型TLC得到所需物質(zhì)。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表7中。
作為1415、1416和1417號化合物的副產(chǎn)物，分別得到下列3種化合物。
14197.9mg，產(chǎn)率38％；ESI/MS m/e 419.0(C20H23ClN4O2S)
14207.1mg，產(chǎn)率36％；ESI/MS m/e 399.2(C21H26N4O2S)
14217.4mg，產(chǎn)率37％；ESI/MS m/e 404.2(C19H25N5O3S)
表7
例如，1583號化合物顯示下列NMR譜
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.64-1.72(m，1H)，2.20-2.30(m，1H)，2.41-2.51(m，2H)，2.71-2.78(m，2H)，3.59(dd，J＝15.4，12.9Hz，2H)，3.94(s，2H)，4.35-4.41(m，1H)，6.82(d，J＝8.6Hz，1H)，7.29(s，4H)，7.40(dd，J＝8.6，1.7Hz，1H)，7.85(d，J＝0.96Hz，1H).
參考例4(S)-3-[N-{3-(三氟甲基)苯甲?；鶀甘氨酰]氨基吡咯烷的制備
將(S)-1-(4-氯芐基)-3-[N-{3-(三氟甲基)苯甲酰基}甘氨酰]氨基吡咯烷(2.93g，6.66mmol)與Pd(OH)2在5％HCO2H/甲醇(70ml)中的混懸液在60℃下攪拌3小時。通過硅藻土濾出Pd催化劑，濾液濃縮。向殘余物中加入2NNaOH水溶液(100ml)，混合物用乙酸乙酯萃取(100ml×3)。合并了的萃取液用鹽水洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥，過濾，并濃縮。柱色譜(SiO2，EtOAc/MeOH/Et3N＝85/10/5-60/30/5)得到(S)-3-[N-{3-(三氟甲基)苯甲?；鶀甘氨酰]氨基吡咯烷(1.70g，81％)，為一種油 1HNMR(CDCl3，270MHz)δ1.76(d，J＝7.3Hz，1H)，2.07-2.25(m，1H)，2.81-2.98(m，2H)，3.02-3.11(m，2H)，4.12(s，2H)，4.41(br，1H)，6.90(br，1H)，7.45(br，1H)，7.58(dd，J＝7.3 and 7.3Hz，1H)，7.77(d，J＝7.3Hz，1H)，8.02(d，J＝7.3Hz，1H)，8.11(s，1H)；ESI/MS m/e 316.0(M++H，C14H16F3N3O2).
依據(jù)上述方法，使用相應(yīng)的試劑，也制備了(R)-3-[N-{3-(三氟甲基)苯甲?；鶀甘氨酰]氨基吡咯烷1.49g，68％；該產(chǎn)物顯示與(S)-異構(gòu)體相同的1H NMR和ESI/MS。
依據(jù)上述方法，使用相應(yīng)的試劑，也制備了(R)-3-[N-{2-氨基-5-(三氟甲基)苯甲酰基}甘氨酰]氨基吡咯烷316mg，93％；ESI/MS m/e 331.2(M++H，C14H17F3N4O2)。
依據(jù)上述方法，使用相應(yīng)的試劑，也制備了(R)-3-[N-{2-(叔丁氧羰基氨基)-5-(三氟甲氧基)苯甲?；鶀甘氨酰]氨基吡咯烷定量； 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.51(s，9H)，1.60-1.70(m，2H)，2.10-2.25(m，1H)，2.80-2.88(m，1H)，2.89-2.98(m，1H)，3.04-3.18(m，2H)，4.05(d，J＝4.9Hz，2H)，4.43(br，1H)，6.15(br，1H)，7.03(br，1H)，7.32(d，J＝9.3Hz，1H)，7.38(5，1H)，8.42(d，J＝9.3Hz，1H).
實施例573(R)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基]-1-(4-氯芐基)吡咯烷的制備
將(R)-1-(4-氯芐基)-3-(甘氨酰氨基)吡咯烷(5.0g，18.7mmol)的二氯甲烷(100ml)溶液用Et3N(2.9ml，20.5mmol)、2-(叔丁氧羰基氨基)-5-(三氟甲基)苯甲酸(6.27g，20.5mmol)、EDCI(3.9g，20.5mmol)和HOBt(2.8g，20.5mmol)處理。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜。向反應(yīng)混合物中加入2N NaOH水溶液(80ml)，混合物用二氯甲烷萃取。萃取液經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾，并蒸發(fā)。柱色譜(SiO2，己烷/乙酸乙酯＝1/1-1/4)得到(R)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-(4-氯芐基)吡咯烷(9.41g，91％)，為白色無定形固體ESI/MS m/e 555.2(M++H，C26H30ClF3N4O4)。
參考例5(R)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷的制備
將(R)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基]-1-(4-氯芐基)吡咯烷(6.3g，11.4mmol)、Pd(OH)2(1.68g)、HCO2H(3.7ml)和甲醇(80ml)的混合物在50℃下攪拌過夜?；旌衔锢鋮s至室溫后，通過硅藻土濾出Pd催化劑，濾液濃縮。柱色譜(SiO2，AcOEt，AcOEt/MeOH＝5/1-4/1)得到(R)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基]吡咯烷(4.42g，90％)，為白色固體1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.48(s，9H)，2.0-2.4(m，2H)，3.42-3.71(m，5H)，4.00-4.22(m，2H)，4.56(br，1H)，7.48(d，J＝9.0Hz，1H)，7.93(s，1H)，8.17(br，1H)，8.33(d，J＝9.0Hz，1H)，8.45(br，1H).
實施例574(S)-1-芐基-3-[N-{3-(三氟甲基)苯甲?；鶀甘氨酰]氨基吡咯烷(239號化合物)的制備
向芐基溴(0.050mmol)的CH3CN(0.4ml)溶液中加入(S)-3-[N-{3-(三氟甲基)苯甲酰基}甘氨酰]氨基吡咯烷(0.060mmol)在CH3CN(1.1ml)與哌啶子基甲基聚苯乙烯(2.6-2.8mmol/g，30mg)中的溶液。反應(yīng)混合物在45℃下攪拌5小時。混合物冷卻至室溫后，過濾除去樹脂，濾液濃縮。將殘余物溶于CH3CN(1.0ml)，加入異氰酸苯基酯(0.008ml，0.05mmol)。混合物在室溫下攪拌1小時，裝上VarianTMSCX柱，用CH3OH(15ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(6ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮，得到(S)-1-芐基-3-[N-{3-(三氟甲基)苯甲酰基}甘氨酰]氨基吡咯烷(239號化合物)(9.0mg，44％)純度用RPLC/MS測定(99％)；ESI/MS m/e 406.0(M++H，C21H22F3N3O2)。
實施例575(R)-1-(4-丁基芐基)-3-[{N-(3-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基]吡咯烷(1648號化合物)的制備
向(R)-3-[N-{3-(三氟甲基)苯甲?；鶀甘氨酰]氨基吡咯烷(0.050mmol)、4-丁基苯甲醛(0.18mmol)、NaBH3CN(0.23mmol)和甲醇(1.85ml)的混合物中加入乙酸(0.060ml)。反應(yīng)混合物在60℃下攪拌12小時?；旌衔锢鋮s至室溫，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH(15ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮，得到(R)-1-(4-丁基芐基)-3-[{N-(3-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷(1648號化合物)(20.6mg，89％)純度用RPLC/MS測定(91％)；ESI/MS m/e 462.2(M++H，C25H30F3N3O2)。
實施例576-738
依據(jù)實施例574或575的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。必要時使用制備型TLC或色譜法(HPLC-C18)得到所需物質(zhì)。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表8中。
表8
*TFA鹽的產(chǎn)量
實施例739-748
依據(jù)實施例738的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。必要時使用制備型TLC得到所需物質(zhì)。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表9中。
表9
實施例749(R)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲氧基苯甲酰基)甘氨酰}氨基]-1-(3-羥基-4-甲氧基芐基)吡咯烷(1896號化合物)的制備
向(R)-3-[N-{2-(叔丁氧羰基氨基)-5-(三氟甲氧基)苯甲?；鶀甘氨酰]氨基吡咯烷(0.050mmol)、3-羥基-4-甲氧基苯甲醛(0.060mmol)、NaBH3CN(0.15mmol)和甲醇(1.3ml)的混合物中加入乙酸(0.050ml)。反應(yīng)混合物在60℃下攪拌8小時?；旌衔锢鋮s至室溫，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH(10ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。向所得物質(zhì)中加入4N HCl的1，4-二噁烷溶液，溶液在室溫下攪拌過夜。經(jīng)過濃縮和制備型TLC得到(R)3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲氧基苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-(3-羥基-4-甲氧基芐基)吡咯烷(1896號化合物)(9.1mg，38％)純度用RPLC/MS測定(93％)；ESI/MS m/e 483(M++H，C22H25F3N4O5)。
實施例750-757
依據(jù)實施例749的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表10中。
表10
實施例758(R)-3-[{N-(2-氨基-5-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-(4-乙烯基芐基)吡咯烷(1701號化合物)的制備
將(R)-3-[{N-(2-氨基-5-(三氟甲基)苯甲酰基)甘氨酰}氨基]吡咯烷(0.050mmol)、4-乙烯基芐基氯(9.9mg，0.065mmol)、哌啶子基甲基聚苯乙烯(60mg)、乙腈(1.0ml)和氯仿(0.30ml)的混合物在50℃下攪拌12小時。反應(yīng)混合物冷卻，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH(15ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮，得到(R)-3-[{N-(2-氨基-5-(三氟甲基)苯甲酰基)甘氨酰}氨基]-1-(4-乙烯基芐基)吡咯烷(1701號化合物)(19.6mg，88％)純度用RPLC/MS測定(92％)；ESI/MS m/e 547.2(M++H，C23H25ClF3N4O2)。
實施例759-762
依據(jù)實施例758的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。必要時使用制備型TLC得到所需物質(zhì)。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表11中。
表11
實施例763(R)-3-[{N-(2-氨基-5-(三氟甲氧基)苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-(2，4-二氯芐基)吡咯烷(1905號化合物)的制備
將(R)-3-[{N-(2-氨基-5-(三氟甲氧基)苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷(0.050mmol)、2，4-二氯芐基氯(0.060mmol)、哌啶子基甲基聚苯乙烯(60mg)、乙腈(0.8ml)和氯仿(0.50ml)的混合物在60℃下攪拌12小時。反應(yīng)混合物冷卻，裝上VarianTM SCX柱，用50％CHCl3/CH3OH(10ml)和CH3OH(10ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，溶液在室溫下攪拌過夜。經(jīng)過濃縮和制備型TLC，得到(R)-3-[{N-(2-氨基-5-(三氟甲氧基)苯甲酰基)甘氨酰}氨基]-1-(2，4-二氯芐基)吡咯烷(1905號化合物)(17.6mg，70％)純度用RPLC/MS測定(93％)；ESI/MS m/e 505(M++H，C21H21Cl2F3N4O3)。
實施例764-770
依據(jù)實施例763的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表12中。
表12
實施例771(R)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲氧基苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-(2-氨基-4-氯芐基)吡咯烷(1921號化合物)的制備
將(R)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲氧基苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷(0.050mmol)、4-氯-2-硝基芐基氯(0.050mmol)、哌啶子基甲基聚苯乙烯(60mg)、乙腈(1.0ml)和氯仿(0.7ml)的混合物在50℃下攪拌過夜。反應(yīng)混合物冷卻，裝上VarianTM SCX柱，用50％CHCl3/CH3OH(10ml)和CH3OH(10ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。向所得物質(zhì)中加入乙醇(3ml)和10％Pd-C(15mg)，混合物在室溫H2下攪拌1.5小時。經(jīng)過過濾、濃縮和制備型TLC，得到(R)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲氧基苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-(2-氨基-4-氯芐基)吡咯烷(1921號化合物)(2.2mg，6％)純度用RPLC/MS測定(81％)；ESI/MS m/e 486.2(M++H，C21H23ClF3N5O3)。
實施例772(R)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-(2-溴-4-氟芐基)吡咯烷(2120號化合物)的制備
向(R)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷(0.050mmol)、4-溴-2-氟苯甲醛(0.15mmol)、甲醇(1.5ml)和乙酸(0.016ml)的混合物中加入NaBH3CN(0.25mmol)的甲醇(0.50ml)溶液。反應(yīng)混合物在50℃下攪拌過夜?；旌衔锢鋮s至室溫，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH洗滌(5ml×2)。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。將殘余物溶于甲醇(0.25ml)，加入4N HCl的二噁烷(0.50ml)溶液。溶液在室溫下攪拌5小時，并濃縮。將殘余物溶于甲醇，裝上VarianTMSCX柱，用CH3OH洗滌(5ml×2)。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。將所得物質(zhì)溶于乙酸乙酯(0.5ml)，裝上VarianTMSi柱，用乙酸乙酯/甲醇＝5∶1(6ml)洗脫，并濃縮，得到(R)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基]-1-(2-溴-4-氟芐基)吡咯烷(2120號化合物)(16.0mg，31％)純度用RPLC/MS測定(99％)；ESI/MS m/e 517.0(M++H，C21H21BrF4N4O2)。
實施例773-793
依據(jù)實施例772的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表13中。
表13
實施例794(R)3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基]-1-(2，4-二甲氧基嘧啶-5-基甲基)吡咯烷(2175號化合物)的制備
將(R)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷(17.2mg，0.04mmol)溶于THF(1ml)，加入2，4-二甲氧基-5-嘧啶甲醛(6.7mg，0.04mmol)，然后加入三乙酰氧基硼氫化鈉(12.7mg，0.06mmol)和冰乙酸(2.4mg，0.04mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?4小時，并蒸發(fā)。然后將殘余物溶于二氯甲烷(1ml)，用1N NaOH溶液(1ml)洗滌?；厥沼袡C相，蒸發(fā)，然后在室溫下用25％三氟乙酸的二氯甲烷(1ml)溶液處理1小時，并蒸發(fā)。殘余物用LC/MS純化，得到(R)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-(2，4-二甲氧基嘧啶-5-基甲基)吡咯烷(2175號化合物)(18.6mg，78％)純度用RPLC/MS測定(98％)；ESI/MS m/e 483(M++H，C21H25F3N6O4)。
實施例795-803
依據(jù)實施例794的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表14中。
表14
實施例804(R)-1-(2-氨基-4，5-亞甲二氧基芐基)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷(2127號化合物)的制備
將(R)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-(4，5-亞甲二氧基-2-硝基芐基)吡咯烷(30.5mg)、10％Pd-活性碳(6mg)和甲醇(3ml)的混合物在室溫氫氣氛下攪拌10小時。通過硅藻土濾出Pd催化劑，濾液濃縮。固相萃取(Bond ElutTM SI，20％甲醇/AcOEt)，得到(R)-1-(2-氨基-4，5-亞甲二氧基芐基)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷(2127號化合物)(21.9mg，76％)純度用RPLC/MS測定(95％)；ESI/MS m/e 480.1(M++H，C22H24F3N5O4)。
實施例805和806
依據(jù)實施例804的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表15中。
表15
實施例807(R)-1-(3-氨基-4-氯芐基)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷(2132號化合物)的制備
將(R)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-(4-氯-3-硝基芐基)吡咯烷(32.6mg)、10％Pd-活性碳(8mg)、乙酸乙酯(2.7ml)和甲醇(0.3ml)的混合物在室溫氫氣氛下攪拌15小時。濾出Pd催化劑，濾液濃縮。固相萃取(Bond ElutTM SI，20％甲醇/AcOEt)，得到(R)-1-(3-氨基-4-氯芐基)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷(2132號化合物)(10.5mg，34％)純度用RPLC/MS測定(84％)；ESI/MS m/e 470.2(M++H，C21H23ClF3N5O2)。
實施例808(R)-1-(2-氨基-4，5-亞甲二氧基芐基)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷的制備
向(R)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基]吡咯烷(0.150mmol)、4，5-亞甲二氧基-2-硝基苯甲醛(0.45mmol)、甲醇(4.5ml)和乙酸(0.048ml)的混合物中加入NaBH3CN(0.75mmol)的甲醇(1.50ml)溶液。反應(yīng)混合物在50℃下攪拌過夜。混合物冷卻至室溫，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH洗滌。用2N NH3的CH3OH溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮，得到(R)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-(4，5-亞甲二氧基-2-硝基芐基)吡咯烷。
將上面制備的(R)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-(4，5-亞甲二氧基-2-硝基芐基)吡咯烷、10％Pd-活性碳(22mg)和甲醇(3.0ml)的混合物在室溫氫氣氛下攪拌過夜。濾出Pd催化劑，濾液濃縮，得到(R)-1-(2-氨基-4，5-亞甲二氧基芐基)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基]吡咯烷(87.1mg，定量)TLC沒有檢測到任何明顯的副產(chǎn)物。
依據(jù)實施例808的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，也合成了(R)-1-(3-氨基-4-甲氧基芐基)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷和(R)-1-(3-氨基-4-甲基芐基)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷。
(R)-1-(3-氨基-4-甲氧基芐基)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷101mg，定量；TLC沒有檢測到任何明顯的副產(chǎn)物。
(R)-1-(3-氨基-4-甲基芐基)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基]吡咯烷97.2mg，定量；TLC沒有檢測到任何明顯的副產(chǎn)物。
實施例809(R)-1-(3-氨基-4-氯芐基)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷的制備
向(R)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷(0.150mmol)、4-氯-3-硝基苯甲醛(0.45mmol)、甲醇(4.5ml)和乙酸(0.048ml)的混合物中加入NaBH3CN(0.75mmol)的甲醇(1.50ml)溶液。反應(yīng)混合物在50℃下攪拌過夜?；旌衔锢鋮s至室溫，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH洗滌。用2N NH3的CH3OH溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮，得到(R)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-(4-氯-3-硝基芐基)吡咯烷。
將上面制備的(R)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-(4-氯-3-硝基芐基)吡咯烷、10％Pd-活性碳(22mg)、乙酸乙酯(2.7ml)和甲醇(0.3ml)的混合物在室溫氫氣氛下攪拌15小時。濾出Pd催化劑，濾液濃縮，得到(R)-1-(3-氨基-4-氯芐基)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷(89.7mg，定量)TLC沒有檢測到任何明顯的副產(chǎn)物。
實施例810(R)-1-(3-氨基-4-羥基芐基)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷(2187號化合物)的制備
將依據(jù)實施例808方法制備的(R)-1-(3-氨基-4-羥基芐基)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基]吡咯烷(20mg)的4N HCl二噁烷(2.0ml)溶液在室溫下攪拌過夜。溶液濃縮后，將殘余物溶于甲醇，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH洗滌，用2N NH3的CH3OH溶液洗脫。經(jīng)過濃縮和制備型TLC(SiO2，AcOEt/MeOH＝4/1)得到(R)-1-(3-氨基-4-羥基芐基)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷(2187號化合物)(9.6mg，59％)純度用RPLC/MS測定(86％)；ESI/MS m/e 452.3(M++H，C21H24F3N5O3)。
實施例811(R)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-{4-氯-3-(二甲氨基)芐基}吡咯烷(2133號化合物)的制備
向(R)-1-(3-氨基-4-氯芐基)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基]吡咯烷(44.9mg)、甲醇(0.95ml)、乙酸(0.05ml)和37％HCHO水溶液(0.15ml)的混合物中加入NaBH3CN(38mg)。反應(yīng)混合物在50℃下攪拌過夜?；旌衔锢鋮s至室溫，并蒸發(fā)。向殘余物中加入2N NaOH水溶液和乙酸乙酯，分離有機層，含水層用乙酸乙酯萃取。合并了的有機層干燥并濃縮，將殘余物裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH洗滌。用2N NH3的CH3OH溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。將殘余物溶于50％濃HCl/二噁烷，溶液在室溫下攪拌1小時。用5NNaOH水溶液調(diào)反應(yīng)混合物的pH為10，用乙酸乙酯萃取(2次)。合并了的萃取液經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，并蒸發(fā)。經(jīng)過制備型TLC(SiO2，20％MeOH/AcOEt)得到(R)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-{4-氯-3-(二甲氨基)芐基}吡咯烷(2133號化合物)(10.9mg，28％)純度用RPLC/MS測定(95％)；ESI/MS m/e 498.3(M++H，C23H27ClF3N5O2)。
實施例812-814
依據(jù)實施例811的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表16中。
表16
實施例815(R)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-(3-甲氨基-4-羥基芐基)吡咯烷(2158號化合物)的制備
向(R)-1-(3-氨基-4-羥基芐基)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基]吡咯烷(27.3mg，0.049mmol)、37％HCHO溶液(4.0mg，0.049mmol)、乙酸(0.10ml)和甲醇(1.3ml)的混合物中加入NaBH3CN(9.2mg)的甲醇(0.2ml)溶液。反應(yīng)混合物在60℃下攪拌過夜?；旌衔锢鋮s至室溫，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH洗滌(5ml×2)。用2N NH3的CH3OH(8ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。
將所得物質(zhì)溶于甲醇(1ml)，加入4N HCl的二噁烷(1.0ml)溶液。溶液在室溫下攪拌3小時。溶液濃縮后，將殘余物溶于甲醇(1ml)，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH洗滌(5ml×2)，用2N NH3的CH3OH(8ml)溶液洗脫。經(jīng)過濃縮和制備型TLC(SiO2)得到(R)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基]-1-(3-甲氨基-4-羥基芐基)吡咯烷(2158號化合物)(4.3mg，19％)純度用RPLC/MS測定(71％)；ESI/MS m/e 480.3(M++H，C22H26F3N5O3)。
實施例816(R)-1-(3-乙酰氨基-4-甲氧基芐基)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷(2152號化合物)的制備
向(R)-1-(3-氨基-4-甲氧基芐基)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基]吡咯烷(50.5mg)的吡啶(1ml)溶液中加入乙酸酐(1ml)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜，加入甲醇?；旌衔镎舭l(fā)，加入1N NaOH溶液?；旌衔镉靡宜嵋阴ポ腿。袡C層濃縮。經(jīng)過制備型TLC得到(R)-1-(3-乙酰氨基-4-甲氧基芐基)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基]吡咯烷。
將所得(R)-1-(3-乙酰氨基-4-甲氧基芐基)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基]吡咯烷溶于50％6N鹽酸的二噁烷溶液，溶液在室溫下攪拌2小時。用5M NaOH溶液調(diào)混合物的pH為10，用乙酸乙酯萃取。有機層蒸發(fā)，經(jīng)過制備型TLC(SiO2，AcOEt/MeOH＝4∶1)得到(R)-1-(3-乙酰氨基-4-甲氧基芐基)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷(2152號化合物)(3.7mg，8％)純度用RPLC/MS測定(100％)；ESI/MS m/e 508.3(M++H，C24H28F3N5O4)。
實施例817-819
依據(jù)實施例816的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表17中。
表17
實施例820(R)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基]-1-(苯并[d]噁唑-5-基)吡咯烷(2189號化合物)的制備
將依據(jù)實施例808方法制備的(R)-1-(3-氨基-4-羥基芐基)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷(20mg)的THF(2ml)溶液用原甲酸三乙酯(0.020ml，3.3當(dāng)量)和吡啶鎓對甲苯磺酸酯(1.2mg，0.4當(dāng)量)處理。反應(yīng)混合物在回流下攪拌過夜。冷卻至室溫后，混合物濃縮。將殘余物溶于AcOEt，裝上BondElutTMSi柱，用乙酸乙酯/甲醇＝4/1洗脫，并濃縮。
將所得物質(zhì)溶于AcOEt(1.5ml)，加入4N HCl的二噁烷(0.5ml)溶液。溶液在室溫下攪拌過夜，用5MNaOH水溶液調(diào)pH為10，用AcOEt萃取。萃取液濃縮，用PTLC純化(SiO2，AcOEt/MeOH＝4∶1)，得到(R)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基]-1-(苯并[d]噁唑-5-基)吡咯烷(2189號化合物)(0.5mg，3％)純度用RPLC/MS測定(97％)；ESI/MS m/e 462.3(M++H，C22H22F3N5O3)。
實施例821(R)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基]-1-(苯并[c]噻二唑-5-基)吡咯烷(2183號化合物)的制備
向5-(羥甲基)苯并[c]噻二唑(8.3mg，0.050mmol)、(哌啶子基甲基)聚苯乙烯(86mg)和氯仿(1ml)的混合物中加入甲磺酰氯(0.0042ml)，混合物在室溫下攪拌1.5小時。加入乙腈(1ml)和(R)-3-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]吡咯烷(0.060mmol)，反應(yīng)混合物在50℃下攪拌3小時。冷卻至室溫后，加入異氰酸苯基酯(30mg)，混合物在室溫下攪拌1小時，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH(5ml)和CHCl35ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(3ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。
將所得物質(zhì)溶于二氯甲烷(1ml)，加入1M氯三甲基硅烷和1M苯酚的二氯甲烷(1ml)溶液。溶液在室溫下攪拌5小時，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH和二氯甲烷洗滌。用2N NH3的CH3OH溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。經(jīng)過制備型TLC(SiO2，AcOEt/MeOH＝3∶1)得到(R)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-(苯并[c]噻二唑-5-基)吡咯烷(2183號化合物)(11.5mg，48％)純度用RPLC/MS測定(86％)；ESI/MS m/e 479.2(M++H，C21H21F3N6O2S)。
參考例64-[{N-(1-(9-芴基(fuluorenyl)甲氧羰基)吡咯烷-3-基)氨基甲酰基甲基}氨甲基]-3-甲氧基苯氧基甲基-聚苯乙烯的制備
向鹽酸(R)-1-(9-芴基甲氧羰基)-3-甘氨酰氨基吡咯烷(4.38g，10mmol)的DMF(65ml)溶液中加入乙酸(0.3ml)、三乙酰氧基硼氫化鈉(1.92g)和4-甲?；?3-(甲氧基苯氧基甲基)-聚苯乙烯(1mmol/g，200g)?；旌衔飺u動2小時，過濾。樹脂用MeOH、DMF、CH2Cl2和甲醇洗滌，干燥，得到所需物質(zhì)(2.73g)。
實施例822-912用于3-氨基吡咯烷的固相合成的通用操作
向相應(yīng)的酸(1.6mmol)、HBTU(1.6mmol)和DMF(6ml)的混合物中加入二異丙基乙胺(3.6mmol)，混合物搖動2分鐘。加入4-[{N-(1-(9-芴基(fuluorenyl)甲氧羰基)吡咯烷-3-基)氨基甲?；谆鶀氨甲基]-3-甲氧基苯氧基甲基-聚苯乙烯(400mg，0.4mmol)，混合物搖動1小時，過濾。樹脂用DMF和CH2Cl2漂洗，干燥。
將所得樹脂、吡咯烷(原文為哌啶——譯者注)(3.2ml)和DMF(12.8ml)的混合物搖動10分鐘，過濾。樹脂用DMF和CH2Cl2洗滌，干燥。
向干燥樹脂(0.05mmol)中加入NaBH(OAc)3(0.25mmol)、AcOH(0.025mmol)和DMF(1ml)的混合物。加入相應(yīng)的醛(2.5mmol)，混合物搖動2小時，然后過濾，用CH3OH、10％二異丙乙胺的DMF溶液、DMF、CH2Cl2和CH3OH洗滌。將樹脂、水(0.050ml)和三氟乙酸(0.95ml)的混合物搖動1小時，過濾。樹脂用CH2Cl2和CH3OH洗滌。合并濾液和洗液，濃縮。將粗物質(zhì)裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH(15ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，濃縮。必要時使用制備型TLC或HPLC，得到所需物質(zhì)。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表18中。
表18
*TFA鹽的產(chǎn)量
參考例72-氨基甲?；?1-(4-氯芐基)吡咯烷的制備
將鹽酸dl-脯氨酰胺(2.5g，21.8mmol)的CH3CN(35ml)溶液用Et3N(7.45ml)和4-氯芐基氯(3.88g，24.1mmol)處理。反應(yīng)混合物在70℃下攪拌4小時，然后在25℃下攪拌16小時。所得混合物用CH2Cl2(20ml)稀釋，用水洗滌(3×30ml)。有機相干燥(MgSO4)并濃縮。經(jīng)過色譜法(SiO2，1％CH3OH-CH2Cl2)得到2-氨基甲酰基-1-(4-氯芐基)吡咯烷(5.21g，81％)。
參考例82-(氨甲基)-1-(4-氯芐基)吡咯烷的制備
將2-氨基甲酰基-1-(4-氯芐基)吡咯烷溶于1M BH3-THF(9.4ml)，加熱至70℃。16小時和25小時后，另加入0.5當(dāng)量1M BH3-THF。40小時后，加入1N HCl水溶液(14ml)，反應(yīng)物加熱回流3小時，加入3N HCl水溶液(6ml)，反應(yīng)物再加熱3小時。反應(yīng)混合物冷卻至25℃，用4N NaOH水溶液堿化，用CH2Cl2萃取(4×15ml)。經(jīng)過色譜法(SiO2，8∶1∶1 iPrOH-H2O-NH4OH)得到2-(氨甲基)-1-(4-氯芐基)吡咯烷(1.21g，86％)。
依據(jù)上述方法，分別使用相應(yīng)的試劑，也制備了旋光活性的(S)-2-(氨甲基)-1-(4-氯芐基)吡咯烷和(R)-2-(氨甲基)-1-(4-氯芐基)吡咯烷。
(S)-2-(氨甲基)-1-(4-氯芐基)吡咯烷 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.40-1.80(m，5H)，1.80-1.95(m，1H)，2.12-2.21(m，1H)，2.48-2.65(m，1H)，2.66-2.78(m，2H)，2.85-2.95(m，1H)，3.26(d，J＝13.2Hz，1H)，3.93(d，J＝13.2Hz，1H)，7.20-7.40(m，4H).
(R)-2-(氨甲基)-1-(4-氯芐基)吡咯烷顯示與(S)-異構(gòu)體相同的1H NMR。
實施例9132-{(N-苯甲?；涟滨?氨基甲基}-1-(4-氯芐基)吡咯烷(344號化合物)的制備
將2-(氨甲基)-1-(4-氯芐基)吡咯烷(22.5mg，0.10mmol)和dl-苯甲酰亮氨酸(0.12mmol)的CHCl3(1ml)溶液用EDCI(23mg)、HOBt(16.2mg)和Et3N(15.2μl)處理，在25℃下攪拌16小時。反應(yīng)混合物用CH2Cl2(0.5ml)稀釋，用2N NaOH水溶液洗滌(2×0.75ml)，通過PTFE膜過濾進行干燥，并濃縮，得到2-{(N-苯甲?；涟滨?氨基甲基}-1-(4-氯芐基)吡咯烷(344號化合物)(74mg，定量)純度用RPLC/MS測定(85％)；ESI/MS m/e 442(M++H，C25H32ClN3O2)。
實施例914-935
依據(jù)實施例913的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。必要時使用色譜法(HPLC-C18，CH3CN/H2O/TFA)得到所需物質(zhì)的TFA鹽。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表19中，339和34O號化合物分別顯示如下1HNMR譜。
表19
*TFA鹽的產(chǎn)量
實施例934339號化合物82％； 1H NMR(CDCl3)δ1.52-1.75(m，4H)，1.84-1.95(m，1H)，2.10-2.20(m，1H)，2.67-2.78(m，1H)，2.80-2.90(m，1H)，3.10-3.20(m，1H)，3.25(d，J＝13.1Hz，1H)，3.50-3.60(m，1H)，3.89(d，J＝13.1Hz，1H)，4.28-4.20(m，2H)，7.00-7.05(m，1H)，7.12-7.29(m，4H)，7.51(t，J＝7.8Hz，1H)，7.74(d，J＝7.8Hz，1H)，7.99(d，J＝7.8Hz，1H)，8.10-8.27(m，2H).
實施例935340號化合物68％； 1H NMR(CDCl3)δ1.55-1.73(m，4H)，1.86-1.97(m，1H)，2.12-2.21(m，1H)，2.67-2.76(m，1H)，2.86-2.93(m，1H)，3.14-3.21(m，1H)，3.27(d，J＝13.1Hz，1H)，3.52-3.59(m，1H)，3.89(d，J＝13.1Hz，1H)，4.09-4.21(m，2H)，7.00-7.07(m，1H)，7.12-7.30(m，4H)，7.50(t，J＝7.8Hz，1H)，7.73(d，J＝7.8Hz，1H)，8.01(d，J＝7.8Hz，1H)，8.10-8.25(m，2H).
參考例93-(氨甲基)-1-(4-氯芐基)吡咯烷的制備
向4-羧基-1-(4-氯芐基)吡咯烷-2-酮(5.05g，20mmol)、EDCI(2.85g，22mmol)、HOBt(2.97g，22mmol)和二氯甲烷(100ml)的混合物中加入0.5M氨的二噁烷溶液(60ml，30mmol)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌15小時，用2NHCl(3次)和2N NaOH水溶液(100ml×4)洗滌。有機層經(jīng)無水硫酸鎂干燥，過濾，并濃縮，得到3-氨基甲?；?1-(4-氯芐基)吡咯烷-2-酮(1.49g)，為無色固體。
向3-氨基甲酰基-1-(4-氯芐基)吡咯烷-2-酮(1.45g)的THF(15ml)溶液中加入1.0N BH3的THF(25ml)溶液。反應(yīng)混合物在65℃下攪拌15小時。冷卻至室溫后，在減壓下除去溶劑。加入水(30ml)和濃HCl(10ml)，混合物在100℃下攪拌2小時，在室溫下攪拌1小時。加入2N NaOH水溶液(100ml)，混合物用AcOEt萃取(50ml×3)。合并了的有機層經(jīng)K2CO3干燥，過濾，并濃縮。經(jīng)過柱色譜法(SiO2，15％CH3OH-5％Et3N的CH2Cl2溶液)得到3-(氨甲基)-1-(4-氯芐基)吡咯烷(860mg，19％)，為無色的油。
參考例101-(4-氯芐基)-3-{(甘氨酰氨基)甲基}吡咯烷的制備
將3-(氨甲基)-1-(4-氯芐基)吡咯烷(860mg，3.8mmol)、Et3N(5.7mmol)、N-叔丁氧羰基甘氨酸(704mg)、EDCI(594mg)、HOBt(673mg)和二氯甲烷(20ml)的混合物在室溫下攪拌15小時。加入二氯甲烷(50ml)，溶液用2NNaOH溶液洗滌(50ml×2)，經(jīng)無水硫酸鈉干燥，過濾，并濃縮，得到3-[{N-(叔丁氧羰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-氯芐基)吡咯烷(1.31g，90％)。
向3-[{N-(叔丁氧羰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-氯芐基)吡咯烷(804mg，2.11mmol)的甲醇(10ml)溶液中加入4N HCl的二噁烷(5ml)溶液。溶液在室溫下攪拌3.5小時。反應(yīng)混合物濃縮，加入1N NaOH溶液(20ml)?；旌衔镉枚燃淄檩腿?20ml×3)，合并了的萃取液經(jīng)硫酸鈉干燥，并濃縮，得到所需的1-(4-氯芐基)-3-{(甘氨酰氨基)甲基}吡咯烷(599mg，100％)純度用RPLC/MS測定(100％)；ESI/MS m/e 282.2(M++H，C14H20ClN3O)。
實施例9363-[{N-(3-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-氯芐基)吡咯烷(1463號化合物)的制備
向1-(4-氯芐基)-3-{(甘氨酰氨基)甲基}吡咯烷(0.050mmol)和哌啶子基甲基聚苯乙烯(60mg)在氯仿(0.2ml)與二氯甲烷(1ml)中的混合物中加入3-(三氟甲基)苯甲酰氯(0.058mmol)的二氯甲烷(0.2ml)溶液。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2.5小時后，加入甲醇(0.30ml)，混合物在室溫下攪拌1小時。將反應(yīng)混合物裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH(15ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮，得到3-[{N-(3-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-氯芐基)吡咯烷(1463號化合物)(22.4mg，99％)純度用RPLC/MS測定(97％)；ESI/MS m/e 454.2(M++H，C22H23ClF3N3O2)。
實施例937-944
依據(jù)實施例936的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESL/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表20中。
表20
實施例9453-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-氯芐基)吡咯烷(1506號化合物)的制備
將1-(4-氯芐基)-3-{(甘氨酰氨基)甲基}吡咯烷(0.050mmol)在CHCl3(1.35ml)與叔丁醇(0.05ml)中的溶液用2-氨基-4，5-二氟苯甲酸(0.060mmol)、二異丙基碳二亞胺(0.060mmol)和HOBt(0.060mmol)處理。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌19小時。將混合物裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH/CHCl3 1∶1(10ml)和CH3OH(10ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮，得到3-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-氯芐基)吡咯烷(1506號化合物)(22.0mg，定量)純度用RPLC/MS測定(92％)；ESI/MSm/e 437(M++H，C21H23ClF2N4O2)。
實施例946-952
依據(jù)實施例945的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。
ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表21中。
表21
參考例111-(4-氯芐基)-3-哌啶甲酸的制備
向3-哌啶甲酸乙酯(6.29g，40.0mmol)的CH3CN(15ml)的溶液中加入4-氯芐基氯(6.42g，39.9mmol)和iPr2NEt(7.74g，40.0mmol)。反應(yīng)混合物在70℃下攪拌1.5小時。在減壓下除去溶劑。向殘余物中加入飽和NaHCO3水溶液(50ml)，混合物用乙酸乙酯(100ml)萃取。有機相用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥。在減壓下除去溶劑，得到1-(4-氯芐基)-3-哌啶甲酸乙酯，為紅黃色油(11.025g，97.8％)，不用進一步純化。純度用RPLC/MS測定(97％)；ESI/MS m/e 382.2(M++H，C15H21ClNO2)。
向1-(4-氯芐基)-3-哌啶甲酸乙酯在THF(60ml)與CH3OH(20ml)中的溶液中加入LiOH(1.66g)的H2O(25ml)溶液。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌15小時。在減壓下除去溶劑，得到無定形固體，用柱色譜法純化(SiO2，50％CH3OH-CH2Cl2)，得到1-(4-氯芐基)-3-哌啶甲酸(9.75g，98.2％)，為淡黃色無定形固體。純度用RPLC/MS測定(＞95％)；ESI/MS m/e 254.0(M++H，C13H17ClNO2)。
參考例121-(4-氯芐基)-3-{(叔丁氧羰基)氨基}哌啶的制備
將1-(4-氯芐基)-3-哌啶甲酸(7.06g，27.8mmol)tBuOH(500ml)溶液用Et3N(3.38g)和活化3A分子篩(30g)處理。加入二苯基磷酰疊氮化物(8.58g)，反應(yīng)混合物加熱回流18小時?；旌衔锢鋮s，溶劑回流18小時。混合物冷卻，在真空下除去溶劑。將殘余物溶于EtOAc(500ml)，有機相用飽和NaHCO3水溶液(2×100ml)和鹽水(50ml)洗滌，干燥(Na2SO4)，并在真空中濃縮。經(jīng)過色譜法(SiO2，25％EtOAc-己烷)得到1-(4-氯芐基)-3-{(叔丁氧羰基)氨基}哌啶(2.95g，32.6％)，為白色晶性固體H1NMR(CDCl3，300Mhz)δ1.4-1.75(br，4H)，2.2-2.7(br，4H)，3.5(br，2H)，3.8(br，1H)，7.3(br，4H)；純度用RPLC/MS測定(＞99％)；ESI/MS m/e 269.2(M++H-56，C17H26ClN2O2)。
參考例133-氨基-1-(4-氯芐基)哌啶的制備
將1-(4-氯芐基)-3-{(叔丁氧羰基)氨基}哌啶(2.55g，7.85mmol)的CH3OH(25ml)溶液用1N HCl-Et2O(50ml)處理。反應(yīng)混合物在25℃下攪拌15小時。在減壓下除去溶劑，得到二鹽酸3-氨基-1-(4-氯芐基)哌啶，為無定形固體(2.49g，定量)。純度用RPLC/MS測定(＞95％)；ESI/MS m/e 225.2(M++H，C12H18ClN2)。
實施例9531-(4-氯芐基)-3-[{N-(3-甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]哌啶(355號化合物)的制備
向二鹽酸1-(4-氯芐基)-3-氨基哌啶(14.9mg，0.050mmol)和Et3N(15.2mg)的CHCl3(2.5ml)溶液中加入N-(3-甲基苯甲?；?甘氨酸(10.6mg，0.055mmol)、EDCI(10.5mg)和1-羥基苯并三唑水合物(7.4mg)。反應(yīng)混合物在25℃下攪拌16小時，用2N NaOH水溶液(2ml×2)和鹽水(1ml)洗滌。通過PTFE濾膜過濾后，在減壓下除去溶劑，得到1-(4-氯芐基)-3-[{N-(3-甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]哌啶(355號化合物)，為淡黃色油(17.4mg，87％)純度用RPLC/MS測定(97％)；ESI/MS m/e 400.0(M++H，C22H26ClN3O2)。
實施例954-982
依據(jù)實施例953的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表22中，358號化合物顯示如下1H NMR譜。
表22
實施例982358號化合物88％；
1H NMR(CDCl3)δ1.53-1.75(m，4H)，2.12-2.20(m，1H)，2.37-2.50(m，2H)，2.53-2.61(m，1H)，3.38-3.50(m，2H)，2.53-2.61(m，1H)，3.38-3.50(m，2H)，4.06-4.20(m，3H)，7.10-7.13(m，1H)，7.18-7.30(m，4H}，7.59(t，J＝7.8Hz，1H)，7.79(d，J＝7.8Hz，1H)，8.01(d，J＝7.8Hz，1H)，8.11(s，1H).
參考例141-芐基-4-[{N-(叔丁氧羰基)甘氨酰)氨基]哌啶的制備
將4-氨基-1-芐基哌啶(3.80g，20mmol)的CH2Cl2(40ml)溶液用N-(叔丁氧羰基)甘氨酸(3.48g，20mmol)、EDCI(4.02g，21mmol)和HOBt(2.83g，21mmol)處理。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌12小時后，加入2N NaOH溶液(20ml)。分離有機層，含水層用二氯甲烷萃取(20ml×2)。合并了的有機層用水(20ml)和鹽水(20ml)洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥，過濾，并濃縮。經(jīng)過柱色譜法(SiO2，乙酸乙酯/MeOH/Et3N＝85/12/3)得到1-芐基-4-[{N-(叔丁氧羰基)甘氨酰}氨基]哌啶(6.59g，95％)。
參考例151-(4-氯芐基)-4-(甘氨酰氨基)哌啶的制備
向1-芐基-4-[{N-(叔丁氧羰基)甘氨酰}氨基]哌啶(6.59g)的甲醇(80ml)溶液中加入4N HCl的二噁烷(19ml)溶液。溶液在室溫下攪拌2小時。反應(yīng)混合物濃縮，加入2N NaOH水溶液(20ml)?；旌衔镉枚燃淄檩腿?40ml×3)，合并了萃取液經(jīng)無水硫酸鈉干燥，并濃縮。經(jīng)過柱色譜法(SiO2，AcOEt/MeOH/Et3N＝85/12/3)得到1-(4-氯芐基)-4-(甘氨酰氨基)哌啶(3.91g，83％)
1H NMR(CDCl3，400MHz)d 1.47-1.59(m，2H)，1.59(br，2H)，1.76-1.96(m，2H)，2.10-2.19(m，2H)，2.75-2.87(m，2H)，3.29(s，2H)，3.50(s，2H)，3.65-3.89(m，1H)，7.15-7.23(m，1H)，7.23-7.33(m，5H).
依據(jù)參考例13和14的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，也合成了其他4-酰氨基-1-芐基哌啶。
4-(β-丙氨酰氨基)-1-芐基哌啶2.46g，51％(2步)。
1-芐基-4-((S)-亮氨酰氨基)哌啶1.78g，74％(2步)。
1-芐基-4-(R)-亮氨酰氨基)哌啶1.48g，61％(2步)。
實施例9834-(N-苯甲?；拾滨?氨基-1-芐基哌啶(386號化合物)
向1-(4-氯芐基)-4-(甘氨酰氨基)哌啶(0.050mmol)與三乙胺(0.070mmol)的氯仿(1.0ml)溶液中加入苯甲酰氯(0.060mmol)的氯仿(0.4ml)溶液。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2.5小時，加入(氨甲基)聚苯乙烯樹脂(1.04mmol/g，50mg，50mmol)，混合物在室溫下攪拌12小時。反應(yīng)混合物過濾，樹脂用二氯甲烷(0.5ml)洗滌。合并濾液和洗液，加入二氯甲烷(4ml)，溶液用2N NaOH水溶液(0.5ml)洗滌，得到4-(N-苯甲酰基甘氨酰)氨基-1-芐基哌啶(386號化合物)(11.3mg，64％)純度用RPLC/MS測定(94％)；ESI/MS m/e 352.0(M++H，C21H25N3O2)。
實施例984-1034
依據(jù)實施例983的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表23中。
表23
*TFA鹽的產(chǎn)量
參考例163-氨基甲酰基-1-(4-氯芐基)哌啶的制備
將3-哌啶甲酰胺(6.40g，50mmol)在CH3CN(150ml)與乙醇(20ml)中的溶液用Et3N(7.0ml，50mmol)和4-氯芐基氯(8.05g，50mmol)處理。反應(yīng)混合物在50℃下攪拌16小時。冷卻至室溫后，向反應(yīng)混合物中加入飽和NaHCO3水溶液(50ml)和水(150ml)?；旌衔镉靡宜嵋阴ポ腿?150ml×3)，合并了的有機層用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，并濃縮，得到淡紅色固體。粗固體用乙醚(100ml)洗滌，得到3-氨基甲?；?1-(4-氯芐基)哌啶(6.98g，54％)。
參考例173-(氨甲基)-1-(4-氯芐基)哌啶的制備
將3-氨基甲?；?1-(4-氯芐基)哌啶(3.80g，15mmol)溶于THF(30ml)，向溶液中加入1M BH3-THF(9.4ml)。反應(yīng)混合物在70℃下攪拌15小時?；旌衔锢鋮s至0℃后，加入2N HCl水溶液(50ml)，混合物在室溫下再攪拌3小時，用4N NaOH水溶液堿化，用乙酸乙酯萃取(100ml×3)。合并了萃取液用鹽水洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，過濾，并濃縮。經(jīng)過柱色譜法(SiO2，乙酸乙酯/EtOH/Et3N＝80/15/5)得到3-(氨甲基)-1-(4-氯芐基)哌啶(2.05g，55％)
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.00-1.09(m，1H)，1.50-1.87(m，7H)，1.97-2.06(m，1H)，2.65-2.77(m，2H)，3.16-3.26(m，2H)，3.32(s，2H)，3.40(d，J＝13.3Hz，1H)，3.49(d，J＝13.3Hz，1H)，7.22-7.33(m，5H).
實施例10353-{(N-苯甲?；拾滨?氨基}甲基-1-(4-氯芐基)哌啶(434號化合物)的制備
向3-(氨甲基)-1-(4-氯芐基)哌啶(0.050mmol)和三乙胺(0.070mmol)的氯仿(1.0ml)溶液中加入苯甲酰氯(0.060mmol)的氯仿(0.4ml)溶液。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2.5小時后，加入(氨甲基)聚苯乙烯樹脂(1.04mmol/g，50mg，50mmol)，混合物在室溫下攪拌12小時．反應(yīng)混合物過濾，樹脂用二氯甲烷(0.5ml)洗滌。合并濾液和洗液，加入二氯甲烷(4ml)，溶液用2N NaOH水溶液(0.5ml)洗滌，得到3-{(N-苯甲?；拾滨?氨基}甲基-1-(4-氯芐基)哌啶(434號化合物)(14.7mg，74％)純度用RPLC/MS測定(91％)；ESI/MS m/e 400(M++H，C22H26ClN3O2)。
實施例1036-1058
依據(jù)實施例1035的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表24中。
表24
參考例184-(氨甲基)-1-(4-氯芐基)哌啶的制備
將4-(氨甲基)哌啶(7.00g，61.3mmol)的CH3CN(100ml)溶液按順序用K2CO3(3.02g)和4-氯芐基氯(3.52g，21.8mmol)處理。反應(yīng)混合物在60℃下加熱16小時，冷卻至25℃后濃縮。使殘余物在CH2Cl2(75ml)與水(50ml)之間分布，用水(2×50ml)和鹽水(1×50ml)洗滌。有機相干燥(MgSO4)，并濃縮。經(jīng)過色譜法(SiO2，4％ H2O-iPrOH)得到4-(氨甲基)-1-(4-氯芐基)哌啶(3.58g，69％)。
實施例10594-{(N-苯甲?；拾滨?氨基}甲基-1-(4-氯芐基)哌啶(458號化合物)的制備
將4-(氨甲基)-1-(4-氯芐基)哌啶(50mg，0.21mmol)的CH2Cl2(1ml)溶液用馬尿酸(38mg，0.21mmol)、EDCI(48mg，0.24mmol)、HOBt(31mg，0.23mmol)和Et3N(38μl，0.27mmol)處理。反應(yīng)混合物在25℃下攪拌16小時，用1ml CH2Cl2稀釋，用2N NaOH水溶液洗滌(2×0.75ml)，干燥(MgSO4)，并濃縮。經(jīng)過色譜法(SiO2，6至8％CH3OH/CH2Cl2梯度洗脫)得到4-{(N-苯甲?；拾滨?氨基}甲基-1-(4-氯芐基)哌啶(458號化合物)，用TFA處理得到TFA鹽(105mg，97％)純度用RPLC/MS測定(85％)；ESI/MS m/e 400(M++H，C22H26ClN3O2)。
實施例1060-1086
依據(jù)實施例1059的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表25中。
表25
*TFA鹽的產(chǎn)量
參考例191-(4-氯芐基)-4-{N-(3，3-二苯丙基)氨甲基}哌啶的制備
在NaI(2.6當(dāng)量)的存在下，在70℃CH3CN中將4-(氨甲基)-1-(4-氯芐基)哌啶(120mg)用甲磺酸3，3-二苯丙基酯(1.0當(dāng)量)進行烷基化16小時。經(jīng)過一般操作和柱色譜法(SiO2)得到1-(4-氯芐基)-4-{N-(3，3-二苯丙基)氨甲基}哌啶(118mg，54％)純度用RPLC測定(98％)。
參考例201-(4-氯芐基)-4-{N-(2，2-二苯乙基)氨甲基}哌啶的制備
在25℃甲醇中，將4-(氨甲基)-1-(4-氯芐基)哌啶(120mg)用2，2-二苯基乙醛(0.66當(dāng)量)和以聚合物為載體的硼氫化物進行還原性胺化16小時，然后經(jīng)過一般操作和柱色譜法(SiO2)得到1-(4-氯芐基)-4-{N-(2，2-二苯乙基)氨甲基}哌啶(70mg，49％)純度用RPLC測定(98％)。
實施例10874-{N-(N-苯甲?；拾滨?-N-(2，2-二苯乙基)氨甲基}-1-(4-氯芐基)哌啶(524號化合物)的制備
將1-(4-氯芐基)-4-{N-(2，2-二苯乙基)氨甲基}哌啶(0.084mmol)的CH2Cl2溶液用馬尿酸(1.1當(dāng)量)、HBTU(1.1當(dāng)量)、HOBt(1.1當(dāng)量)處理。反應(yīng)混合物在40℃下攪拌24小時。經(jīng)過一般操作和制備型TLC(SiO2)得到4-{N-(N-苯甲?；拾滨?-N-(2，2-二苯乙基)氨甲基}-1-(4-氯芐基)哌啶(524號化合物)(8.5mg，17％)純度用RPLC/MS測定(98％)；ESI/MS m/e 580(M++H，C36H38ClN3O2)。
實施例1088-1090
依據(jù)實施例1087的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表26中。
表26
參考例211-(4-氯芐基)-4-{(纈氨酰氨基)甲基}哌啶的制備
將4-(氨甲基)-1-(4-氯芐基)哌啶(1.0g，4.2mmol)的CH2Cl2(21ml)溶液用Et3N(0.76ml，5.44mmol)、dl-N-(叔丁氧羰基)纈氨酸(1.09g，5.03mmol)、EDCI(883mg，4.61mmol)和HOBt(623mg，4.61mmol)處理。反應(yīng)混合物在25℃下攪拌16小時。所得溶液用CH2Cl2(20ml)稀釋，用2N NaOH溶液(2×20ml)和鹽水(1×20ml)洗滌，干燥(MgSO4)。經(jīng)過濃縮和色譜法(SiO2，3％CH3OH/CH2Cl2)得到1-(4-氯芐基)-4-[{(N-Boc-纈氨酰)氨基}甲基]哌啶(1.1g，60％)，為淡琥珀色油ESI/MS m/e 438(M++H)。
將1-(4-氯芐基)-4-[{(N-Boc-纈氨酰)氨基}甲基]哌啶(1.1g，2.51mmol)溶于3M HCl-CH3OH溶液(25ml)，在25℃下攪拌1小時。反應(yīng)混合物濃縮，將所得鹽溶于3∶1 tBuOH-H2O(25ml)。加入陰離子(OH-)交換樹脂，直到溶液微呈堿性時為止。經(jīng)過過濾和濃縮得到1-(4-氯芐基)-4-{(纈氨酰氨基)甲基}哌啶(819mg，97％)，不需要進一步純化RPLC(97％)；ESI/MS m/e 338.1(M++H，C18H28ClN3O)。
依據(jù)參考例20的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，也合成了其他4-{(酰氨基)甲基}-1-(4-氯芐基)哌啶。
1-(4-氯芐基)-4-{(甘氨酰氨基)甲基}哌啶0.830g，67％(2步)；ESI/MS269(M++H)。
1-(4-氯芐基)-4-{(絲氨酰氨基)甲基}哌啶0.286g，20％(2步)；ESI/MS326(M++H)。
4-{(丙氨酰氨基)甲基}-1-(4-氯芐基)哌啶1.20g，65％(2步)；ESI/MS310(M++H)。
1-(4-氯芐基)-4-{(脯氨酰氨基)甲基}哌啶1.48g，86％(2步)；ESI/MS336(M++H)。
1-(4-氯芐基)-4-{(谷氨酰氨基)甲基}哌啶0.830g，27％(2步)；ESI/MS367(M++H)。
1-(4-氯芐基)-4-{((2-甲基丙氨酰)氨基)甲基}哌啶2.24g，62％(2步)；ESI/MS 324(M++H)。
1-(4-氯芐基)-4-{((O-甲基絲氨酰)氨基)甲基}哌啶0.686g，38％(2步)；ESI/MS 340(M++H)。
1-(4-氯芐基)-4-{((1-氨基環(huán)丙基羰基)氨基)甲基}哌啶2.03g，82％(2步)；ESI/MS 322(M++H)。
1-(4-氯芐基)-4-{(亮氨酰氨基)甲基}哌啶1.30g，58％(2步)；ESI/MS352(M++H)。
1-(4-氯芐基)-4-{((O-芐基絲氨酰)氨基)甲基}哌啶1.34g，56％(2步)；ESI/MS 416(M++H)。
參考例221-(叔丁氧羰基)-4-[{N-(9-芴基甲氧羰基)甘氨酰}氨基甲基]哌啶的制備
將4-(氨甲基)-1-(叔丁氧羰基)哌啶(5.72g)的CH2Cl2(150ml)溶液用Et3N(3.51g)、N-(9-芴基甲氧羰基)甘氨酸(7.93g，26.7mmol)、EDCI(3.80g)和HOBt(4.33g)處理。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時后，混合物用水(100ml×3)和鹽水(100ml×2)洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥，過濾，并濃縮。從0℃CH3CN/CH3OH(150ml/1ml)中重結(jié)晶，得到1-(叔丁氧羰基)-4-[{N-(9-芴基甲氧羰基)甘氨酰}氨基甲基]哌啶(5.75g，44％)，為淡黃色晶體。
參考例234-[{N-(9-芴基甲氧羰基)甘氨酰}氨基甲基]哌啶的制備
向1-(叔丁氧羰基)-4-[{N-(9-芴基甲氧羰基)甘氨酰}氨基甲基]哌啶(3.17g，6.42mmol)中加入4N HCl的二噁烷(50ml)溶液。溶液在室溫下攪拌5小時。反應(yīng)混合物濃縮，得到4-[{N-(9-芴基甲氧羰基)甘氨酰}氨基甲基]哌啶(3.85g)，為白色固體。該產(chǎn)物在使用時不經(jīng)進一步純化。
參考例244-[{N-(9-芴基甲氧羰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-甲硫基芐基)哌啶的制備
向4-[{N-(9-芴基甲氧羰基)甘氨酰}氨基甲基]哌啶(1.00g，2.33mmol)的1％AcOH/DMF(15ml)溶液中加入4-甲硫基苯甲醛(1.24g)和NaBH(OAc)3(2.56g)。反應(yīng)混合物在60℃下攪拌1小時，冷卻至室溫，并濃縮。加入飽和NaHCO3水溶液(50ml)，混合物用AcOEt萃取(50ml×2)。合并后的萃取液經(jīng)無水硫酸鈉干燥，過濾，并濃縮。經(jīng)過柱色譜法(SiO2，5％-10％CH3OH/CH2Cl2)得到4-[{N-(9-芴基甲氧羰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-甲硫基芐基)哌啶(602mg)，為無色的油。
參考例251-(4-乙基芐基)-4-[{N-(9-芴基甲氧羰基)甘氨酰}氨基甲基]哌啶的制備
向4-[{N-(9-芴基甲氧羰基)甘氨酰}氨基甲基]哌啶(1.00g，2.33mmol)的2.5％AcOH/CH3OH(15ml)溶液中加入4-乙基苯甲醛(1.09g，8.16mmol)和NaBH3CN(6.59g，10.5mmol)。反應(yīng)混合物在60℃下攪拌13小時?；旌衔锢鋮s至室溫后，加入1N NaOH水溶液(50ml)和二氯甲烷(50ml)。分離有機層，含水層用二氯甲烷萃取(50ml×3)。合并后的有機層用鹽水洗滌，經(jīng)無水硫酸鈉干燥，過濾，并濃縮。經(jīng)過柱色譜法(SiO2，CH3OH/AcOEt 2∶8)得到1-(4-乙基芐基)-4-[{N-(9-芴基甲氧羰基)甘氨酰}氨基甲基]哌啶(740mg，62％)。
參考例264-{(甘氨酰氨基)甲基}-1-(4-甲硫基芐基)哌啶的制備
將4-[{N-(9-芴基甲氧羰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-甲硫基芐基)哌啶(590mg)和哌啶(1ml)的DMF(4ml)溶液在室溫下攪拌2小時。經(jīng)過濃縮和柱色譜法(SiO2，Et3N∶CH3OH∶CH2Cl2＝1∶1∶9)得到4-{(甘氨酰氨基)甲基}-1-(4-甲硫基芐基)哌啶(365mg)，為白色固體 1H NMR(CDCl3，270MHz)δ1.25(dd，J＝12Hz，4.1Hz，2H)，1.34(dd，J＝12Hz，4.1Hz，2H)，1.51(br-s，2H)，1.66(d，J＝12Hz，2H)，1.77(d，J＝7.3Hz，1H)，1.94(t，J＝9.5Hz，2H)，2.48(s，3H)，2.80(d，J＝12Hz，2H)，3.18(t，J＝6.2Hz，2H)，3.35(s，2H)，3.45(s，2H)，7.18-7.29(m，4H)，7.35(br-s，1H).
依據(jù)參考例25的方法，使用相應(yīng)的試劑，也合成了1-(4-乙基芐基)-4-{(甘氨酰氨基)甲基}哌啶333mg，79％。
參考例274-{(甘氨酰氨基)甲基}-1-(4-氟芐基)哌啶的制備
將4-[{N-(9-芴基甲氧羰基)甘氨酰}氨基甲基]哌啶(1.50g，3.49mmol)、4-氟芐基溴(0.478ml，3.84mmol)和Et3N(1.47ml，10.5mmol)的CH3CN(200ml)溶液在室溫下攪拌13小時，濃縮。經(jīng)過柱色譜法(SiO2，10％CH3OH/CH2Cl2)得到4-[(N-(9-芴基甲氧羰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-氟芐基)哌啶。
將4-[{N-(9-芴基甲氧羰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-氟芐基)哌啶和哌啶(5ml)的DMF(5ml)溶液在室溫下攪拌17小時。經(jīng)過濃縮和柱色譜法(SiO2，Et3N∶CH3OH∶CH2Cl2＝0.5∶2∶8)得到4-{(甘氨酰氨基)甲基}-1-(4-氟芐基)哌啶(453mg，46％)。
參考例284-{(甘氨酰氨基)甲基}-1-{4-(N-苯基氨基甲?；?芐基}哌啶的制備
向4-[{N-(9-芴基甲氧羰基)甘氨酰}氨基甲基]哌啶(1.27g，2.96mmol)、Et3N(1.25ml，8.88mmol)、KI(50mg，0.30mmol)和CH3CN(200ml)的混合物中滴加4-(N-苯基氨基甲酰基)芐基氯(800mg，3.26mmol)的CH3CN(100ml)溶液?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?9小時，再在60℃下攪拌5小時。經(jīng)過濃縮和柱色譜法(SiO2，5％CH3OH/CH2Cl2-Et3N∶CH3OH∶CH2Cl2＝2∶2∶96)得到4-{(甘氨酰氨基)甲基}-1-{4-(N-苯基氨基甲?；?芐基)哌啶(340mg，30％)。
實施例10911-(4-氯芐基)-4-[{N-(3-氰基苯甲酰基)纈氨酰}氨基甲基]哌啶(619號化合物)的制備
將1-(4-氯芐基)-4-{(纈氨酰氨基)甲基}哌啶(20mg，0.059mmol)的CH2Cl2(0.60ml)溶液用Et3N(0.011ml，0.077mmol)、間氰基苯甲酸(28mg，0.071mmol)、EDCI(13mg，0.065mmol)和HOBt(9mg，0.065mmol)處理。反應(yīng)混合物在25℃下攪拌16小時。所得溶液用CH2Cl2(0.75ml)稀釋，用2NNaOH水溶液洗滌(2×0.75ml)，通過PTFE膜過濾進行干燥。經(jīng)過濃縮得到1-(4-氯芐基)-4-[{N-(3-氰基苯甲酰基)纈氨酰}氨基甲基]哌啶(619號化合物)(24.2mg，88％)，不需要進一步純化純度用RPLC/MS測定(85％)；ESI/MS m/e 467(M++H，C26H31ClN4O2)。
實施例1092-1543
依據(jù)實施例1091的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表27中。
表27
*TFA鹽的產(chǎn)量
實施例15441-(4-氯芐基)-4-[{N-(3，5-雙(三氟甲基)苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]哌定(1213號化合物)的制備
向1-(4-氯芐基)-4-{(甘氨酰氨基)甲基}哌啶(0.050mmol)與哌啶子基甲基聚苯乙烯(58mg)在氯仿(0.2ml)與二氯甲烷(0.75ml)中的混合物中加入3，5-雙(三氟甲基)苯甲酰氯(0.058mmol)的二氯甲烷(1ml)溶液。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時后，加入甲醇(1.0ml)，混合物在室溫下攪拌30分鐘。將反應(yīng)混合物裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH(16ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(6ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮，得到1-(4-氯芐基)-4-[{N-(3，5-雙(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(1213號化合物)(24.0mg，90％)純度用RPLC/MS測定(100％)；ESI/MS m/e 536.2(M++H，C24H24ClF6N3O2)。
實施例1545-1547
依據(jù)實施例1544的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表28中。
表28
實施例15484-[{N-(3-溴-4-甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-氯芐基)哌啶(1113號化合物)的制備
將1-(4-氯芐基)-4-{(甘氨酰氨基)甲基}哌啶(0.050mmol)在CHCl3(1.35ml)與叔丁醇(0.15ml)中的溶液用3-溴-4-甲基苯甲酸(0.060mmol)、二異丙基碳二亞胺(0.060mmol)和HOBt(0.060mmol)處理。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌15小時。將混合物裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH/CHCl3 1∶1(12ml)和CH3OH(12ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮，得到4-[{N-(3-溴-4-甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-氯芐基)哌啶(1113號化合物)(16.1mg，65％)純度用RPLC/MS測定(95％)；ESI/MS m/e 494.0(M++H，C23H27BrClN3O2)。
實施例1549-1619
依據(jù)實施例1548的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。必要時使用制備型TLC得到所需物質(zhì)。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表29中。
所得1422號化合物是1418號化合物的副產(chǎn)物5.6mg，產(chǎn)率25％；ESI/MS m/e 447.2(C22H27ClN4O2S)。
表29
例如，1245和1600號化合物顯示下列NMR譜。
1245號化合物1H NMR(270MHz，CDCl3)δ1.20-1.97(m，7H)，2.80-2.86(m，2H)，3.19(t，J＝6.5Hz，2H)，3.43(s，2H)，4.02(d，J＝5.3Hz，2H)，5.52(br s，2H)，6.44(d，J＝11.9，6.6Hz，1H)，7.02(br s，1H)，7.21-7.32(m，5H).
1600號化合物1H NMR(270MHz，CDCl3)δ1.25-1.97(m，9H)，2.82-2.87(m，2H)，3.21(t，J＝6.5Hz，2H)，3.44(s，2H)，4.06(d，J＝5.1Hz，2H)，5.98(br s，1H)，6.71(d，J＝8.3Hz，1H)，6.87(br s，1H)，7.26(s，4H)，7.43(dd，J＝5.9Hz，1H)，7.64(s，1H).
實施例16201-(4-氯芐基)-4-[{N-(4-異丙基苯磺?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(869號化合物)的制備
將1-(4-氯芐基)-4-{(甘氨酰氨基)甲基}哌啶(14.8mg，0.05mmol)的CHCl3(2ml)溶液用(哌啶子基甲基)聚苯乙烯樹脂(28mg，2.8mmol/g)、4-異丙基苯磺酰氯(1.5當(dāng)量)處理，在25℃下攪拌16小時。加入(氨甲基)聚苯乙烯以清除殘留的磺酰氯，反應(yīng)混合物在25℃下攪拌16小時。過濾并濃縮，得到1-(4-氯芐基)-4-[{N-(4-異丙基苯磺?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(869號化合物)(22.1mg，92％)純度用RPLC/MS測定(86％)；ESI/MS m/e 478(M++H，C24H32ClN3O3S)。
實施例1621-1627
依據(jù)實施例1620的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表30中。
表30
實施例16281-(4-氯芐基)-4-[{2-(3-(4-三氟甲基苯基)脲基)乙酰氨基}甲基]哌啶(852號化合物)的制備
將1-(4-氯芐基)-4-{(甘氨酰氨基)甲基}哌啶(14.8mg，0.05mmol)的CHCl3(2ml)溶液用(哌啶子基甲基)聚苯乙烯樹脂(28mg，2.8mmol/g)、并氰酸3-(三氟甲基)苯基酯(1.3當(dāng)量)處理，在25℃下攪拌16小時。加入(氨甲基)聚苯乙烯以清除殘留的異氰酸酯，反應(yīng)混合物在25℃下攪拌16小時。過濾并濃縮，得到1-(4-氯芐基)-4-[{2-(3-(4-三氟甲基苯基)脲基)乙酰氨基}甲基]哌啶(852號化合物)(19mg，78％)純度用RPLC/MS測定(92％)；ESI/MS m/e483(M++H，C23H26ClF3N4O2)。
實施例1629-1641
依據(jù)實施例1628的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表31中。
表31
*TFA鹽的產(chǎn)量
實施例16421-(4-氯芐基)-4-[{N-(3-乙氧基苯甲酰基)-D-苯丙氨酰}氨基甲基]哌啶(2091號化合物)的制備
將1-(4-氯芐基)-4-(氨甲基)哌啶(100mg)的CHCl3(3ml)溶液用Et3N(0.090ml)、N-(叔丁氧羰基)-D-苯丙氨酸(122mg)、EDCI(89mg)和HOBt(62mg)處理。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌17小時。反應(yīng)混合物用1N NaOH水溶液(2ml×2)和鹽水(2ml)洗滌。有機層干燥，并濃縮，得到1-(4-氯芐基)-4-[{N-(叔丁氧羰基)-D-苯丙氨酰}氨基甲基]哌啶。
將所得1-(4-氯芐基)-4-[{N-(叔丁氧羰基)-D-苯丙氨酰}氨基甲基]哌啶溶于甲醇(5ml)，加入4N HCl的二噁烷(1.5ml)溶液。溶液在室溫下攪拌19小時，濃縮。
將所得物質(zhì)和3-乙氧基苯甲酸(80mg，0.48mmol)的CHCl3(1ml)溶液用Et3N(0.090ml)、EDCI(90mg)和HOBt(68mg)處理。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌11小時。反應(yīng)混合物用1N NaOH水溶液(1.5ml×2)和鹽水(1.5ml)洗滌。有機層干燥并濃縮。經(jīng)過柱色譜法(SiO2，CH2Cl2/MeOH＝95∶5)得到1-(4-氯芐基)-4-[{N-(3-乙氧基苯甲?；?-D-苯丙氨酰}氨基甲基]哌啶(2091號化合物)純度用RPLC/MS測定(99％)；ESI/MS m/e 534.0(M++H，C31H36ClN3O3)。
實施例1643-1657
依據(jù)實施例1642的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表32中。
表32
參考例291-(叔丁氧羰基)-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶的制備
向1-(叔丁氧羰基)-4-(氨甲基)哌啶(4.03g)的無水CH2Cl2(200ml)溶液中加入N-{3-(三氟甲基)苯甲?；鶀甘氨酸(4.22g，17.0mmol)、EDCl(4.25g，22.1mmol)、1-羥基苯并三唑水合物(2.99g，22.1mmol)和Et3N(1.72g)。反應(yīng)混合物在25℃下攪拌20小時。向反應(yīng)混合物中加入H2O(100ml)，混合物用CH2Cl2(2×50ml)萃取。合并后的萃取液用H2O(2×50ml)、鹽水(50ml)洗滌，并干燥(MgSO4)。在減壓下除去溶劑，得到黃色的油，用柱色譜法純化(SiO2，70％EtOAc-己烷)，得到1-(叔丁氧羰基)4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶，為白色固體(6.39g，85％)
1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ1.4(s，9H)，1.0-1.8(m，5H)，2.6-2.8(m，2H)，3.15-3.3(m，2H)，4.0-4.3(m，4H)，6.6-6.7(m，1H)，7.64(s，1H)，7.60(dd，1H，J＝7.2，7,2Hz)，7.79(d，1H，J＝7,2Hz)，8.0(d，1H，J＝7.2Hz)，8.11(s，1H)；
純度用RPLC/MS測定(97％)；ESI/MS m/e 444.3(M++H，C21H28F3N3O4)。
參考例304-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶的制備
將1-(叔丁氧羰基)-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(2.29g，5.16mmol)的CH3OH(40ml)溶液用1N HCl-Et2O(55ml)處理。反應(yīng)混合物在25℃下攪拌15小時，在減壓下除去溶劑。向反應(yīng)混合物中加入2N NaOH水溶液(100ml)，混合物用EtOAc萃取(3×100ml)。合并了萃取液用鹽水洗滌，干燥(K2CO3)。在減壓下除去溶劑，得到白色固體，用柱色譜法純化(SiO2，CH3OH/CH2Cl2/Et3N＝7/6/1)，得到4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶，為白色固體(1.27g，72％)純度用RPLC/MS測定(98％)；ESI/MS m/e 344.1(M++H，C16H20F3N3O2)。
實施例16581-{3-(三氟甲氧基)芐基}-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(927號化合物)的制備
向3-(三氟甲氧基)芐基溴(12.3mg，0.048mmol)的CH3CN(1.0ml)溶液中加入4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(19.9mg，0.058mmol)的CH3CN(1.0ml)溶液和(哌啶子基甲基)聚苯乙烯(55mg，2.7mmol基質(zhì)/g樹脂)。反應(yīng)混合物在60℃下攪拌2.5小時。向冷卻后的反應(yīng)混合物中加入異氰酸苯基酯(6.9mg，0.048mmol)，混合物在25℃下攪拌1小時。將反應(yīng)混合物裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH(20ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(6ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮，得到1-{3-(三氟甲氧基)芐基}-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]哌啶(927號化合物)(22.8mg，91％)，為淡黃色油純度用RPLC/MS測定(99％)；ESI/MS m/e 518.1(M++H，C24H25F6N3O3)。
實施例1659-1710
依據(jù)實施例1658的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表33中。
表33
實施例17111-{4-(二甲氨基)芐基}-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(937號化合物)的制備
向4-(二甲氨基)苯甲醛(30.4mg，0.204mmol)的5％CH3COOH/CH3OH(1.0ml)溶液中加入4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(20.0mg，0.058mmol)的CH3CN(1.0ml)溶液和NaBH3CN(16.5mg)。反應(yīng)混合物在60℃下攪拌19小時。蒸發(fā)溶劑得到-固體。向該固體加入CH3CN(2.0ml)和異氰酸苯基酯(6.9mg，0.048mmol)，混合物在25℃下攪拌1小時。將反應(yīng)混合物裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH(20ml)洗滌。用2N NH3-CH3OH(6ml)洗脫產(chǎn)物，濃縮洗脫液，得到1-{4-(二甲氨基)芐基}-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(937號化合物)(13.5mg，49％)，為淡黃色油純度用RPLC/MS測定(87％)；ESI/MS m/e 477.3(M++H，C25H31F3N4O2)。
實施例1712-1729
依據(jù)實施例1711的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。必要時使用制備型TLC(SiO2)得到所需物質(zhì)。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表34中。
表34
實施例17301-(3-羥基-4-甲氧基芐基)-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(1452號化合物)的制備
向4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(20.0mg，0.058mmol)和3-羥基-4-甲氧基苯甲醛(33mg)的5％CH3COOH/CH3OH(1.0ml)溶液中加入NaBH3CN(16.5mg)的5％CH3COOH/CH3OH(1.0ml)溶液。反應(yīng)混合物在60℃下攪拌15小時。將反應(yīng)混合物裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH(15ml)洗滌。用2N NH3-CH3OH(5ml)洗脫產(chǎn)物，濃縮洗脫液，得到1-(3-羥基-4-甲氧基芐基)-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(1452號化合物)(25.8mg，92％)純度用RPLC/MS測定(91％)；ESI/MSm/e 480(M++H，C24H28F3N3O4)。
實施例1731-1733
依據(jù)實施例1730的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表35中。
表35
實施例17341-(4-芐基芐基)-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(926號化合物)的制備
向4-(芐基)苯甲醇(8.7mg，0.044mmol)的CHCl3(1.0ml)溶液中加入甲磺酰氯(4.2mg，0.037mmol)的CHCl3(1.0ml)溶液和(哌啶子基甲基)聚苯乙烯(54mg，2.7mmol基質(zhì)/g樹脂)。反應(yīng)混合物在25℃下攪拌15小時。向反應(yīng)混合物中加入4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(15.1mg，0.044mmol)的CH3CN(1.0ml)溶液和KI(2mg)，混合物在65℃下攪拌5小時。向冷卻后的反應(yīng)混合物中加入異氰酸苯基酯(5.2mg)，混合物在25℃下攪拌1小時。將反應(yīng)混合物裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH(20ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(6ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮，得到1-(4-芐基芐基)-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(926號化合物)(5.6mg，29％)，為淡黃色油純度用RPLC/MS測定(94％)；ESI/MS m/e 524.1(M++H，C30H32F3N3O2)。
參考例314-[{(N-(芐氧羰基)甘氨酰)氨基}甲基]-1-(叔丁氧羰基)哌啶的制備
將4-(氨甲基)-1-(叔丁氧羰基)哌啶(3.54g，16.5mmol)的CH2Cl2(80ml)溶液用Et3N(2.8ml，20mmol)、N-(芐氧羰基)甘氨酸(3.77g，18mmol)、EDCI(3.45g，18mmol)和HOBt(2.43g，18mmol)處理。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌15小時后，加入2N NaOH水溶液(100ml)。分離有機層，含水層用二氯甲烷萃取(100ml×3)。合并了有機層經(jīng)無水硫酸鈉干燥，過濾，并濃縮。經(jīng)過柱色譜法(SiO2，乙酸乙酯)得到4-[{(N-(芐氧羰基)甘氨酰)氨基}甲基]-1-(叔丁氧羰基)哌啶(6.27g，94％)，為無定形固體。
參考例324-{(甘氨酰氨基)甲基}-1-(叔丁氧羰基)哌啶的制備
在5％鈀碳(620mg)的存在下，將4-[{(N-(芐氧羰基)甘氨酰)氨基}甲基]-1-(叔丁氧羰基)哌啶(6.26g，15.4mmol)的甲醇(100ml)溶液在室溫、1atm下氫化7小時。通過硅藻土過濾除去催化劑，合并后的濾液濃縮，得到4-{(甘氨酰氨基)甲基}-1-(叔丁氧羰基)哌啶(3.84g，92％)，為一固體。
參考例334-[{(N-(2-氨基-5-氯苯甲?；?甘氨酰)氨基}甲基]-1-(叔丁氧羰基)哌啶的制備
將4-{(甘氨酰氨基)甲基}-1-(叔丁氧羰基)哌啶(1.33g，4.90mmol)的CH2Cl2(25ml)溶液用Et3N(0.75ml，5.4mmol)、2-氨基-5-氯苯甲酸(840mg，4.9mmol)、EDCI(940mg，4.9mmol)和HOBt(660mg，4.9mmol)處理。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時后，加入2N NaOH水溶液(20ml)。分離有機層，含水層用二氯甲烷萃取(20ml×3)。合并后的有機層經(jīng)無水硫酸鈉干燥，過濾，并濃縮。經(jīng)過柱色譜法(SiO2，乙酸乙酯)得到4-[{(N-(2-氨基-5-氯苯甲?；?甘氨酰)氨基}甲基]-1-(叔丁氧羰基)哌啶(1.63g，78％)，為一固體。
參考例344-[{(N-(2-氨基-5-氯苯甲酰基)甘氨酰)氨基}甲基]哌啶的制備
向4-[{(N-(2-氨基-5-氯苯甲?；?甘氨酰)氨基}甲基]-1-(叔丁氧羰基)哌啶(1.63g，3.84mmol)的甲醇(20ml)中加入4N HCl的二噁烷(9.5ml)溶液。溶液在室溫下攪拌6小時。反應(yīng)混合物濃縮，加入2N NaOH水溶液(20ml)。混合物用二氯甲烷萃取(20ml×3)，合并后的萃取液經(jīng)無水硫酸鈉干燥，過濾，并濃縮，得到4-[{(N-(2-氨基-5-氯苯甲?；?甘氨酰)氨基}甲基]哌啶(1.19g，95％) 1H NMR(CDCl3，270MHz)δ1.10-1.76(m，4H)，2.55(td，J＝2.4 and 12.2Hz，2H)，3.00-3.10(m，2H)，3.17(t，J＝6.2Hz，2H)，3.48(s，2H)，4.03(d，J＝4.9Hz，2H)，5.50(br.s，2H)，6.11-6.23(m，1H)，6.60(d，J＝8.8Hz，1H)，6.85-7.02(m，1H)，7.15(dd，J＝2.7 and 8.8Hz，1H)，7.38(d，J＝2.4Hz，1H)；ESI/MS m/e325.2(C15H21ClN4O2).
依據(jù)參考例32和33的方法，使用相應(yīng)的試劑，也合成了4-[{(N-(2-氨基-5-溴苯甲?；?甘氨酰)氨基}甲基]哌啶951mg，64％(2步)；ESI/MS m/e369.2(C15H21BrN4O2)。
實施例17354-[{(N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲酰基)甘氨酰)氨基}甲基]-1-(4-氯芐基)哌啶的制備
將二鹽酸1-(4-氯芐基)-4-{(甘氨酰氨基)甲基}哌啶(738mg，2mmol)的CH2Cl2(20ml)溶液用Et3N(1.1ml，8mmol)、2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲酸(607mg，2.2mmol)、EDCI(422mg，2.2mmol)和HOBt(337mg，2.2mmol)處理。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌14小時后，加入0.6N NaOH水溶液(50ml)，混合物用二氯甲烷萃取(3次)。合并后的有機層經(jīng)無水硫酸鈉干燥，過濾，并濃縮。經(jīng)過柱色譜法(SiO2，乙酸乙酯然后是乙酸乙酯/甲醇＝92/8)得到4-[{(N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰)氨基}甲基]-1-(4-氯芐基)哌啶(1.01g，92％)ESI/MS m/e 551.3(M++H，C27H33ClF2N4O4)。
依據(jù)上述方法，使用相應(yīng)的試劑，也合成了4-[{(N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰)氨基}甲基]-1-(4-氯芐基)哌啶3.03g，82％；ESI/MS m/e 583.2(M++H，C28H34ClF3N4O4)。
參考例354-[{(N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰)氨基}甲基]哌啶的制備
將1-(4-氯芐基)-4-[{(N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰)氨基}甲基]哌啶(447mg，0.93mmol)與Pd(OH)2(60mg，0.23mmol)在5％HCO2H/甲醇(10ml)中的混懸液在50℃下攪拌14小時。通過硅藻土濾出Pd催化劑，濃縮濾液。向殘余物中加入1N NaOH水溶液(15ml)，混合物用乙酸乙酯萃取(30ml×3)。合并后的萃取液經(jīng)無水硫酸鈉干燥，過濾，并濃縮。經(jīng)過柱色譜法(SiO2，AcOEt/MeOH/Et3N＝70/25/5)得到4-[{(N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰)氨基}甲基]哌啶(284mg，86％)ESI/MS m/e 359.0(M++H，C16H21F3N4O2)。
依據(jù)上述方法，分別使用相應(yīng)的試劑，也制備了4-[{(N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰)氨基}甲基]哌啶、4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲氧基苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶、4-[{(N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰)氨基}甲基]哌啶和4-[{(N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰)氨基}甲基]哌啶。
4-[{(N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲酰基)甘氨酰)氨基}甲基]哌啶564mg，89％；ESI/MS m/e 327.2(M++H，C15H20F2N4O2)。
4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲氧基苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶定量； 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.10-1.25(m，2H)，1.45-1.73(m，3H)，1.51(s，9H)，2.53-2.64(m，2H)，3.04-3.13(m，2H)，3.22(t，J＝6.3Hz，2H)，4.09(d，J＝4.6Hz，2H)，5.91(br.s，1H)，7.08(br.s.，1H)，7.32(d，J＝9.0Hz，1H)，7.38(s，1H)，8.43(d，J＝9.0Hz，1H).
4-[{(N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰)氨基}甲基]哌啶310mg，40％；ESI/MS m/e 427.3(M++H，C20H28F2N4O4)。
4-[{(N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰)氨基}甲基]哌啶1.35g，57％；ESI/MS m/e 459.3(M++H，C21H29F3N4O4)。
實施例17364-[{N-(2-氨基-5-氯苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-乙氧基芐基)哌啶(1429號化合物)和1-(4-乙氧基芐基)-4-[{N-(2-(4-乙氧基芐基)氨基-5-氯苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(1433號化合物)的制備
向4-[{N-(2-氨基-5-氯苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(0.10mmol)、4-乙氧基苯甲醛(0.10mmol)、乙酸(0.050ml)和甲醇(1.6ml)的混合物中加入氰基硼氫化鈉(140mmol)的甲醇(0.4ml)溶液。反應(yīng)混合物在60℃下攪拌14小時。將反應(yīng)混合物裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH(20ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(6ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。經(jīng)過制備型TLC(SiO2，AcOEt/CH3OH5∶1)得到4-[{N-(2-氨基-5-氯苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-乙氧基芐基)哌啶(1429號化合物)和1-(4-乙氧基芐基)-4-[{N-(2-(4-乙氧基芐基)氨基-5-氯苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(1433號化合物)。
1429號化合物4.5mg，20％；純度用RPLC/MS測定(95％)；ESI/MSm/e 459.2(M++H，C24H31ClN4O3)。
1433號化合物8.4mg，28％；純度用RPLC/MS測定(98％)；ESI/MSm/e 593.2(M++H，C33H41ClN4O4)。
實施例1737-1779
依據(jù)實施例1736的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表36中。
表36
實施例17804-[{N-(2-氨基-5-三氟甲氧基苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-異丙基芐基)哌啶(1903號化合物)的制備
向4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲氧基)苯甲?；拾滨氨基甲基]哌啶(0.050mmol)、4-異丙基苯甲醛(0.060mmol)、NaBH3CN(0.15mmol)和甲醇(1.3ml)的混合物中加入乙酸(0.050ml)。反應(yīng)混合物在60℃下攪拌8小時。混合物冷卻至室溫，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH(10ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。向所得物質(zhì)中加入4N HCl的1，4-二噁烷(2ml)溶液，溶液在室溫下攪拌過夜。經(jīng)過濃縮和制備型TLC得到4-[{N-(2-氨基-5-三氟甲氧基苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-異丙基芐基)哌啶(1903號化合物)(6.6mg，28％)純度用RPLC/MS測定(93％)；ESI/MS m/e 507(M++H，C26H33F3N4O3)。
實施例1781-1783
依據(jù)實施例1780的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表37中。
表37
實施例17844-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(5-溴-2-乙氧基芐基)哌啶(2052號化合物)的制備
向4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(0.050mmol)、5-溴-2-乙氧基苯甲醛(0.15mmol)、甲醇(1.2ml)和乙酸(0.030ml)的混合物中加入NaBH3CN(0.25mmol)的甲醇(0.50ml)溶液。反應(yīng)混合物在50℃下攪拌13小時?；旌衔锢鋮s至室溫，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH洗滌(5ml×3)。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。向所得物質(zhì)中加入二氯甲烷(1ml)和三氟乙酸(TFA)(0.50ml)，溶液在室溫下攪拌10分鐘。反應(yīng)混合物濃縮，將殘余物溶于甲醇，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH洗滌(5ml×2)。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。經(jīng)過制備型TLC(SiO2，乙酸乙酯/甲醇＝10/1)得到4-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(5-溴-2-乙氧基芐基)哌啶(2052號化合物)(10.2mg，38％)純度用RPLC/MS測定(96％)；ESI/MS m/e 539.2(M++H，C24H29F2N4O3)。
實施例1785-1792
依據(jù)實施例1784的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表38中。
表38
實施例17934-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(3，4-二乙氧基芐基)哌啶(2065號化合物)的制備
向4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(0.050mmol)、3，4-二乙氧基苯甲醛(0.15mmol)、甲醇(1.2ml)和乙酸(0.050ml)的混合物中加入NaBH3CN(0.25mmol)的甲醇(0.50ml)溶液。反應(yīng)混合物在50℃下攪拌過夜?；旌衔锢鋮s至室溫，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH洗滌(5ml×2)。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。向所得物質(zhì)中加入二氯甲烷(2ml)和異氰酸苯基酯(0.10ml)，溶液在室溫下攪拌1小時，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH洗滌(5ml×2)。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。將殘余物溶于甲醇(0.25ml)，加入4NHCl的二噁烷(0.125ml)溶液。溶液在室溫下攪拌過夜，并濃縮。將殘余物溶于甲醇，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH洗滌(5ml×2)。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮，得到4-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(3，4-二乙氧基芐基)哌啶(2065號化合物)(21.2mg，84％)純度用RPLC/MS測定(97％)；ESI/MS m/e 505.2(M++H，C26H34F2N4O4)。
實施例1794-1808
依據(jù)實施例1793的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表39中。
表39
實施例18094-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(2-羥基-3-甲基芐基)哌啶(2106號化合物)的制備
向4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]哌啶(0.050mmol)、2-羥基-3-甲基苯甲醛(0.25mmol)、甲醇(1.0ml)和乙酸(0.040ml)的混合物中加入NaBH3CN(0.40mmol)的甲醇(0.50ml)溶液。反應(yīng)混合物在50℃下攪拌過夜?；旌衔锢鋮s至室溫，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH洗滌(5ml×2)。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。將所得物質(zhì)溶于乙酸乙酯/甲醇＝5∶1(1ml)，裝上VarianTMSi柱，用乙酸乙酯/甲醇＝5∶1(5ml)洗脫，并濃縮。將殘余物溶于甲醇(2ml)，加入4N HCl的二噁烷(0.50ml)溶液。溶液在室溫下攪拌過夜，并濃縮。將殘余物溶于甲醇，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH洗滌(5ml×2)。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。經(jīng)過制備型TLC得到4-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(2-羥基-3-甲基芐基)哌啶(2106號化合物)純度用RPLC/MS測定(97％)；ESI/MS m/e 447.0(M++H，C23H28F2N4O3)。
實施例1810-1823
依據(jù)實施例1809的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表40中。
表40
ND沒有測定
實施例18244-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(3-氨基-4-甲基芐基)哌啶(2114號化合物)的制備
向4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(0.050mmol)、4-甲基-3-硝基苯甲醛(0.25mmol)、甲醇(1.2ml)和乙酸(0.050ml)的混合物中加入NaBH3CN(0.50mmol)的甲醇(1.0ml)溶液。反應(yīng)混合物在50℃下攪拌過夜。混合物冷卻至室溫，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH洗滌(5ml×2)。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。將所得物質(zhì)溶于乙酸乙酯/甲醇＝2/1(2ml)，裝上VarianTMSi柱，用乙酸乙酯/甲醇＝2/1(6ml)洗脫，并濃縮。將殘余物溶于甲醇(1ml)，加入4N HCl的二噁烷(0.50ml)溶液。溶液在室溫下攪拌過夜，并濃縮。將殘余物溶于甲醇，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH洗滌(5ml×2)。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物。經(jīng)過濃縮得到4-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-甲基-3-硝基芐基)哌啶。
將上面制備的4-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-甲基-3-硝基芐基)哌啶、5％鈀-活性碳(15mg)和甲醇(2ml)的混合物在室溫氫氣氛下攪拌4小時。通過硅藻土濾出Pd催化劑，濃縮濾液。經(jīng)過制備型TLC(SiO2，乙酸乙酯/MeOH＝3/1)得到4-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(3-氨基-4-甲基芐基)哌啶(2114號化合物)(2.9mg，13％)純度用RPLC/MS測定(100％)；ESI/MS m/e 446.1(M++H，C23H29F2N5O2)。
實施例18254-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(3-氨基-4-甲氧基芐基)哌啶(2113號化合物)的制備
依據(jù)實施例1824的方法，使用相應(yīng)的試劑，合成標(biāo)題化合物4-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(3-氨基-4-甲氧基芐基)哌啶(2113號化合物)4.6mg，產(chǎn)率20％；ESI/MS m/e 462.2(M++H，C23H29F2N5O3)。
實施例18261-(3-氨基-4-羥基芐基)-4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]哌啶的制備
向4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(0.35mmol)、4-羥基-3-硝基苯甲醛(1.22mmol)、甲醇(3.8ml)和乙酸(0.175ml)的混合物中加入NaBH3CN(1.58mmol)的甲醇(3.2ml)溶液。反應(yīng)混合物在50℃下攪拌過夜。混合物冷卻至室溫，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH洗滌。用2N NH3的CH3OH溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。將所得物質(zhì)溶于乙酸乙酯/甲醇＝5/1，裝上VarianTMSi柱，用乙酸乙酯/甲醇＝5/1(10ml)洗脫，并濃縮，得到4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-羥基-3-硝基芐基)哌啶(175mg，87％)。
將上面制備的4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-羥基-3-硝基芐基)哌啶、10％鈀-活性碳(45mg)和甲醇(5ml)的混合物在室溫氫氣氛下攪拌2小時。濾出Pd催化劑，濃縮濾液，得到1-(3-氨基-4-羥基芐基)-4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(100mg，60％)。
實施例18274-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(3-氨基-4-羥基芐基)哌啶(2141號化合物)的制備
向1-(3-氨基-4-羥基芐基)-4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(20.0mg，0.035mmol)的甲醇(1ml)溶液中加入4NHCl的二噁烷(0.50ml)溶液，溶液在室溫下攪拌過夜。溶液濃縮后，將殘余物溶于甲醇，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH(5ml×2)洗滌。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物。經(jīng)過濃縮得到4-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(3-氨基-4-羥基芐基)哌啶(2141號化合物)(17.6mg，定量)純度用RPLC/MS測定(85％)；ESI/MS m/e 448.3(M++H，C22H27F2N5O3)。
實施例1828-1831
依據(jù)實施例1826和1827的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。必要時使用制備型TLC(SiO2)得到所需物質(zhì)。ESI/MS數(shù)據(jù)和最后步驟的產(chǎn)率總結(jié)在表41中。
表41
實施例18321-(3-氨基-4-氯芐基)-4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶的制備
向4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(0.14mmol)、4-氯-3-硝基苯甲醛(0.50mmol)、甲醇(1.5ml)和乙酸(0.070ml)的混合物中加入NaBH3CN(0.63mmol)的甲醇(1.3ml)溶液。反應(yīng)混合物在50℃下攪拌過夜。混合物冷卻至室溫，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH洗滌。用2N NH3的CH3OH溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。將所得物質(zhì)溶于乙酸乙酯/甲醇＝5/1，裝上VarianTMSi柱，用乙酸乙酯/甲醇＝5/1(6ml)洗脫，并濃縮，得到4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-氯-3-硝基芐基)哌啶(44mg，53％)ESI/MS m/e 596.3(M++H)。
將上面制備的4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-氯-3-硝基芐基)哌啶(121mg，0.20mmol)、10％鈀-活性碳(85mg)、乙酸乙酯(10ml)和甲醇(1ml)的混合物在室溫氫氣氛下攪拌19小時。濾出Pd催化劑，濃縮濾液，得到1-(3-氨基-4-氯芐基)-4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(78mg，68％)。
實施例18331-(3-氨基-4-氯芐基)-4-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(2142號化合物)的制備
依據(jù)實施例1832的方法，使用相應(yīng)的試劑，合成標(biāo)題化合物1-(3-氨基-4-氯芐基)-4-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(2142號化合物)13.7mg，98％；純度用RPLC/MS測定(83％)；ESI/MS m/e466.2(M++H，C22H26ClF2N5O2)。
實施例18341-(3-乙酰氨基4-羥基芐基)-4-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(2148號化合物)的制備
向1-(3-氨基-4-羥基芐基)-4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(27mg，0.049mmol)、(哌啶子基甲基)聚苯乙烯(2.7mmol/g，60mg，0.15mmol)和二氯甲烷(2ml)的混合物中加入乙酸酐(0.12mmol)的二氯甲烷(0.12ml)溶液。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時。將混合物裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH洗滌。用2N NH3的CH3OH溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮，得到1-(3-乙酰氨基-4-羥基芐基)-4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(30mg，定量)ESI/MS m/e590.4(M++H，C29H37F2N5O6)。
向上面得到的1-(3-乙酰氨基-4-羥基芐基)-4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶的甲醇(1ml)溶液中加入4N HCl的二噁烷(0.50ml)溶液，溶液在室溫下攪拌過夜。溶液濃縮后，將殘余物溶于甲醇，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH(5ml×2)洗滌。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物。經(jīng)過濃縮和制備型TLC(SiO2，AcOEt/MeOH＝3∶2)得到1-(3-乙酰氨基-4-羥基芐基)-4-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]哌啶(2148號化合物)(2.3mg，9.2％)純度用RPLC/MS測定(98％)；ESI/MSm/e 490.3(M++H，C24H29F2N5O4)。
實施例1835-1839
依據(jù)實施例1826和1834的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表42中。
表42
實施例18404-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(3-甲氨基-4-羥基芐基)哌啶(2160號化合物)的制備
向1-(3-氨基-4-羥基芐基)-4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(20.4mg，0.037mmol)、37％HCHO溶液(3.0mg，0.037mmol)、乙酸(0.10ml)和甲醇(1.3ml)的混合物中加入NaBH3CN(7.0mg)的甲醇(0.2ml)溶液。反應(yīng)混合物在60℃下攪拌過夜?；旌衔锢鋮s至室溫，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH洗滌(5ml×2)。用2N NH3的CH3OH(8ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮，得到4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(3-甲氨基-4-羥基芐基)哌啶。
向上面得到的4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(3-甲氨基-4-羥基芐基)哌啶的甲醇(1.0ml)溶液中加入4N HCl的二噁烷(1.0ml)溶液，溶液在室溫下攪拌3小時。溶液濃縮后，將殘余物溶于甲醇(1ml)，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH(5ml×2)洗滌。用2N NH3的CH3OH(8ml)溶液洗脫產(chǎn)物。經(jīng)過濃縮和制備型TLC(SiO2)得到4-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(3-甲氨基-4-羥基芐基)哌啶(2160號化合物)(3.4mg，20％)純度用RPLC/MS測定(96％)；ESI/MS m/e462.4(M++H，C23H29F2N5O3)。
實施例1841-1844
依據(jù)實施例1826和1840的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表43中。
表43
實施例18454-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(苯并[c]呋咱-5-基)哌啶(2130號化合物)的制備
將4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(0.050mmol)、5-(溴甲基)苯并[c]呋咱(0.75mmol)、(哌啶子基甲基)聚苯乙烯(2.6-2.8mmol/g，60mg，0.15mmol)、甲醇(0.2ml)、乙腈(1.0ml)和氯仿(0.50ml)的混合物在50℃下攪拌過夜?；旌衔锢鋮s至室溫，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH洗滌(5ml×2)。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。向所得物質(zhì)中加入氯仿(1.5ml)和異氰酸苯基酯(0.075ml)，溶液在室溫下攪拌1小時，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH洗滌(5ml×2)。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。將殘余物溶于甲醇(1ml)，加入4N HCl的二噁烷(0.50ml)溶液。溶液在室溫下攪拌過夜，并濃縮。將殘余物溶于甲醇，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH(5ml×2)洗滌。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物。經(jīng)過濃縮和制備型TLC(SiO2，乙酸乙酯/MeOH＝5/1)得到4-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(苯并[c]呋咱-5-基)哌啶(2130號化合物)(3.6mg，16％)純度用RPLC/MS測定(87％)；ESI/MS m/e459.3(M++H，C22H24F2N6O3)。
實施例18464-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(3，5-二甲基異噁唑-4-基)哌啶(2131號化合物)的制備
依據(jù)實施例1845的方法，使用相應(yīng)的試劑，合成標(biāo)題化合物4-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(3，5-二甲基異噁唑-4-基)哌啶(2131號化合物)3.8mg，產(chǎn)率18％；ESI/MS m/e 436.2(M++H，C21H27F2N5O3)。
實施例18474-[{N-(2-氨基-5-氯苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-{4-(三氟甲硫基)芐基}哌啶(1616號化合物)的制備
將4-[{N-(2-氨基-5-氯苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]哌啶(16.2mg，0.050mmol)、4-(三氟甲硫基)芐基溴(20.3mg，0.075mmol)、哌啶子基甲基聚苯乙烯(60mg)、乙腈(1.0ml)和氯仿(0.50ml)的混合物在60℃下攪拌15小時。反應(yīng)混合物冷卻，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH(15ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮，得到4-[{N-(2-氨基-5-氯苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-{4-(三氟甲硫基)芐基}哌啶(1616號化合物)(21.9mg，85％)純度用RPLC/MS測定(96％)；ESI/MS m/e 545.2(M++H，C23H26ClF3N4O2S)。
實施例1848-1868
依據(jù)實施例1847的方法，使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。必要時使用制備型TLC得到所需物質(zhì)。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表44中。
表44
實施例18694-[{N-(2-氨基-5-三氟甲氧基苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-溴芐基)哌啶(1910號化合物)的制備
將4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲氧基苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(0.050mmol)、4-溴芐基溴(0.060mmol)、哌啶子基甲基聚苯乙烯(60mg)、乙腈(0.8ml)和氯仿(0.5ml)的混合物在60℃下攪拌12小時。反應(yīng)混合物冷卻，裝上VarianTM SCX柱，用50％CHCl3/CH3OH(10ml)和CH3OH(10ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。向所得物質(zhì)中加入4N HCl的1，4-二噁烷(2ml)溶液，溶液在室溫下攪拌過夜。經(jīng)過濃縮和制備型TLC得到4-[{N-(2-氨基-5-三氟甲氧基苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-溴芐基)哌啶(1910號化合物)(6.5mg，24％)純度用RPLC/MS測定(96％)；ESI/MS m/e 545(M++H，C23H26BrF3N4O3)。
實施例1870-1873
依據(jù)實施例1869的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表45中。
表45
實施例18744-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(苯并[d]咪唑-5-基)哌啶(2186號化合物)的制備
將4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(0.060mmol)、1-(叔丁氧羰基)-6-(溴甲基)苯并[d]咪唑(15.6mg，0.050mmol)、(哌啶子基甲基)聚苯乙烯(86mg)和乙腈(2ml)的混合物在50℃下攪拌3小時。冷卻至室溫后，加入異氰酸苯基酯(30mg)，混合物在室溫下攪拌1小時，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH(5ml)和CHCl3(5ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(3ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。
將所得物質(zhì)溶于甲醇(1ml)，加入4N HCl的二噁烷(1ml)溶液。溶液在室溫下攪拌過夜，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH和二氯甲烷洗滌。用2N NH3的CH3OH溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。經(jīng)過制備型TLC(SiO2，AcOEt/MeOH＝3∶1)得到4-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(苯并[d]咪唑-5-基)哌啶(2186號化合物)(1.9mg，7.8％)純度用RPLC/MS測定(100％)；ESI/MS m/e 489.4(M++H，C24H27F3N6O2)。
實施例18754-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(苯并[c]噻二唑-5-基)哌啶(2184號化合物)的制備
向5-(羥甲基)苯并[c]噻二唑(8.3mg，0.050mmol)、(哌啶子基甲基)聚苯乙烯(86mg)和氯仿(1ml)的混合物中加入甲磺酰氯(0.0042ml)，混合物在室溫下攪拌1.5小時。加入乙腈(1ml)和4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(0.060mmol)，反應(yīng)混合物在50℃下攪拌3小時。冷卻至室溫后，加入異氰酸苯基酯(30mg)，混合物在室溫下攪拌1小時，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH(5ml)和CHCl3(5ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(3ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。
將所得物質(zhì)溶于二氯甲烷(1ml)，加入1M氯三甲基硅烷和1M苯酚的二氯甲烷(1ml)溶液。溶液在室溫下攪拌5小時，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH和二氯甲烷洗滌。用2N NH3的CH3OH溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。經(jīng)過制備型TLC(SiO2，AcOEt/MeOH＝3∶1)得到4-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(苯并[c]噻二唑-5-基)哌啶(2184號化合物)(1.3mg，5.5％)純度用RPLC/MS測定(100％)；ESI/MS m/e 475.2(M++H，C22H24F2N6O2S)。
實施例18764-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(苯并[c]噻二唑-5-基)哌啶(2185號化合物)的制備
依據(jù)實施例1875的方法，使用相應(yīng)的試劑，合成標(biāo)題化合物4-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(苯并[c]噻二唑-5-基)哌啶(2185號化合物)7.2mg，產(chǎn)率28％；ESI/MS m/e 507.4(M++H，C23H25F3N6O2S)。
實施例18774-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(2-氨基-4-氯芐基)哌啶(1919號化合物)的制備
將4-[{N-2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(0.050mmol)、4-氯-2-硝基芐基氯(0.050mmol)、哌啶子基甲基聚苯乙烯(60mg)、乙腈(1.0ml)和氯仿(0.7ml)的混合物在50℃下攪拌過夜。反應(yīng)混合物冷卻，裝上VarianTM SCX柱，用50％CHCl3/CH3OH(10ml)和CH3OH(10ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。向所得物質(zhì)中加入乙醇(3ml)和10％Pd-C(15mg)，混合物在室溫H2下攪拌1.5小時。經(jīng)過過濾、濃縮和制備型TLC得到4-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(2-氨基-4-氯芐基)哌啶(1919號化合物)(5.1mg，14％)純度用RPLC/MS測定(90％)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.09-1.32(m，4H)，1.41-1.59(m，1H)，1.66(d，J＝12.5Hz，2H)，1.88(t，J＝11.5Hz，2H)，2.82(d，J＝11.5Hz，2H)，3.17(t，J＝6.5Hz，2H)，3.42(s，2H)，4.05(d，J＝5.5Hz，2H)，4.85(br s，1H)，5.92(br s，2H)，6.25-6.36(m，1H)，6.55-6.66(m，1H)，6.70(d，J＝8.5Hz，1H)，6.85(d，J＝8.5Hz，1H)，7.26(s，1H)，7.42(d，J＝8.5Hz，1H)，7.68(s，1H)；ESI/MS m/e 498.2(M++H，C23H27ClF3N5O2).
實施例1878和1879
依據(jù)實施例1877的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表46中。
表46
實施例18804-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(苯并[d]噁唑-5-基)哌啶(2188號化合物)的制備
將依據(jù)實施例1826方法制備的1-(3-氨基-4-羥基芐基)-4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(34.8mg，0.060mmol)的THF(2ml)溶液用原甲酸三乙酯(0.033ml，3.3當(dāng)量)和對甲苯磺酸吡啶鎓(2mg，0.4當(dāng)量)處理。反應(yīng)混合物在回流下攪拌過夜。冷卻至室溫后，混合物濃縮。將殘余物溶于AcOEt，裝上BondElutTMSi柱，用乙酸乙酯/甲醇＝4/1洗脫，并濃縮。
將所得物質(zhì)溶于AcOEt(1.5ml)，加入4N HCl的二噁烷(0.5ml)溶液。溶液在室溫下攪拌過夜，用5M NaOH水溶液調(diào)pH為10，用AcOEt萃取。萃取液濃縮，用PTLC純化(SiO2，AcOEt/MeOH＝4∶1)，得到4-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(苯并[d]噁唑-5-基)哌啶(2188號化合物)(1.6mg，5％)純度用RPLC/MS測定(94％)；ESI/MS m/e 490.3(M++H，C24H26F3N5O3)。
實施例18814-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(2-酮基-2，3-二氫-1，3-苯并噁唑-5-基)哌啶(2190號化合物)的制備
向1-(3-氨基-4-羥基)-4-[{N-(2-(叔丁氧羰基氨基)-4，5-二氟苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]哌啶(22mg，0.040mmol)、NaHCO3(0.040mmol)、水(0.7ml)和甲醇(1.5ml)的混合物中加入氯甲酸苯基酯(0.046mmol)，混合物在室溫下攪拌3小時。加入1N NaOH溶液(0.040ml)，反應(yīng)混合物再攪拌1.5小時?；旌衔镉靡宜嵋阴ポ腿?，蒸發(fā)。將殘余物溶于甲醇，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH洗滌(5ml×2)。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。
向所得物質(zhì)中加入1M氯三甲基硅烷和1M苯酚的二氯甲烷(2ml)溶液。溶液在室溫下攪拌2小時，蒸發(fā)。將殘余物溶于甲醇，裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH洗滌(5ml×2)。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮。經(jīng)過制備型TLC(SiO2，AcOEt/MeOH＝5∶2)得到4-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(2-酮基-2，3-二氫-1，3-苯并噁唑-5-基)哌啶(2190號化合物)(4.1mg，22％)純度用RPLC/MS測定(100％)；ESI/MS m/e474.2(M++H，C23H25F2N5O4)。
實施例1882-1884
依據(jù)實施例1881的方法，分別使用相應(yīng)的試劑(在制備2192和2193號化合物時，用氯硫甲酸苯基酯(chlorothionoformate)代替氯甲酸苯基酯)，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表47中。
表47
參考例364-[{N-(1-(9-芴基甲氧羰基)哌啶-4-基甲基)氨基甲?；谆鶀氨基甲基]-3-甲氧基苯氧基甲基-聚苯乙烯的制備
向鹽酸1-(9-芴基甲氧羰基)-4-(甘氨酰氨基甲基)哌啶(10mmol)的DMF(65ml)溶液中加入乙酸(0.3ml)、三乙酰氧基硼氫化鈉(1.92g)和4-甲?；?3-(甲氧基苯氧基甲基)-聚苯乙烯(1mmol/g，200g)?；旌衔飺u動2小時，過濾。樹脂用MeOH、DMF、CH2Cl2和甲醇洗滌，并干燥，得到所需物質(zhì)。
實施例1885-2000用于4-氨甲基哌啶的固相合成的通用操作
向相應(yīng)的酸(1.6mmol)、HBTU(1.6mmol)和DMF(6ml)的混合物中加入二異丙基乙胺(3.6mmol)，混合物搖動2分鐘。加入4-[{N-(1-(9-芴基甲氧羰基)哌啶-4-基甲基)氨基甲?；谆鶀氨甲基]-3-甲氧基苯氧基甲基-聚苯乙烯(0.4mmol)，混合物搖動1小時，過濾。樹脂用DMF和CH2Cl2漂洗，干燥。
將所得樹脂、哌啶(3.2ml)和DMF(12.8ml)的混合物搖動10分鐘，過濾。樹脂用DMF和CH2Cl2洗滌，干燥。
向干燥樹脂(0.05mmol)中加入NaBH(OAc)3(0.25mmol)、AcOH(0.025mmol)和DMF(1ml)的混合物。加入相應(yīng)的醛(2.5mmol)，混合物搖動2小時，然后過濾，用CH3OH、10％二并丙乙胺的DMF溶液、DMF、CH2Cl2和CH3OH洗滌。將樹脂、水(0.050ml)和三氟乙酸(0.95ml)的混合物搖動1小時，過濾。樹脂用CH2Cl2和CH3OH洗滌。合并濾液和洗液，濃縮。將粗物質(zhì)裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH(15ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，濃縮。必要時使用制備型TLC或HPLC，得到所需物質(zhì)。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表48中。
表48
*TFA鹽的產(chǎn)量
實施例20011-(3-氨基甲酰基芐基)-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(924號化合物)的制備
向1-(3-羧基芐基)-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]哌啶(19.4mg，0.041mmol)的CHCl3(2.5ml)的溶液中加入EDCI(10.7mg)、1-羥基苯并三唑水合物(7.5mg)、Et3N(15.4mg)、0.5M NH3的二噁烷溶液(0.1ml，0.05mmol)和DMF(0.5ml)。反應(yīng)混合物在25℃下攪拌20小時，用2N NaOH水溶液(2×2ml)和鹽水(1ml)洗滌。通過PTFE濾膜過濾后，在減壓下除去溶劑，得到1-(3-氨基甲?；S基)-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(924號化合物)，為淡黃色固體(17.9mg，92％)純度用RPLC/MS測定(89％)；ESI/MS m/e 447.3(M++H，C24H27F3N4O3)。
實施例20021-(4-氨基甲?；S基)-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(925號化合物)的制備
依據(jù)實施例2001的方法，使用相應(yīng)的試劑，合成了925號化合物14.2mg，72％；純度用RPLC/MS測定(86％)；ESI/MS m/e 447(M++H，C24H27F3N4O3)。
實施例20031-(4-氨基芐基)-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(516號化合物)的制備
在5％鈀碳(10mg)的存在下，將1-(4-硝基芐基)-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(22.4mg，0.047mmol)的EtOH(3ml)溶液在25℃1atm下氫化1小時。過濾除去催化劑，用EtOH(5ml)洗滌。合并后的濾液蒸發(fā)，得到1-(4-氨基芐基)-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]哌啶(516號化合物)，為淡黃色固體(20.1mg，96％)。純度用RPLC/MS測定(99％)；ESI/MS m/e 449.1(M++H，C23H27F3N4O2)。
實施例2004和2005
依據(jù)實施例2003的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成了517和518號化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表49中。
表49
實施例20061-{ 4-(苯甲酰氨基)芐基}-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(519號化合物)的制備
向1-(4-氨基芐基)-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(10.1mg，0.023mmol)的CH2Cl2(2.5ml)溶液中加入EDCI(4.7mg)、1-羥基苯并三唑水合物(3.3mg)、Et3N(2.5mg)和苯甲酸(3.0mg)。反應(yīng)混合物在25℃下攪拌16小時，用2N NaOH水溶液(2×2ml)和鹽水(1ml)洗滌。通過PTFE濾膜過濾后，在減壓下除去溶劑，得到1-{4-(苯甲酰氨基)芐基}-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(519號化合物)，為無色的油(4.6mg，36％)純度用RPLC/MS測定(99％)；ESI/MS m/e 553.2(M++H，C30H31F3N4O3)。
實施例20071-{4-(哌啶子基羰基)芐基}-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(1572號化合物)的制備
向1-(4-羧基芐基)-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(0.040mmol)的DMF(1.0ml)溶液中加入哌啶(0.048mmol)、二異丙基碳二亞胺(0.45mmol)的DMF(0.15ml)溶液、1-羥基苯并三唑水合物(0.45mmol)的DMF(0.15ml)溶液。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌17小時，裝上VarianTM SCX柱，用CHCl3/CH3OH 1∶1(5ml)和CH3OH(5ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮，得到1-{4-(哌啶子基羰基)芐基}-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]哌啶(1572號化合物)(14.3mg，66％)純度用RPLC/MS測定(99％)；ESI/MS m/e 545(M++H，C29H35F3N4O3)。
實施例2008-2015
依據(jù)實施例2007的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表50中。
表50
實施例20161-[4-(氯甲?；?芐基]-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶的制備
將1-(4-羧基芐基)-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(240mg)和亞硫酰氯(1ml)的混合物在室溫下攪拌12小時，在減壓下除去過量的亞硫酰氯，得到所需的1-[4-(氯甲酰基)芐基]-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶。酰氯在使用時不經(jīng)過進一步純化。
實施例20171-[4-{N-(2-甲氧基乙基)氨基甲酰基}芐基]-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(1612號化合物)的制備
將1-[4-(氯甲酰基)芐基]-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]哌啶(0.042mmol)、2-甲氧基乙胺(3.8mg，0.050mmol)、哌啶子基甲基聚苯乙烯(46mg)和二氯甲烷(1.5ml)的混合物在室溫下攪拌17小時。加入水(0.020ml)，混合物攪拌30分鐘。加入甲醇(1ml)，將混合物裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH(10ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮，得到1-[4-{N-(2-甲氧基乙基)氨基甲?；鶀芐基]-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(1612號化合物)(26.7mg，100％)純度用RPLC/MS測定(92％)；ESI/MS m/e 535.2(M++H，C27H33F3N4O4)。
實施例2018-2020
依據(jù)實施例2017的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。必要時使用制備型TLC得到所需物質(zhì)。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表51中。
表51
實施例20214-[N-{5-溴-2-(甲氨基)苯甲?；鶀甘氨酰]氨基甲基-1-(4-氯芐基)哌啶(1427號化合物)的制備
將4-{N-(2-氨基-5-溴苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基-1-(4-氯芐基)哌啶(1042號化合物)(50mg，0.10mmol)的原甲酸三乙酯(6.5ml)溶液在150℃下攪拌17小時。濃縮得到黃色固體。向該黃色固體的乙醇(3ml)溶液中加入硼氫化鈉(7.6mg，0.2mmol)，混合物在室溫下攪拌14小時。將所得白色沉淀溶于二氯甲烷，溶液用1N NaOH水溶液(2ml)洗滌。分離有機層，經(jīng)K2CO3干燥，過濾并蒸發(fā)。經(jīng)過柱色譜法(SiO2，20％MeOH/CHCl3)得到4-[N-{5-溴-2-(甲氨基)苯甲?；鶀甘氨酰]氨基甲基-1-(4-氯芐基)哌啶(1427號化合物)(40mg，80％)純度用RPLC/MS測定(100％)；ESI/MS m/e 505(M++H，C23H28BrClF6N4O2)。
實施例20224-[N-{5-溴-2-(二甲氨基)苯甲?；鶀甘氨酰]氨基甲基-1-(4-氯芐基)哌啶(1428號化合物)的制備
向4-{N-(2-氨基-5-溴苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基-1-(4-氯芐基)哌啶(1042號化合物)(67mg，0.14mmol)、37％甲醛水溶液(0.112ml，1.4mmol)、乙腈(2ml)和甲醇(1.5ml)的混合物中連續(xù)加入氰基硼氫化鈉(26mg，0.42mmol)和乙酸(14μl)。溶液在50℃下攪拌30小時后，加入1N NaOH水溶液和二氯甲烷。分離含水層，有機層經(jīng)K2CO3干燥，過濾并蒸發(fā)。經(jīng)過柱色譜法(SiO2，20％MeOH/AcOEt)得到4-[N-{5-溴-2-(二甲氨基)苯甲酰基}甘氨酰]氨基甲基-1-(4-氯芐基)哌啶(1428號化合物)(60mg，82％)純度用RPLC/MS測定(100％)；ESI/MS m/e 523(M++H，C24H30BrClF6N4O2)。
實施例20234-[{N-(5-溴-2-(甲磺酰氨基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-氯芐基)哌啶(1581號化合物)的制備
將4-[{N-(2-氨基-5-溴苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-氯芐基)哌啶(25mg，0.05mmol)、甲磺酰氯(0.0045ml)、三乙胺(0.026ml)和二氯甲烷(2ml)的混合物在室溫下攪拌17小時。反應(yīng)混合物用柱色譜法(SiO2)純化，裝上VarianTM SAX柱，用CH3OH(5ml)洗滌。用0.1N HCl的CH3OH(5ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮，得到4-[{N-(5-溴-2-(甲磺酰氨基)苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-氯芐基)哌啶(1581號化合物)(5.4mg，19％)ESI/MS m/e 573.0(M++H，C23H28BrClN4O4S)。
實施例20244-[{N-(5-溴-2-(雙(甲磺酰)氨基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-氯芐基)哌啶(1582號化合物)的制備
將4-[{N-(2-氨基-5-溴苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-氯芐基)哌啶(57mg，0.10mmol)、甲磺酰氯(0.018ml，0.24mmol)、三乙胺(0.068ml)和二氯甲烷(2ml)的混合物在室溫下攪拌8小時。加入1N NaOH水溶液(1ml)，混合物用二氯甲烷萃取(2ml×3)。合并后的萃取液經(jīng)K2CO3干燥，過濾并蒸發(fā)。經(jīng)過柱色譜法(SiO2)得到4-[{N-(5-溴-2-(雙(甲磺酰)氨基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-氯芐基)哌啶(1582號化合物)(40mg，62％)ESI/MS m/e 651(M++H，C24H30BrClN4O6S2)。
實施例20251-(4-氯芐基)-1-甲基-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]哌啶鎓碘化物(461號化合物的甲基碘化銨)的制備
向4-氯芐基氯(11.7mg，0.073mmol)的CH3CN(1.0ml)溶液中加入4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(30mg，0.087mmol)的CH3CN(1.0ml)溶液和(哌啶子基甲基)聚苯乙烯(80mg，2.7mmol基質(zhì)/g樹脂)。反應(yīng)混合物在60℃下攪拌2小時。向冷卻后的反應(yīng)混合物中加入異氰酸苯基酯(10.4mg，0.087mmol)，混合物在25℃下攪拌1小時。將反應(yīng)混合物裝上VarianTM SCX柱，用CH3OH(20ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(6ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮，得到1-(4-氯芐基)-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶，為無色的油，使用時不經(jīng)過純化。向1-(4-氯芐基)-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]哌啶的CH3CN(2.0ml)溶液中加入碘甲烷(28mg，0.20mmol)，反應(yīng)混合物在70℃下攪拌4小時。在減壓下除去溶劑，得到1-(4-氯芐基)-1-甲基-4-[{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶鎓碘化物，為淡黃色油(31.7mg，71％)純度用RPLC/MS測定(99％)；ESI/MS m/e 482.1(M+，C24H28ClF3N3O2)。
實施例20261-(4-氯芐基)-4-[N-甲基-N-{N-(3-(三氟甲基)苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]哌啶(520號化合物)的制備
向1-(4-氯芐基)-4-(氨甲基)哌啶(318mg，1.33mmol)與NaBH3CN(668mg)的10％CH3COOH/CH3OH(3ml)溶液中加入甲醛(108mg，1.33mmol，37wt％H2O溶液)。反應(yīng)混合物在25℃下攪拌1小時。將反應(yīng)混合物裝上DOWEXTM50W×2柱(10ml)，用CH3OH(100ml)洗滌。用2N NH3的CH3OH(100ml)溶液洗脫產(chǎn)物，并濃縮，得到173mg粗的1-(4-氯芐基)-4-{(甲氨基)甲基}哌啶，為無色的油，使用時不經(jīng)過純化。
向1-(4-氯芐基)-4-{(甲氨基)甲基}哌啶(111mg，0.44mmol)的CH2Cl2(4ml)溶液中加入EDCI(85mg)、1-羥基苯并三唑水合物(60mg)。反應(yīng)混合物在25℃下攪拌1小時，然后用2N NaOH水溶液(2ml×2)和鹽水(1ml)洗滌。通過PTFE濾膜過濾后，在減壓下除去溶劑，得到黃色的油，用制備型TLC純化(SiO2，5％CH3OH/CH2Cl2)，得到1-(4-氯芐基)-4-[N-甲基-N-{N-(3-(三氟甲基)苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶(520號化合物)，為淡黃色油(14.0mg，3.4％)純度用RPLC/MS測定(99％)；ESI/MS m/e 482.1(M++H，C24H27ClF3N3O2)。
參考例373-氨基高哌啶的制備
將DL-α-氨基-ε-己內(nèi)酰胺(2g，16mmol)的THF(70ml)溶液用1M BH3-THF溶液(80ml)處理，并加熱回流3小時。加入2N HCl溶液(50ml)，反應(yīng)物再加熱回流一小時，然后冷卻至25℃。向反應(yīng)物中加入4N NaOH溶液進行堿化(pH10)，用EtOAc萃取(3×200ml)。合并后的有機相用飽和NaHCO3水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，并濃縮，得到所需物質(zhì)(990mg，54％)，使用時不經(jīng)過任何進一步純化。
參考例383-氨基-1-(4-氯芐基)高哌啶的制備
將3-氨基高哌啶(1.71g，15mmol)的CH3CN(45ml)溶液用對氯芐基氯(463mg，2.9mmol)和K2CO3(828mg(原文為828g——譯者注)，6mmol)處理，并在70℃下加熱9小時。反應(yīng)混合物冷卻至25℃，并濃縮，得到黃色固體。使殘余物在H2O(5ml)與EtOAc(50ml)之間分布，用EtOAc萃取(2×50ml)。合并后的有機萃取液用鹽水(20ml)洗滌，干燥(Na2SO4)，并濃縮。所得黃色的油用色譜法純化(SiO2，5-20％CH3OH-CH2Cl2梯度洗脫)，得到所需產(chǎn)物，為黃色的油(639mg，93％)。
實施例20271-(4-氯芐基)-3-{(4-苯甲?；□?氨基}高哌啶(994號化合物)的制備
將3-氨基-1-(4-氯芐基)高哌啶(24mg，0.10mmol)與4-苯甲?；∷?1.2當(dāng)量)的CHCl3(1ml)溶液用EDCI(23mg)、HOBt(16.2mg)和Et3N(15.2μl)處理，在25℃下攪拌16小時。反應(yīng)混合物用CH2Cl2(0.5ml)稀釋，用2N NaOH水溶液洗滌(2×0.75ml)，通過PTFE膜過濾進行干燥，并濃縮，得到1-(4-氯芐基)-3-{(4-苯甲?；□?氨基}高哌啶(994號化合物)(43mg，99％)純度用RPLC/MS測定(98％)；ESI/MS m/e 413(M++H，C24H29ClN2O2)。
實施例2028-2042
依據(jù)實施例2027的方法，分別使用相應(yīng)的試劑，合成本發(fā)明的化合物。必要時使用色譜法(HPLC-C18)得到所需物質(zhì)的TFA鹽。ESI/MS數(shù)據(jù)和產(chǎn)率總結(jié)在表52中。
表52
*TFA鹽的產(chǎn)量
實施例2043供試化合物對MIP-1α與THP-1細胞結(jié)合的抑制作用的測量
將人單核細胞白細胞系THP-1懸浮在測定緩沖液(RPMI-1640(Gibco-BRL Co.)，含有0.1％BSA和25mM HEPES，pH調(diào)為7.4)中，得到濃度為1×107個細胞/ml的細胞混懸液。將供試化合物稀釋在測定緩沖液中，用作供試化合物溶液。將碘化人MIP-1α(DuPont NEN Co.)稀釋在測定緩沖液中，濃度為250nCi/ml，用作標(biāo)記配體溶液。在96孔濾板(Millipore Co.)中，向每孔中按順序等量加入25μl供試化合物溶液、25μl標(biāo)記配體溶液和50μl細胞混懸液，攪拌(總反應(yīng)體積為100μl)，在18℃下恒溫一小時。
反應(yīng)后，過濾反應(yīng)溶液，濾器用200μl冷PBS洗滌兩次(加入200μl冷PBS，然后過濾)。濾器風(fēng)干，向每孔中加入25μl液體閃爍劑。用TopCount(Packard Instrument Co.)測量濾器上細胞保留的放射性。
為了計算供試化合物抑制人MIP-1α與THP-1細胞結(jié)合的能力，減去由加入100ng未標(biāo)記的人MIP-1α(Peprotech Co.)代替供試化合物所測定的非特異性結(jié)合，將沒有加入供試化合物的讀數(shù)作為100％。
抑制率(％)＝1-(A-B)/(C-B)}×100
(A加入供試化合物的讀數(shù)；B加入100ng未標(biāo)記的人MIP-1α的讀數(shù)；C加入[125I]-標(biāo)記的人MIP-1α的讀數(shù))。
在測量本發(fā)明的環(huán)胺衍生物的抑制作用時，例如，下列化合物在2μM或5μM下分別證實了20％-50％、50％-80％和＞80％的抑制活性。這些化合物是
10μM下抑制率為20％-50％的化合物29，37，41，45，46，47，50，82，85，107，120，134，214，217，218，220，222，225，226，227，228，229，230，231，233，234，236，237，238，333，334，335，336，338，340，342，347，348，349，350，352，357，359，361，366，372，374，375，376，380，382，383，385，470，471，472，473，474，483，484，488，489，491，497，499，500，502，506，508，510，514，515，518，524，543，553，554，555，556，563，571，575，576，578，579，580，583，586，587，588，590，591，592，595，596，598，603，610，611，612，614，624，625，626，629，635，638，639，640，641，642，643，644，646，647，648，649，652，653，658，659，660，665，666，669，671，675，677，679，681，682，684，691，695，696，700，702，704，706，711，712，714，717，721，723，724，726，727，728，729，731，737，739，740，741，742，744，746，765，767，772，773，774，775，776，780，781，785，786，787，788，790，791，792，793，795，796，797，798，805，806，807，810，813，820，821，822，824，825，827，829，830，833，834，837，838，844，853，855，873，877，878，880，882，887，888，891，894，901，903，904，905，911，929，932，933，935，938，940，948，993，996，1006，1018，1026，1028，1035，1048，1053，1054，1055，1056，1068，1070，1071，1072，1073，1075，1076，1081，1763，1764.
10μM下抑制率為50％-80％的化合物1，2，3，4，7，13，22，23，24，25，27，31，32，38，48，83，119，121，123，131，215，216，221，235，337，351，354，358，362，363，365，367，368，369，373，378，381，384，458，459，463，465，466，467，468，478，479，480，482，485，486，487，492，493，494，495，496，498，501，503，504，507，511，512，513，520，523，527，529，530，531，532，533，534，535，536，537，538，539，540，541，542，545，546，547，548，549，550，551，552，558，559，560，561，562，565，567，568，569，570，572，573，574，577，581，582，594，597，599，600，602，604，606，607，608，609，613，615，616，618，619，620，621，628，630，631，632，633，634，636，637，645，651，654，655，657，661，662，664，673，674，676，678，680，683，685，687，688，689，693，703，705，707，708，709，710，713，716，718，719，720，725，730，732，733，734，735，736，749，750，751，752，753，754，756，758，760，762，763，764，766，768，769，770，771，777，778，779，784，794，799，800，802，804，808，809，811，812，815，816，819，828，831，832，835，836，839，840，845，846，847，848，850，851，854，857，858，859，860，861，862，863，865，866，867，868，872，874，876，886，899，910，942，998，1004，1005，1007，1013，1015，1016，1017，1019，1020，1021，1022，1024，1030，1037，1042，1043，1044，1045，1046，1047，1049，1050，1052，1059，1060，1061，1067，1069，1074，1078，1079，1080，1766.
10μM下抑制率＞80％的化合物461，464，469，481，490，505，509，521，526，528，544，564，566，601，605，617，622，623，627，650，656，663，668，672，686，690，692，694，715，743，747，748，755，757，759，761，782，783，803，814，817，818，826，849，856，864，869，870，871，999，1000，1001，1002，1003，1008，1009，1010，1011，1012，1023，1029，1031，1032，1033，1034，1036，1038，1039，1040，1041，1051，1057，1058，1062，1063，1064，1065，1066，1082，1083.
2μM下抑制率為20％-50％的化合物1042，1043，1244，1245，1416，1435，1436，1438，1441，1480，1570，1583，1584，1589，1590，1594，1595，1601，1660，1672，1687，1724，1779，1780，1787，1795，1796，1798，1799，1802，1893，1894，1898，1900，1915，1919，1920，2092，2096，2098，2100.
2μM下抑制率為50％-80％的化合物1190，1414，1600，2091，2094，2095.
2μM下抑制率＞80％的化合物2093，2097，2099，2103，2104.
實施例2044MCP-1與THP-1細胞結(jié)合的抑制作用的測量
1、攜帶人MCP-1基因的重組桿狀病毒的構(gòu)造
基于以前公開的人MCP-1基因序列(例如T.Yoshimura等《FEBSLett.》1989，244，487-493)，使用兩種側(cè)面連接限制酶部位的合成DNA引物(5’-CACTCTAGACTCCAGCATGA-3’和5’-TAGCTGCAGATTCTTGGGTTG-3’)擴增來源于人內(nèi)皮細胞cDNA(購自Kurabow Co.)的DNA片段；擴增后的片段用限制酶(PstI和XbaI)切割，與轉(zhuǎn)移載體pVL1393(Invitrogen Co.)結(jié)合，將所得載體與傳染性桿狀病毒共同轉(zhuǎn)染給Sf-9昆蟲細胞，上清液進行噬斑測定，得到人MCP-1基因桿狀病毒重組體。
2、桿狀病毒內(nèi)表達的[125I]-標(biāo)記的人MCP-1的合成
利用K.Ishii等的方法(《生物化學(xué)與生物物理學(xué)研究通訊》1995，206，955-961)，用5×107PFU(噬斑形成單位)上述人MCP-1重組桿狀病毒感染5×106Sf-9昆蟲細胞，在Ex-Cell 401培養(yǎng)基中培養(yǎng)7天。培養(yǎng)物上清液用肝素瓊脂糖柱(Pharmacia Co.)親和法純化，然后進一步用反相HPLC(Vydac C18柱)純化，制備純化后的人MCP-1。純化后的人MCP-1通過Amersham Co.用Bolton Hunter法進行蛋白質(zhì)標(biāo)記，得到[125I]-標(biāo)記的桿狀病毒表達的人MCP-1(比活度為2000 Ci/mmol)。
3-1、對[125I]-標(biāo)記的桿狀病毒表達的人MCP-1與THP-1細胞結(jié)合的抑制作用的測量(方法1)
將人單核細胞白細胞系THP-1懸浮在測定緩沖液(RPMI-1640(Gibco-BRL Co.)，含有0.1％BSA和25mM HEPES，pH調(diào)為7.4)中，得到濃度為1×107個細胞/ml的細胞混懸液。將供試化合物稀釋在測定緩沖液中，用作供試化合物溶液。將上述[125I]-標(biāo)記的人MCP-1稀釋在測定緩沖液中，濃度為1mCi/ml，用作標(biāo)記配體溶液。在96孔濾板(Millipore Co.)中，向每孔中按順序等量加入25μl供試化合物溶液、25μl標(biāo)記配體溶液和50μl細胞混懸液，攪拌(總反應(yīng)體積為100μl)，在18℃下恒溫一小時。
反應(yīng)后，過濾反應(yīng)溶液，濾器用200μl冷PBS洗滌兩次(加入200μl冷PBS，然后過濾)。濾器風(fēng)干，向每孔中加入25μl液體閃爍劑。用TopCount(Packard Instrument Co.)測量濾器上細胞保留的放射性。
為了計算供試化合物抑制人MCP-1與THP-1細胞結(jié)合的能力，減去由加入100ng未標(biāo)記的人MCP-1代替供試化合物所測定的非特異性結(jié)合，將沒有加入供試化合物的讀數(shù)作為100％。
抑制率(％)＝{1-(A-B)/(C-B)}×100
(A加入供試化合物的讀數(shù)；B加入100ng未標(biāo)記的人MCP-1的讀數(shù)；C加入[125I]-標(biāo)記的人MCP-1的讀數(shù))。
在測量本發(fā)明的環(huán)胺衍生物的抑制作用時，例如，下列化合物在1μM、10μM或100μM下分別證實了20％-50％、50％-80％和＞80％的抑制活性。
這些化合物是
100μM下抑制率為20％-50％的化合物3，6，11，15，16，19，28，44，88，92，94，104，111，112，124，125，133，219，220，224，228，236，338，343，346，347，348，349，362，363，367，368，371，373，381，618，847，849，850，866，867，869，870，871，872，873.
100μM下抑制率為50％-80％的化合物1，8，10，12，18，21，26，30，33，35，39，84，89，90，91，96，97，98，99，100，101，103，106，108，109，110，116，122，126，216，218，221，225，226，231，330，332，333，334，337，341，342，350，352，354，356，359，360，361，364，366，374，375，379，382，462，463，464，557，686，840，841，842，843，844，845，846，848，862，863，864，865，868.
100μM下抑制率＞80％的化合物
2，4，5，7，13，14，17，20，22，23，24，25，27，29，31，32，34，36，38，40，41，42，43，45，46，47，48，49，50，83，85，86，95，102，105，107，113，114，115，119，120，121，123，127，128，129，130，131，132，134，214，215，217，227，237，238，331，335，336，339，340，345，351，355，357，358，383，458，459，460，466，558，851，852，861，874.
10μM下抑制率為20％-50％的化合物12，18，30，34，40，42，43，51，52，53，54，55，56，57，59，60，64，66，75，76，77，78，79，82，89，90，97，98，102，103，116，127，128，129，130，132，135，136，140，141，144，156，157，159，160，161，162，163，166，167，168，169，170，171，172，173，174，175，176，178，179，190，191，192，195，197，200，202，203，204，205，208，233，234，235，239，240，241，242，243，245，247，249，250，255，263，264，269，274，278，279，282，306，316，317，323，324，380，404，409，433，446，448，449，451，470，471，473，476，479，486，498，489，497，498，499，501，504，507，508，509，510，512，514，516，519，527，530，532，542，545，560，563，564，565，566，568，569，572，573，574，575，578，583，584，586，587，589，590，599，600，601，603，606，612，613，620，621，622，624，625，627，629，630，632，634，636，637，640，641，642，643，644，645，646，647，648，649，658，678，682，687，692，694，764，775，856，857，860，881，882，883，884，890，892，899，900，903，905，907，908，911，912，916，917，921，922，923，925，927，931，932，935，939，940，968，986，1039，1041，1045，1047，1062，1063，1083.
10μM下抑制率為50％-80％的化合物7，32，36，61，62，63，65，67，69，70，71，72，73，74，81，91，105，114，121，123，134，137，138，139，146，147，148，149，151，154，165，177，232，244，248，251，252，253，256，259，261，266，267，276，286，292，293，295，301，305，307，310，314，315，320，322，328，434，435，436，437，439，440，443，447，450，452，453，454，455，456，468，469，472，474，475，477，478，480，481，482，483，485，490，493，494，500，505，511，517，520，529，534，540，543，544，548，555，556，561，562，570，576，579，611，617，853，854，855，858，859，875，877，879，880，885，886，897，888，891，894，895，904，906，909，910，913，914，918，928，930，933，937，938，945，970，1040，1044，1046.
10μM下抑制率＞80％的化合物31，45，46，48，58，68，80，83，113，115，142，143，145，150，152，265，268，272，275，283，285，287，288，290，291，294，296，297，302，308，309，313，321，325，326，358，438，441，442，444，445，457，466，467，484，487，491，492，495，496，503，518，537，538，547，554，876，878，919，929，943
1μM下抑制率為20％-50％的化合物1118，1121，1136，1143，1146，1158，1159，1167，1170，1359，1361，1362，1363.
1μM下抑制率為50％-80％的化合物
1133，1134，1137，1141，1156，1161，1162，1163，1164，1166.
1μM下抑制率＞80％的化合物1147.
3-2、對[125I]-標(biāo)記的桿狀病毒表達的人MCP-1與THP-1細胞結(jié)合的抑制作用的測量(方法2)
將人單核細胞白細胞系THP-1懸浮在測定緩沖液(50mM HEPES，pH7.4，1.0mM CaCl2，5.0mM MgCl2，0.5％BSA)中，得到濃度為1×107個細胞/ml的細胞混懸液。將供試化合物稀釋在測定緩沖液中，用作供試化合物溶液。將上述[125I]-標(biāo)記的人MCP-1稀釋在測定緩沖液中，濃度為1mCi/ml，用作標(biāo)記配體溶液。在96孔濾板(Millipore Co.)中，向每孔中按順序等量加入25μl供試化合物溶液、25μl標(biāo)記配體溶液和50μl細胞混懸液，攪拌(總反應(yīng)體積為100μl)，在18℃下恒溫一小時。
反應(yīng)后，過濾反應(yīng)溶液，濾器用200μl冷PBS洗滌兩次(加入200μl冷PBS，然后過濾)。濾器風(fēng)干，向每孔中加入25μl液體閃爍劑。用TopCount(Packard Instrument Co.)測量濾器上細胞保留的放射性。
為了計算供試化合物抑制人MCP-1與THP-1細胞結(jié)合的能力，減去由加入100ng未標(biāo)記的人MCP-1代替供試化合物所測定的非特異性結(jié)合，將沒有加入供試化合物的讀數(shù)作為100％。
抑制率(％)＝{1-(A-B)/(C-B)}×100
(A加入供試化合物的讀數(shù)；B加入100ng未標(biāo)記的人MCP-1的讀數(shù)；C加入[125I]-標(biāo)記的人MCP-1的讀數(shù))。
在測量本發(fā)明的環(huán)胺衍生物的抑制作用時，例如，下列化合物在0.2μM、1μM或10μM下分別證實了20％-50％、50％-80％和＞80％的抑制活性。這些化合物是
10μM下抑制率為20％-50％的化合物1560
10μM下抑制率為50％-80％的化合物1550.
10μM下抑制率＞80％的化合物541，1042，1043，1559
1μM下抑制率為20％-50％的化合物
1098，1100，1101，1104，1105，1109，1110，1116，1174，1175，1176，1178，1187，1188，1189，1197，1198，1199，1200，1201，1202，1209，1210，1211，1212，1222，1225，1229，1230，1237，1238，1243，1250，1259，1261，1265，1266，1272，1277，1282，1294，1299，1302，1307，1315，1318，1319，1320，1329，1330，1335，1336，1337，1343，1344，1353，1355，1356，1357，1358，1368，1372，1385，1386，1392，1400，1413，1422，1423，1425，1426，1429，1430，1432，1437，1440，1445，1446，1447，1448，1450，1452，1453，1455，1458，1459，1461，1463，1464，1466，1468，1469，1470，1471，1474，1479，1482，1485，1507，1508，1510，1511，1512，1513，1514，1515，1516，1518，1519，1521，1522，1524，1535，1538，1540，1542，1544，1571，1573，1574，1575，1576，1577，1578，1579，1580，1581，1582，1585，1587，1598，1602，1603，1604，1609，1611，1612，1613，1614，1615，1616，1617，1618，1622，1627，1630，1643，1646，1662，1669，1716，1717，1723，1728，1731，1733，1736，1739，1740，1747，1750，1755，1757，1758，1759，1760，1761，1762，1769，1770，1771，1772，1773，1774，1777，1783，1784，1785，1791，1793，1904，1911，1917，2057，2061，2063，2064，2065，2066，2067，2068，2069，2071，2072，2073，2074，2075，2076，2080，2081，2082，2110，2112，2123，2130，2131，2139.
1μM下抑制率為50％-80％的化合物
37，298，318，1084，1091，1103，1106，1108，1111，1113，1114，1115，1138，1142，1165，1179，1190，1192，1193，1195，1196，1204，1205，1206，1207，1208，1245，1246，1255，1257，1258，1262，1263，1293，1300，1342，1351，1352，1354，1370，1371，1373，1375，1377，1378，1380，1381，1383，1384，1391，1411，1412，1414，1417，1418，1419，1421，1424，1431，1436，1439，1449，1454，1456，1457，1460，1462，1472，1473，1487，1502，1504，1506，1517，1525，1526，1527，1529，1530，1531，1532，1533，1534，1536，1537，1539，1541，1545，1593，1600，1601，1606，1608，1619，1620，1621，1623，1624，1625，1626，1628，1629，1645，1650，1654，1658，1663，1664，1665，1670，1671，1672，1673，1675，1678，1679，1681，1684，1687，1688，1689，1690，1711，1712，1714，1718，1722，1725，1726，1727，1729，1730，1732，1734，1735，1737，1741，1742，1743，1744，1745，1746，1748，1751，1753，1754，1756，1779，1781，1782，1786，1788，1789，1790，1792，1795，1797，1798，1800，1801，1804，1848，1862，1883，1885，1886，1887，1889，1893，1894，1903，1905，1910，1912，1913，1914，1918，1922，1976，1985，2027，2035，2062，2083，2084，2088，2089，2090，2111，2124，2125，2126，2135.
1μM下抑制率＞80％的化合物299，311，312，329，1042，1043，1085，1119，1191，1203，1220，1228，1236，1244，1256，1288，1295，1308，1310，1376，1382，1393，1395，1415，1416，1420，1435，1438，1441，1480，1481，1570，1583，1584，1589，1590，1594，1595，1607，1634，1660，1661，1666，1668，1695，1696，1697，1698，1699，1701，1702，1703，1704，1705，1706，1707，1708，1709，1713，1724，1749，1752，1775，1776，1778，1780，1787，1794，1796，1799，1802，1803，1841，1869，1870，1871，1872，1876，1877，1892，1896，1897，1898，1899，1900，1901，1902，1906，1907，1908，1909，1915，1916，1919，1920，1921，2085，2086，2087，2113，2114，2118，2119，2120，2121，2122，2127，2128，2129，2132，2133，2136，2137，2138，2159，2161，2162，2187，2189，2193.
0.2μM下抑制率為20％-50％的化合物
1680，1682，1686，1691，1694，1700，1805，1810，1811，1812，1813，1815，1816，1817，1818，1819，1820，1824，1825，1826，1827，1828，1832，1833，1834，1835，1836，1839，1840，1842，1843，1851，1852，1853，1854，1855，1856，1858，1859，1860，1863，1864，1865，1866，1868，1874，1878，1879，1880，1888，1890，1891，1895，1926，1927，1928，1929，1930，1934，1935，1937，1945，1946，1951，1952，1953，1954，1959，1960，1961，1962，1966，1969，1970，1971，1972，1973，1977，1978，1979，1980，1981，1985，2014，2027，2028，2033，2035，2039，2040，2041，2042，2044，2045，2046.
0.2μM下抑制率為50％-80％的化合物1677，1678，1679，1681，1687，1688，1689，1690，1695，1697，1808，1809，1841，1848，1861，1862，1869，1870，1871，1872，1873，1876，1877，1883，1884，1885，1886，1887，1889，1893，1894，1976.
0.2μM下抑制率＞80％的化合物1696，1892
實施例2045對[125I]-標(biāo)記的人MCP-1與表達MCP-1受體的細胞結(jié)合的抑制作用的測量
1、表達MCP-1受體的細胞的衍生
將含有MCP-1受體的cDNA片段(由S.Yamagami等《生物化學(xué)與生物物理學(xué)研究通訊》1994，202，1156-1162報道)克隆到NotI部位的表達質(zhì)粒pCEP4(Invitrogen Co.)中，使用脂轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine(Gibco-BRL Co.)將所得質(zhì)粒轉(zhuǎn)染給人腎上皮細胞系293-EBNA。在選擇劑(潮霉素)的存在下培養(yǎng)細胞，得到穩(wěn)定表達的轉(zhuǎn)染子系。受體的表達通過[125I]-標(biāo)記的人MCP-1的結(jié)合得以確認。
2、對[125I]-標(biāo)記的桿狀病毒表達的人MCP-1與MCP-1受體表達細胞結(jié)合的抑制作用的測量
用細胞刮棒刮取組織培養(yǎng)皿上的MCP-1受體表達細胞，將其懸浮在測定緩沖液(D-MEM(Gibco-BRL Co.)，含有0.1％BSA和25mM HEPES，pH調(diào)為7.4)中，得到濃度為6×106個細胞/ml的細胞混懸液。將供試化合物稀釋在測定緩沖液中。其余操作同實施例2044。
在測量本發(fā)明某些典型化合物的抑制作用時，抑制活性基本上分別等于實施例2044。
實施例2046對細胞趨化性的抑制作用的測量
為了測定本發(fā)明化合物對細胞趨化性的抑制作用，我們按照Fall等的方法(《免疫學(xué)方法雜志》190，33，239-247)，使用人單核細胞白細胞系THP-1作為趨化細胞，測量了由單核細胞趨化因子MCP-1引起的細胞趨化性。將2×106個細胞/ml的THP-1細胞(懸浮在RPMI-1640(Flow Laboratories Co.)+10％FCS中)置于96孔微趨化性腔(Neuroprobe，注冊商標(biāo))的上腔(200μl)中，將在相同溶液中的最終濃度為20ng/ml的人重組MCP-1(Peprotech Co.)置于下腔中，將聚碳酸酯濾器(無PVP，Neuroprobe；注冊商標(biāo))置于兩腔之間。將這些在37℃5％CO2中恒溫2小時。
除去濾器，將已經(jīng)移行至濾器下側(cè)的細胞固定，用Diff Quick(KokusaiShiyaku Co.)染色，然后用平板讀數(shù)器(Molecular Device Co.)在550nm波長下定量測定細胞移行指數(shù)，為3孔的平均值。另外，將供試化合物分別與THP-1和MCP-1置于上腔和下腔，測定對細胞移行的抑制作用(抑制IC50(μM))。抑制作用被定義為{(沒有供試化合物的上腔和下腔中由MCP-1誘導(dǎo)的細胞移行)-(沒有加入MCP-1的下腔中的細胞移行)＝100％}，供試化合物給出50％抑制作用的濃度被指定為IC50。
在測量本發(fā)明的環(huán)胺衍生物的抑制作用時，例如，下列化合物的50％抑制作用濃度(IC50)是IC50＜0.1μM。
IC50＜0.1μM的化合物4，37，298，299，311，312，318，329，461，886，909，1042，1043，1085，1119，1138，1142，1165，1179，1191，1203，1205，1220，1228，1236，1244，1245，1256，1288，1293，1295，1308，1310，1352，1376，1382，1393，1395，1416，1420，1435，1436，1438，1441，1480，1531，1532，1570，1583，1584，1589，1590，1594，1595，1600，1601，1607，1660，1661，1664，1666，1668，1698，1699，1701，1702，1703，1704，1706，1707，1708，1709，1713，1775，1776，1778，1779，1787，1794，1796，1799，1802，1803，1896，1898，1899，1900，1901，1902，1906，1907，1908，1909，1915，1916，1919，1920，1921，2087，2114，2128，2122132，2137，2141，2144，2157，2158，2189.
權(quán)利要求
1.下式(I)化合物
其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，
其中R1是苯基、C3-C8環(huán)烷基或具有1-3個雜原子的芳族雜環(huán)基，雜原子選自由氧原子、硫原子、氮原子或其組合組成的組，其中該苯基或芳族雜環(huán)基可以與苯環(huán)或具有1-3個雜原子的芳族雜環(huán)基稠合形成稠合環(huán)，雜原子選自由氧原子、硫原子、氮原子或其組合組成的組，該苯基、C3-C8環(huán)烷基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)可以被一個或多個下列取代基取代鹵原子、羥基、氰基、硝基、羧基、氨基甲?；?、C1-C6烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C6烯基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、C3-C5亞烷基、C2-C4亞烷氧基、C1-C3亞烷二氧基、苯基、苯氧基、苯硫基、芐基、芐氧基、苯甲酰氨基、C2-C7烷?；?、C2-C7烷氧羰基、C2-C7烷酰氧基、C2-C7烷酰氨基、C2-C7N-烷基氨基甲?；?、C4-C9N-環(huán)烷基氨基甲?；?、C1-C6烷磺?；?、C3-C8(烷氧羰基)甲基、N-苯基氨基甲?；⑦哙ぷ踊驶?、嗎啉代羰基、1-吡咯烷基羰基、由式-NH(C＝O)O-代表的二價基團、由式-NH(C＝S)O-代表的二價基團、氨基、單(C1-C6烷基)氨基、或二(C1-C6烷基)氨基，其中該苯基、C3-C8環(huán)烷基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基可選地被一個或多個鹵原子、羥基、氨基、三氟甲基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基取代；
R2是氫原子、C1-C6烷基、C2-C7烷氧羰基、羥基或苯基，其中該C1-C6烷基或苯基可以被一個或多個鹵原子、羥基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基取代，且當(dāng)j＝0時，R2不是羥基；
j代表0-2的整數(shù)；
k代表0-2的整數(shù)；
m代表2-4的整數(shù)；
n代表0或1；
R3是氫原子或可選被一個或兩個苯基取代的C1-C6烷基，該苯基各自可以被一個或多個鹵原子、羥基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基取代；
R4和R5是彼此相同或不同的，是氫原子、羥基、苯基或C1-C6烷基，其中該C1-C6烷基可選地被一個或多個下列取代基取代鹵原子，羥基，氰基，硝基，羧基，氨基甲?；瑤€基，胍基，C3-C8環(huán)烷基，C1-C6烷氧基，C1-C6烷硫基，可選被一個或多個鹵原子、羥基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或芐氧基取代的苯基，苯氧基，芐氧基，芐氧羰基，C2-C7烷?；?，C2-C7烷氧羰基，C2-C7烷酰氧基，C2-C7烷酰氨基，C2-C7N-烷基氨基甲?；珻1-C6烷磺?；?，氨基，單(C1-C6烷基)氨基，二(C1-C6烷基)氨基，或具有1-3個雜原子且可選與苯環(huán)稠合的芳族雜環(huán)基，雜原子選自由氧原子、硫原子、氮原子或其組合組成的組，條件是R4和R5均不為異丁基，或者R4和R5一起形成3至6元環(huán)烴；
p代表0或1；
q代表0或1；
G是由下式代表的基團-CO-、-SO2-、-CO-O-、-NR7-CO-、-CO-NR7-、-NH-CO-NH-、-NH-CS-NH-、-NR7-SO2-、-SO2-NH-、-NH-CO-O-或-O-CO-NH-，其中R7是氫原子或C1-C6烷基，或者R7與R5一起代表C2-C5亞烷基；
R6是苯基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烯基、芐基或具有1-3個雜原子的芳族雜環(huán)基，雜原子選自由氧原子、硫原子、氮原子或其組合組成的組，其中該苯基、芐基或芳族雜環(huán)基可以與苯環(huán)或具有1-3個雜原子的芳族雜環(huán)基稠合形成稠合環(huán)，雜原子選自由氧原子、硫原子、氮原子或其組合組成的組，該苯基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烯基、芐基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)可以被一個或多個下列取代基取代鹵原子、羥基、巰基、氰基、硝基、氰硫基、羧基、氨基甲?；?、三氟甲基、C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基、C2-C6烯基、C1-C6烷氧基、C3-C8環(huán)烷氧基、C1-C6烷硫基、C1-C3亞烷二氧基、苯基、苯氧基、苯氨基、芐基、苯甲酰基、苯亞磺?；?、苯磺?；?、3-苯脲基、C2-C7烷?；?、C2-C7烷氧羰基、C2-C7烷酰氧基、C2-C7烷酰氨基、C2-C7N-烷基氨基甲?；?、C1-C6烷磺?；?、苯基氨基甲酰基、N，N-二(C1-C6烷基)氨磺酰基、氨基、單(C1-C6烷基)氨基、二(C1-C6烷基)氨基、芐氨基、C2-C7(烷氧羰基)氨基、C1-C6(烷磺酰)氨基、或雙C1-C6(烷磺酰)氨基，其中該苯基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烯基、芐基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基可選地被一個或多個鹵原子、氰基、羥基、氨基、三氟甲基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、單(C1-C6烷基)氨基或二(C1-C6烷基)氨基取代。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中在上式(I)中，k＝1，m＝2。
3.如權(quán)利要求2所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中在上式(I)中，n＝0。
4.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中在上式(I)中，k＝0，m＝3，n＝1。
5.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中在上式(I)中，k＝1，m＝3。
6.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中在上式(I)中，k＝2，m＝2。
7.如權(quán)利要求6所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中在上式(I)中，n＝1。
8.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中在上式(I)中，k＝1，m＝4。
9.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中在上式(I)中，j＝0。
10.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中在上式(I)中，p＝0，q＝0，G是由-NR7-CO-代表的基團。
11.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中在上式(I)中，R2是氫原子，R3是氫原子，R7是氫原子。
12.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中在上式(I)中，R1中苯基、C3-C8環(huán)烷基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基是一個或多個鹵原子、羥基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、C2-C4亞烷氧基、亞甲二氧基、N-苯基氨基甲?；被?、單(C1-C6烷基)氨基、或二(C1-C6烷基)氨基。
13.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中在上式(I)中，R6中苯基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烯基、芐基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基是一個或多個鹵原子、硝基、三氟甲基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、苯磺酰基、C2-C7烷酰氨基、或氨基。
14.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中在上式(I)中，R1是苯基或異噁唑基。
15.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中在上式(I)中，R6是苯基、呋喃基或噻吩基。
16.用含有治療上有效量的由下式(I)代表的化合物的藥物制劑抑制化學(xué)因子與靶細胞受體結(jié)合和/或抑制其對靶細胞的作用的方法
其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，
其中R1是苯基、C3-C8環(huán)烷基或具有1-3個雜原子的芳族雜環(huán)基，雜原子選自由氧原子、硫原子、氮原子或其組合組成的組，其中該苯基或芳族雜環(huán)基可以與苯環(huán)或具有1-3個雜原子的芳族雜環(huán)基稠合形成稠合環(huán)，雜原子選自由氧原子、硫原子、氮原子或其組合組成的組，該苯基、C3-C8環(huán)烷基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)可以被一個或多個下列取代基取代鹵原子、羥基、氰基、硝基、羧基、氨基甲?；?、C1-C6烷基、C3-C8環(huán)烷基、C2-C6烯基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、C3-C5亞烷基、C2-C4亞烷氧基、C1-C3亞烷二氧基、苯基、苯氧基、苯硫基、芐基、芐氧基、苯甲酰氨基、C2-C7烷?；?、C2-C7烷氧羰基、C2-C7烷酰氧基、C2-C7烷酰氨基、C2-C7N-烷基氨基甲?；4-C9N-環(huán)烷基氨基甲?；?、C1-C6烷磺?；?、C3-C8(烷氧羰基)甲基、N-苯基氨基甲?；?、哌啶子基羰基、嗎啉代羰基、1-吡咯烷基羰基、由式-NH(C＝O)O-代表的二價基團、由式-NH(C＝S)O-代表的二價基團、氨基、單(C1-C6烷基)氨基、或二(C1-C6烷基)氨基，其中該苯基、C3-C8環(huán)烷基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基可選地被一個或多個鹵原子、羥基、氨基、三氟甲基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基取代；
R2是氫原子、C1-C6烷基、C2-C7烷氧羰基、羥基或苯基，其中該C1-C6烷基或苯基可以被一個或多個鹵原子、羥基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基取代，且當(dāng)j＝0時，R2不是羥基；
j代表0-2的整數(shù)；
k代表0-2的整數(shù)；
m代表2-4的整數(shù)；
n代表0或1；
R3是氫原子或可選被一個或兩個苯基取代的C1-C6烷基，該苯基各自可以被一個或多個鹵原子、羥基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基取代；
R4和R5是彼此相同或不同的，是氫原子、羥基、苯基或C1-C6烷基，其中該C1-C6烷基可選地被一個或多個下列取代基取代鹵原子，羥基，氰基，硝基，羧基，氨基甲酰基，巰基，胍基，C3-C8環(huán)烷基，C1-C6烷氧基，C1-C6烷硫基，可選被一個或多個鹵原子、羥基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基或芐氧基取代的苯基，苯氧基，芐氧基，芐氧羰基，C2-C7烷酰基，C2-C7烷氧羰基，C2-C7烷酰氧基，C2-C7烷酰氨基，C2-C7N-烷基氨基甲?；?，C1-C6烷磺酰基，氨基，單(C1-C6烷基)氨基，二(C1-C6烷基)氨基，或具有1-3個雜原子且可選與苯環(huán)稠合的芳族雜環(huán)基，雜原子選自由氧原子、硫原子、氮原子或其組合組成的組，或者R4和R5一起形成3至6元環(huán)烴；
p代表0或1；
q代表0或1；
G是由下式代表的基團-CO-、-SO2-、-CO-O-、-NR7-CO-、-CO-NR7-、-NH-CO-NH-、-NH-CS-NH-、-NR7-SO2-、-SO2-NH-、-NH-CO-O-或-O-CO-NH-，其中R7是氫原子或C1-C6烷基，或者R7與R5一起代表C2-C5亞烷基；
R6是苯基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烯基、芐基或具有1-3個雜原子的芳族雜環(huán)基，雜原子選自由氧原子、硫原子、氮原子或其組合組成的組，其中該苯基、芐基或芳族雜環(huán)基可以與苯環(huán)或具有1-3個雜原子的芳族雜環(huán)基稠合形成稠合環(huán)，雜原子選自由氧原子、硫原子、氮原子或其組合組成的組，該苯基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烯基、芐基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)可以被一個或多個下列取代基取代鹵原子、羥基、巰基、氰基、硝基、氰硫基、羧基、氨基甲酰基、三氟甲基、C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基、C2-C6烯基、C1-C6烷氧基、C3-C8環(huán)烷氧基、C1-C6烷硫基、C1-C3亞烷二氧基、苯基、苯氧基、苯氨基、芐基、苯甲?；?、苯亞磺?；?、苯磺?；?、3-苯脲基、C2-C7烷?；?、C2-C7烷氧羰基、C2-C7烷酰氧基、C2-C7烷酰氨基、C2-C7N-烷基氨基甲?；?、C1-C6烷磺酰基、苯基氨基甲酰基、N，N-二(C1-C6烷基)氨磺酰基、氨基、單(C1-C6烷基)氨基、二(C1-C6烷基)氨基、芐氨基、C2-C7(烷氧羰基)氨基、C1-C6(烷磺酰)氨基、或雙C1-C6(烷磺酰)氨基，其中該苯基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烯基、芐基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基可選地被一個或多個鹵原子、氰基、羥基、氨基、三氟甲基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、單(C1-C6烷基)氨基或二(C1-C6烷基)氨基取代。
17.如權(quán)利要求16所述的抑制化學(xué)因子與靶細胞受體結(jié)合和/或抑制其對靶細胞的作用的方法，其中在上式(I)中，k＝1，m＝2。
18.如權(quán)利要求17所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中在上式(I)中，n＝0。
19.如權(quán)利要求16所述的抑制化學(xué)因子與靶細胞受體結(jié)合和/或抑制其對靶細胞的作用的方法，其中在上式(I)中，k＝0，m＝3，n＝1。
20.如權(quán)利要求16所述的抑制化學(xué)因子與靶細胞受體結(jié)合和/或抑制其對靶細胞的作用的方法，其中在上式(I)中，k＝1，m＝3。
21.如權(quán)利要求16所述的抑制化學(xué)因子與靶細胞受體結(jié)合和/或抑制其對靶細胞的作用的方法，其中在上式(I)中，k＝2，m＝2。
22.如權(quán)利要求21所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中在上式(I)中，n＝1。
23.如權(quán)利要求16所述的抑制化學(xué)因子與靶細胞受體結(jié)合和/或抑制其對靶細胞的作用的方法，其中在上式(I)中，k＝1，m＝4。
24.如權(quán)利要求16所述的抑制化學(xué)因子與靶細胞受體結(jié)合和/或抑制其對靶細胞的作用的方法，其中在上式(I)中，j＝0。
25.如權(quán)利要求16所述的抑制化學(xué)因子與靶細胞受體結(jié)合和/或抑制其對靶細胞的作用的方法，其中在上式(I)中，p＝0，q＝0，G是由-NR7-CO-代表的基團。
26.如權(quán)利要求16所述的抑制化學(xué)因子與靶細胞受體結(jié)合和/或抑制其對靶細胞的作用的方法，其中在上式(I)中，R2是氫原子，R3是氫原子，R7是氫原子。
27.如權(quán)利要求16所述的抑制化學(xué)因子與靶細胞受體結(jié)合和/或抑制其對靶細胞的作用的方法，其中在上式(I)中，R1中苯基、C3-C8環(huán)烷基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基是一個或多個鹵原子、羥基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、C2-C4亞烷氧基、亞甲二氧基、N-苯基氨基甲?；?、氨基、單(C1-C6烷基)氨基、或二(C1-C6烷基)氨基。
28.如權(quán)利要求16所述的抑制化學(xué)因子與靶細胞受體結(jié)合和/或抑制其對靶細胞的作用的方法，其中在上式(I)中，R6中苯基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烯基、芐基、芳族雜環(huán)基或稠合環(huán)的取代基是一個或多個鹵原子、硝基、三氟甲基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、苯磺?；2-C7烷酰氨基、或氨基。
29.如權(quán)利要求16所述的抑制化學(xué)因子與靶細胞受體結(jié)合和/或抑制其對靶細胞的作用的方法，其中在上式(I)中，R1是苯基或異噁唑基。
30.如權(quán)利要求16所述的抑制化學(xué)因子與靶細胞受體結(jié)合和/或抑制其對靶細胞的作用的方法，其中在上式(I)中，R6是苯基、呋喃基或噻吩基。
31.如權(quán)利要求16所述的抑制化學(xué)因子與靶細胞受體結(jié)合和/或抑制其對靶細胞的作用的方法，其中該化學(xué)因子是MIP-1α。
32.如權(quán)利要求16所述的抑制化學(xué)因子與靶細胞受體結(jié)合和/或抑制其對靶細胞的作用的方法，其中該化學(xué)因子是MCP-1。
33.如權(quán)利要求16所述的抑制化學(xué)因子與靶細胞受體結(jié)合和/或抑制其對靶細胞的作用的方法，其中該化學(xué)因子是CCR1。
34.如權(quán)利要求16所述的抑制化學(xué)因子與靶細胞受體結(jié)合和/或抑制其對靶細胞的作用的方法，其中該化學(xué)因子是CCR2A或CCR2B。
35.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中該化合物是4-[{N-(2-氨基-5-氯苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-氯芐基)哌啶。
36.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中該化合物是4-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-氯芐基)哌啶。
37.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中該化合物是4-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-氯芐基)哌啶。
38.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中該化合物是4-[{N-(2-氨基-5-三氟甲氧基苯甲酰基)甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-氯芐基)哌啶。
39.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中該化合物是4-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(4-溴芐基)哌啶。
40.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中該化合物是1-(2-氨基-4-氯芐基)-4-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶。
41.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中該化合物是1-(3-氨基-4-甲氧基芐基)-4-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]哌啶。
42.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中該化合物是4-[{N-(2-氨基-4，5-二氟苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-{4-氯-3-(甲氨基)芐基}哌啶。
43.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中該化合物是4-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基甲基]-1-(2-硫代-2，3-二氫-1，3-苯并噁唑-5-基甲基)哌啶。
44.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中該化合物是3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-(4-氯芐基)吡咯烷。
45.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中該化合物是3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-(4-甲氧基芐基)吡咯烷。
46.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中該化合物是3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-(3，4-亞甲二氧基芐基)吡咯烷。
47.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中該化合物是3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-(2，3-二氫-1-苯并呋喃-5-基甲基)吡咯烷。
48.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中該化合物是3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基]-1-(4-甲硫基芐基)吡咯烷。
49.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中該化合物是3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-(4-乙基芐基)吡咯烷。
50.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中該化合物是3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲氧基苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-(4-乙基芐基)吡咯烷。
51.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中該化合物是1-(3-氨基-4-甲氧基芐基)-3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基]吡咯烷。
52.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中該化合物是3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲酰基)甘氨酰}氨基]-1-(4-氯-3-甲基芐基)吡咯烷。
53.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中該化合物是3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-{4-羥基-3-(甲氨基)芐基}吡咯烷。
54.如權(quán)利要求1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1-C6烷基加成鹽，其中該化合物是3-[{N-(2-氨基-5-三氟甲基苯甲?；?甘氨酰}氨基]-1-(1，3-苯并噁唑-5-基甲基)吡咯烷。
全文摘要
由通式(I)代表的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽或其藥學(xué)上可接受的C1－C6烷基加成鹽及其醫(yī)學(xué)應(yīng)用。由于這些化合物抑制MIP－1α和/或MCP－1等化學(xué)因子對靶細胞的作用，因此可用作血液單核細胞和淋巴細胞浸潤組織的疾病治療藥和/或預(yù)防藥，例如動脈粥樣硬化、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。
文檔編號C07D207/32GK1496981SQ0211854
公開日2004年5月19日 申請日期1998年11月17日 優(yōu)先權(quán)日1997年11月18日
發(fā)明者鹽田辰樹, 片岡健一郎, 今井穣, 堤貴春, 須藤正樹, 十川亮, 森田卓也, 羽田尚彥, 室賀由美子, 竹之內(nèi)修美, 古屋實, 遠藤則明, 克里斯琴·M·塔比, 威爾納·莫里, 史蒂文·L·泰格, L 泰格, 莫里, 一郎, 也, 修美, 彥, 明, 樹, 琴 M 塔比, 美子 申請人:帝人株式會社, 德爾塔根公司