1.一種針對(duì)腺病毒的多途徑協(xié)同免疫方法,其特征在于包括以下步驟:
1)制備腺病毒液;
2)制備腺病毒卵黃抗體;
3)將所述腺病毒液與腺病毒卵黃抗體混合后對(duì)雞進(jìn)行免疫注射。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種針對(duì)腺病毒的多途徑協(xié)同免疫方法,其特征在于所述腺病毒液中的抗原成為為腺病毒I群血清4型。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種針對(duì)腺病毒的多途徑協(xié)同免疫方法,其特征在于步驟3)所述腺病毒液中病毒效價(jià)為108.5TCID50、108.0TCID50或107.5TCID50。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種針對(duì)腺病毒的多途徑協(xié)同免疫方法,其特征在于步驟3)所述腺病毒卵黃抗體中抗體效價(jià)為1:4、1:8或1:16。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種針對(duì)腺病毒的多途徑協(xié)同免疫方法,其特征在于步驟3)中腺病毒液與腺病毒卵黃抗體的混合體積比是1:1。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種針對(duì)腺病毒的多途徑協(xié)同免疫方法,其特征在于步驟3)中所述注射的劑量是0.5mL。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種針對(duì)腺病毒的多途徑協(xié)同免疫方法,其特征在于步驟3)中腺病毒液與腺病毒卵黃抗體混合后先加入油佐劑乳化,油水混合制劑型,而后再對(duì)雞進(jìn)行免疫注射。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種針對(duì)腺病毒的多途徑協(xié)同免疫方法,其特征在于步驟1)所述腺病毒液是通過(guò)以下方法制備的:取分離鑒定株腺病毒I群血清4型,用滅菌生理鹽水10倍稀釋病毒液,接種已長(zhǎng)滿(mǎn)單層的雞胚成纖維細(xì)胞,待細(xì)胞病變達(dá)到80%時(shí),收獲,反復(fù)凍融三次,測(cè)得的病毒含量為108.0TCID50,將檢驗(yàn)合格的凍融液濃縮4倍后,為免疫原。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種針對(duì)腺病毒的多途徑協(xié)同免疫方法,其特征在于步驟2)所述腺病毒卵黃抗體是通過(guò)以下方法制備的:
A)制備腺病毒滅活疫苗;
B)取120日齡蛋雞,每只胸部肌肉注射步驟A)所述疫苗2ml,10日后每只胸部肌肉再注射步驟A)所述疫苗2ml,10日后每只胸部肌肉再注射步驟A)所述疫苗2ml;
C)取步驟B)三免后的雞卵,制備卵黃抗體。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的一種針對(duì)腺病毒的多途徑協(xié)同免疫方法,其特征在于步驟C)所述制備卵黃抗體,具體包括以下操作:將分離的蛋黃攪拌成均勻膏狀,加入等體積注射用水,攪拌均勻后,65℃加熱滅活30分鐘;加入6倍量酸化水,重復(fù)3組;將各組降溫至1~4℃;4℃靜置2~5小時(shí),14000轉(zhuǎn)離心取上清;加入正辛酸終濃度為0.3%,室溫放置5~12小時(shí);卵黃液用孔徑為0.45μm濾器過(guò)濾澄清,再用0.22μm濾器過(guò)濾除菌;經(jīng)截留分子量為100KD超濾膜堆進(jìn)行濃縮;加入終濃度為0.2%甲醛溶液,室溫放置24小時(shí),期間振搖4~6次。