專利名稱：N-取代芳烴苯胺/多取代二芳基醚類化合物,其制備方法及抗腫瘤應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有多種抗癌活性的N-取代芳烴苯胺/多取代二芳基 醚類化合物或其可藥用鹽、其制備方法、含有所述化合物的藥物組合 物及其在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
惡性腫瘤是嚴(yán)重威脅人類健康的常見病和多發(fā)病。根據(jù)世界衛(wèi)生 組織報(bào)告，全世界50億人口中，每年新發(fā)病例約900萬例，因腫瘤而 死亡者達(dá)700萬人，且每年還有增加的趨勢。在惡性腫瘤的三大療法 (手術(shù)、化療、放療)中，藥物治療占有重要地位。近年來隨著分子 生物學(xué)的發(fā)展和人們對(duì)癌癥的發(fā)生、發(fā)展的分子水平機(jī)制的進(jìn)一步認(rèn) 識(shí)，抗肺瘤藥物研究正從傳統(tǒng)的細(xì)胞毒性藥物轉(zhuǎn)向針對(duì)機(jī)制的多環(huán)節(jié) 作用的新型抗腫瘤藥物。以細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子為靶點(diǎn)或新生血管為靶 點(diǎn)的抑制劑、抗轉(zhuǎn)移或抗耐藥性的藥物、分化誘導(dǎo)劑、導(dǎo)向治療、提 高或調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能以及基因治療等多種途徑成為研發(fā)新型抗癌藥 物的關(guān)注點(diǎn)。其中以細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子為靶點(diǎn)的蛋白酪氨酸激酶抑制 劑吉非替尼(Gefetinib)已獲得了成功，成為上市的第一個(gè)非小細(xì)胞 肺癌的藥物。
盡管現(xiàn)在臨床常用的抗肺瘤藥物約60多種，但對(duì)危害人類生命 健康最嚴(yán)重的、占惡性腫瘤90%以上的實(shí)體瘤的治療未能達(dá)到滿意的 效果。因此繼續(xù)尋找新的高效低毒的抗腫瘤藥物仍是藥物研究領(lǐng)域的 熱點(diǎn)
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明人在尋找抗癌新藥的研究過程中，通過對(duì)小分子合成化合
物的體外多細(xì)胞林的抗癌活性普篩，發(fā)現(xiàn)了系列N-取代芳烴苯胺和多 取代二芳基醚類化合物對(duì)多種癌細(xì)胞均有強(qiáng)烈的抑制活性，并呈現(xiàn)出 一定的構(gòu)效關(guān)系，據(jù)此，本發(fā)明人對(duì)該類化合物進(jìn)行了深入研究。有 關(guān)該類化合物的抗癌活性未曾見報(bào)導(dǎo)。
因此，本發(fā)明的第一個(gè)方面涉及具有下列通式(I)結(jié)構(gòu)的N-取 代芳烴苯胺類和多取代二芳基醚類化合物或其可藥用鹽
其中，
Z為CH或N; X為卣素或氫； Y為-0-或-NR，-;
Ri， R2， R3各自獨(dú)立地為H、鹵素、-N02、 -CN、 -NH2、 Cw烷基、 Cw烷氧基、0H、 -0CH20-、 -CF3，、 -COOH、 -S03H、 -C0NH2、 -C0,或 -COOR，；
或者，K和l或R2和R3可以一起形成-OCH20-;
R4為-CN、 -N02， -CH=CH2、 -C=CH、 -CH3、 Cw烷基、d-6烷氧基、 卣素、-冊(cè)2、 -OH、 -COOH、 -S03H、 -CsCR"或-CH-CHR，，，且114為單-(鄰、間、對(duì)位)或多取代；
R，為H、 Cw烴基取代的C^。芳環(huán)、五元或六元雜芳環(huán)，任選含有 雙鍵或三鍵的Ch。脂肪烴基，或任選含有雙鍵或三鍵的Ch。脂肪酰
基；
R，，為任選含有雙鍵或三鍵的C卜4烴基；
條件是，不包括以下化合物
5-氯-2， 4-二硝基-薩(4，-甲基苯基)-苯胺5- 氯-2， 4-二硝基]-(4，-甲氧基苯基)-苯胺；和
6- 氯-2- ( N-苯胺基)-3-硝基吡啶。
本發(fā)明的第二個(gè)方面涉及上述式I化合物的制備方法。 本發(fā)明的第三個(gè)方面涉及包含上述式I化合物以及一或多種藥用
載體或賦形劑的藥物組合物。
本發(fā)明的第四個(gè)方面涉及所述式I化合物用于制備抗腫瘤藥物的用途。
本發(fā)明中所采用的術(shù)語"烴基"包括烷基、烯基和炔基。
本發(fā)明中所采用的術(shù)語"Ch。芳?jí)?是指含有6-10個(gè)碳原子的單 一或稠合芳香環(huán)系，其包括但不限于苯基、萘基。
本發(fā)明中所采用的術(shù)語"五元或六元雜芳環(huán)"是指環(huán)系中含有至 少一個(gè)選自0， S或N的雜原子的五元或六元芳香環(huán)系，其包括但不限 于吡咯、吡唑、呋喃、漆吩、吡咬等。
根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式，本發(fā)明涉及具有下列通式(I)的 N-取代芳烴苯胺類和多取代二芳基醚類化合物
其中，
Z為CH或N;
X為面素或氫；
Y為-O-或-NR，-;
R" R2， R3各自獨(dú)立地為H、鹵素、-N02、 -CN、 -NH2、 d—6烷基、 d-6烷氧基、0H、 -0CH20-、 -CF3，、 -C00H、 -S03H、 -CONH" -CONHR，或 -COOR，；
或者，R,和R2或R2和R3可以一起形成-0CH20-;
R4為-CN、 -N02， -CH-CH2、 -C=CH、 -CH3、 d-6烷基、Cw烷氧基、卣素、-NH2、 -0H、 -COOH、 -S03H、 -C三CR"或-CH-CHR"，且R4為單-(鄰、間、對(duì)位)或多取代；
R，為H、 Cw烴基取代的Ch。芳?jí)摹⑽逶蛄s芳環(huán)，任選含有 雙鍵或三鍵的Cw。脂肪烴基，或任選含有雙鍵或三鍵的Cw。脂肪酰
基；
R"為任選含有雙鍵或三鍵的Cw烴基；
條件是，不包括以下化合物
5-氯-2， 4-二硝基-^(4，-甲基苯基)-苯胺
5- 氯-2, 4-二硝基-N- (4，-甲氧基苯基)-苯胺；和
6- 氯-2- ( N-苯胺基)-3-硝基吡啶。
根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式，其中Z為CH。 根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式，其中Z為N。 根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式，其中R4為對(duì)位取代。 根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式，其中Y為-NH-。
根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式，其中，
R!和R3各自獨(dú)立地為卣素、-N02、 -CN、 -NH2、 -CH3， -OCH3、 0H、 -OCH20-、 -CF3， 、 -COOH、 -S03H、 -CONH2; R2為H。
根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式，其中， R!為fi素、-N02、 -CN、 -NH2、 -CH" -OCH3、 OH、 -OCH20-、 -CF3、 -COOH、 -S03H、 -CONH2; R2和R3為H。
根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式，其中， l為由素、-N02、 -CN、 -NH2、 -CH" -OCH3、 OH、 -OCH20-、 -CF3、 -COOH、 -S03H、 -CONH2;Ri和R3為H。
根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式，其中， Ri和R3各自獨(dú)立地為卣素、-N02、 -CN、 -NH2、 -CH" -0CH3、 0H、 -0CH20-、 -CF3、 -COOH、 -S03H、 -C0NH2; R2為H。
根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式，其中，
R3為獨(dú)立地為卣素、-N02、 -CN、 -NH2、 -CH3， -0CH3、 0H、 -0CH20-、 -CF3、 -COOH、 -S03H、 -C0NH2; R!和112為H;
或者，K和R2或R2和R3 —起形成-0CH20-。
本發(fā)明更優(yōu)選下列化合物
#- ( t羥基苯基)-5-氯-2， 4-二硝基苯胺；
5-氯-f (4，-氰基苯基)-2， 4-二硝基苯胺；
5-氯-2， 4-二硝基-N-(4，-曱氧基苯基)-苯胺；
S-氯-N- (4，-硝基苯基)-2，4-二硝基苯胺；
5-氯-N- (4，-氰基苯基)-2-硝基苯胺；
5-氯-N- (4，-氰基苯基)-3-硝基苯胺；
4，-氰基苯氧基-5-氯-2， 4-二硝基苯醚；
(4，-溴-2，， 6，-二曱苯氧基)-5-氯-2， 4-二硝基苯醚；
(4，-氰基-2，， 6，-二甲苯氧基)-5-氯-2， 4-二硝基苯醚；
5- (4，-氰基苯氧基)-2-硝基苯醚； 4- ( 4，-氰基苯氧基)硝基苯醚；
2- (4，-氰基苯氧基)硝基苯；
6- 氯-2- (4，-甲氧基苯胺基)-3-硝基吡啶； 6-氯-2- (4，-氰基苯胺基)-3-硝基吡啶； 2- (4，-甲基苯胺基)-3-硝基吡啶；2- ( 4，-氰基苯胺基)-3-硝基吡咬;和 6-氯-2-(2，， 4，， 6，-三甲基苯胺基)-3-硝基吡咬。
本發(fā)明式I化合物可通過以下反應(yīng)路線制備得到<formula>formula see original document page 10</formula>
W=CI. Bnl Y=NH2orOH X =囪素或氫
X二鹵素或氫 Y=NH, 0, NR'
Z = C,N 2 = C,N
其中Id， R2, R3和R4的定義同上式I所述。
在堿的作用下，使式n取代的g代苯或卣代吡啶與式ni取代苯 胺或取代酚類化合物反應(yīng)，生成式I化合物。
更具體地說，在叔丁醇鉀、氬化鈉、三乙胺、吡啶、N， N-二甲胺 基吡啶，或碳酸鉀/卣代亞銅存在下，使帶有硝基取代的卣代苯或卣代 吡啶(式II)與取代苯胺或取代酚類化合物(式III)在DMF,乙腈、 THF或DMSO溶劑中，室溫或130。C以下，5分鐘一24小時(shí)，反應(yīng)物II/III 投料摩爾比為1:1.1 一 1:2。
該偶合反應(yīng)也可在微波條件下進(jìn)行，堿和反應(yīng)物投料量比例同上 所述，以DMF或DMSO為溶劑，在150-180。C下反應(yīng)10-30分鐘。
本發(fā)明化合物在多種癌細(xì)胞試驗(yàn)中顯示出強(qiáng)抑制活性。如下文所 述，化合物在肺癌細(xì)胞(A549 ),乳腺癌細(xì)胞(MCF-7)和鼻咽癌細(xì)胞 (KB )的抑制活性試驗(yàn)中顯示出與陽性對(duì)照藥物[高三尖杉酯 (Homoharringtonine )和依托泊脊(Etoposide， VP-16)]相當(dāng)或更 好的抑制活性。特別值得注意的是其中一些化合物對(duì)具有耐藥性的 KB-VIN細(xì)胞也顯示出很強(qiáng)的抑制活性。因此，對(duì)本發(fā)明化合物進(jìn)行深
入研究將有望開發(fā)出新的抗癌藥物。
本發(fā)明化合物既可以其本身也可以其可藥用鹽或溶劑化物的形 式使用。式I化合物的可藥用鹽包括與藥學(xué)上可接受的無機(jī)酸或有機(jī) 酸、或者無機(jī)堿或有機(jī)堿形成的常規(guī)鹽。合適的酸加成鹽的例子包括與鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、硝酸、高氯酸、富馬酸、乙酸、丙酸、 琥珀酸、羥基乙酸、甲酸、乳酸、馬來酸、酒石酸、檸檬酸、樸酸、 丙二酸、羥基馬來酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水楊酸、富馬酸、
甲苯磺酸、曱磺酸、萘-2-磺酸、苯磺酸、羥基萘甲酸、氫碘酸、蘋 果酸、鞣酸等形成的鹽。合適的堿加成鹽的例子包括與鈉、鋰、鉀、 鎂、鋁、鈣、鋅、N，N， -二節(jié)基乙二胺、氯代普魯卡因、膽堿、二乙 醇胺、乙二胺、N-曱基葡糖胺和普魯卡因等形成的鹽。本文中涉及到 本發(fā)明化合物時(shí)，包括式I化合物及其可藥用鹽或溶劑化物。
根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明式I化合物可與常規(guī)藥用載體或賦形劑組成 藥物組合物。該藥物組合物可通過口服或非腸道途徑給藥。本發(fā)明的 藥物組合物可按本領(lǐng)域常規(guī)方法制備成各種劑型，包括但不限于片劑、 膠嚢、溶液、懸浮液、顆粒劑或注射劑等，經(jīng)口服或非腸道途徑給藥。
另外需要指出，本發(fā)明化合物使用劑量和使用方法取決于諸多因 素，包括患者的年齡、體重、性別、自然健康狀況、營養(yǎng)狀況、化合物 的活性強(qiáng)度、服用時(shí)間、代謝速率、病癥的嚴(yán)重程度以及診治醫(yī)師的主 觀判斷。優(yōu)選的使用劑量介于O. 01~100 mg/kg體重/天。
具體實(shí)施例方式
下面的實(shí)施例用于進(jìn)一步說明本發(fā)明，但其不意味著本發(fā)明僅限 于此。
實(shí)施例1: A^(iff"羥基苯基)-5-氯-2， 4-二硝基苯胺(Al) 將1， 5-二氯-2， 4-二硝基苯(237 mg 1. G mmol)和間氨基苯酚(230 mg， 2. llmmol)溶于DMF (0. 5mL)后直接放置120"C的油浴內(nèi)，攪拌 2分鐘，反應(yīng)液變成紅色即冷卻至室溫，加入水水，稀HCl調(diào)pH為3。 過濾出固體，粗品用硅膠板分離，展開劑石油醚/乙酸乙酯，得到標(biāo) 題化合物208 mg，紅色固體，產(chǎn)率67%。 ^ NMR (DMSO) 5 ppm 6. 77 (1H， s， ArH-2， )， 6.78 ( 1H， d， J = 8. 4 Hz， ArH-4， )， 6.81 (1H， t， J = 8. 4Hz, ArH-5， )， 7.04 ( 1H， s， ArH-6 ) ， 7.31 ( 1H，d， J - 8. 4 Hz， ArH-6， )， 8.90 ( 1H， s， ArH-3 )， 9.83 ( 1H， s， 0H )， 10. 04 ( 1H， s， NH )。
實(shí)施例2: 5-氯-^ (4，-氰基苯基)-2， 4-二硝基苯胺(A2) 2， 4-二氯-1， 5-二硝基苯(1. 2 g， 5 mmol )和對(duì)腈苯胺(0. 59 g， 5 mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(DMF， 10 mL)。置于水水浴中分批 加入叔丁醇鉀(1.4g， 12. 5mmo1)，然后室溫?cái)嚢?5分鐘。將反應(yīng) 液倒入水水中，稀HC1調(diào)pH值至中性。將析出固體濾出，水洗，干燥， 粗品用硅膠柱分離(乙酸乙酯/石油醚)得到標(biāo)題化合物(1.44g， 90 %)，淡黃色固體。'HNMR(CDCl3) 5 ppm, 7.41 (1H， s， ArH-6)， 7.57 (2H， d， J = 8. 8 Hz, ArH-3， ， 5， ) ， 7.91 (2H， d， J - 8. 8 Hz， ArH-2， ， 6， )， 8. 90 (1H， s， ArH-3) ， 10.07 (1H， s， NH)。
實(shí)施例3: 5-氯-2， 4-二硝基-N-(4，-曱氧基苯基)-苯胺(A3) 將2， 4-二氯-l， 5-二硝基苯(0， 5 g， 2. 11 mmol )和對(duì)甲氧基苯 胺(0. 26 g， 2. 11 mmol )溶于DMS0 ( 5 mL )中，加入K2C03 (0. 58 g， 4. 22mmol)和催化量的金屬Cu,氮?dú)獗Ｗo(hù)下，115 C攪拌2小時(shí)。倒 入冰水中，濾出固體，水洗數(shù)次，干燥后粗品用硅膠柱分離(石油醚/ 乙酸乙酯洗脫)得到標(biāo)題化合物，其為紅褐色固體，0.68 g， 收率 67 0/。。^麗R (CDC13) Sppm3. 88 (3H， s， 0CH3) ， 7.02 (1H， s， ArH-6)， 7.03 (2H， d， J = 8. 96Hz， ArH-3， ， 5， )， 7.21 (2H, d, J = 8. 96 Hz， ArH-2， ， 6， ) ， 9. 07 (1H， s， ArH-3) ， 9.73 (1H， s，麗)。
實(shí)施例4: 5-氯-2， 4-二硝基-^(4，-曱基苯基)-苯胺(A4) 1，5-二氯-2，4-二硝基苯(37 mg， lmmol)，對(duì)甲基苯胺(128mg， 1.2 mmol)和叔丁醇鉀(224 mg, 2mmol)在DMF ( 3 mL )中室溫?cái)嚢?40分鐘。倒入水中，調(diào)pH-5，過濾得粗品，用PTLC (石油醚/乙酸乙 酯)分離得到標(biāo)題化合物，其為淡黃色固體，258 mg，產(chǎn)率84%。 ^ NMR (CDC13) 3 ppmS2.43 (3H， s, CH3) ， 7.12 (1H， s, ArH-6) ， 7.17(2H， d， J - 8. 4 Hz， ArH-3， ，5， ) ， 7. 32 (2H， d， J = 8. 4 Hz， ArH-2，， 6， )， 9.08(1H， s， ArH-3)， 9.79 (1H， s， NH)。
實(shí)施例5: 5-氯-N-(4'-曱氧基苯基)_1，2，4-苯三胺(A5) 將化合物A4 (128 mg, 0. 4 mmol)溶于2. 5 mL THF，將六水氯化 鎳(28.3mg， 0. 12 mmol)的甲醇(1 mL)溶液加入THF溶液中。該混 合物用水浴冷卻、攪拌，分批加入硼氫化鈉(75.6 mg， 2 mmol),冰 浴下繼續(xù)攪拌15分鐘。反應(yīng)液倒入冰水中，調(diào)節(jié)pH約為5，室溫?cái)?拌片刻，濾出固體，干燥后粗品用硅膠板分離(氯仿/曱醇)得到標(biāo)題 化合物，其為淺褐色固體，20mg,產(chǎn)率19。/。。iHNMR (CDC13) 5 ppm 3. 78 (3H， s， OCH3) 5.81 (1H， s， ArH-3)， 6.18 (1H， s， ArH-6) ， 6.71 (2H， d， J = 8. 8 Hz， ArH-3， ， 5， )， 6. 77 (2H， d, J = 8, 8 Hz， ArH-2，， 6，)。
實(shí)施例6: 5-氯-N- ( 4，-硝基苯基)-2， 4-二硝基苯胺(A6 ) 1， 5-二氯-2, 4-二硝基苯(237 mg, 1 mmol)、對(duì)硝基苯胺(166 mg， 1.2 mmol)和叔丁醇鉀(236 mg, 2.1 mmol)在DMF ( 3 mL )中，室溫 攪拌30分鐘。后處理同A5,得到標(biāo)題化合物，其為淡黃色產(chǎn)物280 mg， 產(chǎn)率83%,熔點(diǎn)140-141匸。力NMR (DMSO) 5 ppm 7. 55 (1H， s， ArH-6)， 7.60 (2H， d, J - 9. 0 Hz， ArH-2， ， 6， )， 8. 29 (2H， d， J - 9. 0 Hz， ArH-3， ， 5， )， 8. 90 (1H， s， ArH-3) ， 10.19 (1H， s， NH)。
實(shí)施例7: 5-氯-N- (4，-氰基苯基)-2-硝基苯胺(A7 ) 2， 4-二氯硝基苯(576 mg， 3mmo1)、對(duì)氰基苯胺(425 mg， 3- 6 mmol) 和叔丁醇鐘(672 mg， 6 mmol)在4 mL DMF中，室溫?cái)嚢?0小時(shí)，， 后處理同A5，得到標(biāo)題化合物，其為紅黃色固體，583 mg，產(chǎn)率71%。 熔點(diǎn)123匸；力NMR ( DMSO ) 5 ppm 7. 17 (1H， d， J = 9, 2 Hz， ArH-4)， 7. 40(2H， d， J = 8. 8Hz， ArH-3， ， 5， )， 7. 45 (1H， s， ArH-6) ， 7.79 (2H， d, J = 8. 8Hz， ArH-2， ，6， )，8.14 (1H， d， J = 9. 2 Hz， ArH-3)，9.48 (1H, s，冊(cè))。
實(shí)施例8: 5-氯-N- (4，-氰基苯基)-3-硝基苯胺(A8 ) 3， 5-二氯硝基苯(192 mg， 1 mmol)和對(duì)氰基苯胺(118 mg， 1 mmol) 和叔丁醇鉀(224 mg, 2mmol)在DMF (3 mL)中，室溫?cái)嚢?0小時(shí)， 得到標(biāo)題化合物，其為紅黃色固體，223 mg，產(chǎn)率82%。屮NMR (CDCU 5 ppm 6.25 (1H， s， ArH-6) ， 6.78 (2H， d， J = 8. 8 Hz， ArH-3，， 5， )， 7.55 (2H， d， J = 8. 8 Hz， ArH-2， ，6， )，7.83 (1H， s， ArH-2)， 8. 02 (1H， s， ArH-4)。
實(shí)施例9: 4，-氰基苯氧基-5-氯-2, 4-二硝基苯醚(A9) 1,5-二氯-2，4-二硝基苯(237 mg， 1 mmol)、對(duì)氰基苯酚(143 mg， 1.2 mmol)和碳酸鉀(276 mg, 2歷ol)在DMSO ( 2 mL )中，192 。C下 微波反應(yīng)10分鐘。反應(yīng)液倒入水中，攪拌10分鐘，乙醚提取，有機(jī) 相依次用10%氬氧化鈉溶液、水和飽和鹽水液洗滌，無水硫酸鈉干燥。 減壓除去溶劑后，得到標(biāo)題化合物，其為紅色固體，312mg，產(chǎn)率97%。 ^ NMR (DMSO) 5 5.98 (1H， s， ArH-6) ， 7.12 (2H， d， J = 8. 8 Hz， ArH-2， ， 6， )， 7.80 (2H， d， J = 8. 8 Hz, ArH-3， ， 5， )， 8. 73 (1H， s， ArH-3)。
實(shí)施例10: ( 4，-溴-2，， 6，-二甲苯氧基)-5-氯-2， 4-二硝基苯醚 (A10)
將1，5-二氯-2，4-二硝基苯(250 mg， 1.05 mmol)和2， 6-二甲基 -4-溴苯酚(250 mg， 1. 2mmol)溶于DMF(3mL)中，加入碳酸鉀(180 mg， 1.3mmo1)， 180C孩吏波反應(yīng)10分鐘。反應(yīng)液倒入水中，濾出固 體，水洗，干燥后粗產(chǎn)物用硅膠柱分離(石油醚/乙酸乙酯)得到標(biāo)題 化合物，其為黃色固體，260 mg，產(chǎn)率65。/。. ^ NMR (CDC13) S ppm 2. 15 (6H， s， 2xCH3)， 5.85 (1H， s， ArH-6) ， 7.31 (2H， s， ArH-3， ， 5，)， 8.79 (1H， s， ArH-3)實(shí)施例11: ( 4，-氰基-2，， 6，-二甲苯氧基)-5-氯-2， 4-二硝基苯 醚(All)
1，5-二氯-2，4-二硝基苯(71 mg，0.3 mmol)和2，6-二甲基-4-氰基苯酚(59mg， 0.4mmo1)、無水碳酸鉀(83mg， 0.6mmol)在3mL DMF中，溫度180X:，微波反應(yīng)10分鐘。后處理同前，得到標(biāo)題化合 物，其為黃色固體，73mg，產(chǎn)率70%。屮NMR (CDCU Sppm2. 17 (6H， s， 2x鵬，5.88 (1H， s， ArH-6)， 7.45 (2H， s， ArH-3， ， 5，)， 8.79 (1H， s， ArH-3)。
實(shí)施例12: 5- (4，-氰基苯氧基)-2-硝基苯醚(A12) 5-氯-2-硝基苯胺(172.5 mg， 1 mmol)和對(duì)氰基苯酚(143 mg， 1.2 mmol) ， 180。C微波反應(yīng)IO分淡黃色固體，產(chǎn)率71°/。。力NMR (CDCU 5ppm6. 16 (2H， s， NH2) ， 6.33 (1H， d， J = 2. 4 Hz， ArH-6)， 6.36 (2H， dd， Jl - 9. 2 & 2, 4 Hz， ArH-4) ， 7.15 (2H， d， J = 8. 8 Hz， ArH-2， ， 6， ) ， 7. 71.(2H， d， J = 8. 8 Hz， ArH-3， ， 5， )， 8. 17 (1H， d， J = 9. 2 Hz， ArH-3)。
實(shí)施例13: 4- (4，-氰基苯氧基)硝基苯醚(A13) 方法同實(shí)施例12。釆用158 mg (1 mmol)對(duì)氯硝基苯和143 mg (1.2mmo1)對(duì)氰基苯酚，得到標(biāo)題化合物，其為淺黃色固體，UOmg, 產(chǎn)率54%。力NMR (CDC1》5ppm7.ll (2H, d， J = 9. 0 Hz， ArH-2，， 6， )， 7.15 (2H， d， J = 9.2 Hz， ArH-3， 5)， 7.72 (2H, d， J = 9. 0 Hz， ArH-3， ， 5， )， 8.28 (2H, d， J = 9.2 Hz, ArH-2， 6)。
實(shí)施例14: 2- (4，-氰基苯氧基)硝基苯(A14) 方法同實(shí)施例12。采用鄰氯硝基苯(158 mg， 1 mmol)和對(duì)氰基 苯酚(143mg， 1. 2mmol)微波反應(yīng)，得到標(biāo)題化合物，其為白色固體， 130 mg，產(chǎn)率54%。 'H NMR (CDC13) 5 ppm 7.04 (2H， d， J - 8. 8 Hz，ArH-2， ， 6， )， 7. 20 (1H， d， J = 8. 4 Hz， ArH-3) ， 7.40 (1H， t， J-8. 4Hz， ArH-4)， 7.65 (3H， m， ArH-5， ArH-3， ， 5， )， 8. 04 (1H， d， J - 8.4 Hz， ArH-6)。
實(shí)施例15: 6-氯-2- (N-苯胺基)-3-硝基吡啶(Bl) 2， 6-二氯-3-硝基吡啶(553. 3 mg， 2. 867 mmol )、苯胺(266. 6 mg， 286.7 mg)和NaHC03 ( 240.8 mg， 2.867 mmol)在無水乙醇(15 mL) 中室溫?cái)嚢?0 h，大量紅色固體析出。向反應(yīng)液中加入1N的HC1調(diào) 節(jié)pH至3左右。固體被過濾、蒸餾水洗滌，干燥后得到標(biāo)題化合物， 其為紅色固體，629. 5 mg，產(chǎn)率87.6%。 TLC (乙酸乙酯/石油醚)顯 示單一點(diǎn)。^ NMR (CDC13) 5 ppm 6.81 (1H， d, J - 8. 4 Hz， H-5)， 7.21 (1H， t， J-8. 0Hz， H-4， )， 7.42 (2H， t， J - 8. 0 Hz， H-3，， 5， )， 7.66 (2H， d， J = 8. 0 Hz, H-2， ，6， )， 8.47 (1H， d， J = 8. 4 Hz， H-4)， 10.28 (1H, bs， NH)。
實(shí)施例16: 6_氯_2- (4，-曱氧基苯胺基)-3-硝基吡啶(B2) 2， 6-二氯-3-硝基吡啶(193 mg， 1 mmol )、對(duì)氨基苯曱醚(123 mg， 1 mmol)和NaHC03 ( 84 mg， 1 mmol )在無水乙醇(10 mL)中，室溫 攪拌4天，得到標(biāo)題化合物，其為紅色固體，212 mg，產(chǎn)率75.7%。 力醒(CDC13) 5 3. 84 (3H， s， 0CH3) ， 6. 75 (1H， d， J = 8. 8 Hz， H-5)， 6.95 (2H， d， J = 8.8 Hz， H-3， ，5， )， 7.53 (2H， d， J = 8. 8 Hz， H-2， ，6， )， 8.45 (1H， d， J = 8. 8 Hz， H-4) ， 10.17 (1H， bs, NH)。
實(shí)施例17: 6-氯-2- (4，-氰基苯胺基)-3-硝基吡啶(B3 ) 2， 6-二氯-3-硝基吡咬(193 mg， 1腿ol )、對(duì)氰基苯胺(354 mg， 3 mmol)和Na2C03 ( 168 mg， 2 mmol)在叔丁醇(10 mL)中，^保護(hù) 下回流2天。TLC (乙酸乙酯/石油醚)顯示仍有原料。粗產(chǎn)物用制備 色鐠分離，得到標(biāo)題化合物，其為黃色固體，85mg，產(chǎn)率31%。卞NMR (CDCh) 5ppm 6.96 (1H， d， J = 8. 4 Hz， H-5) ， 7.70 (2H， d， J =8.8 Hz， H-3， ，5， )， 7.86 (2H， d， J = 8. 8 Hz, H-2， ，6， )， 8.53 (1H， d， J = 8.4 Hz， H-4)， 10.47 (1H， bs， NH)。
實(shí)施例18: 6-氯-2-(2，， 4，， 6，-三甲基苯胺基)-3-硝基吡啶(B4 ) 2， 6-二氯-3-硝基吡啶(193 mg， 1 mmol ) 、 2, 4， 6-三甲基苯胺(0. 5 mL， 3. 56 mmol )和K2C03 ( 276 mg， 2 mmol )在HuOH (4 mL )中， 在微波條件下200X:，反應(yīng)30min,反應(yīng)液呈深褐色。TLC (乙酸乙酯 /石油醚)顯示有新點(diǎn)生成。反應(yīng)液中加入l N的HC1調(diào)pH值4-5, 析出黃色固體。過濾、水洗得粗產(chǎn)物，制備色譜分離后，得到標(biāo)題化 合物，其為紅色固體，123 mg，產(chǎn)率42. 2%，熔點(diǎn)123-124. 7 X:。H NMR (CDC13) 5 ppm 2. 07 (6H， s， 2 x CH廣2， ， 6， ) ， 2. 27 (3H， s， CH3-4，)， 6. 85 (1H， d， J = 8, 4 Hz， H-5) ， 6. 95 (2H， s， H-3， ， H-5，)， 8.50 (1H， d， J = 8. 4 Hz， H-4) ， 9.75 (1H， brs， NH)。
實(shí)施例19: 2- ( 4，-甲基苯胺基)-3-硝基吡啶(B5 ) 2-溴-3-硝基吡啶(101. 5 mg， 0. 5 mmol)、對(duì)曱基苯胺(53. 5 mg， 0. 5 mmol )和K2C03 ( 69 mg， 0. 5 mmol )在DMS0 (1.5 mL )中， N2保護(hù)、外浴為110。C條件下反應(yīng)4h。 TLC (乙酸乙酯/石油醚)監(jiān) 測反應(yīng)完全。將反應(yīng)液倒入蒸餾水中，過濾出沉淀。用丙酮溶解所得 固體，TLC板分離得產(chǎn)物47 mg,紅色固體，產(chǎn)率40.0%，熔點(diǎn) 176-177。C。力NMR (CDCU 3 ppm 10. 04 (1H， br s， NH); 8.46-8.53 (2H， m， H-4， H-6); 7.49 (2H， d， J = 8. 4 Hz， H-2，， H-6，)； 7.21 (2H， d， J = 8. 4Hz， H-3，， H-5，)； 6.80 (1H， dd， J = 8. 0 Hz， 4. 0 Hz， H-5); 2. 36 (3H， s， CH3)。
實(shí)施例20:2- (4，-氰基苯胺基)-3-硝基吡啶(B6 ) 2-溴-3-硝基p比咬(203 mg， 1 mmol) 、 4-氰基苯胺(354 mg， 3mmo1) 和特丁醇鉀(112mg， lmmol)在t-BuOH(4ml)中，微波條件下110°C， 反應(yīng)10min。 TLC (乙酸乙酯/石油醚)監(jiān)測反應(yīng)完全。將反應(yīng)液倒入水水中，用稀HC1調(diào)節(jié)pH至偏酸性，析出固體。粗品經(jīng)柱層析分離純 化得黃色固體18 mg，產(chǎn)率7.5%。 ^ NMR (CDC13) 5ppm 10.37 (1H， br s， NH)， 8.58 (2H, m， H-4， H-6) , 7.90 (2H， d， J - 8. 4 Hz， H-3,, H-5，) ， 7. 67 (2H, d， J = 8. 8 Hz， H-2，， H-6，) ， 7. 00 (1H， dd， J = 8.4 Hz， 4.4 Hz， H-5)。
實(shí)施例21.抑制癌細(xì)胞生長試驗(yàn)
所用的人體癌細(xì)胞(A549， MCF-7， KB， KB-VIN等)被置于單一 培養(yǎng)基(RPMI-1640含10。/。(v/v)小牛血清)中，用顯微鏡對(duì)細(xì)胞在 培養(yǎng)液中的形態(tài)特征和生長狀況進(jìn)行檢查。細(xì)胞置于2.5 cn^的培養(yǎng) 皿中，37°C，含5%0)2潮濕空氣中培養(yǎng)。細(xì)胞系貼壁生長。樣品配制 和稀釋及將其接種于細(xì)胞液中的過程應(yīng)為無菌操作。測試樣品通常用 DMSO溶解，-70 。C保存。在96孔培養(yǎng)板中，每個(gè)孔置于不同濃度的 測試樣品和約5000-20000個(gè)細(xì)胞，放置72小時(shí)。抑制癌細(xì)胞生長的 EDs。值由SRB ( sulforhodamine B )方法確定?？拱┧幬锔呷馍减?堿和VP16作為陽性對(duì)照。
A549:肺癌細(xì)胞；MCF-7:乳腺癌細(xì)胞；KB:鼻咽癌細(xì)胞；KB-VIN: 有抗藥性的鼻咽癌細(xì)胞。ED5fl值為抑制半數(shù)癌細(xì)胞生長的有效劑量， 表示抗癌活性。本發(fā)明涉及的化合物的部分抗癌活性測試結(jié)果見表1。表l.式I化合物及其抗癌活性數(shù)據(jù)
ED50jxg/mL
化合物&R2R3XYA549MCF7KBKBVIN
AlN02HN02CINH5. 411. 220. 760. 83
A2N02HN02CINH1. 130. 380. 770. 098
A3N02HN02;H)CH3CINH3. 452. 371. 081. 67
A4N02HN02,CH3CINH9. 573. 941. 821. 92
A5NH2HNH2/H)CH3CINH19. 287. 097. 6912. 38
A6N02HN02"o2CINH0. 870. 716. 765. 61
A7N02HHCINHNANANANA
A8HN02H;t"CNCINH8. 368. 359. 217. 33
A9N02HN02CI00. 980. 760. 590. 49
BlN02HHHCINH5. 963. 465. 194. 41
B2N02HHCIM3. 783. 242. 010- 67
B3N02HH"CNCINH1. 683. 250. 750. 58
B4N02HHo，_p~tri-0CH3CINH1. 452. 223. 610. 74
高三尖杉酯堿0. 0140. 0210. 0020. 28
依托泊苷，VP—165. 88NA8. 33NA
t明A549:肺癌細(xì)胞；MCF-7:乳腺癌細(xì)胞；KB:鼻咽癌細(xì)胞;KB-VIN:有抗藥性的鼻咽癌細(xì)胞。抑制半數(shù)癌細(xì)胞生長的有效劑量 (ED5。)表示抗癌活性。M:無抑制活性
權(quán)利要求
1.式I的N-取代芳烴苯胺類或多取代二芳基醚類化合物或其可藥用鹽其中，Z為CH或N；X為鹵素或氫；Y為-O-或-NR’-；R1，R2，R3各自獨(dú)立地為H、鹵素、-NO2、-CN、-NH2、C1-6烷基、C1-6烷氧基、OH、-OCH2O-、-CF3，、-COOH、-SO3H、-CONH2、-CONHR’或-COOR’；或者，R1和R2或R2和R3可以一起形成-OCH2O-；R4為-CN、-NO2，-CH＝CH2、-C≡CH、C1-6烷基、C1-6烷氧基、-CF3、鹵素、-NH2、-OH、-COOH、-SO3H、-C≡CR”或-CH＝CHR”，且R4為單-(鄰、間、對(duì)位)或多取代；R’為H、C1-4烴基取代的C6-10芳環(huán)、五元或六元雜芳環(huán)，任選含有雙鍵或三鍵的C1-10脂肪烴基，或任選含有雙鍵或三鍵的C1-10脂肪?；籖”為任選含有雙鍵或三鍵的C1-4烴基；條件是，不包括以下化合物5-氯-2，4-二硝基-N-(4’-甲基苯基)-苯胺5-氯-2，4-二硝基-N-(4’-甲氧基苯基)-苯胺；和6-氯-2-(N-苯胺基)-3-硝基吡啶。
2.權(quán)利要求l的化合物，其中，l為對(duì)位取代。
3. 權(quán)利要求l的化合物，其中，Y為-NH-。
4. 權(quán)利要求l的化合物，其中，Ri和R3各自獨(dú)立地為卣素、-N02、 -CN、 -NH2、 -CH" -0CH3、 0H、 -0CH20-、 -CF3，、 -COOH、 -S03H、 -C0NH2; R2為H。
5. 權(quán)利要求l的化合物，其中，Ri為卣素、-N02、 -CN、 -NH2、 -CH3, -0CH3、 0H、 -0CH20-、 -CF3、 -COOH、 -S03H、 -C0NH2; R2和R3為H。
6. 權(quán)利要求l的化合物，其中，R,和R3各自獨(dú)立地為卣素、-N02、 -CN、 -NH2、 -CH" -0CH3、 0H、 -0CH20-、 -CF3、 -COOH、 -S03H、 -C0NH2; R2為H。
7. 權(quán)利要求l的化合物，選自(t羥基苯基)-5-氯-2， 4-二硝基苯胺； 5-氯-f (4，-氰基苯基)-2， 4-二硝基苯胺； 5-氯-2， 4-二硝基-N-(4，-甲氧基苯基)-苯胺； 5-氯~^- ( 4，-硝基苯基)-2， 4-二硝基苯胺； 5-氯-N- (4，-氰基苯基)-2-硝基苯胺； 5-氯-N- (4，-氰基苯基)-3-硝基苯胺； 4，-氰基苯氧基-5-氯-2， 4-二硝基苯醚； (4，-溴-2，， 6，-二甲苯氧基)-5-氯-2， 4-二硝基苯醚； (4，-氰基-2，， 6，-二甲苯氧基)-5-氯-2， 4-二硝基苯醚； 5- (4，-氰基苯氧基)-2-硝基苯醚； 4- (4，-氰基苯氧基)硝基苯醚；2- (4，-氰基苯氧基)硝基苯；6-氯-2- (4，-甲氧基苯胺基)-3-硝基吡啶；6-氯-2- (4，-氰基苯胺基)-3-硝基吡啶；2- (4，-甲基苯胺基)-3-硝基吡啶；2- (4，-氰基苯胺基)-3-硝基吡啶；和6-氯-2-(2，， 4，， 6，-三曱基苯胺基)-3-硝基吡啶。
8.藥物組合物，其包含權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的化合物或其 可藥用鹽以及一種或多種藥用載體或賦形劑。
9.權(quán)利要求l-7任一項(xiàng)所述的化合物的制備方法:<formula>formula see original document page 0</formula>W = CI, Br, I Y=NH2orOH X =鹵素或氫X二鹵素或氫 Y=NH, O, NR'Z = C,N Z = C,N其中Rm R2，、和R4的定義同上式I所述，在堿的作用下，使式II取代的卣代苯或卣代吡啶與式III取代苯 胺或取代酚類化合物反應(yīng)，生成式I化合物。
10.不包含權(quán)利要求1中所述排除條件的權(quán)利要求1 -7任一項(xiàng)所 述的化合物用于制備抗腫瘤藥物的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)N-取代芳烴苯胺類和多取代二芳基醚類化合物或其可藥用鹽，其中X、Y、Z、R₁-R₄的定義見權(quán)利要求書，其制備方法、含有所述化合物的藥物組合物及其在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61P35/00GK101407467SQ200710163960
公開日2009年4月15日 申請(qǐng)日期2007年10月12日 優(yōu)先權(quán)日2007年10月12日
發(fā)明者李國雄, 田興濤, 秦柄杰, 藍(lán) 謝 申請(qǐng)人:中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院毒物藥物研究所