專利名稱：使用雌激素和抑制硫酸酯酶的孕激素的長(zhǎng)周期避孕給藥方案的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于月經(jīng)期間女性的長(zhǎng)周期避孕給藥方案。更具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及含有有效抑制硫酸酯酶的孕激素和雌激素的長(zhǎng)周期避孕給藥方案，其中有效的抑制硫酸酯酶的孕激素的例子包括炔諾肟酯(NGM)或諾孕曲明(NGMN)。

背景技術(shù)：
人乳腺癌的顯著發(fā)生百分率是激素依賴性的。動(dòng)物研究和臨床試驗(yàn)已經(jīng)表明雌激素尤其是雌二醇是支持激素依賴性的乳房腫瘤生長(zhǎng)的最重要的激素(參見(jiàn)參考文獻(xiàn)#1的第493頁(yè)，#2的第967頁(yè)，#7的第1589頁(yè)，#8的第525頁(yè)，#9的第135頁(yè)，#10的第225頁(yè)，#11的第625頁(yè)和#12的第1497頁(yè))。
絕經(jīng)后的婦女體內(nèi)的雌酮和雌二醇血漿濃度非常低(參見(jiàn)參考文獻(xiàn)#1的493頁(yè)和#11的第626頁(yè))。還有，雌酮和雌二醇的乳房腫瘤組織濃度比血漿濃度高一個(gè)數(shù)量級(jí)(參見(jiàn)參考文獻(xiàn)#1的第493頁(yè)、#2的第967頁(yè)和#13的第641頁(yè))。

圖1顯示了雌激素在人乳腺癌細(xì)胞局部形成因而能支持乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)的酶催化過(guò)程(參見(jiàn)參考文獻(xiàn)#10的第229頁(yè))。參見(jiàn)圖1，研究表明在雌激素的形成中似乎硫酸酯酶比芳香酶至少重要10倍(參見(jiàn)參考文獻(xiàn)#1的第493頁(yè)，#2的第967頁(yè)，#4的第17頁(yè)，#5的第931頁(yè)，#7的第1589頁(yè)，#8的第525頁(yè)，#9的第135頁(yè)，#10的第228頁(yè)，#11的第626和628頁(yè)和#13的第641頁(yè))。因此，硫酸酯酶途徑是促進(jìn)人乳腺癌細(xì)胞內(nèi)雌激素局部形成的主要途徑。
因?yàn)榇贫际侵С旨に匾蕾囆匀榉磕[瘤生長(zhǎng)的主要因素之一，而硫酸酯酶途徑又是乳房?jī)?nèi)雌二醇形成的主要途徑，因此通過(guò)抑制硫酸酯酶途來(lái)減少雌二醇的形成將對(duì)乳腺癌的治療具有潛在的治療作用(參見(jiàn)參考文獻(xiàn)#1的第493頁(yè)，#3的第55頁(yè)，#4的第17頁(yè)，#5的第931頁(yè)，#6的第123頁(yè)，#11的第631頁(yè))。抑制硫酸酯酶途徑將具有保護(hù)乳房的作用。
雌激素在乳房?jī)?nèi)的局部形成是乳房組織接觸雌激素的唯一來(lái)源。乳房組織內(nèi)雌激素的另一來(lái)源是含雌激素的避孕給藥方案。大多數(shù)這種給藥方案遵循28天的周期，包括21天孕激素和雌激素的聯(lián)合給藥后不用激素(包括雌激素)的7天。目前，人們對(duì)周期長(zhǎng)于28天的給藥方案越來(lái)越感興趣。這種給藥方案將具有6至26周如6、8、12或13周的長(zhǎng)周期。在這種長(zhǎng)周期中，與28天周期的給藥方案的不用激素或不用雌激素相比不用激素或不用雌激素的期間將不會(huì)增加。因此，91天的周期將包括84天孕激素和雌激素的聯(lián)合給藥后不用激素(包括雌激素)的7天。與28天的周期比較，91天的周期將需要91天中的84天用雌激素而不是28天中的21天。這意味著一年中與對(duì)于28天的周期將給藥13周不用雌激素相比，91天的周期將有4周不用雌激素。這種與雌激素接觸的增加被認(rèn)為可能是不利的(參見(jiàn)參考文獻(xiàn)#14第275頁(yè)和#15第94頁(yè))。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一是提供一種持續(xù)抑制人乳腺癌細(xì)胞內(nèi)硫酸酯酶活性的長(zhǎng)周期避孕給藥方案。
本發(fā)明還有一目的是提供一種異常抑制人乳腺癌細(xì)胞內(nèi)硫酸酯酶活性的長(zhǎng)周期避孕給藥方案。
本發(fā)明還有一目的是提供一種持續(xù)抑制人乳腺癌細(xì)胞內(nèi)雌激素形成的長(zhǎng)周期避孕給藥方案。
本發(fā)明還有一目的是提供一種異常抑制人乳腺癌細(xì)胞內(nèi)雌激素形成的長(zhǎng)周期避孕給藥方案。
本發(fā)明還有一目的是提供一種將乳房與局部形成的雌激素的接觸減少到最小程度的長(zhǎng)周期避孕給藥方案。
本發(fā)明還有一目的是提供一種長(zhǎng)周期的避孕給藥方案，與其它同等劑量的雌激素的長(zhǎng)周期避孕給藥方案相比，它能減少乳房與雌激素的接觸。
本發(fā)明還有一目的是提供一種長(zhǎng)周期的避孕給藥方案，與其它同等劑量的雌激素的長(zhǎng)周期避孕給藥方案相比，該方案中乳房與雌激素的接觸水平最低。
本發(fā)明還有另一目的是提供一種長(zhǎng)周期的避孕給藥方案，它幾乎能限制乳房與給藥方案中用藥所給的雌激素或體內(nèi)乳房外產(chǎn)生的雌激素水平的接觸。
本發(fā)明還有另一目的是提供一種長(zhǎng)周期的避孕給藥方案，它能提供異常的和持續(xù)的乳房保護(hù)作用。
本發(fā)明還有另一目的是提供一種能將乳腺癌的危險(xiǎn)因素減少到最低程度的長(zhǎng)周期避孕給藥方案。
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本發(fā)明還提供一種用于月經(jīng)期間女性避孕的治療單元，該治療單元包括一個(gè)周期的分開(kāi)的劑量單位，所述的劑量單位周期包括至少42個(gè)適于連續(xù)每天口服給藥的劑量單位，其中所述的劑量單位含與藥學(xué)上可接受的載體混合的有效避孕日劑量的雌激素和孕激素的聯(lián)合，其中所述的孕激素為有效抑制硫酸酯酶的孕激素，任選地，所述的劑量單位周期包括4-8個(gè)不含雌激素的劑量單位。
本發(fā)明還提供一種用于月經(jīng)期間女性給藥的避孕治療單元，其包括一個(gè)周期的經(jīng)皮貼劑，其中所述的經(jīng)皮貼劑周期包括適于連續(xù)給藥以提供至少連續(xù)42天治療的足夠數(shù)目的貼劑，其中所述的經(jīng)皮貼劑在合適的基質(zhì)中含以有效避孕的日劑量釋放的雌激素和孕激素的聯(lián)合，其中所述的孕激素為有效抑制硫酸酯酶的孕激素，任選地，所述的經(jīng)皮貼劑周期包括4-8天使用的不含雌激素的貼劑。
本發(fā)明還提供一種用于月經(jīng)期間女性給藥的避孕治療單元，其包括一個(gè)周期的陰道環(huán)，其中所述的陰道環(huán)周期包括適于連續(xù)給藥以提供至少連續(xù)42天治療的足夠數(shù)目的環(huán)，其中所述的陰道環(huán)在合適的基質(zhì)中含以有效避孕的日劑量釋放的雌激素和孕激素的聯(lián)合，其中所述的孕激素為有效抑制硫酸酯酶的孕激素，任選地，所述的陰道環(huán)周期包括4-8天使用的不含雌激素的環(huán)。
申請(qǐng)人:出乎意料地發(fā)現(xiàn)與其它用同等劑量的雌激素長(zhǎng)周期避孕的給藥方案相比，這種給藥方案有望減少乳房?jī)?nèi)雌激素的水平。
附圖簡(jiǎn)述 附圖1-顯示了有關(guān)人乳腺癌的雌激素形成和轉(zhuǎn)化的酶催化過(guò)程。
發(fā)明詳述 本發(fā)明的避孕給藥方案是給月經(jīng)期間的女性一個(gè)周期接一個(gè)周期地用藥以取得長(zhǎng)期的避孕效果。月經(jīng)期間的女性是指到了育兒年齡能生育的女性。給藥的方法可以是經(jīng)皮給藥、陰道給藥或口服給藥。經(jīng)皮給藥時(shí)，連續(xù)戴上合適的貼劑，并按要求更換。陰道給藥時(shí)，連續(xù)地插入合適的陰道裝置如環(huán)，并按要求更換。口服給藥時(shí)，服用每日的口服劑量單位。
許多常規(guī)的避孕給藥方案為28天一個(gè)周期，它包括21天的雌激素和孕激素的聯(lián)合用藥，緊接著是不使用這些激素的7天間歇期。本文中所用到短語(yǔ)“長(zhǎng)周期避孕給藥方案”是指42天或更長(zhǎng)時(shí)間的雌激素和孕激素的聯(lián)合給藥，緊接著是不用這些激素或用其減量以便月經(jīng)的間歇期的避孕方案。因此，最小的長(zhǎng)周期為用藥的42天加上不用藥或用減量藥的4-8天的間歇期的時(shí)間期間。優(yōu)選的長(zhǎng)周期是11或12周藥物的給藥緊接著是不用藥或用減量藥的4-8天的間歇期。另一優(yōu)選的長(zhǎng)周期是25周的給藥緊接著是不用藥或用減量藥的4-8天的間歇期。
如上所述間歇期不用激素或用減量激素是以便有月經(jīng)。在間歇期間應(yīng)不用雌激素。然而，從本發(fā)明的一般意義上講應(yīng)理解，可能需要繼續(xù)用有效抑制硫酸酯酶的孕激素以繼續(xù)獲得其乳房保護(hù)作用。將需要以不干擾月經(jīng)的程度繼續(xù)用孕激素。因此，可能需要在整個(gè)間歇期繼續(xù)用全劑量的或減少劑量的孕激素。全劑量是指繼續(xù)按周期中活性期間的給藥劑量或下文所述的適合于周期中活性期間給藥的孕激素劑量用藥。減少的或最低的劑量可以是以片劑的形式釋放至口腔中的等效于30或60mcg炔諾肟酯的劑量，或以裝置的形式釋放至體循環(huán)中的等效于18或30mcg炔諾肟酯的劑量。另外，可能需要中止孕激素給藥比整個(gè)間歇期短的若干天。例如，可能三天不用雌激素或孕激素而在間歇期剩下的時(shí)間內(nèi)用全劑量的或減少劑量的孕激素。優(yōu)選的不用激素或用減少劑量的激素以便月經(jīng)的間歇期為7天。
本發(fā)明中的長(zhǎng)周期給藥方案可包括按固定的模式所用的活性成分劑量每天至每天或每周至每周都變化的給藥方案。在這種情況下，包括劑量變化的給藥方案一個(gè)周期接一個(gè)周期地重復(fù)。長(zhǎng)周期給藥方案也可以是所給的活性成分的劑量沒(méi)有變化的給藥方案。無(wú)論是哪種情況，利用本發(fā)明避孕給藥方案的長(zhǎng)周期避孕產(chǎn)品都是以周期的單位開(kāi)方、銷售和給藥的。一個(gè)周期的避孕產(chǎn)品可以是4-25個(gè)陰道環(huán)，按照其設(shè)計(jì)這些陰道環(huán)插入后每7、14或21天進(jìn)行更換。一個(gè)周期的避孕產(chǎn)品可以是4-25個(gè)經(jīng)皮貼劑，按照其設(shè)計(jì)這些貼劑粘上后每7、10或14天進(jìn)行更換。一個(gè)周期的避孕產(chǎn)品可以是42、49、63、84、91、126或182個(gè)片劑，這些片劑在一個(gè)周期，即42/7、49/7、63/7、84/7、91/7、126/7或182/7內(nèi)每日口服。
雌激素與孕激素以足以提供避孕效果的量聯(lián)合給藥。此外，在本文中描述的避孕給藥法中雌激素的劑量與控制周期中的出血和起斑緊密聯(lián)系在一起。在月經(jīng)周期之間應(yīng)將出血和起斑減少至最小的程度。因此，也可用足量的17α-乙炔雌二醇控制或最小化或消除周期中月經(jīng)周期之間的出血和起斑。
本文中的“雌激素”是指雌激素受體調(diào)節(jié)劑，它對(duì)雌激素受體要么具有激動(dòng)作用要么具有拮抗作用，但優(yōu)選具有激動(dòng)作用。任何常規(guī)的雌激素都可作為一種合適的成分應(yīng)用于本發(fā)明的避孕給藥方案中。應(yīng)選擇和給藥的所用具體雌激素在避孕效果上等同于每天劑量約0.005-0.050mg的17α-乙炔雌激素。所用的雌激素的優(yōu)選劑量等效于每天劑量約0.010-0.035mg的17α-乙炔雌二醇。
除了常用的17β-雌二醇外，還可能應(yīng)用17α-乙炔雌二醇、17α-乙炔雌二醇的酯和醚如17α-乙炔雌二醇3-二甲氨基丙酸酯、17α-乙炔雌二醇3-環(huán)戊基醚(quienestrol)和17α-乙炔雌二醇3-甲基醚(炔雌醇甲醚)作為雌激素成分。也可以應(yīng)用天然的雌激素如雌酮、雌酮硫酸酯、硫酸雌酮哌嗪鹽、雌二醇和雌三醇以及它們的酯。已知的用于這方面的激素有綴合的馬雌激素(CEE)或綴合的雌激素(CE)。用于本發(fā)明的合適的合成雌激素或合成的雌激素調(diào)節(jié)劑包括他莫昔芬、托瑞米芬、奧美昔芬、modrefen、呋維司曲(fulvestrant)、拉索昔芬、bazedoxifene(TSE-424)，阿佐昔芬、替米利芬、米潑昔芬、EM-652(Sch-57068)、3339(Aventis)、Ospemifene(Fc 1271A)、ERA-923、GTx-006、HM-101、DPC-974、A-007、SP-8490、WAY-140424、替勃龍、levodoxiphen、雷洛昔芬。
在日口服片劑的情況下，17α-乙炔雌二醇(或避孕等效量的合適的雌激素)優(yōu)選的給藥劑量為約0.005mg至約0.050mg，更優(yōu)選約0.010mg至約0.035mg。具體的日口服片劑可含0.015、0.020、0.025或0.035mg 17α-乙炔雌二醇。在陰道環(huán)的情況下，優(yōu)選的環(huán)釋放17α-乙炔雌二醇(或避孕等效量的合適的雌激素)到體循環(huán)中的日劑量為約0.003mg至約0.030mg，更優(yōu)選約0.006mg至約0.020mg。具體的陰道環(huán)可插入一周，在此期間內(nèi)釋放體循環(huán)中的17α-乙炔雌二醇的平均日劑量為0.009、0.012、0.015或0.020mg。在經(jīng)皮貼劑的情況下，優(yōu)選的貼劑釋放17α-乙炔雌二醇(或避孕等效量的合適的雌激素)到體循環(huán)中的日劑量為約0.003mg至約0.030mg，更優(yōu)選約0.006mg至約0.020mg。具體的貼劑可戴上一周，在此期間內(nèi)釋放到皮膚表面的17α-乙炔雌二醇的平均日劑量為0.009、0.012、0.015或0.020mg。不管是上述的哪種情況，本發(fā)明均使用雌激素的常規(guī)劑量，因?yàn)榇萍に氐某煞植皇潜景l(fā)明的關(guān)鍵。本領(lǐng)域的技術(shù)人員很容易理解在避孕給藥方案中所需雌激素需要的劑量。
本文中有效抑制硫酸酯酶的孕激素優(yōu)選定義為這樣一種孕激素，該孕激素(或與其基本代謝物一起的孕激素)在MCF-7或T-47D乳腺癌細(xì)胞系中將E1S轉(zhuǎn)化為E2的IC50與諾孕曲明相應(yīng)的IC50大約相等或比它低。有效抑制硫酸酯酶的孕激素也可以是這樣一種孕激素，該孕激素(或與其代謝物一起的孕激素)在MCF-7或T-47D乳腺癌細(xì)胞系中將E1S轉(zhuǎn)化為E2的IC50基本上低于醋酸甲羥孕酮相應(yīng)的IC50，例如約為醋酸甲羥孕酮IC50的1/3、1/2或1/5倍。有效抑制硫酸酯酶的孕激素也可以是這樣一種孕激素，該孕激素(或與其基本代謝物一起的孕激素)在MCF-7或T-47D乳腺癌細(xì)胞系中將E1S轉(zhuǎn)化為E2的IC50最多為醋酸甲羥孕酮(MPA)相應(yīng)的IC50的約1/10，或優(yōu)選地約為1/100。有效抑制硫酸酯酶的孕激素也可定義為這樣一種孕激素，該孕激素(或與其代謝物一起的孕激素)在試驗(yàn)中以50×10-6mol/l的濃度應(yīng)用時(shí)對(duì)MCF-7或T-47D乳腺癌細(xì)胞系中E1S轉(zhuǎn)化為E2的抑制為至少約70％，優(yōu)選至少約90％。
炔諾肟酯(NGM)或諾孕曲明(NGMN)為本發(fā)明所用優(yōu)選的孕激素，均屬于避孕治療領(lǐng)域已知的孕激素。事實(shí)上，現(xiàn)在許多市售的避孕產(chǎn)品中都使用了炔諾肟酯。最優(yōu)選的孕激素為諾孕曲明(17-d-炔諾肟酯)。諾孕曲明是人體內(nèi)炔諾肟酯的主要代謝產(chǎn)物，80％或更高的炔諾肟酯在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為諾孕曲明。因此，對(duì)硫酸酯酶活性的抑制顯示的是諾孕曲明的作用，據(jù)推斷是炔諾肟酯的作用。當(dāng)然，與任何劑量的諾孕曲明比較，為獲得對(duì)硫酸酯酶活性(但不是孕激素效應(yīng))同等的抑制，必須應(yīng)用比諾孕曲明略大劑量的炔諾肟酯。
將孕激素與足量的雌激素聯(lián)合給藥以產(chǎn)生避孕效果。孕激素還將對(duì)抗雌激素對(duì)子宮內(nèi)膜的作用。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)期應(yīng)用雌激素而不應(yīng)用孕激素對(duì)抗其作用，會(huì)導(dǎo)致子宮內(nèi)膜癌發(fā)生率的顯著增加。因此，在避孕的給藥方案中還要求應(yīng)用孕激素，其量為有效地保護(hù)子宮內(nèi)膜的量。
按照本發(fā)明，現(xiàn)在額外地要求孕激素以有效保護(hù)乳房的量應(yīng)用。更具體地說(shuō)，在有效保護(hù)乳房的和其它適量的孕激素的第一種特征中，所選擇和應(yīng)用的足量的抑制硫酸酯酶的孕激素在避孕和乳房保護(hù)作用方面至少等效于約0.030mg至約0.500mg口服的炔諾肟酯。優(yōu)選地，所選擇和應(yīng)用的足量的抑制硫酸酯酶的孕激素在避孕和乳房保護(hù)作用方面至少等效于約0.050mg至約0.300mg口服的炔諾肟酯。在乳房保護(hù)量的孕激素或假定的有效避孕量的另一種特征中，所應(yīng)用的足量的活性化合物在每天的基本時(shí)間期間提供基本抑制硫酸酯酶的活性，例如抑制50％或更高，優(yōu)選67％或更高以及最優(yōu)選75％或更高的活性。一天的基本時(shí)間是指至少4小時(shí)的期間，但在本發(fā)明中也可能指至少8小時(shí)或12小時(shí)甚至24小時(shí)的期間。在日口服片劑的情況下，所應(yīng)用的優(yōu)選劑量的炔諾肟酯或諾孕曲明(或等效避孕量的合適的孕激素)為約30mcg至約500mcg，更優(yōu)選約50mcg至約300mcg。具體的日口服片可含125、180、215、250或300mcg炔諾肟酯或諾孕曲明。在陰道環(huán)的情況下，優(yōu)選的環(huán)釋放炔諾肟酯或諾孕曲明(或等效避孕量的合適的孕激素)到體循環(huán)中的日劑量為約18mcg至約300mcg，更優(yōu)選約30mcg至約175mcg。具體的陰道環(huán)可插入一周，且在此期間內(nèi)釋放炔諾肟酯或諾孕曲明到體循環(huán)中的平均日劑量為70、100、125、140或175mcg。在經(jīng)皮貼劑的情況下，優(yōu)選的貼劑釋放炔諾肟酯或諾孕曲明(或等效避孕量的合適的孕激素)到體循環(huán)中的日劑量為約18mcg至約300mcg，更優(yōu)選約30mcg至約175mcg。具體的貼劑可戴一周，且在此期間內(nèi)釋放炔諾肟酯或諾孕曲明到體循環(huán)中的平均日劑量為70、100、125、140或175mcg。
表1中公開(kāi)了本發(fā)明優(yōu)選的每天口服的長(zhǎng)周期避孕給藥方案，其中所用的藥物含炔諾肟酯(NGM)或諾孕曲明(NGMN)。在間歇期用不含激素的安慰劑，在活性期用含報(bào)告中的激素的單一的片劑。
表1 給藥方案# 活性成分/安慰劑 天數(shù) 片劑中17α-乙炔 雌二醇的含量 片劑中孕激素含量142/720mcg 125mcg NGM或NGMN242/720mcg 180mcg NGM或NGMN342/720mcg 250mcg NGM或NGMN442/725mcg 125mcg NGM或NGMN542/725mcg 180mcg NGM或NGMN642/725mcg 250mcg NGM或NGMN742/735mcg 125mcg NGM或NGMN842/735mcg 180mcg NGM或NGMN942/735mcg 250mcg NGM或NGMN1063/720mcg 125mcg NGM或NGMN 1163/720mcg 180mcg NGM或NGMN1263/720mcg 250mcg NGM或NGMN1363/725mcg 125mcg NGM或NGMN1463/725mcg 180mcg NGM或NGMN1563/725mcg 250mcg NGM或NGMN1663/735mcg 125mcg NGM或NGMN1763/735mcg 180mcg NGM或NGMN1863/735mcg 250mcg NGM或NGMN1984/720mcg 125mcg NGM或NGMN2084/720mcg 180mcg NGM或NGMN2184/720mcg 250mcg NGM或NGMN22g4/725mcg 125mcg NGM或NGMN2384/725mcg 180mcg NGM或NGMN2484/725mcg 250mcg NGM或NGMN2584/735mcg 125mcg NGM或NGMN2684/735mcg 180mcg NGM或NGMN2784/735mcg 250mcg NGM或NGMN28126/720mcg 125mcg NGM或NGMN29126/720mcg 180mcg NGM或NGMN30126/720mcg 250mcg NGM或NGMN31126/725mcg 125mcg NGM或NGMN32126/725mcg 180mcg NGM或NGMN33126/725mcg 250mcg NGM或NGMN34126/735mcg 125mcg NGM或NGMN35126/735mcg 180mcg NGM或NGMN36126/735mcg 250mcg NGM或NGMN 表1中的每種給藥法可這樣改變?cè)陂g歇期的所有天數(shù)里繼續(xù)用只含孕激素的NGM或NGMN的片劑。其劑量可以是與活性期間的給藥量相同的全劑量，或125mcg的劑量或50mcg的最低劑量。
表2中公開(kāi)了本發(fā)明優(yōu)選的避孕經(jīng)皮給藥方案或陰道環(huán)給藥方案，該給藥方案使用含炔諾肟酯(NGM)或諾孕曲明(NGMN)的周貼劑或環(huán)。周貼劑或環(huán)將報(bào)告中平均日劑量的NGM或NGMN釋放至體循環(huán)中。在間歇期間不用裝置。
表2 給藥方案# 裝置/間歇期 周 裝置釋放17β- 雌二醇的速率 裝置釋放孕激素的速率376/112mcg 70mcg NGM或NGMN386/112mcg 100mcg NGM或NGMN396/112mcg 140mcg NGM或NGMN406/115mcg 70mcg NGM或NGMN416/115mcg 100mcg NGM或NGMN426/115mcg 140mcg NGM或NGMN436/120mcg 70mcg NGM或NGMN446/120mcg 100mcg NGM或NGMN456/120mcg 140mcg NGM或NGMN469/112mcg 70mcg NGM或NGMN479/112mcg 100mcgNGM或NGMN489/112mcg 140mcg NGM或NGMN499/115mcg 70mcg NGM或NGMN509/115mcg 100mcg NGM或NGMN519/115mcg 140mcg NGM或NGMN529/120mcg 70mcg NGM或NGMN539/120mcg 100mcgNGM或NGMN549/120mcg 140mcg NGM或NGMN5512/112mcg 70mcg NGM或NGMN5612/112mcg 100mcg NGM或NGMN5712/112mcg 140mcg NGM或NGMN5812/115mcg 70mcg NGM或NGMN5912/115mcg 100mcg NGM或NGMN6012/115mcg 140mcg NGM或NGMN6112/120mcg 70mcg NGM或NGMN6212/120mcg 100mcg NGM或NGMN6312/120mcg 140mcg NGM或NGMN6418/112mcg 70mcg NGM或NGMN6518/112mcg 100mcg NGM或NGMN6618/112mcg 140mcg NGM或NGMN6718/115mcg 70mcg NGM或NGMN 6818/115mcg 100mcg NGM或NGMN6918/115mcg 140mcg NGM或NGMN7018/120mcg 70mcg NGM或NGMN7118/120mcg 100mcg NGM或NGMN7218/120mcg 140mcg NGM或NGMN 表2中的每種給藥方案可這樣改變?cè)陂g歇期間繼續(xù)用只含孕激素的NGM或NGMN的裝置。其劑量可以是與活性期間的給藥量相同的全劑量，或70mcg的劑量或30mcg的最低劑量。
雌激素和孕激素成分優(yōu)選以含藥學(xué)上可接受的無(wú)毒載體的片劑形式一起口服給藥，但也可分開(kāi)給藥。合適的載體包括碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石粉、乳糖、糖、peptin、糊精、淀粉、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉等。片劑也可含一種或多種起稀釋劑、調(diào)味劑、增溶劑、潤(rùn)滑劑、懸浮劑、粘合劑或片劑崩解劑及囊化材料作用的物質(zhì)。一般，活性成分與常用的添加劑、載體和/或常用于蓋倫制劑中的調(diào)味劑一起按普遍接受的藥學(xué)操作加工。含激素的片劑也可含營(yíng)養(yǎng)添加劑如鐵添加劑、葉酸、鈣、維生素B6、維生素B12等。在典型的片劑制造中，活性成分與噴霧干燥的乳糖、潤(rùn)滑劑和著色劑一起制粒和壓縮。
口服的片劑優(yōu)選以藥物試劑盒或包裝的形式包裝，其中每日劑量按適當(dāng)?shù)慕o藥順序排列。因此，本發(fā)明還涉及一種含有同步、固定順序的給藥方案的片劑的藥物單元，其中劑量單位的順序或排列與每日給藥方案相對(duì)應(yīng)。
雌激素和孕激素成分也可用貼劑經(jīng)皮給藥，優(yōu)選一起給藥。概括地說(shuō)，貼劑是這樣一種裝置，它至少含容納藥物和定量供應(yīng)存儲(chǔ)的藥物或釋放藥物至皮膚的貯藥基質(zhì)、背襯層和將裝置粘于患者身上的粘附層。該裝置可含其它層如調(diào)節(jié)釋放速率的藥物釋放速率控制層等。該裝置可含透皮增強(qiáng)劑以增加藥物穿透皮膚的速率。貼劑為本領(lǐng)域技術(shù)人員已知和了解。目前，用于某些孕激素和雌激素給藥的市售產(chǎn)品中應(yīng)用了貼劑。本文中描述的具體貼劑及類固醇的這類應(yīng)用在美國(guó)專利5474783；5656286；5958446；6024976；5252334；5006342；和4906463中有描述。
雌激素和孕激素成分也可用環(huán)陰道內(nèi)給藥，優(yōu)選一起給藥。概括地說(shuō)，環(huán)是具有彈性部分或體的裝置，其中活性的類固醇分散于彈性體中，彈性體起儲(chǔ)庫(kù)的作用并定量將活性成分分散到陰道內(nèi)表面。環(huán)可完全由含均勻分散的類固醇的彈性體構(gòu)成，如美國(guó)專利3545397中所述。環(huán)可具有的惰性內(nèi)芯，該內(nèi)芯被含活性成分的彈性層包圍，如美國(guó)專利4012496中所述。環(huán)可具有彈性的含活性成分的內(nèi)芯，該內(nèi)芯被一層初始不含活性成分的薄彈性體層包圍。環(huán)可具有惰性芯，該惰性芯被含活性成分的彈性層包圍并進(jìn)一步被初始不含活性成分的各種厚度的彈性外層包圍，如美國(guó)專利4292965所述。彈性體、環(huán)的層狀設(shè)計(jì)、環(huán)的表面積、活性成分的濃度、活性成分的特性等都結(jié)合起來(lái)決定活性成分的釋放速率。環(huán)為本領(lǐng)域技術(shù)人員已知和理解。目前，在用于某些類固醇給藥的市售產(chǎn)品中應(yīng)用了環(huán)。更具體的環(huán)及本文中描述的類固醇的這類應(yīng)用在美國(guó)專利4871543和5188835有描述。

具體實(shí)施例方式 生物實(shí)驗(yàn)方法 化學(xué)藥品 [6，7-3H(N)]-雌甾酮硫酸酯(3H-E1S)、銨鹽(sp.act.53 Ci/mmol)和[4-14C]-雌二醇(14C-E2)(sp.act.57mCi/mmol)購(gòu)自New EnglandNuclear Division(DuPont de Nemours，Les Ulls，F(xiàn)rance)。使用前用薄層層析(TLC)在合適的系統(tǒng)中對(duì)放射性同位素的純度進(jìn)行評(píng)估。E1S、銨鹽、未標(biāo)記的E1和E2(分析純)購(gòu)自Sigma-Aldrich Chimle，(St Quentin Fallavier，F(xiàn)rance)。17-去乙酰基甲基炔諾酮(NGMN；13-乙基-17-羥基-18，19-雙去甲基-17α-孕甾-4-烯-20-炔-3-酮肟)由R.W.Johnson Pharmaceutical Research Institute，Medicinal ChemistryDepartment，(Raritan，NJ，USA)贈(zèng)送；醋酸甲羥孕酮(MPA，17α-乙酰氧基-6α-甲基孕甾酮)購(gòu)自Sigma-Aldrich Chimie。其它所有的化學(xué)藥品級(jí)別均為市售的最高級(jí)別。
細(xì)胞培養(yǎng) 讓激素依賴性MCF-7和T-47D人乳腺癌細(xì)胞系在以10mmol/lHEPES(pH 7.6)緩沖的Eagle′s Minimal Essential Medium(MEM)中生長(zhǎng)，培養(yǎng)基中補(bǔ)充2mmol/l L-谷氨酰胺、100U/ml青霉素-鏈霉素和胎牛血清(FCS)(A.T.G.C.，Marne-la-Vallée，F(xiàn)rance)，對(duì)于T-47D胎牛血清的濃度為5％，對(duì)于MCF-7細(xì)胞胎牛血清的濃度為10％，并在37℃下含5％CO2的潮濕空氣中孵化。培養(yǎng)基一周更換兩次。細(xì)胞每10-12天傳代一次，將其重新平鋪在75cm2的燒瓶(A.T.G.C.)中，每個(gè)燒瓶3×106個(gè)細(xì)胞。試驗(yàn)前4天，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至含5％除去類固醇的處理的FCS的MEM中。將FCS在4℃用右旋糖苷包被的活性碳(DCC)(0.1-1％w/v，DCC-FCS)處理一整夜。本發(fā)明中使用的MCF-7和T-47D細(xì)胞系按照布達(dá)佩斯條約規(guī)定的方法以MCF7_JJPRD and T47D_JJPRD的流水號(hào)于2002年5月17，保藏于The Belgian Co-ordinated Collections of Microorganisms(BCCM)，Laboratorium voor Moleculaire Biologie，Universiteit Gent，K.L.Ledeganckstraat 35，B-9000 Gent，Belgium，并能為公眾獲得，它們的保藏號(hào)分別為L(zhǎng)MBP 5862CB和LMBP 5863CB。
用[3H]-E1S孵化的人乳腺癌細(xì)胞產(chǎn)生的[3H]-雌二醇的分離與定量測(cè)試 將預(yù)匯流的細(xì)胞在MEM-DCC-FCS中于37℃孵化4小時(shí)，孵化時(shí)基質(zhì)中只加入5×10-9mol/l的[3H]-E1S(對(duì)照細(xì)胞)，或還加入溶解在乙醇中濃度為5×10-5-5×10-9mol/l的不同的化合物NGMN或MPA(最終濃度＜0.2％)。對(duì)照細(xì)胞只能以乙醇為媒介物。24小時(shí)后，除去培養(yǎng)基用冰水冷卻的Hank′s緩沖鹽溶液(HBSS，游離的鈣-鎂)(A.T.G.C.)洗滌細(xì)胞兩次，刮下并收集。離心過(guò)濾后，用80％乙醇處理平鋪板并在-20℃下提取放射性物質(zhì)至少24小時(shí)。測(cè)定乙醇上清液內(nèi)細(xì)胞的放射性物質(zhì)攝取量，并按照Burton.Biochem Journal 62315-323，1956描述的方法評(píng)估殘留在平鋪板上的DNA含量。加入[14C]-E2(5,000dpm)以監(jiān)測(cè)分析過(guò)程中的損失，并加入未標(biāo)記的E1和E2(50μg)作為載體和對(duì)照指示劑。通過(guò)薄層層析(TLC)在硅膠60F254(Merck，Darmstadt，Germany)上以氯仿-乙酸乙酯(4∶1，v/v)溶劑系統(tǒng)展開(kāi)分離整個(gè)乙醇提取物中的E2。當(dāng)雌激素在254nm的紫外光下清晰可見(jiàn)時(shí)，切下其中適當(dāng)?shù)膮^(qū)域成小塊，置于裝有乙醇(0.5ml)的液體閃爍小瓶中并提取30mn。加入3ml of Opti-fluor(Packard，Rungis，F(xiàn)rance)并通過(guò)外標(biāo)法以猝滅校正分析3H和14C的含量。E2的定量評(píng)估是以占細(xì)胞總放射性的百分?jǐn)?shù)計(jì)算的，并以由E1S形成的E2的fmol/mgDNA表示。
統(tǒng)計(jì)分析 數(shù)據(jù)以平均值±平均標(biāo)準(zhǔn)偏差(SEM)的值表示。用斯徒登t-檢驗(yàn)來(lái)評(píng)價(jià)平均值之間是否存在顯著性的差異；認(rèn)為p值≤0.05時(shí)有顯著性的差異。
結(jié)果 表3顯示了NGMN和醋酸甲羥孕酮(MPA)的濃度對(duì)激素依賴性的人乳腺癌細(xì)胞系T-47D內(nèi)E1S轉(zhuǎn)化為E2的影響。數(shù)據(jù)為3次獨(dú)立試驗(yàn)重復(fù)測(cè)定的平均值±SEM。加*表示與對(duì)照值(未處理的細(xì)胞)比較p≤0.05；加**表示與對(duì)照值(未處理的細(xì)胞)比較p≤0.005。
表3 NGMN或MPA 濃度1×10-6 mol/l NGMN形成的E2fmol/mgDNA(抑制百分?jǐn)?shù))MPA形成的E2fmol/mg DNA(抑制百分?jǐn)?shù)) 0(時(shí)照組) 1805±152(0％) 0.005 1029±？(43±7％)* 1245±？(31±5％)* 0.5 469±？(74±4％)* 957±？(47±3％)* 50 54±？(97±2％) 704±？(61±3％)* 表4顯示了NGMN和醋酸甲羥孕酮(MPA)的濃度對(duì)激素依賴性的人乳腺癌細(xì)胞系MCF-7內(nèi)E1S轉(zhuǎn)化為E2的影響。數(shù)據(jù)為3次獨(dú)立試驗(yàn)重復(fù)測(cè)定的平均值±SEM。加*表示與對(duì)照值(未處理的細(xì)胞)比較p≤0.05；加**表示與對(duì)照值(未處理的細(xì)胞)比較p≤0.005。
表4 NGMN或MPA 濃度1×10-6 mol/lNGMN形成的E2 fmol/mgDNA(抑制百分?jǐn)?shù)) MPA形成的E2 fmol/mgDNA(抑制百分?jǐn)?shù)) 0/對(duì)照組2185±101(0％) 0.005 1639±7(25±4％)* 2054±？(6±3％％) 0.5 940±7(57±5％)* 1748±？(20±3％) 50 87±？(96±2％)** 808±？(63±4％)* 表5顯示了在激素依賴性的人乳腺癌細(xì)胞系MCF-7和T-47D內(nèi)E1S轉(zhuǎn)化為E2的NGMN和醋酸甲羥孕酮(MPA)的IC50值。IC50值相當(dāng)于對(duì)E1S轉(zhuǎn)化為E2產(chǎn)生50％抑制時(shí)的值，用非線性回歸分析法測(cè)定。
表5 IC50，1×10-5mol/lT-47DMCF-7NGMN0.01270.178MPA2.1526.1 以上詳細(xì)地描述了本發(fā)明并舉例說(shuō)明了其可實(shí)施的方式，對(duì)本領(lǐng)域的技術(shù)人員來(lái)說(shuō)在不背離本發(fā)明的精神或范圍的情況下可對(duì)其基本原理進(jìn)行無(wú)數(shù)變化、應(yīng)用、改變和擴(kuò)展是顯而易見(jiàn)的。應(yīng)理解以上的描述僅僅是示例，本發(fā)明不限于本文中描述和說(shuō)明部分的具體形式或方案。
權(quán)利要求
1.一種避孕的方法，包括給月經(jīng)期間的女性給藥的一個(gè)周期的避孕治療步驟，所述的治療周期包括用雌激素和孕激素以有效避孕的日劑量聯(lián)合給藥至少連續(xù)42天，其中所述的孕激素為有效的抑制硫酸酯酶的孕激素，所述的治療周期包括在上述的至少連續(xù)的42天后不用雌激素的4-8天。
2.一種用于月經(jīng)期間女性避孕的治療單元，包括一個(gè)周期的分開(kāi)的劑量單位，所述的劑量單位周期包括至少42個(gè)適于連續(xù)每天口服給藥的劑量單位，其中所述的劑量單位含與藥學(xué)上可接受的載體混合的有效避孕日劑量的雌激素和孕激素的聯(lián)合，其中所述的孕激素為有效的抑制硫酸酯酶的孕激素，任選地，所述的劑量單位周期包括不含雌激素的4-8個(gè)劑量單位。
3.本發(fā)明還提供一種用于月經(jīng)期間女性給藥的避孕治療單元，其包括一個(gè)周期的經(jīng)皮貼劑，其中所述的經(jīng)皮貼劑周期包括適于連續(xù)給藥以提供至少連續(xù)42天治療的足夠數(shù)目的貼劑，其中所述的經(jīng)皮貼劑在合適的基質(zhì)中含以有效避孕的日劑量釋放的雌激素和孕激素聯(lián)合，其中所述的孕激素為有效的抑制硫酸酯酶的孕激素，任選地，所述的經(jīng)皮貼劑周期包括4-8天使用的不含雌激素的貼劑。
4.本發(fā)明還提供一種用于月經(jīng)期間女性給藥的避孕治療單元，其包括一個(gè)周期的陰道環(huán)，其中所述的避孕環(huán)周期包括適于連續(xù)給藥以提供至少連續(xù)42天治療的足夠數(shù)目的環(huán)，其中所述的陰道環(huán)在合適的基質(zhì)中含以有效避孕的日劑量釋放的雌激素和孕激素聯(lián)合，其中所述的孕激素為有效的抑制硫酸酯酶的孕激素，任選地，所述的陰道環(huán)周期包括用于4-8天使用的不含雌激素的環(huán)。
全文摘要
本發(fā)明描述了一種避孕方法，它包括給月經(jīng)期間的女性一個(gè)周期的避孕治療的步驟，所述的治療周期包括用雌激素和孕激素以有效避孕的日劑量聯(lián)合給藥至少連續(xù)42天，其中所述的孕激素為有效的抑制硫酸酯酶的孕激素，所述的治療周期包括在上述的至少連續(xù)的42天后不用雌激素的4－8天。
文檔編號(hào)A61K9/70GK1652796SQ03810710
公開(kāi)日2005年8月10日 申請(qǐng)日期2003年3月11日 優(yōu)先權(quán)日2002年3月11日
發(fā)明者P·M·科貝爾, A·J·弗里德曼 申請(qǐng)人:詹森藥業(yè)有限公司