用于制備嘧啶基環(huán)戊烷化合物的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種用于制備式(I)化合物的方法，其中R1如本文所定義，所述化合物用作制備活性藥物化合物的中間體。
【專利說明】用于制備嘧啶基環(huán)戊烷化合物的方法
[0001] 相關(guān)申請
[0002] 本申請要求2013年11月15日提交的歐洲專利申請?zhí)?3193030.7的優(yōu)先權(quán)，所述歐 洲專利申請的全部內(nèi)容以引用的方式并入本文。 發(fā)明領(lǐng)域
[0003] 本發(fā)明涉及用于制備用作制備針對諸如癌癥的疾病具有治療活性的AKT蛋白質(zhì)激 酶抑制劑的中間體的嘧啶基環(huán)戊烷化合物的方法。
[0004] 發(fā)明背景
[0005] 蛋白質(zhì)激酶B/Akt酶是一組在某些人腫瘤中過表達(dá)的絲氨酸/蘇氨酸激酶。國際專 利申請W0 2008/006040和美國專利號8,063,050討論許多AKT抑制劑，包括正在臨床試驗中 針對治療各種癌癥加以探究的化合物(S)_2_(4-氯苯基)-1-(4-( (5R，7R)-7-羥基-5-甲基-6,7-二氫-5H-環(huán)戊并[d]嘧啶-4-基）哌嗪-1-基）-3-(異丙基氨基）丙-1-酮（伊帕斯布 (ipatasertib)，GDC_0068)〇
[0006] 盡管WO 2008/006040和US 8,063,050中所述的方法用于提供羥基化的環(huán)戊并[d] 嘧啶化合物作為AKT蛋白質(zhì)激酶抑制劑，但需要替代性或改進(jìn)的方法，包括用于大規(guī)模制造 這些化合物的方法。
[0007] 發(fā)明概述
[0008] 本發(fā)明提供用于制備式(I)化合物
[0010]或其鹽的方法，其包括式（II)化合物
[0012]與式（III)化合物
[0014] 的偶聯(lián)反應(yīng)，其中R\R2和Μ如本文所述。
[0015] 發(fā)明詳述
[0016] 除非另外定義，否則本文所用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語都具有與由本發(fā)明所屬領(lǐng)域 的普通技術(shù)人員通常所理解相同的含義。盡管與本文所述的那些方法和材料類似或等效的 方法和材料可用于實施或測試本發(fā)明，但以下描述合適的方法和材料。
[0017] 除非另外指示，否則用于本申請中的命名法基于IUPAC系統(tǒng)命名法。
[0018] 除非另外指示，否則出現(xiàn)在本文結(jié)構(gòu)中的碳、氧、硫或氮原子上的任何開放化合價 都指示存在氫。
[0019] 當(dāng)指示取代基的數(shù)目時，術(shù)語"一個或多個"是指從一個取代基至最高可能數(shù)目的 取代的范圍，即一個氫由取代基置換直至所有氫都由取代基置換。
[0020] 術(shù)語"任選"或"任選地"表示隨后描述的事件或事項可能但無需發(fā)生，并且所述描 述包括其中所述事件或事項發(fā)生的情況以及其中它不發(fā)生的情況。
[0021] 術(shù)語"藥學(xué)上可接受的鹽"表示并非在生物學(xué)上或在其它方面不合需要的鹽。藥學(xué) 上可接受的鹽包括酸加成鹽與堿加成鹽兩者。
[0022] 術(shù)語"藥學(xué)上可接受的酸加成鹽"表示用無機(jī)酸，諸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、碳 酸、磷酸;和選自脂族、環(huán)脂族、芳族、芳脂族、雜環(huán)、羧酸和磺酸類別的有機(jī)酸的有機(jī)酸，諸 如甲酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、葡萄糖酸、乳酸、丙酮酸、草酸、蘋果酸、順丁烯二酸、丙二酸、丁 二酸、反丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、天冬氨酸、抗壞血酸、谷氨酸、鄰氨基苯甲酸、苯甲酸、肉 桂酸、杏仁酸、雙羥萘酸、苯乙酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、對甲苯磺酸和水楊酸形成的那些藥 學(xué)上可接受的鹽。
[0023] 術(shù)語"藥學(xué)上可接受的堿加成鹽"表示用有機(jī)或無機(jī)堿形成的那些藥學(xué)上可接受 的鹽?？山邮艿臒o機(jī)堿的實例包括鈉、鉀、銨、鈣、鎂、鐵、鋅、銅、錳和鋁鹽。由藥學(xué)上可接受 的有機(jī)無毒堿獲得的鹽包括以下各項的鹽:伯胺、仲胺和叔胺、取代的胺(包括天然存在的 取代的胺）、環(huán)胺和堿性離子交換樹脂，諸如異丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇 胺、2-二乙基氨基乙醇、三甲胺、二環(huán)己胺、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、咖啡因、普魯卡因、海卓 胺(hydrabamine)、膽堿、甜菜堿、乙二胺、葡糖胺、甲基葡糖胺、可可堿、嘌呤、哌嗪、哌啶、Ν-乙基哌啶和聚胺樹脂。
[0024] 本文所用的立體化學(xué)定義和慣例大體上遵循S.P. Parker編，McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms(1984)McGraw-Hill Book Company,New York;以及 Eliel，Ε·和Wilen，S.，"Stereochemistry of Organic Compounds" John ffiley&Sons, Inc.，New York，1994。在描述光學(xué)活性化合物時，前綴D和L或R和S用于表示分子關(guān)于它的 手性中心的絕對構(gòu)型。根據(jù)Cahn、Ingo 1 d和Prelog的順序規(guī)則（Sequence Rule)對連接于所 考慮的手性中心的取代基分級。（Cahn等Angew. Chem. Inter .Edit · 1966，5，385;勘誤511)。 前綴D和L或(+ )和(-)用于指定由化合物達(dá)成的平面偏振光旋轉(zhuǎn)的符號，其中（-)或L指定化 合物是左旋的。以(+ )或D為前綴的化合物是右旋的。
[0025] 術(shù)語"立體異構(gòu)體"表示具有相同分子連接性和鍵合多重性，但在它的原子在空間 中的排列方面不同的化合物。
[0026] 術(shù)語"手性中心"表示鍵合于四個非相同取代基的碳原子。術(shù)語"手性"表示不能與 鏡像具有可重疊性，而術(shù)語"無手性"是指實施方案可與它們的鏡像重疊。手性分子是光學(xué) 活性的，即它們能夠使平面偏振光的平面旋轉(zhuǎn)。
[0027] 本發(fā)明化合物可具有一個或多個手性中心，并且可以光學(xué)純的對映異構(gòu)體、對映 異構(gòu)體的混合物(例如像外消旋物）、光學(xué)純的非對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體的混合物、非對 映異構(gòu)外消旋物或非對映異構(gòu)外消旋物的混合物形式存在。只要手性中心存在于化學(xué)結(jié)構(gòu) 中時，意圖與那個手性中心相關(guān)的所有立體異構(gòu)體都由本發(fā)明涵蓋。
[0028] 術(shù)語"對映異構(gòu)體"表示化合物的是彼此的不可重疊鏡像的兩個立體異構(gòu)體。
[0029] 術(shù)語"非對映異構(gòu)體"表示具有兩個或更多個手性中心，并且其分子不是彼此的鏡 像的立體異構(gòu)體。非對映異構(gòu)體具有不同物理性質(zhì)，例如熔點(diǎn)、沸點(diǎn)、光譜性質(zhì)和反應(yīng)性。
[0030] 術(shù)語"非對映體過量"（de)表示非對映異構(gòu)純度，即（非對映異構(gòu)體A-非對映異構(gòu) 體B)/(非對映異構(gòu)體A+非對映異構(gòu)體B)(以面積％計）。
[0031] 術(shù)語"對映體過量"（ee)表示對映異構(gòu)純度，即（對映異構(gòu)體A-對映異構(gòu)體B)/(對 映異構(gòu)體A+對映異構(gòu)體B)(以面積％計）。
[0032]術(shù)語"鹵代基"和"鹵素"在本文中可互換使用，并且表示氟代基、氯代基、溴代基或 鵬代基。
[0033]術(shù)語"鹵離子"表示鹵素離子，特別是氟離子、氯離子、溴離子或碘離子。
[0034] 術(shù)語"烷基"表示具有1至12個碳原子的單價直鏈或支鏈飽和烴基團(tuán)。在特定實施 方案中，烷基具有1至7個碳原子，并且在更特定實施方案中，具有1至4個碳原子。烷基的實 例包括甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基或叔丁基。
[0035] 術(shù)語"烯基"表示具有2至7個碳原子以及至少一個雙鍵的單價直鏈或支鏈烴基團(tuán)。 在特定實施方案中，烯基具有2至4個碳原子以及至少一個雙鍵。烯基的實例包括乙烯基、丙 烯基、丙-2-烯基、異丙烯基、正丁烯基和異丁烯基。
[0036]術(shù)語"炔基"表示具有2至7個碳原子，包含一個、兩個或三個三鍵的單價直鏈或支 鏈飽和烴基團(tuán)。在特定實施方案中，炔基具有2至4個碳原子，包含一個或兩個三鍵。炔基的 實例包括乙炔基、丙炔基和正丁炔基。
[0037] 術(shù)語"烷氧基"表示式-0-R'基團(tuán)，其中R'是烷基。烷氧基部分的實例包括甲氧基、 乙氧基、異丙氧基和叔丁氧基。
[0038] 術(shù)語"鹵烷基"表示其中烷基的至少一個氫原子已被相同或不同鹵素原子，特別是 氟原子置換的烷基。鹵烷基的實例包括單氟、二氟或三氟甲基、乙基或丙基，例如3,3,3-三 氟丙基、2-氟乙基、2,2,2_三氟乙基、氟甲基或三氟甲基。術(shù)語"全鹵烷基"表示其中烷基的 所有氫原子都已被相同或不同鹵素原子置換的烷基。
[0039] 術(shù)語"鹵烷氧基"表示其中烷氧基的至少一個氫原子已被相同或不同鹵素原子，特 別是氟原子置換的烷氧基。鹵烷氧基的實例包括單氟、二氟或三氟甲氧基、乙氧基或丙氧 基，例如3,3,3_三氟丙氧基、2-氟乙氧基、2,2,2_三氟乙氧基、氟甲氧基或三氟甲氧基。術(shù)語 "全鹵烷氧基"表示其中烷氧基的所有氫原子都已被相同或不同鹵素原子置換的烷氧基。
[0040] 術(shù)語"環(huán)烷基"表示具有3至10個環(huán)碳原子的單價飽和單環(huán)或雙環(huán)烴基團(tuán)。在特定 實施方案中，環(huán)烷基表示具有3至8個環(huán)碳原子的單價飽和單環(huán)烴基團(tuán)。雙環(huán)意指由共同具 有一個或多個碳原子的兩個飽和碳環(huán)組成。特定環(huán)烷基是單環(huán)。單環(huán)環(huán)烷基的實例是環(huán)丙 基、環(huán)丁烷基、環(huán)戊基、環(huán)己基或環(huán)庚基。雙環(huán)環(huán)烷基的實例是雙環(huán)[2.2.1]庚烷基或雙環(huán) [2.2.2]辛烷基。
[0041] 術(shù)語"雜環(huán)烷基"表示具有3至9個環(huán)原子的單價飽和或部分不飽和單環(huán)或雙環(huán)系 統(tǒng)，所述環(huán)原子包含1、2或3個選自N、0和S的環(huán)雜原子，其余環(huán)原子是碳。在特定實施方案 中，雜環(huán)烷基是具有4至7個環(huán)原子的單價飽和單環(huán)系統(tǒng)，所述環(huán)原子包含1、2或3個選自N、0 和S的環(huán)雜原子，其余環(huán)原子是碳。單環(huán)飽和雜環(huán)烷基的實例是氮丙啶基、環(huán)氧乙烷基、氮雜 環(huán)丁烷基、氧雜環(huán)丁烷基、吡咯烷基、四氫呋喃基、四氫-噻吩基、吡唑烷基、咪唑烷基、噁唑 烷基、異噁唑烷基、噻唑烷基、哌啶基、四氫吡喃基、四氫噻喃基、哌嗪基、嗎啉基、硫代嗎啉 基、1，1_二氧代-硫代嗎啉-4-基、氮雜環(huán)庚烷基、二氮雜環(huán)庚烷基、高哌嗪基或氧雜氮雜環(huán) 庚烷基(oxazepanyl)。雙環(huán)飽和雜環(huán)烷基的實例是8-氮雜-雙環(huán)[3.2.1]辛基、奎寧環(huán)基、8-氧雜 _3-氣雜-雙環(huán)[3.2.1 ]辛基、9-氣雜-雙環(huán)[3.3.1 ]壬基、3-氧雜氣雜-雙環(huán)[3.3.1 ] 壬基或3-硫雜-9-氮雜-雙環(huán)[3.3.1]壬基。部分不飽和雜環(huán)烷基的實例是二氫呋喃基、咪唑 啉基、二氫-噁唑基、四氫-吡啶基或二氫吡喃基。
[0042] 術(shù)語"芳基"表示包含6至10個碳環(huán)原子的單價芳族碳環(huán)單環(huán)或雙環(huán)環(huán)系統(tǒng)。芳基 部分的實例包括苯基和萘基。特定芳基是苯基。
[0043] 術(shù)語"雜芳基"表示具有5至12個環(huán)原子的單價芳族雜環(huán)單環(huán)或雙環(huán)環(huán)系統(tǒng)，所述 環(huán)原子包含1、2、3或4個選自N、0和S的雜原子，其余環(huán)原子是碳。雜芳基部分的實例包括吡 咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、噁二唑基、噻二唑基、四唑基、吡啶 基、吡嗪基、吡唑基、噠嗪基、啼啶基、三嗪基、氮雜章基、二氮雜罩基、異噁唑基、苯并呋喃 基、異噻唑基、苯并噻吩基、吲哚基、異吲哚基、異苯并呋喃基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯 并異噁唑基、苯并噻唑基、苯并異噻唑基、苯并噁二唑基、苯并噻二唑基、苯并三唑基、嘌呤 基、喹啉基、異喹啉基、喹唑啉基或喹喔啉基。
[0044] "離去基團(tuán)"是指化學(xué)反應(yīng)中第一反應(yīng)物的在所述化學(xué)反應(yīng)中被從所述第一反應(yīng) 物移位的部分。離去基團(tuán)的實例包括但不限于氫、鹵素、羥基、硫氫基、氨基(例如-NRR，其中 R獨(dú)立地是烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、苯基或雜環(huán)基，并且R獨(dú)立地任選被取代）、甲娃烷基 (例如-SiRRR，其中R獨(dú)立地是烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、苯基或雜環(huán)基，并且R獨(dú)立地任選被 取代）、_N( R) 0R(其中R獨(dú)立地是烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、苯基或雜環(huán)基，并且R獨(dú)立地任選 被取代）、烷氧基(例如_〇R，其中R獨(dú)立地是烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、苯基或雜環(huán)基，并且R 獨(dú)立地任選被取代）、硫醇基團(tuán)（例如-SR，其中R獨(dú)立地是烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、苯基或 雜環(huán)基，并且R獨(dú)立地任選被取代）、磺?；趸?例如-0S(0)1-2R，其中R獨(dú)立地是烷基、烯 基、炔基、環(huán)烷基、苯基或雜環(huán)基，并且R獨(dú)立地任選被取代）、氨基磺酸酯基團(tuán)（例如-0S(0) 1-2NRR，其中R獨(dú)立地是烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、苯基或雜環(huán)基，并且R獨(dú)立地任選被取 代）、氨基甲酸酯基團(tuán)（例如_0C(0)2NRR，其中R獨(dú)立地是烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、苯基或雜 環(huán)基，并且R獨(dú)立地任選被取代)和碳酸酯基團(tuán)（例如-0C(0)2R，其中R獨(dú)立地是烷基、烯基、 炔基、環(huán)烷基、苯基或雜環(huán)基，并且R獨(dú)立地任選被取代）。示例性碳酸酯基團(tuán)包括碳酸叔丁 酯。示例性磺酰基氧基包括但不限于烷基磺?；趸ɡ缂谆酋；趸谆撬狨セ?團(tuán)）和三氟甲基磺?；趸?三氟甲磺酸酯基團(tuán)））和芳基磺酰基氧基(例如對甲苯磺?；?基（甲苯磺酸酯基團(tuán)）和對硝基磺酰基氧基(對硝基苯磺酸酯基團(tuán)））。離去基團(tuán)的其它實例 包括取代和未取代的氨基，諸如氨基、烷基氨基、二烷基氨基、羥基氨基、烷氧基氨基、N-燒 基-N-烷氧基氨基、酰基氨基、磺?；被⑹宥⊙趸?。
[0045] 術(shù)語"保護(hù)基"表示選擇性阻斷多官能化合物中的反應(yīng)性位點(diǎn)以使化學(xué)反應(yīng)可在 另一未保護(hù)的反應(yīng)性位點(diǎn)處選擇性進(jìn)行的基團(tuán)，其處于在合成化學(xué)中常規(guī)與它相關(guān)的含義 下?？稍谶m當(dāng)時點(diǎn)移除保護(hù)基。示例性保護(hù)基是氨基保護(hù)基、羧基保護(hù)基或羥基保護(hù)基。
[0046] 術(shù)語"氨基保護(hù)基"表示意圖保護(hù)氨基的基團(tuán)，并且包括苯甲基、苯甲基氧基羰基 (芐氧羰基，CBZ)、Fmoc(9-芴基甲基氧基羰基）、對甲氧基苯甲基氧基羰基、對硝基苯甲基氧 基羰基、叔丁氧基羰基（B0C)和三氟乙?；?。這些基團(tuán)的其它實例見于T.W. Greene和 P.G.M.Wuts，"Protective Groups in Organic Synthesis"，第2版，John Wiley&Sons， Inc ., New York，NY，1991，第7章；E·Has lam，"Protective Groups in Organic Chemistry"，J.G.W.McOmie編，Plenum Press，New York，NY, 1973，第5章；以及T.W.Greene， "Protective Groups in Organic Synthesis"，John Wiley and Sons,New York,NY,1981 中。術(shù)語"保護(hù)的氨基"是指被氨基保護(hù)基取代的氨基。氨基保護(hù)基的特定實例是叔丁氧基 羰基(B0C)。
[0047] 術(shù)語"脫保護(hù)(deprotect ion/deprotect ing)"表示在選擇性反應(yīng)完成之后移除保 護(hù)基所采用的過程。脫保護(hù)試劑包括酸、堿或氫氣，特別是碳酸鉀或碳酸鈉、氫氧化鋰于醇 溶液中、鋅于甲醇中、乙酸、三氟乙酸、鈀催化劑或三溴化硼。特定脫保護(hù)試劑是鹽酸。
[0048] 術(shù)語"緩沖劑"表示使制劑的pH穩(wěn)定的賦形劑。合適的緩沖劑在本領(lǐng)域中是熟知 的，并且可見于文獻(xiàn)中。特定藥學(xué)上可接受的緩沖劑包括組氨酸緩沖劑、精氨酸緩沖劑、檸 檬酸鹽緩沖劑、丁二酸鹽緩沖劑、乙酸鹽緩沖劑和磷酸鹽緩沖劑。獨(dú)立于所用緩沖劑，pH可 用本領(lǐng)域中已知的酸或堿，例如鹽酸、乙酸、磷酸、硫酸和檸檬酸、氫氧化鈉和氫氧化鉀來調(diào) To
[0049] 術(shù)語"堿金屬"是指周期表的第1族的化學(xué)元素，即鋰(Li)、鈉(Na)、鉀⑷、銣(Rb)、 銫(Cs)和鈁(Fr)。堿金屬的特定實例是Li、Na和K，最特別是Na。
[0050] 術(shù)語"堿土金屬"是指周期表的第2族的化學(xué)元素，即鈹(Be)、鎂(Mg)、鈣（Ca)、鍶 (Sr)、鋇(Ba)和錯(Ra)。堿土金屬的特定實例是Mg和Ca。
[0051] 術(shù)語"過渡金屬"表示其原子具有不完全d亞殼層(d sub-she 11)的化學(xué)元素。
[0052]
[0053] Ac 乙酰基
[0054] AcOH 乙酸
[0055] AN 乙腈
[0056] BINAP 2,2，_雙(二苯基膦基)_1，Γ-聯(lián)萘
[0057] BINAPHANE 1，2_雙[4,5_ 二氫 _3H_聯(lián)萘并
[0058] (l，2-C:2'，l'-e)磷雜庚英并]苯
[0059] BIPHEMP (6,6'_二甲基聯(lián)苯 _2,2'_二基)雙(二苯基-膦）
[0060] B0C 叔丁氧基羰基
[00611 (Boc)20 二碳酸二叔丁酯
[0062] CBS 科里-巴克什-柴田（Corey-Bakshi-Shibata)催化劑
[0063] CBZ 苯甲基氧基羰基、芐氧羰基
[0064] C0D 1,5-環(huán)辛二烯
[0065] CPME 環(huán)戊基甲基醚
[0066] de 非對映體過量
[0067] DIPEA 二異丙基乙胺
[0068] DMAP 二甲基氨基吡啶
[0069] DMF N，N-二甲基甲酰胺
[0070] DPEN 1，2_ 二苯基乙二胺
[0071 ] ee 對映體過量
[0072] Et 乙基
[0073] EtOAc 乙酸乙酯
[0074] Fmoc 9_荷基甲基氧基羰基
[0075] (2-呋喃基)_MeOBIPHEP (6,6'_二甲氧基聯(lián)苯-2,2'_二基)雙[雙(2_呋喃基)-膦]
[0076] HAP 有害空氣污染物
[0077] HBTU 六氟磷酸1^，'-四甲基^)-(1!1-苯并三唑-1-基)脲
[0078] iBu 異丁基
[0079] ICM 國際協(xié)調(diào)會議
[0080] IPC 過程中控制
[0081 ] iPr 異丙基
[0082] iPr-DUPHOS 1，2_雙（2，5_二-異丙基磷雜環(huán)戊烷基)苯
[0083] Me 甲基
[0084] MeOBIPHEP (6,6'-二甲氧基聯(lián)苯_2,2'-二基）雙（二苯基-膦）
[0085] MES 2-(N_嗎啉代）乙烷磺酸
[0086] MTBE 甲基叔丁基醚
[0087] NAD 煙酰胺腺嘌呤二核苷酸
[0088] NADP 磷酸煙酰胺腺嘌呤二核苷酸
[0089] nBu 正丁基
[0090] NEM N-乙基嗎啉
[0091] nPr 正丙基
[0092] 〇Ac 乙酸根
[0093] PBS 磷酸二氫鉀緩沖液
[0094] pCym 對聚傘花素
[0095] PDE 允許每日暴露量
[0096] Ph 苯基
[0097] pTol 對甲苯基
[0098] pTol-Binap 2,2'_雙（二-對甲苯基膦基)_1，Γ-聯(lián)萘
[0099] S/C 底物與催化劑摩爾比
[0100] Τ3Ρ 丙基膦酸酐
[0101] tBu 叔丁基
[0102] t-BuOK 叔丁醇鉀
[0103] TEA 三乙胺
[0104] TFA 三氟乙酸根
[0105] THF 四氫呋喃
[0106] TMBTP 2,2'，5,5'_四甲基-4,4'-雙(二苯基膦基)-3,3'_聯(lián)噻吩
[0107] TPA 三（正丙基）胺
[0108] Xyl 3,5-二甲基苯基
[0109] 3,5-Xyl，4-Me0-Me0BIPHEP (6,6'_二甲氧基聯(lián)苯-2,2'-二基）雙[雙（3,5-二甲 基-4-甲氧基-苯基)膦]
[0110] 3,5-Xyl-BINAP 2,2'_雙[二(3,5_ 二甲苯基)膦]-1，1聯(lián)萘
[0111] 3,5-Xyl-MeOBIPHEP (6,6'_二甲氧基聯(lián)苯_2,2'_二基)雙[雙(3,5_二甲基 苯基)膦]
[0112] 本發(fā)明提供一種用于制備式（I)化合物或其鹽的方法，其包括式（II)化合物與式 (III)化合物的偶聯(lián)反應(yīng)，其中R1、!? 2和Μ如本文所述(以下流程1)。
[0113] 本發(fā)明的另一方面涉及用于制造式(II)化合物的方法，其包括使用金屬絡(luò)合物催 化劑(C)使式(IV)化合物不對稱氫化(以下流程1)。
[0114] 本發(fā)明的一個方面涉及用于制造式(III)化合物的方法，其包括式(V)化合物的由 氧化還原酶催化的不對稱還原（以下流程1)。
[0115] 本發(fā)明的另一方面涉及用于制造式(VI)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的方法，其 中將式(I)化合物脫保護(hù)（以下流程1)。
[0116] 流程 1
[0118] 在本發(fā)明的一個實施方案中，R1是選自苯甲基、苯甲基氧基羰基(芐氧羰基，CBZ)、 9-芴基甲基氧基羰基(Fmoc )、對甲氧基苯甲基氧基羰基、對硝基苯甲基氧基羰基、叔丁氧基 羰基(B0C)和三氟乙?；牧斜淼陌被Ｗo(hù)基。
[0119] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，R1是叔丁氧基羰基(B0C)。
[0120] 在本發(fā)明的一個實施方案中，R2是選自苯甲基、苯甲基氧基羰基(芐氧羰基，CBZ)、 9-芴基甲基氧基羰基(Fmoc )、對甲氧基苯甲基氧基羰基、對硝基苯甲基氧基羰基、叔丁氧基 羰基(B0C)和三氟乙?；牧斜淼陌被Ｗo(hù)基。
[0121] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，R2是叔丁氧基羰基(B0C)。
[0122] 在本發(fā)明的一個實施方案中，Μ是選自堿金屬離子、堿土金屬離子和過渡金屬離子 的列表的金屬離子。
[0123] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，Μ是金屬離子，特別是堿金屬離子、堿土金屬離子 或過渡金屬離子，前提是它不是Κ+。
[0124] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，Μ是堿金屬離子。
[0125] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，Μ是Li+、K+或Na+。
[0126] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，Μ不是K+。
[0127] 在本發(fā)明的最特定實施方案中，Μ是Na+。
[0128] W0 2008/006040公開式（Il-pa)氨基酸及其制造方法，其中R6和R9可具有各種替代 物，并且t是0至4。
[0130] 其中公開的用于制造式(Il-pa)化合物的方法涉及a)烷基胺與2-芳基丙烯酸酯的 非對映選擇性反應(yīng)以產(chǎn)生外消旋混合物或b)將烷氧基甲胺不對稱添加至含有適當(dāng)手性助 劑的2-苯基乙酸酯中。兩種方法均不涉及不對稱氫化，但涉及加成反應(yīng)。因此，兩種方法均 需要用于添加、裂解和分離助劑的額外步驟。
[0131] 根據(jù)以上方法a)的合成通過形成外消旋酯中間體而進(jìn)行，所述中間體被進(jìn)一步水 解成外消旋酸，與手性助劑(僅呈例如S對映異構(gòu)體形式)偶聯(lián)以產(chǎn)生非對映異構(gòu)體R-氨基 酸/S-助劑和S-氨基酸/S-助劑的50:50混合物。非對映異構(gòu)體必須通過色譜法分離。所需S-S中間體的產(chǎn)率僅為38%。另外，S-S中間體必須被水解以提供S-II酸(伴有另一手性組分手 性助劑的喪失）。這個程序是冗長且效率不良的，因為在一個步驟中，損失72%的物質(zhì)?？?之，胺和丙烯酸酯的非對映選擇性加成展現(xiàn)缺乏立體選擇性，并且因此必須通過例如色譜 法分離外消旋混合物的固有問題。因此，相較于立體選擇性順序，產(chǎn)率低至少100%。
[0132] 此外，向含有手性助劑的中間體（以上方法b))的不對稱加成需要用于添加、裂解 和分離助劑的額外步驟。使所靶向的酸的合成中的前體與手性助劑組合，并且使所得中間 體與烷氧基甲胺偶聯(lián)。產(chǎn)物如果不由1:1混合物組成，那么充其量由非對映異構(gòu)體R/S和S/S 的略微富集的混合物組成，其必須如上所提及加以進(jìn)一步處理來以充其量適度產(chǎn)率分離式 (I I-pa)化合物的(S)-異構(gòu)體。
[0133] 因此，對用于制備式（II)化合物的提供較好立體選擇性，從而使得避免隨后手性 色譜法；需要較少反應(yīng)步驟;提供較高產(chǎn)率；以及因此更高效、更綠色且成本更低的改進(jìn)方 法存在未滿足的需要。
[0134] 本發(fā)明的
【發(fā)明人】已發(fā)現(xiàn)一種用于制造式(II)化合物的新型方法，其包括使用金屬 絡(luò)合物催化劑(C)使式(IV)化合物不對稱氫化。
[0135] 用于制造式（II)化合物的這個新型方法的特征在于相較于本領(lǐng)域中已知的方法 具有許多相關(guān)益處：
[0136] ?在合成中引入高度立體選擇性反應(yīng)；
[0137] ?避免使用手性色譜法進(jìn)行隨后純化；
[0138] ?反應(yīng)步驟的數(shù)目減少；
[0139] ?總產(chǎn)率提高；
[0140] ?總反應(yīng)更高效、更綠色且成本更低。
[0141]已發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的特定金屬絡(luò)合物催化劑在以下意義上比其它已知催化劑高效得 多且活性和選擇性大得多：在類似反應(yīng)條件（即無添加劑)下，可采用多達(dá)ΙΟ'ΟΟΟ的底物與 催化劑摩爾比（S/C)，而其它已知催化劑需要在200-250的S/C下使用。因此，催化劑的使用 少40-50倍對效率、成本和綠色性具有實質(zhì)性影響。
[0142] 某些已知催化劑需要大量LiBF4作為添加劑(相對于氫化底物多達(dá)5.8mol%，相對 于催化劑多達(dá)100摩爾當(dāng)量）以增加催化劑活性。高量LiBF 4對于工業(yè)過程是不利的，因為存 在這個大量氟離子(多達(dá)氫化底物的23.2%)會在按比例擴(kuò)大時造成關(guān)于腐蝕鋼壓力反應(yīng) 器的問題。另一方面，即使在LiBF 4添加劑下，催化劑也達(dá)不到我們的新型催化劑的活性(例 如多達(dá) S/C 10'000)。
[0143] 例如像如本領(lǐng)域中已知的不對稱氫化的均質(zhì)催化反應(yīng)需要極其艱巨的處理程序， 其包括許多個循環(huán)的萃取和濃縮溶液。此外，如本領(lǐng)域中已知的不對稱氫化需要用大量(相 對于氫化底物多達(dá)6重量％;多達(dá)催化劑重量的193倍)清除劑(例如硫醇樹脂)移除金屬催 化劑。使用清除劑樹脂對釕污染物的此類移除到目前為止不是容易的，并且十分昂貴。此 外，釕內(nèi)含物僅被部分地降低（例如至約50ppm)，并且進(jìn)行至下一步驟中，因此增加副產(chǎn)物 形成的可能性。這增加材料和勞動力成本，并且展開關(guān)于潛在雜質(zhì)的討論。
[0144]總之，從催化劑和添加劑純化和分離氫化產(chǎn)物的已知方法的效率較低。
[0145] 相比之下，根據(jù)本發(fā)明的方法提供式(II)化合物的鹽，其從氫化混合物直接沉淀， 并且可易于濾除。對氫化產(chǎn)物的此類分離和純化提供高產(chǎn)率(>94%)，其中ee是100%，并且 釕含量低于5ppm的檢測限。如由本
【發(fā)明人】發(fā)現(xiàn)的對不對稱氫化反應(yīng)產(chǎn)物的處理因此比常規(guī) 方法實質(zhì)上更簡單、更便宜且更適用。
[0146] 本發(fā)明的一個方面涉及一種式(II)化合物
[0148] 其中R1和Μ如本文所定義。
[0149] 本發(fā)明的一個方面涉及一種式（II)化合物，其是(S)-3_(叔丁氧基羰基(異丙基） 氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸鈉。
[0150]本發(fā)明的一個方面涉及用于制造式(II)化合物的方法
[0152]其包括使用金屬絡(luò)合物催化劑(C)使式(IV)化合物
[0154] 不對稱氫化，其中R1和Μ如本文所定義。
[0155] 在本發(fā)明的一個實施方案中，金屬絡(luò)合物催化劑(C)是釕絡(luò)合物催化劑。
[0156] 在本發(fā)明的一個實施方案中，釕絡(luò)合物催化劑包含特征在于氧化數(shù)是II的釕。
[0157] 在本發(fā)明的一個實施方案中，釕絡(luò)合物催化劑包含手性膦配體(D)。
[0158] 在本發(fā)明的一個實施方案中，釕絡(luò)合物催化劑包含配體，特別是中性配體(L)和/ 或陰離子配體(Ζ)。
[0159]中性配體(L)的實例是烯烴(諸如乙烯或丙烯）、環(huán)辛烯、1，3_己二烯、降冰片二烯、 1，5_環(huán)辛二烯、苯、六甲基苯、1，3,5_三甲基苯和對聚傘花素，或也是溶劑，諸如四氫呋喃、 二甲基甲酰胺、乙腈、苯甲腈、丙酮、甲苯和甲醇。
[0160] 陰離子配體(Ζ)的實例是乙酸根(CH3C00-)、三氟乙酸根(CF3C00-)、η5-2，4-戊二烯 基、η 5-2,4-二甲基-戊二烯基和鹵素離子，諸如氟離子、氯離子、溴離子或碘離子。
[0161] 如果釕絡(luò)合物催化劑是帶電荷的，那么它還包含非配位陰離子(Υ)。非配位陰離子 (Υ)的實例是1?素1?子(諸如氟1?子、氯1?子、溴1?子或碘1?子）、BF4、Cl〇4、SbF6、PF6、Β(苯 基)4-、Β (3，5-二-三氟甲基-苯基)4-、CF3S03-和 C6H5S03-。
[0162] 釕絡(luò)合物催化劑可任選進(jìn)一步配位于路易斯酸(Lewis acid)，諸如A1C13。
[0163] 在本發(fā)明的一個實施方案中，釕絡(luò)合物催化劑選自式(Cl)、（ C2)或(C3)化合物：
[0164] Ru(Z)2D (Cl)
[0165] [Ru(Z)2-P(D)(L)m](Y) P (C2)
[0166] Ru(E)(E'）（D)(F) (C3)
[0167] 其中：
[0168] D是手性膦配體；
[0169] L是選自以下的中性配體:C2-7烯、環(huán)辛烯、1，3-己二烯、降冰片二烯、1，5-環(huán)辛二 烯、苯、六甲基苯、1，3,5_三甲基苯、對聚傘花素、四氫呋喃、二甲基甲酰胺、乙腈、苯甲腈、丙 酮、甲苯和甲醇；
[0170] Z是選自以下的陰離子配體:氫陰離子、氟離子、氯離子、溴離子、ri5-2,4-戊二烯 基、n 5_2，4-二甲基-戊二烯基或基團(tuán)Α-ΟΧΓ，前提是當(dāng)兩個Z連接于Ru原子時，它們可為相同 或不同；
[0171] 六是&―7烷基、7鹵烷基、芳基或鹵芳基；
[0172] Y是選自以下的非配位陰離子:氟離子、氯離子、溴離子、BF4_、Cl〇4_、SbF6'PFfT、B (苯基)4-、B (3，5-二-三氟甲基-苯基)4-、CF3S03-和 C6H5S03-;
[0173] F是任選手性二胺；
[0174] E與E'均是鹵素離子，或E是氫陰離子，并且E'是BHf;
[0175] m是1、2、3或 4:
[0176] p是 1 或2。
[0177] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，釕絡(luò)合物催化劑選自式(C1)或(C2)化合物，其中 2、0、1^、￥、111和。如本文所述。
[0178] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，釕絡(luò)合物催化劑選自式(C1)化合物，其中Z和D如 本文所述。
[0179] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，釕絡(luò)合物催化劑是Ru(Z)2D，其中Z和D如本文所 述。
[0180] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，釕絡(luò)合物催化劑選自式(C2)化合物，其中Z、D、L、 Y、m和p如本文所述。
[0181] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，釕絡(luò)合物催化劑選自式(C3)化合物，其中E、E'、D 和F如本文所述。
[0182] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，陰離子配體(Z)獨(dú)立地選自氯離子、溴離子、碘離 子、OAc 和 TFA。
[0183]在本發(fā)明的一特定實施方案中，陰離子配體(Z)是Α-ΟΧΓ。
[0184] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，A是-CF3。
[0185] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，陰離子配體(Z)是三氟乙酸根(TFA)。
[0186] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，中性配體(L)獨(dú)立地選自苯（C6H6)、對聚傘花素 (pCym)和乙腈(AN)。
[0187] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，中性配體(L)是苯(C6H6)。
[0188] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，非配位陰離子(Y)選自氯離子、溴離子、碘離子和 BF4-〇
[0189] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，非配位陰離子(Y)是BF4_。
[0190] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，m是1或4。
[0191] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，m是1。
[0192] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，m是4。
[0193] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，p是1。
[0194] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，p是2。
[0195] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，E與E'均是氯離子；
[0196] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，手性二胺F是（1S，2S)-1，2_二苯基乙二胺（S，S-DPEN)〇
[0197] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，釕絡(luò)合物催化劑配位于路易斯酸，特別是A1C13。
[0198] 在本發(fā)明的一個實施方案中，手性膦配體D選自式(D1)至(D12)化合物：
[0200]其中：
[0201 ] #1是&-7烷基、&-7烷氧基、苯甲基氧基、羥基或&-7烷基-c (0) ο-;
[0202] R12和R13各自獨(dú)立地是氫、7烷基、7烷氧基或二(&-7烷基)氨基;或
[0203] 連接于同一苯基的R11和R12或連接于同一苯基的R12和R13-起是-X-(CH 2)r_Y-，其 中X是-0-或-C(0)0-，Y是-0-、-N(低級烷基)-或-CF2-，并且r是1至6的整數(shù);或
[0204] 兩個 R11-起是-〇-(CH2)s-〇-或〇-CH(CH3)-(CH 2)s-CH(CH3)-〇-，其中 s是 1 至6 的整 數(shù);或
[0205] R11和R12或R12和R13連同它們所連接的碳原子一起形成萘基、四氫萘基或二苯并呋 喃環(huán)；
[0206] R14和R15各自獨(dú)立地是7烷基、C3-8環(huán)烷基、苯基、萘基或雜芳基，任選被1至7個獨(dú) 立地選自由以下組成的組的取代基取代:烷基、CP7烷氧基、二(烷基)氨基、嗎啉基、 苯基、三(Ci-7烷基）甲硅烷基、Ci-7烷氧基羰基、羥基羰基、羥基磺?；ⅲ–H 2)t-〇H和(CH2)t-NH2,其中t是1至6的整數(shù)；
[0207]妒6是&-7烷基；
[0208] R17是d-7烷基;并且
[0209] R18獨(dú)立地是芳基、雜芳基、C3-8環(huán)烷基或&―7烷基。
[0210]在本發(fā)明的一特定實施方案中，手性膦配體(D)選自式(D1)化合物，其中R11至R15 如本文所述。
[0211]在本發(fā)明的一特定實施方案中，手性膦配體(D)選自（R)-3,5-Xyl-BINAP、（R)_ 81財卩、（5)-2-呋喃基-]\^08113冊？、（5)-81麻？、（5)-81麻？私冊、（5)-81?冊]\〇\(5)- MeOBIPHEP、（S)-pTo1-BINAP)、（S)-TMBTP和（S，S)-i Pr-DUPHOS。
[0212] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，手性膦配體(D)選自（S)-BIPHEMP、（S)-BINAP和 (S)-MeOBIPHEP〇
[0213] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，手性膦配體(D)是(S) -BINAP。
[0214] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，手性膦配體(D)是（S)_2,2'-雙(二苯基膦基)_1， 1 '_聯(lián)蔡。
[0215] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，手性膦配體(D)是
[0217] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，釕絡(luò)合物催化劑選自以下各項的組：
[0218] Ru(TFA)2((R)-3,5-Xyl_BINAP)、
[0219] Ru(0AcM(S)-2-呋喃基-MeOBIPHEP)、
[0220] Ru(0Ac)2((S)_BINAP)、
[0221] [Ru(OAc)2((S)-BINAP)]A1C13、
[0222] Ru(TFA)2((S)_BINAP)、
[0223] Ru(TFA)2((S)_BINAPHANE)、
[0224] Ru(TFA)2((S)_BIPHEMP)、
[0225] Ru(0Ac)2((S)_Me0BIPHEP)、
[0226] Ru(TFA)2((S)_TMBTP)、
[0227] Ru(TFA)2 ((S，S)-i Pr-DUPHOS)、
[0228] [Ru((R)-BINAP)(pCym)(AN)](BF4)2、
[0229] [RuBr( (S)-BINAP) (C6H6) ]Br、
[0230] [ RuC 1 ((S) -BI NAP) (C6H6) ] BF4、
[0231] [RuC1((S)-BINAP)(C6H6)]C1、
[0232] [RuI((S)-BINAP)(C6H6)]I、
[0233] [Ru( (S)-BINAP) (AN) )4] (BF4)2 和
[0234] RuCl2((S)-pTol-BINAP)(S，S-DPEN)。
[0235] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，釕絡(luò)合物催化劑選自以下各項的組：
[0236] Ru(TFA)2((R)_3，5-Xyl-BINAP)、
[0237] Ru(0AcM(S)-2-呋喃基-MeOBIPHEP)、
[0238] Ru(0Ac)2((S)_BINAP)、
[0239] [Ru(OAc)2((S)-BINAP)]A1C13、
[0240] Ru(TFA)2((S)_BINAP)、
[0241] Ru(TFA)2((S)_BINAPHANE)、
[0242] Ru(TFA)2((S)_BIPHEMP)、
[0243] Ru(0Ac)2((S)_Me0BIPHEP)、
[0244] Ru(TFA)2((S)_TMBTP)、
[0245] Ru(TFA)2 ((S，S)-i Pr-DUPHOS)、
[0246] [Ru((R)-BINAP)(pCym)(AN)](BF4)2、
[0247] [RuBr( (S)-BINAP) (C6H6) ]Br、
[0248] [RuC1((S)-BINAP)(C6H6)]BF4、
[0249] [RuI((S)-BINAP)(C6H6)]I、
[0250] [Ru( (S)-BINAP) (AN) )4] (BF4)2 和
[0251] RuCl2((S)-pTol-BINAP)(S，S-DPEN)。
[0252] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，釕絡(luò)合物催化劑是選自以下各項的組的式(Cl)化 合物：
[0253] Ru(TFA)2((R)_3，5-Xyl-BINAP)、
[0254] Ru(0Ac)2((S)-2_ 呋喃基-MeOBIPHEP)、
[0255] Ru(0Ac)2((S)_BINAP)、
[0256] [Ru(OAc)2((S)-BINAP)]A1C13、
[0257] Ru(TFA)2((S)_BINAP)、
[0258] Ru(TFA)2((S)_BINAPHANE)、
[0259] Ru(TFA)2((S)_BIPHEMP)、
[0260] Ru(0Ac)2((S)_Me0BIPHEP)、
[0261] Ru(TFA)2((S)_TMBTP)和
[0262] Ru(TFA)2 ((S，S)-i Pr-DUPHOS)。
[0263] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，釕絡(luò)合物催化劑是選自以下各項的組的式(C2)化 合物：
[0264] [Ru((R)-BINAP)(pCym)(AN)](BF4)2、
[0265] [RuBr( (S)-BINAP) (C6H6) ]Br、
[0266] [RuC1((S)-BINAP)(C6H6)]BF4、
[0267] [RuC1((S)-BINAP)(C6H6)]C1、
[0268] [RuI((S)-BINAP)(C6H6)]I 和
[0269] [Ru( (S)-BINAP) (AN)4] (BF4)2。
[0270] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，釕絡(luò)合物催化劑是式(C3)化合物，特別是RuC12 ((S)-pTol-BINAP)(S,S-DPEN))〇
[0271] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，釕絡(luò)合物催化劑是Ru(TFA)2((S)_BINAP)。
[0272] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，釕絡(luò)合物催化劑是[RuCl (S-BINAP) (C6H6) ] Cl。 [0273 ]在本發(fā)明的一特定實施方案中，釕絡(luò)合物催化劑不是[RuCl (S-BINAP) (C6H6) ] Cl。
[0274]在本發(fā)明的一特定實施方案中，在選自醇、烴、氯化烴、氟化和多氟化脂族或芳族 烴、超臨界或液體二氧化碳、THF、水或其混合物的溶劑中進(jìn)行式(IV)化合物的不對稱氫化。
[0275] 用于不對稱氫化的特定溶劑是醇、氯化烴和THF。
[0276] 用于不對稱氫化的特定溶劑選自|^0!14切!1、卜?抑!14切!1/環(huán)戊基甲基醚4切!1/ 〇1 2(：12』切!1/^切4(3』切!1/1'冊4切!1/!120、〇12(：12和1'冊的列表。
[0277] 用于不對稱氫化的最特定溶劑是乙醇(EtOH)。
[0278] 溶劑可單獨(dú)或以以上提及的溶劑的混合物形式使用。
[0279] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，在1至50重量％，特別是5重量％、10重量％、20重 量％或30重量％的式(IV)化合物濃度下進(jìn)行式(IV)化合物的不對稱氫化。
[0280]在本發(fā)明的一特定實施方案中，在10至25重量％的式（IV)化合物濃度下進(jìn)行式 (IV)化合物的不對稱氫化。
[0281] 已驚人地發(fā)現(xiàn)在特殊情況下，添加某些添加劑會改進(jìn)式（IV)化合物的不對稱氫 化。據(jù)假設(shè)釕催化劑的活性以及穩(wěn)定性被實質(zhì)上改進(jìn)，并且因此所需催化劑的量得以降低。 采用較低量的催化劑導(dǎo)致處理簡化以及成本降低。
[0282] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，式(IV)化合物的不對稱氫化還包括一種或多種選 白 LiBF4、LiPF6、Li〇3SCF3、NaCl、NaBr、NaI、KCl、KBr、KI、LiCl、LiBr、LiI、HBF4、HCl、HBr、 H2S〇4和CH3S03H的列表的添加劑。
[0283] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，式(IV)化合物的不對稱氫化不包括LiBF4、LiPF6或 Li03SCF3作為添加劑。鑒于所述含氟離子添加劑的高度腐蝕性特性，它們難以處理，并且因 此不是優(yōu)選的。
[0284] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，式(IV)化合物的不對稱氫化還包括一種或多種選 自恥(：1、恥81、1((：1、仙1、!1(：1和邢1的列表的添加劑。
[0285] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，式(IV)化合物的不對稱氫化還包括一種或多種選 自 LiBF4、HBF4、HCl、H2S〇4 和 CH3S03H 的列表的添加劑。
[0286] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，式(IV)化合物的不對稱氫化還包括一種或多種選 自1^8卩4、似(：1、恥8廣1^(：1、1^8廣1^1、冊卩4、11(：1、冊1、!123〇4和0133〇311的列表的添加劑。
[0287] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，以氫氣作為氫來源進(jìn)行式(IV)化合物的不對稱氫 化。
[0288] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，在1至150巴，特別是10至30巴，最特別是17至21巴 的氫氣壓力下進(jìn)行式(IV)化合物的不對稱氫化。
[0289] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，在10至120°C，特別是20至90°C的溫度下進(jìn)行式 (IV)化合物的不對稱氫化。
[0290] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，在5至30小時，特別是6至25小時，更特別是6至23 小時的時期期間進(jìn)行式(IV)化合物的不對稱氫化。
[0291] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，在5至ΙΟΟ'ΟΟΟ,特別是100至15'000,最特別是100 至10 ' 000的底物/催化劑比率(S/C)下進(jìn)行式(IV)化合物的不對稱氫化。
[0292] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，分批進(jìn)行式(IV)化合物的不對稱氫化。
[0293] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，以連續(xù)方式進(jìn)行式(IV)化合物的不對稱氫化。
[0294] 本發(fā)明的一個方面涉及用于制造式(II)化合物的方法
[0296]其包括使用金屬絡(luò)合物催化劑(C)使式(IV)化合物
[0298] 不對稱氫化，隨后通過向氫化反應(yīng)混合物中添加式Ch烷基-0M金屬醇鹽的醇溶液 來形成鹽，其中R 1和Μ如本文所定義。
[0299] 本發(fā)明的一個方面涉及用于制造式(II)化合物的方法，其包括使用金屬絡(luò)合物催 化劑(C)使式（IV)化合物不對稱氫化，隨后通過在不先前分離或純化酸中間體下向氫化反 應(yīng)混合物中添加式Ci-7烷基-0Μ金屬醇鹽的醇溶液來形成鹽，其中R 1和Μ如本文所定義。
[0300] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，鹽形成步驟中采用的金屬醇鹽是Me0M、Et0M、 iPrOM、nPrOM、nBuOM、iBuOM 或 tBuOM，最特別是 EtOM。
[0301] 在本發(fā)明的一特定實施方案中，在鹽形成步驟中用作溶劑的醇是Cp7烷基-OH，更 特別是 MeOH、EtOH、iPrOH、nPrOH、nBuOH、iBuOH 或 tBuOH，最特別是 EtOH。
[0302] 本發(fā)明的一個方面涉及用于制造式(II)化合物的方法，其包括使用金屬絡(luò)合物催 化劑(C)使式（IV)化合物不對稱氫化，隨后通過向氫化反應(yīng)混合物中添加乙醇鈉的乙醇溶 液來形成鹽。
[0303] 可根據(jù)為本領(lǐng)域技術(shù)人員所知的方法制備式（IV)化合物。一種制備式（IV)化合物 的特定一般性方法描繪于流程2中。對于個別反應(yīng)步驟的更詳細(xì)描述，參見以下實施例章 To
[0304] 流程 2
[0306]使式（IVa)化合物(其中R3是任選取代的7烷基，特別是乙基)與化合物HC02R 4 (其 中R4是任選取代的C1-7烷基，特別是乙基）在堿性條件下縮合以形成式（IVb)化合物。式 (IVb)化合物與胺HN(異丙基)R5(其中R5是氫、Ci-7烷基或氨基保護(hù)基)進(jìn)一步縮合形成式 (IVc)化合物。當(dāng)在式(IVc)化合物中R5是氫時，可對胺進(jìn)行額外保護(hù)以形成保護(hù)的式(IVc) 化合物(例如其中R 5是氨基保護(hù)基，諸如Boc)。水解化合物(IVc)的酯提供式(IV)化合物。
[0307] 本發(fā)明的釕絡(luò)合物催化劑在原則上可以本身已知的方式制備。它們可例如根據(jù) B. Heiser^, Tetrahedron: Asymmetry 1991,2,51;或 N.Feiken 等，Organometallics 1997, 16，537;或J·-P.Genet，Acc·Chem.Res·2003，36，908;或K.Mashima等，J·Org·Chem.1994， 53,3064;Angew.Chem.Int.Ed.1998,37,1703-1707;或M.P.Fleming等，US 6,545，165B1和 其中引用的參考文獻(xiàn)；以及具體來說對于基于二茂鐵的Ru絡(luò)合物的O.Briel等，Catalysis of Organic Reactions，CRC Press，Boca Raton,2009直接分離或使用（原位制備），所有這 些文件的公開內(nèi)容都出于所有目的以引用的方式整體并入本文。
[0308] [Ru(TFA)2( (S)_BINAP)]的合成公開于B · Heiser等，Tetrahedron : Asymmetry 1991,2,51中。
[0309] 釕絡(luò)合物催化劑可原位制備，即恰好在使用之前并且在不分離下制備。于其中制 備此類催化劑的溶液可已含有用于對映選擇性氫化的底物，或可恰好在引發(fā)氫化反應(yīng)之前 使溶液與底物混合。
[0310] W0 2008/006040公開式(71)的5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán)戊并[d]嘧啶-7-醇及其制 造方法，其中R5可具有各種替代物。
[0312]特定來說，W0 2008/006040公開使用手性催化劑(在氫氣存在下），科里-巴克什-柴田（CBS)催化劑、硼氫化物還原劑(在手性配體存在下）或非手性還原劑(例如H 2、Pd/C)， 使5-甲基-5，6-二氫環(huán)戊并[d]嘧啶-7-酮不對稱還原成(R)或(S)-5-甲基-6，7-二氫-5H-環(huán) 戊并[d]嘧啶-7-醇。
[0313]本領(lǐng)域中已知用以產(chǎn)生式（III)化合物的方法展現(xiàn)固有缺點(diǎn)，即它們需要劇烈反 應(yīng)條件（例如高壓），使用重金屬和手性助劑，并且獲得的非對映體選擇性僅是有限的（即 88%de)，因此需要額外純化步驟。
[0314]本發(fā)明的
【發(fā)明人】已發(fā)現(xiàn)用于制造其中R2如本文所述的式（III)化合物的新型酶促 方法。
[0316] 根據(jù)本發(fā)明的用于制造式（III)化合物的這些新型方法的特征在于相較于如本領(lǐng) 域中已知的方法具有許多相關(guān)益處。酶促還原的優(yōu)勢是它的催化性質(zhì)，避免潛在需要隨后 拆分形成的非對映異構(gòu)體的極高非對映體選擇性和溫和反應(yīng)條件。此外，不需要重金屬和 手性助劑。
[0317] 本發(fā)明的酶促還原使技術(shù)要求簡化，降低成分的數(shù)目和數(shù)量，并且使得空間-時間 產(chǎn)率能夠較高。本發(fā)明的優(yōu)勢被例示為技術(shù)相關(guān)準(zhǔn)則改進(jìn)，諸如底物濃度增加(多達(dá)25%)， 產(chǎn)物濃度增加（多達(dá)25%)，輔因子裝載量降低（降至式(V)化合物的1/3000)以及用2-丙醇 作為最終還原劑的輔因子再生系統(tǒng)更簡單。用2-丙醇作為最終還原劑的輔因子再生系統(tǒng)避 免第二酶，降低粘度，避免連續(xù)中和作為氧化共底物的葡萄糖酸，并且允許連續(xù)移除形成的 丙酮。
[0318] 本發(fā)明的一個方面涉及用于制造式(III)化合物的方法
[0320]其包括由氧化還原酶催化的使式(V)化合物
[0322] 不對稱還原，其中R2如本文所定義。
[0323] 在本發(fā)明的一個方面，催化式(V)化合物不對稱還原成式(III)化合物的氧化還原 酶是酮還原酶。
[0324] 在本發(fā)明的一個方面，氧化還原酶以至少95 %非對映體過量(de)的非對映體選擇 性，特別是以至少98 % de的非對映體選擇性，更特別是以至少99 % de的非對映體選擇性催 化式(V)化合物不對稱還原成式(III)化合物。
[0325] 在本發(fā)明的一個方面，式(V)化合物不對稱還原成式(III)化合物由氧化還原酶在 輔因子存在下催化。
[0326] 在本發(fā)明的一個方面，在式(V)化合物不對稱還原成式(III)化合物中被氧化的輔 因子是NADH或NADPH。
[0327] 在本發(fā)明的一個方面，在式(V)化合物不對稱還原成式(III)化合物中被氧化的輔 因子是應(yīng)用酶偶聯(lián)輔因子再生(例如基于作為最終還原劑的葡萄糖和葡萄糖脫氫酶)或底 物偶聯(lián)再生(例如使用仲醇作為共底物)加以原位再生。
[0328] 在本發(fā)明的一個方面，在式(V)化合物不對稱還原成式(III)化合物中被氧化的輔 因子是通過使用葡萄糖和葡萄糖脫氫酶作為共底物進(jìn)行酶偶聯(lián)輔因子再生加以原位再生。 [0329 ]在本發(fā)明的一個方面，在式(V)化合物不對稱還原成式(III)化合物中被氧化的輔 因子是通過使用仲醇作為共底物進(jìn)行底物偶聯(lián)再生加以原位再生。
[0330] 在本發(fā)明的一個方面，作為共底物用于底物偶聯(lián)再生的仲醇選自2-丙醇、2-丁醇、 丁-1，4-二醇、2-戊醇、戊-1，5-二醇、4-甲基-2-戊醇、2-己醇、己-1，5-二醇、2-庚醇或2-辛 醇，特別是丙醇。
[0331] 特別適用的是2-丙醇用于在也催化靶標(biāo)反應(yīng)的相同酶下再生輔因子以及連續(xù)移 除形成的丙酮。
[0332] 在本發(fā)明的一個方面，催化式(V)化合物不對稱還原成式(III)化合物的氧化還原 酶是非對映體選擇性NADPH依賴性氧化還原酶。
[0333] 在本發(fā)明的一個方面，催化式(V)化合物不對稱還原成式(III)化合物的氧化還原 酶是選自以下各項的列表的非對映體選擇性NADPH依賴性氧化還原酶：
[0334] KRED-NADPH-111 (來自Codexis Inc.，Redwood City，CA，USA)、
[0335] KRED-NADPH-112(來自Codexis Inc.，Redwood City,CA，USA)、
[0336] KRED-NADPH-113(來自Codexis Inc.，Redwood City,CA，USA)、
[0337] KRED-NADPH-114(來自Codexis Inc.，Redwood City,CA，USA)、
[0338] KRED-NADPH-115(來自Codexis Inc.，Redwood City，CA，USA)、
[0339] KRED-NADPH-121(來自Codexis Inc.，Redwood City,CA，USA)、
[0340] KRED-NADPH-123(來自Codexis Inc.，Redwood City,CA，USA)、
[0341] KRED-NADPH-145(來自Codexis Inc.，Redwood City,CA，USA)、
[0342] KRED-NADPH-155(來自Codexis Inc.，Redwood City,CA，USA)、
[0343] A231(來自Almac Group Ltd.Craigavon，United Kingdom)和
[0344] KRED_NADPH_136(來自Enzysource，Hangzhou,China) 〇
[0345] 催化式(V)化合物不對稱還原成式（III)化合物的其它合適的氧化還原酶是選自 以下各項的列表的非對映體選擇性NADPH依賴性氧化還原酶：
[0346] KRED-X1，一種來自克菲爾乳酸桿菌(Lactobacillus kefir)的工程改造的酮還原 酶，如PCT國際公布號W02010/025238A2中所公開并標(biāo)識為SEQ. ID. N0.34，和
[0347] KRED-X2，一種來自赫色擲抱酵母（Sporobolomyces salmonicolor)的工程改造的 酮還原酶，如PCT國際公布號W02009/029554A2中所公開并標(biāo)識為SEQ. ID. NO. 138。
[0348] 催化式(V)化合物不對稱還原成式（III)化合物的其它合適的氧化還原酶是KRED-XI的可商購獲得的變體(來自Codexis Inc.，Redwood City,CA,USA)。
[0349] 特別適用的是工程改造的酮還原酶"KRED-X1-P1B06"，即一種來自Codexis KRED 特種板產(chǎn)品 "KRED-X1-SPECIALTY-PLT" 的KRED變體"P1B06"。
[0350]催化式(V)化合物不對稱還原成式（III)化合物的其它合適的氧化還原酶是KRED-Xl 的可商購獲得的變體 (來自Codexis Inc. ，Redwood City, CA, USA)。特別適用的是來自 Codexis KRED特種板產(chǎn)品"KRED-X1.1-B06-SPECIALTY-PLT"的以下工程改造的酮還原酶： [0351 ] "KRED-X1 · 1-P1F01"（KRED變體P1F01)、
[0352] "KRED-X1 · 1-P1H10"（KRED變體P1H10)、
[0353] "KRED-X1 · 1-P1G11"（KRED變體P1G11)、
[0354] "KRED-X1 · 1-P1C04"（KRED變體P1C04)、
[0355] "KRED-X1 · 1-P1C11"（KRED變體P1C11)和
[0356] "KRED-X1 · 1-P1C08"（KRED變體P1C08)。
[0357] 特別適用的是工程改造的酮還原酶"KRED-X1.1-P1C04"和"KRED-X1.1-P1F01"。最 特定的酮還原酶是工程改造的酮還原酶"KRED-X1.1-P1F01"。
[0358] PCT國際公布號W02010/025085A2和W02009/029554A2據(jù)此出于所有目的以引用的 方式整體并入本文，特別是其中關(guān)于制備和使用氧化還原酶的方面。
[0359] 所有以上提及的酶都也可能使用輔因子NADH。
[0360] 在本發(fā)明的一個特定方面，催化式(V)化合物不對稱還原成式(III)化合物的氧化 還原酶是選自以下各項的列表的非對映體選擇性NAD PH依賴性氧化還原酶:1〇^0-祖0卩!1- 111、KRED-NADPH-112、KRED-NADPH-113、KRED-NADPH-114、KRED-NADPH-115、KRED-NADPH-121、KRED-NADPH-123、KRED-NADPH-145、KRED-NA DPH-155、A231、KRED-NADPH-136、KRED-XI、KRED-X2、KRE D-X1-P1B06、KRED-X1.1-P1F01、KRED-X1.1-P1H10、KRED-X1.1-P1G11、 KRED-X1·1-P1C04、KRED-X1·1-P1C11和KRED-X1·1-P1C08。
[0361] 在本發(fā)明的一個特定方面，催化式(V)化合物不對稱還原成式(III)化合物的氧化 還原酶是選自以下各項的列表的非對映體選擇性NAD PH依賴性氧化還原酶：KRED-X1、 KRED-X2、KRED-X1-P1B06、KRED-X1.1-P1F01、KRED-X1.1-P1H10、KRED-X1.1-P1G11、KRED-XI.1-P1C04、KRED-X1.1-P1C11和KRED-X1.1-P1C08。
[0362] 在本發(fā)明的一個特定方面，催化式(V)化合物不對稱還原成式(III)化合物的氧化 還原酶是選自以下各項的列表的非對映體選擇性NADPH依賴性氧化還原酶:10^011、1(1?〇-X2、KRED-X1-P1B06、KRED-X1·1-P1C04和KRED-X1·1-P1F01。
[0363] 在本發(fā)明的一個特定方面，催化式(V)化合物不對稱還原成式(III)化合物的氧化 還原酶是選自以下各項的列表的非對映體選擇性NADPH依賴性氧化還原酶:10^011、1(1?〇-X1-P1B06、KRED-X1·1-P1C04和KRED-X1·1-P1F01。
[0364] 在本發(fā)明的一個特定方面，催化式(V)化合物不對稱還原成式(III)化合物的氧化 還原酶是選自以下各項的列表的非對映體選擇性N A D P Η依賴性氧化還原酶：K R E D - X1和 KRED-X2。
[0365] 在本發(fā)明的一個特定方面，催化式(V)化合物不對稱還原成式(III)化合物的氧化 還原酶是選自以下各項的列表的非對映體選擇性N A D Ρ Η依賴性氧化還原酶：K R E D - X1和 KRED-X1-P1B06。
[0366] 在本發(fā)明的一個特定方面，催化式(V)化合物不對稱還原成式(III)化合物的氧化 還原酶是選自以下各項的列表的非對映體選擇性NADPH依賴性氧化還原酶:KRED-X1.1-P1C04和KRED-X1·1-P1F01。
[0367] 在本發(fā)明的一個特定方面，催化式(V)化合物不對稱還原成式(III)化合物的氧化 還原酶是非對映體選擇性NADPH依賴性氧化還原酶KRED-X1.1-P1F01。
[0368] 在本發(fā)明的一個方面，在水性介質(zhì)中在一種或多種有機(jī)共溶劑存在下進(jìn)行式(V) 化合物不對稱還原成式(ΠI)化合物。
[0369] 在本發(fā)明的一個方面，在水性介質(zhì)中在一種或多種有機(jī)共溶劑存在下進(jìn)行式(V) 化合物不對稱還原成式（III)化合物，其中所述有機(jī)共溶劑以1至50V%，特別是4至40V%的 總濃度存在。
[0370] 在本發(fā)明的一個方面，式(V)化合物不對稱還原成式(III)化合物中存在的共溶劑 選自以下各項的列表:甘油、2-丙醇、乙醚、叔丁基甲基醚、二異丙基醚、二丁醚、甲基四氫呋 喃、乙酸乙酯、乙酸丁酯、甲苯、庚烷、己烷、環(huán)己烯及其混合物;特別是2-丙醇。
[0371] 2-丙醇特別用作共溶劑，因為它可充當(dāng)用于底物偶聯(lián)輔因子再生的最終還原劑。 [0372]在本發(fā)明的一個方面，在1°C與50°C之間，特別是20°C與45°C之間的反應(yīng)溫度下進(jìn) 行式(V)化合物不對稱還原成式(III)化合物。
[0373] 上限范圍內(nèi)的溫度增加反應(yīng)速率，并且促進(jìn)丙酮移除。
[0374] 在本發(fā)明的一個方面，在5.5與8.5之間的pH下進(jìn)行式(V)化合物不對稱還原成式 (III)化合物。
[0375] 在本發(fā)明的一個方面，在緩沖劑水溶液中進(jìn)行式(V)化合物不對稱還原成式(III) 化合物。合適的緩沖劑為本領(lǐng)域中的專家所知。特定緩沖劑是2-(N_嗎啉代）乙烷磺酸(MES) 或磷酸二氫鉀(PBS)。
[0376] 最優(yōu)pH范圍以及因此任何合適的緩沖劑取決于采用的特定氧化還原酶。
[0377] 本發(fā)明的一個方面涉及式(V)化合物不對稱還原成式（III)化合物，其中所述式 (V)化合物初始在1至25重量％，特別是10至20重量％的濃度下存在。
[0378] 本發(fā)明的一個方面涉及式(V)化合物不對稱還原成式(III)化合物，其中反應(yīng)濃度 (反應(yīng)混合物中式(V)酮和式（III)手性醇的總濃度)在1與25重量％之間，特別是在10與20 重量％之間。
[0379] 本發(fā)明的一個方面涉及用于制造式（III)化合物的方法，其包括由氧化還原酶催 化的式(V)化合物的不對稱還原，隨后通過萃取或通過過濾進(jìn)行處理。
[0380] 本發(fā)明的一個方面涉及由氧化還原酶催化的使式（V)化合物不對稱還原成式 (III)化合物，其中產(chǎn)物常規(guī)通過萃取或通過過濾加以處理。
[0381] 粗產(chǎn)物純度可能通過結(jié)晶加以進(jìn)一步增加，或照原樣在隨后反應(yīng)順序中用于制造 式(I)化合物。
[0382] 本發(fā)明的一個方面涉及用于制造式（III)化合物的方法，其包括由氧化還原酶催 化的式(V)化合物的不對稱還原，隨后通過萃取或通過過濾以及進(jìn)一步通過結(jié)晶進(jìn)行處理。
[0383] 本發(fā)明的一個方面涉及式(V)化合物不對稱還原成式(III)化合物，其中產(chǎn)物常規(guī) 通過萃取或通過過濾以及進(jìn)一步通過結(jié)晶加以處理。
[0384] 本發(fā)明的一個方面涉及用于制造式(IVc)化合物：
[0386]或其鹽的方法，其中R1和R3在本文中定義，所述方法包括使式（IVd)化合物：
[0388] 或其鹽與妒-X在足以產(chǎn)生式IVc化合物或其鹽的條件下接觸，其中X是離去基團(tuán)。
[0389] 在一個實施方案中，方法包括制造(E)-3_(叔丁氧基幾基（異丙基)_氨基)-2-(4-氯苯基)丙烯酸乙酯或其鹽，其中R1是B0C保護(hù)基，R 3是乙基，并且其中妒-X是(B0C)20。
[0390] 在一個特定實施方案中，方法包括使式IVd化合物或其鹽與小于約8當(dāng)量，特別是 小于約4當(dāng)量，更特別是約3當(dāng)量的（B0C) 20在包含DMF的極性溶劑混合物中，在以大于約 50%，特別是約75%或大于75%產(chǎn)率的產(chǎn)率產(chǎn)生式IVc化合物或其鹽的條件下接觸。
[0391 ]在一個更特定實施方案中，條件包括在包含DMF的極性溶劑混合物中，使式IVd化 合物或其鹽與約3當(dāng)量(B0C)20和包含各自約2當(dāng)量的三丁胺和二甲基氨基吡啶(DMAP)的堿 性混合物接觸。在一實施方案中，方法還包括在添加 (B0C)20期間在真空下從反應(yīng)混合物移 除一部分液體。
[0392 ]可根據(jù)為本領(lǐng)域技術(shù)人員所知的方法制備式(V)化合物。一種制備式(V)化合物的 特定一般性方法描繪于流程3中。對于個別反應(yīng)步驟的更詳細(xì)描述，參見以下實施例章節(jié)。
[0393]流程 3
[0395] 式(Va)化合物與碘化劑(例如碘化物鹽，諸如Nal，以及任選與酸)反應(yīng)產(chǎn)生式(Vb) 二碘嘧啶，其可進(jìn)一步與單保護(hù)的哌嗪反應(yīng)以提供式(Vc)化合物。用金屬化劑，諸如格氏試 劑(Grignard reagent)(例如Ci-7烷基鹵化鎂，諸如iPrMgCl)使式(Vc)化合物金屬化以形成 式(Vd)化合物，其進(jìn)一步環(huán)化以形成式(V)環(huán)戊酮，其中
[0396] R2如本文所述，
[0397] G 是 Li 或 Mg，
[0398] R6 是 Cl 或 0H，
[0399] R7是-CN、-C00Ra或-C0NRaRb，其中R a和妒獨(dú)立地選自氫、-OH、&-7烷氧基、Ci-7烷基、 C2-7烯基、C2-7炔基、C3-8環(huán)烷基、苯基或3至12元雜環(huán)烷基的列表;或1^和妒連同它們所連接的 氮原子一起形成3-7元雜環(huán)烷基。
[0400] W0 2008/006040公開制造式(73)化合物的方法，其中式(71)化合物在使用酸脫保 護(hù)之后用適當(dāng)氨基酸?；渲蠷和R 5可具有各種替代物。
[0402]如先前技術(shù)中所述的?；磻?yīng)展現(xiàn)以下缺點(diǎn)：
[0403] ?采用HBTU作為偶聯(lián)試劑的方法不適于大規(guī)模商業(yè)制造過程。HBTU產(chǎn)生重度工業(yè) 衛(wèi)生問題，因為過敏和職業(yè)性過敏性接觸性皮炎的病例描述于文獻(xiàn)中（Hannu T.等，Occup Med,2006,56(6) ,430-433以及M.A.Aleer等，Contact Dermatitis,2010 62,2 123)。
[0404] ?采用二氯甲烷作為溶劑的方法不適于大規(guī)模商業(yè)制造過程，因為二氯甲烷在美 國被分類為有害空氣污染物(HAP)。此外，歸因于二氯甲烷的固有毒性，它被國際協(xié)調(diào)會議 (ICH)評定為伴有嚴(yán)格的允許每日暴露量(PDE)的2類溶劑。
[0405] ?歸因于色譜法的極高溶劑消耗和低通量，使用色譜法純化產(chǎn)物不是可為大規(guī)模 小分子制造所接受的純化方法。
[0406] ?在商業(yè)大規(guī)模反應(yīng)過程在混合物中涉及超過一種溶劑的情況下，溶劑需要足以 達(dá)成彼此分開的不同沸點(diǎn)以允許使用蒸餾進(jìn)行彼此分離和再循環(huán)。因為混合物不可分離而 不可再循環(huán)的在同一步驟中涉及四種溶劑（例如在環(huán)戊基甲基醚(CPME)的情況下）的方法 不適于大規(guī)模制造。
[0407] ?對產(chǎn)物的處理需要眾多（例如六次)水性萃取，它們?nèi)及橛袧饪s的無機(jī)鹽，從 而產(chǎn)生大量污染廢水。此類工藝條件導(dǎo)致生產(chǎn)過程在環(huán)境上不利。
[0408]本發(fā)明的
【發(fā)明人】已發(fā)現(xiàn)一種用于制造式（I)化合物的新型改進(jìn)方法，其包括使作 為鹽，特別是鈉鹽的式（II)化合物偶聯(lián)于式（III)化合物。已發(fā)現(xiàn)相較于使用游離氨基酸， 使用呈鹽，特別是鈉鹽形式的式(II)化合物實質(zhì)上促進(jìn)和簡化此類方法。
[0409]根據(jù)本發(fā)明的用于制造式（I)化合物的方法的特征在于相較于本領(lǐng)域中所述的方 法具有許多相關(guān)優(yōu)勢，尤其例如：
[0410] ?對式（I)化合物的處理被可觀改進(jìn)。采用僅三種可良好分離的溶劑（異丙醇、甲 苯和庚烷）。
[0411] ?丙基膦酸酐(T3P)是一種不具有過敏原性和致敏性質(zhì)的無毒偶聯(lián)劑。
[0412] ?反應(yīng)的副產(chǎn)物是水溶性的，并且因此可易于通過例如三倍水性萃取而移除。
[0413] 本發(fā)明的一個方面提供一種用于制備式(I)化合物
[0415]或其鹽的方法，其包括式(II)化合物
[0417]與式(III)化合物
[0419]的偶聯(lián)反應(yīng)，其中R\R2和Μ如本文所定義。
[0420] 本發(fā)明的一個方面提供一種用于制備式（I)化合物或其鹽的方法，其包括式（II) 化合物與式(I II)化合物的偶聯(lián)反應(yīng)，其中R1、R2和Μ如本文所定義，包括以下反應(yīng)步驟：
[0421] a)在溶劑中在酸性條件下將所述式(III)化合物脫保護(hù)；
[0422] b)使用堿調(diào)節(jié)至堿性pH;
[0423] c)添加在溶劑中包含所述式(II)化合物的溶液；
[0424] d)添加在溶劑中包含偶聯(lián)劑的溶液。
[0425] 在本發(fā)明的一個方面，使用鹽酸、硫酸、三氟乙酸或氫溴酸進(jìn)行步驟a)中的脫保 護(hù)。
[0426] 在本發(fā)明的一特定方面，使用鹽酸進(jìn)行步驟a)中的脫保護(hù)。
[0427] 在本發(fā)明的一個方面，用于步驟a)中脫保護(hù)的溶劑選自水、甲醇、乙醇、正丙醇、異 丙醇、正丁醇和叔丁醇。
[0428] 在本發(fā)明的一特定方面，用于步驟a)中脫保護(hù)的溶劑選自正丙醇或異丙醇。
[0429] 在本發(fā)明的一個方面，在50至100°C的溫度下，特別是在80°C下進(jìn)行步驟a)中的脫 保護(hù)。
[0430] 在本發(fā)明的一個方面，在0.1至24小時的反應(yīng)時間期間，特別是在1至2小時的反應(yīng) 時間期間進(jìn)行步驟a)中的脫保護(hù)。
[0431] 在本發(fā)明的一個方面，步驟b)中的堿是選自N -乙基嗎啉(NEM)、三乙胺（TEA)、三 (正丙基)胺(TPA)、二異丙基乙胺(DIPEA)、吡啶和二甲基吡啶的液體堿。
[0432] 在本發(fā)明的一個方面，步驟b)中的堿是N-乙基嗎啉(NEM)。
[0433] 在本發(fā)明的一個方面，在步驟b)中，相對于式（III)化合物添加4至8當(dāng)量的堿，特 另IJ是6至7當(dāng)量的堿，最特別是6.5當(dāng)量的堿。
[0434] 在本發(fā)明的一個方面，用于步驟c)中的溶劑與用于步驟a)中的溶劑相同。
[0435] 在本發(fā)明的一個方面，用于步驟c)中的溶劑選自水、甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、 正丁醇和叔丁醇。
[0436] 在本發(fā)明的一特定方面，步驟c)中的溶劑選自正丙醇或異丙醇。
[0437] 在本發(fā)明的一個方面，用于步驟d)中的偶聯(lián)劑是丙基膦酸酐(T3P)。
[0438]在本發(fā)明的一個方面，用于步驟d)中的溶劑選自甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁 醇、叔丁醇、甲苯、乙腈、四氫呋喃、N，N-二甲基甲酰胺、氯仿、二氯甲烷、二氯甲烷、二氯乙 烷、乙醚、丙酮、甲基乙基酮、二甲亞砜、N，N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二噁烷、四氫 吡喃、吡啶、2-丙酮、2-丁酮、乙二醇二甲基醚、乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸異丙酯以及以上各 項的混合物。
[0439]在本發(fā)明的一特定方面，用于步驟d)中的溶劑選自正丙醇和甲苯或異丙醇和甲苯 的混合物，最特別是正丙醇和甲苯的混合物。
[0440]在本發(fā)明的一個方面，在-10至50°C，特別是0至25°C的溫度下進(jìn)行步驟d)中的偶 聯(lián)反應(yīng)。
[0441] 在本發(fā)明的一個方面，在0.1至24小時的反應(yīng)時間期間，特別是在1至4小時的反應(yīng) 時間期間進(jìn)行步驟d)中的偶聯(lián)反應(yīng)。
[0442] 本發(fā)明的一個方面涉及式（II)化合物與式（III)化合物的偶聯(lián)反應(yīng)，其中在步驟 d)之后，通過水性萃取來處理產(chǎn)物。
[0443]在本發(fā)明的一特定方面，在步驟d)之后對產(chǎn)物的處理包括用水萃取1至6次，特別 是用水萃取3次。
[0444]本發(fā)明的一個方面涉及用于制造式(VI)化合物
[0446]或其藥學(xué)上可接受的鹽的方法，其中將式(I)化合物
[0448] 脫保護(hù)，其中R1如本文所定義。
[0449] 本發(fā)明的一個方面涉及用于制造式(VI)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的方法，其 中將式(I)化合物脫保護(hù)，其中R1如本文所定義，包括以下反應(yīng)步驟：
[0450] i)在溶劑中在酸性條件下將所述式(I)化合物脫保護(hù)；
[0451] ii)使用于溶劑中的堿調(diào)節(jié)pH;
[0452] i i i)任選使所述式(VI)化合物結(jié)晶。
[0453]在本發(fā)明的一個方面，使用鹽酸、硫酸、三氟乙酸或氫溴酸進(jìn)行步驟i)中的脫保 護(hù)。
[0454] 在本發(fā)明的一特定方面，使用鹽酸進(jìn)行步驟i)中的脫保護(hù)。
[0455] 在本發(fā)明的一個方面，用于步驟i)中脫保護(hù)的溶劑選自水、甲醇、乙醇、正丙醇、異 丙醇和叔丁醇或其混合物。
[0456]在本發(fā)明的一特定方面，用于步驟i)中脫保護(hù)的溶劑選自正丙醇、異丙醇以及正 丙醇/水的1:1混合物。
[0457]在本發(fā)明的一個方面，在30至100 °C的溫度下，特別是在80°C下進(jìn)行步驟i)中的脫 保護(hù)。
[0458] 在本發(fā)明的一個方面，在1至24小時的反應(yīng)時間期間，特別是在1至4小時的反應(yīng)時 間期間進(jìn)行步驟i)中的脫保護(hù)。
[0459] 在本發(fā)明的一個方面，步驟ii)中的堿是于正丙醇/水的1:1混合物中的NaOH。
[0460] 在本發(fā)明的一個方面，步驟ii)中的堿是氨。
[0461] 在本發(fā)明的一個方面，用于步驟ii)中的溶劑與用于步驟i)中的溶劑相同。
[0462]在本發(fā)明的一個方面，用于步驟ii)中的溶劑選自水、甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、 正丁醇和叔丁醇或其混合物。
[0463]在本發(fā)明的一特定方面，步驟ii)中的溶劑選自正丙醇、異丙醇以及正丙醇/水的 1:1混合物。
[0464]在本發(fā)明的一特定方面，通過逐滴添加氨于異丙醇中的溶液(2-4重量％，特別是 3.8重量％)或他0!1于正丙醇/水的1:1混合物中的溶液(5-101，特別是71〇進(jìn)行?!1調(diào)節(jié)。 [0 465]在本發(fā)明的一特定方面，在步驟ii)中調(diào)節(jié)之后的最終pH高于pH6,特別是在pH 6 與7之間。
[0466] 在本發(fā)明的一個方面，通過將溶劑轉(zhuǎn)換為適于結(jié)晶式(VI)化合物的結(jié)晶溶劑來進(jìn) 行步驟iii)中的結(jié)晶。
[0467] 在本發(fā)明的一特定方面，步驟iii)中的結(jié)晶溶劑選自甲苯、庚烷、四氫呋喃、2-丙 酮、2-丁酮、乙二醇二甲基醚、乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸異丙酯及其混合物。
[0468]在本發(fā)明的一特定方面，步驟iii)中的結(jié)晶溶劑是乙酸乙酯。
[0469] 本發(fā)明的一個方面涉及可通過如本文所述的任何方法獲得的化合物。
[0470] 本發(fā)明的一個方面涉及包含可通過如本文所述的任何方法獲得的化合物的藥物 組合物。
[0471 ]本發(fā)明的一個方面涉及一種如本文所述的式(VI)化合物，其包含lppb與lOOppm之 間的式(I)化合物，其中R1如本文所定義。
[0472] 本發(fā)明的一個方面涉及一種如本文所述的式(VI)化合物，其包含lppb與lppm之間 的式(I)化合物，其中R1如本文所定義。
[0473] 本發(fā)明的一個方面涉及一種包含如本文所述的式(VI)化合物的藥物組合物。
[0474] 本發(fā)明的一個方面涉及一種如本文所述的式（I)化合物，其包含lppb與lOOppm之 間的式(Π )化合物，其中R1和Μ如本文所定義。
[0475] 本發(fā)明的一個方面涉及一種如本文所述的式（I)化合物，其包含lppb與lppm之間 的式(Π )化合物，其中R1和Μ如本文所定義。
[0476] 本發(fā)明的一個方面涉及一種如本文所述的式（I)化合物，其包含lppb與lOOppm之 間的式(III)化合物，其中R1和R 2如本文所定義。
[0477] 本發(fā)明的一個方面涉及一種如本文所述的式（I)化合物，其包含lppb與lppm之間 的式(III)化合物，其中R1和R 2如本文所定義。
[0478] 本發(fā)明的一個方面涉及一種如本文所述的式（I)化合物，其包含lppb與lOOppm之 間的式(II)化合物和lppb與1 OOppm之間的式(III)化合物，其中R1、R2和Μ如本文所定義。
[0479] 本發(fā)明的一個方面涉及一種如本文所述的式（I)化合物，其包含lppb與lppm之間 的式(II)化合物和lppb與lppm之間的式(III)化合物，其中R 1、R2和Μ如本文所定義。 實施例
[0480] 提供以下實施例1-15以說明本發(fā)明。它們不應(yīng)被視為限制本發(fā)明的范圍，而是僅 應(yīng)被視為其代表。
[0481] 實施例1
[0482] (E)-3_(叔丁氧基羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙烯酸
[0484] 向甲酸乙酯（123·9L，1538·9mol)于MTBE(189L)中的溶液中添加4-氯苯基乙酸乙 酯（120kg，604. lmol)。在15-30°C下攪拌混合物30分鐘，接著在維持內(nèi)部溫度低于5°C的同 時添加 t-BuOK(136.8kg，1219. lmo 1)于MTBE (1215.8L)中的混合物。在0-10 °C之間攪拌混合 物1.5小時。在維持內(nèi)部溫度低于10 °C下添加反應(yīng)混合物至鹽酸的水溶液（35 %，99.8L于 560L H20中）中。在0-10°C之間攪拌混合物30分鐘，直至觀察到最終pH = 2。分離各層，并且 有機(jī)層用25 % NaCl溶液(496L)洗滌。
[0485] 冷卻混合物至-5 °C，接著在維持溫度〈10 °C下緩慢添加異丙胺（107. 2L， 1251.9111〇1)和4(30!1(70.51^，1233.3111〇1)。在0-10°(：下攪拌混合物3小時，接著依次用!120 (760L)、15%Na 2C03水溶液(424L)和25%NaCl水溶液(650L)洗滌有機(jī)層。分離水層，并且添 加01^(443〇和01^ 3(14.41^，117.9111〇1)至有機(jī)溶液中。接著加熱混合物至60-65°(：，隨后在 24小時內(nèi)緩慢添加（Boc)2〇(951 · 6L，4142mol)、DMF(228 · 6L)和三乙胺（263 · 0L， 1821.8mol)。在攪拌約6小時之后，冷卻混合物至室溫，并且添加 MTBE( 1434L)、水（1010L)和 10%檸檬酸水溶液(938〇。分離水層，并且混合物用25%似(：1水溶液(98禮)洗滌。接著在維 持溫度低于50°C下通過蒸餾將有機(jī)層濃縮至最小工作體積（約240L)。接著在0-5 °C下攪拌 有機(jī)層5小時并過濾。濾餅用庚烷(20.6L)洗滌并干燥以提供呈白色固體狀的(E)-3-((叔丁 氧基羰基）（異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙烯酸乙酯（148.551^，63%產(chǎn)率，歷經(jīng)三步）。
[0486] 添加（E)-3_((叔丁氧基羰基）（異丙基）氨基）-2-(4-氯苯基）丙烯酸乙酯 (133·5kg，362·9mol)至在室溫下攪拌的H20(252L)、Na0H(58·25kg，1456mol)和Et0H (383.5L)的混合物中。使混合物升溫至40-45°C，持續(xù)2.5小時，直至形成澄清溶液。在維持 溫度低于50°C下將混合物濃縮至最小工作體積。接著冷卻混合物至10_25°C，并且添加 HC1 的溶液（842L 2N HC1和11L 35%HC1)直至獲得最終pH = 2~4。分離水層，并且有機(jī)層用 25%NaCl水溶液(810L)洗滌。在蒸餾時添加正庚烷以形成混懸液。收集產(chǎn)物并用正庚烷洗 滌，并且在40-45 °C下干燥約10小時以提供110.7kg( 90.5 %產(chǎn)率)根據(jù)HPLC具有99.9 %純度 的(E)-3-(叔丁氧基羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙烯酸。使用單晶X射線分析確認(rèn)E 構(gòu)型。
[0487] 實施例la
[0488] (E)-3_((叔丁氧基羰基)_(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙烯酸乙酯
[0490] 向2-(4-氯苯基)-3-(異丙基氨基）丙烯酸乙酯（如上在實施例1中由120kg 2-(4-氯苯基）乙酸乙酯制備，0.604kmol)的濃縮溶液中添加 DMF(354kg)，并且將批料濃縮至3體 積。添加 DMAP( 14 · 0kg，114 · 6mol)和n-Bu3N(224 · 21kg，1 · 21kmol)并加熱混合物至70-75°C， 并且在70-75°C下在2小時內(nèi)添加(80〇20(3301^，1.511〇11〇1)于01^(1691^)溶液中的溶液。 在添加完成之后，在低于75°C下在真空下在3小時內(nèi)移除約200L DMF。在70-75°C下在0.5小 時內(nèi)繼續(xù)添加含(80〇20(68.61^，0.3141〇11 〇1)的01^(32.41^)溶液。在添加完成之后，在低 于75 °C的溫度下濃縮批料，接著冷卻至約23.5 °C。裝入MTBE( 899.6kg)，接著冷卻混合物至 約12.6 °C。在10-20 °C下添加含檸檬酸單水合物（197.4kg)的水(702kg)溶液。分離各層，并 且有機(jī)層用5 % NaCl水溶液（582kg)洗滌。分割各層，并且在低于50 °C下將有機(jī)層濃縮至 240-360L。在裝入正庚烷(77kg)之后，在低于50 °C下將混合物濃縮至240-360L。在裝入正庚 烷（70kg)之后，在Ο-UTC下攪拌混懸液4小時，并且通過離心收集產(chǎn)物。餅塊用正庚烷 (28.2kg)洗滌，并且獲得(E)-3-((叔丁氧基羰基）（異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙烯酸乙 酯（170.61^，77%產(chǎn)率，991%!^〇，其可如上在這個實施例1中用于制備的-3-(叔丁氧 基羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙烯酸。
[0491] 實施例2
[0492] (S)-3_(叔丁氧基羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸鈉
[0494] 在手套箱(02含量彡2ppm)中，將50ml高壓釜裝以6.8g(20.0mmol)(E)-2-(4-氯苯 基）-3-[( 2-甲基丙-2-基）氧基羰基-丙-2-基氨基]丙-2-烯酸、34ml乙醇和4.81mg (0.0051mmol，S/C 4'000)[此0?厶)2((3)-81祖?]。在60°(：下在18巴氫氣下進(jìn)行不對稱氫化 7小時。在冷卻至室溫之后，從高壓釜釋放壓力，并且分析黃色反應(yīng)溶液的樣品以顯示>99% 轉(zhuǎn)化成(S)-3-(叔丁氧基羰基-異丙基-氨基)-2-(4-氯-苯基)-丙酸，其中S/R對映異構(gòu)比率 是99.3比0.7。在氬氣下借助于100ml叔丁基甲基醚將氫化混合物轉(zhuǎn)移至1 1玻璃反應(yīng)器中， 所述混合物含有6個類似氫化實驗的粗反應(yīng)混合物(總計47.9g(E)-2-(4-氯苯基)-3-[(2_ 甲基丙-2-基)氧基羰基-丙-2-基氨基]丙-2-烯酸），接著在50°C下在攪拌下逐滴添加乙醇 鈉的乙醇溶液(52.3ml，140mmol)。形成淺黃色沉淀，其在相同溫度下攪拌，接著在室溫下攪 拌過夜。濾除沉淀的產(chǎn)物，用叔丁基甲基醚/乙醇4 : 1混合物（3 0 0 m 1)和叔丁基甲基醚 (200ml)洗滌，在真空下干燥直至重量恒定來以96.3%產(chǎn)率以及以S/R對映異構(gòu)比率>99.9 比<0.1 %廣生呈白色晶體狀的（S )-3-(叔丁氧基幾基（異丙基)氨基)-2-( 4-氯苯基）丙酸 鈉 (49 · 03g)。4-匪1?(〇2〇): δ7 · 32(d，2H)，7 · 22(d，2H)，3 · 65-3 · 85兩個寬單峰，芳基-迎和^ 迎（C H3)2)，3.55(m，2H)，1.29(s，9H)，1.00(d，3H)，0.80(bs，3H)。
[0495] 使用150mm*4.6mm的Chiralpak-AD-3柱，通過HPLC來測定對映異構(gòu)比率。洗脫劑： A)含0.10 %三氟乙酸的正庚烷，B)乙醇，流速：1.25ml/min，25°C，5μ1注射體積，220nm。保留 時間：（S)-3-(叔丁氧基羰基-異丙基-氨基)-2-(4-氯-苯基)-丙酸2.48分鐘，（1〇-3-(叔丁 氧基羰基-異丙基-氨基)-2-(4-氯-苯基)-丙酸2.77分鐘，")-2-(4-氯苯基)-3-[(2-甲基 丙-2-基)氧基幾基-丙_2_基氨基]丙_2_稀酸3.16分鐘。
[0496] 實施例3
[0497] (S)-3_(叔丁氧基羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸鈉
[0498] 在手套箱(02含量彡2ppm)中，將185ml高壓釜裝以17.0g(50.0mmol)(E)-2-(4-氯 苯基）-3-[(2-甲基丙-2-基）氧基羰基-丙-2-基氨基]丙-2-烯酸、70ml乙醇和4.74mg (0.005mmol，S/C 10'000)[Ru(TF A)2((S)-BINAP]。在70°C下在 18巴氫氣下進(jìn)行不對稱氫 化22小時。在冷卻至室溫之后，從高壓釜釋放壓力，并且分析黃色反應(yīng)溶液的樣品以顯示〉 99%轉(zhuǎn)化成(S)-3-(叔丁氧基羰基-異丙基-氨基)-2-(4-氯-苯基)-丙酸，其中S/R對映異構(gòu) 比率是98.2比1.8。在氬氣下借助于200ml叔丁基甲基醚將氫化混合物轉(zhuǎn)移至400ml玻璃反 應(yīng)器中，接著在50 °C下在攪拌下逐滴添加乙醇鈉的乙醇溶液（18.7ml，50mmo 1)。形成淺黃色 沉淀，將其在相同溫度下攪拌，接著在室溫下攪拌總計3.5小時。濾除沉淀的產(chǎn)物，用叔丁基 甲基醚/乙醇4:1混合物(80ml)和叔丁基甲基醚(20ml)洗滌，在真空下干燥直至重量恒定來 以94.6%產(chǎn)率以及以S/R對映異構(gòu)比率100比0%產(chǎn)生呈白色晶體狀的（S)-3-(叔丁氧基羰 基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸鈉（17.35g)。
[0499] 實施例3a
[0500] (S)-3_(叔丁氧基羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸鈉
[0501 ] 在手套箱(〇2含量彡2ppm)中，將185ml高壓釜裝以10.0g(29.4mmol)(E)-2-(4-氯 苯基)-3-[(2_甲基丙-2-基)氧基羰基-丙-2-基氨基]丙-2-烯酸、125ml乙醇、0.118mL NaBr 水溶液（謂）和5.7711^(0.006111111〇1，5/^5'000)[1?11(了卩厶)2((3)-81嫩？]。在60°(：下在18巴氫 氣下進(jìn)行不對稱氫化22小時。在冷卻至室溫之后，從高壓釜釋放壓力，并且分析黃色反應(yīng)溶 液的樣品以顯不>99 %轉(zhuǎn)化成(S) _3_(叔丁氧基幾基-異丙基-氨基)-2-(4-氯-苯基)-丙酸， 其中S/R對映異構(gòu)比率是98比2。借助于10mL乙醇將氫化混合物轉(zhuǎn)移至0.5L反應(yīng)器中。在45 °(：下在真空中蒸發(fā)反應(yīng)混合物以獲得殘余體積65mL。
[0502] 在45 °C下添加70ml叔丁基甲基醚。接著在45 °C下在攪拌下逐滴添加乙醇鈉 (11.4g，35mm〇l)的乙醇溶液。漏斗用1.3g乙醇沖洗。形成淺黃色沉淀，將其在相同溫度下攪 拌1小時，接著在室溫下攪拌1小時。濾除沉淀的產(chǎn)物，用叔丁基甲基醚/乙醇1:1混合物 (13.6g)和叔丁基甲基醚（16g)洗滌，在真空下干燥直至重量恒定來以89%產(chǎn)率以及以S/R 對映異構(gòu)比率100比0 %廣生呈白色晶體狀的（S) _3_(叔丁氧基幾基（異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸鈉(9.52g)。
[0503] 實施例3b
[0504] (S)-3_(叔丁氧基羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸鈉
[0505] 在手套箱(〇2含量彡2ppm)中，將185ml高壓釜裝以10.0g(29.4mmol)(E)-2-(4-氯 苯基)_3_[ (2-甲基丙_2_基)氧基幾基-丙_2_基氛基]丙_2_稀酸、120ml乙醇(在Ar下蒸饋）、 0.118mL NaCl水溶液（1M)和5.8mg(0.006mmol，S/C 5'000)[Ru(TFA)2((S)-BINAP]。在60°C 下在18巴氫氣下進(jìn)行不對稱氫化12小時。在冷卻至室溫之后，從高壓釜釋放壓力，并且分析 黃色反應(yīng)溶液的樣品以顯不>99 %轉(zhuǎn)化成（S)_3_(叔丁氧基幾基-異丙基-氨基)-2-(4-氯-苯基)_丙酸，其中S/R對映異構(gòu)比率是99比1。借助于10mL乙醇將氫化混合物轉(zhuǎn)移至0.5L反 應(yīng)器中。在45 °C下在真空中蒸發(fā)反應(yīng)混合物以獲得殘余體積65mL。
[0506] 在20°C下添加70ml叔丁基甲基醚。接著在45°C下在攪拌下逐滴添加乙醇鈉于乙醇 中的溶液(21 % (m/m)，9.5g，29.4mmo 1)。漏斗用1.3g乙醇沖洗。形成沉淀，將其在相同溫度 下攪拌1小時，接著在室溫下攪拌1小時。濾除沉淀的產(chǎn)物，用叔丁基甲基醚/乙醇1:1混合物 (13.6g)和叔丁基甲基醚（16g)洗滌，在真空下干燥直至重量恒定來以89%產(chǎn)率以及以S/R 對映異構(gòu)比率100比0 %廣生呈白色晶體狀的（S) _3_(叔丁氧基幾基（異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸鈉(9.5g)。
[0507] 實施例3c
[0508] (S) _3_(叔丁氧基幾基(異丙基)氨基)_2_( 4_氯苯基)_丙酸
[0509] 在手套箱(〇2含量彡2ppm)中，將185ml高壓釜裝以17.1g(50.0mmol)(E)-2-(4-氯 苯基）-3-[ (2-甲基丙-2-基)氧基羰基-丙-2-基氨基]丙-2-烯酸和75ml乙醇。在單獨(dú)燒瓶 中，4.7911^(0.005_〇1，5/(：10'000)[1?11(丁?厶)2((3)-81嫩？]和8.31111乙醇的混合物用1.671111 (0.10mmol)60毫摩爾HC1水溶液處理，攪拌所得混懸液30分鐘，接著添加至高壓釜中。在已 密封高壓釜之后，在60°C下在18巴氫氣下進(jìn)行不對稱氫化12小時。在冷卻至室溫之后，從高 壓釜釋放壓力，并且分析黃色反應(yīng)溶液的樣品以顯示99.5%轉(zhuǎn)化成(S)-3-(叔丁氧基羰基-異丙基 _氛基)_2-(4_氣-苯基)-丙酸，其中3/1?對映異構(gòu)比率是98.7比1.3。
[0510] 實施例3d
[0511] (S) _3_(叔丁氧基幾基(異丙基)氨基)_2_( 4_氯苯基)_丙酸
[0512] 使用HBr作為添加劑，重復(fù)實施例3c的程序。氫化以99.8%轉(zhuǎn)化率進(jìn)行，以定量產(chǎn) 率分離所需(S)-酸，其中S/R對映異構(gòu)比率是98.7:1.3。
[0513] 實施例3e
[0514] (S) _3_(叔丁氧基幾基(異丙基)氨基)_2_( 4-氯苯基)-丙酸
[0515] 在手套箱(〇2含量彡2ppm)中，將185ml高壓釜裝以17.0g(50.0mmol)(E)-2-(4-氯 苯基）-3-[ (2-甲基丙-2-基)氧基羰基-丙-2-基氨基]丙-2-烯酸和75ml乙醇。在單獨(dú)燒瓶 中，9.5911^(0.010111111〇1，5/^5'000)[1?11(丁卩厶)2((3)-81嫩？]和9.81111乙醇的混合物用0.201111 (0.20mmol) 1摩爾HC1水溶液處理，攪拌所得混懸液30分鐘，接著添加至高壓釜中。在已密封 高壓釜之后，在60°C下在18巴氫氣下進(jìn)行不對稱氫化12小時。在冷卻至室溫之后，從高壓釜 釋放壓力，并且分析黃色反應(yīng)溶液的樣品以顯示99.7%轉(zhuǎn)化成(S)-3-(叔丁氧基羰基-異丙 基 -氣基)_2-(4-氣-苯基丙酸，其中S/R對映異構(gòu)比率是99.0比1.0。
[0516] 實施例3f
[0517] ⑶_3_(叔丁氧基幾基(異丙基)氨基)_2_( 4_氯苯基)_丙酸
[0518] 使用LiBr作為添加劑，重復(fù)實施例3f的程序。氫化以98.9%轉(zhuǎn)化率進(jìn)行，以定量產(chǎn) 率分離所需(S)-酸，其中S/R對映異構(gòu)比率是98.5:1.5。
[0519] 實施例4
[0520] (S)-3-(叔丁氧基幾基(異丙基)氨基)-2-( 4-氯苯基)-丙酸
[0521] 在手套箱(02含量彡2ppm)中，將35ml配備有玻璃插入物和磁性攪拌棒的高壓釜裝 以400mg( 1.18mmol) (E)-2_(4-氣苯基)_3_[ (2_甲基丙_2_基)氧基幾基-丙_2_基氛基]丙-2-烯酸、5.9211^(0.00589111111〇1)[1?110?厶)2((3)-81嫩？）](5/^ 200)和41111乙醇。密封高壓釜， 并且用20巴氫氣加壓，在60°C下在攪拌下進(jìn)行不對稱氫化14小時。在冷卻至室溫之后，從高 壓釜釋放壓力，在真空中蒸發(fā)乙醇溶液來以定量產(chǎn)率以及以S/R對映異構(gòu)比率99:1產(chǎn)生 (3)-3-(叔丁氧基幾基-異丙基-氛基)-2-(4_氣-苯基)-丙酸。轉(zhuǎn)化率是> =99.9%。
[0522] 實施例5.1至5.17(S)或(R)-3_(叔丁氧基羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸
[0523] 使用不同手性釕催化劑重復(fù)實施例4的程序以產(chǎn)生3_(叔丁氧基羰基-異丙基-氨 基)-2-(4-氯-苯基)_丙酸的相應(yīng)(R)和(S)異構(gòu)體。結(jié)果連同催化劑、轉(zhuǎn)化％和5/1?對映異構(gòu) 比率一起顯示于表1中。在所有實驗中（除非在腳注中明確指示），反應(yīng)規(guī)模都是400mg，溫度 是60°C，氫氣壓力是20巴，在S/C比率200下，反應(yīng)時間是14小時。反應(yīng)器是35ml高壓釜。指示 的添加劑量意圖相對于金屬催化劑的量。
[0526] 35ml高壓釜，1 ·7g規(guī)模；S/C 250，22小時。b) 1 ·7g規(guī)模，S/C250，14小時；c)6·8g底 物，在50ml高壓釜中，S/C 1500,5小時。d)通過在50 °C下在手套箱中在3ml乙醇中攪拌 2.56mg[Ru(C0D) (TFA)2]2和2.2摩爾當(dāng)量的手性二膦持續(xù)3小時來原位制備催化劑。
[0527] 實施例6.1至6.8
[0528] (S)或(R)-3_(叔丁氧基羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸
[0529] 以類似于實施例5.1-5.16的方式，使用各種物質(zhì)作為添加劑進(jìn)行以下氫化來以表 2中指不的純度和對映異構(gòu)純度提供3-(叔丁氧基幾基-異丙基-氨基)_2_( 4-氯-苯基)-丙 酸的（R)和(S)異構(gòu)體。在所有實驗中（除非在腳注中明確指示），反應(yīng)規(guī)模都是400mg，溫度 是60°C，氫氣壓力是18-20巴，在4小時期間，在S/C比率200下。反應(yīng)器是35ml高壓釜。指示的 添加劑量意圖相對于金屬催化劑的量。
[0532] 對于a)反應(yīng)時間14小時;b)S/C 4000，18小時，6·8g規(guī)模，在185ml高壓釜中；c)S/C 200,14小時，1.18g規(guī)模，30ml高壓釜，20巴H2。
[0533] 實施例7.1 至7.11
[0534] (S)或(R)-3_(叔丁氧基羰基(異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸
[0535] 重復(fù)實施例5.1-5.16的程序，但反應(yīng)條件在氫氣壓力、濃度和溶劑方面變化以產(chǎn) 生3-(叔丁氧基幾基 -異丙基-氨基)-2-(4_氯-苯基)-丙酸的相應(yīng)(R)和(S)異構(gòu)體。結(jié)果顯 示于表3中。在所有實驗中（除非在腳注中明確指示），反應(yīng)規(guī)模都是400mg，在4ml溶劑中，溫 度是60°C，在S/C比率200下，反應(yīng)時間是14小時。反應(yīng)器是35ml高壓釜，催化劑是Ru(TFA) 2 ((S)-BINAP)〇
[0536] 整
[0538] 對于a)反應(yīng)時間4小時；b)200mg底物，在4ml乙醇中；c)600mg底物，在2ml乙醇中； d)通過在50°C下在手套箱中在3ml乙醇中攪拌2.56mg[Ru(C0D)(TFA)2]2和4.0mg(S)-BINAP 持續(xù)3小時來原位制備催化劑。
[0539] 實施例8
[0540] (R)-4-(5-甲基- 7-氧代-5,6-二氫-5H-環(huán)戊并[d]嘧啶- 4-基)哌嗪-丨-甲酸叔丁酯
[0542] (R)-3_(4,6-二氯嘧啶-5-基)丁酸甲酯
[0543] 在50°C下向（R)-3-(4,6-二羥基嘧啶-5-基）丁酸甲酯（1.001^，4.70111〇1)、甲苯 (4.00L)和2，6-二甲基吡啶（0.550L，4.70mo 1)的混合物中緩慢添加三氯氧磷（0.960L， 10.6mol)。在70°C下攪拌混合物24小時。冷卻溶液至0°C。在維持內(nèi)部溫度低于30°C下的同 時，向混合物中緩慢添加20 %氫氧化鈉水溶液(約40.0 mo 1，1.60kg，于8.00L H20中）以獲得 在5與6之間的最終pH值。添加乙酸乙酯（2.50L)，攪拌0.5小時，接著分離各層。水相用乙酸 乙酯（3X1.00L)萃取。合并有機(jī)物，并且用1N鹽酸(2X2.50L)和鹽水(2.50L)洗滌。合并有 機(jī)層，并且經(jīng)硫酸鈉干燥并經(jīng)玻璃纖維過濾器過濾。將溶液濃縮至約3.00mL/g，并且用乙腈 稀釋至約7.00mL/g。重復(fù)該順序兩次以移除殘余乙酸乙酯和甲苯(通過咕NMR分析確認(rèn)）。 剩余粗溶液不經(jīng)進(jìn)一步純化或分離即直接用于下一步驟。
[0544] (R)-3_(4,6-二碘嘧啶-5-基)丁酸甲酯
[0545]向（R)-3-(4,6-二氯啼啶-5-基）丁酸甲酯（36.0g，145mmol)于乙腈(540mL)中的溶 液中添加碘化鈉（152g，1.02mo 1)。在25°C下攪拌混合物30分鐘，接著冷卻至約5 °C。在5分鐘 內(nèi)添加甲烷磺酸(9.41mL，1.00當(dāng)量）。在約5°C下攪拌混合物3小時。冷卻反應(yīng)器至約5°C，并 且添加 N，N-二異丙基乙胺（20.3mL，116mmo 1)。在使混合物升溫至20 °C的同時攪拌混合物1 小時。添加飽和亞硫酸鈉溶液直至不再觀察到顏色變化以移除碘。添加水(540mL)，并且將 pH調(diào)節(jié)至約5與7之間。在小于40°C的溫度下在減壓下濃縮兩相混合物以移除乙腈。過濾水 性混懸液以產(chǎn)生48.8g (78 %產(chǎn)率)灰白色固體產(chǎn)物。
[0546] (R)-4_(6-碘-5-(4-甲氧基-4-氧代丁-2-基)嘧啶-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0547] 向（1〇-3-(4,6-二碘嘧啶-5-基）丁酸甲酯（2128,491111111〇1)和8〇(3-哌嗪（101 8， 540mmol)于甲醇（424mL)中的溶液中添加 N，N_二異丙基乙胺（94.3mL, 540mmol)。在60°C下 加熱混合物24小時。在低于40 °C下在減壓下蒸餾出甲醇。向混合物中添加318mL四氫呋喃。 重復(fù)以上溶劑交換過程兩次。向混合物中添加424mL四氫呋喃、212mL飽和氯化銨水溶液和 21.2mL水。有機(jī)層用212mL( 1.00體積)飽和氯化銨水溶液洗滌。這個四氫呋喃溶液不經(jīng)進(jìn)一 步純化即用于下一步驟(91 %重量測定產(chǎn)率）。
[0548] (R)-3-(4-(4_(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)-6_碘-嘧啶-5-基)丁酸
[0549] 在25°C下，向（R)-4-(6-碘-5-(4-甲氧基-4-氧代丁-2-基）嘧啶-4-基）哌嗪-1-甲 酸叔丁酯(2198,0.447111〇1)于四氫咲喃(6571]11^)中的溶液中添加氫氧化鋰單水合物(56.2區(qū)， 1.34mol)于329mL水中的溶液。在25 °C下攪拌混合物5小時。丟棄底部水層。在5 °C下用1N鹽 酸酸化混合物以產(chǎn)生在約1至2之間的最終pH值。分離各層。頂層接著用乙酸異丙酯(440mL X3)萃取，與底層合并，并且用水(220mLX2)洗滌。在低于50°C下在減壓下蒸餾出溶劑。在 低于50°C下在減壓下使殘余乙酸異丙酯與庚烷共沸去除。產(chǎn)物逐漸沉淀析出，并且被過濾 以產(chǎn)生灰白色至淡黃色粉末(196g，84%產(chǎn)率）。
[0550] (R)-4-(6-碘-5-(4-(甲氧基（甲基)氨基)-4-氧代丁-2-基)嘧啶-4-基)哌嗪-1 -甲 酸叔丁酯
[0551] 分批向（R)-3-(4-(4_(叔丁氧基羰基）哌嗪-1-基)-6_碘-嘧啶-5-基）丁酸（100g， 2lOmmo 1)于四氫呋喃（700mL)中的溶液中添加1，Γ -羰基二咪唑（40.9g，252mmo 1)。在20°C 下攪拌反應(yīng)混合物1小時，并且冷卻至5 °C。分批添加 N，0-二甲基羥胺鹽酸鹽（41.0g， 420mmol)，隨后添加 N-甲基嗎啉（6 · 94mL，63 · Ommol)。在5°C下攪拌混合物約1小時，緩慢升 溫至室溫，并且攪拌24小時。添加飽和氯化銨水溶液(500mL)和水（150mL)以得到明顯相分 離。有機(jī)層用飽和氯化銨水溶液(500mL)和鹽水(200mL)洗滌。通過與四氫呋喃共同蒸發(fā)來 使殘余水共沸去除以達(dá)到小于500ppm。呈于四氫呋喃中的溶液形式的產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步純化 或分離即用于下一步驟(重量測定產(chǎn)率:>99%。
[0552] (R)-4_(5-甲基-7-氧代-6,7-二氫-5H-環(huán)戊并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0553] 將(R)-4-(6-碘-5-(4-(甲氧基（甲基)氨基)-4_氧代丁-2-基)嘧啶-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯（l〇9g，210mmol)于四氫咲喃(600mL)中的溶液用氮?dú)鈨艋?0分鐘。在-15°C下逐 滴添加異丙基氯化鎂溶液（159mL，210mmol，1.32M，于四氫咲喃中）。在-10°C下攪拌混合物1 小時，并且在維持內(nèi)部溫度低于l〇°C下的同時，在攪拌下緩慢轉(zhuǎn)移至20重量％冷氯化銨水 溶液(600mL)中。接著用飽和氯化銨水溶液(500mL)洗滌有機(jī)層。在低于40°C下在減壓下蒸 餾出四氫呋喃。在維持內(nèi)部溫度在35°C與40°C之間的同時緩慢添加甲基叔丁基醚(350mL)， 隨后添加庚烷(350mL)。使混合物緩慢冷卻至20°C，并且產(chǎn)物在過程期間逐漸沉淀析出。過 濾漿液，并且濾餅在40°C下在真空下干燥以產(chǎn)生灰色固體(52.3g，75%產(chǎn)率，歷經(jīng)兩步）。咕 NMR(300MHz，CDCl3)S8.73(s，IH)，3.92-3.83(m，2H)，3.73-3.49(m，7H)，2.96(dd，J=16.5， 7.2Hz，lH)，2.33(dd, J=16.5，1.8Hz，IH)，1.50(s，9H), 1.32((1, J = 6.9Hz，3H)<Xi7H25N4〇3的 HRMS計算值：[M+H] +:333.1921，實測值：333.1924。
[0554] 實施例9
[0555] 4-[(5R，7R)-7-羥基-5-甲基-6,7-二氫環(huán)戊并[d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0557] 在劇烈攪拌下形成3g 4-[(5R)_5-甲基-7-氧代_5,6-二氫環(huán)戊并[(1]嘧啶-4-基] 哌嗪-1-甲酸叔丁酯于21ml緩沖劑水溶液（100mM 2-(N-嗎啉代）乙烷磺酸，pH 5.8)、6ml 2-丙醇和3mg氧化輔因子NADP[Roche]中的減弱黃色混懸液。加熱反應(yīng)溶液至40°C并攪拌5分 鐘，并且隨后，通過添加30mg KRED-X1-P1B06來開始還原。將pH從5·6調(diào)節(jié)至5·8。在40°C下 在21.5小時內(nèi)實現(xiàn)幾乎完全轉(zhuǎn)化（IPC:0.6面積％的離析物）的反應(yīng)的過程期間，pH增加至 6.4。向反應(yīng)中添加30ml乙酸異丙酯，并且劇烈攪拌15分鐘。自發(fā)發(fā)生相分裂。分離的水相用 50ml乙酸異丙酯萃取兩次，總計100ml乙酸異丙酯。合并的有機(jī)相經(jīng)MgS〇4干燥，過濾并在50 °(：下在真空下蒸發(fā)，從而以3.07g( 102%)產(chǎn)生淡紅色泡沫狀物作為標(biāo)題化合物的含有約 4% 乙酸異丙酯的粗產(chǎn)物。6^1-]\^:334.2(]\1+!1) +;手性冊1^：:99.88%(1?，1〇,0.12%(1?，5) [254nm; Chiralpak IC-3; 150*4 · 6mm，3μπι，流速0 · 8ml，30 Γ，A: 60 % 正庚烷，B: 40 % EtOH+ 0·1DEA，0-15分鐘100%B，15-17分鐘100%B，17·1分鐘40%B];化學(xué)純度HPLC :99·2面積％ (含有0.6面積％的離析物）</H NMR(600MHz，CDCl3)Sppm 1 · 17-1 · 22(m，3H)l .45-1 · 51(m， 9H)2.02(s,lH)2.12-2.24(m,2H)3.43-3.83(m,9H)3.85-4.08(m,lH)5.12(t,J=7.2Hz,lH) 8.53( 8，1!〇(含有約4%乙酸異丙酯）。
[0558] 實施例10.1-10.6
[0559] 4-[ (5R，7R) -7-羥基-5-甲基-6，7-二氫環(huán)戊并[d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯 [0560]對于實施例9.1-9.6,重復(fù)實施例9的程序，但如下表中所指示變化輔因子(NADP [Roche])比率，并且施加不同酮還原酶變體，即施加 KRED-X1。
[0561 ] ^4
[0563] 實施例11
[0564] 4-[ (5R，7R) -7-羥基-5-甲基-6，7-二氫環(huán)戊并[d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0565] 在劇烈攪拌下形成6g 4-[(5R)-5-甲基-7-氧代-5,6-二氫環(huán)戊并[(1]嘧啶-4-基] 哌嗪-1-甲酸叔丁酯于18ml緩沖劑水溶液（100mM 2-(N-嗎啉代）乙烷磺酸，pH 5.8)、6ml 2-丙醇和6mg氧化輔因子NADP[Roche]中的減弱黃色混懸液。加熱反應(yīng)溶液至40°C并攪拌5分 鐘，并且隨后，通過添加60mg KRED-X1-P1B06來開始還原。將pH從5·5調(diào)節(jié)至5·8。在40°C下 在2天內(nèi)實現(xiàn)幾乎完全轉(zhuǎn)化(IPC:1天1.3面積％離析物，2天1.2面積％離析物）的反應(yīng)的過 程期間，pH增加至6.0。向反應(yīng)中添加30ml乙酸異丙酯，并且劇烈攪拌15分鐘。自發(fā)發(fā)生相分 裂。分離的水相用50ml乙酸異丙酯萃取兩次，總計100ml乙酸異丙酯。合并的有機(jī)相經(jīng)MgS0 4 干燥，過濾并在50 °C下在真空下蒸發(fā)，從而以6.02g(99.7%)產(chǎn)生淡紅色泡沫狀物作為標(biāo)題 化合物的含有約4%乙酸異丙酯的粗產(chǎn)物。GC-EI-MS :334.2(M+H) + ;手性HPLC:99.88%(R， R)，0.12%(R，S)[254nm;Chirapakl IC-3; 150*4.6mm，3ym，流速0.8ml，30°C，A:60%正庚 烷，B:40%Et0H+0·lDEA，0-15分鐘100%B，15-17分鐘100%B，17·l分鐘40%B] ;化學(xué)純度 HPLC: 98 · 4 面積 ％ (含有 1 · 3面積 ％ 離析物）。咕 MMR(600MHz，CDC13) δρρπι 1.2(d，J = 7.1Hz 3H)1.49(s,9H)2.14-2.23(m,2H)3.46-3.59(m,5H)3.64(ddd,J=13.1,6.9,3.3Hz,2H)3.78 (ddd J = 13.1,7.2,3.3Hz，2H)5.12(t，J = 7.2Hz,lH)8.53(s, 1H)(含有約4%乙酸異丙酯）。
[0566] 實施例12
[0567] 4-[(5R，7R)_7-羥基-5-甲基-6,7_二氫環(huán)戊并[d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0568] 在劇烈攪拌下形成3g 4-[(5R)-5-甲基-7-氧代-5,6-二氫環(huán)戊并[(1]嘧啶-4-基] 哌嗪-1-甲酸叔丁酯于21ml緩沖劑水溶液（100mM磷酸二氫鉀，pH 7.2; 2mM氯化鎂）、6ml 2-丙醇和3mg氧化輔因子NADP[Roche]中的減弱黃色混懸液。加熱反應(yīng)溶液至40°C并攪拌5分 鐘，并且隨后，通過添加30mg KRED-X1-P1B06來開始還原。將pH從7 · 5調(diào)節(jié)至7 · 2。在40°C下 在18.5小時內(nèi)實現(xiàn)幾乎完全轉(zhuǎn)化（IPC:0.8面積％離析物）的反應(yīng)的過程期間，pH降低至 7.15。向反應(yīng)中添加30ml乙酸異丙酯，并且劇烈攪拌15分鐘。自發(fā)發(fā)生相分裂。分離的水相 用50ml乙酸異丙酯萃取兩次，總計100ml乙酸異丙酯。合并的有機(jī)相經(jīng)MgS〇4干燥，過濾并在 50 °C下在真空下蒸發(fā)，從而以3.06g(102%)產(chǎn)生淡紅色泡沫狀物作為標(biāo)題化合物的含有約 4% 乙酸異丙酯的粗產(chǎn)物。6^1-]\^:334.2(]\1+!1) +;手性冊1^：:99.76%(1?，1〇,0.24%(1?，5) [254nm; Chirapakl IC-3; 150*4 · 6mm，3μπι，流速0 · 8ml，30 Γ，A: 60 % 正庚烷，B: 40 % Et0H+ 0·1DEA，0-15分鐘100%B，15-17分鐘100%B，17·1分鐘40%B];化學(xué)純度HPLC :98·9面積％ (含有0.8面積％離析物）</H NMR(600MHz，CDCl3)Sppm 1.16-1.22(m，3H) 1.45-1.53(m，9H) 2.12-2.25(m,2H)3.42-3.86(m,9H)4.13(br.s.,1H)5.12(t,J=7.2Hz,1H)8.44-8.59(m, 1H)(含有約4%乙酸異丙酯）。
[0569] 實施例13.1-13.7
[0570] 4-[(5R，7R)-7-羥基-5-甲基-6,7-二氫環(huán)戊并[d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0571] 添加溶解于50μ1 DMS0和50μ1 2-丙醇的混合物中的10mg4-[(5R)-5-甲基-7-氧 代-5,6-二氫環(huán)戊并[d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯至深孔板的含有300μ1緩沖液 (100mM MES、2mM MgCl2;pH5.8)、lmg NADP和KRED-X1的變體的各孔中。在室溫下振蕩1.5小 時之后，向各孔中添加 0.5ml MeOH，并且通過HPLC加以分析。最佳變體的結(jié)果列于下表中。
[0572] ^5
[0574] 實施例13a
[0575] 4-[(5R，7R)_7-羥基-5-甲基-6,7_二氫環(huán)戊并[d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯 [0576] 在劇烈攪拌下形成50g(150mmol)4-[ (5R)-5-甲基-7-氧代-5,6-二氫環(huán)戊并[d]-嘧啶-4-基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯于100ml緩沖劑水溶液（100mM磷酸二氫鉀，pH7.2)、78g2-丙醇和50mg NAD(75ymol)中的混懸液。通過添加500mg KRED-X1.1-P1F01來開始還原。反應(yīng) 混合物用氮?dú)鈬娚洳⒓訜嶂?0°C，持續(xù)22小時。在反應(yīng)完成之后，添加174g乙酸異丙酯，攪 拌，分裂各相并移除水相。水相用174g乙酸異丙酯再次萃取。移除水相并合并有機(jī)相，并且 在35 °C下在真空中濃縮至最終體積115mL。在相同溫度下，在1小時內(nèi)添加212g庚烷，使混懸 液老化1小時并在6小時內(nèi)冷卻至10°C。過濾混懸液并用68g庚烷洗滌。在50°C下干燥濾餅4 小時之后，獲得41.1 g(82 %產(chǎn)率，純度100 %面積）白色晶體。
[0577] 實施例13b
[0578] 4_[ (5R，7R) -7-羥基-5-甲基-6，7-二氫環(huán)戊并[d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯
[0579] 在劇烈攪拌下形成4〇ga5〇mm〇l)4-[(5R)-5-甲基-7-氧代-5,6_二氫環(huán)戊并[d]-嘧啶-4-基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯于240ml緩沖劑水溶液(含有3.3g KH2P〇4和8.4g K2HP〇4)、 26g葡萄糖和40mg NAD中的混懸液。使還原升溫至35°C，并且通過添加400mg KRED-X1.1-P1F01和400mg⑶H-101來開始。歷經(jīng)反應(yīng)過程(26小時），使用58.8mL Κ0Η水溶液（10 % (m/ m))使pH保持在7.0。在反應(yīng)完成之后，添加290g乙酸異丙酯和117g NaSCN，攪拌，分裂各相 并移除水相。有機(jī)相用200g水洗滌并使用filtrox過濾板過濾，水相用175g乙酸異丙酯洗 滌。在25°C下在真空中濃縮合并的有機(jī)相至最終體積100mL。在25°C下，在1小時內(nèi)添加383g 庚烷。在30分鐘內(nèi)使混懸液冷卻至0 °C并老化30分鐘。過濾混懸液并用91 g庚烷洗滌。在50 °C 下干燥濾餅16小時之后，獲得30.9g(76 %產(chǎn)率，純度100 %面積）白色晶體。
[0580] 實施例14
[0581] ((S)-2-(4-氯苯基)-3-(4-((5R，7R)-7-羥基-5-甲基-6,7-二氫-5H-環(huán)戊并[d]嘧 啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基）（異丙基)氨基甲酸叔丁酯
[0583] 向配備有機(jī)械攪拌器、氮?dú)膺M(jìn)口和溫度計的三頸500mL反應(yīng)器中裝入4-((5R，7R)_ 7-羥基-5-甲基-6,7-二氫-5H-環(huán)戊并[d]嘧啶-4-基）哌嗪-1-甲酸叔丁酯（16.7g， 52.5mmol)和2-丙醇(65mL)。加熱溶液至55°C。接著在55°C下在10分鐘內(nèi)添加含20.8%(m/ m)HCl的2-丙醇(24.6g，140mmol)。攪拌混懸液直至反應(yīng)完成。冷卻反應(yīng)混合物至10°C，并且 添加4-甲基嗎啉(32.9g，325mm 〇l)。在15°C下攪拌混合物30分鐘。添加(S)-3-((叔丁氧基羰 基）（異丙基)氨基)-2-(4-氯苯基)丙酸鈉鹽（19七，52.5111111 〇1)和2-丙醇(738)，并且冷卻反 應(yīng)混合物至5°C。在維持溫度在5°C的速率下添加丙烷膦酸酐(T3P)(50w%(m/m)于甲苯中） (35g，57·3mmol)〇
[0584] 在反應(yīng)完成后，添加20g水。通過在45°C和150毫巴下蒸餾來濃縮溶液直至最終體 積100mL。添加甲苯（260g)。通過在45°C和150毫巴下蒸餾來再次濃縮溶液直至最終體積 300mL。添加水（150g)，并且攪拌混懸液15分鐘。分離各相15分鐘并移除水相。添加水 (100g)，并且攪拌混懸液15分鐘。分離各相15分鐘并移除水相。再次添加水（100g)，并且攪 拌混懸液15分鐘。分離各相15分鐘并移除水相。通過在45 °C和150毫巴下蒸餾來濃縮溶液直 至最終體積1 〇〇mL。添加正庚烷(34g)，在1小時內(nèi)冷卻溶液至0 °C以使（（S)-2-(4-氯苯基)-3-(4-((5R，7R)-7-羥基-5-甲基-6,7-二氫-5H-環(huán)戊并[d]嘧啶-4-基）哌嗪-1-基)-3-氧代 丙基）（異丙基)氨基甲酸叔丁酯結(jié)晶。再添加正庚烷（170g)。使混懸液老化2小時，過濾并用 甲苯(6.4g)和正庚烷(29.2g)的混合物洗滌，隨后用庚烷洗滌兩次(每次68.4g)。在<55°C 下干燥濾餅以產(chǎn)生呈灰白色固體狀的（（S)-2-(4-氯苯基）-3-(4-((5R，7R)-7-羥基-5-甲 基-6,7-二氫-5H-環(huán)戊并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-氧代丙基）（異丙基)氨基甲酸叔丁 酯，分離 23.9g，86% 產(chǎn)率。（? NMR(600MHz，CDCl3)Sppm 0.68(br.s.，3H)0.94-1.08(m，3H) 1.14(d,J=7.0Hz,3H)1.47(s,10H)2.06-2.27(m,2H)3.30(br.s.,1H)3.38-3.53(m,5H) 3.56-3.73(m,4H)3.78(br.s. , 3H)4.62(br. s. , 1H)5.10(t ,J = 7.1Hz , 1H)7.24(s , 1H)8.49 (s，lH)〇
[0585] 實施例15
[0586] (S)-2-(4-氯苯基)-1-(4-((5R，7R)-7-羥基-5-甲基-6,7-二氫-5H-環(huán)戊并[d]嘧 啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(異丙基氨基)丙-1-酮單鹽酸鹽
[0588] 向配備有機(jī)械攪拌器、氮?dú)膺M(jìn)口、溫度計和pH計的500mL反應(yīng)器中添加（（S)-2_(4-氯苯基）-3-(4-((5R，7R)-7-羥基-5-甲基-6,7-二氫-5H-環(huán)戊并[d]嘧啶-4-基）哌嗪-1-基)-3_氧代丙基）（異丙基)氨基甲酸叔丁酯（50g)和2-丙醇（128g)。加熱溶液至50°C。在50 °C下添加 HC1于2-丙醇中的溶液(21重量％ (m/m)，46.7g)。使溶液維持在50°C下直至反應(yīng)完 成，并且冷卻混合物至25 °C。在約1小時內(nèi)添加氨于2-丙醇中的溶液(2M，66.6g，1.66當(dāng)量） 直至達(dá)到pH 6.7。冷卻混懸液至0°C并過濾。濾餅用2-丙醇（39g)洗滌。通過在50°C和150毫 巴下蒸餾來濃縮濾液直至最終體積l〇〇mL。添加乙酸乙酯（130g)至溶液中。在40 °C下在恒定 體積(300mL)下使用乙酸乙酯（670g)對漿液進(jìn)行溶劑轉(zhuǎn)換。冷卻混懸液至5°C并過濾漿液。 濾餅用Et0Ac(105mL)洗滌并在100°C下在真空下干燥16小時以提供呈灰白色固體狀的（S)-2-(4-氯苯基)-1-(4-((5R，7R)-7-羥基-5-甲基-6,7-二氫-5H-環(huán)戊并[d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基）-3-(異丙基氨基）丙-1-酮單鹽酸鹽：36.4g(82%產(chǎn)率hGH匪R(600MHz，D 20)Sppm 0.92(d ,J = 7.1Hz,3H)1.23(t ,J = 6.4Hz,6H) 1.89-2.15(m,2H)2.85-3.06(m,lH)3.17-3.59 (m,10H)3.83(d ,J= 10.5Hz, 2H)4.33(dd,J = 8.5,4.9Hz,lH)4.98(t,J = 7.0Hz,lH)7.23(d, J = 8.5Hz,2H)7.36(d ,J = 8.7Hz,2H)8.10-8.35(m,lH).LCMS[M+H]+458.2)〇
[0589] 實施例16
[0590] (S)-2-(4-氯苯基)-1-(4-((5R，7R)-7-羥基-5-甲基-6,7-二氫-5H-環(huán)戊并[d]嘧 啶-4-基)哌嗪-1-基)-3-(異丙基氨基)丙-1-酮單鹽酸鹽
[0591] 向配備有機(jī)械攪拌器、氮?dú)膺M(jìn)口、溫度計和pH計的500mL反應(yīng)器中添加（（S)-2-(4-氯苯基）-3-(4-((5R，7R)-7-羥基-5-甲基-6,7-二氫-5H-環(huán)戊并[d]嘧啶-4-基）哌嗪-1-基)-3_氧代丙基）（異丙基)氨基甲酸叔丁酯（50g)和1-丙醇（131g)。加熱溶液至60°C。在60 °C下添加 HC1于1-丙醇中的溶液(22重量％(111/111)，38.(^)。使溶液維持在50°(：下直至反應(yīng)完 成，并且冷卻混合物至25°C。添加 NaOH水溶液（28 % ) (16g)直至達(dá)到pH 6。在60°C下在真空 中濃縮混懸液直至達(dá)到最終體積lOOmL。冷卻混懸液至20°C，添加90g乙酸乙酯并用filtrox 板過濾。反應(yīng)器和過濾裝置用41g 1-丙醇/乙酸乙酯洗滌。在20°C下經(jīng)木炭過濾墊過濾溶 液。反應(yīng)器和過濾器用82g 1-丙醇/乙酸乙酯沖洗。在60°C下，在真空中濃縮溶液直至最終 體積300mL。在60°C下繼續(xù)蒸餾，并且同時在保持體積恒定下添加1260g乙酸乙酯。
[0592] 冷卻混懸液至5°C并過濾漿液。濾餅用Et0Ac(105mL)洗滌并在60°C下在真空下干 燥16小時以提供呈灰白色固體狀的（S)-2-(4-氯苯基)-1-(4-((5R，7R)-7-羥基-5-甲基-6， 7-二氫-5H-環(huán)戊并[d]嘧啶-4-基）哌嗪-1-基)-3-(異丙基氨基)丙-1-酮單鹽酸鹽:36.5g (81 %產(chǎn)率，91.4% (m/m)純度，99.9% (面積)測定）。
【主權(quán)項】
1. 一種用于制備式(I)化合物或其鹽的方法，其包括式(I I)化合物 與式(III)化合物 的偶聯(lián)反應(yīng)，其中R1是選自苯甲基、苯甲基氧基羰基(芐氧羰基，CBZ)、9-芴基甲基氧基羰基(Fmoc)、對甲 氧基苯甲基氧基羰基、對硝基苯甲基氧基羰基、叔丁氧基羰基(BOC)和三氟乙?；牧斜淼?氨基保護(hù)基。 R2是選自苯甲基、苯甲基氧基羰基(芐氧羰基，CBZ)、9-芴基甲基氧基羰基(Fmoc)、對甲 氧基苯甲基氧基羰基、對硝基苯甲基氧基羰基、叔丁氧基羰基(BOC)和三氟乙?；牧斜淼?氨基保護(hù)基。 M是選自堿金屬離子、堿土金屬離子和過渡金屬離子的列表的金屬離子。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中R1是叔丁氧基羰基(BOC)。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2中任一項所述的方法，其中R2是叔丁氧基羰基(B0C)。4. 根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項所述的方法，其中M是堿金屬離子。5. 根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一項所述的方法，其中M是Na+。6. 根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項所述的方法，其包括以下反應(yīng)步驟： a) 在溶劑中在酸性條件下將所述式(I II)化合物脫保護(hù)； b) 使用堿調(diào)節(jié)至堿性pH; c) 添加在溶劑中包含所述式(I I)化合物的溶液； d) 添加在溶劑中包含偶聯(lián)劑的溶液。7. 根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項所述的方法，其中使用鹽酸進(jìn)行步驟a)中的所述脫保 護(hù)。8. 根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項所述的方法，其中用于步驟a)中脫保護(hù)的所述溶劑選自 正丙醇或異丙醇。9. 根據(jù)權(quán)利要求1至8中任一項所述的方法，其中步驟b)中的所述堿選自N-乙基嗎啉 (NEM)、三乙胺(TEA)、三(正丙基)胺(TPA)、二異丙基乙胺(DIPEA)、吡啶和二甲基吡啶。10. 根據(jù)權(quán)利要求1至9中任一項所述的方法，其中步驟b)中的所述堿是N-乙基嗎啉 (NEM)011. 根據(jù)權(quán)利要求1至10中任一項所述的方法，其中步驟c)中的所述溶劑選自正丙醇或 異丙醇。12. 根據(jù)權(quán)利要求1至11中任一項所述的方法，其中用于步驟d)中的所述偶聯(lián)劑是丙基 膦酸酐(T3P)。13. 根據(jù)權(quán)利要求1至12中任一項所述的方法，其中用于步驟d)中的所述溶劑是正丙醇 和甲苯的混合物。14. 根據(jù)權(quán)利要求1至13中任一項所述的方法，其中在步驟d)之后，通過水性萃取來處 理產(chǎn)物。15. 根據(jù)權(quán)利要求1至14中仟一項所述的方法，其還包括用于制造式（II)化合物的方法其包括使用金屬絡(luò)合物催化劑(C)使式(IV)化合物不對稱氫化，其中R1和M如權(quán)利要求1至5中任一項所定義。16. -種用于制造式(II)化合物的方法其包括使用金屬絡(luò)合物催化劑(C)使式(IV)化合物不對稱氫化，其中R1和M如權(quán)利要求1至5中任一項所定義。17. 根據(jù)權(quán)利要求15或16所述的方法，其中所述金屬絡(luò)合物催化劑(C)是選自式(Cl)、 (C2)或(C3)化合物的釕絡(luò)合物催化劑： Ru(Z)2D (Cl) [Ru(Z)2-P(D)(L)m](Y) P (C2) Ru(E)(Ej)(D)(F) (C3) 其中： D是手性膦配體； L是選自以下的中性配體:C2-7烯、環(huán)辛烯、1，3-己二烯、降冰片二烯、1，5-環(huán)辛二烯、苯、 六甲基苯、1，3,5_三甲基苯、對聚傘花素、四氫呋喃、二甲基甲酰胺、乙腈、苯甲腈、丙酮、甲 苯和甲醇； Z是選自以下的陰離子配體:氫陰離子、氟離子、氯離子、溴離子、n5-2,4-戊二烯基、Ii5-2,4_二甲基-戊二烯基或基團(tuán)A-⑶0-，前提是當(dāng)兩個Z連接于Ru原子時，它們可為相同或不 同； 八是&-7烷基、Cw鹵烷基、芳基或鹵芳基； Y是選自以下的非配位陰離子：氟離子、氯離子、溴離子、BF4'Cl〇4'SbFfr、PFfr、B(苯 基)4-、B (3，5-二-三氟甲基-苯基)4-、CF3S〇3-和 C6H5S〇3-; F是任選手性二胺； E與E '均是鹵素離子，或E是氫陰離子，并且E '是 m是1、2、3或4;并且 P是1或2。18. 根據(jù)權(quán)利要求15至17中任一項所述的方法，其中所述釕絡(luò)合物催化劑是Ru(Z)2D,其 中Z和D如權(quán)利要求17所定義。19. 根據(jù)權(quán)利要求15至18中任一項所述的方法，其中所述陰離子配體(Z)獨(dú)立地選自氯 離子、溴離子、碘離子、OAc和TFA。20. 根據(jù)權(quán)利要求15至19中任一項所述的方法，其中所述陰離子配體(Z)是三氟乙酸根 (TFA)021. 根據(jù)權(quán)利要求15至17中任一項所述的方法，其中所述中性配體(L)獨(dú)立地選自苯 (C6H6)、對聚傘花素(pCym)和乙腈(AN)。22. 根據(jù)權(quán)利要求15至17中任一項所述的方法，其中所述中性配體(L)是苯(C6H6)。23. 根據(jù)權(quán)利要求15至17中任一項所述的方法，其中所述非配位陰離子(Y)選自氯離 子、溴咼子、碘咼子和BF4。24. 根據(jù)權(quán)利要求15至17中任一項所述的方法，其中所述非配位陰離子(Y)是BF4'25. 根據(jù)權(quán)利要求15至17中任一項所述的方法，其中m是1或4。26. 根據(jù)權(quán)利要求15至17中任一項所述的方法，其中E與E'均是氯離子。27. 根據(jù)權(quán)利要求15至17中任一項所述的方法，其中所述手性二胺F是（1S，2S)-1，2_二 苯基乙二胺（S，S-DPEN)。28. 根據(jù)權(quán)利要求15至17中任一項所述的方法，其中所述手性膦配體D選自式(Dl)至 (D12)化合物：其中： !^是&―7烷基、C1-7烷氧基、羥基或&―7烷基-C( O ) O-; R12和R13各自獨(dú)立地是氫、Cw烷基、Cw烷氧基或二(Cw烷基)氨基;或 連接于同一苯基的R11和R12或連接于同一苯基的R12和R13-起是-X-(CH 2)r-Y-,其中X是-0-或-C(0)0-，Y是-0-、-N(低級烷基)-或-CF2-,并且r是1至6的整數(shù);或 兩個 R11-起是-O-(CH2)s-O-或O-CH(CH3)-(CH 2)s-CH(CH3)-O-,其中 s是 1 至6 的整數(shù);或 R11和R12或R12和R13連同它們所連接的碳原子一起形成萘基、四氫萘基或二苯并呋喃環(huán)； R14和R15各自獨(dú)立地是烷基、C3-8環(huán)烷基、苯基、萘基或雜芳基，任選被1至7個獨(dú)立地 選自由以下組成的組的取代基取代:烷基、烷氧基、二(烷基)氨基、嗎啉基、苯基、 三(C 1-7烷基）甲硅烷基、C1-7烷氧基羰基、羥基羰基、羥基磺?；?、（CH2) t-OH和(CH2) t-NH2，其 中t是1至6的整數(shù)； 妒6是&-7烷基； 妒7是&-7烷基;并且 R18獨(dú)立地是芳基、雜芳基、C3-8環(huán)烷基或&-7烷基。29. 根據(jù)權(quán)利要求15至17中任一項所述的方法，其中所述手性膦配體(D)選自所述式 (Dl)化合物，其中R11至R 15如權(quán)利要求28中所述。30. 根據(jù)權(quán)利要求15至17以及28至29中任一項所述的方法，其中所述手性膦配體(D)選 自（R)-3，5-Xyl-BINAP、（R)-BINAP、（S)-2-呋喃基-MeOBIPHEP、（S)-BINAP、（S)-BIPHEMP、 (S)-MeOBIPHEP、（S)-pToI-BINAP)、（S)-TMBTP和（S，S)-i Pr-DUPHOS。31. 根據(jù)權(quán)利要求15至17以及28至30中任一項所述的方法，其中所述手性膦配體(D)選 自（S)-BIPHEMP、（S)-BINAP和（S)-MeOBIPHEP。32. 根據(jù)權(quán)利要求15至17以及28至31中任一項所述的方法，其中所述手性膦配體(D)是 ⑶-BINAP033. 根據(jù)權(quán)利要求15至17中任一項所述的方法，其中所述釕絡(luò)合物催化劑選自以下各 項的組： Ru(TFA)2((R)-3,5-Xyl-BINAP)、 Ru(0Ac)2((S)-2-呋喃基-MeOBIPHEP)、 Ru(OAc)2((S)-BINAP)^ [Ru(0Ac)2((S)-BINAP)]A1C13、 Ru(TFA)2((S)-BINAP)、 Ru(TFA) 2((S)-BINAPHANE)、 Ru(TFA)2((S)-BIPHEMP)、 Ru(0Ac)2( (S)-MeOBIPHEP)、 Ru(TFA)2((S)-TMBTP)、 Ru(TFA)2 ((S，S)-iPr-DUPH0S)、 [Ru((R)-BINAP)(pCym)(AN)](BF4)2、 [RuBr((S)-BINAP) (C6H6) ]Br^ [RuCl ((S)-BINAP) (C6H6) ]BF4、 [RuI((S)-BINAP) (C6H6) ]I、 [Ru( (S)-BINAP) (AN) )4] (BF4)2和 RuCl2((S)-pTol-BINAP)(S，S-DPEN)。34. 根據(jù)權(quán)利要求15至17中任一項所述的方法，其中所述釕絡(luò)合物催化劑是Ru(TFA)2 ((S)-BINAP)〇35. 根據(jù)權(quán)利要求15至34中任一項所述的方法，其中在選自醇、烴、氯化烴、氟化和多氟 化脂族或芳族烴、超臨界或液體二氧化碳、THF、水或其混合物的溶劑中進(jìn)行式（IV)化合物 的所述不對稱氫化。36. 根據(jù)權(quán)利要求15至35中任一項所述的方法，其中在選自以下各項的列表的溶劑中 進(jìn)行式（IV)化合物的所述不對稱氫化:1^0!^切!1、^"!^切!1/環(huán)戊基甲基醚4切!1/ CH2Cl 2、EtOH/EtOAc、EtOH/THF、Et0H/H20、CH2Cl 2和 THF。37. 根據(jù)權(quán)利要求15至36中任一項所述的方法，其中在乙醇(EtOH)中進(jìn)行式（IV)化合 物的所述不對稱氫化。38. 根據(jù)權(quán)利要求15至37中任一項所述的方法，其中式（IV)化合物的所述不對稱氫化 還包括一種或多種選自 LiBF4、LiPF6、Li03SCF3、NaCl、NaBr、NaI、KCl、KBr、KI、LiCl、LiBr、 LiI、HBF4、HC1、HBr、H2S〇4 和 CH3SO3H 的列表的添加劑。39. 根據(jù)權(quán)利要求15至38中任一項所述的方法，其中在1至150巴的氫氣壓力下進(jìn)行式 (IV)化合物的所述不對稱氫化。40. 根據(jù)權(quán)利要求15至39中任一項所述的方法，其中在10至30巴的氫氣壓力下進(jìn)行式 (IV)化合物的所述不對稱氫化。41. 根據(jù)權(quán)利要求15至40中任一項所述的方法，其中在5至100'000的底物/催化劑比率 (S/C)下進(jìn)行式(IV)化合物的所述不對稱氫化。42. 根據(jù)權(quán)利要求15至41中任一項所述的方法，其中在100至15 ' OOO的底物/催化劑比 率(S/C)下進(jìn)行式(IV)化合物的所述不對稱氫化。43. 根據(jù)權(quán)利要求15至42中任一項所述的方法，隨后通過向氫化反應(yīng)混合物中添加式 Ch烷基-OM金屬醇鹽的醇溶液來形成鹽，其中R1和M如權(quán)利要求1至4所定義。44. 根據(jù)任何權(quán)利要求43所述的方法，其中鹽形成步驟中采用的所述金屬醇鹽是MeOM、 EtOM、iPrOM、nPrOM、nBuOM、iBuOM或tBuOM。45. 根據(jù)權(quán)利要求43或44中任一項所述的方法，其中鹽形成步驟中采用的所述金屬醇 鹽是EtOM。46. 根據(jù)權(quán)利要求43至45中任一項所述的方法，其中在鹽形成步驟中用作溶劑的醇是 Cl - 7 烷基-OH，更特別是 MeOH、EtOH、iPrOH、nPrOH、nBuOH、iBuOH 或 tBuOH。47. 根據(jù)權(quán)利要求43至46中任一項所述的方法，其中在鹽形成步驟中用作溶劑的醇是 EtOH048. 根據(jù)權(quán)利要求1至14中任一項所述的方法，其還包括用于制造式（III)化合物的方 法其包括由氧化還原酶催化的伸式(V)化合物不對稱還原，其中R2如權(quán)利要求1和3中任一項所定義。49. 一種用于制造式(III)化合物的方法其包括由氧化松?！?隹tLtW TiiXVA V，丨七婦'物不對稱還原，其中R2如權(quán)利要求1和3中任一項所定義。50. 根據(jù)權(quán)利要求48或49中任一項所述的方法，其中所述氧化還原酶以至少95%非對 映體過量(de)的非對映體選擇性催化式(V)化合物不對稱還原成式(I II)化合物。51. 根據(jù)權(quán)利要求48至50中任一項所述的方法，其中所述氧化還原酶以至少至少98 % de的非對映體選擇性催化式(V)化合物不對稱還原成式(I II)化合物。52. 根據(jù)權(quán)利要求48至51中任一項所述的方法，其中式(V)化合物至式（III)化合物的 所述不對稱還原由氧化還原酶在輔因子存在下催化。53. 根據(jù)任何權(quán)利要求52所述的方法，在式(V)化合物至式（III)化合物的所述不對稱 還原中被氧化的所述輔因子是NADH或NADPH。54. 根據(jù)權(quán)利要求52至53中任一項所述的方法，其中所述輔因子通過使用葡萄糖和葡 萄糖脫氫酶作為共底物進(jìn)行酶偶聯(lián)輔因子再生加以原位再生。55. 根據(jù)權(quán)利要求52至53中任一項所述的方法，其中所述輔因子通過使用仲醇作為共 底物進(jìn)行底物偶聯(lián)輔因子再生加以原位再生。56. 根據(jù)權(quán)利要求55所述的方法，其中作為共底物用于底物偶聯(lián)再生的所述仲醇選自 2_丙醇、2-丁醇、丁-1.4-二醇、2-戊醇、戊-1，5-二醇、4-甲基-2-戊醇、2-己醇、己-1，5-二 醇、2-庚醇或2-辛醇。57. 根據(jù)權(quán)利要求55至56中任一項所述的方法，其中作為共底物用于所述底物偶聯(lián)輔 因子再生的所述仲醇是2-丙醇。58. 根據(jù)權(quán)利要求48至57中任一項所述的方法，其中所述氧化還原酶是選自以下各項 的列表的非對映體選擇性NADPH依賴性氧化還原酶：KRED-NADPH-111、KRED-NADPH-112、 KRED-NADPH-113、KRED-NADPH-114、KRED-NADPH-115、KRED-NADPH-121、KRED-NADPH-12 3、 KRED-NADPH-145、KRED-NADPH-155、A231、KRED-NADPH-136、KRED-X1、KRED-X2、KRED-X1-P1B06、KRED-X1.I-PlFOl、KRED-X1.1-P1H10、KRED-X1.I-PlGll、KRED-X1.1-P1C04、KRED-Xl·I-PlCll和KRED-Xl·1-P1C08。59. 根據(jù)權(quán)利要求48至58中任一項所述的方法，其中所述氧化還原酶是選自以下各項 的列表的非對映體選擇性NADPH依賴性氧化還原酶:KRED-Xl、KRED-X2、KRED-X1-P1B06、 KRED-Xl.1-P1F01、KRED-X1.1-P1H10、KRED-X1.I-PlGll、KRED-X1.1-P1C04、KRED-X1.1-PlCll和KRED-Xl·1-P1C08。60. 根據(jù)權(quán)利要求48至59中任一項所述的方法，其中所述氧化還原酶是選自以下各項 的列表的非對映體選擇性NADPH依賴性氧化還原酶:KRED-Xl、KRED-X2、KRED-X1-P1B06、 KRED-Xl·1-P1C04和KRED-Xl·1-P1F01。61. 根據(jù)權(quán)利要求48至60中任一項所述的方法，其中所述氧化還原酶是選自以下各項 的列表的非對映體選擇性NADPH依賴性氧化還原酶:KRED-Xl. 1-P1C04和KRED-Xl. 1-P1F01。62. 根據(jù)權(quán)利要求48至61中任一項所述的方法，其中在水性介質(zhì)中在一種或多種有機(jī) 共溶劑存在下進(jìn)行式(V)化合物至式(III)化合物的所述不對稱還原。63. 根據(jù)權(quán)利要求62所述的方法，其中所述有機(jī)共溶劑以1至50V %的總濃度存在。64. 根據(jù)權(quán)利要求62所述的方法，所述有機(jī)共溶劑以5至30V%的總濃度存在。65. 根據(jù)權(quán)利要求48至64中任一項所述的方法，其中所述有機(jī)共溶劑選自以下各項的 列表:甘油、2-丙醇、乙醚、叔丁基甲基醚、二異丙基醚、二丁醚、甲基四氫呋喃、乙酸乙酯、乙 酸丁酯、甲苯、庚烷、己烷、環(huán)己烯及其混合物。66. 根據(jù)權(quán)利要求48至65中任一項所述的方法，其中所述有機(jī)共溶劑是2-丙醇。67. 根據(jù)權(quán)利要求48至61中任一項所述的方法，其中在緩沖劑水溶液中進(jìn)行式(V)化合 物至式(I II)化合物的所述不對稱還原。68. 根據(jù)任何權(quán)利要求67所述的方法，其中所述緩沖劑是2-(N-嗎啉代）乙烷磺酸(MES) 或磷酸二氫鉀(PBS)。69. 根據(jù)權(quán)利要求50至68中任一項所述的方法，隨后通過萃取或通過過濾進(jìn)行處理。70. 根據(jù)權(quán)利要求1至14中任一項所述的方法，其還包括用于制造式(VI)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的方法，其中將式(I)化合物脫保護(hù)，其中R1如權(quán)利要求1至2中任一項所定義。71. 根據(jù)權(quán)利要求70所述的方法，其包括以下反應(yīng)步驟： i)在溶劑中在酸性條件下將所述式(I)化合物脫保護(hù)； i i)使用于溶劑中的堿調(diào)節(jié)pH; iii)任選使所述式(VI)化合物結(jié)晶。72. 根據(jù)權(quán)利要求70或71中任一項所述的方法，其中使用鹽酸、硫酸、三氟乙酸或氫溴 酸進(jìn)行步驟i)中的所述脫保護(hù)。73. 根據(jù)權(quán)利要求70至72中任一項所述的方法，其中使用鹽酸進(jìn)行步驟i)中的所述脫 保護(hù)。74. 根據(jù)權(quán)利要求70至73中任一項所述的方法，其中用于步驟i)中脫保護(hù)的所述溶劑 選自正丙醇、異丙醇以及正丙醇/水的1:1混合物。75. 根據(jù)權(quán)利要求70至74中任一項所述的方法，其中步驟i i)中的所述堿是NaOH或氨。76. 根據(jù)權(quán)利要求70至75中任一項所述的方法，其中步驟ii)中的所述溶劑選自正丙 醇、異丙醇以及正丙醇/水的1:1混合物。77. 根據(jù)權(quán)利要求70至76中任一項所述的方法，其中通過將溶劑轉(zhuǎn)換為適于結(jié)晶所述 式(VI)化合物的結(jié)晶溶劑來進(jìn)行步驟iii)中的所述結(jié)晶。78. 根據(jù)權(quán)利要求77所述的方法，其中步驟iii)中的所述結(jié)晶溶劑選自甲苯、庚烷、四 氫呋喃、2-丙酮、2-丁酮、乙二醇二甲基醚、乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸異丙酯及其混合物。79. 根據(jù)權(quán)利要求77所述的方法，其中步驟iii)中的所述結(jié)晶溶劑是乙酸乙酯。80. 各種化合物，其可通過根據(jù)權(quán)利要求1至79中任一項所述的方法獲得。81. 各種藥物組合物，其包含可通過根據(jù)權(quán)利要求1至79中任一項所述的方法獲得的化 合物。82. -種式(II)化合物 其中R1和M如權(quán)利要求1至5中任一項所定義。83. 根據(jù)權(quán)利要求82所述的式（II)化合物，其是(S)-3-(叔丁氧基羰基(異丙基)氨基)-2-(4_氯苯基)丙酸鈉。84. 根據(jù)權(quán)利要求70所述的式(VI)化合物，其包含Ippb與IOOppm之間的所述式（I)化合 物，其中R1如權(quán)利要求1或2中任一項所定義。85. 根據(jù)權(quán)利要求70所述的式(VI)化合物，其包含Ippb與Ippm之間的所述式（I)化合 物，其中R1如權(quán)利要求1或2中任一項所定義。86. -種藥物組合物，其包含根據(jù)權(quán)利要求84或85中任一項所述的式(VI)化合物。87. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的式（I)化合物，其包含Ippb與IOOppm之間的所述式（II)化合 物，其中R1和M如權(quán)利要求1至5中任一項所定義。88. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的式（I)化合物，其包含Ippb與Ippm之間的所述式(II)化合物， 其中R1和M如權(quán)利要求1至5中任一項所定義。89. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的式（I)化合物，其包含Ippb與IOOppm之間的所述式（III)化合 物，其中R1和R 2如權(quán)利要求1至3中任一項所定義。90. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的式（I)化合物，其包含Ippb與Ippm之間的所述式（III)化合 物，其中R1和R 2如權(quán)利要求1至3中任一項所定義。91. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的式（I)化合物，其包含Ippb與IOOppm之間的所述式（II)化合 物和Ippb與IOOppm之間的所述式(III)化合物，其中R 1、R2和M如權(quán)利要求1至5中任一項所定 義。92. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的式（I)化合物，其包含Ippb與Ippm之間的所述式（II)化合物 和I ppb與I ppm之間的所述式(III)化合物，其中R1、R2和M如權(quán)利要求1至5中任一項所定義。93. 如本文之前所述的本發(fā)明。
【文檔編號】A61K31/517GK105899492SQ201480072954
【公開日】2016年8月24日
【申請日】2014年11月13日
【發(fā)明人】H·伊丁, R·倫茨, M·斯卡洛內(nèi), F·戈瑟蘭
【申請人】豪夫邁·羅氏有限公司, 基因泰克公司