用2倍柱體積的蒸餾水洗掉蛋白和糖類(lèi)大分子雜質(zhì)，再用70%的乙醇以最大流速洗脫，收集2倍柱體積的洗脫液，
步驟二，釤-木犀草素二元配合物的合成
取步驟一中的木犀草素加入二甲亞砜完全溶解，配制成0.025mol/L木犀草素的溶液，將醋酸釤加入二甲亞砜完全溶解配制成0.025mol/L的醋酸釤的溶液，在不斷攪拌下將1ml木犀草素溶液滴加到500ml的醋酸釤溶液中，得混合溶液一，在55°C下攪拌溶解至混合溶液一完全澄清；用5%Na0H溶液調(diào)節(jié)混合溶液一的pH值至8，再升高溫度至75°C，水浴回流磁力攪拌4h，產(chǎn)生沉淀，靜置過(guò)濾，沉淀用乙醇洗滌6，將沉淀于45°C真空干燥得固體一，將固體一分別用丙酮和冰醋酸進(jìn)行重結(jié)晶得到釤-木犀草素二元配合物晶體；
步驟三，釤-木犀草素-咪唑三元配合物的合成
先準(zhǔn)確稱(chēng)取步驟二合成的釤-木犀草素二元配合物晶體，溶于二甲亞砜中配制成
0.1moI/L的溶液A，溶液A在65°C水浴攪拌回流3h后，將咪唑加入二甲亞砜中配成0.lmol/L的溶液B，將10ml溶液B加入到10ml溶液A，繼續(xù)攪拌回流，反應(yīng)6h，后轉(zhuǎn)移至水浴中緩慢蒸發(fā)濃縮、真空干燥后得到釤-木犀草素-咪唑三元配合物。
[0027]實(shí)驗(yàn)表明，當(dāng)選擇天然黃酮木犀草素作為配體，即可中和咪唑雜環(huán)N的堿性，又未破壞咪唑五元雜環(huán)殺菌抗炎作用，同時(shí)還增強(qiáng)了稀土與咪唑殺菌的協(xié)同作用。以P(配合物)=10 g*L—1用藥，24 h后釤-木犀草素-咪唑三元配合物對(duì)大腸桿菌的菌落抑制率均為100%，48 h后有極少的菌落生成，但菌落抑制率仍可達(dá)95 %，而對(duì)比實(shí)驗(yàn)顯示，相同濃度時(shí)，24 h后釤-木犀草素及釤-咪唑二元配合物對(duì)大腸桿菌的菌落抑制率分別為79.3%和69.2%，單獨(dú)咪唑?qū)Υ竽c桿菌的菌落抑制率為65.3%。說(shuō)明由于協(xié)同效應(yīng)，釤-木犀草素-咪唑三元配合物表現(xiàn)出優(yōu)良的抑菌活性。
[0028]經(jīng)試驗(yàn)證明步驟二和步驟三中的有機(jī)溶劑為四氫呋喃、甲醇、乙醇和二甲亞砜中的一種或多種的混合物時(shí)都可以。
[0029]經(jīng)試驗(yàn)證明稀土-木犀草素-咪唑三元配合物中稀土離子:木犀草素:咪唑的摩爾比為1-5:0.1-1:1-3時(shí)其應(yīng)用時(shí)效果較好。
[0030]所述稀土離子為L(zhǎng)a、Ce、Pr、Nd、Sm、Eu、Gd、Tb、Dy、Ho、Er、Yb、Y中的任意一種的三價(jià)離子。
[0031]以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種稀土-木犀草素-咪唑三元配合物，其特征在于，所述配合物通式為REx-(LUT)Y-(nOz，通式中RE為稀土離子，LUT為第一配體代表木犀草素，頂為第二配體代表咪唑，其中，X=卜5;Υ=0.Η ;Ζ=卜3ο2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的稀土-木犀草素-咪唑三元配合物，其特征在于，所述RE為L(zhǎng)a、Ce、Pr、Nd、Sm、Eu、Gd、Tb、Dy、Ho、Er、Yb、Y中的任意一種三價(jià)離子。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的稀土-木犀草素-咪唑三元配合物，其特征在于，所述三價(jià)離子，由!^、06、？1'、則、3111411、6(1、1'13、07、!10 41'、￥13、￥的三價(jià)離子的醋酸鹽提供。4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的稀土-木犀草素-咪唑三元配合物，其特征在于，所述通式中的第一配體LUT木犀草素由金銀花的葉中提取獲得。5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一所述的稀土-木犀草素-咪唑三元配合物的制備方法，其特征在于，包括下列步驟: 步驟一，木犀草素的提取 取金銀花葉干粉，用金銀花葉干粉量15-25倍質(zhì)量的醇體積含量為50-60%的乙醇超聲浸提黃酮后，將提取液濃縮成膏，然后按照金銀花葉干粉和聚酰胺粉的質(zhì)量比為10-20:1的比例混入80-100目的聚酰胺粉，得混合物一，使混合物一保持松散，不結(jié)塊，將此混合物一放在索氏提取器中用石油醚回流脫色5-15次后取出，揮干石油醚，即得黃酮粗品拌料，然后將黃酮粗品拌料經(jīng)過(guò)大孔樹(shù)脂柱進(jìn)一步分離富集得到洗脫液，洗脫液濃縮成膏后得到木犀草素備用； 步驟二，稀土 -木犀草素二元配合物的合成 取步驟一中的木犀草素加入有機(jī)溶劑，木犀草素完全溶解配制成木犀草素的溶液，將稀土醋酸鹽加入有機(jī)溶劑，完全溶解后配制成稀土醋酸鹽的溶液，在不斷攪拌下將稀土醋酸鹽的溶液與木犀草素的溶液混合，得混合溶液一，所述混合溶液中稀土離子:木犀草素摩爾比為1-5:0.1-1，在55-65°C下攪拌溶解至混合溶液一完全澄清；用5_10%Na0H溶液調(diào)節(jié)混合溶液一的pH值至8-10，再升高溫度至75-85°C，水浴回流磁力攪拌4_5h，產(chǎn)生沉淀，靜置過(guò)濾，沉淀用乙醇洗滌數(shù)次，將沉淀于35-45°C真空干燥得固體一，將固體一分別用丙酮和冰醋酸進(jìn)行重結(jié)晶得到稀土-木犀草素二元配合物晶體，所述稀土-木犀草素二元配合物晶體中稀土離子:木犀草素摩爾比為1-5:0.1 -1; 步驟三，稀土 -木犀草素-咪唑三元配合物的合成 先準(zhǔn)確稱(chēng)取步驟二合成的稀土-木犀草素二元配合物晶體，完全溶于有機(jī)溶劑中配制成溶液A，將咪唑加入有機(jī)溶劑中完全溶解配成溶液B，取溶液A在55-65 °C水浴攪拌回流2-3h后，取溶液B加入到溶液A，繼續(xù)攪拌回流，反應(yīng)5-6h，后轉(zhuǎn)移至水浴中緩慢蒸發(fā)濃縮、真空干燥后得到稀土-木犀草素-咪唑三元配合物，所述稀土-木犀草素-咪唑三元配合物中稀土離子:木犀草素:咪唑的摩爾比為1-5:0.1-1:1-3。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的稀土-木犀草素-咪唑三元配合物的制備方法，其特征在于，所述大孔樹(shù)脂柱中黃酮粗品拌料與大孔樹(shù)脂質(zhì)量比為1:3-10。7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的稀土-木犀草素-咪唑三元配合物的制備方法，其特征在于，所述分離富集包括以下步驟:先用2-5倍柱體積的蒸餾水洗掉蛋白和糖類(lèi)大分子雜質(zhì)，再用70%的乙醇洗脫，收集2-8倍柱體積的洗脫液。8.根據(jù)權(quán)利要求5-7任一所述的稀土-木犀草素-咪唑三元配合物的制備方法，其特征在于，所述步驟二和所述步驟三中的有機(jī)溶劑為四氫呋喃、甲醇、乙醇和二甲亞砜中的一種或多種的混合物。9.根據(jù)權(quán)利要求6任一所述的稀土-木犀草素-咪唑三元配合物的制備方法，其特征在于，所述步驟一中大孔樹(shù)脂柱的柱徑與柱長(zhǎng)比為1:3-8。10.—種權(quán)利要求1-9中任一所述的稀土-木犀草素-咪唑三元配合物的應(yīng)用，其特征在于，所述稀土-木犀草素-咪唑三元配合物用于抑菌劑、抗炎藥和抗氧化劑。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種稀土-木犀草素-咪唑三元配合物及其制備方法，配合物通式為REX-(LUT)Y-(IM)Z，通式中RE為稀土離子，LUT為第一配體代表木犀草素，IM為第二配體代表咪唑，其中，X=1-5；Y=0.1-1；Z=1-3。本發(fā)明的有益效果是：該三元配合物表現(xiàn)出優(yōu)良的抗炎、抗菌、抗癌、抗氧化等生物活性，與稀土離子、稀土氧化物、稀土-木犀草素二元配合物相比，由于增加了咪唑作為配體，顯著提高了抗菌活性，并且能避免直接利用稀土離子或稀土氧化物對(duì)生物體或細(xì)胞的氧化損害作用，提高藥物的脂溶性，從而促進(jìn)細(xì)胞對(duì)藥物的吸收，降低細(xì)胞毒性，提高藥物療效。三元配合物表現(xiàn)出優(yōu)良的生物活性和較小的細(xì)胞毒性。
【IPC分類(lèi)】A61P31/04, A61P29/00, A61P39/06, C07F5/00
【公開(kāi)號(hào)】CN105622655
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610021931
【發(fā)明人】郭紹芬
【申請(qǐng)人】臨沂大學(xué)
【公開(kāi)日】2016年6月1日
【申請(qǐng)日】2016年1月14日