啶-3-甲酰胺
[0066] 5-(3-甲氧基苯基)-1，7_萘啶-3-甲酰胺
[0067] 5-(3-(三氟甲氧基)苯基)_1，7-萘啶-3-甲酰胺
[0068] 3-氨基甲?；?1，7-萘啶-5-甲酸甲酯
[0069] 5-( 3，6_ 二氫-2H-吡喃-4-基)-1，7-萘啶-3-甲酰胺
[0070] 5-(4,4_二氟哌啶-1-基)-1，7_萘啶-3-甲酰胺
[0071] 5-(6-氯吡啶-3-基)-1，7-萘啶-3_甲酰胺，或
[0072] 5-( 2，4-二氯苯基)-1，7-萘啶-3-甲酰胺。
[0073] 不論討論的術(shù)語(yǔ)單獨(dú)或組合出現(xiàn)，以下用于本說明書的通用術(shù)語(yǔ)的定義都適用。
[0074] 如本文中使用的，術(shù)語(yǔ)"低級(jí)烷基"表示包括具有1-4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈碳鏈 的飽和的，即脂族的烴基團(tuán)。"烷基"的實(shí)例是甲基，乙基，正丙基，和異丙基。
[0075]術(shù)語(yǔ)"烷氧基"表示基團(tuán)-0-R'，其中R'是如上所定義的低級(jí)烷基。
[0076] 術(shù)語(yǔ)"被鹵素取代的低級(jí)烷基"表示如上所定義的低級(jí)烷基基團(tuán)，其中至少一個(gè)氫 原子被鹵素原子替代。優(yōu)選的基團(tuán)是CF3。
[0077] 術(shù)語(yǔ)"鹵素取代的低級(jí)烷氧基"表示如上所定義的低級(jí)烷氧基，其中至少一個(gè)氫原 子被鹵素原子替代。優(yōu)選的基團(tuán)是〇CF3。
[0078]術(shù)語(yǔ)"鹵素"表示氯、溴、氟或碘。
[0079]術(shù)語(yǔ)〃藥用鹽〃或"藥用酸加成鹽"包括與無機(jī)和有機(jī)酸，如鹽酸，硝酸，硫酸，磷酸， 檸檬酸，甲酸，富馬酸，馬來酸，乙酸，琥珀酸，酒石酸，甲磺酸，對(duì)苯甲磺酸等的鹽。
[0080] 本發(fā)明的新的式I化合物及其藥用鹽可以通過本領(lǐng)域已知的方法制備，例如，通過 下述方法制備，所述方法包括
[0081] a)將式1的化合物
[0083]與式2的化合物反應(yīng)
[0084] NHR2R3 2
[0085]形成式I的化合物
[0087]并且，如果需要，將獲得的化合物轉(zhuǎn)化為藥用酸加成鹽，或 [0088] b)將式3的化合物
[0090]與式4的化合物反應(yīng)
[0092]形成式I的化合物
[0094] 并且，如果需要，將獲得的化合物轉(zhuǎn)化為藥用酸加成鹽。
[0095] 本發(fā)明式I的化合物的制備可以以順序或會(huì)聚的合成途徑進(jìn)行。本發(fā)明化合物的 合成顯示在以下方案1中。進(jìn)行所述反應(yīng)和純化產(chǎn)生的產(chǎn)物的技術(shù)對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員已 知。除非有相反說明，以下方法描述中使用的取代基和標(biāo)記具有上文中給出的意義。
[0096] 更詳細(xì)地，可以通過下文給出的方法，通過實(shí)施例中給出的方法或通過類似方法 制造式I的化合物。各個(gè)反應(yīng)步驟的適當(dāng)反應(yīng)條件是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。反應(yīng)順序不限 于方案1中顯示的順序，而是依賴于起始材料和其相應(yīng)反應(yīng)性，反應(yīng)步驟的順序可以隨意改 變。起始材料是可商購(gòu)的或可以通過與下文給出的方法類似的方法，通過說明書引用的參 考文獻(xiàn)中或?qū)嵤├忻枋龅姆椒ǎ蛲ㄟ^本領(lǐng)域已知的方法制備。
[0097] 方案 1
[0099] 將式5的5-溴-1，7-萘啶-3-甲酸，N，N-二異丙基乙胺和0-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N'，N'_四甲基脲鐵六氟磷酸鹽(HATU)在二甲基甲酰胺中的混合物在室溫?cái)嚢?0 分鐘。加入式2的相應(yīng)胺并繼續(xù)攪拌超過兩天，獲得式3的化合物。
[0100] 此外，向式3的5-溴-1，7-萘啶3-甲酰胺和式4的硼酸和碳酸銫在二[」惡烷和水中的 懸浮液中，加入雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)。將混合物在80°C攪拌3小時(shí)。通過蒸 餾去除溶劑并色譜分離，獲得式I的化合物。
[0101] 化合物的分離和純化
[0102]如果需要，本文中描述的化合物和中間體的分離和純化可以通過任意合適的分離 或純化方法進(jìn)行，所述方法諸如，例如，過濾，萃取，結(jié)晶，柱層析，薄層層析，厚層層析，制備 型低或高壓液相色譜或這些方法的組合。可以通過參考下文的制備和實(shí)施例獲得適當(dāng)?shù)姆?離和離析方法的具體說明。然而，當(dāng)然可以使用其它相當(dāng)?shù)姆蛛x或離析方法?？梢允褂檬中?HPLC分離式I的手性化合物的外消旋混合物。
[0103] 式I的化合物的鹽
[0104] 式I的化合物是堿性的并且可以被轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄳?yīng)的酸加成鹽。通過用至少化學(xué)計(jì)量 的量的適當(dāng)酸諸如鹽酸，氫溴酸，硫酸，硝酸，磷酸等，和有機(jī)酸諸如乙酸，丙酸，乙醇酸，丙 酮酸，草酸，蘋果酸，丙二酸，琥珀酸，馬來酸，富馬酸，酒石酸，檸檬酸，苯甲酸，肉桂酸，扁桃 酸，甲磺酸，乙磺酸，對(duì)甲苯磺酸，水楊酸等處理實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)變。典型地，將游離堿溶解在惰性有 機(jī)溶劑諸如二乙醚，乙酸乙酯，氯仿，乙醇或甲醇等中，并且將酸加入類似的溶劑中。將溫度 維持在0°C和50°C之間。產(chǎn)生的鹽自發(fā)沉淀或可以用較小極性的溶劑帶出溶液。
[0105] 式I的堿性化合物的酸加成鹽可以通過用至少化學(xué)計(jì)量當(dāng)量的適當(dāng)堿諸如氫氧化 鈉或氫氧化鉀，碳酸鉀，碳酸氫鈉，氨水等處理轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄳?yīng)的游離堿。
[0106] 式I的化合物和其藥用加成鹽具有有益的藥學(xué)性質(zhì)。具體地，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化 合物具有作為神經(jīng)源性劑的活性。
[0107] 根據(jù)下文給出的測(cè)試研究所述化合物。
[0108] 神經(jīng)發(fā)生測(cè)定
[0109] 神經(jīng)干細(xì)胞增殖測(cè)定
[0110] 小分子的神經(jīng)源性性質(zhì)基于通過之前描述的雙重smad抑制衍生的人胚胎干細(xì)胞 衍生的神經(jīng)干細(xì)胞(NSC)的增殖而確定（Chambers，S.M.，等人，Highly efficient neural conversion ofhuman ES and iPS cells by dual inhibition of SMAD signaling， Nature biotechnology,2009.27(3)：p.275-80.)
[0111] 4天的孵育期之后，通過基于ATP水平的細(xì)胞增加(pr〇mega:CdrriterG1o?)測(cè)量 化合物響應(yīng)。
[0112] 將NSC解凍并擴(kuò)充3代。在第14天，將NSC以38μ1培養(yǎng)基體積中21'000個(gè)細(xì)胞/cm 2的 細(xì)胞密度接種入Polyorni thin/Laminin包被的384孔板中。
[0113] 細(xì)胞接種后4小時(shí)，以2μ 1的體積添加化合物溶液。將化合物的儲(chǔ)液(水，5 %DMSO) 稀釋以獲得劑量響應(yīng)（11個(gè)點(diǎn)，稀釋因子是2)，范圍從8μΜ至8ηΜ。運(yùn)行對(duì)照以不斷確定細(xì)胞 的神經(jīng)源性性質(zhì)：
[0114] 陰性（中性)對(duì)照是細(xì)胞培養(yǎng)基(最終DMSO濃度:0.25 % )。
[0115] 陽(yáng)性對(duì)照是：
[0116] 1.細(xì)胞培養(yǎng)基+100ng/ml FGF2(最終DMSO濃度:0.1%)
[0117] 2.細(xì)胞培養(yǎng)基+20ng/ml EGF(最終DMSO濃度:0.1%)
[0118] 3.細(xì)胞培養(yǎng)基+100ng/ml Wnt3a(最終DMSO濃度:0.1%)
[0119] 在37°C，5%C02孵育4天之后，定量每孔的ATP量。ATP濃度與細(xì)胞數(shù)量成比例。通過 使用PromegaCeUTite.rG.lo_?試劑盒定量ATP。Cell.TiterGlo?試劑含有細(xì)胞溶解緩沖液， 熱穩(wěn)定熒光素酶(UltraGlo?重組熒光素酶），鎂和熒光素。熒光素與ATP反應(yīng)產(chǎn)生氧化熒光 素，AMP和光。發(fā)光信號(hào)與ATP含量成比例。
[0120] 對(duì)于各個(gè)測(cè)定板，通過采用16個(gè)陰性對(duì)照孔的平均確定陰性（中性)對(duì)照值。對(duì)于 各個(gè)化合物，將神經(jīng)源性化合物響應(yīng)計(jì)算為(化合物/陰性對(duì)照)*1〇〇。
[0121 ]對(duì)于各個(gè)測(cè)試化合物，確定來自劑量響應(yīng)曲線的EC15q值。EC15q是達(dá)到對(duì)照（100 % ) 的150 %活性的化合物濃度。
[0122] 優(yōu)選的化合物顯示在<2.5μΜ的范圍內(nèi)的Ε&5〇(μΜ)，如以下表1所示。
[0123] 藍(lán)
[0124] 新化合物的實(shí)例和EC15q數(shù)據(jù)的列表
[0125]
[0130]式I的化合物和式I的化合物的藥用鹽可以用作藥物，例如藥物制劑形式的藥物。 所述藥物制劑可以口服施用，例如以片劑、包衣片劑、糖衣丸(dragges)、硬和軟明膠膠囊、 溶液、乳液或混懸劑的形式施用。然而，施用還可以經(jīng)直腸(例如以栓劑的形式)或經(jīng)腸胃外 (例如以注射液的形式)實(shí)現(xiàn)。
[0131]式I的化合物可以用藥學(xué)上惰性的、無機(jī)或有機(jī)載體處理以用于生產(chǎn)藥物制劑。例 如，可以使用乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸或其鹽等作為此種載體用于片劑、包 衣片劑、糖衣丸和硬明膠膠囊。用于軟明膠膠囊的合適的載體是例如，植物油、蠟、脂肪、半 固體和液體多元醇等。然而，根據(jù)活性物質(zhì)的性質(zhì)，在軟明膠膠囊的情形下，通常不需要載 體。用于生產(chǎn)溶液和糖漿的適當(dāng)載體是，例如，水、多元醇、甘油、植物油等。用于栓劑的適當(dāng) 載體是例如，天然或硬化油、蠟、脂肪、半液體或液體多元醇等。
[0132] 此外，藥物制劑可以含有防腐劑、增溶劑、穩(wěn)定劑、濕潤(rùn)劑、乳化劑、甜味劑、著色 劑、香料、改變滲透壓的鹽、緩沖劑、掩蔽劑或抗氧化劑。它們還可以含有其它治療上有價(jià)值 的物質(zhì)。
[0133] 含有式I的化合物或其藥用鹽和治療上惰性的載體的藥物也是本發(fā)明的目的，其 制備方法也是本發(fā)明的目的，所述方法包括將一種或多種式I的化合物和/或藥用酸加成鹽 和(如果需要)一種或多種其它治療上有價(jià)值的物質(zhì)與一種或多種治療惰性載體一起制成 蓋倫制劑施用形式。
[0134] 根據(jù)本發(fā)明的最優(yōu)選的適應(yīng)證是包括中樞神經(jīng)系統(tǒng)的病癥的那些，例如治療或預(yù) 防抑郁、精神病、帕金森病、焦慮、注意力缺陷多動(dòng)癥(ADHD)和糖尿病。
[0135] 劑量可以在寬范圍內(nèi)改變并且當(dāng)然將適于各個(gè)特定案例中的個(gè)體需求。在口服給 藥的情況下，成人的劑量可以在約〇. Olmg至約1000 mg/天的通式I的化合物或相應(yīng)量的其藥 用鹽的范圍內(nèi)變化。每日劑量可以作為單劑或以分開的多劑施用并且，此外，當(dāng)發(fā)現(xiàn)必要 時(shí)，也可以超過所述上限。 片劑制劑(濕法制粒） 項(xiàng)問 成分 mg/片 5 mg 25 mg 100 mg 500 mg TL 式I的化合物 5 25 100 500
[0136] 2、 乳糖無水 DTG 125 105 30 150 3, Sta-Rx 1500 6 6 6 30 4, 微晶纖維素 30 30 10 150 5, 硬脂酸鎂 I I I 1 總量 167 167 167 831
[0137] 制造過程
[0138] 1.混合項(xiàng)目1、2、3和4并用純化的水制粒。
[0139] 2.在50°C干燥顆粒。
[0140] 3.將顆粒通過合適的研磨裝置。
[0141] 4.添加項(xiàng)目5并混合三分鐘;在合適的壓力機(jī)上壓制。 膠囊制劑 項(xiàng)目 成分 mg/膠囊 5 mg 25 mg 100 mg 500 mg I. 式I的化合物 5 25 100 500
[0142] 2. 含水乳糖 15:9 123 148 - 3. 玉米淀粉 25 35 40 70 4. 滑石 10 15 10 25 5. 硬脂酸鎂 12 2 5 總量 200 200 300 600
[0143] 制造過程
[0144] 1.在適當(dāng)?shù)幕旌掀髦谢旌?、2和3項(xiàng)達(dá)30分鐘。
[0145] 2.添加4和5項(xiàng)并混合3分鐘。
[0146] 3.裝入適當(dāng)?shù)哪z囊中。
[0147] 實(shí)施例1
[0148] 5-(4-氯苯基)-1，7-萘啶-3_甲酰胺
[0150] a)5_溴-1，7_萘啶-3-甲酸乙酯
[0152] 將在乙酸（3ml)中的1，7-萘啶-3-甲酸乙酯（CAS949922-44-5,50.0mg，247ymol)和 N-溴琥珀酰亞胺（52.8mg，297μπι〇1)在80°C攪拌1小時(shí)。將粗反應(yīng)混合物在真空中濃縮并通 過色譜法(硅膠，乙酸乙酯/庚烷=30:70至100:0)純化從而產(chǎn)生標(biāo)題化合物，為淺褐色固體 (62mg,89 % )〇MS：m/e = 281.2,283.3[M+H]+ 〇
[0153] b)5-(4_氯苯基)-l，7-萘啶-3-甲酸乙酯
[0155] 向5_溴-1，7_萘啶-3-甲酸乙酯（55mg，196μηιο1)和4_氯苯基硼酸（30 · 6mg，196μ mo I)和碳酸銫(70 · Img，215μηιο I)在二卩惡燒(5ml)和水(0 · 5ml)中的懸浮液加入雙(二苯基膦 基)二茂鐵-二氯化鈀（Π ) (7.16mg，9.78μπι〇1)。將混合物在80°C攪拌2小時(shí)。通過蒸餾除去 溶劑，并且通過色譜法(硅膠，乙酸乙酯/庚烷= 20:80至100:0)和與二乙醚/戊烷一起研磨 產(chǎn)生標(biāo)題化合物，為淺褐色固體(54!^，88%)。]\^:111/6 = 313.4[]\1+!1] +。
[0156] c)5-(4_ 氯苯基)-1，7_ 萘啶-3-甲酸
[0158] 將5-(4-氯苯基)-1，7_萘啶-3-甲酸乙酯（50mg，160ymol)與二噁烷(6ml)合并從而 提供淺褐色溶液。加入在水（Iml)中的氫氧化鋰(4.59mg，192μπι 〇1)并將混合物在室溫?cái)嚢? 小時(shí)。將粗反應(yīng)混合物在真空中濃縮，倒入水（IOml)中，用2Ν鹽酸水溶液酸