（249g，I. 5mol)和無水碳酸鉀（579. 6g，2. Imol)加 入到1250mL丙酮中，控溫25°C以下緩慢滴加1-溴-3-氯丙烷（661.3g，4.2mol)/丙酮 (1200mL)，滴畢，與室溫攪拌過夜。反應完畢后，抽濾，濾餅用IOOmL丙酮淋洗，合并濾餅，將 濾液緩慢倒入15L冰水中，同時劇烈攪拌，析出大量白色固體，抽濾，濾餅于40°C真空干燥 48h，得白色粉末 695. 5g，收率 92. 5%，ESI-MS[M+H] (m/z) :242. 70。
[0109] 步驟B I-(4-(3-氣丙氧基）甲氧基硝基）苯乙麗（III)
[0110] 將中間體II (200g，0. 82mol)加入至CH2Cl2 (5v/w，1000mL)中，充分攪拌使中間體 II全部溶解，然后將反應液冷卻至-20°c后，緩緩滴加發(fā)煙硝酸（130g，2. 06mol )，控制滴加 速度保持反應液溫度低于-KTC，滴加完畢后在-10~-20°C反應2h。反應完畢后，將反應 液倒入冰水中，收集有機層，有機層用飽和食鹽水洗滌，直至水層為中性，無水硫酸鈉干燥。 蒸干溶劑，得黃色固體 210g，收率 89%，ESI-MS [M+H] (m/z) :287. 70。
[0111] 步驟C (E)-1-(4-(3-氯丙氧基）-5-甲氧基-2-硝基苯基）-3-(二甲氨基）丙 基-2-烯-1-酮（IV )
[0112] 將中間體III (200g，0. 695moL)加入至甲苯（5v/w，1000 mL)中，加熱至IKTC使中間 體III完全溶解，再加入N，N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛（DMF-DM) (414. 2g，3. 476mol)，加熱 回流反應16h。反應完畢后，將反應液冷卻至室溫后放入冷阱中攪拌，析出固體，抽濾，濾餅 干燥后得黃色固體 180g，收率 75. 8%，ESI-MS[M+H] (m/z) :342. 77。
[0113] 步驟D 7-(3-氯丙氧基）-6-甲氧基-4 (IH)-喹啉酮（V )
[0114] 將中間體IV(150g，0. 44mol)加至冰乙酸（8v/w，1200mL)中，升溫至40°C，待中間 體IV完全溶解后，分批緩慢加入鐵粉（123. lg，2. 20mol)升溫至80°C機械攪拌反應2h。反應 完畢后，反應液趁熱抽濾，收集濾液，濾液冷卻后有大量固體析出，抽濾，得土黃色固體。將 濾餅溶解在冰乙酸中，于80°C下攪拌約30min，再次趁熱抽濾，收集濾液，濾液冷卻后有固 體析出，抽濾，濾餅水洗至中性，干燥后得固體79g，收率65%，ESI-MS [M+H] (m/z) : 267. 71。
[0115] 步驟E 6-(甲氧基）-7-(3-(1-吡咯烷基）丙氧基）-4 (IH)-喹啉酮（VI)
[0116] 將中間體 V (62g，0. 232mol)、四氫吡咯（98. 6g，l. 38mol)加入至乙腈（620mL)中， 加熱回流8h。反應完畢后，蒸去大部分溶劑，將殘余液置于冷阱中，析出固體，抽濾，乙酸乙 酯洗滌，得固體 68. 5g，收率 95. 5%，ESI-MS [M+H] (m/z) :302. 37。
[0117] 步驟F 4-氯-6-甲氧基-7- (3- (1-吡咯烷基）丙氧基）喹啉（W )
[0118] 將中間體VI(64g，0· 19mol)、三氯氧磷（5v/w，315mL)加入至乙腈（5v/w，315mL) 中，升溫至85°C回流反應6h。反應完畢后，減壓蒸干，得灰色粘稠固體，將其加入到大量的 冰水混合液中，用10%氫氧化鉀溶液調pH至10。用CH 2Cl2萃?。?00mL*3)，收集有機層，無 水硫酸鈉干燥，蒸干溶劑，冷卻得灰白色固體58g，收率87%，ESI-MS [M+H] (m/z) :320. 81。
[0119] 步驟G 4_ (2_氟-4-硝基苯氧基）-6-甲氧基-7-(3_ (1-批略烷基）丙氧基）喹 啉（W)
[0120] 將2-氟-4-硝基苯酉分（36. 73g，0. 234mol)加入至干燥的氯苯（5v/w，250mL)中，加 熱至145°C，向反應液中加入中間體W (62. 5g，0. 2mol)，此溫度下反應20h。反應完畢后， 蒸干溶劑，得灰色固體，將此固體溶于二氯甲烷中，用飽和碳酸鉀溶液洗滌，收集有機層，干 燥，蒸干溶劑，用乙醇重結晶，得固體50. 15g，收率70. 9%，ESI-MS[M+H] (m/z) :441. 45。
[0121] 步驟H 3-氟-4-(6-甲氧基-7-(3-(1-吡咯烷基）丙氧基）喹啉-4-氧基）苯胺 (A)
[0122] 將鐵粉（61. 42g，I. lmol)、6mL 濃鹽酸加入至 90% 乙醇（25v/w，1210. 5mL)中，升溫 至80°C攪拌15min，然后向反應液中分批加入中間體VDK49. 5g，0. llmol)，加畢，回流反應 2h。反應完畢后，趁熱抽濾，收集濾液，蒸干溶劑，得到黃色固體44g，收率95%，ESI-MS [M+H] (m/z):411. 47〇
[0123] 步驟I 4-氯苯肼鹽酸鹽（a)
[0124] 將4-氯苯胺（12. 75g，0.1mol)加至30mL濃鹽酸的水溶液中，冰鹽浴冷卻至-5°C 后，向反應液中滴加15mL亞硝酸鈉（7. 59g，0. llmol)水溶液，控制滴加速度，使反應溫度 在-5~(TC之間。滴畢，于0_5°C反應30min，備用。將亞硫酸鈉（37. 44g，0. 36mol)加入到 IOOmL水中，然后將上述制備的重氮鹽溶液緩慢滴入，保持反應溫度在20°C以下。滴畢，在 室溫條件下反應30min后，升溫至回流反應3h。反應完畢后，停止加熱，靜止冷卻析出固體， 抽濾，濾餅用乙酸乙酯洗滌，干燥，得類白色固體8g，收率85%，ESI-MS [M+H] (m/z) : 179. 05。
[0125] 步驟J 1-(4-氯苯基）-3_甲基-IH-吡唑-5 (4H)-酮（b)
[0126] 將中間體a (5g，0. 028mol)與乙酰乙酸乙酯（4. 3g，0. 034mol)加入到20mL的冰 醋酸中，升溫至90°C反應4h。反應完畢，減壓濃縮冰醋酸后得到油狀物，向油狀物中加入 30mL乙酸乙酯和30mL飽和碳酸氫鈉水溶液萃取分層，水層再次用30mL的乙酸乙酯萃取， 合并有機層溶液再次用50mL飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，50mL飽和食鹽水洗滌有機層，無 水硫酸鈉干燥。抽濾，濃縮得到油狀液體，用乙醚固化，得到淡黃色固體粉末4g，收率85%， ESI-MS[M+H](m/z):208. 64。
[0127] 步驟K (Z)-l_(4-氯苯基）-4-((二甲氨基）亞甲基）-3-甲基-IH-吡 唑-5 (4H)-酮（B)
[0128] 將中間體b (4g，0.019mol)溶于20mL N, N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛（DMF-DMA) 中，在50°C下反應2h。隨著反應的進行會有固體析出，反應完畢。靜止冷卻后析出固體，抽 濾，得到黃色固體 3g，收率 90%，ESI-MS [M+H] (m/z) :263. 72。
[0129] 步驟L (Z)-4-((3-氟-4-(6-甲氧基-7-(3-(1-吡咯烷基）丙氧基）喹啉-4-氧 基）苯基氨基）亞甲基）-1-(4-氯苯基）-3-甲基-IH-吡唑-5 (4H)-酮(實施例1)
[0130] 將中間體 A (0· lg，0. 24mmol)與中間體 B (0· 15g，0. 57mmol)加入到 IOmL 的冰 醋酸溶液中，在90°C下反應3h。反應完畢，減壓濃縮冰醋酸后得到油狀物，向油狀物中加 入20mL二氯甲烷和20mL飽和碳酸氫鈉水溶液萃取分層，水層再次用二氯甲烷萃取，合 并有機層溶液再次用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，飽和食鹽水洗滌有機層，無水硫酸鈉干 燥。抽濾，濃縮得到油狀液體，用色譜柱層析分離純化，得到淡黃色固體粉末〇. 〇8g，收率 75%,ESI-MS[M+H](m/z):630. 11〇
[0131] 按照制備通法，分別制得實施例1 - 74化合物（見表一）。
[0132] 表一：
[0133]
















[0150] 體外抗腫瘤細胞活性
[0151] 對按照本發(fā)明的上式I的含吡唑酮的喹啉類衍生物進行了體外抑制結腸癌細胞 HT-29、肺癌細胞H460、人胃癌細胞MKN-45活性篩選。
[0152] (1)細胞復蘇并傳代2-3次穩(wěn)定后，用胰蛋白酶溶液（0. 25%)使其從培養(yǎng)瓶底部消 化下來。將細胞消化液倒入離心管中后，之后加入培養(yǎng)液以終止消化。將離心管在SOOr/ min下離心10min，棄去上清液后加入5mL培養(yǎng)液，吹打混勻細胞，吸取10 μ L細胞混懸液加 入細胞計數(shù)板中計數(shù)，調整細胞濃度為IO4個/孔。96孔板中除Al孔為空白孔不加細胞外， 其余皆加入100 μ L細胞混懸液。將96孔板放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。
[0153] (2)用50 μ L二甲基亞砜溶解受試樣品，然后加入適量培養(yǎng)液，使樣品溶解成2mg/ mL藥液，然后在24孔板中將樣品稀釋為20, 4, 0. 8, 0. 16, 0. 032 μ g/mL。
[0154] 每個濃度加入3孔，其中周圍兩行兩列細胞長勢受環(huán)境影響較大，只和為空白細 胞孔使用。將96孔板放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h。
[0155] (3)將96孔板中帶藥培養(yǎng)液棄去，用磷酸緩沖溶液（PBS)將細胞沖洗兩遍，在每孔 中加入MTT (四氮唑）（0· 5mg/mL) 100 μ L放入培養(yǎng)箱中4h后，棄去MTT溶液，加入二甲基亞 砜100 μ L。在磁力振蕩器上振蕩使存活細胞與MTT反應產物甲臜充分溶解，放入酶標儀中 測定結果。通過Bliss法可求出藥物IC 5。值。
[0156] 化合物的抑制結腸癌細胞HT-29、肺癌細胞H460和人胃癌細胞MKN-45活性結果， 以foretinib為陽性對照（見表二）。
[0157] 表二

[0160] c-Met酶活性試驗
[0161] 用于測量c-Met激酶活性的試驗基于酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA)。具體操作是：
[0162] 室溫下，在0.25!1^/1111^61'包被的板上，將實施例化合物、5(^(3-|^瓶8-標記的 重組人Met (氨基酸974-末端），通過桿狀病毒表達）和5 μ M ATP在試驗緩沖液中（25mM 10卩5^7.4,511111%(：12,0.