本發(fā)明涉及芳基乙醇胺槲皮素衍生物及其在制藥中的應(yīng)用，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

支氣管哮喘（簡稱哮喘)是最常見的慢性氣道炎癥性疾病。近年來發(fā)病率與日俱增,全世界已有約1.5-2億患者,每年死于哮喘的人數(shù)達18萬之多,在過去10年中病例數(shù)增加了三倍以上。哮喘的防治成為各國學者共同關(guān)心的重大課題。

當前哮喘的治療已從緩解支氣管平滑肌痙攣轉(zhuǎn)向控制氣道炎癥和氣道高反應(yīng)性方向發(fā)展，但由于糖皮質(zhì)激素起效慢,因此在哮喘急性發(fā)作期能夠迅速解除支氣管平滑肌痙攣的β₂AR激動劑也是必不可少的有效治療藥物。槲皮素可以通過對TLR4/NF-kB信號通路的激活，在哮喘氣道炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。本發(fā)明結(jié)合槲皮素的抗炎作用和芳基乙醇胺結(jié)構(gòu)對氣管收縮的拮抗作用的優(yōu)點，制備了芳基乙醇胺槲皮素衍生物，該類衍生物具有抗哮喘作用。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供芳基乙醇胺槲皮素衍生物或其藥學可接受的鹽，包括其立體異構(gòu)體或互變異構(gòu)體，其具有治療哮喘的作用。

本發(fā)明的另一目的在于提供上述芳基乙醇胺槲皮素衍生物或其藥學可接受的鹽，包括其立體異構(gòu)體或互變異構(gòu)體的制備方法。

本發(fā)明的再一目的在于提供上述芳基乙醇胺槲皮素衍生物或其藥學可接受的鹽，包括其立體異構(gòu)體或互變異構(gòu)體的用途。

以下對本發(fā)明進行詳細描述。

本發(fā)明提供一種芳基乙醇胺槲皮素衍生物或其藥學可接受的鹽，包括其立體異構(gòu)體或互變異構(gòu)體，結(jié)構(gòu)如下式所示：

式中：R 各自選取芳香環(huán)、芳雜環(huán)、帶各種取代基的芳香環(huán)和芳雜環(huán)。

所述的芳基乙醇胺槲皮素衍生物或其藥學可接受的鹽，包括其立體異構(gòu)體或互變異構(gòu)體的結(jié)構(gòu)，具體實例包括：

本發(fā)明還提供了所述的芳基乙醇胺槲皮素衍生物或其藥學可接受的鹽，包括其立體異構(gòu)體或互變異構(gòu)體的制備方法，包括以下步驟：

式中：R 各自選取芳香環(huán)、芳雜環(huán)、帶各種取代基的芳香環(huán)和芳雜環(huán)。

藥學上可接受的鹽是指保留了芳基乙醇胺槲皮素衍生物的生物效力和性質(zhì)，并與合適的非毒性有機或有機或無機堿形成的常規(guī)酸加成鹽。酸加成鹽的實例包括醋酸鹽，己二酸鹽，藻酸鹽，天冬氨酸鹽，苯甲酸鹽，苯磺酸鹽，硫酸氫鹽，丁酸鹽，檸檬酸鹽，樟腦酸鹽，環(huán)戊丙酸鹽，二葡萄糖酸鹽，十二烷基硫酸鹽，乙磺酸鹽，富馬酸鹽，甘油磷酸鹽，半硫酸鹽，庚酸鹽，己酸鹽，氫氯酸鹽，氫溴酸鹽，氫碘酸鹽，乳酸鹽，馬來酸鹽，甲磺酸鹽，煙酸鹽，硝酸鹽，草酸鹽，果膠酯酸鹽，過硫酸鹽，苦味酸鹽，琥珀酸鹽，酒石酸鹽，硫酸鹽，硫氰酸鹽，苯甲磺酸鹽，十一酸鹽。

本發(fā)明的芳基乙醇胺槲皮素衍生物或其藥學可接受的鹽，包括其立體異構(gòu)體或互變異構(gòu)體，具有治療哮喘的作用。

通過以下實施例進一步舉例說明本發(fā)明，但應(yīng)注意本發(fā)明的范圍并不受這些實施例的任何限制。

具體實施方式

實施例1

芳基乙醇胺槲皮素衍生物（1）及其鹽酸鹽的制備

將122 mg (1.5 mmol) 的甲醛溶液，175 mg (1.5 mmol)濃氨水，302 mg (1 mmol)槲皮素和5 mL乙醇加入密閉耐壓反應(yīng)器中，加3滴鹽酸，加熱至75-80℃反應(yīng)3h,自然冷卻，析出固體，抽濾，粗品經(jīng)層析板分離（V（正丁醇）：V(水）：V(HOAc）= 4:1:1，甲醇洗脫，得中間體Mannich堿淡黃色固體105 mg，收率31.7%。m.p.>300℃；¹H NMR（400 MHz, DMSO-d₆)δ: 7.74 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 6.92 (d, 1H), 6.19 (s, 1H), 3.86 (s, 2H)。

N₂保護下，將中間體Mannich堿331mg (1.0 mmol)和182.4 mg (1.2 mmol)3，4-二羥基苯基環(huán)氧乙烷加入5mLDMF中，室溫攪拌3d，減壓蒸除溶劑，加入15mL水，攪拌0.5h，過濾，得粗品。粗品經(jīng)層析板分離（V（正丁醇）：V(水）：V(HOAc）= 4:1:1，甲醇洗脫，得化合物（1）黃色固體373.6 mg，收率80.0%。MS(ESI)[M+H]⁺ = 468.1,[M-H]^- = 466.1。

芳基乙醇胺槲皮素衍生物（1）鹽酸鹽的制備

N₂保護下，將化合物（1）467 mg (1.0 mmol)加入5mL無水乙醇中，加熱溶解，加入飽和氯化氫的乙醇溶液10mL,保溫反應(yīng)2h，冷至室溫，過濾，無水乙醇洗滌，干燥，得化合物（1)鹽酸鹽463mg，收率92%。

實施例2

芳基乙醇胺槲皮素衍生物（2）及其L-(+)-酒石酸鹽的制備

用244.8 mg (1.2 mmol)3,5-二氯-4-氨基苯基環(huán)氧乙烷代替實施例1中的182.4 mg (1.2 mmol)3，4-二羥基苯基環(huán)氧乙烷，其他同實施例1,得到化合物（2）317.6 mg，收率61.2%。MS(ESI)[M+H]⁺ = 519.0,[M-H]^- = 517.0。

芳基乙醇胺槲皮素衍生物（2）L-(+)-酒石酸鹽的制備

N₂保護下，將化合物（2）518 mg (1.0 mmol)加入5mL無水乙醇中，加熱溶解，加入65 mg (1.1 mmol)L-(+)-酒石酸水溶液5mL,40-45℃反應(yīng)4h，冷至室溫，過濾，95%乙醇洗滌，干燥，得化合物（2)L-(+)-酒石酸鹽607.8mg，收率91%。

實施例3

芳基乙醇胺槲皮素衍生物（3）及其富馬酸鹽的制備

用285.1 mg (1.2 mmol)3-三氟甲基-4-氨基-5-氯苯基環(huán)氧乙烷代替實施例1中的182.4 mg (1.2 mmol)3，4-二羥基苯基環(huán)氧乙烷，其他同實施例1,得到化合物（3）348.2 mg，收率63.0%。MS(ESI)[M+H]⁺ = 553.0,[M-H]^- = 551.0。

芳基乙醇胺槲皮素衍生物（3）富馬酸鹽的制備

用127.6 mg (1.1 mmol)富馬酸代替65 mg (1.1 mmol)L-(+)-酒石酸，其它同實施例4，得到化合物（3）富馬酸鹽627.9 mg,收率94%。

實施例4

芳基乙醇胺槲皮素衍生物（4）及其鹽酸鹽的制備

用185.5 mg (1.2 mmol)3-氯苯基環(huán)氧乙烷代替實施例1中的182.4 mg (1.2 mmol)3，4-二羥基苯基環(huán)氧乙烷，其他同實施例1,得到化合物（4）357.2 mg，收率76.0%。MS(ESI)[M+H]⁺ = 470.1,[M-H]^- = 468.1。得到化合物（4）鹽酸鹽455mg,收率90%。

實施例5

芳基乙醇胺槲皮素衍生物（5）及其鹽酸鹽的制備

用193.2 mg (1.2 mmol)2-羥甲基-3-羥基-6-環(huán)氧乙烷基吡啶代替實施例1中的182.4 mg (1.2 mmol)3，4-二羥基苯基環(huán)氧乙烷，其他同實施例1,得到化合物（5）342.2 mg，收率71.0%。MS(ESI)[M-H]^- = 481.1。得到化合物（5）鹽酸鹽472mg,收率91%。

實施例6

芳基乙醇胺槲皮素衍生物（6）及其鹽酸鹽的制備

用182.4 mg (1.2 mmol)3，5-二羥基苯基環(huán)氧乙烷代替實施例1中的182.4 mg (1.2 mmol)3，4-二羥基苯基環(huán)氧乙烷，其他同實施例1,得到化合物（6）337.4 mg，收率70.0%。MS(ESI)[M-H]^- = 481.1。得到化合物（6）鹽酸鹽466.7mg,收率90%。

實施例7

芳基乙醇胺槲皮素衍生物（7）及其鹽酸鹽的制備

用214.9 mg (1.2 mmol)3-甲酰氨基-4-羥基苯基環(huán)氧乙烷代替實施例1中的182.4 mg (1.2 mmol)3，4-二羥基苯基環(huán)氧乙烷，其他同實施例1,得到化合物（7）358.5 mg，收率72.5%。MS(ESI)[M-H]^- = 493.1。得到化合物（7）鹽酸鹽461.5mg,收率89%。

實施例8

芳基乙醇胺槲皮素衍生物（8）及其鹽酸鹽的制備

用199.2 mg (1.2 mmol)3-羥甲基-4-羥基苯基環(huán)氧乙烷代替實施例1中的182.4 mg (1.2 mmol)3，4-二羥基苯基環(huán)氧乙烷，其他同實施例1,得到化合物（8）331.4 mg，收率68.9%。MS(ESI)[M-H]^- = 480.1。得到化合物（8）鹽酸鹽464mg,收率90%。

實施例9

芳基乙醇胺槲皮素衍生物（9）及其鹽酸鹽的制備

用353.1 mg (1.2 mmol)3,5-二（N,N-二甲氨基羧酸基）苯基環(huán)氧乙烷代替實施例1中的182.4 mg (1.2 mmol)3，4-二羥基苯基環(huán)氧乙烷，其他同實施例1,得到化合物（8）401.9 mg，收率66.0%。MS(ESI)[M-H]^- = 608.0。得到化合物（9）鹽酸鹽593.9mg,收率92%。

實施例10

芳基乙醇胺槲皮素衍生物對氯化乙酰膽堿所致離體氣管收縮的拮抗作用

一、實驗材料:

儀器：多導生理記錄儀(日本光電,RM-6000)，張力換能器(日本光電,TB-6llT)，載波放大器(日本光電Ap-62G1)，平衡記錄儀(上海大華儀器廠，XWT204)

條件:克-亨氏營養(yǎng)液；95%氧氣和5%二氧化碳的混合氣體；紙速為4mm/min；溫度恒定在37℃。

動物：豚鼠(350-500g)，雌雄兼用；試劑:10^-5mol/L氯化乙酰膽堿溶液；樣品:受試藥均配制成10^-6mol/L的溶液；對照品:10^-6mol/L喘通溶液和10^-6mol/L沙丁胺醇溶液。

二、實驗方法:

采用離體豚鼠氣管螺旋條法:將豚鼠擊斃后立即剪開頸部皮膚和皮下組織,自甲狀軟骨至氣管分叉處剪下全部氣管,置冰浴充氧的克-亨氏液中。按螺旋形將氣管剪成長約2cm,寬約3mm的條狀。標本放入盛有10ml克-亨氏液的浴槽中，下端固定于通氣鉤上，上端以線連至張力換能器上，浴槽內(nèi)溫度控制在37℃,并持續(xù)供氧。標本平衡2小時，用氯化乙酰膽堿使氣管條收縮到最大效應(yīng)的50%，然后加入受試藥，觀察受試樣品對氯化乙酰膽堿所至離體氣管收縮的拮抗作用，并以下式計算舒張百分率(表 1)。

舒張百分率(%)=(組胺收縮曲線高度-加藥后曲線高度)/組胺收縮曲線高度x100%

結(jié)果顯示，與對照組相比，所述芳基乙醇胺槲皮素衍生物對氯化乙酰膽堿引起的支氣管痙攣具有顯著的拮抗作用。

實施例11

芳基乙醇胺槲皮素衍生物對動物哮喘的發(fā)作潛伏期和跌倒率研究

選普通豚鼠雌雄各半（體重200±20g），20-23℃，光照12h眀，12h暗飼養(yǎng)。

以生理鹽水為溶劑，配制5%卵白蛋白（OVA）溶液，于豚鼠兩后肢各注射0.4mL,腹腔注射1mL，2周后取上述致敏豚鼠進行實驗。

將經(jīng)過篩選的豚鼠隨機分為模型組、槲皮素組和芳基乙醇胺槲皮素衍生物組，每組8只，劑量4.0mg/kg。分別于OVA激發(fā)引喘前4h灌胃給藥，模型組灌服生理鹽水。各組豚鼠分別依次放入多功能誘喘儀內(nèi)，觀察給藥后對OVA引喘的抑制效應(yīng)，觀察引喘潛伏期和跌倒率（最長觀察6min，超過6min按6min記錄，表2），實驗結(jié)果以均數(shù)±標準差（`X±S）表示，用SPSS15.0統(tǒng)計軟件包統(tǒng)計。結(jié)果顯示，與對照組相比，芳基乙醇胺槲皮素衍生物均可減少豚鼠跌倒數(shù)量，均可延長引喘潛伏期，化合物(2)(3)(5)(6)(7)對動物過敏性哮喘有顯著的治療效果。