本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種2-芳基-4-芳?；?三氮唑類(lèi)化合物及其用途，確切地說(shuō)，涉及該類(lèi)化合物及其作為腫瘤細(xì)胞增殖抑制劑在制備抗腫瘤的藥物方面的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

惡性腫瘤是威脅人類(lèi)健康與生命的嚴(yán)重疾病，在中國(guó)為第一致死病因。尋找和發(fā)現(xiàn)治療與預(yù)防腫瘤的新藥是當(dāng)前面臨的重大課題。Combretastatin A-4(CA-4)是從南非柳樹(shù)中分離得到的順式二苯乙烯類(lèi)天然產(chǎn)物，其化學(xué)名稱(chēng)為(Z)-2-甲氧基-5-(3,4,5-三甲氧基苯乙烯基)苯酚。CA-4為微管蛋白聚合抑制劑，呈現(xiàn)很強(qiáng)的抑制腫瘤細(xì)胞增殖活性，其前藥CA-4磷酸酯鈉鹽(CA-4P)已在美國(guó)進(jìn)入三期臨床研究階段。以CA-4為先導(dǎo)化合物設(shè)計(jì)、合成新的抗腫瘤活性化合物的研究已有大量報(bào)道，但多數(shù)CA-4類(lèi)似物存在或活性不夠高、或毒性較大、或合成比較復(fù)雜等缺點(diǎn)(相關(guān)報(bào)道參見(jiàn)Pettit G.R.,et al.Experiential,1989,45,209；Nam N.H.Current Medicinal Chemistry,2003,10,1697；Tron G.C.,et al.Journal of Medicinal Chemistry,2006,49(11),3033-3044.)。本發(fā)明涉及的2-芳基-4-芳?；?三氮唑類(lèi)化合物作為抗腫瘤活性研究目前尚未見(jiàn)報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于設(shè)計(jì)、合成具有良好抗腫瘤活性的Combretastatin A-4的結(jié)構(gòu)類(lèi)似物，即2-芳基-4-芳?；?三氮唑類(lèi)化合物；所制備的化合物在體內(nèi)外抗腫瘤活性測(cè)試中顯現(xiàn)良好的結(jié)果。

本發(fā)明涉及定義如下的通式M的化合物：

其中，R為氫、氨基，

X為C＝O、C＝N-OR⁴；

R¹～R³各自獨(dú)立地為氫、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷基氧基、鹵素原子；

R⁴為H、C₁-C₆烷基；

本發(fā)明優(yōu)選涉及定義如下的通式M的化合物：

(1)R為氫時(shí)，

X為C＝O、C＝N-OR⁴；

R¹～R³各自獨(dú)立地為氫、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷基氧基、鹵素原子；

R⁴為H、C₁-C₆烷基；

(2)R為氨基時(shí)，

X為C＝O；

R¹～R³各自獨(dú)立地為氫、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷基氧基、鹵素原子。

本發(fā)明優(yōu)選涉及定義如下的通式M的化合物：

其中，

(1)R為氫時(shí)，

X為C＝O、C＝N-OR⁴；

R¹～R³各自獨(dú)立地為氫、C₁-C₃烷基、C₁-C₃烷基氧基、鹵素原子；

R⁴為H、C₁-C₃烷基；

(2)R為氨基時(shí)，

X為C＝O；

R¹～R³各自獨(dú)立地為氫、C₁-C₃烷基、C₁-C₃烷基氧基、鹵素原子。

本發(fā)明最優(yōu)選涉及定義如下的通式M的化合物：

其中，

(1)R為氫時(shí)，

X為C＝O、C＝N-OR⁴；

R¹～R³各自獨(dú)立地為氫、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、氟、氯、溴；

R⁴為H、甲基；

(2)R為氨基時(shí)，

X為C＝O；

R¹～R³各自獨(dú)立地為氫、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、氟、氯、溴。

本發(fā)明的化合物還包括上述結(jié)構(gòu)式所示化合物所形成的在藥學(xué)上可接受的無(wú)毒鹽及其水合物，這些藥學(xué)上可接受的無(wú)毒鹽包括該衍生物與酸所形成的鹽。所述的酸可以為鹽酸、硫酸、氫溴酸、磷酸的無(wú)機(jī)酸或選自乙酸、檸檬酸、草酸、酒石酸、苯甲酸、蘋(píng)果酸的有機(jī)酸。所述水合物的結(jié)晶水?dāng)?shù)目為0～16中的任意實(shí)數(shù)。

本發(fā)明優(yōu)選的部分化合物結(jié)構(gòu)如下：

化合物1

2-苯基-4-(3,4,5-苯甲?；?-5-氨基-1,2,3-三氮唑

化合物2

2-(2-甲基苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-5-氨基-1,2,3-三氮唑

化合物3

2-(4-甲基苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-5-氨基-1,2,3-三氮唑

化合物4

2-(4-甲氧基苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-5-氨基-1,2,3-三氮唑

化合物5

2-(4-氟苯基)-4-(3,4,5-苯甲酰基)-5-氨基-1,2,3-三氮唑

化合物6

2-(2-氯苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-5-氨基-1,2,3-三氮唑

化合物7

2-(4-氯苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-5-氨基-1,2,3-三氮唑

化合物8

2-(2-溴苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-5-氨基-1,2,3-三氮唑

化合物9

2-(3-溴苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-5-氨基-1,2,3-三氮唑

化合物10

2-(4-溴苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-5-氨基-1,2,3-三氮唑

化合物11

2-苯基-4-(3,4,5-苯甲?；?-1,2,3-三氮唑

化合物12

2-(2-甲基苯基)-4-(3,4,5-苯甲酰基)-1,2,3-三氮唑

化合物13

2-(4-甲基苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-1,2,3-三氮唑

化合物14

2-(4-甲氧基苯基)-4-(3,4,5-苯甲酰基)-1,2,3-三氮唑

化合物15

2-(4-氟苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-1,2,3-三氮唑

化合物16

2-(2-氯苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-1,2,3-三氮唑

化合物17

2-(4-氯苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-1,2,3-三氮唑

化合物18

2-(2-溴苯基)-4-(3,4,5-苯甲酰基)-1,2,3-三氮唑

化合物19

2-(3-溴苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-1,2,3-三氮唑

化合物20

2-(4-溴苯基)-4-(3,4,5-苯甲酰基)-1,2,3-三氮唑

化合物21

2-苯基-4-(3,4,5-苯甲酰肟基)-1,2,3-三氮唑

化合物22

2-(2-甲基苯基)-4-(3,4,5-苯甲酰肟基)-1,2,3-三氮唑

化合物23

2-(4-甲基苯基)-4-(3,4,5-苯甲酰肟基)-1,2,3-三氮唑

化合物24

2-(4-甲氧基苯基)-4-(3,4,5-苯甲酰肟基)-1,2,3-三氮唑

化合物25

2-(4-氟苯基)-4-(3,4,5-苯甲酰肟基)-1,2,3-三氮唑

化合物26

2-(2-氯苯基)-4-(3,4,5-苯甲酰肟基)-1,2,3-三氮唑

化合物27

2-(4-氯苯基)-4-(3,4,5-苯甲酰肟基)-1,2,3-三氮唑

化合物28

2-(2-溴苯基)-4-(3,4,5-苯甲酰肟基)-1,2,3-三氮唑

化合物29

2-(3-溴苯基)-4-(3,4,5-苯甲酰肟基)-1,2,3-三氮唑

化合物30

2-(4-溴苯基)-4-(3,4,5-苯甲酰肟基)-1,2,3-三氮唑

本發(fā)明的2-芳基-4-芳?；?三氮唑類(lèi)化合物可以按照以下反應(yīng)路線合成得到：

以3,4,5-三甲氧基苯甲醛為起始原料，經(jīng)縮合、成腙、縮合環(huán)化、去氨基及成肟等反應(yīng)，制得2-芳基-4-芳?；?三氮唑類(lèi)化合物。

本發(fā)明所提供的2-芳基-4-芳?；?三氮唑類(lèi)化合物制備方法簡(jiǎn)單可行，收率較高。

本發(fā)明進(jìn)一步提供了上述化合物在制備治療腫瘤疾病的藥物中的應(yīng)用。

2-芳基-4-芳?；?三氮唑類(lèi)化合物具有較好的治療腫瘤疾病的作用，在制備抗腫瘤藥物中具有較好的發(fā)展前景。

具體實(shí)施方式

通過(guò)下述實(shí)例將有助于理解本發(fā)明，但本發(fā)明的內(nèi)容并不限于所舉實(shí)例。

本發(fā)明所用試劑均為市售，核磁共振譜AVANCE-400、Bruker ARX-300傅立葉變換核磁共振波譜儀測(cè)定，質(zhì)譜由BrukeeEsqure 2000、Shimadzu GCMS-QP5050A型質(zhì)譜儀測(cè)定。

實(shí)施例1：2-氧-N-苯基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)氰乙酰腙的制備

將3,4,5-三甲氧基苯甲醛(5.34g,23.6mmol)、氫化鈉(1.62g,47.2mmol)溶在無(wú)水四氫呋喃(20mL)中，逐滴滴加無(wú)水乙腈(1.4mL,23.6mmol)，攪拌回流3小時(shí)；反應(yīng)完畢，加水稀釋后減壓蒸除溶劑四氫呋喃，稀鹽酸(1mol/L)調(diào)節(jié)pH＝2，析出淺黃色固體，過(guò)濾，干燥，即得化合物3-氧代-3-(3,4,5-三甲氧基苯基)丙腈，無(wú)需純化直接用于下一步。將化合物3-氧代-3-(3,4,5-三甲氧基苯基)丙腈(1.5g,6.4mmol)溶在乙醇(10mL)中，加入溶解在水(10mL)的乙酸鈉(0.95g,11.6mmol)，冷卻到0℃，再逐滴滴加芳基重氮鹽(6.4mmol)，0℃下反應(yīng)0.5小時(shí)，升到室溫反應(yīng)1小時(shí)；反應(yīng)完畢后，析出黃色固體，過(guò)濾，干燥，即得化合物2-氧-N-芳基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)氰乙酰腙，無(wú)需純化直接用于下一步。

實(shí)施例2：2-苯基-4-(3,4,5-苯甲?；?-5-氨基-1,2,3-三氮唑的制備(化合物1)

將2-氧-N-苯基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)氰乙酰腙(339mg，1.0mmol)、鹽酸羥胺(345mg,5.0mmol)和無(wú)水乙酸鈉(410mg,5.0mmol)加入到微波反應(yīng)管中，加入N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，微波160℃反應(yīng)7分鐘；反應(yīng)完畢，冷卻到室溫，倒入到冰水中，析出棕色的固體。經(jīng)柱層析分離純化即可得到化合物1；收率90％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.08(m,2H),7.60(m,3H),7.06(s,2H),3.95(s,3H),3.89(s,6H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝355.1,[M+Na]⁺＝377.1。

實(shí)施例3:2-(2-甲基苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-5-氨基-1,2,3-三氮唑的制備(化合物2)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例2相同的方法制備化合物2；收率84％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ7.68(s,2H),7.63(d,J＝7.6Hz,1H),7.36(m,3H),3.94(s,3H),3.92(s,6H),2.48(s,3H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝369.1,[M+Na]⁺＝391.1。

實(shí)施例4:2-(4-甲基苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-5-氨基-1,2,3-三氮唑的制備(化合物3)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例2相同的方法制備化合物3；收率85％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ7.58(d,J＝8.5Hz,2H),7.43(s,2H),7.30(d,J＝8.5Hz,2H),3.98(s,3H),3.96(s,6H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝369.1,[M+Na]⁺＝391.1。

實(shí)施例5:2-(4-甲氧基苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-5-氨基-1,2,3-三氮唑的制備(化合物4)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例2相同的方法制備化合物4；收率77％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ7.94(m,2H),7.82(s,2H),6.99(m,2H),3.98(s,6H),3.96(s,3H),3.86(s,3H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝385.1,[M+Na]⁺＝407.1。

實(shí)施例6:2-(4-氟苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-5-氨基-1,2,3-三氮唑的制備(化合物5)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例2相同的方法制備化合物5；收率87％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ7.80(m,2H),7.80(s,2H),7.18(m,2H),3.97(s,6H),3.97(s,3H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝373.1,[M+Na]⁺＝395.1。

實(shí)施例7:2-(2-氯苯基)-4-(3,4,5-苯甲酰基)-5-氨基-1,2,3-三氮唑的制備(化合物6)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例2相同的方法制備化合物6；收率89％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.21(s,1H),7.95(d,J＝8.1Hz,1H),7.82(s,2H),7.48(d,J＝7.9Hz,1H),7.35(t,J＝8.0Hz,1H),3.98(s,6H),3.97(s,3H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝389.1,[M+Na]⁺＝411.1。

實(shí)施例8:2-(4-氯苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-5-氨基-1,2,3-三氮唑的制備(化合物7)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例2相同的方法制備化合物7；收率91％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ7.90(d,J＝8.6Hz,2H),7.79(s,2H),7.61(d,J＝8.6Hz,2H),3.97(s,9H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝389.1,[M+Na]⁺＝411.1。

實(shí)施例9:2-(2-溴苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-5-氨基-1,2,3-三氮唑的制備(化合物8)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例2相同的方法制備化合物8；收率90％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.30(s,1H),8.04(d,J＝8.0Hz,1H),7.69(s,2H),7.53(d,J＝7.5Hz,1H),7.38(t,J＝8.0Hz,1H),3.98(s,3H),3.96(s,6H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝433.0。

實(shí)施例10:2-(3-溴苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-5-氨基-1,2,3-三氮唑的制備(化合物9)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例2相同的方法制備化合物9；收率93％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ7.84(s,2H),7.69(m,1H),7.58(m,1H),7.41(m,2H),3.94(s,9H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝433.0,[M+Na]⁺＝455.0。

實(shí)施例11:2-(4-溴苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-5-氨基-1,2,3-三氮唑的制備(化合物10)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例2相同的方法制備化合物10；收率92％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ7.96(m,2H),7.79(s,2H),7.46(m,2H),3.97(s,9H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝433.0,[M+Na]⁺＝455.1。

實(shí)施例12:2-苯基-4-(3,4,5-苯甲?；?-1,2,3-三氮唑的制備(化合物11)

將化合物1(0.50g,1.14mmol)加入茄型瓶中，用適量四氫呋喃溶解，滴加亞硝酸異戊酯(0.66g,4.56mmol)，回流反應(yīng)1小時(shí)；反應(yīng)完畢，減壓蒸除四氫呋喃，經(jīng)柱層析分離純化即可得到化合物11；收率82％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃):δ8.45(s,1H),8.06(m,2H),7.72(s,2H),7.34(m,3H),3.98(s,3H),3.96(s,6H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝340.1,[M+Na]⁺＝362.1。

實(shí)施例13:2-(2-甲基苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-1,2,3-三氮唑的制備(化合物12)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例12相同的方法制備化合物12；收率92％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.46(s,1H),7.76(s,2H),7.67(d,J＝7.8Hz,1H),7.38(m,3H),3.96(s,3H),3.94(s,6H),2.48(s,3H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝354.1,[M+Na]⁺＝376.1。

實(shí)施例14:2-(4-甲基苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-1,2,3-三氮唑的制備(化合物13)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例12相同的方法制備化合物13；收率87％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.44(s,1H),8.06(m,2H),7.74(s,2H),7.58(m,2H),3.99(s,3H),3.97(s,6H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝354.1,[M+Na]⁺＝376.1。

實(shí)施例15:2-(4-甲氧基苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-1,2,3-三氮唑的制備(化合物14)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例12相同的方法制備化合物14；收率89％。¹H-NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.70(d,J＝2.7Hz,1H),8.42(s,1H),8.34(dd,J＝2.7Hz,8.0Hz,1H),7.76(s,2H),7.27(d,J＝8.0Hz,1H),4.06(s,3H),3.98(s,3H),3.97(s,6H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝370.1,[M+Na]⁺＝392.1。

實(shí)施例16:2-(4-氟苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-1,2,3-三氮唑的制備(化合物15)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例12相同的方法制備化合物15；收率88％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.41(s,1H),8.04(m,2H),7.72(s,2H),7.67(m,2H),3.98(s,3H),3.96(s,6H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝358.1,[M+Na]⁺＝380.1。

實(shí)施例17:2-(2-氯苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-1,2,3-三氮唑的制備(化合物16)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例12相同的方法制備化合物16；收率87％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.42(s,1H),8.35(t,J＝1.9Hz,8.1Hz,1H),8.10(m,1H),7.75(s,2H),7.56(m,1H),7.41(t,J＝1.9Hz,8.1Hz,1H),3.99(s,3H),3.98(s,6H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝374.1。

實(shí)施例18:2-(4-氯苯基)-4-(3,4,5-苯甲酰基)-1,2,3-三氮唑的制備(化合物17)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例12相同的方法制備化合物17；收率91％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.40(s,1H),8.11(m,2H),7.72(s,2H),7.50(m,2H),3.98(s,3H),3.96(s,6H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝374.1,[M+Na]⁺＝396.1。

實(shí)施例19:2-(2-溴苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-1,2,3-三氮唑的制備(化合物18)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例12相同的方法制備化合物18；收率92％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.48(s,1H),7.81(d,J＝1.1Hz,1H),7.79(s,2H),7.64(dd,J＝7.7Hz,1.6Hz,1H),7.51(m,1H),7.42(td,J＝7.7Hz,1.6Hz,1H),3.95(s,3H),3.95(s,6H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝418.0,[M+Na]⁺＝440.1。

實(shí)施例20:2-(3-溴苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；?-1,2,3-三氮唑的制備(化合物19)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例12相同的方法制備化合物19；收率88％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.48(s,1H),7.79(s,2H),7.70(dd,J＝7.5Hz,2.0Hz,1H),7.62(dd,J＝7.5Hz,1.6Hz,1H),7.47(m,2H),3.95(s,3H),3.95(s,6H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝418.0,[M+Na]⁺＝440.0。

實(shí)施例21:2-(4-溴苯基)-4-(3,4,5-苯甲酰基)-1,2,3-三氮唑的制備(化合物20)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例12相同的方法制備化合物20；收率87％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.37(s,1H),8.10(m,2H),7.71(s,2H),7.20(m,2H),3.96(s,3H),3.94(s,6H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝418.0,[M+Na]⁺＝440.0。

實(shí)施例22:2-苯基-4-(3,4,5-苯甲?；炕?-1,2,3-三氮唑的制備(化合物21)

將化合物11(0.40g,1.18mmol)溶于無(wú)水乙醇中，加入鹽酸羥胺(0.81g,11.8mmol)和無(wú)水乙酸鈉(0.97g,11.8mmol)，回流反應(yīng)2小時(shí)；反應(yīng)完畢，將反應(yīng)液倒入水中，用乙酸乙酯萃取，有機(jī)層用飽和氯化鈉溶液洗滌并用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，經(jīng)柱層析分離純化即可得到化合物21(Z:E＝3:1)；收率85％。(Z):¹H NMR(600MHz,CDCl₃):δ11.72(s,1H),8.46(s,1H),7.92(m,2H),7.51(m,3H),6.84(s,2H),3.81(s,6H),3.73(s,3H)ppm；(E):¹H NMR(600MHz,CDCl₃):δ11.08(s,1H),8.38(s,1H),7.85(m,2H),7.03(m,3H),6.72(s,2H),3.78(s,9H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝355.1,[M+Na]⁺＝377.1。

實(shí)施例23:2-(2-甲基苯基)-4-(3,4,5-苯甲酰基肟基)-1,2,3-三氮唑的制備(化合物22)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例22相同的方法制備化合物22(Z:E＝5:1)；收率83％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)(Z isomer)δ8.60(s,1H),7.58(m,1H),7.35(m,3H),6.95(s,2H),3.90(s,3H),3.86(s,6H),2.40(s,3H)ppm；(E isomer)δ8.04(s,1H),7.58(m,1H),7.28(m,3H),6.85(s,2H),3.92(s,3H),3.84(s,6H),2.40(s,3H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝369.2。

實(shí)施例24:2-(4-甲基苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；炕?-1,2,3-三氮唑的制備(化合物23)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例22相同的方法制備化合物23(Z:E＝4:1)；收率84％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)(Z isomer)δ11.52(1H,s),8.64(1H,s),7.76(2H,d,J＝8.3Hz),7.36(2H,d,J＝8.3Hz),6.80(2H,s),3.78(6H,s),3.72(3H,s),2.35(3H,s)ppm；(E isomer)δ11.02(1H,s),8.30(1H,s),7.74(2H,d,J＝8.5Hz),7.28(2H,d,J＝8.5Hz),6.72(2H,s),3.76(6H,s),3.74(3H,s),2.33(3H,s)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝369.1,[M+Na]⁺＝391.1。

實(shí)施例25:2-(4-甲氧基苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；炕?-1,2,3-三氮唑的制備(化合物24)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例22相同的方法制備化合物24(Z:E>10:1)；收率83％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)(Z isomer)δ9.80(s,1H)；8.57(s,1H)；8.08(d,J＝7.66Hz,2H)；7.46(d,J＝7.66Hz,2H)；6.97(s,2H)；3.93(s,3H)；3.88(s,6H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝385.1,[M+Na]⁺＝407.1。

實(shí)施例26:2-(4-氟苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；炕?-1,2,3-三氮唑的制備(化合物25)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例22相同的方法制備化合物25(Z:E＝2:1)；收率86％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)(Z isomer)δ8.40(s,1H),8.14(m,2H),7.73(s,2H),7.23(m,2H),6.66(s,1H),3.98(s,3H),3.97(s,6H)ppm；(E isomer)δ8.19(s,1H),8.06(m,2H),7.73(s,2H),7.20(m,2H),6.66(s,2H),3.93(s,3H),3.81(s,6H).ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝373.1。

實(shí)施例27:2-(2-氯苯基)-4-(3,4,5-苯甲酰基肟基)-1,2,3-三氮唑的制備(化合物26)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例22相同的方法制備化合物26(Z:E＝8:1)；收率89％。¹H NMR(600MHz,DMSO)(Z isomer)δ8.91(s,1H),8.29(m,2H),7.90(m,2H),6.99(s,2H),3.97(s,3H),3.94(s,6H)；δ8.93(s,1H),8.41(s,2H),8.18(m,2H),7.14(s,2H),4.06(s,9H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝389.1,[M+Na]⁺＝411.1。

實(shí)施例28:2-(4-氯苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；炕?-1,2,3-三氮唑的制備(化合物27)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例22相同的方法制備化合物27(Z:E＝3:1)；收率86％。¹H NMR(600MHz,DMSO)(Z isomer)δ8.55(s,1H),8.03(d,J＝8.64Hz,2H),7.45(d,J＝8.64Hz,2H),6.94(s,2H),3.91(s,3H),3.86(s,6H)ppm；(Eisomer)8.41(s,1H),8.09(d,J＝8.76Hz,2H),7.72(s,2H),7.51(d,J＝8.76Hz,2H),3.98(s,3H),3.96(s,6H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝389.1,[M+Na]⁺＝411.1。

實(shí)施例29:2-(2-溴苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；炕?-1,2,3-三氮唑的制備(化合物28)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例22相同的方法制備化合物28(Z:E＝3:1)；收率87％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)(Z isomer)δ8.65(s,1H),7.73(d,J＝7.5Hz,1H),7.56(d,J＝6.0Hz,1H),7.45(d,J＝7.4Hz,1H),7.36(t,J＝7.2Hz,1H),6.96(s,2H),3.88(s,3H),3.86(s,6H)ppm；(E isomer)δ8.09(s,1H),7.72(s,1H),7.55(s,1H),7.42(d,J＝7.2Hz,1H),7.32(s,1H),6.87(s,2H),3.90(s,3H),3.85(s,6H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝433.0,[M+Na]⁺＝455.0。

實(shí)施例30:2-(3-溴苯基)-4-(3,4,5-苯甲?；炕?-1,2,3-三氮唑的制備(化合物29)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例22相同的方法制備化合物29(Z:E＝3:1)；收率86％。(Z):¹H-NMR(600MHz,CDCl₃):(Z isomer)δ8.63(s,1H),7.60(dd,J＝1.77Hz,7.57Hz,1H),7.57(dd,J＝1.55Hz,7.90Hz,1H),7.43(dd,J＝1.77Hz,7.90Hz,1H),7.41(dd,J＝1.55Hz,7.57Hz,1H),6.96(s,2H),3.88(s,3H),3.87(s,6H)ppm；(E isomer)δ8.63(s,1H),7.60(dd,J＝8.64Hz,1H),7.57(dd,J＝8.64Hz,1H),7.43(dd,1H),7.41(dd,1H),6.96(s,2H),3.88(s,3H),3.87(s,6H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝433.0,[M+Na]⁺＝455.1。

實(shí)施例31:2-(4-溴苯基)-4-(3,4,5-苯甲酰基肟基)-1,2,3-三氮唑的制備(化合物30)

除了使用相應(yīng)的原料外，以實(shí)施例22相同的方法制備化合物30(Z:E＝2:1)；收率89％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)(Z isomer)δ12.26(s,1H),8.66(s,1H),8.03(m,2H),7.42(m,2H),6.97(s,2H),3.78(s,6H),3.76(s,3H)ppm；(E isomer)δ11.83(s,1H),8.27(s,1H),7.95(m,1H),7.47(m,1H),6.86(s,1H),3.73(s,3H),3.72(s,6H)ppm；MS(ESI):[M+H]⁺＝433.0。

實(shí)施例32：本發(fā)明的化合物的體外抗腫瘤活性測(cè)試

體外活性測(cè)試方法和結(jié)果如下：其中，臨床常用的抗腫瘤藥物阿霉素(DOX)為陽(yáng)性實(shí)驗(yàn)組。

篩選方法：四氮唑鹽(micoculturetetrozolium,MTT)還原法

細(xì)胞株：人胃癌細(xì)胞株(SGC-7901cell line)、人肺腺癌(A549cell line)、人結(jié)腸癌細(xì)胞株(HT-1080cell line)

作用時(shí)間：72小時(shí)

各化合物對(duì)三種腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制率(30μg/mL)見(jiàn)表-1。

各化合物對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的抑制率(μg/mL)見(jiàn)表-1：

表-1

實(shí)施例33：本發(fā)明的化合物的動(dòng)物體內(nèi)抗腫瘤活性測(cè)試

選擇體外活性較好的化合物3、化合物7、化合物10和化合物23進(jìn)行了動(dòng)物體內(nèi)抗腫瘤活性測(cè)試，所用模型為小鼠S-180肉瘤模型，陽(yáng)性對(duì)照藥物為臨床常用的抗腫瘤藥物氟尿嘧啶(Fluorouracil,5-Fu)。

實(shí)驗(yàn)方法：選用18-22克雌性昆明小鼠及生長(zhǎng)良好的7-11天的S-180瘤種，將瘤組織制成細(xì)胞懸液，接種至小鼠右側(cè)腋部皮下，約1.0-2.0×10⁶細(xì)胞/只，接種24小時(shí)后隨機(jī)分籠，腹腔注射給藥連續(xù)7天。停藥后24小時(shí)處死動(dòng)物，稱(chēng)體重、瘤重，計(jì)算各組平均瘤重，按如下公式求出腫瘤抑制率并進(jìn)行t檢驗(yàn)。

腫瘤抑制率＝[(空白對(duì)照組平均瘤重-治療組平均瘤重)/(空白對(duì)照組平均瘤重)]×100％

實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表-2：

表-2