技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種分離液泡和觀察液泡膜上蛋白分布和運(yùn)動(dòng)的方法。該方法依次包括如下步驟：(1)取植物組織，用酶解液進(jìn)行處理，獲得原生質(zhì)體；(2)裂解所述原生質(zhì)體，獲得液泡；(3)多聚甲醛載玻片固定液泡；(4)全內(nèi)光反射顯微鏡觀察液泡膜上蛋白分布和運(yùn)動(dòng)。實(shí)驗(yàn)證明，采用本發(fā)明所提供的方法分離的液泡是具有生理活性的液泡，其液泡膜上蛋白質(zhì)也是具有生理活性的，且可利用全內(nèi)反射熒光顯微鏡觀察液泡膜上蛋白的運(yùn)動(dòng)和分布。本發(fā)明將以TIRFM顯微鏡為基礎(chǔ)的單分子技術(shù)的觀測范圍從細(xì)胞外膜擴(kuò)展到胞內(nèi)細(xì)胞器膜，所提供的方法在液泡的分離及觀察中具有重要的應(yīng)用價(jià)值，為深入研究植物的細(xì)胞器奠定了技術(shù)基礎(chǔ)。

技術(shù)研發(fā)人員：林金星;吳鴻洋;呂雪芹;李曉娟
受保護(hù)的技術(shù)使用者：北京林業(yè)大學(xué)
文檔號(hào)碼：201610595887
技術(shù)研發(fā)日：2016.07.26
技術(shù)公布日：2016.12.21