專利名稱：作為ppar配體的6-唑-4-基甲氧基-烷氧基甲基取代的苯甲酸衍生物、其制備方法和其在 ...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及式I化合物和它們生理上耐受的鹽、溶劑合物和有生理學(xué)作用的衍生物
其中各基團(tuán)含義如下 R1為H、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C2)-烷基、(C1-C6)-烷基巰基、三氟甲氧基、三氟甲基巰基、F、CF3、苯基、苯氧基； R2為H、O-(C1-C3)-烷基、(C1-C3)-烷基、CF3、三氟甲氧基或R1和R2與苯環(huán)一起稠合成萘基； R3為H、(C1-C6)-烷基、苯基、環(huán)己基； R4、R5為H，其中m可以是1、2；或 為CH3，僅對m＝1而言； R6為H、(C1-C6)-烷基； X為CH，如果n＝1或 S，如果n＝0； n為0或1； m為1或2。
優(yōu)選的式I化合物是其中R1或R2不為H的式I化合物。
特別優(yōu)選的式I化合物是如下定義的式I化合物，其中 R1為H； R2為O-(C1-C3)-烷基、(C1-C3)-烷基、CF3、三氟甲氧基； R3為(C1-C6)-烷基； R4、R5、R6為H； X為CH； n為1； m為1或如下定義的式I化合物 其中 R1為(C1-C6)-烷基、O-(C1-C2)-烷基、三氟甲氧基、三氟甲基巰基、F、苯基、苯氧基； R2為H； R3為(C1-C6)-烷基、苯基、環(huán)己基； R4、R5、R6為H； X為CH； n為1； m為1或如下定義的式I化合物 其中 R1和R2同時為H、Me、OMe或 R1和R2與苯環(huán)一起稠合成萘基； R3為(C1-C6)-烷基； R4、R5、R6為H； X為CH； n為1； m為1。
更加特別優(yōu)選的式I化合物為如下定義的式I化合物，其中 R1為H、F、Me； R2為H、OMe、CF3； R3為H、(C1-C6)-烷基； R4、R5為Me； R6為H； X為CH； n為1； m為1或如下定義的式I化合物 其中 R1為H、F、Me、Ph； R2為H、OMe、CF3； R3為(C1-C6)-烷基； R4、R5、R6為H； X為CH； n為1； m為2。
取代基R1、R2、R3和R6中的烷基基團(tuán)可以是直鏈或分支的。
因為藥學(xué)上可接受的鹽在水中的溶解性高于初始或者堿性化合物的溶解性，所以它們特別適于醫(yī)療用途。這些鹽必須具有藥學(xué)上可接受的陰離子或陽離子。本發(fā)明化合物的適當(dāng)?shù)乃帉W(xué)上可接受的酸加成鹽為無機酸鹽和有機酸鹽，所述無機酸如鹽酸、氫溴酸、磷酸、偏磷酸、硝酸和硫酸；所述有機酸如乙酸、苯磺酸、苯甲酸、檸檬酸、乙磺酸、反丁烯二酸、葡糖酸、羥基乙酸、羥乙磺酸、乳酸、乳糖酸、馬來酸、蘋果酸、甲磺酸、琥珀酸、對甲苯磺酸和酒石酸。適當(dāng)?shù)乃帉W(xué)上可接受的堿鹽為銨鹽、堿金屬鹽(如鈉鹽和鉀鹽)、堿土金屬鹽(如鎂鹽和鈣鹽)、氨基丁三醇(2-氨基-2-羥基甲基-1，3-丙二醇)鹽、二乙醇胺鹽、賴氨酸鹽或乙二胺鹽。
與藥學(xué)上不可接受的陰離子形成的鹽，例如與三氟乙酸鹽，同樣在本發(fā)明的范圍之內(nèi)，它們可作為制備或純化藥學(xué)上可接受的鹽和/或用于非治療應(yīng)用(例如在體外)的有用中間體。
文中所用的術(shù)語“有生理學(xué)作用的衍生物”指本發(fā)明的式I化合物的任何生理上耐受的衍生物，例如酯，將其給藥至哺乳動物(如人類)能夠形成(直接或間接地)式I化合物或其活性代謝物。
有生理學(xué)作用的衍生物還包括本發(fā)明化合物的前藥，例如H.Okada等人，化學(xué)和藥物公報(Chem.Pharm.Bull.)1994，42，57-61中所述。此類前藥可在體內(nèi)代謝成本發(fā)明化合物。這些前藥本身可為活性的或無活性的。
本發(fā)明的化合物也可以各種多晶型形式存在，例如無定形或結(jié)晶多晶型形式。本發(fā)明化合物的所有多晶型形式在本發(fā)明的范圍之內(nèi)并為本發(fā)明的另一方面。
所有下文談及的“式I化合物”指如上所述的式I化合物、如本文所述的它們的鹽、溶劑合物和有生理學(xué)作用的衍生物。
用途 本發(fā)明還涉及式I化合物和其藥物組合物作為PPAR受體的配體的用途。本發(fā)明的PPAR受體的配體適于用作PPAR受體活性的調(diào)節(jié)劑。
過氧化物增殖物激活受體(PPAR)為可由配體活化的轉(zhuǎn)錄因子，并且屬于核激素受體類型(class)。存在三種由不同基因編碼的PPAR同種型PPARα、PPARγ和PPARδ(過氧化物增殖物激活受體(PPAR)結(jié)構(gòu)、激活機制和各種功能(Peroxisome proliferator-activated receptor(PPAR)structure，mechanisms of activation and diverse functions)Motojima K.，Cell Struct Funct.，1993，18(5)，267-77)。
PPAR受體在大量基因調(diào)節(jié)的許多方面起關(guān)鍵作用，所述基因的產(chǎn)物直接或間接地決定性地參與脂類和糖類代謝。因此，例如PPARα受體在肝臟中的脂肪酸分解代謝和脂蛋白代謝的調(diào)節(jié)中起重要作用，而PPARγ例如在脂肪細(xì)胞分化的調(diào)節(jié)中起決定性作用。存在兩種PPARγ變種，即PPARγ1和γ2(Vidal-Puig等人，臨床研究雜志(J.Clin.Invest.)，972553-2561，1996)。不同的PPAR受體具有不同的組織分布并調(diào)節(jié)不同的生理功能。然而，此外PPAR受體也參與許多其他生理過程的調(diào)節(jié)，所述調(diào)節(jié)包括那些與糖類或脂類代謝不直接相關(guān)的生理過程。不同PPAR受體的活性可在不同程度由多種脂肪酸、脂肪酸衍生物和合成化合物調(diào)節(jié)。關(guān)于功能、生理作用和病理生理學(xué)的相關(guān)綜述，參見Joel Berger等人，醫(yī)學(xué)年鑒(Annu.Rev.Med.)，2002，53，409-435；Timothy Wilson等人，藥物化學(xué)雜志(J.Med.Chem.)，2000，43(4)，527-550；Steven Kliewer等人，激素研究當(dāng)前進(jìn)展(Recent Prog HormRes.)，2001，56，239-63。
本發(fā)明涉及式I化合物，其適于調(diào)節(jié)PPAR受體的活性，尤其是PPARα和PPARγ的活性。取決于調(diào)節(jié)的模式，式I化合物適于治療、控制和預(yù)防下文所述的適應(yīng)癥，并適于與其相關(guān)的許多其他藥物應(yīng)用(見于例如，JoelBerger等人，醫(yī)學(xué)年鑒，2002，53，409-435；Timothy Wilson等人，藥物化學(xué)雜志，2000，43(4)，527-550；Steven Kliewer等人，激素研究當(dāng)前進(jìn)展，2001，56，239-63；Jean-Charles Fruchart，Bart Staels和Patrick DuriezPPARS，代謝病和動脈硬化(PPARS，Metabolic Disease and Arteriosclerosis)，藥理學(xué)研究(Pharmacological Research)，Vol.44，No.5，2001；Sander Kersten，Beatrice Desvergne&Walter WahliPPARs在健康和疾病中的作用(Roles of PPARs in health and disease)，自然(NATURE)，VOL 405，2000年5月25日；Ines Pineda Torra，Giulia Chinetti，Caroline Duval，Jean-Charles Fruchart和Bart Staels過氧化物增殖物激活受體從轉(zhuǎn)錄控制到臨床實踐(Peroxisome proliferator-activated receptorsfromtranscriptional control to clinical practice)，脂類學(xué)的當(dāng)前觀點(Curr OpinLipidol)122001，245-254)。
該類化合物特別適于治療和/或預(yù)防 1.-脂肪酸代謝疾病和葡萄糖利用疾病 -與胰島素抵抗有關(guān)的病癥 2.糖尿病，尤其是2型糖尿病，包括其相關(guān)后遺癥的預(yù)防。
與上述相關(guān)的具體方面是 -高血糖癥， -胰島素抵抗的改善 -葡萄糖耐受的改善 -胰腺β細(xì)胞的保護(hù) -大血管和微血管病癥的預(yù)防 3.血脂障礙及其后遺癥，例如動脈粥樣硬化、冠心病、腦血管病等等，尤其是那些特征為下列因素的一種或多種的疾病(但不限于此) -高血漿甘油三酯濃度、高餐后血漿甘油三酯濃度 -低HDL膽固醇濃度 -低ApoA脂蛋白濃度 -高LDL膽固醇濃度 -小密度LDL膽固醇顆粒 -高ApoB脂蛋白濃度 4.與代謝綜合征相關(guān)的許多其他疾病，如 -肥胖癥(超重)，包括向心性肥胖 -血栓形成、高凝固性和血栓形成前的階段(動脈和靜脈) -高血壓 -心臟衰竭，例如(但不限于)隨心肌梗塞、高血壓心臟病和心肌病而來的心臟衰竭 5.例如與炎性反應(yīng)或細(xì)胞分化有關(guān)的另外的病癥或疾病 -動脈粥樣硬化，例如(但不限于)冠狀動脈硬化，包括心絞痛或心肌梗塞、中風(fēng) -血管再狹窄或再閉塞 -慢性炎性腸疾病，例如克羅恩氏病和潰瘍性結(jié)腸炎 -胰腺炎 -其他炎癥狀態(tài) -視網(wǎng)膜病 -脂肪細(xì)胞瘤 -脂肪細(xì)胞癌，如脂肉瘤 -實體瘤和腫瘤，例如(但不限于)胃腸道癌、肝癌、膽道癌、胰腺癌、內(nèi)分泌腫瘤、肺癌、腎和尿道癌、生殖道癌、前列腺癌等等 -急性和慢性骨髓增殖性疾病和淋巴瘤 -血管生成 -神經(jīng)變性疾病 -阿爾茨海默氏病 -多發(fā)性硬化 -帕金森病 -紅斑鱗屑性皮膚病，如牛皮癬 -尋常痤瘡 -PPAR調(diào)節(jié)的其他皮膚病癥和皮膚疾病 -濕疹和神經(jīng)性皮炎 -皮炎，例如脂溢性皮炎或光照性皮炎 -角膜炎和角化病，如脂溢性角化病、老年性角化病、光化性角化病、光誘導(dǎo)的角化病或毛囊角化病 -瘢痕疙瘩和瘢痕疙瘩的預(yù)防 -疣，包括濕疣和尖銳濕疣 -人乳頭瘤病毒(HPV)感染，例如性病濕疣、病毒性疣(例如傳染性軟疣、粘膜白斑病) -丘疹性皮膚病，例如扁平苔癬 -皮膚癌，例如基底細(xì)胞癌、黑素瘤或皮膚T細(xì)胞淋巴瘤 -局部良性表皮瘤，如皮膚角化病、表皮痣 -凍瘡 -高血壓 -X綜合征 -多囊卵巢綜合征(PCOS) -哮喘 -骨關(guān)節(jié)炎 -紅斑狼瘡(LE)或炎性風(fēng)濕性疾病，例如類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎 -脈管炎 -消瘦(惡病質(zhì)) -痛風(fēng) -局部缺血/再灌注綜合征 -急性呼吸窘迫綜合征(ARDS) 制劑 達(dá)到所需生物學(xué)作用必需的式I化合物的量取決于很多因素，例如所選的特定化合物、預(yù)期的用途、給藥方式和患者的臨床病癥。日劑量通常為每天每千克體重0.001-100mg(一般為0.01-50mg)，例如0.1-10mg/kg/天。靜脈給藥劑量可為例如0.001-1.0mg/kg，其適于以每分鐘每千克體重10-100ng輸注給藥。用于上述目的的適當(dāng)輸注溶液可每毫升含有例如0.1ng-10mg，通常為每毫升含有1ng-10mg。單一劑量可含有例如1mg-10g的活性成分。因此，注射用的安瓿劑可含有例如1-100mg，并且可口服給藥的單劑量制劑，例如膠囊劑或片劑，可含有例如0.05-1000mg，通常含有0.5-600mg。為治療上面提到的疾病，式I化合物可以以化合物本身使用，但是它們優(yōu)選為在含有可接受載體的藥物組合物形式中。當(dāng)然，載體必須在與組合物的其他成分相容的意義上是可接受的并且對患者的健康無害。載體可以是固體或液體或兩者皆可，并且優(yōu)選與所述化合物配制成單劑量，例如作為片劑，所述單劑量可以包含重量為0.05％到95％的活性成分。同樣也可以存在其它藥物活性物質(zhì)，包括其它式I化合物。本發(fā)明的藥物組合物可以通過已知的藥學(xué)方法之一生產(chǎn)，所述方法基本由混合成分與藥學(xué)上可接受的載體和/或賦形劑組成。
本發(fā)明的藥物組合物是那些適于口服、直腸、局部、經(jīng)口(例如舌下)、腸胃外(例如皮下、肌內(nèi)、皮內(nèi)或靜脈內(nèi))給藥的藥物組合物，最適合的給藥方式在每個單獨的病例中取決于需要治療的病癥的性質(zhì)和嚴(yán)重程度以及取決于每個病例中使用的式I化合物的性質(zhì)。包衣制劑和包衣緩釋制劑也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。優(yōu)選酸和胃液抗性制劑。適當(dāng)?shù)牡挚刮敢旱陌虏牧习ㄒ宜徉彵蕉姿崂w維素、聚乙酸鄰苯二甲酸乙烯酯(polyvinal acetatephthalate)、鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素和異丁烯酸與異丁烯酸甲酯的陰離子聚合物。
用于口服給藥的適當(dāng)?shù)乃幬镏苿┛梢砸元毩⒌膯挝恍问酱嬖?，例如膠囊劑、扁囊劑、可吮吸片劑或片劑，所述每種獨立單位包含規(guī)定量的式I化合物；如散劑或顆粒劑；如水或非水液體中的溶液劑或混懸劑；或如水包油或油包水型乳劑。如已經(jīng)提到的，這些組合物可以通過任何合適的藥學(xué)方法制備，所述方法包括使活性成分和載體(可由一種或多種另外成分組成)混合的步驟。通常通過將活性成分與液體和/或微粉化固體載體混合均一和均勻，制備組合物，如果需要的話，隨后使產(chǎn)物成型。因此，例如可以通過將化合物粉末或顆粒根據(jù)需要與一種或多種另外成分一起壓制或模壓，制備片劑?？梢酝ㄟ^下法制備壓制片劑在合適的機器中將能自由流動形式的化合物，例如粉末或顆粒，根據(jù)需要，與粘合劑、助流劑、惰性稀釋劑和/或一種(或多種)表面活性劑/分散劑一起壓片。模壓片劑可以如下制備在合適的機器中將粉末形式的并用惰性液體稀釋劑濕潤的化合物模壓。
適合經(jīng)口(舌下)給藥的藥物組合物包括可吸吮片劑和軟錠劑(pastilles)，所述可吸吮片劑包含式I化合物和矯味劑，矯味劑通常是蔗糖和阿拉伯膠或黃蓍膠；所述軟錠劑包含在惰性基質(zhì)(如明膠和甘油或蔗糖和阿拉伯膠)中的化合物。
適合腸胃外給藥的藥物組合物優(yōu)選包含式I化合物的無菌含水制劑，該制劑優(yōu)選與目標(biāo)受試者的血液等滲。盡管給藥也可以通過皮下、肌內(nèi)或皮內(nèi)注射給藥，但優(yōu)選將這些制劑靜脈內(nèi)給藥?？梢詢?yōu)選通過將化合物和水混合并且將得到的溶液滅菌以及使它和血液等滲，制備上述制劑。可注射的本發(fā)明的組合物通常包含重量為0.1％到5％的活性化合物。
適于直腸給藥的藥物組合物優(yōu)選為單劑量栓劑形式?？梢酝ㄟ^將式I化合物與一種或多種常規(guī)的固體載體(例如可可脂)混合，并且使得到的混合物成形，制備上述栓劑。
適于皮膚局部給藥的藥物組合物優(yōu)選為膏劑、乳膏劑、洗劑、糊劑、噴霧劑、氣霧劑或油劑的形式。可使用的載體是凡士林、羊毛脂、聚乙二醇、醇類以及兩種或多種上述物質(zhì)的組合?；钚猿煞滞ǔＲ越M合物重量的0.1％-15％的濃度存在，例如0.5％-2％。
也可經(jīng)皮給藥。適于經(jīng)皮使用的藥物組合物可以是單獨的貼劑形式，該貼劑適合長期與患者表皮緊密接觸。這類貼劑適當(dāng)?shù)匕谒芤褐械幕钚曰衔铮鶕?jù)需要，可以將該溶液緩沖、溶解和/或分散在粘合劑中或分散在聚合物中。適當(dāng)?shù)幕钚猿煞值臐舛燃s為1％到35％，優(yōu)選約3％到15％。對于活性化合物而言，通過例如藥學(xué)研究(Pharmaceutical Research)，2(6)318(1986)中所描述的電轉(zhuǎn)運或離子電滲療法進(jìn)行釋放是極有可行性的。
式I化合物對代謝疾病有顯著的有益作用。它們有利地影響脂類和糖類代謝，特別是它們降低甘油三酯水平并適于預(yù)防和治療II型糖尿病和動脈粥樣硬化及其各種后遺癥。
與其它藥物聯(lián)合 本發(fā)明化合物可以單獨給藥或與一種或多種其它藥理活性物質(zhì)聯(lián)合給藥，所述其它藥理活性物質(zhì)例如對代謝紊亂或通常與其相關(guān)的疾病具有有益作用。這些藥物的示例為 1.降血糖、抗糖尿病藥物， 2.用于治療血脂異常的活性成分， 3.抗動脈粥樣硬化藥物， 4.減肥藥物， 5.抗炎活性成分， 6.用于治療惡性腫瘤的活性成分， 7.抗血栓形成的活性成分， 8.用于治療高血壓的活性成分， 9.用于治療心臟衰竭的活性成分以及 10.用于治療和/或預(yù)防由糖尿病引起的或與糖尿病相關(guān)的并發(fā)癥的活性成分。
特別是為了使效果協(xié)同提高，可以將它們與本發(fā)明的式I化合物組合?？梢酝ㄟ^分別將活性成分給藥至患者，或以其中多種活性成分存在于一種藥物制劑中的組合產(chǎn)品的形式，進(jìn)行活性成分的聯(lián)合給藥。
可提及的實例是 抗糖尿病藥 適當(dāng)?shù)目固悄虿∷幨抢缭赗ote Liste 2001，第12章中或在USAN的USP藥名詞典和國際藥物名稱(International Drug Names)、美國藥典、Rockville 2003中公開的抗糖尿病藥。抗糖尿病藥包括所有胰島素和胰島素衍生物，例如，Lantus(參見www.Lantus.com)或Apidra以及其它速效胰島素(參見US6221633)、GLP-1受體調(diào)節(jié)劑，如在WO01/04146中描述的或如那些在Novo NordiskA/S的WO98/08871中公開的。
口服有效的降血糖活性成分優(yōu)選地包括磺酰脲類、雙胍類、氯茴苯酸類(Meglitinides)、二唑烷二酮類(oxadiazolidinediones)、噻唑烷二酮類(thiazolidinediones)、葡糖苷酶抑制劑、胰高血糖素拮抗劑、口服GLP-1激動劑、DPP-IV抑制劑、鉀通道開啟劑(例如在WO97/26265和WO99/03861中公開的)、胰島素增敏劑、與刺激糖異生和/或糖原分解相關(guān)的肝酶抑制劑、葡萄糖攝取調(diào)節(jié)劑、改變脂類代謝且導(dǎo)致血液脂類組成改變的化合物、減少食物攝取或食物吸收的化合物、PPAR和PXR調(diào)節(jié)劑以及作用于β細(xì)胞的ATP-依賴的鉀通道的活性成分。
在本發(fā)明的一個實施方案中，式I化合物與胰島素聯(lián)合給藥。
在本發(fā)明的一個實施方案中，式I化合物與影響肝葡萄糖生成的物質(zhì)(例如糖原磷酸化酶抑制劑)聯(lián)合給藥(參見WO01/94300、WO02/096864、WO03/084923、WO03/084922、WO03/104188)。
在一個實施方案中，式I化合物與磺酰脲類聯(lián)合給藥，所述磺酰脲類例如為甲磺丁脲、格列本脲、格列吡嗪或格列美脲。
在一個實施方案中，式I化合物與作用于β細(xì)胞的ATP依賴性鉀通道的活性成分聯(lián)合給藥，所述活性成分例如為甲磺丁脲、格列本脲、格列吡嗪、格列美脲或瑞格列奈。
在一個實施方案中，式I化合物與例如二甲雙胍的雙胍類聯(lián)合給藥。
在另一實施方案中，式I化合物與例如瑞格列奈的氯茴苯酸聯(lián)合給藥。
在一個實施方案中，式I化合物與噻唑烷二酮類聯(lián)合給藥，所述噻唑烷二酮類例如環(huán)格列酮、吡格列酮、羅格列酮或在Reddy博士研究基金(Dr.Reddy’s Reasearch Foundation)的WO97/41097中公開的化合物，特別是5-[[4-[(3，4-二氫-3-甲基-4-氧代-2-喹唑啉基甲氧基)]苯基]甲基]-2，4-噻唑烷二酮。
在一個實施方案中，式I化合物與DPPIV抑制劑聯(lián)合給藥，所述DPPIV抑制劑例如為在WO98/19998、WO99/61431、WO99/67278、WO99/67279、WO01/72290、WO02/38541、WO03/040174中所描述的化合物，特別是P93/01(氯化1-環(huán)戊基-3-甲基-1-氧代-2-戊銨)、P-31/98、LAF237(1-[2-(3-羥基金剛烷-1-基氨基)乙?；鵠吡咯烷-2-(S)-甲腈])、TS021((2S，4S)-4-氟-1-[[(2-羥基-1，1-二甲基乙基)氨基]乙?；鵠吡咯烷-2-甲腈單苯磺酸鹽)。
在本發(fā)明的一個實施方案中，式I化合物與PPARγ激動劑聯(lián)合給藥，所述PPARγ激動劑例如為羅格列酮、吡格列酮。
在一個實施方案中，式I化合物與對SGLT-1和/或2有抑制活性的化合物聯(lián)合給藥，所述化合物例如為直接或間接在WO2004/007517、WO2004/052902和WO2004/052903中公開的化合物。
在一個實施方案中，式I化合物與α-葡糖苷酶抑制劑聯(lián)合給藥，α-葡糖苷酶抑制劑例如為米格列醇或阿卡波糖。
在一個實施方案中，式I化合物與乙酰輔酶A羧化酶(ACC)抑制劑聯(lián)合給藥，所述ACC抑制劑例如為在WO199946262、WO200372197、WO2003072197、WO2005044814中所描述的化合物。
在一個實施方案中，式I化合物與磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)抑制劑聯(lián)合給藥，所述PEPCK抑制劑例如為在WO2004074288中所描述的化合物。
在一個實施方案中，式I化合物與糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)抑制劑聯(lián)合給藥，所述GSK-3β抑制劑例如為在US2005222220、WO2005085230、PCT/EP2005/005346、WO2003078403、WO2004022544、WO2003106410、WO2005058908、US2005038023、WO2005009997、US2005026984、WO2005000836、WO2004106343、EP1460075、WO2004014910、WO2003076442、WO2005087727、WO20040461 17中所描述的化合物。
在一個實施方案中，式I化合物與蛋白激酶C-β(PKC-β)抑制劑(例如ruboxistaurin)聯(lián)合給藥。
在一個實施方案中，式I化合物與“I-kappaB激酶”抑制劑(IKK抑制劑)聯(lián)合給藥，所述IKK抑制劑例如為在WO2001000610、WO2001030774、WO2004022553、WO2005097129中所描述的化合物。
在一個實施方案中，式I化合物與糖皮質(zhì)激素受體調(diào)節(jié)劑聯(lián)合給藥，所述調(diào)節(jié)劑例如為在WO2005090336中所描述的化合物。
在一個實施方案中，式I化合物與乙酰輔酶A羧化酶(ACC)抑制劑聯(lián)合給藥，所述ACC抑制劑例如為在WO199946262、WO200372197、WO2003072197、WO2005044814中所描述的化合物。
在一個實施方案中，式I化合物與磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)抑制劑聯(lián)合給藥，所述PEPCK抑制劑例如為在WO2004074288中所描述的化合物。
在一個實施方案中，式I化合物與糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)抑制劑聯(lián)合給藥，所述GSK-3β抑制劑例如為在US2005222220、WO2005085230、PCT/EP2005/005346、WO2003078403、WO2004022544、WO2003106410、WO2005058908、US2005038023、WO2005009997、US2005026984、WO2005000836、WO2004106343、EP1460075、WO2004014910、WO2003076442、WO2005087727、WO2004046117中所描述的化合物。
在一個實施方案中，式I化合物與蛋白激酶C-β(PKC-β)抑制劑(例如ruboxistaurin)聯(lián)合給藥。
在一個實施方案中，式I化合物與內(nèi)皮素-A受體拮抗劑(例如avosentan(SPP-301))聯(lián)合給藥。
在一個實施方案中，式I化合物與“I-kappaB激酶”抑制劑(IKK抑制劑)聯(lián)合給藥，所述IKK抑制劑例如為在WO2001000610、WO2001030774、WO2004022553、WO2005097129中所描述的化合物。
在一個實施方案中，式I化合物與糖皮質(zhì)激素受體調(diào)節(jié)劑聯(lián)合給藥，所述調(diào)節(jié)劑例如為在WO2005090336中所描述的化合物。
在一個實施方案中，式I化合物與內(nèi)皮素-A受體拮抗劑(例如avosentan(SPP-301))聯(lián)合給藥。
在一個實施方案中，式I化合物與多種上述化合物聯(lián)合給藥，例如，與磺酰脲和二甲雙胍、磺酰脲和阿卡波糖、瑞格列奈和二甲雙胍、胰島素和磺酰脲、胰島素和二甲雙胍、胰島素和曲格列酮、胰島素和洛伐他汀等聯(lián)合給藥。
脂類調(diào)節(jié)劑 在本發(fā)明的一個實施方案中，式I化合物與HMGCoA還原酶抑制劑聯(lián)合給藥，所述HMGCoA還原酶抑制劑例如洛伐他汀、氟伐他汀、普伐他汀、辛伐他汀、匹伐他汀(ivastatin)、伊伐他汀、atoravastatin、羅舒伐他汀。
在本發(fā)明的一個實施方案中，式I化合物與膽汁酸吸收抑制劑(參見，例如US6245744、US6221897、US6277831、EP0683773、EP0683774)聯(lián)合給藥。
在本發(fā)明的一個實施方案中，式I化合物與聚合膽汁酸吸收劑(例如消膽胺、考來維綸)聯(lián)合給藥。
在本發(fā)明的一個實施方案中，式I化合物與膽固醇吸收抑制劑聯(lián)合給藥，所述膽固醇吸收抑制劑如在WO0250027中描述的化合物或依澤替米貝、替奎安、帕馬苷。
在本發(fā)明的一個實施方案中，式I化合物與LDL受體誘導(dǎo)劑(參見，例如，US6342512)聯(lián)合給藥。
在本發(fā)明的一個實施方案中，式I化合物與填充劑(bulking agent)聯(lián)合給藥，優(yōu)選不可溶填充劑(見例如，carob/Caromax(Zunft H J等，用于治療高膽固醇血癥的角豆膠制劑漿(Carob pulp preparation)，治療進(jìn)展(ADVANCES IN THERAPY)(2001年9月-10月)，18(5)，230-6)。Caromax是一種得自Nutrinova，Nutrition Specialties&Food Ingredients GmbH，Industriepark Hchst，65926 Frankfurt/Main的含有豆角膠的產(chǎn)品))。可以將式I化合物和Caromax在一種制劑中給藥或?qū)⑺鼈兎謩e給藥，從而與Caromax聯(lián)用。此外，可以將Caromax以食品的形式給藥，例如，在面點產(chǎn)品或早餐棒(muesli bar)中給藥。
在本發(fā)明的一個實施方案中，式I化合物與PPARα激動劑聯(lián)合給藥。
在本發(fā)明的一個實施方案中，式I化合物與PPARα/γ混合型激動劑聯(lián)合給藥，所述PPARα/γ混合型激動劑例如為AZ 242(Tesaglitazar，(S)-3-(4-[2-(4-甲磺酰氧基苯基)乙氧基]苯基)-2-乙氧基丙酸)、BMS298585(N-[(4-甲氧基苯氧基)羰基]-N-[[4-[2-(5-甲基-2-苯基-4-唑基)乙氧基]苯基]甲基]甘氨酸)，或如在WO99/62872、WO99/62871、WO01/40171、WO01/40169、WO96/38428、WO01/81327、WO01/21602、WO03/020269、WO00/64888或WO00/64876中描述的化合物。
在本發(fā)明的一個實施方案中，式I化合物與PPARδ激動劑(例如GW-501516)聯(lián)合給藥。
在一個實施方案中，式I化合物與激素敏感脂肪酶(HSL)抑制劑(例如在WO2005073199中所描述的化合物)聯(lián)合給藥。
在本發(fā)明的一個實施方案中，式I化合物與貝特類(fibrate)藥物如非諾貝特、吉非貝齊、氯苯丁酯、苯扎貝特聯(lián)合給藥。
在本發(fā)明的一個實施方案中，式I化合物與尼克酸或煙酸聯(lián)合給藥。
在本發(fā)明的一個實施方案中，式I化合物與CETP抑制劑如CP-529414(torcetrapib)聯(lián)合給藥。
在本發(fā)明的一個實施方案中，式I化合物與ACAT抑制劑聯(lián)合給藥。
在本發(fā)明的一個實施方案中，式I化合物與MTP抑制劑如英普他派聯(lián)合給藥。
在本發(fā)明的一個實施方案中，式I化合物與抗氧化劑聯(lián)合給藥。
在本發(fā)明的一個實施方案中，式I化合物與脂蛋白脂肪酶抑制劑聯(lián)合給藥。
在本發(fā)明的一個實施方案中，式I化合物與ATP檸檬酸裂合酶抑制劑聯(lián)合給藥。
在本發(fā)明的一個實施方案中，式I化合物與角鯊烯合成酶抑制劑聯(lián)合給藥。
在本發(fā)明的一個實施方案中，式I化合物與脂蛋白拮抗劑聯(lián)合給藥。
減肥藥 在本發(fā)明的一個實施方案中，式I化合物與脂肪酶抑制劑(例如奧利司他)聯(lián)合給藥。
在一個實施方案中，其它活性成分是芬氟拉明或右芬氟拉明。
在另一實施方案中，其它活性成分是西布曲明。
大麻素(Cannabinoid)受體1拮抗劑(例如利莫那班、surinabant、氮雜環(huán)丁烷衍生物和/或如EP0656354、WO00/15609、WO02/076949、WO2005080345、WO2005080328、WO2005080343、WO2005075450、WO2005080357、WO200170700、WO2003026647-48、WO200302776、WO2003040107、WO2003007887、WO2003027069、US6509367、WO200132663、WO2003086288、WO2003087037、WO2004048317、WO2004058145、WO2003084930、WO2003084943、WO2004058744、WO2004013120、WO2004029204、WO2004035566、WO2004058249、WO2004058255、WO2004058727、WO2004069838、US20040214837、US20040214855、US20040214856、WO2004096209、WO2004096763、WO2004096794、WO2005000809、WO2004099157、US20040266845、WO2004110453、WO2004108728、WO2004000817、WO2005000820、US20050009870、WO200500974、WO2004111033-34、WO200411038-39、WO2005016286、WO2005007111、WO2005007628、US20050054679、WO2005027837、WO2005028456、WO2005063761-62、WO2005061509、WO2005077897所描述的大麻素受體拮抗劑)。
在另外的實施方案中，式I化合物與下列物質(zhì)聯(lián)合給藥，所述物質(zhì)為CART調(diào)節(jié)劑(見“可卡因-苯丙胺調(diào)節(jié)的轉(zhuǎn)錄物影響大鼠的能量代謝、焦慮和胃排空(Cocaine-amphetamine-regulated transcript influences energymetabolism，anxiety and gastric emptying in mice)”Asakawa，A等，M.激素和代謝研究(Hormone and Metabolic Reasearch)(2001)，33(9)，554-558)、NPY拮抗劑(例如萘-1-磺酸{4-[(4-氨基喹唑啉-2-基氨基)甲基]環(huán)己基甲基}酰胺鹽酸鹽(CGP71683A))、MC4激動劑(例如1-氨基-1，2，3，4-四氫萘-2-甲酸[2-(3a-芐基-2-甲基-3-氧代-2，3，3a，4，6，7-六氫吡唑并[4，3-c]吡啶-5-基)-1-(4-氯苯基)-2-氧代乙基]酰胺；(WO01/91752))、阿立新(Orexin)拮抗劑(如1-(2-甲基苯并唑-6-基)-3-[1，5]萘啶-4-基脲鹽酸鹽(SB-334867-A))、H3激動劑(如3-環(huán)己基-1-(4，4-二甲基-1，4，6，7-四氫咪唑并[4，5-c]吡啶-5-基)丙烷-1-酮草酸鹽(WO00/63208))；TNF激動劑、CRF拮抗劑(如[2-甲基-9-(2，4，6-三甲基苯基)-9H-1，3，9-三氮雜芴-4-基]二丙基胺(WO00/66585))、CRF BP拮抗劑(如優(yōu)洛可定(Urocortin))、優(yōu)洛可定激動劑、β3激動劑(如1-(4-氯-3-甲磺酰甲基苯基)-2-[2-(2，3-二甲基-1H-吲哚-6-基氧基)乙基氨基]-乙醇鹽酸鹽(WO01/83451))、MSH(促黑素細(xì)胞激素)激動劑、CCK-A激動劑(如{2-[4-(4-氯-2，5-二甲氧基苯基)-5-(2-環(huán)己基乙基)噻唑-2-基氨基甲?；鵠-5，7-二甲基吲哚-1-基}乙酸三氟乙酸鹽(WO99/15525))、血清素再攝取抑制劑(如右芬氟拉明)、混合的血清素能和去甲腎上腺素能化合物(如WO 00/71549)、5HT激動劑(如1-(3-乙基苯并呋喃-7-基)哌嗪草酸鹽(WO01/09111))、鈴蟾肽激動劑、加蘭肽拮抗劑、生長激素(如人生長激素)、生長激素釋放化合物(6-芐氧基-1-(2-二異丙基氨基乙基氨基甲?；?-3，4-二氫-1H-異喹啉-2-甲酸叔丁酯(WO01/85695))、TRH激動劑(參見，如EP0462884)、解偶聯(lián)蛋白2或3調(diào)節(jié)劑、瘦蛋白激動劑(參見，如Lee，Daniel W.；Leinung，MatthewC.；Rozhavskaya-Arena，Marina；Grasso，Patricia)。瘦蛋白激動劑作為治療肥胖的潛在方法(Leptinagonists as a potential approach to the treatment of obesity)，未來藥物(Drugs of the Future)(2001)，26(9)，837-881)、DA激動劑(溴隱停、Doprexin)、脂肪酶/淀粉酶抑制劑(如WO 00/40569)、PPAR調(diào)節(jié)劑(如WO00/78312)、RXR調(diào)節(jié)劑或TR-β激動劑)。
在本發(fā)明的一個實施方案中，另外的活性成分是瘦蛋白。
在一個實施方案中，另外的活性成分是右旋安菲他明、安非他明、嗎吲哚(mazindole)或苯丁胺。
在一個實施方案中，式I化合物與對冠狀循環(huán)和血管系統(tǒng)有作用的藥物(如ACE抑制劑(如雷米普利))、對腎素-血管緊張素系統(tǒng)有作用的藥物、鈣拮抗劑、β-阻斷劑等聯(lián)合給藥。
在一個實施方案中，式I化合物與具有抗炎作用的藥物聯(lián)合給藥。
在一個實施方案中，式I化合物與用于癌癥治療和癌癥預(yù)防的藥物聯(lián)合給藥。
可以理解，本發(fā)明化合物與一種或多種上述化合物以及任選一種或多種其它藥理活性物質(zhì)的任何適當(dāng)?shù)慕M合產(chǎn)品是在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
化合物的活性如下測試 在PPARα細(xì)胞試驗中測定PPAR激動劑的EC50值 原理 使用穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的HEK(HEK＝人胚胎腎)細(xì)胞系，在這里將其稱“PPARα報告細(xì)胞系”，對結(jié)合到人PPARα并以激動(agonistic)方式將其激活的物質(zhì)的功效進(jìn)行分析。所述細(xì)胞包含兩個遺傳元件，即熒光素酶報告元件(pdeltaM-GAL4-Luc-Zeo)和PPARα融合蛋白(GR-GAL4-人PPARα-LBD)，PPARα融合蛋白依賴PPARα配體介導(dǎo)熒光素酶報告元件的表達(dá)。穩(wěn)定和組成型表達(dá)的融合蛋白GR-GAL4-人PPARα-LBD在PPARα報告細(xì)胞系的細(xì)胞核中通過GAL4蛋白部分結(jié)合到穩(wěn)定整合進(jìn)此細(xì)胞系基因組中的熒光素酶報告元件的5’-上游GAL4 DNA結(jié)合基序。如果在試驗中使用脂肪酸耗竭的胎牛血清(cs-FCS)，沒有PPARα配體加入時，只有極少量熒光素酶報告基因表達(dá)。PPARα配體結(jié)合并激活了PPARα融合蛋白，因此導(dǎo)致熒光素酶報告基因的表達(dá)。形成的熒光素酶可以通過借助合適底物的化學(xué)發(fā)光法檢測。
細(xì)胞系的構(gòu)建 PPARα報告細(xì)胞系通過兩個步驟制備。首先，構(gòu)建熒光素酶報告元件并且將其穩(wěn)定地轉(zhuǎn)染進(jìn)HEK細(xì)胞。為此，將酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4(在每種情況下為5’-CGGAGTACTGTCCTCCGAG-3’)的五個結(jié)合位點克隆進(jìn)68bp長的最小MMTV啟動子(基團(tuán)庫登錄號#V01175)的5’-上游。最小MMTV啟動子部分包含CCAAT盒和TATA元件，以使通過RNA聚合酶II的有效轉(zhuǎn)錄成為可能。GAL4-MMTV構(gòu)建體的克隆和測序可類似于SambrookJ.等人所描述(分子克隆(Molecular cloning)，Cold Spring HarborLaboratory Press，1989)進(jìn)行。然后將完整的螢火蟲熒光素酶基因(基團(tuán)庫登錄號#M15077)克隆進(jìn)GAL4-MMTV元件的3’-下游。測序后，將由五個GAL4結(jié)合位點、MMTV啟動子和熒光素酶基因組成的熒光素酶報告元件亞克隆進(jìn)賦予zeozin抗性的質(zhì)粒中，以獲得質(zhì)粒pdeltaM-GAL4-Luc-Zeo。根據(jù)Ausubel，F(xiàn).M.等的描述((分子生物學(xué)當(dāng)前技術(shù))Current protocols inmolecular biology，1-3卷，John Wiley&Sons，Inc.，1995)將載體轉(zhuǎn)染進(jìn)HEK細(xì)胞中。然后用含有zeozin的培養(yǎng)基(0.5mg/ml)來選擇合適的穩(wěn)定的細(xì)胞克隆，它表現(xiàn)極低的熒光素酶基因的基礎(chǔ)表達(dá)。
第二步，將PPARα融合蛋白(GR-GAL4-人PPARα-LBD)導(dǎo)入所述的穩(wěn)定細(xì)胞克隆中。為此，最初，將編碼糖皮質(zhì)激素受體N端76個氨基酸的cDNA(基團(tuán)庫登錄號#P04150)連接到編碼酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4的氨基酸1-147的cDNA部分(基團(tuán)庫登錄號#P04386)。將人PPARα受體的配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域的cDNA(氨基酸S167-Y486；基團(tuán)庫登錄號#S74349)克隆進(jìn)此GR-GAL4構(gòu)建體的3’端。將用此方法制備的融合構(gòu)建體(GR-GAL4-人PPARα-LBD)亞克隆進(jìn)質(zhì)粒pcDNA3(購自Invitrogen)，以使通過巨細(xì)胞病毒啟動子進(jìn)行的組成型表達(dá)成為可能。將這個質(zhì)粒用限制性核酸內(nèi)切酶線性化，并穩(wěn)定地轉(zhuǎn)染進(jìn)前述含有熒光素酶報告元件的細(xì)胞克隆中。所得到的包含熒光素酶報告元件和組成型表達(dá)PPARα融合蛋白(GR-GAL4-人PPARα-LBD)的PPARα報告細(xì)胞系可以通過用zeozin(0.5mg/ml)和G418(0.5mg/ml)選擇，進(jìn)行分離。
試驗方法 PPARα激動劑活性在為期3天的試驗中得以測定，描述如下 第一天 將PPARα報告細(xì)胞系在具有如下添加物10％cs-FCS(胎牛血清，#SH-30068.03，Hyclone)、0.5mg/ml的zeozin(#R250-01 Invitrogen)、0.5mg/ml的G418(#10131-027，Invitrogen)、1％的青霉素鏈霉素溶液(#15140-122，Invitrogen)和2 mM的L-谷氨酰胺(#25030-024，Invitrogen)的DMEM培養(yǎng)基(#41965-039，Invirogen)中培養(yǎng)至80％匯合。在5％CO2存在下于37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞培養(yǎng)瓶(#353112，Becton Dickinson)里進(jìn)行培養(yǎng)。將80％匯合的細(xì)胞用15ml PBS(#14190-094，Invitrogen)洗滌一次，用3ml胰蛋白酶溶液(#25300-054，Invitrogen)在37℃處理2分鐘，將其置于5ml上述DMEM培養(yǎng)基中并且在細(xì)胞計數(shù)器中計數(shù)。稀釋到500000個細(xì)胞/ml后，將35000個細(xì)胞接種在具有透明塑料底的96孔微量滴定板(#3610，Corning Costar)的每個孔中。將板在37℃和5％CO2條件下的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育24小時。
第二天 將待檢測的PPARα激動劑溶解于DMSO中，濃度為10mM。將此儲備溶液在DMEM培養(yǎng)基(#41965-039，Invitrogen)中稀釋，所述培養(yǎng)基中混有5％的cs-FCS(#SH-30068.03，Hyclone)、2mM的L-谷氨酰胺(#25030-024，Invitrogen)以及上述抗生素(zeozin、G418、青霉素和鏈霉素)。
在10μM到100pM范圍內(nèi)，對測試物質(zhì)以11種不同濃度進(jìn)行檢測。較有效的化合物以1μM到10pM或100nM到1pM之間的濃度進(jìn)行檢測。
通過抽吸將第一天用來接種PPARα報告細(xì)胞系的培養(yǎng)基完全除去，并且立刻將在培養(yǎng)基中稀釋了的試驗物質(zhì)加入細(xì)胞中。使用自動裝置(robot)(Beckman FX)進(jìn)行上述物質(zhì)的稀釋和添加。在培養(yǎng)基中稀釋的試驗物質(zhì)的終體積為96孔微量滴定板的每孔100μl。在檢測中DMSO濃度低于0.1％v/v，以防止溶劑的細(xì)胞毒效應(yīng)。
為了證明本測試在各個單獨板中的作用，將同樣稀釋成11種不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)PPARα激動劑加入到各個板中。將檢測板于37℃和5％CO2的培養(yǎng)箱中孵育24小時。
第三天 將用試驗物質(zhì)處理過的PPARα受體細(xì)胞從培養(yǎng)箱中移出，并且將培養(yǎng)基抽吸掉。吸量50μl Bright Glo試劑(來自Promega)加入每個96孔微量滴定板孔中，將細(xì)胞裂解。在暗處室溫下孵育10分鐘后，在光度計中(來自Wallac的Trilux)測定微量滴定板。對每個微量滴定板孔的測定時間為1秒。
計算 將得自光度計的原始數(shù)據(jù)導(dǎo)入Microsoft Excel文件中。根據(jù)生產(chǎn)商(IDBS)的指定的程序XL.Fit計算PPAR激動劑的劑量-效應(yīng)曲線和EC50值。
在PPARγ細(xì)胞試驗中測定PPAR激動劑的EC50值 原理 用一種瞬時轉(zhuǎn)染系統(tǒng)測定PPAR激動劑的細(xì)胞PPARγ的活性，其中應(yīng)用了熒光素酶報告質(zhì)粒(pGL3basic-5xGAL4-TK)和PPARγ表達(dá)質(zhì)粒(pcDNA3-GAL4-人PPARγLBD))。將兩種質(zhì)粒瞬時轉(zhuǎn)染到人胚胎腎細(xì)胞(HEK細(xì)胞)。然后在這些融合蛋白GAL4-人PPARγLBD(其結(jié)合至報告質(zhì)粒GAL4結(jié)合點)的細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)。在PPARγ活性配體的存在下，有活性的融合蛋白GAL4-人PPARγLBD誘導(dǎo)熒光素酶報告基因表達(dá)，在加入熒光素酶底物后，這可以以化學(xué)發(fā)光信號形式檢測。不同于穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的PPARα報告細(xì)胞系，在細(xì)胞PPARγ測定中，由于PPARγ融合蛋白穩(wěn)定和持久的表達(dá)是細(xì)胞毒性的，所以兩個組分(熒光素酶報告質(zhì)粒和PPARγ表達(dá)質(zhì)粒)被瞬間轉(zhuǎn)染到HEK細(xì)胞中。
質(zhì)粒的構(gòu)建 熒光素酶報告質(zhì)粒pGL3basic-5xGAL4-TK基于來自Promega的載體pGL3basic。通過將酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4(每個結(jié)合位點帶有5′CTCGGAGGACAGTACTCCG-3′序列)五個結(jié)合位點與160bp-長的胸苷激酶啟動子部分(基因庫登錄號#AF027128)5′-上游一起克隆進(jìn)pGL3basic，制備報告質(zhì)粒。胸苷激酶啟動子的3’-下游是來自螢火蟲的完全熒光素酶基因(基因庫登錄號#M15077)，它還是所用的質(zhì)粒pGL3basic的一個構(gòu)成組分。根據(jù)類似于Sambrook J.等人的描述(分子克隆，Cold Spring Harbor Laboratory Press，1989)，進(jìn)行報告質(zhì)粒pGL3basic-5xGAL4-TK的克隆和序列測定。
PPARγ表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3-GAL4-人PPARγLBD的制備首先，將編碼酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4氨基酸1-147的cDNA(基因庫登錄號#P04386)克隆到細(xì)胞巨化病毒啟動子的質(zhì)粒pcDNA3(得自Invitrogen)3′-下游。然后，克隆GAL4 DNA結(jié)合域的人PPARγ受體3′-下游的配體結(jié)合域(LBD)的cDNA(氨基酸I152-Y475；基因庫登錄號#g1480099)。再根據(jù)類似于Sambrook J.等人的描述(分子克隆，ColdSpring Harbor Laboratory Press，1989)，進(jìn)行PPARγ表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3-GAL4-人PPARγLBD的克隆和序列測定。除了熒光素酶報告質(zhì)粒pGL3basic-5xGAL4-TK和PPARγ表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3-GAL4-人PPARγLBD外，PPARγ試驗還使用對照質(zhì)粒pRL-CMV(來自Promega)和來自Stratagene的質(zhì)粒pBluescript SK(+)。四種質(zhì)粒全部用來自Qiagen的質(zhì)粒制備盒制備，該制備盒可保證質(zhì)粒的質(zhì)量，使其在轉(zhuǎn)染進(jìn)HEK細(xì)胞前有最低的內(nèi)毒素含量。
試驗方法 在為期4天的試驗中測定PPARγ激動劑活性，描述如下。在轉(zhuǎn)染前，將HEK細(xì)胞在具有下列添加物10％FCS(#16000-044，Invitrogen)、1％青霉素鏈霉素溶液(#15140-122，Invitrogen)和2mM L-谷氨酰胺(#25030-024，Invitrogen)的DMEM培養(yǎng)基(#41965-039，Invitrogen)中培養(yǎng)。
第一天 首先，制備溶液A，即除了DMEM培養(yǎng)基外還包含上述的全部四種質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染混合物。測試中對于每個96孔微量滴定板而言，3mL的溶液A包括下列量2622μl的含抗生素且無血清的DMEM培養(yǎng)基(#41965-039，Invitrogen)、100μl的對照質(zhì)粒pRL-CMV(1ng/μl)、100μl的熒光素酶報告質(zhì)粒pGL3basic-5xGAL4-TK(10ng/μl、100μl的PPARγ表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3-GAL4-人PPARγLBD(100ng/μl)和78μl的質(zhì)粒pBluescript SK(+)(500ng/μl)。然后，對于每個96孔微量滴定板，用1.9mL的DMEM培養(yǎng)基(#41965-039，Invitrogen)和100μl的PolyFect轉(zhuǎn)染劑(來自Qiagen)制備2mL溶液B。接著，將3mL溶液A與2mL溶液B混合得到5mL溶液C，通過多次移液使其完全混合，在室溫下孵育10分鐘。
將得自容量為175cm2的細(xì)胞培養(yǎng)瓶的80％匯合的HEK細(xì)胞用15mlPBS(#14190-094，Invitrogen)洗滌一次，用3ml胰蛋白酶溶液(#25300-054，Invitrogen)在37℃處理2分鐘。將細(xì)胞加入15mL DMEM培養(yǎng)基(#41965-039，Invitrogen)中，該培養(yǎng)基混有10％FCS(#16000-044，Invitrogen)、1％青霉素鏈霉素溶液(#15140-122，Invitrogen)和2mM L-谷氨酰胺(#25030-024，Invitrogen)。將細(xì)胞懸浮液在細(xì)胞計數(shù)器中計數(shù)后，將懸浮液稀釋到250000個細(xì)胞/ml。
對于一個微量滴定板而言，將15ml上述細(xì)胞懸浮液和5mL溶液C混合。將200μl懸浮液接種在具有透明塑料底的96孔微量滴定板(#3610，CorningCostar)的每個孔中，將板在37℃和5％CO2條件下在細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育24小時。
第二天 將待檢測的PPAR激動劑溶于DMSO中，濃度為10mM。將此儲備溶液在DMEM培養(yǎng)基(#41965-039，Invitrogen)中稀釋，上述培養(yǎng)基混有2％Ultroser(#12039-012，Biosepra)、1％青霉素鏈霉素溶液(#15140-122，Invitrogen)和2mM L-谷氨酰胺(#5030-024，Invitrogen)。將測試物質(zhì)以10μM到100pM范圍內(nèi)的總共11種不同濃度進(jìn)行檢測。較有效的化合物以1μM到10pM范圍的濃度進(jìn)行檢測。
通過抽吸將第一天用于接種和轉(zhuǎn)染HEK細(xì)胞的培養(yǎng)基完全除去，并且立刻將在培養(yǎng)基中稀釋的試驗物質(zhì)加入細(xì)胞中。使用自動裝置(BeckmanFX)進(jìn)行此類物質(zhì)的稀釋和添加。在培養(yǎng)基中稀釋的試驗物質(zhì)的終體積為96孔微量滴定板的每孔100μl。為了證明本測試在各個單獨板中的作用，將同樣稀釋成11種不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)PPARγ激動劑加入到各個板中。將檢測板在37℃和5％CO2條件下，在培養(yǎng)箱中孵育48小時。
第四天 通過吸抽將培養(yǎng)基移除后，根據(jù)生產(chǎn)商的用法說明，將50μlDual-GloTM試劑(Dual-GloTM Luciferase Assay System；Promega)加至每孔，以使細(xì)胞裂解，同時提供在細(xì)胞中形成的螢火蟲熒光素酶(Photinus pyralis)的底物，在暗處室溫下孵育10分鐘后，在測量儀器中測定螢火蟲熒光素酶介導(dǎo)的化學(xué)發(fā)光(測定時間/每孔1秒；來自Wallac的Trilux)。然后將50μlDual-GloTM Stop&Glo試劑(Dual-GloTM Luciferase Assay System；Promega)加入到每個孔中，以終止螢火蟲熒光素酶的活性，并且提供通過對照質(zhì)粒pRL-CMV表達(dá)的Renilla熒光素酶的底物。在暗處及室溫下再孵育10分鐘后，在測量儀器上再以1秒/孔測定Renilla熒光素酶介導(dǎo)的化學(xué)發(fā)光。
計算 將得自光度計的原始數(shù)據(jù)導(dǎo)入Microsoft Excel文件中。對由微滴定板的孔中得到的每一測量值而言，測定螢火蟲/Renilla熒光素酶活性比。根據(jù)生產(chǎn)商(IDBS)的指定的程序XL.Fit，由上述比例計算PPAR激動劑的劑量-效應(yīng)曲線和EC50值。
本發(fā)明的式I部分化合物的活性結(jié)果如下列表I所示 表I ·來自WO2000064888的實施例51
表I表明，式I的本發(fā)明化合物活化PPARα受體和PPARγ受體，因此類似于臨床使用的貝特類，例如減少體內(nèi)的甘油三酯(參見，例如J.-Ch.Fruchard等人PPARS，代謝疾病和動脈粥樣硬化，藥理學(xué)研究，Vol.44，No.5，2001；S.Kersten等人PPARs在健康和疾病中的作用，自然，VOL405，2000年5月25日；I.Pineda等人過氧化物增殖物激活受體從轉(zhuǎn)錄控制到臨床實踐，脂類學(xué)的當(dāng)前觀點122001，245-254)。
下面詳述的實施例用以舉例說明本發(fā)明，而不是限制本發(fā)明。

表II實施例1到23，其中m＝1，R4＝R5＝R6＝H。
表III實施例24-28，其中m＝n＝1，R4＝R5＝Me，R6＝H，X＝CH。
表IV實施例29-33，其中m＝2，n＝1，R4＝R5＝R6＝H，X＝CH。
方法 本發(fā)明的式I化合物可按下面的反應(yīng)流程制得
方法A 化合物A-1是按照WO2004076390描述的方法制備的，其中R6具有上面所述的意義。然后該溴化物與伯二醇(過量)在極性溶劑及在堿存在和20至40℃條件下反應(yīng)，得到產(chǎn)物A-2，其中R4、R5和m具有上面所述的意義。然后化合物A-2在極性溶劑中及在堿存在和20至40℃條件下與碘化物A-3反應(yīng)，A-3如WO2004076428、WO2004076427、WO2004076426、WO2004075815、WO2004076390、WO2003020269所述制備，其中R1、R2、R3、X和n具有上面所述的意義，得到化合物A-4。最后，通過將化合物A-4氫氧化物在水/甲醇或水/乙醇混合物中在0-40℃下(對于R6為伯或仲烷基而言)或在三氟乙酸/二氯甲烷中在0-40℃下(對于R6為叔烷基而言)攪拌，使其進(jìn)行酯裂解。下面提到的實施例可以通過該方法合成。
所用的縮寫代表 tBu 叔丁基 Cy 環(huán)己基 DCM 二氯甲烷 DMF N，N-二甲基甲酰胺 DMSO二甲基亞砜 EA 乙酸乙酯 EI 電子轟擊離子化(在MS中) equiv. 當(dāng)量 ESI 電噴霧離子化(在MS中) Et 乙基 h 小時 HPLC高壓、高效液相色譜 LCMS液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用 Me 甲基 MS 質(zhì)譜法 MTBE叔丁基甲醚 NMR 核磁共振波譜法 Ph 苯基 iPr 異丙基 nPr 正丙基 Rf 保留比(在TLC中) RT 室溫 sat.飽和的 TFA 三氟乙酸 THF 四氫呋喃 TLC 薄層色譜 其他化合物可根據(jù)上述方法制備。
實施例1 2-甲基-6-[3-(5-甲基-2-m-甲苯基唑-4-基甲氧基)丙氧基甲基]苯甲酸
2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯
將25.5ml的丙二醇在RT下慢隉滴加到3.37g的氫化鈉(在礦物油中，重量含量60％)的400mL DMF懸濁液中。在氣體停止產(chǎn)生后，加入20g 2-溴甲基-6-甲基苯甲酸叔丁酯，將溶液在RT攪拌72h。加入水，并用MTBE將溶液萃取兩次，合并有機相，用水和飽和氯化鈉溶液洗滌，經(jīng)MgSO4干燥并濃縮。將殘留物在硅膠柱上層析，用環(huán)己烷/乙酸乙酯梯度洗脫，得到16g無色油狀的2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯。
1H-NMR(500MHz，DMSO)δ＝7.27-7.32(m，1H)；7.16-7.24(m，2H)；4.44(s，2H)；438(t，J＝6Hz，1H)；3.39-3.46(m，4H)；2.27(s，3H)；1.66(tt，J1＝6Hz，J2＝6Hz，2H)；1.55(s，9H)。
2-(3-羥基-2，2-二甲基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯
類似于2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯的合成，由2-溴甲基-6-甲基苯甲酸叔丁酯和2，2-二甲基丙烷-1，3-二醇制備2-(3-羥基-2，2-二甲基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯。
1H-NMR(500MHz，DMSO)δ＝7.27-732(m，1H)；7.16-7.24(m，2H)；4.44(s，2H)；4.39(t，J＝6Hz，1H)；3.32-3.40(m，4H)；3.16(d，J＝6Hz，2H)；3.10(s，2H)；2.27(s，3H)；1.55(s，9H)；0.79(s，6H)。
2-(4-羥基丁氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯
類似于2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯的合成，由2-溴甲基-6-甲基苯甲酸叔丁酯和丁烷-1，4-二醇合成2-(4-羥基丁氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯。
1H-NMR(500MHz，DMSO)δ＝7.27-732(m，1H)；7.16-7.24(m，2H)；4.44(s，2H)；4.37(t，J＝6Hz，1H)；3.32-3.40(m，4H)；2.27(s，3H)；1.55(s，9H)；1.50-1.59(m，2H)；1.40-1.48(m，2H)。
2-甲基-6-[3-(5-甲基-2-m-甲苯基唑-4-基甲氧基)丙氧基甲基]苯甲酸
將200mg的2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯溶解在1.0ml MTBE中，加入57mg的氫化鈉(60％，在礦物油中)。在停止產(chǎn)生氣體后，加入446mg的5-甲基-2-m-甲苯基唑-4-基甲基碘，將混懸液在RT下攪拌過夜，然后加入水，將液體倒入硅藻土(kieselguhr)柱(VARIAN CHEM ELUT1010)中。產(chǎn)物用MTBE洗脫并濃縮。不經(jīng)純化，將殘留物溶解在DCM/TEA(3∶1)中，在40℃攪拌5h。將溶液濃縮，并用制備型HPLC純化，得到202mg 2-甲基-6-[3-(5-甲基-2-m-甲苯基唑-4-基甲氧基)丙氧基甲基]苯甲酸。
C24H27NO5(409.19)LCMS(ESI)410.48[MH+]。
實施例2 2-甲基-6-[3-(5-甲基-2-p-甲苯基唑-4-基甲氧基)丙氧基甲基]苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和5-甲基-2-p-甲苯基唑-4-基甲基碘制得2-甲基-6-[3-(5-甲基-2-p-甲苯基唑-4-基甲氧基)丙氧基甲基]苯甲酸。
C24H27NO5(409.19)LCMS(ESI)410.23[MH+]。
實施例3 2-甲基-6-[3-(5-甲基-2-p聯(lián)苯基唑-4-基甲氧基)丙氧基甲基]苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和5-甲基-2-p-聯(lián)苯唑-4-基甲基碘制得到2-甲基-6-[3-(5-甲基-2-p-聯(lián)苯基唑-4-基甲氧基)丙氧基甲基]苯甲酸。
C29H29NO5(471.20)LCMS(ESI)472.19[MH+]。
實施例4 2-甲基-6-{3-[5-甲基-2-(4-三氟甲氧基苯基)唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和5-甲基-2-(4-三氟甲氧基苯基)唑-4-基甲基碘制得2-甲基-6-{3-[5-甲基-2-(4-三氟甲氧基苯基)唑-4-基甲基]丙氧基甲基}苯甲酸。
C24H24F3NO6(479.16)LCMS(ESI)480.12[MH+]。
實施例5 2-甲基-6-[3-(5-甲基-2-噻吩基唑-4-基甲氧基)丙氧基甲基]苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和5-甲基-2-噻吩基唑-4-基甲基碘制得2-甲基-6-[3-(5-甲基-2-噻吩基唑-4-基甲氧基)丙氧基甲基]苯甲酸。
C21H23NO5S(401.13)LCMS(ESI)402.13[MH+]。
實施例6 2-甲基-6-{3-[5-甲基-2-(4-三氟甲基巰基苯基)唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和5-甲基-2-(4-三氟甲基巰基苯基)唑-4-基甲基碘制得2-甲基-6-{3-[5甲基-2-(4-三氟甲基巰基苯基)唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}苯甲酸。
C24H24F3NO5S(495.13)LCMS(ESI)496.14 [MH+]。
實施例7 2-甲基-6-{3-[5-甲基2-(4-氟苯基)唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和5-甲基-2-(4-氟苯基)唑-4-基甲基碘制得2-甲基-6-{3-[5-甲基-2-(4-氟苯基)唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}苯甲酸。
C23H24FNO5(413.16)LCMS(ESI)414.20[MH+]。
實施例8 2-甲基-6-{3-[5-甲基-2-(4-苯氧基苯基)唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和5-甲基-2-(4-苯氧基苯基)唑-4-基甲基碘制得2-甲基-6-{3-[5-甲基-2-(4-苯氧基苯基)唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}苯甲酸。
C29H29NO6(487.20)LCMS(ESI)488.23[MH+]。
實施例9 2-甲基-6-{3-[5-甲基-2-(3-三氟甲基苯基)唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和5-甲基-2-(3-三氟甲基苯基)唑-4-基甲基碘制得2-甲基-6-{3-[5甲基-2-(3-三氟甲基苯基)唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}苯甲酸。
C24H24F3NO5(463.16)LCMS(ESI)464.03 [MH+]。
實施例10 2-甲基-6-{3-[5-甲基-2-(3-甲氧基苯基)唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和5-甲基-2-(3-甲氧基苯基)唑-4-基甲基碘制得2-甲基-6-{3-[5-甲基-2-(3-甲氧基苯基)唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}苯甲酸。
C24H27NO6(425.18)LCMS(ESI)426.44[Mh+]。
實施例11 2-甲基-6-{3-[5-甲基-2-(3，4二甲氧基苯基)唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和5-甲基-2-(3，4-二甲氧基苯基)唑-4-基甲基碘制得2-甲基-6-{3-[5-甲基-2-(3，4-二甲氧基苯基)唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}苯甲酸。
C25H29NO7(455.19)LCMS(ESI)456.18[MH+]。
實施例12 2-甲基-6-{3-[5-甲基-2-(3-三氟甲氧基苯基)唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和5-甲基-2-(3-三氟甲氧基苯基)唑-4-基甲基碘制得2-甲基-6-{3-[5-甲基-2-(3-三氟甲氧基苯基)唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}苯甲酸。
C24H24F3NO6(479.16)LCMS(ESI)480.21[MH+]。
實施例13 2-{3-[2-(4-叔丁基苯基)-5-乙基唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}-6-甲基苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和2-(4-叔丁基苯基)-5-乙基唑-4-基甲基碘制得2-{3-[2-(4-叔丁基苯基)-5-乙基唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}-6-甲基苯甲酸。
C28H35NO5(465.25)LCMS(ESI)464.24 [MH+]。
實施例14 2-{3-[5-乙基-2-(2-萘基)唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}-6-甲基苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和5-乙基-(2-萘基)唑-4-基甲基碘制得2-{3-[5-乙基-2-(2-萘基)唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}-6-甲基苯甲酸。
C28H29NO5(459.20)LCMS(ESI)460.09[MH+]。
實施例15 2-{3-[2-(3，4-二甲基苯基)-5-乙基唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}-6-甲基苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和5-乙基-2-(3，4-二甲基苯基)唑-4-基甲基碘制得2-{3-[2-(3，4-二甲基苯基)-5-乙基唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}-6-甲基苯甲酸。
C26H31NO5(437.22)LCMS(ESI)438.10[MH+]。
實施例16 2-甲基-6-[3-(5-乙基-2-p-甲苯基唑-4-基甲基)丙氧基甲基]苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和5-乙基-2-p-甲苯基唑-4-基甲基碘制得2-甲基-6-[3-(5-乙基-2-p-甲苯基唑-4-基甲氧基)丙氧基甲基]苯甲酸。
C25H29NO5(423.20)LCMS(ESI)424.51[MH+]。
實施例17 2-乙基-6-{3-[5-甲基-2-(3-甲氧基苯基)唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基丙氧基甲基-6-甲基苯甲酸叔丁酯和5-乙基-2-(3-甲氧基苯基)唑-4-基甲基碘制得2-乙基-6-{3-[5-甲基-2-(3-甲氧基苯基)唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}苯甲酸。
C25H29NO6(439.20)LCMS(ESI)440.25[MH+]。
實施例18 2-{3-[2-(4-叔丁基苯基)-5-異丙基唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}-6-甲基苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和2-(4-叔丁基苯基)-5-異丙基唑-4-基甲基碘制得2-{3-[2-(4-叔丁基苯基)-5-異丙基唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}-6-甲基苯甲酸。
C29H37NO5(479.27)LCMS(ESI)480.13[MH+]。
實施例19 2-{3-[5-異丙基(2-(2-萘基)唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}-6-甲基苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和5-異丙基-2-(2-萘基)唑-4-基甲基碘制得2-{3-[5-異丙基-2-(2-萘基)唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}-6-甲基苯甲酸。
C29H31NO5(473.22)LCMS(ESI)474.09[MH+]。
實施例20 2-{3-[5-異丙基-2-(3-三氟甲基苯基)唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}-6-甲基苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和5-異丙基-2-(3-三氟甲基苯基)唑-4-基甲基碘制得2-{3-[5-異丙基-2-(3-三氟甲基苯基)唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}-6-甲基苯甲酸。
C26H28F3NO5(491.19)LCMS(ESI)492.04[MH+]。
實施例21 2-{3-[5-異丙基-2-(3，4-二甲基苯基)唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}-6-甲基苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和5-異丙基-2-(3，4-二甲基苯基)唑-4-基甲基碘制得2-{3-[5-異丙基-2-(3，4-二甲基苯基)唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}-6-甲基苯甲酸。
C27H33NO5(451.24)LCMS(ESI)452.10[MH+]。
實施例22 2-甲基-6-{3-[5-環(huán)己基-2-p-甲苯基唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和5-環(huán)己基-2-p-甲苯基唑-4-基甲基碘制得2-甲基-6-{3-[5-環(huán)己基-2-p-甲苯基唑-4-基甲氧基]丙氧基甲基}苯甲酸。
C29H35NO5(477.25)LCMS(ESI)478.52[MH+]。
實施例23 2-甲基-6-[3-(5-苯基-2-p-甲苯基唑-4-基甲氧基)丙氧基甲基]苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和5-苯基-2-p-甲苯基唑-4-基甲基碘制得2-甲基-6-[3-(5-苯基-2-p-甲苯基唑-4-基甲基)丙氧基甲基]苯甲酸。
C29H29NO5(471.20)LCMS(ESI)472.52[MH+]。
實施例24 2-{3-[2-(4-氟苯基)唑-4-基甲氧基]-2，2-二甲基丙氧基甲基}-6-甲基苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基-2，2-二甲基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和2-(4-氟苯基)唑-4-基甲基碘制得2-{3-[2-(4-氟苯基)唑-4-基甲氧基]-2，2-二甲基丙氧基甲基}-6-甲基苯甲酸。
C24H26FNO5(427.18)LCMS(ESI)428.24[MH+]。
實施例25 2-[2，2-二甲基-3-(5-甲基-2-p-甲苯基唑-4-基甲氧基)丙氧基甲基]-6-甲基苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基-2，2-二甲基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和5-甲基-2-p-甲苯基唑-4-基甲基碘制得2-[2，2-二甲基-3-(5-甲基-2-p-甲苯基唑-4-基甲氧基)丙氧基甲基]-6-甲基苯甲酸。
C26H31NO5(437.22)LCMS(ESI)438.53[MH+]。
實施例26 2-{3-[2-(4-氟苯基)-5-甲基唑-4-基甲氧基]-2，2-二甲基丙氧基甲基}-6-甲基苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基-2，2-二甲基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和2-(4-氟苯基)-5-甲基唑-4-基甲基碘制得2-{3-[2-(4-氟苯基)-5-甲基唑-4-基甲氧基]-2，2-二甲基丙氧基甲基}-6-甲基苯甲酸。
C25H28FNO5(441.20)LCMS(ESI)442.27[MH+]。
實施例27 2-{3-[2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基唑-4-基甲氧基]-2，2-二甲基丙氧基甲基}-6-甲基苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基-2，2-二甲基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基唑-4-基甲基碘制得2-{3-[2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基唑-4-基甲氧基]-2，2-二甲基丙氧基甲基}-6-甲基苯甲酸。
C26H31NO6(453.22)LCMS(ESI)454.11[MH+]。
實施例28 2-{3-[5-異丙基-2-(3-三氟甲基苯基)唑-4-基甲氧基]-2，2-二甲基丙氧基甲基}-6-甲基苯甲酸
類似于實施例1，由2-(3-羥基-2，2-二甲基丙氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和5-異丙基-2-(3-三氟甲基苯基)唑-4-基甲基碘制得2-{3-[5-異丙基-2-(3-三氟甲基苯基)唑-4-基甲氧基]-2，2-二甲基丙氧基甲基}-6-甲基苯甲酸。
C28H32F3NO5(519.22)LCMS(ESI)520.46[MH+]。
實施例29 2-甲基-6-{4-[5-甲基-2-(4-氟苯基)唑-4-基甲氧基]丁氧基甲基}苯甲酸
類似于實施例1，由2-(4-羥基丁氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和5-甲基-2-(4-氟苯基)唑-4-基甲基碘制得2-甲基-6-{4-[5-甲基-2-(4-氟苯基)唑-4-基甲氧基]丁氧基甲基}苯甲酸。
C24H26FNO5(427.18)LCMS(ESI)428.45 [MH+]。
實施例30 2-甲基-6-[4-(5-甲基-2-p-甲苯基唑-4-基甲氧基)丁氧基甲基]苯甲酸
類似于實施例1，由2-(4-羥基丁氧基甲基)6-甲基苯甲酸叔丁酯和5-甲基-2-p-甲苯基唑-4-基甲基碘制得2-甲基-6-[4-(5-甲基-2-p-甲苯基唑-4-基甲氧基)丁氧基甲基]苯甲酸。
C25H29NO5(423.20)LCMS(ESI)424.27[MM+]。
實施例31 2-甲基-6-{4-[2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基唑-4-基甲氧基]丁氧基甲基}苯甲酸
類似于實施例1，由2-(4-羥基丁氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基唑-4-基甲基碘制得2-甲基-6-{4-[2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基唑-4-基甲氧基]丁氧基甲基}苯甲酸。
C25H29NO6(439.20)LCMS(ESI)440.15[MH+]。
實施例32 2-{4-[5-異丙基-2-(3-三氟甲基苯基)唑-4-基甲氧基]丁氧基甲基}-6-甲基苯甲酸
類似于實施例1，由2-(4-羥基丁氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和5-異丙基-2-(3-三氟甲基苯基)唑-4-基甲基碘制得2-{4-[5-異丙基-2-(3-三氟甲基苯基)唑-4-基甲氧基]丁氧基甲基}-6-甲基苯甲酸。
C27H30F3NO5(505.21)LCMS(ESI)506.30[MH+]。
實施例33 2-甲基-6-[4-(2-p-聯(lián)苯基-5-甲基唑-4-基甲氧基)丁氧基甲基]苯甲酸
類似于實施例1，由2-(4-羥基丁氧基甲基)-6-甲基苯甲酸叔丁酯和2-p-聯(lián)苯基-5-甲基唑-4-基甲基碘制得2-甲基-6-[4-(2-p-聯(lián)苯基-5-甲基唑-4-基甲氧基)丁氧基甲基]苯甲酸。
C30H31NO5(485.22)LCMS(ESI)486.47[MH+]。
權(quán)利要求
1.式I的化合物和它們生理上耐受的鹽、溶劑合物和有生理學(xué)作用的衍生物
其中各基團(tuán)含義如下
R1為H、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C2)-烷基、(C1-C6)-烷基巰基、三氟甲氧基、三氟甲基巰基、F、CF3、苯基、苯氧基；
R2為H、O-(C1-C3)-烷基、(C1-C3)-烷基、CF3、三氟甲氧基或
R1和R2與苯環(huán)一起稠合成萘基；
R3為H、(C1-C6)-烷基、苯基、環(huán)己基；
R4、R5為H，其中m可以為1、2；或
為CH3，僅對m＝1而言；
R6為H、(C1-C6)-烷基；
X為CH，如果n＝1或
S，如果n＝0；
n為0或1；
m為1或2。
2.如權(quán)利要求1中所要求保護(hù)的式I化合物，其中R1或R2不為H。
3.如權(quán)利要求1中所要求保護(hù)的式I化合物，其中
R1為H；
R2為O-(C1-C3)-烷基、(C1-C3)-烷基、CF3、三氟甲氧基；
R3為(C1-C6)-烷基；
R4、R5、R6為H；
X為CH；
n為1；
m為1。
4.如權(quán)利要求1中所要求保護(hù)的式I化合物，其中
R1為(C1-C6)-烷基、O-(C1-C2)-烷基、三氟甲氧基、三氟甲基巰基、F、苯基、苯氧基；
R2為H；
R3為(C1-C6)-烷基、苯基、環(huán)己基；
R4、R5、R6為H；
X為CH；
n為1；
m為1。
5.如權(quán)利要求1中所要求保護(hù)的式I化合物，其中
R1和R2同時為H、Me、OMe或
R1和R2與苯環(huán)一起稠合成萘基；
R3為(C1-C6)-烷基；
R4、R5、R6為H；
X為CH；
n為1；
m為1。
6.如權(quán)利要求1中所要求保護(hù)的式I化合物，其中
R1為H、F、Me；
R2為H、OMe、CF3；
R3為H、(C1-C6)-烷基；
R4、R5為Me；
R6為H；
X為CH；
n為1；
m為1。
7.如權(quán)利要求1中所要求保護(hù)的式I化合物，其中
R1為H、F、Me、Ph；
R2為H、OMe、CF3；
R3為(C1-C6)-烷基；
R4、R5、R6為H；
X為CH；
n為1；
m為2。
8.藥物，該藥物包含一種或多種如權(quán)利要求1-7的一項或多項中所要求保護(hù)的式I化合物。
9.藥物，該藥物包含一種或多種如權(quán)利要求1-7的一項或多項中所要求保護(hù)的式I化合物和一種或多種對代謝紊亂或與其相關(guān)的疾病有有益作用的活性成分。
10.藥物，該藥物包含一種或多種如權(quán)利要求1-7的一項或多項中所要求保護(hù)的式I化合物和一種或多種抗糖尿病藥物。
11.藥物，該藥物包含一種或多種如權(quán)利要求1-7的一項或多項中所要求保護(hù)的式I化合物和一種或多種脂類調(diào)節(jié)劑。
12.如權(quán)利要求1-7的一項或多項所要求保護(hù)的式I化合物在治療和/或預(yù)防脂肪酸代謝疾病和葡萄糖利用疾病中的用途。
13.如權(quán)利要求1-7的一項或多項中所要求保護(hù)的式I化合物在治療和/或預(yù)防與胰島素抵抗有關(guān)的疾病中的用途。
14.如權(quán)利要求1-7的一項或多項中所要求保護(hù)的式I化合物在治療和/或預(yù)防糖尿病和與其相關(guān)的后遺癥中的用途。
15.如權(quán)利要求1-7的一項或多項中所要求保護(hù)的式I化合物在治療和/或預(yù)防血脂異常及其后遺癥中的用途。
16.如權(quán)利要求1-7的一項或多項中所要求保護(hù)的式I化合物在治療和/或預(yù)防與代謝綜合征相關(guān)的病癥中的用途。
17.如權(quán)利要求1-7的一項或多項中所要求保護(hù)的化合物聯(lián)合至少一種其它活性化合物在治療和/或預(yù)防脂肪酸代謝疾病和葡萄糖利用疾病中的用途。
18.如權(quán)利要求1-7的一項或多項中所要求保護(hù)的化合物聯(lián)合至少一種其它活性化合物在治療和/或預(yù)防與胰島素抵抗相關(guān)的疾病中的用途。
19.制備包含一種或多種如權(quán)利要求1-7的一項或多項中所要求保護(hù)的化合物的藥物的方法，該方法包括將活性化合物與藥學(xué)上適當(dāng)?shù)妮d體混合，并將該混合物制成適于給藥的形式。
全文摘要
本發(fā)明涉及烷氧甲基取代的苯甲酸衍生物，并涉及其生理上可容許的鹽和其具有生理學(xué)功能的衍生物。本發(fā)明還涉及式I化合物和其生理上可容許的鹽以及制備所述化合物的方法，式I化合物中各基團(tuán)有特定的含義。本發(fā)明化合物例如可用于預(yù)防和/或治療脂肪酸代謝疾病、葡萄糖利用疾病以及胰島素抵抗在其中起作用的疾病。
文檔編號C07D263/32GK101193874SQ200680020649
公開日2008年6月4日 申請日期2006年6月9日 優(yōu)先權(quán)日2005年6月24日
發(fā)明者C·施塔帕爾, H·格隆比克, E·法爾克, S·凱爾, H-L·舍費爾, W·文德勒, S·哈什特爾 申請人:塞諾菲-安萬特股份有限公司