一種快速檢測煙用水基膠中異噻唑啉酮類化合物的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種快速檢測煙用水基膠中異噻唑啉酮類化合物的方法，該方法包括如下步驟：向煙用水基膠樣品中加入萃取劑，所述萃取劑與水基膠樣品的體積質(zhì)量比例為5?40mL:0.3g；然后進(jìn)行超聲萃取，萃取時間為5?45min，得到萃取液；將得到的萃取液進(jìn)行離心，取上清液，向上清液中吹入氮氣，得到濃縮的上清液；使?jié)饪s的上清液通過濾膜，得到待測液；采用超高效液相色譜?二極管陣列對得到的待測液中的異噻唑啉酮類化合物進(jìn)行定量分析。本發(fā)明可同時對煙用水基膠中至少3種異噻唑啉酮類化合物進(jìn)行分析檢測，而且處理簡便，分析速度快，檢測結(jié)果準(zhǔn)確且重復(fù)性好、靈敏度高，適用于煙用水基膠及其它復(fù)雜基質(zhì)中3種異噻唑啉酮類化合物的測定。
【專利說明】
一種快速檢測煙用水基膠中異噻唑啉酮類化合物的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及化學(xué)檢測技術(shù)領(lǐng)域，更具體涉及一種快速檢測煙用水基膠中異噻唑啉 酮類化合物的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 水基膠是通過乳液聚合而成的含水膠乳，易受微生物侵襲，而異噻唑啉酮的添加 可以起到殺菌防腐的作用。但研究發(fā)現(xiàn)，暴露在環(huán)境中的異噻唑啉酮類化合物會存在健康 隱患，如甲基異噻唑啉酮具有一定的細(xì)胞毒性和神經(jīng)毒性，與皮膚接觸有過敏性反應(yīng)等。而 國內(nèi)外對玩具、食品、化妝品等領(lǐng)域?qū)Ξ愢邕蜻悮⒕鷦┑挠昧俊埩袅亢吞囟ㄞ|移量都 有嚴(yán)格的管控，如歐盟玩具安全標(biāo)準(zhǔn)EN71-9-2005(對MI、CMI和BIT的限量分別為10、10和 5mg/kg，并且MI和BIT總限量為15mg/kg) [ 6 ]、；我國GB 9685-2008《食品容器、包裝材料用添 加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》(對MI、CMI和BIT的特定迀移限量分別為0.5mg/kg、不能檢出和1.2mg/ kg )、；我國和歐盟化妝品法規(guī)對MI和BIT的限量均分別為0.01 %和0.0015 %。由于煙用水基 膠由于可能會直接接觸消費者的口腔，異噻唑啉酮的加入量直接影響到吸食安全性，因此 建立水基膠中異噻唑啉酮含量的測定方法對產(chǎn)品質(zhì)量安全管控尤為必要。
[0003] 目前，異噻唑啉酮類化合物的檢測方法主要有紫外分光光度法、高效液相色譜法、 氣相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜法、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法等。水基膠中異噻唑啉酮類化合物的 已報道檢測方法有高效液相色譜法和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法，而超高效液相色譜法尚無報 道。相比之下，高效液相色譜法分析時間長，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法設(shè)備要求高，而超高效液 相色譜是一種基于小顆粒填料技術(shù)，具有超高速度、超高分離度和超高靈敏度的新一代液 相分離技術(shù)。不僅分析時間短，而且分離效果和靈敏度高。因此急需研發(fā)出超高效液相色譜 法的水基膠中異噻唑啉酮類化合物的檢測方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] (一)要解決的技術(shù)問題
[0005] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題就是如何簡單、快速、靈敏的測定煙用水基膠中的異噻 唑啉酮類化合物，而提供一種快速檢測煙用水基膠中異噻唑啉酮類化合物的方法。
[0006] (二)技術(shù)方案
[0007] 為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種快速檢測煙用水基膠中異噻唑啉酮類 化合物的方法，該方法包括如下步驟：
[0008] 步驟一:超聲萃?。合驘熡盟z樣品中加入萃取劑，所述萃取劑與水基膠樣品的 體積質(zhì)量比例為5-40mL: 0.3g;然后進(jìn)彳丁超聲萃取，萃取時間為5_45min，得到萃取液；
[0009] 步驟二：離心濃縮：將步驟二得到的萃取液進(jìn)行離心，所述的離心轉(zhuǎn)速為5000-1000〇1'/111；[11，離心時間2-101]1；[11，取上清液，向上清液中吹入氮氣，得到濃縮的上清液 ；
[0010] 步驟三:濾膜過濾:使?jié)饪s的上清液通過濾膜，所述的濾膜為〇. 20-0.25μπι的有機(jī) 相濾膜，得到待測液；
[0011] 步驟四：定量分析:采用超高效液相色譜-二極管陣列對步驟三得到的待測液中的 異噻唑啉酮類化合物進(jìn)行定量分析。
[0012] 優(yōu)選地，在步驟一中，所述的萃取劑為水和甲醇，水和甲醇的體積比為0.5-10:1。 [00 13]優(yōu)選地，在步驟一中，所述的水和甲醇的體積比為1:1。
[0014] 優(yōu)選地，在步驟一中，所述萃取劑與水基膠樣品的體積質(zhì)量比例為20mL:0.3g;所 述的超聲萃取時間為30min。
[0015] 優(yōu)選地，在步驟二中，所述的離心轉(zhuǎn)速為9000r/min，離心時間5min。
[0016] 優(yōu)選地，在步驟二中，所述的上清液的濃縮倍數(shù)為2-8倍 [0017]優(yōu)選地，在步驟三中，所述的濾膜為〇.22μπι的有機(jī)相濾膜。
[0018] 優(yōu)選地，在步驟四中，所述的超高效液相色譜的條件為：色譜柱為ACQUITY UPLC BEH Phenyl(2. IX 50mm，1.7ym)，ACQUITY UPLC BEH C18(2. IX 50mm，1·7μπι)或ACQUITY 1^〇：!?5了3(2.1\50111111，1.84111)，優(yōu)選厶〇01]叮￥1^1^：!^5了3(2.1\50臟，1.84111) ;柱溫： 25-50°C，優(yōu)選35°C ;進(jìn)樣量：5-10yL，優(yōu)選8yL;流速:0 · 1-0 · 5mL/min，優(yōu)選0 · 2mL/min;流動 相A為水，B為乙腈;梯度洗脫程序為:0~（l-8)min:B由0.01-0.5%上升為20-60%; (1-8)~ (8-12)min:B由20-60%降為0.01-0.5%，保持l-5min;優(yōu)選0~4min:B由0.1%上升為40% ; 4~5min:B由40%降為0.1%，保持2min。
[0019] 優(yōu)選地，在步驟四中，所述的二極管陣列條件為：檢測波長：0~（0.5-7)min: 275nm，（0 · 5-7 · 5)~（l_8)min: 318nm;優(yōu)選0~3 · 4min: 275nm，3 · 4~4min: 318nm〇
[0020] 優(yōu)選地，在步驟四中，采用超高效液相色譜-二極管陣列對步驟三得到的待測液中 的異噻唑啉酮類化合物進(jìn)行定量分析中采用水和甲醇配制混合異噻唑啉酮標(biāo)準(zhǔn)貯備液、不 同濃度梯度的異噻唑啉酮混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，具體為：
[0021] 混合異噻唑啉酮標(biāo)準(zhǔn)貯備液:分別稱取2-甲基-3(2H)_異噻唑啉酮(MI)、5_氯-2-甲基-2H-異噻唑-3-酮(CMI)和1，2_苯并異噻唑基-3(2H)_酮(BIT)三種不同質(zhì)量的異噻唑 啉酮標(biāo)樣，置于50mL容量瓶中，加入甲醇定容，搖勻，得到混合異噻唑啉酮標(biāo)準(zhǔn)貯備液，備 用；
[0022] 不同濃度梯度的異噻唑啉酮混合標(biāo)準(zhǔn)溶液:準(zhǔn)確移取5，10，50，100，250，500yL混 合異噻唑啉酮標(biāo)準(zhǔn)貯備液于6只25mL容量瓶中，用水定容，搖勻，得到不同濃度梯度的異噻 唑啉酮混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，備用。
[0023](三)有益效果
[0024]本發(fā)明快速檢測煙用水基膠中異噻唑啉酮類化合物的方法具有顯著的效果:可同 時對煙用水基膠中至少3種異噻唑啉酮類化合物進(jìn)行分析檢測，而且前處理簡便，分析速度 快，檢測結(jié)果準(zhǔn)確且重復(fù)性好、靈敏度高，適用于煙用水基膠及其它復(fù)雜基質(zhì)中3種異噻唑 啉酮類化合物的測定。
【附圖說明】
[0025]為了更清楚地說明本發(fā)明實施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對實施例或現(xiàn) 有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本 發(fā)明的一些實施例，對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下，還可以 根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。
[0026]圖1是標(biāo)準(zhǔn)樣品色譜圖；
[0027]圖2是實施例樣品色譜圖；
【具體實施方式】
[0028] 下面結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明的實施方式作進(jìn)一步詳細(xì)描述。以下實施例用于 說明本發(fā)明，但不能用來限制本發(fā)明的范圍。
[0029] 作為本發(fā)明優(yōu)選的實施方式，采用甲醇和水配制標(biāo)準(zhǔn)溶液(混合異噻唑啉酮標(biāo)準(zhǔn) 貯備液和不同濃度梯度的異噻唑啉酮混合標(biāo)準(zhǔn)溶液）：
[0030] 1)混合異噻唑啉酮標(biāo)準(zhǔn)貯備液:分別準(zhǔn)確稱取2-甲基-3(2H)_異噻唑啉酮(MI)、5_ 氯-2-甲基-2H-異噻唑-3-酮(QO)U， 2-苯并異噻唑基-3(2H)-酮(BIT)3種不同治療的異噻 唑啉酮標(biāo)樣，見表1，精確至0. 〇〇〇 Ig，置于50mL容量瓶中，加入甲醇定容，搖勻，得到混合異 噻唑啉酮標(biāo)準(zhǔn)貯備液。
[0031 ] 表1:混合異噻唑啉酮標(biāo)準(zhǔn)貯備液中化合物濃度
[0033] 2)不同濃度梯度的異噻唑啉酮混合標(biāo)準(zhǔn)溶液:準(zhǔn)確移取5，10，50，100，250，500yL 混合異噻唑啉酮標(biāo)準(zhǔn)貯備液于6只25mL容量瓶中，用水定容，搖勻，得到不同濃度梯度的異 噻唑啉酮混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。
[0034] 分別對6個不同濃度梯度的異噻唑啉酮混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行UPLC/PDA分析，如圖1所 示，以異噻唑啉酮類化合物的峰面積(Y)對相應(yīng)的異噻唑啉酮化合物濃度(X，yg/mL)進(jìn)行線 性回歸分析，得到3種異噻唑啉酮類化合物的工作曲線回歸方程和相關(guān)系數(shù)。通過稀釋最低 濃度混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，異噻唑啉酮在儀器上產(chǎn)生不低于3倍信噪比（S/N)和10倍信噪比（S/N) 所對應(yīng)的分析物濃度分別計為方法的檢出限(LOD)和定量限(L0Q)。結(jié)果如表2所示。
[0035]表2異噻唑啉酮類化合物工作曲線、相關(guān)系數(shù)、檢測限和定量限
[0037]采用標(biāo)準(zhǔn)加入法測定本發(fā)明所述檢測方法的回收率，稱取一定量的已檢出3種異 噻唑啉酮含量的煙用水基膠樣品（圖2)，分3份，分別按照低、中、高3個添加水平加入上述混 合標(biāo)準(zhǔn)品，按優(yōu)化的方法測定異噻唑啉酮的含量，計算方法的回收率，結(jié)果見表3。由表3可 以看出，異噻唑啉酮的回收率在92.2 %~100.4%之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為1.8 %~6.8%， 表明本方法的準(zhǔn)確性和精密度較好。
[0038] 表3:回收率和精密度(n = 6)
[0041]本發(fā)明所述的檢測方法可同時對煙用水基膠中至少3種異噻唑啉酮類化合物進(jìn)行 分析檢測，而且前處理簡便，分析速度快，檢測結(jié)果準(zhǔn)確且重復(fù)性好、靈敏度高，適用于煙用 水基膠及其它復(fù)雜基質(zhì)中3種異噻唑啉酮類化合物的測定。
[0042]下面用實施例進(jìn)一步說明本發(fā)明：
[0043] 實施例1
[0044] 1)分別準(zhǔn)確稱取8種不同類型煙用水基膠樣品0.3g于50mL具塞三角瓶中，先加入 IOmL超純水輕微搖晃使水基膠均勾分散，再加入IOmL甲醇混勾后，超聲30min;
[0045] 2)轉(zhuǎn)移至50mL離心管中，9000r/min離心5min，取2mL上清液，用氮吹濃縮至ImL后 (不足ImL時加入超純水定容至ImL)過0.22μπι水相濾膜于色譜瓶，待分析；
[0046] 3)用超高效液相色譜-二極管陣列（UPLC-PDA)進(jìn)行定量分析，檢測結(jié)果如表4所 不。
[0047] 其中，UPLC-PDA條件如下：
[0048] 色譜條件：分析柱：Waters ACQUITY UPLC HSS Τ3(2· IX 50mm, 1·7μπι);柱溫：35 °C ;進(jìn)樣量:8yL;流速:0.2mL/min;流動相A為水，B為乙腈;梯度洗脫程序為:0~4min: B由 0.1% 上升為 40%;4 ~5min:B 由 40% 降為 0.1%，保持 2min。
[0049] PDA 條件：檢測波長：0~3 · 4min: 275nm，3 · 4~4 · Omin: 318nm;
[0050] 表4:3種異噻唑啉酮化合物的含量(yg/g)
[0052] 注未檢出
[0053]結(jié)果表明，煙用水基膠中3種異噻唑啉酮類化合物都有不同程度的添加，其中MI使 用相對于CMI和BIT更多。
[0054]以上實施方式僅用于說明本發(fā)明，而非對本發(fā)明的限制。盡管參照實施例對本發(fā) 明進(jìn)行了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，對本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行各種組合、 修改或者等同替換，都不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的精神和范圍，均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的權(quán)利要 求范圍當(dāng)中。
【主權(quán)項】
1. 一種快速檢測煙用水基膠中異噻唑啉酮類化合物的方法，其特征在于，該方法包括 如下步驟： 步驟一:超聲萃?。合驘熡盟z樣品中加入萃取劑，所述萃取劑與水基膠樣品的體積 質(zhì)量比例為5-40mL:0.3g;然后進(jìn)彳丁超聲萃取，萃取時間為5_45min，得到萃取液； 步驟二:離心濃縮:將步驟二得到的萃取液進(jìn)行離心，所述的離心轉(zhuǎn)速為5000-10000r/ min，離心時間2-1 Omin，取上清液，向上清液中吹入氮氣，得到濃縮的上清液； 步驟三:濾膜過濾:使?jié)饪s的上清液通過濾膜，所述的濾膜為〇 . 20-0.25μπι的有機(jī)相濾 膜，得到待測液； 步驟四：定量分析:采用超高效液相色譜-二極管陣列對步驟三得到的待測液中的異噻 唑啉酮類化合物進(jìn)行定量分析。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速檢測煙用水基膠中異噻唑啉酮類化合物的方法，其特征 在于，在步驟一中，所述的萃取劑為水和甲醇，水和甲醇的體積比為0.5-10:1。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的快速檢測煙用水基膠中異噻唑啉酮類化合物的方法，其特征 在于，在步驟一中，所述的水和甲醇的體積比為1:1。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速檢測煙用水基膠中異噻唑啉酮類化合物的方法，其特征 在于，在步驟一中，所述萃取劑與水基膠樣品的體積質(zhì)量比例為20mL:0.3g;所述的超聲萃 取時間為30min。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速檢測煙用水基膠中異噻唑啉酮類化合物的方法，其特征 在于，在步驟二中，所述的離心轉(zhuǎn)速為9000r/min，離心時間5min。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速檢測煙用水基膠中異噻唑啉酮類化合物的方法，其特征 在于，在步驟二中，所述的上清液的濃縮倍數(shù)為2-8倍。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速檢測煙用水基膠中異噻唑啉酮類化合物的方法，其特征 在于，在步驟三中，所述的濾膜為0.22μπι的有機(jī)相濾膜。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速檢測煙用水基膠中異噻唑啉酮類化合物的方法，其特征 在于，在步驟四中，所述的超高效液相色譜的條件為:色譜柱為ACQUITY UPLC BEH Phenyl (2.1X50mm，1.7ym)，ACQUITYUPLCBEHC18(2.1X50mm，1.7ym)SACQUITYUPLCHSST3 (2 · 1 X 50mm，1 · 8μπι);柱溫：25-50°C ;進(jìn)樣量：5-10yL;流速:0 · 1-0 · 5mL/min;流動相A為水，B 為乙腈;梯度洗脫程序為：〇~（l-8)min:B由0.01-0.5%上升為20-60%; (1-8)~（8-12) 11^11:8由20-60%降為0.01-0.5%，保持1-511^11。9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速檢測煙用水基膠中異噻唑啉酮類化合物的方法，其特征 在于，在步驟四中，所述的二極管陣列條件為:檢測波長:〇~(〇. 5-7)min: 275nm，（0.5-7.5) ~（l-8)min:318nm〇10. 根據(jù)權(quán)利要求1-9任一項所述的快速檢測煙用水基膠中異噻唑啉酮類化合物的方 法，其特征在于，在步驟四中，采用超高效液相色譜-二極管陣列對步驟三得到的待測液中 的異噻唑啉酮類化合物進(jìn)行定量分析中采用水和甲醇配制混合異噻唑啉酮標(biāo)準(zhǔn)貯備液、不 同濃度梯度的異噻唑啉酮混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，具體為： 混合異噻唑啉酮標(biāo)準(zhǔn)貯備液:分別稱取2-甲基-3(2H)_異噻唑啉酮、5-氯-2-甲基-2H-異噻唑-3-酮和1,2-苯并異噻唑基-3(2H)_酮三種不同的異噻唑啉酮標(biāo)樣，置于50mL容量瓶 中，加入甲醇定容，搖勻，得到混合異噻唑啉酮標(biāo)準(zhǔn)貯備液，備用； 不同濃度梯度的異噻唑啉酮混合標(biāo)準(zhǔn)溶液:準(zhǔn)確移取5，10，50，100，250，500yL混合異 噻唑啉酮標(biāo)準(zhǔn)貯備液于6只25mL容量瓶中，用水定容，搖勻，得到不同濃度梯度的異噻唑啉 酮混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，備用。
【文檔編號】G01N30/02GK105842351SQ201610152249
【公開日】2016年8月10日
【申請日】2016年3月17日
【發(fā)明人】姬厚偉, 劉劍, 彭黔榮, 董睿, 張麗, 王芳
【申請人】貴州中煙工業(yè)有限責(zé)任公司