專利名稱:作為大麻素受體配體的咪唑并吡啶衍生物的制作方法
作為大麻素受體配體的咪唑并吡咬衍生物本發(fā)明涉及新的咪唑并吡咬衍生物,包含這些化合物的藥物組合物以及 其在治療疾病尤其是疼痛中的用途,所述的疾病由大麻素受體活性的升高或 降低而直接地或間接地引起。大麻素是一類特定的存在于印度大麻(Cannabis sativa)中的精神活性的 化合物,包括約60種不同分子,最具代表性的是大麻酚、大麻二酚以及幾 種四氫大麻酚的異構(gòu)體。大麻的治療活性的知識(shí)可以追溯到中國(guó)遠(yuǎn)古時(shí)代, 在5,000年以前,大麻用來(lái)治療哮喘、偏頭痛以及一些婦科疾病。這些用途 后來(lái)被確認(rèn),以致在約1850年,大麻提取物包括在美國(guó)藥典中并且一直保 持至1947年。已知大麻素可以對(duì)多種系統(tǒng)和/或器官引起不同的作用,最重要的是對(duì)中 樞神經(jīng)系統(tǒng)以及心血管系統(tǒng)的作用。這些效果包括改善記憶以及認(rèn)知、欣快 以及鎮(zhèn)靜。大麻素也增加心率并改變?nèi)韯?dòng)脈壓。也觀察到涉及支氣管收縮、 免疫調(diào)節(jié)以及炎癥的外周作用。大麻素降低眼內(nèi)壓以及影響呼吸以及內(nèi)分泌 系統(tǒng)的能力也有很多文件證明。參見(jiàn)如L.E. Hollister, Health Aspects of Cannabis, Pharmacological Reviews, Vol. 38, pp. 1-20,(1986)。最近,已經(jīng)發(fā)現(xiàn) 大麻素抑制細(xì)胞和體液免疫應(yīng)答并顯示消炎作用。Wirth等人, Anti-inflammatory Properties of Cannabichrome, Life Science, Vol. 26, pp. 1991-1995,(1980)。盡管有前述的有利作用,大麻的治療用途仍然存在爭(zhēng)論,由于其相關(guān)的 精神活性作用(引起依賴性以及成癮性),以及由于迄今尚未完全闡明的多方 面的副作用。盡管自1940'年代以來(lái),該領(lǐng)域的工作一直在進(jìn)行,表明不是 繼發(fā)于CNS作用的而直接介導(dǎo)大麻素外周作用的證據(jù)一直受限于受體表征 缺乏、有關(guān)內(nèi)源性大麻素配體的信息缺乏以及直至最近受體亞型選擇性化合 物的缺乏。發(fā)現(xiàn)第一種大麻素受體主要位于腦部、在神經(jīng)細(xì)胞中,并且只有很少的 一部分,位于外周細(xì)胞水平。從其定位的角度考慮,稱之為中樞受體("CBl")。參見(jiàn)Matsuda等人,"Structure of a Cannabinoid Receptor and Functional Expression of the Cloned cDNA," Nature, Vol. 346, pp. 561-564(1990)。第二種 大麻素受體("CB2")在脾中被鑒定出來(lái),并被認(rèn)為調(diào)節(jié)大麻素的非精神活性。 參見(jiàn)Munro等人,"Molecular Characterization of a Peripheral Receptor for Cannabinoids," Nature, Vol. 365, pp. 61-65(1993)。前述適應(yīng)癥以及CB2受體在免疫系統(tǒng)的優(yōu)先定位確證了 CB2在調(diào)節(jié)對(duì)遭受疼痛的患者的總數(shù)非常大(差不多3億人),主要遭受背疼痛、骨關(guān) 節(jié)炎疼痛以及術(shù)后疼痛。神經(jīng)性疼痛(與神經(jīng)損傷有關(guān)的如由糖尿病、HIV、 皰滲感染或中風(fēng)誘導(dǎo)的那些)發(fā)生患病率較低,但是仍然基本上普遍,如癌 癥疼痛 一樣。虧1起疼痛癥狀的發(fā)病才幾理分成兩個(gè)主要類型-為炎性組織反應(yīng)成分的那些(炎性疼痛);-源自 一些形式的神經(jīng)損傷的那些(神經(jīng)性疼痛)。慢性炎癥疼痛主要包括骨關(guān)節(jié)炎、慢性腰部疼痛和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。疼 痛源自急性以及進(jìn)行性損傷和/或炎癥。可為自發(fā)的以及刺激的疼痛二者。由于生理應(yīng)激性增高以及進(jìn)一 步增強(qiáng)這種應(yīng)激性增高的炎性介質(zhì)的釋 放,存在潛在的病理超敏感性。CB2受體在炎性細(xì)胞(T細(xì)胞、B細(xì)胞、巨噬 細(xì)胞、肥大細(xì)胞)上表達(dá)并通過(guò)抑制細(xì)胞相互作用/炎性介質(zhì)的釋放調(diào)節(jié)免疫新近,數(shù)據(jù)表明CB2受體激活在CNS中起作用。直到最近,CB2受體被 認(rèn)為限于外周,然而出現(xiàn)的數(shù)據(jù)表明,大鼠脊髓中CB2受體表達(dá)的炎性痛介 導(dǎo)的誘導(dǎo)與激活的小神經(jīng)膠質(zhì)的出現(xiàn)一致(Zhang等2003)。此外,CB2受體激 動(dòng)劑已經(jīng)表明在炎性疼痛的動(dòng)物模型中機(jī)械地降低脊髓背角中引起的反應(yīng) 和寬動(dòng)態(tài)范圍神經(jīng)元的纏繞(Zhang等,2003, Eur J. Neurosci. 17: 2750-2754, Nackley等,2004, J. Neurophys, 92: 3562-3574, Elmes等,2004, Eur. J. Neurosci. 20: 2311-2320.)CB2在免疫調(diào)節(jié)、炎癥、骨質(zhì)疏松癥、心血管疾病、腎病以及其它疾病 病癥中的作用目前還在研究中。基于上文,需要具有抗CB2受體活性的化合物。因此,CB2調(diào)節(jié)劑被 認(rèn)為提供對(duì)免疫疾病、炎癥、骨質(zhì)疏松癥、腎缺血以及其它病理生理病癥的藥物治療的唯一途徑。WO 04/018433、 WO 04/018434、 WO 04/029027和WO 04/029026(所有 以Glaxo Group Limited的名義)描述了用于治療直接或間接由大麻素受體活 性增加或減少引起的疾病的嗜咬和吡。定衍生物。本發(fā)明提供式(I)的新的咪唑并吡咬衍生物及其藥學(xué)上可接受的衍生物, 含有這些化合物或衍生物的藥物組合物,以及它們作為CB2受體調(diào)節(jié)劑的 用途,其用于治療各種疾病。本發(fā)明還包括治療在動(dòng)物包括人中由CB2受體介導(dǎo)的疾病的方法,包 括給予需要的動(dòng)物有效無(wú)毒數(shù)量的式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生 物??紤]到大麻素對(duì)能夠調(diào)節(jié)各種功能性作用的受體起作用的事實(shí),以及考 慮到CB2和CBl之間的低同源性,希望一類對(duì)特異性受體亞型具有選擇性 的藥物?,F(xiàn)行的天然或合成大麻素不能實(shí)現(xiàn)這種功能,因?yàn)樗鼈儗?duì)兩種受體 都是活性的。在一個(gè)實(shí)施方案中,本發(fā)明包括能夠選擇性地調(diào)節(jié)大麻素受體,并因此 調(diào)節(jié)與這些受體有關(guān)的病理。本發(fā)明提供式(I)的化合物其中X,是NR4或O;R/選自氫、d—6烷基、C3-6環(huán)烷基和鹵代d—6烷基;R2是氫或(CH2)mR3,其中m是0或1;或R1和R2與它們所連接的N —起形成任選取代的4-至8-員非芳香族雜 環(huán)基環(huán);W是4-至8-員非芳香族雜環(huán)基、(:3.8環(huán)烷基、直鏈或支鏈Cw。烷基、Cwo鏈烯基、C3-8環(huán)烯基、Cw。炔基、C3-8環(huán)炔基或苯基,其中任何一個(gè)可以是未取代的或取代的,或R"R4選自氫、C!-6烷基、(:3.6環(huán)烷基、卣代Cw烷基、COCH3和S02Me;<formula>formula see original document page 8</formula>其中p是0、 l或2,以及X是CH2、 O、 S或S02;W是未取代的或取代的苯基、未取代的或取代的C3,6環(huán)烷基或未取代的 或取代的4-至8-員非芳香族雜環(huán)基環(huán);R7是OH、 d-6烷氧基、NR8aR8b、 NHCOR9、順802119或SOqR9;R8a是H或Cw烷基;R8b是H或C卜6烷基; R9是Cw烷基;Rw是氫、取代或未取代的(CL6)烷基或氯; R^是氫或C^烷基; R^是氫或CL6烷基; q是0、 1或2; 或其藥學(xué)上可接受的衍生物。在一個(gè)實(shí)施方案中,R^是氫。在一個(gè)實(shí)施方案中,R"是(CH2)mR"其中m是0或1。 在一個(gè)實(shí)施方案中,Xi是NR4。 在一個(gè)實(shí)施方案中,Xi是O。當(dāng)113或Re獨(dú)立地選自非芳香族雜環(huán)基時(shí),所述的環(huán)可以含有1、 2、 3 或4個(gè)雜原子。在一個(gè)實(shí)施方案中,所述的雜原子選自氧、氮或硫。4-員基 團(tuán)的例子是2-或3-氮雜環(huán)丁烷基、氧雜環(huán)丁烷基、硫氧雜環(huán)丁基、硫氧雜環(huán) 丁基-s-氧化物和硫氧雜環(huán)丁基-s,s-二氧化物。在此情況中,5-員雜環(huán)基的例 子包括二氧戊環(huán)基、吡咯烷基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、四氫噻吩基-s,s-二氧化物和四氫噻吩基-s-氧化物。6-員雜環(huán)基的例子是嗎啉基、哌咬基、哌 嗪基、四氫吡喃基、四氫p塞喃基、四氫噻喃基-s,s-二氧化物、硫代嗎啉基、 硫代嗎啉基-s,s-二氧化物、四氫吡咬基、二嘈、烷基、四氫硫代吡喃-l,l-二氧 化物和四氫硫代吡喃-l-氧化物。7-員雜環(huán)基的例子是氮雜簟或氧雜簞。8-員R5是基團(tuán)的例子是氮雜環(huán)辛烷基、氮氧雜環(huán)辛烷基或氮硫雜環(huán)辛烷基、氧雜環(huán)辛 烷基、硫雜環(huán)辛烷基和氮雜硫雜環(huán)辛烷基-S-氧化物、氮雜;克雜環(huán)辛烷基-S,S-二氧化物、疏雜環(huán)辛烷基-S,S-二氧化物和硫雜環(huán)辛烷基-S-氧化物。 在一個(gè)實(shí)施方案中,W是未取代的或取代的Cw烷基。 在一個(gè)實(shí)施方案中,R"是d-6烷基或氫,例如曱基或氫。在一個(gè)實(shí)施方案中,R"是氫。當(dāng)R1和R2與它們相連的N —起形成任選取代的非芳香族雜環(huán)基環(huán)時(shí), 所述的環(huán)可以Y壬選含有1、 2、 3或4個(gè)其它的雜原子。所述的環(huán)可以是々包和 或不飽和的。在一個(gè)實(shí)施方案中,所述的其它雜原子選自氧、氮或硫。4-員 雜環(huán)基環(huán)的例子是氮雜環(huán)丁烷基。5-員雜環(huán)基環(huán)的例子是吡咯烷基和吡唑烷 基。6-員雜環(huán)基環(huán)的例子是嗎啉基、哌嗪基、哌咬基、四氫吡咬基、硫代嗎 啉-s,s-二氧化物、硫代嗎啉基和硫代嗎啉基-s-氧化物。7-員雜環(huán)基環(huán)的例子 是氮雜罩或氧雜罩。8-員雜環(huán)基環(huán)的例子是氮雜環(huán)辛烷基、氮雜氧雜環(huán)辛烷 基或氮雜硫雜環(huán)辛烷基。在一個(gè)實(shí)施方案中,W和W與它們相連的氮一起形成嗎啉基、吡咯烷 基或哌。定基環(huán)。在另一個(gè)實(shí)施方案中,W和112與它們相連的氮一起形成嗎 啉基環(huán)。在一個(gè)實(shí)施方案中,RS是未取代的或取代的苯基。 在一個(gè)實(shí)施方案中,W是OH。 在一個(gè)實(shí)施方案中,111()是氫。在一個(gè)實(shí)施方案中,1112是甲基或氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中,RU是甲基。 在一個(gè)實(shí)施方案中,R"是曱基或氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中,R"是氫。 當(dāng)W被取代時(shí),它可以被l、 2或3個(gè)取代基取代,所述的取代基可以 選自6烷基、鹵代d-6烷基例如三氟曱基,d-6烷氧基、羥基、氰基、 卣代、(^.6烷基磺酰基、-CONH2、 -NHCOCH3、 -COOH、鹵代Cw烷氧基例 如三氟甲基氧基和S02NR8aR8b,其中R&和RSb如上所定義。 在一個(gè)實(shí)施方案中,116被1或2個(gè)取代基取代。在一個(gè)實(shí)施方案中,W被選自鹵代、氰基、曱基、三氟甲基、曱氧基和 三氟曱氧基的取代基取代。在一個(gè)實(shí)施方案中,RM皮卣代如氯取代。在另一個(gè)實(shí)施方案中,116是 3-氯苯基。當(dāng)R1和R2與它們所連接的N —起形成4-至8-員被取代的非芳香族雜環(huán) 基環(huán)時(shí),或當(dāng)R"被取代時(shí),所述的一個(gè)或多個(gè)取代基可以選自Q-6烷基、CL6烷氧基、羥基、囟代d—6烷基如三氟曱基、卣代C,-6烷氧基如三氟曱基氧基、氰基、卣代或磺?;?、曱基磺?;?、NR8aR8b、 CONH2、 NHCOCH3、 (O)、 COOH、 CONHCH3、 CON(CH3)j。 NHS02CH3,其中R8a和R幼如上所述。當(dāng)R1和R2與它們所連接的N —起形成4-至8-員被取代的非芳香族雜環(huán) 基環(huán)時(shí),或當(dāng)W被取代時(shí),可以存在l、 2或3個(gè)取代基。 當(dāng)R^被取代時(shí),所述的取代基可以選自卣素。 在一個(gè)實(shí)施方案中,本發(fā)明是式(Ia)的化合物;其中W是氫;R2是(CH2)mR3,其中m是0或1;或R1和R2與它們相連的N —起形成可以是未取代的或取代的嗎啉基、吡咯烷基或旅p先基環(huán);W是未取代的或取代的直鏈或支鏈Cw烷基;W是氫或曱基,R6是未取代的或取代的苯基;R"是氫或甲基; 或其藥學(xué)上可接受的衍生物。在某些實(shí)施方案中,式(I)的化合物顯示出對(duì)CB2超過(guò)CB1的選擇性。在一個(gè)實(shí)施方案中,式(I)的化合物對(duì)克隆人大麻素CB2受體所具有的 EC50值是對(duì)克隆人大麻素CB 1受體的EC50值的至少50倍和/或?qū)B 1受體具 有小于10。/。效力。在一個(gè)實(shí)施方案中,式(I)的化合物對(duì)克隆人大麻素CB2受體的EMR值是 對(duì)克隆人大麻素CB1受體的EMR值的至少5倍。在另一個(gè)實(shí)施方案中,式(I) 的化合物對(duì)克隆人大麻素CB2受體的EMR值是對(duì)克隆人大麻素CB1受體的 EMR值的至少10倍。EMR是等有效摩爾比并且可以由下面所示的方程計(jì)算數(shù)值。當(dāng)式(I)的化合物口服給予哺乳動(dòng)物時(shí),與早先公開(kāi)的CB2激動(dòng)劑的化合 物相比,該化合物可能更有效和/或更可溶和/或更高的生物利用度和/或產(chǎn)生 更線性的接觸增加。本發(fā)明利用下述定義進(jìn)行描述,除非另有說(shuō)明。術(shù)語(yǔ)"藥學(xué)上可接受的衍生物"指式(I)化合物的任何藥學(xué)上可接受的鹽、 酯、所述酯的鹽、或溶劑合物(包括鹽、酯或酯的鹽的溶劑合物),或任何其 他的化合物,其經(jīng)對(duì)接受者給藥后能提供(直接地或間接地)式(I)的化合物或 其活性代謝物或殘留物。在一個(gè)實(shí)施方案中,所述的藥學(xué)上可接受的衍生物 是式(I)化合物的鹽或溶劑合物。官能團(tuán)上進(jìn)行修飾以提供其藥學(xué)上可接受的衍生物,并且式(I)的化合物可在 多于一個(gè)位置上進(jìn)行衍生。應(yīng)該理解,對(duì)于藥用,上述鹽、酯、酯的鹽和溶劑合物為生理可接受鹽、 酯、酯的鹽和溶劑合物,但是其他鹽、酯、酯的鹽和溶劑合物也可用于,例 如制備式(I)的化合物和其生理可接受鹽、酯、酯的鹽和溶劑合物。藥學(xué)上可 才妄受的鹽包4舌由Berge, Bighley和Monkhouse , J. Pharm. Sci., 1977, 66, 1-19 中記載的那些鹽。術(shù)語(yǔ)"藥學(xué)上可接受的鹽"包括由藥學(xué)上可接受的無(wú)毒石咸包 括無(wú)機(jī)堿以及有機(jī)堿制備的鹽。衍生自無(wú)機(jī)堿的鹽包括鋁鹽、銨鹽、4丐鹽、 銅鹽、鐵鹽、亞鐵鹽、鋰鹽、鎂鹽、錳鹽、二價(jià)錳鹽、鉀鹽、鈉鹽、鋅鹽等。 衍生自藥學(xué)上可接受的有機(jī)無(wú)毒堿的鹽包括衍生自下述堿的鹽伯、仲以及 叔胺、取代的胺包括天然存在的取代的胺、環(huán)胺以及堿性離子交換樹(shù)脂,如 精氨酸、甜菜堿、咖啡因、膽堿、N,N'-二芐基乙二胺、二乙基胺、2-二乙基 氨基乙醇、2-二曱基氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基-嗎啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、葡糖胺、組氨酸、哈胺(hydrabamine )、異丙基胺、賴氨酸、曱基 葡萄糖胺、嗎啉、哌嗓、哌啶、多胺樹(shù)脂、普魯卡因、嘌呤、可可堿、三乙 基胺、三甲基胺、三羥曱基氨基曱烷、三丙基胺、氨基丁三醇等。當(dāng)本發(fā)明 的化合物為堿性的時(shí)候,鹽可從藥學(xué)上可接受的無(wú)毒酸包括無(wú)機(jī)和有機(jī)酸制 備。所述的酸包括乙酸、苯磺酸、苯曱酸、樟腦石黃酸、檸檬酸、乙磺酸、富 馬酸、葡糖酸、谷氨酸、氫溴酸、氫氯酸、羥乙基磺酸、乳酸、馬來(lái)酸、蘋 果酸、扁桃酸、曱磺酸、半乳糖二酸、硝酸、雙羥萘酸、泛酸、磷酸、琥珀 酸、硫酸、酒石酸、對(duì)曱^5黃酸等。藥學(xué)上可接受的鹽的實(shí)例包括銨鹽、鈣鹽、鎂鹽、鉀鹽以及鈉鹽,以及 那些由馬來(lái)酸、富馬酸、苯曱酸、抗壞血酸、雙羥萘酸、琥珀酸、氫氯酸、 硫酸、雙亞曱基水楊酸、甲磺酸、乙二磺酸、丙酸、酒石酸、水楊酸、檸檬 酸、葡糖酸、門冬氨酸、硬脂酸、棕櫚酸、衣康酸、羥乙酸、對(duì)氨基苯曱酸、 谷氨酸、苯磺酸、環(huán)己基氨基磺酸、磷酸以及硝酸等形成的鹽。術(shù)語(yǔ)'卣素或卣,用來(lái)表示氟、氯、溴或》典。作為基團(tuán)或基團(tuán)的 一部分的術(shù)語(yǔ)'烷基,指直鏈或支鏈烷基或其組合,例 如曱基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、異丁基、戊基、 己基、1,1-二曱基乙基、庚基、辛基、壬基、癸基或其組合。作為基團(tuán)或作為基團(tuán)的一部分的術(shù)語(yǔ)'烷氧基,指具有與鏈相連的氧原子 的直鏈、支鏈或環(huán)狀的烷基,例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、 正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、異丁氧基、戊氧基、己氧基、環(huán)戊氧基或 環(huán)己氧基。術(shù)語(yǔ)'環(huán)烷基,指閉合的飽和環(huán),例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基 或環(huán)庚基或環(huán)辛基。作為基團(tuán)或基團(tuán)的一部分的術(shù)語(yǔ)'鏈烯基,指包含一個(gè)或多個(gè)雙鍵的直鏈 或支鏈的碳鏈或其組合,例如丁烯基、戊烯基、己烯基、庚烯基或辛烯基。術(shù)語(yǔ)'環(huán)烯基"指包含一個(gè)或多個(gè)雙^t的閉合的非芳香碳環(huán),例如環(huán)丁烯 基、環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基或環(huán)庚烯基或環(huán)辛烯基。作為基團(tuán)或基團(tuán)的 一部分的術(shù)語(yǔ)'炔基,指包含一個(gè)或多個(gè)碳碳三鍵的直 鏈或支鏈的碳鏈或其組合,例如乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基 或其組合。術(shù)語(yǔ)'環(huán)炔基,指包含一個(gè)或多個(gè)碳碳三鍵的閉合的非芳香碳環(huán),例如環(huán)丙炔基、環(huán)丁炔基、環(huán)戊炔基、環(huán)己炔基或其組合。術(shù)語(yǔ)'芳基'是指5-或6-員芳環(huán),例如苯基,或7-至12-員雙環(huán)體系,其中至少一個(gè)環(huán)是芳香族的,例如萘基。本發(fā)明還提供制備本發(fā)明化合物和所使用的中間體(n)、 (m)、 (iv)、 (v)、 (vi)和(vn)的方法。式(I)的化合物可以如方案1中所述制備方衆(zhòng)1:<formula>formula see original document page 14</formula>其中LG'和LGZ是離去基團(tuán),例如,卣代,例如氯,LGS是離去基團(tuán)如Q-6烷 基例如曱基或乙基,PG是氫或堿金屬離子例如Na+,和Xp R1、 R2、 R6、 R12 和R"如式(I)化合物中所定義。應(yīng)該理解為本發(fā)明包括式(I)的化合物和其藥學(xué)上可接受的衍生物的所 有異構(gòu)體,包括所有的幾何、互變以及光學(xué)異構(gòu)體的形式,以及其混合物(如 外消旋混合物)。當(dāng)其他的手性中心存在于式(I)的化合物中時(shí),本發(fā)明在其 范圍內(nèi)包括所有可能的非對(duì)映異構(gòu)體,包括其混合物。可利用常規(guī)的方法將不同的異構(gòu)體形式分離開(kāi)來(lái)或?qū)⒁环N異構(gòu)體與其他異構(gòu)體分離開(kāi),或利用常 規(guī)的合成方法或利用立體定向或不對(duì)稱合成得到任何指定的異構(gòu)體。本發(fā)明還包括同位素標(biāo)記的化合物,其與在式(I)中所述的那些化合物和其衍生物(following)相同,但是其中的一個(gè)或多個(gè)原子被具有與自然界通常發(fā)現(xiàn)的原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)不同的原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)的原子替換。可摻入本發(fā) 明的化合物中的同位素實(shí)例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟、碘以及氯的同位素,如3H、 "C、 "C、 18F、 1231和1251。包含前述同位素和/或其他原子的其他同位素的本發(fā)明化合物以及所述 化合物的藥學(xué)上可接受的鹽包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。同位素標(biāo)記的本發(fā)明化合物,例如放射活性同位素如311、 "c摻入到其中的那些化合物可用于藥物和/或底物組織分布分析。由于易于制備以及檢測(cè),氚化的,即,3H,以及碳-14, 即,"C,同位素特別優(yōu)選。"C和SF同位素尤其可用于PET(正電子發(fā)射斷層 掃描術(shù)),并且1251同位素尤其可用于SPECT(單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層攝影術(shù)), 這些同位素都可用于腦部成像。此外,被較重的同位素如氘,即,2H取代可 提供一定的治療上的優(yōu)點(diǎn),所述的優(yōu)點(diǎn)源自更大的代謝穩(wěn)定性,例如增加的 體內(nèi)半衰期或減小的劑量需求,因此,在某些情況下可能是優(yōu)選的。本發(fā)明 的同位素標(biāo)記的式(I)的化合物以及其衍生物(following)可按照所述方案和/ 或下述實(shí)施例中公開(kāi)的方法,利用易得的同位素標(biāo)記的試劑代替非同位素標(biāo) 記的試劑進(jìn)行制備。式(I)的化合物和它們藥學(xué)上可接受的衍生物可以以晶體或非晶體形式 制備,并且,如果為晶體,可任選為溶劑化的。當(dāng)在本文中涉及溶劑合物時(shí), 包括水合物。本發(fā)明在其范圍內(nèi)包括化學(xué)計(jì)量的溶劑合物(包括水合物)以及 包含不定量的水和/或溶劑的化合物。從其結(jié)合CB2受體的能力的角度考慮,認(rèn)為本發(fā)明的化合物可用于治 療下述的疾病。因此,式(I)的化合物和它們藥學(xué)上可接受的衍生物可用作鎮(zhèn) 痛劑。例如它們可用于治療慢性炎性疼痛(如與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、 類風(fēng)濕性脊推炎、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎和幼年型關(guān)節(jié)炎有關(guān)的疼痛)包括疾病緩和 以及關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)保持的特性;肌肉骨骼疼痛;下背以及頸部疼痛;扭傷以及拉 傷;神經(jīng)性疼痛;交感神經(jīng)持續(xù)性疼痛;肌炎;與癌癥和纖維肌痛有關(guān)的疼 痛;與偏頭痛有關(guān)的疼痛;與流感或其他的病毒感染如普通感冒有關(guān)的疼痛; 風(fēng)濕熱;與功能性腸病如非潰瘍性消化不良有關(guān)的疼痛、非心臟的胸部疼痛以及過(guò)敏性腸綜合征;與心肌缺血有關(guān)的疼痛;術(shù)后疼痛;頭痛;牙痛;和 痛經(jīng)。本發(fā)明的化合物也具有多發(fā)性硬化、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng) 濕性脊推炎、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎和幼年型關(guān)節(jié)炎中的疾病緩和或關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)保護(hù)作 用。本發(fā)明的化合物尤其可用于治療神經(jīng)性疼痛。在神經(jīng)損傷后可發(fā)展成神 經(jīng)性疼痛綜合征,并且發(fā)生的疼痛會(huì)持續(xù)數(shù)月或數(shù)年,甚至在初始的損傷已 經(jīng)治愈之后。神經(jīng)損傷可出現(xiàn)在外周神經(jīng)、背側(cè)根、脊髓或腦部的某些區(qū)域。 神經(jīng)性疼痛綜合征通常根據(jù)引起疼痛的疾病或事件進(jìn)行分類。神經(jīng)性疼痛綜 合征包括糖尿病神經(jīng)??;坐骨神經(jīng)痛;非特異性后背疼痛;多發(fā)性硬化疼 痛;纖維肌痛;HIV-相關(guān)的神經(jīng)??;皰滲后神經(jīng)痛;三叉神經(jīng)痛;以及源自 物理性外傷、截肢手術(shù)、癌癥、毒素或慢性炎性疾病的疼痛。這些疾病難以 治療并且盡管已知有幾種藥物,但效能有限,很難實(shí)現(xiàn)完全的疼痛控制。神 經(jīng)性疼痛的癥狀為令人難以置信地多種多樣,并且通常描述為自發(fā)的急速以 及刀刺性痛,或不斷發(fā)展的灼燒疼痛。此外,以及與通常地非疼痛感覺(jué)有關(guān) 的疼痛,如"發(fā)麻"(感覺(jué)異常和感覺(jué)遲鈍)、觸覺(jué)增敏(感覺(jué)過(guò)敏)、無(wú)害刺激后 的疼痛感覺(jué)(動(dòng)態(tài)的、靜態(tài)的或熱異常性疼痛)、有害刺激的敏感性增力。(熱、 冷、機(jī)械性痛覺(jué)過(guò)敏)、消除刺激后的持續(xù)疼痛感覺(jué)(痛覺(jué)過(guò)敏)或選擇性感覺(jué) 通路的缺乏或不足(痛覺(jué)感退)。式(I)的化合物和它們藥學(xué)上可接受的衍生物也可用于治療發(fā)熱。 式(I)的化合物和它們藥學(xué)上可接受的衍生物也可用于治療炎癥,例如用 于治療皮膚病(如曬傷、燒傷、濕疹、皮炎、牛皮癬);眼病如青光眼、視網(wǎng) 膜炎、視網(wǎng)膜病、眼色素層炎以及眼組織的急性損傷(如結(jié)膜炎);肺疾病(如 哮喘、支氣管炎、肺氣腫、過(guò)敏性鼻炎、呼吸窘迫綜合征、養(yǎng)鴿者疾病、農(nóng) 民肺、慢性阻塞性肺病(COPD);胃腸道紊亂(如口瘡性潰瘍、克羅恩病、特 異反應(yīng)性胃炎、痘滲狀胃炎(gastrieis varialoforme)、潰瘍性結(jié)腸炎、腹部疾 病、節(jié)段性回腸炎、過(guò)敏性腸綜合征、炎性腸病、胃食管返流疾病),器官 移植;帶有炎性成分的其他疾病如血管疾病、偏頭痛、結(jié)節(jié)性動(dòng)脈外膜炎、 曱狀腺炎、再生障礙性貧血、何杰金病、硬皮病(sclerodoma)、重癥肌無(wú)力、 多發(fā)性硬化、結(jié)節(jié)病(sorcoidosis)、腎病綜合征、黑奇特綜合征、多發(fā)性肌炎、 齒齦炎、心肌缺血、發(fā)熱、全身性紅斑狼瘡、腱炎、粘液嚢炎以及斯耶格倫綜合征。式(I)化合物和它們藥學(xué)上可接受的衍生物也可用于治療膀胱炎后的膀胱反射亢進(jìn)(bladder hyperrelexia)。式(I)的化合物和它們藥學(xué)上可接受的衍生物也可用于治療免疫性疾病 如自身免疫性疾病、免疫缺陷性疾病或器官移植。式(I)的化合物和它們藥學(xué) 上可接受的衍生物對(duì)增加HIV感染的潛伏期也有效。式(I)的化合物和它們藥學(xué)上可接受的衍生物也可用于治療血小板功能 異常性疾病(如閉塞性血管病)。式(I)化合物和它們藥學(xué)上可接受的衍生物也可用于治療神經(jīng)炎、燒心 (heartbum)、吞咽困難、骨盆超敏感性、尿失禁、膀胱炎或搔癢癥。式(I)的化合物和它們藥學(xué)上可接受的衍生物也具有利尿作用。式(I)的化合物和它們藥學(xué)上可接受的衍生物也可用于治療陽(yáng)萎或勃起 機(jī)能障礙。式(I)的化合物和它們藥學(xué)上可接受的衍生物也可用于減輕非甾體消炎 藥物(NSAID's)和環(huán)氧合酶-2(COX-2)抑制劑的血液動(dòng)力學(xué)副作用。式(I)的化合物和它們藥學(xué)上可接受的衍生物也可用于治療神經(jīng)變性疾 病以及神經(jīng)變性如癡呆,尤其是變性癡呆(包括老年性癡呆、阿耳茨海默病、 皮克病、亨廷頓舞蹈病、帕金森病和克羅伊茨費(fèi)爾特-雅各布病、運(yùn)動(dòng)神經(jīng) 元病);血管性癡呆(包括多發(fā)性腦梗死性癡呆);以及與顱內(nèi)占位性病變有關(guān) 的癡呆;外傷;感染以及相關(guān)的疾病(包括HIV感染);帕金森病中的癡呆; 代謝病;毒素;缺氧癥以及維生素缺乏;以及與衰老有關(guān)的輕度認(rèn)知損害, 尤其是年齡相關(guān)的記憶損害。所述化合物也可用于治療肌萎縮側(cè)索硬化(ALS) 和神經(jīng)炎癥。式(I)的化合物和它們藥學(xué)上可接受的衍生物也可用于神經(jīng)保護(hù)和用于 治療中風(fēng)、心臟病發(fā)作、肺部旁路術(shù)、外傷性腦損傷、脊髓損傷等之后的神 經(jīng)變性。式(I)的化合物和它們藥學(xué)上可接受的衍生物也可用于治療耳鳴。 式(I)的化合物和它們藥學(xué)上可接受的衍生物也可用于治療精神性疾病 例如精神分裂癥、抑郁(該術(shù)語(yǔ)包括雙相抑郁癥、單相抑郁癥、單一的或再 發(fā)嚴(yán)重抑郁發(fā)作,伴有或不伴精神病特征、緊張性精神癥的特征、憂郁癥特 征、非典型特征或產(chǎn)后發(fā)作,季節(jié)性情感障礙、心境惡劣障礙,早發(fā)或遲發(fā)以及伴有或不伴非典型性特征、官能性抑郁癥以及社交恐怖癥、伴有癡呆的 抑郁例如阿耳茨海默型的,情感分裂性精神障礙或抑郁型,以及源自普通疾 病的抑郁病癥包括但不限于心肌梗塞、糖尿病、流產(chǎn)或早產(chǎn)等)、焦慮性疾 病(包括一般焦慮性疾病和社交焦慮障礙)、急性焦慮癥、廣場(chǎng)恐怖癥、社交 恐怖癥、強(qiáng)制性障礙和創(chuàng)傷后精神緊張性障礙、記憶性疾病包括癡呆、遺忘 癥以及年齡相關(guān)的記憶損傷、進(jìn)食行為失調(diào),包括神經(jīng)性厭食癥和神經(jīng)性貪 食癥,性功能障礙、睡眠障礙(包括晝夜節(jié)律紊亂、睡眠障礙、失眠癥、睡 眠性呼吸暫停和發(fā)作性睡病)、藥物如可卡因、乙醇、煙堿、苯并二氮雜萆類、 酒精、咖啡因、苯環(huán)己哌啶(苯環(huán)己哌咬-類化合物)、鴉片制劑(如大麻、海 洛因、嗎啡)、安非他明或安非他明-相關(guān)的藥物(如右旋安非他命、曱基苯丙 胺)或其組合濫用導(dǎo)致的脫瘊性腦綜合征。式(I)的化合物和它們藥學(xué)上可接受的衍生物也可用于預(yù)防或減輕對(duì)依 賴性-誘導(dǎo)劑的依賴性,或預(yù)防或減輕對(duì)依賴性-誘導(dǎo)劑的耐受性或逆耐受性。依賴性誘導(dǎo)劑的實(shí)例包括鴉片類(如嗎啡)、CNS鎮(zhèn)靜劑(如酒精)、精神興奮 劑(如可卡因)和煙堿。式(I)的化合物和它們藥學(xué)上可接受的衍生物也可用于治療腎臟功能紊 亂(腎炎,尤其是腎小球膜增生性腎小球腎炎、腎炎綜合征)、肝功能紊亂(肝 炎、肝硬化)、胃腸功能紊亂(腹瀉)和結(jié)腸癌。在一個(gè)實(shí)施方案中,本發(fā)明化合物可以選擇性地與CB2受體結(jié)合;這 些化合物可以特別地用于治療CB2受體介導(dǎo)的疾病。這里使用的術(shù)語(yǔ)"治療"包括確定疾病的治療,并且也包括其預(yù)防。這里 使用的術(shù)語(yǔ)"預(yù)防"指預(yù)防已經(jīng)受害的對(duì)象中的癥狀或預(yù)防受害過(guò)的對(duì)象中 癥狀的復(fù)發(fā),并且不限于痛苦的完全預(yù)防。根據(jù)本發(fā)明的另一方面,我們提供式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的衍 生物,其用于人或獸醫(yī)藥物。根據(jù)本發(fā)明的另一方面,我們提供式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的衍 生物,其用于治療由大麻素2活性介導(dǎo)的病癥。根據(jù)本發(fā)明的另 一方面,我們提供式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的衍 生物在制備治療劑中的用途,其中所述的治療劑用于治療由大麻素2受體活 性介導(dǎo)的病癥。根據(jù)本發(fā)明的另 一方面,我們提供治療患有由大麻素2受體活性介導(dǎo)的 病癥的哺乳動(dòng)物如人的方法,其包括給藥所述受治療者無(wú)毒、治療有效量的 式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物。根據(jù)本發(fā)明的另一方面,我們提供治療患有由免疫疾病、炎癥、疼痛、 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、骨關(guān)節(jié)炎或骨質(zhì)疏松癥的哺乳動(dòng)物如人的方 法,其包括給藥所述受治療者無(wú)毒、治療有效量的式(I)化合物或其藥學(xué)上可 接受的衍生物。根據(jù)本發(fā)明的另 一方面,我們提供式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的衍 生物,其用于治療病癥如免疫疾病、炎癥、疼痛、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性 硬化、骨關(guān)節(jié)炎或骨質(zhì)疏松癥。根據(jù)本發(fā)明的另 一方面,我們提供式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的衍 生物在制備治療劑中的用途,所述的治療劑用于治療或預(yù)防病癥例如免疫疾 病、炎癥、疼痛、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、骨關(guān)節(jié)炎或骨質(zhì)疏松癥。在一個(gè)實(shí)施方案中,所述的病癥是疼痛。在另一個(gè)實(shí)施方案中,所述疼 痛選自炎性疼痛、內(nèi)臟疼痛(viseralpain)、癌癥疼痛、神經(jīng)性疼痛、下背疼痛、 肌肉骨骼疼痛(muscular sceletal)、術(shù)后疼痛、急性疼痛和偏頭痛。例如,所 述的炎性疼痛是與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎或骨關(guān)節(jié)炎有關(guān)的疼痛。為了使用式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物用于治療人以及其 它哺乳動(dòng)物,通常根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)藥物實(shí)踐將它配制成藥物組合物。因此,在本發(fā) 明的另一方面中,本發(fā)明提供藥物組合物,其包含適合于在人或獸醫(yī)藥中使 用的式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物。在一個(gè)實(shí)施方案中,所述的 藥物組合物還包含其藥物載體或稀釋劑。在此所使用的"調(diào)節(jié)劑"是指拮抗劑、部分或完全激動(dòng)劑和反激動(dòng)劑。在 一個(gè)實(shí)施方案中,本發(fā)明的調(diào)節(jié)劑是激動(dòng)劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中,本發(fā)明 的調(diào)節(jié)劑是拮抗劑。在一個(gè)實(shí)施方案中,本發(fā)明的化合物是CB2激動(dòng)劑。式(I)的化合物和其藥學(xué)上可接受的衍生物可以標(biāo)準(zhǔn)的方式給藥用于治 療顯示的疾病,例如口服、腸胃外、舌下、皮膚、鼻內(nèi)、經(jīng)皮、經(jīng)直腸、經(jīng) 吸入或經(jīng)口腔給藥?;钚缘氖?I)的化合物和其藥學(xué)上可接受的衍生物當(dāng)經(jīng)口給藥的時(shí)候,可 配制成液體、片劑、膠嚢以及錠劑。液體制劑通常由所述化合物或鹽與調(diào)味 劑、懸浮劑或著色劑一起在液體載體例如,乙醇、橄欖油、甘油、葡萄糖(糖漿)或水中的懸浮液或溶液組成。當(dāng)組合物為片劑形式的時(shí)候,可使用任何 用于制備固體制劑的常規(guī)藥用載體。所述載體的實(shí)例包括硬脂酸鎂、石膏粉、 滑石、明膠、阿拉伯膠、硬脂酸、淀粉、乳糖和蔗糖。當(dāng)組合物為膠嚢形式 的時(shí)候,任何常規(guī)的包封是合適的,例如使用前述載體或半固體如甘油單癸酸酯、甘油二硬脂酸酯、GelucireTM和LabrasolTM或硬膠嚢殼如明膠。當(dāng)所 述的組合物為軟殼膠嚢如明膠形式的時(shí)候,可以考慮使用常規(guī)用于制備分散 體或懸浮液的任何藥用載體,例如含水樹(shù)膠或油類,并加入到軟膠嚢殼中。典型的腸胃外組合物由化合物或衍生物在無(wú)菌水性或非水性載體中的 溶液或懸浮液組成,所述溶液或懸浮液任選包含腸胃外可接受的油,例如聚 乙二醇、聚乙烯基吡咯烷酮、卵磷脂、花生油或芝麻油。供吸入的典型組合物為溶液、懸浮液或乳狀液的形式,可以干粉的形式 或利用常規(guī)的拋射劑如二氯二氟曱烷或三氯氟曱烷為氣霧劑的形式給藥。典型的栓劑包括當(dāng)以這種方式給藥時(shí)候的活性的式(I)的化合物或其藥 學(xué)上可接受的衍生物,以及粘合和/或潤(rùn)滑劑,例如聚乙二醇類、明膠、可可 脂或其他的低熔點(diǎn)植物蠟或脂肪或其合成的類似物。典型的皮膚以及經(jīng)皮制劑包括常規(guī)的水性或非水性載體,例如乳膏、軟 膏、洗劑或糊劑或?yàn)楹幍母嗨?、貼片或膜。在一個(gè)實(shí)施方案中,所述的組合物是單位劑型,例如片劑、膠嚢或計(jì)量 氣霧劑,以便患者可以給藥單次劑量。合適地,口服給藥的每一劑量單位含有0.001 mg-500 mg,例如0.01 mg-500 mg例如0.01 mg-100 mg,以及合適地,腸胃外給藥的每一劑量單位 含有0.001 mg-100 mg以游離酸(未衍生化的化合物)形式計(jì)算的式(I)化合物 或其藥學(xué)上可接受的衍生物。合適地,栓劑給藥的每一劑量單位含有0.001 mg-500 mg, 1"列^口 0.01 mg-500 mg侈'W口 0.01 mg-100 mg。合適J也,每人鼻內(nèi) 給藥的每一劑量單位含有1-400 mg以及合適地10-200 mg。合適地,局部制 劑含有0.01-5.0%的式(1)的化合物。合適地,口服給藥的日劑量方案為約0.01 mg/kg-1000 mg/kg的以游離酸 (未衍生化的化合物)形式計(jì)算的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物。合 適地,腸胃外給藥的日劑量方案為約0.001 mg/kg-200 mg/kg的以游離酸(未 衍生化的化合物)形式計(jì)算的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物。合適 地, 一全劑給藥的日劑量方案為約0.01 mg/kg-1000 mg/kg的以游離酸(未衍生化的化合物)形式計(jì)算的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物。合適地,鼻內(nèi)給藥和口腔吸入的日劑量方案為約10-約500mg/人。所述的活性組分可 以每日給藥l-6次,足以顯示所需的活性。將本發(fā)明的化合物制備成納米顆??赡苁怯幸娴摹_@可以改善化合物的 口服生物利用度。對(duì)于本發(fā)明來(lái)說(shuō),"納米顆粒"定義為50%的顆粒的粒徑小 于l|im例如小于0.75(xm的固體顆灃立。化合物(I)的固體顆粒的粒徑可以通過(guò)激光衍射測(cè)定。通過(guò)激光衍射測(cè)定 粒徑的合適儀器是Lecotrac激光粒徑分析儀,使用裝有QUIXEL分散 (despersion)裝置的HELOS光具座。合成納米顆粒形式的固體顆粒的許多方法是已知的。典型地,這些方法 包括研磨過(guò)程,例如在表面調(diào)節(jié)劑存在下的濕研磨處理過(guò)程,其中所述的表 面調(diào)節(jié)劑抑制一旦形成的納米顆粒的凝集和/或晶體生長(zhǎng)?;蛘?,這些方法可 以包括沉淀過(guò)程,例如,在含水介質(zhì)中從藥物在非水溶劑中的溶液中沉淀的 方法。因此,在另一方面中,本發(fā)明提供制備如上文所定義的納米顆粒形式的 式(I)化合物和它們的藥學(xué)上可接受的^"生物的方法,該方法包括研磨或沉 淀。制備納米顆粒形式的固體顆粒的代表性方法描述在下面所列的專利和 出版物中。Violanto & Fischer的美國(guó)專利號(hào)4,826,689 , Liversidge等的美國(guó)專利號(hào) 5,145,684, Na & Rajagopalan的美國(guó)專利號(hào)5,298,262, Liversidge等的美國(guó) 專利號(hào)5,302,401 ,Na& Rajagopalan的美國(guó)專利號(hào)5,336,507, Illig & Sarpotdar 的美國(guó)專利號(hào)5,340,564 , Na Rajagopalan的美國(guó)專利號(hào)5,346,702, Hollister 等的美國(guó)專利號(hào)5,352,459, Lovrecich的美國(guó)專利號(hào)5,354,560, Courteille等 的美國(guó)專利號(hào)5,384,124, June的美國(guó)專利號(hào)5,429,824, Ruddy等的美國(guó)專 利號(hào)5,503,723, Bosch等的美國(guó)專利號(hào)5,510 118, Bruno等的美國(guó)專利號(hào) 5,518, Eickhoff等的美國(guó)專利號(hào)5,518,738, De Castro的美國(guó)專利號(hào)5,534,270, Canal等的美國(guó)專利號(hào)5,536,508, Liversidge等的美國(guó)專利號(hào)5,552,160, Eickhoff等的美國(guó)專利號(hào)5,560,931, Bagchi等的美國(guó)專利號(hào)5,560,932, Wong 等的美國(guó)專利號(hào)5,565,188, Eickhoff等的美國(guó)專利號(hào)5,571,536, Desieno & Stetsko的美國(guó)專利號(hào)5,573,783, Ruddy等的美國(guó)專利號(hào)5,580,579, Ruddy等的美國(guó)專利號(hào)5,585,108, Wong的美國(guó)專利號(hào)5,587,143, Franson等的美 國(guó)專利號(hào)5,591456, Wong的美國(guó)專利號(hào)5,622,938, Bagchi等的美國(guó)專利號(hào) 5,662,883, Bagchi等的美國(guó)專利號(hào)5,665,331, Ruddy等的美國(guó)專利號(hào) 5,718,919, Wiedmann等的美國(guó)專利號(hào)5,747,001, WO 93/25190, WO 96/24336, WO 97/14407, WO 98/35666, WO 99/65469, WO 00/18374, WO 00/27369, WO 00/30615和WO 01/41760。這些方法可以容易地適合于制備納米顆粒形式的式(I)化合物和它們的 藥學(xué)上可接受的衍生物。這些方法構(gòu)成本發(fā)明的另 一方面。本發(fā)明的方法可以使用在研磨機(jī)如分散研磨機(jī)中進(jìn)行的濕磨步驟,以便 產(chǎn)生化合物的納米顆粒形式。本發(fā)明可以使用常規(guī)的濕磨技術(shù)進(jìn)行,例如在 Lachman等在The Theory and Practice of Industrial Pharmacy, Chapter 2, "Milling" p.45(1986)中所述的技術(shù)。在進(jìn)一步精制中,WO 02/00196(SmithKline Beecham plc)描述了使用研 磨機(jī)的濕磨步驟,其中至少 一些表面由包含一種或多種內(nèi)部潤(rùn)滑劑的尼龍 (聚酰胺)構(gòu)成,用于制備納米顆粒形式的藥物的固體顆粒。在另 一方面中,本發(fā)明提供制備納米顆粒形式的本發(fā)明化合物的方法, 包括在具有至少一個(gè)室和攪拌設(shè)備的研磨機(jī)中濕磨化合物的懸浮液,所述室 和/或所述攪動(dòng)設(shè)備包括如WO02/00196中所述的潤(rùn)滑尼龍。典型地,在濕研磨中使用的本發(fā)明化合物的懸浮液為粗化合物在液體介 質(zhì)中的液體懸浮液。術(shù)語(yǔ)"懸浮液"表示化合物基本上在所述的液體介質(zhì)中是 不溶解的。代表性的液體介質(zhì)包括含水介質(zhì)。使用本發(fā)明的方法,本發(fā)明的 粗化合物的平均粒經(jīng)可以至多1mm直徑。這有利地避免需要預(yù)處理化合物。在本發(fā)明的另 一方面中,進(jìn)行研磨的含水介質(zhì)包含以約1%-約40% w/w, 合適地約10%-約30% w/w,例如約20% w/w存在的式(I)的化合物或其藥學(xué) 上可接受的衍生物。所述的含水介質(zhì)可以進(jìn)一步包含一種或多種藥學(xué)上可接受的水溶性載 體,其適合于空間穩(wěn)定(steric stabilisation)和式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的 衍生物在研磨后的后續(xù)加工成藥物組合物,例如通過(guò)噴霧干燥。最適合于空 間穩(wěn)定和噴霧干燥的藥學(xué)上可接受的賦形劑是表面活性劑例如泊洛沙姆、月 桂基硫酸鈉和聚山梨醇酯等;穩(wěn)定劑例如纖維素例如羥丙基曱基纖維素;以 及載體例如碳水化合物例如甘露醇。在本發(fā)明的另 一 方面中,所述的進(jìn)行研磨的含水介質(zhì)可以進(jìn) 一 步包含以約0.1-約10。/。w/w存在的羥丙基曱基纖維素(HPMC)。本發(fā)明的方法可以包括干燥本發(fā)明化合物的隨后步驟以得到粉末。因此,在另一方面中,本發(fā)明提供制備含有本發(fā)明的化合物的藥物組合 物的方法,該方法包括制備納米顆粒形式的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的 衍生物,任選接著干燥以得到粉末,以及任選將該粉末與一種或多種藥學(xué)上 可接受的載體或賦形劑混和。本發(fā)明的另一方面是包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物的藥 物組合物,其中所述的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物以納米顆粒形 式存在于固體顆粒中,與 一種或多種藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。術(shù)語(yǔ)"干燥"是指除去在保持式(I)的化合物以液體懸浮液或溶液形式存 在的過(guò)程中所使用的任何水或其它液體賦形劑。這種干燥方法可以是本領(lǐng)域 已知的任何干燥方法,包括冷凍干燥、噴霧造?;驀婌F干燥。在這些方法當(dāng) 中,噴霧干燥是特別優(yōu)選的。所有這些技術(shù)在本領(lǐng)域中是公知的。研磨組合物的噴霧干燥/流化床造粒最合適使用噴霧干燥器進(jìn)行,例如可移動(dòng)Minor 噴霧干燥器[Niro, Denmark],或流化床干燥機(jī),例如由德國(guó)Glatt制備的那 些。在另一方面中,本發(fā)明提供如上文所定義的干粉形式的藥物組合物,其 可以通過(guò)濕磨式(I)化合物的固體顆粒接著噴霧干燥所得懸浮液獲得。在一個(gè)實(shí)施方案中,如上文所定義的藥物組合物還包含小于15%w/w, 例如,0.1-10% w/w的HPMC 。用于本發(fā)明的CB2受體化合物可與其他治療劑組合使用,所述其他治療 劑例如COX-2抑制劑,如塞來(lái)考昔、地拉考昔、羅非考昔、伐地考昔、帕 瑞考昔或COX-189; 5-脂氧合酶抑制劑;NSAID,如阿司匹林、雙氯芬酸、 消炎痛、萘丁美酮或布洛芬;白三烯受體拮抗劑;DMARD如曱氨蝶呤;腺 苷A1受體激動(dòng)劑;鈉通道阻滯劑如拉莫三嗪;NMDA受體調(diào)節(jié)劑如甘氨酸 受體拮抗劑;加巴噴丁以及相關(guān)的化合物;三環(huán)類抗抑郁藥如阿米替林;神 經(jīng)元穩(wěn)定性抗癲癇劑;單胺能攝取抑制劑如文拉法辛;鴉片類鎮(zhèn)痛劑;局麻 劑;5HT^激動(dòng)劑,如曲坦類(triptans),例如舒馬普坦、那拉曲坦、佐米曲坦、 依立曲坦、夫羅曲坦、阿莫曲坦或利扎曲坦;EPi受體的配體,EP4受體的配 體;EP2受體的配體;EP3受體的配體;EP4拮抗劑;EP2拮抗劑和EPs拮抗劑;舒緩激肽受體的配體和香草素受體的配體、抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎藥物,例如抗TNF藥物如enbrel、 remicade、抗-IL-l藥物,或DMARDS如來(lái)氟米特 或5H丁6化合物。當(dāng)所述化合物與其他的治療劑組合使用的時(shí)候,所述化合 物可以任何便利的途徑順序或同時(shí)給藥。其他的COX-2抑制劑公開(kāi)在US專利5,474,995、 US5,633,272、 US5,466,823、US6,310,099和US6,291,523;以及WO 96/25405、 WO 97/38986、 WO 98/03484、 WO 97/14691、 WO 99/12930、 WO 00/26216、 WO 00/52008、 WO 00/38311、 WO 01/58881和WO 02/18374中。適合于治療阿爾茨海默病或認(rèn)知增強(qiáng)的合適的組合藥物中的5HT6化合 物可以選自SGS518(Saegis)、 BGC20 761(在WO00/34242中公開(kāi)的BTG)、 WAY466(Wyeth) 、 P04368554(Hoffman le Roche) 、 BVT5182(Biovitron)和 LY483518(Lily)、 SB742457(GSK)和/或在WO03/080580的實(shí)施例1-50中公 開(kāi)的化合物。本發(fā)明化合物可與其他的活性物質(zhì)組合給藥,所述其他活性物質(zhì)如 5HT3拮抗劑、NK-1拮抗劑、5-羥色胺激動(dòng)劑、選擇性5-羥色胺再攝取抑制 劑(SSRI)、去曱腎上腺素再攝取抑制劑(SNRI)、三環(huán)類抗抑郁藥和/或多巴胺 能抗抑郁藥。可與本發(fā)明化合物組合使用的合適的5HT3拮抗劑包括例如昂丹司瓊、 格拉司瓊、曱氧氯普胺??膳c本發(fā)明化合物組合使用的合適的5-羥色胺激動(dòng)劑包括舒馬曲坦、異 育亨賓堿、育亨賓、曱氧氯普胺??膳c本發(fā)明化合物組合使用的合適的SSRI包括氟西汀、西酞普蘭、非 莫西汀、氟伏沙明、帕羅西汀、吲達(dá)品、舍曲林、齊美定。可與本發(fā)明化合物組合使用的合適的SNRI包括文拉法辛和瑞波西汀??膳c本發(fā)明化合物組合使用的合適的三環(huán)類抗抑郁藥包括丙米。秦、阿米 替4木(amitriptiline)、 氯米巾白明(chlomipramine)和去曱替一木(nortriptiline)??膳c本發(fā)明化合物組合使用的合適的多巴胺能抗抑郁藥包括丁氨苯丙 酮和阿米庚酸。本發(fā)明的化合物可以與PDE4抑制劑組合使用。在本發(fā)明中使用的PDE4 抑制劑可以是已知抑制PDE4酶的任何化合物或其被發(fā)現(xiàn)作為PDE4抑制劑 起作用的任何化合物,并且其僅僅或基本上僅僅是PDE4抑制劑,而不是抑制到對(duì)PDE家族以及PDE4的其它成員顯示出療效程度的化合物。通常,它 優(yōu)選使用PDE4拮抗劑,其高親和力結(jié)合咯利普蘭的PDE4催化形式的IC50 除以低親和力結(jié)合咯利普蘭的PDE4催化形式的ICso所得的ICso比值約0.1 或更大。本發(fā)明的化合物或與PDE4的組合可以被用于治療炎癥和作為支氣 管擴(kuò)張藥。對(duì)人單核細(xì)胞重組體PDE 4(hPDE 4)在其抑制劑結(jié)合處存在至少兩種結(jié) 合形式。這些觀察的一種解釋是hPDE 4存在兩種不同的形式。 一種高親和 力結(jié)合咯利普蘭和登布茶堿,而另一種低親和力結(jié)合這些化合物。在本發(fā)明 中使用的優(yōu)選的PDE4抑制劑是那些化合物,其具有有益的治療比,即化合 物優(yōu)先抑制cAMP催化活性,其中酶是以低親和力結(jié)合咯利普蘭的形式存 在,由此減少明顯與抑制高親和力結(jié)合咯利普蘭的形式有關(guān)的副作用。另一 種說(shuō)明這是優(yōu)選的化合物具有約0.1或更大的ICso比值,即高親和力結(jié)合咯 利普蘭的PDE4催化形式的ICs。除以低親和力結(jié)合咯利普蘭的形式的IC50。參見(jiàn)美國(guó)專利5,998,428,其中更詳細(xì)地描述了這些方法,其在此整個(gè)引 入作為參考。合適地,所述的PDE4抑制劑是那些PDE4抑制劑,其具有大于0.5的 IC50比值,特別是比值大于l.O的那些化合物。本發(fā)明的另一方面是CB2調(diào)節(jié)劑(式(I)的化合物及它們的藥學(xué)上可接受 的衍生物)與PDE4抑制劑的組合藥物以及包含所述組合藥物(combination)的 藥物組合物。本發(fā)明的另 一方面是治療肺部疾病或可以用支氣管擴(kuò)張劑(broncodilator) 治療的疾病的方法,所述的肺部疾病是例如哮喘、支氣管炎、肺氣腫、過(guò)*文 性鼻炎、呼吸窘迫綜合征、養(yǎng)鴿者病、農(nóng)民肺、慢性阻塞性肺病(COPD)和 咳嗽,其包括給藥哺乳動(dòng)物包括人有效量的CB2調(diào)節(jié)劑或其藥學(xué)上可接受 的衍生物(式(I)的化合物和它們的藥學(xué)上可接受的衍生物)以及有效量的 PDE4抑制劑或其藥學(xué)上可接受的衍生物。本發(fā)明的另外方面是有效量的CB2調(diào)節(jié)劑或其藥學(xué)上可接受的衍生物 (式(I)的化合物和它們的藥學(xué)上可接受的衍生物)以及有效量的PDE4抑制劑 或其藥學(xué)上可接受的衍生物在制備藥物或用于制備支氣管擴(kuò)張劑中的用途,所述的藥物用于治療肺部疾病例如哮喘、支氣管炎、肺氣肺、過(guò)敏性鼻炎、 呼吸窘迫綜合征、養(yǎng)鵒者病、農(nóng)民肺、慢性阻塞性肺病(COPD)和咳嗽。當(dāng)在此使用時(shí),咳嗽可以具有若干形式并且包括排痰性的、非排痰性的、 反應(yīng)性增強(qiáng)性的譯喘和與COPD有關(guān)的。本發(fā)明的另一方面是患者包(patientpack),其包含有效量的CB2調(diào)節(jié)劑 或其藥學(xué)上可接受的衍生物(式(I)的化合物和它們的藥學(xué)上可接受的衍生物) 以及有效量的PDE4抑制劑或藥學(xué)上可接受的衍生物??赡艿腜DE4化合物是順式[氰基-4-(3-環(huán)戊氧基-4-曱氧基苯基)環(huán)己烷 -l-羧酸酯],亦稱西洛司特或Ariflo , 2-曱酯基-4-氰基-4-(3-環(huán)丙基曱氧基-4-二氟曱氧基苯基)環(huán)己烷-l-S同,和順式[4-氰基-4-(3-環(huán)丙基曱氧基-4-二氟曱氧 基苯基)環(huán)己烷-l-醇]。它們可以通過(guò)美國(guó)專利5,449,686和5,552,438中所述 的方法制備。其它PDE4抑制劑,特異性抑制劑,可以被用于本發(fā)明的是來(lái) 自ASTA MEDICA的AWD-12-281(Hofgen, N.等.15th EFMC Int Symp Med Chem(Sept 6-10, Edinburgh) 1998, Abst P.98); 9-千基腺噤呤衍生物,名為 NCS-613(INSERM);來(lái)自Chiroscience and Schering-Plough的D-4418;苯并 二氮雜革PDE4抑制劑,名為CI-1018(PD-168787; Parke-Davis/Wamer-Lambert);在WO 9916766中公開(kāi)的苯并間二氧雜環(huán)戊烯(benzodioxole)衍生 物Kyowa Hakko;來(lái)自Napp的V-l 1294A(Landells, L丄爭(zhēng).Eur Resp J [Annu Cong Eur Resp Soc(Sept 19-23, Geneva) 1998] 1998, 12(Suppl. 28): Abst P2393); 羅氟司特(CAS參考號(hào)162401 -32-3)和來(lái)自Byk-Gulden(現(xiàn)在Altana)的 pthalazinone(WO 99/47505)或名為T-440的化合物(Tanabe Seiyaku; Fuji, K.等. J泡畫(huà)co/五xp 77^, 1998, 284(1):162)。其它的PDE4抑制劑公開(kāi)在WO01/13953中的第2頁(yè)至第15頁(yè)。特別 選擇的是阿羅茶堿、阿替唑侖、BAY-19-8004、苯芬群、BYK-33043、 CC-3052、 CDP-840、西潘茶堿、CP-220629、 CP-293121、 D-22888、 D-4396、登布茶 堿、非拉司特、GW-3600、異丁地特、KF-17625、 KS-506-G、拉普茶堿、 NA-0226A、 NA-23063A、 ORG-20241、 ORG-30029、 PDB-093、已酮可可豆 堿、吡拉米司特、咯利普蘭、RPR-117658、 RPR畫(huà)122818、 RPR-132294、 RPR-132703、 RS-17597、 RS-25344-000、 SB-207499、 SB210667、 SB211572、 SB-211600 、 SB212066 、 SB212179 、 SDZ-ISQ-844 、 SDZ-MNS-949 、 SKF-107806、 SQ-20006、 T-2585 、硫苯司特、托拉芬群、UCB-29646、 V-11294A、 YM-58997、 YM-976和扎達(dá)維林。在一個(gè)實(shí)施方案中,所述的PDE4抑制劑選自西洛司特、AWD-12-281、NCS-613、 D-4418、 CI-1018、 V-11294A、羅氟司特或T-440。本發(fā)明的化合物還可以與抗高血脂藥、抗動(dòng)脈粥樣硬化藥、抗糖尿病藥、 抗心絞痛藥、抗高血壓藥或降低Lp(a)的藥結(jié)合用于治療動(dòng)脈粥樣硬化。上述 的例子包括膽固醇合成抑制劑例如他汀類,抗氧化劑類例如普羅布考,胰島 素敏化劑,4丐通道拮抗劑。降低Lp(a)的藥劑的例子包括WO 97/02037、 WO 98/28310、 WO 98/28311和WO 98/28312(Symphar SA和SmithKline Beecham) 中所述的氨基磷酸酯類??垢哐獕核?antihyerper tension agents)的例子是血管 緊張素-轉(zhuǎn)化酶抑制劑,血管緊張素-II受體拮抗劑,ACE/NEP抑制劑,-阻滯 劑,鈣通道阻滯劑,PDE抑制劑,醛甾酮阻滯劑??赡艿穆?lián)合治療將使用本發(fā)明的化合物和他汀。所述的他汀類是一類公 知的降低膽固醇藥劑,并且包括阿伐他汀、辛伐他汀(simvarstatin)、帕伐他 汀、西立伐他汀、氟伐地汀、洛伐他汀和ZD 4522(也稱為S-4522, Astra Zeneca)。所述的兩種藥劑可以在基本上同時(shí)或不同時(shí)間給藥,根據(jù)醫(yī)生的判 斷。其它可能的聯(lián)合治療將是本發(fā)明的化合物和抗糖尿病藥或胰島素敏化 劑的使用。在這種類型內(nèi),與本發(fā)明的化合物一起使用的可能化合物包括 PPARgamma激活劑,例如G1262570(Glaxo Wellcome)以及格列酮類化合物例 如羅格列酮(Avandia, SmithKline Beecham)、曲格列酮和匹格列酮??梢岳斫猓鲜鼋M合藥物或組合物(combinations or compositions)中的任 何化合物可以同時(shí)(在相同或不同的藥物制劑中)、分開(kāi)或依次給藥。因此,另一方面,本發(fā)明提供組合藥物,其包含式(I)的化合物或其藥學(xué) 上可接受的衍生物以及其它的治療劑或藥劑。上面所指的組合藥物可以方便地以藥物制劑的形式存在,因此,包含如 上所定義的組合藥物以及藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑的藥物制劑構(gòu)成本 發(fā)明的另一方面。這些組合藥物的單個(gè)組分可以依次或同時(shí)以單個(gè)藥物制劑 或混合藥物制劑形式給藥。當(dāng)式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物與第二種對(duì)相同疾病是活 性的治療劑組合使用時(shí),每種化合物的劑量可以不同于該化合物單獨(dú)使用時(shí) 的劑量。本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員可以很容易地知道適宜的劑量。M素CB1受體激動(dòng)劑活性的測(cè)定式(I)的化合物的大麻素CB1受體激動(dòng)劑活性按照下述實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行測(cè)定。實(shí)驗(yàn)方法表達(dá)人大麻素CB1受體的酵母(酉良酒酵母)細(xì)胞通過(guò)將表達(dá)盒(cassette)整 合到酵母菌林MMY23的ura3染色體位點(diǎn)而產(chǎn)生。該盒由編碼人CB1受體 的DNA序列組成,在CB1的5'端側(cè)接酵母GPD啟動(dòng)子以及CB1的3'端側(cè) 接酵母轉(zhuǎn)錄終止子序列。MMY23表達(dá)酵母/哺乳動(dòng)物嵌合G-蛋白a亞單位 (subunit),其中Gpal C-端的5個(gè)氨基酸被人Goci1/2 C-端的5個(gè)氨基酸所代 替(如Brown等描述(2000), Yeast 16: 11-22中記載)。細(xì)胞在30°C、在缺乏 尿嘧啶、色氨酸、腺嘌呤以及亮氨酸的液體合成完全(SC)酵母培養(yǎng)基(Guthrie and Fink(1991), Methods in Enzymology, Vol. 194)中生長(zhǎng)至晚期對(duì)數(shù)期(約6 OD600/ml)。將激動(dòng)劑制備成DMSO中的10 mM儲(chǔ)存液。利用在DMSO中稀釋4-倍的稀釋液評(píng)估ECso值(產(chǎn)生50。/。最大響應(yīng)需要的濃度)(BiomekFX, Beckman)。將DMSO中激動(dòng)劑的溶液(1%最終分析體積)轉(zhuǎn)移到來(lái)自Greiner 的黑色微量滴定板(384-孔)中。將細(xì)胞以0.2OD6(K)/ml的密度懸浮在SC培養(yǎng) 基中,所述的培養(yǎng)基缺乏組氨酸、尿嘧啶、色氨酸、腺嘌呤以及亮氨酸并補(bǔ) 充10mM 3-氨基三唑、0.1M磷酸鈉pH 7.0,以及10|aM熒光素二-P-D-吡喃 葡萄糖香(FDGlu)。將該混合物(每孔50ul)加入到分析板(Multidr叩384, Labsystems)中的激動(dòng)劑中。在30。C培養(yǎng)24小時(shí)后,利用熒光微量滴定板讀 取儀(Tecan Spectrofluor或LJL分析儀;激發(fā)波長(zhǎng)485nm;發(fā)射波長(zhǎng)535nm) 測(cè)定由外切葡聚糖酶將FDGlu降解成熒光素而產(chǎn)生的熒光,所述的外切葡聚 糖酶是在激動(dòng)劑刺激細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中產(chǎn)生的內(nèi)源性酵母酶。用熒光對(duì)化合物 濃度作圖并利用四參數(shù)擬和得到經(jīng)擬和的迭代曲線以產(chǎn)生濃度效果值。利用下述公式計(jì)算效力(En^)Emax二Max[化合物x]-Min[化合物x]/Max[HU2K)]-Min[HU210] x 100% 其中Max[化合^x]和Min[化合物x]分別為從化合物X濃度效果曲線得到的經(jīng)擬 和的最大值和最小值,并且]\^乂[111]21。]和]^11[冊(cè)21()]分別為從(6&11,1(^11)-3-(1,1'-二曱基庚基)-6a,7,10,10a-四氫-l-羥基-6,6-二曱基-6H-二苯并[b,d]吡喃-9-曱醇 (HU210;購(gòu)自Tocris)的濃度效果曲線得到的經(jīng)擬和的最大值和最小值。從 下述公式計(jì)算等效摩爾比值(eqieffective molar ratio)(EMR) EMR=EG5o [化合物x]/EC50 [HU2io]其中EC5o[化合物x]為化合物X的EC50且EQopu2叫為HU210的EC50。 根據(jù)該方法檢測(cè)的實(shí)施例1-22的化合物對(duì)克隆的人大麻素CB1受體的 EC5o值〉l,OOOnM和/或效力值〈30Q/c)。結(jié)果以若干實(shí)驗(yàn)的平均值給出。九眛素CB2受體激動(dòng)劑活性的測(cè)定式(I)的化合物對(duì)大麻素CB2受體的激動(dòng)劑活性按照下述實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行 測(cè)定。實(shí)驗(yàn)方法表達(dá)人大麻素CB2受體的酵母(釀酒酵母)細(xì)胞通過(guò)將表達(dá)盒整合到酵母 菌抹MMY23的ura3染色體位點(diǎn)而產(chǎn)生。該盒由編碼人CB2受體的DNA序 列組成,在CB2的5'端側(cè)接酵母GPD啟動(dòng)子以及在CB2的3'端側(cè)接酵母 轉(zhuǎn)錄終止子序列。MMY23表達(dá)酵母/哺乳動(dòng)物嵌合G-蛋白a亞單位,其中 Gpal C-端的5個(gè)氨基酸被人God1/2 C-端的5個(gè)氨基酸所代替(如Brown等描 述(2000), Yeast 16: 11-22中記載)。細(xì)胞在30°C、在缺乏尿嘧咬、色氨酸、 腺噤呤以及亮氨酸的液體合成完全(SC)酵母培養(yǎng)基(Guthrie and Fink(1991), Methods in Enzymology, Vol. 194)中生長(zhǎng)至晚期對(duì)數(shù)期(約6 OD600/ml)。將激動(dòng)劑制備成DMSO中的10 mM溶液。利用在DMSO中稀釋4-倍的 稀釋液評(píng)估EC5。值(產(chǎn)生50。/。最大響應(yīng)需要的濃度)(BiomekFX, Beckman)。 將DMSO中激動(dòng)劑的溶液(1%最終分析體積)轉(zhuǎn)移到來(lái)自Greiner的黑色微量 滴定板(384-孔)中。將細(xì)胞以0.2OD6W)/ml的密度懸浮在SC培養(yǎng)基中,所述 的培養(yǎng)基缺乏組氨酸、尿嘧啶、色氨酸、腺嘌呤以及亮氨酸并補(bǔ)充10mM3-氨基三峻、0.1M磷酸鈉pH 7.0,以及10pM熒光素二-l3-D-口比喃葡萄糖苷 (FDGlu)。將該混合物(每孔50ul)加入到分析板(Multidrop 384, Labsystems)中 的激動(dòng)劑中。在30°C培養(yǎng)24小時(shí)后,利用熒光微量滴定板讀取儀(Tecan Spectrofluor或LJL分析儀;激發(fā)波長(zhǎng)485nm;發(fā)射波長(zhǎng)535nm)測(cè)定由外 切葡聚糖酶將FDGlu降解成焚光素而產(chǎn)生的焚光,所述的外切葡聚糖酶是在 激動(dòng)劑刺激細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中產(chǎn)生的內(nèi)源性酵母酶。用熒光對(duì)化合物濃度作圖 并利用四參數(shù)擬和得到經(jīng)擬和的迭代曲線以產(chǎn)生濃度效果值。利用下述公式計(jì)算效力(EmJEmax二Max[化合物x〗-Min[化合物x]/Max〖HU2叫-Min[HU2K)] x 100%其中Max[化合物x]和Min[化合物x]分別為從化合物X濃度效果曲線得到的經(jīng)擬 和的最大值和最小值,并且Max[HU2io]和Min[Hu加]分別為從(6aR, 1 OaR)-3-(1,1 '-二曱基庚基)-6a,7,10,10a-四氫-l-羥基-6,6-二曱基-6H-二苯并[b,d]吡喃-9-曱醇 (HU210;購(gòu)自Tocris)的濃度效果曲線得到的經(jīng)擬和的最大值和最小值。從 下述公式計(jì)算等效摩爾比值(eqieffective molar ratio)(EMR)ElV[R=EC5o [化合物x]/EG50 [HU2io]其中EC5o[化合物x]為化合物X的EC50且ECso[HU2叫為HU210的EC50。 根據(jù)該方法檢測(cè)的實(shí)施例1-22的化合物對(duì)克隆的人大麻素CB2受體的ECso值〈300nM且效力值〉500/0。結(jié)果以實(shí)驗(yàn)數(shù)值的平均值給出。根據(jù)上述方法測(cè)試的實(shí)施例l-22的化合物在CBl酵母受體試驗(yàn)中具有大于100的EMR,以及在CB2酵母受體試驗(yàn)中具有小于100的EMR。,實(shí)施例1-5、和7-22的化合物對(duì)CB2的EMR相對(duì)于對(duì)CB1的EMR至少4氐十倍。結(jié)果以若干實(shí)驗(yàn)的平均值給出。在報(bào)導(dǎo)基因試驗(yàn)中CB2激動(dòng)劑作用的測(cè)定 實(shí)驗(yàn)方法使用報(bào)道基因試驗(yàn)測(cè)定CB2激動(dòng)劑作用。這些研究使用表達(dá)人重組體 CB2受體的CH0-K1細(xì)胞系(CHO-Kl CB2 CRE-LUC細(xì)胞)進(jìn)行。此外,這 些細(xì)胞還表達(dá)"CRE-LUC"報(bào)道基因構(gòu)造,其包含在多cAMP效應(yīng)元件結(jié)合蛋 白啟動(dòng)子控制下的螢光素酶基因。在這些細(xì)胞中,胞內(nèi)cAMP水平的增加引 起螢光素酶基因的轉(zhuǎn)錄以及螢光素酶的隨后產(chǎn)生。螢光素酶表達(dá)通過(guò)將含有 螢光素、螢光素酶底物(Luclite, PerkinElmer, Cat No 6016919)的專有混合 物加入到細(xì)胞中進(jìn)行測(cè)定。反應(yīng)產(chǎn)物(resultant reaction)引起光產(chǎn)生,其在 TopCount閃爍計(jì)數(shù)器中進(jìn)行測(cè)量。在所述的CH0-K1 CB2 CRE-LUC細(xì)胞中, 毛喉素產(chǎn)生螢光素酶表達(dá)的顯著增加并且CB2激動(dòng)劑抑制這種應(yīng)答。通常, CHO-K1 CB2 CRE-LUC細(xì)胞表達(dá)高水平的組成性CB2受體活性。在使用前, 在這些實(shí)驗(yàn)中通過(guò)用反激動(dòng)劑,SR144528,預(yù)處理30-60分鐘得以克服。這 種處理已經(jīng)表明消除組成性CB2受體活性(Bouaboula等,1999)。方法CHO-K1 CB2 CRE誦LUC細(xì)胞在DMEM/F12加glutamax I培養(yǎng)基(Gibco Cat. No. 31331-028)中生長(zhǎng),所述培養(yǎng)基補(bǔ)充有9% FBS(Gibco, Cat No.16000-040)和0.5mg.mr1 G418(Gibco, Cat. No. 10131隱027)和0.5mg.mr1潮霉 素(Invitrogen, Cat, No. 10687-010)。細(xì)胞以單層培養(yǎng)在162cm2 vented Nunclon 燒瓶(NUNC, Cat. No. 178883)中在27.5ml培養(yǎng)基中在潮濕的95%空氣和5% C02氣氛中在37。C下生長(zhǎng)。當(dāng)融合時(shí),所述的生長(zhǎng)培養(yǎng)基用DMEM/F12培 養(yǎng)基(Gibco, Cat. No. 31331-028)替換,所述培養(yǎng)基含有l(wèi)OOnM的CB2反激 動(dòng)劑,SR144528,并且將所述的細(xì)胞在37。C培養(yǎng)30-60分鐘。燒瓶用25ml Dulbecco磷酸鹽緩沖鹽水(PBS, Gibco Cat. No. 14190-094)沖洗兩次,然后通 過(guò)在10ml維爾烯(Versene) (Gibco, Cat. No. 15040-033)中培養(yǎng)10分鐘收獲。 細(xì)胞通過(guò)急速吹(sharp blow)分離到燒瓶中,細(xì)胞懸液用PBS補(bǔ)充至50ml并 在250xg離心5分鐘。將細(xì)胞沉淀再懸浮在24ml無(wú)苯酚紅的DMEM/F12試 驗(yàn)緩沖液(Gibco, Cat. No. 11039-021)中,接著將50 pl的細(xì)胞懸液(約50,000 細(xì)胞)加入到含有50|al測(cè)試激動(dòng)劑在2 (iM毛喉素(最終試驗(yàn)濃度為1 (iM FSK) 中的96孔板(Costar, Cat. No. 3904-清底黑色孔板)中。測(cè)試激動(dòng)劑在DMSO 中制備成10mM溶液并稀釋到含有2 (iM毛喉素的無(wú)苯酚紅的DMEM/F12 試驗(yàn)緩沖液中以產(chǎn)生20 的測(cè)試激動(dòng)劑溶液。隨后將測(cè)試激動(dòng)劑在含有毛 喉素的試驗(yàn)緩沖液中制備系列稀液,每一測(cè)試激動(dòng)劑在10 ^M-10nM(或如果 需要的話更低)的最終試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)進(jìn)行通常測(cè)試。將所述的板在板搖動(dòng) 器上混合5分鐘(800-1000rpm),然后以250xg簡(jiǎn)短地離心(5-10s),放在沒(méi)有 蓋的生物斧反(Bioplate)中,在潮濕95%空氣和5% C02氛中在3TC培養(yǎng)4-5hr。 從培養(yǎng)箱中除去96孔板并在RT下放置10-15min,然后加入25 的Luclite 溶液(才艮據(jù)廠商的i兌明制備)。用Topseal A(Perkin Elmer, Cat. No. 6005185) 密封^反,在—反搖動(dòng)器上混合5分鐘(800-1000 rpm),然后以250xg簡(jiǎn)短地離 心(5-10s)。最后,使用Packard TopCount閃爍計(jì)數(shù)器測(cè)定發(fā)光。 數(shù)據(jù)分析對(duì)于每一化合物,測(cè)定毛喉素(forsklin)應(yīng)答的最大抑制和這種作用的 EC50。在每一實(shí)-瞼中,包括參考激動(dòng)劑HU210并且每一測(cè)試激動(dòng)劑的最大 作用表達(dá)為相對(duì)于由HU210產(chǎn)生的最大作用以提供內(nèi)在活性的估計(jì)值。此 夕卜,每一化合物的EC50除以HU210的EC50以計(jì)算測(cè)試化合物的等效摩爾 比值(EMR)。結(jié)果依據(jù)這種方法測(cè)試的實(shí)施例1-5、 9-10、 17和20的化合物具有小于30的EMR值。結(jié)果以若干實(shí)驗(yàn)的平均值給出。參考文獻(xiàn)Bouaboula M Dussossoy D. Casellas P. Regulation of peripheral cannabinoid receptor CB2 phosphorylation by the inverse agonist SR 144528. Implications for receptor biological responses. Jowrwa/ o/ CTzem/s^y. 27 .2,7漏鐵7卿.下述實(shí)施例是說(shuō)明性的,但是不限制本發(fā)明的實(shí)施方案。 縮寫(xiě)AcOH(乙酸),Bn(千基),Bu, Pr, Me, Et(丁基,丙基,曱基,乙 基),DMSO(二曱亞石風(fēng)),DCM(二氯曱烷),DME(l,2-二曱氧基乙烷), DMF(N,N-二曱基曱酰胺),EDC( 1 -(3-二曱基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺), EtOAc(乙酸乙酯),EtOH(乙醇),HPLC(高壓液相色譜),LC/MS(液相色語(yǔ)/ 質(zhì)譜),MDAP(質(zhì)量控制的自動(dòng)提純),MeCN(乙腈),MeOH(曱醇), NMR(核磁共振(波譜)),NMP(N-曱基吡咯烷酮),SCX(強(qiáng)陽(yáng)離子交換劑例如 Isolute SCX-2柱),SPE(固相萃取),TFA(三氟乙酸),THF(四氫呋喃),s, d, t, q, m, br(單峰,雙峰,三重峰,四重峰,多重峰,寬峰)硬件Waters 2525 二元梯度模塊(module)Waters 515補(bǔ)給泵(make up pump)Waters泵控制才莫塊Waters 2767注入收集(Inject Collect)Waters柱流體控制器(Column Fluidics Manager)Waters 2996光電二極管陣列檢測(cè)器Waters ZQ質(zhì)譜儀Gilson 202級(jí)分收集器Gilson Aspec廢料收集器軟件Waters MassLynx第4版SP2 桂4吏用的柱是Waters Atlantis,其尺寸為19mm x 100mm(小型)和30mm x 100mm(大型)。固定相粒徑是5 |im。 溶劑A:含水溶劑=水+0.1%曱酸 B:有機(jī)溶劑=乙腈+0.1%曱酸 補(bǔ)充^^劑=曱醇水80:20 洗針溶劑=曱醇 方法根據(jù)所研究化合物的分析保留時(shí)間使用四種方法。它們?nèi)烤哂?3.5-分鐘的運(yùn)行時(shí)間,其包括10-分鐘梯度,接著3.5分鐘柱沖洗和再平衡步驟。 大規(guī)模/小規(guī)模1.0-1.5=5-30% B 大規(guī)模/小規(guī)模1.5-2.2=15-55% B 大規(guī)模/小規(guī)模2.2-2.9=30-85% B 大規(guī)模/小規(guī)模2.9-3.6=50-99% B 大規(guī)模/小規(guī)模3.6-5.0=80-99% B(在6 min內(nèi)) 流速以上全部方法具有20ml/min(小規(guī)模)或40ml/min(大規(guī)模)的流速分析LCMS系統(tǒng)硬件Agilent 1100梯度泵 Agilent 1100自動(dòng)進(jìn)樣器 Agilent 1100 DAD檢測(cè)器 Agilent 1100脫氣器 Agilent 1100烘箱 Agilent 1100控制器 Waters ZQ質(zhì)譜儀Sedere Sedex 75或Sedere Sedex 85或Polymer Labs PL-ELS-2100 軟件Waters MassLynx 4.0版SP2 桂所使用的柱是Waters Atlantis,其尺寸是4.6mm x 50mm。固定相粒徑是3 (xm。 溶劑A:含水溶劑=水+0.05%曱酸 B:有機(jī)溶劑=乙腈+0.05%曱酸 方法所使用的一般方法具有5分鐘運(yùn)行時(shí)間。 時(shí)間/min %B 0 3 0.1 3 4 974.8 974.9 3 5.0 3上述方法具有3ml/min的流速NMR所l吏用的^H"硬件Bruker 400MHz Ultrashield Bmker B-ACS60自動(dòng)進(jìn)樣器 Bruker Advance 400 Console 軟件用戶界面-NMRkiosk 控制軟件-XWin畫(huà)R 3.0版 孩b皮所〗吏用的M 硬件Biotage Initiator技術(shù)條件加熱溫度至多250 °C 孩i波輻射50-300W在2.45GHz中間體1: 6-氯-4-(甲基絲)-5-硝基-3-吡咬羧酸乙酯制備a:將曱胺(33%在乙醇中,lmL)滴加到回流的4,6-二氯-5-硝基-3-吡咬羧酸乙酯(可以根據(jù)Sanchez等,J.Heterocyclic Chem,, 1993,30, 855制 備)(2.65g)和三乙胺(1.4mL)在乙醇(10mL)中的溶液中。反應(yīng)物回流30分鐘, 然后蒸發(fā)。殘余物用沸騰乙酸乙酯萃取,然后將其蒸發(fā)。所得粗產(chǎn)物用沸騰 己烷萃取,冷卻后,得到黃色晶體形式的標(biāo)題化合物(1.82g)mp70-72。C。制備b:向4,6-二氯-5-硝基-3-吡啶羧酸乙酯(75.96g, 0.287mole)在乙醇 (596ml)中的溶液中加入三乙胺(40ml, 0.287mole),接著將混合物加熱回流。 在1小時(shí)又35分鐘內(nèi),將在乙醇中的曱胺(35.6ml, 33%)滴加到回流混合物 中。加畢后,將混合物回流25min,然后將其冷卻。反應(yīng)混合物在步琪蒸發(fā) 器(buchi)上在真空下蒸發(fā)。所獲得的殘余物在DCM(200ml)中攪拌IO分鐘; 將固體濾出并用DCM(100ml)洗滌。合并DCM層并用水(2x250ml)萃取。水 層用DCM(200ml)反萃取。合并DCM層,使用MgS04千燥。濾出MgS04, DCM層蒸發(fā),得到紅褐色油。此物質(zhì)在靜置時(shí)固化。將固體置于乙醇(150ml) 中,加熱直到固體溶解為止。將混合物冷卻過(guò)夜,濾出形成的晶體,用冷乙 醇(100ml)洗滌。該晶體在空氣中用真空干燥,得到6-氯-4-(曱基氨基)-5-硝基 -3-他咬羧酸乙酯(52.1§, 69%)畫(huà)R(400MHz, DMSO隱d6)麗C121277 5 1.40-1.44(3H, t), 2.92-2.94(3H, d), 4.37-4.43(2H, q), 8.73(1H, s), 9.00-9.IO(IH, br)。與預(yù)計(jì)的結(jié)構(gòu)一致。LC/MS產(chǎn)物3.10min, [MH+]260與分子式C9H1GN3C104 —致。在 2.45min處存在8%的雜質(zhì),[MH+]255。中間體2: 5-絲-6-氯-4-(甲基M)-3-吡咬羧酸乙酯制備a:將6-氯-4-(曱基氨基)-5-硝基-3-吡啶羧酸乙酯(15g)在乙醇中的懸浮液在阮內(nèi)鎳的存在下在室溫和常壓下進(jìn)行氫化。結(jié)束后,濾掉催化劑,濾液蒸發(fā),得到深色油。用己烷研制,得到暗粉紅色固體狀的標(biāo)題化合物(12g)mp 50-52。C。制備b:向6-氯-4-(曱基氨基)-5-硝基-3-吡啶羧酸乙酯(52.1g, 0.2mole) 中加入乙醇(300ml)。在氬氣中,向此懸浮液中加入阮內(nèi)鎳(6ml在水中的50% 淤漿)。反應(yīng)在氫大氣壓下在室溫下攪拌過(guò)夜(23小時(shí))。在氬氣中,使用硅藻 土(Kieselguhr)濾出阮內(nèi)鎳。在步琪蒸發(fā)器上在真空下蒸除乙醇,得到稠棕色 殘余物形式的5-氨基-6-氯-4-(曱基氨基)-3-吡啶羧酸乙酯(49.7g 107%)。該混 合物在沒(méi)有進(jìn)一步提純的情況下就使用。NMR(400MHz, DMSO-d6)HNC121452 5與預(yù)計(jì)結(jié)構(gòu)一致。 LC/MS產(chǎn)物2.05min, [MH+]230。存在的雜質(zhì)數(shù)量為2%-9%。產(chǎn)物與 分子式C9H10N3C1O4 —致。中間體3: 4-氯-l-曱基-lH-咪唑并[4,5-e]吡咬-7-羧酸乙酯制備a: 5-氨基-6-氯-4-(甲基氨基)-3-吡啶羧酸乙酯(12g)和原曱酸三乙酯 (50mL)的混合物回流3小時(shí)(乙醇一皮除去)。將熱溶液過(guò)濾,然后將其冷卻。 過(guò)濾所得固體,用乙醚洗滌,然后干燥,得到棕色結(jié)晶固體狀的標(biāo)題化合物 (8.8g)mp 112-114。C。制備b:向5-氨基-6-氯-4-(曱基氨基)-3-吡啶羧酸乙酯(49,7g, 0.21mole) 中加入原曱酸三乙酯(216ml, 1.26mole),接著將混合物加熱回流1小時(shí)。將 混合物冷卻,在步琪蒸發(fā)器上在真空下蒸發(fā),得到稠的半固體。將乙醚(500ml) 加入到該半固體中并將混合物在室溫下攪拌10分鐘。濾出棕色固體,接著 進(jìn)一步用乙醚(250ml)洗滌,固體在真空中在空氣中干燥,得到4-氯-l-曱基 -1 H-咪峻并[4,5-c]吡啶-7-羧酸乙酯(31.7g, 61 %)。麗R(400MHz,氯仿-d6)麗C121507 5 1.46-1.49(3H, t), 4.16(3H, s), 4.45-4.15(2H, q), 7.99(1H, s), 8.78(1H ,s)。與預(yù)計(jì)的結(jié)構(gòu)一致。中間體4: 4-[(3-溴苯基)氨基-l-甲基-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸乙酯在20ml微波管瓶中制備4-氯-l-甲基-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸乙酯 (650mg)在1,4-二哺烷(5ml)中的懸浮液。將3-溴苯胺(935mg)加入到此懸浮液 中,接著加入曱磺酸(0.35ml)。密封反應(yīng)管瓶并加熱到180。C30分鐘。此時(shí), 所述的反應(yīng)混合物與來(lái)自以同樣方式但使用4-氯-l-曱基-lH-咪唑并[4,5-c]吡 啶-7-羧酸乙酯(100mg)完成的另一反應(yīng)的批料混合。將此合并的反應(yīng)混合物 在二氯曱烷和水之間進(jìn)行分配,通過(guò)疏水性玻璃料收集有機(jī)層。將該二氯曱 烷溶液用真空濃縮,化合物用二氧化硅色譜(50g柱,用0-100%乙酸乙酯的 己烷溶液洗脫)提純,得到標(biāo)題化合物,其用真空干燥,得到米色固體(l.lg)。LC/MS [MH+]377與分子式C16H1581BrN402~^i。中間體5: 4-(3-溴苯基)氨基-l-曱基-lH-咪唑并[4,5-c]吡咬-7-羧酸鈉將4-[(3-溴苯基)氨基]-l-曱基-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸乙基酯(l.lg ) 放在20ml微波管瓶中并溶于曱醇(15ml)中,然后加入(2N)氫氧化鈉(4ml)。 密封該管瓶并加熱到120°C5分鐘。將該溶液用真空千燥,得到白色固體狀 的標(biāo)題化合物(8.7g包括過(guò)量氫氧化鈉)。LC/MS [MI^]349與分子式C14H 81BrN402""^:t。中間體6: 4-[(2,4-二氯苯基)^J^-l-甲基-lH-咪唑并[4,5-c]吡咬-7-羧酸 乙酯.在20ml微波管瓶中制備4-氯-l-曱基-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸乙酯 (650mg)在1,4-二嚅烷(5ml)中的懸浮液。將2,4-二氯苯胺(880mg)加入到此懸浮液中,接著加入曱磺酸(0.35ml)。密封反應(yīng)管瓶并加熱到180°C30分鐘。 此時(shí),所述的反應(yīng)混合物與來(lái)自以同樣方式但使用100mg4-氯-l-曱基-lH-咪 唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸乙酯完成的另 一反應(yīng)的批料混合。將此合并的反應(yīng)混 合物在二氯曱烷和水之間進(jìn)行分配,通過(guò)疏水性玻璃料收集有機(jī)層。將所述 的二氯曱垸溶液用真空濃縮。殘余物用二氧化石圭色語(yǔ)(50g柱,0-100%乙酸 乙酯的己烷溶液洗脫)提純,但是在裝載到柱上后剩余一些沉淀。將此在SCX 柱(5g)上用曱醇洗滌并分析,證明是標(biāo)題化合物。提純合適的級(jí)分并用真空 干燥,與所述沉淀合并,得到一種棕色固體(700mg)。 LC/MS [MI^]365與分子式C16H1435Cl2N402""^t。中間體7: 4-[(2,4-二氯苯基)氨基-l-曱基-lH-咪唑并[4,5-c吡咬-7-羧酸 鹽酸鹽。將4-[(2,4-二氯苯基)氨基]-l-曱基-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸乙酯 。00mg )放在20ml微波管瓶中并溶于曱醇(lSml)中,然后加入2N氫氧化鈉 (4ml)。密封該管瓶并加熱到120°C5分鐘。將所述的溶液用真空濃縮并再溶 于曱醇(30ml)中。加入(2N)氫氧化鈉(4ml),接著將反應(yīng)混合物在100。C回流 3小時(shí)。反應(yīng)混合物用真空干燥,用(2N)鹽酸酸化,過(guò)濾懸浮液,固體用真 空干燥,得到標(biāo)題化合物(540mg)LC/MS [Mtf]337與分子式C14H1()35C12N402—致。中間體8: 4-[(3-氯苯基)絲H-曱基-lH-咪哇并4,5-c]吡咬-7-羧酸乙酉旨。制備a:將4-氯-l-曱基-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸乙酯(lg, 4.1mmo1) 和3-氯苯胺(0.9ml, 8.9mmol)在1,4-二"惡烷(25ml)中的懸浮液在100。C加熱過(guò) 夜。粗反應(yīng)混合物蒸發(fā)并在乙酸乙酯和水(每種約100ml)之間進(jìn)行分配。將乙酸乙酯層干燥,過(guò)濾,蒸發(fā),得到粗橙色油狀的標(biāo)題化合物(1.8g)。LC/MS [MlT]331與分子式C16H1535C1N402 —致。制備b:向4-氯-l-曱基-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸乙酯(31.7g, 0.13mole)中加入1,4-二嚅烷(410ml)、 3-氯苯胺(27.93ml, 0.26mol)和曱磺酸 (17.19ml, 0.26mol),注意細(xì)微的放熱反應(yīng)。將混合物加熱至105°C4小時(shí)。 二嗜、烷在步琪蒸發(fā)器上在真空中除去。向所述殘余物中加入乙酸乙酯(l升) 和水(500ml),此溶液通過(guò)加入飽和碳酸氫鈉水溶液(350ml)中和。分離乙酸 乙酯層,水層用乙酸乙酯(500ml)反萃取。合并乙酸乙酯層并在buchi上在真 空下蒸發(fā)。向所述殘余物中加入己烷(1.5升),接著將混合物加熱回流45分 鐘。冷卻后,過(guò)濾獲得的固體,并與額外數(shù)量的己烷(l升)加熱回流。冷卻 后,濾出固體,得到暗褐色固體狀的4-[(3-氯苯基)氨基]-l-曱基-lH-咪唑并 [4,5-c]吡咬-7-羧酸乙酯(37.9g, 86%)。NMR(400MHz,氯仿-d6)HNC121507 5 1.41-1.44(3H, t), 4.14(3H, s), 4.37-4.42(2H, q), 7.02_7.05(1H, m), 7,25-7.29(lH, m), 7.57-7.60(lH, m), 7.93(1H, s), 7.80-8.10(lH, br)8.12(lH, s), 8.74(1H, s)。與預(yù)計(jì)的結(jié)構(gòu)一致。LC/MS產(chǎn)物保留時(shí)間3.19min, [MH+]331與分子式C16H15N4C102 —致。中間體9: 4-[(3-氯苯基)絲卜l-甲基-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶々-羧酸。制備a:將4-[(3-氯苯基)氨基]-l-曱基-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸乙酯 (1.8g)溶解到曱醇(5ml)和(2N)氫氧化鈉(5ml)中,并在微波條件下在U0。C加 熱5分鐘。然后,所述化合物在乙酸乙酯和水(100ml)之間進(jìn)行分配。將乙酸 乙酯層干燥,過(guò)濾并蒸發(fā)。然后,將粗物質(zhì)溶于水中并用(2N)鹽酸調(diào)節(jié)到pH 4-3,其引起從水中析出沉淀。加入乙酸乙酯,其使所述混合物形成乳液。 然后,將整個(gè)乳液蒸發(fā),使用氨基-丙基SPE柱(50g)提純?cè)摌悠?,?2M)氨 的甲醇溶液洗脫,得到標(biāo)題化合物(l.lg)。LC/MS [MH^]303與分子式C14H 35ClN402""^i:。制備b:向4-[(3-氯苯基)氨基]-l-曱基-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸乙酯(32.9g, 0.099mole)中加入乙醇(330ml),接著加入2M氫氧化鈉水溶液(130ml, 0.25mol)。將混合物在攪拌下加熱至回流1小時(shí)。冷卻時(shí),混合物凝固,加 入乙醇(100ml)以形成淤漿。該淤漿在buchi上在真空下蒸發(fā),得到棕色固體。 將此固體溶解到水(l升)中,將所述溶液在冰浴中冷卻至15°C,用2M鹽酸 水溶液酸化至pHl。濾出形成的沉淀,得到的固體用水(2x 200ml)洗滌。所 述固體在真空中在40。C干燥,直到達(dá)到恒重為止(48小時(shí)),得到棕色固體狀 的4-[(3-氯苯基)^J^]-l-甲基-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸(28.19g, 93%)。NMR(400MHz, DMSO-d6)HNC121878 5 4.07(3H, s), 7.04-7.06(lH, m), 7.31-7.36(1H, t), 7.92-7.94(lH, m), 8.23-8.24(lH, m), 8.33(1H, s), 8.49(1H, s), 9.82(1H, s), 12.00-13.50(寬單峰)。與預(yù)計(jì)的結(jié)構(gòu)一致。LC/MS產(chǎn)物保留時(shí)間2.17min, [MH+]303與分子式CmHuNaCIC^ —致。中間體10: 4-[(3-氯苯基)lL^]-l-甲基-lH-咪唑并[4,5-c吡咬-7-羧酸鹽酸將3-氯苯酚(1.8ml, 16.7mmol)在1,4-二嗜、烷(4ml)中的混合物劇烈攪拌。 然后,緩慢加入氫化鈉(60%在礦物油中,701mg)。將另外的1,4-二嚅烷(18ml) 與4-氯-l-曱基-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸乙酯(lg, 4.2mmol)—起加入到該 懸浮液中。樣品在微波條件下在180。C下加熱10小時(shí)。然后,所述物質(zhì)蒸發(fā) 至盡可能地干燥,再溶解到水中并用(2N)鹽酸酸化至pH-l。獲得固體沉淀, 將該固體過(guò)濾,在真空烘箱中在40°C下干燥過(guò)夜(l .3g)。LC/MS [MH^304與分子式C14H1()35C1N303—致。中間體11: 4-氯-l-甲基-lH-咪唑并[4,5-c吡咬-7-羧酸將4-氯-l-曱基-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸乙酯(8.80g)、曱醇(90ml)和 2N氫氧化鈉(30ml)—起在室溫下攪拌2小時(shí)。加入2N鹽酸(30ml),得到沉 淀,將該沉淀濾出并在真空中在50。C干燥,得到紅色粉末狀的標(biāo)題化合物 (6.7g)。LC/MS [MH"]212與分子式C8H635C1N302 —致。中間體12: 4-氯-l-曱基-7-(4-嗎啉基^J0-lH-咪唑并[4,5-c吡啶將4-氯-l-甲基-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸(1.0g)在二曱基曱酰胺 (30ml)、 N,N-二異丙基乙胺(4.12ml)、嗎啉(0.82ml)和O-(lH-苯并三哇-l-基)-N,N,N',N'-四曱基脲镥六氟磷酸鹽(2.688g)中的混合物在室溫下攪拌45分 鐘。將反應(yīng)混合物溶于水和乙酸乙酯中。有機(jī)層用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌 兩次,然后用水洗滌。有機(jī)層蒸發(fā),蒸發(fā)水洗液,接著蒸發(fā)合并的碳酸氫鈉 洗液。將來(lái)自碳酸氫鈉洗液蒸發(fā)的殘余物在二氯曱烷中攪拌,濾出固體,濾 液與來(lái)自有機(jī)層蒸發(fā)的殘余物和來(lái)自水洗液蒸發(fā)的殘余物混合。將所得混合 物蒸發(fā),殘余物用色譜提純(50g ds柱)用0-100%曱醇/水的梯度洗脫,得到 灰白色固體狀的標(biāo)題化合物(940mg)。LC/MS [MlT]281與分子式C12H13 35C1N402 —致。實(shí)施例1: N-(3-溴苯基)-l-甲基-7-(l-哌錄餘)-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶 -4-胺鹽酸鹽將4-[(3-溴苯基)氨基]-l-曱基-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸鈉(250mg包 括氬氧化鈉)放于沸騰管中,在那里它與羥基苯并三唑水合物(107mg)、 N-(3-二曱基氨基丙基)-N-乙基碳二亞胺(123mg)、 N-乙基嗎啉(0.183ml)、哌啶 (0.092ml)混合,接著將此混合物溶于二曱基曱酰胺(8ml)中。反應(yīng)混合物在室 溫下攪拌48小時(shí)。該反應(yīng)混合物用真空濃縮,用2N鹽酸酸化,然后用真空濃縮。所得固體與羥基苯并三唑水合物(107mg)、 N-(3-二曱基氨基丙基)-N-乙基碳二亞胺(123mg)、哌咬(0.092ml)、過(guò)量N-乙基嗎啉混合,接著將此混 合物溶于二曱基曱酰胺(8ml)中。然后,將溶液在室溫下攪拌24小時(shí)。將反 應(yīng)混合物用真空濃縮,接著與水和二氯曱烷混合。通過(guò)疏水性玻璃料收集有 機(jī)層,接著用真空濃縮。殘余物用硅膠色譜(10g柱,用l-2。/。的2M氨的曱 醇溶液在二氯曱烷中的溶液洗脫)提純。所得溶液用真空濃縮,然后用質(zhì)量 控制HPLC提純。合并合適的級(jí)分,用真空濃縮,得到固體,將該固體溶于 曱醇和乙腈中,接著加入在乙醚中的1M鹽酸。將所述溶液用真空濃縮,得 到固體,將該固體溶于1,4-二嚅烷和水中,并放在冷凍干燥器中,得到白色 固體(136mg)。LC/MS [MH+]416與分子式C19H2()81BrN50—致。實(shí)施例2: N-(3-溴苯基)-l-曱基-7-(4-嗎啉基絲)-lH-咪唑并[4,5-c吡啶 -4-胺鹽酸鹽標(biāo)題化合物以類似于實(shí)施例1的方法由4-[(3-溴苯基)氨基]-l-曱基-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸鈉(250mg)制備,其中嗎啉(94(il)用于偶合步驟中。 獲得白色固體(77mg)。LC/MS [MH^418與分子式C18H1881BrN502"^i:。實(shí)施例3: N-(3-溴苯基)-l-甲基-7-(l-吡咯烷基絲)-lH-咪唑并[4,5-c]吡 咬-4-胺鹽酸鹽標(biāo)題化合物以類似于實(shí)施例1的方法由4-[(3-溴苯基)氨基]-l-曱基-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸鈉(250mg)制備,其中吡咯烷(89^d)用于偶合步驟中。 獲得白色固體(154mg)。LC/MS [MH+]402與分子式C18H1881BrN50—致。實(shí)施例4: 4-[(3-溴苯基)絲]-l-曱基-N-(2-曱基丙基)-lH-咪唑并[4,5-c 吡咬-7-甲酰胺鹽酸鹽標(biāo)題化合物以類似于實(shí)施例1的方法由4-[(3-溴苯基)氨基]-1-曱基-111-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸鈉(250mg)制備,其中異丁胺(108^1)用于偶合步驟 中。除了當(dāng)反應(yīng)混合物用真空干燥并與二氯曱烷和水混合時(shí),剩余的沉淀過(guò) 濾,然后用30%乙腈在水中的溶液洗滌,得到白色固體。將此溶于甲醇中并 加入在乙醚中的1M鹽酸。在真空中除去溶劑,得到固體,將該固體溶于1,4-二嚅烷和水中,接著放在冷凍千燥器中,得到白色固體(154mg)。LC/MS [NfflT]404與分子式C18H2()81BrN50""^:t。實(shí)施例5: N-(2,4-二氯苯基)-l-曱基-7-(4-嗎啉基総)-lH-咪唑并[4,5-c
吡咬-4-胺鹽酸鹽將4-[(2,4-二氯苯基)氨基]-l-曱基-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸鹽酸鹽 (135mg)放于沸騰管中,在那里它與羥基苯并三唑水合物(59mg)、 N-(3-二曱 基氨基丙基)-N-乙基碳二亞胺(68mg)、 N-乙基嗎啉(0.1ml)、嗎啉(0.052ml)混 合,接著將此混合物溶于二曱基曱酰胺(8ml)中。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌 24小時(shí)。將反應(yīng)混合物然后用真空干燥,接著與水和二氯甲烷混合。用疏水 性玻璃料收集有機(jī)層,用真空濃縮,在C-18柱(5g)上提純,用0-50 %乙腈 在水中的溶液洗脫。合并合適的級(jí)分,用真空濃縮,得到固體,將該固體溶 于乙腈中,接著加入在乙醚中的1M鹽酸。然后,將此用真空干燥,得到固 體。然后,將該固體溶于1,4-二嗜烷和水中,接著放在冷凍干燥器中,得到 白色固體(44mg)。LC/MS [MH4]406與分子式C18H1735C12N502—致。實(shí)施例6: N-(2,4-二氯苯基)-l-甲基-7-(l-哌錄絲)-lH-咪唑并[4,5-c 吡咬-4-胺鹽酸鹽標(biāo)題化合物以類似于實(shí)施例5的方法由4-[(2,4-二氯苯基)氨基]-l-曱基 -lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸鹽酸鹽(135mg)制備,其中哌啶(51)al)用于偶合 步驟中。獲得白色固體(19mg)。LC/MS [MH4]404與分子式C19H1935C12N50—致。實(shí)施例7: N-(2,4-二氯苯基)-l-甲基-7-(l-吡咯烷基絲)-lH-咪唑并[4,5-c: 吡吱-4-胺鹽酸鹽標(biāo)題化合物以類似于實(shí)施例5的方法由4-[(2,4-二氯苯基)氨基]-l-曱基 -1^1-咪唑并[4,5<]吡啶-7-羧酸鹽酸鹽(1351^)制備,其中吡咯烷(50pl)用于偶 合步驟中。獲得白色固體(37mg)。LC/MS [MH^]390與分子式C18H1735C12N50—致。實(shí)施例8: 4-[(2,4-二氯苯基)氨基-l-曱基-N-(2-曱基丙基)-lH-咪唑并 [4,5《吡啶-7-曱酰胺鹽酸鹽標(biāo)題化合物以類似于實(shí)施例5的方法由4-[(2,4-二氯苯基)氨基]-l-甲基 -111-咪唑并[4,5-01吡啶-7-羧酸鹽酸鹽(135111§)制備,其中異丁胺(60pl)用于偶 合步驟中。除反應(yīng)混合物用真空濃縮外,殘余物部分溶于乙腈和二曱亞砜中。過(guò)濾剩余的固體并用真空千燥,然后溶于甲醇中,接著加入在乙醚中的1M 鹽酸。然后,將此用真空干燥,得到固體。然后,將該固體溶于1,4-二喁烷和水中,接著放在冷凍干燥器中,得到白色固體(42mg) LC/MS [MPf]392與分子式C18H1935C12N50 —致。實(shí)施例9a: N-(3-氯苯基)-l-甲基-7-(4-嗎啉基g)-lH-咪唑并[4,5-c吡啶 -4-胺鹽酸鹽。將4-[(3-氯苯基)氨基]-l-曱基-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸(275mg, 0.91mmo1)、 二曱基曱酰胺(8ml)、 4-乙基嗎啉(230|11, 1.8mmo1)、嗎啉(120(11, 1.36mmo1 )、 l-羥基苯并三唑水合物(135mg, lmmol )和l-(3-二曱基氨基丙 基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(155mg, lmmol)—起加入,接著將溶液在室溫下 攪拌過(guò)夜。蒸除溶劑。殘余物用疏水性玻璃料在水和二氯曱烷之間進(jìn)行分配。 二氯曱烷萃取液蒸發(fā)并用色譜(10g 二氧化硅)提純,用二氯曱烷洗脫。柱子 用3柱體積的二氯曱烷、2柱體積的2。/。(2M氨的曱醇溶液)/二氯曱烷、2柱 體積的5%(2M氨的曱醇溶液)/二氯曱烷和2柱體積的10%(2M氨的曱醇溶 液)/二氯曱烷洗滌。樣品用過(guò)量的氯化氫乙醚溶液(5ml)處理,然后冷凍干燥, 獲得灰白色固體狀的標(biāo)題化合物(177mg)。LC/MS [MH+]372與分子式C18H1835C1N502—致。實(shí)施例9b: N-(3-氯苯基)-l-甲基-7-(4-嗎啉基羰基)-lH-咪唑并[4,5-c吡 梵-4-胺向攪拌下的4-[(3-氯苯基)氨基]-l-曱基-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸(27.19g, 0.09mole)在DMF(680ml)中的懸浮液中加入N,N-二異丙基乙胺 (78.26ml, 0.45mole)、 O-(lH-苯并三唑-l-基)-N,N,N',N'-四曱基脲像六氟磷酸 鹽(51.18g, 0.135mole)。此時(shí),反應(yīng)混合物開(kāi)始變得粘稠。在5分鐘內(nèi),緩 慢地向此混合物中加入嗎啉(15.72ml, 0.18mole)。反應(yīng)混合物形成暗色溶液。 反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。反應(yīng)混合物蒸發(fā)以除去595ml的DMF。 將所述暗褐色油溶解到乙酸乙酯(3升)中,然后將此依次用水(l升)、飽和碳 酸氫鈉水溶液(l升)洗滌。在乙酸乙酯層中形成細(xì)微的沉淀,然后將該沉淀 濾出。乙酸乙酯層依次用水(l升)、2M氫氧化鈉水溶液(2x500ml)、水(l升) 和鹽水(l升)洗滌。干燥(MgS04)乙酸乙酯層并蒸發(fā),得到淺棕色固體。將此 固體溶解在含有甲醇(20ml)的DCM(200ml)中,向其中加入二氧化硅(125g), 接著將混合物蒸發(fā)。該固體在Biotage Flash 75上進(jìn)行色譜分離,用DCM/ 曱醇(97:3)洗脫,得到淺黃色固體,其在真空中在6(TC干燥過(guò)夜。將獲得的 固體溶解到2M鹽酸水溶液(l升)中,將此溶液用乙酸乙酯(2x 500ml)洗滌。 然后,水相用固體碳酸氫鈉堿化至pH8。濾出形成的沉淀,接著再懸浮在水 (1升)中并攪拌30分鐘,濾出固體,在真空中在40。C干燥過(guò)夜,得到灰白色 固體狀的N-(3-氯苯基)-l-曱基-7-(4-嗎啉基羰基)-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-胺 (25.01g, 74%)。NMR(400畫(huà)z, DMSO-d6)HNC122148 5 3.30-3.90(11H, m), 6.96-6.99 (1H, m), 7.27-7.31(IH, t), 7.92曙7.94(2H, m), 8.29(1H, s), 8.33-8.34(lH, m), 9.51 (lH,s).與預(yù)計(jì)的結(jié)構(gòu)一致。LC/MS,產(chǎn)物保留時(shí)間2.23min, [MH+]372與分子式C18H1835C1N502 一致。實(shí)施例10: N-(3-氯苯基)-l-曱基-7-(l-哌^(guò)JJt^)-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶 -4-胺鹽酸鹽。標(biāo)題化合物以類似于實(shí)施例9a的方法從4-[(3-氯苯基)氨基]-1-曱基-111-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸(275mg)制備。其中哌啶(120^il)用于偶合步驟中。獲得白色固體(250mg)。LC/MS [MHT]370與分子式C19H2G35C1N50—致。實(shí)施例11: N-(3-氯苯基)-l-曱基-7-(l-吡咯烷基羰基)-lH-咪唑并[4,5-c 吡^-4-胺鹽酸鹽。標(biāo)題化合物以類似于實(shí)施例9a的方法從4-[(3-氯苯基)氨基]-1-曱基-11^-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸(275mg)制備,其中吡咯烷(110)al)用于偶合步驟中。 獲得白色固體(103mg)。LC/MS [Mtf]356與分子式C18H1835C1N50—致。實(shí)施例12: 4-[(3-氯苯基)氨基-l-甲基-N-(2-甲基丙基)-lH-咪唑并[4,5-c
吡吱-7-曱酰胺鹽酸鹽。標(biāo)題化合物以類似于實(shí)施例9a的方法從4-[(3-氯笨基)氨基]-1-曱基-111-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸(275mg)制備,其中異丁胺(73jil)用于偶合步驟中。 獲得灰白色固體(144mg)。LC/MS [MH+]358與分子式C18H2()35C1N50—致。實(shí)施例13: 4-[(3-氯苯基)猛H-甲基-7-(l-哌錄絲)-lH-咪唑并[4,5-c p比咬鹽酸鹽。<formula>formula see original document page 48</formula>將4-[(3-氯苯基)氧基]-l-甲基-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸鹽酸鹽 (325mg, 1.07mmo1)、 二曱基曱酰胺(8ml)、 4-乙基嗎啉(230pl, 1.8mmo1)、 哌啶(140(11, 1.66mmo1)、 l-羥基苯并三唑水合物(165mg, l.lmmol )和1-(3-二曱基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(l卯mg, l.lmmol )—起加入,接著 該溶液在室溫下攪拌過(guò)夜。蒸除溶劑。殘余物用疏水性玻璃料在水和二氯曱 烷之間進(jìn)行分配。二氯曱烷萃取液蒸發(fā)并用色語(yǔ)(10g 二氧化硅)提純,用二 氯曱烷洗脫。柱子用3柱體積的二氯曱烷、2柱體積的2。/。(2M氨的曱醇溶 液)/二氯曱烷、2柱體積的5%(2M氨的曱醇溶液)/二氯曱烷和2柱體積的 10。/。(2M氨的曱醇溶液)/二氯曱烷洗滌。樣品用(1M)氯化氫的乙醚溶液(大約 l-2ml)處理,然后蒸發(fā)至干。然后,將樣品溶于1,4-二噹烷和水的混合物中, 冷凍干燥過(guò)夜,獲得灰白色固體狀的標(biāo)題化合物(280mg)。LC/MS [MH+]371與分子式(:19111935(:^402—致。實(shí)施例14: 4-[(3-氯苯基)狄H-甲基-7-(4-嗎啉基M0-lH-咪唑并[4,5-c 吡咬鹽酸鹽。<formula>formula see original document page 48</formula>標(biāo)題化合物以類似于實(shí)施例13的方法由4-[(3-氯苯基)氧基]-1-曱基-111-咪唑并[4,5-c]吡咬-7-羧酸鹽酸鹽(325mg)制備,其中嗎啉(140)il)用于偶合步驟 中。獲得灰白色固體(182mg)。LC/MS [MH"]373與分子式C18H1735C1N403—致。實(shí)施例15: 4-[(3-氯苯基)氧基-l-甲基-7-(l-吡咯烷基羰基)-lH-咪唑并 [4,5-c]吡咬鹽酸鹽。/標(biāo)題化合物以類似于實(shí)施例13的方法由4-[(3-氯苯基)氧基]-l-甲基-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸鹽酸鹽(325mg)制備,其中吡咯烷(12(^1)用于偶合步 驟中。獲得灰白色固體(300mg)。LC/MS [MH+]357與分子式C18H1735C1N402—致。實(shí)施例16: 4-[(3-氯苯基)氧基-l-甲基-N-(2-甲基丙基)-lH-咪唑并[4,5-c
吡吱-7-甲酰胺鹽酸鹽。/標(biāo)題化合物以類似于實(shí)施例13的方法由4-[(3-氯苯基)氧基]-l-曱基-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶-7-羧酸鹽酸鹽(325mg)制備,其中異丁胺(120pl)用于偶合步 驟中。獲得灰白色固體(248mg)。LC/MS [MH^]359與分子式C18H1935ClN402"^:i。實(shí)施例17: 1-甲基-7-(4-嗎啉基羰基)-^{3-[(三氟甲基)氧基苯基}-111-咪唑并[4,5-c]吡咬-4-胺鹽酸鹽/將4-氯-l-曱基-7-(4-嗎啉基羰基)-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶(150mg)、曱磺酸 (0.207ml)和3-三氟曱氧基苯胺(0.143ml)在1 ,4-二嚅烷(5ml)中的混合物在微波 條件下在180。C加熱30分鐘?;旌衔镌谡婵罩羞M(jìn)行濃縮,用MDAP提純, 懸浮在曱醇中,用在乙醚(0.5ml)中的2N鹽酸處理,蒸發(fā),干燥,得到標(biāo)題 化合物(27mg)。LC/MS [Mtf]422與分子式C19H18F3N503 —致。實(shí)施例18: N-(3-氟苯基)-l-曱基-7-(4-嗎啉基M)-lH-咪唑并[4,5-c吡啶 -4-胺鹽酸鹽標(biāo)題化合物(36mg)以類似于實(shí)施例17的方法由4-氯-l-曱基-7-(4-嗎啉基 羰基)-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶(150mg)和3-氟苯胺(0.103ml)制備,除反應(yīng)時(shí)間 為15分鐘以外。LC/MS [MH"]356與分子式(18^^>^02—致。實(shí)施例19: N-(3,4-二氟苯基)-l-曱基-7-(4-嗎啉基絲)-lH-咪唑并[4,5-c
吡咬-4-胺鹽酸鹽標(biāo)題化合物(72mg)以類似于實(shí)施例17的方法由4-氯-l-曱基-7-(4-嗎p林基 羰基)-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶(150mg)和3,4-二氟苯胺(0.106ml)制備,除反應(yīng)時(shí) 間為15分鐘以外。LC/MS [MI^]374與分子式C18H17F2N502—致。實(shí)施例20: 1-曱基-^[2-曱基-3-(三氟甲基)苯基1-7-(4-嗎啉基絲)-111-咪唑并[4,5-c吡咬-4-胺鹽酸鹽標(biāo)題化合物(32mg)以類似于實(shí)施例17的方法由4-氯-l-曱基-7-(4-嗎啉基 羰基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(150mg)和2-曱基-3-三氟甲基苯胺(187mg)制備, 除反應(yīng)時(shí)間為15分鐘以外。LC/MS [Mtf]420與分子式C2。H2qF3N502 —致。實(shí)施例21: N-[2-氟-3-(三氟曱基)苯基-l-曱基-7-(4-嗎啉基羰基)-lH-咪 唑并[4,5-cl吡咬-4-胺鹽酸鹽標(biāo)題化合物(33mg)以類似于實(shí)施例17的方法由4-氯-l-甲基-7-(4-嗎啉基 羰基)-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶(150mg)和2-氟-3-三氟曱基苯胺(0.138ml)制備, 除反應(yīng)時(shí)間為20分鐘以外。標(biāo)題化合物是油,須用二氯曱烷共蒸發(fā),得到 泡沫/固體。LC/MS [Mlf]424與分子式C19H17F4N502 —致。實(shí)施例22: N-(3-氯-4-氟苯基)-l-曱基-7-(4-嗎啉基絲)-lH-咪唑并[4,5-c: 吡咬-4-胺鹽酸鹽標(biāo)題化合物(57mg)以類似于實(shí)施例17的方法由4-氯-l-曱基-7-(4-嗎啉基 羰基)-lH-咪唑并[4,5-c]吡啶(150mg)和3-氯-4-氟苯胺(156mg)制備,除反應(yīng)時(shí) 間為20分鐘以外。標(biāo)題化合物進(jìn)一步通過(guò)用己烷研磨來(lái)提純,得到白色固 體。LC/MS [MH^390與分子式C18H1735C1 FN502 —致。 包含本發(fā)明化合物的用于藥物用途的制劑可以以各種形式并且與許多 賦形劑一起制備。這些制劑的實(shí)例如下。實(shí)例23: ^L7v制劑每次給藥,式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物(l mg-100mg)從計(jì) 量劑量的吸入器中霧化輸送所需數(shù)量的藥物。實(shí)施例24:片劑片劑/組分 每片1. 活性組分 40 mg (式(I)的化合物或藥學(xué)上可接受的衍生物)2. 玉米淀粉 20 mg3. 海藻酸 20 mg4. 海藻酸鈉 20 mg5. 硬脂酸鎂 1.3 mg制備片劑的方法將組分l、 2、 3和4在合適混合器/摻合器中混合。向摻合物中分批加入 足夠的水以在加入每種組分后充分混合,直到物質(zhì)的稠度可以將其轉(zhuǎn)化為濕 顆粒為止。將濕物質(zhì)通過(guò)擺動(dòng)式制粒機(jī)利用8目(2.38mm)篩網(wǎng)變成顆粒。然 后將濕顆粒在烘箱中在140。F(60。C)干燥直至變干。千燥顆粒用組分5潤(rùn)滑, 并將潤(rùn)滑過(guò)的顆粒在合適的壓片機(jī)上壓制。實(shí)施例25:胃腸外制劑用于腸胃外給藥的藥物組合物通過(guò)在加熱下將適量的式(I)化合物溶解 在聚乙二醇中制備。然后將該溶液用注射用水(Ph Eur.)稀釋(至100 ml)。所 得溶液通過(guò)由0.22微米的膜濾器濾過(guò)進(jìn)行滅菌并密封在無(wú)菌容器中。
權(quán)利要求
1.式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物id="icf0001" file="S2006800375345C00011.gif" wi="50" he="41" top= "48" left = "83" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="no"/>其中X1是NR4或O;R1選自氫、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基和鹵代C1-6烷基;R2是氫或(CH2)mR3,其中m是0或1;或R1和R2與它們所連接的N一起形成任選取代的4-至8-員非芳香族雜環(huán)基環(huán);R3是4-至8-員非芳香族雜環(huán)基、C3-8環(huán)烷基、直鏈或支鏈C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C3-8環(huán)烯基、C2-10炔基、C3-8環(huán)炔基或苯基,其中任何一個(gè)可以是未取代的或取代的,或R5;R4選自氫、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、鹵代C1-6烷基、COCH3和SO2Me;R5是id="icf0002" file="S2006800375345C00012.gif" wi="21" he="16" top= "181" left = "99" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="no"/>其中p是0、1或2,以及X是CH2、O、S或SO2;R6是未取代的或取代的苯基、未取代的或取代的C3-6環(huán)烷基或未取代的或取代的4-至8-員非芳香族雜環(huán)基環(huán);R7是OH、C1-6烷氧基、NR8aR8b、NHCOR9、NHSO2R9或SOqR9;R8a是H或C1-6烷基;R8b是H或C1-6烷基;R9是C1-6烷基;R10是氫、取代或未取代的(C1-6)烷基或氯;R12是氫或C1-6烷基;R13是氫或C1-6烷基;q是0、1或2。
2. 權(quán)利要求1所述的化合物,其中W是氫。
3. 權(quán)利要求1或2所述的化合物,其中W是(CH2)mR3,其中m是0或1。
4. 前面任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的化合物,其中R 是未取代的或取代的d_6 烷基。
5. 權(quán)利要求1所述的化合物,其中W和R"與它們相連的氮一起形成嗎 啉基、吡咯烷基或哌啶基環(huán)。
6. 前面任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的化合物,其中116是未取代的或取代的苯基。
7. 前面任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的化合物,其中X!是NR4。
8. 前面任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的化合物,其中R"是Cw烷基或氫,例如曱 基或氫。
9. 前面任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的化合物,其中R"是氫。
10. 前面任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的化合物,其中R"是曱基。
11. 前面任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的化合物,其中R"是氫。
12. 式(Ia)的化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物X!是NR4; W是氫;r2是(CH2)JR3,其中m是0或1;或R1和R2與它們相連的N —起形成可以未取代的或取代的嗎啉基、吡 咯烷基或哌啶基環(huán);R3是未取代的或取代的直鏈或支鏈d.6烷基;W是氫或曱基,R6是未取代的或取代的苯基;R^是氫或曱基。
13. 藥物組合物,包含前面任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的化合物或其藥學(xué)上可接 受的衍生物。
14. 權(quán)利要求13所述的藥物組合物,還包含其藥物載體或稀釋劑。
15. 權(quán)利要求13或14所述的藥物組合物,還包含第二種治療劑。
16. 權(quán)利要求1-12任一項(xiàng)所述的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生 物,其用于人或獸醫(yī)藥物。
17. 權(quán)利要求1-12任一項(xiàng)的化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物,其用于 治療由大麻素2受體活性介導(dǎo)的病癥。
18. 權(quán)利要求1-12任一項(xiàng)所述的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物 在制備治療劑中的用途,其中所述的治療劑用于治療由大麻素2受體活性介 導(dǎo)的病癥。
19. 治療患有由大麻素2受體活性介導(dǎo)的病癥的哺乳動(dòng)物例如人的方法, 包括給藥所述受治療者無(wú)毒的、治療有效量的權(quán)利要求l-2任一項(xiàng)所述的式 (I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物。
20. 權(quán)利要求17所述的化合物或權(quán)利要求18所述的用途或權(quán)利要求19所 述的治療方法,其中由大麻素2受體活性介導(dǎo)的病癥是免疫疾病、炎性疾病、 疼痛、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、骨關(guān)節(jié)炎或骨質(zhì)疏松癥。
21. 權(quán)利要求20所述的化合物、用途或方法,其中所述的疼痛選自炎性疼 痛、內(nèi)臟疼痛、癌癥疼痛、神經(jīng)性疼痛、下背疼痛、肌肉骨骼疼痛、術(shù)后疼 痛、急性疼痛和偏頭痛。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的咪唑并吡啶衍生物,含有這些化合物的藥物組合物以及它們?cè)谥委熂膊?,特別是疼痛中的用途,其中所述疾病直接或間接地由大麻素受體活性的增加或減少所引起。
文檔編號(hào)A61K31/4545GK101282973SQ200680037534
公開(kāi)日2008年10月8日 申請(qǐng)日期2006年8月7日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月9日
發(fā)明者威廉·L·米切爾, 安德魯·J·伊瑟頓, 李·W·佩奇, 杰勒德·M·P吉布林, 珍妮弗·A·斯威廷, 艾倫·內(nèi)勒, 馬丁·斯沃布里克 申請(qǐng)人:葛蘭素集團(tuán)有限公司