專利名稱：維生素d胺及酰胺衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新穎的維生素D類似物，特別是在17-位上具有修飾側(cè)鏈的1α-羥基維生素D3類似物。
眾所周知，具有下式的維生素D3在鈣代謝 中起著關(guān)鍵作用，其可促進鈣和磷的腸道吸收，保持鈣和磷的血清水平，在甲狀旁腺激素存在下促進鈣從骨流質(zhì)隔室的代謝。
20年以前人們就認(rèn)識到維生素D在體內(nèi)進行羥基化反應(yīng)，25-位的羥基化發(fā)生在肝臟，1α-位的羥基化發(fā)生在腎臟，生成的1α，25-二羥基代謝物是具有生理學(xué)活性的物質(zhì)。這一發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致了許多維生素D類似物的合成，對它們的評價表明1α-位及24R或25-位的羥基對于一個化合物或其代謝物顯示出對鈣代謝實際效應(yīng)來說是必需的。同時，如上所述，這類羥基將最終在體內(nèi)正常被引入，在24R-或25-位上的羥基化要比在1α-位來得容易得多，使用已經(jīng)如此羥基化的維生素D類似物已被證明具有優(yōu)勢，由于其活性水平提高，作用迅速且隨后亦能迅速從體內(nèi)消除。特別值得一提的是對于腎衰竭患者來說，1α-羥基化維生素D衍生物是特別適用的。
當(dāng)今使用的羥基化維生素D類似物的實例有天然代謝物1α，25-二羥基維生素D3和1α-羥基維生素D3(其在體內(nèi)容易進行25-羥基化)。其它報道的有前途的化合物包括1α，24R-二羥維生素D3，上述化合物的D2類似物以及1α，25-二羥類似物(在24-，26-和/或27-位上帶有氟原子)(參見De Luca和Schnoes，Ann.Rev.Biochem.(1983)，52，PP 411-439以及De Luca等..Top.Curr.Chem.(1979)，83，PP 1-65)。
最近已了解到，天然代謝物1α，25-二羥基維生素D3對于細胞代謝還有其它作用，這些細胞調(diào)節(jié)作用包括促進細胞成熟和分化(TanaK等，Biochem.J.(1982)，204，PP 713-719；Am ento等J.Clin.Invest.(1984)，73，PP 731-739；Colston等，Endocrinology(1981)，108，PP 1083-1086；Abe等，Proc.Nat.Acad.Sci.(1981)，78，PP 4990-4994)以及免疫抑制作用(例如對白介素II生成的抑制)(Rigby，Immunology Today(1988)，9，PP 54-58)新近，人們觀察到1α，25-二羥基維生素D3具有免疫強化作用，該化合物對殺細菌的氧代謝物的產(chǎn)生以及對白細胞趨化性反應(yīng)有刺激作用(參見Cohen等，J.Immunol.(1986)，136 PP 1049-1053)。眾所周知，白細胞在體內(nèi)防御各種感染中起著重要作用(例如，參見Roitt，Brostoff及Male，”Immunology”第二版，(1989)，C.V.Mosby，St.Louis，16.10-16.13以及17.4-17.5章節(jié))，例如，通過粘附和吞噬入侵的有機物(細胞趨化性反應(yīng))和/或生成超氧化物和/或其它毒性的氧代謝物。人們已知，輔致癌物佛波醇酯及γ-干擾素等有絲分裂原也可以刺激該反應(yīng)，上述兩種物質(zhì)在結(jié)構(gòu)上與維生素D類似物截然不同。
借助對細胞代謝的這些作用，從理論上來講，1α，25-二羥基維生素D3在如此不同的范圍內(nèi)有治療作用，如對牛皮癬，炎癥及自身免疫疾病，腫瘤和增生，亦可作為感染化療時的輔助劑尤其是細菌，病毒和真菌)，還可在涉及單核吞噬細胞的其他治療形式中作輔助劑。1α，25-二羥基維生素D3及1α-羥基維生素D3還被建議用于治療高血壓(Lind等，Acta Med.Scand.(1987)，222，PP 423-427)和糖尿病(Inomata等，Bone Mineral(1986)，1，PP 187-192)，還有人提出1α，25-二羥基維生素D3可以促進毛發(fā)生成(Lancet，4March 1989，P478)并可以用于治療痤瘡(Malloy等，TricontinentalMeeting for Investigative Dermatology，Washington，1989)。
由于一個足以產(chǎn)生所需的細胞調(diào)節(jié)，免疫抑制，免疫加強作用的劑量水平同時能導(dǎo)致不可接受的高血鈣癥，因此1α，25-二羥基維生素D3和1α-羥基維生素D3對鈣代謝的強力作用將妨礙它的使用，因此導(dǎo)致人們試圖合成新的對鈣代謝作用有所降低，但對細胞代謝仍顯示出所期作用的類似物。
新的類似物已有報道，其在一定程度上顯示了這種所期活性的分離。已有報道化合物MC-903(Calcipotriol)，其為在24位帶有一個環(huán)丙基的22，23-未飽和1α，24R-二羥基維生素D3類似物，而不是通常膽甾烷側(cè)鏈的C25-C27構(gòu)型，現(xiàn)在用來治療牛皮癬，據(jù)報導(dǎo)與1α，25-二羥基維生素D3相比，對細胞成熟作用較大，但同時具有較小的引起高血鈣癥的作用(Calverley，Tetranedron(1987)，43，PP4609-4619；和Holick，Arch.Dermatol.(1989)，125，PP 1692-1696)。對1α，25-二羥基維生素D3的類似物亦有相似的權(quán)利要求，例如22-氧雜(Abe等，Endocrinology(1989)，124，PP 2645-2647)，24-及26-高(Ostrem等，J.Biol.Chem.(1987)，262，PP14164-14171)，16-去氫-23，24-乙炔基(Zhou等，Blood(1989)，74，PP 82-93)以及19-去甲-10-二氫(Perlman等，TetrahedronLett.(1990)，PP 1823-1824)。
為了達到分化誘導(dǎo)活性及高血鈣活性增強分離的目的，所研究的其它1α，25-二羥基維生素D3類似物包括23-氧雜，23-硫代以及23-氮雜衍生物(Kubodera等，Chem.Pharm.Bull.(1991)，39，PP 3221-3224)，帶有不同大小側(cè)鏈的22-氧雜類似物(Kubodera等，Chem.Pharm.Bull.(1992).40PP 1494-1499).以及20-表類似物(Binderup等，Biochemical Pharmacology(1991)，42，PP 1569-1575)。
從這些發(fā)明中似乎既不可能推斷出哪一個化合物會顯示出細胞調(diào)節(jié)活性(或任何這類活性的水平)，也不可能決定哪一個因素可以導(dǎo)致關(guān)于細胞調(diào)節(jié)和鈣代謝活性的分離。因此已觀察到在分化誘導(dǎo)活性和側(cè)鏈長度或親水性之間沒有嚴(yán)格的關(guān)系。
大多數(shù)結(jié)果表明，對于化合物顯示明顯的細胞調(diào)節(jié)活性來說，靠近膽甾烷型側(cè)鏈末端或其同系物末端的羥基基團的存在是必需的。然而，Ostrem等(op.cit.)的發(fā)現(xiàn)表明，具有短的未取代17-位側(cè)鏈的類似物(例如異丙基或仲丁基，就象高-或雙-高-孕甾烷)顯示出非常強的分化誘導(dǎo)活性，并且比相應(yīng)的具有側(cè)鏈羥基的短側(cè)鏈化合物具有更強的活性。
所提的一些類似物所顯示出的細胞調(diào)節(jié)活性水平與1α，25-二羥基維生素D3相似，但它們顯示出來的對鈣代謝作用卻較適宜，相對于1α，25-二羥基維生素D3而言，該活性(指鈣代謝)的減弱程度至多兩個數(shù)量級，況且，從上述許多(如果不同全部)顯示鈣和細胞代謝作用分離的新類似物(包括MC-903)可以看出，減弱的鈣作用僅僅是由于維生素代謝更加迅速而降低了參與循環(huán)的藥物的量(參見Bouillon等，J.Bone Miner.Res.(1991)，6，P1051及Dusso等，En-docrinology(1991)，128，P1687)。其同樣可以降低體內(nèi)細胞調(diào)節(jié)作用，從而比體外實驗結(jié)果所要求的全身劑量要更大。
因此，如果長期使用這種化合物，特別是需要全身應(yīng)用時，這些類似物會產(chǎn)生積蓄毒性的問題，例如在治療炎癥，自身免疫疾病，腫瘤以及增生，或在口服治療牛皮癬時，因此，在這一治療范圍內(nèi)，有必要繼續(xù)應(yīng)用維生素D樣的化合物，其顯示出較強的細胞調(diào)節(jié)活性，且與減少鈣代謝的作用結(jié)合起來。
在其它情況中也需要這種細胞調(diào)節(jié)和鈣代謝的特殊平衡，例如在治療骨質(zhì)疏松癥時。
本發(fā)明是基于這樣一種發(fā)現(xiàn)，即17-位側(cè)鏈帶有某些胺或酰胺功能的1α-羥基維生素D衍生物具有有價值的生物活性；令人十分驚訝的是本發(fā)明包括那些缺乏側(cè)鏈羥基的化合物；迄今為至，這一基團平常被認(rèn)為可提高鈣和/或細胞調(diào)節(jié)活性。進一步而言，正如Ku-bodera等所述(op.Cit.，1991)，在1α，25-二羥基維生素D3的17位側(cè)鏈引入氮原子代替亞甲基可以使分化誘導(dǎo)活性失活。因此，可以期望用胺或酰胺功能基取代維生素D類似物的促活側(cè)鏈羥基的作用，將得到活性更低的化合物，尤其是因為胺基團比氧功能基(如羥基)的堿性更顯著，在生理PH條件下將被質(zhì)子化。
另外，如下文中所詳細描述的，業(yè)已發(fā)現(xiàn)，通過適當(dāng)?shù)倪x擇可以影響其活性，例如對本發(fā)明化合物17-位側(cè)鏈上碳鏈長度的選擇，或可提高細胞調(diào)節(jié)活性，或可提高鈣代謝和骨鈣代謝活性，從而使得制備適于特殊治療應(yīng)用又具有特殊活性狀態(tài)的化合物成為可能。
因此，根據(jù)本發(fā)明的一個方面，提供如下式(I)化合物 (其中R代表氫原子，一個脂肪、環(huán)脂、芳脂或芳基有機基團，或一個?；?jīng)由羰基基團與氮原子相連這樣的有機基團；R1和R2(其可以相同也可不同)各自代表低級烷基或環(huán)烷基，或與和它們相連的碳原子一起構(gòu)成低級環(huán)烷基基團；R3代表具α-或β-構(gòu)型的甲基；Y代表低級亞烷基，亞鏈烯基、亞炔基，它們可以任意地被羥基，醚化羥基或酯化羥基基團取代；且A＝代表環(huán)亞己基部分，其以A環(huán)上具1α-羥基化的維生素D或其類似物為特征。
其中R1和R2代表低級烷基，其可以是C1-6烷基基團，例如甲基，乙基，丙基和丁基基團。低級環(huán)烷基R1和R2可以含3-8個碳原子，例如環(huán)丙基，環(huán)戊基及環(huán)己基基團。
其中R代表脂肪或環(huán)脂基團，其可以是低級烷基或低級環(huán)烷基，例如對R1和R2的描述。芳脂基團R可以是C6-12碳環(huán)芳基，C1-4烷基基團，例如芐基或苯乙烯基；芳基基團可以是C6-12碳環(huán)芳基基團，如苯基或萘基。其中R代表?；鶊F，其可以是低級(例如C1-6)烷?；?，如甲?；?，乙?；虮；?；C6-12碳環(huán)芳基C2-5烷酰其基團，如苯乙?；?；或C7-13碳環(huán)芳?；?，如苯甲?；??；鶊FR可任意地帶有一或多個取代基，例如選自鹵素(如氯或溴)，低級(如C1-4)烷基，如甲基，低級烷氧基(如甲氧基)，低級烷?；?如乙?；?，低級烷氨基(如甲基氨基)，二(低級烷基)氨基(如二甲基氨基)，硝基，氨甲?；暗图壨轷；被?例如乙酰氨基)。
用Y代表的低級亞烷基，亞鏈烯基，亞炔基基團，含有至多7個碳原子及至多三個重鍵。較有益的Y為直鏈基團，例如含3-6碳原子，如1，3-亞丙基，1，4-亞丁基，1，5-亞戊基，1，6-亞己基，亞丁-1，3-二烯基，亞丙炔基，亞丁-1-炔基或亞丁-2-炔基。
其中Y被羥基，醚化羥基或酯化羥基基團取代，較有利地、取代基位于基團-C(R1)(R2).NHR的α-，β-或γ-位，或者位于基團Y中任何三重鍵的α-位。醚化的羥基基團包括低級(例如C1-6)烷基基團(其可任意地被一個或多個氧原子插入，例如甲基，甲氧甲基或甲氧乙氧甲基)，以及環(huán)狀基團，如四氫吡喃基。酯化的羥基基團包括低級(例如C1-6)烷?；?，如乙?；?，丙?；?，異丁?；蛭祯；?；低級鏈烯酰基(例如烯丙羰基)；芳?；?例如對硝基苯甲?；?；低級烷氧羰基(例如叔丁氧羰基)；低級鹵代烷氧羰基(例如2，2，2-三氯乙氧羰基或1，1，1-三氯-2-甲基-2-丙氧羰基)；芳烷氧羰基(例如芐氧羰基或?qū)ο趸S基氧基羰基)；以及低級鏈烯氧羰基(例如烯丙氧羰基)。將意識到有利的是選擇那些在體內(nèi)代謝易變化的醚化或酯化基團。
當(dāng)式(I)的R3為α-構(gòu)型中的甲基基團時，化合物具有天然維生素D衍生物特征的20R構(gòu)型；當(dāng)R1處于β-構(gòu)型時，化合物具有表-維生素衍生物的20S-構(gòu)型。將被意識到本發(fā)明包括這兩種異構(gòu)體的混合物。
由A＝表示的亞環(huán)已基在1α-和3β-位上攜帶有羥基或其保護衍生物，并可帶有更多的取代基，例如，在為了提高抗鈣血癥或抗增生活性，和/或促進分化時。A＝可由下式(A-1)來表示 其中R4和R5(它們可以相同也可不同)分別獨立地代表氫原子或O-保護基，R6和R7(它們可以相同也可以不同)選自氫原子及單價或二價取代基團。
其中的R4和R5代表O-保護基團，可用本領(lǐng)域內(nèi)常用的方法去除O-保護基團。合適的基團包括醚化基團，如甲硅烷基〔例如，三(低級烷基)甲硅烷基如三甲基甲硅烷基，三乙基甲硅烷基，三異丙基甲硅烷基或叔丁基二甲基甲硅烷基；三(芳基)甲硅烷基基團，如三苯基甲硅烷基；以及混合烷基-芳甲硅烷基基團〕；低級(如C1-6)烷基基團，其可任意地被氧原子插入，例如甲基，甲氧甲基或甲氧乙氧甲基；以及環(huán)基基團，如四氫吡喃。酯化的O-保護基團包括低級(C1-6)烷?；缫阴；?，丙?；惗□；蛭祯；?；芳?；?例如含7-15碳原子)，如苯甲?；?-苯基偶氮苯甲?；?；低級烷磺?；?，如(任意鹵化的)甲烷磺?；?；以及芳烴磺?；鐚妆交酋；?。
在制備具式(I)的活性1α，3β-二醇(其中R4和5代表氫原子)時，O-保護基衍生物作為中間體是很有用的。另外，O-保護基團在體內(nèi)代謝易變化，因此式(I)的醚及酯化合物可以直接用于治療。
R6和R7之中的至小一個最好為氫原子。作為R6和R7的其它形式而存在的取代基包括有亞甲基，甲基及亞乙基(以便與相連的碳原子形成螺旋形連接的環(huán)丙基基團)。
歸入上述式(A-1)中的代表性A＝基團包括以下基團 將意識到，含有基團(A-2)及(A-3)的化合物分別為維生素D同類物的5，6-順式(即5Z)及5，6-反式(即5E)異構(gòu)體。含有基團(A-4)及(A-5)的化合物相應(yīng)地為10，19-二氫維生素D類似物的5，6-順式及5，6-反式異構(gòu)體，含有基團(A-8)的化合物為19-去甲維生素D類似物。
本發(fā)明中的5，6-反式異構(gòu)體通常可作為合成5，6-順式異構(gòu)體的中間體，詳見下文所述。然而，5，6-反式異構(gòu)體其中R4和R5為氫原子或代謝不穩(wěn)定的基團時，通常具有生物活性，例如，比相應(yīng)的5，6-順式異構(gòu)體低一個數(shù)量級，故也可用于治療目的。
式(I)活性化合物，其中Y是，例如，含有3個碳原子以內(nèi)的基團，如1，3-亞丙基，且R1和R2是，例如，低級烷基，如甲基或乙基，可顯示出與已知的1α-羥基維生素D衍生物，如1α，25-二羥基維生素D3相似的活性。因而，該類化合物可顯示出明顯的鈣代謝效應(yīng)，如通過刺激體內(nèi)腸鈣運轉(zhuǎn)，骨鈣松動和骨骼形成。因此，該類化合物可用于治療和/或預(yù)防如下疾病，例如，佝僂病和骨軟化，骨質(zhì)疏松，甲狀旁腺機能減退，低磷酸鹽血癥，低血鈣癥和/或有關(guān)的骨疾病，低血鈣手足搐搦，腎衰竭，以及腎病性骨營養(yǎng)不良，膽汁性肝硬變，脂肪痢，繼發(fā)性低血鈣和/或由于肝、腎或胃腸道功能紊亂所引起的病癥，或者用苯妥英鈉或用巴比妥類藥物，如苯巴比妥及有關(guān)的藥物治療時所引發(fā)的病癥。特別地，它們可用于天然化合物如維生素D3難治的疾病。
在式(I)化合物中有氨基存在時(其中R代表氫或低級烷基)可提高與含有一個側(cè)鏈羥基的維生素D衍生物有關(guān)的化合物的生物利用度，例如，通過限制脂質(zhì)體中的多價螯合作用也可允許化合物易于配方成為水性組合物，與常規(guī)的油溶性維生素D衍生物相比，具有較高的優(yōu)越性。
上述式(I)化合物也顯示出細胞調(diào)節(jié)活性，如誘導(dǎo)細胞分化和成熟，抑制細胞增生和/或活化單核細胞(例如，通過Styrt等人的方法評價，Blood(1986)，67，PP334-342)，但是由于它們的鈣血癥效應(yīng)太明顯，從而影響其在細胞代謝效應(yīng)方面的中或長期應(yīng)用。然而，該類化合物的高度同系性，如式(I)化合物(其中Y含有4-7個碳原子和/或R1和/或R2各自含有2或多個碳原子)可顯示出降低鈣代謝的效應(yīng)，正如在大鼠體內(nèi)，降低血清鈣和磷的水平所顯示，從而，顯示出細胞調(diào)節(jié)活性和鈣血癥活性之間有利的治療比率。
本發(fā)明中這類活性化合物的細胞調(diào)節(jié)活性，結(jié)合實質(zhì)上的鈣血癥效應(yīng)的缺乏，使得它們在治療腫瘤疾病，特別是髓性白血病方面導(dǎo)致興趣(兩者單獨或附加一起)，并被提議用作促進傷口愈合的藥物。它們既可單獨使用，或作為附加物，用于感染化療，以及其它涉及單核吞噬細胞治療形式的附加劑，例如，治療骨疾病(例如佝僂病或腎性營養(yǎng)不良所表現(xiàn)的骨質(zhì)疏松，骨質(zhì)稀少或骨營養(yǎng)不良)。自身免疫病，宿主移植反應(yīng)，移植排斥，炎癥疾病(包括免疫炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié))，腫瘤形成及增生，肌病，腸病及脊椎性心臟病等。本發(fā)明化合物也可用于對甲狀旁腺激素有抑制作用(例如在血清鈣的體內(nèi)平衡中)，并可用于治療皮膚病(例如痤瘡、脫發(fā)、濕疹、瘙癢、牛皮癬和皮膚老化，包括光老化)，高血壓，風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，牛皮癬性關(guān)節(jié)炎，繼發(fā)性甲狀旁腺機能亢進，哮喘，識別損傷以及老年性癡呆(包括Alzheimer’s疾病)，控制人類和動物生育率，以及調(diào)節(jié)涉及血塊的功能失調(diào)，例如通過溶解現(xiàn)存的血塊或預(yù)防血塊的形成。本發(fā)明包括使用這些化合物來治療或預(yù)防上述疾病，并包括使用這些化合物制備用于治療或預(yù)防目的的藥物。
我們確信式(I)化合物的活性的20R異構(gòu)體治療感染效果較好，例如在復(fù)合治療中，活性20S-表異構(gòu)體可應(yīng)用于免疫抑制作用，例如治療自身免疫及炎癥疾病，風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，哮喘等。Binderup等人有關(guān)20-表維生素D3類似物的工作支持了這一觀點，見于Biochemical Pharmacologv(1991)，42(8)，PP 1569-1575。
將意識到優(yōu)先選擇式(I)的低級同系物來治療鈣代謝缺乏，并選擇其高級同系物，專一地用于細胞調(diào)節(jié)，例如在治療增生(如牛皮癬)時。然而，在治療骨疾病時兩種類型的活性均有用，還可以通過對Y、R1及R2適當(dāng)?shù)倪x擇得到特定的同系物，以獲得為上述目的而具有所期活性平衡的化合物。
已有報道(Neef等人，9th Workshop on Vitamin D(1994)，維生素D化合物在如下情況下，即具有常規(guī)的末端羥基化的17-位側(cè)鏈(包括23-位上含雜原子的側(cè)鏈)時，具有20，20-二甲基，20-亞甲基或20-螺旋環(huán)丙基基團的類似物，可顯示出有用的生物活性。典型地類似于相應(yīng)的20R-甲基取代異構(gòu)體，而不是相應(yīng)的20S-表異構(gòu)體。本發(fā)明包含上述定義的式(I)化合物的類似物，其中R3選自二甲基，亞甲基以及螺旋環(huán)丙基基團。
本發(fā)明活性化合物可以配制成用于任何方便的給藥途徑的劑型，例如口服(包括舌下的)，非腸道給藥，直腸給藥或吸入給藥，如此配制的藥物組合物具有本發(fā)明的特征。
如有所需，口服給藥制劑可以含有一種或多種生理學(xué)上可相容的載體和/或賦形劑，其可以是固體或液體。組合物可以采用任何方便的劑型，包括片劑、包衣片劑、膠囊、錠劑、水或油懸浮液、溶液、乳劑、糖漿、酏劑以及在使用前適合與水或其它合適液體載體重組的干燥產(chǎn)品。較好地是將組合物制成單位劑型。如有所需，本發(fā)明中的片劑和膠囊可以含有常規(guī)組份，如粘合劑，例如，糖漿、阿拉伯膠、明膠、山梨糖醇、黃蓍膠或聚乙烯吡咯烷酮；填充劑，如乳糖、蔗糖、玉米淀粉、磷酸鈣、山梨糖醇或甘油；潤滑劑，例如硬脂酸鎂、滑石、聚乙二醇或硅石；崩解劑，例如土豆淀粉；或可接受的加濕劑，如月桂基硫酸鈉。片劑可用常規(guī)的方法進行包衣。
液體組合物可以含有常規(guī)的添加劑，如懸浮劑，例如山梨糖醇糖漿、甲基纖維素、葡萄糖/蔗糖糖漿、明膠、羥甲基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁膠或氫化的食用脂肪；乳化劑，如卵磷脂，脫水山梨糖醇單油酸酯或阿拉伯膠；非水載體，其包括食用油，例如植物油，如花生油，杏仁油，經(jīng)分餾的椰子油，魚肝油，油性酯，例如多乙氧基醚，聚乙二醇，或乙醇；以及防腐劑，例如，對羥基苯甲酸甲酯或丙酯。液體組合物可用合宜的方法封成膠囊，例如，用明膠，以獲得產(chǎn)品的單位劑型。
用于非腸道給藥的組合物可使用可注射的液體載體，如無菌無熱原水，無菌的無過氧化物的油酸乙酯，無水醇或丙二醇或無水醇/丙二醇的混合物來配制，其可經(jīng)靜脈，腹膜內(nèi)或肌肉注射。
用于直腸給藥的組合物可使用合宜的栓劑基質(zhì)，如可可脂或其它甘油酯來配制。
用于局部給藥的組合物包括軟膏劑，霜劑，凝膠，洗劑，洗發(fā)劑，搽劑，粉末劑(包括噴霧粉末劑)，陰道栓劑，填塞劑，噴霧劑，浸泡劑，氣溶膠，傾倒劑及滴劑等。根據(jù)需要，可選擇親水或疏水基質(zhì)來配制活性成分。
通過吸入給藥的組合物通常配成自身推進輸送形式，如在計量劑型中。例如，將活性成份置于推進劑(如鹵代烴)中，填充于一個配有計量分散閥的氣溶膠容器中制成懸浮液。
有利的是在本發(fā)明的組合物中混入抗氧化劑，例如抗壞血酸，丁基化的羥基茴香醚或氫醌，以提高它們的貯存期。
如果將上述組合物制成單位劑型的話，每個劑量單位一般含有0.1-500μg，例如0.2-100μg的本發(fā)明活性化合物。如有所需，這些化合物還可以與一種或多種其它活性成份相配伍后使用。
本發(fā)明化合物合適的日劑量范圍為0.2-1000μg，例如0.4-200μg/天，劑量大小取決于所治病情的嚴(yán)重程度，以及患者的年令，體重和身體狀況等因素。
本發(fā)明化合物可用任意的合宜的方法來制備，例如選自下列之一的方法A)式I的5，6-順式化合物可從相應(yīng)的5，6-反式化合物的異構(gòu)化來制備，隨后如果需要和/或有要求時，可除去任意的氧保護基。該異構(gòu)化反應(yīng)可按下列方法來實現(xiàn)，例如，用碘處理，用二硫化物或聯(lián)硒化物處理，或用紫外光照射，較可取的是在三重敏化劑存在下。B)式(I)5，6-反式化合物可按下列方法來制備，羥化相應(yīng)的1-未取代的5，6-反式化合物，例如，A＝下式基團的化合物(I) (其中R4為氫或O-保護基)，該羥化反應(yīng)可用硒酯(它由二氧化硒或硒酸與醇就地生成)使之完成，如GTB-A-2038834中所述方法；或采用硒酸在pH＝3-9的范圍中完成，如GB-A-2108506中所述；該兩個專利說明書的內(nèi)容在此文中可作為參考。如果需要的話1-未取代的5，6-反式化合物可從相應(yīng)的5，6-順式維生素就地在羥化反應(yīng)條件下反應(yīng)，隨后異構(gòu)化和/或除去氧保護基(在需要時和/或有要求時)完成該制備反應(yīng)。C)通過含有前體的化合物(該前體處于所需的17-位側(cè)鏈的一或多個階段)與一或多個反應(yīng)物形成所需的側(cè)鏈，隨后在需要時或有要求時進行異構(gòu)化和/或除去O-保護基。
因而，例如，為制備式(I)化合物(其中R1和R2相同)可用通式(II)化合物 (其中R3，Y及A＝同上述定義，A＝較可取的為(A-2)-(A-8)中的一個，且處于O-保護狀態(tài))與有機鈰試劑反應(yīng)，例如，從氯化鈰與適當(dāng)?shù)挠袡C金屬化合物就地生成，如烷基/環(huán)烷基鋰化合物，式R1Li(其中R1同前定義)，例如見Ciganek(J.Org.Chem.(1992)，57，PP4521-4527)中所述。
R1和R2不同的式(I)化合物可按，例如，下列反應(yīng)來制備，將式(III)硫代肟 (其中，R1、R3，Y及A＝同前定義，且R8為芳基，如，碳環(huán)芳基，如苯基)，與相應(yīng)的有機金屬化合物，如式R2Li的烷基/環(huán)烷基鋰化合物(其中R2同前定義)反應(yīng)，然后還原所制得的式(IV)化合物。 (其中R1、R2、R3、R8，Y及A＝同前定義)，例如，用金屬氫化物還原劑，如硼氫化鈉或無機或有機硫化物，如硫化氫，硫化鈉或硫醇(如低級烷基硫醇如，甲硫醇)，除去R8·S基團，得到相應(yīng)的式(I)化合物(其中R為氫原子)(參見J·Org.Chem.(1977)42，PP 398-399)。
式(I)化合物中R代表低級烷?；?，芳基烷?；蚍减；淇山?jīng)?；鄳?yīng)的R為氫的化合物(I)來制備，例如，與適當(dāng)?shù)孽｛u或酸酐反應(yīng)，或與適當(dāng)?shù)乃嵩谂己蟿┐嬖谙?，如N，N′-羰二咪唑或二環(huán)己基羰二酰亞胺進行反應(yīng)。在該?；磻?yīng)過程中，將分子中存在的羥基，如A＝的取代基或Y基團，保護起來，呈O-保護狀態(tài)是有宜的。
式(I)化合物，其中R代表低級烷基，可經(jīng)下列步驟制備。例如，將相應(yīng)的式(I)化合物(其中R為低級烷酰基)與例如金屬氫化物還原劑，如氫化鋁鋰，進行反應(yīng)。另外，也可將R為氫的化合物(I)直接進行烷基化反應(yīng)，例如，與鹵代烷反應(yīng)或進行還原性胺化反應(yīng)，例如與適當(dāng)?shù)娜┘斑€原劑如氰基硼氫化鈉進行反應(yīng)。
式(I)化合物，其中Y為亞炔基，可經(jīng)下列步驟來制備，例如，將式(V)化合物 (其中R3及A＝同上定義，Ya為亞烷基，如含有1-4個碳原子，且L表示離去基團如磺酸酯基，如低級烷基磺酰氧基，如甲磺酰氧基，低級氟烷基磺酰氧基，如三氟甲磺酰氧基或芳基磺酰氧基，如甲苯磺酰氧基，或鹵原子如氯、溴或碘)，與式(VI)炔的金屬衍生物(例如，鋰衍生物) (其中R，R1及R2同前定義，且n為0或整數(shù)，例如，1-3)，進行反應(yīng)。
所得到的化合物(I)其中Y為基團-Ya-C≡C-(CH2)n-(其中Ya及n同前定義)，在需要時，可進行氫化，將三鍵轉(zhuǎn)化為雙鍵(例如，采用Lindlar催化劑或轉(zhuǎn)化為單鍵(例如，用貴金屬催化劑，如鉑，鈀或均相銠或釕)，在該氫化反應(yīng)中，化合物(I)中的5，7-二烯或5，7，10(19)-三烯體系最好處于保護狀態(tài)，即Diels Alder加成物狀態(tài)，通過與親二烯體反應(yīng)來實現(xiàn)，例如，見于GB-A-2114570中所述(該內(nèi)容為本文的參考文獻)；較可取的親二烯體包括二?；嫉衔?，如2，3-二氮雜萘二酮及苯基三噁唑啉二酮。該Diels Alder加成物可被除去，如在氫化之后用臭氧分解或其它的氧化技術(shù)。
式(I)化合物，其中Y是帶有一個與三鍵相連的α位羥基的亞炔基，可按下列步驟制備，例如，將式(VII)化合物 (其中R3及A＝同前定義，且Yb為價鍵或亞烷基例如，含有1-4個碳原子)，與式(VI)炔的金屬衍生物反應(yīng)，得到化合物(I)，其中Y基團為-Yb-CH(OH)-C≡C-(CH2)n-(其中Yb及n同前定義)。
式(VI)化合物可按下列步驟制備將式(VIII)化合物CH3(CH2)nC≡C-C(R1)(R2)OH(其中n，R1及R2同前定義)與式RaCN(其中Ra為氫原子或合適的有機基團)在強酸存在下，如礦酸，象硫酸，進行Ritter反應(yīng)，得到式(I)化合物，其中R為Ra·CO-。該基團可經(jīng)水解除去，得到R為氫的式(I)化合物；也可以進行還原，同前所述，得到化合物(I)其中R為Ra·CH2-基團。另外，叔甲醇上的羥基也可被疊氮基所取代，例如，在強酸存在下與疊氮酸反應(yīng)，而后將疊氮酸還原，得到R為氫的化合物(I)。中間的炔基可被異構(gòu)化為末端位的炔基，該異構(gòu)反應(yīng)是用1，3-丙二胺的鉀鹽以，以1，3-丙二胺為溶劑(“乙炔拉鏈”)處理上述炔基來實現(xiàn)的。
式(II)化合物可按下列步驟來制備。例如，用上述定義的式(V)化合物與(i)氰離子源反應(yīng)(例如，堿金屬氰化物，象氰化鈉，氰化鉀)，(ii)金屬乙腈衍生物反應(yīng)(例如，鋰衍生物)，或(iii)丙烯腈反應(yīng)，較可取的是其中L為碘原子(例如，用超聲波誘導(dǎo)的鉻介導(dǎo)的共軛加成反應(yīng)，參見Mourino等在J.Org.Chem.(1993)58，pp118-123中的報導(dǎo))。
化合物(II)，其中17-位側(cè)鏈末端為基團-CH＝CH-CN可按下列步驟制備，例如，用上述定義的式(VI)醛進行Wittig反應(yīng)，如與式(R9)3P＝CH-CN的內(nèi)鎓鹽反應(yīng)(其中每個R9代表一個有機基團，例如，碳環(huán)芳基，如苯基)化合物進行反應(yīng)，或與對應(yīng)的磷酸酯或甲硅烷基相當(dāng)物反應(yīng)。
式(III)化合物可按下列步驟進行反應(yīng)，例如，將式(IX)酮 (其中R1，R3，Y及A＝同前定義)與S-取代的硫胺R8·S·NH(其中R8同前定義)進行反應(yīng)。該式(IX)化合物可按下列步驟制備，將式(X)酸 (其中R3，Y及A＝同前定義)，形成相應(yīng)的酰基鹵如酰氯，而后與有機金屬化合物R1MX(其中R1同前定義；M表示二價金屬，如，銅、鋅或鎘；且X代表，例如，鹵原子)反應(yīng)。另外，可用另外兩種方法制備化合物(IX)，即將式(V)化合物與(i)α-金屬化衍生物，如式CH3·CO·R1(其中R1同前定義)酮的鋰衍生物，或為相應(yīng)的烯醇反應(yīng)，或(ii)優(yōu)選其中L為碘原子的式CH2＝CH-CO-R1(其中R1同前所述)烯酮，如用超聲波誘導(dǎo)的鉻媒介的共軛加成，見Mourino等人所述(op.cit)。
因此，化合物(X)及其酯也可用于式(II)化合物的制備，即與氨或其金屬衍生物，例如堿金屬酰胺如酰胺鋰反應(yīng)形成相應(yīng)的酰胺，該酰胺經(jīng)過溫和的脫水反應(yīng)轉(zhuǎn)化為腈(II)，例如用甲苯磺酰氯，氧氯化磷(在堿，比吡啶存在下)或用三氟乙酸酐(在過量的堿，如吡啶存在下)。
式(II)化合物，其中Y為α-羥基取代的，可十分方便地從形成氰醇，如通過式(VII)化合物與氫氰酸反應(yīng)來制備。式(II)化合物，其中Y為β-羥基取代的，可直接從化合物(VII)與乙腈的金屬衍生物(例如鋰化物)的反應(yīng)來制備。它們也可間接地通過與乙酸酯的金屬衍生物反應(yīng)，隨后將酯轉(zhuǎn)化為酰胺，而后轉(zhuǎn)化為腈基，例如以前述方法。
在一般情況下，化合物(I)及其起始物(其中Y被羥基取代的)可用標(biāo)準(zhǔn)方法被轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的醚或酯的衍生物，該方法為本行業(yè)所熟悉。因此，例如，醚化反應(yīng)時可將適宜的有機鹵代物(如碘代烷)在適宜的堿存在下(例如，堿金屬烷氧化物，如，叔丁氧鉀)，較好的是在冠醚，如18-冠-6-存在下進行反應(yīng)。酯化反應(yīng)可采用適宜的?；瘎?，如酰鹵，酸酐等進行反應(yīng)。
有用的上述式(V)，(VII)及(X)化合物的起始物包括化合物(XI) (其中R4和R5同上定義)和/或其5，6-反式異構(gòu)體及相應(yīng)的1-去氧化合物；該類化合物可從維生素D2，1α-羥基維生素D2或它們的O-保護的衍生物上的22，23-雙鍵氧化裂解來制備(例如，臭氧化反應(yīng))最好通過形成Diels Alder親二烯加成物來使之穩(wěn)定，例如與二氧化硫或二氮雜環(huán)狀化合物反應(yīng)，參見GB-A-2114570的例子(該文內(nèi)容與本文參考文獻相結(jié)合)。
該20S化合物(XI)仍任意地以其親二烯加成物的形式時，可用下列步驟使其異構(gòu)化，例如，用溫和的堿處理，如無機堿，像碳酸氫鈉或三級有機堿，如1，4-二氮雜雙環(huán)〔2.2.2〕辛烷(“DABCO”)或1，8-二氮雜雙環(huán)〔5.4.0〕十一碳-7-烯(“DBV”)，從而得到20R及20S異構(gòu)體的混合物，從混合物純的20R表-異構(gòu)體可經(jīng)過層析法分離得；另外，也可在往后合成步驟中，乃至最后一步中分離出所需的表-異構(gòu)體。
用金屬氫化物還原劑，象硼氫化鈉，將式(XI)化合物或相應(yīng)的表-異構(gòu)體上的醛基進行還原，得到相應(yīng)的羥甲基化合物，即，化合物(V)，其中Yα為CH2且L為OH，它可轉(zhuǎn)化為化合物(V)，其中L為離開基團，例如，轉(zhuǎn)化為磺酸酯(如甲苯磺酸酯)，隨后，如果需要，與鹵化物鹽(例如，堿金屬溴化物)對磺酸酯基進行親核取代。
式(V)化合物，其中A＝表示基團(A-9)(用前定義)，Yα同前定義，且L為一個O-保護的羥基(如，其中羥基被酯化，例如，與低級烷?；缫阴；?可被進行1α-羥基化，方法同前(B)中所述，于是給出化合物(V)，其中A為基團(A-2)或(A-3)(同前定義，其中R5為氫)。該化合物或其被保護的衍生物，例如，其中R5為三甲基甲硅烷基，可被氫化(如在貴金屬催化劑，如氯化叁-三苯基膦銠的存在下)，得到相應(yīng)的化合物，其中A＝為基團(A-4)或(A-5)(同前定義)，或被環(huán)丙烷化(例如，與二碘甲烷在鋅/銅復(fù)合物存在下進行反應(yīng))，得到相應(yīng)的化合物，其中A＝為基團(A-6)或(A-7)(同前定義)。適當(dāng)?shù)兀蓪⑺玫幕衔镛D(zhuǎn)化為R5為O-保護基的化合物(例如，用甲硅烷化)，且可水解(例如，用堿，如氫氧化鉀或碳酸鉀)，或進行還原(例如，用氫化鋁鋰)以除去側(cè)鏈酯基，得到有用的起始物(V)，其中L為羥基。
式(XI)化合物的19-去甲類似物及相應(yīng)的20-羥甲基化合物(即是化合物(I)的起始物，其中A＝為基團(A-8)同前定義)可按Perlman等，Tetrahedron Letters(1992)33，pp2937-2940中所述方法制備。
式(V)化合物，其中Ya為1，2-亞乙基，或1，3-亞丙基，可按下列步驟制備。例如，將化合物(V)(其中Ya為亞甲基)當(dāng)(i)引入一個碳片斷的試劑反應(yīng)(如金屬氰化物)；再將引入的基團轉(zhuǎn)化基團-CH2L，例如，通過水解氰基得到羥基，或還原該氰基(如用金屬氫化物還原劑，如氫化二異丁基鋁)得到羧醛基，然后還原羧基或羧醛基(用硼氫化鈉或氫化鋁鋰)得到羥甲基，隨后，該羥甲基可被甲苯磺?；?，且如果需要的話，進行親核取代(同前所述)，轉(zhuǎn)化到鹵甲基；或者(ii)乙酸的酯或硫酯的金屬衍生物進行反應(yīng)，含有另一個與乙酸相當(dāng)?shù)奶缄庪x子的衍生物反應(yīng)，(例如，乙腈的金屬衍生物)，或與丙二酸酯的金屬衍生物反應(yīng)(其中反應(yīng)產(chǎn)物部分水解得到單酯，經(jīng)加熱脫羧，得到羧酸酯)，還原生成的酯或硫酯產(chǎn)物得到醇(例如，用氫化鋁鋰)，且將生成的羥基轉(zhuǎn)化為離開基團，如甲苯磺?；螓u原子，例如同前所述。
將意識到重復(fù)上述步驟(i)和/或(ii)，制得化合物(V)其中Ya為C3-C7亞烷基。D)將式(I)化合物進行反應(yīng)，以修飾A＝基團的取代模式，隨后在需要時和/或想要時，進行異構(gòu)化和/或除去保護基。
因此，例如化合物(I)，其中A＝代表基團(A-4)或(A-5)，可按下列步驟進行制備，氫化相應(yīng)的化合物，其中A＝為(A-2)或(A-3)，例如，采用GB-A-1583749的方法。也可將該氫化提早到反應(yīng)順序的早期階段，如在式(V)起始物或式(V)中間體階段。
化合物(I)，其中A＝為基團(A-6)或(A-7)可按下列步驟制備，從相應(yīng)的化合物，其中A＝為(A-2)或(A-3)(其中R4為O-保護基，且R5為氫原子或三甲基甲硅烷基)，按Simmons-Smith亞甲基化反應(yīng)進行(參見Neef等，Tetrahedron Letters(1991)，32，pp5073-5076)。
化合物(I)，其中A＝為基團(A-8)，可按下列步驟制備，例如，將適宜的維生素D衍生物(例如，化合物(I)的前體，其中A＝為(A-9)基團)的7，8-雙鍵斷開，例如用臭氫分解或高錳酸鉀和高碘酸鈉連續(xù)反應(yīng)，隨后將得到的8-酮與適當(dāng)?shù)沫h(huán)A前體進行Wit-tig-Horner反應(yīng)，例如，式(XII) (其中R4和R5代表O-保護基)，Perlman等，Tetrahedron Letters(1992)33，pp2937-2940。
通常在上述(C)和(D)所述的任一步驟中，均可能有5，6-順式或5，6-反式的構(gòu)型存在，雖然可在上述1α-羥基化及22-23雙鍵氫化裂解反應(yīng)中，較可取的是采用5，6-反式異構(gòu)體。在引入1α-羥基之后，將5，6-反式構(gòu)型轉(zhuǎn)化為5，6-順式是十分有利的。
將意識到，在上述許多反應(yīng)順序中，也可采用合適的甾體-5，7-二烯(或甾體-5-烯，它可轉(zhuǎn)化為該雙烯)，隨后將該甾體產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為所需的維生素D類似物，例如用紫外光照射。
通常，在1α-和/或3β-位上的O-保護基可用文獻記載的常規(guī)方法除去。因此，經(jīng)酯化的?；捎脡A性水解除去，例如用堿金屬烷氧化物，反應(yīng)在一種醇中進行。醚化基團，例如，甲硅烷基可用酸性水解或用氟化物鹽處理，如氟化四烷基銨。采取該類對酸不穩(wěn)定的，而對堿穩(wěn)定的保護基的特殊優(yōu)點是可在同系化反應(yīng)步驟中建立所期的側(cè)鏈。鑒于是在強堿性條件下，正常地采用這種反應(yīng)。
下列非限定的實例僅用來說明本發(fā)明。所有溫度均為℃。制備1a)20α-乙酰氧基甲基-1α-羥基-3β-三異丙基甲硅烷氧基-9，10-斷孕甾-5(E)，7-二烯〔式(IV)-A＝(A-5)，R3＝α-CH3，R4＝(異丙基)3Si，R5＝H，L＝O.CO.CH3，Ya＝CH2〕在氫氣下，將三-三苯基膦銠氯化物(450mg)的苯溶液(或1∶1的苯∶乙醇混合物)進行攪拌，直至不再吸收為止。將20α-乙酰氧甲基-1α-羥基-3β-三異丙基甲硅烷氧基-9，10-斷孕甾-5(E)，7，10(19)-三烯〔式(V)-A＝(A-3)，R3＝α-CH3，R4＝(異丙基)3Si，R5＝H，L＝O.CO.CH3，Ya＝CH2-作為替代物，也可以采用相應(yīng)的1α-三甲基甲硅烷基醚〕(500mg)的苯溶液(30ml)加入其中，混合物于氫氣下攪拌，直至1當(dāng)量的氫氣被吸收為止(約21ml)。標(biāo)題化合物用層析純化〔10(R)和10(S)異構(gòu)體在這一步驟中可以任意拆分〕，其相應(yīng)的光譜數(shù)據(jù)為UVλmax約243，251和261nm，ε分別約為35,000；40,000及27,000。
b)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20α-羥甲基-9，10-斷孕甾-5(E)，7-二烯〔式(V)-A＝(A-5)，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，L＝OH，Ya＝CH2〕上述(a)中所得的二烯(約500mg)的CH2Cl2(2ml)溶液用氯代三異丙基硅烷(250mg)及咪唑(350mg)進行處理，混合物于室溫下攪拌過夜。處理后粗品雙甲硅烷基醚溶于THF(10ml)中，用氫化鋁鋰(100mg)進行處理，室溫攪拌1-2小時。待多余的氫化鋁鋰分解后(小心地加入飽和Na2SO4水溶液)，處理反應(yīng)混合物得標(biāo)題醇。制備21α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20α-羥甲基-9，10，-斷孕甾-5(Z)，7-二烯〔式(V)-A＝(A-4)，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，L＝OH，Ya＝CH2〕在吩嗪存在下，通過光照射1小時，使制備1(a)中的5(E)-三烯起始物在苯中進行光異構(gòu)化，產(chǎn)生相應(yīng)的5(Z)-三烯。按制備1(a)中所述方法對此產(chǎn)品進行氫化，并按1(b)方法進行甲硅烷化和去乙?；?，得標(biāo)題化合物。光譜數(shù)據(jù)為UVλmax約243，251及261nm，ε分別約為35,000；40,000及27,000。
相應(yīng)于制備1和2產(chǎn)物的表化合物(例如20β-羥甲基)可以20表化合物20β-乙酰氧甲基-1α-羥基-3β-三異丙基甲硅烷氧基-9，10-斷孕甾-5(E)，7，10(19)-三烯〔式(V)-A＝(A-3)，R3＝β-CH3，R4＝(異丙基)3Si，R5＝H，L＝O.CO.CH3，Ya＝CH2〕作起始物，按相同的方法制得。它本身制得自20-醛的異構(gòu)化反應(yīng)(該醛得自維生素D2的二氧化硫加成物的臭氧化反應(yīng))，接著通過還原和20-表醛的1α-羥基化反應(yīng)。制備3a)20α-乙酰氧甲基-1α-羥基-3β-三異丙基甲硅烷氧基-10-螺旋環(huán)丙基-9，10-斷孕甾-5(E)，7-二烯〔式(V)-A＝(A-7)，R3＝α-CH3，R4＝(異丙基)3Si，R5＝H，L＝O.CO.CH3，Ya＝CH2〕攪拌回流下，使Zn/Cu混合物(1.08g)與二碘甲烷(0.9ml)的醚溶液(6ml)一起加熱40分鐘。加入20α-乙酰氧甲基-1α-羥基-3β-三異丙基甲硅烷氧基-9，10-斷孕甾-5(E)，7，10(19)-三烯〔式(V)-A＝(A-3)，R3＝α-CH3，R4＝(異丙基)3Si，R5＝H，L＝O.CO.CH3，Ya＝CH2-作為替代物，可采用相應(yīng)的1α-三甲基甲硅烷基醚〕(約500mg)的醚溶液(9ml)，混合物加熱回流攪拌，直至大部分起始物消失(TLC控制對于1α-三甲基甲硅烷基醚大約4小時，對于1α-羥基化合物時間再短一些)。反應(yīng)混合物過濾，蒸除溶劑，產(chǎn)品層析除去剩余的二碘甲烷，標(biāo)題化合物的光譜數(shù)據(jù)UVλmax約246，253及263nm，E分別約為29,000；36,000及25,000。
b)1α-3β-雙三異醛甲硅烷氧基-20α-羥甲基10-螺旋環(huán)丙基-9，10-斷孕甾-5(E)，7-二烯〔式(V)-A＝(A-7)，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，L＝OH，Ya＝CH2〕上述(a)中得到的二烯(約500mg)的CH2Cl2(2ml)溶液用氯代三異丙基硅烷(250mg)和咪唑(350mg)進行處理，混合物室溫攪拌過夜。處理后，粗品雙-甲硅烷基醚溶于THF(10ml)中，用氫化鋁鋰(100mg)處理，在室溫下攪拌1～2小時，待多余的氫化鋁鋰分解后(小心地加入飽和Na2SO4水溶液)，處理反應(yīng)混合物得標(biāo)題醇。制備41α，3β-雙-三異丙基甲硅烷基氧基-20α-羥甲基-10-螺旋環(huán)丙基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7-二烯〔式(V)-A＝(A-6)，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，L＝OH，Ya＝CH2〕以相應(yīng)的5(Z)-三烯作起始物(按制備2中5(E)-三烯的光異構(gòu)化方法制得)按照制備3(a)中的方法進行反應(yīng)，5(Z)-三烯的反應(yīng)比5(E)-三烯的反應(yīng)稍慢。經(jīng)制備3(b)所述的甲硅烷化和去乙?；脴?biāo)題化合物。UVλmax約246，253及263nm，ε分別約為29,000；36,000及25,000。制備51α，3β-雙-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-20β-羥甲基-19-去甲-9，10-斷孕甾-5(E)，7-二烯〔式(V)-A＝(A-8)，R3＝β-CH3，R4＝R5＝叔-丁基(甲基)2Si，L＝OH，Ya＝CH2〕將1α，3β-雙-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-20α-甲酰基-19-去甲-9，10-斷孕甾-5，7-二烯〔式(VIII)-A＝(A-8)，R1＝α-CH3，R4＝R5＝叔丁基(甲基)2Si，Yb＝價鍵〕(得自Tetrahedron Lett.(1992)，33P，2937，所述方法)(約1.5g)溶于苯(15ml)和甲醇(15ml中，0℃下用DBU(400μl)處理過夜使之異構(gòu)化。正(20α-甲?；?和表(20β-甲酰基)醛化合物的混合物可經(jīng)層析(硅膠柱，以15％苯/己烷作洗脫液)拆分，這一拆分步驟既可在醛(約1g)還原之前也可在還原之后進行(還原反應(yīng)如下進行于30ml苯溶液中，0℃下，通過滴加NaBH4(400mg)的乙醇(15ml)溶液，然后使混合物于0℃下再攪拌0.5小時)。處理后，通過層析拆分產(chǎn)品(硅膠柱，以苯或醚/己烷溶液作洗脫液)得標(biāo)題化合物。制備6a)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-23-去甲-9，10-斷膽汁5(E)，7，10，19-三烯酸，腈(20正及20表異構(gòu)體)〔式(II)-A＝(A-3)，R3＝α-及β-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Ya＝CH2〕將一個含有KCN(390mg)的1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷基氧基-20(α，β)-甲苯磺酰氧基甲基-9，10-斷孕甾-5(E)7，10(19)-三烯〔式(V)-A＝(A-3)，R3＝α，β-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，L＝O，甲苯磺酰基，Ya＝CH2〕(1g)的二甲亞砜(5ml)溶液于90℃下加熱2小時，產(chǎn)品用乙醚提取，洗滌，柱層析純化，得標(biāo)題腈(748mg)。UV(Et2O)λmax 267，λmin229nm；NMR(CCl4)δ5.36-6.13(ABq，6，7-H′S)，4.83(bs，19-H′S)，4.13-4.46(m，1.3-H′S)，0.53(S，18-H′S)。
b)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-23-去甲-9，10-斷膽汁-5(E)，7，10，19-三烯羧醛(20正及20表異構(gòu)體混合物)〔式(V)-A＝(A-3)，R3＝α及β-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，L＝CHO，Ya＝CH2〕將得自(a)中的腈(480mg)的己烷(3ml)溶液冷卻至-78℃，用二異丁基鋁氫化物(1.4ml 1M的庚烷溶液)進行處理?；旌衔镉?℃下攪拌1小時，用乙醚及飽和NH4Cl溶液處理，產(chǎn)品被提取λ醚層。粗品的光譜數(shù)據(jù)為UV(Et2O)γmax270，λmin 229nm，IR(CCl4)νmax1730cm-1； NMR(CCl4)δ10.6(bs，CHO)，5.53-6.23(ABq，6，7-H′s)，4.76(bs，19-H′s)，4.16-4.43(m，1，3-H′s)，0.56(s，18-H′s).c)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-(α，β)-(2-羥乙基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7，10，19-三烯〔式(V)-A＝(A-3)，R3＝α和β-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，L＝OH，Ya＝(CH2)2〕0℃下，用NaBH4(105mg)的乙醇(10ml)溶液對得自上述(b)中的醛(440mg)的苯(10ml)溶液進行處理，再于室溫下攪拌45分鐘。處理后，產(chǎn)品經(jīng)層析純化，得標(biāo)題化合物(380mg)。
UV(Et2O)λmax269，λmin228nm；IR(CCl4)νmax3500-3700cm-1；NMR(CCl4)δ5.53-6.3(ABq，6，7-H′s)，4.73(bs，19-H′s)，4.16-4.43(m，1，3-H′s)，0.56(s，18-H′s).
將1.2g異構(gòu)體混合物(C-20位上)小心地于硅膠上進行層析拆分(以30％苯/己烷洗脫)。20β-(表)異構(gòu)體(145mg)極性較小，首先被洗脫下來，然后是異構(gòu)體混合物，最后是20α(正)異構(gòu)體(360mg)。
d)1，3β-雙-三異丙基甲硅烷基氧基-20α-(2-溴乙基)-9，10-斷孕甾-5(E)，7，10，(19)-三烯〔式(V)-A＝(A-3)，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，L＝Br，Ya＝(CH2)2〕得自上述(c)中的正醇(200mg)于室溫下在含有對甲苯磺酰氯(110mg)和吡啶(243μl)的CH2Cl2(5ml)中攪拌2小時。加入NaH-CO3(20ml飽和溶液)，繼續(xù)攪拌2小時，處理混合物。將甲苯磺酰酯粗品溶于乙腈(6.6ml)和CH2Cl2(6.6ml)中(其中含有l(wèi)iBr(317mg)和1，8-雙-二甲基氨基萘(“質(zhì)子海綿”40mg)混合物在80℃下加熱回流30分鐘。冷卻，處理后得標(biāo)題溴化合物(261mg，層析純化)。
UV(Et2O)λmax267，λmin228nm； NMR(CCl4)δ5.43-6.16(ABq，6，7-H′s)，4.76(bs，19-H′s)，4.14-4.45(m，1，3-H′s)，3.16(m，CH2Br)，0.5(s，18-H′s).制備7a)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20α-溴甲基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7-二烯〔式(V)-A＝(A-5)，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(i-pr)3Si，L＝Br，Ya＝CH2〕按照制備6(d)所述方法，從制備1所得產(chǎn)物可獲得上述化合物。b)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20α-溴甲基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7-二烯〔式(V)-A＝(A-4)，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(i-pr)3Si，L＝Br，Ya＝CH2〕按照制備6(d)所述方法，從制備2所得產(chǎn)物可獲得上述化合物。c)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20α-溴甲基-10-螺旋環(huán)丙基-9，10-斷孕甾-5(E)，7-二烯〔式(V)-A＝(A-7)，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(i-pr)3Si，L＝Br，Ya＝CH2〕按照制備6(d)所述方法，從制備3所得產(chǎn)物可獲得上述化合物。d)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20α-溴甲基-10-螺旋環(huán)丙基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7-二烯〔式(V)-A＝(A-6)，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(i-pr)3Si，L＝Br，Ya＝CH2〕按照制備6(d)所述方法，從制備4所得產(chǎn)物可獲得上述化合物。e)1α，3β-雙-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-20β-溴甲基-19-去甲-9，10-斷孕甾-5(E)，7-二烯〔式(V)-A＝(A-8)，R3＝β-CH3，R4＝R5＝(i-pr)3Si，L＝Br，Ya＝CH2〕按照制備6(d)所述方法，從制備5所得產(chǎn)物可獲得上述化合物。制備8a).1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20α-溴乙基-9，10-斷孕甾-5(E)，7-二烯〔式(V)-A＝(A-5)，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(i-pr)3Si，L＝Br，Ya＝(CH2)2〕按照制備6(a)-(d)所述方法，從制備7(a)所得產(chǎn)物可獲得標(biāo)題化合物。b).1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20α-溴乙基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7-二烯〔式(V)-A＝(A-4)，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(i-pr)3Si，L＝Br，Ya＝(CH)2〕按照制備6(a)-(d)所述方法，從制備7(b)所得產(chǎn)物可獲得標(biāo)題化合物。c)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20α-溴乙基-10-螺旋環(huán)丙基-9，10-斷孕甾-5(E)，7-二烯〔式(V)-A＝(A-7)，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(i-pr)3Si，L＝Br，Ya＝(CH2)2〕按照制備6(a)-(d)所述方法，從制備7(c)所得產(chǎn)物可獲得標(biāo)題化合物。d)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20α-溴乙基-10-螺旋環(huán)丙基-9，10-斷孕甾-5(Z)，7-二烯〔式(V)-A＝(A-6)，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(i-pr)3Si，L＝Br，Ya＝(CH2)2〕按照制備6(a)-(d)所述方法，從制備7(d)所得產(chǎn)物可獲得標(biāo)題化合物。e)1α，3β-雙-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-20β-溴乙基-19-去甲-9，10-斷孕甾-5，7-二烯〔式(V)-A＝(A-8)，R3＝β-CH3，R4＝R5＝(i-pr)3Si，L＝Br，Ya＝(CH2)2〕按照制備6(a)-(d)所述方法，從制備7(e)所得產(chǎn)物可獲得標(biāo)題化合物。制備9a)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-24-氨甲?；?24-高-9，10-斷膽汁-5(E)，7，10，(19)，22(E)，24(E)-五烯〔式(X)酸的NH2酰胺-A＝(A-3)，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝CH＝CH-CH＝CH〕在氨氣下，使LiAlH4(10ml 1M的乙醚溶液)于室溫下攪拌30分鐘，生成的懸浮液用1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-24-乙氧羰基-24-高-9，10-斷膽汁-5(E)，7，10，(19)，22(E)，24(E)-五烯〔式(X)酸的乙酯-A＝(A-3)，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝CH＝CH-CH＝CH〕(250mg)的醚溶液(1ml)進行處理，混合物于室溫下攪拌10小時。反應(yīng)混合物冷卻至0℃，用乙醇水溶液(3ml，70％)進行處理(小心！)，乙醚稀釋，Na2SO4干燥，柱層析純化得標(biāo)題化合物(180mg)。
UV(Et2O)λmax260nm；IRνmax(CDCl3)3520-3000，1670，1630，1580cm-1； NMR(CDCl3)δ0.63(s，18-H′s)，3.8-4.7(m，1，3-H′s)，4.7-5.0(bs，19-H′s)，5.3-7.3(m，6，7，22，23，24，24a-H′s).b)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-24-氰基-24-高-9，10-斷膽汁-5(E)，7，10，(19)，22(E)，24(E)-五烯〔式(II)-A＝(A-3)，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝CH＝CH-CH＝CH〕將三氟乙酸酐(54μl)滴加到一個攪拌著的冰冷的得自上述(a)的酰胺的無水二噁烷(540μl)溶液(含150μl吡啶)中?；旌衔镉谑覝叵聰嚢?小時，乙醚稀釋，依次用水，HCl，飽和NaHCO3水溶液及鹽水洗滌，干燥，真空蒸除溶劑，層析分離產(chǎn)品，得標(biāo)題化合物(115mg) UV(Et2O)λmax260nm；IRνmax(CDCl4)2100，1630cm-1；NMR(CDCl3)δ0.56(s，18-H′s)′3.8-4.6(m，1，3-H′s)，4.6-5.0(bs，19-H′s)，5.3-7.3(m，6，7，22，23，24，24a-H′s).實例1a)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-9，10-斷膽汁-5(E)，7，10，(19)-三烯-24-羰腈〔式(II)-A＝(A-3)，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝(CH2)3〕對按實列2(c)(WO93/09093)中所述方法制備的相應(yīng)的24-醇(480mg)就地進行甲苯磺?；?，生成1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-24-甲苯磺酰氧基-9，10-斷膽汁-5(E)，7，10，(19)-三烯，將此產(chǎn)品的二甲亞砜(2.5ml)溶液(含KCN 220mg)于90℃下加熱50分鐘，冷卻，用乙酸乙酯提取，所得產(chǎn)品用柱層析純化得標(biāo)題化合物(320mg)。
UV(Et2O)λmax267，λmin236nm；NMR(CCl4)δ5.53-6.3(ABq，6，7-H′s)，4.8(s，19-H′s)，0.50(s，18-H′s).b)25-氨基-1α，3β-三異丙基甲硅烷氧基-9，10-斷膽甾-5(E)，7，10，(19)三烯〔式(I)-A＝(A-3)，R＝H，R1.＝R2＝CH3，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝(CH2)3〕0℃下，將THF(2ml)加到氯化鈰(639mg)中。生成的溶液于室溫下攪拌15分鐘，冷卻至-70℃，用甲基鋰(1.85ml 1.6M的THF溶液)處理，在約-70℃下攪拌。于-70℃下將得自上述(a)中的腈化物(320mg)的THF(2.5ml)溶液加入剛生成的烷基鈰試劑中，混合物于-70℃下攪拌1小時，慢慢升溫至室溫，再冷卻至-70℃，用濃NH3水(2ml)終止反應(yīng)，經(jīng)硅藻土過濾，用THF和乙醚洗滌，產(chǎn)品從混合的有機相中分離出來，層析(氧化鋁)純化，得標(biāo)題化合物(235mg)，UV(Et2O)λmax268，λmin228nm； NMR(CDCl3)δ5.58-6.3(ABq，6，7-H′s)，4.83(s，19-H′s)，0.53(s，18-H′s).c)25-氨基-1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10，(19)-三烯〔式(I)-A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝(CH2)3〕得自上述(b)的5(E)化合物(188mg)的苯溶液(25ml)(含有吩嗪98mg)經(jīng)光照50分鐘。產(chǎn)品經(jīng)處理，用TLC純化，得標(biāo)題化合物(140mg)。UV(Et2O)λmax260，λmin222nm；NMR(CDCl3)δ5.66-6.2(ABq，6，7-H′s)，4.7-5.03(d，19-H′ s)，0.50(s，18-H′s).d)25-氨基-1α，3β-雙-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10，(19)-三烯〔式(I)-A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3，R3＝α-CH3，R4＝R5＝H，Y＝(CH2)3〕得自上述(c)中的雙甲硅烷基醚(60mg)的THF(0.556μl)溶液經(jīng)四丁基銨氟化物(1M THF溶液0.556μl)處理3小時進行去甲硅烷化。產(chǎn)品用氯仿提取，然后用水洗滌兩次，干燥，真空蒸發(fā)。所得產(chǎn)品用兩次連續(xù)的TLC進行純化，得標(biāo)題化合物(10.6mg)。
UV(EtOH)λmax264，λmin228nm；NMR(CDCl3)δ5.66-6.23(ABq，6，7-H′s)，4.8-5.13(d，19-H′s)，1.1-1.2(d，26，27-H′s)，0.50(s，18-H′s)；IR(CDCl3)νmax3600-3350cm-1(OH，NH).實例2a)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-22，23-雙去甲-9，10-斷膽汁-5(E)，7，10(19)-三烯-24-羰腈，20R和20S的混合物〔式(II)-A＝(A-3)，R3＝α-和β-CH3(～1∶1)，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝CH2〕1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20(α，β)-甲苯磺酰氧甲基-9，10-斷孕甾-5(E)，7，10(19)-三烯〔式(V)-A＝(A-3)，R3＝α-和β-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Ya＝CH2，L＝甲苯磺酰氧基〕(1g)的二甲亞砜(5ml)溶液(含390mg KCN)于90℃下加熱2小時。產(chǎn)品用乙醚提取，洗滌，柱層析純化得標(biāo)題化合物(748mg)。
UV(Et2O)λmax267，λmin229nm；NMR(CCl4)δ5.36-6.13(ABq，6，7-H′s)，4.83(bs，19-H′s)，4.13-4.46(m，1，3-H′s)，0.53(s，18-H′s).b)25-氨基-1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-23，24-雙去甲-9，10-斷膽甾-5(E)，7，10(19)-三烯，20R及20S異構(gòu)體混合物〔式(I)-A＝(A-3)，R＝H，R1＝R2＝CH3，R3＝α-和β-CH3(～1∶1)，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝CH2〕將氯化鈰(3價)(492mg，2mM)的THF(2.5ml)溶液于室溫下攪拌1小時，冷卻至-78℃，用甲基鋰(2mM己烷溶液)處理，-78℃下攪拌30分鐘。加入得自(a)中產(chǎn)品(262mg)的THF溶液(1.5ml)，反應(yīng)混合物于-78℃下攪拌1.5小時，2小時內(nèi)升溫至室溫，再次冷卻至-78℃，按實例1(b)中所述方法處理，得標(biāo)題化合物(170mg)。
UV(Et2O)λmax269nm； NMR(CDCl3)δ5.53-6.33(ABq，6，7-H′s)，4.76(s，19-H′s)，0.53(s，18-H′s).c)25-氨基-1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-23，24-雙去甲-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯，20R和20S異構(gòu)體的混合物〔式(I)-A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3，R3＝α-和β-CH3(～1∶1)，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝CH2〕含有吩嗪(80mg)的上述(b)中所得產(chǎn)品(170mg)的苯溶液(20ml)進行光異構(gòu)化，如實例1(c)中所述進行處理，得標(biāo)題化合物(90mg)。
-UV(Et2O)λmax262nm；NMR(CDCl3)δ5.63-6.06(ABq，6，7-H′s)，4.9-5.2(each s，19-H′s)，1.4(s，gem CH3′s)，0.50(s，18-H′s).d)25-氨基-1α，3β-二羥基-23，24-雙去甲-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10，(19)-三烯，20R和20S異構(gòu)體的混合物〔式(1)-A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3，R3＝α-及β-CH3(～1∶1)，R4＝R5＝H，Y＝CH2〕使得自上述(c)中產(chǎn)品(90mg)的THF(0.5ml)溶液與四丁基銨氟化物(0.38ml 1M THF溶液)一起攪拌過夜。TLC檢測顯示仍有未反應(yīng)的起始物質(zhì)，進一步用四丁基銨氟化物(0.65ml)進行反應(yīng)，攪拌3小時。處理混合物，用氧化鋁柱進行層析分離純化(兩次)，得標(biāo)題化合物。 UV(EtOH)λmax263nm；IR(CDCl3)νmax3600-3340cm-1(OH，NH)；NMR(CDCl3)δ5.56-6.23(ABq，6，7-H′s)，4.9-5.23(each s，19-H′s)，1.03，1.23，1.36(m，21-CH3，gem CH3′s)，0.56(s，18-H′s).
實例3a)25-乙酰氨基-1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-9.10-斷膽甾-5(Z)，7.10(19)-三烯〔式(I)-A＝(A-2)，R＝CH3CO，R1＝R2＝CH3，R3＝α-CH3，R4＝R4＝(異丙基)3Si，Y＝(CH2)3〕用乙酸酐(290μl)和吡啶(290μl)對得自實例1(c)產(chǎn)品(60mg)的CH2Cl2(1ml)溶液進行處理，生成的混合物于室瘟下攪拌3.5小時，然后用NaHCO3水溶液處理。2小時后，處理混合物，產(chǎn)品經(jīng)TLC分離得標(biāo)題化合物(42mg)。
UV(Et2O)λmax261，λmin225nm；IR(CCl4)3420，3300(NH)，1670(C＝0)cm-1；NMR(CCl4)δ5.96-6.1(ABq，6，7-H′s)，4.76，5.06(each s，19-H′s)，1.76(s，COCH3)，1.23(s，gem CH3′s)，0.58(s，18-H′s).b)25-乙酰氨基-1α，3β-二羥基-9.10-斷膽甾-5(Z)，7.10(19)-三烯〔式(I)-A＝(A-2)，R＝CH3CO，R1＝R2＝CH3，R3＝α-CH3，R4＝R5＝H，Y＝(CH2)3〕得自上述(a)中雙甲硅烷基醚(42mg)的THF(0.37ml)溶液用四丁基銨氟化物進處理(0.36ml 1M THF溶液)，生成的混合物于室溫攪拌2小時，進一步用四丁基銨氟化物溶液(0.1ml)進行處理，攪拌3小時，處理。TLC分離產(chǎn)品得標(biāo)題化合物(20.2mg)UV(EtOH)λmax263，λmin225nm；IR(CDCl3)3420，3600(NH，OH)，1660(C＝0)cm-1；NMR(CDCl3)δ5.7-6.3(ABq，6，7-H′s)，4.8，5.06(each s，19-H′s)，1.83(s，COCH3)，1.23(s，gemCH3′s)，0.83，0.9(d，21-H′s)，0.58(s，18-H′s).實例4a)1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-表-9.10-斷膽汁-5(E)，7.10(19)-三烯-24-羰睛〔式(II)-A＝(A-3)，R3＝β-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝(CH2)3〕-78℃下，將乙睛(0.32ml)的THF(2ml)溶液滴加到1.6M丁基鋰(3.75ml)的己烷和THF(4ml)溶液中，于-78℃下保持50分鐘后，移出除了0.38mMole部分之外的溶液(假設(shè)總量為6mMoles)，剩余的溶液用1α，3β-雙三異丙基甲硅烷氧基-20β-溴乙基-9，10-斷孕甾-5(E)，7.10(19)-三乙烯〔式(V)-A＝(A-3)，R3＝β-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，L＝Br Y＝(CH2)2〕(100mg)的THF(2.05ml)進行處理。-78℃下保持1.5小時后(TLC檢測無起始物存在)，反應(yīng)混合物用NH4Cl水溶液處理，用乙醚提取產(chǎn)品。粗品與得自第二次反應(yīng)所得的相似物質(zhì)(用172mg溴化物同上進行反應(yīng))合并，層析純化產(chǎn)品，得標(biāo)題化合物(193mg)。
-(UV(Et2O)λmax269，λmin228nm；NMR(CCl4)δ0.53(s，18-H′s)，4.8(s，19-H′s)，5.56-6.3(ABq，6，7-H′s).b)25-氨基-1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-表-9，10-斷膽甾-5(E)，7，10(19)-三烯〔式(I)-A＝(A-3)，R＝H，R1＝R2＝CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝(CH2)3〕
0℃下，用足量的甲基鋰(1.8ml〔？M〕己烷溶液對氯化鈰(3價)的THF溶液進行處理，產(chǎn)生了一種帶有持久黃色的溶液。溶液冷卻至-78℃，再加入甲基鋰(1.35ml)，混合物于-78℃下保持40分鐘，以使有機鈰試劑的形成反應(yīng)完成。于-78℃下加入得自上述(a)中的睛(196mg，溶于3ml THF中)，反應(yīng)混合物在該溫度下再攪拌60分鐘，升溫至-40℃，再冷卻至-78℃，用NH4OH處理。粗品經(jīng)硅藻土過濾(CH2Cl2/乙醚洗脫)，層析純化得標(biāo)題化合物(120mg)。
- UV(Et2O)λmax269，λmin228nm；NMR(CCl4)δ0.53(s，18-H′s)，4.13-4.66(bm，1，3-H′s)，4.9(s，19-H′s)，5.66-6.46(ABq，6，7-H′s)，6.46(bs，NH′s，exchanges with D2O).c)25-氨基-1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20-表-9-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯〔式(I)-A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3，R3＝β-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝(CH2)3〕在含有吩嗪(42mg)的苯溶液(10.6ml)中，通過照射40分鐘對得自上述(b)中的胺(80mg)進行光異構(gòu)化反應(yīng)。層析得標(biāo)題化合物(50mg)。
UV(Et2O)λmax263，λmin226nm；NMR(CDCl3)δ0.50(s，18-H′s)，4.06-4.6(bm，1，3-H′s)，4.6.4.76(ea.s，19-H′s)，5.53-6.2(ABq，6，7-H′s)，6.2(bs，NH′s，exchanges with D2O).d)25-氨基-1α，3β-二羥基-20-表-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯〔式(I)-A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3，R3＝β-CH3，R4＝R5＝H，Y＝(CH2)3〕用四丁基銨氟化物(350μl)的THF(350μl)溶液在室溫下對得自上述(c)中的甲硅烷醚(52mg)進行去甲硅烷基化反應(yīng)，過夜。層析得標(biāo)題化合物(8.7mg)。UV(EtOH)λmax263-4，λmin225-6nm；IR(CHCl3)3400，3600cm-1(OH，NH)；NMR(CDCl3)δ0.53(s，18-H′s)，0.86，0.76(d21-H′s)，2.03(bs，NH′s，exchanges with D2O)，4.06-4.46(bm，1，3-H′s)，4.9，5.23(ea.s，19-H′s)，5.76-6.4(ABq，6，7-H′s).
根據(jù)制備6(d)中步驟(a)-(d)所述反應(yīng)，可相似地獲得25-氨基-1α，3β-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯〔式(I)-A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3，R3＝α-CH3，R4＝R5＝H，Y＝(CH2)3〕根據(jù)制備8(a)中步驟(a)-(b)所述反應(yīng)，可相似地獲得25-氨基-1α，3β-二羥基-9，10-斷膽甾-5(E)，7-二烯〔式(I)-A＝(A-5)，R＝H，R1＝R2＝CH3，R3＝α-CH3，R4＝R5＝H，Y＝(CH2)3〕根據(jù)制備8(b)中步驟(a)-(d)所述反應(yīng)，可相似地獲得25-氨基-1α，3β-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7-二烯〔式(I)-A＝(A-4)，R＝H，R1＝R2＝CH3，R3＝α-CH3，R4＝R5＝H，Y＝(CH2)3〕根據(jù)制備8(c)中步驟(a)-(d)所述反應(yīng)，可相似地獲得25-氨基-1α，3β-二羥基-10-螺旋環(huán)丙基-9，10-斷膽甾-5(E)，7-二烯〔式(I)-A＝(A-7)，R＝H，R1＝R2＝CH3，R3＝α-CH3，R4＝R5＝H，Y＝(CH2)3〕根據(jù)制備8(d)中步驟(a)-(d)所述反應(yīng)，可相似地獲得25-氨基-1α，3β-二羥基-10-螺旋環(huán)丙基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7-二烯〔式(I)-A＝(A-6)，R＝H，R1＝R2＝CH3，R3＝α-CH3，R4＝R5＝H，Y＝(CH2)3〕根據(jù)制備8(e)中步驟(a)-(d)所述反應(yīng)，可相似地獲得25-氨基-1α，3β-二羥基-20-表19去甲-9，10-斷膽甾-5，7-二烯〔式(I)-A＝(A-8)，R＝H，R1＝R2＝CH3，R3＝β-CH3，R4＝R5＝H，Y＝(CH2)3〕實例5a)1α，3β-雙三異丙基甲硅烷氧基-24-高-9，10-斷膽汁-5(E)，7，10(19)-三烯-24-羰睛〔式(II)-A＝(A-3)，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝(CH2)4〕-78℃下，將乙睛(0.32ml)的THF(2ml)溶液滴加到正丁基鋰(3.75ml 1.6M的己烷溶液)和THF(4ml)溶液中。-78℃下保持50分鐘，移出除了0.7mMole部分之外的溶液(假設(shè)全部量為6mMoles)，剩余部分用1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-24-溴-9，10-斷膽汁-5(E)，7，10(19)-三烯〔式(V)-A＝(A-3)，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，L＝Br，Y＝(CH2)3〕(190mg)的THF(3.05ml)溶液進行處理。-78℃下保持40分鐘后，混合物升溫至-30℃，于該溫度下保持60分鐘(TLC檢測顯示沒有起始物存在)，然后再冷卻至-78℃。反應(yīng)混合物用NH4Cl水溶液處理，產(chǎn)品用乙醚提取。粗品經(jīng)層析純化，得標(biāo)題化合物(156mg)。
UV(EtOH)λmax267-8，λmin228nm；NMR(CCl4)δ0.53(s，18-H′s)，4.96，(s，19-H′s)，5.53-6.26(ABq，6，7-H′s).b)25-氨基-1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷基氧基-24-高-9，10-斷膽甾-5(E)，7，10(19)-三烯〔式(I)-A＝(A-3)，R＝H，R1＝R2＝CH3，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝(CH2)4〕0℃下，用足量的甲基鋰(1.2ml〔？〕摩爾的己烷溶液)對氯化鈰(381mg)和THF溶液(3ml)進行處理，得到一持續(xù)黃色的溶液，冷卻至-78℃，再加入甲基鋰(1.4ml)，混合物于-78℃下保持30分鐘以使有機鈰試劑的形成完成。-78℃下向其中加入得自上述(a)中的腈(180mg)的THF溶液(2.05ml)，混合物于該溫度下再攪拌60分鐘，升溫至-30℃，再冷卻至-78℃，用NH4OH水溶液處理，粗品經(jīng)硅藻土過濾(CH2Cl2/乙醚)，層析純化，得標(biāo)題化合物(125mg)。
UV(Et2O)λmax267-8，λmin227-8nm；NMR(CCl4)δ0.53(s，18-H′s)，4.8，(s，19-H′s)，5.53-6.26(ABq，6，7-H′s).c)25-氨基-1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-24-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯〔式(I)-A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝(CH2)4〕
在有吩嗪(61mg)存在的苯溶液(18ml)中，通過光照射40分鐘使得自上述(b)中的胺(125mg)進行光異構(gòu)化。層析得標(biāo)題化合物(88mg)。
UV(Et2O)λmax263，λmin226-7nm；NMR(CDCl3)δ0.53(s，18-H′s)，4.73，5.0(ea.s，19-H′s)，5.6-6.1(ABq，6，7-H′s).d)25-氨基-1α，3β-二羥-24-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯〔式(I)-A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3，R3＝α-CH3，R4＝R5＝H，Y＝(CH2)4〕在室溫THF(320μl)中，用四丁基銨氟化物(320μl)對得自上述(c)的甲硅烷醚(40mg)進行去甲硅烷化反應(yīng)3小時。層析得標(biāo)題化合物(8.7mg)。
UV(EtOH)λmax263，λmin226-7nm； IR(CHCl3)νmax3200-3300，3600cm-1(OH，NH)；NMR(CDCl3)δ0.53(s，18-H′s)，4.9，5.2(ea.s，19-H′s)，5.8-6.33(ABq，6，7-H′s).e)25-氨基-1α，3β-二羥-24，26，27-三-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7.10(19)-三烯〔式(I)-A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3CH2，R3＝α-CH3，R4＝R5＝H，Y＝(CH2)4〕用乙基鋰代替上述(b)中的甲基鋰并繼續(xù)其余步驟可制備標(biāo)題化合物。f)25-氨基-1α，3β-二羥-24，26，26，26，27，27，27，-七個-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯〔式(I)-A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3(CH2)3，R3＝α-CH3，R4＝R5＝H，Y＝(CH2)4〕用丁基鋰代替上述(b)中的甲基鋰，繼續(xù)其余步驟可得標(biāo)題化合物。g)25-氨基-1α，3β，23-三羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯〔式(I)-A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3，R3＝α-CH3，R4＝R5＝H，Y＝CH2CHOHCH2〕用1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-23-去甲-9，10-斷孕甾-5(E)，7，10(19)-三烯-24-羧醛〔式(VII)-A＝(A-3)，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Yb＝CH2〕代替上述(a)中的溴乙基化合物并繼續(xù)其余步驟，可得上述標(biāo)題化合物。
用乙基鋰代替甲基鋰，用1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-24-氰基-24-高-9，10-斷膽汁-5(E)，7，10(19)，22(E)，24(E)-戊烯〔式(II)-A＝(A-3)，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝CH＝CH-CH＝CH〕(制備9(b))代替上述(b)中的腈可制得25-氨基-1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-24，26，27-三-高-9，10-斷膽甾-5(E)，7，10(19)22，24，(24a)-戊烯〔式(I)-A＝(A-3)，R＝H，R1＝R2＝CH3CH2，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝CH＝CH-CH＝CH〕。異構(gòu)化及去甲硅烷化得25-氨基-1α，3β-二羥基-24，26，27-三-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)，22，24(24a)-戊烯〔式(I)-A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3CH2，R3＝α-CH3，R4＝R5＝CH，Y＝CH＝CH-CH＝CH〕。實例625-乙酰氨基-1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-24-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯〔式(I)-A＝(A-2)，R＝CH3CO，R1＝R2＝CH3，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝(CH2)4〕。
用乙酸酐(0.026ml)于吡啶(0.26ml)和CH2Cl2(0.8ml)中對得自上述實例5(c)中的25-氨基化合物(48mg)進行處理。室溫保持2小時后，冷卻混合物，用NaHCO3水溶液處理，攪拌2小時，然后用乙酸乙酯提取，層析得標(biāo)題化合物(24mg)。
UV(Et2O)λmax262-3，λmin225nm；IRνmax(CCl4)3350，3220(NH)，1680cm-1(CONH)；NMR(CCl4)δ0.53(s，18-H′s)，1.8(s，OCCH3)，4.1-4.46(bm，1，3-H′s)，4.73，5.06，5.23(each s，19-H′s，N-H)，5.66-6.36(ABq，6，7-H′s).b)25-乙酰氨基-1α，3β-二羥基-24-高-9，10-斷膽甾-5(Z)7，10(19)-三烯〔式(I)-A＝(A-2)，R＝CH3CO，R1＝R2＝CH3，R3＝α-CH3，R4＝R5＝H，Y＝(CH2)4〕。
室溫下于THF(0.30ml)中，用四丁基銨氟化物(0.030ml)對得自上述(a)中的甲硅烷醚(25mg)進行去甲硅烷化反應(yīng)4.5小時。層析得標(biāo)題化合物(22mg)。UV(EtOH)λmax263，λmin225-6nm；IRνmax(CHCl3)3420，3600(NH，OH)，1670cm-1(CONH)； NMR(CDCl3)δ0.56(s，18-H′s)，0.86，0.93(d，21-H′s)，1.3(d，CH3，)，1.8(s，OCCH3)，4.03-4.4(bm，1，3-H′s)，4.9，5.1，5.23(each s，19-H′s，N-H)，5.8-6.36(ABq，6，7-H′s).
通過使用苯甲酰氯以及對上述步驟(a)作最少的修飾(Schotten-Baumann)可以制備25-苯甲酰氨基-1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-24-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯〔式(I)-A＝(A-2)，R＝C6H5CO，R1＝R2＝CH3，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝(CH2)4〕。該產(chǎn)品亦可以通過去甲硅烷化轉(zhuǎn)化成25-苯甲酰氨基-1α，3β-二羥基-24-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯〔式(I)-A＝(A-2)，R＝C6H5CO，R1＝R2＝CH3，R3＝α-CH3，R4＝R5＝H，Y＝(CH2)4〕。實例7a)25-氨基-1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-26，27-雙-高-9，10-斷膽甾-5(E)，7，10(19)-三烯-23-炔〔式(I)-A＝(A-3)，R＝H，R1＝R2＝CH3CH2，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝CH2-C≡C〕0℃下，用丁基鋰(4.5ml 1.4M的己烷溶液)對3-氨基-3-乙基-1-戊炔〔式(VI)-R＝H，R1＝R2＝CH3CH2，n＝0〕(1.05ml)的己烷溶液(10.5ml)(含有六甲基磷酰胺0.9ml)進行處理，5℃下攪拌30分鐘，然后于室溫下攪拌1.25小時。移去除了2.5mMole部分之外的溶液(假設(shè)含有6mMole乙炔化物陰離子)，剩余的2.5mMole陰離子用1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20α-溴甲基-9，10-斷孕甾-5(E)，7.10(19)-三烯〔式(V)-A＝(A-3)，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，L＝Br，Ya＝CH2〕(200mg)進行處理，生成的混合物于35℃下攪拌21小時。冷卻，用NH4Cl水溶液進行處理，產(chǎn)品用乙醚提取。層析得標(biāo)題化合物(68mg)UV(Et2O)λmax267，λmin226nm；NMR(CDCl4)δ0.5(s，18-H′s)，4.83(s，19-H′s)，5.6-6.36(ABq，6，7-H′s).b)25-氨基-1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-26，27-雙-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯-23-炔〔式(I)-A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3CH2，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝CH2-C≡C〕在含有吩嗪(50mg)的苯溶液(14ml)中，對得自上述(a)中的產(chǎn)品(95mg)照射30分鐘進行光異構(gòu)化。層析得標(biāo)題化合物(66.5mg)。
UV (Et2O)λmax260-1，λmin226nm；NMR(CCl4)δ0.5(s，18-H′s)，4.1-4.43(bm，1，3-H′s)，4.73，5.03(each s，19-H′s)，5.9-6.23(ABq，6，7-H′s).c)25-氨基-1α，3β-二羥-26，27-雙-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯-23-炔〔式(I)-A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3CH2，R3＝α-CH3，R4＝R5＝H，Y＝CH2-C≡C〕用四丁基銨氟化物(0.5ml 1MTHF溶液)在室溫下，于THF(0.5ml)中對得自上述(b)中的甲硅烷醚(67mg)進行去甲硅烷化過夜。產(chǎn)品用氯仿提取，水洗，層析分高，得標(biāo)題化合物(29mg)。
UV(EtOH)λmax262-3，λmin225 nm；IR(CHCl3)νmax3200-3500，3600cm-1(OH，NH)；NMR(CDCl3)δ0.53(s，18-H′s)，0.86-1.23(m，21-H′s and Me-H′s of Et′s)，1.9(m，N-H′s，exchanges with D2O)，1.36-1.56(m，Et-H′s)，4.03-4.4(bm，1，3-Hs)，4.86，5.2(ea.s，19-H′s)，5.76-(ABq，6，7 -H′s)-用1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-20β-溴乙基-9，10-斷孕甾-5(E)，7，10(19)-三烯〔式(V)-A＝(A-3)，R3＝β-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，L＝Br，Y＝(CH2)2〕代替上述(a)中的甾類起始物，并繼續(xù)其余的步驟，可以制得25-氨基-1α，3β-二羥基-20-表-24，26，27-三-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯-24(24a)-炔〔式(I)-A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3CH2，R3＝β-CH3，R4＝R5＝H，Y(CH2)2-C≡C-〕。
用2-氨基-2-甲基-4-戊炔〔式(VI)-R＝H，R1＝R2＝CH3，n＝1〕代替上述(a)中的炔，并重復(fù)其余步驟，可以獲得25-氨基-1α，3β-二羥基-24-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯-24(24a)-炔〔式(I)A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3，R3＝α-CH3，R4＝R5＝H，Y＝CH2-C≡C-CH2〕實例8炔烯基側(cè)鏈轉(zhuǎn)化到烷烯基按實例7制備的任何一個甾類炔化合物的三烯系統(tǒng)，特別是5(E)構(gòu)型的通過與重氮親二烯體(較好的是2，3二氮雜萘二酮反應(yīng)進行氫化保護，形成Diels Alder加成物(在6-和19-位之間)。(GB-A-2114570)。將生成的加成物(約100mg)溶于乙醇(5ml)和含有新鮮Pd/C(5％，100mg)以及NaHCO3(50mg)的苯(5ml)的混合液中，混合物在氫氣氛下保持反應(yīng)，直至2摩爾當(dāng)量的氫氣被消耗(約20小時)為止。硅藻土過濾，去除溶液，得純產(chǎn)品。2，3-二氮雜萘基團可以通過后述的英國專利所述方法除去，生成的5(E)維生素可以按實例7所述方法進行光異構(gòu)化及去除甲硅烷基團。按此操作從實例7(a)產(chǎn)品可以得到25-氨基-1α，3β-二羥-20-表-24，26，27-三-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯〔式(I)A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3CH2，R3＝β-CH3，R4＝R5＝H，Y＝(CH2)4〕。實例9a)25-氨基-1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-22-羥基-26，27-雙-高-9，10-斷膽甾-5(E)，7，10(19)-三烯-23-炔〔式(I)-A＝(A-3)，R＝H，R1＝R2＝CH3CH2，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝CHOH-C≡C〕。
5℃下，用丁基鋰(3ml 1.4M己烷溶液)對含有六甲基磷酰胺(0.6ml)的3-氨基-3-乙基-1-戊炔〔式(VI)-R＝H，R1＝R2＝CH3CH2，n＝0〕(0.78ml)的己烷溶液(6.5ml)進行處理，溶液于5℃下攪拌30分鐘，再于室溫下攪拌1.25小時。-78℃下，向-1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷基氧基-20α-甲?；?9，10-斷孕(甾)-5(E)，7，10(19)-三烯〔式(VII)-A＝(A-3)，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Yb＝價鍵〕(100mg)溶液中加入1份溶液(1/5，假設(shè)約含有0.75mM)的乙炔化物陰離子)，生成的混合物在該溫度下攪拌，慢慢使之升溫至20°(此時醛已消耗完畢)。反應(yīng)混合物再冷卻至-78℃，用NH4Cl水溶液處理，產(chǎn)品用乙醚提取，層析得標(biāo)題化合物(94mg)。UV(Et2O)λmax268-9，λmin227nm；NMR(CCl4)δ0.55(s，18-H′s)，4.23-4.56(bm，1，3-H′s)，4.83(s，19-H′s)，5.6-6.33(ABq，6，7-H′s).b)25-氨基-1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-22-羥基-26，27-雙-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯-23-炔〔式(I)-A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3CH2，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝CHOH-C≡C〕。
在含有吩嗪(40mg)的苯溶液(11ml)中，對得自上述(a)的產(chǎn)品(94mg)照射40分鐘進行光異構(gòu)化，層析得標(biāo)題化合物(68mg)。UV(Et2O)λmax261-2，λmin225nm； NMR(CCl4)δ0.53(s，18-H′s)，4.16-4.5(bm，1，3-H′s)，4.73，5.1(each s，19-H′s)，5.73-6.06(ABq，6，7-H′s).c)25-氨基-1α，3β，22-三羥基-26，27-高9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯-23-炔〔式(I)-A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3CH2，R3＝α-CH3，R4＝R5＝H，Y＝CHOH-C≡C〕。
室溫下，用四丁基銨氟化物(0.5ml，1M THF溶液)在THF中對得自上述(b)中的甲硅烷醚(68mg)進行去甲硅烷基化16小時。TLC顯示起始物仍有存在，故再加入部分四丁基銨氟化物(0.4ml)，繼續(xù)反應(yīng)2小時。產(chǎn)品用氯仿提取，水洗，層析分離(2次)，再于CH2Cl2和水中分配，得標(biāo)題化合物(18mg)。
UV(EtOH)λmax263-4，λmin225-6nm；IR(CDCl3)νmax3250-3450，3600cm-1(OH，NH)；NMR(CDCl3)δ0.53(s，18-H′s)，0.83-1.23(m，21-H′s andMe-H′s of Et′s)，1.83(m，N-H′s？)，1.36-1.56(m，Et-H′s)，4.1-4.5(bm，1，3-H′s)，4.9，5.23(ea.s，19-H′s)，5.83-6.36(ABq，6，7-H′s).
在上述(a)中用1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-23-去甲-9，10-斷孕甾-5(E)，7，10(19)-三烯-24羧醛〔式(VII)-A＝(A-3)，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Yb＝CH2〕代替并繼續(xù)其余的步驟，可得25-氨基-1α，3β，23-三羥基-24，26，27-三-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯-24(24a)-炔〔式(I)-A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3CH2，R3＝α-CH3，R4＝R5＝H，Y＝CH2CHOH-C≡C〕。
用1，1-二甲基炔丙胺〔式(VI)-R＝H，R1＝R2＝CH3，n＝0〕代替上述(a)中的氨基炔并繼續(xù)其余步驟可以制得25-氨基-1α，3β-22-三羥-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯-23炔〔式(I)-A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3，R3＝α-CH3，R4＝R5＝H，Y＝CHOH-C≡C〕。d)25-氨基-1α，3β-二羥22-甲氧基-26，27-雙-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯-23炔〔式(I)-A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3CH2，R3＝α-CH3，R4＝R5＝H，Y＝CH(OCH3)-C≡C〕。
用過量的叔丁醇鉀，在含有18-冠-6的苯中對得自上述(b)的25-氨基-1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-22-羥基-26，27-雙-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯-23-炔〔式(I)-A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3CH2，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝CHOH-C≡C〕進行甲基化，然后再小心地加入碘甲烷(TLC控制)，并按上述(c)所述除去甲硅烷基團，可制得標(biāo)題化合物。
用碘乙烷或碘丙烷代替碘甲烷，可以分別制得25-氨基-1α，3β-二羥基-22-乙氧基-26，27-雙-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯-23-炔〔式(I)-A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3CH2，R3＝α-CH3，R4＝R5＝H，Y＝CH(OCH2CH3)-C≡C〕及25-氨基-1α，3β-二羥-22-丙氧基-26，27-雙-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯-23-炔〔式(I)-A＝(A-2)，R＝H，R1＝R2＝CH3CH2，R3＝α-CH3，R4＝R5＝H，Y＝CH(OCH2CH2CH3)-C≡C〕。實例10a)N-乙基-25-氨基-1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-24-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯〔式(I)-A＝(A-2)，R＝CH3CH2，R1＝R2＝CH3，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，L＝Br，Y＝(CH2)4〕。
將實例6(a)中所得的25-乙酰氨基-1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷基氧基-24-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯〔式(I)-A＝(A-2)，R＝CH3CO，R1＝R2＝CH3，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝(CH2)4〕(44mg)的THF(1.5ml)溶液(含有氫化鋁鋰35mg)攪拌回流加熱，直至起始物消失(約2.5小時，TLC檢測)，冷卻，用幾滴水處理。反應(yīng)混合物用Na2SO4處理，乙醚稀釋，傾析出醚層，蒸除溶劑得標(biāo)題化合物。b)N-乙基-25-氨基-1α，3β-二羥基-24-高-9.10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯〔式(I)-A＝(A-2)，R＝CH3CH2，R1＝R2＝CH3，R3＝α-CH3，R4＝R5＝H，Y＝(CH2)4〕用與實例1(d)相似的方法對上述(a)中產(chǎn)品進行去甲硅烷化，可得標(biāo)題化合物。
在上述(a)中采用相似的方法，用25-丙酰氨基-1α，3β-雙-三異丙基甲硅烷氧基-24-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯〔式(I)-A＝(A-2)，R＝CH3CH2CO，R1＝R2＝CH3CH2，R3＝α-CH3，R4＝R5＝(異丙基)3Si，Y＝(CH2)4〕(在實例6中，通過取代丙酰氯而制得，并將反應(yīng)時間增加至4小時)取代，并繼續(xù)其余的步驟，可得N-丙基-25-氨基-1α，3β-二羥-24-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯〔式(I)-A＝(A-2)，R＝CH3CH2CH2，R1＝R2＝CH3，R3＝α-CH3，R4＝R5＝H，Y＝(CH2)4〕
權(quán)利要求
1.式(I)化合物 其中R代表氫，脂肪，環(huán)脂，芳脂或芳基有機基團，或包括通過羰基基團與氮原子相連的?；?；R1和R2分別選自低級烷基和環(huán)烷基基團，或與它們相連的碳原子一起形成低級環(huán)烷基基團；R3代表具α-或β-構(gòu)型的甲基；Y代表低級亞烷基，亞烯基，亞炔基，它們可任意地被羥基，醚化羥基或酯化基基團取代；且A＝代表亞環(huán)己基基團，其為具有1α-羥基化的維生素D或其類似物的A環(huán)的特征。
2.權(quán)利要求1中的化合物，其中R代表氫，低級烷基或低級烷?；?br> 3.權(quán)利要求1和2中的化合物，其中R1和R2分別選自甲基，乙基，丙基和丁基。
4.前述權(quán)利要求中所述的化合物，其中Y為含有3～6碳的直鏈基團。
5.權(quán)利要求4中所述的化合物，其中Y選自1，3-亞丙基，1，4-亞丁基，1，5亞戊基，1，6-亞己基，1，3-亞丁二烯基，亞丙炔基，1-亞丁炔基及2-亞丁炔基。
6.前述權(quán)利要求中所述化合物，其中Y在基團-C(R1)(R2)·NHR的α-，β-或γ-位，或在基團Y中任意存在的三鍵的α-位上，帶有羥基，醚化羥基或酯化羥基基團。
7.前述權(quán)利要注中所述化合物，其中A＝代表下列任意基團之一 其中R4和R5選自氫原子和O-保護基團。
8.權(quán)利要求7中所述化合物，其中R4和R5代表醚化的甲硅烷基基團。
9.權(quán)利要求7中所述化合物，其中R4和R5選自氫原子和代謝不穩(wěn)定的醚化或酯化基團。
10.權(quán)利要求1～6中所述化合物，其中A＝代表下列基團之一
11.前述權(quán)利要求中所述化合物的20，20-二甲基，20-亞甲基及20-螺旋環(huán)丙基同類物。
12.下列化合物25-氨基-1α，3β-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯；25-氨基-1α，3β-二羥基-23，24-雙去甲-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯；25-乙酰氨基-1α，3β-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯；25-氨基-1α，3β-二羥基-20-表-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯；25-氨基-1α，3β-二羥基-24-高9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯；25-氨基-1α，3β-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯；25-氨基-1α，3β-二羥基-9，10-斷膽甾-5(E)，7-二烯；25-氨基-1α，3β-二羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7-二烯；25-氨基-1α，3β-二羥基-10-螺旋環(huán)丙基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯；25-氨基-1α，3β-二羥基-10-螺旋環(huán)丙基-9，10-斷膽甾-5(E)，7，10(19)-三烯；25-氨基-1α，3β-二羥基-20-表-19-去甲-9，10-斷膽甾-5，7-二烯；25-氨基-1α，3β-二羥基-24，25，26-三-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯；25-氨基-1α，3β-二羥基-24，26，26，26，27，27，27-七個-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯；25-氨基-1α，3β-二羥基-24-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯；25-氨基-1α，3β-二羥基-26，27-雙-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯-23-炔；25-氨基-1α，3β-二羥基-20-表24，26，27-三-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯-24(24a)-炔；25-氨基-1α，3β-二羥基-24-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯24(24a)-炔；25-氨基-1α，3β，22-三羥基-26，27-雙-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯-23-炔；25-氨基-1α，3β，23-三羥基-24，26，27-三-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯24(24a)-炔；25-氨基-1α，3β-三羥基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯-23-炔；25-氨基-1α，3β-二羥基-22-甲氧基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯-23-炔；25-氨基-1α，3β-二羥基-22-乙氧基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯-23-炔；25-氨基-1α，3β-二羥基-22-丙氧基-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯-23-炔；N-乙基-25-氨基-1α，3β-二羥基-24-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯；25-苯甲酰氨基-1α，3β-二羥基-24-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)-三烯以及25-氨基-1α，3β-二羥基-24，26，27-三-高-9，10-斷膽甾-5(Z)，7，10(19)，22，24(24a)-戊烯；
13.前述任一權(quán)利要求所要求的活性化合物，用來治療和/或預(yù)防向僂病，骨軟化，骨質(zhì)疏松，甲狀旁腺機能減退，低磷酸鹽血癥，低血鈣癥和/或有關(guān)的骨疾病，低血鈣手足搐搦，腎衰竭，腎病性骨營養(yǎng)不良，膽汁性肝硬變，指肪痢繼發(fā)性低血鈣癥和/或有關(guān)的骨疾病，用于傷口愈合，控制生育力，抑制甲狀旁腺激素，涉及血塊的失調(diào)處理，或者以人或動物為對象，在治療和預(yù)防腫瘤疾病，感染，骨疾病，自身免疫疾病，宿主移植物反應(yīng)，移植排斥，炎癥，瘤形成，增生，肌病，腸病，脊椎炎性心臟病，皮膚病，高血壓，風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，牛皮癬性關(guān)節(jié)炎，繼發(fā)性甲狀旁腺機能亢進，哮喘，識別損傷或老年性癡呆等方面的用途。
14.使用權(quán)利要求1-12中的活性化合物制備用于下列疾病治療的藥物，包括治療和/或預(yù)防佝僂病，骨軟化，骨質(zhì)疏松，甲狀旁腺機能減退，低磷酸鹽血癥，低血鈣癥和/或有關(guān)的骨疾病，低血鈣手足搐搦，腎衰竭，腎病性骨營養(yǎng)不良，膽汁性肝硬變，脂肪痢，繼發(fā)性低血鈣和/或有關(guān)的骨疾病，傷口愈合，控制生育力，抑制甲狀旁腺激素，涉及血塊的失調(diào)處理，或者以人或動物為對象，用于治療和預(yù)防腫瘤疾病，感染，骨疾病，自身免疫疾病，宿主移植物反應(yīng)，移植排斥，炎癥，瘤形成，增生，肌病，腸病，脊椎炎性心臟病，皮膚病，高血壓，風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，牛皮癬性關(guān)節(jié)炎，繼發(fā)性甲狀旁腺機能亢進，哮喘，識別損傷或老年性癡呆等病癥。
15.包含權(quán)利要求1-12中任何一個所述活性化合物且摻合一種或多種生理學(xué)上可接受的載體或賦形劑的藥物組合物。
16.以人或動物為對象，用以促進治療和/或預(yù)防疾病的方法，這些疾病包括佝僂病，骨軟化，骨質(zhì)疏松，甲狀旁腺機能減退，低磷酸鹽血癥，低血鈣癥和/或有關(guān)的骨疾病，低血鈣手足搐搦，腎衰，腎病性骨營養(yǎng)不良，膽汁性肝硬變，脂肪痢，次級低血鈣和/或有關(guān)的骨疾病，傷口愈合，控制生育率，抑制甲狀旁腺激素，涉及血塊的失調(diào)處理，或克服腫瘤疾病，感染，胃疾病，自身免疫疾病，宿主移植反應(yīng)，移植排斥，炎癥，瘤形成，增生，肌病，腸病，脊椎炎性心臟病，皮膚病，高血壓，風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，牛皮癬性關(guān)節(jié)炎，繼發(fā)性甲狀旁腺機能亢進，哮喘，識別損傷或老年性癡呆等病癥的方法，該方法包括給予所述對象有效劑量的權(quán)利要求1-12任何一個中的活性化合物。
17.制備權(quán)利要求1中所述通式(I)化合物的方法，其包括以下一或多個步驟；A)將通式(I)的5，6-反式異構(gòu)體，異構(gòu)化成相應(yīng)的5，6-順式異構(gòu)體，接著如有所需，可去除任何O-保護基；B)對通式(I)化合物的1-未取代-5，6-反式類似物進行羥基化，以制備通式(I)的5，6-反應(yīng)式異構(gòu)體，接著如有所需，可進行異構(gòu)化和/或去除任何O-保護基；C)為了獲得所需的17-位側(cè)鏈，使含有前體的化合物在一或多個步驟中與一或多種反應(yīng)物進行反應(yīng)以形成所需的側(cè)鏈，接著如有所需，可進行異構(gòu)化和/或去除任何O-保護基；D)使式(I)化合物反應(yīng)以修飾A＝基團的取代型式，接著如有所需，進行異構(gòu)化和/或保護基去除反應(yīng)。
全文摘要
通式I化合物，其R代表氫原子，脂肪，環(huán)脂，芳脂或芳香族有機基團或?；鶊F，包括經(jīng)由羰基連接到氮原子上的有機基團；R
文檔編號A61P9/02GK1141625SQ9419482
公開日1997年1月29日 申請日期1994年12月13日 優(yōu)先權(quán)日1993年12月13日
發(fā)明者R·H·赫西, M·拉姆高帕爾, S·K·S·塞提 申請人:藥物和化學(xué)研究所公司