專(zhuān)利名稱(chēng)：一種hiv蛋白酶抑制劑前藥的制作方法
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及1993年5月7日提交的Merk文件18996，U.S.S.N.08/059,038及Merk文件19097。
標(biāo)明人體免疫缺陷病毒(HIV)的逆病毒是復(fù)雜病癥的病原劑，復(fù)雜病癥包括免疫系統(tǒng)的逐漸破壞(獲得性免疫缺乏綜合癥；AIDS)，以及周?chē)爸袠猩窠?jīng)系統(tǒng)的退化。以前所知道的這些病毒是LAV，HTLV-III，或ARV。逆病毒蛋白復(fù)制的一般特征是多蛋白前體的被病毒編碼的擴(kuò)展的翻譯后過(guò)程產(chǎn)生成熟的病毒蛋白，而它又為病毒組裝及功能上所必須。抑制這個(gè)過(guò)程阻止了正常的病毒感染的產(chǎn)物。比如，Kohl，N.E.et al.Proc.Nat’lAcad.Sci.854686(1988)表明，HIV編碼的蛋白酶基因的失活導(dǎo)致不成熟的、不感染的病毒粒子的產(chǎn)生。這些結(jié)果表明抑制HIV蛋白酶代表了另一種治療艾滋病以及治療和預(yù)防HIV感染的方法。
HIV核苷酸順序分析表明在一個(gè)開(kāi)放的讀碼框中pol基因的存在[Ratner，L.et.al.，Nature，313，277(1985)]。同源氨基酸順序表明pot順序編碼了逆轉(zhuǎn)錄酶、核酸內(nèi)切酶以及一種HIV同切酶[Toh，H.et.al.，EMBO J.，4.1267(1985)；Power，M.D.et al.，Science，231，1567(1986)；Pearl，L.H.et al.，Nature，329，35[(1987)]。
化合物L(fēng)-735,524是一種有力的HIV蛋白酶阻化劑，在治療艾滋病或ARC上有用，而無(wú)根本性的副作用或毒性。
申請(qǐng)人發(fā)現(xiàn)L-735,524的前藥形式是以酯形式。這些前藥提高了與延伸釋放系統(tǒng)更加協(xié)調(diào)的分配比，還提高了口服后長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)在腸中的吸收。
L-735,524在口服開(kāi)始幾個(gè)小時(shí)后在人體里不好吸收。由于短的生物半衰期，它用于延伸釋放劑量形式降低了用藥頻率。然而，游離堿太低的水溶性以及質(zhì)子化化合物低的pka值(大約3.7和5.9)可能導(dǎo)致在回腸、空腸以及結(jié)腸中的溶解性不足，那里pH值往往大于6.0。為了制得更易溶的前藥，使得它在腸里有更好的溶解度，以及在腸里能恢復(fù)至親體，或在吸收后或吸收過(guò)程中恢復(fù)至親體，必須克服作為控制釋放劑量形式規(guī)定的障礙。發(fā)明簡(jiǎn)述本發(fā)明的前藥有阻止/HIV蛋白酶，預(yù)防HIV感染、治療HIV感染和艾滋病和/或ARC上很有用。它可單獨(dú)作為化合物，(合適時(shí))藥用鹽、醫(yī)藥組合物的組分使用，或者與其他抗病毒劑、抗感染劑、免疫調(diào)制劑、抗生素或疫苗結(jié)合使用。還公開(kāi)了治療艾滋病、預(yù)防HIV感染、治療HIV感染的方法。發(fā)明詳述及優(yōu)選實(shí)施方案本發(fā)明涉及L-735,524前藥，或它們藥用鹽，在阻止HIV蛋白酶，預(yù)防或治療HIV感染以及在治療獲得性免疫缺乏綜合癥(AIDS艾滋病)上的應(yīng)用。前藥定義如下 或它們的用鹽，其中Y和Z不都是H，Y和Z可分別為(a)H； n＝0-16；R1和R2可為H；羥基；氨基；苯基；雜環(huán)；用羥基、-COOH、氨基、芳基、酮基或雜環(huán)取代或未取代的C1-4烷R3是H或用芳基、氨基、-COOH、酮基、 烷基或 烷基取代或未取代的C1-4烷基；R4是H，-NR1R2或雜環(huán)。
一種現(xiàn)在優(yōu)選的實(shí)施方案是鈉、鉀、鹽酸鹽或硫酸鹽，其中Y或Z中至少一種形成琥珀酸、戊二酸或己二酸酯。
HIV蛋白酶抑制劑L-735,524可用1993.5.12.出版的Merk文件18597Y.EP0541168中的實(shí)驗(yàn)方案合成，該文在此引入作參考?；衔風(fēng)-735,524是N-(2(R)-羥基-1(S)-2，3-二氫化茚基)-2(R)-苯甲基-4-(S)-羥基-5-(1-(4-(3-吡咯甲基)-2(S)-(N’-(叔丁基羧酰氨基-哌嗪基))-戊酰胺，或它們的藥用鹽。有關(guān)的合成背景包含在EP-0337714中，在此引入作為參考。
本發(fā)明的前藥還可與P450細(xì)胞色素的抑止劑結(jié)合，如酮康唑或甲氰咪胍。這些抑止劑在通過(guò)阻止氧化代謝提高該前藥的壽命上很有作用。
酮康唑是cis-乙酰基-4-[4-[[2-(2，4-二氯苯基〕-2(IH-咪唑-1-基-甲基)-1，3-二氧戊環(huán)-4-基]-甲氧基]-苯基]-哌嗪或它的藥用鹽。它可通過(guò)U.S.4,144,346或U.S.4,223,036的路線合成，二者都在此引入作參考。
甲氰咪胍是N-氰基-N’-甲基-N”-[2-[[(5-甲基-1H-咪唑-4-基)甲基]硫]乙基胍，或它的藥用鹽。它可通過(guò)U.S.3,950,333的方法合成，該文在此引入作參考。
本發(fā)明的化合物含有不對(duì)稱(chēng)中心或手性中心，作為外消旋物、外消旋混合物以及作為單個(gè)的非對(duì)映體或?qū)τ丑w存在，所有的異構(gòu)體形式都包括在本發(fā)明中。
當(dāng)任一組分中任一變量(如雜環(huán)、R1或R2等)出現(xiàn)一次以上時(shí)，在每一種情況下它的定義都與其它條件下的定義不相關(guān)。而且取代基和/或變量的組合，僅在能組合成穩(wěn)定化合物時(shí)是允許的。
除標(biāo)明之處外，這里所用的烷基意指含有特定碳原子的直鏈或支鏈飽和脂肪烴基(Me指甲基，Et指乙基，Pr指丙基，Bu指丁基)；烷氧基是指通過(guò)氧橋連接的指定碳原子數(shù)的烷基。
除標(biāo)明之處外，這里所用的芳基指苯基或萘基。
除標(biāo)明之處外，這里所用的雜環(huán)或雜環(huán)基指穩(wěn)定的飽和5-7員單元雜環(huán)，它由碳原子和1-3個(gè)雜原子組成，雜原子從N、O、S中選取。雜環(huán)必須在N雜原子處連接。這種雜環(huán)元素的例子包括4-嗎啉基，1-哌嗪基，1-哌啶基，1-吡咯基，4-硫代嗎啉基。
本發(fā)明中的藥用鹽(以水溶或油溶或分散產(chǎn)物的形式)包括傳統(tǒng)的無(wú)毒鹽或季銨鹽，它們通過(guò)有機(jī)或無(wú)機(jī)酸或堿形成。這種酸加成鹽的例子包括乙酸鹽、己二酸鹽，藻酸鹽，天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽，苯磺酸鹽，硫酸氫鹽，丁酸鹽，檸檬酸鹽，樟腦酸鹽，樟腦磺酸鹽，環(huán)戊烷丙酸鹽，二葡萄糖酸鹽，十二烷基磺酸鹽，乙基磺酸鹽，富馬酸鹽，葡庚糖酸鹽，甘油磷酸鹽，庚酸鹽，己酸鹽，氫氯酸鹽，氫溴酸鹽，氫碘酸鹽，2-羥基乙磺酸鹽，乳酸鹽，馬來(lái)酸鹽，甲磺酸鹽，2-萘磺酸鹽，尼古丁酸鹽，草酸鹽，香茅酸鹽、甲膠酸鹽，過(guò)二硫酸鹽，3-苯基丙酸鹽，磷酸鹽，集磷酸鹽，新戊酸鹽，丙酸鹽，琥珀酸鹽，酒石酸鹽，硫氰酸鹽，甲基苯磺酸鹽以及十一烷酸鹽。堿鹽包括銨鹽，堿金屬鹽如鈉鹽和鉀鹽，堿土金屬鹽如鈣鹽和鎂鹽，有機(jī)堿鹽如二環(huán)已胺鹽，N-甲基-D-葡糖胺鹽，以及氨基酸鹽如精氨酸鹽，賴氨酸鹽等。同樣，堿性含氮基團(tuán)可用低級(jí)鹵代烷季銨化，如甲基、乙基、丙基、丁基氯代烷，溴代烷以及碘代烷；二烷基硫酸酯如二甲基、二乙基、二丁基以及二戊基硫酸酯長(zhǎng)鏈鹵代物如癸基、月桂基、十四烷基以及十八烷基氯代物，溴代物和碘代物；芳鹵如苯基和酚基溴等。其他藥用鹽包括硫酸鹽乙醇酯以及硫酸鹽。
醇的酯化，如L-735,524，通過(guò)多種傳統(tǒng)的方法進(jìn)行，包括使醇與合適的酸酐、羧酸以及酰鹵反應(yīng)。這些反應(yīng)和其它醇的酯化-樣，對(duì)技術(shù)人員來(lái)說(shuō)是容易明白的。
醇與合適的酸酐反應(yīng)(如例1所示)在一種?；呋瘎┐嬖谙逻M(jìn)行，如4-DMAP(4-二甲氨基吡啶)又叫N，N-二甲基氨基吡淀)，或吡啶，或1，8-二[二甲氨基]-萘。優(yōu)選的?；呋瘎┦?-DMAP。
醇和適當(dāng)?shù)聂人岱磻?yīng)(如例2示)在一種脫水劑以及任選一種?；呋瘎┐嬖谙逻M(jìn)行。脫水劑通過(guò)移去反應(yīng)體系中的水分來(lái)推動(dòng)反應(yīng)進(jìn)行，可從以下幾種中選擇；二環(huán)己基碳化二酰亞胺(DDC)，1-[3-二甲氨基丙基]-3-乙基碳化二酰亞胺(EDC)以及其他水溶性脫水劑，優(yōu)選的脫水劑是DDC。
另外，如在三氟乙酸酐以及任選吡啶存在下，醇和合適的羧酸也能發(fā)生酯化反應(yīng)。進(jìn)-步的改變是醇在N，N-羰基二咪唑作用下與合適的羧酸反應(yīng)，而不需要吡啶。
醇和酰氯在?；呋瘎┤?-DAMP或吡啶作用下反應(yīng)。
選擇性酯化有幾種方法。-種優(yōu)選的方法如例2，3所示，在三氯乙基衍生物作用下醇先被酯化。優(yōu)選的酯進(jìn)行色譜分離后，在醋酸中和鋅粉反應(yīng)還原消除三氯乙基。另一種選擇性酯化的方法是二酯的水解。
本發(fā)明的化合物在阻止HIV蛋白酶，預(yù)防和治療人體免疫缺陷病毒(HIV)以及治療繼后發(fā)生的病理癥狀如艾滋病上很有作用。治療艾滋病或預(yù)防或治療HIV感染的定義，包括但不局限于治療很寬范圍的HIV感染艾滋病、ARC(艾滋病相關(guān)的復(fù)雜病癥)，不管有無(wú)癥狀，實(shí)際上或潛在的HIV接觸。比如本發(fā)明的化合物在治療HIV感染時(shí)有用，它有可能在輸血、體液交換、咬、釘傷事故或手術(shù)時(shí)病人血液接觸時(shí)產(chǎn)生。
為此目的，本發(fā)明的化合物可以口服，腸胃外用(如皮下注射，靜脈、肌肉或胸骨內(nèi)注射，或輸液技術(shù))，或液體制劑吸入霧，或直腸用藥等。用藥單位配方中含有傳統(tǒng)的無(wú)毒藥用載體。佐藥及賦形劑等。
本發(fā)明還涉及治療HIV感染以及艾滋病的方法及藥用組合物。該治療涉及給需要這種治療的病人以藥用組合物，該藥用組合物包括藥用載體以及治療有效量的本發(fā)明的組合中的各種化合物。
這些藥用組合物可以是口服液或藥片形式；鼻吸噴霧；無(wú)菌的注射介體，如無(wú)菌注射水質(zhì)或油質(zhì)懸浮物，或塞藥等。
當(dāng)作為一種懸浮液口服施用時(shí)，這些組合物可根據(jù)醫(yī)藥行業(yè)熟知的技術(shù)生產(chǎn)，并可含有微晶纖維素增大體積，藻酸或藻酸鈉作懸浮劑、甲基纖維素作增粘劑，以及本領(lǐng)域已知的甜味劑和/或香味劑。作為快速釋放的藥片，這些組合物可含有微晶纖維素，磷酸氫二鈣，淀粉，硬脂酸鎂及乳糖和/或其它本領(lǐng)域已知的賦形劑、粘合劑、增量劑、崩解劑、稀釋劑及潤(rùn)滑劑等。
當(dāng)采用鼻用氣溶膠或吸入形式施用時(shí)，這些組合物可以根據(jù)藥學(xué)規(guī)定的已知技術(shù)生產(chǎn)，可以制成鹽水溶液，用芐醇或其他防腐劑，用本領(lǐng)域已知的吸收促進(jìn)劑提高生物利用率，用碳氟化合物和/或其他增溶劑或分散劑。
注射液或懸浮液可以根據(jù)已知工業(yè)配制，可用合適的無(wú)毒的胃腸外的可接受的稀釋劑或溶劑，如甘露糖醇，1，3-丁二醇，水，Ringer’s溶液或等滲氯化鈉溶液，或合適分散劑或潤(rùn)濕劑，以及懸浮劑，如無(wú)菌的、溫和的固定油類(lèi)，包括合成的單-或二甘油酯和脂肪酸，包括油酸。
如以栓劑形式直腸給藥，這些組合物可由藥物與合適的無(wú)刺激性的賦形劑混合制成，這些賦形劑如可可脂，合成甘油酯或聚乙二醇，它們?cè)诔叵率枪腆w，但在直腸里溶解和或液化釋放出藥物。
本發(fā)明的這些化合物中的對(duì)每一種對(duì)人體來(lái)說(shuō)都有具體用藥范圍。L-735,524或它的藥用鹽口服劑量為每天約40mg至約4000mg，每天1-4次。酮康唑或它的藥用鹽的口服劑量為隔天約200mg至每天兩次每次約400mg。甲氰咪胍或定的藥用鹽口服或靜脈內(nèi)的劑量為每天約100mg至4800mg，一天1-4次。然而，應(yīng)當(dāng)理解，對(duì)任一特定病人的用藥量及用藥頻率都應(yīng)根據(jù)許多因素而定，包括所用具體化合物的活性、代謝穩(wěn)定性及該化合物作用期長(zhǎng)短，年齡、體重，健康狀況，性別，飲食，用藥方式及時(shí)間，排泄速率，藥物組合，特定條件的嚴(yán)重性，以及進(jìn)行治療的寄主。
例1.
N-〔2(R)-琥珀酰氧基-1(S)-2，3-二氫化茚基-5-〔〔2(S)-叔丁基氨基羰基〕-4-(3-吡啶甲基)哌嗪基〕-4(S)-琥珀酰氧基-2(R)-苯甲基戊酰胺(L-735,524二琥珀酸酯，L-751,368)。
1.5g L-735,524一水合物溶液和2.5g琥珀酸酐在10ml吡啶中室溫?cái)嚢?4小時(shí)。由旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器蒸去吡啶，殘余物溶于30ml水和150ml氯仿中。除去水層，有機(jī)層用水洗。氯仿層用硫酸鈉干燥，蒸發(fā)。殘余物真空干燥過(guò)夜，得泡沫狀固體吡啶鎓鹽2.45g。將其溶于25ml乙酸中，過(guò)量乙酸由旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器蒸去。殘余物真空干燥得到玻璃狀固體。將其熔于5ml乙醇，冰浴冷卻。劇烈攪拌下，將50ml冰水逐份加到乙醇溶液中。用電磁攪拌器把形成的白色沉淀打成精細(xì)的懸浮物。過(guò)濾沉淀，水洗真空干燥，得1.7g白色粉末狀產(chǎn)物，通過(guò)TLC及HPLC可知它是均質(zhì)的。
例2N-〔2(R)-三氯乙氧基琥珀酰氧基-1(S)-2，3-二氫化茚基-5-〔〔2(S)-叔丁基氨基羰基〕-4-(3-吡啶甲基)哌嗪基〕-4(S)-羥基-2(R)苯甲基戊酰胺(L-735,524三氯乙基琥珀酸單酯)。
2.35g L-735,524一水合物溶液，1.1g單三氯乙基琥珀酸酯，0.49g 4-二甲氨基吡啶以及0.9g二環(huán)己基碳化二酰亞胺溶于50ml氯仿中，室溫?cái)嚢柽^(guò)夜。反應(yīng)混合在冰中冷卻，濾去沉淀二環(huán)己基脲，用0.3ml乙酸酸化濾液，水洗兩次，鹽水洗一次。蒸發(fā)氯仿溶液得到4.14g白色泡沫體，它由兩種單酯異構(gòu)體、雙酯、未反應(yīng)的起始原料及一些二環(huán)己基脲組成的混合物?；旌衔锓殖伤呐?，在硅膠板制備上用薄層色譜純化，用甲醇∶氯仿(8∶92)作擴(kuò)展劑。合并所要單酯富集的部分用3∶97的甲醇氯仿做展開(kāi)劑再次進(jìn)行色譜分離，得到1.85g純的三氯乙基琥珀單酯。
例3N-〔2(R)-琥珀酰氧基-1(S)-2，3-二氫化茚基-5-〔〔2(S)-叔丁基氨基羰基〕-4-(3-吡啶甲基)哌嗪基〕-4(S)-羥基-2(R)-苯甲基戊酰胺(L-735,524琥珀酸單酯，L-755,550)。
1.8g例2的三氯乙基酯溶于50ml乙酸中，加入3g鋅粉。室溫?cái)嚢?小時(shí)后，再加入1.5g鋅粉再攪3小時(shí)。過(guò)濾反應(yīng)混合物，蒸發(fā)濾液。殘余物溶于100ml氯仿中，用水(2×50ml)及鹽水洗。蒸發(fā)氯仿溶液得1.34g泡沫狀固體。用15∶85甲醇、氯仿做展開(kāi)劑，硅膠制備TLC純化，得到純的單酯。將其溶于氯仿，用巴斯德吸量管中的短床硅藻土過(guò)濾。蒸去氯仿，得1.23g白色粉末狀純單酯。
例4用琥珀酸二酯治療的實(shí)驗(yàn)方案在這份HIV-血清檢查隱性患者的實(shí)驗(yàn)方案中，例1的產(chǎn)物以每日總用藥量為500-1500mg給藥?？共《净钚酝ㄟ^(guò)測(cè)量治療前和治療過(guò)程中HIV P24抗原血清水平、HIV RNA抗原血清水平，以及CD4網(wǎng)狀細(xì)胞肉瘤計(jì)數(shù)來(lái)測(cè)量。
例5用琥珀酸單酯治療的實(shí)驗(yàn)方案在這份血清檢查隱性患者的原報(bào)告中，例3產(chǎn)物以日用藥量為500-1500mg給藥?？共《净钚酝ㄟ^(guò)測(cè)量治療前和治療過(guò)程中HAV P24抗原的血清水平。HZV RNA的血清水平以及CD4網(wǎng)狀細(xì)胞肉瘤計(jì)數(shù)來(lái)測(cè)定。
例6制備N(xiāo)-(2(R)-(二甲氨基乙酸基)-1(S)-2，3-二氫化茚基)-2(R)-苯甲基-4(S)-羥基-5-(1-(4-(3-吡啶甲基)-2(S)-N’(叔丁基羧酰氨基)-哌嗪基))戊酰胺 700mg(1.109mmol)N-(2-(R)-羥基-1(S)-2，3-二氫化茚基)-2(R)-苯甲基-4(S)-羥基-5-(1-(4-(3-吡啶甲基)-2(S)-N’-(叔丁基羧酰氨基(哌嗪基))-戊酰胺溶于4ml二氯甲烷中，加入137mg(1.331mmol)N，N-二甲基甘氨酸，274mg(1.331mmol)1，3-二環(huán)己基碳化二酰亞胺和13mg催化量的N，N-二甲氨基吡啶(0.11mmol)。室溫18小時(shí)后，過(guò)濾，濃縮得白色泡沫體。殘余物用柱色譜純化(40×150mm柱，梯度洗脫，CHCl2用NH3飽和的CHCl3∶MeOH60∶39.5∶0.5％(1000ml)，60∶39∶1％(1000ml)，60∶38.5∶1.5％(1000ml))。得310mg白色泡沫體，用20∶80酸乙酯∶己烷滴定得215mg白色固體，mp78-82℃。對(duì)C40H54N6O50.8molH2O進(jìn)行元素分析，計(jì)算值C，67.35，H，7.86；N，11.78，實(shí)測(cè)值C，67.37；H，7.67；N，11.49。
例7以下化合物用例6同樣的方法制備。
A.N-(2-(R)-基甲酰氧基)-1(S)-2，3-二氫化茚基)-2(R)-苯甲基-4(S)-羥基-5-(1-(4-(3-吡啶甲基)-2(S)-N’-(叔丁基羧酰氨基)-哌嗪基))-戊酰胺 mp154-161℃，C43H51N5O5元素分析計(jì)算值C，71.94；H，7.16；N，9.76；實(shí)測(cè)值C，71.93；H，7.19；N，9.76。
B.N-(2(R)-壬酰氧基)-1(S)-2，3-二氫化茚基)-2(R)-苯甲基-4(S)-羥基-5-(1-(4-(3-吡啶甲基)-2(S)-N’-(叔丁基羧酰氨基)-哌嗪基))-戊酰胺 mp62-68℃。C45H63N5O50.8molH2O計(jì)算值C，70.34；H，8.47；N，9.11。實(shí)測(cè)值C，70.32；H，8.30；N，9.06.
C.N-(2(R)-乙酰氧基)-1(S)-2，3-二氫化茚基-2(R)-苯甲基-4(S)-羥基-5-(1-(4-吡啶甲基)-2(S)-N’-(叔丁基羧酰氨基)-哌嗪基))-戊酰胺 mp90-94℃。C38H49N5O50.4mol CH2Cl2元素分析計(jì)算值C，66.84；H，7.28；N，10.15；實(shí)測(cè)值C，66.77；H，7.19；N，10.44。
D.N-(2(R)-(乙酰氧基)-1(S)-2，3-二氫化茚基)-2(R)-苯甲基-4(S)-(乙酰氧基)-5-(1-(4-(3-吡啶甲基)-2(S)-N’-(叔丁基羧酰氨基)-哌嗪基))-戊酰胺
對(duì)此二乙酸酯要求所有試劑有2.5當(dāng)量。色譜爭(zhēng)離后得油狀物。在乙酸乙酯中用1當(dāng)量的H2SO4處理油狀物，濃縮此溶液得白色泡沫體，高真空干燥(18h，55℃)。mp133-138℃。C40H51N5O61.35molH2SO4元素分析計(jì)算值C，58.21；H，6.55；N，8.48。實(shí)測(cè)值C，58.12；H，6.65；N，8.20。
例8N-(2(R)-(4-氯甲基苯甲酰氧基)-1(S)-2，3-二氫化茚基)-2(R)-苯甲基-4(S)-羥基-5-(1-4-(3-吡啶甲基)-2-(S)-N’-(叔丁基羧酰氨基)-哌嗪基))-戊酰胺的制備 2.0g(3.16mmol)N-(2(R)-羥基-1(S)-2，3-二氫化茚基)-2(R)·苯甲基-4(S)-羥基-5-(1-(4-(3-吡啶甲基)-2(S)-N’-(叔丁基羧酰氨基)-哌嗪基))-戊酰胺溶于20ml二氯甲烷中，加入648mg(3.803mmol)4-氯甲基苯甲酸，784mg(3.803mmol)，1，3-二環(huán)己基碳化二酰亞胺，以及催化量的N，N-二甲氨基吡啶(38mg，0.317mmol)。室溫反應(yīng)24小時(shí)，過(guò)濾，濃縮濾液得白色泡沫體。殘余物用柱層析純化(50×150mm柱，梯度洗脫，CH2Cl2∶用NH3飽和的CHCl3∶CH3OH60∶39.5∶0.0(1000ml)，60∶39∶1(1000ml)，60∶38.5∶1.5(1000ml)，60∶38∶2(1000ml)，60∶37∶3(1000ml)，60∶35∶5(1000ml)。得1.46g白色泡沫體。TLC分析(CH2Cl2∶用NH3飽和的CHCl3∶MeOH60∶35∶5Rf＝0.26)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.59-8.56(m，2H)，7.83-7.78(m，3H)，7.6O(m，1H)，7.40(d，J＝12Hz，2H)，7.29-7.09(m，5H)，7.05-6.85(m，5H)，6.31(d，J＝8.3Hz，1H)，5.75(dd，J＝8.2 and 4.9Hz，1H)，5.50(dd，J＝4.7 and 4.03Hz，1H)，4.60(s，2H)，4.12(br s，1H)，3.89-3.83(m，1H)，3.51(s，2H)，3.29(dd，J＝17.5 and 4.0Hz，1H)，3.19-3.16(m，1H)，3.08(d，J＝17.5Hz，1H)，2.95-2.91(m，1H)，2.83-2.45(m，8H)，2.38-2.29(m，1H)，1.90-1.81(m，1H)，1.62(br s，1H)，1.57-1.48(m，1H)，1.38(s，9H).
例9.
N-(2(R)-((4-嗎啉甲基苯甲酰)氧基)-1(S)-2，3-二氫化茚基)-2(R)-苯甲基-4(S)-羥基-5-(1-(4-(3-吡啶甲基)-2(S)-N’-(叔丁基羧酰氨基)-哌嗪基))-戊酰胺的制備 425mg(0.55mmol)N-(2(R)-((4-氯甲基苯甲酰)氧基)-1(S)-2，3-二氫化茚基)-2(R)-苯甲基-4(S)-羥基-5-(1-(4-(3-吡啶甲基)-2(S)-N’-(叔丁基羧酰氨基)-哌嗪基))-戊酰胺溶于1ml無(wú)水DMF中，加入0.242ml(2.7)mmol)嗎啉。48小時(shí)后溶液用80ml乙酸乙酯稀釋?zhuān)?×10ml水和10ml鹽水洗滌，MgSO4干燥，過(guò)濾，濃縮得白色固體。快速柱層析純化(40×150mm柱，梯度洗脫，CH2Cl2∶用NH3飽和的CHCl3∶MeOH60∶39.5∶0.0(1000ml)，60∶39∶1(1000ml)，60∶38.5∶1.5(1000ml)，60∶36∶4(1000ml)得404mg澄清的油.乙酸乙酯結(jié)晶，得350mg白色固體，mp110～120℃，C48H60N6O60.35mol H2O元素分析計(jì)算值C，70.02；H，7.43；N，10.21；實(shí)測(cè)值C，70.04；H，7.34；N，10.13.
例10用例9所述方法制備以下化合物A.N-(2(R)-4-((4’-甲基哌嗪基)甲基苯甲酰基)氧基-1(S)-2，3-二氫化茚基)-2(R)-苯甲基-4(S)-羥基-5-(1-(4-(3-吡啶甲基)-2(S)-N’-(叔丁基羧酰氨基)哌嗪基))-戊酰胺 mp88-94℃，C49H62N7O51.0mol H2O元素分析計(jì)算值C，69.48；H，7.62；N，11.57；測(cè)得值C，69.33；H，7.44；N，11.35。
B.N-(2(R)-4-(N，N-二乙基甲基苯甲酰基(氧基)-1(S)-2，3-二氫化茚基-2(R)-苯甲基-4(S)-羥基-5-(1-(4-(3-吡啶甲基)-2(S)-N-(叔丁基羧酰氨基)-哌嗪基))-戊酰胺
mp135-145℃，C48H62N6O50.4molH2O元素分析值計(jì)算值C，71.15；H，7.81；N，10.37。測(cè)量值C，71.11；H，7.57；N，10.77。
雖然前面詳細(xì)敘述了本發(fā)明的原理，并提供了一些實(shí)例用于說(shuō)明目的，但應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明的實(shí)踐還應(yīng)包含后述權(quán)利要求及它的等同條件范圍內(nèi)的正常的改變、調(diào)整和修改。
權(quán)利要求
1.以下通式的前藥或它的藥用鹽， 其中Y或Z不都是H，Y和Z可為(a)H； n＝0-16；R1、R2可各自為H；羥基，氨基；苯基；雜環(huán)基；用羥基、-COOH、氨基、芳基、酮基或雜環(huán)基取代或未取代的C1-4烷基，R3是H；或用芳基、氨基、-COOH、酮基、 烷基取代或未取代的C1-4烷基；或 烷基。R4是H，-NR1R2或雜環(huán)基。
2.權(quán)利要求1的前藥，其與酮康唑結(jié)合。
3.權(quán)利要求1的前藥，其與甲氰咪胍結(jié)合。
4.權(quán)利要求1的前藥，其中的藥用鹽用鈉鹽、鉀鹽、氫氯酸鹽、硫酸鹽、Y或Z至少之一形成琥珀酸酯、戊二酸酯或己二酸酯。
5.一種抑止HIV蛋白酶的方法，包括對(duì)需要這種治療的合適哺乳動(dòng)物給予有效量的權(quán)利要求1的前藥。
6.一種預(yù)防HIV感染，或治療HIV感染或治療艾滋病或ARC的方法，包括對(duì)需要這種治療的合適哺乳動(dòng)物給予有效量的權(quán)利要求1的前藥。
7.用于抑止HIV蛋白酶的有用藥用組合物，它包含有效量的權(quán)利要求1的前藥以及藥用載體。
8.用于預(yù)防或治療HIV感染或治療艾滋病或ARC的藥用組合物，它包含有效量的權(quán)利要求1的前藥以及合適的藥用載體。
全文摘要
式(I)所示的前藥在阻止HIV蛋白酶、預(yù)防和治療、HIV感染以及治療艾滋病上有用，它既可以單獨(dú)作為化合物、藥用鹽或藥用組合物的組分使用，又可以和其它抗病毒、免疫調(diào)節(jié)劑、抗生素或疫苗結(jié)合使用。還描述了治療艾滋病以及治療和預(yù)防HIV感染的方法。
文檔編號(hào)A61P37/04GK1139432SQ94194700
公開(kāi)日1997年1月1日 申請(qǐng)日期1994年11月14日 優(yōu)先權(quán)日1993年11月18日
發(fā)明者J.阿歷山大, D.比德拉, B.D.多塞, A.J.雷塔, J.P.瓦卡 申請(qǐng)人:麥克公司