專利名稱：含有大環(huán)內(nèi)酯菌素a及其衍生物作為有效成分的具有抗血管生成效果的組合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種具有抗血管生成效果的組合物，其含有具有抗血管生成作用的大環(huán)內(nèi)酯菌素A (macrolactin A,以下稱為MA)、7_0-丙二酸大環(huán)內(nèi)酯菌素A (7-0-malonylmacrolactin A,以下稱為 MMA)及 7_0_ 丁二酸大環(huán)內(nèi)酯菌素 A(7-0_succinyl macrolactinA，以下稱為SMA)等大環(huán)內(nèi)酯類化合物作為有效成分。利用本發(fā)明的具有抗血管生成效果的組合物，可以提供一種以預防或治療由血管生成引起的疾病為目的的藥物組合物。
背景技術：
血管生成(angiogenesis)是指由現(xiàn)有的微血管生成新的毛細血管的過程。正常 的血管生成發(fā)生在胚胎發(fā)育(embryonic development)、組織再生、傷口處理及作為女性生殖系統(tǒng)的周期性變化的黃體成熟時期,此時也被嚴格調(diào)節(jié)而進行(Folkman J et al.，Int. Rev. Exp. Pathol.，16pp207_248,1976 (Folkman J 等人，國際實驗病理學評論，16 第207-248 頁，1976))。在成人中，血管內(nèi)皮細胞的生長非常緩慢，與其它類型的細胞相比，相對不易分裂。血管生成的過程如下。一般是依靠血管生成促進因子的刺激，通過依靠蛋白酶引起的血管基底膜的分解、血管內(nèi)皮細胞的遷移、增殖，以及由血管內(nèi)皮細胞分化引起的管形成使血管重建，從而生成新的毛細血管。一些疾病是由于血管生成不能得到自我調(diào)節(jié)，導致血管異常生長而引起的。在病理條件下發(fā)生的與血管生成相關的疾病有血管瘤、血管纖維瘤、血管畸形，以及動脈硬化、血管粘附、硬腫癥等心血管疾?。挥裳苌梢鸬难劭萍膊∮薪悄ひ浦残匝苌?、新生血管性青光眼、糖尿病視網(wǎng)膜病變、新生血管性角膜疾病、斑點退化、翼狀胬肉、視網(wǎng)膜變性、晶狀體后纖維組織增生和顆粒性結膜炎等。關節(jié)炎等慢性炎癥性疾病，牛皮癬、毛細血管擴張癥、化膿性肉芽腫、脂溢性皮炎、痤瘡等皮膚疾病，阿爾茨海默氏癥和肥胖也與血管生成有關，此外，癌的生長和轉移必須依賴于血管生成(D’Amato. RJ et al.,Ophthalmology,102 (9), ppl261-1262,1995 ；Arbiser JL,J.Am. Acad. Dermatol. , 34 (3)，pp486_497,1996 ;0’Brien KD et al. Circulation,93(4),pp672-682,1996 ；Hanahan D etal.，Cell，86，pp353-364，1996 (D，Amato. RJ 等人，眼科學，102 (9)，第 1261-1262 頁，1995 ；Arbiser幾，美國皮膚病學會雜志，34 (3)，第486-497頁，1996 ;0’Brien KD等人，循環(huán)雜志，93 (4)，第 672-682 頁，1996 ；HanahanD 等人，細胞，86，第 353-364 頁，1996))。特別是癌癥的情況下，血管生成在癌細胞的生長和轉移中起著重要的作用。腫瘤通過新生血管得到生長和增殖所需的營養(yǎng)和氧氣，此外，滲透到腫瘤的新生血管給轉移的癌細胞提供進入血液循環(huán)系統(tǒng)的機會，使癌細胞轉移(metastasis) (Folkman and Tyler,Cancer Invasionand metastasis, Biological mechanism and Therapy (S.B. Day ed.)Ravenpress, New York,pp94-103, 1977 ；Polverini PJ,Crit.Rev. Oral. Biol. Med. ,6 (3)，pp230-247，1995 (?？寺吞├眨┑那忠u及轉移，生物學機制及治療(S. B. Day ed. )Raven出版社，紐約，第94-103頁，1977 ；Polverini PJ, 口腔生物醫(yī)學與醫(yī)學鑒定性評論，6 (3)，第230-247頁，1995))。目前在臨床上對癌癥患者所使用的化學療法或免疫療法無法提高癌癥患者的生存率的主要原因為癌癥的轉移。關節(jié)炎作為典型的炎癥性疾病，自身免疫失調(diào)是其主要原因，隨著病情的發(fā)展，關節(jié)之間的滑膜囊內(nèi)的慢性炎癥會誘導血管生成并破壞軟骨。即，借助于誘導炎癥的細胞因子，滑膜細胞和血管內(nèi)皮細胞在滑膜囊內(nèi)增殖，隨著血管生成的進行，在軟骨部形成結締組織層一關節(jié)醫(yī)后，對起到緩沖作用的軟骨進行破壞(Koch AE et al. , Arthritis. Rheum.,29,pp471_479,1986 ;Stupack DG et al. ,Braz J. Med. Biol. Res. ,32(5),pp578_581,1999 ;KochAE, Atrhritis. Rheum.，41 (6), pp951_962,1998 (KochAE 等人，關節(jié)炎與風濕病，29,第471-479頁，1986 ;Stupack DG等人，巴西醫(yī)學及生物學雜志，32 (5)，第578-581頁，1999 ;KochAE，關節(jié)炎與風濕病，41 (6)，第 951-962 頁，1998)。每年使全世界數(shù)以百萬計的人失明的眼科疾病，其原因也是血管生成(JeffreyMI et al.，J. Clin.1nvest.，103，ppl231_1236,1999 (JeffreyMI 等人，臨床研究雜志， 103，第1231-1236頁，1999))。具有代表性的例子有發(fā)生在老年人上的黃斑變性(maculardegeneration)、糖尿病性視網(wǎng)膜病變(diabetic retinopathy)、早熟兒的視網(wǎng)膜病、新生血管性青光眼、新生血管性角膜疾病等，這些疾病都是由血管生成引起的(Adamis AP etal.，Angiogenesis, 3, pp9_14,1999 (Adamis AP 等人,血管生成，3,第 9-14 頁，1999 年))。其中，糖尿病性視網(wǎng)膜病變作為糖尿病的并發(fā)癥，其是因視網(wǎng)膜中的毛細血管侵入到玻璃體而導致失明的疾病。以紅色斑點和鱗片狀皮膚為特征的牛皮癬也是一種發(fā)生在皮膚上的慢性增生性疾病，其難以治愈且伴隨疼痛和變形。與正常狀態(tài)下的角質細胞每月增殖一次相比，牛皮癬患者至少每周增殖一次。對于這樣的快速增殖，需要提供豐富的血液，因此無法避免活躍的血管生成(Folkman J, J.1nvest. Dermatol. , 59, pp40-48,1972 (Folkman J，研究性皮膚病學雜志，59，第 40-48 頁，1972))?？寡苌梢种苿┛梢赃m用于治療這些各種血管生成相關的疾病。由于患者通常需要長期服用這些抗血管生成抑制劑，因此毒性低且能夠口服的藥物最為理想。因此，需要開發(fā)一種毒性低的抗血管生成抑制劑。本發(fā)明的發(fā)明人對以大環(huán)內(nèi)酯菌素A為首的大環(huán)內(nèi)酯衍生物的藥理活性進行了長期研究，它們?yōu)楹?4-環(huán)內(nèi)酯環(huán)的大環(huán)內(nèi)酯類抗菌素物質。大環(huán)內(nèi)酯類化合物是從未分類的海洋細菌、放線菌和芽孢桿菌菌株中產(chǎn)生(Wiliam Fenical et al.，J AmChem Soc. ,111, pp7519_7524,1989 ;Ik Dong Yoo et al. , J Microbiol Biotechnol.,
7,pp429_434,1997 ;Gabriella Molinari et al. , Antimicrob AgentsChemother. ,50,ppl701-1709，2006 (Wiliam Fenical 等人，美國化學學會志，111，第 7519-7524 頁，1989 ；Ik Dong Yoo等人,微生物學與生物技術雜志,7,第429-434頁，1997 ；Gabriella Molinari等人，抗微生物劑與化療，50，第1701-1709頁，2006))。到目前為止已有23種化合物在結構上得到確認。現(xiàn)有的針對大環(huán)內(nèi)酯類化合物藥理活性的研究如下。在1989年首次分離出的MA具有以下作用，其抑制小鼠黑素瘤癌細胞(murinemelanoma cancer cell)和單純性皰疫病毒(Herpessimplex virus)的增殖，保護因艾滋病毒(HIV)而受損的T-淋巴母細胞(Wiliam Fenical et al. , J Am Chem Soc.,111，PP7519-7524,1989 (Wiliam Fenical 等人，美國化學學會志，111，第 7519-7524 頁，1989))。此外，還具有抑制S烯合酶(squalene synthase) (Sung WonChoi et al. , CanJ Microbiol. , 49, pp663-668, 2003 (Sung Won Choi 等人，加拿大微生物雜志,49,第663-668頁,2003)),保護因谷氨酸鹽(glutamate)而受損的腦細胞(Ik Dong Yoo et al.,J MicrobiolBiotechnol. ,7, pp429-434,1997 (Ik Dong Yoo 等人，微生物學與生物技術雜志，7，第429-434，1997))的作用，還對包括超級細菌在內(nèi)的各種病原菌表現(xiàn)出了抗菌活性(Gabriella Molinari et al. ,Antimicrob Agents Chemother. ,50,ppl701-1709,2006(GabriellaMolinari等人，抗微生物劑與化療，50，第1701-1709，2006)。此外，本發(fā)明人確認了 MA及其衍生物具有以下作用，其可抑制由脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)誘導的炎癥介質的形成，并對此申請了專利(PCT申請?zhí)朠CT/KR2010/003239)。本發(fā)明人確認了從聚酵素芽孢桿菌KJS-2 (Bacilluspolyfermenticus KJS-2,KCCM10769P,以下簡稱“BP2”)菌株的發(fā)酵液或培養(yǎng)液中可以產(chǎn)出 作為主要產(chǎn)物的MA、MMA和SMA，并確定了它們的結構。并且，通過液相色譜-質譜聯(lián)用(LC/Mass)，確認了從上述菌的發(fā)酵液或培養(yǎng)液的粗提物中還生產(chǎn)出了上述三種大環(huán)內(nèi)酯類化合物以外的物質，即，被推定為大環(huán)內(nèi)酯菌素B (macrolactinB)、大環(huán)內(nèi)酯菌素C (macrolactin C)、大環(huán)內(nèi)酯菌素D (macrolactinD)、大環(huán)內(nèi)酯菌素E (macrolactin E)、大環(huán)內(nèi)酯菌素F(macrolactinF)、大環(huán)內(nèi)酯菌素 G (macrolactin G)、大環(huán)內(nèi)酯菌素H (macrolactinH)、大環(huán)內(nèi)酯菌素I (macrolactin I)、大環(huán)內(nèi)酯菌素J (macrolactin J)、大環(huán)內(nèi)酯菌素K(macrolactin K)、大環(huán)內(nèi)酯菌素 L (macrolactin L)、大環(huán)內(nèi)酯菌素 M (macrolactin M)、大環(huán)內(nèi)酯菌素N (macrolactin N)、異大環(huán)內(nèi)酯酸(isomacrolactinic acid)及大環(huán)內(nèi)酯酸(macrolactinicacid)(韓國專利授權號10-0895908)。但本發(fā)明人沒有證實大環(huán)內(nèi)酯菌素 O (macrolactin 0)、大環(huán)內(nèi)酷菌素 P (macrolactin P)、大環(huán)內(nèi)酷菌素 Q (macrolactinQ)、大環(huán)內(nèi)酷菌素R (macrolactin R)及大環(huán)內(nèi)酷菌素S (macrolactin S)產(chǎn)自BP2菌。大環(huán)內(nèi)酯類化合物具有與它們的各種結構相對應的各種藥理活性。然而，目前還沒有關于大環(huán)內(nèi)酯類化合物抑制血管生成方面的研究報道。為此，本發(fā)明人使用中壓液相色譜(middle pressure liquidchromatography, MPLC)對含有各種大環(huán)內(nèi)酯類化合物的BP2菌的發(fā)酵液或培養(yǎng)液中產(chǎn)出的粗提物進行分別提取，并對各流分的血管生成抑制活性進行研究。結果發(fā)現(xiàn)含有大環(huán)內(nèi)酯類化合物的流分具有抑制血管生成的作用，特別是含有MA、MMA, SMA的流分可強烈抑制新生血管的形成。由此,本發(fā)明人通過對含有上述三種大環(huán)內(nèi)酯化合物的中壓液相色譜流分進行精制，獲得高純度的各物質(PCT申請?zhí)朠CT/KR2010/003239)，并分別對精制獲得的三種大環(huán)內(nèi)酯化合物的血管生成抑制活性進行了研究。

發(fā)明內(nèi)容
要解決的技術問題本發(fā)明人通過確認MA、MMA及SMA具有強烈抑制血管生成的作用，從而完成了本發(fā)明。因此，本發(fā)明以預防或治療由血管生成引起的疾病為目的，旨在提供一種含有上述大環(huán)內(nèi)酯類化合物作為有效成分的藥物組合物。技術方案
為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供一種用于抑制血管生成的組合物，其含有化學式f化學式3所示的化合物作為有效成分。此外，為了實現(xiàn)本發(fā)明的另一個目的，本發(fā)明提供一種用于預防或治療與血管生成相關的疾病的組合物，其含有化學式廣化學式3所示的化合物中的任意一種作為有效成分?；瘜W式I
權利要求
1.一種具有抑制血管生成效果的藥物組合物，其含有選自大環(huán)內(nèi)酯菌素A、7-0-丙二酰大環(huán)內(nèi)酯菌素A及7-0- 丁二酰大環(huán)內(nèi)酯菌素A中的一種以上作為有效成分。
2.根據(jù)權利要求1所述的具有抑制血管生成效果的藥物組合物，其特征在于，其含有大環(huán)內(nèi)酯菌素A作為有效成分。
3.根據(jù)權利要求1所述的具有抑制血管生成效果的藥物組合物，其特征在于，其含有 7-0-丙二酰大環(huán)內(nèi)酯菌素A作為有效成分。
4.根據(jù)權利要求1所述的具有抑制血管生成效果的藥物組合物，其特征在于，其含有 7-0- 丁二酰大環(huán)內(nèi)酯菌素A作為有效成分。
5.根據(jù)權利要求廣4中任一項所述的具有抑制血管生成效果的藥物組合物，其特征在于，由血管生成引起的疾病選自類風濕性關節(jié)炎、骨關節(jié)炎、膿毒性關節(jié)炎、牛皮癬、角膜潰瘍、老年性黃斑變性、糖尿病視網(wǎng)膜病變、增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變、未成熟視網(wǎng)膜病變、 眼科炎癥、圓錐形角膜、干燥綜合征、近視眼腫瘤、角膜移植排斥、異常傷口粘連、骨病、蛋白尿、腹主動脈瘤、外傷性關節(jié)損傷導致的退行性軟骨損失、神經(jīng)系統(tǒng)的脫髓鞘疾病、肝硬化、 腎小球疾病、未成熟胚胎胎膜破裂、炎癥性腸病、牙周疾病、動脈硬化癥、再狹窄、中樞神經(jīng)系統(tǒng)的炎癥性疾病、阿爾茨海默氏病、皮膚衰老和癌的浸潤及轉移中的一種以上。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種具有抗血管生成效果的組合物，其含有大環(huán)內(nèi)酯菌素A、7-O-丙二酰大環(huán)內(nèi)酯菌素A及7-O-丁二酰大環(huán)內(nèi)酯菌素A等大環(huán)內(nèi)酯類化合物作為有效成分。本發(fā)明提供的所述大環(huán)內(nèi)酯類化合物在活體內(nèi)實驗中強烈抑制新生血管的生成，可以用作預防或治療由血管生成引起的疾病的藥物組合物。
文檔編號A61P19/00GK103002892SQ201180035102
公開日2013年3月27日 申請日期2011年2月23日 優(yōu)先權日2010年7月16日
發(fā)明者池龍勳, 金桐熙, 金貞愛, 姜在璿, 鄭星旭, 黃星宇, 姜憬孌, 姜友拉 申請人:大宇制藥株式會社