專利名稱：雙吲哚生物堿類化合物，其藥物組合物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體地，涉及具有抗腫瘤活性的雙吲哚生物堿類化合 物，其衍生物，有機(jī)和無機(jī)酸鹽，含有該類化合物的藥物組合物及植物提取物，該類化合物 及其藥物組合物和提取物在制備治療或預(yù)防癌癥藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
腫瘤是世界難題。在中國(guó)每年新增160萬腫瘤病患者，每年有130萬腫瘤病患者 死亡。目前臨床上使用的化療藥物雖然有一定療效，但因其毒性大而給病人帶來巨大的肉 體痛苦和精神壓力，新的療效確切且毒副作用相對(duì)較小的抗腫瘤藥物的發(fā)現(xiàn)迫在眉睫。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供式(I)的雙吲哚生物堿類化合物，以及利用有機(jī)酸(酒 石酸，檸檬酸，甲酸，乙酸，乙二酸等)或無機(jī)酸(鹽酸，氫溴酸，硝酸，硫酸，磷酸等)制成的 鹽；其制備方法；其作為有效成分與可藥用載體或賦形劑組成的藥物組合物；以及式(I)的 雙吲哚生物堿類化合物或其藥用鹽在制備預(yù)防或治療肝癌、白血病、胰腺癌、乳腺癌及肺癌 的藥物中的用途。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明一方面涉及式(I)所示的雙吲哚類化合物或其藥學(xué)上 可接受的鹽，
(I)其中，各R1彼此獨(dú)立的是氫、C1,烷基、C1,醛基或C1,烷?；籖2是氫或任選被取代的C1,烷基，其中C1,烷基的取代基選自羥基、C1,烷氧基、 C1,酰氧基或下列所示的取代基 各R3彼此獨(dú)立的是氫、C1,烷氧基羰基、C2,烯基氧羰基、C2,炔基氧羰基或C6_1Q 芳基氧羰基；各R4彼此獨(dú)立的是氫、羥基、C1,烷氧基、C2_1Q烯基氧基、C2_1Q炔基氧基、C6_1Q芳基 氧基或C1,酰氧基；η是0-4的整數(shù)；R5是氫或任選被取代的C1,烷基和C2,烯基，其中C1,烷基和C2_1(1烯基的取代基 選自羥基、氧代基、羧基、C1,烷氧基、C2_10烯基氧基、C2,炔基氧基或C1,酰氧基；R6是氫或氧代C1,烷基，優(yōu)選氧代CV6烷基，更優(yōu)選氧代丙基；條件是當(dāng)R6是氫時(shí)，R5是未取代的C1,烷基且R2不是氫、R4不是羥基。本發(fā)明的另一方面涉及一種藥物組合物，其中含有式(I)化合物或其藥學(xué)上可接 受的鹽作為有效成分，并含有至少一種藥學(xué)上可接受的載體。本發(fā)明的又一方面涉及式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備治療或預(yù)防 增生性疾病或病癥的藥物中的應(yīng)用。所述的增生性疾病或病癥優(yōu)選為癌癥，更優(yōu)選肝癌、白 血病、胰腺癌、乳腺癌及肺癌。本發(fā)明還涉及一種狗牙花屬植物提取物，尤其是傘房狗牙花提取物，其用于治療 或預(yù)防增生性疾病或病癥，例如癌癥，特別是肝癌、白血病、胰腺癌、乳腺癌及肺癌。所述的 狗牙花屬植物提取物是從狗牙花屬植物，例如狗牙花Tabernaemontana divaricate、尖蕾 狗牙花T. bufalina、平脈狗牙花T. pandacaqui、傘房狗牙花T. corymbosa或藥用狗牙花 T. bovina等植物原料中用水或有機(jī)溶劑提取，優(yōu)選回流提取或浸提，經(jīng)分離純化而得。如果 有必要，與適當(dāng)?shù)乃岢甥}，所述的適當(dāng)?shù)乃徇x自鹽酸、氫溴酸、硝酸、硫酸、磷酸、酒石酸、檸 檬酸、甲酸、乙酸、乙二酸或其他適合的有機(jī)酸或無機(jī)酸。所述的有機(jī)溶劑選自醇類溶劑、酮類溶劑、酯類溶劑、醚類溶劑或商代烷類溶劑， 例如Cp6醇、C3_6酮、C3_6酯、C2_6醚或Ch6鹵代烷。其中所述的CV6醇包括例如甲醇、乙醇、 正丙醇、異丙醇、正丁醇、異丁醇、叔丁醇、正戊醇、異戊醇、環(huán)戊醇、正己醇、環(huán)己醇等。所述 的c3_6酮包括例如丙酮、甲乙酮、甲基異丁酮等。所述的c2_6醚包括例如甲醚、乙醚等。所述 的c3_6酯包括例如甲酸乙酯、乙酸乙酯丙酸乙酯等。所述的Ch6鹵代烴包括例如二氯甲烷、 氯仿、二氯乙烷等。如果有必要的話，可對(duì)式⑴化合物進(jìn)一步分離純化，其中包括將提取物經(jīng)酸化， 優(yōu)選PH = 1. 0 4. 5，用有機(jī)溶劑分配，水層堿化，優(yōu)選PH = 8. 0 11. 0，再用有機(jī)溶劑萃 取，分離有機(jī)溶劑層而得。如果有必要的話，還可包括用柱層析進(jìn)一步提高純度。所述的柱層析可以是硅膠 柱層析、C18柱層析、離子交換樹脂柱層析、葡聚糖凝膠層析等。例如經(jīng)硅膠柱層析，用氯 仿/甲醇梯度洗脫，分配比例為氯仿/甲醇10 0,20 1,10 1,8 1,5 1,3 1, 1 I0
6
具體地，取傘房狗牙花的莖葉粉碎，甲醇提取，調(diào)節(jié)pH = 1. 0-4. 5，乙酸乙酯萃取， 水層調(diào)節(jié)至PH = 8. 0-11. 0，乙酸乙酯萃取，萃取物濃縮，經(jīng)硅膠柱層析，氯仿-丙酮洗脫，得 粗產(chǎn)物，甲醇重結(jié)晶得純品。所述的藥學(xué)上可接受的鹽是指其與有機(jī)酸或無機(jī)酸形成的鹽，其中有機(jī)酸包括但 不限于酒石酸、檸檬酸、甲酸、乙酸、乙二酸，無機(jī)酸包括但不限于鹽酸、硫酸、磷酸、氫溴酸 鹽、硝酸鹽。本說明書中，術(shù)語“烷基“是指飽和的直鏈或支鏈烴基，優(yōu)選具有1-10個(gè)碳原子， 更優(yōu)選具有1-6個(gè)碳原子，更優(yōu)選具有1-4個(gè)碳。代表性的例子包括甲基、乙基、丙基、異丙 基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基等?！跋┗笔侵妇哂兄辽僖粋€(gè)碳碳雙鍵，直鏈或支鏈的脂族烴基，優(yōu)選具有2-10個(gè)碳 原子，更優(yōu)選具有2-6個(gè)碳原子，更優(yōu)選具有2-4個(gè)碳。代表性的例子包括乙烯基、丙烯基、 烯丙基、丁烯基、戊二烯基等?！叭不笔侵妇哂兄辽僖粋€(gè)碳碳三鍵，直鏈或支鏈的脂族烴基，優(yōu)選具有2-10個(gè)碳 原子，更優(yōu)選具有2-6個(gè)碳原子，更優(yōu)選具有2-4個(gè)碳。代表性的例子包括乙炔基、丙炔基、 丁炔基等。“?；?，，是指飽和的或不飽和的，直鏈或支鏈的，環(huán)狀或無環(huán)的脂族或芳香族羧酸 去掉羧基上的羥基形成的基團(tuán)，優(yōu)選具有1-10個(gè)碳原子，更優(yōu)選具有1-6個(gè)碳原子，更優(yōu)選 具有1-4個(gè)碳，代表性的例子包括甲?；⒁阴；?、丙?；?、丁?；?、苯甲酰基、萘甲?；?。“芳基”是指具有單環(huán)或雙環(huán)的芳香性基團(tuán)，它具有6-14個(gè)碳原子，優(yōu)選具有6-10 個(gè)碳原子，可以含有0-3個(gè)選自0、S、N、S(0)、S(02)的雜原子，并且可與其他環(huán)稠合。代表 性的例子包括苯基、萘基、呋喃基、喹啉基等。本發(fā)明式(I)所示的雙吲哚生物堿化合物的一般制備方法1、來源于植物及衍生化從狗牙花屬植物，例如狗牙花Tabernaemontana divaricata、尖蕾狗牙花 T. bufalina、平脈狗牙花T. pandacaqui、傘房狗牙花T. corymbosa或藥用狗牙花T. bovina 等植物原料中用水或有機(jī)溶劑提取，優(yōu)選回流提取或浸提，經(jīng)分離純化而得。如果有必要， 與適當(dāng)?shù)乃岢甥}，所述的適當(dāng)?shù)乃徇x自鹽酸、氫溴酸、硝酸、硫酸、磷酸、酒石酸、檸檬酸、甲 酸、乙酸、乙二酸或其他適合的有機(jī)酸或無機(jī)酸。所述的有機(jī)溶劑選自醇類溶劑、酮類溶劑、酯類溶劑、醚類溶劑或商代烷類溶劑， 例如Cp6醇、C3_6酮、C3_6酯、C2_6醚或Ch6鹵代烷。其中所述的CV6醇包括例如甲醇、乙醇、 正丙醇、異丙醇、正丁醇、異丁醇、叔丁醇、正戊醇、異戊醇、環(huán)戊醇、正己醇、環(huán)己醇等。所述 的c3_6酮包括例如丙酮、甲乙酮、甲基異丁酮等。所述的c2_6醚包括例如甲醚、乙醚等。所述 的c3_6酯包括例如甲酸乙酯、乙酸乙酯丙酸乙酯等。所述的Ch6鹵代烴包括例如二氯甲烷、 氯仿、二氯乙烷等。如果有必要的話，可對(duì)式(I)化合物進(jìn)一步分離純化，其中包括將提取物經(jīng)酸化， 優(yōu)選PH = 1. 0 4. 5，用有機(jī)溶劑分配，水層堿化，優(yōu)選PH = 8. 0 11. 0，再用有機(jī)溶劑萃 取，分離有機(jī)溶劑層而得。如果有必要的話，還可包括用柱層析進(jìn)一步提高純度。所述的柱層析可以是硅膠 柱層析、C18柱層析、離子交換樹脂柱層析、葡聚糖凝膠層析等。例如經(jīng)硅膠柱層析，用氯仿/甲醇梯度洗脫，分配比例為氯仿/甲醇10 0,20 1,10 1,8 1,5 1,3 1， 1 I0具體地，取傘房狗牙花的莖葉粉碎，甲醇提取，調(diào)節(jié)PH = 1. 0-4. 5，乙酸乙酯萃取， 水層調(diào)節(jié)至PH = 8. 0-11. 0，乙酸乙酯萃取，萃取物濃縮，經(jīng)硅膠柱層析，氯仿-丙酮洗脫，得 粗產(chǎn)物，甲醇重結(jié)晶得純品。更具體的方法為傘房狗牙花干燥莖、葉(14kg)，粉碎，甲醇浸回流提取3次，減壓 濃縮，調(diào)節(jié)PH = 2，乙酸乙酯萃取3次，減壓濃縮得非堿，酸水調(diào)節(jié)pH = 9-10，乙酸乙酯萃 取3次，75g硅膠拌樣，氯仿-丙酮洗脫。分為7份。II(4.5g)反相柱(160g)，50%-80% 甲醇。得到6份。II-5石油醚-丙酮(4 1-3 1)分得傘房狗牙花堿B(3g，新化合物)， 傘房狗牙花堿A (2g，新化合物)可選擇地，可對(duì)式(I)的雙吲哚化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾和衍生化，例如在吲哚環(huán)上 弓I入各種取代基團(tuán)，或?qū)ζ渌h(huán)上的取代基進(jìn)行變換和修飾。吲哚環(huán)上的取代基可通過例如中國(guó)專利CN101108859A的方法而引入。其中以式 (I-Ia)為原料，在適當(dāng)?shù)臏囟?-20°C 30°C)下，在無水二氯甲烷及三氟乙酸的混合溶劑 中與鹵代試劑反應(yīng)，得到鹵素取代的通式(I_lb、C、d)化合物，其中(I-Ib)和(I-Id)可進(jìn) 一步轉(zhuǎn)化為(I-Ic)，然后在過渡金屬催化下加熱40 150°C進(jìn)行反應(yīng)最終得到式(I)化合 物。 2、化學(xué)合成方法將構(gòu)成式(I)雙吲哚化合物的兩個(gè)吲哚單體分別通過前述方法在吲哚環(huán)或其他環(huán)上引入相應(yīng)的取代基進(jìn)行必要的修飾，然后在醇(例如甲醇、乙醇)溶液中經(jīng)酸催化，在 適當(dāng)?shù)臏囟认?例如常溫到回流的溫度，具體地20 80°C )進(jìn)行偶聯(lián)，從而得到式I化合 物。 本發(fā)明的式(I)化合物或其鹽可經(jīng)口或不經(jīng)過口給藥，給藥量因藥物不同而各有 不同，對(duì)成人來說，每天I-IOOOmg比較合適。經(jīng)口服給藥時(shí)，首先使化合物與常規(guī)的藥用輔劑如賦形劑、崩解劑、黏合劑、潤(rùn)滑 劑、抗氧化劑、包衣劑、著色劑、芳香劑、表面活性劑等混合，將其制成顆粒劑、膠囊、片劑等 形式給藥；非經(jīng)口給藥時(shí)可以注射液、輸液劑或栓劑等形式給藥。制備上述制劑時(shí)，可使用 常規(guī)的制劑技術(shù)。
具體實(shí)施例方式下面的試驗(yàn)實(shí)施例、實(shí)施例和制劑實(shí)施例可更詳細(xì)地說明本發(fā)明，但不以任何形 式限制本發(fā)明。試驗(yàn)實(shí)施例1 試驗(yàn)證明，本發(fā)明的通式(I)雙吲哚化合物對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株(SK-BR-3)，人肝癌 細(xì)胞株(SMMC7721)，人白血病細(xì)胞株(HL-60)，人胰腺癌細(xì)胞株(PANC-I)，人肺癌細(xì)胞株 (A549)生長(zhǎng)的半數(shù)抑制濃度(IC50)在0. 1-1000 μ M之間，具有預(yù)防或治療增生性疾病例如 癌癥的作用。實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果如下一、材料與方法1.樣品及制備樣品呈無色，二甲基亞砜(DMSO)溶解配制為10mg/ml濃度的貯存液避光保存?zhèn)溆谩?.細(xì)胞株SK-BR-3，人乳腺癌細(xì)胞株SMMC7721，人肝癌細(xì)胞株HL-60，人白血病細(xì)胞株P(guān)ANC-I，人胰腺癌細(xì)胞株
A549，人肺癌細(xì)胞株3.實(shí)驗(yàn)方法(1)接種細(xì)胞用含10%胎牛血清的培養(yǎng)液(DMEM或者RMPI1640)配成單個(gè)細(xì)胞 懸液，以每孔10000-20000個(gè)細(xì)胞接種到96孔板，每孔體積IOOul，貼壁細(xì)胞提前12小時(shí)接
種培養(yǎng)。(2)加入待測(cè)化合物溶液(化合物單體固定濃度40uM初篩，粗提物100ug/ml初 篩，在該濃度對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)抑制在50 %附近的化合物設(shè)5個(gè)濃度進(jìn)入梯度復(fù)篩)，每孔終 體積200ul，每種處理均設(shè)3個(gè)復(fù)孔。(3)顯色37攝氏度培養(yǎng)48小時(shí)后，每孔加MTT溶液20ul。繼續(xù)孵育4小時(shí)，終 止培養(yǎng)，小心吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液IOOul以避免細(xì)胞丟失，每孔加20%的SDSlOOul，過夜孵 育(溫度37°C )，使結(jié)晶物充分融解。(4)比色選擇595nm波長(zhǎng)，酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀(Bio-Rad 680)讀取各孔光吸收值， 記錄結(jié)果，以濃度為橫坐標(biāo)，細(xì)胞存活率為縱坐標(biāo)繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線，應(yīng)用兩點(diǎn)法(Reed and Muench法)計(jì)算化合物的IC50值。(5)陽性對(duì)照順鉬二、結(jié)果表1本發(fā)明化合物的抗腫瘤活性.(IC50，uM) 三、結(jié)論在本實(shí)驗(yàn)條件下，對(duì)以上包括人乳腺癌細(xì)胞株(SK-BR-3)，人肝癌細(xì)胞株 (SMMC7721)，人白血病細(xì)胞株(HL-60)，人胰腺癌細(xì)胞株(PANC-I)，人肺癌細(xì)胞株(A549) 生長(zhǎng)的半數(shù)抑制濃度(IC50)在0.66-23. 41 μΜ之間，依據(jù)中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志1993，24 455-457，周建軍等提出的評(píng)價(jià)抗腫瘤物質(zhì)活性的改良MTT法得出結(jié)論上述數(shù)據(jù)顯示了明 顯的抑制癌癥的作用。實(shí)施例1 提取分離傘房狗牙花Τ. corymbosa干燥莖、葉(14kg)，粉碎，甲醇浸回流提取3次，減壓濃 縮，調(diào)節(jié)pH = 2，乙酸乙酯萃取3次，減壓濃縮得非堿，酸水調(diào)節(jié)pH = 9-10，乙酸乙酯萃取 3次，75g硅膠拌樣，氯仿-丙酮洗脫。分為7份。11(4. 5g)反相柱(160g)，50 %-80 %甲 醇。得到6份。II-5石油醚-丙酮(4 1-3 1)分得傘房狗牙花堿A(3g)，傘房狗牙花 堿 B(2g).
傘房狗牙花堿AR = H 傘房狗牙花堿BR = CH2COCH3
傘房狗牙花堿A(Tabernaecorymbosine Α)的化學(xué)結(jié)構(gòu)式為
(II)分子量734，分子式C44H54N4O615旋光[α ]17D = -75°。白色粉末。易溶于氯仿，丙 酮，甲醇，微溶于水。傘房狗牙花堿ACTabernaecorymbosine A)的結(jié)構(gòu)是基于它的紫外光譜、紅外光 譜、質(zhì)譜和核磁共振譜特別是二維核磁共振譜而確定。紫外光譜數(shù)據(jù)=UVλ (max) (MeOH) 225 (4. 72)，286 (4. 15)，294 (4. 11)紅外光譜數(shù)據(jù)JR ν (max) (KBr) :3407，2928，1725，1619，1461質(zhì)譜數(shù)據(jù)HR-ESI-MS(m/z)735. 4131 ([M+H]+)
1H匪R和13C匪R數(shù)據(jù)見表2。以上數(shù)據(jù)結(jié)合2D NMR分析證實(shí)了傘房狗牙花堿ACTabernaecorymbosine A)的化 學(xué)結(jié)構(gòu)為式(II)所示。傘房狗牙花堿B (Tabernaecorymbosine B)的化學(xué)結(jié)構(gòu)式為 分子量790，分子式C47H58N407。旋光[α ] 17D = -98°。白色粉末。易溶于氯仿，丙 酮，甲醇，微溶于水。傘房狗牙花堿B(Tabernaecorymbosine B)的結(jié)構(gòu)是基于它的紫外光譜、紅外光 譜、質(zhì)譜和核磁共振譜特別是二維核磁共振譜而確定。紫外光譜數(shù)據(jù)UVλ (max) (MeOH) 224 (4. 56)，286 (3. 98)，294 (3. 96)紅外光譜數(shù)據(jù)=IRν (max) (KBr) =3415,2930,1724，1620，1641質(zhì)譜數(shù)據(jù)HR-ESI-MS(m/z) :791· 4388 ([M+H]+)1HNMR 和 13C NMR 數(shù)據(jù)見表 1。以上數(shù)據(jù)結(jié)合2D NMR分析證實(shí)了傘房狗牙花堿B (Tabernaecorymbosine B)的化 學(xué)結(jié)構(gòu)為式(II I)所示。表1.傘房狗牙花堿 A、B (Tabernaecorymbosines Α、B)的1H NMR 禾Π 13CNMR 數(shù)據(jù) (CD3OD) (JinHz. δ in ppm) 實(shí)施例2 按實(shí)施例1的方法先制得傘房狗牙花堿A、B (tabernaecorymbosine A、 B)，加入4 %的硫酸乙醇溶液，pH = 4，過濾，干燥，制成硫酸傘房狗牙花堿A、 B(tabernaecorymbosineA、B)。實(shí)施例3 按實(shí)施例1的方法制得傘房狗牙花堿A、B (tabernaecorymbosine A、B)，加入4% 的鹽酸酸溶液，pH = 4，過濾，干燥，制成鹽酸傘房狗牙花堿A、B (tabernaecorymbosineA、 B)。實(shí)施例4:
按實(shí)施例1的方法制得傘房狗牙花堿A、B (tabernaecorymbosineA, B)，加入4% 的磷酸酸溶液，PH = 4，過濾，干燥，制成磷酸傘房狗牙花堿A、B(tabernaecorymbosine A、 B)。實(shí)施例5:按實(shí)施例1的方法制得傘房狗牙花堿A、B (tabernaecorymbosineA, B)，加入4% 的酒石酸溶液，PH = 4，過濾，干燥，制成酒石酸傘房狗牙花堿A、B (tabernaecorymbosineA, B)。實(shí)施例6:按實(shí)施例1的方法制得傘房狗牙花堿A、B (tabernaecorymbosineA, B)，加入4% 的檸檬酸溶液，PH = 4，過濾，干燥，制成檸檬酸傘房狗牙花堿A、B(tabernaeC0rymb0SineA、 B)。實(shí)施例7:按實(shí)施例1的方法制得傘房狗牙花堿A、B(tabernaecorymbosineA、B)，加入4%的 甲酸溶液，PH = 4，過濾，干燥，制成甲酸傘房狗牙花堿A、B(tabernaecorymbosineA、B)。實(shí)施例8:按實(shí)施例1的方法制得傘房狗牙花堿A、B (tabernaecorymbosineA, B)，加入4% 的乙二酸溶液，PH = 4，過濾，干燥，制成乙二酸傘房狗牙花堿A、B(tabernaecorymbosineA、 B)。實(shí)施例9將傘房狗牙花堿A、B在適當(dāng)?shù)臏囟?-20 30°C)下溶于無水二氯甲烷及三氟乙 酸的混合溶劑中，與NBS反應(yīng)得到10-溴代傘房狗牙花堿A，然后將其溶于水，在過渡金屬催 化下加熱至75°C進(jìn)行反應(yīng)得到10-羥基傘房狗牙花堿A。類似地，可以制備以下的式I化合物(見表5)。表5本發(fā)明式I化合物的結(jié)構(gòu) 制劑實(shí)施例1:按實(shí)施例1-16的方法先制得傘房狗牙花堿A、B,以及利用有機(jī)酸(酒石酸，檸檬 酸，甲酸，乙二酸等)或無機(jī)酸(鹽酸，硫酸，磷酸等)制成的鹽，按常規(guī)加注射用水，精濾， 灌封滅菌制成注射液。制劑實(shí)施例2:
按實(shí)施例1-16的方法先制得傘房狗牙花堿A、B,以及利用有機(jī)酸(酒石酸，檸檬 酸，甲酸，乙二酸等)或無機(jī)酸(鹽酸，硫酸，磷酸等)制成的鹽，將其溶于無菌注射用水中， 攪拌使溶，用無菌抽濾漏斗過濾，再無菌精濾，分裝于2安瓿中，低溫冷凍干燥后無菌熔封 得粉針劑。制劑實(shí)施例3:將按實(shí)施例1-16的方法所分離得到傘房狗牙花堿A、B,以及利用有機(jī)酸(酒石 酸，檸檬酸，甲酸，乙二酸等)或無機(jī)酸(鹽酸，硫酸，磷酸等)制成的鹽，與賦形劑重量比為 9 1的比例加入賦形劑，制成粉劑。制劑實(shí)施例4:按實(shí)施例1-16的方法先制得傘房狗牙花堿A、B,以及利用有機(jī)酸(酒石酸，檸檬 酸，甲酸，乙二酸等)或無機(jī)酸(鹽酸，硫酸，磷酸等)制成的鹽，按其與賦形劑重量比為 1:5-1: 10的比例加入賦形劑，制粒壓片。制劑實(shí)施例5:按實(shí)施例1-16的方法先制得傘房狗牙花堿A、B,以及利用有機(jī)酸(酒石酸，檸檬 酸，甲酸，乙二酸等)或無機(jī)酸(鹽酸，硫酸，磷酸等)制成的鹽，按常規(guī)口服液制法制成口 服液。制劑實(shí)施例6:按實(shí)施例1-16的方法先制得傘房狗牙花堿A、B,以及利用有機(jī)酸(酒石酸，檸檬 酸，甲酸，乙二酸等)或無機(jī)酸(鹽酸，硫酸，磷酸等)制成的鹽，按其與賦形劑重量比為 5 1的比例加入賦形劑，制成膠囊或顆粒劑或沖劑。制劑實(shí)施例7:按實(shí)施例1-16的方法先制得傘房狗牙花堿A、B,以及利用有機(jī)酸(酒石酸，檸檬 酸，甲酸，乙二酸等)或無機(jī)酸(鹽酸，硫酸，磷酸等)制成的鹽，按其與賦形劑重量比為 3 1的比例加入賦形劑，制成膠囊或顆粒劑或沖劑。
權(quán)利要求
如式(I)所示的雙吲哚化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中，各R1彼此獨(dú)立的是氫、C1 10烷基、C1 10醛基或C1 10烷?；?；R2是氫或任選被取代的C1 10烷基，其中C1 10烷基的取代基選自羥基、C1 10烷氧基、C1 10酰氧基或下列所示的取代基；各R3彼此獨(dú)立的是氫、C1 10烷氧基羰基、C2 10烯基氧羰基、C2 10炔基氧羰基或C6 10芳基氧羰基；各R4彼此獨(dú)立的是氫、羥基、C1 10烷氧基、C2 10烯基氧基、C2 10炔基氧基、C6 10芳基氧基或C1 10酰氧基；n是0 4的整數(shù)；R5是氫、或任選被取代的C1 10烷基和C2 10烯基，其中C1 10烷基和C2 10烯基的取代基選自羥基、氧代基、羧基、C1 10烷氧基、C2 10烯基氧基、C2 10炔基氧基或C1 10酰氧基；R6是氫或氧代C1 10烷基；條件是當(dāng)R6是氫時(shí)，R5是未取代的C1 10烷基且R2不是氫、R4不是羥基。FSA00000007345300011.tif,FSA00000007345300012.tif
2.如權(quán)利要求1所述的雙吲哚化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R6是氧代C1,烷基。
3.如權(quán)利要求1所述的雙吲哚化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R6是氧代CV6烷基。
4.如權(quán)利要求1所述的雙吲哚化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R6是2-氧代丙基。
5.如權(quán)利要求1所述的雙吲哚化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中通過吲哚環(huán)的 3-12'位連接。
6.如權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)的雙吲哚化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R2是被羥基取 代的C1,烷基。
7.如權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)的雙吲哚化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R2是被羥基取 代的Cp6烷基。
8.如權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)的雙吲哚化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R2是羥甲基。
9.如權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)的雙吲哚化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R5是未取代的C1-X0焼基。
10.如權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)的雙吲哚化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，R5是乙基或并烯基。
11.如權(quán)利要求1所述的雙吲哚化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其選自 R6 = H 或 R6 = CH2COCH3
12.如權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的雙吲哚化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述的 藥學(xué)上可接受的鹽選自鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、甲 酸鹽、乙酸鹽、乙二酸鹽。
13.如權(quán)利要求1-12任一項(xiàng)的雙吲哚化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法，其特 征在于從狗牙花屬植物中用水或有機(jī)溶劑提取分離而得；需要時(shí)進(jìn)一步與適當(dāng)?shù)乃岢甥}， 適當(dāng)?shù)乃徇x自鹽酸、氫溴酸、硝酸、硫酸、磷酸、酒石酸、檸檬酸、甲酸、乙酸、乙二酸或其他適 合的有機(jī)酸或無機(jī)酸。
14.如權(quán)利要求13的制備方法，其中所述的狗牙花屬植物選自狗牙花 Tabernaemontana divaricata^^^^^^T. bufalina>^PI/JC^^1^Τ. pandacaqui>^^^ 牙花Τ. corymbosa或藥用狗牙花Τ. bovina。
15.如權(quán)利要求14的制備方法，其中所述的狗牙花屬植物選自傘房狗牙花 Tabernaemontana corymbose。
16.如權(quán)利要求13-15任一項(xiàng)的制備方法，其中提取用的有機(jī)溶劑選自醇類溶劑、酮類 溶劑、酯類溶劑、醚類溶劑或商代烷類溶劑。
17.如權(quán)利要求16的制備方法，其中提取用的有機(jī)溶劑選自甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙 酯、氯仿或石油醚。
18.如權(quán)利要求17的制備方法，其特征在于取傘房狗牙花的莖葉粉碎，甲醇提取，調(diào)節(jié) PH= 1. 0-4. 5，乙酸乙酯萃取，水層調(diào)節(jié)至pH = 8. 0-11. 0，乙酸乙酯萃取，萃取物濃縮，經(jīng)硅 膠柱層析，氯仿_丙酮洗脫，得粗產(chǎn)物，甲醇重結(jié)晶得純品。
19.狗牙花提取物，由權(quán)利要求13-18任一項(xiàng)的方法制備而得。
20.藥物組合物，其含有權(quán)利要求1-12任一項(xiàng)的雙吲哚化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 作為有效成分，至少還包含一種藥學(xué)上可接受的載體。
21.藥物組合物，其含有權(quán)利要求19的狗牙花提取物作為有效成分，至少還包括一種藥學(xué)上可接受的載體。
22.權(quán)利要求1-12任一項(xiàng)所述的雙吲哚化合物或其藥用鹽或權(quán)利要求19所述的狗牙 花提取物或權(quán)利要求20所述的藥物組合物在制備預(yù)防或治療人或動(dòng)物增生性疾病或病癥 的藥物中的應(yīng)用。
23.如權(quán)利要求22的應(yīng)用，所述的增生性疾病或病癥是癌癥。
24.如權(quán)利要求23的應(yīng)用，所述的增生性疾病或病癥是白血病、肝癌、肺癌、乳腺癌、胰 腺癌。
全文摘要
式(I)所示的具有抗腫瘤活性的雙吲哚生物堿類化合物，其制備方法，含有該類化合物的藥物組合物和植物提取物，該類化合物及其藥物組合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，特別是在制備治療和預(yù)防白血病、肝癌、肺癌、乳腺癌、胰腺癌等疾病的藥物中的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61K36/24GK101928293SQ20101010173
公開日2010年12月29日 申請(qǐng)日期2010年1月27日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月27日
發(fā)明者李艷, 羅曉東, 蔡祥海 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所