一種新的吲哚生物堿類化合物及其制備方法和醫(yī)藥用圖
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種新的吲哚生物堿類化合物及其制備方法和醫(yī)藥用途。該化合物為首次報道，是一種結(jié)構(gòu)新穎的吲哚生物堿類化合物，可以從蕪菁的干燥根中提取、分離純化得到。體外試驗證明該化合物能夠抑制腎癌細(xì)胞株RC?2增殖，這種抑制呈濃度及時間依賴性，可以用來開發(fā)成治療腎癌的藥物。
【專利說明】
一種新的吲哚生物堿類化合物及其制備方法和醫(yī)藥用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及從蕪菁的干燥根中分離得到的一種具有治療 腎癌作用的吲哚生物堿類化合物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 蕪菁rapa L.)也叫蔓菁、莞根，是十字花科，蕓苔屬，二年生草本，全國 各地均有栽培。維吾爾語稱為"恰瑪古"，是維吾爾醫(yī)藥常用藥材，種子或根為其藥用部分。 《晶珠本草》記載:妞瑪為作物類藥物，其植物為蕪菁(蔓菁）。蔓菁味辛，性溫。治培根病，龍 病、生赤巴，蔓菁連葉滋補，蔓菁子解毒，解諸種食物中毒。各地均以十字花科蕪菁(又稱莞 根)入藥。中醫(yī)認(rèn)為，蕪菁味甘、辛、苦，性溫，無毒;入胃、肝、腎三經(jīng);具有開胃消食，下氣寬 中，止咳化痰，利濕解毒，溫和脾胃之功效。對治療寒積腹痛、食欲不振、食積不化、黃疽、乳 癰以及皮膚癤腫等癥效果顯著。在《本草綱目》《太平圣惠方》《世醫(yī)得效方》中早有記載，稱 其具有美容、醒酒、促進(jìn)消化，增強體質(zhì)等功效。《達(dá)吾得志》中記載："清除多余體液，利尿退 月中，消除黃疽，清退傷寒，消除腰痛，祛斑生輝等:治異常體液增多，各種浮腫，各種黃疽，各 種傷寒，腰部酸痛，各種黑斑等。"《藥物寶庫》中記載："潤肺止咳，軟腸通便，開胃增食，溶石 排石，通利小便等，治肺燥咳嗽，腸燥便秘，胃納不佳，各種結(jié)石，小便不利等。" 蕪菁對環(huán)境的適應(yīng)性強，且在少數(shù)民族中有著悠久的食用歷史，同時其重要的藥用價 值逐漸受到人們的關(guān)注。研究表明，蕪菁含有如下化學(xué)成分:皂苷、黃酮類、糖類及其苷、生 物堿類、揮發(fā)油、酚類、鞣質(zhì)、氨基酸、蛋白質(zhì)等。
[0003] 現(xiàn)在藥理研究表明蕪菁具有抗氧化、清除自由基作用，抗腫瘤、抗癌作用，降血糖 作用，抗缺氧活性，抑菌作用，抗疲勞作用等。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種從蕪菁的干燥根中分離得到的一種具有治療腎癌作用 的吲哚生物堿類化合物及其制備方法。
[0005] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實現(xiàn)的： 具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I)，
[0006] 所述的化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟:（a)將蕪菁的干燥根粉碎，用80 ~90%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正 丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中乙酸乙 酯萃取物用大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫6個柱體積，再用75%乙醇洗脫10個柱體積，收 集75%乙醇洗脫液，減壓濃縮得75%乙醇洗脫物浸膏；（c)步驟(b)中75%乙醇洗脫浸膏用正相 硅膠分離，依次用體積比為85 :1、55:1、25:1、10:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到5個 組分；（d)步驟(c)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為15:1、10:1和5:1的二氯 甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分 離，用體積百分濃度為70%的甲醇水溶液等度洗脫，收集8~10個柱體積洗脫液，洗脫液減壓 濃縮得到純的化合物(I)。
[0007]進(jìn)一步地，所述大孔樹脂為AB-8型大孔吸附樹脂。
[0008] 進(jìn)一步地，所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為85%。
[0009] -種藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物（I)和藥學(xué)上可接受的載 體。
[0010] 所述的化合物(I)在制備治療腎癌的藥物中的應(yīng)用。
[0011] 所述的藥物組合物在制備治療腎癌的藥物中的應(yīng)用。
[0012] 本發(fā)明化合物用作藥物時，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。
[0013] 該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I)，其余為藥物學(xué)上可接受的、對 人和動物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0014] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等;用于注射時，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
【附圖說明】
[0015] 圖1為化合物⑴結(jié)構(gòu)式。
[0016] 圖2為化合物（I)理論E⑶值與實驗E⑶值比較。
【具體實施方式】
[0017]下面結(jié)合實施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實施例對本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和范圍。
[0018] 實施例1:化合物(I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證 試劑來源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷為分析純，購自上海凌峰化學(xué)試 劑有限公司，甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學(xué)試劑有限公司。
[0019] 制備方法：（a)將蕪菁的干燥根(8kg)粉碎，用85%乙醇熱回流提?。?5LX 3次），合 并提取液，濃縮至無醇味(3L)，依次用石油醚(3L X 3次）、乙酸乙酯(3L X 3次)和水飽和的正 丁醇(3LX3次)萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(345g)和正丁醇萃取物；（b) 步驟(a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8型大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫6個柱體積，再用75% 乙醇洗脫10個柱體積，收集75%乙醇洗脫液，減壓濃縮得75%乙醇洗脫物浸膏（133g);(c)步 驟(b)中75%乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為85:1 (8個柱體積）、55:1 (8個柱 體積）、25:1(6個柱體積）、10:1(8個柱體積)和1:1(5個柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫 得到5個組分；（d)步驟(c)中組分4(27g)用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為15:1(8個 柱體積）、10 :1(10個柱體積）和5:1(6個柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分； (e)步驟(d)中組分2(13g)用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為70%的 甲醇水溶液等度洗脫，收集8-10個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I) (32mg)〇
[0020] 結(jié)構(gòu)確證：白色粉末;冊43頂3顯示[]\?^]+為111/2 387.1306，結(jié)合核磁特征可得 分子式為C2iH2QN2〇4，不飽和度為13。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)δ Η(ppm，DMSO-?，600MHz ) : H-6(2.51， m),H-6(2.76,m),H-9(7.62,d,/=7.7),H-10(6.87,t,/=7.7),H-ll(7.09,t,/=7.7),H-12 (6.76,d,/=7.7),H-14(5.85,d,/=9.9),H-15(6.47,d,/=9.9),H-17(2.00,d,/=15.4),H-17 (2.53,d,/=15.4),H-18(0.70,t,/=7.4),H-19(0.97,m),H-19(1.03,m),H-21(4.32,d,/= 1.5)，16-C0 2Me(3.72, s)，NH( 10.72，br，s);核磁共振碳譜數(shù)據(jù) Sc(ppm，DMS〇-c/i；，150MHz): 166.4(C，2-C)，162.1(C，3-C)，175.6(C，5-C)，44.5(CH2,6-C)，55.7(C，7-C)，134.6(C，8-C)，124.2(CH，9-C)，120.9(CH，10-C)，127.7(CH，11-C)，109.0(CH，12-C)，142.3(C，13-C)， 122.2(CH，14-C)，147.3(CH，15-C)，88.9(C，16-C)，25.1(CH2，17-C)，7.1(CH 3，18-C)，25.9 (CH2，19-C)，40.3(C，2〇-C)，66.1(CH，21-C)，168.1(C，16-C〇2Me)，50.8(CH 3，16-C〇2Me);碳 原子標(biāo)記參見圖1。IR光譜表明該化合物含有胺基，羥基(3382CHT1)和酯羰基（1726CHT 1) ,Η NMR譜顯示四個芳族共振信號（δΗ6.76，6.87，7.09，7.62)，一個吲哚ΝΗ( δΗΙΟ. 72)，一個酯甲 基（δΗ3.72)，兩個烯屬次甲基信號0!15.85，(1，/=9.9他；6.47，(1，/=9.9他）以及一個乙基側(cè) 鏈（δΗΟ. 70，0.97和1.03)。13(：匪R譜26個碳顯示了21個碳信號，包括兩個甲基（一個甲氧 基），三個亞甲基，七個次甲基(六個烯屬次甲基），以及九個季碳。R0ESY譜中，Η-21與Me-18， 以及H-21與H-19a的相關(guān)性表明了 H-21和C-20位的乙基為α構(gòu)型。綜合氫譜、碳譜、HMBC譜和 R0ESY譜，以及文獻(xiàn)關(guān)于相關(guān)類型核磁數(shù)據(jù)，可基本確定該化合物如圖1所示，立體構(gòu)型進(jìn)一 步通過Ε⑶試驗確定，理論值與實驗值基本一致(圖2)。
[0021] 實施例2:化合物(I)藥理作用試驗 一、材料和儀器 人腎癌RC-2細(xì)胞株購于ATCC細(xì)胞庫(美國）。分析純蔗糖購于國藥集團(tuán)化學(xué)試劑公司。 重水(D20)購于青島騰龍微波科技有限公司。Tris、SDS、30%丙烯酰胺單體、Tween20購于重 慶醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)研究所實驗室。小牛血清、RPMI-1640購于美國Gibco公司。Centriplus離心 超濾管、Amicon Ultra高回收率高流速切向流超濾離心管（100kD)、PVDF膜購于Millipore 公司。SDS-PAGE凝膠配制試劑盒購于上海安亭科學(xué)儀器廠。5XSDS-PAGE蛋白質(zhì)上樣緩沖 液、BeyoECL熒光檢測試劑、考馬斯亮藍(lán)G250、考馬斯亮藍(lán)R250購于碧云天生物技術(shù)研究所。 化合物（I)自制，HPLC歸一化純度大于98%。鼠抗人HSP70單克隆抗體、兔抗人ICAM-1單克隆 抗體、兔抗人G250多克隆抗體購于Sigma公司。兔抗人Survivin多克隆抗體武漢博士德生物 有限公司。
[0022] 超凈工作臺（蘇州華新空調(diào)凈化有限公司），自動平衡離心機(jī)(上海醫(yī)用分析儀器 廠），光學(xué)顯微鏡(NIKON，日本），透射電子顯微鏡(LeicaTCS-NT，德國），低溫高速離心機(jī)（日 立公司，日本），低溫超高速離心機(jī)H-80B(日立公司，日本）。垂直電泳槽、電轉(zhuǎn)槽(北京六一 廠，中國）。臺式高速離心機(jī)、酶標(biāo)儀(上海安亭科學(xué)儀器廠，中國）。96孔培養(yǎng)板(Corning公 司，美國）。凝膠儀、PCR擴(kuò)增儀(BI0-RAD，美國）。
[0023]二、試驗方法 1、MTT檢測化合物（I)不同濃度48h對腎癌細(xì)胞株RC-2增殖的影響 用含10%小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液(含有0.1%青霉素、鏈霉素)常規(guī)培養(yǎng)人腎癌細(xì)胞 株RC-2，根據(jù)細(xì)胞生長密度1~2天換液一次，3天傳代一次。取對數(shù)期生長細(xì)胞，按照如下步 驟操作：（1)接種細(xì)胞：胰酶消化對數(shù)生長期的腎癌RC-2細(xì)胞，用含10%小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液lmL制成單細(xì)胞懸液，混勻后用移液管按照體積100μL孔，即接種腎癌細(xì)胞數(shù)目 5 X 103個/孔，加入96孔培養(yǎng)板中。每組細(xì)胞設(shè)置3個復(fù)孔；（2)培養(yǎng)細(xì)胞:將培養(yǎng)板小心置入 孵箱中（37 °C、5%C02)培養(yǎng)3天；（3)處理細(xì)胞：分別按空白組（加 5yL DMS0液）、0.25、0.5、 0.75、lymol/L化合物（I)處理組分組后加藥處理48h; (4)顯色:在各個時間點，予以每孔各 加入MTT溶液20yL，之后繼續(xù)放入孵箱中孵育4h，然后小心把孔內(nèi)培養(yǎng)液用注射器吸去；對 于當(dāng)天接種的細(xì)胞而言，離心之后（l〇〇〇rpm，5min)，然后將孔內(nèi)培養(yǎng)液移除。之后把150yL DMS0加入每孔，使其充分振蕩lOmin后，把結(jié)晶物溶解完全；（5)比色：在全自動酶標(biāo)儀上檢 測各孔在580nm波長下的光密度值[(D580)]，按公式測定細(xì)胞活力:D(580)實驗孔/D(580) 對照孔X 100%。
[0024] 2、MTT檢測0.5μΜ化合物（I)不同時間對腎癌細(xì)胞株RC-2增殖的影響 接種和處理細(xì)胞及顯色和比色步驟同上（1)、（2)、（4)、（5)，處理細(xì)胞:分別按空白組 (加5yL DMS0液）、0·5μΜ化合物（I)處理24h、48h、72h分組。
[0025] 3、制備 exosomes (1)細(xì)胞分組:取6份細(xì)胞計數(shù)相近的人腎癌RC-2細(xì)胞株體外常規(guī)培養(yǎng)，其中三份為對 照組(CE)，另外三份為實驗組(CE2)，等細(xì)胞呈對數(shù)生長時，兩組細(xì)胞株按照3 X 106/100mL 重新傳代至新的培養(yǎng)瓶，嚴(yán)格控制每組細(xì)胞培養(yǎng)基的體積一致;在實驗組，等細(xì)胞培養(yǎng)48h 后加入0.5μΜ的化合物（I)處理細(xì)胞48h，之后收集培養(yǎng)上清液各150 mL;對照組不加藥物， 加入與實驗組等量的DMS0,48h后收集培養(yǎng)上清液各150mL，置于-20°C冰箱保存；（2)提取 exosomes:培養(yǎng)上清液150mL，300g低溫離心（4°C )10min去除細(xì)胞;800g低溫離心30min獲取 上清10000g低溫離心30min獲取上清通過100kD MW⑶Centriplus離心超濾管濃縮超濾 (MWC0:分子量截留），以1000g離心30min，得到約20mL超濾液。將超濾液分別移至2mL含30g/ L的蔗糖重水墊的10mL的離心管中，100000g低溫超速離心lh。收集離心管底部的緩沖墊用 PBS稀釋，置于100kD MWC0高回收率高流速切向流超濾離心管中1000g離心30min，得到3mL exosome。。. 22μηι濾膜過濾除菌，_80°C保存?zhèn)溆迷O(shè)置對照組細(xì)胞(CE1)來源的exosomes為 EX1 組 exosomes，實驗組細(xì)胞(CE2)來源的 exosomes 為EX2 組 exosomes。
[0026] 4、BCA法檢測exosomes蛋白含量 (1)測定方法:取96孔酶標(biāo)板，按下表加入試劑并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：

上述試劑加完后，準(zhǔn)確吸取l〇yL樣品溶液于酶標(biāo)孔中，加入BCA試劑200yL，輕搖，于37 °C保溫30min，冷卻至室溫后，以空白為對照，在酶標(biāo)儀上562nm處比色，以牛血清白蛋白含 量為橫坐標(biāo)，以吸光值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。以標(biāo)準(zhǔn)曲線空白為對照，根據(jù)樣品的吸光 值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出樣品的蛋白質(zhì)濃度；（2)計算方法:exosome濃縮液總蛋白質(zhì)含量(mg)= 濃縮后的總體積X BCA法測定蛋白質(zhì)濃度。重復(fù)6次實驗，取平均值做統(tǒng)計學(xué)分析。
[0027] 5、統(tǒng)計學(xué)方法 使用軟件GRAGHPAD PRISM 5.0進(jìn)行圖表制作及統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料以X ±s表示， 比較組間差異使用方差分析或t檢驗。
[0028]三、結(jié)果及結(jié)論 1、MTT顯示不同濃度化合物（I)作用腎癌細(xì)胞株RC-2后細(xì)胞活力變化 MTT結(jié)果顯示當(dāng)化合物（I)濃度0.75μΜ作用細(xì)胞時，細(xì)胞活力(71.32 ± 4.68%)與化合物 (1)濃度0.5以1及0.25以1作用細(xì)胞時細(xì)胞組（91.43±2.74%;94.67±1.21%)相比，差異具有 統(tǒng)計學(xué)意義(Ρ〈〇.〇5)。
[0029] 2、ΜΤΤ顯示0·5μΜ化合物（I)不同時間作用腎癌細(xì)胞株RC-2后細(xì)胞活力變化 11'1'結(jié)果顯示當(dāng)0.5以]?化合物（1)作用細(xì)胞7211組(71.34±1.64%)與作用4811組(91.04± 6 · 23%)、24h組(94· 56± 1 · 13%)對比，細(xì)胞活力差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(Ρ〈0 · 05)。
[0030] 3、Exosomes計數(shù)和蛋白定量 電鏡下實驗組(EX2)和對照組(EXl)exosomes計數(shù)和exosomes蛋白定量結(jié)果:經(jīng)化合物 (I)處理后，RC-2細(xì)胞產(chǎn)生的exosomes數(shù)量和exosome蛋白含量較未經(jīng)藥物處理組都明顯增 加，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P〈〇. 05)。結(jié)果見表1。
[0031]結(jié)果說明，化合物（I)能夠抑制腎癌細(xì)胞株RC-2增殖，這種抑制呈濃度及時間依賴 性。經(jīng)化合物（I)處理后，透射電鏡觀察腎癌細(xì)胞株RC-12源性exosomes形態(tài)未見明顯改變， 其分泌量和蛋白含量較處理前明顯增加(P<〇. 05)，這些說明化合物（I)對腎癌細(xì)胞株RC-12的抑制作用與化合物（I)引起的腎癌細(xì)胞RC-2表達(dá)野生型p53mRNA上調(diào)有關(guān)。
[0032] 表1實驗組和對照組分泌exosomes數(shù)量及蛋白含量對比
實施例3 片劑的制備:按實施例1方法先制得化合物(I )，以及利用有機(jī)酸如酒石酸、或檸檬酸或 甲酸或乙二酸等、無機(jī)酸如鹽酸或硫酸或磷酸制成的鹽，按其與賦形劑重量比為1:9的比例 加入賦形劑，制粒壓片。
[0033] 實施例4 口服液制備:按實施例1方法先制得化合物(I )，以及利用有機(jī)酸如酒石酸、或檸檬酸或 甲酸或乙二酸等、無機(jī)酸如鹽酸或硫酸或磷酸制成的鹽，按常規(guī)口服液制法制成口服液。
[0034] 實施例5 膠囊劑或顆粒劑的制備:按實施例1方法先制得化合物(I)，以及利用有機(jī)酸如酒石酸、 或檸檬酸或甲酸或乙二酸等、無機(jī)酸如鹽酸或硫酸或磷酸制成的鹽，按其與賦形劑重量比 為1:9的比例加入賦形劑，制成膠囊或顆粒劑。
[0035] 實施例6 注射液的制備:按實施例1方法先制得化合物(I )，以及利用有機(jī)酸如酒石酸、或檸檬酸 或甲酸或乙二酸等、無機(jī)酸如鹽酸或硫酸或磷酸制成的鹽，按常規(guī)加注射用水，精濾，灌封 滅菌制成注射液。
[0036] 實施例7 無菌粉針的制備:按實施例1方法先制得化合物(I)，以及利用有機(jī)酸如酒石酸、或檸檬 酸或甲酸或乙二酸等、無機(jī)酸如鹽酸或硫酸或磷酸制成的鹽，將其溶于無菌注射用水中，攪 拌使溶，用無菌抽濾漏斗過濾，再無菌精濾，分裝于安瓿中，低溫冷凍干燥后無菌熔封得粉 針劑。
[0037] 上述實施例的作用在于說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明的保護(hù) 范圍。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換， 而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和保護(hù)范圍。
【主權(quán)項】
1. 具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I)，2. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于包含W下操作步驟：（a)將憲菁 的干燥根粉碎，用80~90%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油酸、乙酸 乙醋和水飽和的正下醇萃取，分別得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物； (b)步驟(a)中乙酸乙醋萃取物用大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫6個柱體積，再用75%乙醇 洗脫10個柱體積，收集75%乙醇洗脫液，減壓濃縮得75%乙醇洗脫物浸膏；（C)步驟(b)中75% 乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為85:1、55:1、25:1、10:1和1:1的二氯甲燒- 甲醇梯度洗脫得到5個組分；（d)步驟(C)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為 15:1、10:1和5:1的二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基 硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為70%的甲醇水溶液等度洗脫，收集8~10個柱體 積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物(I)。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:所述大孔樹脂為AB-8型 大孔吸附樹脂。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:所述用乙醇熱回流提取 采用的乙醇濃度為8 5%。5. -種藥物組合物，其特征在于：其中含有治療有效量的權(quán)利要求1所述的化合物（I) 和藥學(xué)上可接受的載體。6. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)在制備治療腎癌藥物中的應(yīng)用。7. 權(quán)利要求5所述的藥物組合物在制備治療腎癌藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號】A61P13/12GK106083863SQ201610385342
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年6月3日 公開號201610385342.9, CN 106083863 A, CN 106083863A, CN 201610385342, CN-A-106083863, CN106083863 A, CN106083863A, CN201610385342, CN201610385342.9
【發(fā)明人】莊愛華
【申請人】莊愛華