專利名稱：作為5ht的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有5HT4-拮抗性能的式(I)的新穎化合物。本發(fā)明進(jìn)一步涉及制備這種新穎的化合物的方法，包括所述新穎的化合物的藥物組合物以及所述化合物作為藥物的用途。
WO-00/37461公開了具有5HT4-拮抗性能的3-或4-取代的4-(氨甲基)-哌啶衍生物的雙環(huán)苯甲酰胺。
本發(fā)明的化合物在結(jié)構(gòu)上不同于引用技術(shù)中已知的化合物，這是由于在苯甲酰胺部分的4-位存在一個(gè)不是氫或鹵素的官能團(tuán)。
意想不到地，與WO-00/37461中所公開的化合物相比較，本發(fā)明的式(I)的化合物具有改進(jìn)的代謝穩(wěn)定性。
本發(fā)明涉及式(I)的化合物 其立體化學(xué)異構(gòu)形式、其N-氧化物形式、或其藥學(xué)可接受的酸或堿加成鹽，其中-R1-R2-是下式的二價(jià)基-O-CH2-O-(a-1)，-O-CH2-CH2- (a-2)，-O-CH2-CH2-O- (a-3)，-O-CH2-CH2-CH2-(a-4)，-O-CH2-CH2-CH2-O- (a-5)，-O-CH2-CH2-CH2-CH2- (a-6)，-O-CH2-CH2-CH2-CH2-O- (a-7)，-O-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2- (a-8)，其中在所述二價(jià)基中，任選在相同或不同碳原子上的一或兩個(gè)氫原子可以被C1-6烷基或羥基取代，R3是氫，鹵素，C1-4烷基；R4是C1-6烷基；被氰基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基；C1-6烷氧基；氰基；氨基或單或二(C1-6烷基)氨基；R5是氫或C1-6烷基，且-OR5基團(tuán)位于哌啶部分的3-或4-位；L是氫，或L是下式基團(tuán)-Alk-R6(b-1)，-Alk-X-R7(b-2)，-Alk-Y-C(＝O)-R9(b-3)，或-Alk-Z-C(＝O)-NR11R12(b-4)，其中每個(gè)Alk是C1-12烷二基；且R6是氫；羥基；氰基C3-6環(huán)烷基C1-6烷基磺酰氨基；芳基或Het；R7是C1-6烷基；羥基取代的C1-6烷基；C3-6環(huán)烷基；芳基或Het；X是O、S、SO2或NR8；所述R8是氫或C1-6烷基；R9是氫、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、羥基或芳基；Y是直接鍵、或NR10，其中R10是氫或C1-6烷基；Z是直接鍵、O、S或NR10，其中R10是氫或C1-6烷基；R11和R12各自獨(dú)立地是氫，C1-6烷基，C3-6環(huán)烷基，或R11和R12與帶有R11和R12的氮原子結(jié)合可以形成吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或4-嗎啉基環(huán)，兩者都可以任選被C1-6烷基取代；芳基代表未取代的苯基或被1、2或3個(gè)各自獨(dú)立地選自鹵素、羥基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷基羰基、硝基、三氟甲基、氨基、氨基羰基和氨基磺?；娜〈〈谋交?；和Het是呋喃基；被C1-6烷基或鹵素取代的呋喃基；四氫呋喃基；被C1-6烷基取代的四氫呋喃基；二氧戊環(huán)基；被C1-6烷基取代的二氧戊環(huán)基；二噁烷基；被C1-6烷基取代的二噁烷基；四氫吡喃基；被C1-6烷基取代的四氫吡喃基；2，3-二氫-2-氧代-1H-咪唑基；被一或兩個(gè)各自獨(dú)立地選自鹵素或C1-6烷基的取代基取代的2，3-二氫-2-氧代-1H-咪唑基；吡咯烷基；被一或兩個(gè)各自獨(dú)立地選自鹵素、羥基或C1-6烷基的取代基取代的吡咯烷基；吡啶基；被一或兩個(gè)各自獨(dú)立地選自鹵素、羥基或C1-6烷基的取代基取代的吡啶基；嘧啶基；被一或兩個(gè)各自獨(dú)立地選自鹵素、羥基或C1-6烷基的取代基取代的嘧啶基；噠嗪基；被一或兩個(gè)各自獨(dú)立地選自羥基、C1-6烷氧基、C1-6烷基或鹵素的取代基取代的噠嗪基；吡嗪基；被一或兩個(gè)各自獨(dú)立地選自羥基、C1-6烷氧基、C1-6烷基或鹵素的取代基取代的吡嗪基。
在上述定義中使用的鹵素泛指氟、氯、溴和碘；C1-4烷基定義為具有從1到4個(gè)碳原子的直鏈和支鏈飽和烴基團(tuán)，例如，甲基，乙基，丙基，丁基，1-甲基-乙基，2-甲基丙基等等；C1-6烷基是用來包括C1-4烷基和其具有5或6個(gè)碳原子的高級(jí)同系物，例如，2-甲基-丁基，戊基，己基等等；C3-6環(huán)烷基泛指環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基和環(huán)己基；C1-12烷二基定義為含有從1到12個(gè)碳原子的二價(jià)直鏈或支鏈烴基團(tuán)，例如，甲二基，1，2-乙二基，1，3-丙二基，1，4-丁二基，1，5-戊二基，1，6-己二基，1，7-庚二基，1，8-辛二基，1，9-壬二基，1，10-癸二基，1，11-十一烷二基，1，12-十二烷二基和其支鏈異構(gòu)體。C1-4烷二基定義為含有從1到4個(gè)碳原子的二價(jià)直鏈或支鏈烴基團(tuán)，例如，甲二基，1，2-乙二基，1，3-丙二基，和1，4-丁二基。
上文使用的術(shù)語“立體化學(xué)異構(gòu)形式”定義式(I)化合物可能具有的所有可能的異構(gòu)形式。除非另作說明或標(biāo)明，化合物的化學(xué)名稱表示所有可能的立體化學(xué)異構(gòu)形式的混合物，所述混合物含有基本分子結(jié)構(gòu)的全部非對(duì)映體和對(duì)映體。更具體地說，立體中心可以具有R-或S-構(gòu)型；在二價(jià)環(huán)狀(部分)飽和基團(tuán)上的取代基可以具有順式-或反式-構(gòu)型。包含雙鍵的化合物在所述雙鍵處可以具有E或Z-立體化學(xué)。式(I)化合物的立體化學(xué)異構(gòu)形式明顯地意味著包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。
上文提及的藥學(xué)可接受的酸和堿加成鹽是用來包括式(I)化合物能夠形成的治療活性的無毒酸和堿加成鹽形式。藥學(xué)可接受的酸加成鹽可以用合適的酸處理堿形式方便地得到。合適的酸包括，例如，無機(jī)酸例如氫鹵酸例如鹽酸或氫溴酸，硫酸，硝酸，磷酸等等酸；或有機(jī)酸例如，乙酸，丙酸，羥基乙酸，乳酸，丙酮酸，草酸(即乙二酸)，丙二酸，琥珀酸(即丁二酸)，馬來酸，富馬酸，蘋果酸，酒石酸，檸檬酸，甲磺酸，乙磺酸，苯磺酸，對(duì)-甲苯磺酸，環(huán)乙烷氨基磺酸，水楊酸，對(duì)-氨基水楊酸，雙羥萘酸等等酸。
相反地，所述鹽形式可以用合適的堿處理，轉(zhuǎn)化成為游離堿形式。
含有酸性質(zhì)子的式(I)化合物，還可以用合適的有機(jī)和無機(jī)堿處理，轉(zhuǎn)變?yōu)樗鼈兊臒o毒金屬或胺加成鹽形式。合適的堿鹽形式包括，例如銨鹽，堿金屬和堿土金屬鹽例如鋰、鈉、鉀、鎂、鈣鹽等等，與有機(jī)堿例如芐星(benzathine)，N-甲基-D-葡糖胺，海巴胺成的鹽，和與氨基酸例如精氨酸、賴氨酸等等成的鹽。
上文使用的術(shù)語加成鹽還包括式(I)化合物以及其鹽能夠形成的溶劑化物。這種溶劑化物是例如水合物、醇化物等等。
一些式(I)的化合物還可以以其互變異構(gòu)形式存在。這種形式盡管沒有明確在上述式中標(biāo)明，但也包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。例如，當(dāng)芳雜環(huán)被羥基取代時(shí)，酮式可能是主要的互變異構(gòu)體。
可以用本領(lǐng)域已知的方式制備的式(I)化合物的N-氧化物形式，是用來包括其中一或幾個(gè)氮原子被氧化為N-氧化物的那些式(1)化合物。特別的N-氧化物包括其中哌啶-氮是N-氧化的那些。
一組有價(jià)值的化合物包括其中適用一個(gè)或多個(gè)下面限制的那些式(I)化合物a)-R1-R2-是式(a-3)的基團(tuán)；和/或b)-R1-R2-是式(a-5)的基團(tuán)；和/或c)R3是氫或鹵素；和/或d)R4是甲基，甲氧基，甲氧基甲基，氰基，氰基甲基胺基，氨基或C1-6烷基氨基；和/或e)R5是氫或甲基，且-OR5基團(tuán)位于哌啶環(huán)的3-或4-位；和/或f)R5是氫，且-OR5基團(tuán)位于哌啶環(huán)的3-位；和/或g)R5是氫，且-OR5基團(tuán)位于哌啶環(huán)的4-位；和/或h)-OR5基團(tuán)位于哌啶環(huán)的3-位且是在相對(duì)于哌啶部分4-位的亞甲基的反位；和/或i)-OR5基團(tuán)位于哌啶環(huán)的3-位，且是在相對(duì)于哌啶部分4-位的亞甲基的反位，所述哌啶部分的絕對(duì)構(gòu)型是(3S，4S)；和/或j)L是氫；
k)L是式(b-1)、(b-2)、(b-3)或(b-4)的基團(tuán)；或l)L是式(b-1)的基團(tuán)，其中Alk是C1-4烷二基，且R6是氫，羥基，氰基，C3-6環(huán)烷基，C1-6烷基磺酰氨基，表示被鹵素或羥基取代的苯基的芳基；或Het表示四氫呋喃基，二氧戊環(huán)基，被C1-4烷基取代的二氧戊環(huán)基，或吡啶基；或L是基團(tuán)(b-2)，其中Alk是C1-4烷二基，X表示O，R7是C3-6環(huán)烷基、C1-6烷基、被羥基取代的C1-6烷基、或表示被氨基磺?；〈谋交姆蓟?；或L是基團(tuán)(b-2)，其中Alk是C1-4烷二基，X表示NR8，其中R8是氫且R7是C1-6烷基，或Het代表被C1-6烷基取代的嘧啶基或吡嗪基；或L是基團(tuán)(b-2)，其中Alk是C1-4烷二基，X表示SO2，R7是C1-6烷基；或L是基團(tuán)(b-3)，其中Alk是C1-4烷二基，Y是直接鍵且R9是C1-6烷基或羥基；或L是式(b-4)的基團(tuán)，其中Alk是C1-4烷二基，Z是直接鍵，R11和R12代表氫，或R11和R12與帶有R11和R12的氮原子結(jié)合形成被C1-6烷基取代的吡咯烷基或哌嗪基；或L是式(b-4)的基團(tuán)，其中Alk是C1-4烷二基，Z是O，R11和R12與帶有R11和R12的氮原子結(jié)合形成吡咯烷基。
其它有價(jià)值的化合物是以下式(I)的那些化合物，其中-R1-R2-是下式的二價(jià)基-O-CH2-CH2-O- (a-3)，-O-CH2-CH2-CH2-O- (a-5)，R3是氫，鹵素，C1-4烷基；R4是C1-6烷基；被氰基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基；C1-6烷氧基；氰基；氨基或單或二(C1-6烷基)氨基；R5是氫或C1-6烷基，且-OR5基團(tuán)位于哌啶部分的3-或4-位；L是氫，或L是下式基團(tuán)-Alk-R6(b-1)，-Alk-X-R7(b-2)，-Alk-Y-C(＝O)-R9(b-3)，或
-Alk-Z-C(＝O)-NR11R12(b-4)，其中每個(gè)Alk是C1-12烷二基；R6是氫；羥基；氰基；C3-6環(huán)烷基；C1-6烷基磺酰氨基；芳基或Het；R7是C1-6烷基；羥基取代的C1-6烷基；C3-6環(huán)烷基；芳基或Het；X是O、S、SO2或NR8；所述R8是氫或C1-6烷基；R9是C1-6烷基或羥基；Y是直接鍵；Z是直接鍵或O；R11和R12各自獨(dú)立地是氫，或C1-6烷基，或R11和R12與帶有R11和R12的氮原子相結(jié)合，可以形成被C1-6烷基取代的吡咯烷基或哌嗪基；芳基代表未取代的苯基或被1，2或3個(gè)各自獨(dú)立地選自鹵素、羥基、C1-6烷基、C1-6烷氧基和氨基磺?；娜〈〈谋交?；和Het是四氫呋喃基；被C1-6烷基取代的四氫呋喃基；二氧戊環(huán)基；被C1-6烷基取代的二氧戊環(huán)基；吡啶基；被一或兩個(gè)各自獨(dú)立地選自鹵素、羥基、C1-6烷基的取代基取代的吡啶基；嘧啶基；被一或兩個(gè)各自獨(dú)立地選自鹵素、羥基、或C1-6烷基的取代基取代的嘧啶基；噠嗪基；被一或兩個(gè)各自獨(dú)立地選自羥基、C1-6烷氧基、C1-6烷基或鹵素的取代基取代的噠嗪基；吡嗪基；被一或兩個(gè)各自獨(dú)立地選自羥基、C1-6烷氧基、C1-6烷基或鹵素的取代基取代的吡嗪基。
具體的化合物是下述那些式(I)的化合物，其中-OR5基團(tuán)優(yōu)選表示羥基或甲氧基，位于具有反式構(gòu)型的哌啶部分的3-位，即-OR5基團(tuán)在相對(duì)于哌啶部分上的亞甲基的反位。
更具體的化合物是這樣的式(I)的化合物其中二價(jià)基-R1-R2-是式(a-3)或(a-5)基團(tuán)，-OR5基團(tuán)表示羥基并位于具有(3S-反式)構(gòu)型的哌啶部分的3-位，其相當(dāng)于所述哌啶部分的絕對(duì)(3S，4S)構(gòu)型。
優(yōu)選的化合物是更具體的化合物其中-R1-R2-是式(a-5)的基團(tuán)；R3是氫；R4是甲基；R5是氫。
更優(yōu)選的化合物是如下優(yōu)選的化合物其中L是式(b-2)的基團(tuán)，其中X是O，Alk是C1-4烷二基且R7是C1-6烷基，優(yōu)選甲基。
最優(yōu)選的化合物是下列化合物(87)，(125)，(158)，(159)，(162)，(163)，(165)，(168)，(177)，(183)，(184)，(185)，(186)，(187)，(200)，(202)，(211)，(225)，(228)，(229)，(246)，和(247)。
式(I)的化合物可以通過式(II)的中間體與式(III)的衍生物或任選其反應(yīng)性官能衍生物例如羰基咪唑衍生物、酰鹵或混合酸酐反應(yīng)來制備。所述酰胺鍵可以通過在合適的溶劑中攪拌反應(yīng)物來形成，任選在堿例如三乙胺存在的條件下。
式(I-b)的化合物，定義為其中L不是氫的式(I)化合物，通?？梢酝ㄟ^下列方式制備用式(IV)的中間體N-烷基化式(I-a)的中間體，其中W是合適的離去基團(tuán)例如鹵素例如氟、氯、溴、碘，或在有些情況下，W還可以是磺酰氧基，例如甲磺酰氧基、苯磺酰氧基、三氟甲烷磺酰氧基等等反應(yīng)性離去基團(tuán)。式(I-a)的化合物定義為其中L表示氫的式(I)化合物。反應(yīng)可以在反應(yīng)-惰性溶劑例如乙腈、2-戊醇、異丁醇、二甲基乙酰胺或DMF中進(jìn)行，并任選在合適的堿例如碳酸鈉、碳酸鉀、N-甲基吡咯烷酮或三乙胺存在的條件下。攪拌可以增加反應(yīng)速度。反應(yīng)可以在室溫和反應(yīng)混合物的回流溫度之間的溫度范圍內(nèi)方便地進(jìn)行。
或者，式(I-b)的化合物還可以利用式L’＝O(V)的中間體通過還原性N-烷基化式(I-a)的化合物來制備，其中L’＝O表示式L-H的衍生物，其中兩個(gè)偕氫原子被氧取代，采取本領(lǐng)域已知的還原性N-烷基化步驟進(jìn)行。
所述還原性N-烷基化可以在反應(yīng)惰性溶劑例如二氯甲烷、乙醇、甲苯或其混合物中、并在還原劑例如硼氫化物例如硼氫化鈉、氰基硼氫化鈉或三乙酰氧基硼氫化物的存在下進(jìn)行。還可以方便地使用與合適的催化劑例如鈀/炭或鉑/炭組合的氫作為還原劑。如果氫用作還原劑，適宜在反應(yīng)混合物中加入脫水劑例如叔丁醇鋁。為了防止不希望的在反應(yīng)物和反應(yīng)產(chǎn)物中的某些官能團(tuán)的進(jìn)一步氫化，有利地還可以在反應(yīng)混合物中加入合適的催化劑毒劑例如噻吩或喹啉-硫。為了提高反應(yīng)速度，可以將溫度在室溫和反應(yīng)混合物的回流溫度中間升高，并任選提高氫氣壓力。
式(I-a)的化合物可以通過下列方式制備式(VI)的中間體，其中PG表示合適的技術(shù)中已知的保護(hù)基例如叔丁氧羰基或芐基或光可去除的基團(tuán)，與式(III)的酸或其合適的反應(yīng)性官能衍生物例如羰基咪唑衍生物反應(yīng)，隨后脫保護(hù)如此形成的中間體，即通過現(xiàn)有技術(shù)已知的方法除去PG。
式(I-c)的化合物，定義為其中R3是氫且R4是氨基的式(I)化合物，通?？梢杂檬?III-a)的羧酸衍生物N-烷基化式(II)的中間體來制備。所述N-烷基化反應(yīng)可以通過在合適的溶劑中攪拌反應(yīng)物來進(jìn)行，任選在堿例如碳酸鉀或三乙胺存在的條件下。N-烷基化反應(yīng)后使用合適的催化劑例如鈀/碳進(jìn)行氫化步驟。
式(I-d)的化合物，定義為其中R4是甲基氨基的式(I)化合物，通?？梢酝ㄟ^用式(III-b)的羧酸衍生物N-烷基化式(II)的中間體來制備，其中PG基團(tuán)是可以在酸性條件除去的保護(hù)基例如叔丁氧基-羰基。所述N-烷基化反應(yīng)可以通過在合適的溶劑中攪拌反應(yīng)物來進(jìn)行，任選在堿例如碳酸鉀或三乙胺存在的條件下。N-烷基化反應(yīng)后在酸性條件下進(jìn)行水解反應(yīng)，以除去保護(hù)基PG。
可以進(jìn)一步按照現(xiàn)有技術(shù)已知的基團(tuán)轉(zhuǎn)化反應(yīng)，通過式(I)化合物的彼此轉(zhuǎn)化來制備式(I)化合物。
起始原料和一些中間體是已知的化合物，并可商業(yè)購(gòu)買，或可以按照通常本領(lǐng)域已知的常規(guī)反應(yīng)步驟來制備。例如，式(II)的中間體可以按照WO-99/02156或WO-00/37461中描述的方法來制備。
式(VI)的中間體可以按照WO-99/02156或WO-00/37461中所描述的描述式(VIII)中間體的一般方法來制備。
按照上文描述方法制備的式(I)化合物，可以合成為對(duì)映體的外消旋混合物的形式，其可以按照現(xiàn)有技術(shù)已知的拆分步驟互相分離。通過與合適的手性酸反應(yīng)，式(I)的外消旋化合物可以轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄳?yīng)的非對(duì)映體鹽的形式。隨后將所述非對(duì)映體鹽的形式分離，例如通過選擇性的或分級(jí)結(jié)晶，且通過堿從其中游離出對(duì)映體。分離式(I)化合物的對(duì)映體形式的替代方案包括使用手性固定相的液相色譜。所述純的立體化學(xué)異構(gòu)形式還可以衍生自合適起始原料的相應(yīng)的純立體化學(xué)異構(gòu)形式，條件是反應(yīng)立體專一地進(jìn)行。優(yōu)選如果需要特定立體異構(gòu)體時(shí)，所述化合物將通過立體有擇制備方法合成。這些方法優(yōu)選采用對(duì)映體純的起始原料。
式(I)的化合物、其N-氧化物形式、藥學(xué)可接受的酸或堿加成鹽和立體異構(gòu)形式，具有實(shí)施例C.1中描述的5HT4-拮抗性能。
此外，如實(shí)施例C.2所述，式(I)的化合物相對(duì)于WO-00/37461的結(jié)構(gòu)上相關(guān)化合物顯示了改進(jìn)的代謝穩(wěn)定性。有利的代謝穩(wěn)定性性能導(dǎo)致在細(xì)胞色素P450酶例如CYP1A2、CYP3A4、CYP2D6、CYP2C9和CYP2C 19的水平上藥物-藥物相互作用危險(xiǎn)的降低，并因此本發(fā)明的化合物具有改進(jìn)的藥物安全特性。而且這些有利的代謝穩(wěn)定性性能可以允許每天給予一次式(I)的化合物，代替每天介于兩或四次之間攝入活性組分的常用給藥方案，由此使患者具有更高的依從性。
鑒于本發(fā)明化合物的5HT4-拮抗性能，該化合物通?？梢杂糜谥委熁蝾A(yù)防胃腸病癥例如蠕動(dòng)性過高、過敏性腸綜合征(IBS)、便秘-或腹瀉-為主的IBS、疼痛-和非疼痛為主的IBS、腸過敏性、和降低與胃腸過敏性和/或機(jī)能亢進(jìn)有關(guān)的疼痛。
同樣相信式(I)的化合物可有效用于防止或預(yù)防失調(diào)、梗阻或損傷的胃調(diào)節(jié)例如消化不良。消化不良癥狀是例如腹部壓力、缺乏食欲、發(fā)脹感、早期飽食感、惡心、嘔吐、胃氣脹和打嗝。
式(I)的化合物同樣可以用于治療其它與5HT4有關(guān)的病癥例如貪食和食欲過盛。
鑒于式(I)化合物的用途，本發(fā)明也提供了對(duì)于患有胃腸病癥例如過敏性腸綜合征(IBS)的溫血?jiǎng)游锇ㄈ祟?本文通常稱為患者)的治療方法。因而提供一種治療方法用于解除患有例如蠕動(dòng)性過高、過敏性腸綜合征(IBS)、便秘-或腹瀉-為主的IBS、疼痛-和非疼痛-為主的IBS、腸過敏性等病癥的患者的病癥，和降低與胃腸過敏性和/或機(jī)能亢進(jìn)有關(guān)的疼痛。
式(I)的化合物也可以在其它胃腸機(jī)能失調(diào)，例如與上部的腸運(yùn)動(dòng)性有關(guān)的機(jī)能失調(diào)中具有潛在的用途。特別的，它們?cè)谥委熚?食道回流疾病的胃部癥狀中具有潛在的用途，例如燒心(包括階段性的燒心，夜間燒心，和膳食誘導(dǎo)的燒心)。
而且，式(I)的5HT4-拮抗化合物也具有用于治療或預(yù)防膀胱高敏感性，膀胱過度活化，下尿路癥狀，良性前列腺肥大(BPH)，前列腺炎，逼尿肌反射亢進(jìn)，出口阻塞，尿頻，夜尿癥，尿急，骨盆高敏感性，急失禁，尿道炎，前列腺痛，膀胱炎，特發(fā)性膀胱高敏感性，尿失禁或與過敏性腸綜合征有關(guān)的尿失禁的潛在用途。在這方面，將式(I)的5HT4-拮抗化合物與α-腎上腺素能受體拮抗劑例如醛酶質(zhì)，吲哚拉明，坦洛新，多沙唑嗪，特拉唑嗪，阿巴諾喹，或哌唑嗪組合以得到包括這樣的α-腎上腺素能受體拮抗劑和式(I)的5-HT4-受體拮抗劑的藥物組合物可能是有利的。
因此，本發(fā)明提供式(I)的化合物用作藥物，和特別是式(I)的化合物用于制備治療胃腸病癥例如蠕動(dòng)性過高，IBS，便秘-或腹瀉-為主的IBS，疼痛-和非疼痛為主的IBS，腸過敏性，和降低與胃腸過敏性和/或機(jī)能亢進(jìn)有關(guān)的疼痛的藥物的用途。包括預(yù)防性和治療性醫(yī)冶。
鑒于本發(fā)明化合物的5HT4-拮抗性能，本發(fā)明化合物也可以在人類中用于治療或防止與5HT4-有關(guān)的CNS病癥。具體地說，式(I)的化合物可用于治療各種CNS病癥包括但不局限于藥物物質(zhì)濫用，認(rèn)知障礙例如阿爾茨海默氏病，老年性癡呆；行為障礙例如精神分裂癥，狂躁，強(qiáng)迫性-強(qiáng)制性病癥和使用對(duì)精神起作用的物質(zhì)所致障礙；情緒障礙例如抑郁癥，兩極情感障礙，焦慮和恐慌障礙；自主機(jī)能控制的障礙例如高血壓癥和睡眠障礙；強(qiáng)迫性/強(qiáng)制性障礙包括厭食和貪食癥，和神經(jīng)精神病學(xué)障礙，例如面肌-聲帶抽搐綜合征(Gilles de laTourette′s綜合征)，和亨廷頓(Huntington′s)病。
為了制備本發(fā)明的藥物組合物，將有效量的作為活性組分的具體化合物，以堿或酸加成鹽的形式，與藥學(xué)可接受的載體以直接混合物的形式混合，其中載體可以采用多種形式，取決于希望給藥的制劑的形式。這些藥物組合物以單元?jiǎng)┬痛嬖谑呛弦獾?，?yōu)選適合用于口服、直腸或腸胃外注射給藥。例如，在制備口服劑型的組合物中，可以采用任何常用藥物介質(zhì)，例如，在口服的液體藥劑例如懸浮液、糖漿、酏劑和溶液的情況下例如水，乙二醇，油類，醇等等；或在粉劑、藥丸、膠囊和片劑的情況下，固體載體例如淀粉，糖，高嶺土，潤(rùn)滑劑，粘合劑，崩解劑等等。由于片劑和膠囊易于給藥，它們代表最方便的口服劑量單位形式，在這樣的情況下采用固體藥物載體是顯而易見的。對(duì)于腸胃外的組合物，載體通常包括無菌水，至少是大部分，盡管可以包括其它組分例如為了幫助溶解的組分。例如可以制備其中載體包括生理鹽水、葡萄糖溶液或生理鹽水和葡萄糖溶液的混合物的注射溶液。也可以制備可注射的懸浮液，在這樣的情況下可以采用合適的液體載體，懸浮劑等等。在適合于經(jīng)皮膚給藥的組合物中，載體任選地包括提高滲透的藥劑和/或適合的潤(rùn)濕劑，任選地與較小比例的具有任何性質(zhì)的合適的添加劑相結(jié)合，該添加物不會(huì)導(dǎo)致對(duì)皮膚的顯著有害影響。所述添加劑可以促進(jìn)對(duì)皮膚給藥和/或可以有助于制備所需要的組合物。這些組合物可以以多種方式用藥，例如，以透皮膜片，以點(diǎn)劑，以油膏形式給藥。(I)的酸加成鹽由于其比相應(yīng)的堿形式具有增加的水溶性所以明顯更適合用于制備含水組合物。
以單元?jiǎng)┝啃问脚渲粕鲜龅乃幬锝M合物以便于給藥和具有均勻的劑量是特別有利的。在本文說明書和權(quán)利要求中所使用的單元?jiǎng)┬褪侵高m合用作單元?jiǎng)┝康奈锢硇苑稚⒌膯卧總€(gè)單元含有與所需藥物載體結(jié)合的預(yù)定量的活性組分，所述預(yù)定量的活性組分經(jīng)過計(jì)算以產(chǎn)生所需要的治療效果。這種單元?jiǎng)┬偷睦邮瞧瑒?包括刻痕或包衣片劑)，膠囊，丸劑，粉劑包裝，糯米紙包劑，注射溶液或懸浮液，茶匙量劑型，湯匙量劑型等等，和其分離的多重份。
對(duì)于口服，藥物組合物可以采取固體劑量形式例如片劑(只可吞咽的和可咀嚼的兩種形式)，膠囊或膠蓋劑的形式，通過與藥學(xué)可接受的賦形劑例如粘合劑(例如預(yù)凝膠化的玉米淀粉，聚乙烯吡咯烷酮或羥丙基甲基纖維素)；填充劑(例如，乳糖，微晶纖維素或磷酸鈣)；潤(rùn)滑劑(例如，硬脂酸鎂，滑石粉或硅石)；崩解劑(例如，馬鈴薯淀粉或淀粉乙醇酸鈉)；或潤(rùn)濕劑(例如，十二烷基硫酸鈉)以常規(guī)方法制備。片劑可以用本領(lǐng)域眾所周知的方法包衣。
用于口服的液體藥劑可以采取例如溶液、糖漿或懸浮液的形式，或它們可以干品存在，使用之前用水或其它合適的賦形劑制成液體制劑。這樣的液體藥劑可以任選地與藥學(xué)可接受的添加劑例如懸浮劑(例如山梨糖醇糖漿，甲基纖維素，羥基-丙基甲基纖維素或氫化的可食用脂肪)；乳化劑(例如卵磷脂或阿拉伯膠)；非水的賦形劑(例如杏仁油，油狀酯或乙醇)；和防腐劑(例如對(duì)羥基苯甲酸甲酯或丙酯或山梨酸)通過常規(guī)方法制備。
藥學(xué)可接受的甜味劑包括優(yōu)選至少一種強(qiáng)烈的甜味劑例如糖精，糖精鈉或鈣，天冬甜素，雙氧噁噻嗪鉀，環(huán)氨酸鈉，埃利坦(alitame)，二氫查耳酮甜味劑，莫那靈(monellin)，甜菊苷或三氯半乳蔗糖(4，1’，6’-三氯-4，1’，6’-三脫氧半乳糖基蔗糖)，優(yōu)選糖精，糖精鈉或鈣，和批量散裝甜味劑例如山梨糖醇，甘露糖醇，果糖，蔗糖，麥芽糖，異麥芽糖醇，葡萄糖，氫化葡萄糖漿，木糖醇，焦糖或蜂蜜。
強(qiáng)甜味劑可方便地在低濃度下使用。例如，在糖精鈉的情況下，濃度可以在基于最終制劑總體積的0.04％到0.1％(w/v)的范圍，優(yōu)選在低-劑量制劑中大約是0.06％和在高劑量制劑中約是0.08％?？梢杂行У匾暂^大的數(shù)量從大約10％到約35％，優(yōu)選從約10％到約15％(w/v)的范圍使用批量甜味劑。
在低劑量制劑中可以屏蔽口苦組分的藥學(xué)可接受的調(diào)味劑優(yōu)選是水果調(diào)味劑例如櫻桃、木莓、黑加侖或草莓調(diào)味劑。兩種調(diào)味劑的聯(lián)用可以產(chǎn)生很好的結(jié)果。在高-劑量制劑中可能需要更強(qiáng)的調(diào)味劑，例如焦糖巧克力調(diào)味劑，涼薄荷調(diào)味劑，幻想調(diào)味劑等等藥學(xué)可接受的強(qiáng)調(diào)味劑。每種調(diào)味劑可能以從0.05％到1％(w/v)的濃度范圍在最終組合物中存在。優(yōu)選使用所述強(qiáng)調(diào)味劑的聯(lián)用。優(yōu)選使用在制劑酸性條件下不發(fā)生任何變化或損失味道和顏色的調(diào)味劑。
本發(fā)明的制劑可以任選地包括抗氣脹劑，例如二甲基硅油，α-D-半乳糖苷酶等等。
還可以將本發(fā)明化合物配制成長(zhǎng)效制劑。這種長(zhǎng)效制劑可以通過植入法給藥(例如，皮下或肌肉內(nèi))或通過肌肉注射給藥。因此，例如可以將化合物與合適的聚合或疏水性材料(例如作為在可接受的油中的乳狀液)或離子交換樹脂進(jìn)行配制，或以微溶的衍生物形式，例如微溶的鹽。
可以將本發(fā)明的化合物配制成腸胃外給藥的注射液，可方便地靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)或皮下注射，例如通過快速濃注或連續(xù)靜脈內(nèi)輸液。用于注射劑的制劑，可以存在于單位劑型中，例如在加入防腐劑的安瓿并有或多劑型容器中。組合物可以采用懸浮液、在油狀或含水賦形劑中的溶液或乳狀液的形式，并且可以含有調(diào)配試劑例如等滲劑、懸浮劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑?；蛘撸褂弥?，活性組分可以是粉末形式，用于與合適的賦形劑例如無菌無熱原的水組合。
還可以將本發(fā)明的化合物以直腸組合物例如栓劑或滯留灌腸劑的形式配制，例如，含有常規(guī)的栓劑基料例如可可脂或其它甘油脂。
對(duì)于鼻內(nèi)給藥，可能以例如液體噴霧劑、粉劑或以滴劑的形式使用本發(fā)明的化合物。
通常認(rèn)為治療的有效量將會(huì)在約0.0001毫克/千克到約1毫克/千克體重的范圍，優(yōu)選約0.001毫克/千克到約0.5毫克/千克體重。
實(shí)驗(yàn)部分在下文中描述的步驟中使用下面的縮寫“ACN”代表乙腈；″THF″，代表四氫呋喃；″DCM″代表二氯甲烷；″DIPE″代表二異丙基醚；″EtOAc″代表乙酸乙酯；″NH4OAc″代表乙酸銨；″HOAc″代表乙酸；″MIK″代表甲基異丁基酮，″DMF″代表二甲基甲酰胺和″DMA″代表二甲基乙酰胺。
對(duì)于一些化學(xué)試劑，使用了化學(xué)式，例如NaOH為氫氧化鈉，Na2CO3為碳酸鈉，K2CO3為碳酸鉀，H2為氫氣，N2為氮?dú)?，CH2Cl2為二氯甲烷，CH3OH為甲醇，NH3為氨，HCl為鹽酸，NaH為氫化鈉，CaCO3為碳酸鈣，和KOH為氫氧化鉀。
A.中間體的制備實(shí)施例A.1a)中間體(1)的制備
將5-氨基-2，3-二羥苯甲酸(0.62摩爾)在硫酸(110毫升)和甲醇(1100毫升)中的混合物攪拌和回流24小時(shí)。將反應(yīng)混合物在室溫下放置過夜。然后將混合物濃縮，并將殘余物在DCM和水之間分配。將分離的水層用DCM洗滌，收集有機(jī)層、干燥、過濾并濃縮。將產(chǎn)物干燥，得到120克中間體(1)。
b)中間體(2)的制備 將中間體(1)(0.35摩爾)，K2CO3(0.77摩爾)和四丁基溴化銨(5克)的混合物在1，2-二溴乙烷(42ml)，DMA(680ml)和丙酮(1000毫升)中攪拌，回流(70℃)20小時(shí)。加入額外的DMA(250毫升)，四丁基溴化銨(5克)和1-溴-2-氯乙烷(29毫升)。將反應(yīng)混合物攪拌和回流44小時(shí)。然后允許反應(yīng)混合物冷卻至室溫過周末。過濾懸浮液，并將濾液濃縮。將濃縮液在水和甲苯之間分配。將分離的水層用DCM洗滌若干次。合并分離的有機(jī)層，干燥，過濾并濃縮。將殘余物從DIPE和ACN中結(jié)晶，得到26克中間體(2)(熔點(diǎn)140℃)。
c)中間體(3)的制備 將中間體(2)(0.063摩爾)在NaOH 1N(100毫升)中的混合物攪拌和回流4小時(shí)。將反應(yīng)混合物在一冰浴中冷卻。將1N HCl溶液(100ml)加入到所形成的沉淀中。使該反應(yīng)混合物升溫到室溫，將形成的沉淀過濾并干燥，得到14.5克中間體(3)(熔點(diǎn)234℃)。
實(shí)施例A.2
a)中間體(4)的制備 將中間體(2)(0.089mol)在甲醇(500ml)中的混合物在50℃用鈀/碳(10％；3g)作為催化劑、在噻吩溶液(1ml)的存在下進(jìn)行氫化。吸收氫氣(3當(dāng)量)之后，用dicalite濾出催化劑并將濾液蒸發(fā)，得到20.9克中間體(4)。
b)中間體(5)的制備 向中間體(4)(0.1摩爾)在三氯甲烷(130毫升)的混合物中加入三氟乙酸酐(0.11摩爾)。攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)并濃縮混合物。在玻璃過濾器上用硅膠純化殘余物(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 90/10)。收集產(chǎn)物級(jí)份，并將濾液濃縮。將殘余物用硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 98/2)。收集純的級(jí)份并蒸發(fā)溶劑，得到11.0克中間體(5)。
c)中間體(6)的制備 在氮?dú)饬鳁l件下，在室溫下將中間體(5)(0.036mol)在DMF(100ml)中攪拌。在氮?dú)饬飨?，分批加入石蠟中?0％氫化鈉(0.0432mol)。將反應(yīng)混合物升溫至50℃。然后在50℃、在氮?dú)饬飨碌渭尤氲獯淄?0.0432mol)。將反應(yīng)混合物在50℃攪拌過夜，然后使混合物冷卻至室溫并倒入水中(680ml)，然后用甲苯提取。將分離的有機(jī)層干燥，過濾并濃縮，得到10.8g中間體(6)。
d)中間體(7)的制備 將中間體(6)(0.0338摩爾)在1N NaOH(0.07mol)和水(60毫升)中的混合物攪拌和回流1小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后加入二碳酸叔丁酯(0.041摩爾)，并使反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜。然后加入1N HCl(0.07摩爾)并用DCM提取殘余物。將分離的有機(jī)層干燥，過濾并濃縮，得到10.0g中間體(7)。
實(shí)施例A.3a)中間體(8)的制備 將8-氯-2，3-二氫-1，4-苯并二氧六環(huán)-5-羧酸甲酯(0.44摩爾)溶于硫酸(850毫升)中。將此溶液冷卻至低于0℃。用2小時(shí)滴加加入在硫酸(200ml)中的硝酸(發(fā)煙，0.44mol)。將反應(yīng)混合物在-10℃攪拌45分鐘，而后倒入冰-水中。用DCM提取，得到中間體(8)。
b)中間體(9)的制備
將中間體(8)(0.20摩爾)在THF(1000ml)和NaOH(2N，1000ml)中的混合物在室溫下攪拌5小時(shí)。在35℃蒸發(fā)除去THF(700ml)。將水層用乙酸乙酯(2×750ml)提取。將分離的水層在冰浴上冷卻，并用濃HCl酸化。濾出沉淀，用水洗滌并干燥，得到52g中間體(9)。
實(shí)施例A.4a)中間體(10)的制備 將中間體(8)(0.095mol)在THF(250ml)中的混合物在50℃用5％鉑/碳(3g)作為催化劑、在噻吩溶液(2ml)的存在下進(jìn)行氫化。吸收氫氣(3當(dāng)量)之后，用硅藻土過濾反應(yīng)混合物并將濾液蒸發(fā)，得到中間體(10)。
b)中間體(11)的制備 將中間體(10)(0.095mol)的氯仿(200ml)溶液在水浴中冷卻，然后用20至30分鐘滴加入三氟乙酸酐(0.125mol)，并在室溫下將反應(yīng)混合物攪拌2小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，加入甲苯(150ml)，并將混合物濃縮至大約100ml，然后加入DIPE(300ml)。將產(chǎn)生的沉淀濾出，用DIPE洗滌并干燥，得到28.8g中間體(11)。
c)中間體(12)的制備
在低于25℃的溫度下，向中間體(11)(0.084mol)的N，N-二甲基甲酰胺(150ml)溶液中分批加入NaH(0.09mol)，并在室溫下將反應(yīng)混合物攪拌90分鐘。滴加入碘代甲烷(0.09mol)并將混合物在室溫下攪拌20分鐘。將反應(yīng)混合物傾倒在HCl(400ml，5％水溶液，冷的)中，并用DCM(2次350ml)提取混合物。將有機(jī)層分離，用水洗滌、干燥，并蒸發(fā)溶劑。將殘余物溶于NaOH(200ml，2N)和THF(150ml)中，并將反應(yīng)混合物攪拌和回流90分鐘。蒸發(fā)有機(jī)溶劑，并將含水堿性濃縮液在冰上冷卻和用濃HCl酸化。濾出沉淀并干燥，得到19.75g中間體(12)。
實(shí)施例A.5a)中間體(13)的制備 在室溫下攪拌8-氨基-2，3-二氫-1，4-苯并二氧六環(huán)-5-羧酸甲酯(0.1摩爾)在水(100ml)中的混合物。在室溫下，滴加入硫酸(96％)(11ml)。在室溫下，滴加入NaNO2(0.1mol)在水(100ml)中的混合物。將混合物在室溫下攪拌30分鐘，得到混合物1。在室溫下攪拌Cu(I)Br 0.15mol在HBr水溶液(48％)(100ml)和水(300ml)中的混合物。在室溫下滴加入混合物1。在室溫下將混合物攪拌30分鐘，然后用水(300ml)稀釋。濾出沉淀，用水洗滌并用CH2Cl2/CH3OH/水(300毫升/100毫升/300毫升)稀釋。將溶液用dicalite過濾。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物懸浮在DIPE/石油醚中。濾出沉淀并干燥，得到23.2g 8-溴-2，3-二氫-1，4-苯并二氧六環(huán)-5-羧酸甲酯(中間體13)。
b)中間體(14)的制備
將中間體(13)(0.12摩爾)的硫酸(175毫升)溶液冷卻至0℃。滴加入硝酸(0.12mol)的硫酸(175ml)溶液。將混合物在-10℃攪拌10分鐘，并傾倒在冰水中。過濾沉淀，用水洗滌并溶解在DCM中。加入水。用DCM提取混合物。將有機(jī)層用水洗滌，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑，得到36g中間體(14)。
c)中間體(15)的制備 將中間體(14)(0.055摩爾)在NaOH(300ml)和THF(300ml)中的混合物在室溫下攪拌過夜。蒸發(fā)NaOH。加入乙酸乙酯。用乙酸乙酯提取混合物。用HCl酸化混合物。攪拌沉淀，然后過濾，用水(最低量)洗滌并干燥，得到14.3g中間體(15)。
實(shí)施例A.6a)中間體(16)的制備 將2，3-二羥基-5-甲基苯甲酸甲酯(0.27摩爾)和K2CO3(0.6摩爾)在1，2-二溴乙烷(0.4摩爾)和丙酮(1000毫升)中的混合物攪拌并回流24小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物溶解在DCM中，用水和2N NaOH水溶液洗滌。將有機(jī)層干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑，得到30.5g中間體(16)。
b)中間體(17)的制備
將中間體(16)(0.146摩爾)的NaOH(2N)(400毫升)和THF(400毫升)溶液攪拌并回流18小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物，蒸發(fā)除去THF。用濃HCl酸化殘余物。將產(chǎn)生的固體濾出，洗滌并干燥，得到26.5g中間體(17)。
實(shí)施例A.7a)中間體(18)的制備 在0℃下，將NaNO2(0.1314摩爾)的水(29.3ml)溶液滴加到中間體(4)(0.1195摩爾)在1.5N HCl(190毫升)的混合物中。在10℃下，將混合物攪拌15分鐘，并在5℃下，將其滴加到CuCN(0.1673mol)和KCN(0.2749mol)在水(293ml)中的混合物中。將混合物在5℃攪拌1小時(shí)，然后在60℃攪拌1小時(shí)30分鐘，然后冷卻并過濾。將濾液用乙醚提取。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑至干。將殘余物用CH2Cl2/CH3OH洗滌，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑至干。將殘余物用硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/乙酸乙酯98/2)。收集純的級(jí)份并蒸發(fā)溶劑至干，得到10.4克中間體(18)。
b)中間體(19)的制備 將中間體(18)(0.0446摩爾)和氫氧化鋰一水合物(0.0891摩爾)在THF(300毫升)和水(300毫升)中的混合物在室溫下攪拌20小時(shí)。部分蒸發(fā)THF。用3N HCl酸化混合物，并用乙酸乙酯提取。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑至干，得到9.4g中間體(19)。
實(shí)施例A.8中間體(21)的制備 將中間體(22)(0.12摩爾)在1N NaOH(200毫升)中的混合物攪拌和回流4小時(shí)。將反應(yīng)混合物在室溫下放置過夜，然后在冰浴上冷卻并加入1N HCl溶液(200ml)。將混合物升溫至室溫，過濾形成的沉淀，得到26.7g中間體(21)。
實(shí)施例A.9a)中間體(22)的制備 將5-硝基-2，3-二羥基苯甲酸甲酯(0.3摩爾)、碳酸鉀(0.66摩爾)、1，3-二溴丙烷(0.42摩爾)和四正丁基溴化銨(4.5克)在丙酮(900毫升)和DMA(600毫升)中的混合物攪拌和回流30小時(shí)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌兩天，然后過濾。將溶劑蒸發(fā)，并將殘余物在水和DCM之間分配。將分離的有機(jī)層干燥，過濾并濃縮。將殘余物懸浮在DIPE中，過濾，干燥并用硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 98/2)，得到33.5g中間體(22)。
b)中間體(23)的制備
用10％鈀/碳(3g)作為催化劑、在噻吩溶液(1ml)的存在下，將中間體(22)(0.11mol)在THF(250ml)中的混合物氫化。吸收氫氣(3當(dāng)量)之后，用dicalite濾出催化劑并將濾液濃縮，得到24.7克中間體(23)。
c)中間體(24)的制備 將中間體(23)(0.11摩爾)溶于三氯甲烷(500毫升)中，并將混合物在冰浴上冷卻至溫度低于10℃。在相同溫度下，滴加入三氟乙酸酐(0.14mol)，然后在室溫下攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)，然后濃縮。將殘余物用DIPE在室溫下過夜結(jié)晶，得到5.8克中間體(24)。
d)中間體(25)的制備 在室溫下、在氮?dú)饬鳁l件下，將60％NaH(0.046摩爾)分批加入到中間體(24)(0.131摩爾)在DMF(140毫升)的混合物中。在室溫下攪拌混合物1小時(shí)。滴加入碘代甲烷(0.046mol)。在50℃溫度下將混合物攪拌過夜，然后冷卻至室溫，傾倒在冰水中，并用甲苯提取。將有機(jī)層用水洗滌，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。加入石油醚并傾析，將殘余物在石油醚中升溫并再次傾析。將殘余物濃縮，得到12.8克中間體(25)。
e)中間體(26)的制備
將中間體(25)(0.0294摩爾)在NaOH(1M，0.059mol)和水(60ml)中的混合物攪拌和回流1小時(shí)。將反應(yīng)混合物在冰浴中冷卻至室溫。然后加入二碳酸叔丁酯(0.036mol)并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜。加入HCl(1N，0059mol)并用DCM提取產(chǎn)物。將分離的有機(jī)層干燥，過濾并濃縮，得到10.8g中間體(26)。
實(shí)施例A.10a)中間體(27)的制備 在室溫下、在氮?dú)饬鳁l件下，將60％NaH(0.171摩爾)分批加入到中間體(24)(0.131摩爾)在DMF(450毫升)的混合物中。將混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。滴加入碘乙烷(0.171mol)。在溫度介于50和60℃之間，將混合物攪拌2天，然后冷卻至室溫，傾倒在冰水中并用乙酸乙酯提取。將有機(jī)層用水洗滌，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物用硅膠柱層析純化(洗脫液甲苯/乙酸乙酯90/10)，得到26.5g中間體(27)。
b)中間體(28)的制備
在室溫下將氫氧化鋰一水合物(0.264mol)分批加入到中間體(27)(0.063mol)在水(150ml)中的混合物中。將混合物在室溫下攪拌18小時(shí)。蒸發(fā)除去水(150ml)。用3N HCl將混合物酸化至得到pH＝4，然后用乙酸乙酯提取。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑，得到14g中間體(28)。
實(shí)施例A.11中間體(29)的制備 將中間體(24)(0.0565摩爾)溶解在DMF(110毫升)中。分批加入60％NaH(0.061mol)。在室溫下將混合物攪拌90分鐘。加入1-碘代-丙烷(0.061mol)，并在50-60℃攪拌反應(yīng)混合物45小時(shí)；然后冷卻。將混合物傾倒在冷HCl(1N，300ml)中，并用DCM(2×200ml)提取。將合并的有機(jī)層用水洗滌，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物用硅膠柱層析純化(洗脫液己烷/EtOAc 70/30)。收集所需要的級(jí)份，并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物溶于THF(100ml)中。加入NaOH水溶液(2N，125ml)。將混合物攪拌過夜。將有機(jī)溶劑蒸發(fā)。用DCM洗滌水層，用氯化鈉飽和，在冰浴上冷卻，并用濃HCl溶液酸化至pH值3到4。然后將混合物用二乙醚(4×100ml)提取。將合并的有機(jī)層干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑，得到6.5g中間體(29)。
實(shí)施例A.12a)中間體(30)的制備
在室溫下攪拌中間體(24)(0.166mol)在DMF(350ml)中的混合物。分批加入NaH(60％)(0.2mol)。將混合物在室溫下攪拌1.5小時(shí)，然后加熱到50℃。加入1-碘代丁烷(0.2mol)。將反應(yīng)混合物在50℃攪拌整個(gè)周末；然后冷卻。加入水并用甲苯提取混合物。將分離的有機(jī)層干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。在玻璃過濾器上用硅膠純化殘余物(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 99/1)。收集所需要的級(jí)份并蒸發(fā)溶劑，得到34克中間體(30)。
b)中間體(31)的制備 在室溫下，將中間體(30)(0.09摩爾)在NaH(10％)(400ml)和THF(100毫升)中攪拌28小時(shí)。將有機(jī)溶劑蒸發(fā)。將含水混合物用DCM洗滌；然后用濃HCl溶液酸化(pH值3至4)并用DCM提取。將合并的有機(jī)層干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑，得到22g中間體(31)。
實(shí)施例A.13a)中間體(32)的制備 將中間體(23)(0.2688摩爾)、2-溴-丙烷(0.537摩爾)和三乙胺(0.403摩爾)在DMF(600毫升)中的混合物在130℃攪拌過夜，然后調(diào)到室溫。蒸發(fā)DMF。將殘余物溶解在乙酸乙酯中，傾倒在冰水中，并用乙酸乙酯提取。將有機(jī)層用水洗滌，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物用硅膠柱層析純化(洗脫液環(huán)己烷/EtOAc 80/20)。收集純的級(jí)份并蒸發(fā)溶劑，得到25克中間體(32)(熔點(diǎn)145℃)。
b)中間體(33)的制備 將中間體(32)(0.0942摩爾)在NaOH(200ml，2N)和THF(200毫升)中的混合物在室溫下攪拌72小時(shí)。蒸發(fā)除去溶劑。加入乙酸乙酯。用乙酸乙酯提取混合物。用HCl酸化水層至得到pH值2。攪拌混合物。過濾沉淀，用最少量水洗滌并干燥，得到22g中間體(33)，(熔點(diǎn)203℃)。
實(shí)施例A.14a)中間體(34)的制備 將97％硫酸(80ml)小心地加入至9-(乙酰氨基)-3，4-二氫-2H-1，5-苯并二氧雜環(huán)庚烷-6-羧酸甲酯(0.51摩爾)在甲醇(1000毫升)的混合物中。將混合物在60℃攪拌1小時(shí)，然后冷卻。蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物溶解在DCM中。用KHCO3溶液洗滌混合物。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物懸浮在DIPE和少量ACN中。濾出沉淀，洗滌并干燥，得到105g中間體(34)。
b)中間體(35)的制備 在0℃下，攪拌中間體(34)(0.24摩爾)在水(240毫升)中的混合物。在0℃，滴加入HCl(120毫升)。將混合物攪拌15分鐘。在0℃，滴加入亞硝酸鈉(0.24摩爾)在水(120毫升)中的混合物。將混合物在0℃下攪拌30分鐘，得到混合物(A)。在室溫下，攪拌氯化銅(0.24摩爾)在HCl(120ml)中的混合物。滴加入混合物(A)。在室溫下，將反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)。濾出沉淀，洗滌并干燥，得到55.8g中間體(35)。
c)中間體(36)的制備 將中間體(35)(0.22摩爾)和KOH(2.2摩爾)在水(1000毫升)中的混合物攪拌和回流30分鐘，然后冷卻。用濃HCl溶液酸化混合物。濾出沉淀，洗滌并干燥，得到48g中間體(36)。
d)中間體(37)的制備 將中間體(36)(0.01摩爾)在硫酸(20ml)中的混合物冷卻至-30℃，然后在-30℃滴加入硝酸(0.01摩爾)在硫酸(20毫升)中的混合物，并將反應(yīng)混合物攪拌5分鐘。將混合物傾倒在冰-水中，將產(chǎn)生的沉淀濾出，并用水洗滌，得到中間體(37)。
實(shí)施例A.15a)中間體(38)的制備 在室溫下，攪拌中間體(34)(0.27摩爾)在水(270毫升)中的混合物。在室溫下，滴加入硫酸(97％)(30ml)。將混合物攪拌15分鐘。在室溫下，滴加入亞硝酸鈉(0.27摩爾)在水(270ml)中的混合物。將混合物在室溫下攪拌30分鐘，得到混合物(A)。在室溫下，攪拌溴化銅(I)(0.4摩爾)在水(540毫升)和氫溴酸(270毫升)中的混合物。在室溫下，滴加入混合物(A)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。濾出沉淀，用稀硫酸溶液和水洗滌，并減壓干燥過夜。將殘余物溶解在DCM中。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。減壓干燥固體，得到71.5g中間體(38)。
b)中間體(39)的制備 在溫度介于0和5℃之間，向中間體(38)(0.123mol)在硫酸(280ml)中的混合物中滴加入硝酸(0.135mol)的硫酸(70ml)溶液。將反應(yīng)混合物在0℃攪拌10分鐘，傾倒在冰水中，用DCM提取。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑，得到中間體(39)。
c)中間體(40)的制備 在室溫下，將2N NaOH(700毫升)加入到中間體(39)(0.1205摩爾)在THF(700毫升)的混合物中。將混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。蒸發(fā)NaOH。加入乙酸乙酯。用濃HCl酸化水層。過濾沉淀，用最少量水洗滌并干燥，得到36.5g中間體(40)。
實(shí)施例A.16a)中間體(41)的制備
將2，3-二羥基-5-甲基苯甲酸甲酯(0.198摩爾)、1，3-二溴丙烷(0.198摩爾)和K2CO3(0.396摩爾)在丙酮(360毫升)中的混合物攪拌和回流6小時(shí)，然后冷卻并蒸發(fā)溶劑。將混合物傾倒在冰水中并過濾。將濾液用乙酸乙酯提取。分離有機(jī)層，干燥，過濾，蒸發(fā)溶劑，并用硅膠柱層析純化(洗脫液環(huán)己烷/乙酸乙酯80/20到70/30)，得到中間體(41)。
b)中間體(42)的制備 將中間體(41)(0.1129摩爾)在2N NaOH溶液(370ml)和THF(370毫升)的混合物中的混合物在室溫下攪拌15小時(shí)。蒸發(fā)THF并用12NHCl酸化混合物。過濾沉淀，用水洗滌并干燥，得到21.9g中間體(42)，(熔點(diǎn)74℃)。
實(shí)施例A.17a)中間體(45)的制備 將5-溴-2，3-二羥基苯甲酸甲酯(0.397摩爾)和K2CO3(0.87摩爾)在1，3-二溴丙烷(49毫升)和丙酮(1000毫升)中的混合物攪拌和回流22小時(shí)，然后冷卻反應(yīng)混合物，用dicalite過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物在NaHCO3(5％，水溶液)和DCM之間分配。將有機(jī)層分離，干燥，用dicalite過濾并蒸發(fā)溶劑，得到112g中間體(45)。
b)中間體(46)的制備 中間體(45)(0.14摩爾)在THF(200ml)和2NNaOH溶液(300毫升)中的混合物在30-60℃攪拌4小時(shí)，然后蒸發(fā)有機(jī)溶劑，并在冰上冷卻含水濃縮液，用DCM提取。進(jìn)一步在冰上冷卻水層，酸化到pH值＝1，濾出固體殘余物并干燥，得到33g中間體(46)。
c)中間體(47)的制備 將中間體(46)(0.33摩爾)和氰化銅(I)(2.7摩爾)在DMA(800毫升)中的混合物在140℃攪拌20小時(shí)，然后冷卻反應(yīng)混合物，加入FeCl3.6H2O(130g)、HCl(33ml)和水(200ml)。將混合物在60℃攪拌20小時(shí)，冷卻，并傾倒在水中。加入乙酸乙酯，并將液層過濾，以除去不溶性鹽。將有機(jī)層分離，用水洗滌、干燥、過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物溶解在水中，加入5％NaOH溶液，然后用DIPE提取混合物，用HCl酸化并用乙酸乙酯提取。將有機(jī)層分離，干燥并蒸發(fā)溶劑。將殘余物用短柱層析法純化(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 95/5+2ml乙酸)，得到7g中間體(47)。
實(shí)施例A.18a)中間體(48)的制備
將中間體(16)(0.126mol)、NBS(0.151摩爾)和[1，1’-聯(lián)苯基]-2，2’二羧酸(0.0126摩爾)在四氯甲烷(500毫升)中的混合物攪拌和回流5小時(shí)，傾倒在10％K2CO3中并用DCM提取。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑至干。將殘余物用硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/環(huán)己烷80/20到100/0)，得到16.5g中間體(48)。
b)中間體(49)的制備 將中間體(48)(0.048摩爾)和NaCN(0.1096摩爾)在DMSO(330毫升)中的混合物在室溫下攪拌15小時(shí)。加入K2CO3(10％)。用乙酸乙酯提取混合物。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物用硅膠柱層析純化(洗脫液環(huán)己烷/乙酸乙酯70/30)，得到10.8g中間體(49)。
c)中間體(50)的制備 將中間體(49)(0.0419摩爾)和氫氧化鋰一水合物(0.0837摩爾)在THF(100毫升)和水(100毫升)中的混合物在室溫下攪拌5小時(shí)。蒸發(fā)THF。用濃HCl溶液酸化混合物，并用乙酸乙酯提取。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑至干，得到9.8g中間體(50)。
實(shí)施例A.19a)中間體(51)的制備 將中間體(23)(0.0895摩爾)在室溫下分批地加入到濃硫酸(28ml)在水(42毫升)中的混合物中。加入冰(70克)。將混合物大力攪拌，然后冷卻到0℃。在0℃和7℃溫度之間，加入NaNO2(0.0967mol)的水(15ml)溶液。將混合物攪拌15分鐘，然后在氮?dú)饬鳁l件下、在5℃和7℃之間將其加入到CuSO4.5H2O(0.358mol)在水(250ml)中的熱溶液(85℃)中。將混合物攪拌和回流30分鐘，然后冷卻，傾倒在冰水中，并用乙酸乙酯提取。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物用硅膠柱層析純化(洗脫液甲苯/乙酸乙酯80/20)。收集兩個(gè)級(jí)份并蒸發(fā)溶劑，得到2.7克中間體(51)。
b)中間體(52)的制備 將中間體(51)(0.012摩爾)、(CH3)2SO4(0.012摩爾)和K2CO3(0.0144摩爾)在丙酮(30毫升)中的混合物攪拌和回流4小時(shí)，然后冷卻到室溫，并蒸發(fā)溶劑至干。將殘余物溶解在DCM和水的混合物中。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑，得到2.7g中間體(52)。
c)中間體(53)的制備
在室溫下，將2N NaOH(20毫升)加入到中間體(52)(0.0113摩爾)在THF(20毫升)的混合物中。將混合物在室溫下攪拌18小時(shí)。在30℃蒸發(fā)THF。將水層用乙酸乙酯提取兩次，用6N HCl酸化，并用乙酸乙酯提取。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑，得到2.5g中間體(53)。
實(shí)施例A.20a)中間體(54)的制備 將中間體(48)(0.11摩爾)和30％CH3ONa/CH3OH(0.44摩爾)在甲醇(330ml)中的混合物在60℃攪拌2小時(shí)，然后調(diào)到室溫，并蒸發(fā)溶劑至干。將殘余物溶解在DCM和水的混合物中。用DCM提取混合物。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑，得到24g中間體(54)。
b)中間體(55)的制備 將氫氧化鋰二水合物(0.182摩爾)在室溫下滴加到中間體(54)(0.091摩爾)在THF(20毫升)和水(200毫升)的混合物中。將混合物在室溫下攪拌過夜。蒸發(fā)THF。加入乙酸乙酯。用乙酸乙酯提取混合物。用濃HCl酸化水層。加入DCM。用DCM提取混合物。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑，得到21.5g中間體(55)。
實(shí)施例A.21中間體(56)的制備
將(反式)-3-羥基-4-[[(苯基甲基)氨基]甲基]-1-哌啶羧酸1，1-二甲基乙酯[描述在WO-00/37461中，作為中間體(1-d)](0.023摩爾)在甲醇(100毫升)中的混合物氫化，用鈀/碳(10％，1克)作為催化劑。吸收氫氣(1當(dāng)量)之后，濾出催化劑并將濾液蒸發(fā)。將殘余物在DIPE+ACN中固化，過濾并干燥，得到4克(反式)-4-(氨甲基)-3-羥基-1-哌啶羧酸1，1-二甲基乙酯(中間體56，熔點(diǎn)178℃)。用類似的方法，但從順式-3-羥基-4-哌啶甲醇(描述在J.Org Chem.，34，pp.3674-3676(1969)中)開始，制備了(順式)-4-(氨甲基)-3-羥基-1-哌啶羧酸1，1-二甲基乙酯(中間體57)。
中間體(57)實(shí)施例A.22a)中間體(58)的制備 將(反式)-3-羥基-4-[[(苯基甲基)氨基]甲基]-1-哌啶羧酸1，1-二甲基乙酯[描述在WO-00/37461中，作為中間體(1-d)](2.73摩爾)分離，并用手性層析柱在Chiralcel AD上純化(洗脫液己烷/乙醇80/20)。收集所需要的級(jí)份，并將溶劑蒸發(fā)。加入甲苯并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上共沸，得到377克(3S-反式)-3-羥基-4-[[(苯基甲基)氨基]甲基]-1-哌啶羧酸1，1-二甲基乙酯(中間體58)。
b)中間體(59)的制備
用鈀/碳(10％；2g)作為催化劑，將中間體(58)(0.028mol)在甲醇(100ml)中的混合物進(jìn)行氫化。吸收氫氣之后(1當(dāng)量)，濾出催化劑并蒸發(fā)濾液，得到4.7克(3S-反式)-4-(氨甲基)-3-羥基-1-哌啶羧酸1，1-二甲基乙酯(中間體(59)；[α]20，D＝+4.37°(c＝24.03mg/5ml，在CH3OH中))。
實(shí)施例A.23a)中間體(60)的制備 將(3R-反式)-3-羥基-4-[[(4-甲基苯基)-磺?；鵠氧基甲基]-1-哌啶羧酸1，1-二甲基乙酯[在WO-00/37461中描述，作為中間體(1-c-I)](0.03摩爾)和芐胺(0.1摩爾)在THF(250毫升)中的混合物在125℃(反應(yīng)釜)攪拌16小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物，并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物在DCM和K2CO3水溶液之間分配。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物用DIPE結(jié)晶，得到5.3克(3R-反式)-3-羥基-4-[[(苯基甲基)氨基]甲基]-1-哌啶羧酸1，1-二甲基乙酯(中間體60)([α]20，D＝-68.65°(c＝23.16mg/5ml在CH3OH中)；熔點(diǎn)91℃)。
b)中間體(61)的制備
在50℃溫度下，用鈀/碳(10％；2g)作為催化劑，將中間體(60)(0.016mol)在甲醇(150ml)中的混合物進(jìn)行氫化。吸收氫氣之后(1當(dāng)量)，將催化劑濾出并蒸發(fā)濾液，得到(3R-反式)-4-(氨甲基)-3-羥基-1-哌啶羧酸1，1-二甲基乙酯(中間體61)。
實(shí)施例A.24a)中間體(62)的制備 反應(yīng)在氮?dú)鈿夥障逻M(jìn)行。將氫化鈉(0.3摩爾)加入到反式-3-羥基-4-[[[(4-甲基苯基)磺?；鵠氧基]甲基]-1-哌啶羧酸1，1-二甲基乙酯[在WO-00/37461中描述，作為中間體(1-c)](0.27摩爾)的THF(1300毫升)溶液中。將混合物攪拌30分鐘。加入碘甲烷(0.54mol)并將得到的反應(yīng)混合物攪拌90分鐘。加入少量水。將溶劑蒸發(fā)，并將殘余物在水和DCM之間分配。分離有機(jī)層，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑，得到反式-4-[[[(4-甲基苯基)磺?；鵠氧基]-甲基]-3-甲氧基-1-哌啶羧酸1，1-二甲基乙酯(中間體62)。
b)中間體(63)的制備 將中間體(62)(0.065摩爾)在THF(250毫升)中的混合物在125℃的壓熱器中用液態(tài)NH3處理16小時(shí)。過濾反應(yīng)混合物，并蒸發(fā)濾液。將殘余物在5％NaOH水溶液和DCM之間分配。分離有機(jī)層，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑，得到16克(反式)-4-(氨甲基)-3-甲氧基-1-哌啶羧酸1，1-二甲基乙酯(中間體(63)。
實(shí)施例A.25
a)中間體(64)的制備 在10℃，攪拌4-氧代-1-哌啶羧酸叔丁酯(0.1摩爾)和硝基甲烷(0.1摩爾)在甲醇(200毫升)中的混合物。在10℃，滴加入甲醇鈉(0.11摩爾)。在室溫下將反應(yīng)混合物攪拌20小時(shí)。蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物溶解在水中，然后用乙酸中和，然后用DCM提取兩次。將分離的有機(jī)層用水洗滌，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物懸浮在DIPE中，過濾、洗滌并干燥，得到17.2g中間體(64)(熔點(diǎn)160℃)。
b)中間體(65)的制備 在14℃，用鈀/碳(10％，1g)作為催化劑，將中間體(64)(0.058mol)和乙酸(12ml)在甲醇(250ml)中的混合物氫化。吸收氫氣(3當(dāng)量)之后，濾出催化劑并將濾液蒸發(fā)。將殘余物溶解在冰/水中，然后用氫氧化鉀堿化，并用K2CO3鹽析。用DCM提取混合物兩次。將分離的有機(jī)層干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物懸浮在DIPE中，過濾、洗滌并干燥，得到7.5g中間體(65)。
實(shí)施例A.26a)中間體(66)的制備 將(反式)-4-[[(苯基甲基)氨基]甲基]-3-哌啶醇(在WO-00/37461中作為中間體(6)制備)(0.04摩爾)、3-溴-1-丙醇(0.04摩爾)和Na2CO3(0.08摩爾)在異丁基甲基酮(400毫升)中的混合物攪拌和回流18小時(shí)。蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物在水和DCM之間分配。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物用硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)93/7)。收集所需要的級(jí)份，并將溶劑蒸發(fā)。加入甲苯，然后再次蒸發(fā)，得到7.2克中間體(66)。
b)中間體(67)的制備 用鈀/碳(10％；2g)作為催化劑，將中間體(66)(0.026mol)在甲醇(100ml)中的混合物進(jìn)行氫化。吸收氫氣(1當(dāng)量)之后，濾出催化劑并將濾液蒸發(fā)，得到4.4克中間體(67)。
實(shí)施例A.27a)中間體(68)的制備 將(反式)-4-[[(苯基甲基)氨基]甲基]-3-哌啶醇(在WO-00/37461中作為中間體(6)制備)(0.04摩爾)、1-氯-3-甲氧基丙烷(0.04mol)和Na2CO3(0.08mol)在異丁基甲基酮(300毫升)中的混合物攪拌和回流20小時(shí)，然后冷卻并蒸發(fā)溶劑。將殘余物溶解在DCM中，然后用水洗滌、干燥、過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物用柱層析在硅膠上純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)97/3)。收集純的級(jí)份并蒸發(fā)溶劑，得到5克中間體(68)。
b)中間體(69)的制備
用鈀/碳(10％；1g)作為催化劑，將中間體(68)(0.016mol)在甲醇(150ml)中的混合物進(jìn)行氫化。吸收氫氣(1當(dāng)量)之后，濾出催化劑并將濾液蒸發(fā)，得到3.3克中間體(69)。
實(shí)施例A.28a)中間體(70)的制備 將(反式)-3-羥基-4-[[(苯基甲基)氨基l甲基]-1-哌啶羧酸1，1-二甲基乙酯(WO-99/02156中的中間體(1-d))(0.426摩爾)、苯甲醛(0.5摩爾)和鈀/碳(10％)(5克)在噻吩溶液(5毫升)和甲醇(1000ml)中的混合物在70-80℃攪拌過夜。蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物在DCM(150毫升)和5％NaOH水溶液(150ml)之間分配。將混合物各層分離。用DCM提取水層。將合并的有機(jī)層干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物用柱層析在硅膠上純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)90/10)。收集純的級(jí)份，并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物用DIPE和一滴ACN結(jié)晶。過濾沉淀并干燥，得到2.35克(反式)-4-[[二(苯基甲基)氨基]甲基]-3-羥基-1-哌啶羧酸1，1-二甲基乙酯(中間體70)，熔點(diǎn)133℃)。
b)中間體(71)的制備 將中間體(70)(0.284摩爾)在2-丙醇(1000毫升)和6N HCl在2-丙醇(250毫升)的混合物中的混合物攪拌和回流15分鐘，然后冷卻。蒸發(fā)除去溶劑。加入5％NaOH水溶液(750ml)。用DCM提取混合物三次。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑，得到88.95克(反式)-4-[[二(苯基甲基)氨基]甲基]-3-哌啶醇(中間體71)。
c)中間體(72)的制備 用鈀/碳(10％)(2g)作為催化劑、在噻吩溶液(3ml)的存在下，將中間體(71)(0.083mol)和丁醛(7g)在甲醇(300ml)中的混合物氫化。吸收氫氣(1當(dāng)量)之后，用硅藻土過濾催化劑并將濾液蒸發(fā)。將殘余物溶于2N HCl水溶液(500ml)中。將混合物用甲苯洗滌，然后將各層分離。將水層用50％NaOH水溶液堿化，然后用甲苯提取三次。將合并的有機(jī)層干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑，得到29克(反式)-4-[[二(苯基甲基)氨基]甲基]-1-丁基-3-哌啶醇(中間體72)。
d)中間體(73)的制備 用鈀/碳(10％)(2g)作為催化劑，將中間體(72)(0.079mol)在甲醇(250ml)中的混合物氫化。吸收氫氣之后(2當(dāng)量)，將催化劑用硅藻土過濾并蒸發(fā)濾液，得到13.8g(反式)-4-(氨甲基)-1-丁基-3-哌啶醇(中間體73)。
實(shí)施例A.29a)中間體(74)的制備
將中間體(71)(0.0387摩爾)溶于2-甲基-丙醇(200毫升)中。加入甲磺酸四氫呋喃酯(0.05摩爾)和Na2CO3(0.0774摩爾)。將反應(yīng)混合物攪拌和回流24小時(shí)；然后冷卻。將沉淀過濾。蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物用柱層析在硅膠上純化(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 97/3)。收集所需要的級(jí)份并蒸發(fā)溶劑，得到11.1克中間體(74)。
b)中間體(75)的制備 用鈀/碳(10％；2g)作為催化劑，將在甲醇(150ml)中的中間體(74)(0.0279mol)氫化。吸收氫氣(2當(dāng)量)之后，用decalite濾出催化劑并將溶劑蒸發(fā)，得到5.74克中間體(75)。
實(shí)施例A.30a)中間體(76)的制備 (反式)-4-(氨甲基)-3-羥基-1-哌啶羧酸1，1-二甲基乙酯(在WO-00/37461中作為中間體(1-e)制備)(0.06摩爾)在用HCl(60毫升)和2-丙醇(400毫升)飽和的2-丙醇中攪拌和回流30分鐘，然后冷卻。蒸發(fā)溶劑，并與甲苯共沸。干燥殘余物，得到12g中間體(76)。
b)中間體(77)的制備
將4-溴-丁腈(0.06摩爾)，中間體(76)(0.06摩爾)和Na2CO3(0.24摩爾)在ACN(600毫升)中的混合物攪拌和回流20小時(shí)；然后冷卻并過濾。蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物用硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)85/15)。收集所需要的級(jí)份并蒸發(fā)溶劑，得到4.5克中間體(77)。
實(shí)施例A.31a)中間體(78)的制備 在室溫下，攪拌三氟乙酸(1.15mol)在水(2000ml)中的混合物。將1，2，3，6-四氫-1-(苯基甲基)-吡啶(1.15摩爾)滴加到混合物中，并將混合物在室溫下攪拌15分鐘。分批加入N-溴琥珀酰亞胺(1.4摩爾)，并用1小時(shí)將混合物升溫到30-35℃。將反應(yīng)混合物攪拌30分鐘。再次分批加入N-溴琥珀酰亞胺(0.085摩爾)，并將混合物升溫到35℃。在室溫下將反應(yīng)混合物攪拌過夜，然后傾析并滴加到20％NaOH溶液(2000ml)中。將混合物在室溫下攪拌過夜。用DCM提取產(chǎn)物(3x)。將分離的有機(jī)層干燥，過濾并濃縮，得到193g中間體(78)。
b)中間體(79)的制備 將氫化鋰(0.66摩爾)在THF(600毫升，p.a.)中的混合物在室溫及氮?dú)庀路磻?yīng)，然后滴加入2-羥基-2-甲基-丙腈(0.66摩爾)在THF(150毫升)中的混合物，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)，得到混合物(A)。將中間體(78)(0.6摩爾)在THF(250毫升)中的混合物滴加到混合物(A)中，加入完成之后，將反應(yīng)混合物攪拌和回流4小時(shí)，然后在室溫下攪拌過夜。加入DCM和水，分離有機(jī)層，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑，得到128克中間體(79)。
c)中間體(80)的制備 用Raney Nicke作為催化劑，在14℃將中間體(79)(0.6mol)在CH3OH/NH3(1.5l)中氫化。吸收氫氣(2當(dāng)量)之后，濾出催化劑并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物溶于ACN中，并用乙二酸(0.6ml)轉(zhuǎn)變?yōu)橐叶猁}(1∶1)。將溶劑傾析。將殘余物懸浮在2-丙醇中。過濾沉淀，并溶解在甲醇中，沸騰并冷卻。過濾沉淀，洗滌并干燥，得到107g中間體(80)。
實(shí)施例A.32中間體(81)的制備 將甲基[4-[(甲基磺?；?氧基]丁基]-氨基甲酸1，1-二甲基乙酯(0.02摩爾)、中間體(76)(0.02摩爾)和Na2CO3(0.08摩爾)在ACN(100毫升)中的混合物攪拌和回流48小時(shí)，冷卻，過濾并蒸發(fā)濾液。將殘余物用柱層析在硅膠上純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)80/20)，得到2.4g中間體(81)。
實(shí)施例A.33a)中間體(82)的制備 將中間體(3)(0.146摩爾)在DCM(400毫升)中攪拌。加入三乙胺(0.146mol)。將反應(yīng)混合物冷卻至溫度低于10℃。在此溫度下，滴加入甲酸(0.146mol)，并在此溫度下攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)(＝混合物A)。在室溫下將中間體(56)(0.146摩爾)在DCM(400毫升)中攪拌1小時(shí)；然后加入到混合物(A)中。在室溫下將反應(yīng)混合物攪拌90分鐘。加入水。將分離的有機(jī)層干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑，得到81g中間體(82)。
b)中間體(83)的制備 將中間體(82)(0.15摩爾)在2-丙醇/6N HCl(120毫升)和2-丙醇(1200毫升)中攪拌和回流2小時(shí)。使反應(yīng)混合物冷卻至室溫過夜。過濾所形成的沉淀，干燥，得到54.5g中間體(83)，(熔點(diǎn)150℃)。
用類似的方法，制備中間體(84)和(85)。
中間體(84) 中間體(85)
實(shí)施例A.34a)中間體(86)的制備 在5℃攪拌中間體(7)(0.08摩爾)在DCM(400毫升)和三乙胺(0.1摩爾)中的混合物。滴加入甲酸(0.08mol)。在5℃將混合物攪拌30分鐘。在5℃加入在DCM(400ml)中的中間體(80)(0.08摩爾)和三乙胺(0.25摩爾)。將反應(yīng)混合物升溫至室溫并用水洗滌。將分離的有機(jī)層干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑，并與甲苯共同蒸發(fā)，得到41g中間體(86)。
b)中間體(87)的制備 用鈀/碳(10％；2g)作為催化劑，將在甲醇(250ml)中的中間體(86)(0.08mol)氫化。吸收氫氣(1當(dāng)量)之后，濾出催化劑并將溶劑蒸發(fā)，得到34克中間體(87)。
用類似的方法，制備中間體(88)。
中間體(88)實(shí)施例A.35中間體(89)的制備
將中間體(7)(0.013摩爾)在DCM(100毫升)中攪拌。加入三乙胺(0.015摩爾)并在5℃攪拌混合物。在5℃滴加入甲酸(0.013mol)；然后在5℃攪拌反應(yīng)混合物30分鐘。在5℃加入在DCM(100ml)中的三乙胺(0.03mol)和中間體(67)(0.013mol)。將反應(yīng)混合物升溫至室溫，然后用水洗滌。將分離的有機(jī)層干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑，得到5.3g中間體(89)。
實(shí)施例A.36a)中間體(90)的制備 將中間體(9)(0.06mol)加入到DCM(250毫升)中。加入三乙胺(8.4毫升)并將混合物冷卻至-5℃。用5分鐘滴加入甲酸(0.06mol)。將反應(yīng)混合物在溫度范圍在-5和-10℃之間攪拌40分鐘。立刻加入在DCM(50ml)和三乙胺(8.4ml)中的中間體(56)(0.06摩爾)。除去冰浴，將混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。加入DCM(200毫升)。將混合物用水/NaOH(5％水溶液)/水/冷HCl(5％水溶液)/水洗滌。將分離的有機(jī)層干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物在DIPE/ACN中研磨。濾出沉淀并干燥，得到23.2g中間體(90)。
b)中間體(91)的制備
在50℃、用鉑/碳(5％，3g)作為催化劑、在噻吩溶液(3ml)的存在下，將中間體(90)(0.0478mol)在甲醇(250ml)中氫化。吸收氫氣(3當(dāng)量)之后，用dicalite濾出催化劑并將溶劑蒸發(fā)。在DIPE中研磨殘余物。過濾沉淀，干燥，得到19.7g中間體(91)(熔點(diǎn)161℃)。
用類似的方法，制備中間體(92)、(93)和(94)。
實(shí)施例A.37(中間體95)的制備
在5℃攪拌中間體(17)(0.336摩爾)和三乙胺(0.4摩爾)在DCM(1000毫升)中的混合物，然后滴加入氯甲酸乙酯(0.35摩爾)并將反應(yīng)混合物攪拌30分鐘。在5℃向該混合物中加入中間體(59)(83克)的DCM(1000毫升)溶液，然后使反應(yīng)混合物達(dá)到室溫并用水洗滌。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑，得到150g中間體(95)。
表I-1按照實(shí)施例A.38的相同步驟，制備中間體(96)至(114)

實(shí)施例A.38中間體(115)的制備 將4-甲氧基-1-丁醇(0.9摩爾)在DCM(1500毫升)中攪拌，并加入三乙胺(1.35摩爾)，然后滴加入甲磺酰氯(1.1摩爾)(溫度升至40℃)，并在室溫下攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí)。用水洗滌混合物。將有機(jī)層分離，干燥并蒸發(fā)溶劑，然后與甲苯共同蒸發(fā)，得到167g中間體(115)。
實(shí)施例A.39中間體(116)的制備
將三乙胺(0.11摩爾)加入到3-環(huán)己基氧基丙-1-醇(0.063摩爾)在DCM(120毫升)中的混合物中，然后滴加入甲磺酰氯(0.07摩爾)，并在室溫下將反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)。用Na2CO3溶液水溶液和水洗滌混合物。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物用柱層析在硅膠上純化(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 99/1)。將產(chǎn)物級(jí)份收集并蒸發(fā)溶劑，然后與甲苯共同蒸發(fā)，得到8.6g中間體(116)。
實(shí)施例A.40a)中間體(117)的制備 將4-苯氧基丁基氯(0.135mol)在DCM(50ml)中的混合物攪拌，并冷卻至0℃。用45分鐘滴加入氯磺酸(0.149mol)。除去冰浴，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。然后滴加入乙二酰二氯(0.176mol)，接著滴加入DMF(2ml)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌20小時(shí)。然后，將混合物傾倒在冰上，用DCM提取，干燥并蒸發(fā)溶劑，得到中間體(117)。
b)中間體(118)的制備 將中間體(117)(0.135mol)的THF(500ml)溶液攪拌并冷卻至0℃，然后將氨(氣體)鼓泡通過溶液。過濾反應(yīng)混合物，并蒸發(fā)溶劑。將DCM(600ml)加入到殘余物中，并將混合物用HCl(600ml，1N)洗滌。分離水層，并用DCM(2次，300ml)提取。將合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，干燥，并蒸發(fā)溶劑。將殘余物用CH3OH/DIPE結(jié)晶，過濾并干燥，得到18.5g中間體(118)。
用類似的方法，但從4-苯氧基丙基氯或4-苯氧基乙基氯開始，制備中間體(119)和(120)。
中間體(119)中間體(120)實(shí)施例A.41中間體(121)的制備 將1-吡咯烷碳酰氯(0.037摩爾)溶于四氯甲烷(12毫升)中。滴加入3-溴-1-丙醇(0.036mol)并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌7天。將混合物在冰上冷卻，并加入CH3OH/(NH3)(2ml)。然后，加入DCM(100ml)，用水洗滌混合物，干燥并蒸發(fā)溶劑。在玻璃過濾器上用硅膠純化殘余物(洗脫液DCM)。收集產(chǎn)物級(jí)份并蒸發(fā)溶劑，得到4克中間體(121)。
實(shí)施例A.42a)中間體(122)的制備 將中間體(87)(0.0154mol)、4-溴-丁酸甲酯(0.02mol)和三乙胺(0.02mol)在DMF(150ml)中的混合物在70℃攪拌過夜。冷卻反應(yīng)混合物，并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物溶解在DCM中并用水洗滌。將分離的有機(jī)層干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑，得到8g中間體(122)。
b)中間體(123)的制備 將中間體(122)(0.0154摩爾)在HCl/2-丙醇(6N)(0.09摩爾)和甲醇(100毫升)中攪拌和回流1小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物。蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物溶解在DCM中并用水/NH3洗滌。將分離的有機(jī)層干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物用柱層析在硅膠上純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)97/3)。收集所需要的級(jí)份并蒸發(fā)溶劑，得到1.75克中間體(123)。
用類似的方法，制備中間體(124)至(129)。
中間體(124) 中間體(125) 中間體(126)
中間體(127) 中間體(128) 中間體(129)對(duì)于最終化合物的制備，也已經(jīng)使用了現(xiàn)有技術(shù)已知的中間體，例如，3-氰基丙基溴，甲磺酸四氫糠酯，3-羥基-丙基溴，2-甲氧基乙基溴，3-甲氧基丙基氯，(反式)-4-(氨甲基)-1-[2-(1，3-二氧戊環(huán)-2-基)乙基]-3-哌啶醇(在WO-00/37461中描述為中間體8)，1-氯-3-(1-甲基乙氧基)-丙烷，2-(3-氯丙基)-2-甲基-1，3-二氧戊環(huán)，2-(2-溴乙基)-1，3-二氧戊環(huán)，4-溴丁酸甲酯，2-氯-乙腈，2-(2-氯乙氧基)-乙醇，N-(2-氯乙基)-甲磺酰胺，和N-[3-[(甲基磺?；?氧基]丙基]-甲磺酰胺。
B.最終化合物的制備實(shí)施例B.1將中間體(95)(0.336mol)在HCl/2-丙醇(160ml)和2-丙醇(1400ml)中的混合物攪拌和回流1小時(shí)。將溶劑蒸發(fā)，并將殘余物溶解在DCM和少量甲醇的混合物中。將混合物用氨水溶液洗滌，并分離有機(jī)層，干燥，過濾并蒸發(fā)，得到71g化合物(255)。
實(shí)施例B.2a)中間體(20)的制備 將中間體(85)(0.01摩爾)、中間體(115)(0.014摩爾)和碳酸鈉(0.02摩爾)在異丁醇(100毫升)中的混合物攪拌和回流40小時(shí)；然后冷卻并過濾。將濾液的溶劑蒸發(fā)。將殘余物用柱層析在硅膠上純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)97/3)。收集所需要的級(jí)份并蒸發(fā)溶劑，得到2.6克中間體(20)。
b)將中間體(20)(0.006mol)在甲醇(100ml)中用鈀/碳(10％，1g)作為催化劑、在噻吩溶液(0.5ml)的存在下進(jìn)行氫化。吸收氫氣(3當(dāng)量)之后，濾出催化劑并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物在玻璃濾器上用硅膠純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)96/4)。收集所需要的級(jí)份，過濾并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物溶于2-丙醇中，并用(E)-2-丁烯二酸將其轉(zhuǎn)變?yōu)?E)-2-丁烯二酸鹽(1∶1)。過濾沉淀，洗滌并干燥，得到1.8g化合物(1)(熔點(diǎn)174℃)。
實(shí)施例B.3a)中間體(43)的制備 將中間體(26)(0.012mol)溶于DCM(60ml)中。加入三乙胺(0.012mol)，并將反應(yīng)混合物冷卻至溫度低于10℃。小心地加入甲酸(0.012mol)，并在溫度低于10℃下將反應(yīng)混合物攪拌45分鐘，得到混合物(A)。將中間體(67)(0.011mol)在DCM(60ml)中攪拌。加入三乙胺(0.029mol)，并在室溫下將反應(yīng)混合物攪拌45分鐘，得到混合物(B)。將混合物(A)加入到混合物(B)中，并將得到的反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜。用5％NaOH、然后用水洗滌反應(yīng)混合物。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物用柱層析在硅膠上純化(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 95/5)。收集產(chǎn)物級(jí)份并蒸發(fā)溶劑，得到3.5克中間體(43)。
b)將中間體(43)(0.007mol)在6N HCl/2-丙醇(7ml)和2-丙醇(70ml)中的混合物攪拌和回流一小時(shí)。蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物在水和DCM之間分配。加入碳酸鈉。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物懸浮在DIPE中，過濾并干燥(真空，40℃)。將殘余物溶于水和50％NaOH中。用DCM提取混合物。將分離的有機(jī)層干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物干燥(真空，40℃)，然后用DIPE/ACN結(jié)晶，過濾并干燥，得到1.3克化合物(2)(熔點(diǎn)150℃)。
實(shí)施例B.4a)中間體(44)的制備 將中間體(88)(0.0106摩爾)、1-溴-2-甲氧基-乙烷(0.015摩爾)和碳酸鈉(0.02摩爾)在異丁醇(100毫升)中的混合物攪拌和回流20小時(shí)，然后將反應(yīng)混合物冷卻，過濾鹽并蒸發(fā)濾液。將殘余物用柱層析在硅膠上純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)97/3)。收集產(chǎn)物級(jí)份并蒸發(fā)溶劑，得到3.3克中間體(44)。
b)將中間體(44)(0.0067摩爾)和6N HCl/2-丙醇(0.03摩爾)在2-丙醇(80毫升)中的混合物攪拌和回流1小時(shí)，然后將反應(yīng)混合物冷卻并蒸發(fā)溶劑。將殘余物溶解在DCM中，并用2％NaOH水溶液洗滌。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物懸浮在DIPE中，將混合物沸騰并冷卻。過濾得到的沉淀，洗滌并干燥，得到1.78g化合物(33)(熔點(diǎn)135℃)。
實(shí)施例B.5將化合物(255)(0.0125mol)、3-甲氧基丙基氯(0.025mol)和碳酸鉀(0.0375mol)在ACN(50毫升)中的混合物攪拌和回流20小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻，傾倒在水中，并用DCM提取。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物用柱層析在硅膠上純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)93/7/0.5)。收集純的級(jí)份，并將溶劑蒸發(fā)。過濾沉淀，用2-丙酮和DIPE的混合物重結(jié)晶，得到3g化合物(200)(熔點(diǎn)108℃；[α]20，D＝-10.70°，(c＝10.28mg/2ml在甲醇中))。
實(shí)施例B.6將化合物(8)(0.0094摩爾)、丁醛(0.0094摩爾)和乙酸鉀(0.015摩爾)在甲醇(100毫升)的混合物用鉑/碳(5％，1g)作為催化劑、在噻吩溶液(2ml)的存在下氫化。吸收氫氣(1當(dāng)量)之后，用硅藻土過濾催化劑并將濾液蒸發(fā)。將殘余物在2％NaOH水溶液(100ml)和DCM(150ml)之間分配。分離各層。將水相用DCM(100ml)反萃取。將合并的有機(jī)層干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物用柱層析在硅膠上純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)97/3)。收集產(chǎn)物級(jí)份，并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物溶于ACN中并轉(zhuǎn)變?yōu)橐叶猁}(1∶2)，然后過濾并干燥，得到1.62克化合物(11)(熔點(diǎn)＞110℃)。
可以使用類似的步驟、利用4-氟-苯甲醛替代丁醛來制備化合物例如化合物(64)。
實(shí)施例B.7將中間體(123)(0.004mol)在水中(100毫升)攪拌和回流6小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻并用DCM洗滌。蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物懸浮在ACN中。過濾沉淀，洗滌并干燥，得到1.58g化合物(16)(熔點(diǎn)240℃)。
實(shí)施例B.8將三乙胺(1.4毫升)加入到中間體(12)(0.01摩爾)的DCM(75毫升)懸浮液中，并將反應(yīng)混合物冷卻至溫度低于0℃。在溫度低于0℃時(shí)滴加入甲酸(0.96)，并在溫度低于0℃下將反應(yīng)混合物攪拌30分鐘。加入中間體(69)(0.01摩爾)在DCM(25毫升)和三乙胺(2.4毫升)中的懸浮液，然后在室溫下攪拌混合物3小時(shí)。加入DCM(100毫升)和水(150毫升)，攪拌混合物并分離各層。將有機(jī)層用5％NaOH水溶液和水洗滌，然后干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物用柱層析在硅膠上純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)96/4)。收集產(chǎn)物級(jí)份，并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物用帶有少量ACN的DIPE結(jié)晶，過濾得到的沉淀并干燥，得到2.2g化合物(26)(熔點(diǎn)106-108℃)。
實(shí)施例B.9將化合物(43)(0.0051mol)在5％HCl水溶液(50ml)和THF(50ml)中的混合物在室溫下攪拌過夜；然后真空濃縮。將濃縮液用氨水溶液堿化，并用DCM提取(3x)。將分離的有機(jī)層干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物用DIPE/ACN結(jié)晶。過濾沉淀并干燥，得到1.9g化合物(44)(熔點(diǎn)130℃)。
實(shí)施例B.10a)中間體(130)的制備 將化合物(24)(0.026摩爾)在CH3OH/NH3(250毫升)中用RaneyNickel作為催化劑、在噻吩溶液(1ml)的存在下氫化。吸收氫氣(2當(dāng)量)之后，濾出催化劑并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物用ACN結(jié)晶(0℃)。濾出沉淀并干燥，得到8g中間體(130)。
b)將中間體(130)(0.008mol)溶解在氯仿(100毫升)中。加入三乙胺(0.012mol)。在溫度低于5℃時(shí)，滴加入在氯仿(10ml)中的甲磺酰氯(0.008mol)。將反應(yīng)混合物攪拌30分鐘，用水洗滌、干燥、過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物用硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)93/7)。收集所需要的級(jí)份，并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物懸浮在DIPE/ACN中(0℃)。過濾沉淀并干燥，得到1.1g化合物(63)(熔點(diǎn)180℃)。
實(shí)施例B.11將中間體(130)(0.016摩爾)、2-氯-3-甲基-吡嗪(0.016摩爾)和氧化鈣(0.02摩爾)在DMA(5毫升)中的混合物在120℃攪拌48小時(shí)；然后冷卻。加入水并用CH2Cl2/CH3OH提取混合物。將分離的有機(jī)層干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物用硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)93/7)。收集所需要的級(jí)份，并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物懸浮在DIPE中(0℃)。過濾沉淀并干燥，得到1.45g化合物(68)(熔點(diǎn)100℃)。
實(shí)施例B.12a)中間體(131)的制備 將中間體(88)(0.01摩爾)和1，1-二甲基-甲基-(3-氧代丙基)-氨基甲酸酯(±0.015摩爾)在THF(100毫升)中的混合物用鈀/碳(10％，2克)作為催化劑、在噻吩溶液(2毫升)的存在下氫化。吸收氫氣(1當(dāng)量)之后，濾出催化劑并將濾液蒸發(fā)。將殘余物用短柱層析法在硅膠上純化。收集產(chǎn)物級(jí)份并蒸發(fā)溶劑，得到2.9克中間體(131)。
b)將中間體(131)(0.0048mol)和HCl/2-丙醇(6N)(5ml)在2-丙醇(100ml)中的混合物攪拌和回流1小時(shí)，然后將反應(yīng)混合物冷卻并蒸發(fā)溶劑。將殘余物溶解在DCM中，并用2％NaOH水溶液洗滌。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物用柱層析在硅膠上純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)90/10)。收集產(chǎn)物級(jí)份，并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物溶于2-丙醇中，并用富馬酸(2當(dāng)量)將其轉(zhuǎn)變?yōu)?E)-2-丁烯二酸鹽(2∶3)。過濾沉淀并干燥，得到1.13g化合物(81)(熔點(diǎn)＞130℃)。
實(shí)施例B.13a)中間體(132)的制備 將中間體(3)(0.013摩爾)在DCM(60ml)中的混合物攪拌并在冰浴上冷卻。小心地加入三乙胺(0.013mol)，并在10℃溫度下攪拌混合物，然后滴加入甲酸(0.013mol)并攪拌混合物45分鐘。加入中間體(73)(0.012摩爾)的DCM(30毫升)溶液，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜。用5％NaOH水溶液和水洗滌反應(yīng)混合物。用DCM提取分離的水層。將分離的有機(jī)層干燥，過濾并濃縮。將殘余物用柱層析在硅膠上純化(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 90/10)。收集純的級(jí)份，并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物用甲苯濃縮并蒸發(fā)溶劑，得到2.75g中間體(132)。
b)將中間體(132)(0.0069mol)在甲醇(150ml)中的混合物用鈀/碳(10％，1g)作為催化劑、在噻吩溶液(1ml)的存在下進(jìn)行氫化。吸收氫氣(3當(dāng)量)之后，用dicalite濾出催化劑并將濾液濃縮。將殘余物用2-丙醇和DIPE結(jié)晶，并轉(zhuǎn)變?yōu)橐叶猁}(2∶3)。過濾殘余物并干燥，得到2.25g化合物(107)(熔點(diǎn)＞160℃)。
實(shí)施例B.14a)中間體(133)的制備 將中間體(26)(0.016摩爾)在DCM(60毫升)中的混合物攪拌，加入三乙胺(0.016摩爾)并在冰浴上(溫度低于10℃)冷卻反應(yīng)混合物。然后滴加入甲酸(0.016mol)，并將反應(yīng)混合物在溫度低于10℃下攪拌45分鐘(溶液A)。在室溫下攪拌中間體(69)(0.013摩爾)的DCM(60毫升)溶液，加入三乙胺(0.03摩爾)，并在室溫下攪拌反應(yīng)混合物45分鐘。加入第一溶液(A)，并在室溫下攪拌反應(yīng)混合物過夜。用水洗滌反應(yīng)混合物。將分離的有機(jī)層干燥，過濾并濃縮。將殘余物用硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH37N)95/5)。收集產(chǎn)物級(jí)份并蒸發(fā)溶劑，得到3.1克中間體(133)。
b)將中間體(133)(0.006mol)在2-丙醇/HCl(6N)(6ml)和2-丙醇(60ml)中的混合物攪拌和回流1小時(shí)。將反應(yīng)混合物在室溫下放置過夜，然后濃縮。將殘余物在氨水溶液和DCM之間分配。將分離的有機(jī)層干燥，過濾并濃縮。將產(chǎn)物用ACN和DIPE結(jié)晶，過濾并干燥，得到1.55克化合物(113)(熔點(diǎn)126℃)。
實(shí)施例B.15a)中間體(134)的制備 將化合物(226)(0.013mol)在CH3OH/NH3(300ml)中用RaneyNickel(1g)作為催化劑氫化。吸收氫氣(2當(dāng)量)之后，濾出催化劑并將濾液蒸發(fā)，得到5.1克中間體(134)。
b)在室溫下，將甲磺酰氯(0.54ml)滴加到中間體(134)(0.0064mol)和三乙胺(0.013mol)在DCM(60ml)中的混合物中。3小時(shí)之后，加入甲磺酰氯(0.2ml)，并攪拌混合物24小時(shí)。將混合物用水洗滌，干燥有機(jī)層，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物用快速柱層析在硅膠上純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)99/1，98/2，97/3)。收集產(chǎn)物級(jí)份，并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物用DIPE與少量ACN結(jié)晶，過濾、洗滌并干燥，得到0.7g化合物(193)(熔點(diǎn)134℃；。[α]20，D＝-9.83°(c＝23.40mg/5ml在CH3OH中))。
實(shí)施例B.16
在氬氣氛圍下，攪拌化合物(192)(0.006摩爾)在吡啶(0.012摩爾)、DCM(50毫升)和THF(50毫升)中的混合物(5℃)。滴加入亞硫酰氯(0.006mol)(5℃)。在5℃將反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)，在5℃鼓入氨(氣態(tài)的)氣泡10分鐘。達(dá)到室溫之后，攪拌混合物2小時(shí)，溶解在DCM中并用水洗滌。將有機(jī)層干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物在玻璃濾器上用硅膠純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)93/7)。收集產(chǎn)物級(jí)份，并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物用DIPE結(jié)晶，過濾、洗滌并干燥，得到0.4g化合物(197)(熔點(diǎn)136℃；[α]20，D＝-11.52°(c＝10.42mg/5ml在CH3OH中))。
實(shí)施例B.17在5℃攪拌化合物(192)(0.005摩爾)和三乙胺(0.01摩爾)在DCM(30毫升)中的混合物。在5℃滴加入甲酸(0.005mol)。在5℃將混合物攪拌30分鐘。然后在5℃加入1-甲基-哌嗪(0.015mol)。使反應(yīng)混合物達(dá)到室溫并用水洗滌。將有機(jī)層干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物用硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)95/5)。收集產(chǎn)物級(jí)份，并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物溶于乙酸乙酯中，并轉(zhuǎn)變?yōu)橐叶猁}(1∶1)。過濾沉淀并干燥，得到0.6g化合物(238)(熔點(diǎn)＞112℃)。
實(shí)施例B.18將化合物(241)(0.0033摩爾)、氫氧化鉀(0.009摩爾)和乙醇(50毫升)的混合物攪拌和回流5天。冷卻混合物，并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物在水和DCM之間分配，并用DCM提取2次。將有機(jī)層分離，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物用硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)95/5)。收集產(chǎn)物級(jí)份，并將溶劑蒸發(fā)。干燥殘余物，得到0.14g化合物(249)。
表F-1列舉了按照其中一個(gè)上述實(shí)施例制備的化合物。
表F-1


























藥理學(xué)實(shí)施例實(shí)施例C.1“5HT4拮抗作用”將h5-HT4h-HEK293克隆9細(xì)胞在150mm Petri培養(yǎng)皿中培養(yǎng)，并用冷PBS洗滌兩次。然后從培養(yǎng)皿中刮下細(xì)胞，并懸浮在50mM、pH值7.4的Tris-HCl緩沖液中，并在23,500rpm下離心10分鐘收集。將丸粒再懸浮在5mM、pH值7.4的Tris-HCl中，并用Ultra Turrax勻化機(jī)進(jìn)行均化。在30,000rpm下離心20分鐘收集細(xì)胞膜，再懸浮在50mM、pH值7.4的Tris-HCl中，并在-80℃儲(chǔ)存。實(shí)驗(yàn)時(shí)，試驗(yàn)混合物(0.5毫升)含有50μl的氚化配體(5-HT4拮抗劑[3H]GR113808 0.1nM)和0.4毫升細(xì)胞膜制劑(15微克蛋白質(zhì)/毫升)。加入50μl 10％的DMSO用于全部結(jié)合。加入50μl的1μM的8-氨基-7-氯-2，3-二氫-1，4-苯并二氧六環(huán)-5-羧酸(+)-反式-(1-丁基-3-羥基-4-哌啶基)甲酯(JanssenPharmaceutica的專用5HT4激動(dòng)劑)用于測(cè)定非特異性結(jié)合。
該[3H]GR113808試驗(yàn)緩沖液是50mM HEPES-NaOH，pH值7.4。將混合物25℃下培養(yǎng)30分鐘。通過用預(yù)浸在0.1％聚乙烯亞胺中的Unifilter 96GF/B過濾而終止培養(yǎng)，接著用pH值7.4的50mMHEPES-NaOH洗滌六次。
利用非線性回歸分析計(jì)算配體濃度結(jié)合等溫線(直角雙曲線)，全部試驗(yàn)化合物的pIC50數(shù)據(jù)列于下面的表C.1中。
表C.15HT4拮抗數(shù)據(jù)
實(shí)施例C.2“代謝穩(wěn)定性”根據(jù)Gorrod等人(Xenobiotica 5453-462，1975)的方法，通過在組織的機(jī)械均化之后的離心分離，制備次-細(xì)胞組織制劑。將肝臟組織在冰冷的0.1M Tris-HCI(pH值7.4)緩沖液中沖洗，以洗去多余的血液。然后將組織吸干，稱量并使用手術(shù)剪粗略地切碎。將組織碎片在3倍體積的、冰冷的0.1M磷酸鹽緩沖液(pH值7.4)中均勻化。
在4℃將組織均勻物在9000×g離心20分鐘。將得到的上清液儲(chǔ)存在-80℃，并稱為‘S9’。
S9部份可以進(jìn)一步在100.000×g離心60分鐘(4℃)。小心地吸出得到的上清液，等分試樣并稱為‘胞質(zhì)液’。在1ml最終體積/0.5g最初組織重量中，將丸粒再懸浮在0.1M磷酸鹽緩沖液(pH 7.4)中，并稱為‘微粒體’。
將全部次細(xì)胞部份等分，立刻冷凍在液氮中，并儲(chǔ)存在-80℃下，直到使用。
對(duì)于待試驗(yàn)樣品，培養(yǎng)混合物含有PBS(0.1M)、化合物(5μM)、微粒體(1mg/ml)和NADPH-產(chǎn)生系統(tǒng)(0.8mM葡萄糖-6-磷酸鹽，0.8mM氯化鎂和0.8單位的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶)。對(duì)照樣品含有相同物質(zhì)，但用熱滅活的(在攝氏95度，10分鐘)微粒體替代微粒體。在對(duì)照樣品中的化合物回收率始終是100％。
將混合物在37攝氏度預(yù)培養(yǎng)5分鐘。在時(shí)間點(diǎn)為零(t＝0)時(shí)通過加入0.8mM NADP開始反應(yīng)，并將樣品培養(yǎng)60分鐘(t＝60)。通過加入2倍體積的DMSO來終止反應(yīng)。然后在900×g將樣品離心10分鐘，并將上清液在室溫下儲(chǔ)存，在不超過24小時(shí)之前分析。全部培養(yǎng)都是雙重進(jìn)行。用LC-MS分析進(jìn)行上清液的分析。樣品的洗脫是在Xterra MSC18(50×4.6mm，5μM。Waters，US)上進(jìn)行。使用Alliance 2790(供應(yīng)商Waters，US)HPLC系統(tǒng)。用緩沖液A(25mM乙酸銨(pH 5.2)在水/乙腈(95/5)中)、溶劑B乙腈和溶劑C甲醇以2.4ml/min的流速洗脫。采用的梯度是增加的有機(jī)相濃度以線性方式，用5分鐘從0％至50％B和50％C，用1分鐘至100％B，并且有機(jī)相濃度額外保持不變1.5分鐘。樣品的全部注射體積是25μl。
使用配備ESP源的Quatro三重四極質(zhì)譜儀作為檢測(cè)器。源和解離溫度分別設(shè)定在120和350℃，并使用氮?dú)庾鳛閲婌F和干燥氣體。在正掃描模式(單一離子反應(yīng))下獲得數(shù)據(jù)。錐體電壓設(shè)定在10V且停留時(shí)間是1秒鐘。
代謝穩(wěn)定性表示為在活性微粒體(E(act))的存在下化合物經(jīng)培養(yǎng)60分鐘之后的代謝％(作為實(shí)例給出方程式)(代謝％＝100％-((E(act)在t＝60的總離子電流(TIC)/E(act)在t＝0的TIC)×100)。
表C.2本發(fā)明的化合物(左欄)與WO-00/37461的類似結(jié)構(gòu)(右欄)相比較的代謝％



權(quán)利要求
1.式(I)的化合物 其立體化學(xué)異構(gòu)形式、其N-氧化物形式、或其藥學(xué)可接受的酸或堿加成鹽，其中-R1-R2-是下式的二價(jià)基-O-CH2-O- (a-1)，-O-CH2-CH2- (a-2)，-O-CH2-CH2-O- (a-3)，-O-CH2-CH2-CH2- (a-4)，-O-CH2-CH2-CH2-O-(a-5)，-O-CH2-CH2-CH2-CH2- (a-6)，-O-CH2-CH2-CH2-CH2-O- (a-7)，-O-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-(a-8)，其中在所述二價(jià)基中，任選在相同或不同碳原子上的一或兩個(gè)氫原子可以被C1-6烷基或羥基替代，R3是氫，鹵素，C1-4烷基；R4是C1-6烷基；被氰基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基；C1-6烷氧基；氰基；氨基或單或二(C1-6烷基)氨基；R5是氫或C1-6烷基，且-OR5基團(tuán)位于哌啶部分的3-或4-位；L是氫，或L是下式基團(tuán)-Alk-R6(b-1)，-Alk-X-R7(b-2)，-Alk-Y-C(＝O)-R9(b-3)，或-Alk-Z-C(＝O)-NR11R12(b-4)，其中每個(gè)Alk是C1-12烷二基；且R6是氫；羥基；氰基；C3-6環(huán)烷基；C1-6烷基磺酰氨基；芳基或Het；R7是C1-6烷基；羥基取代的C1-6烷基；C3-6環(huán)烷基；芳基或Het；X是O、S、SO2或NR8；所述R8是氫或C1-6烷基；R9是氫、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、羥基或芳基；Y是直接鍵或NR10，其中R10是氫或C1-6烷基；Z是直接鍵、O、S或NR10，其中R10是氫或C1-6烷基；R11和R12各自獨(dú)立地是氫，C1-6烷基，C3-6環(huán)烷基，或R11和R12與帶有R11和R12的氮原子結(jié)合可以形成吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基或4-嗎啉基環(huán)，兩者都可以任選被C1-6烷基取代；芳基代表未取代的苯基或被1、2或3個(gè)各自獨(dú)立地選自鹵素、羥基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷基羰基、硝基、三氟甲基、氨基、氨基羰基和氨基磺?；娜〈〈谋交?；和Het是呋喃基；被C1-6烷基或鹵素取代的呋喃基；四氫呋喃基；被C1-6烷基取代的四氫呋喃基；二氧戊環(huán)基；被C1-6烷基取代的二氧戊環(huán)基；二噁烷基；被C1-6烷基取代的二噁烷基；四氫吡喃基；被C1-6烷基取代的四氫吡喃基；2，3-二氫-2-氧代-1H-咪唑基；被一或兩個(gè)各自獨(dú)立地選自鹵素或C1-6烷基的取代基取代的2，3-二氫-2-氧代-1H-咪唑基；吡咯烷基；被一或兩個(gè)各自獨(dú)立地選自鹵素、羥基或C1-6烷基的取代基取代的吡咯烷基；吡啶基；被一或兩個(gè)各自獨(dú)立地選自鹵素、羥基或C1-6烷基的取代基取代的吡啶基；嘧啶基；被一或兩個(gè)各自獨(dú)立地選自鹵素、羥基或C1-6烷基的取代基取代的嘧啶基；噠嗪基；被一或兩個(gè)各自獨(dú)立地選自羥基、C1-6烷氧基、C1-6烷基或鹵素的取代基取代的噠嗪基；吡嗪基；被一或兩個(gè)各自獨(dú)立地選自羥基、C1-6烷氧基、C1-6烷基或鹵素的取代基取代的吡嗪基。
2.權(quán)利要求1所要求的化合物，其中-R1-R2-是下式的二價(jià)基-O-CH2-CH2-O- (a-3)，-O-CH2-CH2-CH2-O- (a-5)，R3是氫，鹵素，C1-4烷基；R4是C1-6烷基；被氰基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基；C1-6烷氧基；氰基；氨基或單或二(C1-6烷基)氨基；R5是氫或C1-6烷基，且-OR5基團(tuán)位于哌啶部分的3-或4-位；L是氫，或L是下式基團(tuán)-Alk-R6(b-1)，-Alk-X-R7(b-2)，-Alk-Y-C(＝O)-R9(b-3)，或-Alk-Z-C(＝O)-NR11R12(b-4)，其中每個(gè)Alk是C1-12烷二基；且R6是氫；羥基；氰基；C3-6環(huán)烷基；C1-6烷基磺酰氨基；芳基或Het；R7是C1-6烷基；羥基取代的C1-6烷基；C3-6環(huán)烷基；芳基或Het；X是O、S、SO2或NR8；所述R8是氫或C1-6烷基；R9是C1-6烷基或羥基；Y是直接鍵；Z是直接鍵或O；R11和R12各自獨(dú)立地是氫，或C1-6烷基，或R11和R12與帶有R11和R12的氮原子相結(jié)合，可以形成被C1-6烷基取代的吡咯烷基或哌嗪基；芳基代表未取代的苯基或被1，2或3個(gè)各自獨(dú)立地選自鹵素、羥基、C1-6烷基、C1-6烷氧基和氨基磺?；娜〈〈谋交?；和Het是四氫呋喃基；被C1-6烷基取代的四氫呋喃基；二氧戊環(huán)基；被C1-6烷基取代的二氧戊環(huán)基；吡啶基；被一或兩個(gè)各自獨(dú)立地選自鹵素、羥基、C1-6烷基的取代基取代的吡啶基；嘧啶基；被一或兩個(gè)各自獨(dú)立地選自鹵素、羥基、或C1-6烷基的取代基取代的嘧啶基；噠嗪基；被一或兩個(gè)各自獨(dú)立地選自羥基、C1-6烷氧基、C1-6烷基或鹵素的取代基取代的噠嗪基；吡嗪基；被一或兩個(gè)各自獨(dú)立地選自羥基、C1-6烷氧基、C1-6烷基或鹵素的取代基取代的吡嗪基。
3.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所要求的化合物，其中-OR5基團(tuán)位于具有反式構(gòu)型的哌啶部分的3-位。
4.權(quán)利要求3所要求的化合物，其中所述哌啶部分的絕對(duì)構(gòu)型是(3S，4S)。
5.前述權(quán)利要求任一項(xiàng)所要求的化合物，其中-R1-R2-是式(a-5)的基團(tuán)；R3是氫；R4是甲基；和R5是氫。
6.權(quán)利要求5所要求的化合物，其中L是式(b-2)的基團(tuán)，其中X是O，Alk是C1-4烷二基和R7是C1-6烷基。
7.一種藥物組合物，包括藥學(xué)可接受的載體和治療活性數(shù)量的權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)的化合物。
8.制備權(quán)利要求7的藥物組合物的方法，其中將治療活性數(shù)量的權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)的化合物與藥學(xué)可接受的載體緊密混合。
9.權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)的化合物作為藥物的用途。
10.一種用于制備式(I)化合物的方法，其中a)使式(II)的中間體與式(III)的羧酸衍生物或其反應(yīng)性官能衍生物反應(yīng)； b)在反應(yīng)惰性溶劑中，且任選在合適的堿存在下，用式(I-a)的化合物將式(IV)的中間體N-烷基化，式(I-a)的化合物定義為其中L表示氫的式(I)化合物，由此得到式(I-b)的化合物，式(I-b)的化合物定義為其中L不是氫的式(I)化合物； c)使式L’＝O(V)的合適的酮或醛中間體與式(I-a)的化合物反應(yīng)，所述L’＝O是式L-H的化合物，其中在C1-12烷二基部分中的兩個(gè)偕氫原子被＝O取代，由此得到式(I-b)的化合物； 其中在上述反應(yīng)路線中，基團(tuán)-R1-R2-、R3、R4、R5和L是按照權(quán)利要求1所定義，且W是合適的離去基團(tuán)；d)或按照現(xiàn)有技術(shù)已知的轉(zhuǎn)化反應(yīng)，將式(I)的化合物互相轉(zhuǎn)化；或如果需要的話，將式(I)的化合物轉(zhuǎn)化成藥學(xué)可接受的酸加成鹽，或相反地，將式(I)化合物的酸加成鹽用堿轉(zhuǎn)化成游離堿形式；且如果需要的話，制備其立體化學(xué)異構(gòu)形式。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有5HT
文檔編號(hào)A61K31/453GK1809558SQ200480017134
公開日2006年7月26日 申請(qǐng)日期2004年6月10日 優(yōu)先權(quán)日2003年6月19日
發(fā)明者J·-P·R·M·A·博斯曼斯, H·J·M·吉森, L·A·梅費(fèi)萊克 申請(qǐng)人:詹森藥業(yè)有限公司