專利名稱：：Cddo甲基酯的新形態(tài)的制作方法CDDO甲基酯的新形態(tài)相關(guān)專利申請的交叉引用本申請要求2007年8月15日提交的美國臨時申請第60/955，939號的優(yōu)先權(quán)，它的全部內(nèi)容在此通過引用并入本文。
背景技術(shù)：
：通過角鯊烯的環(huán)化反應(yīng)在植物中生物合成了三萜系化合物。盡管三萜系化合物是候選的藥用化合物，這些天然生成的分子表現(xiàn)出相對弱的生物活性。因此，化學(xué)家已嘗試合成增強效力的類似化合物(Honda等人，1997&1998)。據(jù)報道，一些合成的類似化合物抑制在已由IFN-γ或LPS刺激的巨噬細胞中iNOS和C0X-2的重新形成(Suh等人，1998；Honda等人，2002)。另一種合成的三萜系化合物2-氰基-3，12-二氧代齊墩果烷-1，9(11)_雙烯-28-酯(CDDO)顯示出抗炎癥和抗增殖的活性(Honda等人，1998&2000)。通過研究⑶DO的甲基酯(甲基2-氰基_3，12-二氧代齊墩果烷-1，9(11)-雙烯-28-酯(CDD0甲基酯))，Bore等人(2002)確定了它的晶體結(jié)構(gòu)。在含水的晶形中，水調(diào)整了引起特定晶體堆積和特定晶體結(jié)構(gòu)的相互作用。
發(fā)明內(nèi)容在本發(fā)明的一種實施方式中，提供一種CDDO甲基酯不含水的晶形。所述不含水的晶形優(yōu)選地具有P432i2空間群，所述空間群具有a=14.2入、b=14.2A以及c=81.6A的晶胞尺寸。本發(fā)明也擬用一種固體劑型的藥物組合物，所述藥物組合物包括(i)治療有效量的CDDO甲基酯不含水的晶形和(ii)可食用的載體。此外，本發(fā)明提供一種CDDO甲基酯的玻璃態(tài)固體形態(tài)，該玻璃態(tài)固體形態(tài)具有如圖2C所示的在2θ大約為13.5°處具有暈峰(halopeak)的χ-射線粉末衍射圖，并且具有玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(Tg)。在特定的實施方式中，所述Tg的范圍可為約120°C至約135°C。在其他一些實施方式中，所述Tg的范圍為約125°C至約130°C。⑶DO-甲基酯的玻璃態(tài)固體形態(tài)可具有PDF光譜，所述PDF光譜具有與圖28類似的從約5入至約20入的峰。此外，本發(fā)明提供一種固體劑型的藥物組合物，所述藥物組合物包括(i)治療有效量的CDDO甲基酯的玻璃態(tài)固體形態(tài)和(ii)可食用的載體。就此而言，本發(fā)明構(gòu)思了治療癌癥患者的方法，所述方法包括將這種藥物組合物給藥于癌癥患者。本發(fā)明還擬將CDDO甲基酯的玻璃態(tài)形態(tài)與另一種抗癌藥物聯(lián)合給藥。例如，所述抗癌藥物可以是吉西他濱(gemcitabine)并且所述癌癥可以是胰腺癌。本發(fā)明還包括涉及急性或慢性氧化應(yīng)激和炎癥的疾病或失調(diào)的治療方法，尤其是涉及部分地具有誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)或誘導(dǎo)型環(huán)加氧酶(C0X-2)過表達的特征的疾病或失調(diào)的治療方法。此外，本發(fā)明涉及CDDO甲基酯的二甲醇溶劑化物形態(tài)，它具有如表18所示的特征峰的X-射線粉末衍射圖和如圖24所示的DSC圖譜。根據(jù)本發(fā)明，所述二甲醇溶劑化物形態(tài)可作為中間體用于生成CDDO甲基酯的玻璃態(tài)固體形態(tài)。CDDO甲基酯的玻璃態(tài)固體形態(tài)的生成方法(經(jīng)過二甲醇溶劑化物形態(tài))包括制備CDDO甲基酯的二甲醇溶劑化物形態(tài)以及干燥所述二甲醇溶劑化物形態(tài)。根據(jù)另一種實施方式，本發(fā)明涉及CDDO甲基酯二甲醇化物的晶體生長方法，所述方法包括制備純化的CDDO甲基酯的溫?zé)釤o水甲醇溶液，將所述溫?zé)岬娜芤杭尤氲胶欣浼状嫉娜萜髦?，并且過濾所得晶體。根據(jù)另一種實施方式，本發(fā)明涉及一種藥物組合物，所述藥物組合物包括(i)治療有效量的CDDO甲基酯和(ii)賦形劑，所述賦形劑是玻璃形成體，這樣所述組合物具有Tg。所述賦形劑可選自例如，(A)碳水化合物、碳水化合物的衍生物或碳水化合物聚合物，⑶合成的有機聚合物，(C)有機酸鹽，⑶蛋白質(zhì)、多肽或肽，以及(E)高分子量多糖。合成的有機聚合物類賦形劑的例子是羥丙基甲基纖維素(例如羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯)、聚[1-(2_氧-1-批咯烷基)乙烯](poly[l-(2-oxo-l-pyrrolidinyl)ethylene])或它的共聚物(例如PVP/VA)，以及甲基丙烯酸共聚物(例如甲基丙烯酸-丙烯酸乙酯的共聚物(11))。這方面的賦形劑的另一個例子是共聚維酮(copovidone)，它是1-乙烯基-2-卩比咯烷酮_乙烯基醋酸酯共聚物(3:2)。圖1描述了⑶DO甲基酯的化學(xué)結(jié)構(gòu)。圖2表示A型(上部)和B型(底部)的XRPD圖譜。從上部至底部非微粉化A型；微粉化A型；以及B型。圖3顯示⑶DO甲基酯(A型)的DSC曲線和TG曲線。圖4顯示A型(非微粉化)的熱臺(hotstage)分析。圖5顯示A型(非微粉化)的動態(tài)蒸氣吸附等溫線(dynamicvaporsorptionisotherm)。圖6顯示A型(非微粉化)的SEM圖像。圖7顯示195°C下受力之前(上部)和之后(底部)的A型。圖8顯示A型(非微粉化)的NMR光譜。圖9顯示B型CDDO甲基酯的MDSC曲線。圖10顯示200°C/環(huán)境RH條件下熱受力60分鐘之前(上部)和之后(底部)的B型CDDO甲基酯。圖11顯示B型⑶DO甲基酯的匪R光譜。圖12顯示具有標記的單一A型分子的ORTEP繪圖。由50%概率的各向異性熱橢圓體(thermalellipsoid)代表原子。圖13顯示A型晶體的不對稱單元內(nèi)容的ORTEP繪圖。由50%概率的各向異性熱橢圓體代表原子。圖14顯示沿晶軸a俯視的A型晶體的堆積圖。圖15顯示沿晶軸b俯視的A型晶體的堆積圖。圖16顯示沿晶軸c俯視的A型晶體的堆積圖。圖17顯示計算的A型的X-射線粉末圖譜。圖18顯示A型的實驗得到的XRPD。圖19表示A型⑶DO甲基酯的計算XRPD圖譜和實驗得到的XRPD圖譜的比較。圖20顯示以4.lmg/kg口服給藥于獼猴之后，根據(jù)A型和B型的曲線代表性的區(qū)域圖示。每個數(shù)據(jù)點代表8個動物中CDDO甲基酯的平均血藥濃度。誤差棒代表在抽樣總體中的標準偏差。圖21顯示在動物#505M(上圖)和動物#507M(下圖)體內(nèi)的CDDO甲基酯B型的血藥濃度和A型的血藥濃度的比較。圖22表示在動物#508F(上圖)和動物#502M(下圖)體內(nèi)的CDDO甲基酯B型的血藥濃度和A型的血藥濃度的比較。圖23描述CDDO甲基酯單側(cè)苯溶劑化物(hemibenzenesolvate)的熱分析圖。圖24顯示⑶DO甲基酯的二甲醇溶劑化物的熱分析圖。圖25描述與⑶DO甲基酯的二甲醇溶劑化物相關(guān)的TGIR數(shù)據(jù)。圖26表示TGIR分析(高達140°C)之前(上部)和之后(底部)，⑶DO甲基酯的二甲醇溶劑化物的XRPD圖譜。圖27是A型相對B型的PDF數(shù)據(jù)的重疊圖。局部順序從約5A至約20A之間類似。圖28是B型的不同制劑的X射線無定形圖的重疊圖，圖28顯示了制劑之間基本一致。圖29是空間群PAJP^ge)的示意圖。圖30顯示⑶DO甲基酯膠囊單一口服給藥于雄性獼猴之后(第2階段和第3階段)，⑶DO甲基酯的平均血液濃度。具體實施例方式如前所述，三萜系化合物作為iNOS活性的抑制劑(尤其是抑制NO的生成)的研究已證明CDDO和CDDO甲基酯的高效力(IC5tl<InM水平)。參見Honda等人(2000)。這些研究關(guān)注溶解的CDDO甲基酯，幾乎沒有提供CDDO甲基酯固體的特性。Bore等人(2002)的工作闡明了CDDO甲基酯的單一溶劑化晶形的結(jié)構(gòu)(首次公開了三萜系化合物)。為了實現(xiàn)CDDO甲基酯(如圖1(化學(xué)結(jié)構(gòu))和圖12(0RTEP制圖)所描述)的治療潛力，本發(fā)明人研究了具有諸如較高水溶性和化學(xué)穩(wěn)定性之類特性的所述化合物的其他一些形態(tài)，所述特性有利于具有合適的藥代動力學(xué)的藥物產(chǎn)品的研制。從而，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)了CDDO甲基酯的兩種形態(tài)，其不同于Bore等人(2002)闡明的晶形，所述CDDO甲基酯的兩種形態(tài)具有上述性質(zhì)，因此它們本身就是藥物研制的候選化合物。本發(fā)明的CDDO甲基酯的“A型”是非溶劑化的(不含水的)并且以獨特晶體結(jié)構(gòu)和堆積結(jié)構(gòu)為特征，如圖29所示，所述晶體結(jié)構(gòu)具有P432i2空間群(no.96)，晶胞尺寸為a=14.2入、b=14.2A以及c=81.6A，并且所述堆積結(jié)構(gòu)如圖14至圖16所示，三個分子以沿晶軸b向下的螺旋方式堆積。下表10列舉了A型的附加晶體數(shù)據(jù)和晶體學(xué)數(shù)據(jù)_采集參數(shù)。本發(fā)明的另一個“B型”是單一相但是缺少這樣明確的晶體結(jié)構(gòu)。更確切地，B型以不同于A型的χ-射線粉末衍射光譜(XRPD)為特征(其中參見圖2)。此外，B型表現(xiàn)出驚人的優(yōu)于A型的生物利用度(bioavailability)(參見實施例7)。⑶DO甲基酯的合成方法已被公開，參見美國專利第6，326，507號，Honda等人(1998)和Honda等人(2000)。本發(fā)明人已發(fā)現(xiàn)CDDO甲基酯的A型和B型均易于由化合物的各種溶液(由下文表3至表5中那些細節(jié)舉例說明)制備而成。具體而言，可通過MTBE、THF、甲苯或乙基醋酸酯中的快速蒸發(fā)或緩慢蒸發(fā)來制備B型。同樣道理，可通過CDDO甲基酯的乙醇或甲醇溶液的快速蒸發(fā)、緩慢蒸發(fā)或緩慢冷卻來制備A型。溶于丙酮的CDDO甲基酯的制劑可生成A型(使用快速蒸發(fā))或B型(使用緩慢蒸發(fā))。包括所提供的表格在內(nèi)的其他制備方法在下面描述。由于B型沒有明確的晶體結(jié)構(gòu)，B型同樣也缺少獨特的XRPD峰(例如那些代表A型的XRPD峰)，反而B型以普通的“暈(halo)”XRPD圖譜為特征。具體而言，所述非晶態(tài)B型落入“χ-射線無定形”固體的范疇，因為它的XRPD圖譜表現(xiàn)出三個或更少的主要衍射暈(例如，參見圖10)。在這個范疇內(nèi)，B型是“玻璃態(tài)”材料如PDF所示，最鄰近的原子-原子相互作用與觀察到的晶體A型的原子-原子相互作用匹配，但是平均晶胞的概念不適用，因為沒有長程有序來證實。因此，不同于A型，B型樣品顯示無長程(即，大約20A以上)分子相互關(guān)系(參見圖27)。然而，B型樣品的熱分析揭示了玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(Tg)。相反，無序納米晶體材料不表現(xiàn)出Tg，反而僅表現(xiàn)出熔化溫度(Tm)，在熔化溫度以上晶體結(jié)構(gòu)成為液體。本發(fā)明說明書也表征了CDDO甲基酯的二甲醇溶劑化物形態(tài)，它可用于制備B型(參見實施例9)。本發(fā)明說明書也表征了CDDO甲基酯單側(cè)苯化物(hemibenzenate)形態(tài)(參見實施例8)。盡管已發(fā)現(xiàn)其他一些晶體材料的微粉化影響XRPD光譜，微粉化的A型的XRPD分析得出與非微粉化A型類似的光譜。參見圖2的非微粉化A型CDDO甲基酯、微粉化A型⑶DO甲基酯和B型⑶DO甲基酯的并列比較。各種表征手段可一同使用以將A型⑶DO甲基酯和B型⑶DO甲基酯彼此區(qū)分以及將A型⑶DO甲基酯和B型⑶DO甲基酯與⑶DO甲基酯的其他一些形態(tài)予以區(qū)分。適用于這個目的技術(shù)的例子是固態(tài)核磁共振(NMR)、X_射線粉末衍射、X-射線晶體學(xué)、差熱掃描量熱法(DSC)、動態(tài)蒸氣吸附/解吸附(DVS)、卡爾費休(KarlFischer)分析(KF)、熱臺顯微法(hotstagemicroscopy)、調(diào)制差熱掃描量熱法、FT-IR和拉曼光譜學(xué)。具體而言，XRPD和DSC的分析數(shù)據(jù)可將⑶DO甲基酯A型、⑶DO甲基酯B型和⑶DO甲基酯的單側(cè)苯化物形態(tài)予以區(qū)分。如上所述，本發(fā)明的CDDO甲基酯的兩種形態(tài)的性質(zhì)均是獨特的并且有助于它們作為藥物制劑的使用。例如，當猴子口服接受相等劑量的明膠膠囊中的所述兩種形態(tài)時，A型CDDO甲基酯和B型CDDO甲基酯在猴子體內(nèi)具有不同的生物利用度。參見實施例7。此夕卜，新近鑒定的CDDO甲基酯的形態(tài)的穩(wěn)定性對藥物組合物的生產(chǎn)有用。以類似于將A型⑶DO甲基酯和B型⑶DO甲基酯彼此區(qū)分以及將A型⑶DO甲基酯和B型⑶DO甲基酯與⑶DO甲基酯的其他一些形態(tài)予以區(qū)分的方法，可通過包括XRPD和DSC分析在內(nèi)的各種技術(shù)將保持“χ-射線無定形”特性的CDDO甲基酯分散體(如下更詳細地描述)與含有晶體A型CDDO甲基酯的分散體予以區(qū)分。因此，含有A型晶體CDDO甲基酯的分散體典型地表現(xiàn)出純的A型CDDO甲基酯的分立峰的特征，尤其是出現(xiàn)在大約13.35和8.782θ)的分立峰(例如，參見下面表17)。本發(fā)明的CDDO甲基酯聚合物賦形劑分散體的性質(zhì)均是獨特的并且有助于它們作為藥物制劑使用。例如，當猴子接受相等劑量的明膠膠囊中的所述分散體時，所選擇的CDDO甲基酯的分散體(用附加的非活性添加劑配制)在猴子體內(nèi)具有不同的生物利用度。參見下面實施例7，研究第2階段和第3階段。在一些例子中，含有CDDO甲基酯聚合物賦形劑分散體的劑型在生物利用度方面產(chǎn)生驚人的進一步的提高(甚至相對于由純B型CDDO甲基酯生成的劑型)。先前已描述了藥物固體中包括多晶型物在內(nèi)的多種形態(tài)的存在(例如，Cui(2007))。化合物的晶體形態(tài)和無定形形態(tài)可顯示出不同的物理特性和化學(xué)特性。例如，無定形形態(tài)相對于晶體形態(tài)可具有較高的溶解度。就此而言，每個化合物是獨一無二的，然而，無定形材料不同于晶體狀態(tài)的程度必須逐個研究并且不能被先驗地預(yù)言。此外，一些無定形材料易于重結(jié)晶。在目前情況下，數(shù)據(jù)采集的變化性可由無數(shù)的原因引起。因此，本說明書使用術(shù)語“約”或“大約”以說明用于描述CDDO甲基酯形態(tài)的數(shù)據(jù)變化。例如，熔化溫度基于儀器或條件可變。關(guān)于測試的精確度，美國藥典(USP)<891>闡述“在熔化情況下，“起始”溫度和“峰”溫度可被客觀地和可重復(fù)地確定，該“起始”溫度和“峰”溫度通常精確至零點幾度之內(nèi)。實際經(jīng)驗表明美國藥典的闡述對于測量材料的Tg是不對的。Tg依賴于很多因素如何制備樣品、樣品的受熱過程(馳豫過程(relaxation))、在Tg之前可揮發(fā)或不可揮發(fā)的殘余溶劑、儀器、樣品制劑(樣品質(zhì)量、粒度、包裝、稀釋劑)、測量Tg的參數(shù)(特別是掃描速率)、確定Tg位置的參數(shù)(起始溫度、中點溫度、拐點溫度或偏移溫度)、在Tg處是否存在馳豫吸熱線以及其他一些因素。一些因素將會降低Tg(由于殘留水/溶劑的增塑作用)，而其他一些因素將會增加Tg(較快的掃描速度、馳豫過程)并且可使?。辉黾硬畈欢?0°C至15°C。在Tg溫度下的熱容量(ΔCp)的變化會是重要的，如Zhou等人所報道(J.PharmaceuticalSciences91:1863-72(2002))。本發(fā)明說明書涉及在它們的“特征”峰方面的不同圖譜。這些峰的組合或這些峰組在誤差范圍內(nèi)對于給定的多晶型物的形態(tài)是獨一無二的，所述誤差分別歸因于單獨的儀器和實驗條件。對于每一個晶形而言，五個特征峰的組列于下面表17至表19。典型的變化范圍可以是士0.1°(2Θ)，但是在一些實驗中，峰位置可在高達士0.2°(2Θ)或者更大的范圍內(nèi)變化。表17-A型<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>表18-二甲醇化物<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>表19-單側(cè)苯化物<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>玻璃態(tài)材料(B型)的XRPD圖譜顯示出在2θ大約為13.5°處的寬暈峰，該暈峰表現(xiàn)出是B型的特征。其他的暈則沒有如此明確，并且這個圖譜的形狀/位置會隨儀器和實驗條件而改變。這個寬峰的位置的變化將大于各個晶形的特征峰位置的變化。具體而言，在某些儀器中可預(yù)期B型的寬峰的變化范圍高達士0.1°(2θ)。所生成的作為⑶DO甲基酯賦形劑分散體的玻璃態(tài)材料的XRPD圖譜也顯示出寬暈峰。典型地，寬暈峰中心位于2θ大約為13.5°處。這些材料通過調(diào)制差熱掃描量熱法(mDSC)同樣表現(xiàn)出Tg。類似于純的B型⑶DO甲基酯樣品，賦形劑分散體的XRPD圖的形狀和位置會隨所使用的儀器、實驗條件以及用于生成分散體的特殊賦形劑而改變。本發(fā)明進一步分別涉及⑶DO甲基酯的A型、⑶DO甲基酯的B型、⑶DO甲基酯的玻璃態(tài)、CDDO甲基酯的XRPD-無定形賦形劑分散體在治療與炎癥有關(guān)的疾病方面的使用，所述與炎癥有關(guān)的疾病包括癌癥疾病和感染中樞神經(jīng)系統(tǒng)的各種病理。根據(jù)本發(fā)明，這些疾病的治療包括將受體所需的、有效量的、本申請列舉的新型CDDO甲基酯的形態(tài)給藥于受體。這些化合物對于改善或預(yù)防與癌癥病原、阿爾茨海默病(AD)、帕金森病(PD)、多發(fā)性硬化(MS)、肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化癥(amyotrophiclateralsclerosisALS)、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)以及其他自身免疫疾病、腸炎和其他關(guān)于一氧化氮或前列腺素過量生成的病理學(xué)情況有關(guān)的炎癥具有實用性。如前所述，許多疾病過程的發(fā)病機制(包括結(jié)腸中的致癌作用)涉及了環(huán)加氧酶-2(C0X-2)或誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)的異常表達或過量表達。已報道包括⑶DO甲基酯在內(nèi)的一些合成的三萜系化合物的類似物抑制iNOS的表達。相關(guān)研究已顯示在已被IFN-γ或LPS刺激的巨噬細胞中三萜系化合物對iNOS和C0X-2表達的抑制(Suh等人，1998；Honda等人，2002)。因此，期望通過CDDO甲基酯形態(tài)的給藥治療對iNOS和C0X-2抑制發(fā)生作用。C0X-2基因過表達是結(jié)腸癌變中早期和重要的跡象(Prescott和White，1996；Dubois等人，1996)。帶有APC(腺瘤性結(jié)腸息肉病)基因缺陷的小鼠在早期產(chǎn)生了大量的腸息肉，并且已發(fā)現(xiàn)在這些息肉中C0X-2酶水平顯著升高。這些動物的研究結(jié)果與在許多人類原發(fā)性結(jié)腸癌和結(jié)腸癌細胞系中發(fā)現(xiàn)的C0X-2mRNA和C0X-2蛋白質(zhì)水平升高相關(guān)(Prescott和White，1996)，并且人們相信，C0X-2中的這種升高導(dǎo)致細胞凋亡的抑制，而細胞凋亡通常將會導(dǎo)致癌前期細胞死亡(Tsujii和DuBois，1996)。C0X-2與腸腫瘤形成的功能相關(guān)性已由C0X-2基因的敲除予以證明(Oshima等人，1996)。帶有這種敲除的小鼠與生有息肉(polyp-forming)的小鼠(帶有APC基因病灶)交配；所述C0X-2敲除導(dǎo)致小鼠的后代中息肉數(shù)量顯著減小。此外，已報道用選擇性的C0X-2抑制劑或非選擇性的C0X-1/C0X-2抑制劑對實驗動物的治療是化學(xué)預(yù)防腸癌的有效方法(Marnett，1992；Oshima等人，1996；Boolbol等人，1996；Reddy等人，1996；Sheng等人，1997)。關(guān)于致癌作用中iNOS的作用，清楚的是，NO是有效的誘變劑(Tamir和Tarmebaum，1996)，并且一氧化氮還可活化C0X-2(Salvemini等人，1993，1994)。在由致癌物質(zhì)、氧化偶氮甲烷誘導(dǎo)的大鼠結(jié)腸腫瘤中iNOS也顯著增加(Takahashi等人，1997)。類似地，已報道人腫瘤中iNOS的過表達作為陰性預(yù)后因素(例如，Ekemekcioglu等人，2006)。炎癥信號通路和其他一些與疾病相關(guān)的信號通路(例如，由血管緊縮素II誘導(dǎo))經(jīng)常地刺激活性氧或活性氮類物質(zhì)(RONS)的過量生成，所述活性氧或活性氮類物質(zhì)包括過氧化物、過氧化氫、氧化氮和過氧化亞硝酸鹽。CDDO甲基酯已顯示出在多種不同的細胞類型中是有效的抗氧化活性誘導(dǎo)劑和有效的炎癥過程抑制劑(Dinkova-Kostova等人，2005；Liby等人，2006；Ahmad等人，2006；Shishodia等人，2006)。由包括傳染、外傷、燒傷和化學(xué)暴露的多種原因引起的嚴重的急性炎癥可威脅生命并且可導(dǎo)致肝功能衰竭、腎功能衰竭、呼吸衰竭或心臟衰竭。慢性炎癥和相關(guān)的氧化應(yīng)激促成了包括自身免疫疾病(例如，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、狼瘡、牛皮癬和多種硬化癥)、心血管疾病(例如，動脈硬化和心臟衰竭)、糖尿病(I型和II型)、呼吸道疾病(例如，慢性阻塞性肺疾病和哮喘)、慢性腎疾病、腎功能衰竭、肝功能衰竭和疼痛綜合癥(例如，神經(jīng)性疼痛、纖維性肌痛和偏頭痛)在內(nèi)的許多重要疾病的病理。此外，三萜系化合物已顯示出在巨噬細胞中抑制HIV-I的復(fù)制(Vazquez等人，2005)，因此它在過濾性病毒疾病的治療方面會有用，尤其是那些由器官或組織炎癥(例如，病毒性肝炎、流行性感冒、單純皰疹)導(dǎo)致顯著發(fā)病的過濾性病毒疾病。MS是已知的中樞神經(jīng)系統(tǒng)的炎癥疾病(Williams，Ulvestad和Hickey，1994；Merrill和Benevist,1996；Genain和Nauser,1997)。MS、AD、PD和ALS的發(fā)病機制包括炎癥機理、氧化機理或免疫機理(Bagasra等人，1995；Griffin等人，1995；McGeer和McGeer，1995；Good等人，1996；Simonian和Coyle,1996；Kaltschmidt等人，1997)。NDD/NID的起因涉及反應(yīng)性星形膠質(zhì)細胞和活化的小膠質(zhì)細胞；小膠質(zhì)細胞作為合成NO和前列腺素的細胞受到了特殊的重視，所述NO和前列腺素是酶、iNOS和C0X-2各自的產(chǎn)物。由諸如干擾素-Y或白介素-1之類的炎癥細胞因子驅(qū)動這些酶重新形成。NO的過量產(chǎn)生轉(zhuǎn)而可導(dǎo)致在細胞和許多器官的組織(包括神經(jīng)細胞和神經(jīng)系統(tǒng)的少突膠質(zhì)細胞)中的炎癥級聯(lián)反應(yīng)和/或氧化損傷，并伴隨后續(xù)臨床表現(xiàn)為AD、MS以及可能的PD和ALS(Coyle和Puttfarcken，1993；Goodwin等人，1995；Beal,1996；Good等人，1996；Merri11和Benvenist,1996；Simonian和Coyle，1996；Vodovotz等人，1996)。流行病學(xué)數(shù)據(jù)表明NSAID的長期使用(其阻止從花生四烯酸酯合成前列腺素)顯著地降低了AD發(fā)生的危險(McGeer等人，1996；Stewart等人，1997)。因此，作為阻止NO和前列腺素形成的制劑的⑶DO甲基酯的A型和B型應(yīng)該是治療或預(yù)防NDD的有用治療方法。如上所述，多種臨床前期的研究已表明⑶DO-Me具有抑制C0X-2和iNOS(與炎癥和致癌作用均相關(guān)的酶)表達的能力。⑶DO-Me也顯示抑制核因子-κB(NF-kB)和信號傳感器以及轉(zhuǎn)錄3活化劑(STAT3)的活化、與炎癥有關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子、腫瘤惡化(tumorprogression)以及腫瘤抗治療性。初步研究證明⑶DO-Me抑制許多癌癥細胞系的生長；在NCI-60腫瘤細胞系組中CDDO-Me的平均IC50值大約為35nM。體內(nèi)研究證實CDDO-Me有效地抑制腫瘤的生長，所述腫瘤由移植在嚙齒動物體內(nèi)的人腫瘤細胞系或移植在嚙齒動物體內(nèi)的同源癌癥細胞系形成(表16)。根據(jù)物種、品種和給藥方法，在這些研究中使用的劑量范圍為10mg/kg/天至100mg/kg/天。下面詳細敘述的研究提供了反映CDDO-甲基酯對于遭受癌癥疾病的患者的有益影響的人類數(shù)據(jù)。參見實施例10。根據(jù)上述內(nèi)容，本發(fā)明包含了含有CDDO甲基酯形態(tài)的、穩(wěn)定的控釋劑型。本發(fā)明的劑型可用于每天一次給藥、緩釋給藥或脈沖釋放給藥，從而通過與藥效需求匹配的藥代動力學(xué)表現(xiàn)來優(yōu)化治療。CDDO甲基酯的B型、CDDO甲基酯的A型以及CDDO甲基酯含有賦形劑分散體的劑型中的任何一種可口服給藥?？蓪⒒钚曰衔锇诓牧现幸员Ｗo所述化合物避免酸的作用和使所述化合物失活的其他一些自然條件的作用。給藥的其他一些模式也是本發(fā)明的一部分，例如局部給藥、皮下給藥、靜脈注射和腹腔內(nèi)給藥。為了給藥治療化合物，需要將所述化合物包裹在材料內(nèi)或?qū)⑺龌衔锱c材料聯(lián)合給藥以避免所述化合物失活。因此，無論B型或A型的CDDO甲基酯都可在合適的載體(例如脂質(zhì)體)中或在稀釋劑中給藥于受體。藥學(xué)上可接受的稀釋劑包括生理鹽溶液和緩沖水溶液。脂質(zhì)體包括水包油包水CGF乳液和傳統(tǒng)的脂質(zhì)體。參見，例如，Strejan等人，J.Neuroimmunol.727(1984)。所述治療化合物可與惰性稀釋劑、添加劑或可食用的載體一同形成藥物組合物口服給藥。為此目的，本發(fā)明的治療化合物和其他一些成分可被裝入硬殼明膠膠囊或軟殼明膠膠囊中，壓縮成藥片或直接混合進入受體的飲食。對于口服給藥治療化合物而言，A型或B型可與賦形劑混合并且以可吸收的藥片、口含片、片劑、膠囊、酏劑(elixir)、懸浮液、糖漿、薄片等形式使用。類似地，本發(fā)明的賦形劑分散體可以以各種劑型類型呈現(xiàn)，所述劑型類型包括本申請描述的A型或B型的那些劑型。組合物和制劑中所述治療化合物的百分數(shù)可以根據(jù)傳統(tǒng)實踐改變以達到活性劑的合適劑量。此外，本發(fā)明涉及一種藥物組合物，所述藥物組合物包括有效量的B型⑶DO甲基酯或A型CDDO甲基酯，結(jié)合一種或一種以上無毒的、藥學(xué)上可接受的載體和/或稀釋劑以及其他一些活性成分(如果需要的話)。如上所述，從B型或A型任一種開始，可生成所述活性化合物作為均勻的賦形劑分散體。這種CDDO甲基酯賦形劑分散體是固體溶液并且在分子水平上可視為均勻分散。這種分散體可方便地與其他藥學(xué)上可接受的添加劑一同配制以穩(wěn)定活性化合物，并且在一些例子中，在生物利用度方面提供進一步的改善。在作為賦形劑分散體的CDDO甲基酯的配制方面，分散體的賦形劑的選擇由下面兩個標準來指導(dǎo)賦形劑是好的“玻璃形成體”并且賦形劑是藥學(xué)上可接受的。更一般地，所述賦形劑應(yīng)形成穩(wěn)定的、均勻的玻璃態(tài)基質(zhì)，所述玻璃態(tài)基質(zhì)通過具有高于通常的室溫儲存條件的Tg來穩(wěn)定分散體。在這方面附加的標準是分散體的賦形劑應(yīng)是與例如粘合劑、填充劑、潤滑劑、助流劑等其他一些添加劑化學(xué)共存的，所述其他一些添加劑可被用在最終的劑型中以賦予期望的功能性質(zhì)。就滿足這些標準而言，賦形劑根據(jù)本發(fā)明可選自以合適的高Tg值為特征的大量化合物，所述化合物例如(A)碳水化合物、碳水化合物的衍生物和碳水化合物聚合物，(B)合成的有機聚合物，(C)有機酸鹽，⑶蛋白質(zhì)、多肽和肽，以及(E)高分子量多糖，例如肝素，它是硫酸化的多糖，和透明質(zhì)酸、黏多糖。(A)類的例子是纖維素衍生物，例如羥丙基纖維素(HPC)、羥丙基甲基纖維素(HPMC)和乙基纖維素；多糖，例如棉子糖、麥芽三糖、水蘇糖、糊精(尤其包括麥芽糖糊精和環(huán)糊精)、葡聚糖和可溶性淀粉；糖醇，例如甘露醇、木糖醇和山梨糖醇；以及二糖，例如乳糖、海藻糖、麥芽糖和蔗糖。從這類中優(yōu)選的賦形劑是羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯(HPMC-P)。(B)類例如聚[1-(2_氧-1-吡咯烷基)乙烯](poly[l-(2-oxo-l-pyrrolidinyl)ethylene])，也稱聚乙烯吡啶酮(povidone)或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)以及相關(guān)的共聚物，例如不同分子量的PVP/VA。這個類別也包括甲基丙烯酸族共聚物，例如C型甲基丙烯酸共聚物(USP/NF)。(C)類以鹽為例，例如乳酸、抗壞血酸、馬來酸、草酸、丙二酸、蘋果酸、琥珀酸、檸檬酸、葡萄糖酸和谷氨酸各自的鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽和鎂鹽。因此，這方面代表性的鹽是檸檬酸鈉、乳酸鈉、馬來酸鈉、葡萄糖酸鎂和抗壞血酸鈉。典型的(D)類賦形劑是人血清白蛋白；聚氨基酸，例如聚丙氨酸、聚精氨酸、聚甘氨酸和聚谷氨酸；酪蛋白；膠原蛋白；明膠和純化的明膠蛋白質(zhì)；以及某些藥學(xué)上的活性化合物，例如胰島素。如上所述，賦形劑可改變所述藥物劑型的一些物理特征。例如，各種不同的聚合的賦形劑中的分散體可導(dǎo)致所述劑型的可觀察到的Tg減小。通常，Tg是基于所包含的材料比例的加成性質(zhì)。因此，當使用具有Tg值小于無定形B型的Tg值的聚合物時，可預(yù)期觀察到分散體(混合物)的??；減小。此外，通常存有的濕氣或微量殘留有機溶劑也造成！；減小。為了生成固體⑶DO-Me分散體，典型地必須憑經(jīng)驗確定賦形劑的最優(yōu)選擇。例如，使用諸如PEG6000的聚乙二醇族賦形劑生成玻璃態(tài)XRPD-無定形分散體的嘗試生成了含有與A型⑶DO甲基酯的存在有關(guān)的特征峰的混合物。使用維生素E-TPGS(用聚乙二醇1000酯化d-α-琥珀酸生育酚來生成的賦形劑)和使用諸如Pluronic的氧化乙烯_氧化丙烯共聚物得到類似的結(jié)果。如下面的例子所示，根據(jù)本發(fā)明用于與CDDO-Me—同形成分散體的特定的聚合的賦形劑相對于純的B型藥品在口服生物利用度方面表現(xiàn)出驚人的改善。制備均勻的、玻璃態(tài)、X-射線無定形的、具有藥學(xué)上可接受的賦形劑的CDDO-Me分散體的方法可不同，并且這里介紹的例子使用噴霧干燥以生成這種分散體。可使用其他一些制造方法生成具有相同性質(zhì)和實用性的本發(fā)明的分散體。參見Itepka等人，2002，以及那里所引用的參考文獻。所述其他一些方法包括但不限于溶劑蒸發(fā)和擠出，例如熱熔化擠出。除了賦形劑之外，可包括其他一些添加劑以輔助活性成分的穩(wěn)定、調(diào)節(jié)pH(例如，緩沖劑)、改善分散性、輔助提供遞送的均勻性以及達到所期望的藥物劑型的其他一些特性。本發(fā)明的所述化合物或組合物的給藥量根據(jù)患者和給藥模式改變，所述給藥量可以是任何有效量。通過標準的和常規(guī)的臨床前測試和臨床測試的方法可改善本發(fā)明組合物給藥的給定治療方案，所述治療方案的具體細節(jié)由治療的適應(yīng)癥和其他一些因素所決定。所述活性劑給藥的量可在大范圍內(nèi)變化，從而以單位劑量的形式基于患者的體重/天提供藥學(xué)上有效量以達到理想效果。理想的劑量也可隨需被治療的疾病而改變。例如，急性癌癥的治療可能需要的劑量顯著高于諸如關(guān)節(jié)炎的炎癥疾病的治療。具體而言，本發(fā)明的組合物以單位劑量被提供，并且優(yōu)選地每天服用1次至3次以達到理想的效果，最優(yōu)選地每天服用一次以達到理想的效果。此外，本發(fā)明的組合物可每兩天服用一次、每三天服用一次、每四天服用一次、每五天服用一次、每六天服用一次或一個星期服用一次。基于患者的具體需求，本發(fā)明的組合物也可單獨給藥或與其他一些藥物聯(lián)合給藥。具體而言，本發(fā)明的組合物可與抗癌藥劑一同作為治療方案的一部分進行給藥。例如，在諸如胰腺癌的癌癥治療過程中，CDDO-甲基酯可與吉西他濱或其他一些藥劑一同給藥?？傮w而言，本發(fā)明的藥物組合物使用傳統(tǒng)材料和例如混合、調(diào)和等等的傳統(tǒng)技術(shù)來制備。此外，含有A型和B型的藥劑也可含有其他一些成分，所述其他一些成分包括但不限于合適的佐劑、載體、賦形劑和穩(wěn)定劑等等。本發(fā)明的治療劑型優(yōu)選為固體，但是原則上可以是液體，例如懸浮液或乳液。根據(jù)本發(fā)明，口服維持劑量典型地為約0.Img至約lOOOmg，優(yōu)選地每天給藥一次。所述劑量隨受體體重可改變，或者所述劑量適于受體體重。典型的劑量可為約0.01mg/kg至100mg/kg，并且優(yōu)選的單位劑型包括片劑和膠囊。下面的實施例僅是示例性的并無意于限制本發(fā)明。下面概述在實施例中使用的材料和方法a.材料溶劑和其他一些試劑購自商業(yè)供應(yīng)商并且為HPLC級或ACS級。b.實驗方法i.近似溶解度-溶劑添加法已稱重的樣品在室溫下用等份的測試溶劑處理。通過目測檢驗確定測試材料完全溶解?；谟糜谔峁┩耆芙獾目?cè)軇﹣砉浪闳芙舛取Ｒ驗樗褂萌軇┑牡确葸^多或溶解速度慢，實際的溶解度可能大于計算值。如果在實驗過程中沒有發(fā)生溶解，溶解度被表達為“小于”。如果由于僅添加一等份溶劑達到完全溶解，溶解度被表達為“大于”。ii.多晶型物篩選使用熱力學(xué)和動力學(xué)結(jié)晶技術(shù)。這些技術(shù)將在下面更詳細地描述。一旦從結(jié)晶試驗中獲得固體樣品，便在顯微鏡下檢查固體樣品形態(tài)或肉眼觀察固體樣品形態(tài)。記錄任何結(jié)晶的形狀，但是有時固體由于粒度小表現(xiàn)出未知的形態(tài)。然后通過XRPD分析各種固體樣品，并且互相比較圖譜以鑒別新的晶形或非晶形。⑴低溫沉淀(CP)高溫條件下在各種溶劑中制備溶液。然后將所述溶液通過0.2μm的尼龍過濾器或PTFE過濾器過濾至低于室溫的反溶劑中。觀察有無固體存在。如果沒有固體存在，或如果判斷出固體的量對于XRPD分析而言太少，將小瓶放入冰箱中。通過過濾分離所得固體并在分析前干燥所得固體。(ii)快速蒸發(fā)(FE)在各種溶劑中制備溶液并在添加等份溶劑之間將所述溶液經(jīng)聲波處理以幫助溶解。由目測觀察判斷，一旦混合物達到完全溶解，通過0.2μm的尼龍過濾器過濾所述溶液。讓已過濾的溶液在沒有蓋的小瓶中在室溫下蒸發(fā)。分離并分析形成的固體。(iii)冷凍干燥(FD)制備1，4-二氧六環(huán)溶液，通過0.2μm的尼龍過濾器過濾所述溶液，并使用干冰冷凍所述溶液。使用FTS系統(tǒng)Flexi-Dry冷凍干燥冷凍樣品。不控制冷凍干燥溫度。(iv)微粉化在流能磨(fluidenergymill)中完成材料的微粉化，并且微粉化可使粒度減小為1微米至20微米。這些過程的進一步描述可在PERRY化學(xué)工程師手冊(7thed.，McGrawHill,1998)中發(fā)現(xiàn)。(ν)研磨將固體樣品放入帶有小金屬球的不銹鋼磨筒中。一些樣品含有添加的少量水(濕法研磨)。然后將所述樣品在Retesh型匪220混合磨中以30Hz研磨大約20分鐘。分離并分析所得固體。(Vi)低溫研磨將固體樣品放入帶有研磨棒的不銹鋼研磨罐中。然后將樣品在SPEXCertipr印6750型冷凍研磨儀(cryomill)上以15Hz研磨設(shè)定的時間。在實驗過程中，所述研磨罐浸沒在液氮浴中。分離并分析固體。(vii)熔化/淬火將固體樣品放置在玻璃顯微鏡載片上并弄平。然后將所述載片放置在設(shè)定溫度下的熱平板上直至固體熔化。熔化后，從熱平板中移除所述載片并將所述載片放置在冷藏柜上部以快速冷卻。在氮氣下干燥所得固體并分析。(viii)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)在各種溶劑中制備溶液并通過0.2μm的尼龍過濾器過濾溶液。將所述樣品放置在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上并且當干燥時移除所述樣品。分離并分析所得固體。(ix)緩慢蒸發(fā)(SE)在各種溶劑中制備溶液并在添加等份溶劑之間將所述溶液經(jīng)聲波處理以幫助溶解。由目測觀察判斷，一旦混合物達到完全溶解，通過0.2μm的尼龍過濾器過濾所述溶液。讓過濾的所述溶液在室溫下蒸發(fā)或在氮氣條件下在覆蓋了帶有貫穿小孔的鋁箔的小瓶中蒸發(fā)。分離并分析由此形成的固體。(χ)緩慢冷卻(SC)在大約60°C下在各種溶劑中制備飽和溶液，所述溶液在仍溫?zé)釙r通過0.2μπι的尼龍過濾器過濾進入打開的小瓶中。覆蓋所述小瓶并讓所述小瓶緩慢冷卻至室溫。觀察固體是否存在。如果沒有固體存在，或如果判斷固體的量對于XRPD分析而言太少，將所述小瓶放入冰箱。再次觀察固體是否存在，如果沒有固體，將所述小瓶放入冷凍箱。通過過濾分離所形成的固體并在分析前讓所形成的固體干燥。(xi)泥漿實驗(slurryexperiment)在給定的溶劑中添加足夠的固體來制備溶液，這樣存在過量固體。然后在室溫下在密封的小瓶中搖動混合物。7天或10天后，通過真空過濾分離所述固體并分析所述固體。(xii)應(yīng)力實驗(stressexperiment)在不同溫度和/或相對濕度(RH)環(huán)境中固體受力一段測量時間。通過將固體放置在含有飽和鹽溶液的密封小室內(nèi)或ESPEC溫度和濕度的小柜內(nèi)以達到特定的RH值。根據(jù)ASTM標準程序選擇和制備鹽溶液。從應(yīng)力環(huán)境中移除樣品之后立即由XRPD分析樣品。iii.單晶體結(jié)構(gòu)測定⑴樣品制備在大約60°C甲醇溶液中制備⑶DO甲基酯的飽和溶液，將該飽和溶液在仍溫?zé)釙r通過0.2μπι的過濾器過濾至打開的小瓶中。覆蓋所述小瓶并讓其緩慢冷卻至室溫。一天后觀察到錐體片(pyramidaltablet)的存在。(ii)數(shù)據(jù)收集具有二維尺寸約為0.OlmmXO.Olmm的⑶DO-Me的無色平板以隨機取向安裝在玻璃纖維上。在安裝了石墨單晶入射光束單色儀的NoniusKappaC⑶衍射儀上使用MoKa輻射(λ=0.71073A)執(zhí)行初步的檢查和數(shù)據(jù)收集。在LINUXPC上使用SHELX97執(zhí)行修正(Sheldrick,1997)[1]。使用2°<θ<22°范圍內(nèi)的46742個反射的設(shè)定角度，通過最小二乘法修正獲取晶胞常數(shù)和取向矩陣的采集數(shù)據(jù)。DENZ0/SCALEPACK[2]的修正馬賽克性(mosaicity)為0.32°，它顯示良好的晶體特性。由XPREP程序[3]確定空間群。根據(jù)系統(tǒng)存在的以下條件:h00h=2η，0011=4η和后續(xù)的最小二乘法修正確定空間群為Ρ43212(ηο.96)。溫度為150士IK條件下，收集數(shù)據(jù)至最大2θ值，該最大2θ值為44.43°。(iii)數(shù)據(jù)壓縮使用DENZ0-SMN[2]使結(jié)構(gòu)一體化。收集到總數(shù)為46742個反射，其中9168個反射是獨一無二的。將洛倫茲效應(yīng)(Lorentz)和極化作用校正應(yīng)用于數(shù)據(jù)。MoKa輻射的線性吸收系數(shù)為0.074mm1O應(yīng)用經(jīng)驗吸收校正，該經(jīng)驗吸收校正使用SCALEPACK[2]。傳輸系數(shù)的范圍為0.9995至0.9999。等量反射的強度被平均?；趶姸?，用于平均的偏離因子(agreementfactor)為9·3%0(iv)結(jié)構(gòu)分析和修正使用SHELXS97[1]通過直接方法分析結(jié)構(gòu)。剩余的原子被設(shè)置在隨后的差值傅里葉合成法中。在修正中包括氫原子，但限制氫原子騎在它所連接的原子上。通過將函數(shù)最小化從而在全矩陣最小二乘法中修正結(jié)構(gòu)，所述函數(shù)為EW(|F0|2-|FC|2)2重量w定義為1/，其中？=(F。2+2F。2)/3。從“國際晶體學(xué)表(InternationalTablesforCrystallography)[5]”中得到散射因子。在用于修正的9168個反射中，僅使用具有F。2>2o(F02)的反射計算R。總共有5421個反射在所述計算中使用。最后一輪修正包括1024個可變參數(shù)并且由未加權(quán)和加權(quán)的(最大的參數(shù)偏移<0.01倍的估計標準偏差)的偏差因子收斂，所述未加權(quán)和加權(quán)的偏差因子為R=EIF0-Fj/ΣF0=0.051R·;^Α^'^/Σ^)=_單位權(quán)重觀測的標準偏差為1.05。最終的差值傅里葉中的最大峰具有0.22e/人3的高度。最小的負峰具有-0.256/人3的高度。(ν)計算的X-射線粉末衍射(XRPD)圖譜使用PowderCell2.3[6]和單晶體數(shù)據(jù)的原子坐標、空間群和晶胞參數(shù)生成Cu輻射的計算的XRPD圖譜。(vi)ORTEP和堆積圖使用ORTEPIII[7][9]繪制ORTEP圖。由50%概率各向異性熱橢圓體代表原子。使用CAMER0N[8]模擬軟件繪制堆積圖。使用Mercuryl.4.1[4]生成附加的圖和BFDH形態(tài)預(yù)測。c.儀器方法i.差熱掃描量熱法(DSC)在TA儀器差熱掃描量熱儀2920或Q1000上執(zhí)行分析。使用銦作為參照材料校準所述儀器。樣品放置在具有軋花蓋(crimpedlid)結(jié)構(gòu)的標準鋁DSC平底鍋內(nèi)，并精確記錄重量。在25°C條件下平衡樣品池(samplecell)并在氮氣吹掃的條件下以10°C/分鐘的速度加熱，直至250°C的最終溫度。ii.動態(tài)蒸氣吸附/解吸附(DVS)在VTISGA-100蒸氣吸附分析儀上收集濕氣吸附/解吸附數(shù)據(jù)。在氮氣吹掃的情況下，在5%至95%相對濕度范圍內(nèi)以10%RH間隔收集吸附和解吸附數(shù)據(jù)。分析之前不干燥樣品。分析用的平衡標準是五分鐘之內(nèi)小于0.010%的重量變化以及3個小時的最大平衡時間(如果沒有達到重量標準)。不校準樣品的起始濕氣含量的數(shù)據(jù)。使用氯化鈉和聚乙烯吡咯烷酮作為校正標準。iii.卡爾費休(KarlFischer)(KF)使用MettlerToledoDL39卡爾費休滴定儀執(zhí)行用于水分測定的庫侖法卡爾費休(KF)分析。大約24mg至32mg樣品放置在含有Hydranal-CoulomatAD的KF滴定容器中。然后用發(fā)生電極滴定所述樣品，所述發(fā)生電極通過電化學(xué)氧化產(chǎn)生碘2Γ=>I2+2e。獲取三個重復(fù)數(shù)據(jù)以確保重復(fù)性。iv.熱臺顯微法使用安裝在LeicaDMLP顯微鏡上的Linkam熱臺(型號FTIR600)來執(zhí)行熱臺顯微法。使用帶有正交偏光器(CP)和λ補償器的20倍物鏡(obj.)來觀察樣品。樣品被放置在蓋玻片上。然后在樣品上放置第二個蓋玻片。在所述熱臺被加熱時，可直觀地觀察每個樣品。使用具有SPOT軟件v.4.5.9.的SPOTInsight彩色數(shù)碼相機拍攝圖像。使用USP熔點標準來校準熱臺。v.調(diào)制差熱掃描量熱分析法(MDSC)在安裝有冷凍冷卻系統(tǒng)(RCS)的TA儀器差熱掃描量熱分析儀上獲取調(diào)制差熱掃描量熱分析法數(shù)據(jù)。樣品被放入鋁DSC平底鍋中，并精確記錄重量。用蓋子覆蓋所述平底鍋并收緊所述平底鍋。使用+/-0.8°C調(diào)制幅度和具有_25°C至250°C范圍內(nèi)2°C/分鐘的基本加熱速度的60秒周期獲取MDSC數(shù)據(jù)。使用銦金屬和藍寶石作為校正標準分別校正溫度和熱容量。由可逆熱流相對溫度曲線的階躍變化的拐點得到所報道的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度。vi.核磁共振(NMR)由光譜數(shù)據(jù)服務(wù)器(SpectraDataService,Inc)收集液相1HNMR光譜。采集參數(shù)打印在每個光譜上。光譜參照位于0.Oppm的內(nèi)標四甲基硅烷。vii.光學(xué)顯微法在Wolfe偏光光學(xué)顯微鏡上放大4倍來收集由光學(xué)顯微法作出的觀測。使用正交偏光器(CP)來觀察樣品中的雙折射。viii.掃描電子顯微法(SEM)使用FEIQuanta200掃描電子顯微鏡執(zhí)行掃描電子顯微檢查(SEM)。在高真空模式下，使用固體反向散射(Etd)檢測器。電子束電壓為5.0kV。使用Cressington108自動噴涂刻蝕儀在約20mA和約0.13mbar(Ar)條件下用Au/Pd噴涂覆蓋樣品75秒。通過將少量樣品放置在固定于鋁樣品底座上的碳纖維雙面膠上來制備用于分析的樣品。使用NIST標準校正所述儀器的放大倍數(shù)。使用xTm(v.2.01)(版本號1564)收集數(shù)據(jù)并使用XTDocu(v.3.2)分析數(shù)據(jù)。在獲取初始數(shù)據(jù)后，計算記錄在SEM圖像上的放大倍數(shù)。在重新調(diào)整圖像后，記錄在每個圖像較低的部分的標尺是準確的，并且當進行尺寸測定時，應(yīng)利用所述標尺。ix.熱重分析法(TG)在TA儀器2950熱重分析儀上完成分析。校正標準是鎳和鋁鎳合金TM(AlumelTM)。每個樣品被放入鋁樣品平底鍋內(nèi)并塞入TG熔爐。首先，在25°C平衡樣品，然后在氮氣流下以10°C/分鐘的速度加熱，直至350°C的最終溫度(除非另有說明)。X.X-射線粉末衍射(XRPD)(i)InelXRG-3000同樣在InelXRG-3000衍射儀上執(zhí)行X_射線粉末衍射分析，所述InelXRG-3000衍射儀安裝具有120°的2Θ范圍的彎曲的位置敏感探測器。在0.03°(2θ)分辨率下，使用CuKa輻射收集實時數(shù)據(jù)。管電壓和管電流強度分別設(shè)置為40kV和30mA。顯示從2.5°至40°(2Θ)的圖譜以利于直接比較圖譜。通過將樣品裝入薄壁玻璃毛細管中來制備用于分析的樣品。每個毛細管被安裝在測角儀的頭部，所述測角儀頭部是電動的以允許毛細管在數(shù)據(jù)獲取過程中自旋。使用硅參照標準每天執(zhí)行儀器校正。d.其他計算技術(shù)i.PDF在χ-射線無定形數(shù)據(jù)的計算機分析中使用的一種技術(shù)是對分布函數(shù)(PairDistributionFunction,PDF)。顧名思義，PDF是由材料內(nèi)所有相關(guān)的原子-原子相互作用的線性總和構(gòu)成的。缺陷(無序)材料在減短尺度內(nèi)表現(xiàn)出與結(jié)晶相相同的原子_原子相互作用。因此，這些材料通過檢測最初幾個納米中PDF的峰可與母體結(jié)晶材料相比較。由于OA至5A范圍內(nèi)的非自然信號，難于比較OA至5A范圍內(nèi)的圖譜。在玻璃態(tài)材料形成時，隨分子馳豫PDF的峰位置表現(xiàn)出相對結(jié)晶峰位置的一些移動。這類似于熱膨脹/收縮情況，其中，盡管所述PDF峰輕微地移動，相對峰強度因與原始結(jié)晶材料相關(guān)而應(yīng)仍是可辨別的。當材料進入熱動力學(xué)無定形狀態(tài)時，將損失一些點群對稱關(guān)系產(chǎn)生降低了復(fù)雜性的PDF。還會有一些峰移動。玻璃態(tài)/無定形材料表現(xiàn)出在2至3個最近距離內(nèi)快速降至零的PDF。利用測試條件以最小化χ-射線圖中的背景并且使用算法以計算基于測量的χ-射線數(shù)據(jù)的PDF。使用PatternMatchv2.2.1計算所述PDF，對于所有樣品而言使用測量數(shù)據(jù)的整體范圍。實施例1-溶解度評估在室溫條件下測定了不同溶劑中的近似溶解度，測試結(jié)果如表2所示。⑶DO甲基酯在大多數(shù)所使用的有機溶劑中表現(xiàn)出高溶解度。CDDO甲基酯在水中的溶解度表現(xiàn)出小于0.lmg/mL0實施例2-多晶型物篩選結(jié)果執(zhí)行了大約50個多晶型物篩選試驗。在大約50%的樣品中觀察到A型。A型的形成不限于特定的結(jié)晶條件并且由多種不同的試驗和溶劑制備而成。B型材料通過冷凍干燥、熔化/淬火以及幾種蒸發(fā)試驗制備而成。多晶型物篩選樣品按所用溶劑的字母順序列于表3至表5。在圖2中比較了A型材料和B型材料代表性的XRPD圖譜。A型和B型的特性數(shù)據(jù)在下面的實施例中予以總結(jié)。實施例3-CDD0-甲基酯-A型(非微粉化)的特性A型是非溶劑化物(見表6)?；谏鲜龇椒ù_定A型的單晶結(jié)構(gòu)。生長⑶DO-甲基酯的晶體并進行單晶結(jié)構(gòu)分析。由單晶X-射線衍射確定晶體結(jié)構(gòu)。所提出的CDDO-甲基酯的結(jié)構(gòu)如圖1所示。四方晶胞參數(shù)和計算的體積為a=14.21620(10)A,b=14.21620(10)A,c=81.5875(12)Α，α=90.00°，β=90.00°，γ=90.00°,V=16488.9(3)A30CDDO甲基酯的分子量是505.70g/mol以及Z=24得出計算的密度為1.222gcm_3。確定空間群為PAJpOio.96)。晶體數(shù)據(jù)和晶體學(xué)數(shù)據(jù)采集參數(shù)在表10中予以總結(jié)。如R值為0.051(5.1所表明的，獲得了高質(zhì)量的結(jié)構(gòu)。對于最可靠地確定結(jié)構(gòu)而言，通常引用0.02至0.06范圍內(nèi)的R值。單一⑶DO甲基酯分子的ORTEP繪圖如圖12所示。圖13所示的非對稱單元含有三個CDDO甲基酯分子。所述分子與圖1提出的結(jié)構(gòu)相同。分別沿晶軸a，晶軸b和晶軸c看到的堆積圖如圖14至圖16所示。晶體結(jié)構(gòu)包括許多范德華相互作用且沒有氫鍵。沿晶軸b的俯視圖(圖15)突出體現(xiàn)了四方螺旋軸堆積排列的螺旋性質(zhì)和預(yù)測的BFDH形態(tài)。所述預(yù)測的形態(tài)與觀察到的在數(shù)據(jù)收集中使用的單晶形態(tài)具有良好的一致性。圖17示出了由單晶數(shù)據(jù)計算得到的⑶DO甲基酯XRPD圖譜。圖18示出了⑶DO甲基酯的實驗XRPD圖譜。表17提供了A型XRPD圖譜的特征峰。計算XRPD圖譜和實驗XRPD圖譜的比較(圖19)揭示了實驗圖譜中所有的峰表現(xiàn)在計算XRPD圖中，這說明體材料很可能是單一相。在峰位置中觀察到的微小的一致位移很可能是基于下述事實實驗粉末圖譜在室溫下收集，而單晶數(shù)據(jù)是在150°K收集。在單晶分析中使用低溫以改善結(jié)構(gòu)性質(zhì)?？偠灾?，確定了CDDO甲基酯A型的單晶結(jié)構(gòu)以證實所提出的分子結(jié)構(gòu)。確定了空間群為PAjp(IK).96)。CDDO甲基酯的結(jié)構(gòu)由沿晶軸b向下的螺旋型堆積的三個分子組成。實驗圖譜中的所有峰在計算XRPD圖譜中得以體現(xiàn)，這說明體材料可能是單一相。圖3示出了A型的熱數(shù)據(jù)。DSC曲線顯示了在大約157°C處的基線位移并且具有起始溫度為大約222°C的吸熱線(信號最大值在約224°C處)。由熱臺顯微檢查證實在約224°C處的現(xiàn)象為熔化(圖4)。熱重量分析(TG)曲線表現(xiàn)了溫度高達150°C時可忽略的0.34%的失重，接著150°C至210°C失重1.2%?？栙M歇爾數(shù)據(jù)顯示所述材料含有約0.38%的殘留水分，這與由TG觀察到的初始失重一致。DVS數(shù)據(jù)說明A型不是吸濕的(圖5)。所述材料在整個試驗過程中顯示出可忽略的重量變化。通過XRPD分析所得材料并且所得材料是A型。圖6示出了SEM圖像，觀察到包括錐形、片狀、類平板狀在內(nèi)的多種形態(tài)。本發(fā)明研究了不同條件下A型的物理穩(wěn)定性(表7)。在25°C/60%RH或40°C/75%RH條件下樣品受力7天，所述樣品均顯示出可忽略的重量變化(分別損失0.6%以及增加0.2%)，這表明A型不是吸濕的。兩個樣品被置于球磨機上大約20分鐘，一個變干燥，另一個含有少量水。通過XRPD再次分析所有樣品并且所有樣品仍為A型。在195°C條件下樣品受力15分鐘并且所述樣品顯示出2%的失重。所得材料的XRPD類似于A型的XRPD；然而，基線噪音明顯增加(圖7)。圖8示出了溶液的NMR光譜。所述光譜與⑶DO甲基酯的結(jié)構(gòu)一致。在大約1.6ppm和7.3ppm處的峰分別對應(yīng)于水和氯仿(由于交換)。A型是非溶劑化物并且不吸濕，因此，根據(jù)分析員在熱臺顯微檢查過程中的觀察，A型在約228°C熔化。實施例4-CDD0甲基酯-A型(微粉化)的特性通過XRPD確定微粉化的A型⑶DO甲基酯為A型(圖2，表1)。通過諸如噴氣制粉之類的本領(lǐng)域熟知的傳統(tǒng)方法可生成微粉化材料。這些結(jié)果似乎說明微粉化不影響A型以改變其XRPD圖。實施例5-⑶DO甲基酯-B型的特件B型材料可通過冷凍干燥、熔化/淬火、以及如表3所提供的一些其他蒸發(fā)試驗來制備。圖9示出了調(diào)制DSC(MDSC)數(shù)據(jù)。可逆曲線顯示了玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(Tg)為約125°C。不可逆曲線顯示了具有信號最大值在195°C處的放熱并且具有信號最大值在223°C處的吸熱。所述不可逆現(xiàn)象很可能是由于B型材料的結(jié)晶(放熱)和之后結(jié)晶材料的熔化(吸熱)。本發(fā)明研究了各種情況下B型材料的物理穩(wěn)定性(表9)。在22°C/97%RH、40°C/75%RH,80°C/0%RH以及195°C/環(huán)境RH條件下樣品受力后仍保持為B型。在2000C/環(huán)境RH條件下材料受力60分鐘生成A型材料和少量B型材料(圖10)。圖11示出了溶液的NMR光譜。所述光譜與CDDO甲基酯的結(jié)構(gòu)一致。在大約1.6ppm、大約5.3ppm以及大約7.3ppm處的峰分別對應(yīng)于水、二氯甲烷和氯仿。B型不是吸濕的，在約200°C結(jié)晶為A型，并且玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(Tg)為約125°C至約130°C?？偠灾?，B型不是吸濕的。MDSC數(shù)據(jù)說明B型的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(Tg)為大約125°C至大約130°C。當在大約200°CB型受力時，B型材料結(jié)晶為A型。實施例6-B型CDDO甲某酯和CDDO甲某酯聚合物賦形劑分散體的穩(wěn)定件研究(i)對純化的B型的研究對在不同的應(yīng)力條件下的B型CDDO甲基酯進行研究。表15提供了來自這些研究的一些結(jié)果。由本發(fā)明有用的但次優(yōu)選的實施方式生成的B型CDDO甲基酯顯示出顯著的穩(wěn)定性，所述實施方式包括使用乙酸乙酯作為溶劑。然而，在乙酸乙酯存在條件下生成的B型樣品的測試揭示了在60°C及以上溫度條件下存儲28天后形成A型。與之相對，根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的實施方式(下面實施例11是其示例)生成的所有樣品在特殊嚴格條件下應(yīng)力測試之后保持無定形特性(見表15)。這些研究顯示B型材料驚人的穩(wěn)定性，尤其當所述B型材料根據(jù)上述優(yōu)選的實施方式制備時。此外，分析在不同條件下制備的B型樣品以確定它們是否具有類似的化學(xué)性質(zhì)。如上所述，也就是通過低溫研磨、熔化淬火以及噴霧干燥方法制備B型樣品。此外，非微粉化的B型被微粉化以生成微粉化的B型。對樣品執(zhí)行PDF分析(圖28)，確定所述樣品性質(zhì)上為玻璃態(tài)。(ii)對⑶DO甲基酯分散體制劑的研究進行研究以比較不同B型(通過噴霧干燥生成的聚合物固體分散體)的性能。所述產(chǎn)物特性研究包括穩(wěn)定性和藥物溶解曲線。以藥物活性成分(API)與聚合物的三種比例(2080、4060以及6040%(w/w))使用不同的聚合物。選取下列三種聚合物甲基丙烯酸-丙烯酸乙酯共聚物(11)共聚維酮(Copovidone)[1-乙烯基-2-吡咯烷酮-醋酸乙烯酯共聚物(3:2)]羥丙甲纖維素鄰苯二甲酸酯。將CDDO-Me溶液、A型晶體材料或B型材料任一種的溶液以及所選擇的用于研究的聚合物溶液以適當?shù)闹亓勘热芙庥诤线m的溶劑中，所述適當?shù)闹亓勘鹊湫偷厥枪腆w重量占溶液重量的10%至20%。典型地，所使用的溶劑為丙酮。通過裝有兩個流體噴嘴的實驗室規(guī)模的噴霧干燥器(Bt)CHI,型號B-290)并使用氮氣作為干燥氣體和載氣來噴霧干燥所得溶液。典型地，使用65°c至85°C的載氣入口溫度以及50°C至60°C的載氣出口溫度。收集固體并且噴霧干燥的粉末在真空條件下被后干燥以進一步降低有機溶劑的水平。分析所述噴霧干燥粉末的殘留有機溶劑水平、玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(Tg)以及體密度。后干燥之后，還通過X-射線粉末衍射(XRPD)以及溶解曲線來分析所述粉末的純度、水含量、平均粒度、不存在晶體材料。在短期受力之后(5天之后，40°C/75%RH)，通過XRPD和調(diào)制差熱掃描量熱分析法(mDSC)評價所述分散體的物理化學(xué)特性。這些研究表明在短期受力期間玻璃化轉(zhuǎn)變溫度Tg降低可能是由于在受力過程中吸收了濕氣。所述降低在含有低的CCDO甲基酯與聚合物比例的制劑中更加顯著。對于短期受力之前的樣品而言，在較高溫度條件下觀察到一個或兩個吸熱轉(zhuǎn)變，盡管這些溫度稍低于最初觀察到的溫度。與這些轉(zhuǎn)變有關(guān)的焓隨聚合物含量減少而減少。這就說明這種轉(zhuǎn)變最可能與聚合物有關(guān)，而非與晶形熔化有關(guān)。事實上，對于用PVP/VA生成的分散體而言，這種吸熱轉(zhuǎn)變的溫度與觀察到的從生產(chǎn)廠商得到的純賦形劑的吸熱轉(zhuǎn)變溫度類似。在每個例子中，受力之后的XRPD曲線仍為特征的暈圖，中心在2θ約為13.5°處，并且沒有檢測到與晶形相關(guān)的峰。使用大型噴霧干燥裝置對兩種劑型實施了進一步的噴霧干燥研究。在這些例子中，使用Niropilot規(guī)格干燥器PSD-I型(Mobileminor2000)。對上述的劑型也使用等效的噴嘴和噴霧干燥條件。表20和表21總結(jié)了所制備的用于噴霧干燥的溶液和噴霧干燥之后溶液的特性。由于所述制劑包括的聚合物的Tg小于B型的Tg，所述劑型顯示了相對于純B型較低的Tg。實施例7-⑶DO甲基酯的給藥在獼猴體內(nèi)B型與A型對比在這個研究的第1階段，一定量的含有純微粉化的A型CDDO-Me或純微粉化的B型CDDO-Me的硬明膠膠囊通過以下步驟制備(i)向1號硬明膠膠囊中加入適當重量的純形態(tài)的藥品，然后(ii)封閉膠囊。未采用其他的賦形劑。將CDDO甲基酯B型或A型的任一種以明膠膠囊形式口服給藥于獼猴(所有例子中劑量=4.lmg/kg)。CDDO甲基酯B型的給藥提供了中位暴露(medianexposure)，該中位暴露高于猴子體內(nèi)CDDO甲基酯A型的等效劑量約520%。表11比較了單個動物的藥物暴露。在本研究中實施交叉設(shè)計以增加‘η’值并提高數(shù)據(jù)可靠性。在所述交叉過程中實施1周的洗脫期。圖20顯示了在抽樣總體中CDDO甲基酯的兩種形態(tài)隨時間變化所達到的血藥濃度。圖21表示比較動物#505Μ和動物#507F的⑶DO甲基酯血藥濃度。圖22表示比較動物#508F和動物#502M的⑶DO甲基酯血藥濃度。為了進一步評價⑶DO甲基酯(包括那些含有⑶DO-甲基酯賦形劑分散體)的口服劑型的相對生物利用度，執(zhí)行了如下具體描述的兩個附加的第2階段研究和第3階段研究。這些研究包括實施例6中描述的一些⑶DO-MeB型-聚合物分散體。所有劑型包括常用的劑型添加劑。第2階段:由微粉化的A型材料樣品生成納米晶體⑶DO-Me的水懸浮液。將25gm微粉化的CDDO-Me(平均粒度分布為6.1μM)、5gm多庫酯鈉、Igm吐溫80以及68.3gm水裝入含有平均尺寸為2mm的氧化鋯球的RetsehPlanatory球磨機(型號PM400)。以大約400RPM開始研磨并持續(xù)2小時。使用激光粒度分析儀確定粒度分布(PSD)，結(jié)果表明得到了0.37μm的平均PSD。向該濃懸浮液中加入Igm微晶纖維素和0.2gm黃原膠，并簡單攪拌，冷藏儲存所述懸浮液。在實驗室規(guī)模AeromaticStrea1流化床中將球磨的納米懸浮液噴涂于干燥的賦形劑混合物上，所述流化床的噴霧裝置具有0.4mm噴嘴尺寸。入口溫度設(shè)置為55°C。噴霧期間的排氣溫度范圍為32°C至35°C。將所得顆粒干燥約5分鐘，直至排氣溫度達到38°C(附件3至5)。涂覆材料的組分如下納米晶體30mgCDDO-Me劑型的理論組分<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>對所得干燥顆粒進行HPLC分析以確定活性成分的含量。確定了所述活性成分含量為14.4%(wt/wt)，大大高于理論值(5.7%)。基于HPLC分析，填充膠囊以提供30mg的凈CDDO-Me含量。通過傳統(tǒng)的干粉混合工藝生成晶體微粉化A型和無定形微粉化B型劑型，所述傳統(tǒng)的干粉混合工藝使用微晶纖維素、預(yù)凝膠淀粉、交聯(lián)聚維酮(crospovidone)(作為崩解劑功能)、膠體二氧化硅以及植物級(vegetablegrade)硬脂酸鎂作為添加劑。平均PSD為6.1μM的微粉化的⑶DO-MeA型被用于A型劑型，而平均PSD為10.8μM的微粉化的⑶DO-MeB型被用于相應(yīng)的⑶DO-MeB型劑型。下表描述了兩種劑型的定量組分。A型和B型30mg膠囊定量組分<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>15只雄性獼猴(食蟹獼猴(Macacafascicularis))中的每一只以10mg/kg的目標劑量水平接受CDDO-甲基酯的單一口服給藥(3種不同的劑型，5只猴/劑型)。猴子的年齡范圍為1歲至3歲，猴子的體重范圍為2.5kg至3.5kg。給藥后72小時收集血樣。第3階段:通過傳統(tǒng)干粉混合工藝進一步配制如實施例6所描述的⑶DO-Me賦形劑分散體，所述傳統(tǒng)干粉混合工藝使用微晶纖維素、乳糖一水化物、交聯(lián)聚維酮(作為崩解劑功能)以及十二烷基硫酸鈉作為添加劑。每個劑型的定量組分表示如下。膠囊劑型的⑶DO-Me賦形劑分散體與添加劑混合的組分40%CDDO-Me/60%C型60%CDD〇-Me/40%60%CDDO-Me/40%成分_甲基丙烯酸共聚物_PVP/VA_HPMC-PCDDO-Me分散體60.0%50.0%50.0%孩史晶纖維素12.8%16.0%16.0%乳糖一水化物20.0%25.0%25.0%交聯(lián)聚維酮6.4%8.0%8.0%十二烷基石鬼酸納0.8%1.0%1.0%總膠囊含量100%100%100%填充量_125mg_IOOmg_IOOmg_在一段合適的洗脫期之后(7天至10天)，15只雄性獼猴(與第2階段所使用的相同)的每一只以10mg/kg的目標劑量水平接受CDDO-甲基酯的單一口服給藥(3種不同的劑型，5只猴/劑型)。給藥后72小時采集血樣。下表總結(jié)了研究的每個階段<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>下面總結(jié)了雄性獼猴接受的平均靜脈給藥劑量和口服劑量以及CDDO-甲基酯的平均濃度<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>PO通過膠囊口服給藥2號明膠膠囊被用于在第2階段中遞送劑型以及1號明膠膠囊被用于在第3階段中遞送。假定每只猴子重3kg，在每個膠囊中凈藥物含量為30mg以對應(yīng)于10mg/kg的藥物劑量。將所述膠囊連接于管飼用的管子，對所述動物進行管飼，并且由空注射器的空氣壓力將所述膠囊從管飼末端釋放。最后一個膠囊給藥之后，口服給予少量水(約IOmL)。在以下時間點(記錄實際時間)中的每一個時間點，從每只動物的股靜脈或動脈抽取一系列血樣(約ImL)并轉(zhuǎn)移至含有K2-EDTA的試管中第2階段給藥前、給藥后1小時、2小時、4小時、8小時、16小時、24小時、48小時和72小時第3階段給藥前、給藥后1小時、2小時、4小時、8小時、16小時、24小時、48小時和72小時收集之后，在約4°C冷卻之前，充分混合所有樣品，并置于濕冰上。通過HPLC-MS/MS分析血液中的⑶DO-甲基酯濃度。結(jié)果如表22和圖30所示。對于第2階段而言，B型顯示出顯著優(yōu)于所測試的兩種A型劑型的生物利用度。第3階段的結(jié)果顯示出CDDO-Me聚合物分散體-基礎(chǔ)劑型中的每一個較微粉化A型或納米晶體A型劑型具有更高的生物利用度。在受體猴子體內(nèi)，C型甲基丙烯酸共聚物和HPMC-P劑型顯示出最高的生物利用度。實施例8-CDD0-甲基酯的單側(cè)苯化物(hemibenzenate)形杰的特件執(zhí)行復(fù)制⑶DO甲基酯合成的最后回收步驟的各種實驗。Hondaetal.，2000。目的是從苯/丙酮(101)溶液混合物中分離晶體材料。將約IOOmgCDDO-甲基酯溶解于300μL苯/丙酮(101)中，并通過0.2μm尼龍過濾器過濾。然后，使用超聲處理器將所述溶液用聲波處理10分鐘，并讓所述溶液在室溫條件下在開蓋的小瓶中過夜蒸發(fā)。形成透明凝膠并加入IOOyL苯/丙酮(101)。將所述溶液在超聲處理器上通過聲波處理約30分鐘。形成白色沉淀物。讓所述固體風(fēng)干。在其它一些試驗中，將約200mg⑶DO-甲基酯溶解于0.8mL苯/丙酮(101)中，并通過0.2μm尼龍過濾器過濾。然后，將所述溶液平均分入兩個Ι-dram小瓶中。然后，在室溫條件下，讓樣品A和B快速蒸發(fā)幾小時。將樣品A加蓋置于冷藏箱中。所述樣品冷凍后，讓所述樣品在室溫條件下融化。使用刮勺刮出小的刮痕，并讓所述樣品在室溫條件下蒸發(fā)。形成白色固體并讓所述白色固體風(fēng)干。將樣品B加蓋，置于室溫，并且所述樣品B在室溫下放置一晚后為透明溶液。使用刮勺刮出小的刮痕，并讓所述樣品在室溫條件下蒸發(fā)。形成白色固體并讓所述白色固體風(fēng)干。從多個這種實驗中獲得的晶體材料被確定為單側(cè)苯化物。如上所述，在回收容器內(nèi)諸如超聲處理或僅僅刮出小的刮痕的較小的干擾將有利于苯溶劑化物的結(jié)晶(表12)。單側(cè)苯化物的特性數(shù)據(jù)在表13中予以總結(jié)。在表19中提供單側(cè)苯化物XRPD圖的特征峰。DSC曲線在133°C附近表現(xiàn)出寬的吸熱，該寬的吸熱與TG熱分析圖23中約7.0%的失重相關(guān)。所述失重很可能是由于苯的揮發(fā)(參見下面的NMR討論)，并且對于每摩爾⑶DO-甲基酯而言所述失重對應(yīng)于0.5摩爾苯。在223°C附近觀察到的DSC吸熱最有可能是由于去溶劑化材料的熔化所致。這些數(shù)據(jù)將⑶DO甲基酯的先前分離的形態(tài)與本發(fā)明區(qū)分開來。實施例9-CDD0-甲基酯的新型二甲醇化物形態(tài)的特性根據(jù)下面的步驟制備⑶DO-甲基酯二甲醇溶劑化物。將約500mg⑶DO-甲基酯溶解于60°C的20ml甲醇中。然后，緩慢地將所述溶液加入至-10°C的20ml冷甲醇中并攪拌。通過真空過濾收集白色固體，然后儲存在冷藏箱中。特性數(shù)據(jù)在表14中予以總結(jié)。表18中提供了二甲醇化物XRPD圖的特征峰。DSC曲線顯示了102°C附近寬的吸熱，該寬的吸熱與TG熱分析圖中(圖24)約11%的失重相關(guān)。TGIR數(shù)據(jù)證實所述失重是由于約2.0摩爾的甲醇揮發(fā)(圖25)?；厥諒腡GIR實驗所得的材料并且通過XRPD(圖26)確定所得材料為無定形。在DSC曲線中還觀察到在約130°C處的基線位移和在強吸熱之后(開始223°C)在203°C附近寬的放熱。這些現(xiàn)象最可能代表的是無定形材料(B型)的Tg。通過所述二甲醇溶劑化物去溶劑化，接著無定形材料結(jié)晶為A型并使該晶體材料熔化獲得上述無定形材料(B型)。獲得了溶液的質(zhì)子NMR光譜。沒有進行化學(xué)指認；然而該光譜看起來與CDDO-甲基酯的化學(xué)結(jié)構(gòu)一致。在約3.51ppm的峰對應(yīng)于甲醇并且相當于約1.7摩爾。這個結(jié)果與上面的熱數(shù)據(jù)一致。實施例10-⑶DO-甲基酯的臨床研究選取使用微粉化的A型配制的CDDO-Me用于臨床發(fā)展并且在第1階段面向安全的研究中初步測試患晚期癌癥的患者，先前的治療對所述患者沒有足夠的療效。在第1階段的劑量遞增試驗中，將CDDO-Me給藥于21位具有各種形式的晚期(轉(zhuǎn)移性的)癌癥的成人患者。將日劑量的⑶DO-Me膠囊給藥于患者，所述⑶DO-Me的日劑量范圍為5mg/天至900mg/天(具體而言，5mg/天、IOmg/天、20mg/天、40mg/天、80mg/天、150mg/天、300mg/天、600mg/天或900mg/天)。⑶DO-Me以“周期”給藥，重復(fù)所述周期直至患者遭受不可接受的毒性或顯示出疾病惡化的跡象。在這個研究中，CDDO-Me的一個周期由21天連續(xù)給藥及后續(xù)的七天休息時間構(gòu)成，在所述七天休息時間之后患者有資格開始下一個周期。復(fù)查了⑶DO-Me的安全性和抗腫瘤活性。此外，表征了⑶DO-Me的生物學(xué)上的效果。這些患者對⑶DO-Me耐受性非常好，沒有報道重大的與藥物相關(guān)的不良反應(yīng)。一些患者(約75%評價的患者)被認為在第二治療周期結(jié)束之后的最初評價點具有穩(wěn)定的病情(基于標準放射學(xué)和臨床標準)。在完成第二周期之前被發(fā)現(xiàn)有疾病惡化跡象的患者不做正式地評價，并且所述患者不包括在評價的患者組內(nèi)。包括患有黑色素瘤和腎細胞癌癥患者在內(nèi)的五個患者持續(xù)表現(xiàn)出穩(wěn)定的病情，一些患者在四個治療周期之后具有個體腫瘤病變退化的跡象。在至少六個治療周期之后，四個患者被認為具有穩(wěn)定的病情。按照所規(guī)定的計劃接受至少40mg⑶DO-Me/天的劑量的任何一個患者體內(nèi)沒有新的轉(zhuǎn)移瘤產(chǎn)生?；谝阎蘑荄O-Me的抗炎癥性質(zhì)，在第1階段的試驗中評價了患者體內(nèi)的循環(huán)炎癥細胞因子。當劑量低至5mg/天時，一些循環(huán)促炎細胞因子和包括MMP-9、TNFα、IL-8和VEGF在內(nèi)的趨化因子降低。具體而言，已知TNFa在例如類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎之類的疾病的炎癥過程中起重要作用，所述TNFα在具有高基線TNF水平的3位患者(每天每一位患者治療劑量為10mg、20mg和40mg)體內(nèi)大幅度地降低或降低至低于檢測限。不像與靶標結(jié)合并且使靶標無效的抗TNF單克隆抗體，⑶DO-Me降低了TNFα的產(chǎn)量和TNFα產(chǎn)物循環(huán)水平。此外，在第1階段的研究中在患者外周血單核細胞中已監(jiān)測到包括抗氧化劑和解毒酶類的第2階段的基因產(chǎn)物。在IOmg/天及大于IOmg/天的劑量條件下已觀察到第2階段的轉(zhuǎn)錄活性的標記物NQOl(NAD(P)H醌氧化還原酶)的顯著誘導(dǎo)作用。接受⑶DO-Me治療兩個周期之后，來自一些患者的腫瘤活組織檢查數(shù)據(jù)說明在腫瘤組織中環(huán)加氧酶-2(C0X-2)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)以及磷酸化STAT3(pSTAT3)的水平顯著降低。已知這些蛋白質(zhì)中的每一個的高水平的表達與腫瘤惡化和臨床結(jié)果不佳有關(guān)。一些患者體內(nèi)的腫瘤活組織檢查數(shù)據(jù)還顯示出用CDDO-Me治療兩個周期之后腫瘤細胞死亡的顯著程度。在這個研究中在第21天80%以上的患者體內(nèi)血清肌酸酐的水平與治療前基線水平相比明顯較低。一些持續(xù)治療多個周期的患者表現(xiàn)出血清肌酸酐的持續(xù)降低。因為血清肌酸酐是被廣泛使用的腎功能指示劑，這些觀察說明用CDDO-Me治療改善腎功能。這些研究所提供的人類癌癥患者體內(nèi)數(shù)據(jù)顯示出CDDO-甲基酯對于遭受癌癥的患者的有益效果。所述數(shù)據(jù)進一步說明在遭受包括腎功能障礙在內(nèi)的其他一些與炎癥有關(guān)的疾病的患者體內(nèi)CDDO-Me很可能具有臨床的有用效果。實施例Il-B型的大規(guī)模生產(chǎn)使用二甲醇溶劑化物中間體將1千克A型⑶DO-Me溶解于60士5°C的甲醇中以提供完整溶液。將所得的⑶DO-Me的熱溶液加入含有_5°C至_15°C的冷甲醇的容器中，同時維持攪拌并維持整個添加過程的溫度為_5°C至_15°C。過濾所得的結(jié)晶的⑶DO-Me的二甲醇溶劑化物的懸浮液。所得固體顯示出與圖26中描述的XRPD圖譜相一致的XRPD圖譜(TGIR分析之前)，在70士5°C的烘箱中干燥所得固體。持續(xù)干燥直到XRPD曲線不顯示無晶體物質(zhì)的反射特性。過篩并包裝所得XRPD無定形⑶DO-Me固體。產(chǎn)物收率的范圍為65%至95%。實施例12-低溫研磨A型和B型低溫研磨并分析A型。通過低溫研磨(2小時)獲得的樣品的測量χ-射線數(shù)據(jù)顯示出在2θ約為13.5°處的峰的一些加寬。低溫研磨A型的PDF分析產(chǎn)生的結(jié)果與B型分析類似。這些結(jié)果說明低溫研磨的A型是玻璃態(tài)材料并且該低溫研磨可提供用于生成B型可選的方法。低溫研磨并分析B型。通過低溫研磨(1小時)獲得的樣品的測量χ-射線數(shù)據(jù)與起始的B型材料類似。這些結(jié)果說明B型是穩(wěn)定的并且不因低溫研磨改變形態(tài)。表I-樣品信息<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>_a根據(jù)用于制備溶液的總?cè)軇﹣碛嬎闳芙舛纫驗樗褂玫娜軇┎糠值捏w積或溶解的速度慢，實際溶解度可能較大。溶解度四舍五入為最接近的mg/mL。表3-CDD0甲基酯的結(jié)晶實驗<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>_aFE=快速蒸發(fā)，SE=緩慢蒸發(fā)，SC=緩慢冷卻，溫度是近似的，F(xiàn)D=冷凍干燥，rotovap=旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)13單晶體結(jié)構(gòu)確定表4-CDD0甲基酯的泥漿實驗<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>_a所有的溫度為V，endo=吸熱13結(jié)果基于所拍攝的圖像表7-A型的應(yīng)力研究<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>表8-CDD0甲基酯B型的特性數(shù)據(jù)<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>表9-CDD0甲基酯B型的應(yīng)力研究<table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>_aRH=相對濕度，Tg=玻璃化轉(zhuǎn)變溫度b所測量的環(huán)境實驗室濕度為74%RHcmin=少量表IO-A型的晶體數(shù)據(jù)和數(shù)據(jù)采集參數(shù)<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>_aOtwinowskiZ.Minor,W.酶學(xué)方法，1997，276，307b晶體尺寸是近似的表11-研究的所有動物(η=8)體內(nèi)的血藥濃度(AUC)隨時間變化的曲線以下面積的總結(jié)⑶DO甲基酯劑型研究_母體化合物<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>N/A=無法確定表12-CDD0-甲基酯的結(jié)晶試驗<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>表13-⑶DO甲基酯的單側(cè)苯溶劑化物的特性<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>_aRE=旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，F(xiàn)E=快速蒸發(fā)表14-⑶DO-甲基酯二甲醇溶劑化物的特性<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>表15-微粉化的B型⑶DO甲基酯的應(yīng)力研究<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>_aRH=相對濕度b實際值為負表16-CDD0-Me單一藥劑抗癌活性<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>aKonopleva,etal.,"Synthetictriterpenoid2-cyano_3，12-dioxooleana-l,9-dien-28_oicacidinducesgrowtharrestinHER2_overexpressingbreastcancercells，”MolCancerTher.2006,5:317-28.bLing,etal.,"ThenoveltriterpenoidC_28methylesterof2-cyano_3,12-dioxoolen—l,9-dien-28_oicacidinhibitsmetastaticmurinebreasttumorgrowththroughinactivationofSTAT3signaling,，，CancerRes.2007,67:4210-8.表20-為噴霧干燥準備的溶液<table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table>在裝入聚合物之后溶液顯示出一些在裝入聚合物之后溶液完全透明。~渾濁性。樣品溶液加熱至35/4CTC，在同一天使用所準備的所述溶液觀察但渾濁性沒有消失并且觀察到一些完成兩種運行。絮凝。表21-測試劑型的特性<table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table>引用的出版物1．Sheldrick，G．M．SHELX97，APROGxAMFORCRYSTALSTRUCTRUEREFINEMENT，UniversityofGottingen,Germany(1997).2.Otwinowski,Ζ.；Minor,W.MethodsEnzymo1.1997,276,307.3.Bruker,XPREPinSHELXTLv.6.12.，BrukerAXSInc.，Madison,WI(2002)·4.Bruno,etal.，ActaCrystalIogr.2002，B58,3895.INxEENahonalTablesforCeystallogeaphy,Vol.C,Tables4.2.6.8and6.1.1.4,KluwerAcademicPublishers:Dordrecht,TheNetherlands(1992).6.Kraus,W.，andG.Nolze,PowdeecellfoeWindowsVersion2.3,FederalInstituteforMaterialsResearchandTesting,Berlin(1999).7.Johnson，C.K.0RTEPIII，IteportORNL-6895，OakRidgeNationalLaboratory,TN,U.S.A.1996.8.ffatkin,D.J.；Prout,C.K.；Pearce,L.J.Cameron,ChemicalCeystallogeaphyLaboeatoey,UniversityofOxford,Oxford,1996.9.0PTEP-3forWindowsVI.05.，F(xiàn)arrugia,L.J.，J.App1.Cryst.1997，30，565.10.Bore,etal.，ActaCryst.2002，C58,ol99_o200.11.Honda,etal.,Bioorganic&MedicinalChemistryLetters1997,7,1623.12.Honda,etal.，loc.cit，1998，8，2711—14.13.Honda,etal.，J.Med.Chem.2000，43，1866.14.Honda,etal.,loc.cit.,4233.15.Honda,etal.,Bioorganic&MedicinalChemistryLetters2002,12,1027.16.Zhou,etal.,J.PharmaceuticalSciences2002,91,1863.17.Cuietal.，Int，1J.Pharmaceutics,2007339,3-18.18.Repkaetal.,Hot-meltextrusiontechnologyIn:ENCL0PEDIAOFPHARMACEUTICALTECHNOLOGY,2nded(MarcelDekker，2002)，pages203-06.權(quán)利要求一種CDDO-甲基酯的玻璃態(tài)固體形態(tài)，所述CDDO甲基酯的玻璃態(tài)固體形態(tài)具有如圖2C所示的x-射線粉末衍射圖譜和Tg，所述x-射線粉末衍射圖譜在2θ大約為13.5°處具有暈峰。2.—種CDDO-甲基酯的二甲醇溶劑化物形態(tài)，所述CDDO-甲基酯的二甲醇溶劑化物形態(tài)具有如表18所示的特征峰的χ-射線粉末衍射圖譜和如圖24所示的DSC圖譜。3.—種固體劑型的藥物組合物，所述藥物組合物包括(i)治療有效量的權(quán)利要求1所述的CDDO-甲基酯的玻璃態(tài)固體形態(tài)和(ii)可食用的載體。4.一種權(quán)利要求1所述的CDDO-甲基酯的玻璃態(tài)固體形態(tài)的生產(chǎn)方法，所述方法包括(a)制備具有如表18所示的特征峰的χ-射線粉末衍射圖譜和如圖24所示的DSC圖譜的CDDO-甲基酯的二甲醇溶劑化物形態(tài)，以及(b)干燥所述二甲醇溶劑化物形態(tài)以獲得所述玻璃態(tài)固體形態(tài)。5.如權(quán)利要求1所述的CDDO-甲基酯的玻璃態(tài)固體形態(tài)，所述CDDO-甲基酯的玻璃態(tài)固體形態(tài)具有PDF光譜，所述光譜具有圖28的約5人至約20人的特征峰。6.一種治療方法，所述方法包括將有效量的權(quán)利要求3所述的藥物組合物給藥于遭受癌癥疾病的受體。7.如權(quán)利要求6所述的方法，所述方法進一步包括將另一種抗癌藥物給藥于所述受體。8.如權(quán)利要求7所述的方法，其中，所述另一種抗癌藥物是吉西他濱并且所述癌癥疾病是胰腺癌。9.如權(quán)利要求1所述的CDDO甲基酯的玻璃態(tài)固體形態(tài)，所述CDDO甲基酯的玻璃態(tài)固體形態(tài)的Tg值的范圍為約120°C至約135°C。10.如權(quán)利要求1所述的CDDO甲基酯的玻璃態(tài)固體形態(tài)，所述CDDO甲基酯的玻璃態(tài)固體形態(tài)的Tg值的范圍為約125°C至約130°C。11.一種藥物組合物，所述藥物組合物包括(i)治療有效量的CDDO-甲基酯和(ii)賦形劑，所述賦形劑是玻璃形成體，這樣所述組合物具有Tg。12.如權(quán)利要求11所述的藥物組合物，其中，所述賦形劑選自(A)碳水化合物、碳水化合物的衍生物或碳水化合物聚合物，(B)合成的有機聚合物，(C)有機酸鹽，(D)蛋白質(zhì)、多肽或肽，和(E)高分子量多糖。13.如權(quán)利要求12所述的藥物組合物，其中，所述賦形劑是合成的有機聚合物。14.如權(quán)利要求13所述的藥物組合物，其中，所述賦形劑選自羥丙基甲基纖維素、聚[1-(2_氧-1-吡咯烷酮基)乙烯]或它的共聚物以及甲基丙烯酸共聚物。15.如權(quán)利要求14所述的藥物組合物，其中，所述賦形劑是羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯。16.如權(quán)利要求14所述的藥物組合物，其中，所述賦形劑是PVP/VA。17.如權(quán)利要求14所述的藥物組合物，其中，所述賦形劑是甲基丙烯酸-丙烯酸乙酯共聚物(1:1)。18.如權(quán)利要求13所述的藥物組合物，其中，所述賦形劑是共聚維酮。全文摘要三萜系化合物，甲基2-氰基-3，12-二氧代齊墩果烷-1，9(11)-雙烯-28-酯(CDDO甲基酯)，其具有非晶體、玻璃態(tài)固體形態(tài)和例如從飽和甲醇溶液可制備的不含水的晶形。相對于所述不含水的晶形，所述玻璃態(tài)形態(tài)顯示出增強的生物利用度。CDDO甲基酯的每種形態(tài)(典型地為固體劑型)是用于治療各種疾病狀態(tài)(一般是與炎癥有關(guān)的疾病狀態(tài))較好的候選劑型。文檔編號A01N43/04GK101820758SQ200880111234公開日2010年9月1日申請日期2008年8月14日優(yōu)先權(quán)日2007年8月15日發(fā)明者大衛(wèi)·T·約奈蒂斯,斯蒂芬·D·帕倫特,約翰·沃琳,羅伯特·M·克拉爾申請人:瑞阿特制藥公司