本發(fā)明涉及一種鋅離子含量快速檢測(cè)的試劑盒，屬于重金屬快速檢測(cè)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

鋅是動(dòng)物和人類營(yíng)養(yǎng)中必需的微量元素，它與蛋白質(zhì)關(guān)系較為密切，經(jīng)常作為一種催化劑，結(jié)構(gòu)或調(diào)節(jié)因子而存在，參與了體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的代謝過程，并影響動(dòng)物的繁殖和免疫。在配合飼料中添加高鋅促生長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致畜禽體內(nèi)和糞便中的鋅含量顯著提高。研究表明，高劑量的鋅往往會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物中毒，并使動(dòng)物腸道內(nèi)增加一定比例抗痕量元素鋅的大腸桿菌，這些耐藥菌可以從動(dòng)物轉(zhuǎn)移到人。同時(shí)高鋅也會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物體腸道對(duì)鋅以及其它營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的生物利用度降低。高鋅的糞便進(jìn)入土壤后，長(zhǎng)期會(huì)影響土壤中的食物鏈和周圍的環(huán)境。歐盟2014年規(guī)定的限量標(biāo)準(zhǔn)：母豬、仔豬全價(jià)飼料中鋅含量不得超過150mg/kg，雞全價(jià)飼料中鋅含量不得超過140mg/kg。

現(xiàn)有的飼料和水中鋅檢測(cè)方法仍以原子吸收分光光度法、電感耦合等離子體-原子發(fā)射光譜法、電感耦合等離子體質(zhì)譜分析和原子熒光光譜分析等傳統(tǒng)方法為主。但是此類方法需要昂貴的大型儀器，復(fù)雜的樣品前處理過程，以及專業(yè)技術(shù)人員操作，無(wú)法在短時(shí)間內(nèi)對(duì)大量樣品進(jìn)行檢測(cè)，因此不適合于基層實(shí)驗(yàn)室中的推廣應(yīng)用。近年來，研究人員建立了多種快速檢測(cè)方法，包括電化學(xué)檢測(cè)、熒光測(cè)定法和比色檢測(cè)法等。電化學(xué)檢測(cè)法有著良好的靈敏度和選擇性，但是制備和修飾電極過于復(fù)雜，不適合與常規(guī)實(shí)驗(yàn)室推廣應(yīng)用。文獻(xiàn)報(bào)道的大部分熒光檢測(cè)法和比色法均易受基質(zhì)溶液和其它離子的干擾，僅限于在水樣中鋅離子的檢測(cè)。綜上，目前缺少一種可以用于復(fù)雜基質(zhì)如飼料、畜禽養(yǎng)殖廢棄物和污水中鋅離子高通量、快速檢測(cè)的方法。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種鋅離子含量快速檢測(cè)的試劑盒。

本發(fā)明提供的一種鋅離子含量快速檢測(cè)的試劑盒，其包括參數(shù)采集試劑、參數(shù)采集設(shè)備和可讀性載體；

所述參數(shù)采集試劑包括采集所述可讀性載體中涉及的各項(xiàng)參數(shù)的試劑；

所述參數(shù)采集設(shè)備包括采集所述可讀性載體中涉及的各項(xiàng)參數(shù)的設(shè)備；

所述可讀性載體上記載了如下測(cè)定鋅離子含量的步驟：

1)吸光值的檢測(cè)

標(biāo)準(zhǔn)曲線組：配制至少3種不同濃度的鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液，將所述鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液分別與5-br-paps工作液混合，測(cè)定混合后體系在552nm下的吸光值，記為a；

樣品組：將待測(cè)樣品溶液與空白溶液混合，測(cè)定混合后體系在552nm下的吸光值，記為a1；

將所述待測(cè)樣品溶液與所述5-br-paps工作液混合，測(cè)定混合后體系在552nm下的吸光值，記為a2；

所述5-br-paps工作液為5-br-paps溶液、檸檬酸鈉溶液、去鐵敏溶液和水楊醛肟溶液的混合液；

所述空白溶液為碳酸鹽緩沖溶液；

2)計(jì)算鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率

根據(jù)式ⅰ對(duì)吸光度值a進(jìn)行校正，得到校正吸光值，記為ac，

式ⅰ中，表示所述5-br-paps工作液的濃度，單位為μl/ml；vpaps、vzn分別表示步驟1)中加入的所述5-br-paps工作液和所述鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，單位為μl；βpaps為0.0026；

以所述校正吸光值為縱坐標(biāo)，以所述鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性擬合，得到所述鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液在552nm下的標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率，記為βzn；根據(jù)式ⅱ得到βzn-paps：

式ⅱ中，mpaps、mzn、mzn-paps分別表示5-br-paps、鋅和zn-paps復(fù)合物的相對(duì)分子質(zhì)量，單位為g/m；vpaps和vzn分別為加入的所述5-br-paps工作液和所述鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，單位為ml；βpaps為0.0026；

3)吸光度值a2與a1的差值記為δa，根據(jù)式ⅲ得到所述待測(cè)樣品溶液中鋅離子的濃度czn-sample，

式ⅲ中，βzn-paps為通過所述式ⅱ的測(cè)定值，mpaps、mzn、mzn-paps分別表示5-br-paps、鋅和zn-paps復(fù)合物的相對(duì)分子質(zhì)量，單位為g/m；vpaps和vzn分別為加入的所述5-br-paps工作液和所述鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，單位為ml，表示所述5-br-paps工作液的濃度，單位為μg/ml；βpaps為0.0026。

本發(fā)明中，所述5-br-paps的中文名稱為2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-[n-正丙基-n-(3-磺酸丙基)氨基]苯酚。

上述的試劑盒中，所述待測(cè)樣品溶液為待測(cè)樣品的三氯乙酸溶液的提取液；

所述待測(cè)樣品為飼料、畜禽養(yǎng)殖廢棄物、污水和飲用水中的至少一種；

當(dāng)所述待測(cè)樣品為固體樣本時(shí)，具體可為飼料和/或畜禽養(yǎng)殖廢棄物，所述待測(cè)樣品與所述三氯乙酸溶液的質(zhì)量體積比為1g：(50～200)ml；

當(dāng)所述待測(cè)樣品為液體樣本時(shí)，具體可為污水和/或飲用水，所述待測(cè)樣品與所述三氯乙酸溶液的體積比為1：0.2～10；

所述吸光值的檢測(cè)采用酶標(biāo)板和酶標(biāo)儀。

本發(fā)明中，三氯乙酸的英文簡(jiǎn)稱為tca；

所述畜禽養(yǎng)殖廢棄物為本領(lǐng)域公知的常識(shí)。

所述待測(cè)樣品經(jīng)過稀釋之后進(jìn)行測(cè)定，則根據(jù)以下公式計(jì)算待測(cè)樣品中鋅濃度：

式ⅸ中，ωzn表示待測(cè)樣品中鋅離子的含量；czn-sample表示待測(cè)樣品上清液中鋅離子的濃度，單位為μg/ml，vtca表示tca提取液的體積，單位為ml；m表示待測(cè)樣品的質(zhì)量，單位為μg。

上述的試劑盒中，所述5-br-paps工作液中5-br-paps溶液、檸檬酸鈉溶液、去鐵敏溶液和水楊醛肟溶液的濃度依次可為：0.5～1.0mm、0.85～1.00m、3200ppm和25～30mm；

所述待測(cè)樣品溶液與所述5-br-paps工作液的體積比可為1：5；

所述碳酸緩沖溶液的濃度可為0.2m；

所述待測(cè)樣品溶液與空白溶液的體積比可為1：5；

所述鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的質(zhì)量體積濃度可為0～8μg/ml，具體可為0、0.1、0.5、1、2、4、6、8μg/ml。

上述的試劑盒中，所述可讀性載體為試劑盒說明書；所述測(cè)定鋅離子含量的步驟的內(nèi)容印刷在卡片上；

所述可讀性載體為計(jì)算機(jī)可讀載體。

本發(fā)明還提供了一種測(cè)定鋅離子含量的方法，包括以下步驟：

1)吸光值的檢測(cè)：

標(biāo)準(zhǔn)曲線組：配制至少3種不同濃度的鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液，將所述鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液分別與5-br-paps工作液混合，測(cè)定混合后體系在552nm下的吸光值，記為a；

樣品組：將待測(cè)樣品溶液與空白溶液混合，測(cè)定混合后體系在552nm下的吸光值，記為a1；

將所述待測(cè)樣品溶液與所述5-br-paps工作液混合，測(cè)定混合后體系在552nm下的吸光值，記為a2；

所述5-br-paps工作液為5-br-paps溶液、檸檬酸鈉溶液、去鐵敏溶液和水楊醛肟溶液的混合液；

所述空白溶液為碳酸緩沖溶液；

2)計(jì)算鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率

根據(jù)式ⅰ對(duì)吸光度值a進(jìn)行校正，得到校正吸光值，記為ac，

式ⅰ中，表示所述5-br-paps工作液的濃度，單位為μl/ml；vpaps、vznn分別表示步驟1)中加入的所述5-br-paps工作液和所述鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，單位為μl；βpaps為0.0026；

以所述校正吸光值為縱坐標(biāo)，以所述鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性擬合，得到所述鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液在552nm下的標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率，記為βzn；根據(jù)式ⅱ得到βzn-paps，

式ⅱ中，mpaps、mzn、mzn-paps分別表示5-br-paps、鋅和zn-paps復(fù)合物的相對(duì)分子質(zhì)量，單位為g/m；vpaps和vzn分別為加入的所述5-br-paps工作液和所述鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，單位為ml；βpaps為0.0026；

3)吸光度值a2與a1的差值記為δa，根據(jù)式ⅲ得到所述待測(cè)樣品溶液中鋅離子的濃度czn-sample，

式ⅲ中，βzn-paps為通過所述式ⅱ的測(cè)定值，mpaps、mzn、mzn-paps分別表示5-br-paps、鋅和zn-paps復(fù)合物的相對(duì)分子質(zhì)量，單位為g/m；vpaps和vzn分別為加入的所述5-br-paps工作液和所述鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，單位為ml；表示所述5-br-paps工作液的濃度，單位為μg/ml；βpaps為0.0026。

本發(fā)明所述方法中，所述待測(cè)樣品中鋅離子快速測(cè)定計(jì)算表被提供，在excel表格中已經(jīng)輸入相應(yīng)公式；先輸入不同濃度的鋅標(biāo)準(zhǔn)液的吸光值，會(huì)自動(dòng)生成鋅標(biāo)準(zhǔn)曲線圖并計(jì)算出校正后的βzn和βzn-paps，最后輸入待測(cè)樣品的吸光度值和背景值，即可得到所述待測(cè)樣品中鋅離子的濃度。

上述的方法中，步驟1)中，所述待測(cè)樣品溶液為待測(cè)樣品的三氯乙酸溶液的提取液；

所述待測(cè)樣品為飼料、糞便、污水和飲用水中的至少一種；

當(dāng)所述待測(cè)樣品為固體樣本時(shí)，具體可為飼料和/或畜禽養(yǎng)殖廢棄物，所述待測(cè)樣品與所述三氯乙酸溶液的質(zhì)量體積比為1g：(50～200)ml；

當(dāng)所述待測(cè)樣品為液體樣本時(shí)，具體可為污水和/或飲用水，所述待測(cè)樣品與所述三氯乙酸溶液的體積比為1：0.2～10；

所述吸光值的檢測(cè)采用酶標(biāo)板和酶標(biāo)儀。

上述的方法中，所述5-br-paps工作液中5-br-paps溶液、檸檬酸鈉溶液、去鐵敏溶液和水楊醛肟溶液的濃度依次可為：0.5～1.0mm、0.85～1.00m、3200ppm和25～30mm；

所述待測(cè)樣品溶液與所述5-br-paps工作液的體積比可為1：5；

所述碳酸緩沖溶液的濃度可為0.2m；

所述待測(cè)樣品溶液與空白溶液的體積比可為1：5；

所述鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的質(zhì)量體積濃度可為0～8μg/ml，具體可為0、0.1、0.5、1、2、4、6、8μg/ml。

本發(fā)明進(jìn)一步提供了參數(shù)采集試劑、參數(shù)采集設(shè)備和可讀性載體在制備測(cè)定鋅離子含量的試劑盒中的應(yīng)用，其中，所述參數(shù)采集試劑包括采集所述可讀性載體中涉及的各項(xiàng)參數(shù)的試劑；

所述參數(shù)采集設(shè)備包括采集所述可讀性載體中涉及的各項(xiàng)參數(shù)的設(shè)備；

所述可讀性載體上記載了如下測(cè)定鋅離子含量的步驟：

1)吸光值的檢測(cè)：

標(biāo)準(zhǔn)曲線組：配制至少3種不同濃度的鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液，將所述鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液分別與5-br-paps工作液混合，測(cè)定混合后體系在552nm下的吸光值，記為a；

樣品組：將待測(cè)樣品溶液與空白溶液混合，測(cè)定混合后體系在552nm下的吸光值，記為a1；

將所述待測(cè)樣品溶液與所述5-br-paps工作液混合，測(cè)定混合后體系在552nm下的吸光值，記為a2；

所述5-br-paps工作液為5-br-paps溶液、檸檬酸鈉溶液、去鐵敏溶液和水楊醛肟溶液的混合液；

所述空白溶液為碳酸緩沖溶液；

2)計(jì)算鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率

根據(jù)式ⅰ對(duì)吸光度值a進(jìn)行校正，得到校正吸光值，記為ac，

式ⅰ中，表示所述5-br-paps工作液的濃度，單位為μl/ml；vpaps、vzu分別表示步驟1)中加入的所述5-br-paps工作液和所述鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，單位為μl；βpaps為0.0026；

以所述校正吸光值為縱坐標(biāo)，以所述鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性擬合，得到所述鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液在552nm下的標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率，記為βzu；根據(jù)式ⅱ得到βzu-paps，

式ⅱ中，mpaps、mzu、mzu-paps分別表示5-br-paps、鋅和zu與5-br-paps復(fù)合物的相對(duì)分子質(zhì)量，單位為g/m；vpaps和vzu分別為加入的所述5-br-paps工作液和所述鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，單位為ml；βpaps為0.0026；

3)吸光度值a2與a1的差值記為δa，根據(jù)式ⅲ得到所述待測(cè)樣品溶液中鋅離子的濃度czu-sample，

式ⅲ中，βzu-paps為通過所述式ⅱ的測(cè)定值，mpaps、mzu、mzu-paps分別表示5-br-paps、鋅和zu與5-br-paps復(fù)合物的相對(duì)分子質(zhì)量，單位為g/m；vpaps和vzu分別為加入的所述5-br-paps工作液和所述鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，單位為ml，表示所述5-br-paps工作液的濃度，單位為μg/ml；βpaps為0.0026。

上述的應(yīng)用中，所述可讀性載體上：所述待測(cè)樣品溶液為待測(cè)樣品的三氯乙酸溶液的提取液；

所述待測(cè)樣品為飼料、畜禽養(yǎng)殖廢棄物、污水和飲用水中的至少一種；

當(dāng)所述待測(cè)樣品為固體樣本，具體可為飼料和/或畜禽養(yǎng)殖廢棄物，所述待測(cè)樣品與所述三氯乙酸溶液的質(zhì)量體積比為1g：(50～200)ml；

當(dāng)所述待測(cè)樣品為液體樣本時(shí)，具體可為污水和/或飲用水，所述待測(cè)樣品與所述三氯乙酸溶液的體積比為1：0.2～10；

所述吸光值的檢測(cè)采用酶標(biāo)板和酶標(biāo)儀。

上述的應(yīng)用中，所述5-br-paps工作液中5-br-paps溶液、檸檬酸鈉溶液、去鐵敏溶液和水楊醛肟溶液的濃度依次可為：0.5～1.0mm、0.85～1.00m、3200ppm和25～30mm；

所述待測(cè)樣品溶液與所述5-br-paps工作液的體積比可為1：5；

所述碳酸緩沖溶液的濃度可為0.2m；

所述待測(cè)樣品溶液與空白溶液的體積比可為1：5；

所述鋅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的質(zhì)量體積濃度可為0～8μg/ml，具體可為0、0.1、0.5、1、2、4、6、8μg/ml。

本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)：

1)本發(fā)明充分利用了統(tǒng)計(jì)學(xué)剖分方法，加大了檢測(cè)的準(zhǔn)確性。

2)本發(fā)明檢測(cè)方法無(wú)需復(fù)雜的樣品前處理和貴重儀器。

3)本發(fā)明檢測(cè)方法既可用于簡(jiǎn)單水樣，也適用于復(fù)雜基質(zhì)如動(dòng)物飼料，基本消除了其他成分對(duì)檢測(cè)的干擾。

4)本發(fā)明檢測(cè)方法成本低，抗干擾能力強(qiáng)，檢測(cè)限低，既可用酶標(biāo)儀進(jìn)行定量檢測(cè)，也可以用肉眼觀察，比較鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)生的顏色，對(duì)鋅離子濃度進(jìn)行半定量檢測(cè)。

5)本發(fā)明采用采用酶標(biāo)板作為載體，可一次對(duì)大批量樣品進(jìn)行檢測(cè)。

附圖說明

圖1校正后的鋅檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖2其它重金屬離子對(duì)本發(fā)明試劑盒測(cè)定鋅的干擾試驗(yàn)

圖3本試劑盒測(cè)定與傳統(tǒng)的原子吸收光譜法測(cè)定的對(duì)比試驗(yàn)結(jié)果

具體實(shí)施方式

下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無(wú)特殊說明，均為常規(guī)方法。

下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無(wú)特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。

實(shí)施例1、

1)參數(shù)采集試劑組成：

a液：三氯乙酸溶液，配制方法：三氯乙酸固體溶于純水中，濃度為1g/100ml(1％,w/v)。

b液：5-br-paps溶液。配制方法：稱取適量的5-br-paps、無(wú)水碳酸鈉、碳酸氫鈉、檸檬酸鈉、去鐵敏固體，溶于純水中，終濃度分別為5g/100ml(5％，w/v)、2g/100ml(2％,w/v)、2g/100ml(2％,w/v)、10g/100ml(10％,w/v)、3.2g/100ml(3.2％，w/v)

c液：水楊醛肟溶液。配制方法：取水楊醛肟溶于水溶液中，濃度為1.25g/100ml(1.25％，w/v)

d液：5-br-paps工作溶液，將b液與c溶液以4：1(v/v)比例混合，現(xiàn)配現(xiàn)用。

e液：空白5-br-paps工作液，配制方法：將不含5-br-paps的b液與c液以4：1(v/v)比例混合。

f液：鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液0、0.1、0.5、1、2、4、6、8μg/ml，分別記為f1-f8標(biāo)準(zhǔn)液。

2)樣品前處理：

飼料樣品(配合飼料、濃縮飼料或預(yù)混料)：樣品與a液(三氯乙酸溶液)混合，比例為1g：(50～200)ml，振蕩3分鐘，定量濾紙過濾或10000rpm離心10分鐘，取上清液。

3)檢測(cè)：

標(biāo)準(zhǔn)曲線組：酶標(biāo)板孔中每孔加入40μl不同濃度的鋅標(biāo)準(zhǔn)液(f1-f8液)，隨后每孔加入200μl5-br-paps工作液。

樣品組：每個(gè)樣品測(cè)定需四個(gè)酶標(biāo)板孔：兩個(gè)背景孔和兩個(gè)樣品孔。背景孔中加入40μl樣品上清液和200μlb液(空白溶液)；樣品孔中加入40μl樣品上清液和200μla液(5-br-paps工作溶液)，均做兩個(gè)平行。

所有酶標(biāo)板孔于室溫(25℃)反應(yīng)30分鐘后，置于酶標(biāo)儀讀數(shù)，檢測(cè)波長(zhǎng)為552nm。

4)濃度計(jì)算：

原理：①計(jì)算βzn的值：根據(jù)3)中的操作步驟，測(cè)定552nm下各濃度鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)生的吸光值a，根據(jù)下式對(duì)吸光值進(jìn)行校正，獲得校正吸光值ac：

其中，為paps在工作液中的濃度，v為各溶液體積。

以校正吸光值ac為縱坐標(biāo)，以鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性擬合，獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率，設(shè)為βzn。

②然后通過以下公式計(jì)算βzn-paps:

③記錄樣品中背景孔和樣品孔的吸光值，分別記錄為a1和a2，計(jì)算δa＝a2—a1，將

δa值代入如下公式中，即可得到樣品溶液中鋅離子濃度。

式中，czn-sample為鋅離子濃度(μg/ml)；v為各溶液的體積；m為相對(duì)分子質(zhì)量(g/m)，βpaps為paps標(biāo)準(zhǔn)溶液在552nm下測(cè)定獲得的標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率，為0.0026，已預(yù)先測(cè)定，由本試劑盒提供。

校正的標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖1所示，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y＝0.2173x+0.056，其中βzn＝0.2173。

最低檢測(cè)線(lod)可根據(jù)公式計(jì)算：

其中s代表空白標(biāo)準(zhǔn)溶液的測(cè)定偏差，a代表標(biāo)準(zhǔn)曲線的截距值，k代表標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率。經(jīng)計(jì)算，本方法的最低檢測(cè)限為0.038μg/ml。

根據(jù)以下公式計(jì)算樣品中鋅濃度：

其中，ωzn是樣品中鋅含量，czn-sample樣品上清液中鋅濃度，vtca是tca提取液的體積，m是樣品質(zhì)量。

實(shí)施例2、添加回收試驗(yàn)

取飲用水、豬配合飼料、雞配合飼料、寵物飼料，采用原子吸收法測(cè)定各樣品中鋅的含量。隨后往各樣本中添加高濃度的鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液，至飼料中添加濃度為0、50、100、200、500mg/kg，血清和水中添加濃度0、0.5、1.0、2.0、5.0μg/ml，每個(gè)濃度4個(gè)平行。采用本試劑盒進(jìn)行測(cè)定。將測(cè)定值除以添加值計(jì)算回收率，同時(shí)計(jì)算4個(gè)平行測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。結(jié)果如表1所示。由表1中結(jié)果表明：在添加的濃度范圍內(nèi)，平均回收率在98.69％—123.58％之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于16％。

表1本試劑盒測(cè)定動(dòng)物飼料、寵物飼料和飲用水中鋅含量的添加回收試驗(yàn)結(jié)果

實(shí)施例3、其它重金屬離子的干擾試驗(yàn)

在飼料中常量元素，微量元素及可能還有的有害元素對(duì)本試劑盒方法造成的偏差分析試驗(yàn)。首先測(cè)定4μg/mlzn²⁺標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)生的吸收值，計(jì)為ab，然后在4μg/mlzn²⁺標(biāo)準(zhǔn)溶液中分別添加1-1000μg/ml的fe³⁺，fe²⁺,zn²⁺,mg²⁺,mn²⁺，和1-10000μg/ml的ca²⁺和f^-，每種溶液反應(yīng)產(chǎn)生的吸光值，計(jì)為at，以at和ab值按下列公示計(jì)算干擾率(i.p.)：

結(jié)果如圖2所示，產(chǎn)生5％干擾率的離子濃度分別為15、100、100、40、1000和>1000μg/ml的fe²⁺、fe³⁺、cn²⁺、mg²⁺、mn²⁺、ca²⁺和f^-，說明本試劑盒測(cè)定鋅的特異性和選擇性較好。

實(shí)施例4、實(shí)際樣本測(cè)定(與原子吸收光譜測(cè)定法的比較)

采用本發(fā)明試劑盒方法測(cè)定采集的豬、雞配合飼料78個(gè)，測(cè)定結(jié)果與傳統(tǒng)的原子吸收光譜法比較并進(jìn)行線性回歸分析。結(jié)果如圖3，表2所示。結(jié)果表明：本發(fā)明試劑盒測(cè)定結(jié)果與原子吸收法測(cè)定結(jié)果基本一致，相關(guān)性大于0.99。說明本發(fā)明試劑盒可用于實(shí)際樣品的檢測(cè)。

表2原子吸收光譜法與試劑盒檢測(cè)結(jié)果比較