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一種定量檢測(cè)土壤中磺酰脲類除草劑痕量殘留的方法

文檔序號(hào):6026981閱讀:907來源:國知局
專利名稱:一種定量檢測(cè)土壤中磺酰脲類除草劑痕量殘留的方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及一種土壤中磺酰脲類除草劑痕量殘留檢測(cè)方法,特別涉及一種定量檢測(cè)土壤中磺酰脲類除草劑痕量殘留的方法。背景技術(shù)
隨著農(nóng)業(yè)技術(shù)的現(xiàn)代化以及生產(chǎn)力的解放,化學(xué)除草劑已成為控制農(nóng)田雜草危害的主要手段。自上世紀(jì)80年代杜邦公司推出第一個(gè)超高效磺酰脲類除草劑(綠磺隆)以來,磺酰脲類除草劑已成為當(dāng)今世界農(nóng)田雜草防治的重要除草劑,在我國亦被廣泛應(yīng)用,如在江蘇無錫有31%的稻田使用苯磺隆+甲磺隆混劑防治雜草。這類除草劑用量特別低,每公頃的施用量只需2 75g活性成分;而且選擇性強(qiáng),對(duì)不同作物的敏感性差異很大,其微量殘留即可對(duì)后茬敏感作物產(chǎn)生藥害。如綠磺隆在土壤中的殘留期較長(zhǎng),已危及非靶標(biāo)植物,在我國旱作地區(qū)后茬為玉米、大豆、棉花的麥田已被禁用。在麥稻連作區(qū),因使用不當(dāng)亦會(huì)發(fā)生對(duì)水稻的藥害,1995年沈陽曾發(fā)生綠磺隆危害水稻的重大事故,造成533. 4hm2稻田受害,其中267hm2絕收;1992年河北省使用甲磺隆后的麥田,給后茬玉米造成大面積藥害; 1994年在江蘇省油菜田施用胺苯磺隆,使后茬水稻發(fā)生大面積藥害。在我國有不少磺酰脲類除草劑對(duì)后茬敏感作物產(chǎn)生藥害事件的報(bào)道,國外也有類似報(bào)道。鑒于此,美國、歐盟、日本等發(fā)達(dá)國家或地區(qū),相繼對(duì)進(jìn)口農(nóng)產(chǎn)品中除草劑殘留制定了最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)(MRLs)。 美國規(guī)定,自2007年2月起,稻米產(chǎn)品中的磺酰脲類除草劑殘留限量為0. 05mg/kg。
日本的肯定列表規(guī)定青花菜的氟啶嘧磺隆、啶嘧磺隆、四唑嘧磺隆、芐嘧磺隆的 MRL均為0. 02mg/kg。歐盟規(guī)定荔枝中甲酰胺磺隆和啶嘧磺隆為0. 01mg/kgo因此,探討磺酰脲類除草劑殘留的分析測(cè)定方法對(duì)控制磺酰脲類除草劑殘留藥害具有重要意義。
目前,測(cè)定磺酰脲類除草劑在水及土壤中的殘留主要有高效液相色譜法(HPLC)、 氣相色譜法(GC)、色質(zhì)聯(lián)譜法(LC/MQ、酶聯(lián)免疫法和生物測(cè)定法等,目前這些檢測(cè)方法, 其檢測(cè)限一般在mg/kg μ g/kg間。
然而,由于磺酰脲類除草劑用量低,其相應(yīng)的殘留濃度低而這種低殘留濃度特性給土壤、水體、作物中這類化合物的分析測(cè)定就造成一定的困難。因此,尋找磺酰脲類化合物高靈敏度檢測(cè)方法的研究已成為相關(guān)研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一。
毛細(xì)管電泳技術(shù)誕生以來,研究工作異常活躍,特別是進(jìn)十來年,有大量有關(guān)毛細(xì)管電泳技術(shù)應(yīng)用的報(bào)道。毛細(xì)管電泳技術(shù)已廣泛應(yīng)用于單分子檢測(cè)、DNA、蛋白質(zhì)、藥物分析等方面,且靈敏度較高。但有關(guān)毛細(xì)管電泳技術(shù)應(yīng)用于磺酰脲類除草劑殘留檢測(cè)報(bào)道很少。
本發(fā)明根據(jù)毛細(xì)管電泳技術(shù)靈敏度高的優(yōu)點(diǎn),與提取濃縮和定量補(bǔ)償待測(cè)磺酰脲類除草劑相結(jié)合,建立了一種同時(shí)定量檢測(cè)土壤中多種磺酰脲類除草劑痕量(10_3μ g/kg 級(jí))殘留檢測(cè)的毛細(xì)管電泳分析方法,獲得了滿意的結(jié)果。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是提供一種同時(shí)定量檢測(cè)土壤中多種磺酰脲類除草劑痕量(10_3μ g/kg級(jí))殘留檢測(cè)的毛細(xì)管電泳分析方法。
本發(fā)明采用的技術(shù)方案是
一種定量檢測(cè)土壤中磺酰脲類除草劑痕量殘留的方法,所述方法為將待測(cè)土樣加入pH7. 8的0. lmol/L碳酸氫鈉水溶液中,振蕩lh,12000r/min離心5min,得沉淀和一次上清液,取一次上清液用0. IM鹽酸水溶液調(diào)pH至2. 5后,裝入預(yù)處理后的C18柱,再用二氯甲烷淋洗,收集淋出液,淋出液濃縮至干,濃縮物用體積濃度60%甲醇水溶液溶解,獲得溶解液,將溶解液中補(bǔ)加混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,再加入體積濃度60%甲醇水溶液定容制成混合液, 使混合液中補(bǔ)加的標(biāo)準(zhǔn)甲磺隆、標(biāo)準(zhǔn)綠磺隆及標(biāo)準(zhǔn)氯嘧磺隆終濃度均為5mg/L,獲得待測(cè)樣品,待測(cè)樣品用毛細(xì)管電泳儀進(jìn)行測(cè)試;根據(jù)甲磺隆、綠磺隆及氯嘧磺隆標(biāo)準(zhǔn)曲線,獲得待測(cè)樣品中甲磺隆、綠磺隆或氯嘧磺隆的含量,再根據(jù)公式(1)計(jì)算等測(cè)土樣中甲磺隆、綠磺隆或氯嘧磺隆的含量;所述混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液為標(biāo)準(zhǔn)甲磺隆、標(biāo)準(zhǔn)綠磺隆和標(biāo)準(zhǔn)氯嘧磺隆終濃度均為100mg/L的混合溶液。
土壤中甲磺隆、綠磺隆及氯嘧磺隆濃度的含量根據(jù)公式(1)計(jì)算土壤甲嘧磺隆、玉嘧磺隆或氯磺隆的量(mg/kg)= (P-S)X&公式(ι)m
公式(1)中P -根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算獲得待測(cè)液中甲磺隆、綠磺隆及氯嘧磺隆的濃度(mg/L);
V1——定容體積(mL);
m——烘干土的質(zhì)量(g);
所述毛細(xì)管電泳儀測(cè)試條件為毛細(xì)管電泳儀采用UV檢測(cè)器,內(nèi)徑75 μ m、有效柱長(zhǎng)50cm的石英毛細(xì)管,毛細(xì)管電泳儀每次開機(jī)時(shí),先用0. lmol/L鹽酸沖洗柱子,然后依次用0. lmol/L氫氧化鈉、去離子水、緩沖液分別沖洗毛細(xì)管柱10min、5min和20min。每次進(jìn)樣前用緩沖液沖洗毛細(xì)管柱anin ;結(jié)束分析時(shí)用0. lmol/L氫氧化鈉沖洗毛細(xì)管柱lOmin,再用去離子水沖洗5min,檢測(cè)波長(zhǎng)214nm、分離電壓25kV、溫度35°C、進(jìn)樣38001^X10秒, 進(jìn)樣量IOyL0
所述緩沖溶液為pH5. 0冰醋酸-醋酸銨緩沖溶液,所述緩沖溶液由終濃度如下的原料組成50mmol/L冰醋酸、50mmol/L醋酸銨、80mmol/L SDS,體積濃度14%甲醇,體積濃度20%異丙醇。
進(jìn)一步,所述方法為將等測(cè)土樣加入pH7. 8的0. lmol/L碳酸氫鈉水溶液中,振蕩 lh, 12000r/min離心5min,得沉淀和一次上清液,所述沉淀再用pH7. 8的0. lmol/L碳酸氫鈉水溶液重復(fù)振蕩提取lh,離心,重復(fù)2次,將2次重復(fù)提取的上清液并入所述的一次上清液,取合并的總上清液用0. IM鹽酸水溶液調(diào)pH至2. 5后裝入預(yù)處理后的C18柱,再用二氯甲烷淋洗,收集淋出液,淋出液濃縮至干,濃縮物用體積濃度60%甲醇水溶液溶解,獲得溶解液,將溶解液中補(bǔ)加混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,再加入體積濃度60%甲醇水溶液定容制成混合液, 使混合液中補(bǔ)加的標(biāo)準(zhǔn)甲磺隆、標(biāo)準(zhǔn)綠磺隆及標(biāo)準(zhǔn)氯嘧磺隆終濃度均為5mg/L,獲得待測(cè)樣品,待測(cè)樣品用毛細(xì)管電泳儀進(jìn)行測(cè)試;根據(jù)甲磺隆、綠磺隆及氯嘧磺隆標(biāo)準(zhǔn)曲線,獲得待測(cè)樣品中甲磺隆、綠磺隆或氯嘧磺隆的含量,再根據(jù)公式(1)計(jì)算等測(cè)土樣中甲磺隆、綠磺隆或氯嘧磺隆的含量;所述混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液為標(biāo)準(zhǔn)甲磺隆、標(biāo)準(zhǔn)綠磺隆和標(biāo)準(zhǔn)氯嘧磺隆終濃度均為100mg/L的混合溶液;所述C18柱預(yù)處理為依次用甲醇和重蒸水淋洗C18柱,棄去
與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在本發(fā)明方法檢測(cè)靈敏度高,檢測(cè)限達(dá)到10_3 μ g/kg級(jí),高于高效液相色譜等其他現(xiàn)有方法的檢測(cè)限值(不超過μ g/kg)。

圖1標(biāo)準(zhǔn)曲線A為峰面積與甲磺隆濃度線性標(biāo)準(zhǔn)曲線、B為峰面積與氯嘧磺隆線性標(biāo)準(zhǔn)曲線、C為峰面積與綠磺隆濃度線性標(biāo)準(zhǔn)曲線
圖2不同樣品中甲磺隆、氯嘧磺隆和綠磺隆的毛細(xì)血管電泳分離圖譜,其中a是未加磺酰脲除草劑土壤樣品(組a) ;b是加10 X 10_3 μ g/kg磺酰脲除草劑土壤樣品(組b); c是加IOX 10_3μ g/kg磺酰脲除草劑土壤樣品中補(bǔ)加5mg/L磺酰脲除草劑的試樣(組c), b和c中1為甲磺隆吸收峰,2為氯嘧磺隆吸收峰,3為綠磺隆吸收峰。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步描述,但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不僅限于此
1、藥劑及材料
甲磺隆、綠磺隆、氯嘧磺隆標(biāo)準(zhǔn)品(美國Chemical Service公司)。
甲醇,異丙醇(色譜純級(jí));醋酸銨,冰醋酸,鹽酸,碳酸氫鈉,氫氧化鈉十二烷基磺酸鈉(SDS)(分析純級(jí));C18柱。
2、主要儀器
毛細(xì)管電泳儀(BeckmanP/ACE System 5000),pH 計(jì)。
3、溶液配制及檢測(cè)條件
(1)溶液配制
①磺隆、綠磺隆及氯嘧磺隆混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液精確稱量甲磺隆、綠磺隆及氯嘧磺隆各IOmg混溶于IOOmL甲醇-水(60 40 ;ν/ν)混合溶劑中,得甲磺隆、綠磺隆及氯嘧磺隆濃度分別為100mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,于冰箱中4°C避光保存。
②緩沖液稱取3g冰醋酸和3. 65g醋酸銨溶解到一定量水中,移入IL的容量瓶中, 同時(shí)在該容量瓶中加入27. 6g SDS、140mL甲醇和200mL異丙醇,用蒸餾水定容,調(diào)節(jié)pH至 5. 0,獲得冰醋酸-醋酸銨緩沖液,即冰醋酸50_01/1、醋酸銨50_01/1、30380_01/1,14% 甲醇(ν/ν),20%異丙醇(ν/ν) 0
③0. lmol/L鹽酸和0. lmol/L氫氧化鈉溶液移取9mL分析純濃鹽酸至L的容量瓶中,用蒸餾水定容,獲得0. lmol/L鹽酸;稱取4g氫氧化鈉溶解到一定量水中,移入IL的容量瓶中,用蒸餾水定容,獲得0. lmol/L氫氧化鈉溶液。
④0. lmol/L碳酸氫鈉(pH7. 8)溶液稱取8. 4g碳酸氫鈉溶解到一定量水中,移入 IL的容量瓶中,用蒸餾水定容,調(diào)節(jié)pH至7.8,獲得0. lmol/L碳酸氫鈉(pH7. 8)溶液。
⑤體積濃度60%的甲醇水溶液即甲醇-水(60 40 ;ν/ν)溶液于IL的容量瓶中,加入600mL甲醇和400mL水,即獲得甲醇-水(60 40 ;ν/ν)溶液。
(2)檢測(cè)條件
毛細(xì)管電泳儀采用配件為UV檢測(cè)器,內(nèi)徑75 μ m、有效柱長(zhǎng)50cm的石英毛細(xì)管。毛5細(xì)管電泳儀每次開機(jī)時(shí),先用0. lmol/L鹽酸沖洗柱子,然后依次用0. lmol/L氫氧化鈉、去離子水、緩沖液分別沖洗毛細(xì)管柱10min、5min和20min。每次進(jìn)樣前用緩沖液沖洗毛細(xì)管柱aiiin ;結(jié)束分析時(shí)用0. lmol/L氫氧化鈉沖洗毛細(xì)管柱lOmin,再用去離子水沖洗5min。 檢測(cè)波長(zhǎng)214nm、分離電壓25kV、溫度35°C、進(jìn)樣3800PaX 10秒,進(jìn)樣量IOyL0
實(shí)施例1標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
分別移取25,50,100,200,300,400和500 μ L的100mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液至7個(gè) 5mL容量瓶中,用甲醇-水(60 40 ;v/v)混合溶劑定容,獲得甲磺隆、綠磺隆及氯嘧磺隆濃度均分別為0. 5,1. 0,2. 0,4. 0,6. 0,8. 0和10mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,采用上述檢測(cè)條件進(jìn)行毛細(xì)管電泳檢測(cè)。采用峰面積與甲磺隆、綠磺隆及氯嘧磺隆各自的濃度繪制工作標(biāo)準(zhǔn)曲線,工作標(biāo)準(zhǔn)曲線用于甲磺隆、綠磺隆及氯嘧磺隆殘留定量計(jì)算,結(jié)果見圖1。
實(shí)施例2待測(cè)土壤樣測(cè)定
稱取IOOg烘干土重的土樣于500mL三角瓶中,加入200mL 0. lmol/L碳酸氫鈉 (pH7. 8)水溶液,用橡皮塞蓋好振蕩lh,于12000r/min離心5min。獲取上清液,提取殘?jiān)儆孟嗤妓釟溻c溶液提取兩遍,將所得上清液合并。合并后的上清液用0. IM鹽酸溶液調(diào)pH 至2. 5,并裝入C18柱(C18柱先通過用IOmL甲醇活化及IOmL重蒸水鈍化,棄去淋出液),再用IOmL 二氯甲烷淋洗C18柱,收集淋出液,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮至干,濃縮物用ImL甲醇-水 (60 40 ;ν/ν)混合溶劑溶解,轉(zhuǎn)入5mL容量瓶中,并于容量瓶中補(bǔ)加25 μ L的100mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,用甲醇-水(60 40 ;v/v)混合溶劑定容使容量瓶中補(bǔ)加的甲磺隆、綠磺隆和氯嘧磺隆終濃度均為5mg/L,定容后用毛細(xì)管電泳測(cè)試,測(cè)試方法同上,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算甲磺隆、綠磺隆及氯嘧磺隆濃度,根據(jù)公式(1)計(jì)算土壤中甲磺隆、綠磺隆及氯嘧磺隆殘留濃度。
土壤中甲磺隆、綠磺隆及氯嘧磺隆濃度的含量根據(jù)公式(1)計(jì)算土壤甲嘧磺隆、玉嘧磺隆或氯磺隆的量(mg/kg)= {ρ-5)χ&公式(1)m
公式(1)中P-標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算獲得待測(cè)液中甲磺隆、綠磺隆及氯嘧磺隆的濃度 (mg/L);
V1——定容體積(mL);
m——烘干土的質(zhì)量(g);
實(shí)施例3稻田土壤樣品中痕量甲磺隆、綠磺隆及氯嘧磺隆的測(cè)定
(1) 土壤用于檢測(cè)的土壤樣品采自浙江省杭州市郊區(qū)的稻田。該土樣未被施用過磺酰脲類除草劑,土壤質(zhì)地是沙壤土,粘粒含量18.0%,粉粒含量55.2%,沙粒含量 26. 8%, pH4. 74,有機(jī)質(zhì)含量 1. 82%。
(2) lmg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液
分別精確稱量甲磺隆、綠磺隆、氯嘧磺隆各Img混溶于IL重蒸水中,獲得含甲磺隆、綠磺隆、氯嘧磺隆濃度分別為lmg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。
(3)檢測(cè)靈敏度
實(shí)驗(yàn)分成3組,組a、組b和組c,其中組a為對(duì)照組,不添加lmg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,組b和組c為實(shí)驗(yàn)組,分別添加lmg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液制成含甲磺隆、綠磺隆、氯嘧磺隆濃度均分別為10X 10_3 μ g/kg的土樣,同時(shí)組c的提取液經(jīng)C18柱洗脫后的淋出液中補(bǔ)加lmg/L混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,使補(bǔ)加的甲磺隆、綠磺隆、氯嘧磺隆終濃度均為5 μ g/L。
分別稱取3份500g(烘干土計(jì))土樣于3個(gè)燒杯中,分別為組a、組b和組c,于組a、組b和組c中分別加入0、5、5mL的lmg/L混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,充分混勻,組a獲得含甲磺隆、綠磺隆、氯嘧磺隆均為0 μ g/kg,組b和組c獲得含甲磺隆、綠磺隆、氯嘧磺隆均為 10 X 10_3 μ g/kg。將3組土樣過Imm篩,于_20°C冷凍儲(chǔ)存。分別稱取IOOg冷凍土樣(組a)、 200g冷凍土樣(組b和組c),于3個(gè)500mL三角瓶中,組a 組c分別加入200mL 0. Imo 1/ L碳酸氫鈉溶液,用橡皮塞蓋好振蕩lh,于12000r/min離心5min,獲取上清液,提取殘?jiān)儆?. lmol/L碳酸氫鈉溶液提取兩遍,將各組所得上清液分別合并,分別合并后的上清液用 0. lmol/L鹽酸溶液調(diào)pH至2. 5,分別裝入C18柱(C18柱通過用IOmL甲醇活化及IOmL重蒸水鈍化,棄去淋出液),再分別用IOmL 二氯甲烷淋洗C18柱,分別收集淋出液(組a 組 c),分別用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮至干,殘留物用ImL甲醇-水(60 40 ;ν/ν)混合溶劑溶解(其中組a中甲磺隆、綠磺隆、氯嘧磺隆的樣品濃縮系數(shù)均為100,組b和組c中甲磺隆、綠磺隆、 氯嘧磺隆均為10 X 10_3 μ g/kg的樣品濃縮系數(shù)均為200),分別轉(zhuǎn)入3個(gè)5mL容量瓶中(組 a 組c),并于組c的容量瓶中補(bǔ)加25 μ L的100mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,組a 組c分別用甲醇-水(60 40 ;v/v)混合溶劑定容,定容后用毛細(xì)管電泳測(cè)試,測(cè)試方法同上所述,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算甲磺隆、綠磺隆及氯嘧磺隆濃度,再根據(jù)公式(1)計(jì)算土壤樣品中甲磺隆、 綠磺隆及氯嘧磺隆濃度,結(jié)果見圖2。
測(cè)定分離效果見圖2,圖2是不同樣品中甲磺隆(1)、綠磺隆(3)和氯嘧磺隆(2)的毛細(xì)管電泳分離分離譜圖,從圖2的a可看出在沒有添加除草劑的土壤測(cè)試樣品中沒有甲磺隆、綠磺隆和氯嘧磺隆的保留時(shí)間及吸收峰出現(xiàn),表明沒有被甲磺隆、綠磺隆和氯嘧磺隆污染。從圖2的b可知土壤添加10Χ10_3μ g/kg甲磺隆、綠磺隆和氯嘧磺隆后,經(jīng)提取濃縮 100倍后經(jīng)毛細(xì)管電泳分離在甲磺隆、綠磺隆和氯嘧磺隆相應(yīng)保留時(shí)間位置出現(xiàn)甲磺隆、綠磺隆和氯嘧磺隆的吸收峰,但吸收強(qiáng)度較弱,基線不穩(wěn),受土壤組分干擾較大。為了強(qiáng)化甲磺隆、綠磺隆和氯嘧磺隆分離效果,增強(qiáng)吸收峰吸收強(qiáng)度,測(cè)試中在土壤提取濃縮100倍后的待測(cè)樣中補(bǔ)加5mg/L甲磺隆、綠磺隆和氯嘧磺隆,其毛細(xì)管電泳分離譜圖見圖2的c,從中可看出甲磺隆、綠磺隆和氯嘧磺隆分離效果較好,吸收峰吸收強(qiáng)度較大,基線平穩(wěn),受土壤組分干擾較小,甲磺隆、綠磺隆和氯嘧磺隆吸收峰峰面積增加到整個(gè)毛細(xì)管電泳分離譜圖吸收峰峰面積的35%,據(jù)此待測(cè)土壤中甲磺隆、綠磺隆和氯嘧磺隆含量可通過工作曲線計(jì)算獲得,可見相應(yīng)干擾可通過補(bǔ)加定量濃度的待測(cè)化合物來排除。由此可見采用此方法具有較高的靈敏度,可檢測(cè)土壤中10_3μ g/kg的甲磺隆、綠磺隆和氯嘧磺隆痕量殘留。
(4)回收率
分別稱取30份500g(烘干土計(jì))土樣于30個(gè)燒杯中,分為3組,分別為組d、 組e和組f,于組d、組e和組f中分別加入5、10、25mL的lmg/L混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,充分混勻,獲得含甲磺隆、綠磺隆、氯嘧磺隆均為IOX 10_3 μ g/kg (組d),20Χ 10_3μ g/kg (組e)及 50 X 10_3 μ g/kg (組f)的土樣,將3組土樣過Imm篩,于_20°C冷凍儲(chǔ)存。分別稱取IOOg冷凍土樣(組e和組f)和200g冷凍土樣(組d),于30個(gè)500mL三角瓶中,分別加入200mL 0. lmol/L碳酸氫鈉溶液,用橡皮塞蓋好振蕩lh,于12000r/min離心5min,獲取上清液,提取殘?jiān)儆?. lmol/L碳酸氫鈉溶液提取兩遍,將各組所得上清液分別合并,分別合并后的上清液用0. lmol/L鹽酸溶液調(diào)pH至2. 5,分別裝入C18柱(C18柱通過用IOmL甲醇活化及IOmL重蒸水鈍化,棄去淋出液),再分別用IOmL 二氯甲烷淋洗C18柱,分別收集淋出液 (組d 組f),用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮至干,殘留物分別用ImL甲醇-水(60 40;v/v)混合溶劑溶解(其中甲磺隆、綠磺隆、氯嘧磺隆均為20X 10-3 μ g/kg或50X 10_3μ g/kg的樣品濃縮系數(shù)為100,甲磺隆、綠磺隆、氯嘧磺隆均為10 X 10_3 μ g/kg的樣品濃縮系數(shù)為200),分別轉(zhuǎn)入30個(gè)5mL容量瓶中,并于容量瓶中補(bǔ)加25 μ L的100mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,再分別用甲醇-水(60 40 ;v/v)混合溶劑定容,定容后用毛細(xì)管電泳測(cè)試,測(cè)定方法同實(shí)施例2。
30份樣品中甲磺隆、綠磺隆和氯嘧磺隆提取后測(cè)定的回收率見表1。從表1中可看出甲磺隆、綠磺隆和氯嘧磺隆三者的平均回收率分別為97. 7士 1.6%、96.0士 1.4%和 98. 6士2. 3% ;且在10 50X 10_3 μ g/kg圍內(nèi)回收率不受甲磺隆、綠磺隆和氯嘧磺隆濃度的影響,表明毛細(xì)管電泳方法是對(duì)痕量及多種磺酰脲除草劑混合殘留有效分離和測(cè)定的方法。
表1.不同濃度樣品中甲磺隆、氯嘧磺隆和綠磺隆的回收率
權(quán)利要求
1.一種定量檢測(cè)土壤中磺酰脲類除草劑痕量殘留的方法,其特征在于所述方法為將等測(cè)土樣加入PH7. 8的0. lmol/L碳酸氫鈉水溶液中,振蕩lh,12000r/min離心5min,得沉淀與一次上清液,取一次上清液用0. IM鹽酸水溶液調(diào)pH至2. 5,裝入預(yù)處理后的C18柱,再用二氯甲烷淋洗,收集淋出液,淋出液濃縮至干,濃縮物用體積濃度60%甲醇水溶液溶解, 獲得溶解液,將溶解液中補(bǔ)加混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,再加入體積濃度60%甲醇水溶液制成混合液,使混合液中補(bǔ)加的標(biāo)準(zhǔn)甲磺隆、標(biāo)準(zhǔn)綠磺隆及標(biāo)準(zhǔn)氯嘧磺隆終濃度均為5mg/L,獲得待測(cè)樣品,待測(cè)樣品用毛細(xì)管電泳儀進(jìn)行測(cè)試;根據(jù)甲磺隆、綠磺隆及氯嘧磺隆標(biāo)準(zhǔn)曲線,獲得待測(cè)樣品中甲磺隆、綠磺隆或氯嘧磺隆的含量;所述混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液為標(biāo)準(zhǔn)甲磺隆、標(biāo)準(zhǔn)綠磺隆和標(biāo)準(zhǔn)氯嘧磺隆終濃度均為100mg/L的混合溶液。
2.如權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法,其特征在于所述毛細(xì)管電泳儀測(cè)試條件為毛細(xì)管電泳儀采用UV檢測(cè)器,內(nèi)徑75 μ m、有效柱長(zhǎng)50cm的石英毛細(xì)管,毛細(xì)管電泳儀每次開機(jī)時(shí),先用0. lmol/L鹽酸沖洗柱子,然后依次用0. lmol/L氫氧化鈉、去離子水、緩沖液分別沖洗毛細(xì)管柱10min、5min和20min。每次進(jìn)樣前用緩沖液沖洗毛細(xì)管柱^iiin ;結(jié)束分析時(shí)用 0. lmol/L氫氧化鈉沖洗毛細(xì)管柱lOmin,再用去離子水沖洗5min,檢測(cè)波長(zhǎng)214nm、分離電壓25kV、溫度;35°C、進(jìn)樣 38001^X10 秒,進(jìn)樣量 10 μ L。
3.如權(quán)利要求2所述的檢測(cè)方法,其特征在于所述緩沖溶液為ρΗ5.0冰醋酸-醋酸銨緩沖溶液,所述緩沖溶液由終濃度如下的原料組成50mmol/L冰醋酸、50mmol/L醋酸銨、 80mmol/L SDS,體積濃度14%甲醇,體積濃度20%異丙醇。
4.如權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法,其特征在于所述沉淀再用pH7.8的0. lmol/L碳酸氫鈉水溶液重復(fù)振蕩提取lh,離心,重復(fù)2次,將2次重復(fù)提取的上清液并入所述的一次上清液,取合并的總上清液用0. IM鹽酸水溶液調(diào)pH至2. 5后裝入預(yù)處理后的C18柱。
5.如權(quán)利要求1或4所述的檢測(cè)方法,其特征在于所述C18柱預(yù)處理為依次用甲醇和重蒸水淋洗C18柱,棄去淋洗液。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種定量檢測(cè)土壤中磺酰脲類除草劑痕量殘留的方法將待測(cè)土樣加入pH7.8的0.1mol/L碳酸氫鈉水溶液中,振蕩1h,12000r/min離心5min,得沉淀和一次上清液,取一次上清液用0.1M鹽酸水溶液調(diào)pH至2.5后,制備待測(cè)樣品,待測(cè)樣品用毛細(xì)管電泳儀進(jìn)行測(cè)試;根據(jù)甲磺隆、綠磺隆及氯嘧磺隆標(biāo)準(zhǔn)曲線,獲得待測(cè)樣品中甲磺隆、綠磺隆或氯嘧磺隆的含量;本發(fā)明方法檢測(cè)靈敏度高,檢測(cè)限達(dá)到10-3μg/kg級(jí),高于高效液相色譜等其他現(xiàn)有方法的檢測(cè)限值(不超過μg/kg)。
文檔編號(hào)G01N30/02GK102539559SQ20111043846
公開日2012年7月4日 申請(qǐng)日期2011年12月24日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月24日
發(fā)明者廖敏, 謝曉梅 申請(qǐng)人:浙江大學(xué)
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