本發(fā)明涉及紅景天藥材的深加工技術領域，尤其涉及一種從紅景天中同步分離制備紅景天苷和絡塞維的方法。

技術背景

紅景天(rhodiolaroseal.)是景天科紅景天屬多年生草本或亞灌木植物的干燥根和根莖，別名：薔薇紅景天，掃羅瑪布爾(藏名)等，全世界90多種，分布于東亞、中亞、西伯利亞及北美地區(qū)。紅景天生長在高海拔高寒無污染地帶，其生長環(huán)境惡劣，因而具有很強的生命力和特殊的適應性。其性寒，味甘，澀，具有活血止血，清肺止咳之功效，用于治療肺炎咳嗽，婦女白帶，外用治跌打損傷，燙傷燒傷，是一味作用廣泛的中藥。近年來研究表明紅景天具有明顯的抗氧化、抗缺氧、抗衰老、抗微波輻射、抗疲勞、保肝等功能，而且可以提高工作效率，延緩機體衰老，防治老年病等。因此在軍事醫(yī)學上有十分重要的意義，前蘇聯(lián)衛(wèi)生保健部正式批準其進入市場，被視為黃金植物。

近年來，對紅景天化學成分的研究表明，主要成分是紅景天苷(salidroside)、絡塞維(rosavin)等，結構式分別為：

紅景天苷是紅景天的主要有效成分之一，通常以其有無與含量的高低作為紅景天質量優(yōu)劣的判斷標準?，F(xiàn)代藥理研究表明，其具有抗疲勞、抗輻射、抗衰老、抗腫瘤的功效，在保護心腦血管系統(tǒng)，免疫系統(tǒng)、內分泌系統(tǒng)、調節(jié)神經(jīng)等方面具有確切的作用。絡塞維為苯丙素苷類化合物，主要用于抗疲勞、抗缺氧、緩解壓力、提高工作效率和治療神經(jīng)系統(tǒng)的功能型疾病。紅景天中的絡塞維含量較少，如何從紅景天獲得高收率和高純度的絡塞維是一個研究熱點。

紅景天苷和絡塞維的純度是衡量紅景天提取物的關鍵指標，紅景天藥材中的含有的雜質不但會對制劑的口感和澄明度產(chǎn)生不良影響，還會造成惡心、嘔吐等不良反應。去除紅景天提取物中雜質的同時不影響提取液中紅景天苷和絡塞維等有效成分的含量，并實現(xiàn)同步分離紅景天苷和絡塞維，是工業(yè)生產(chǎn)中的難題。中國公開號為cn106699822a的發(fā)明專利提出了一種從玫瑰紅景天中高效提取紅景天苷和絡塞維的方法，提取液80％乙醇溶液中加入十六烷基三甲基季胺溴化物和醋酸鉀，進行動態(tài)逆流提取，濃縮后，加入酸水進行沉淀，最后噴霧干燥得到。該發(fā)明的方法利用ph為3.0～4.0的酸水，對設備要求較高，而且后期酸水的處理費用較高。最終的產(chǎn)品中紅景天苷(6.1％左右)和絡塞維(3.6％左右)的純度較低，并未實現(xiàn)紅景天苷和絡塞維的分離。因此，要獲得高純度的紅景天苷和絡塞維就需要選擇的合理、有效、成本低的純化工藝來除去提取物中雜質，并實現(xiàn)紅景天苷和絡塞維的同步分離。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供一種從紅景天中同步分離制備紅景天苷和絡塞維的方法，本發(fā)明所提供的方法成本低、試劑用量少、步驟簡單、環(huán)保、適合于工業(yè)化生產(chǎn)，能同步獲得高收率和高純度的紅景天苷和絡塞維提取物。

本發(fā)明的從紅景天中同步分離制備紅景天苷和絡塞維的方法，包括以下步驟：

1)提?。簩⒓t景天根粉碎，過篩，粒度大于60目，得到紅景天粉末；在得到的紅景天粉末中加入5～30倍紅景天重量的乙醇水溶液(添加有0.5％～10％的低共熔溶劑)進行回流提取，獲得提取液；

2)一次分離純化：將步驟1)的提取液濃縮后，離心獲得上清液，上清液通過填充有混合大孔樹脂的膨脹床，從下而上進行吸附；吸附完成后，從下而上進行水洗，直至流出液澄清，再用5％～40％乙醇溶液自上而下洗脫出紅景天苷，收集洗脫液，濃縮至無醇味，得到紅景天苷粗提取液；再用40％～95％乙醇溶液自上而下洗脫出絡塞維，收集洗脫液，濃縮至無醇味，得到絡塞維粗提取液；

3)二次分離純化：將紅景天苷粗提取液通過填充有混合大孔樹脂的膨脹床，從下而上進行吸附；吸附完成后，從下而上進行水洗，直至流出液澄清，5％～40％乙醇溶液自上而下洗脫出紅景天苷，收集洗脫液，濃縮，干燥后得到紅景天苷提取物；

將絡塞維粗提取液通過另一個填充有混合大孔樹脂的膨脹床，從下而上進行吸附；吸附完成后，從下而上進行水洗，直至流出液澄清，用30％～95％乙醇溶液自上而下洗脫出絡塞維，收集洗脫液，濃縮，干燥后得到絡塞維提取物。

所述步驟1)中的低共熔溶劑是由氫鍵受體(四乙基氯化銨)與氫鍵給體(木糖醇、葡萄糖)組合而成的。

所述步驟2)中的混合大孔樹脂是由hpd400a、lsa10、da201-ciii兩種或以上組成的；更優(yōu)選的，混合大孔樹脂以hpd400a:lsa10:da201-ciii為1:1:3的比例組成。

所述步驟2)中的吸附流速為1～5bv/h。

所述步驟2)中的水洗流速為2～6bv/h，用量為2～4bv。

所述步驟2)中的紅景天苷洗脫流速為2～6bv/h，乙醇溶液用量為1～4bv。

所述步驟2)中的絡塞維洗脫流速為1～4bv/h，乙醇溶液用量為1～4bv。

所述步驟3)中的混合大孔樹脂是由lx-28、hpd300、xda-8兩種或或以上組成的。更優(yōu)選的，混合大孔樹脂以lx-28:hpd300:xda-8為2:1:1的比例組成。

所述步驟3)中的吸附流速均為0.5～4bv/h。

所述步驟3)中的水洗流速均為2～5bv/h，用量均為1～5bv。

所述步驟3)中的紅景天苷洗脫流速為1～5bv/h，乙醇溶液用量為1～5bv。

所述步驟3)中的絡塞維洗脫流速為1～5bv/h，乙醇溶液用量為1～6bv。

所述步驟3)中的干燥方式為真空干燥、鼓風干燥、噴霧干燥、冷凍干燥、微波干燥、玻態(tài)干燥、紅外干燥、高壓靜電干燥、氣流干燥、流化床干燥等。

本發(fā)明提供了一種從紅景天中同步分離制備紅景天苷和絡塞維的方法所制得的紅景天苷和絡塞維可以應用于藥品、保健品和食品。

本發(fā)明的有益效果為：

1、制備方法分析：

1.1所述步驟1)中添加低共熔溶劑有利于浸潤，加速有效成分滲出，有利于紅景天苷、絡塞維等的提?。坏凸踩廴軇┛梢猿恋聿糠主焚|、脂肪、蛋白質和多糖類膠質等成分，減少大分子物質進入提取液。

1.2所述步驟2)和3)采用混合大孔樹脂進行分離富集，利用不同大孔樹脂的多重作用力，通過大孔樹脂的不同組合來有效的去除雜質，可以增強大孔樹脂對紅景天苷和絡塞維的選擇性，提高大孔樹脂的吸附容量。在保持較高提取率的情況下，提高了紅景天苷和絡塞維的純度，從而達到提高分離富集效率的目的。

1.3所述步驟2)和3)采用膨脹床模式進行吸附，具有如下優(yōu)點：上柱前不需要過濾，可以減小提取液中固體對吸附過程的影響，不易污染堵塞大孔樹脂柱床，因此可以大大簡化操作和工藝過程，降低生產(chǎn)成本。

2、相對于現(xiàn)有技術，本發(fā)明提供的提取方法具有以下技術效果的優(yōu)勢：

2.1原料設備成本優(yōu)勢：本發(fā)明方法中使用的原料、設備均為常見的普通原料、設備，避免了工業(yè)化生產(chǎn)過程中對于昂貴原材料、設備的依賴，大大地降低了生產(chǎn)成本。

2.2低毒環(huán)保經(jīng)濟高效的技術路線：本發(fā)明采取的是一種綠色環(huán)保經(jīng)濟的技術路線，該技術路線中采用的提取、分離、干燥全部使用安全環(huán)保低毒無害的水、乙醇等。

2.3產(chǎn)品市場優(yōu)勢：由于本發(fā)明可同時提取紅景天中紅景天苷和絡塞維兩種活性成分，且經(jīng)過hplc的含量檢測，利用含低共熔溶劑的乙醇溶液提取后，提取物中紅景天苷含量為2～5％，回收率為80％～98％，絡塞維含量為1～4％，回收率為85％～95％；一次分離純化后，紅景天苷粗提物含量為15～40％，回收率為80％～90％，絡塞維粗提物含量為10～30％，回收率為75％～90％；二次分離純化后，紅景天苷提取物中紅景天苷含量為40％～80％，回收率為60％～88％；絡塞維提取物中絡塞維含量為30％～70％，回收率為65％～85％，因此提高了紅景天的利用率，增加了紅景天的利用價值，具有明顯的競爭優(yōu)勢。

3、本發(fā)明提供的生產(chǎn)方法為利用含低共熔溶劑的乙醇溶液進行提取，采用了混合大孔樹脂膨脹床技術進行分離富集，操作步驟簡單、提取效率高、時間短、能耗低、工藝簡單、管理人員少、易于形成產(chǎn)業(yè)化、綠色安全，所以成本較低，而且產(chǎn)品回收率顯著提高，為紅景天苷和絡塞維的同時制備提供了一條切實可行的方法，具有較好的應用前景。

具體實施方式

申請人研究發(fā)現(xiàn)，紅景天中主要含有紅景天苷、苷元、酪醇和紅景天多糖，并含有脂肪、甾醇、酚類化合物、有機酸、鞣質、多種微生素和水溶性揮發(fā)油；此外，還包括天門冬氨酸、蘇氨酸絲氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、組氨酸、精氨酸、脯氨酸等18種氨基酸；鎂、鈣、鉀、磷等35種無機元素；15種人體必需的常量和微量元素鐵、鋁、鋅、鈷、鎘、鈦、銅、錳等。其苷類物質主要有紅景天苷、熊果苷、蘆丁苷、異槲皮苷、云杉素等；黃酮類有槲皮素、山奈酚花色苷；香豆素類有香豆素、7-羥基香豆素、莨菪亭。通過分析紅景天提取液成分的基礎上，對膨脹床所使用的大孔樹脂的組成及配比進行優(yōu)化，從而能在保證紅景天苷和絡塞維的提取率和純度的情況下，同步分離制備紅景天苷和絡塞維。

下面以實施例作進一步描述，但本發(fā)明不同限于這些實施例。

實施例1

1)提?。簩⒓t景天根1kg粉碎，過篩，粒度大于60目，得到紅景天粉末；在得到的紅景天粉末中加入8倍紅景天重量的10％乙醇水溶液，其中含低共熔溶劑(四乙基氯化銨:木糖醇＝1:1)9％，回流提取，提取時間為8小時，連續(xù)提取2次，合并提取液。

2)一次分離純化：將提取液濃縮至原體積的1/4，離心，上清液通過填充有0.8kg混合大孔樹脂(hpd400a:lsa10:da201-ciii＝1:1.6:3)的膨脹床，從下而上進行吸附，流速為1.5bv/h；吸附完成后，從下而上進行水洗，水洗流速為2bv/h，用量為2.2bv；先用5％乙醇溶液自上而下洗脫出紅景天苷，流速為2bv/h，用量為1.5bv，收集洗脫液，減壓濃縮至無醇味，得到紅景天苷粗提取液；再用40％乙醇溶液自上而下洗脫出絡塞維，流速為1bv/h，用量為1bv，收集洗脫液，濃縮至無醇味，得到絡塞維粗提取液。

3)二次分離純化：將紅景天苷粗提取液通過填充有0.5kg混合大孔樹脂(lx-28:hpd300＝1:3)的膨脹床，從下而上進行吸附，吸附流速均為0.5bv/h；吸附完成后，從下而上進行水洗，水洗流速均為3bv/h，用量均為1bv；用5％乙醇溶液自上而下洗脫出紅景天苷，洗脫流速為2bv/h，乙醇溶液用量為1bv，收集洗脫液，濃縮，噴霧干燥后得到紅景天苷提取物；將絡塞維粗提取液通過填充有0.3kg混合大孔樹脂(hpd300:xda-8＝3:1)的膨脹床，從下而上進行吸附，吸附流速均為1bv/h；吸附完成后，從下而上進行水洗流速均為3.5bv/h，用量均為2bv；用30％乙醇溶液自上而下洗脫出絡塞維，洗脫流速為2bv/h，乙醇溶液用量為3bv，收集洗脫液，濃縮，噴霧干燥后得到絡塞維提取物。

4)檢驗：經(jīng)過hplc的含量檢測，利用含低共熔溶劑的乙醇溶液提取后，提取物中紅景天苷含量為2.5％，回收率為95％，絡塞維含量為1.6％，回收率為93％；一次分離純化后，紅景天苷粗提物含量為20％，回收率為89％，絡塞維粗提物含量為15％，回收率為86％；二次分離純化后，紅景天苷提取物中紅景天苷含量為45％，回收率為85％；絡塞維提取物中絡塞維含量為36％，回收率為81％。

實施例2

1)提?。簩⒓t景天根5kg粉碎，過篩，粒度大于60目，得到紅景天粉末；在得到的紅景天粉末中加入12倍紅景天重量的50％乙醇水溶液，其中含低共熔溶劑(四乙基氯化銨:葡萄糖＝1:2)5％，回流提取，提取時間為6小時，連續(xù)提取2次，合并提取液。

2)一次分離純化：將提取液濃縮至原體積的1/4，離心，上清液通過填充有5kg混合大孔樹脂(hpd400a:da201-ciii＝1:5)的膨脹床，從下而上進行吸附，流速為2bv/h；吸附完成后，從下而上進行水洗，水洗流速為3bv/h，用量為3bv；先用10％乙醇溶液自上而下洗脫出紅景天苷，流速為3bv/h，用量為2bv，收集洗脫液，減壓濃縮至無醇味，得到紅景天苷粗提取液；再用50％乙醇溶液自上而下洗脫出絡塞維，流速為2bv/h，用量為1.5bv，收集洗脫液，濃縮至無醇味，得到絡塞維粗提取液。

3)二次分離純化：將紅景天苷粗提取液通過填充有1kg混合大孔樹脂(hpd300:xda-8＝1:5)的膨脹床，從下而上進行吸附，吸附流速均為1bv/h；吸附完成后，從下而上進行水洗，水洗流速均為4bv/h，用量均為2bv；用10％乙醇溶液自上而下洗脫出紅景天苷，洗脫流速為3bv/h，乙醇溶液用量為2bv，收集洗脫液，濃縮，冷凍干燥后得到紅景天苷提取物；將絡塞維粗提取液通過填充有0.6kg混合大孔樹脂(lx-28:xda-8＝4:1)的膨脹床，從下而上進行吸附，吸附流速均為2bv/h；吸附完成后，從下而上進行水洗流速均為4bv/h，用量均為2.5bv；用40％乙醇溶液自上而下洗脫出絡塞維，洗脫流速為3bv/h，乙醇溶液用量為2bv，收集洗脫液，濃縮，冷凍干燥后得到絡塞維提取物。

4)檢驗：經(jīng)過hplc的含量檢測，利用含低共熔溶劑的乙醇溶液提取后，提取物中紅景天苷含量為2.9％，回收率為91％，絡塞維含量為2.4％，回收率為89％；一次分離純化后，紅景天苷粗提物含量為30％，回收率為84％，絡塞維粗提物含量為19％，回收率為87％；二次分離純化后，紅景天苷提取物中紅景天苷含量為68％，回收率為73％；絡塞維提取物中絡塞維含量為46％，回收率為79％。

實施例3

1)提取：將紅景天根10kg粉碎，過篩，粒度大于60目，得到紅景天粉末；在得到的紅景天粉末中加入20倍紅景天重量的75％乙醇水溶液，其中含低共熔溶劑(四乙基氯化銨:木糖醇:葡萄糖＝2:1:3)2％，回流提取，提取時間為4小時，連續(xù)提取2次，合并提取液。

2)一次分離純化：將提取液濃縮至原體積的1/4，離心，上清液通過填充有8kg混合大孔樹脂(hpd400a:lsa10:da201-ciii＝1:1:3)的膨脹床，從下而上進行吸附，流速為4bv/h；吸附完成后，從下而上進行水洗，水洗流速為4bv/h，用量為4bv；先用25％乙醇溶液自上而下洗脫出紅景天苷，流速為4bv/h，乙醇溶液用量為3bv，收集洗脫液，減壓濃縮至無醇味，得到紅景天苷粗提取液；再用80％乙醇溶液自上而下洗脫出絡塞維，流速為3.5bv/h，用量為4bv，收集洗脫液，濃縮至無醇味，得到絡塞維粗提取液。

3)二次分離純化：將紅景天苷粗提取液通過填充有5kg混合大孔樹脂(lx-28:hpd300:xda-8＝1:3:8)的膨脹床，從下而上進行吸附，吸附流速均為4bv/h；吸附完成后，從下而上進行水洗，水洗流速均為5bv/h，用量均為4.5bv；用20％乙醇溶液自上而下洗脫出紅景天苷，洗脫流速為4bv/h，乙醇溶液用量為3bv，收集洗脫液，濃縮，減壓真空干燥后得到紅景天苷提取物；將絡塞維粗提取液通過填充有4kg混合大孔樹脂(lx-28:hpd300:xda-8＝2:1:1)的膨脹床，從下而上進行吸附，吸附流速均為4bv/h；吸附完成后，從下而上進行水洗流速均為5bv/h，用量均為3bv；用90％乙醇溶液自上而下洗脫出絡塞維，洗脫流速為5bv/h，乙醇溶液用量為5bv，收集洗脫液，濃縮，減壓真空干燥后得到絡塞維提取物。

4)檢驗：經(jīng)過hplc的含量檢測，利用含低共熔溶劑的乙醇溶液提取后，提取物中紅景天苷含量為4.6％，回收率為87％，絡塞維含量為3.3％，回收率為85％；一次分離純化后，紅景天苷粗提物含量為36％，回收率為82％，絡塞維粗提物含量為28％，回收率為77％；二次分離純化后，紅景天苷提取物中紅景天苷含量為78％，回收率為76％；絡塞維提取物中絡塞維含量為66％，回收率為68％。

上述的實施例表明本發(fā)明的方法能有效的從紅景天中同步分離制備紅景天苷和絡塞維。