具有抗癌活性的7-α-[9-(4，4，5，5，5-五氟戊基亞硫?；?壬基]-雌甾-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇的酯類(lèi)衍生物及其制備方法技術(shù)領(lǐng)域本發(fā)明屬醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及到通式A化合物的制備方法，具體來(lái)說(shuō)，涉及到7-α-[9-(4，4，5，5，5-五氟戊基亞硫?；?壬基]-雌甾-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇的酯類(lèi)衍生物及其制備方法。

背景技術(shù)：
7-α-[9-(4，4，5，5，5-五氟戊基亞硫?；?壬基]-雌甾-1，3，5(10)-三烯-3，17β-二醇，別名氟維司群(Fulvestrant)，通式如下式B所示，是一類(lèi)新型的雌激素受體阻斷劑，用于抗雌激素療法治療無(wú)效、雌激素受體呈陽(yáng)性的絕經(jīng)后晚期乳腺癌的治療。乳腺癌的最大特點(diǎn)在于它的發(fā)生與發(fā)展，與體內(nèi)雌激素水平及其代謝有關(guān)。研究表明，在許多乳腺癌患者的腫瘤細(xì)胞上均發(fā)現(xiàn)有雌激素受體(ER)，且腫瘤生長(zhǎng)受到雌激素的刺激，因此降低雌激素的濃度，或阻斷雌激素與其受體的結(jié)合，可抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和繁殖，是目前治療乳腺癌的主要方法之一。氟維司群可與雌激素受體競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，親和力與雌二醇相似；其還可阻滯受體，抑制雌激素的結(jié)合，并激發(fā)受體發(fā)生形態(tài)改變，降低ER濃度而損害腫瘤細(xì)胞。氟維司群可下調(diào)人體乳腺癌細(xì)胞中的ER蛋白，將ER下調(diào)在腫瘤細(xì)胞內(nèi)，使腫瘤的生長(zhǎng)最小化。由于本品不改變已存在的腫瘤ER狀態(tài)，不影響新的ER產(chǎn)生，因此腫瘤繼續(xù)被“程序化”為ER陽(yáng)性，這樣本品持續(xù)發(fā)生治療作用。其最大的優(yōu)點(diǎn)在于沒(méi)有一般抗雌激素類(lèi)藥物的部分激動(dòng)作用和雌激素樣活性?，F(xiàn)今許多商品化的氟維司群制劑，是采用油為賦形劑的，這主要是考慮一下兩方面原因。一方面，氟維司群的穩(wěn)定性較差，是一個(gè)容易降解的藥物，其一般在-20℃下保存，常溫下不宜太久，否則會(huì)影響其純度。其降解機(jī)理暫不清楚，一般認(rèn)為影響其穩(wěn)定性的主要原因在于其C-3位、C-17位的-OH的存在。同時(shí)3-、17-位的-OH的存在，增加了藥物的極性，增加了藥物對(duì)胃腸道的刺激，只能做成注射劑。另一方面，與其他甾族化合物一樣，氟維司群具有難以配制的某些物理性質(zhì)，是一個(gè)特別親脂的分子，水溶性極小，大約10ng/mL。US5183514、CN1394141A中給出了其溶解度(mg/mL，25℃)(水0.001、花生油0.45、芝麻油0.58、蓖麻油20、Migloyl8103.06、Migloyl8122.72、油酸乙酯1.25、苯甲酸芐酯6.15、肉豆蔻酸異丙酯0.80、Span853.79、乙醇>200、苯甲醇>200)?？梢?jiàn)，即使在溶解度最大的蓖麻油中，也不可能使氟維司群的濃度達(dá)到臨床給藥要求。因此許多上市的氟維司群制劑不但使用油作為溶劑，并且在其中添加了其他的賦形劑增溶，如乙醇、苯甲酸卞酯、苯甲醇等。這樣可以制備成可肌肉注射的、含量不低于45mg/mL的注射劑，且有效血漿濃度(2.5ng/mL)可維持2周。但這些溶劑的加入，增加了制劑中藥物沉淀析出的風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)會(huì)引起注射部位的刺激作用?？梢?jiàn)，如何在保證抑制癌細(xì)胞效果的同時(shí)，對(duì)氟維司群進(jìn)行結(jié)構(gòu)上的改進(jìn)，尤其是C-3位和C-17位上-OH的改造，使其降低對(duì)人體的刺激性，并且提高親脂性，從而更易于制成可用于人體的制劑，是現(xiàn)有技術(shù)中亟待解決的問(wèn)題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
因此，本發(fā)明的目的在于，對(duì)氟維司群結(jié)構(gòu)中C-3位和C-17位上的-OH進(jìn)行改進(jìn)，使其酯化成C-17位含碳原子個(gè)數(shù)為2至22的酯類(lèi)(含羧基上C)化合物，C-3位含碳原子個(gè)數(shù)為2至4的酯類(lèi)(含羧基上C)化合物，以增加藥物的穩(wěn)定性和在親脂性溶劑中的溶解度。本發(fā)明的目的是通過(guò)以下方式實(shí)現(xiàn)的：本發(fā)明提供了一種如下式A所示的化合物，其中：取代基R′選自H、碳原子個(gè)數(shù)為2至4的烷?；拖；?，取代基R選自H、碳原子個(gè)數(shù)為2至22的烷酰基和烯?；?。優(yōu)選地，取代基R′為H，且取代基R選自碳原子個(gè)數(shù)為11至22的烷酰基和烯?；?；優(yōu)選地，所述取代基R選自碳原子個(gè)數(shù)為11至22的烷?；?，優(yōu)選為十一烷酰基、十六烷?；?、二十二烷?；?-[(3′，3′)-二甲基-1′-甲基]丁基-5-甲基-(7，7)-二甲基-辛烷酰基。優(yōu)選地，所述取代基R選自含有1至6個(gè)碳碳雙鍵、碳原子個(gè)數(shù)為11至22的烯酰基，其中，所述碳碳雙鍵既可以分布在主鏈上，也可以分布在支鏈上；優(yōu)選地，所述取代基R選自十一碳-2-烯酰基、二十碳-(5，8，11，14，17)-五烯酰基和二十二碳-(4，7，10，13，16，19)-六烯?；?。優(yōu)選地，取代基R′選自碳原子個(gè)數(shù)為2至4的烷酰基時(shí)，為乙酰基或丁?；?。優(yōu)選地，所述取代基R選自碳原子個(gè)數(shù)為11至22的烷?；拖；?，優(yōu)選為2-[(3′，3′)-二甲基-1′-甲基]丁基-5-甲基-(7，7)-二甲基-辛烷?；蚴惶?2-烯酰基。示例性地，所述化合物可以具有如下式所示的結(jié)構(gòu)，以下示出了氟維司群酯Ⅰ～Ⅺ的結(jié)構(gòu)式：此外，本發(fā)明還提供了一種制備上述化合物的方法，所述方法包括以下步驟：a)對(duì)式B的化合物進(jìn)行C-17位上-OH的?；簩⑹紹的化合物與堿性試劑、有機(jī)酸、催化劑在溶劑中在室溫下攪拌，形成反應(yīng)混合物，反應(yīng)制得式A的化合物C-17位上的?；之a(chǎn)物；b)將步驟a)所得粗產(chǎn)物進(jìn)行純化，除去副產(chǎn)物N,N-二環(huán)基脲，制得式A的化合物C-17位上的?；兓a(chǎn)品；當(dāng)根據(jù)化合物中的所述取代基R′不為H時(shí)，所述方法還包括步驟c)將步驟b)所制得的C-17位上的?；兓a(chǎn)品進(jìn)行C-3位上的酰基化：將步驟b)所制得的C-17位上的?；兓a(chǎn)品與堿性試劑、有機(jī)酸、催化劑在溶劑中在室溫下攪拌，反應(yīng)制得式A的化合物C-17和C-3位上的?；之a(chǎn)物；d)將步驟c)所得粗產(chǎn)物進(jìn)行純化，制得式A的化合物的純化產(chǎn)品。其中，在步驟a)中，所述堿性試劑選自吡啶、2-甲基吡啶、3-甲基吡啶、4-甲基吡啶、2-乙基吡啶、3-乙基吡啶、4-乙基吡啶、5-乙基吡啶、2-甲基-5-乙基吡啶、2-二甲氨基吡啶、4-二甲氨基吡啶，優(yōu)選選自4-二甲氨基吡啶；所述溶劑選自一氯甲烷、二氯甲烷、三氯甲烷；所述催化劑為脫水劑，優(yōu)選為N，N-二環(huán)己基碳二亞胺；所述有機(jī)酸為碳原子個(gè)數(shù)為2至22的烷基酸或烯酸；在步驟b)中，所述純化包括將步驟a)所制得的粗產(chǎn)物溶解在四氫呋喃或乙酸乙酯中，然后利用正己烷或正己烷-乙酸乙酯的混和溶劑對(duì)其進(jìn)行沉降、利用硅膠層析柱和/或中性氧化鋁吸附法進(jìn)行分離純化；在步驟c)中，所述堿性試劑選自吡啶、2-甲基吡啶、3-甲基吡啶、4-甲基吡啶、2-乙基吡啶、3-乙基吡啶、4-乙基吡啶、5-乙基吡啶、2-甲基-5-乙基吡啶、2-二甲氨基吡啶、4-二甲氨基吡啶，優(yōu)選選自4-二甲氨基吡啶；所述溶劑選自四氫呋喃、乙酸乙酯，優(yōu)選為四氫呋喃；所述催化劑為脫水劑，優(yōu)選為N，N-二環(huán)己基碳二亞胺；所述有機(jī)酸為碳原子個(gè)數(shù)為2至4的烷基酸或烯酸；在步驟d)中，所述純化是利用硅膠柱層析法和乙醇淋洗法進(jìn)行的，其中，在所述硅膠柱層析法中利用正己烷-乙酸乙酯混合溶劑進(jìn)行梯度洗脫，正己烷與乙酸乙酯的體積比為50:1～1:1，優(yōu)選采用40:1/10:1/5:1梯度洗脫。此外，本發(fā)明還提供了一種包括上述式A化合物的組合物，其中，所述組合物的為油劑、脂肪劑或微球劑。此外，本發(fā)明還提供了一種包括上述的式A化合物或包括式A化合物的組合物在制備用于治療癌癥的藥物中的用途；所述藥物優(yōu)選用于抑制帶有雌激素受體的癌細(xì)胞，特別優(yōu)選用于抑制乳腺癌細(xì)胞。本發(fā)明還提供了一種用于治療癌癥的方法，其中，所述方法包括向有需要的受試者給予治療有效量的如上所述的式A化合物；所述方法優(yōu)選用于抑制帶有雌激素受體的癌細(xì)胞，特別優(yōu)選抑制乳腺癌細(xì)胞的方法；優(yōu)選地，所述式A化合物通過(guò)注射給藥。示例性地，本發(fā)明的化合物制備成油劑后，經(jīng)皮下注射于荷人乳腺癌MCF-7瘤的裸鼠，考察其抑瘤率，結(jié)果表明，此類(lèi)衍生物具有抗癌活性，用于乳腺癌的治療。具體實(shí)施方式下面結(jié)合具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的詳細(xì)描述，給出的實(shí)施例僅為了闡明本發(fā)明，而不是為了限制本發(fā)明的范圍。合成實(shí)施例雖然下述實(shí)施例中選用的堿性試劑為4-二甲氨基吡啶，但應(yīng)當(dāng)理解，也可將吡啶、2-甲基吡啶、3-甲基吡啶、4-甲基吡啶、2-乙基吡啶、3-乙基吡啶、4-乙基吡啶、5-乙基吡啶、2-甲基-5-乙基吡啶、2-二甲氨基吡啶等試劑作為堿性試劑用于下述實(shí)施例中。實(shí)施例1化合物Ⅱ的合成及結(jié)構(gòu)確認(rèn)在500mL三口圓底燒瓶中加入5g(8.25mmol)氟維司群，用300mL二氯甲烷攪拌溶解，然后順次加入0.137g(1.1mmol)的4-二甲氨基吡啶(DMAP)、2.155g(8.41mmol)的棕櫚酸、1.672g(8.23mmol)的N，N-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)，室溫(例如，20±5℃)反應(yīng)48h，終止反應(yīng)。反應(yīng)液過(guò)濾除去析出的副產(chǎn)物N，N’-二環(huán)己基脲(DCU)，濾液用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，再用水洗滌至中性，旋蒸除去溶劑二氯甲烷，得無(wú)色透明膠狀液體8.8g，將其用適量乙酸乙酯溶解，冰箱中冷凍(例如，冷凍溫度可為-15±3℃)，洗出少量白色固體，過(guò)濾除去，如此反復(fù)3次。后將濾液旋蒸除去乙酸乙酯，得無(wú)色透明膠狀液體。將此無(wú)色透明液體用少量四氫呋喃溶解，加入到正己烷中，形成大量白色固體，靜置，過(guò)濾；濾餅再采用上述四氫呋喃溶解、正己烷沉降方法反復(fù)3次，得白色粉末狀產(chǎn)品，即純的化合物Ⅱ，60℃真空烘干，得1.5gⅡ(HPLC測(cè)定純度為99.88％，C18柱，流動(dòng)相67％THF水溶液，流速1.0mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)220nm)，摩爾收率22％。IR(cm-1)：3209，2922，2852，1607，1503，1446，1385，1106，1055，1014，982。1HNMR(500MHz，CDCl3，ppm)：0.78(s,3H)，0.88(t,3H)，1.01-1.52(t,32H)，1.59-1.63(t,6H)，1.70～1.76(t,6H)，1.89～1.94(t,2H)，2.10～2.32(t,10H)，2.61～2.85(t,8H)，3.74(t,2H)，6.20(d,j＝10Hz,1H)，6.56～7.14(t,3H)。13CNMR(125MHz，CDCl3，ppm)：172.67，154.23，136.88，131.04，126.93，117.67，113.01，82.02，52.41，50.83，46.49，43.40，42.05，38.23，36.92，34.74，34.65，33.35，33.24，31.93，30.51，29.92～28.22，27.24，25.62，25.00，22.63，14.65，14.09，11.12。實(shí)施例2化合物Ⅰ的合成及結(jié)構(gòu)確認(rèn)1)反應(yīng)處理將3g(4.95mmol)氟維司群加入250mL圓底燒瓶中，加入160mL二氯甲烷攪拌溶解，然后順次加入0.0822g(0.66mmol)DMAP、0.96g十一烷酸(5.05mmol)、1.02g(4.98mmol)DCC，保持室溫(例如，20±5℃)攪拌反應(yīng)48小時(shí)后，中止反應(yīng)。2)后處理將反應(yīng)體系先冷凍，盡可能析出反應(yīng)的副產(chǎn)物DCU，濾除DCU固體，濾液再以飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，并水洗至中性，旋蒸除去二氯甲烷，得到無(wú)色透明的膠狀液體。再以少量乙酸乙酯溶解膠狀液體，在冰箱中冷凍(例如，冷凍溫度可為-15±3℃)，直至再無(wú)白色固體DCU析出。濾液濃縮除去乙酸乙酯，再以正己烷-乙酸乙酯混合溶劑重結(jié)晶，濾除析出白色固體(未反應(yīng)的原料氟維司群)。母液旋干溶劑后，為無(wú)色油狀物。采用硅膠柱層析法進(jìn)一步純化(洗脫劑為正己烷-乙酸乙酯(1:1，體積比))。旋蒸得無(wú)色油狀物1.0611g，即化合物Ⅰ(HPLC測(cè)定純度為99.104％，方法同實(shí)施例1)，摩爾收率27.7％。IR(cm-1)：3385，2926，2855，1756，1494，1463，1199，1152，1059，1017，985，721。1HNMR(500MHz，CDCl3，ppm)：δ7.28(s,1H)，6.83(d,1H)，6.77(d,1H)，3.73(t,1H,J＝8Hz)，2.88～1.17(t,57H)，0.89(s,3H)，0.77(s,3H)。13CNMR(125MHz，CDCl3，ppm)：δ172.64，148.52，137.13，126.91，122.37，120.10，118.64，81.93，52.75，51.03，46.47，43.33，41.67，38.23，36.89，34.50，34.45，33.85，31.89，29.67，29.50，29.63，29.55，29.49，29.46，29.34，29.30，29.26，29.16，29.12，28.80，28.23，27.11，25.70，25.01，24.88，22.66，14.62，14.50，11.50。實(shí)施例3化合物Ⅲ的合成及結(jié)構(gòu)確認(rèn)將3g(4.95mmol)氟維司群加入250mL圓底燒瓶中，加入160mL二氯甲烷攪拌溶解，然后順次加入0.0822g(0.66mmol)DMAP、1.87g(5.05mmol)二十二碳烷酸、1.02g(4.98mmol)DCC，保持室溫(例如，20±5℃)攪拌反應(yīng)48小時(shí)后，中止反應(yīng)。將反應(yīng)液參照實(shí)施例2中后處理方法處理，得白色固體粉末1.016g(HPLC純度92.634％)(C18柱，流動(dòng)相75％THF水溶液，流速1.0mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)220nm)，即化合物Ⅲ，摩爾收率22.1％。IR(cm-1)：3607，3424，2919，2851，1754，1495，1471，1199，1153，1141，1112，1081，985，719。1HNMR(500MHz，CDCl3，ppm)：δ7.28(d,1H)，6.83(d,1H)，6.77(d,1H)，3.74(t,1H,J＝8Hz)，2.91～1.05(t,79H)，0.89(t,3H)，0.77(s,3H)。13CNMR(125MHz，CDCl3，ppm)：δ172.64，148.53，137.13，126.91，122.37，118.64，81.93，52.83，51.11，46.48，43.34，41.68，38.24，36.89，34.50，33.15，31.94，30.56，29.94，29.86，29.71，29.67，29.63，29.62，29.51，29.48，29.37，29.35，29.27，29.17，29.13，28.81，28.23，27.12，25.70，25.01，24.88，23.16，22.66，14.50，14.01，11.50。實(shí)施例4化合物Ⅳ的合成及結(jié)構(gòu)確認(rèn)將3g(4.95mmol)氟維司群加入250mL圓底燒瓶中，加入160mL二氯甲烷攪拌溶解，然后順次加入0.0822g(0.66mmol)DMAP、1.44g(5.05mmol)異硬脂酸、1.02g(4.98mmol)DCC，保持室溫(例如，20±5℃)攪拌反應(yīng)48小時(shí)后，中止反應(yīng)。將反應(yīng)液參照實(shí)施例2中后處理方法處理，得為無(wú)色膠狀物1.0028g(HPLC測(cè)定純度為99.312％)(方法參照實(shí)施例3)，即化合物Ⅳ，摩爾收率23.2％。IR(cm-1)：3396，2928，2866,1748，1494，1466，1364，1198，1149，1121，1058，1017，984,720。1HNMR(500MHz，CDCl3，ppm)：δ7.28(s,1H)，6.83(d,1H)，6.76(s,1H)，3.74(t,1H,J＝8Hz)，2.35-1.03(t,71H)，1.09-0.94(t,3H)，0.89(s,3H)，0.77(s,3H)。13CNMR(125MHz,CDCl3，ppm)：δ171.15，148.60，137.03，126.88，122.45，118.72，81.94，53.34，53.04，52.82，51.39，50.96，48.46，48.39，48.32，46.48，43.33，41.68，3...