本發(fā)明涉及一類偕胺肟類化合物及其制備方法和用途。

背景技術(shù)：

組蛋白特異性去乙酰化酶1(lysine-specific demethylase1，LSD1)是最早發(fā)現(xiàn)的組蛋白去甲基酶，它對(duì)特異性甲基化組蛋白進(jìn)行去甲基化修飾，逆轉(zhuǎn)組蛋白氨酸甲基化修飾。LSD1的去甲基化修飾作用不僅局限于組蛋白的特異性賴氨酸，它對(duì)某些非組蛋白賴氨酸具有同樣的特異性去甲基化修飾作用，從而調(diào)節(jié)其功能和狀態(tài)。其中，以轉(zhuǎn)錄因子E2F1和p53最具代表性。

組蛋白甲基化修飾是組蛋白翻譯后修飾的一種形式，這種修飾方式發(fā)生于組蛋白尾部及球部的賴氨酸和精氨酸上。賴氨酸可以有單甲基化(me1)、雙甲基化(me2)及三甲基化(me3)3種修飾狀態(tài)，賴氨酸甲基化修飾后可以激活或抑制基因轉(zhuǎn)錄，它的作用與甲基化的賴氨酸殘基部位及修飾狀態(tài)有關(guān)，如組蛋白H3K4甲基化修飾激活基因轉(zhuǎn)錄，而H3K9甲基化修飾則抑制基因轉(zhuǎn)錄。能使組蛋白甲基化的酶非常復(fù)雜，在哺乳動(dòng)物中主要的是SET家族和DOT1家族。由于組蛋白經(jīng)甲基化修飾后，其半壽期與組蛋白自身的半壽期非常接近，因此，過(guò)去一直認(rèn)為，組蛋白甲基化是一個(gè)穩(wěn)定和不可逆轉(zhuǎn)的過(guò)程。但是隨著對(duì)LSD1的深入研究，開始意識(shí)到組蛋白甲基化修飾是一個(gè)可逆的和高度動(dòng)態(tài)的過(guò)程。

LSD1是一種黃素依賴性胺，早期研究表明，它可以特異性地對(duì)組蛋白H3K4 me1和組蛋白H3K4 me2進(jìn)行脫甲基作用，并通過(guò)胺氧化作用形成亞胺中間體，同時(shí)伴有黃素輔助因子的減少。亞胺中間體通過(guò)非酶的水解過(guò)程產(chǎn)生甲醇胺，它很不穩(wěn)定，很快降解釋放出甲醛和新生的非甲基化的賴氨酸殘基。甲基化組蛋白經(jīng)去甲基化修飾后可以逆轉(zhuǎn)其功能，例如：對(duì)轉(zhuǎn)錄有激活作用的甲基化H3K4經(jīng)LSD1去甲基化修飾后，其作用逆轉(zhuǎn)為抑制作用。

胍、雙胍、尿素和硫脲都是有效的組蛋白特異性去乙?；?抑制劑。偕胺肟作為一種組蛋白特異性去乙?；?抑制劑，則可以使H3K4甲基化發(fā)生劇烈的變化，這些偕胺肟類化合物可以作為潛在的抗腫瘤作用藥物，擁有巨大的研究?jī)r(jià)值。偕胺肟類化合物目前沒有上市的藥物，因此，探尋偕胺肟類化合物作為有效的組蛋白特異性去乙?；?抑制劑是該領(lǐng)域工作者重要的科研項(xiàng)目。如能成功，實(shí)對(duì)抗癌藥物的開發(fā)具有深長(zhǎng)和重要意義，同時(shí)帶來(lái)了巨大的國(guó)民經(jīng)濟(jì)價(jià)值。

本發(fā)明提供了如通式(Ⅰ)所示的偕胺肟類化合物，實(shí)驗(yàn)證明其對(duì)多種癌細(xì)胞均具有強(qiáng)大的抑制增殖的能力,對(duì)患有癌癥的病人可有優(yōu)良的治療效果。本發(fā)明提供了一系列的偕胺肟類化合物，本發(fā)明所提供的具有優(yōu)良抗癌細(xì)胞增殖的偕胺肟類化合物在以前專利中從未被提及或公開過(guò)。

本發(fā)明提供一種以三乙胺為催化劑，三步合成含有雜環(huán)的偕胺肟化合物的新方法。為合成抗癌化合物提供了潛在的價(jià)值。

本發(fā)明中所引述的文獻(xiàn)、著作、專利和專利申請(qǐng)公開書，其中全部或局部都明確地和獨(dú)立地都在本專利申請(qǐng)書引用參考。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明涉及一類偕胺肟的設(shè)計(jì)與合成，為了克服現(xiàn)有技術(shù)的上述不足，本發(fā)明提供一種藥效活性優(yōu)異的偕胺肟類化合物。本發(fā)明解決的另一技術(shù)問(wèn)題是提供上述偕胺肟類化合物的制備方法。本發(fā)明之所以能夠解決上述問(wèn)題乃是通過(guò)以下技術(shù)方案給予實(shí)現(xiàn)：

一種偕胺肟類化合物，其特征在于下列通式(Ⅰ)所示的結(jié)構(gòu)：

其中n為1至6；R為烷基或被取代的烷基。

A選自：氫，氯，溴，碘，羥基，烷基，烷環(huán)基，環(huán)烷基，氟取代烷基，氟取代烷氧基，氨基，烷基胺基，烷基羰基，烷氧基羰基，烷酰胺基，硫代烷基，硝基，氰基，芳香環(huán)基，雜環(huán)基，苯并環(huán)基，雜環(huán)并苯基，環(huán)烷氧基或烷環(huán)氧基。

B選自：氫，溴，碘，羥基，烷基，烷環(huán)基，環(huán)烷基，氟取代烷基，氟取代烷氧基，氨基，烷基胺基，烷基羰基，烷氧基羰基，烷酰胺基，硫代烷基，硝基，氰基，芳香環(huán)基，雜環(huán)基，苯并環(huán)基，雜環(huán)并苯基，環(huán)烷氧基或烷環(huán)氧基。

作為一種優(yōu)選方案，本發(fā)明的偕胺肟類化合物選自下列在通式(Ⅰ)中的芳香苯環(huán)基的結(jié)構(gòu)：

作為一種優(yōu)選方案，所述的偕胺肟類化合物與無(wú)機(jī)酸、有機(jī)酸、無(wú)機(jī)堿或有機(jī)堿通過(guò)化學(xué)反應(yīng)形成的鹽，與水或溶劑形成水合物或溶劑合物。

作為一種最優(yōu)選方案，所述的無(wú)機(jī)或有機(jī)酸選自：鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、硝酸、碳酸、磷酸、高氯酸、醋酸、檸檬酸、草酸、乳酸、蘋果酸、水楊酸、酒石酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、取代的苯磺酸、異煙酸、油酸、鞣酸、泛酸、抗壞血酸、丁二酸、馬來(lái)酸、龍膽酸、富馬酸、葡萄糖酸、糖醛酸、葡萄糖二酸、蔗糖酸、甲酸、苯甲酸、谷氨酸、雙羥萘酸或山梨酸；所述的無(wú)機(jī)或有機(jī)堿選自：氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鋰、氫氧化鐵、氫氧化鈣、氫氧化鋇、氫氧化鋁、氫氧化鎂、氫氧化鋅、氨水、氫氧化有機(jī)季銨鹽、碳酸鈉、碳酸鋰、碳酸鈣、碳酸鋇、碳酸鎂、碳酸化有機(jī)季銨鹽、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、碳酸氫鋰、碳酸氫鈣、碳酸氫鋇、碳酸氫鎂、或碳酸氫化有機(jī)季銨鹽。

作為一種最優(yōu)選方案，所述的溶劑合物是指所述的偕胺肟類化合物與化學(xué)上常用的溶劑以共價(jià)鍵、氫鍵、離子鍵、范德華力、絡(luò)合力或包合形成的穩(wěn)定物質(zhì)。

本發(fā)明還公開了一種制備本發(fā)明所述的偕胺肟通式(Ⅰ)化合物的方法，它是由下列步驟制備而得到的：

步驟(1):

步驟(2):

步驟(3):

其中R為烷基或取代的烷基，n為1至6；A和B獨(dú)立地選自氫，氟,氯,溴，碘，羥基，烷基，烷環(huán)基，環(huán)烷基，氟取代烷基，氟取代烷氧基，氨基，烷基胺基，烷基羰基，烷氧基羰基，烷酰胺基，硫代烷基，硝基，氰基，芳香環(huán)基，雜環(huán)基，苯并環(huán)基，雜環(huán)并苯基，烷氧基，環(huán)烷氧基，或烷環(huán)氧基。

上述化合物(Ⅰ)由下列步驟制備而成。

步驟(1)：在三乙胺作用化下，將通式(Ⅱ)化合物與通式(Ⅲ)化合物以醇作溶劑進(jìn)行反應(yīng)，從而制備化合物(Ⅳ)；其中其中所述的反應(yīng)時(shí)間是2至4小時(shí)，溫度為80℃至90℃；

步驟(2)：在碘化鉀、碳酸鉀催化下，將步驟(1)所得產(chǎn)物(IV)與通式(V)化合物以丁酮作溶劑進(jìn)行反應(yīng)，從而制備化合物(VI)；反應(yīng)時(shí)間是3至6小時(shí)，溫度為90℃至100℃。

步驟(3)：將步驟(2)所得產(chǎn)物(VI)溶于乙醇中，在30℃至50℃下攪拌，用恒壓滴液漏斗緩慢加入50％的羥胺水溶液；

本發(fā)明在步驟1和3中所述作溶劑的ROH[醇]選自甲醇,乙醇,丙醇,異丙醇,丁醇,異丁醇,戊醇，異戊醇，乙二醇、丙二醇、聚乙二醇或丙酮。優(yōu)選溶劑為CH₃CH₂OH【乙醇】。

本發(fā)明所述的化合物(Ⅱ)與三乙胺的摩爾之比為1：(1.00～2.00)；優(yōu)化比為1比2.00。

本發(fā)明所述的化合物(Ⅱ)與化合物(Ⅲ)的摩爾比為1：(1～1.2)；優(yōu)選比為1比1.2。

本發(fā)明所述的化合物(IV)與碘化鉀，碳酸鉀的摩爾之比為1:1:2；其中所述的化合物(VI)與化合物(V)的摩爾比為1：(1～1.3)；

本發(fā)明所述的產(chǎn)物(VI)與NH₂OH的摩爾比為1:(1～20)。

下列化合物為本發(fā)明合成其中一部分的偕胺肟化合物：

表I本發(fā)明合成其中一部分的偕胺肟化合物

具體實(shí)施方式

通過(guò)以下的具體實(shí)施方式，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)解釋及展述，使本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員能夠更加容易地理解本發(fā)明，但不應(yīng)該將此理解為本發(fā)明所述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例及限制本發(fā)明的任何或所有權(quán)利，更不應(yīng)該背離本發(fā)明的精神。

偕胺肟化合物實(shí)施例1：[化合物101]

(Z)-2-((3-乙基-7-甲氧基-4-氧代-3，4-二氫-喹唑啉-2-基)硫基)-N’-羥基乙酰亞胺酰胺

步驟(1)：稱量2-氨基-4-甲氧基苯甲酸1.20g(7.2mmol)，異硫氰酸乙酯0.63g(7.2mmol),，三乙胺2.4ml置于100ml三口圓底燒瓶，加入35ml乙醇，氮?dú)獗Ｗo(hù)，磁力攪拌，油浴加熱至乙醇回流，反應(yīng)時(shí)間為2h，期間用薄層層析板跟蹤反應(yīng)，展開劑為石油醚：乙酸乙酯＝2:1。反應(yīng)完成后冷卻至室溫，用砂芯漏斗抽真空過(guò)濾得固體，并用冰乙醇對(duì)固體進(jìn)行清洗，抽干后再用石油醚清洗固體并將固體抽干。最終得到干凈的固體；

步驟(2)：稱量第一步反應(yīng)所得的產(chǎn)物1g(4.23mmol)，溴乙腈0.66g(5.5mmol),碳酸鉀1.17g(8.5mmol),碘化鉀0.7g(4.23mmol)置于100ml三口圓底燒瓶，加入30ml丁酮，氮?dú)獗Ｗo(hù)，磁力攪拌，油浴加熱至96℃，丁酮回流，反應(yīng)2h，期間用薄層層析板跟蹤反應(yīng)，展開劑為石油醚：乙酸乙酯＝3:1。反應(yīng)完成后，旋蒸丁酮，加水?dāng)嚢柽^(guò)夜，次日用砂芯漏斗抽真空過(guò)濾得固體，并用石油醚對(duì)固體進(jìn)行清洗，抽干后再用石油醚清洗固體并將固體抽干。最終得到干凈的固體；

步驟(3)：稱量第二步反應(yīng)得到的產(chǎn)物1g(3.63mmol)置于100ml三口圓底燒瓶，加入10ml乙醇，攪拌溶解。用恒壓滴液漏斗緩慢地加入50％羥胺水溶液0.6g(1.82mmol,磁力攪拌，常溫反應(yīng)，反應(yīng)1h，期間用薄層層析板跟蹤反應(yīng)，展開劑為石油醚:乙酸乙酯＝1:2。反應(yīng)完成后，用砂芯漏斗抽真空過(guò)濾得固體，并用石油醚對(duì)固體進(jìn)行清洗，抽干后再用石油醚清洗固體并將固體抽干。最終得到干凈的固體；HRMS(ESI)：C₁₃H₆N₄O₃S的m/z(M+H)+計(jì)算質(zhì)量值為309.1022.實(shí)驗(yàn)值為:309.1027。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝9.29(1H,s),7.97(1H,d,J＝9.14Hz),7.02(1H,d,J＝8.95Hz),6.97(1H,s),5.69(2H,s),4.07(2H,m),3.96(2H,s),3.89(3H,s),1.25(3H,t,J＝7.05Hz)；

偕胺肟實(shí)施例2:[化合物109]

(Z)7-((3-乙基-7-氟-4-氧代-3，4-二氫-喹唑啉-2-基)硫基)-N’-羥基庚酰亞胺酰胺的制備。

步驟(1)：稱量2-氨基-4-氟苯甲酸1.55g(10mmol)，異硫氰酸乙酯0.87g(10mmol)，三乙胺3.10ml置于100ml三口圓底燒瓶，加入35ml乙醇，氮?dú)獗Ｗo(hù)，磁力攪拌，油浴加熱至乙醇回流，反應(yīng)時(shí)間為2h，期間用薄層層析板跟蹤反應(yīng)，展開劑為石油醚：乙酸乙酯＝2:1。反應(yīng)完成后冷卻至室溫，用砂芯漏斗抽真空過(guò)濾得固體，并用冰乙醇對(duì)固體進(jìn)行清洗，抽干后再用石油醚清洗固體并將固體抽干。最終得到干凈的固體；

步驟(2)：稱量第一步反應(yīng)所得的產(chǎn)物1g(4.46mmol)，溴庚腈1.10g(5.80mmol),碳酸鉀1.23g(8.92mmol),碘化鉀0.74g(4.46mmol)置于100ml三口圓底燒瓶，加入30ml丁酮，氮?dú)獗Ｗo(hù)，磁力攪拌，油浴加熱至96℃，丁酮回流，反應(yīng)2h，期間用薄層層析板跟蹤反應(yīng)，展開劑為石油醚：乙酸乙酯＝3:1。反應(yīng)完成后，旋蒸丁酮，加水?dāng)嚢柽^(guò)夜，次日用砂芯漏斗抽真空過(guò)濾得固體，并用石油醚對(duì)固體進(jìn)行清洗，抽干后再用石油醚清洗固體并將固體抽干。最終得到干凈的固體；

步驟(3)：稱量第二步反應(yīng)得到的產(chǎn)物1g(3.00mmol)置于100ml三口圓底燒瓶，加入10ml乙醇，攪拌溶解。用恒壓滴液漏斗緩慢地加入50％羥胺水溶液1.98g(60mmol),磁力攪拌，常溫反應(yīng)，反應(yīng)12h，期間用薄層層析板跟蹤反應(yīng)，展開劑為石油醚:乙酸乙酯＝1:2。反應(yīng)完成后，用砂芯漏斗抽真空過(guò)濾得固體，并用石油醚對(duì)固體進(jìn)行清洗，抽干后再用石油醚清洗固體并將固體抽干后，用乙腈進(jìn)行重結(jié)晶，最終得到干凈的固體F109；HRMS(ESI)：C₁₇H₂₃FN₄O₂S的m/z(M+H)+計(jì)算質(zhì)量值為367.1605.實(shí)驗(yàn)值為:367.1606.¹H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝8.67(1H,s),8.12(1H,t,J＝8.50Hz),7.29(2H,t,J＝7.83Hz),5.31(2H,s),4.08(2H,m),3.27(2H,t,J＝6.94Hz),1.95(2H,t,J＝6.94Hz),1.72(2H,m),1.47(4H,m),1.33(2H,m),1.26(3H,t,J＝6.49Hz)。

異羥肟酸實(shí)施例3:[化合物113]

(Z)7-((3-乙基-7-氟-4-氧代-3，4-二氫-喹唑啉-2-基)硫基)-N’-羥基庚酰亞胺酰胺的制備。

步驟(1)：稱量2-氨基-4-氯苯甲酸3.00g(17.50mmol)，異硫氰酸乙酯1.50g(17.50mmol)，三乙胺6.0ml置于100ml三口圓底燒瓶，加入35ml乙醇，氮?dú)獗Ｗo(hù)，磁力攪拌，油浴加熱至乙醇回流，反應(yīng)時(shí)間為2h，期間用薄層層析板跟蹤反應(yīng)，展開劑為石油醚：乙酸乙酯＝2:1。反應(yīng)完成后冷卻至室溫，用砂芯漏斗抽真空過(guò)濾得固體，并用冰乙醇對(duì)固體進(jìn)行清洗，抽干后再用石油醚清洗固體并將固體抽干。最終得到干凈的固體；

步驟(2)：稱量第一步反應(yīng)所得的產(chǎn)物1g(4.15mmol)，溴庚腈1.03g(5.40mmol),碳酸鉀1.15g(8.30mmol),碘化鉀0.69g(4.15mmol)置于100ml三口圓底燒瓶，加入30ml丁酮，氮?dú)獗Ｗo(hù)，磁力攪拌，油浴加熱至96℃，丁酮回流，反應(yīng)2h，期間用薄層層析板跟蹤反應(yīng)，展開劑為石油醚：乙酸乙酯＝3:1。反應(yīng)完成后，旋蒸丁酮，加水?dāng)嚢柽^(guò)夜，次日用砂芯漏斗抽真空過(guò)濾得固體，并用石油醚對(duì)固體進(jìn)行清洗，抽干后再用石油醚清洗固體并將固體抽干。最終得到干凈的固體；

步驟(3)：稱量第二步反應(yīng)得到的產(chǎn)物1g(2.86mmol)置于100ml三口圓底燒瓶，加入10ml乙醇，攪拌溶解。用恒壓滴液漏斗緩慢地加入50％羥胺水溶液1.89g(57.15mmol),磁力攪拌，常溫反應(yīng)，反應(yīng)12h，期間用薄層層析板跟蹤反應(yīng)，展開劑為石油醚:乙酸乙酯＝1:2。反應(yīng)完成后，用砂芯漏斗抽真空過(guò)濾得固體，并用石油醚對(duì)固體進(jìn)行清洗，抽干后再用石油醚清洗固體并將固體抽干后，用乙腈進(jìn)行重結(jié)晶，最終得到干凈的固體F113。HRMS(ESI)：C₁₇H₂₃ClN₄O₂S的m/z(M+H)+計(jì)算質(zhì)量值為383.1309.實(shí)驗(yàn)值為:383.1309.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝8.67(1H,s),8.05(1H,d,J＝8.76Hz),7.56(1H,s),7.46(1H,d,J＝8.38Hz),5.30(2H,s),4.08(2H,m),3.26(2H,t,J＝7.24Hz),1.95(2H,t,J＝7.62Hz),1.72(2H,m),1.47(4H,m),1.33(2H,m),1.26(3H,t,J＝6.86Hz)。

＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝

其它化合物制備方法與以上實(shí)例相似。

偕胺肟F102：

HRMS(ESI)：C₁₆H₂₂N₄O₃S的m/z(M+H)+計(jì)算質(zhì)量值為351.1492實(shí)驗(yàn)值為:351.1492.實(shí)驗(yàn)值為:351.1500。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝8.72(1H,s),7.96(1H,d,J＝8.95Hz),7.00(1H,d,J＝8.76Hz),6.95(1H,s),5.35(2H,s),4.07(2H,m),3.89(3H,s),3.29(2H,t,J＝6.47Hz),2.02(2H,t,J＝6.86Hz),1.70(4H,m),1.26(3H,t,J＝6.86Hz).

偕胺肟F103：

HRMS(ESI)：C₁₇H₂₄N₄O₃S的m/z(M+H)+計(jì)算質(zhì)量值為365.1648實(shí)驗(yàn)值為:365.1650.1H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝8.68(1H,s),7.96(1H,d,J＝9.25Hz),7.00(1H,d,J＝8.59Hz),6.95(1H,s),5.32(2H,s),4.07(2H,m),3.88(3H,s),3.27(2H,t,J＝7.60Hz),1.99(2H,t,J＝7.27Hz),1.73(2H,\m),1.57(2H,m),1.44(2H,m),1.25(3H,t,J＝6.77Hz)；

偕胺肟F104:

HRMS(ESI)：C₁₈H₂₆N₄O₃S的m/z(M+H)+計(jì)算質(zhì)量值為379.1808.實(shí)驗(yàn)值為379.1805.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝8.66(1H,s),7.96(1H,d,J＝8.95Hz),7.00(1H,d,J＝8.57Hz),6.93(1H,s),5.30(2H,s),4.07(2H,m),3.89(3H,s),3.28(2H,t,J＝7.43Hz),1.95(2H,t,J＝7.43Hz),1.73(2H,m),1.48(4H,m),1.33(2H,m),1.25(3H,t,J＝6.86Hz)；

偕胺肟F105:

HRMS(ESI)：C₁₅H₂₀N₄O₃S的m/z(M+H)+計(jì)算質(zhì)量值為337.1335。實(shí)驗(yàn)值為337.1329。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝8.72(1H,s),7.96(1H,d,J＝8.66Hz),7.00(1H,d,J＝9.14Hz),6.95(1H,s),5.35(2H,s),3.89(3H,s),3.47(3H,s),3.28(2H,t,J＝6.47Hz),2.03(2H,d,J＝7.62Hz),1.70(4H,m)；

偕胺肟F106:

HRMS(ESI)：C₁₂H₁₃FN₄O₂S的m/z(M+H)+計(jì)算質(zhì)量值為297.0822。實(shí)驗(yàn)值為297.0820。¹H NMR(400MHz,,DMSOd-₆):δ＝9.31(1H,s),8.13(1H,t,J＝7.72Hz),7.32(2H,t,J＝9.12Hz),5.69(2H,s),4.09(2H,m),3.96(2H,s),1.27(3H,t,J＝7.02Hz)。

偕胺肟F107:

HRMS(ESI)：C₁₅H₁₉FN₄O₂S的m/z(M+H)+計(jì)算質(zhì)量值為339.1292。實(shí)驗(yàn)值為339.1292。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝8.72(1H,s),8.12(1H,t,J＝8.08Hz),7.29(2H,t,J＝9.27Hz),5.36(2H,s),4.08(2H,m),3.28(2H,t,J＝6.66Hz),2.03(2H,t,J＝7.13Hz),1.70(4H,m),1.26(3H,t,J＝6.66Hz)。

偕胺肟F108：

HRMS(ESI)：C₁₆H₂₁FN₄O₂S的m/z(M+H)+計(jì)算質(zhì)量值為353.1448。實(shí)驗(yàn)值為353.1452。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝8.69(1H,s),8.12(1H,t,J＝7.38Hz),7.30(2H,t,J＝9.17Hz),5.32(2H,s),4.08(2H,m),3.27(2H,t,J＝7.16Hz),1.97(2H,t,J＝7.16Hz),1.73(2H,m),1.55(2H,m),1.44(2H,m),1.26(3H,t,J＝6.94Hz)；

偕胺肟F110:

HRMS(ESI)：C₁₂H₁₃ClN₄O₂S的m/z(M+H)+計(jì)算質(zhì)量值為313.0527。實(shí)驗(yàn)值為:313.0530。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝9.31(1H,s),8.07(1H,d,J＝8.74Hz),7.62(1H,s),7.49(1H,d,J＝8.74Hz),5.68(2H,s),4.08(2H,m),3.97(2H,s),1.27(3H,t,J＝6.84Hz)。

偕胺肟F111:

HRMS(ESI)：C₁₅H₁₉ClN₄O₂S的m/z(M+H)+計(jì)算質(zhì)量值為355.0996。實(shí)驗(yàn)值為355.0999(M+H)⁺；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆₆):δ＝8.71(1H,s),8.05(1H,d,J＝8.36Hz),7.57(1H,d,J＝2.09Hz),7.45(1H,m),5.35(2H,s),4.07(2H,m),3.28(2H,t,J＝6.65Hz),2.03(2H,t,J＝7.41Hz),1.70(4H,m),1.26(3H,t,J＝6.84Hz).

偕胺肟F112:

HRMS(ESI)：C₁₆H₂₁ClN₄O₂S的m/z(M+H)+計(jì)算質(zhì)量值為369.1153。實(shí)驗(yàn)值為:369.1151。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆₆):δ＝8.68(1H,s),7.97(1H,d,J＝8.57Hz),7.74(1H,s),7.59(1H,d,J＝8.60Hz),5.33(2H,s),4.07(2H,m),3.26(2H,t,J＝7.30Hz),1.98(2H,t,J＝7.17Hz),1.73(2H,m),1.56(2H,m),1.43(2H,m),1.26(3H,t,J＝7.04Hz).

＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝

偕胺肟F114:

HRMS(ESI)：C₁₂H₁₃BrN₄O₂S的m/z(M+H)+計(jì)算質(zhì)量值為357.0022。實(shí)驗(yàn)值為:357.0027,358.0053.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝9.30(1H,s),7.98(1H,d,J＝8.36Hz),7.76(1H,s),7.60(1H,d,J＝8.33Hz),5.67(2H,s),4.08(2H,m),3.97(2H,s),1.27(3H,t,J＝6.94Hz)。

偕胺肟F115:

HRMS(ESI)：C₁₅H₁₉BrN₄O₂S的m/z(M+H)+計(jì)算質(zhì)量值為399.0491。實(shí)驗(yàn)值為399.0497，400.0527.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝8.72(1H,s),7.95(1H,d,J＝8.68Hz),7.71(1H,s),7.57(1H,d,J＝8.68Hz),5.36(2H,s),4.07(2H,m),3.27(2H,t,J＝6.73Hz),2.04(2H,t,J＝7.44Hz),1.70(4H,m),1.26(3H,t,J＝7.26Hz).

偕胺肟F116:

HRMS(ESI)：C₁₆H₂₁BrN₄O₂S的m/z(M+H)+計(jì)算質(zhì)量值為413.0648。實(shí)驗(yàn)值為413.0649，414.0677；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝8.68(1H,s),7.97(1H,d,J＝8.59Hz),7.73(1H,s),7.59(1H,d,J＝8.59Hz),5.32(2H,s),4.08(2H,m),3.26(2H,t,J＝6.68Hz),1.98(2H,t,J＝7.64Hz),1.73(2H,m),1.55(2H,m),1.44(2H,m),1.26(3H,t,J＝6.68Hz).

偕胺肟F117:

HRMS(ESI)：C₁₇H₂₃BrN₄O₂S的m/z(M+H)+計(jì)算質(zhì)量值為427.0804。實(shí)驗(yàn)值為427.0810，428.0833.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝8.68(1H,s),7.96(1H,d,J＝8.57Hz),7.70(1H,s),7.58(1H,d,J＝8.57Hz),5.31(2H,s),4.08(2H,m),3.26(2H,t,J＝7.41Hz),1.96(2H,t,J＝7.41Hz),1.72(2H,m),1.47(4H,m),1.33(2H,m),1.26(3H,t,J＝6.95Hz)；

實(shí)施例4：

(1)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞系，選用四種癌細(xì)胞：人皮膚黑色素瘤細(xì)胞(A375)，人肺癌細(xì)胞(A549)，人胃癌細(xì)胞(MGC80-3)，人肝癌細(xì)胞(HepG2)，其中人皮膚黑色素瘤細(xì)胞(A375)和人肝癌細(xì)胞(HepG2)在含10％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基中，用0.25％胰蛋白酶常規(guī)消化后傳代。人肺癌細(xì)胞(A549)和人胃癌細(xì)胞(MGC80-3)在含10％胎牛血清的RPMI-1640(HyClone)培養(yǎng)基中，用0.25％胰蛋白酶常規(guī)消化后傳代。

(2)將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的癌細(xì)胞消化成單個(gè)細(xì)胞后，以4×10⁴個(gè)/ml的密度接種于96孔板中，每孔加入0.1ml的細(xì)胞懸液，在含5％CO2的37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12小時(shí)，將本發(fā)明的偕胺肟及對(duì)照藥伏立諾他(SAHA)均作用于同一細(xì)胞，每個(gè)濃度設(shè)置3個(gè)復(fù)孔，待細(xì)胞貼壁后，加偕胺肟或SAHA處理，針對(duì)癌細(xì)胞給不同濃度的藥，72h后，各孔加入10μLCCK-8后，在含5％CO₂的37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1小時(shí)，用酶標(biāo)儀檢測(cè)490nm處的吸光度值并計(jì)算IC₅₀值。

表Ⅱ：偕胺肟化合物對(duì)不同癌細(xì)胞的抑制度

表Ⅱ的結(jié)果表明：不同結(jié)構(gòu)的偕胺肟化合物對(duì)不同癌細(xì)胞增殖的抑制能力不同。

(1)對(duì)于人皮膚黑色素瘤細(xì)胞：F104、F113、F117的抑制作用優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照化合物伏立諾他(SAHA)。

(2)對(duì)于人肺癌細(xì)胞：F103、F104的抑制作用優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照化合物SAHA。

(3)對(duì)于肝癌細(xì)胞：對(duì)于人肝癌細(xì)胞HepG2，F(xiàn)104、F113、F117的抑制作用優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照化合物SAHA，同時(shí)如上述對(duì)人皮膚黑色素瘤細(xì)胞和人肺癌細(xì)胞均具有明顯抑制效果的F104,對(duì)于人肝癌細(xì)胞HepG2的抑制效果也同樣地均明顯優(yōu)于對(duì)照化合物伏立諾他(SAHA)。

根據(jù)表Ⅱ的結(jié)果，本發(fā)明提供的偕胺肟化合物中不乏對(duì)人皮膚黑色素瘤細(xì)胞(A375)，人肺癌細(xì)胞(A549)及人肝癌細(xì)胞(HepG2)的抑制作用均優(yōu)于對(duì)照化合物伏立諾他(SAHA)的偕胺肟化合物，本發(fā)明特優(yōu)選F104和F117兩個(gè)偕胺肟化合物與已上市的藥物西達(dá)本胺和順鉑在人皮膚黑色素瘤細(xì)胞A375中進(jìn)行陽(yáng)性對(duì)照，結(jié)果列于表III。

表III：偕胺肟化合物及對(duì)照藥對(duì)A375細(xì)胞的抑制度

表III結(jié)果表明，所選的F104、F117對(duì)人皮膚黑色素瘤A375其抑制作用皆優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照化合物西達(dá)本胺和順鉑。表Ⅱ中，F(xiàn)104、F117對(duì)對(duì)人皮膚黑色素瘤A375其抑制作用優(yōu)于伏立諾他(SAHA)。