本發(fā)明涉及含2(5H)-呋喃酮結(jié)構單元的抗腫瘤活性化合物制備技術領域，具體涉及一類雙呋喃酮基聯(lián)苯胺衍生物及其在制備抗腫瘤藥物中的應用。

背景技術：

許多聯(lián)苯類化合物具有抗菌、抗癌等生物活性，使聯(lián)苯結(jié)構單元在藥物分子的設計與合成中最近越來越受到重視。許多含有的2(5H)-呋喃酮結(jié)構單元的天然產(chǎn)物具有抗腫瘤、抗菌等生物活性，基于簡單2(5H)-呋喃酮類中間體利用簡潔的反應合成新的具有抗腫瘤活性化合物，尋找和開發(fā)高效低毒的抗腫瘤藥物，一直是藥物化學家們的努力目標。

但是，目前僅有極少的文獻報道將2(5H)-呋喃酮結(jié)構與聯(lián)苯結(jié)構同時構建于潛在生物活性分子中的研究(Guerrero,M.D.；Aquino,M.；Bruno,I.；Terencio,M.C.；Paya,M.；Riccio,R.；Gomez-Paloma,L.J.Med.Chem.2007,50,2176；關麗濤,莫廣珍,吳彥城,梁欣榆,羅俏芳,汪朝陽,有機化學,2015,35,1081；葉斌,莫廣珍,關麗濤,吳彥城,陳任宏,汪朝陽,有機化學,2015,35,2420)，并且報道其生物活性的更少。

鑒于此，本申請以3,4-二鹵-5-取代-2(5H)-呋喃酮、聯(lián)苯胺等為原料，通過簡單易行的Michael加成-消除反應，首次合成了系列具有一定抗腫瘤活性的雙呋喃酮基聯(lián)苯胺衍生物，這類新化合物的抗腫瘤活性未見報道。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一類雙呋喃酮基聯(lián)苯胺衍生物及其在抗腫瘤藥物中的應用。

本發(fā)明雙呋喃酮基聯(lián)苯胺衍生物，具有如下結(jié)構式：

式Ⅰ中，X為鹵素Br或Cl；R¹為C₁-C₃烷基或乙?；?/p>

進一步地，所述雙呋喃酮基聯(lián)苯胺衍生物通過Michael加成-消除反應合成，反應式如下：

進一步地，所述反應的溫度為65～85℃，反應時間為24～48小時。

所述的雙呋喃酮基聯(lián)苯胺衍生物應用于制備抗腫瘤藥物。

進一步地，所述的腫瘤包括腦膠質(zhì)瘤、食管癌、乳腺癌、肝癌或鼻咽癌。

進一步地，所述抗腫瘤藥物由所述的雙呋喃酮基聯(lián)苯胺衍生物以及藥學上可接受的輔助劑組成。

進一步地，所述抗腫瘤藥物為片劑、丸劑、膠囊劑、懸浮劑、乳劑或注射劑。

進一步地，所述抗腫瘤藥物的給藥途徑包括口服、靜脈、肌肉或皮膚給藥。

與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明具有如下有益效果

本發(fā)明的雙呋喃酮基聯(lián)苯胺衍生物對腦膠質(zhì)瘤、食管癌、乳腺癌、肝癌及鼻咽癌等腫瘤細胞有明顯的抑制作用，特別是對腦膠質(zhì)瘤細胞C6和乳腺癌細胞MCF-7具有很強的抑制活性，IC₅₀值分別可達12.1±0.9μM和20.1±1.9μM。

具體實施方式

以下結(jié)合實例對本發(fā)明的具體實施作進一步說明，但本發(fā)明的實施和保護范圍不限于此。

本發(fā)明實施例中雙呋喃酮基聯(lián)苯胺衍生物通過Michael加成-消除反應合成，反應式如下：

實施例1

化合物1的合成

如反應式Ⅱ，將1.50mol 5-甲氧基-3,4-二溴-2(5H)-呋喃酮和0.50mol聯(lián)苯胺加入到4mL四氫呋喃中，再加入6當量的堿KF，N₂保護下85℃反應回流36小時；反應完畢，用飽和食鹽水和二氯甲烷處理，得到的有機層用蒸餾水洗滌、干燥后，減壓旋干溶劑，殘余物經(jīng)柱層析分離，得到目標化合物1，其結(jié)構式與表征如下：

淡黃色粘稠固體,60.9％；UV-vis(CH₂Cl₂)λ_max:323.0nm；¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz),δ:3.31(s,6H,2CH₃),6.29(s,2H,2CH),7.60(d,J＝8.0Hz,4H,ArH),7.68(d,J＝8.0Hz,4H,ArH),9.79(s,2H,2NH)；¹³C NMR(DMSO-d₆,100MHz),δ:55.3,76.5,99.6,124.2,127.0,136.3,137.3,157.4,167.8；IR(film),ν,cm^-1:3265(N-H伸縮振動),3049(不飽和C-H伸縮振動),2938,2855(飽和C-H伸縮振動),1742(C＝O伸縮振動),1641(C＝C伸縮振動),1607,1503,1447,1395(苯環(huán)骨架伸縮振動),1319(C-N伸縮振動),1244,1192,1128(C-O-C伸縮振動),953(C-O-C彎曲振動),822(苯環(huán)對二取代),515(C-Br伸縮振動)；Calcd for C₂₂H₁₇Br₂N₂O₆^-([M-H]^-),m/z:564.94(100.0％),Found:564.91(100.0％)；Anal.Calcd for C₂₂H₁₈Br₂N₂O₆:C,46.67；H,3.20；N,4.95,Found:C,46.76；H,3.11；N,4.94。

實施例2

化合物2的合成

如反應式Ⅱ，將1.50mol 5-甲氧基-3,4-二氯-2(5H)-呋喃酮和0.50mol聯(lián)苯胺加入到4mL四氫呋喃中，再加入6當量的堿KF，N₂保護下75℃反應回流36小時；反應完畢，用飽和食鹽水和二氯甲烷處理，得到的有機層用蒸餾水洗滌、干燥后，減壓旋干溶劑，殘余物經(jīng)柱層析分離，得到目標化合物2，其結(jié)構式與表征如下：

淡黃色粘稠固體,50.9％；UV-vis(CH₂Cl₂)λ_max:320.0nm；¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz),δ:3.36(s,6H,2CH₃),6.30(s,2H,2CH),7.31(d,J＝8.0Hz,4H,ArH'),7.71(d,J＝8.0Hz,4H,ArH),9.92(s,2H,2NH)；¹³C NMR(DMSO-d₆,100MHz),δ:55.4,88.9,98.7,123.7,127.0,136.2,137.3,154.2,167.3；IR(film),ν,cm^-1:3265(N-H伸縮振動),3049(不飽和C-H伸縮振動),2930,2855(飽和C-H伸縮振動),1753(C＝O伸縮振動),1649(C＝C伸縮振動),1607,1503,1420(苯環(huán)骨架伸縮振動),1319(C-N伸縮振動),1256,1192,1132(C-O-C伸縮振動),957(C-O-C彎曲振動),818(苯環(huán)對二取代),743(C-Cl伸縮振動)；Calcd for C₂₂H₁₇Cl₂N₂O₆^-([M-H]^-),m/z:475.05(100.0％),Found:474.96(100.0％)；Anal.Calcd for C₂₂H₁₈Cl₂N₂O₆:C,55.36；H,3.80；N,5.87,Found:C,55.33；H,3.92；N,5.68。

實施例3

化合物3的合成

如反應式Ⅱ，將1.50mol 5-乙氧基-3,4-二溴-2(5H)-呋喃酮和0.50mol聯(lián)苯胺加入到4mL四氫呋喃中，再加入6當量的堿KF，N₂保護下75℃反應回流48小時；反應完畢，用飽和食鹽水和二氯甲烷處理，得到的有機層用蒸餾水洗滌、干燥后，減壓旋干溶劑，殘余物經(jīng)柱層析分離，得到目標化合物3，其結(jié)構式與表征如下：

淡黃色粘稠固體,53.4％；UV-vis(CH₂Cl₂)λ_max:320.0nm；¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz),δ:0.97(t,J＝8.0Hz,6H,2CH₃),3.49-3.71(m,4H,2CH₂),6.34(s,2H,2CH),7.33(d,J＝8.0Hz,4H,ArH),7.70(d,J＝8.0Hz,4H,ArH),9.75(s,2H,2NH)；¹³C NMR(DMSO-d₆,100MHz),δ:14.7,64.3,76.0,98.5,123.9,126.5,135.9,137.0,157.6,167.3；IR(film),ν,cm^-1:3265(N-H伸縮振動),3042(不飽和C-H伸縮振動),2930,2855(飽和C-H伸縮振動),1749(C＝O伸縮振動),1641(C＝C伸縮振動),1607,1503,1423(苯環(huán)骨架伸縮振動),1319(C-N伸縮振動),1244,1192,1117(C-O-C伸縮振動),953(C-O-C彎曲振動),818(苯環(huán)對二取代),515(C-Br伸縮振動)；Calcd for C₂₄H₂₁Br₂N₂O₆^-([M-H]^-),m/z:592.97(100.0％),Found:593.00(100.0％)；Anal.Calcd for C₂₄H₂₂Br₂N₂O₆:C,48.51；H,3.73；N,4.71,Found:C,48.53；H,3.81；N,4.60。

實施例4

化合物4的合成

如反應式Ⅱ，將1.50mol 5-乙氧基-3,4-二氯-2(5H)-呋喃酮和0.50mol聯(lián)苯胺加入到4mL四氫呋喃中，再加入6當量的堿KF，N₂保護下65℃反應回流24小時；反應完畢，用飽和食鹽水和二氯甲烷處理，得到的有機層用蒸餾水洗滌、干燥后，減壓旋干溶劑，殘余物經(jīng)柱層析分離，得到目標化合物4，其結(jié)構式與表征如下：

淡黃色粘稠固體,42.7％；UV-vis(CH₂Cl₂)λ_max:319.0nm；¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz),δ:0.99(t,J＝8.0Hz,6H,2CH₃),3.53-3.72(m,4H,2CH₂),6.31(s,2H,2CH),7.27(d,J＝8.0Hz,4H,ArH),7.67(d,J＝8.0Hz,4H,ArH),9.82(s,2H,2NH)；¹³C NMR(DMSO-d₆,100MHz),δ:15.2,64.9,88.7,98.1,123.9,127.0,136.2,137.5,154.8,167.3；IR(film),ν,cm^-1:3265(N-H伸縮振動),3042(不飽和C-H伸縮振動),2930,2855(飽和C-H伸縮振動),1753(C＝O伸縮振動),1645(C＝C伸縮振動),1607,1503,1423(苯環(huán)骨架伸縮振動),1319(C-N伸縮振動),1260,1196,1140(C-O-C伸縮振動),961(C-O-C彎曲振動),818(苯環(huán)對二取代),746(C-Cl伸縮振動)；Calcd for C₂₄H₂₁Cl₂N₂O₆^-([M-H]^-),m/z:503.08(100.0％),Found:503.00(100.0％)；Anal.Calcd for C₂₄H₂₂Cl₂N₂O₆:C,57.04；H,4.39；N,5.54,Found:C,57.15；H,4.40；N,5.42。

實施例5

化合物的合成

如反應式Ⅱ，將1.50mol 5-乙酰氧基-3,4-二溴-2(5H)-呋喃酮和0.50mol聯(lián)苯胺加入到4mL四氫呋喃中，再加入6當量的堿KF，N₂保護下65℃反應回流24小時；反應完畢，用飽和食鹽水和二氯甲烷處理，得到的有機層用蒸餾水洗滌、干燥后，減壓旋干溶劑，殘余物經(jīng)柱層析分離，得到目標化合物5，其結(jié)構式與表征如下：

黃色粘稠固體,47.9％；UV-vis(CH₂Cl₂)λ_max:320.0nm；¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz),δ:1.91(s,6H,2CH₃),7.14(s,2H,2CH),7.30(d,J＝8.0Hz,4H,ArH),7.69(d,J＝8.0Hz,4H,ArH),10.02(s,2H,2NH)；¹³C NMR(DMSO-d₆,100MHz),δ:20.5,75.3,90.1,124.9,127.2,136.7,136.8,157.9,167.6,169.1；IR(film),ν,cm^-1:3356(N-H伸縮振動),3042(不飽和C-H伸縮振動),2959,2930,2855(飽和C-H伸縮振動),1765(C＝O伸縮振動),1641(C＝C伸縮振動),1607,1506,1466(苯環(huán)骨架伸縮振動),1319(C-N伸縮振動),1260,1188,1045(C-O-C伸縮振動),953(C-O-C彎曲振動),818(苯環(huán)對二取代),515(C-Br伸縮振動)；Calcd for C₂₄H₁₇Br₂N₂O₈^-([M-H]^-),m/z:620.93(100.0％),Found:620.79(100.0％)；Anal.Calcd for C₂₄H₁₈Br₂N₂O₈:C,46.33；H,2.92；N,4.50,Found:C,46.40；H,2.95；N,4.41。

實施例6

抗腫瘤活性的測試

應用MTT法測試化合物1～5及陽性對照藥物順鉑對幾種腫瘤的半數(shù)抑制率(IC₅₀)，測試結(jié)果如表1所示。

表1化合物1～5及順鉑的抗腫瘤活性

由表1可知，化合物1～5對幾種腫瘤細胞顯示出明顯的抑制活性，尤其是對腦膠質(zhì)瘤細胞C6具有良好的抑制活性。其中，化合物5對腦膠質(zhì)瘤細胞C6的抑制活性優(yōu)于陽性對照藥物順鉑，對乳腺癌MCF-7的抑制活性是陽性對照藥物順鉑的4倍左右，但是對正常細胞HaCaT的毒性卻遠小于順鉑。