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一種用于檢測胰腺癌的引物組及檢測方法與流程

文檔序號:12097825閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種用于檢測胰腺癌的引物組,其特征在于,所述引物組可以包含a~i9對引物,所述引物a的正向引物如SEQ ID No.1所示,引物a的反向引物如SEQ ID No.2所示,引物b的正向引物如SEQ ID No.3所示,引物b的反向引物如SEQ ID No.4所示,引物c的正向引物如SEQ ID No.5所示,引物c的反向引物如SEQ ID No.6所示,引物d的正向引物如SEQ ID No.7所示,引物d的反向引物如SEQ ID No.8所示,引物e的正向引物如SEQ ID No.9所示,引物e的反向引物如SEQ ID No.10所示,引物f的正向引物如SEQ ID No.11所示,引物f的反向引物如SEQ ID No.12所示,引物g的正向引物如SEQ ID No.13所示,引物g的反向引物如SEQ ID No.14所示,引物h的正向引物如SEQ ID No.15所示,引物h的反向引物如SEQ ID No.16所示,引物i的正向引物如SEQ ID No.17所示,引物i的反向引物如SEQ ID No.18所示。

2.一種權利要求1所述引物組檢測胰腺癌的PCR方法,其特征在于,包括如下步驟:

(1)將權利要求1所述的9對引物分別加入到單個PCR反應管中,并均加入核酸提取物、反轉(zhuǎn)錄酶、RNA酶抑制劑、DNA聚合酶、dNTP;其中,PCR反應的每個循環(huán)的條件為94攝氏度、30s;55攝氏度、30s;72攝氏度、10s;

(2)進行反轉(zhuǎn)錄和PCR反應,用瓊脂糖凝膠電泳法進行檢測。

3.一種權利要求1所述引物組檢測胰腺癌的熒光定量PCR方法,其特征在于,包括如下步驟:

(1)將權利要求1所述的9對引物分別加入到單個PCR反應管中,并均加入核酸提取物、反轉(zhuǎn)錄酶、RNA酶抑制劑、DNA聚合酶、dNTP;分別加入2×ChamQ SYBR qPCR Master Mix,其中,PCR反應的每個循環(huán)的條件為95攝氏度、10s和60攝氏度、30s;40個循環(huán);每管設立三個復孔;

(2)進行反轉(zhuǎn)錄和PCR反應,并實時檢測熒光;

(3)根據(jù)熒光檢測結(jié)果計算出的Ct值,判斷是否有標志物靶基因表達于樣品中。

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