本發(fā)明屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域，更具體地，涉及一種喹啉類衍生物及其制備方法和在制備抗腫瘤藥物中應(yīng)用。

背景技術(shù)：

癌癥是威脅人類健康和生命安全的主要疾病之一。據(jù)統(tǒng)計(jì)，全世界每年新增癌癥患者達(dá)600萬(wàn)人左右?？拱┧幬锏难芯颗c開發(fā)一直是化學(xué)家和藥物學(xué)家關(guān)注的熱點(diǎn)，尋找高效、高選擇性、毒副作用小的抗癌藥物是藥物研究開發(fā)的重要方向之一。

以DNA為靶點(diǎn)設(shè)計(jì)合成抗癌藥物，特別是針對(duì)具有重要生理意義的癌基因c-myc啟動(dòng)子區(qū)中特殊核酸高級(jí)結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)合成小分子抑制劑，是發(fā)展新型抗癌藥物的重要方向。根據(jù)目前的報(bào)道，與c-myc基因中特殊核酸高級(jí)結(jié)構(gòu)相互作用的小分子具有以下結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：有平面的芳環(huán)結(jié)構(gòu)；一條或多條可以與G-四鏈體DNA的Loop結(jié)合的側(cè)鏈。它的抗癌作用機(jī)制主要是通過(guò)與癌基因DNA G-四鏈體結(jié)構(gòu)相互作用，抑制癌基因c-myc轉(zhuǎn)錄表達(dá)，從而抑制癌細(xì)胞的增殖。

吲哚喹啉類化合物是自然界中比較稀少的一種生物堿，具有四個(gè)平面芳環(huán)的結(jié)構(gòu)，quindoline和cryptolepine是該類化合物的典型代表，這兩種化合物分別于1977年和1929年從西非植物Cryptilepis sanguinolenta中首次分離出來(lái)。本研究小組先后報(bào)道了一系列11位氨基側(cè)鏈取代的吲哚喹啉類衍生物(J.Med.Chem.2005,48,7315-7321；J.Med.Chem.2008,51,6381-6392)通過(guò)與端粒G-四鏈體DNA相互作用抑制端粒酶活性，對(duì)多種癌細(xì)胞株具有顯著的抑制作用。

盡管吲哚喹啉類化合物的抗癌效果已經(jīng)得到了證實(shí)，但是由于目前已有的多種吲哚喹啉類化合物對(duì)抗淋巴癌特定靶點(diǎn)(c-myc啟動(dòng)子中的G-四鏈體DNA)的選擇能力仍有待提高，同時(shí)由于自然界中吲哚喹啉類化合物的資源有限，目前，吲哚喹啉類化合物在抗癌方面的應(yīng)用仍存在較大的限制。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種毒性小，選擇性高且抗癌效果好的喹啉類衍生物；

本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供上述衍生物的制備方法，以及該類衍生物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明根據(jù)一些與c-myc G-四鏈體DNA相互作用的小分子化合物(白葉藤堿衍生物)的結(jié)構(gòu)特征，在苯并呋喃喹啉為母體骨架的11位利用點(diǎn)擊化學(xué)引入含三氮唑環(huán)側(cè)鏈，得到與c-myc G-四鏈體DNA相互作用的喹啉類衍生物。

本發(fā)明的上述技術(shù)目的通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

本發(fā)明提供了一種喹啉類衍生物，所述喹啉類衍生物的結(jié)構(gòu)式如式(I)或式(II)所示，

其中，R代表羥基、苯基、取代苯基、環(huán)烷基、胺基、取代胺基、五元或六元雜環(huán)基、C_1-8烷基或取代的C_1-8烷基、鹵基或糖基；

X為N、O或S；Y為C_1-3烷基或氫，n為0～6中任意一個(gè)整數(shù)。

優(yōu)選地，R代表羥基、苯基、取代苯基、C_3-8環(huán)烷基、胺基、取代胺基、五元或六元雜環(huán)基、C_1-8烷基或取代的C_1-8烷基或糖基。

優(yōu)選地，R代表羥基、苯基、取代苯基、C_3-8環(huán)烷基、胺基、取代胺基、含氮的五元或六元雜環(huán)基、含氧的五元或六元雜環(huán)基、C_1-5烷基或取代的C_1-5烷基或糖基。

優(yōu)選地，取代基選自鹵基、羥基、氰基、C_1-5烷基、C_1-5烷氧基、硝基、胺基、C_1-6單烷基氨基、C_1-6二烷基氨基、C_5-8單環(huán)烷基氨基、C_5-6單雜環(huán)基氨基、C_5-6單芳基氨基、C_1-6烷基酰氨基、C_5-6芳基酰氨基、C_1-6烷基酰氧基、羧基、C_5-6芳香基或C_5-6雜環(huán)基。

優(yōu)選地，取代基選自C_1-5烷基、羥基或C_1-3烷基酰氧基。

優(yōu)選地，R代表N,N-二甲基胺基,N,N-二乙基胺基，氨基、嗎啡啉基，哌啶基，甲基哌嗪基，吡咯烷基，羥基，苯基，C_1-5直鏈或支鏈烷基，環(huán)戊烷基、環(huán)己烷基或糖基。

優(yōu)選地，所述糖基為β-D-核糖基、β-D-吡喃葡萄糖基、2,3,5-三-O-乙?；?β-D-核糖基或2,3,4,6-四-O-乙?；?β-D-吡喃葡萄糖。

優(yōu)選地，X為N或O；Y為甲基或氫。

本發(fā)明另外提供所述喹啉類衍生物的制備方法，當(dāng)所述喹啉類衍生物為式(I)所示結(jié)構(gòu)，且當(dāng)X為O，Y為氫時(shí)，包括如下步驟：

S1.苯氧乙酸經(jīng)氯化亞砜酰化與鄰氨基苯甲酸反應(yīng)得到化合物

S2.在多聚磷酸催化下環(huán)合得到化合物

S3.在DMF催化下與氯化亞砜進(jìn)行氯代反應(yīng)得到化合物

S4.在一水合對(duì)甲苯磺酸的催化下與炔丙胺發(fā)生取代反應(yīng)得到化合物

S5.將與疊氮類化合物N₃-R發(fā)生點(diǎn)擊反應(yīng)得到所述喹啉類衍生物

當(dāng)所述喹啉類衍生物為式(II)所示結(jié)構(gòu)，且當(dāng)X為O，Y為甲基時(shí)，包括如下步驟：

S1.與碘甲烷反應(yīng)，得到

S2.化合物與炔丙胺發(fā)生取代反應(yīng)得

SM6.將與疊氮類化合物N₃-R發(fā)生點(diǎn)擊反應(yīng)得到喹啉類衍生物

當(dāng)所述喹啉類衍生物為式(II)所示結(jié)構(gòu)，且當(dāng)X為N，Y為甲基時(shí)，包括如下步驟：

S1.與碘甲烷反應(yīng)得到

S2.化合物與炔丙胺發(fā)生取代反應(yīng)得

S3.將與疊氮類化合物N₃-R發(fā)生點(diǎn)擊反應(yīng)得到喹啉類衍生物

當(dāng)所述喹啉類衍生物為式(I)所示結(jié)構(gòu)，且當(dāng)X為N，Y為氫時(shí)，包括如下步驟：

S1.鄰氨基苯甲酸與氯乙酰氯發(fā)生取代反應(yīng)得到化合物

S2.化合物與苯胺發(fā)生取代反應(yīng)得到化合物

S3.在多聚磷酸催化下關(guān)環(huán)得到化合物

S4.用氯化亞砜氯代得到化合物

S5.在一水合對(duì)甲苯磺酸的催化下與炔丙胺發(fā)生取代反應(yīng)得到化合物

S6.與疊氮類化合物N₃-R發(fā)生點(diǎn)擊反應(yīng)得到所述喹啉類衍生物

本發(fā)明根據(jù)一些與癌基因c-myc G-四鏈體DNA結(jié)構(gòu)相互作用的小分子化合物的結(jié)構(gòu)特征，以苯并呋喃喹啉為基本母核，在母核11位引入一條側(cè)鏈，同時(shí)利用點(diǎn)擊化學(xué)在側(cè)鏈中引入三氮唑環(huán)和不同末端基團(tuán)，增強(qiáng)化合物與c-myc G-四鏈體DNA的loop的相互作用，同時(shí)提高其選擇能力，從而設(shè)計(jì)出一系列與c-myc G-四鏈體DNA相互作用的喹啉類衍生物，降低癌基因c-myc的轉(zhuǎn)錄表達(dá)水平，達(dá)到抗腫瘤作用的目的。

本發(fā)明的所提供的喹啉類衍生物與c-myc G-四鏈體DNA具有很強(qiáng)的相互作用，實(shí)驗(yàn)顯示該類衍生物能選擇性抑制癌基因c-myc的轉(zhuǎn)錄翻譯，從而抑制癌細(xì)胞的增殖和遷移，因此可用于制備抗腫瘤藥物。

進(jìn)一步地，將本發(fā)明提供的喹啉類衍生物應(yīng)用于抑制淋巴瘤細(xì)胞，采用MTT法進(jìn)行體外細(xì)胞毒測(cè)定。對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞加入所述喹啉類衍生物，結(jié)果表明本發(fā)明所述化合物在體外對(duì)人淋巴癌細(xì)胞株具有較強(qiáng)的抑制作用。因此，本發(fā)明所述的喹啉類衍生物極具有開發(fā)前景，可用于制備抗癌的藥物。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果：

1.本發(fā)明所提供的喹啉類衍生物對(duì)多種癌細(xì)胞株，特別是淋巴瘤細(xì)胞株，有顯著的增殖抑制作用，同時(shí)，可以特異性地抑制這些癌細(xì)胞株中癌基因c-myc的轉(zhuǎn)錄表達(dá)。

2.本發(fā)明的所提供的喹啉類衍生物對(duì)正常細(xì)胞毒性小，在制備抗癌藥物的應(yīng)用中安全性高。

3.本發(fā)明的所提供的喹啉類衍生物可以制備成各種劑型的抗癌藥物，具有很高的醫(yī)學(xué)價(jià)值和廣闊的市場(chǎng)前景。

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明所述化合物在Raji細(xì)胞內(nèi)對(duì)c-myc基因的轉(zhuǎn)錄效果圖。

圖2為本發(fā)明所述化合物在Raji細(xì)胞內(nèi)對(duì)c-myc基因的翻譯和c-MYC蛋白的表達(dá)效果圖。

具體實(shí)施方式

以下通過(guò)具體的實(shí)施例和附圖進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案。

除非特別說(shuō)明，本發(fā)明采用的試劑、設(shè)備和方法為本技術(shù)領(lǐng)域常規(guī)市購(gòu)的試劑、設(shè)備和常規(guī)使用的方法。

本發(fā)明所述的喹啉類衍生物的制備方法，當(dāng)X為O，Y為氫,n＝0,1,2,3時(shí)為CK系列化合物，其合成方法包括以下步驟：

實(shí)施例1：化合物S4的合成

將0.1mol苯氧乙酸溶于150mL三氯甲烷中，加入17.5mL氯化亞砜60℃回流反應(yīng)3小時(shí)后減壓旋蒸除去溶劑得到棕色液體，再加入乙腈作為溶劑后與0.1mol鄰氨基苯甲酸進(jìn)行縮合反應(yīng)，得到S1.將而后將PPA預(yù)熱至130℃加入S1進(jìn)行環(huán)合反應(yīng)，得到S2。將S2與氯化亞砜在DMF催化下80℃反應(yīng)得到化合物S3。而后于耐壓管中將2.2g一水合對(duì)甲苯磺酸加熱至120℃后加入5mmol S3，攪拌10分鐘，冷卻至室溫。加入10mmol炔丙胺，120℃反應(yīng)6小時(shí)。反應(yīng)完成后冷卻，用30mL氯仿：甲醇＝2:1溶解固體，1N NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至12，再用50mL氯仿萃取兩次，飽和氯化鈉溶液洗兩次，收集有機(jī)相，經(jīng)過(guò)無(wú)水硫酸鈉干燥后過(guò)濾得有機(jī)相，旋干，再經(jīng)過(guò)硅膠柱層析分離純化(流動(dòng)相：二氯甲烷：甲醇＝500:1；氨水0.5％)得0.75g淡黃色固體。

產(chǎn)率72％。m.p.216.0-217.2℃；¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.35(d,J＝7.7Hz,1H),8.21(d,J＝8.5Hz,1H),7.90(d,J＝8.5Hz,1H),7.66(t,J＝7.6Hz,1H),7.62–7.55(m,2H),7.44(dt,J＝14.0,6.7Hz,2H),5.22(s,1H),4.83(dd,J＝5.8,2.3Hz,2H),2.31(t,J＝1.9Hz,1H).¹³C NMR(101MHz,CDCl3)δ158.3,147.4,146.8,134.1,132.9,130.1,129.7,127.9,124.2,123.2,123.2,122.1,120.0,118.2,112.0,80.8,72.5,35.6.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₁₈H₁₂N₂O,[M+H]⁺273.1022,found 273.1022.

實(shí)施例2：化合物CK1的合成

取化合物S4(0.25g，1mmol)置于50mL單口瓶中，加入10mL四氫呋喃，加入2mL預(yù)先配制好的含有(25mg，0.1mmol)五水硫酸銅溶液，2mL現(xiàn)配現(xiàn)用的含有(50mg，0.2mmol)的抗壞血酸鈉溶液，最后加入1.2當(dāng)量的:N,N-二甲基-2-疊氮乙胺。于35℃攪拌反應(yīng)，TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)。反應(yīng)完畢后，旋干溶劑，經(jīng)柱層析純化得到淡黃色固體CK1(流動(dòng)相：二氯甲烷：甲醇＝200～50:1；氨水0.5％)。

產(chǎn)率88％。m.p.121.5-122.6℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.41(d,J＝7.7Hz,1H),8.18(dd,J＝8.5,0.7Hz,1H),7.94(d,J＝8.5Hz,1H),7.71(s,1H),7.66–7.58(m,3H),7.43(ddd,J＝15.3,7.1,1.2Hz,2H),5.94(s,1H),5.36(d,J＝5.8Hz,2H),4.38(t,J＝6.2Hz,2H),2.69(t,J＝6.2Hz,2H),2.19–2.14(s,6H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ158.1,147.1,146.9,145.5,133.7,130.0,129.5,128.0,124.0,123.5,123.2,122.5,122.2,120.4,118.2,111.8,58.6,48.1,45.2,41.0.HPLC purity：99.8％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₂H₂₂N₆O,[M+H]⁺,387.1928found 387.1915.

實(shí)施例3：化合物CK2的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用:N,N-二乙基-2-疊氮乙胺代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK2。

產(chǎn)率83％。m.p.133.1-134.3℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.39(d,J＝6.9Hz,1H),8.19(d,J＝8.4Hz,1H),7.93(d,J＝8.5Hz,1H),7.63(dt,J＝19.1,7.5Hz,4H),7.45(t,J＝7.3Hz,2H),5.81(s,1H),5.36(d,J＝5.8Hz,2H),4.33(s,2H),2.78(s,2H),2.40(d,J＝6.9Hz,4H),0.79(t,J＝6.9Hz,6H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ158.1,146.9,146.7,145.3,133.8,133.7,130.1,129.4,128.1,124.1,123.3,123.2,122.8,122.2,120.4,118.1,111.8,52.7,49.0,47.1,40.9,11.7.HPLC purity：99.2％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₄H₂₆N₆O,[M+H]⁺,415.2241found 415.2246.

實(shí)施例4：化合物CK3的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用2-疊氮基乙胺代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK3。

產(chǎn)率72％。m.p.130.4-131.5℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.36(d,J＝7.6Hz,1H),8.17(d,J＝8.4Hz,1H),7.93(d,J＝8.4Hz,1H),7.68–7.55(m,4H),7.44(t,J＝7.6Hz,2H),5.83(t,J＝5.9Hz,1H),5.34(d,J＝6.1Hz,2H),4.36–4.27(m,2H),3.20–3.08(m,2H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d₆)δ157.9,147.2,146.6,146.4,135.2,133.2,130.7,129.4,128.4,123.8,123.7,123.6,123.5,122.8,122.0,118.6,112.7,53.0,42.4,40.5.HPLC purity:99.9％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₀H₁₈N₆O,[M+H]⁺,359.1615found 359.1620.

實(shí)施例5：化合物CK4的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用N-(2-疊氮基乙基)嗎啉代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得白色固體CK4。

產(chǎn)率92％。m.p.209.1-210.8℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.37(d,J＝7.5Hz,1H),8.18(dd,J＝8.5,0.9Hz,1H),7.93(d,J＝8.0Hz,1H),7.69–7.64(m,1H),7.63–7.57(m,3H),7.48–7.43(m,2H),5.76(t,J＝6.3Hz,1H),5.35(d,J＝6.3Hz,2H),4.37(t,J＝6.1Hz,2H),3.50–3.43(m,4H),2.71(t,J＝6.1Hz,2H),2.39–2.29(m,4H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ158.1,147.2,147.0,145.8,133.7,133.6,130.1,129.7,128.0,124.1,123.5,123.3,122.3,122.2,120.3,118.2,111.8,67.0,66.7,57.8,53.4,47.3,40.9.HPLC purity：99.7％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₄H₂₄N₆O₂,[M+H]⁺429.2034,found 429.2021.

實(shí)施例6：化合物CK5的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用N-(2-疊氮基乙基)吡咯烷代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK5。

產(chǎn)率79％。m.p.198.7-199.0℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.37(d,J＝7.7Hz,1H),8.18(d,J＝8.5Hz,1H),7.92(d,J＝8.4Hz,1H),7.67(d,J＝11.3Hz,2H),7.60(t,J＝7.3Hz,2H),7.45(dd,J＝13.9,6.8Hz,2H),5.71(t,J＝5.4Hz,1H),5.36(d,J＝6.1Hz,2H),4.41(t,J＝6.3Hz,2H),2.87(t,J＝6.3Hz,2H),2.43(s,4H),1.64(s,4H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ158.1,147.1,146.9,145.6,133.7,133.6,130.0,129.6,128.0,124.1,123.5,123.2,122.4,122.2,120.3,118.1,111.7,55.3,53.9,49.4,40.98,23.5.HPLC purity：99.4％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₄H₂₄N₆O,[M+H]⁺413.2084,found 413.2070.

實(shí)施例7：化合物CK6的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用N-(2-疊氮基乙基)哌啶代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK6。

產(chǎn)率88％。m.p.222.5-223.1℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.37(d,J＝7.7Hz,1H),8.18(d,J＝8.4Hz,1H),7.92(d,J＝8.3Hz,1H),7.65(dd,J＝4.4,3.0Hz,2H),7.64–7.56(m,3H),7.47–7.41(m,2H),5.76(s,1H),5.36(d,J＝6.2Hz,2H),4.37(t,J＝6.2Hz,2H),2.66(t,J＝6.2Hz,2H),2.29(s,4H),1.32(s,6H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ158.1,147.1,146.9,145.5,133.7,130.0,129.6,128.0,124.1,123.4,123.2,122.5,122.2,120.3,118.1,111.8,58.0,54.4,47.7,41.0,25.8,24.1.HPLC purity：100.0％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₅H₂₆N₆O,[M+H]⁺427.2241,found 427.2221.

實(shí)施例8：化合物CK7的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用1-(2-疊氮基乙基)-4-甲基哌嗪代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK7。

產(chǎn)率82％。m.p.214.8-215.7℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.37(d,J＝8.5Hz,1H),8.18(d,J＝9.3Hz,1H),7.92(d,J＝8.0Hz,1H),7.68–7.64(m,1H),7.63(s,1H),7.61(dt,J＝7.5,3.6Hz,2H),7.49–7.42(m,2H),5.73(t,J＝6.1Hz,1H),5.36(d,J＝6.3Hz,2H),4.37(t,J＝6.1Hz,2H),2.71(t,J＝6.1Hz,2H),2.39(s,4H),2.17(s,8H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ158.1,147.2,147.0,145.7,133.7,133.6,130.1,129.7,128.0,124.1,123.5,123.3,122.4,122.2,120.3,118.2,111.8,57.2,54.8,52.9,47.5,45.8,41.0.HPLC purity:98.8％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₅H₂₇N₇O,[M+H]⁺442.2350,found 442.2344.

實(shí)施例9：化合物CK8的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用N,N-二甲基-3-疊氮丙胺代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK8。

產(chǎn)率89％。m.p.188.0-188.9℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.38(d,J＝7.6Hz,1H),8.19(d,J＝8.5Hz,1H),7.94(d,J＝8.5Hz,1H),7.69–7.58(m,3H),7.54(s,1H),7.46(td,J＝8.0,1.5Hz,2H),5.75(s,1H),5.37(d,J＝6.1Hz,2H),4.39(t,J＝6.8Hz,2H),2.24(t,J＝6.8Hz,2H),2.16(s,6H),2.07–2.02(m,2H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ158.1,147.2,147.0,145.6,133.7,133.6,130.0,129.7,128.0,124.1,123.5,123.2,122.1,122.1,120.3,118.1,111.8,55.7,48.05,45.2,41.0,28.1.HPLC purity:99.7％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₃H₂₄N₆O,[M+H]⁺401.2084,found 401.2089.

實(shí)施例10：化合物CK9的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用N,N-二乙基-3-疊氮丙胺代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK9。

產(chǎn)率80％。m.p.150.2-151.1℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.36(d,J＝7.5Hz,1H),8.18(d,J＝9.3Hz,1H),7.93(d,J＝8.0Hz,1H),7.68-7.57(m,3H),7.49(s,1H),7.45(dtd,J＝8.0,6.2,1.5Hz,2H),5.73(t,J＝6.1Hz,1H),5.36(d,J＝6.2Hz,2H),4.35(t,J＝7.0Hz,2H),2.41(q,J＝7.1Hz,4H),2.34(t,J＝6.8Hz,2H),1.99(p,J＝6.9Hz,2H),0.89(t,J＝7.1Hz,6H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ158.1,147.3,147.0,145.7,133.7,133.6,130.0,129.7,128.0,124.1,123.5,123.2,122.1,122.0,120.3,118.2,111.8,49.2,48.4,46.5,41.0,27.9,11.4.HPLC purity:99.9％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₅H₂₈N₆O,[M+H]⁺429.2397,found 429.2401.

實(shí)施例11：化合物CK10的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用3-疊氮基-1-丙胺代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK10。

產(chǎn)率72％。m.p.129.8-130.5℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.37(d,J＝7.6Hz,1H),8.18(d,J＝7.8Hz,1H),7.93(d,J＝8.4Hz,1H),7.69–7.64(m,1H),7.61(dt,J＝8.8,4.3Hz,2H),7.51–7.49(m,1H),7.48–7.42(m,2H),5.69(s,1H),5.36(d,J＝6.2Hz,2H),4.41(t,J＝6.9Hz,2H),2.63(t,J＝6.6Hz,2H),1.95(p,J＝6.8Hz,2H).¹³C NMR(101MHz,MeOD)δ157.9,146.9,146.2,146.2,135.4,132.9,130.1,128.2,127.4,123.6,123.0,122.5,122.3,121.5,121.3,118.0,111.7,47.4,40.00,37.7,32.4.HPLC purity：98.8％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₁H₂₀N₆O,[M+H]⁺373.1771,found 373.1756.

實(shí)施例12：化合物CK11的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用N-(3-疊氮基丙基)嗎啉代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK11。

產(chǎn)率88％。m.p.192.6-193.5℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.47(d,J＝8.2Hz,1H),8.19(d,J＝8.5Hz,1H),7.95(d,J＝8.6Hz,1H),7.61(dt,J＝12.6,8.0Hz,4H),7.43(dt,J＝25.4,7.5Hz,2H),5.40(d,J＝5.9Hz,2H),4.40(t,J＝6.8Hz,2H),3.64–3.55(m,4H),2.25(dd,J＝17.5,10.9Hz,6H),2.03(dt,J＝13.4,6.5Hz,2H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ158.1,147.1,146.9,145.7,133.6,133.6,130.1,129.6,128.1,124.2,123.4,123.3,122.2,122.0,120.2,118.1,111.7,66.8,54.7,53.4,48.0,41.0,26.9.HPLC purity:99.9％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₅H₂₆N₆O₂,[M+H]⁺443.2190,found 443.2196.

實(shí)施例13：化合物CK12的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用N-(3-疊氮基丙基)吡咯烷代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK12。

產(chǎn)率84％。m.p.194.7-195.3℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.36(d,J＝7.6Hz,1H),8.17(dd,J＝8.5,0.7Hz,1H),7.93(d,J＝8.2Hz,1H),7.68–7.62(m,1H),7.62–7.56(m,2H),7.49(s,1H),7.47–7.41(m,2H),5.77(t,J＝6.1Hz,1H),5.35(d,J＝6.2Hz,2H),4.37(t,J＝6.9Hz,2H),2.40–2.30(m,6H),2.01(p,J＝6.9Hz,2H),1.74–1.61(m,4H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ158.1,147.2,147.0,145.7,133.7,133.6,130.0,129.6,128.0,124.0,123.5,123.2,122.1,122.1,120.3,118.2,111.8,53.9,52.4,48.3,40.9,29.3,23.4.HPLC purity:99.8％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₅H₂₆N₆O,[M+H]⁺427.2241,found 427.2243.

實(shí)施例14：化合物CK13的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用N-(3-疊氮基丙基)哌啶代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得白色固體CK13。

產(chǎn)率86％。m.p.193.9-194.7℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.37(d,J＝7.6Hz,1H),8.18(d,J＝8.5Hz,1H),7.92(d,J＝8.5Hz,1H),7.63(dt,J＝17.0,8.1Hz,3H),7.51–7.41(m,3H),5.72(s,1H),5.36(d,J＝5.4Hz,2H),4.35(t,J＝6.4Hz,2H),2.31(s,6H),2.22(s,6H),1.99(dt,J＝12.6,6.2Hz,2H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ158.1,147.2,146.9,145.7,133.7,133.6,130.1,129.6,128.1,124.1,123.4,123.3,122.2,122.1,120.3,118.1,111.8,55.1,54.4,48.3,41.0,27.3,25.8,24.3.HPLC purity:99.8％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₆H₂₈N₆O,[M+H]⁺441.2397,found441.2396.

實(shí)施例15：化合物CK14的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用1-(3-疊氮基丙基)-4-甲基哌嗪代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得白色固體CK14。

產(chǎn)率70％。m.p.158.0-161.1℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.37(d,J＝7.6Hz,1H),8.18(d,J＝8.5Hz,1H),7.92(d,J＝8.5Hz,1H),7.63(dt,J＝17.0,8.1Hz,3H),7.46(s,3H),5.72(s,1H),5.36(d,J＝5.4Hz,2H),4.35(t,J＝6.4Hz,2H),2.31(s,6H),2.21(d,J＝12.2Hz,6H),2.07–1.91(m,3H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ158.1,147.1,146.9,145.7,133.6,133.6,130.1,129.6,128.0,124.1,123.4,123.3,122.2,122.1,120.3,118.1,111.8,54.9,54.1,52.8,48.0,45.9,40.9,27.2.HPLC purity:99.5％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₆H₂₉N₇O,[M+H]⁺456.2506,found 456.2516.

實(shí)施例16：化合物CK15的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用2-疊氮基-1-乙醇代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得白色固體CK15。

產(chǎn)率76％。m.p.180.9-181.8℃；¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.47(d,J＝8.3Hz,1H),8.27(d,J＝7.6Hz,1H),8.03(d,J＝8.3Hz,1H),7.99(s,1H),7.81(d,J＝8.5Hz,1H),7.73(d,J＝5.8Hz,2H),7.52(dd,J＝14.5,7.4Hz,2H),5.25(d,J＝6.2Hz,2H),4.92(t,J＝5.1Hz,1H),4.31(t,J＝5.3Hz,2H),3.69(dd,J＝9.8,4.6Hz,2H).¹³C NMR(101MHz,DMSO)δ157.4,146.7,146.1,145.9,134.7,132.7,130.1,128.9,127.9,123.3,123.2,123.1,123.0,122.3,121.4,118.1,112.3,59.8,52.0,40.0.HPLC purity:99.3％.HRMS(ESI)m/z:calcd for,[M+H]⁺,360.1455,found 360.1449.

實(shí)施例17：化合物CK16的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用3-疊氮基-1-丙醇代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得白色固體CK16。

產(chǎn)率75％。m.p.191.2-192.6℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.37(d,J＝7.7Hz,1H),8.18(d,J＝8.4Hz,1H),7.92(d,J＝8.4Hz,1H),7.70–7.64(m,1H),7.61(dd,J＝11.4,4.9Hz,2H),7.51(s,1H),7.46(ddd,J＝9.4,9.0,4.9Hz,2H),5.65(s,1H),5.36(d,J＝6.2Hz,2H),4.46(t,J＝6.7Hz,2H),3.56(t,J＝4.7Hz,2H),2.11–2.03(m,2H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d₆)δ157.9,147.1,146.6,146.5,135.2,133.1,130.7,129.3,128.4,123.8,123.8,123.4,123.3,122.9,122.0,118.6,112.8,57.9,47.0,40.5,33.5.HPLC purity：99.5％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₁H₁₉N₅O₂,[M+H]⁺374.1612,found 374.1611.

實(shí)施例18：化合物CK17的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用芐基疊氮代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得白色固體CK17。

產(chǎn)率55％。m.p.190.9-191.9℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.36(d,J＝7.6Hz,1H),8.18(d,J＝8.6Hz,1H),7.91(d,J＝8.6Hz,1H),7.66(ddd,J＝8.3,6.8,1.2Hz,1H),7.59(ddd,J＝8.4,7.2,1.3Hz,1H),7.52–7.43(m,3H),7.41(s,1H),7.30(dd,J＝5.0,1.9Hz,3H),7.19(dd,J＝6.5,3.0Hz,2H),5.63(s,1H),5.47(s,2H),5.33(d,J＝6.1Hz,2H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ158.1,147.2,146.9,146.2,134.4,133.7,133.5,130.1,129.6,129.1,129.1,128.8,128.0,128.0,127.9,124.1,123.4,123.2,122.2,121.7,120.2,118.1,111.8,54.2,41.0.HPLC purity：99.9％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₅H₁₉N₅O,[M+H]⁺406.1662,found 406.1647.

實(shí)施例19：化合物CK18的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用2-(疊氮基乙基)苯代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得白色固體CK18。

產(chǎn)率60％。m.p.172.5-173.8℃；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.41(d,J＝8.4Hz,1H),8.22(d,J＝7.5Hz,1H),8.02(d,J＝8.3Hz,1H),7.85(d,J＝16.0Hz,2H),7.70(dt,J＝11.2,7.7Hz,3H),7.47(t,J＝6.9Hz,2H),7.02–6.94(m,4H),5.16(d,J＝5.8Hz,2H),4.49(t,J＝7.0Hz,2H),3.01(t,J＝7.0Hz,2H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d₆)δ157.9,146.6,138.0,135.1,133.,130.7,129.4,128.9,128.6,128.4,126.8,123.8,123.5,123.0,122.8,122.0,118.6,112.8,50.8,40.6,40.4,40.2,40.0,39.8,39.6,39.4,36.2.HPLC purity:99.8％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₆H₂₁N₅O,[M+H]⁺420.1819,found 420.1818.

實(shí)施例20：化合物CK19的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用3-(疊氮基丙基)苯代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得白色固體CK19。

產(chǎn)率58％。m.p.160.3-161.2℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.38(d,J＝7.6Hz,1H),8.17(d,J＝8.4Hz,1H),7.94(d,J＝8.4Hz,1H),7.68–7.54(m,3H),7.48–7.39(m,3H),7.25–7.13(m,3H),7.06(d,J＝7.0Hz,2H),5.87(s,1H),5.35(d,J＝5.8Hz,2H),4.27(t,J＝7.1Hz,2H),2.57(t,J＝7.5Hz,2H),2.21–2.15(m,2H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ158.1,147.2,146.9,145.8,139.9,133.7,133.6,130.1,129.6,128.6,128.3,128.0,126.3,124.1,123.5,123.2,122.,121.6,120.3,118.1,111.8,49.5,41.0,32.4,31.5.HPLC purity:99.9％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₇H₂₃N₅O,[M+H]⁺434.1975,found 434.1976.

實(shí)施例21：化合物CK20的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用1-疊氮基丙烷代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得白色固體CK20。

產(chǎn)率58％。m.p.178.9-181.2℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.35(d,J＝7.8Hz,1H),8.14(d,J＝8.5Hz,1H),7.94(d,J＝8.3Hz,1H),7.64–7.52(m,3H),7.50(s,1H),7.44–7.35(m,2H),5.98(d,J＝5.8Hz,1H),5.31(d,J＝5.8Hz,2H),4.41–4.29(m,1H),2.12(d,J＝12.7Hz,2H),1.85(d,J＝13.5Hz,2H),1.67(dd,J＝26.5,14.1Hz,3H),1.39(dd,J＝26.0,12.9Hz,2H),1.21(dd,J＝24.6,11.9Hz,1H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ158.0,147.0,146.8,145.9,133.9,133.6,130.0,129.4,128.0,124.0,123.4,123.2,122.1,121.7,120.6,118.1,111.8,51.9,40.9,23.6,11.0.HPLC purity:98.3％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₁H₁₉N₅O,[M+H]⁺358.1662,found 358.1657.

實(shí)施例22：化合物CK21的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用1-疊氮基-3-甲基丁烷代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK21。

產(chǎn)率62％。m.p.149.1-152.0℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.38(d,J＝7.7Hz,1H),8.18(d,J＝9.3Hz,1H),7.93(d,J＝8.0Hz,1H),7.68–7.56(m,3H),7.48(s,1H),7.47–7.41(m,2H),5.82(s,1H),5.35(d,J＝5.9Hz,2H),4.33–4.28(m,2H),1.73(dd,J＝14.9,7.1Hz,2H),1.55–1.44(m,1H),0.89(d,J＝6.6Hz,6H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ158.1,147.0,146.8,145.8,133.7,133.6,130.1,129.4,128.1,124.1,123.3,123.2,122.2,121.5,120.4,118.1,111.8,48.7,40.9,38.9,25.4,22.1.HPLC purity:96.9％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₃H₂₃N₅O,[M+H]⁺386.1975,found386.1969.

實(shí)施例23：化合物CK22的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用1-疊氮基環(huán)戊烷代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK22。

產(chǎn)率56％。m.p.156.6-157.9℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.38(t,J＝8.6Hz,1H),8.17(t,J＝8.0Hz,1H),7.94(d,J＝8.5Hz,1H),7.68–7.55(m,3H),7.53(d,J＝7.7Hz,1H),7.42(dt,J＝14.5,7.2Hz,2H),5.92(s,1H),5.38–5.27(m,2H),4.92–4.81(m,1H),2.27–2.14(m,2H),2.05–1.93(m,2H),1.85(tt,J＝11.1,5.8Hz,2H),1.72(dt,J＝11.1,4.7Hz,2H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ158.0,147.0,146.7,145.4,133.9,133.6,130.1,129.3,128.1,124.0,123.3,123.2,122.2,120.4,120.4,118.0,111.7,61.9,40.9,33.3,24.0.HPLC purity:96.3％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₃H₂₁N₅O,[M+H]⁺384.1819,found 384.1815.

實(shí)施例24：化合物CK23的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用1-疊氮基環(huán)己烷代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK23。

產(chǎn)率62％。m.p.156.6-157.9℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.38(t,J＝8.6Hz,1H),8.17(t,J＝8.0Hz,1H),7.94(d,J＝8.5Hz,1H),7.68–7.55(m,3H),7.53(d,J＝7.7Hz,1H),7.42(dt,J＝14.5,7.2Hz,2H),5.92(s,1H),5.38–5.27(m,2H),4.92–4.81(m,1H),2.27–2.14(m,2H),2.05–1.93(m,2H),1.85(tt,J＝11.1,5.8Hz,2H),1.72(dt,J＝11.1,4.7Hz,2H).¹³C NMR(101MHz,CDCl3)δ158.1,147.1,146.9,145.2,133.8,133.6,130.1,129.4,128.0,124.0,123.4,123.2,122.2,120.4,119.6,118.1,111.8,60.2,41.0,33.5,25.1,25.0.HPLC purity:98.7％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₄H₂₃N₅O,[M+H]⁺398.1975,found 398.1976.

實(shí)施例25：化合物CK24的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用1-疊氮基-2,3,4,6-四-O-乙?；?β-D-吡喃葡萄糖代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK24。

產(chǎn)率78％。m.p.210.7-211.1℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.38(d,J＝7.7Hz,1H),8.19(dd,J＝8.5,0.7Hz,1H),7.93(d,J＝8.3Hz,1H),7.78(s,1H),7.65(ddd,J＝4.9,4.2,1.1Hz,1H),7.63–7.58(m,2H),7.45(ddd,J＝7.9,7.2,1.5Hz,2H),5.85–5.80(m,1H),5.71(s,1H),5.43–5.31(m,4H),5.19(ddd,J＝9.5,5.4,3.9Hz,1H),4.25(dd,J＝12.6,4.9Hz,1H),4.10(dd,J＝12.6,2.0Hz,1H),3.97(ddd,J＝10.1,4.9,2.1Hz,1H),2.05(s,3H),2.01(s,3H),2.00(s,3H),1.67(s,3H).¹³C NMR(101MHz,CDCl3)δ170.5,169.9,169.4,168.8,158.2,147.0,146.6,146.6,133.7,133.6,130.2,129.3,128.1,124.1,123.3,123.2,122.2,120.4,120.2,118.0,111.9,85.7,75.1,72.5,70.1,67.6,61.5,40.9,20.6,20.5,20.5,19.9.HPLC purity:99.7％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₃₂H₃₁N₅O₁₀,[M+H]⁺646.2144,found 646.2152.

實(shí)施例26：化合物CK25的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用1-疊氮基-2,3,5-三-O-乙?；?β-D-核糖代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK25。

產(chǎn)率88％。m.p.214.7-215.6℃；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.42(d,J＝8.5Hz,1H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),8.17(s,1H),8.01(d,J＝8.4Hz,1H),7.78(d,J＝8.3Hz,1H),7.68(t,J＝7.8Hz,2H),7.47(t,J＝7.4Hz,2H),5.46(d,J＝9.3Hz,1H),5.26(t,J＝5.4Hz,3H),5.19(d,J＝4.9Hz,1H),5.09(d,J＝5.5Hz,1H),4.52(t,J＝5.4Hz,1H),3.73(td,J＝9.1,6.1Hz,1H),3.62(dd,J＝10.0,5.5Hz,1H),3.16(td,J＝9.0,5.7Hz,1H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d₆)δ157.4,145.9,135.0,132.6,130.3,128.5,128.1,123.4,123.3,122.7,122.4,122.2,121.5,118.0,112.4,87.3,79.9,77.0,71.9,69.5,60.7.HPLC purity:99.5％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₄H₂₃N₅O₆,[M+H]⁺478.1721,found 478.1725.

實(shí)施例27：化合物CK26的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用1-疊氮基-β-D-吡喃葡萄糖代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK26。

產(chǎn)率68％。m.p.159.5-160.3℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.40(d,J＝7.7Hz,1H),8.18(d,J＝7.8Hz,1H),7.94(d,J＝8.0Hz,1H),7.76(s,1H),7.61(tt,J＝12.5,7.1Hz,3H),7.48–7.41(m,2H),6.09(d,J＝3.8Hz,1H),5.84(dd,J＝5.2,3.8Hz,1H),5.59(t,J＝5.3Hz,1H),5.40(t,J＝5.3Hz,2H),4.44(td,J＝4.9,3.2Hz,1H),4.35(dd,J＝12.3,3.1Hz,1H),4.19(dd,J＝12.3,4.7Hz,1H),2.11(s,3H),2.08(s,3H),1.96(s,3H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ170.3,169.4,169.2,158.1,1467.0,146.6,146.2,133.7,130.2,129.4,128.2,124.2,123.3,123.2,122.3,121.4,120.3,118.0,111.9,90.0,81.0,74.2,70.8,62.9,40.9,20.5,20.5,20.4.HPLC purity:99.1％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₉H₂₇N₅O₈,[M+H]⁺574.1932,found 574.1948.

實(shí)施例28：化合物CK27的合成

方法同實(shí)施例2，所不同的是用1-疊氮基-β-D-核糖代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK27。

產(chǎn)率82％。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.42(d,J＝8.5Hz,1H),8.30(s,1H),8.21(d,J＝7.5Hz,1H),8.01(d,J＝8.1Hz,1H),7.84(t,J＝6.3Hz,1H),7.78(d,J＝8.3Hz,1H),7.66(td,J＝7.4,3.2Hz,2H),7.47(td,J＝7.4,2.6Hz,2H),5.88(d,J＝4.7Hz,1H),5.49(d,J＝6.1Hz,1H),5.20(dd,J＝10.2,5.9Hz,3H),4.90(t,J＝5.3Hz,1H),4.32(dd,J＝10.5,5.0Hz,1H),4.07(dd,J＝9.5,4.8Hz,1H),3.91(q,J＝4.2Hz,1H),3.53(dt,J＝11.4,4.7Hz,1H),3.47–3.39(m,1H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d₆)δ172.8,157.9,147.2,135.2,133.1,130.7,129.4,128.4,123.8,123.5,122.9,122.2,122.0,118.6,112.8,92.4,86.3,75.5,70.9,61.9,40.4.HPLC purity:99.4％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₃H₂₁N₅O₅,[M+H]⁺448.1615,found 448.1613.

本發(fā)明所述的喹啉類衍生物的制備方法，當(dāng)X為O，Y為甲基,n＝1時(shí)為CK1系列化合物，其合成方法包括以下步驟：

SM4.化合物S3以環(huán)丁砜作為溶劑經(jīng)碘甲烷于60℃甲基化得到

SM5.以乙二醇乙醚作溶劑，化合物與炔丙胺于120℃發(fā)生取代反應(yīng)得

SM6.將與不同疊氮側(cè)鏈在一價(jià)銅的催化下發(fā)生點(diǎn)擊反應(yīng)(1，3-偶極環(huán)加成反應(yīng))經(jīng)柱層析純化后得到一系列目標(biāo)產(chǎn)物喹啉類衍生物

實(shí)施例29：化合物SM5的合成

取1mmol SM4步驟得到的化合物置于100mL耐壓管中，加入約3mmol的炔丙胺，40mL乙二醇乙醚作溶劑，密封加熱到120℃反應(yīng)30分鐘。停止反應(yīng)后冷卻，加入50mL乙醚超聲后冷凍，析出固體，過(guò)濾收集固體。將所得固體用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相：二氯甲烷：甲醇＝200:1；氨水0.5％)得到淺黃色固體。

產(chǎn)率：88％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.68(d,J＝8.1Hz,1H),7.95(d,J＝7.9Hz,1H),7.52(d,J＝7.9Hz,1H),7.46(dd,J＝13.9,6.3Hz,2H),7.31(t,J＝7.6Hz,1H),7.22(d,J＝8.4Hz,1H),7.14(t,J＝7.3Hz,1H),4.92(s,2H),3.91(s,3H),2.30(t,J＝2.5Hz,1H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ154.7,146.7,139.5,136.4,130.7,130.3,127.8,126.7,124.8,123.0,122.00,121.8,118.9,113.7,112.9,84.87,70.0,41.0,35.1,29.7.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₁₉H₁₅N₂O⁺,[M-I]⁺287.1179,found 287.1180.

實(shí)施例30：化合物CK1-1的合成

取中間體SM5(0.27g，1mmol)置于50mL單口瓶中，加入10mL四氫呋喃，加入2mL預(yù)先配制好的含有(25mg，0.1mmol)五水硫酸銅溶液，2mL現(xiàn)配現(xiàn)用的含有(50mg，0.2mmol)的抗壞血酸鈉溶液，最后加入1.2當(dāng)量的:N,N-二甲基-2-疊氮乙胺。于35℃攪拌反應(yīng)，TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)。反應(yīng)完畢后，旋干溶劑，經(jīng)柱層析純化得到淡黃色固體CK1(流動(dòng)相：二氯甲烷：甲醇＝100～30:1；氨水0.5％)。

產(chǎn)率61％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.59(d,J＝7.9Hz,1H),7.80(d,J＝13.8Hz,2H),7.40–7.27(m,3H),7.20–7.10(m,2H),6.99(t,J＝7.5Hz,1H),5.27(s,2H),4.36(t,J＝6.7Hz,2H),3.78(s,3H),2.72(t,J＝6.7Hz,2H),2.19(s,6H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ154.1,148.4,144.0,138.0,134.3,130.8,129.7,127.7,125.2,122.3,122.2,121.8,121.4,121.2,117.3,113.3,111.9,57.9,47.3,45.3,44.5,34.4.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₃H₂₅N₆O⁺,[M-I]⁺401.2084,found401.2083.

實(shí)施例31：化合物CK1-2的合成

方法同實(shí)施例30，所不同的是用N,N-二乙基-2-疊氮乙胺代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK1-2。

產(chǎn)率70％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.60(d,J＝8.0Hz,1H),7.86(d,J＝13.0Hz,2H),7.48–7.28(m,3H),7.22–7.12(m,2H),7.00(t,J＝7.5Hz,1H),5.37(d,J＝6.1Hz,2H),5.26(d,J＝5.8Hz,2H),3.78(s,3H),4.34(t,J＝6.8Hz,2H),2.40(d,J＝6.9Hz,4H),0.79(t,J＝6.9Hz,6H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ154.1,148.4,144.0,138.0,134.3,130.8,129.7,127.7,125.2,122.3,122.2,121.8,121.4,121.2,117.3,113.3,111.9,57.9，50.0,47.1,41.0,11.8.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₅H₂₉N₆O⁺,[M-I]⁺429.2397，found429.2397.

實(shí)施例32：化合物CK1-3的合成

方法同實(shí)施例30，所不同的是用N-(2-疊氮基乙基)吡咯烷代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得橙紅色固體CK1-3。

產(chǎn)率75％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.69(d,J＝7.8Hz,1H),7.96(d,J＝11.9Hz,1H),7.86(s,1H),7.50(dd,J＝22.6,7.3Hz,3H),7.31(d,J＝7.5Hz,2H),7.18(d,J＝7.1Hz,1H),5.47(s,2H),4.48(d,J＝12.4Hz,2H),4.11–3.87(m,3H),3.67(s,4H),2.85(t,J＝6.3Hz,2H),2.50(s,4H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ154.0,148.8,144.0,138.3,134.8,131.0,129.7,127.8,125.3,123.3,122.2,121.8,121.5,121.2,117.3,113.5,111.8,55.3,54.7,49.4,47.0.43.2,25.5.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₅H₂₇N₆O₂⁺,[M-I]⁺443.2190，found443.2194.

實(shí)施例33：化合物CK1-4的合成

方法同實(shí)施例30，所不同的是用2-疊氮基乙胺代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK1-4。

產(chǎn)率55％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.66(d,J＝7.6Hz,1H),8.17(d,J＝8.4Hz,1H),7.95(d,J＝8.0Hz,1H),7.78–7.58(m,4H),7.15(t,J＝7.6Hz,2H),5.83(t,J＝5.9Hz,1H),5.34(d,J＝6.1Hz,2H),4.36–4.27(m,2H),3.78(s,3H),3.20–3.12(m,2H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ154.0,148.6,144.2,138.2,134.3,130.6,127.7,125.2,123.1,122.6,122.2,121.5,121.4,121.1,116,7,113.3,111.9,54.2,47.3,42.4,40.9.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₁H₂₁N₆O⁺,[M-I]⁺373.1771,found373.1769.

實(shí)施例34：化合物CK1-5的合成

方法同實(shí)施例30，所不同的是用N-(2-疊氮基乙基)哌啶代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK1-5。

產(chǎn)率60％¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.69(d,J＝8.2Hz,1H),7.93(d,J＝24.8Hz,2H),7.49(dd,J＝19.7,7.7Hz,3H),7.31(d,J＝7.1Hz,2H),7.15(d,J＝7.2Hz,1H),5.43(d,J＝8.5Hz,2H),4.47(t,J＝6.6Hz,2H),3.94(s,3H),2.81(t,J＝6.6Hz,2H),2.44(s,4H),1.64–1.33(m,6H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ154.5,148.1,144.8,137.2,135.0,131.1,123.0,127.8,125.3,123.6,122.0,121.5,121.2,121.0,117.3,113.5,112.0,58.0,54.8,47.7,47.0,41.3,26.2,24.5.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₆H₂₉N₆O⁺,[M-I]⁺441.2397，found441.2398.

本發(fā)明所述的喹啉類衍生物的制備方法，當(dāng)X為N，Y為氫，n＝2或3時(shí)為CK2系列化合物，其合成方法包括以下步驟：

DM1.以鄰氨基苯甲酸為起始原料，與氯乙酰氯發(fā)生取代反應(yīng)得到化合物

DM2.以DMF為溶劑，取化合物在碘化鉀的催化下與苯胺發(fā)生取代反應(yīng)得到化合物

DM3.于130℃,在PPA催化下關(guān)環(huán)得到化合物

DM4.在DMF催化下，用氯化亞砜氯代得到化合物

DM5.在一水合對(duì)甲苯磺酸的催化下于120℃與炔丙胺發(fā)生取代反應(yīng)得到化合物

實(shí)施例35：化合物DM5的合成

取10mmol鄰氨基苯甲酸置于500ml圓底燒瓶中加入150ml丙酮溶解，冰浴下滴加氯乙酰氯丙酮溶液。滴加完畢后，冰浴下繼續(xù)攪拌1小時(shí)后轉(zhuǎn)為室溫反應(yīng)過(guò)夜。旋干丙酮，加入適量冷水，過(guò)濾收集固體，干燥，得到DM1。將10mmolDM1與1.2當(dāng)量的苯胺發(fā)生取代反應(yīng)，旋干溶劑水洗過(guò)濾后得到DM2。將所得到的DM2，在10倍質(zhì)量的PPA作用下環(huán)合得到DM3。DM3于氯化亞砜中在DMF催化下80℃發(fā)生氯代反應(yīng)得到化合物DM4。而后于耐壓管中將2.2g一水合對(duì)甲苯磺酸加熱至120℃后加入5mmol DM4，攪拌10分鐘，冷卻至室溫。加入10mmol炔丙胺，120℃反應(yīng)6小時(shí)。反應(yīng)完成后冷卻，用30mL氯仿：甲醇＝2:1溶解固體，1N NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至12，再用50mL氯仿萃取兩次，飽和氯化鈉溶液洗兩次，收集有機(jī)相，經(jīng)過(guò)無(wú)水硫酸鈉干燥后過(guò)濾得有機(jī)相，旋干，再經(jīng)過(guò)硅膠柱層析分離純化(流動(dòng)相：二氯甲烷：甲醇＝300:1；氨水0.5％)得DM5，0.75g淡黃色固體。

產(chǎn)率70％。m.p.230.0-231.3℃；¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.53(d,J＝7.4Hz,1H),8.31(d,J＝8.0Hz,1H),8.12(d,J＝8.0Hz,1H),7.79(t,J＝7.5Hz,1H),7.68-7.61(m,2H),7.50(t,J＝6.5Hz,2H),5.20(s,1H),4.93(d,J＝2.3Hz,2H),2.38(t,J＝1.9Hz,1H).¹³C NMR(101MHz,CDCl3)δ156.2,149.3,147.6,135.1,134.3,132.1,120.0,127.9,124.2,123.2,123.0,122.1,120.0,119.2,112.2,79.5,72.8,35.0.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₁₈H₁₃N₃,[M+H]⁺272.1179,found272.1173.

實(shí)施例36：化合物CK2-1的合成

取中間體DM5(0.25g，1mmol)置于50mL單口瓶中，加入10mL四氫呋喃，加入2mL預(yù)先配制好的含有(25mg，0.1mmol)五水硫酸銅溶液，2mL現(xiàn)配現(xiàn)用的含有(50mg，0.2mmol)的抗壞血酸鈉溶液，最后加入1.2當(dāng)量的:N,N-二甲基-2-疊氮乙胺。于35℃攪拌反應(yīng)，TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)。反應(yīng)完畢后，旋干溶劑，經(jīng)柱層析純化得到淡黃色固體CK2-2(流動(dòng)相：二氯甲烷：甲醇＝100～50:1；氨水0.5％)。

產(chǎn)率82％。m.p.128.6-129.6℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.41(d,J＝7.7Hz,1H),8.18(dd,J＝8.5,0.7Hz,1H),7.94(d,J＝8.5Hz,1H),7.9(s,1H),7.66–7.60(m,3H),7.33(ddd,J＝15.3,7.1,1.2Hz,2H),5.94(s,1H),5.36(d,J＝5.8Hz,2H),4.38(t,J＝6.2Hz,2H),2.69(t,J＝6.2Hz,2H),2.19–2.14(s,6H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ160.1,150.1,147.0,146.7,133.7,130.0,129.5,128.0,124.0,123.5,123.2,122.5,122.2,120.4,118.2,111.8,58.8,48.4,45.4,41.5.HPLC purity：99.9％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₂H₂₃N₇,[M+H]⁺,386.2022found 386.2020.

實(shí)施例37：化合物CK2-2的合成

方法同實(shí)施例36，所不同的是用:N,N-二乙基-2-疊氮乙胺代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK2-2。

產(chǎn)率85％。m.p.140.1-140.3℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.44(d,J＝6.9Hz,1H),8.24(d,J＝8.4Hz,1H),7.90(d,J＝8.5Hz,1H),7.63(dt,J＝19.1,7.5Hz,4H),7.45(t,J＝7.3Hz,2H),5.90(s,1H),5.38(d,J＝5.8Hz,2H),4.50(s,2H),2.80(s,2H),2.35(d,J＝6.9Hz,4H),0.82(t,J＝6.9Hz,6H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ158.8,147.2,146.9,145.5,134.0,133.7,130.1,129.6,128.1,124.1,124.3,123.2,122.8,122.2,121.4,118.1,111.8,52.9,50.0,49.0,41.0,12.0.HPLC purity：99.0％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₄H₂₇N₇,[M+H]⁺,413.2328found 413.2326.

實(shí)施例38：化合物CK2-3的合成

方法同實(shí)施例36，所不同的是用2-疊氮基乙胺代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK2-3。

產(chǎn)率70％。m.p.134.4-135.5℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.46(d,J＝7.6Hz,1H),8.32(d,J＝8.4Hz,1H),7.90(d,J＝8.4Hz,1H),7.75–7.65(m,4H),7.40(t,J＝7.6Hz,2H),5.90(t,J＝5.9Hz,1H),5.38(d,J＝6.1Hz,2H),4.39–4.29(m,2H),3.25–3.13(m,2H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d₆)δ158.2,147.8,146.8 146.4,136.1,134.1,131.5,129.6,128.5,124.2,123.9,123.7,123.5,122.8,122.0,119.8,112.9,53.7,43.2 41.2.HPLC purity:99.5％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₀H₁₉N₇,[M+H]⁺,357.1779found 357.1772.

實(shí)施例39：化合物CK2-4的合成

方法同實(shí)施例36，所不同的是用N-(2-疊氮基乙基)吡咯烷代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK2-4。

產(chǎn)率75％。m.p.215.5-216.8℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.50(d,J＝7.8Hz,1H),8.23(d,J＝8.4Hz,1H),7.98(d,J＝8.2Hz,1H),7.70(d,J＝11.3Hz,2H),7.60(t,J＝7.3Hz,2H),7.58(dd,J＝14.0,7.0Hz,2H),5.78(t,J＝5.4Hz,1H),5.36(d,J＝6.1Hz,2H),4.50(t,J＝6.3Hz,2H),2.92(t,J＝6.3Hz,2H),2.50(s,4H),1.70(s,4H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ160.5,150.1,149.9,146.8,134.8,133.6,130.0,130.6,128.0,124.1,123.5,123.2,122.4,122.2,120.3,118.1,111.7,55.3,53.9,49.8,41.2,23.8.HPLC purity：99.0％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₄H₂₅N₇,[M+H]⁺412.2241,found 412.2240.

實(shí)施例40：化合物CK2-5的合成

方法同實(shí)施例36，所不同的是用N,N-二甲基-3-疊氮丙胺代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK2-5。

產(chǎn)率89％。m.p.193.0-194.9℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.40(d,J＝7.5Hz,1H),8.29(d,J＝8.5Hz,1H),7.98(d,J＝8.5Hz,1H),7.72–7.60(m,3H),7.58(s,1H),7.48(td,J＝8.0,1.5Hz,2H),5.80(s,1H),5.37(d,J＝6.1Hz,2H),4.42(t,J＝6.8Hz,2H),2.33(t,J＝6.5Hz,2H),2.26(s,6H),2.08–2.02(m,2H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ159.1,148.2,148.0,146.5,133.7,133.6,130.3,129.8,128.0,124.1,123.5,123.2,123.2,123.0,120.3,119.3,111.6,55.7,48.2,45.6,41.2,28.2.HPLC purity:99.5％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₃H₂₅N₇,[M+H]⁺400.2241,found 400.2239.

實(shí)施例41：化合物CK2-6的合成

方法同實(shí)施例36，所不同的是用N,N-二乙基-3-疊氮丙胺代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK2-6。

產(chǎn)率80％。m.p.155.8-155.1℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.40(d,J＝7.5Hz,1H),8.26(d,J＝9.0Hz,1H),8.00(d,J＝8.0Hz,1H),7.76-7.66(m,3H),7.58(s,1H),7.54(m,2H),5.76(t,J＝6.0Hz,1H),5.42(d,J＝6.0Hz,2H),4.35(t,J＝7.0Hz,2H),2.39(q,J＝7.0Hz,4H),2.34(t,J＝6.8Hz,2H),2.05(p,J＝6.9Hz,2H),0.92(t,J＝7.3Hz,6H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ159.1,149.3,148.3,146.2,134.5,133.9,130.8,123.0,128.8,124.5,123.5,123.2,122.6,122.5,120.3,118.2,112.0,50.2,48.8,46.5,41.2,27.8,11.6.HPLC purity:99.8％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₅H₂₉N₇,[M+H]⁺428.2554,found 428.2550.

實(shí)施例42：化合物CK2-7的合成

方法同實(shí)施例36，所不同的是用3-疊氮基-1-丙胺代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK2-7。

產(chǎn)率78％。m.p.145.3-144.3℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.40(d,J＝7.6Hz,1H),8.25(d,J＝8.0Hz,1H),7.93(d,J＝8.4Hz,1H),7.70–7.68(m,1H),7.61(dt,J＝8.8,4.3Hz,2H),7.50(s,1H),7.48–7.42(m,2H),5.70(s,1H),5.36(d,J＝6.2Hz,2H),4.41(t,J＝6.9Hz,2H),2.63(t,J＝6.9Hz,2H),2.00(p,J＝6.8Hz,2H).¹³C NMR(101MHz,MeOD)δ159.0,148.2,148.1,146.5,133.8,133.6,132.9,130.1,128.2,127.4,123.6,123.0,122.8,122.5,121.5,121.3,118.6,113.2,49.4,48.0,37.7,32.4.HPLC purity：98.8％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₁H₂₁N₇,[M+H]⁺372.1928,found373.1924.

實(shí)施例43：化合物CK2-8的合成

方法同實(shí)施例36，所不同的是用N-(3-疊氮基丙基)吡咯烷代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK2-8。

產(chǎn)率80％。m.p.224.8-223.6℃；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.36(d,J＝7.6Hz,1H),8.20(d,J＝8.5,1H),7.98(d,J＝8.2Hz,1H),7.66(s,1H),7.62–7.56(m,2H),7.56(s,1H),7.47–7.41(m,2H),5.77(t,J＝6.1Hz,1H),5.35(d,J＝6.2Hz,2H),4.40(t,J＝6.9Hz,2H),2.55–2.50(m,6H),2.00(p,J＝6.9Hz,2H),1.80–1.68(m,4H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ159.0,148.4,148.0,146.5,133.7,133.5,130.3,129.6,128.0,124.0,123.5,123.2,122.1,122.1,120.3,118.2,111.8,53.9,52.4,48.3,40.9,29.3,23.4.HPLC purity:99.8％.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₅H₂₇N₇,[M+H]⁺426.2398,found 426.2390.

本發(fā)明所述的喹啉類衍生物的制備方法，當(dāng)X為N，Y為甲基,n＝2時(shí)為CK3系列化合物，其合成方法包括以下步驟：

FM4.化合物S3以環(huán)丁砜作為溶劑經(jīng)碘甲烷于60℃甲基化得到

FM5.以乙二醇乙醚作溶劑，化合物與炔丙胺于120℃發(fā)生取代反應(yīng)得

FM6.將與不同疊氮側(cè)鏈在一價(jià)銅的催化下發(fā)生點(diǎn)擊反應(yīng)(1,3-偶極環(huán)加成反應(yīng))經(jīng)柱層析純化后得到一系列目標(biāo)產(chǎn)物喹啉類衍生物

實(shí)施例44：化合物FM5的合成

取1mmol FM4置于100mL耐壓管中，加入約3mmol的炔丙胺，40mL乙二醇乙醚作溶劑，密封加熱到120℃反應(yīng)30分鐘。停止反應(yīng)后冷卻，加入50mL乙醚超聲后冷凍，析出固體，過(guò)濾收集固體。將所得固體用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相：二氯甲烷：甲醇＝100:1；氨水0.5％)得到淺黃色固體。

產(chǎn)率：74％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.68(d,J＝8.1Hz,1H),7.95(d,J＝7.9Hz,1H),7.52(d,J＝7.9Hz,1H),7.46(dd,J＝13.9,6.3Hz,2H),7.31(t,J＝7.6Hz,1H),7.22(d,J＝8.4Hz,1H),7.14(t,J＝7.3Hz,1H),4.92(s,2H),3.91(s,3H),2.30(t,J＝2.5Hz,1H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ154.7,146.7,139.5,136.4,130.7,130.3,127.8,126.7,124.8,123.0,122.00,121.8,118.9,113.7,112.9,84.87,70.0,41.0,35.1,29.7.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₁₉H₁₅N₂O⁺,[M-I]⁺287.1179,found 287.1180.

實(shí)施例45：化合物CK3-1的合成

取中間體SM5(0.27g，1mmol)置于50mL單口瓶中，加入10mL四氫呋喃，加入2mL預(yù)先配制好的含有(25mg，0.1mmol)五水合硫酸銅溶液，2mL現(xiàn)配現(xiàn)用的含有(50mg，0.2mmol)的抗壞血酸鈉溶液，最后加入1.5當(dāng)量的N,N-二甲基-2-疊氮乙胺。于35℃攪拌反應(yīng)，TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)。反應(yīng)完畢后，旋干溶劑，經(jīng)柱層析純化得到淡黃色固體CK1(流動(dòng)相：二氯甲烷：甲醇＝100～30:1；氨水0.5％)。

產(chǎn)率57％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.26(d,J＝7.9Hz,1H),8.20(d,J＝13.0Hz,2H),7.60-7.53(m,3H),7.44–7.32(m,2H),6.99(t,J＝7.5Hz,1H),5.40(s,2H),4.36(t,J＝6.0Hz,2H),4.30(s,3H),2.85(m,2H),1.19(s,6H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ150.1,146.2,144.0,138.6,135.2,132.8,130.0,127.7,125.9,122.9,122.2,121.8,121.4,120.2,117.3,113.3,111.9,57.9,42.2,42.2,37.9,24.6..HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₃H₂₆N₇⁺,[M-I]⁺400.2244,found 400.2247.

實(shí)施例46：化合物CK3-2的合成

方法同實(shí)施例45，所不同的是用N,N-二乙基-2-疊氮乙胺代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK3-2。

產(chǎn)率68％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.20(d,J＝8.7Hz,1H),8.30(d,J＝8.4Hz,2H),7.88(m,3H),7.22–7.12(m,2H),7.00(t,J＝7.5Hz,1H),5.37(d,J＝6.1Hz,2H),5.26(d,J＝5.8Hz,2H),4.34(t,J＝6.6Hz,2H),4.32(s,3H),2.52(d,J＝6.8Hz,4H),1.13(t,J＝6.3Hz,6H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ154.1,148.4,144.0,138.0,134.3,131.6,129.6,127.7,125.2,123.8,123.7,122.9,120.4,121.2,117.3,113.3,111.9,57.9,50.0,46.5,41.9,39.8,10.7.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₅H₃₀N₇⁺,[M-I]⁺428.2557，found428.2553.

實(shí)施例47：化合物CK3-3的合成

方法同實(shí)施例45，所不同的是用N-(2-疊氮基乙基)吡咯烷代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得橙紅色固體CK3-3。

產(chǎn)率78％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.69(d,J＝7.8Hz,1H),8.35(d,J＝8.7Hz,1H),,7.80(s,1H),7.63(m,3H),7.31(d,J＝7.5Hz,2H),7.22(d,J＝7.8Hz,1H),5.50(s,2H),4.48(d,J＝12.0Hz,2H),4.23(s,3H),3.67(s,4H),2.85(t,J＝6.3Hz,2H),2.50(s,4H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ154.0,150.8,146.0,143.7,142.4,137.0,135.4,132.2,130.5,124.3,124.0,122.2,121.8,121.5,121.2,117.3,113.5,111.8,55.8,55.0,49.8,47.0.42.9,28.3.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₅H₂₈N₇O⁺,[M-I]⁺442.2350，found442.2351.

實(shí)施例48：化合物CK3-4的合成

方法同實(shí)施例45，所不同的是用2-疊氮基乙胺代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK3-4。

產(chǎn)率48％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.70(d,J＝8.0Hz,1H),8.20(d,J＝8.6Hz,1H),7.95(d,J＝8.0Hz,1H),7.80–7.62(m,4H),7.20(t,J＝8.0Hz,2H),5.86(t,J＝6.0Hz,1H),5.34(d,J＝6.1Hz,2H),4.42–4.36(m,2H),3.80(s,3H),3.36–3.28(m,2H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ154.2,149.6,146.2,138.2,137.7,132.9,132.5,131.2,129.2,123.6,123.2,121.5,121.4,121.1,116,5,113.6,112.7,55.0,47.8,42.6,41.5.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₁H₂₂N₇⁺,[M-I]⁺372.1931，found372.1931.

實(shí)施例49：化合物CK3-5的合成

方法同實(shí)施例45，所不同的是用N-(2-疊氮基乙基)哌啶代替N,N-二甲基-2-疊氮乙胺，得淡黃色固體CK3-5。

產(chǎn)率58％¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.69(d,J＝8.2Hz,1H),7.93(d,J＝24.8Hz,2H),7.50(dd,J＝20.0,7.7Hz,3H),7.31(d,J＝7.1Hz,2H),7.15(d,J＝7.2Hz,1H),5.43(d,J＝8.5Hz,2H),4.47(t,J＝6.6Hz,2H),3.94(s,3H),2.80(t,J＝6.6Hz,2H),2.50(s,4H),1.58–1.39(m,6H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ154.5,150.1,145.6,137.2,135.4,131.2,123.2,127.8,125.3,123.6,122.0,121.5,121.2,121.0,117.3,113.5,112.0,58.8,55.2,48.0,47.1,40.6,25.2,24.6.HRMS(ESI)m/z:calcd for C₂₆H₃₀N₇⁺,[M-I]⁺440.2557，found440.2559.

實(shí)施例50：本發(fā)明所述喹啉類衍生物對(duì)癌基因c-myc轉(zhuǎn)錄表達(dá)具有抑制作用

本發(fā)明的喹啉類衍生物可用于制備以c-myc啟動(dòng)子區(qū)域G-四鏈體結(jié)構(gòu)為靶點(diǎn)的抗癌藥物。選擇圖1中實(shí)施例制備的化合物，采用RT-PCR實(shí)驗(yàn)將不同濃度(0～2μM)的化合物加入到處于對(duì)數(shù)的生長(zhǎng)期Raji細(xì)胞中培養(yǎng)6h后，收集細(xì)胞，提取細(xì)胞內(nèi)總RNA，進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄并用c-myc的特異引物進(jìn)行擴(kuò)增，檢測(cè)191bp大小的產(chǎn)物的量并以β-actin作為內(nèi)參，以未加藥細(xì)胞中內(nèi)參β-actin基因轉(zhuǎn)錄量為基準(zhǔn)計(jì)算得到的c-myc基因相對(duì)轉(zhuǎn)錄量。

圖1結(jié)果表明本發(fā)明所述化合物在濃度為2.0μM時(shí)，在Raji細(xì)胞內(nèi)對(duì)c-myc基因的轉(zhuǎn)錄具有明顯的抑制作用。

實(shí)施例51:選擇圖2中實(shí)施例制備的化合物，將不同濃度(0～2μM)的化合物加入到處于對(duì)數(shù)的生長(zhǎng)期Raji細(xì)胞中培養(yǎng)6h后，收集細(xì)胞提取總蛋白，用c-myc蛋白和β-actin蛋白(內(nèi)參)的抗體進(jìn)行western bolt實(shí)驗(yàn)，以未加藥細(xì)胞中內(nèi)參β-Actin蛋白表達(dá)量為基準(zhǔn)計(jì)算得到的c-Myc蛋白相對(duì)表達(dá)量(化合物加入細(xì)胞中的處理時(shí)間為12小時(shí))，檢測(cè)化合物對(duì)c-myc蛋白表達(dá)的影響。圖2結(jié)果表明本發(fā)明所述化合物在濃度為2.0μM時(shí)，在Raji細(xì)胞內(nèi)對(duì)c-myc基因的翻譯，c-MYC蛋白的表達(dá)具有明顯的抑制作用。

實(shí)施例52:本發(fā)明所述喹啉類衍生物對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用

選擇表1中實(shí)施例制備的化合物，以Raji(淋巴瘤細(xì)胞)、CA46(淋巴瘤細(xì)胞)(但本發(fā)明的應(yīng)用不限于此)，Cc大鼠腎小球系膜細(xì)胞(正常細(xì)胞)采用MTT法進(jìn)行體外細(xì)胞毒測(cè)定。對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞加入所述喹啉類衍生物，作用48小時(shí)后，測(cè)定其吸光度。分別計(jì)算抑制細(xì)胞生長(zhǎng)達(dá)50％時(shí)的化合物濃度以IC₅₀值表示，結(jié)果如表1所示。結(jié)果表明本發(fā)明所述化合物在體外對(duì)人淋巴癌細(xì)胞株具有較強(qiáng)的抑制作用。因此本發(fā)明所述的喹啉類衍生物極具有開發(fā)前景，可用于制備抗癌的藥物。

表1本發(fā)明所述衍生物對(duì)癌細(xì)胞株和正常細(xì)胞株的生長(zhǎng)抑制的IC₅₀值(μM)