本發(fā)明屬于藥物合成領(lǐng)域，具體涉及4,5-二苯基異噁唑衍生物及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：熱休克蛋白對各種細(xì)胞應(yīng)激因素(比如有毒異物、化療、放射)起到關(guān)鍵的保護作用，可以使參與維持正常細(xì)胞功能的關(guān)鍵蛋白避免錯誤折疊。熱休克蛋白HSP90在一系列客戶蛋白的構(gòu)象成熟、穩(wěn)定及功能化方面起著重要作用，這些客戶蛋白很多是屬于原癌基因蛋白家族，例如Bcr-Abl,Raf-1,Akt,ErbB2,EGFR,Hif和其他蛋白以及類固醇激素受體。抑制熱休克蛋白HSP90可以觸發(fā)熱休克蛋白與客戶蛋白復(fù)合物解聚，隨后導(dǎo)致客戶蛋白降解而失去功效，從而可以抑制腫瘤細(xì)胞的生長。因此，熱休克蛋白HSP90在不同疾病領(lǐng)域已成為重要的靶點，尤其是在癌癥及神經(jīng)退行性疾病中所起的作用已被確證(SolitD.B.,etal.,DrugDiscov.Today,2008,13(1-2),38；TaylorD.M.,etal.,CellStressChaperones,2007,12,.2.,151；YangZ.,etal.,Nat.Med.,2007,13,.3.,348；LuoW.,etal.,Proc.Natl.Acad.Sci.,2007,104,9511；MacarioA.J.,etal.,N.Engl.J.Med.,2005,353,1489；DouF.,etal.,Int.J.Mol.Sci.,2007,8,51)。此外，許多HSP90客戶蛋白在癌癥中過度表達，并且往往以變異形式，導(dǎo)致癌細(xì)胞無限增殖和生存；而且，最近發(fā)現(xiàn)HSP90對癌細(xì)胞間的浸潤與擴散也起到重要作用。有趣的是，從腫瘤細(xì)胞中分離出的HSP90蛋白比從正常細(xì)胞中具有特別高的三磷酸腺苷酶活性，因此，設(shè)計特定的化合物可以選擇性的抑制腫瘤細(xì)胞中的HSP90而不影響正常細(xì)胞的功能是可以實現(xiàn)的(ChiosisG.,etal.,ACSChem.Biol.,2006,1,Ii,279；EustaceB.K.,etal.,NatureCellBiol.,2004,6,.6.,507；KogaF.,etal.,Cellcycle,2007,6,1393)。因此，HSP90被認(rèn)為是開發(fā)癌癥治療藥物的重要靶點，抑制HSP90可以實現(xiàn)對多種癌癥的治療。自從發(fā)現(xiàn)兩種天然產(chǎn)物，Geldanamycin和Radicicol，都能通過結(jié)合到熱休克蛋白N端區(qū)域的三磷酸腺苷口袋中，人們對HSP90抑制劑的開發(fā)越來越感興趣。天然抗生素Geldanamycin對人類的癌細(xì)胞生長顯示出了潛在的抑制作用，但是這個化合物明顯的毒性阻止了其進一步的臨床開發(fā)(WhitesellL.,etal.,CancerRes.,1992,52,1721；SupkoJ.G.,etal.,CancerChemother.Pharmacol.,1995,36,305)。目前FDA還沒批準(zhǔn)一個HSP90抑制劑作為抗癌藥物，而HSP90作為一個很有前景的抗癌藥物靶點仍然吸引著醫(yī)藥界去開發(fā)新的HSP90抑制劑。技術(shù)實現(xiàn)要素：為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足之處，發(fā)明人經(jīng)過深入研究發(fā)現(xiàn)了一種具有式(I)結(jié)構(gòu)的4,5-二苯基異噁唑衍生物。這些結(jié)構(gòu)新穎的化合物具有熱休克蛋白HSP90抑制活性，可用于治療癌癥、神經(jīng)退行性疾病、炎癥性疾病、自身免疫性疾病、缺血性腦損傷等用途，具有廣闊的應(yīng)用前景。本發(fā)明的目的在于一方面提供一種具有如下式(I)結(jié)構(gòu)的4,5-二苯基異噁唑衍生物、其立體異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受鹽：其中：R1、R2各自獨立的選自氫、氘、鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)基、3-8元雜環(huán)基氧基、3-8元雜環(huán)基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元雜芳基、5-10元雜芳基氧基、5-10元雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-C(O)R6、-C0-8-O-C(O)R6、-C0-8-NR7R8、-C0-8-C(O)NR7R8或-N(R5)-C(O)R6，或者R1、R2與連接的碳原子一起形成C3-8環(huán)烷基或3-8元雜環(huán)基，所述雜原子選自O(shè)、S、N，任選進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)基、3-8元雜環(huán)基氧基、3-8元雜環(huán)基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元雜芳基、5-10元雜芳基氧基、5-10元雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-C(O)R6、-C0-8-O-C(O)R6、-C0-8-NR7R8、-C0-8-C(O)NR7R8或-N(R5)-C(O)R6；R3、R4各自獨立的選自氫、氘、鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)基、3-8元雜環(huán)基氧基、3-8元雜環(huán)基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元雜芳基、5-10元雜芳基氧基、5-10元雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-C(O)R6、-C0-8-O-C(O)R6、-C0-8-NR7R8、-C0-8-C(O)NR7R8或-N(R5)-C(O)R6，或者R3、R4與連接的氮原子一起形成3-8元含氮雜環(huán)基，任選進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)基、3-8元雜環(huán)基氧基、3-8元雜環(huán)基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元雜芳基、5-10元雜芳基氧基、5-10元雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-C(O)R6、-C0-8-O-C(O)R6、-C0-8-NR7R8、-C0-8-C(O)NR7R8或-N(R5)-C(O)R6的取代基所取代；R5選自氫、Cl-8烷基或C3-8環(huán)烷基；R6選自C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)基、3-8元雜環(huán)基氧基、3-8元雜環(huán)基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元雜芳基、5-10元雜芳基氧基、5-10元雜芳基硫基、-C0-8-O-R5、-C0-8-NR7R8、-N(R5)-C(O)R6或-N(R5)-C(O)OR5，任選進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)基、3-8元雜環(huán)基氧基、3-8元雜環(huán)基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元雜芳基、5-10元雜芳基氧基、5-10元雜芳基硫基、、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-C(O)R5、-C0-8-O-C(O)R5、-C0-8-NR7R8、-C0-8-C(O)NR7R8、-N(R5)-C(O)R5或-N(R5)-C(O)OR5的取代基所取代；R7、R8各自獨立的選自氫、Cl-8烷基或C3-8環(huán)烷基；r為0、1或2。作為進一步優(yōu)選的方案，所述的4,5-二苯基異噁唑衍生物、其立體異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受鹽，R1、R2各自獨立的選自氫、氟、羥基、甲基、三氟甲基、烯丙基、乙炔基、環(huán)丙基、環(huán)己基、嗎啉基、哌嗪基、甲氧基、乙氧基、甲氧羰基、乙氧羰基、乙?；⒁阴Ｑ趸?、氨基、二甲氨基、氨基甲酰基或乙酰氨基。作為更進一步優(yōu)選的方案，所述的4,5-二苯基異噁唑衍生物、其立體異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受鹽，R1、R2、R3各自獨自的選自氫。作為更進一步優(yōu)選的方案，所述的4,5-二苯基異噁唑衍生物、其立體異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受鹽，R4選自-C0-4-C(O)OR5或-C0-4-C(O)R6。作為最優(yōu)選的方案，所述的4,5-二苯基異噁唑衍生物、其立體異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受鹽，選自如下化合物：作為更進一步優(yōu)選的方案，所述的4,5-二苯基異噁唑衍生物、其立體異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受鹽，R1、R2與連接的碳原子一起形成C3-6環(huán)烷基，任選進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)基、3-8元雜環(huán)基氧基、3-8元雜環(huán)基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元雜芳基、5-10元雜芳基氧基、5-10元雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-C(O)R6、-C0-8-O-C(O)R6、-C0-8-NR7R8、-C0-8-C(O)NR7R8或-N(R5)-C(O)R6的取代基所取代。作為更進一步優(yōu)選的方案，所述的4,5-二苯基異噁唑衍生物、其立體異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受鹽，R1、R2與連接的碳原子一起形成環(huán)丙烷基，任選進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)基、3-8元雜環(huán)基氧基、3-8元雜環(huán)基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元雜芳基、5-10元雜芳基氧基、5-10元雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-C(O)R6、-C0-8-O-C(O)R6、-C0-8-NR7R8、-C0-8-C(O)NR7R8或-N(R5)-C(O)R6的取代基所取代。作為更進一步優(yōu)選的方案，所述的4,5-二苯基異噁唑衍生物、其立體異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受鹽，R3、R4與連接的氮原子一起形成3-6元含氮雜環(huán)基，任選進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)基、3-8元雜環(huán)基氧基、3-8元雜環(huán)基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元雜芳基、5-10元雜芳基氧基、5-10元雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-C(O)R6、-C0-8-O-C(O)R6、-C0-8-NR7R8、-C0-8-C(O)NR7R8或-N(R5)-C(O)R6的取代基所取代。作為最優(yōu)選的方案，所述的4,5-二苯基異噁唑衍生物、其立體異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受鹽，選自如下化合物：本發(fā)明另一方面提供了前述4,5-二苯基異噁唑衍生物、其立體異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受鹽的制備方法，其包括如下步驟：或者，其中，Pg1為羥基保護基，優(yōu)選芐基、2-四氫呋喃、甲氧基甲基、乙氧基乙基、C1-8烷基、烯丙基、三甲基硅基、三乙基硅基、三異丙基硅基、叔丁基二甲基硅基或叔丁基二苯基硅基；Pg2為氨基保護基，優(yōu)選叔丁氧羰基、烯丙基羰基、笏甲氧羰基、甲氧羰基、乙氧羰基、三甲基硅乙氧羰基或芐氧羰基；X為鹵素，優(yōu)選碘；R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、r如式(I)化合物所定義。本發(fā)明再一方面提供一種藥物組合物，其包括治療有效劑量的前述4,5-二苯基異噁唑衍生物、其立體異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受鹽及可藥用的載體。本發(fā)明再一方面提供了前述4,5-二苯基異噁唑衍生物、其立體異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受鹽、或前述藥物組合物在制備用于治療癌癥、神經(jīng)退行性疾病、炎癥性疾病、自身免疫性疾病、缺血性腦損傷藥物中的應(yīng)用。具體實施方式詳細(xì)說明：除非有相反陳述，下列用在說明書和權(quán)利要求書中的術(shù)語具有下述含義。“C1-8烷基”指包括1至8個碳原子的直鏈烷基和含支鏈烷基，烷基指飽和的脂族烴基團，C0-8是指不含碳原子或者C1-8烷基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1，1-二甲基丙基、1，2-二甲基丙基、2，2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2-三甲基丙基、1，1-二甲基丁基、1，2-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2，3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2，3-二甲基戊基、2，4-二甲基戊基、2，2-二甲基戊基、3，3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2，3-二甲基己基、2，4-二甲基己基、2，5-二甲基己基、2，2-二甲基己基、3，3-二甲基己基、4，4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基或其各種支鏈異構(gòu)體等。烷基可以是取代的或未取代的，當(dāng)被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，優(yōu)選為一個或多個以下基團，獨立地選自鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)基、3-8元雜環(huán)基氧基、3-8元雜環(huán)基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元雜芳基、5-10元雜芳基氧基、5-10元雜芳基硫基、、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-C(O)R6、-C0-8-O-C(O)R6、-C0-8-NR7R8、-C0-8-C(O)NR7R8或-N(R5)-C(O)R6的取代基所取代；“環(huán)烷基”指飽和或部分不飽和單環(huán)或多環(huán)環(huán)狀烴取代基，“C3-8環(huán)烷基”指包括3至8個碳原子的環(huán)烷基，例如：單環(huán)環(huán)烷基的非限制性實施例包含環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)戊烯基、環(huán)己基、環(huán)己烯基、環(huán)己二烯基、環(huán)庚基、環(huán)庚三烯基、環(huán)辛基等。多環(huán)環(huán)烷基包括螺環(huán)、稠環(huán)和橋環(huán)的環(huán)烷基?！奥莪h(huán)烷基”指單環(huán)之間共用一個碳原子(稱螺原子)的多環(huán)基團，這些可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環(huán)具有完全共軛的π電子系統(tǒng)。根據(jù)環(huán)與環(huán)之間共用螺原子的數(shù)目將螺環(huán)烷基分為單螺環(huán)烷基、雙螺環(huán)烷基基或多螺環(huán)烷基，螺環(huán)烷基的非限制性實施例包含：“稠環(huán)烷基”指系統(tǒng)中的每個環(huán)與體系中的其他環(huán)共享毗鄰的一對碳原子的全碳多環(huán)基團，其中一個或多個環(huán)可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環(huán)具有完全共軛的π電子系統(tǒng)。根據(jù)組成環(huán)的數(shù)目可以分為雙環(huán)、三環(huán)、四環(huán)或多環(huán)稠環(huán)烷基，稠環(huán)烷基的非限制性實施例包含：“橋環(huán)烷基”指任意兩個環(huán)共用兩個不直接連接的碳原子的全碳多環(huán)基團，這些可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環(huán)具有完全共軛的π電子系統(tǒng)。根據(jù)組成環(huán)的數(shù)目可以分為雙環(huán)、三環(huán)、四環(huán)或多環(huán)橋環(huán)烷基，橋環(huán)烷基的非限制性實施例包含：所述環(huán)烷基環(huán)可以稠合于芳基、雜芳基或雜環(huán)烷基環(huán)上，其中與母體結(jié)構(gòu)連接在一起的環(huán)為環(huán)烷基，非限制性實施例包括茚滿基、四氫萘基、苯并環(huán)庚烷基等。環(huán)烷基可以是任選取代的或未取代的，當(dāng)被取代時，取代基優(yōu)選為一個或多個以下基團，獨立地選自鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)基、3-8元雜環(huán)基氧基、3-8元雜環(huán)基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元雜芳基、5-10元雜芳基氧基、5-10元雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-C(O)R6、-C0-8-O-C(O)R6、-C0-8-NR7R8、-C0-8-C(O)NR7R8或-N(R5)-C(O)R6的取代基所取代；“雜環(huán)基”指飽和或部分不飽和單環(huán)或多環(huán)環(huán)狀烴取代基，其中一個或多個環(huán)原子選自氮、氧或S(O)r(其中r是整數(shù)0、1、2)的雜原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的環(huán)部分，其余環(huán)原子為碳?！?-8元雜環(huán)基”指包含3至8個環(huán)原子的雜環(huán)基，“3-6元雜環(huán)基”指包含3至6個環(huán)原子的雜環(huán)基，3-8元雜環(huán)基優(yōu)選3-6元雜環(huán)基。單環(huán)雜環(huán)基的非限制性實施例包含以下結(jié)構(gòu)：多環(huán)雜環(huán)基包括螺環(huán)、稠環(huán)和橋環(huán)的雜環(huán)基?！奥蓦s環(huán)基”指單環(huán)之間共用一個原子(稱螺原子)的多環(huán)雜環(huán)基團，其中一個或多個環(huán)原子選自氮、氧或S(O)r(其中r是整數(shù)0、1、2)的雜原子，其余環(huán)原子為碳。這些可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環(huán)具有完全共軛的π電子系統(tǒng)。根據(jù)環(huán)與環(huán)之間共用螺原子的數(shù)目將螺環(huán)烷基分為單螺雜環(huán)基、雙螺雜環(huán)基或多螺雜環(huán)基。螺環(huán)烷基的非限制性實施例包含：“稠雜環(huán)基”指系統(tǒng)中的每個環(huán)與體系中的其他環(huán)共享毗鄰的一對原子的多環(huán)雜環(huán)基團，一個或多個環(huán)可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環(huán)具有完全共軛的π電子系統(tǒng)，其中一個或多個環(huán)原子選自氮、氧或S(O)r(其中r是整數(shù)0、1、2)的雜原子，其余環(huán)原子為碳。根據(jù)組成環(huán)的數(shù)目可以分為雙環(huán)、三環(huán)、四環(huán)或多環(huán)稠雜環(huán)烷基，稠雜環(huán)基的非限制性實施例包含：“橋雜環(huán)基”指任意兩個環(huán)共用兩個不直接連接的原子的多環(huán)雜環(huán)基團，這些可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環(huán)具有完全共軛的π電子系統(tǒng)，其中一個或多個環(huán)原子選自氮、氧或S(O)r(其中r是整數(shù)0、1、2)的雜原子，其余環(huán)原子為碳。根據(jù)組成環(huán)的數(shù)目可以分為雙環(huán)、三環(huán)、四環(huán)或多環(huán)橋環(huán)烷基，橋環(huán)烷基的非限制性實施例包含：所述雜環(huán)基環(huán)可以稠合于芳基、雜芳基或環(huán)烷基環(huán)上，其中與母體結(jié)構(gòu)連接在一起的環(huán)為雜環(huán)基，非限制性實施例包含：雜環(huán)基可以是任選取代的或未取代的，當(dāng)被取代時，取代基優(yōu)選為一個或多個以下基團，獨立地選自鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)基、3-8元雜環(huán)基氧基、3-8元雜環(huán)基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元雜芳基、5-10元雜芳基氧基、5-10元雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-C(O)R6、-C0-8-O-C(O)R6、-C0-8-NR7R8、-C0-8-C(O)NR7R8或-N(R5)-C(O)R6的取代基所取代；“芳基”指全碳單環(huán)或稠合多環(huán)(也就是共享毗鄰碳原子對的環(huán))基團，具有共軛的π電子體系的多環(huán)(即其帶有相鄰對碳原子的環(huán))基團，“C5-10芳基”指含有5-10個碳的全碳芳基，“5-10元芳基”指含有5-10個碳的全碳芳基，例如苯基和萘基。所述芳基環(huán)可以稠合于雜芳基、雜環(huán)基或環(huán)烷基環(huán)上，其中與母體結(jié)構(gòu)連接在一起的環(huán)為芳基環(huán)，非限制性實施例包含：芳基可以是取代的或未取代的，當(dāng)被取代時，取代基優(yōu)選為一個或多個以下基團，獨立地選自鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)基、3-8元雜環(huán)基氧基、3-8元雜環(huán)基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元雜芳基、5-10元雜芳基氧基、5-10元雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-C(O)R6、-C0-8-O-C(O)R6、-C0-8-NR7R8、-C0-8-C(O)NR7R8或-N(R5)-C(O)R6的取代基所取代；“雜芳基”指包含1至4個雜原子的雜芳族體系，所述雜原子包括氮、氧和S(O)r(其中r是整數(shù)0、1、2)的雜原子，5-7元雜芳基指含有5-7個環(huán)原子的雜芳族體系，“5-10元雜芳基”指含有5-10個環(huán)原子的雜芳族體系，例如呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、四唑基等。所述雜芳基環(huán)可以稠合于芳基、雜環(huán)基或環(huán)烷基環(huán)上，其中與母體結(jié)構(gòu)連接在一起的環(huán)為雜芳基環(huán)，非限制性實施例包含：雜芳基可以是任選取代的或未取代的，當(dāng)被取代時，取代基優(yōu)選為一個或多個以下基團，獨立地選自鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)基、3-8元雜環(huán)基氧基、3-8元雜環(huán)基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元雜芳基、5-10元雜芳基氧基、5-10元雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-C(O)R6、-C0-8-O-C(O)R6、-C0-8-NR7R8、-C0-8-C(O)NR7R8或-N(R5)-C(O)R6的取代基所取代；“烯基”指由至少兩個碳原子和至少一個碳-碳雙鍵組成的如上述定義的烷基，C2-8鏈烯基指含有2-8個碳的直鏈或含支鏈烯基，優(yōu)選含有2-4個碳的直鏈或含支鏈烯基。例如乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-，2-或3-丁烯基等。烯基可以是取代的或未取代的，當(dāng)被取代時，取代基優(yōu)選為一個或多個以下基團，獨立地選自鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)基、3-8元雜環(huán)基氧基、3-8元雜環(huán)基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元雜芳基、5-10元雜芳基氧基、5-10元雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-C(O)R6、-C0-8-O-C(O)R6、-C0-8-NR7R8、-C0-8-C(O)NR7R8或-N(R5)-C(O)R6的取代基所取代；“炔基”指至少兩個碳原子和至少一個碳-碳三鍵組成的如上所定義的烷基，C2-8鏈炔基指含有2-8個碳的直鏈或含支鏈炔基，優(yōu)選含有2-4個碳的直鏈或含支鏈炔基。例如乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-，2-或3-丁炔基等。炔基可以是取代的或未取代的，當(dāng)被取代時，取代基優(yōu)選為一個或多個以下基團，獨立地選自鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)基、3-8元雜環(huán)基氧基、3-8元雜環(huán)基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元雜芳基、5-10元雜芳基氧基、5-10元雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-C(O)R6、-C0-8-O-C(O)R6、-C0-8-NR7R8、-C0-8-C(O)NR7R8或-N(R5)-C(O)R6的取代基所取代；“烷氧基”指-O-(烷基)，其中烷基的定義如上所述。C1-8烷氧基指含1-8個碳的烷基氧基，優(yōu)選含1-4個碳的烷基氧基，非限制性實施例包含甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基等。烷氧基可以是任選取代的或未取代的，當(dāng)被取代時，取代基，優(yōu)選為一個或多個以下基團，獨立地選自鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)基、3-8元雜環(huán)基氧基、3-8元雜環(huán)基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元雜芳基、5-10元雜芳基氧基、5-10元雜芳基硫基、、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-C(O)R6、-C0-8-O-C(O)R6、-C0-8-NR7R8、-C0-8-C(O)NR7R8或-N(R5)-C(O)R6的取代基所取代；“環(huán)烷氧基”指和-O-(未取代的環(huán)烷基)，其中環(huán)烷基的定義如上所述。C3-8環(huán)烷氧基指含3-8個碳的環(huán)烷基氧基，優(yōu)選含3-6個碳的環(huán)烷基氧基，非限制性實施例包含環(huán)丙氧基、環(huán)丁氧基、環(huán)戊氧基、環(huán)己氧基等。環(huán)烷氧基可以是任選取代的或未取代的，當(dāng)被取代時，取代基優(yōu)選為一個或多個以下基團，獨立地選自鹵素、羥基、巰基、氰基、硝基、疊氮基、C1-8烷基、C2-8鏈烯基、C2-8鏈炔基、C3-8環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)基、3-8元雜環(huán)基氧基、3-8元雜環(huán)基硫基、C5-10芳基、C5-10芳基氧基、C5-10芳基硫基、5-10元雜芳基、5-10元雜芳基氧基、5-10元雜芳基硫基、-C0-8-S(O)rR5、-C0-8-O-R5、-C0-8-C(O)OR5、-C0-8-C(O)R6、-C0-8-O-C(O)R6、-C0-8-NR7R8、-C0-8-C(O)NR7R8或-N(R5)-C(O)R6的取代基所取代；“鹵取代的C1-8烷基”指烷基上的氫任選的被氟、氯、溴、碘原子取代的1-8個碳烷基基團，優(yōu)選烷基上的氫任選的被氟、氯、溴、碘原子取代的1-4個碳烷基基團，例如二氟甲基、二氯甲基、二溴甲基、三氟甲基、三氯甲基、三溴甲基等。“鹵取代的C1-8烷氧基”烷基上的氫任選的被氟、氯、溴、碘原子取代的1-8個碳烷氧基基團，優(yōu)選烷基上的氫任選的被氟、氯、溴、碘原子取代的1-4個碳烷氧基基團。例如二氟甲氧基、二氯甲氧基、二溴甲氧基、三氟甲氧基、三氯甲氧基、三溴甲氧基等。-C0-8-S(O)rR5優(yōu)選-C0-4-S(O)rR5；-C0-8-O-R5優(yōu)選-C0-4-O-R5；-C0-8-C(O)OR5優(yōu)選-C0-,4-C(O)OR5，進一步優(yōu)選為-C(O)OR5；-C0-8-C(O)R6優(yōu)選-C0-4-C(O)R6，進一步優(yōu)選為-C(O)R6；-C0-8-O-C0-8-C(O)R6優(yōu)選-C0-8-O-C0-4-C(O)R6，進一步優(yōu)選-C0-4-O-C0-4-C(O)R6；-C0-8-NR7R8優(yōu)選-C0-4-NR7R8；-C0-8-C(O)NR7R8優(yōu)選-C0-4-C(O)NR7R8；-C0-8-N(R5)-C0-8-C(O)R6優(yōu)選-C0-8-N(R5)-C0-4-C(O)R6，進一步優(yōu)選-C0-4-N(R5)-C0-4-C(O)R6；“鹵素”指氟、氯、溴或碘。“DMF”指N、N-二甲基甲酰胺?！癗IS”指N-碘代丁二酰亞胺?！叭芜x”或“任選地”意味著隨后所描述地事件或環(huán)境可以但不必發(fā)生，該說明包括該事件或環(huán)境發(fā)生或不發(fā)生地場合。例如，“任選被烷基取代的雜環(huán)基團”意味著烷基可以但不必須存在，該說明包括雜環(huán)基團被烷基取代的情形和雜環(huán)基團不被烷基取代的情形?！叭〈摹敝富鶊F中的一個或多個氫原子，優(yōu)選為最多5個，更優(yōu)選為1～3個氫原子彼此獨立地被相應(yīng)數(shù)目的取代基取代。不言而喻，取代基僅處在它們的可能的化學(xué)位置，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠在不付出過多努力的情況下確定(通過實驗或理論)可能或不可能的取代。例如，具有游離氫的氨基或羥基與具有不飽和(如烯屬)鍵的碳原子結(jié)合時可能是不穩(wěn)定的。“藥物組合物”表示含有一種或多種本文所述化合物或其生理學(xué)上/可藥用的鹽或前體藥物與其他化學(xué)組分的混合物，以及其他組分例如生理學(xué)/可藥用的載體和賦形劑。藥物組合物的目的是促進對生物體的給藥，利于活性成分的吸收進而發(fā)揮生物活性。下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進一步詳細(xì)、完整地說明，但決非限制本發(fā)明，本發(fā)明也并非僅局限于實施例的內(nèi)容。本發(fā)明的化合物結(jié)構(gòu)是通過核磁共振(NMR)或/和液質(zhì)聯(lián)用色譜(LC-MS)來確定的。NMR化學(xué)位移(δ)以百萬分之一(ppm)的單位給出。NMR的測定是用BrukerAVANCE-400核磁儀，測定溶劑為氘代二甲基亞砜(DMSO-d6)，氘代甲醇(CD3OD)和氘代氯仿(CDCl3)內(nèi)標(biāo)為四甲基硅烷(TMS)。液質(zhì)聯(lián)用色譜LC-MS的測定用Agilent1200InfinitySeries質(zhì)譜儀。HPLC的測定使用安捷倫1200DAD高壓液相色譜儀(SunfireC18150×4.6mm色譜柱)和Waters2695-2996高壓液相色譜儀(GiminiC18150×4.6mm色譜柱)。薄層層析硅膠板使用煙臺黃海HSGF254或青島GF254硅膠板，TLC采用的規(guī)格是0.15mm～0.20mm，薄層層析分離純化產(chǎn)品采用的規(guī)格是0.4mm～0.5mm。柱層析一般使用煙臺黃海硅膠200～300目硅膠為載體。本發(fā)明實施例中的起始原料是已知的并且可以在市場上買到，或者可以采用或按照本領(lǐng)域已知的方法來合成。在無特殊說明的情況下，本發(fā)明的所有反應(yīng)均在連續(xù)的磁攪拌下，在干燥氮氣或氬氣氛下進行，溶劑為干燥溶劑。氬氣氛或氮氣氛是指反應(yīng)瓶連接一個約1L容積的氬氣或氮氣氣球。氫氣氛是指反應(yīng)瓶連接一個約1L容積的氫氣氣球。在無特殊說明的情況下，實施例中的溶液是指水溶液。反應(yīng)的溫度為室溫。室溫為最適宜的反應(yīng)溫度，為20℃～30℃。實施例一5-(2,4-二羥基-5-異丙基苯基)-N-乙基-4-(4-(1-嗎啡啉環(huán)丙基)苯基)異噁唑-3-甲酰胺步驟一：中間體2的合成將4-異丙基間苯二酚1(5.0g,32.85mmol)溶于三氟化硼乙醚(25mL,202.1mmol)和乙酸(3.73mL,65.05mmol)中，然后將體系加熱至90℃并反應(yīng)16小時。待反應(yīng)液冷卻至室溫后，往里滴加10％的醋酸鈉水溶液(500mL)，繼續(xù)攪拌4小時。反應(yīng)液用乙酸乙酯萃取，飽和碳酸氫鈉水溶液和食鹽水洗滌。分離后有機相經(jīng)干燥、過濾和濃縮得到粗產(chǎn)品，粗產(chǎn)品再用冷的正己烷打漿過濾，得到純的中間體2(6.3g)，收率88％。MSm/z(ESI):195.2。步驟二：中間體3的合成將中間體2(5.30g，27.29mmol)和碳酸鉀(7.92g，57.31mmol)溶于乙腈(100mL)中，室溫下往里加入芐溴(9.80g,57.31mmol)。體系加熱至80℃并攪拌反應(yīng)2小時。反應(yīng)液中的固體過濾除去，濾液濃縮干。所得粗品溶于二氯甲烷中，水洗、過濾和濃縮。固體再用少量的乙酸乙酯打漿洗滌，即得中間體3(8.0g)，收率74％。MSm/z(ESI):375.3；1HNMR(400MHz,CDCl3,ppm):δ7.69(s,1H),7.26-7.34(m,10H),6.43(s,1H),5.02(s,2H),5.01(s,2H),3.19-3.23(m,1H),2.49(s,3H),1.15(d,J＝6.8Hz,6H)。步驟三：中間體4的合成冰浴下，將中間體3(7.0g，18.69mmol)溶于無水甲苯(100mL)中，然后分批往里加入氫化鈉(60％,1.12g,28.04mmol)，加完后，體系在0℃下繼續(xù)反應(yīng)30分鐘。待草酸二乙酯(3.0g,20.56mmol)加入后，反應(yīng)液升溫至回流，攪拌反應(yīng)4小時。冷卻至室溫后，往體系中加入數(shù)滴水淬滅反應(yīng)，并用1.0M的鹽酸酸化，待溶劑減壓蒸發(fā)干之后。粗品再溶于二氯甲烷中，并依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和食鹽水洗滌。有機相干燥、過濾和濃縮后，得到中間體4(11.0g)，收率87％。MSm/z(ESI):475.1；1HNMR(400MHz,CDCl3,ppm):δ7.76(s,1H),7.26-7.35(m,10H),6.93(s,1H),6.51(s,1H),5.23(s,1H),5.09(s,2H),5.00(s,2H),4.35(q,J＝6.8Hz,2H),3.23-3.31(m,1H),1.33(t,J＝6.8Hz,3H),1.19(d,J＝6.8Hz,6H)。步驟四：中間體5的合成將中間體4(10.0g，21.07mmol)和鹽酸羥胺(1.76g,25.32mmol)溶于無水乙醇(100mL)中，反應(yīng)液加熱至回流，攪拌反應(yīng)4小時。冷卻至室溫后，反應(yīng)中析出的固體過濾收集，并將其重新溶于二氯甲烷中，經(jīng)飽和食鹽水洗滌、干燥、過濾和濃縮。所得固體再用少量冷的乙醇打漿洗滌過濾，真空干燥后，得到中間體5(8.0g)，收率72％。MSm/z(ESI):472.1。步驟五：中間體6的合成將中間體5(7.0g，14.84mmol)溶于乙胺的甲醇溶液(2M,70mL,140mmol)中，反應(yīng)液加熱至90℃，攪拌下反應(yīng)3小時。冷卻至室溫后，反應(yīng)中析出的固體過濾收集，并依次用水、冷乙醇和少量乙醚洗滌，真空干燥后，得到中間體6(7.0g)，收率90％。MSm/z(ESI):471.3。步驟六：中間體7的合成將中間體6(4.28g，9.095mmol)溶于乙腈(40mL)和二氯甲烷(16mL)中，依次往里加入NIS(4.08g,18.19mmol)和硝酸鈰銨(248mg,0.4547mmol)。反應(yīng)液在室溫下攪拌16小時。反應(yīng)液濃縮后溶于乙酸乙酯，并依次用飽和的亞硫酸氫鈉水溶液和食鹽水洗滌。有機相經(jīng)干燥、過濾和減壓濃縮后，得到中間體7(5.24g)，收率97％。MSm/z(ESI):597.1。步驟七：中間體8的合成將4-溴苯腈(3.00g，16.48mmol)和四異丙氧基鈦(5.4mL,18.13mmol)溶于無水乙醚(40mL)中，冷卻至-78℃，逐滴加入乙基溴化鎂的乙醚溶液(3M,12mL,39.88mmol)。滴加完畢后，在此溫度下繼續(xù)攪拌反應(yīng)10分鐘，然后升至室溫反應(yīng)1小時。加入三氟化硼的乙醚溶液(4.2mL,36.26mmol)，待攪拌1小時后，再加入1N的稀鹽酸和乙醚。水相收集，并用10％的氫氧化鈉水溶液堿化，乙酸乙酯萃取。有機相經(jīng)干燥、過濾和濃縮后，得到中間體8(1.7g)，收率48％。MSm/z(ESI):212.1。步驟八：中間體9的合成將中間體8(1.70g，8.015mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(20mL)，置于封管中，加入2,2'-二溴二乙醚(1.4mL,8.816mmol)和N,N-二異丙基乙胺(2.7mL,16.03mmol)。反應(yīng)加熱至100℃，攪拌16小時。冷卻至室溫，加入乙酸乙酯，水洗，有機相經(jīng)干燥、過濾和減壓濃縮，粗品用柱層析分離純化，得到中間體9(2.23g)，收率42％。MSm/z(ESI):282.1。步驟九：中間體10的合成將中間體9(2.23g，7.902mmol)，雙聯(lián)頻哪醇硼酸酯(2.21g，8.692mmol)，[1,1’-雙(二苯基磷)二茂鐵]二氯化鈀(347mg，0.4741mmol)和醋酸鉀(1.16g，11.85mmol)溶于1，4-二氧六環(huán)(30mL)，加熱至90℃，反應(yīng)16小時。減壓濃縮干，加入乙酸乙酯，鹽水洗滌，干燥，過濾，濃縮后經(jīng)柱層析(石油醚/乙酸乙酯＝6：1，v/v)分離，得到中間體10(1.75g)，收率67％。MSm/z(ESI):330.3。步驟十：中間體11的合成將中間體7(1.00g，1.676mmol)，化合物10(552mg，1.676mmol)，[1,1’-雙(二苯基磷)二茂鐵]二氯化鈀(74mg，0.1006mmol)和碳酸鉀(695mg，5.028mmol)溶于1，4-二氧六環(huán)(20mL)和水(5mL)的混合溶劑，在100℃下反應(yīng)16小時。減壓濃縮干，加入乙酸乙酯，水洗，有機相經(jīng)干燥、過濾和減壓濃縮，粗品經(jīng)柱層析(石油醚/乙酸乙酯＝3：1，v/v)分離純化，得到中間體11(800mg)，收率59％。MSm/z(ESI):672.4。步驟十一：5-(2,4-二羥基-5-異丙基苯基)-N-乙基-4-(4-(1-嗎啡啉環(huán)丙基)苯基)異噁唑-3-甲酰胺的合成將中間體11(800mg，1.191mmol)溶于無水二氯甲烷(10mL)中，在0℃下，往里滴加三氯化硼的正己烷溶液(1M,6mL,5.954mmol)。滴加完成后，反應(yīng)在室溫下反應(yīng)16小時，待反應(yīng)結(jié)束，加入乙醇(1mL)淬滅反應(yīng)，減壓濃縮至干，加入乙酸乙酯，再用飽和的碳酸氫鈉水溶液洗滌。有機相經(jīng)干燥、過濾和減壓濃縮后，粗品經(jīng)柱層析(二氯甲烷/甲醇＝25:1，v/v)分離純化，得到化合物5-(2,4-二羥基-5-異丙基苯基)-N-乙基-4-(4-(1-嗎啡啉環(huán)丙基)苯基)異噁唑-3-甲酰胺(140mg)，收率24％。MSm/z(ESI):492.3；1HNMR(400MHz,DMSO-d6,ppm):δ9.75(s,1H)，9.69(s,1H)，8.82(t,J＝5.8Hz,1H),7.20(s,4H),6.68(s,1H),6.45(s,1H),3.47(t,J＝4.0Hz,4H),3.19-3.26(m,2H),2.92-2.97(m,1H),2.40(t,J＝4.0Hz,4H),1.07(t,J＝6.8Hz,3H),0.89(d,J＝6.8Hz,6H),0.85-0.87(m,2H),0.69-0.72(m,2H)。實施例二(4-(5-(2,4-二羥基-5-異丙基苯基)-3-(乙基氨甲?；?異噁唑-4-基)苯基)甲酸甲酯步驟一：中間體2的合成將4-異丙基間苯二酚1(5.0g,32.85mmol)溶于三氟化硼乙醚(25mL,202.1mmol)和乙酸(3.73mL,65.05mmol)中，然后將體系加熱至90℃并反應(yīng)16小時。待反應(yīng)液冷卻至室溫后，往里滴加10％的醋酸鈉水溶液(500mL)，繼續(xù)攪拌4小時。反應(yīng)液用乙酸乙酯萃取，飽和碳酸氫鈉水溶液和食鹽水洗滌。分離后有機相經(jīng)干燥、過濾和濃縮得到粗產(chǎn)品，粗產(chǎn)品再用冷的正己烷打漿過濾，得到純的中間體2(6.3g)，收率88％。MSm/z(ESI):195.2。步驟二：中間體3的合成將中間體2(5.30g，27.29mmol)和碳酸鉀(7.92g，57.31mmol)溶于乙腈(100mL)中，室溫下往里加入芐溴(9.80g,57.31mmol)。體系加熱至80℃并攪拌反應(yīng)2小時。反應(yīng)液中的固體過濾除去，濾液濃縮干。所得粗品溶于二氯甲烷中，水洗、過濾和濃縮。固體再用少量的乙酸乙酯打漿洗滌，即得中間體3(8.0g)，收率74％。MSm/z(ESI):375.3；1HNMR(400MHz,CDCl3,ppm):δ7.69(s,1H),7.26-7.34(m,10H),6.43(s,1H),5.02(s,2H),5.01(s,2H),3.19-3.23(m,1H),2.49(s,3H),1.15(d,J＝6.8Hz,6H)。步驟三：中間體4的合成冰浴下，將中間體3(7.0g，18.69mmol)溶于無水甲苯(100mL)中，然后分批往里加入氫化鈉(60％,1.12g,28.04mmol)，加完后，體系在0℃下繼續(xù)反應(yīng)30分鐘。待草酸二乙酯(3.0g,20.56mmol)加入后，反應(yīng)液升溫至回流，攪拌反應(yīng)4小時。冷卻至室溫后，往體系中加入數(shù)滴水淬滅反應(yīng)，并用1.0M的鹽酸酸化，待溶劑減壓蒸發(fā)干之后。粗品再溶于二氯甲烷中，并依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和食鹽水洗滌。有機相干燥、過濾和濃縮后，得到中間體4(11.0g)，收率87％。MSm/z(ESI):475.1；1HNMR(400MHz,CDCl3,ppm):δ7.76(s,1H),7.26-7.35(m,10H),6.93(s,1H),6.51(s,1H),5.23(s,1H),5.09(s,2H),5.00(s,2H),4.35(q,J＝6.8Hz,2H),3.23-3.31(m,1H),1.33(t,J＝6.8Hz,3H),1.19(d,J＝6.8Hz,6H)。步驟四：中間體5的合成將中間體4(10.0g，21.07mmol)和鹽酸羥胺(1.76g,25.32mmol)溶于無水乙醇(100mL)中，反應(yīng)液加熱至回流，攪拌反應(yīng)4小時。冷卻至室溫后，反應(yīng)中析出的固體過濾收集，并將其重新溶于二氯甲烷中，經(jīng)飽和食鹽水洗滌、干燥、過濾和濃縮。所得固體再用少量冷的乙醇打漿洗滌過濾，真空干燥后，得到中間體5(8.0g)，收率72％。MSm/z(ESI):472.1。步驟五：中間體6的合成將中間體5(7.0g，14.84mmol)溶于乙胺的甲醇溶液(2M,70mL,140mmol)中，反應(yīng)液加熱至90℃，攪拌下反應(yīng)3小時。冷卻至室溫后，反應(yīng)中析出的固體過濾收集，并依次用水、冷乙醇和少量乙醚洗滌，真空干燥后，得到中間體6(7.0g)，收率90％。MSm/z(ESI):471.3。步驟六：中間體7的合成將中間體6(4.28g，9.095mmol)溶于乙腈(40mL)和二氯甲烷(16mL)中，依次往里加入NIS(4.08g,18.19mmol)和硝酸鈰銨(248mg,0.4547mmol)。反應(yīng)液在室溫下攪拌16小時。反應(yīng)液濃縮后溶于乙酸乙酯，并依次用飽和的亞硫酸氫鈉水溶液和食鹽水洗滌。有機相經(jīng)干燥、過濾和減壓濃縮后，得到中間體7(5.24g)，收率97％。MSm/z(ESI):597.1。步驟七：中間體13的合成將中間體7(71mg，0.1195mmol)，化合物12(30mg，0.1195mmol)，[1,1’-雙(二苯基磷)二茂鐵]二氯化鈀(8mg，0.01195mmol)和碳酸鉀(50mg，0.3585mmol)溶于1，4-二氧六環(huán)(2mL)和水(0.5mL)的混合溶劑，在100℃下反應(yīng)16小時。減壓濃縮干，殘液溶于乙酸乙酯，水洗，有機相經(jīng)干燥、過濾和減壓濃縮，粗品經(jīng)制備板(石油醚/乙酸乙酯＝8：1，v/v)分離純化，得到中間體13(87mg)，收率100％。MSm/z(ESI+Na):698.3。步驟八：中間體14的合成將中間體13(87mg，0.1287mmol)溶于二氯甲烷(3mL)和三氟乙酸(1mL)中，反應(yīng)液在室溫下攪拌3小時。反應(yīng)液濃縮后溶于乙酸乙酯，并依次用飽和的碳酸氫鈉水溶液和水洗滌。有機相經(jīng)干燥、過濾和減壓濃縮后，得到中間體14(74mg)，收率100％。MSm/z(ESI):576.3。步驟九：中間體15的合成將中間體14(423mg，0.7347mmol)和N,N-二異丙基乙胺(0.4mL，2.204mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，在0℃下，往里滴加氯甲酸甲酯(0.1mL，1.102mmol)。反應(yīng)液在室溫下攪拌反應(yīng)30分鐘，減壓濃縮干，殘液溶于乙酸乙酯，水洗，有機相再經(jīng)干燥、過濾和濃縮。粗品用柱層析(二氯甲烷/甲醇＝25:1,v/v)分離純化，得到中間體15(317mg)，收率68％。MSm/z(ESI):634.3。步驟十：(4-(5-(2,4-二羥基-5-異丙基苯基)-3-(乙基氨甲?；?異噁唑-4-基)苯基)甲酸甲酯的合成將中間體15(317mg，0.5002mmol)溶于無水二氯甲烷(5mL)中，在0℃下，往里滴加三氯化硼的正己烷溶液(1M,2mL,2.001mmol)。反應(yīng)液在此溫度下，繼續(xù)攪拌反應(yīng)2小時，待反應(yīng)結(jié)束，加入乙醇(0.5mL)淬滅反應(yīng)，減壓濃縮至干，殘液溶于乙酸乙酯，再用飽和的碳酸氫鈉水溶液洗滌。有機相經(jīng)干燥、過濾和減壓濃縮后，粗品用反相色譜柱分離純化，得到化合物(4-(5-(2,4-二羥基-5-異丙基苯基)-3-(乙基氨甲?；?異噁唑-4-基)苯基)甲酸甲酯(65mg)，收率29％。MSm/z(ESI):454.1；1HNMR(400MHz,DMSO-d6,ppm):δ9.72(s,1H)，9.59(s,1H)，8.84(t,J＝5.6Hz,1H),7.66(t,J＝6.2Hz,1H),7.14-7.20(m,4H),6.82(s,1H),6.41(s,1H),4.14(d,J＝6.0Hz,2H),3.54(s,3H),3.19-3.26(m,2H),2.97-3.03(m,1H),1.08(t,J＝7.2Hz,3H),0.97(d,J＝6.8Hz,6H)。實施例三N-(4-(5-(2,4-二羥基-5-異丙基苯基)-3-(乙基氨甲?；?異噁唑-4-基)苯基)-5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-甲酰胺步驟一：中間體18的合成將5-甲基四氮唑(6.25g,74mmol)和三乙胺(7.5g,74mmol)溶于甲苯(80mL)中，在0℃下，往反應(yīng)液中滴加乙基乙二酰氯酯(10.0g,74mmol)，滴加完成后，繼續(xù)攪拌反應(yīng)30分鐘。反應(yīng)生成的固體過濾去掉，并用冷的甲苯洗滌數(shù)次，然后將合并的甲苯溶液滴加到熱的甲苯(50℃)中，滴完后，溫度升至70℃，繼續(xù)反應(yīng)1小時。待體系冷卻至室溫，反應(yīng)液經(jīng)飽和食鹽水洗滌、干燥和濃縮(20℃下旋蒸)。所得粗品溶于乙醇(100mL)中，冷卻至10℃以下，往其中滴加氫氧化鉀(4.17g,74mmol)的水(10mL)溶液。并保持在此溫度下繼續(xù)攪拌反應(yīng)30分鐘。所得固體經(jīng)過濾收集，用冷的乙醇和叔丁基甲醚洗滌，在20℃時真空干燥，得到所需的中間體18(8.0g)，收率65％。MSm/z(ESI):128.9[M+H]+。步驟二：中間體19的合成將中間體18(150mg,0.9025mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，并滴加兩滴DMF。在冰浴下，往體系中滴加草酰氯(345mg,2.707mmol)，滴完后，繼續(xù)攪拌反應(yīng)3小時。反應(yīng)液直接濃縮干(室溫下旋蒸)備用。步驟三：中間體2的合成將4-異丙基間苯二酚1(5.0g,32.85mmol)溶于三氟化硼乙醚(25mL,202.1mmol)和乙酸(3.73mL,65.05mmol)中，然后將體系加熱至90℃并反應(yīng)16小時。待反應(yīng)液冷卻至室溫后，往里滴加10％的醋酸鈉水溶液(500mL)，繼續(xù)攪拌4小時。反應(yīng)液用乙酸乙酯萃取，飽和碳酸氫鈉水溶液和食鹽水洗滌。分離后有機相經(jīng)干燥、過濾和濃縮得到粗產(chǎn)品，粗產(chǎn)品再用冷的正己烷打漿過濾，得到純的中間體2(6.3g)，收率88％。MSm/z(ESI):195.2。步驟四：中間體3的合成將中間體2(5.30g，27.29mmol)和碳酸鉀(7.92g，57.31mmol)溶于乙腈(100mL)中，室溫下往里加入芐溴(9.80g,57.31mmol)。體系加熱至80℃并攪拌反應(yīng)2小時。反應(yīng)液中的固體過濾除去，濾液濃縮干。所得粗品溶于二氯甲烷中，水洗、過濾和濃縮。固體再用少量的乙酸乙酯打漿洗滌，即得中間體3(8.0g)，收率74％。MSm/z(ESI):375.3；1HNMR(400MHz,CDCl3,ppm):δ7.69(s,1H),7.26-7.34(m,10H),6.43(s,1H),5.02(s,2H),5.01(s,2H),3.19-3.23(m,1H),2.49(s,3H),1.15(d,J＝6.8Hz,6H)。步驟五：中間體4的合成冰浴下，將中間體3(7.0g，18.69mmol)溶于無水甲苯(100mL)中，然后分批往里加入氫化鈉(60％,1.12g,28.04mmol)，加完后，體系在0℃下繼續(xù)反應(yīng)30分鐘。待草酸二乙酯(3.0g,20.56mmol)加入后，反應(yīng)液升溫至回流，攪拌反應(yīng)4小時。冷卻至室溫后，往體系中加入數(shù)滴水淬滅反應(yīng)，并用1.0M的鹽酸酸化，待溶劑減壓蒸發(fā)干之后。粗品再溶于二氯甲烷中，并依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和食鹽水洗滌。有機相干燥、過濾和濃縮后，得到中間體4(11.0g)，收率87％。MSm/z(ESI):475.1；1HNMR(400MHz,CDCl3,ppm):δ7.76(s,1H),7.26-7.35(m,10H),6.93(s,1H),6.51(s,1H),5.23(s,1H),5.09(s,2H),5.00(s,2H),4.35(q,J＝6.8Hz,2H),3.23-3.31(m,1H),1.33(t,J＝6.8Hz,3H),1.19(d,J＝6.8Hz,6H)。步驟六：中間體5的合成將中間體4(10.0g，21.07mmol)和鹽酸羥胺(1.76g,25.32mmol)溶于無水乙醇(100mL)中，反應(yīng)液加熱至回流，攪拌反應(yīng)4小時。冷卻至室溫后，反應(yīng)中析出的固體過濾收集，并將其重新溶于二氯甲烷中，經(jīng)飽和食鹽水洗滌、干燥、過濾和濃縮。所得固體再用少量冷的乙醇打漿洗滌過濾，真空干燥后，得到中間體5(8.0g)，收率72％。MSm/z(ESI):472.1。步驟七：中間體6的合成將中間體5(7.0g，14.84mmol)溶于乙胺的甲醇溶液(2M,70mL,140mmol)中，反應(yīng)液加熱至90℃，攪拌下反應(yīng)3小時。冷卻至室溫后，反應(yīng)中析出的固體過濾收集，并依次用水、冷乙醇和少量乙醚洗滌，真空干燥后，得到中間體6(7.0g)，收率90％。MSm/z(ESI):471.3。步驟八：中間體7的合成將中間體6(4.28g，9.095mmol)溶于乙腈(40mL)和二氯甲烷(16mL)中，依次往里加入NIS(4.08g,18.19mmol)和硝酸鈰銨(248mg,0.4547mmol)。反應(yīng)液在室溫下攪拌16小時。反應(yīng)液濃縮后溶于乙酸乙酯，并依次用飽和的亞硫酸氫鈉水溶液和食鹽水洗滌。有機相經(jīng)干燥、過濾和減壓濃縮后，得到中間體7(5.24g)，收率97％。MSm/z(ESI):597.1。步驟九：中間體13的合成將中間體7(71mg，0.1195mmol)，化合物12(30mg，0.1195mmol)，[1,1’-雙(二苯基磷)二茂鐵]二氯化鈀(8mg，0.01195mmol)和碳酸鉀(50mg，0.3585mmol)溶于1，4-二氧六環(huán)(2mL)和水(0.5mL)的混合溶劑，在100℃下反應(yīng)16小時。減壓濃縮干，殘液溶于乙酸乙酯，水洗，有機相經(jīng)干燥、過濾和減壓濃縮，粗品經(jīng)制備板(石油醚/乙酸乙酯＝8：1，v/v)分離純化，得到中間體13(87mg)，收率100％。MSm/z(ESI):698.3[M+Na]+。步驟十：中間體14的合成將中間體13(87mg，0.1287mmol)溶于二氯甲烷(3mL)和三氟乙酸(1mL)中，反應(yīng)液在室溫下攪拌3小時。反應(yīng)液濃縮后溶于乙酸乙酯，并依次用飽和的碳酸氫鈉水溶液和水洗滌。有機相經(jīng)干燥、過濾和減壓濃縮后，得到淡黃色油狀液體14(74mg)，收率100％。MSm/z(ESI):576.3。步驟十一：中間體20的合成將中間體14(74mg，0.1285mmol)和三乙胺(39mg，0.3855mmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，在0℃下，往里滴加中間體19(132mg，0.9010mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液。反應(yīng)液在室溫下攪拌反應(yīng)16小時，減壓濃縮干，粗品經(jīng)制備板(二氯甲烷/甲醇＝25:1,v/v)分離純化，得到中間體20(80mg)，收率91％。MSm/z(ESI):686.2。步驟十二：N-(4-(5-(2,4-二羥基-5-異丙基苯基)-3-(乙基氨甲酰基)異噁唑-4-基)苯基)-5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-甲酰胺的合成將中間體20(80mg，0.1166mmol)溶于無水二氯甲烷(2mL)中，在0℃下，往里滴加三氯化硼的正己烷溶液(1M,0.5mL,0.4666mmol)。反應(yīng)液在此溫度下，繼續(xù)攪拌反應(yīng)3小時，待反應(yīng)結(jié)束，加入乙醇(0.5mL)淬滅反應(yīng)，減壓濃縮至干，殘液溶于乙酸乙酯，再用飽和的碳酸氫鈉水溶液洗滌。有機相經(jīng)干燥、過濾和減壓濃縮后，粗品經(jīng)反相色譜柱分離純化，得到化合物N-(4-(5-(2,4-二羥基-5-異丙基苯基)-3-(乙基氨甲?；?異噁唑-4-基)苯基)-5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-甲酰胺(51mg)，收率86％。MSm/z(ESI):506.2；1HNMR(400MHz,DMSO-d6,ppm):δ9.78(t,J＝6.2Hz,1H),9.74(s,1H)，9.61(s,1H)，8.85(t,J＝6.0Hz,1H),7.24(d,J＝8.0Hz,2H),7.18(d,J＝8.0Hz,2H),6.81(s,1H),6.40(s,1H),4.41(d,J＝6.4Hz,2H),3.18-3.26(m,2H),2.95-3.01(m,1H),2.57(s,3H),1.08(t,J＝7.2Hz,3H),0.95(d,J＝7.2Hz,6H)。生物學(xué)評價1、HSP90抑制化合物的酶學(xué)活性檢測HSP90抑制化合物的酶學(xué)活性是用熒光偏振(FluorescencePolarization)競爭性結(jié)合方法檢測的。在384孔板中，加入反應(yīng)液，HSP90蛋白，F(xiàn)ITC標(biāo)記的格爾德霉素,然后在不同孔中加上不同濃度的HSP90抑制化合物，在室溫下反應(yīng)3小時后用BioTek酶標(biāo)儀測量平行光和垂直光讀值，以及各自的背景吸光度。mP(milli-polarization)的計算方法為：mP＝1000*[(Is-IsB)-(Ip-IpB)]/[(Is-IsB)+(Ip-IpB)]。根據(jù)各濃度抑制率，采用4參數(shù)非線性回歸方法計算半數(shù)抑制濃度IC50。本發(fā)明化合物及對照化合物(AUY922)的生化學(xué)活性通過以上的試驗進行測定，測得的IC50值見下表。實施例編號IC50(HSP90/BIO)(nM)實施例一17實施例二8.4實施例三18對照化合物(AUY922)23結(jié)論：本發(fā)明實施例化合物對HSP90酶活性均有明顯地抑制作用。2、HSP90抑制化合物的細(xì)胞活性檢測應(yīng)用發(fā)光法細(xì)胞活力檢測試劑盒(LuminescentCellViabilityAssay)檢測藥物對腫瘤細(xì)胞增殖生長的抑制作用。主要步驟如下：接種一定數(shù)量的對數(shù)生長期細(xì)胞于96孔培養(yǎng)板。貼壁生長24小時后，加入不同濃度的藥物，每個濃度設(shè)復(fù)孔，同時設(shè)相應(yīng)濃度的溶媒對照。然后腫瘤細(xì)胞在37℃、5％CO2條件下再培養(yǎng)72h。將培養(yǎng)板及其內(nèi)容物平衡到室溫大約30分鐘，加入試劑，在振蕩器上混合內(nèi)容物2分鐘誘導(dǎo)細(xì)胞裂解。將培養(yǎng)板在室溫進一部孵育10-45分鐘，用酶標(biāo)儀(BioTekSynergyH1)測定螢光信號值。根據(jù)各濃度抑制率，采用非線性回歸方法計算半數(shù)抑制濃度IC50。本發(fā)明化合物及對照化合物(AUY922)的生化學(xué)活性通過以上的試驗進行測定，測得的IC50值見下表。實施例編號IC50(BT474)(nM)實施例一0.6實施例二2.2實施例三7.0對照化合物(AUY922)6.5結(jié)論：本發(fā)明實施例化合物對BT474細(xì)胞活性均有明顯地抑制作用。最后應(yīng)當(dāng)說明的是，以上實施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制本發(fā)明，盡管參照較佳實施例對本發(fā)明進行了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換，所述技術(shù)方案也不會脫離本發(fā)明技術(shù)方案的精神和范圍，其均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍內(nèi)。當(dāng)前第1頁1 2 3