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具有聚酯降解活性的多肽及其用途的制作方法

文檔序號(hào):12701140閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種分離的多肽,其包含與如SEQ ID N°1所示的全長(zhǎng)氨基酸序列具有至少94%、95%、99%或100%同一性的氨基酸序列,并且具有聚酯降解活性。

2.權(quán)利要求1的分離的多肽,其包含至少一個(gè)在對(duì)應(yīng)于SEQ ID N°1的殘基的殘基處的選自以下的氨基酸取代:T175C、R247C、N139D、S170R、N143R、N173E、S194P、H197D、L210P、G212N、I217K、R166K、T160A、L138A或其組合。

3.權(quán)利要求1或2的分離的多肽,其在20℃至60℃,優(yōu)選30℃至55℃,更優(yōu)選40℃至50℃的溫度范圍內(nèi),甚至更優(yōu)選在45℃下,和/或在5-11的pH范圍內(nèi),優(yōu)選在7-10的pH范圍內(nèi),更優(yōu)選在8.5-9.5的pH范圍內(nèi)具有活性。

4.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)的分離的多肽,其能夠降解聚乳酸(PLA),優(yōu)選是聚(L-乳酸)(PLLA)。

5.一種分離的多肽,其包含如SEQ ID N°1或SEQ ID N°5所示的氨基酸序列。

6.一種核酸,其編碼權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)的多肽。

7.一種表達(dá)盒,其包含權(quán)利要求6的核酸。

8.一種載體,其包含權(quán)利要求6的核酸或權(quán)利要求7的表達(dá)盒。

9.一種重組細(xì)胞,其含有權(quán)利要求6的核苷酸、權(quán)利要求7的表達(dá)盒、或權(quán)利要求8的載體。

10.一種產(chǎn)生權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)的多肽的方法,其包括(i)培養(yǎng)權(quán)利要求9的重組細(xì)胞,(ii)回收培養(yǎng)上清液,以及任選地(iii)分離或純化所述多肽。

11.一種組合物,其包含權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)的多肽、或權(quán)利要求9的重組細(xì)胞或其提取物,所述組合物任選地進(jìn)一步包含至少一種附加的酶和/或微生物或其提取物和/或添加劑。

12.權(quán)利要求11的組合物,其選自液體溶液、固體或凍干組合物,優(yōu)選是凍干粉末。

13.權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)的多肽、權(quán)利要求9的重組細(xì)胞或其提取物、或權(quán)利要求11或12的組合物的用途,其用于酶促降解含聚酯材料,優(yōu)選是含PLA材料,甚至更優(yōu)選是含PLLA材料。

14.一種用于降解含聚酯材料的方法,其中使含聚酯材料與權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)的多肽、權(quán)利要求9的重組細(xì)胞或其提取物、或權(quán)利要求11或12的組合物接觸。

15.權(quán)利要求14的方法,其中所述含聚酯材料的至少一種聚酯被解聚成單體和/或寡聚物,并且所述方法任選地包括回收由所述解聚產(chǎn)生的單體和/或寡聚物的附加步驟。

16.權(quán)利要求14或15的方法,其包括所述含聚酯材料的預(yù)處理步驟以機(jī)械和/或物理改性所述含聚酯材料和/或化學(xué)和/或生物改性所述含聚酯材料。

17.權(quán)利要求14-16任一項(xiàng)的方法,其中所述含聚酯材料包含PLA,更優(yōu)選是PLLA,并且其中至少乳酸單體和/或寡聚物被回收。

18.一種從含聚酯材料產(chǎn)生單體和/或寡聚物的方法,其包括使含聚酯材料暴露于權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)的多肽、權(quán)利要求9的重組細(xì)胞或其提取物、或權(quán)利要求11或12的組合物,以及任選地回收單體和/或寡聚物。

19.一種含聚酯材料,其包含至少一種聚酯和權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)的多肽和/或權(quán)利要求9的重組細(xì)胞。

20.一種用于制備權(quán)利要求19的含聚酯材料的方法,其包括將聚酯與權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)的多肽和/或權(quán)利要求9的重組微生物混合的步驟,其中所述混合步驟在所述聚酯處于部分或完全熔融狀態(tài)所處的溫度下,優(yōu)選在擠出過(guò)程期間進(jìn)行。

21.一種多肽用于降解含聚酯材料的用途,其中所述多肽包含與如SEQ ID N°1所示的全長(zhǎng)氨基酸序列具有至少75%、80%、85%、90%、92%、95%、99%或100%同一性的氨基酸序列,并且具有聚酯降解活性。

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