專利名稱：可生物降解聚酯和生物活性多肽的離子性分子軛合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物活性多肽的持續(xù)釋放。
人們?yōu)榱擞锌刂频卦隗w內(nèi)釋放藥物成分，已開發(fā)、試驗(yàn)和使用了許多藥物傳送系統(tǒng)。例如，使用聚(DL—乳酸)、聚乙醇酸、聚(ε-己內(nèi)酯)等聚酯和各種其他共聚物以釋放孕酮等生物活性分子。使用所述聚酯等時(shí)，采用微膠囊、薄膜、棒條等形式(Pitt CG，Marks，TA，和Schindler，A.1980)。在植入聚合物/治療劑組合物時(shí)，例如皮下或肌內(nèi)值入時(shí)，治療劑在一特定時(shí)間內(nèi)釋放。這些具生物相容性、可生物降解的聚合物系統(tǒng)被設(shè)計(jì)成使被其誘捕的治療劑可從聚合物基質(zhì)滲出。治療劑釋放時(shí)，聚合物在體內(nèi)分解，免除了外科去除植入物的手術(shù)。盡管影響聚合物降解的因素尚不完全清楚，但人們相信聚酯的這種降解可以通過酯鍵對(duì)聚合物成分的非酶自動(dòng)催化水解的易接受性加以調(diào)控。
EPO Publication和US Patent中已發(fā)表了幾篇聚合物基質(zhì)的設(shè)計(jì)及其在調(diào)控治療劑在體內(nèi)的釋放速率和程度的作用的文章。
例如，Deluca(EPO Publication 0 467 389 A2/肯塔基大學(xué))描述了疏水性可生物降解聚合物與蛋白質(zhì)或多肽之間的一種物理相互作用。生成的組合物是治療劑和疏水性聚合物的混合物，它在植入患者體內(nèi)后，能維持治療劑從基質(zhì)的擴(kuò)散釋放。
Hutchinson(US Patent 4，767，628/ICI)通過在聚合物裝置內(nèi)的均勻分散，控制治療劑的釋放。據(jù)其所述，這種制劑能通過兩相交疊而有控制地連續(xù)釋放藥物第一，藥物從制劑表面的擴(kuò)散依存性滲出；第二，藥物通過因聚合物降解所致的水性通道進(jìn)行釋放。
一般而言，本發(fā)明的特征在于，一種持續(xù)釋放藥物的制劑，它由含一至多個(gè)自由羧基的聚酯組成，所述羧基與由至少一個(gè)有效的、離子源的胺構(gòu)成的生物活性多肽進(jìn)行離子共軛。其中，組合物中的多肽的至少50％(重量)與聚酯離子進(jìn)行離子軛合。
在較佳的實(shí)施例中，對(duì)聚酯進(jìn)行修飾，以使羧基對(duì)羥基端基的比例從1以上增大到接近無窮大，即，所有的羥基都可被羧基取代。來源于下列化合物的聚酯是較合適的聚酯的實(shí)例L-乳酸，D-乳酸，DL-乳酸，ε-己內(nèi)酯，1，4-二噁烷-2-酮，ε-己酸，取代和非取代的碳酸三亞甲酯，1，5-二氧雜環(huán)庚-2-酮，1，4-二氧雜環(huán)庚-2-酮，乙交酯，乙醇酸，L-丙交酯，D-丙交酯，DL-丙交酯，消旋-丙交酯，草酸亞烴酯，草酸環(huán)亞烴酯，琥珀酸亞烴酯，(β-羥基丁酸酯)，和任一上述化合物的光學(xué)活性異構(gòu)體、消旋體或共聚物。與傳統(tǒng)的聚酯有關(guān)的其他雜鏈聚合物也可使用(例如，聚原酸酯，聚原碳酸酯，聚縮醛)。
聚酯最好通過與蘋果酸或檸檬酸反應(yīng)而被制成多羧基化的聚酯。
在較佳的實(shí)施例中，聚酯用戊二(酸)酐部分地加以酸端基化。在另一較佳的實(shí)例中，聚酯用戊二(酸)酐全部地加以酸端基化。聚酯的平均聚合度最好在10～300間，20～50間更佳。
本發(fā)明的離子性分子軛合物最好由多羧酸端基化的聚酯與含至少一個(gè)有效離子源的胺基團(tuán)的一堿價(jià)和多堿價(jià)的生物活性多肽軛合而制成。或者，任何聚酯，只要用合適的堿(例如NaOH)預(yù)處理過，都可用以形成本發(fā)明的離子性分子軛合物。而且，任何對(duì)酸穩(wěn)定的多肽都可使用，例如，生長(zhǎng)激素釋放肽(GHRP)，促黃體激素釋放激素(LHRH)、生長(zhǎng)激素釋放抑制因子，bombesin(一種促細(xì)胞分裂劑)，胃泌素釋放肽(GRP)，降鈣素，緩激肽，galanin，促黑激素(MSH)、生長(zhǎng)激素釋放因子(GRF)，糊精，速激肽，胰泌素，甲狀旁腺(激)素(PTH)，腦啡肽，endothlin，降鈣素基因釋放肽(CGRP)，neuromedins(神經(jīng)激肽)，甲狀旁腺(激)素相關(guān)肽(PTHrP)，高血糖素，神經(jīng)降壓素，促皮質(zhì)素(ACTH)，肽YY(PYY)，高血糖素釋放肽(GLP)，腸血管活性肽(VIP)，垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)，蠕動(dòng)素，P物質(zhì)，神經(jīng)肽Y(NPY)，TSH，和同類物以及它們的片斷。這樣的離子性分子軛合物可以預(yù)定速率在體內(nèi)釋放其生物活性成分，預(yù)定速率由化學(xué)結(jié)構(gòu)，分子量和這些軛合物的兩個(gè)成分的pKa決定。藥物釋放的一種機(jī)制要求不溶性軛合物狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)樗苄猿煞郑糠值?，系通過疏水性聚酯的水解。這樣，活性多肽的釋放獨(dú)立地隨下列因素而增加a)活性多肽和聚酯間的pKa差異減??；b)表現(xiàn)在羧基的親核性上的聚酯鏈的化學(xué)反應(yīng)性；c)聚酯密度的減小，因?yàn)樗c玻璃(態(tài))化溫度和最小可結(jié)晶性有關(guān)；和d)基質(zhì)親水性的增加。
在較佳實(shí)施例中，多肽占離子性分子軛合物的總重量的1～50％，而組合物中的多肽的85％以上，更好的為95％，尤其好的為99％與聚酯離子軛合；離子性分子軛合物中的聚酯成分的氯仿中的粘度約為0.05—0.7dl/gm；且聚酯的平均分子量約為1200—40,000。
本發(fā)明的聚合離子性分子軛合物不必運(yùn)用需要多相乳狀液或非水性二相系統(tǒng)的加工操作而可容易地制成可注射微球或微粒、可植入的薄膜或棒條。微粒最好通過a)溶解組合物于非質(zhì)子性、水可溶的有機(jī)溶劑中；b)在水中混入有機(jī)溶劑；和c)從水中分離出微粒而制得。在較佳的實(shí)施例中，有機(jī)溶劑選自下列的組丙酮，乙腈，四氫呋喃，二甲基甲酰胺，和乙二醇二甲醚。
在較佳實(shí)施例中，聚酯/多肽離子性分子軛合物可以在至少20天，最佳可高達(dá)70天但不少于7天的期間內(nèi)，于體內(nèi)釋放有效治療劑量的生物活性多肽，在另一些較佳實(shí)施例中，治療用離子性分子軛合物的釋放基本上是單相的。
本發(fā)明的持續(xù)釋放組合物最好通過下法制成a)提供含游離羧基的聚酯和含至少一個(gè)有效的離子源的胺的多肽，b)使聚酯與多肽產(chǎn)生離子性軛合以形成離子性分子軛合物，其中，組合物中的多肽的至少85％(重量)與聚酯發(fā)生離子性軛合。聚酯可以是含足夠量游離羧基的那種聚酯，或者，如果對(duì)開始時(shí)所需要的肽負(fù)載水平而言，只存在不充分的游離羧基數(shù)，則聚酯可以a)通過酯化或官能交換，使之與例如蘋果酸或檸檬酸反應(yīng)，或b)用例如戊二(酸)酐使之酸端基化，或3)聚酯可用(例如NaOH)加以處理，以露出酸基團(tuán)。最后，聚酯/多肽離子性分子軛合物可被轉(zhuǎn)變成可體內(nèi)釋放多肽的可植入的薄膜或棒條，或可注射的微球或微粒。
聚酯最好在多羧基羥基酸(例如蘋果酸或檸檬酸)的存在下，通過一個(gè)或多個(gè)羥基酸(例如乙醇酸和乳酸的催化或自動(dòng)催化的直接縮合加以合成。由此形成的聚酯具有酸端基化的羥基端基，該端基最好部分地或全部地被酸端基化。
聚酯也可以在鏈引發(fā)劑(例如羥基聚羧酸)的存在下，通過內(nèi)酯的催化開環(huán)聚合反應(yīng)，或通過ε-己內(nèi)酯、1，4-二噁烷-2-酮、碳酸三亞甲酯、1，5-二氧雜環(huán)庚-2-酮或1，4-二氧雜環(huán)庚-2-酮等環(huán)狀單體的聚合反應(yīng)加以合成。
另一種合成方法包括將羥基酸與環(huán)狀二聚體反應(yīng)，接著，在羧酸的存在下，進(jìn)行開鏈系統(tǒng)的縮合。
還有另一種合成方法包括將有機(jī)聚羧酸與預(yù)先形成的聚酯進(jìn)行反應(yīng)。
在上述的較佳實(shí)施例中，酸端基化的聚酯的羧基/羥基端基的比例大于1，接近于無窮大(即，消除了所有羥基)，所具平均聚合度在10-300之間，且在特別理想的實(shí)施例中，平均聚合度為20—50。
另外，也可以通過用(例如NaOH)處理，使聚酯具有可與活性多肽形成離子性分子軛合物的能力。
聚酯/多肽離子性分子軛合物最好通過聚酯(例如自由態(tài)的)和多肽(例如自由態(tài)的)在合適的液體介質(zhì)中直接相互作用而合成。在其他較佳實(shí)施例中，適合于軛合物形成的溶劑是非質(zhì)子性溶劑(例如丙酮、四氫呋喃、或乙二醇二甲醚)和適合于多肽的溶劑(例如水)的混合液，其比例以使兩個(gè)系統(tǒng)混溶為準(zhǔn)。多肽最好為pKa值大于或等于3，5的一元酸的鹽。而且，多肽最好含有至少一個(gè)有效的離子源的胺基團(tuán)。
在較佳實(shí)施例中，多肽占聚酯/多肽離子性分子軛合物的1—50％(重量)，較佳的為10—20％(重量)。在較佳實(shí)施例中，可獲得的聚酯的羧基部分地被堿金屬離子或有機(jī)堿所中和。在另一些較佳實(shí)施例中，堿處理造成聚酯的鏈解離和低分子量結(jié)合點(diǎn)的形成。
此處使用的“多肽”一詞，是指蛋白質(zhì)、肽、寡肽或合成寡肽。
此處使用的“多羧基的”一詞，是指含一個(gè)以上羧基的化合物，例如蘋果酸和檸檬酸。
此處所用的“平均聚合度”一詞，是指重復(fù)的單體序列的數(shù)量。
此處所用的“有效離子源的胺”一詞，是指含有至少一個(gè)在優(yōu)勢(shì)條件下，具有形成離子能力的胺的多肽。
此處所用的“酸端基化的”一詞，是指含酸末端的化合物。
此處所用的“部分酸端基化的”一詞，是指其羥基端基的1—99％酸端基化了的化合物。
此處所用的“全部酸端基化的”一詞，是指其羥基端基的99.9％以上酸端基化了的化合物。
此處所用的“羥基酸”一詞，是指含羥基和羧基的任何化合物。
此處所用的“單羧基羥基酸”一詞，是指含一個(gè)羧基和一個(gè)或多個(gè)羥基的有機(jī)酸。
此處所用的“多羧基羥基酸”一詞，是指含一個(gè)以上羧基的羥基酸。
此處所用的“有機(jī)共沸劑”一詞，是指與水共餾的有機(jī)液體。
此處所用的“生物活性的”一詞，是指引起或影響生物學(xué)結(jié)果的分子。
此處所用的“無環(huán)化”一詞，是指由開環(huán)產(chǎn)生的化學(xué)反應(yīng)。
此處所用的“縮聚(作用)”一詞，是指由兩個(gè)或多個(gè)分子縮合而形成聚酯。
本發(fā)明提供了一種新的藥物組合物，該組合物將生物相容性的、可生物降解的聚酯與寡肽、多肽、肽和/或蛋白質(zhì)進(jìn)行結(jié)合，形成均一的離子性物種。通過將不同分子量的聚酯與治療劑進(jìn)行化學(xué)結(jié)合，可更準(zhǔn)確地使組合物的化學(xué)特性適合在體內(nèi)有控制地單相釋放生物活性多肽分子的要求。而且，可容易地使本發(fā)明的組合物最優(yōu)化，以使其具有的官能性能能負(fù)載更多量的治療用活性多肽。
對(duì)本發(fā)明的其他特性和優(yōu)點(diǎn)，通過下面的較佳實(shí)施例的詳細(xì)描述和權(quán)利要求進(jìn)行說明。


圖1表示多羧酸端基化了的丙交酯/乙交酯(蘋果酸型)共聚物。
圖2表示描述丙交酯/乙交酯(蘋果酸型)共聚物與(BIM-23014)相互作用的離子性分子軛合物。
圖3為描述于37℃下、在28日間，從離子性分子軛合物釋放出的肽的百分比的圖表。<合成>
通過選擇合適的結(jié)構(gòu)單體、共聚〔用〕單體或共聚物形成具有預(yù)定的組成和分子量的鏈，使可生物降解或可吸收的聚酯具有所希望的化學(xué)活性；以提供有控制的鏈水解性并顯示出與在生理pH時(shí)，擁有凈負(fù)電荷的寡肽、多肽或蛋白質(zhì)的最大的結(jié)合能力(參見圖2等)。
一種三步(法)合成設(shè)計(jì)被用于制備本發(fā)明的組合物。該合成設(shè)計(jì)不超出從事本領(lǐng)域工作、且掌握常規(guī)技術(shù)的人的能力范圍，它包括1)多羧酸端基化了的聚酯的合成；2)通過多羧酸端基化了的聚酯(或堿處理過的聚酯)和生物活性多肽的相互作用，合成聚酯/多肽的離子性軛合物；和3)離子性軛合物轉(zhuǎn)化成能在體內(nèi)釋放治療劑至少7天的植入物、棒條、微球或微粒。1)多羧酸端基化了的聚酯的合成通過例如2-羥基酸與多羧基有機(jī)酸的直接縮合、無環(huán)化產(chǎn)物的分段生長(zhǎng)聚合、內(nèi)酯或內(nèi)酯混合物的開環(huán)聚合、或多羧基有機(jī)酸與預(yù)先形成的高分子量聚酯的官能互換(參見圖1)等方法，合成本發(fā)明的多羧酸端基化了的聚酯鏈。下面說明使用上述方法的多羧酸端基化了的聚酯的合成。
光學(xué)活性或非活性的2-羧基酸和預(yù)定量的多羧基有機(jī)酸在無機(jī)或有機(jī)金屬催化劑的存在或不存在下的直接縮合，例如，乙醇酸與DL-乳酸、DL-蘋果酸的縮合，一般通過在少量多羧基羥基酸的存在下，在有干燥氮?dú)獾倪B續(xù)流入和能使物料攪拌的玻璃反應(yīng)器中，加熱單羧基羥基酸或兩個(gè)或多個(gè)單羧基羥基酸來加以完成(稱為IA型聚酯，參見表1)。一般縮聚反應(yīng)在150—170℃下反應(yīng)4—72小時(shí)。反應(yīng)液的攪拌可以用磁性攪拌子或向聚酯物料吹入氮?dú)鈿馀輥磉M(jìn)行聚合反應(yīng)進(jìn)行至達(dá)到所希望的平均分子量(由溶液粘度確定)和/或酸值(由端基滴定確定)。用端基滴定法進(jìn)行的聚酯分析的方法如下準(zhǔn)確秤量聚酯試樣(300—500mg)，溶于少量(10—30ml)的丙酮中。溶解后，用苯甲醇(Mallinckrodt，分析純)稀釋溶液至100ml，然后，用氫氧化鉀的苯甲醇溶液進(jìn)行滴定至弱粉紅色終點(diǎn)(酚酞)(用HCl標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)定)。將用于試樣的堿溶液體積(ΔVs)與用于溶劑空白的堿溶液的體積(ΔVo)進(jìn)行比較，以確定聚酯的酸值。 聚合結(jié)束后，分離并從合適的有機(jī)溶液中，用水或稀氫氧化鈉水溶液提取聚酯，以去除水溶性或可溶性低分子量鏈。
用GPC法進(jìn)行的聚酯分析的方法如下用Waters 6000型溶劑輸送泵和Dynamax(Rainin)UV-D型檢測(cè)儀進(jìn)行GPC，確定聚酯的平均分子量。操作在四氫呋喃(Burdick & Jack son UV級(jí))中用Jordin Gel DVB 1000，50cm×10mm柱(Jordi Associates)于25℃，1.2ml/min的流速下進(jìn)行。在220nm和1.0AUFS檢測(cè)峰。分離柱用MW＝4000，9200和25,000的窄帶聚苯乙烯參比標(biāo)準(zhǔn)品(Polysciences In C.)作校準(zhǔn)。
直接縮合方法的一種改良法要求使用有機(jī)共沸劑和作為縮合催化劑的陽離子交換樹脂(稱為IB型聚酯，參見表I)。該方法需要過濾和蒸餾步驟，以分別除去催化劑和共沸劑。用這些方法制備的聚酯的代表性例子和相應(yīng)的分析數(shù)據(jù)示于表I。
表I用直接縮合法制備的聚酯IA型聚酯聚合物 進(jìn)料量聚合條件酸值 固有 Tg，*編號(hào)# 粘度 (℃)1 L-乳酸(88％)35.7gm(0.349M) 100℃/0.7hr 563 0.24 11乙醇酸4.65gm(0.612M) 165℃/17.5hrs檸檬酸 1.75gm/(0.0091M)2 L-乳酸(88％)25.6gm(0.25M)165℃/22hrs 820 0.14 27乙醇酸19.2gm(0.25M)蘋果酸1.5gm(0.011M)IB型聚酯3 L-乳酸(88％)25.6gm(0.25M)132℃/53hrs 842 0.11 15乙醇酸19.2gm(0.25M)檸檬酸 2.13gm(0.011M)用迪安-斯達(dá)克Amberlyst(商品名) 榻分水器傾析。
催化劑珠#150.5gm 在丙酮中過濾、甲苯150ml 干燥。水洗，真空干燥。4 L-乳酸(88％)25.6gm(0.25M)132℃/68hrs 1421 0.20 28乙醇酸19.2gm(0.25M)蘋果酸1.5gm(0.011M)用迪安-斯達(dá)克Amberlyst(商品名) 塌分水器。傾析、甲苯100ml 干燥、水洗、真空干燥。
*用差示掃描量熱計(jì)(TA 2100 DSC)測(cè)定(試樣2—10mg，加熱速率10℃/min，氮?dú)庵?
無環(huán)化產(chǎn)物的分段生長(zhǎng)聚合，除了它使用單羧基羥基酸、仲羥基酸的環(huán)化二聚物、羥基聚羧酸的混合物外，與上述的縮合過程基本一致，其中，讓羥基酸與環(huán)化二聚物反應(yīng)，并在預(yù)定量的聚羧酸的存在下，和在合適的縮合催化劑，例如乙醇酸、L-丙交酯和DL-蘋果酸的存在或不存在下，與產(chǎn)生的開鏈系統(tǒng)繼續(xù)縮合。由此方法制備的聚酯的例子和相應(yīng)的分析數(shù)據(jù)列于表II。當(dāng)環(huán)化二聚物用水預(yù)處理時(shí)，該系統(tǒng)可看作單一的分段生長(zhǎng)聚合。
表II無環(huán)化產(chǎn)物的分段生長(zhǎng)聚合I型聚酯聚合物進(jìn)料量 聚合條件 酸值 固有 Tg，*編號(hào) #粘度 (℃)1 L-丙交酯單體 10.0gm(0.07M) 160℃/29hrs 1200 0.21 20乙醇酸 10.7gm(0.14M)蘋果酸0.79gm(0.0061M)2 L-丙交酯單體 20.0gm(0.139M)25—155℃/1.5h 1800 0.13 27乙醇酸 7.1gm(0.093M) 155℃/70hr蘋果酸1.01gm(0.0075M) 溶于DCM，水洗，真空干燥*用差示掃描量熱計(jì)(TA 2100 DSC)測(cè)定(試樣2—10mg，加熱效率10℃/min，氮?dú)庵?在作為鏈引發(fā)劑的預(yù)定濃度的羥基-聚羧酸和催化量的有機(jī)金屬催化劑(例如，在辛酸亞錫的存在下的L-丙交酯、乙交酯和DL-蘋果酸的混合物)的存在下，內(nèi)酯或內(nèi)酯混合液的開環(huán)聚合使用干燥的環(huán)化單體或環(huán)化單體的混合物、羥基-聚羧酸和微量的辛酸亞錫(使用0.33M的甲苯溶液)，所述的環(huán)化單體等在干燥的無氧空氣中，送入裝有磁性或機(jī)械攪拌裝置的玻璃反應(yīng)器中。聚合反應(yīng)在適當(dāng)?shù)募訜徇^程后，于氮?dú)庵羞M(jìn)行至達(dá)到所希望的分子量(由溶液粘度測(cè)定)。聚合反應(yīng)結(jié)束后，降低溫度，將未反應(yīng)的單體在減壓下餾去。然后，冷卻聚酯塊，水溶性的低分子量部分通過低溫提取，從合適的有機(jī)溶劑中除去。再干燥有機(jī)溶液，除去溶劑。分子量由固有粘度和由端基滴定測(cè)出的酸值確定，由此方法制備的聚酯的例子和相應(yīng)的分析數(shù)據(jù)，列于表III。
表III由開環(huán)聚合制備的聚酯III型聚酯聚合物 進(jìn)料量 聚合條件 酸值固有 Tg，粘度 (℃)*1 乙交酯3.22gm(0.028m)120℃/0.5hr2.150 0.79 38L-丙交酯 10.7gm(0.14M) 150℃/6hrs蘋果酸0.79gm(0.0061M) 120℃/11hrs2 乙交酯2.84gm(0.0245M) 120℃/0.5hr1,206 0.08 26D，L-丙交酯20.0gm(0.139M)180℃/2.5hrs蘋果酸0.876gm(0.00541M) 130℃/15hrs3 乙交酯2.84gm(0.0245M) 155℃/1hr 937 0.10 27D，L-丙交酯20.0gm(0.139M)185℃/2.5hrs檸檬酸1.256gm(0.00654M) 190℃/2.5hrs160℃/13hrs4 乙交酯8.06gm(0.0694M) 180℃/1hr 970 0.26 23D，L-丙交酯10.0gm(0.0694M) 185℃/2hrs蘋果酸0.744gm(0.0055M) 195℃/7hrs120℃/9hrs5 乙交酯8.06gm(0.0694M) 150℃/0.5hr10.138 0.39 30D，L-丙交酯10.0gm(0.0694M) 185℃/4hrs1，6-乙二醇 0.656gm(0.00555M) 150℃/1.5hrs120℃/3hrs*用差示掃描量熱計(jì)(TA2100，DSC)測(cè)定(試樣2—10mg，加熱速率10℃/min，氮?dú)庵?**在六氟異丙醇中多羧基或羥基-有機(jī)多元酸與其整體的COOH/OH的比例實(shí)際上為零的預(yù)先形成的高分子量的聚酯的官能變換，要求在微量的有機(jī)金屬催化劑(例如辛酸亞錫)的存在下，將高分子量的聚酯與預(yù)定量的聚羧酸或羥基一聚羧酸加熱，為產(chǎn)生COOH/OH≥1的低分子量的聚酯，所述官能互換最好在有機(jī)金屬催化劑(例如，在辛酸亞錫的存在下，帶DL-蘋果酸的、COOH/OH≤1和分子量大于5,000的85/15丙交酯/乙交酯的熔融反應(yīng)物)的存在下進(jìn)行。在劇烈攪拌下于氮?dú)庵校?50℃以上溫度加熱反應(yīng)物直至官能互換完成(由殘存的未反應(yīng)的聚羧酸消耗來測(cè)定)。實(shí)際上，這是通過監(jiān)測(cè)生成的低分子量聚酯和存在的未反應(yīng)聚羧酸而確定的(用毛細(xì)管粘度計(jì)在28℃下測(cè)定溶液粘度)這是通過用水提取聚酯試樣，然后用高效液相色譜(HPLC)分析提取物來進(jìn)行，殘存的單體、二聚物和多聚羧酸的水平通過使用Waters 6000型溶劑輸送泵和Dynamax(Rainin)UV-D型檢測(cè)儀(205nm，1.0AUFS)，用HPLC測(cè)定。溶劑使用0.025N Na2PO4緩沖液(pH＝3.5)，isocratic流速為1.0ml/min，分離柱是Nucleosil C18(5μm，25cm×4.6mm)。
分離出所希望的聚酯，按與上述的開環(huán)聚合時(shí)同樣的方法進(jìn)行純化。用此方法制備的聚酯的例子和相應(yīng)的分析數(shù)據(jù)示于表IV。
表IV由官能互換制備的聚醌I(xiàn)V型聚酯聚合物進(jìn)料量 聚合條件 酸值 固有粘度 Tg，7inh ℃*1 Boehringer A001 8gm(50/50dl-丙交酯/乙交酯) 150℃/5hrs 6700.26 25檸檬酸**0.8gm(0.00417M)*用差示掃描量熱計(jì)(TA 2100 DSC)測(cè)定(試樣2—10mg，加熱速率10℃/min，氮?dú)庵?**分析量的辛酸亞錫(0.33M溶液2滴，約0.03nmole)適合于本發(fā)明的聚酯的合成的其他單體有L-乳酸，DL-乳酸，ε-己內(nèi)酯，1，4-二噁烷-2-酮，ε-己酸，碳酸三亞甲酯，1，4-二氧雜環(huán)庚-2-酮，1，4-二氧雜環(huán)庚-2-酮，乙交酯和消旋-丙交酯。有用的多羧基鏈引發(fā)劑和/或鏈改性劑的例子包括蘋果酸和檸檬酸。
2)通過多羧酸端基化了的聚酯和生物活性多肽的離子相互作用進(jìn)行的聚酯/多肽離子軛合物的合成。
上述的多羧酸端基化的可生物降解的聚酯被用于與帶可獲得的有效離子源的胺基的單羧基或多羧基的寡肽、多肽或蛋白質(zhì)形成離子性分子軛合物(參見圖2)。而且，要使任何聚酯具有與多肽形成離子性分子軛合物的能力，除非聚酯被堿(例如0.1N NaOH)處理。這些處理使聚酯的酸基團(tuán)露出，以與陽離子性多肽產(chǎn)生多部位離子相互作用。
這樣，在有或沒有用無機(jī)堿對(duì)聚酯進(jìn)行預(yù)處理、以使聚酯與堿性藥物的結(jié)合額定量達(dá)到最大的情況下，通過在合適溶劑中的成分的直接分子相互作用，形成這些軛合物。如前面指出的那樣，這些離子軛合物成分的離子相互作用，隨著它們的pKa值的差值而增大。
將聚酯在2—20％(W/V)的濃度范圍內(nèi)溶于合適的溶劑中。這些溶劑必須能溶解聚酯，而且還需能與水部分混溶。用于此目的的合適的溶劑包括四氫呋喃、丙酮和乙二醇二甲醚。在此溶液中，加入堿(例如氫氧化鈉和鉀或碳酸鈉和鉀)的水溶液，以使聚酯的結(jié)合容量達(dá)到最大。一般而言，添加的堿的量相當(dāng)于由待使用的堿性肽的抗衡陰離子水平所代表的酸的量。
在粗略地混合聚酯-堿混合物后，加入肽或肽鹽的水溶液，達(dá)到2—50％(W/W，肽/聚酯)的肽/聚酯負(fù)載水平。將該混合液攪拌一段時(shí)間(達(dá)3小時(shí))，然后除去溶劑，將生成物在真空下干燥。該生成物也可以按劑量配方需要，作進(jìn)一步加工。生成的藥用組合物被設(shè)計(jì)成整個(gè)由離子性分子軛合物組成的化學(xué)性均一的組合物，和實(shí)際上沒有在可生物降解的基質(zhì)中的活性藥物的微觀上的或宏觀上的分散的區(qū)域。制備好的離子性分子軛合物的例子和相應(yīng)的分析數(shù)據(jù)示于表V。
表V離子性分子軛合物-肽結(jié)合1使用的聚合物肽2負(fù)載量％保留值3％1 50/50dl丙交酯/乙交酯 I 10 47(商品化的) I 20 25酸值＝22.000 II20 73固有粘度ηinh＝0.53 III 20 48.52聚L-丙交酯 I 10 62(商品化的) II20 40MW(ave)＝2,000酸值＝8503 聚L-丙交酯 I 10 54(商品化的)MW(ave)＝50,000
酸值＝21004 48/48/4聚d，1-丙交酯/乙交 I 2043酯/1，6-環(huán)己二醇(方法II)酸值＝10,138固有粘度ηinh＝0.395 49/49/2聚L-乳酸/乙醇酸I 10100/蘋果酸 I 2099(IB型) I 3095.5酸值＝1400 I 4096.0固有粘度ηinh＝0.20I 5099.8II2099.8III 2077.5683.3/14.7/2聚L-乳酸/乙醇酸 I 2096/檸檬酸(IA型)酸值-563固有粘度ηinh＝0.24749/49/2聚d，1-丙交酯/乙交 I 2096酯/蘋果酸(II型) III 2073.9酸值＝1200固有粘度ηinh＝0.21848/48/4聚d，1-丙交酯/乙交 I 1090酯/檸檬酸(III型)酸值＝589固有粘度ηinh＝0.22
1.在所有情況中，以丙酮作為溶劑，氫氧化鈉作為堿，軛合物如教科書中描述的那樣而形成。使用的所有肽皆為其醋酸鹽。
2.肽I BIM-21003 D-Trp6-LMRM(pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly NH2)pka＝10.1 pka＝9.8III BIM-26226(H2N-D-F5Phe-Gln-Trp-Ala-Val-D-Ala-His-Leu-OCH3)pka＝8.03.保留值通過用去離子水沖洗干燥的聚酯/多肽離子軛合物和對(duì)溶解于清洗水中的肽用HPLC進(jìn)行定量而測(cè)定。 3)將離子軛合物轉(zhuǎn)換成能在體內(nèi)以單相型釋放治療劑至少20日的植入物、棒條、微球或微粒。
本發(fā)明的離子軛合物可以轉(zhuǎn)換成A)含1～50％(重量)多肽的無菌的可注射的微球(有或沒有0.1～10％的固體多羥基醇作為操作助劑)；所述的多肽可基本上按照單相型進(jìn)行釋放并在1～12周內(nèi)持續(xù)藥理活性。b)在有或沒有無藥理活性的操作助劑的情況下，通過澆鑄、壓?；驍D壓，制成與A)中所述相同的、可提供釋放外形的無菌的可植入的薄膜；和c)通過擠壓或壓模制成的、與A)中所述相同的、可提供釋放外形的無菌的可植入的棒條。體外釋放試驗(yàn)干燥的研過的離子軛合物試樣各50mg，置入直徑25mm的閃爍管中，再在各個(gè)管內(nèi)加入5ml的改進(jìn)型PBS緩沖液(PBS緩沖液2.87gm Na2HPO4，0.654gm NaH2PO4，5.9m NaCl，0.5gmNaN3，Q.S.1.0 L，用去離子水；pH＝7.27)將管子置入實(shí)驗(yàn)室用搖動(dòng)器中，在37℃下以120R.P.M回蕩。定時(shí)取出管子，傾去上清液并用新鮮PBS溶液重新裝滿。用HPLC在傾出的PBS溶液中測(cè)定釋放出來的肽的量。從離子性軛合物抽取肽將50mg的離子性分子軛合物與20ml的二氯甲烷混和?；旌弦哼B續(xù)用50ml、20ml和20ml的2N醋酸提取。合并醋酸提取液，用高效液相色譜(HPLC)分析肽含量。HPLC的肽分析按如下方法進(jìn)行。HPLC分析使用Wsters M-4型溶劑輸送泵和EM Science MACS700s檢測(cè)儀在220nm和1.0AUFS進(jìn)行。用Lichrospher(EM sep-arations)C18，1000，5μm，25cm×4.6mm柱進(jìn)行分離，isocratic洗脫緩沖液為30％乙腈/0.1％TFA。
下列是體外試驗(yàn)的詳細(xì)數(shù)據(jù)(表VI)，它們顯示了49∶49∶2 L-乳酸/乙醇酸/蘋果酸\D-色氨酸6〔LHRH〕(實(shí)施例8)、49∶49∶2 L-乳酸/乙醇酸/蘋果酸\生長(zhǎng)激素釋放抑制因子-腫瘤抑制類似物(實(shí)施例9)和73.5∶24.5∶2聚L-丙交酯/乙醇酸/蘋果酸D-色氨酸6〔LHRH〕(實(shí)施例10)離子性分子軛合物在28天期間所釋放的肽的量。圖3為這些數(shù)據(jù)的圖形表達(dá)。
表VI體外試驗(yàn)數(shù)據(jù)試驗(yàn)日數(shù)占所有釋放出來的肽的百分比實(shí)施例8 實(shí)施例9 實(shí)施例101 5.5％12.5％11％7 26.9％ 21.3％53％1455.2％ 47.3％55％1784.4％ 72.2％60％2198.6％ 82.5％66％
24 100％ 98.2％ 75％28— 99.6％ —離子性軛合物中的肽的定量軛合產(chǎn)物中離子性結(jié)合的肽的測(cè)定是通過將10mg試樣溶于丙酮和0.1M三氟醋酸水溶液(9∶1)的混合液中進(jìn)行。將溶液在25℃回蕩15—24小時(shí)，然后用0.5μm特氟隆過濾筒過濾。濾液隨后用HPLC進(jìn)行肽含量分析。HPLC的肽分析使用Millipore(密理博)公司的717 Wisp型自動(dòng)進(jìn)樣器、510型泵和486型紫外檢測(cè)儀(設(shè)定在220nm)。分離肽的柱子為25cm×4.6mm的Lichrospher C18(EMSeparations，5μm，100)，流速為1.0ml/min，洗脫系統(tǒng)為含35％乙腈的0.14％高氯酸鈉緩沖液。肽的量是通過比較試樣的準(zhǔn)確的峰面積和注入的肽標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積加以確定的。
這里所說的任何帶酸的聚酯/多肽離子性軛合物都可以單獨(dú)或與藥學(xué)上可接受的媒體一起用于受體。盡管通過皮下、肌下和腸胃外施藥，用栓劑或滴鼻劑施藥比較方便，但治療用配制物須根據(jù)所處理的條件進(jìn)行施用。在本發(fā)明的配方中的組合物的濃度將隨著一些事項(xiàng)(包括施用的劑量和方法)而變化。
可以相信，本行業(yè)的熟練工作者不需要進(jìn)一步努力便能利用前面的說明，最大程度地運(yùn)用現(xiàn)成的本發(fā)明。因此，下面的實(shí)施例須解釋為僅僅是對(duì)本公開的其他部分的描述，而決非是限制。
實(shí)施例1直接縮合法——由Amerlyst 15催化的50/50 D，L-乳酸/乙醇酸共聚物的合成將D，L-乳酸(85％水混合物，13.7克，0.13摩爾)與乙醇酸(10克，0.13摩爾)在裝備有磁性攪拌器和迪安一斯達(dá)克榻分水器及水冷凝管的圓底瓶中混合，另入甲苯(100ml)和Amerlyst 15小珠(100mg)，在氮?dú)庵?，將混合液回?2小時(shí)，從混合液中除去水。冷卻混合液，從固體物中傾去甲苯，將產(chǎn)物溶于二氯甲烷(250ml)中。二氯甲烷溶液用活性炭(Darco，500mg)處理，過濾并在施轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中真空干燥。進(jìn)一步將聚酯于40℃下，在高真空(1mmHg)中干燥，得到白色粉末。
(氯仿中的ηinh＝0.3，酸值＝2439，Tg＝12℃)實(shí)施例2直接縮合法—由Amberlyst 15催化的49/49/2 L-乳酸/乙醇酸/檸檬酸共聚物的合成使用與上述相類似的體系，將L-乳酸(88％水混合物，25.6克，0.25摩爾)與乙醇酸(19.2克，0.25摩爾)、檸檬酸一水合物(2.33克，0.011摩爾)，Amberlyst 15小珠(500mg)和甲苯(150ml)在圓底燒瓶中混合。將混合液在攪拌下加熱，回流51小時(shí)，用迪安一斯達(dá)克榻分水器除去水。從半固體物中傾去甲苯。將聚酯溶于丙酮(330ml)，過濾并在轉(zhuǎn)旋蒸發(fā)儀中蒸干。然后，將固體的聚酯再溶于二氯甲烷中，水洗二次(2×150ml)，以除去可溶性低聚物。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮有機(jī)溶液，在真空中徹底干燥，得到白色固體(參見表I，IB型聚酯，聚合物4)。
(在氯仿中的ηinh＝0.11，酸值—842，Tg＝15℃)實(shí)施例3階段生長(zhǎng)聚合法——由蘋果酸催化的73.5/24.5/2L-丙交酯/乙醇酯/蘋果酸共聚物的合成使用有空氣碰撞取樣器的150ml圓筒式安瓿，將L-丙交酯(20克，0.139摩爾)和乙醇酸(7.1克，0.093摩爾)、(d、l)-蘋果酸(1.0克，0.0075摩爾)混合于其中?；旌弦和ㄟ^從碰撞取樣器的進(jìn)料口吹入氮?dú)?100ml/min)進(jìn)行攪拌，并在100分鐘內(nèi)將溫度從25℃加熱至155℃。反應(yīng)溫度于70小時(shí)內(nèi)保持在155℃，聚合生成的水被反應(yīng)器的出料線路處的冷阱除去。70小時(shí)后，將反應(yīng)液冷卻至100℃，并注入冷卻的不銹鋼受器中以使反應(yīng)液硬化。然后將固體的聚酯重新溶于二氯甲烷中，水洗二次(2×150ml)以除去可溶性低聚物。將有機(jī)溶液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮，并將產(chǎn)物在真空下徹底干燥，得到白色固體(見表II，II型聚酯，聚合物2)。
(在氯仿中的ηinh＝0.13，酸值＝1800，Tg＝27℃)實(shí)施例4開環(huán)聚合法——由蘋果酸引發(fā)的75/25 L-丙交酯/乙交酯共聚物的合成。
將L-丙交酯(12.0克，0.0833摩爾)、乙交酯(3.21克，0.0277摩爾)、蘋果酸(0.3042克，0.00227摩爾)和辛酸亞錫催化劑(0.33M甲苯溶液，67μ，0.022毫摩爾)在干燥氮?dú)庀录尤胗写帕嚢杵鞯牟ＡО碴持?。在將安瓿封口前，用N2沖洗該系統(tǒng)，并抽真空數(shù)次。然后，在140℃將反應(yīng)物溶化，溶化物在180℃、190℃、180°、和150℃分別加熱1、4.5、12和2小時(shí)。冷卻至室溫后，將聚酯在低于1mmHg的真空下，重新加熱至110℃約1小時(shí)，以除去單體，然后在室溫中冷卻，置入液氮中使其聚冷，分離和真空干燥。
(氯仿中的ηinh＝0.20，酸價(jià)＝2560，Tg＝39℃)實(shí)施例5開環(huán)聚合法——由檸檬酸引發(fā)的50/50 D，L-丙交酯/乙交酯共聚物的合成。
將D，L-丙交酯(10.0g，0.0694摩爾)和乙交酯(8.06克，0.064摩爾)、檸檬酸(1.07克，0.0055摩爾)及辛酸亞錫催化劑(0.33M甲苯溶液，84μL，0.0278毫摩爾)在干燥氮?dú)庀轮萌胗写帕嚢杵鞯牟ＡО碴持谢旌?。溶化反?yīng)物，并分別在180℃、185℃、195℃和120℃加熱1、2、7和9小時(shí)。將聚酯冷卻至室溫，置入液氮中使其驟冷，然后分離和干燥。
(氯仿中的ηinh＝0.26，酸值＝970，Tg＝23℃)實(shí)施例6開環(huán)聚合法——由1，6-己二醇引發(fā)的50/50 D，L-丙交酯/乙交酯共聚物的合成使用與上述相似的系統(tǒng)，將D，L-丙交酯(10.0g，0.0694摩爾)、乙交酯(8.06克，0.0694摩爾)、1，6-己二醇(0.656克，0.00555摩爾)和辛酸亞錫(0.33M甲苯溶液，84μL，0.0278毫摩爾)在干燥氮?dú)庵屑尤胫敛ＡО碴持?，隨后，在真空中將安瓿封口。分別在150℃、185℃、150℃和120℃將其加熱0.5、4、1、5和3小時(shí)?；厥丈傻木埘ゲ⒓右愿稍?參見表III，III型聚酯，聚合物5)。
(在氯仿中的ηinh＝0.39，酸價(jià)＝10138，Tg＝30℃)實(shí)施例7官能互換法——帶羧基的50/50D，L-丙交酯/乙交酯共聚物的合成。
將50/50 D，L-丙交酯/乙交酯(Boehringer A001，8克)、檸檬酸(0.8克，4.16毫摩爾)和辛酸亞錫2滴在干燥氮?dú)庵屑尤胫敛ＡО碴持?，然后封口。?50℃加熱混合物4小時(shí)，然后冷卻至室溫，置入液氮中使其聚冷，分離并干燥(參見表IV，IV型聚酯，聚合物1)。
(氯仿中的ηinh＝0.26，酸價(jià)＝670，Tg＝23℃)實(shí)施例849∶49∶2 L-乳酸/乙醇酸/蘋果酸(參見表I，聚合物4)和D-色氨酸6〔LHRH〕的離子性分子軛合物的合成。
將500mg的49∶49∶2 L-乳酸/乙醇酸/蘋果酸(用直接縮合法合成制得；分子量＝9500，酸價(jià)＝1420)溶于10ml的丙酮(Mallinckrodt分析試劑)中。加入1.14ml 0.1N氫氧化鈉溶液，將混合物在室溫下攪拌15分鐘。加入含100mg的D-色氨酸6〔LHRH〕(BIM-21003肽I；堿含量87％，醋酸鹽含量7％)的1.0ml水溶液，室溫下攪拌混合物1小時(shí)。先在40℃以下用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，然后置于1mmHg真空和室溫下的干燥器中1小時(shí)以除去溶劑。研磨干燥的固體，在100ml去離子水中攪拌，并用過濾法進(jìn)行分離。濾出的水溶液用HPLC進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)含＜1mg的可溶性肽。真空下干燥固體物數(shù)日，得到540mg的白色粉末。粉末用于體外試驗(yàn)(參見表VI，實(shí)施例8)。
實(shí)施例949∶49∶2 L-乳酸/乙醇酸/蘋果酸(參見表I，聚合物4)和生長(zhǎng)激素釋放抑制因子/腫瘤抑制類似物的離子性分子軛合物的合成。
將100mg的49∶49∶2 L-乳酸/乙醇酸/蘋果酸(用直接縮合法合成制得；分子量＝9500，酸價(jià)＝1420)溶于2ml的丙酮(Mallinckrodt分析試劑)中。加入0.32ml的0.1N氫氧化鈉溶液，將混合物于室溫下攪拌15分鐘。加入含20mg的生長(zhǎng)激素釋放抑制因子/腫瘤抑制類似物(BIM-23014肽II；堿含量85％，醋酸鹽含量9.8％)的1.2ml水溶液，室溫下攪拌混合物1小時(shí)。先在40℃以下用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，然后置于1mmHg真空和室溫下的干燥器中1小時(shí)以除去溶劑。研磨干燥的固體，并在20ml去離子水中攪拌，用過濾法進(jìn)行分離。濾出的水溶液用HPLC進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)含＜0.05mg的可溶性肽。在真空中干燥固體物數(shù)日，得到106mg的白色粉末。研磨粉末，并將其用于體外釋放試驗(yàn)(參見表VI，實(shí)施例9)。
實(shí)施例1073.5∶24.5∶2聚L-丙交酯/乙醇酸/蘋果酸(參見表II，聚合物2)和D-色氨酸6〔LHRH〕的離子性分子軛合物的合成將800mg的73.5∶24.5∶2聚L-丙交酯/乙醇酸/蘋果酸(用無環(huán)化產(chǎn)物的階段生長(zhǎng)法合成制得；酸價(jià)＝1800)溶于16ml丙酮中。加入2.8ml的0.1N氫氧化鈉溶液，室溫下攪拌溶液20分鐘。加入200mg的D-色氨酸6〔LHRH〕(BIM-21003；堿含量87％，醋酸鹽含量7％)的2ml水溶液，攪拌混合液90分鐘。除去溶劑，將生成固體在去離子水中研磨，與實(shí)施例8一樣，表明所含的可溶性肽鹽小于1％。將分離出的固體在真空中干燥4日，得到839mg的白色粉末。研磨粉末，將其用于體外釋放試驗(yàn)(參見表VI，實(shí)施例10)。
實(shí)施例11L-丙交酯/乙交酯/d，L-蘋果酸聚酯(65∶33∶2)的肽-聚合物離子性軛合物微粒1.50的形成。
將實(shí)施例4中同樣由開環(huán)聚合法合成而得的軛合物〔分子量＝4700，在Jordi凝膠50×1cm混合線性底柱(mixed linear bed col-umn)上，用THF洗脫液，和Wyatt Mini Daun光散射檢測(cè)儀(dn/dc＝0.05)進(jìn)行GPC，測(cè)得多分散度＝1.3，由滴定測(cè)得酸價(jià)＝1475，Tg＝42℃〕溶于40ml丙酮中。在聚合物溶液中，在攪拌下緩緩加入含0.5克BIM-2304(肽含量83.7％，醋酸鹽含量11.5％)的Milli-Q水溶液20ml以中和酸基團(tuán)。在肽的添加過程中，分批地再加入丙酮40ml以防產(chǎn)生沉淀。攪拌清澄無色溶液1小時(shí)，然后真空蒸干。將生成的白色固體重新溶解于20ml丙酮和2ml Milli-Q水的混合液中，形成清澄溶液。該溶液在4℃下用0.2μ的特氟隆過濾器注入盛有4℃的被快速攪動(dòng)的500ml Milli-Q水的貯液器中。聚合物/肽配位物相在與水接觸時(shí)立即分離成細(xì)粒。漿液在4℃下混合30分鐘后，減壓下除去殘存的丙酮，用離心分離法分離出固體，將其重新懸浮于100ml Milli-Q水中，再離心分離。冷凍干燥分離出的固體，得到1530mg能流動(dòng)自如的白色粉末。粒子的大小范圍＝2—100μm。離子性軛合物的Tg是53℃。HPLC分析顯示在所有上清水溶液中的總殘存(未結(jié)合的)肽為63mg。用氮元素分析法測(cè)得總的初始肽的含量為19.9％(重量)。使用丙酮/0.1MTFA提取技術(shù)，測(cè)得可從軛合物提取的肽的百分比為16.9％(重量)。這樣，生成的軛合物保持約84.8％的離子(可提取的)特性。
根據(jù)上述說明，本行業(yè)的技術(shù)熟練者可容易地弄清本發(fā)明的基本特征。且在不離開本發(fā)明的實(shí)質(zhì)和范圍的情況下，可對(duì)其作各種變化和改良以適應(yīng)各種用途和條件。這樣，本發(fā)明的其他實(shí)施例也在本發(fā)明的權(quán)利要求的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種含聚酯的組合物，其特征在于，所述聚酯含一個(gè)或多個(gè)與含至少一個(gè)離子源胺的生物活性多肽發(fā)生離子性軛合的游離COOH基團(tuán)，存在于所述組合物中的至少50％(重量)的多肽與所述聚酯發(fā)生離子性軛合。
2.如權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，其中所述的聚酯中的羧基與羥基之比大于1。
3.如權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，其中所述的聚酯由從下列化合物組中選出的成分構(gòu)成L-乳酸，D-乳酸，DL-乳酸，ε-己內(nèi)酯，1，4-二噁烷-2-酮，ε-己酸，草酸亞烴酯，草酸環(huán)亞烴酯，琥珀酸亞烴酯，β-羧基丁酸酯，有取代或無取代的碳酸三亞甲酯，1，5-二氧雜環(huán)庚-2-酮，1，4-二氧雜環(huán)庚-2-酮，乙交酯，乙醇酸，L-丙交酯，D-丙交酯，DL-丙交酯，內(nèi)消旋-丙交酯和任一光學(xué)活性異構(gòu)體，或它們的外消旋體或共聚體。
4.如權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，其中所述的聚酯用戊二酸酐進(jìn)行部分酸端基化。
5.如權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，其中所述的聚酯用戊二酸酐進(jìn)行全部酸端基化。
6.如權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，其中所述的聚酯的平均聚合度在10～300之間。
7.如權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，其中所述的聚酯在氯仿中的粘度約為0.05～0.7dl/g，平均分子量約為1200～40000。
8.如權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，其中所述的生物活性多肽占所述離子性分子軛合物的總重量的1～50％。
9.如權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，該組合物中的多肽的85％以上與聚酯離子性軛合。
10.如權(quán)利要求1所述的聚合物，其特征在于，其中所述的多肽選自下列化合物組LHRH，生長(zhǎng)激素釋放抑制因子，bombesin(一種促細(xì)胞分裂劑)/GRP，降鈣素，緩激肽，MSH，GRF，糊精，速激肽，胰泌素，PTH，CGRP，neuromedins(神經(jīng)激肽)，PTHrP，高血糖素，神經(jīng)降壓素，ACTH，GHRP，GLP，VIP，PACAP，腦啡肽、PYY，蠕動(dòng)素，P物質(zhì)，NPY，TSH和它們的類似物或片斷。
11.如權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，其中所述的離子性軛合物具有在至少5日期間于體內(nèi)釋放有效治療劑量的所述多肽的能力。
12.一種合成組合物的方法，其特征在于，它包含(a)提供聚酯和含至少一個(gè)有效離子源胺的生物活性多肽，和(b)將所述聚酯與所述多肽進(jìn)行離子性軛合以形成離子性分子軛合物，其中的多肽離子性地被聚酯軛合。
13.如權(quán)利要求12所述的方法，其特征在于，組合物中的多肽的至少50％(重量)是與聚酯作離子性軛合的。
14.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于，其中所述的聚酯具有酸端基化的羥基端基。
15.如權(quán)利要求14所述的方法，其特征在于，其中所述的羥基端基部分地被戊二酸酐酸端基化。
16.如權(quán)利要求14所述的方法，其特征在于，其中所述的羥基端基全部被戊二酸酐酸端基化。
17.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于，其中所述的聚酯在合成時(shí)使用羥基聚羧酸鏈引發(fā)劑。
18.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于，其中所述的聚酯的羥基端基進(jìn)行了酸端基化。
19.如權(quán)利要求18所述的方法，其特征在于，其中所述的羥基端基團(tuán)戊二酸酐進(jìn)行了部分酸端基化。
20.如權(quán)利要求18所述的方法，其特征在于，其中所述的羥基端基用戊二酸酐進(jìn)行了全部酸端基化。
21.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于，其中所合成的所述聚酯的平均聚合度在10～300之間。
22.如權(quán)利要求21所述的方法，其特征在于，其中所述的聚酯的羧基端基與羥基端基之比大于1。
23.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于，合成所述的聚酯/多肽離子性分子軛合物包含a)將聚酯溶于四氫呋喃、丙酮、或乙二醇二甲醚中，然后加入堿；b)加入多肽或2～50％(W/W，多肽/聚酯)的多肽/聚酯負(fù)載水平的肽的鹽的水溶液。
24.如權(quán)利要求23所述的方法，其特征在于，其中所述的多肽是其pKa值大于或等于3，5的酸的鹽。
25.如權(quán)利要求23所述的方法，其特征在于，其中所述的多肽占所述離子性軛合物的總重量的1～50％。
26.如權(quán)利要求23所述的方法，其特征在于，所述組合物中的多肽的85％與所述聚酯發(fā)生離子性軛合。
27.如權(quán)利要求23所述的方法，其特征在于，其中所述的反應(yīng)使所述的反應(yīng)物之間形成離子鍵。
28.一種組合物，其特征在于，該組合物由權(quán)利要求12的方法制備而成。
29.一種合成微粒的方法，其特征在于，該方法包含a)將權(quán)利要求1的組合物溶于非質(zhì)子性的可與水混溶的有機(jī)溶劑中；b)將所述有機(jī)溶劑與水混和；和c)從所述水中分離出微粒。
30.如權(quán)利要求29所述的方法，其特征在于，其中所述有機(jī)溶劑選自下列一組化合物丙酮，乙腈，四氫呋喃，二甲基甲酰胺，和乙二醇二甲醚。
全文摘要
公開一種持續(xù)釋放的藥用組合物。該組合物包括一個(gè)含一個(gè)與活性多肽離子性地軛合著的游離COOH基團(tuán)的聚酯，所述活性多肽則含有至少一個(gè)有效離子源胺，組合物中的多肽的至少50％(重量)是與聚酯離子性地軛合著的。
文檔編號(hào)A61K38/00GK1115252SQ9410852
公開日1996年1月24日 申請(qǐng)日期1994年7月20日 優(yōu)先權(quán)日1993年1月6日
發(fā)明者沙拉貝W·沙拉貝, 史蒂文A·杰克遜, 雅克-皮埃爾·莫羅 申請(qǐng)人:開納頓有限公司