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阿洛酮糖差向異構(gòu)酶和使用它生產(chǎn)阿洛酮糖的方法與流程

文檔序號(hào):11849933閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.阿洛酮糖差向異構(gòu)酶,由SEQ ID NO:1的氨基酸序列組成。

2.權(quán)利要求1的阿洛酮糖差向異構(gòu)酶,其中所述阿洛酮糖差向異構(gòu)酶來(lái)自于Flavonifractor plautii。

3.權(quán)利要求1的阿洛酮糖差向異構(gòu)酶,其中所述阿洛酮糖差向異構(gòu)酶通過(guò)包括下述步驟的方法生產(chǎn):

(a)通過(guò)培養(yǎng)重組菌株表達(dá)阿洛酮糖差向異構(gòu)酶,所述重組菌株用編碼阿洛酮糖差向異構(gòu)酶的多核苷酸或包含所述多核苷酸的重組載體轉(zhuǎn)化,所述阿洛酮糖差向異構(gòu)酶由SEQ ID NO:1的氨基酸序列組成;以及

(b)從所述重組菌株的裂解物分離阿洛酮糖差向異構(gòu)酶,其中所述重組菌株的裂解物中具有表達(dá)的阿洛酮糖差向異構(gòu)酶。

4.權(quán)利要求3的阿洛酮糖差向異構(gòu)酶,其中所述多核苷酸由SEQ ID NO:2的堿基序列組成。

5.權(quán)利要求3的阿洛酮糖差向異構(gòu)酶,其中所述重組載體具有圖1的切割圖譜。

6.權(quán)利要求3的阿洛酮糖差向異構(gòu)酶,其中分離阿洛酮糖差向異構(gòu)酶的步驟通過(guò)使用肽標(biāo)簽的親和色譜進(jìn)行。

7.用于生產(chǎn)阿洛酮糖的組合物,所述組合物包含:由SEQ ID NO:1的氨基酸序列組成的阿洛酮糖差向異構(gòu)酶、重組菌株、重組菌株的培養(yǎng)物或重組菌株的裂解物,其中所述重組菌株用編碼阿洛酮糖差向異構(gòu)酶的多核苷酸或包含所述多核苷酸的重組載體轉(zhuǎn)化,所述阿洛酮糖差向異構(gòu)酶由SEQ ID NO:1的氨基酸序列組成。

8.權(quán)利要求7的用于生產(chǎn)阿洛酮糖的組合物,其中所述阿洛酮糖差向異構(gòu)酶來(lái)自于Flavonifractor plautii。

9.權(quán)利要求7的用于生產(chǎn)阿洛酮糖的組合物,其中所述多核苷酸由SEQ ID NO:2的堿基序列組成。

10.權(quán)利要求7的用于生產(chǎn)阿洛酮糖的組合物,其中所述重組載體具有圖1的切割圖譜。

11.權(quán)利要求7-10任一項(xiàng)的用于生產(chǎn)阿洛酮糖的組合物,所述組合物進(jìn)一步包含:一種或多種選自由錳離子、鎳離子和鈷離子組成的組的物質(zhì)。

12.生產(chǎn)阿洛酮糖的方法,所述方法包括:

使果糖與阿洛酮糖差向異構(gòu)酶、重組菌株、重組菌株的培養(yǎng)物、重組菌株的裂解物或包含它們的一種或多種的組合物反應(yīng),所述阿洛酮糖差向異構(gòu)酶由SEQ ID NO:1的氨基酸序列組成,

其中所述重組菌株用編碼阿洛酮糖差向異構(gòu)酶的多核苷酸或包含所述多核苷酸的重組載體轉(zhuǎn)化,所述阿洛酮糖差向異構(gòu)酶由SEQ ID NO:1的氨基酸序列組成。

13.權(quán)利要求12的生產(chǎn)阿洛酮糖的方法,其中所述阿洛酮糖差向異構(gòu)酶來(lái)自于Flavonifractor plautii。

14.權(quán)利要求12的生產(chǎn)阿洛酮糖的方法,其中所述多核苷酸由SEQ ID NO:2的堿基序列組成。

15.權(quán)利要求12的生產(chǎn)阿洛酮糖的方法,其中所述重組載體具有圖1的切割圖譜。

16.權(quán)利要求12的生產(chǎn)阿洛酮糖的方法,其中所述組合物進(jìn)一步包含:一種或多種選自由錳離子、鎳離子和鈷離子組成的組的物質(zhì)。

17.權(quán)利要求12-16任一項(xiàng)的生產(chǎn)阿洛酮糖的方法,其中反應(yīng)的溫度是55-67℃,反應(yīng)的pH值是6.5-8。

18.權(quán)利要求12-16任一項(xiàng)的生產(chǎn)阿洛酮糖的方法,其中果糖的濃度是35-75%(w/w)。

19.權(quán)利要求12-16任一項(xiàng)的生產(chǎn)阿洛酮糖的方法,其中所述阿洛酮糖差向異構(gòu)酶或所述重組菌株被固定在載體上。

20.權(quán)利要求12-16任一項(xiàng)的生產(chǎn)阿洛酮糖的方法,其中重組菌株的宿主菌株是細(xì)胞學(xué)安全的菌株。

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