一類(lèi)還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥及其制備方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及化學(xué)藥物領(lǐng)域，具體涉及一類(lèi)還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥的制備與用途，其制備包括以下步驟：制備還原性響應(yīng)的喜樹(shù)堿(CPT)前驅(qū)體；制備還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥。該前藥的自組裝遞送系統(tǒng)，有效提高藥物上載量和雙藥協(xié)同效應(yīng)，解決現(xiàn)有小分子前藥技術(shù)載體比例較高，藥物上載量偏低，難以保證藥物的選擇性可控釋放等問(wèn)題。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
一類(lèi)還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及化學(xué)藥物領(lǐng)域，具體涉及一類(lèi)還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥生物刺激 響應(yīng)型的兩親性小分子前藥的制備與用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 喜樹(shù)堿(Camptothecin，簡(jiǎn)稱CPT，，化學(xué)結(jié)構(gòu)式:C20H16N204，CAS號(hào)：7689-03-4，相 對(duì)分子量:348.43)是從我國(guó)中南、西南的廣泛分布的喜樹(shù)中提純出的一類(lèi)疏水性的抗癌藥 物。喜樹(shù)堿對(duì)肝癌和頭頸部癌等具有強(qiáng)的抗癌活性，其可能的作用機(jī)制是活性喜樹(shù)堿能穩(wěn) 定拓?fù)洚悩?gòu)酶I和DNA的共價(jià)化合物，形成一類(lèi)三元可解離的復(fù)合物，通過(guò)造成DNA的損失， 進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
[0003] 由于喜樹(shù)堿藥物分子尺寸較小且水中溶解度極低，因此在藥物遞送過(guò)程中面臨非 特異選擇性、藥物利用率較低、腎清除率較高以及毒副作用較強(qiáng)等問(wèn)題亟待解決，因此提高 其水溶性和保護(hù)其生物活性具有重要的科學(xué)意義。
[0004] 基于納米技術(shù)的藥物遞送系統(tǒng)（納米藥物)可有效結(jié)合小分子藥物和納米技術(shù)的 雙重優(yōu)勢(shì)，將藥物遞送到腫瘤位點(diǎn)，顯著提高藥物的治療效率和降低毒副作用。一些研究報(bào) 道中，通過(guò)在CPT分子中利用酯鍵或酰胺鍵的連接引入親水性的聚乙二醇，酯鍵的斷裂往往 需要生物體內(nèi)廣泛分布的酯酶參與，而酰胺鍵在生物體內(nèi)一般非常穩(wěn)定，因此基于酯鍵或 酰胺鍵的小分子前藥無(wú)法很好地實(shí)現(xiàn)藥物在腫瘤位點(diǎn)選擇性的釋放，難以有效降低藥物遞 送過(guò)程中引起的毒副作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的一個(gè)目的在于，提供一種兼具小分子前藥和納米藥物優(yōu)勢(shì)于一體的基于 還原響應(yīng)性兩親性小分子前藥及其制備方法，其自組裝的遞送系統(tǒng)能有效提高藥物上載量 和雙藥協(xié)同效應(yīng)，解決當(dāng)前小分子前藥遞送系統(tǒng)靶向傳遞以及藥物選擇性的可控釋放問(wèn) 題，推動(dòng)腫瘤的精確診斷與高效治療的技術(shù)的發(fā)展。
[0006] 本發(fā)明第二個(gè)目的在于，提供上述還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥的制備方法。
[0007] 本發(fā)明的第三個(gè)目的在于，提供還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥在藥物靶向傳遞以 及藥物選擇性的可控釋放靶向藥物傳遞中發(fā)揮的作用。
[0008] 本發(fā)明的上述目的和其他目的通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)解決：
[0009] 還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥是在喜樹(shù)堿的唯一羥基位置引入還原響應(yīng)的雙硫 鍵，再引入親水性藥物分子，該親水性小分子前藥，可以自組裝成高穩(wěn)定性的納米膠束，提 高了疏水性藥物分子的水溶性，增加藥物上載量，其親水性藥物的靶向傳遞功能可精確選 擇釋放出藥物。
[0010] 所述的親水性藥物分子可以是具有靶向功能的葉酸分子，也可以是兼具靶向功能 與藥物功能的甲氨蝶呤。
[0011] 本發(fā)明提供一類(lèi)還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥的制備方法，其特征在于:所述還 原性響應(yīng)兩親性小分子前藥的制備方法包括以下步驟：
[0012] ⑴制備還原性響應(yīng)的喜樹(shù)堿(CPT)前驅(qū)體:將喜樹(shù)堿(CPT)，三光氣，4-二甲氨基 吡啶（D M A P)的混合物分散到二氯甲烷(D C Μ)中，攪拌過(guò)夜，純化后得到所需產(chǎn)物喜樹(shù)堿 (CPT)前驅(qū)體；
[0013] (2)制備還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥:包含雙硫鍵的喜樹(shù)堿(CPT)前驅(qū)體分散于 對(duì)應(yīng)有機(jī)溶劑中，引入親水性藥物分子葉酸(FA)或氨甲喋呤(ΜΤΧ)，通過(guò)酯化或酰胺化反 應(yīng)，獲得還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥FA-CPT和MTX-CPT，純化后得到所需產(chǎn)物。
[0014]優(yōu)選地，本發(fā)明提供的還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥的制備方法，其特征在于:所 述步驟（1)中喜樹(shù)堿(CPT)前驅(qū)體的合成具體方法如下：氬氣(Ar)氛圍條件下，首先將喜樹(shù) 堿(CPT)原始分子溶于無(wú)水二氯甲烷(DCM)中，接著分別滴加入4-二甲氨基吡啶(DMAP)和固 體三光氣的二氯甲烷(DCM)溶液，避光下攪拌20分鐘后，將含一定量的雙(2-羥基乙基)二硫 醚(BHD)的無(wú)水四氫呋喃(THF)溶液緩慢滴加進(jìn)去，攪拌過(guò)夜。經(jīng)過(guò)分離提純后，獲得純凈的 單羥基取代的喜樹(shù)堿(CPT)前驅(qū)體(BHD-CPT)
[0015]優(yōu)選地，本發(fā)明提供的還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥的制備方法，其特征在于:所 述步驟⑵中還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥FA-CPT的合成具體方法如下:在溫度<0°C和氬 氣(Ar)氛圍條件下，一定量的純凈的單羥基取代的喜樹(shù)堿(CPT)前驅(qū)體(BHD-CPT)、親水性 藥物分子葉酸(FA)、4-二甲氨基吡啶(DMAP)溶于無(wú)水N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中，0°C下避 光攪拌30分鐘，接著加入一定量的1-(3-二甲基氨基丙基）-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽 (EDC · HC1)，0°C攪拌2小時(shí)后升至室溫并攪拌48h，經(jīng)過(guò)分離提純，獲得純凈的還原性響應(yīng) 兩親性小分子前藥產(chǎn)物FA-CPT。
[0016]優(yōu)選地，本發(fā)明提供的還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥的制備方法，其特征在于:所 述步驟(2)中還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥MTX-CPT的合成具體方法如下:在溫度<0°C和 氬氣(Ar)氛圍條件下，一定量的純凈的單羥基取代的喜樹(shù)堿(CPT)前驅(qū)體(BHD-CPT)、氨甲 喋呤(MTX)、4-二甲氨基吡啶(DMAP)溶于無(wú)水二甲基亞砜(DMS0)和N，N-二甲基甲酰胺(DMF) 混合溶劑中（v: v= 1:1)中，0°C下避光攪拌30分鐘，加入一定量的二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)， 〇°C下攪拌2小時(shí)后升至室溫并攪拌48h，純化后獲得純凈的還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥 MTX-CPT〇
[0017] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和有益效果在于:本發(fā)明提出了一類(lèi)兼具小分子前藥和納米藥物優(yōu) 勢(shì)于一體的基于還原響應(yīng)性兩親性小分子前藥及其制備方法，該前藥的自組裝遞送系統(tǒng)， 有效提高藥物上載量和雙藥協(xié)同效應(yīng)，解決當(dāng)前小分子前藥遞送系統(tǒng)靶向傳遞以及藥物選 擇性的可控釋放問(wèn)題，其中，葉酸(靶向功能)和甲氨蝶呤(兼靶向與藥物功能)分子的引入， 可暫時(shí)屏蔽(OFF)藥物分子的熒光，通過(guò)與癌細(xì)胞表面葉酸受體的特異性結(jié)合，導(dǎo)致納米膠 束的解組裝，藥物分子的熒光可得到還原(0N)，實(shí)現(xiàn)癌細(xì)胞的精確診斷后，藥物在刺激響應(yīng) 下釋放出藥物，實(shí)現(xiàn)了癌癥的精確診斷與治療。
【附圖說(shuō)明】
[0018] 下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式進(jìn)行詳細(xì)或者優(yōu)選地描述，其中，
[0019] 圖1為實(shí)施例1中還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥(FA-CPT或MTX-CPT)的合成示意 圖。
[0020]圖2為實(shí)施例1中還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥(FA-CPT)的核磁示意圖。
[0021 ]圖3為實(shí)施例1中小分子前藥納米膠束的DLS圖。
[0022]圖4為實(shí)施例1中小分子前藥納米膠束的TEM圖。
[0023]圖5為實(shí)施例1中小分子藥物納米膠束的對(duì)HeLa癌細(xì)胞的體外毒性圖。
【具體實(shí)施方式】
[0024] 根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案，在不變更本發(fā)明的實(shí)質(zhì)精神的情況下，本領(lǐng)域的普通技 術(shù)人員可以提出本發(fā)明的多個(gè)結(jié)構(gòu)方式。因此以下【具體實(shí)施方式】以及附圖只是對(duì)本發(fā)明的 技術(shù)方案的具體說(shuō)明，而不應(yīng)當(dāng)視為本發(fā)明的全部或者視為對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案的限定或限 制。
[0025] -類(lèi)還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥，其特征在于:在喜樹(shù)堿的唯一羥基位置引入 還原響應(yīng)的雙硫鍵，再引入親水性藥物分子，結(jié)構(gòu)通式如下，
[0027]其中，R為親水性藥物分子。
[0028] -類(lèi)還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥，其特征在于:所述的親水性藥物分子可以是 具有靶向功能的葉酸分子，也可以是兼具靶向功能與藥物功能的甲氨蝶呤。
[0029] 本發(fā)明提供一種還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥的制備方法，其特征在于:還原性 響應(yīng)兩親性小分子前藥的制備方法包括以下步驟：
[0030] (1)制備還原性響應(yīng)的喜樹(shù)堿(CPT)前驅(qū)體:將喜樹(shù)堿(CPT)，三光氣，4-二甲氨基 吡啶（D M A P)的混合物分散到二氯甲烷(D C Μ)中，攪拌過(guò)夜，純化后得到所需產(chǎn)物喜樹(shù)堿 (CPT)前驅(qū)體；
[0031] (2)制備兩親性小分子前藥:包含雙硫鍵的喜樹(shù)堿(CPT)前驅(qū)體分散于對(duì)應(yīng)有機(jī)溶 劑中，引入親水性藥物分子葉酸(FA)或氨甲喋呤(ΜΤΧ)，通過(guò)酯化或酰胺化反應(yīng)，獲得還原 性響應(yīng)兩親性小分子前藥FA-CPT和MTX-CPT，純化后得到所需產(chǎn)物。
[0032] 所述步驟（1)中喜樹(shù)堿(CPT)前驅(qū)體的合成具體方法如下:氬氣(Ar)氛圍條件下， 首先將喜樹(shù)堿(CPT)原始分子溶于無(wú)水二氯甲烷(DCM)中，接著分別滴加入4-二甲氨基吡啶 (DMAP)和固體三光氣的二氯甲烷(DCM)溶液，避光下攪拌20分鐘后，將含一定量的雙(2-羥 基乙基）二硫醚(BHD)的無(wú)水四氫呋喃（THF)溶液緩慢滴加進(jìn)去，攪拌過(guò)夜。經(jīng)過(guò)分離提純 后，獲得純凈的單羥基取代的喜樹(shù)堿(CPT)前驅(qū)體(BHD-CPT)。
[0033] 所述步驟(2)中還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥FA-CPT的合成具體方法如下：在溫 度<0°C和氬氣(Ar)氛圍條件下，一定量的純凈的單羥基取代的喜樹(shù)堿(CPT)前驅(qū)體(BHD-CPT)、親水性藥物分子葉酸(FA)、4-二甲氨基吡啶(DMAP)溶于無(wú)水N，N-二甲基甲酰胺(DMF) 中，0 °C下避光攪拌30分鐘，接著加入一定量的1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺 鹽酸鹽(EDC · HC1)，0°C攪拌2小時(shí)后升至室溫并攪拌48h，經(jīng)過(guò)分離提純，獲得純凈的還原 性響應(yīng)兩親性小分子前藥產(chǎn)物FA-CPT。
[0034]所述步驟(2)中還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥MTX-CPT的合成具體方法如下：在溫 度<0°C和氬氣(Ar)氛圍條件下，一定量的純凈的單羥基取代的喜樹(shù)堿(CPT)前驅(qū)體(BHD-CPT)、氨甲喋呤(MTX)、4-二甲氨基吡啶(DMAP)溶于無(wú)水二甲基亞砜(DMS0)和N，N-二甲基甲 酰胺(DMF)混合溶劑中（ v:v = l: 1)中，0°C下避光攪拌30分鐘，加入一定量的二環(huán)己基碳二 亞胺(DCC)，0°C下攪拌2小時(shí)后升至室溫并攪拌48h，純化后獲得純凈的還原性響應(yīng)兩親性 小分子前藥MTX-CPT。
[0035] 本發(fā)明中涉及提純的方法可以是萃取和柱色譜等。
[0036] 實(shí)施例1
[0037] 根據(jù)附圖1所示的反應(yīng)式，在氬氣（Ar)氛圍條件下，首先將一定量的純喜樹(shù)堿 (CPT)分子溶于無(wú)水二氯甲烷(DCM)中，接著分別加入4-二甲氨基吡啶(DMAP)和固體三光氣 的DCM溶液，避光下攪拌20分鐘后，加入一定量的雙(2-羥基乙基）二硫醚(BHD)的無(wú)水四氫 呋喃(THF)溶液，攪拌過(guò)夜。經(jīng)過(guò)分離提純后，獲得純凈的單羥基取代的喜樹(shù)堿(CPT)前驅(qū)體 (BHD-CPT);在溫度彡0 °C和氬氣(Ar)氛圍條件下，一定量的純凈的單羥基取代的喜樹(shù)堿 (CPT)前驅(qū)體（BHD-CPT)、親水性藥物分子葉酸（FA)(取代基R = H時(shí)）、4_二甲氨基吡啶 (DMAP)溶于無(wú)水N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中，0°C下避光攪拌30分鐘，接著加入一定量的ΙΟ-二甲基氨基丙基 )-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽 (EDC · HC1)，0°C 攪拌 2 小時(shí)后升至室溫并 攪拌48h，經(jīng)過(guò)萃取分離、柱色譜提純，獲得純凈的還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥產(chǎn)物FA-CPT〇
[0038] 采用核磁共振測(cè)定1H-NMR氫譜來(lái)確定實(shí)施例1中靶向材料的結(jié)構(gòu)，選用的溶劑為 d-DMSO，結(jié)果如圖2所示。3.4ppm為親水性藥物分子葉酸(FA)上-N-Η上的Η，7.3ppm的質(zhì)子峰 為BHD中的Hj.Oppm以下為FA-CPT中基團(tuán)相互影響加強(qiáng)之后的質(zhì)子Η峰，以上氫核磁譜圖證 實(shí)了 FA-CPT的合成形成。
[0039] 實(shí)施例2
[0040] 將實(shí)施例1中制備的小分子前藥制備成納米膠束:室溫情況下，配備5mg/mL的還原 性響應(yīng)兩親性小分子前藥產(chǎn)物FA-CPT的二甲基亞砜(DMS0)溶液，緩慢滴加到去離子水中， 攪拌一定時(shí)間后，透析獲得淺黃色的小分子前藥納米膠束（圖3右上角所示），通過(guò)動(dòng)態(tài)光散 射法(DLS)和透視電鏡(TEM)進(jìn)行表征。如圖3所示為小分子前藥納米膠束DLS圖，結(jié)果顯示 小分子前藥納米膠束的平均直徑為46.4nm，其粒徑分布系數(shù)為0.218，呈現(xiàn)良好的單分散狀 態(tài)。如圖4所示為小分子前藥納米膠束透射電鏡圖，表明結(jié)果顯示膠束直徑約為30nm。
[0041] 將實(shí)施例2中制備的小分子前藥納米膠束對(duì)HeLa癌細(xì)胞的體外毒性示意圖圖，隨 著喜樹(shù)堿(CPT)濃度增加與作用時(shí)間增加，HeLa癌細(xì)胞的細(xì)胞活性明顯下降，隨著還原性響 應(yīng)兩親性小分子前藥產(chǎn)物FA-CPT濃度的增加 HeLa癌細(xì)胞的細(xì)胞活性明顯下降，作用時(shí)間越 長(zhǎng)，活性下降越劇烈，即隨著時(shí)間的增加(從24h到72h)，還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥產(chǎn)物 FA-CPT形成的前藥膠束對(duì)HeLa腫瘤細(xì)胞的一直持續(xù)增加。
[0042] 實(shí)施例3
[0043]根據(jù)附圖1所示的反應(yīng)式，在氬氣（Ar)氛圍條件下，首先將一定量的純喜樹(shù)堿 (CPT)分子溶于無(wú)水二氯甲烷(DCM)中，接著分別加入4-二甲氨基吡啶(DMAP)和固體三光氣 的DCM溶液，避光下攪拌20分鐘后，加入一定量的雙(2-羥基乙基）二硫醚(BHD)的無(wú)水四氫 呋喃(THF)溶液，攪拌過(guò)夜。經(jīng)過(guò)分離提純后，獲得純凈的單羥基取代的喜樹(shù)堿(CPT)前驅(qū)體 (BHD-CPT); -定量的純凈的單羥基取代的喜樹(shù)堿(CPT)前驅(qū)體(BHD-CPT)、氨甲喋呤(MTX)、 4_二甲氨基吡啶(DMAP)溶于無(wú)水二甲基亞砜(DMSO)和N，N-二甲基甲酰胺(DMF)混合溶劑中 ( v:v=1:1)中，(TC下避光攪拌30分鐘，加入一定量的二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)，(T C下攪拌2 小時(shí)后升至室溫并攪拌48h，純化后獲得純凈的還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥MTX-CPT。
[0044]容易理解，本發(fā)明通過(guò)在喜樹(shù)堿唯一的羥基位置中引入還原響應(yīng)的雙硫鍵，獨(dú)立 地引入葉酸(FA)或甲氨蝶呤(MTX)親水性藥物分子，獲得還原性響應(yīng)的兩親性小分子前藥， 所得兩親性小分子前藥可自組裝成藥物納米膠束，并可選擇性的釋放出藥物，解決了疏水 性藥物分子的水溶性和結(jié)合納米藥物傳遞的特點(diǎn)。FA (靶向功能）和MTX (兼靶向與藥物功 能)分子的引入，可暫時(shí)屏蔽(OFF)藥物分子的熒光，通過(guò)與癌細(xì)胞表面葉酸受體的特異性 結(jié)合，導(dǎo)致納米膠束的解組裝，藥物分子的熒光可得到還原(0N)，實(shí)現(xiàn)癌細(xì)胞的精確診斷 后，藥物在刺激響應(yīng)下釋放出藥物，實(shí)現(xiàn)了藥物靶向傳遞、高藥物上載量、刺激響應(yīng)控制的 藥物釋放、高膠束穩(wěn)定性，能對(duì)癌癥精確診斷與治療。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一類(lèi)還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥，其特征在于:在喜樹(shù)堿的唯一羥基位置引入還 原響應(yīng)的雙硫鍵，再引入親水性藥物分子，結(jié)構(gòu)通式如下，其中，R為親水性藥物分子。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥，其特征在于:所述的親水性藥 物分子可以是具有靶向功能的葉酸分子，也可以是兼具靶向功能與藥物功能的氨甲蝶呤。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥的制備方法，其特征在于:所述 還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥的制備方法包括以下步驟： (1) 制備還原性響應(yīng)的喜樹(shù)堿(CPT)前驅(qū)體:將喜樹(shù)堿(CPT)，三光氣，4-二甲氨基吡啶 的混合物分散到二氯甲烷中，攪拌過(guò)夜，純化后得到所需產(chǎn)物喜樹(shù)堿(CPT)前驅(qū)體； (2) 制備兩親性小分子前藥:包含雙硫鍵的喜樹(shù)堿(CPT)前驅(qū)體分散于對(duì)應(yīng)有機(jī)溶劑 中，引入親水性藥物分子葉酸(FA)或氨甲喋呤(MTX)，通過(guò)酯化或酰胺化反應(yīng)，獲得還原性 響應(yīng)兩親性小分子前藥FA-CPT和MTX-CPT，純化后得到所需產(chǎn)物。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥的制備方法，其特征在于:所述 步驟（1)中喜樹(shù)堿(CPT)前驅(qū)體的合成具體方法如下:氬氣(Ar)氛圍條件下，首先將喜樹(shù)堿 (CPT)原始分子溶于無(wú)水二氯甲烷中，接著分別滴加入4-二甲氨基吡啶(DMAP)和固體三光 氣的二氯甲烷溶液，避光下攪拌20分鐘后，將含一定量的雙(2-羥基乙基)二硫醚(BHD)的無(wú) 水四氫呋喃溶液緩慢滴加進(jìn)去，攪拌過(guò)夜。經(jīng)過(guò)分離提純后，獲得純凈的單羥基取代的喜樹(shù) 堿前驅(qū)體(BHD-CPT)。5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥的制備方法，其特征在于:所述 步驟(2)中還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥FA-CPT的合成具體方法如下:在溫度<0°C和氬氣 (Ar)氛圍條件下，一定量的純凈的單羥基取代的喜樹(shù)堿(CPT)前驅(qū)體(BHD-CPT)、親水性藥 物分子葉酸(FA)、4-二甲氨基吡啶溶于無(wú)水N，N-二甲基甲酰胺中，0°C下避光攪拌30分鐘， 接著加入一定量的1_(3_二甲基氨基丙基)_3_乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC ? HC1)，0°C攪拌 2小時(shí)后升至室溫并攪拌48h，經(jīng)過(guò)分離提純，獲得純凈的還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥產(chǎn) 物FA-CPT。6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥的制備方法，其特征在于:所述 步驟⑵中還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥MTX-CPT的合成具體方法如下:在溫度<0°C和氬 氣(Ar)氛圍條件下，一定量的純凈的單羥基取代的喜樹(shù)堿(CPT)前驅(qū)體(BHD-CPT)、氨甲喋 呤(MTX)、4-二甲氨基吡啶溶于無(wú)水二甲基亞砜和N，N-二甲基甲酰胺混合溶劑中（v :v=l: 1)中，0°C下避光攪拌30分鐘，加入一定量的二環(huán)己基碳二亞胺，0°C下攪拌2小時(shí)后升至室 溫并攪拌48h，純化后獲得純凈的還原性響應(yīng)兩親性小分子前藥MTX-CPT。
【文檔編號(hào)】A61P35/00GK106046029SQ201610379752
【公開(kāi)日】2016年10月26日
【申請(qǐng)日】2016年6月1日
【發(fā)明人】許志剛, 康躍軍, 薛鵬, 石瀟瀟, 侯美麗, 高永娥
【申請(qǐng)人】西南大學(xué)