專(zhuān)利名稱(chēng)：吡啶并[2,3－d]嘧啶衍生物及其醫(yī)藥組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥，特別涉及作為IV型磷酸二酯酶抑制劑的有效的新穎的吡啶并[2，3-d]嘧啶衍生物及其制藥學(xué)上允許的鹽、其醫(yī)藥組合物、用于藥劑制造及給予有效量的預(yù)防或治療方法。
背景技術(shù)：
氣喘是一種由于呼吸道地收縮而引起的喘鳴癥和反復(fù)發(fā)作的呼吸系統(tǒng)疾病。到目前為止其患者數(shù)不斷增加，預(yù)計(jì)今后還會(huì)增加。
氣喘的主要癥狀是由(a)位于呼吸道周?chē)钠交〉膭×沂湛s以及(b)包括肺在內(nèi)的呼吸器官中的浸潤(rùn)性細(xì)胞的活化而引起的炎癥反應(yīng)。所以，針對(duì)于氣喘的癥狀，采用抑制呼吸道的收縮，且抑制或預(yù)防浸潤(rùn)細(xì)胞的活化的方法被認(rèn)為是有效方法之一。
對(duì)于氣喘的治療，現(xiàn)在主要采用的是使支氣管擴(kuò)張，以緩解氣喘癥狀的藥物，如氨茶堿和茶堿等黃嘌呤衍生物及舒心痛等β興奮劑。這些化合物的作用機(jī)理是在呼吸道平滑肌中，通過(guò)活化細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生腺苷環(huán)3′，5′-一磷酸(cAMP)的氧腺苷酸環(huán)化酶或抑制cAMP的分解酶磷酸二酯酶(PDE)，使細(xì)胞內(nèi)的cAMP濃度上升，以抑制呼吸道平滑肌[Thorax 46 512-523(1991)]。
但是，由于黃嘌呤衍生物顯現(xiàn)出降血壓和強(qiáng)心作用等全身性副作用[J.CyclicNucleotide and Protein Phosphorylation Res.10 551-564(1985)]，所以，為了防止這種全身性副作用有必要控制其在血液中的濃度。而且，黃嘌呤衍生物對(duì)治療伴有炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)的氣喘并沒(méi)有明顯的效果。
此外，β興奮劑易產(chǎn)生脫敏作用，如果用量增加，會(huì)出現(xiàn)手指震顫、悸動(dòng)等副作用。
根據(jù)其后的研究，將分解cAMP的酶，PDE至少分為I～I(xiàn)V型4種不同的種類(lèi)，它們的分布或機(jī)能各不相同[Pharmacological Therapy 51 13-33(1991)]。特別是IV型PDE對(duì)存在于核苷酸中的鳥(niǎo)苷環(huán)3′，5′-一磷酸(cGMP)不產(chǎn)生作用，僅特異性地分解cAMP，這種PDE在呼吸道平滑肌及浸潤(rùn)細(xì)胞中都存在。而且，PDE V是cGMP的分解酶。
細(xì)胞內(nèi)的cAMP濃度決定于腺苷酸酯環(huán)化酶控制的cAMP產(chǎn)生速度，和PDE控制的cAMP分解速度之間的平衡。所以，通過(guò)刺激腺苷酸酯或抑制PDE能夠使細(xì)胞內(nèi)的cAMP濃度有所增加。細(xì)胞內(nèi)cAMP濃度的上升能夠抑制呼吸道平滑肌的收縮，抑制炎性細(xì)胞的活化[Clin.Exp.Allergy 22 337-344(1992)，Drug of theFuture 17 799-807(1992)]。
此外，IV型PDE抑制劑對(duì)豚鼠的抗原及血小板活化因子引起的嗜酸性白細(xì)胞浸潤(rùn)具有抑制作用[Eur.J.Pharmacol.255 253-256(1994)]，能夠抑制嗜酸性白細(xì)胞產(chǎn)生的障礙性蛋白(MBP、ECP)的游離[Br.J.Pharmacol.115 39-47(1995)]。而且，能夠抑制收縮性物質(zhì)(組胺、LTD4、乙酰甲基膽堿)引起的呼吸道平滑肌的收縮[Br.J.Pharmacol.113 1423-1431(1994)]，能夠抑制可以說(shuō)與氣喘關(guān)系密切的細(xì)胞分裂，IL-4的產(chǎn)生[J.Invesr.Dermatol.100 681-684(1993)]，對(duì)呼吸道的血管通透性亢進(jìn)具有抑制作用[Fundam.Clin.Pharmacol.6 247-249(1992)]，還能夠防止呼吸道過(guò)敏[Eur.J.Pharmacol.275 75-82(1995)]。
因此，對(duì)IV型PDE具有良好抑制活性的藥物是一種理想的能夠有效地緩解或預(yù)防氣喘，且副作用較少的氣喘治療劑。
以往，不限于IV型PDE，凡具備PDE抑制活性的化合物都被認(rèn)為具有喹唑啉-2-酮結(jié)構(gòu)(WO94/12499號(hào))，與本發(fā)明提供的吡啶并[2，3-d]嘧啶化合物的結(jié)構(gòu)不同。
另一方面，G.E.Hardtmann等的美國(guó)專(zhuān)利第3,758,475號(hào)公報(bào)對(duì)具有4-苯基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-酮結(jié)構(gòu)的化合物進(jìn)行了報(bào)道。該公報(bào)中通過(guò)角叉菜膠誘發(fā)浮腫抑制試驗(yàn)確認(rèn)了具有抗炎活性的化合物，該化合物由以下通式表示
其中，R表示氫或碳原子數(shù)為1～5的低級(jí)烷基，例如，甲基。
R′表示碳原子數(shù)為1～6的低級(jí)烷基，例如，甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、叔丁基等；烯丙基；2-甲基烯丙基；炔丙基；或碳原子數(shù)為3～6的環(huán)烷基，例如環(huán)丙基。R″表示苯基或式
的取代苯基
其中，Y表示原子量為19～80的鹵素，碳原子數(shù)為1～4的低級(jí)烷基，或碳原子數(shù)為1～4的低級(jí)烷氧基。
Y′表示氫原子，鹵素，低級(jí)烷基或低級(jí)烷氧基(與Y所定義的相同)。
G.E.Hardtmann等在J.Med.Chem.1974 Vol.17 No.16 636-639中對(duì)同樣的抗炎化合物進(jìn)行了報(bào)道。
此外，還報(bào)道了抑制由于服用了與上述化合物為同類(lèi)化合物的1-取代-4-芳基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-酮而引起的血小板凝結(jié)的方法(日本專(zhuān)利公開(kāi)公報(bào)昭53-94040號(hào))。
本發(fā)明提供的化合物中有一部分與上述美國(guó)專(zhuān)利記載的R為低級(jí)烷基，R′為低級(jí)烷基或C3-6的環(huán)烷基，R″為間位具有鹵原子、低級(jí)烷基或低級(jí)烷氧基的苯基的化合物相同，包括在其通式中。
但是，實(shí)施例及其他說(shuō)明中對(duì)只在苯基的間位具有鹵原子、低級(jí)烷基或低級(jí)烷氧基，且在吡啶并[2，3-d]嘧啶的7位具有低級(jí)烷基的化合物沒(méi)有具體記載。而且，上述美國(guó)專(zhuān)利僅對(duì)其抗炎活性有所記載，但既沒(méi)有揭示也沒(méi)有暗示其對(duì)IV型PDE的抑制作用，更具體說(shuō)是抗氣喘作用。
發(fā)明的揭示
本發(fā)明者們認(rèn)真探討了對(duì)IV型PDE具有抑制活性作用的化合物，其結(jié)果是，發(fā)現(xiàn)以下通式(I)所示的化合物具有良好的抑制IV型PDE活性作用，從而完成了本發(fā)明。
即，本發(fā)明提供了以下通式(I)所示的吡啶并[2，3-d]嘧啶衍生物及其制藥學(xué)上允許的鹽。
該通式(I)表示的化合物中，X為氧原子，R1為低級(jí)烷基或環(huán)烷基，R2為低級(jí)烷基，R3及R4都為氫原子，R5為式
表示的基團(tuán)，R6為鹵原子、低級(jí)烷基或低級(jí)烷氧基的化合物包括在前述美國(guó)專(zhuān)利公報(bào)所示的通式中。
但是，這些本發(fā)明的化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)具有以下特征，即只在1-取代-4-苯基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮結(jié)構(gòu)的4位苯基的間位(3位)導(dǎo)入鹵原子、低級(jí)烷基或低級(jí)烷氧基，且在7位導(dǎo)入低級(jí)烷基。
前述美國(guó)專(zhuān)利中，對(duì)于這些在特定的取代位置具有特定的取代基的化合物沒(méi)有任何具體的揭示，是新穎的化合物。而且，該化合物具有藥理學(xué)上的特征，即具有顯著的在前述美國(guó)專(zhuān)利中既沒(méi)有揭示也沒(méi)有暗示的抑制IV型PDE活性的作用。
其中，由以下通式(II)表示的吡啶并[2，3-d]嘧啶衍生物及其制藥學(xué)上允許的鹽，與前述美國(guó)專(zhuān)利中被具體揭示的類(lèi)似化合物對(duì)IV型PDE的潛在效果相比，前者的效果有了顯著提高。
另一方面，本發(fā)明化合物(I)中，除了包括在前述美國(guó)專(zhuān)利公報(bào)的通式中的化合物，以下由通式(III)表示的吡啶并[2，3-d]嘧啶衍生物及其制藥學(xué)上允許的鹽是任何以往的文獻(xiàn)都沒(méi)有被揭示過(guò)的新化合物。
本發(fā)明化合物(III)及其制藥學(xué)上允許的鹽的化學(xué)結(jié)構(gòu)具有以下特征，即在吡啶并[2，3-d]嘧啶骨架的1位上具有特定的烷基，在2位上具有羰基或硫代基團(tuán)，4位上具有特定的環(huán)基，在5、6、7位上具有各種特定的取代基，而且，還具有藥理學(xué)上的特征，即能夠選擇性地抑制IV型PDE的活性。
特別是作為IV型PDE抑制劑，化合物(III)的發(fā)明具有最先提供吡啶并[2，3-d]嘧啶結(jié)構(gòu)的化合物的特征。
本發(fā)明化合物中，特別好的化合物是由通式(II)及(III)表示的化合物及其制藥學(xué)上允許的鹽?；衔?II)中，特別好的是R8為甲基或乙基的化合物，更好的是R8為以上基團(tuán)，且R7為乙基或丙基的化合物。以下例舉了特別合適的化合物。
4-(3-氯苯基)-1，7-二乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、4-(3-溴苯基)-1，7-二乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、4-(3-溴苯基)-1-乙基-7-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、1-乙基-7-甲基-4-(3-甲基苯基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮或1，7-二乙基-4-(3-甲基苯基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮。
此外，化合物(III)中特別好的化合物包括R10為氫原子、低級(jí)烷基、鹵代低級(jí)烷基、羥基低級(jí)烷基、巰基低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基低級(jí)烷基、低級(jí)烷基硫代低級(jí)烷基、低級(jí)烷酰氧基低級(jí)烷基、低級(jí)烷酰硫代基低級(jí)烷基、羥基亞氨基低級(jí)烷基、環(huán)烷基、芳基或低級(jí)烷?；幕衔?，更好的是R10為氫原子、低級(jí)烷基、鹵代低級(jí)烷基、羥基低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基低級(jí)烷基、低級(jí)烷酰氧基低級(jí)烷基、低級(jí)烷酰硫代基低級(jí)烷基、羥基亞氨基低級(jí)烷基、環(huán)烷基、芳基或低級(jí)烷酰基的化合物。
其中，合適的化合物是R10為上述基團(tuán)；R4為氫原子；R5為(1)可被低級(jí)烷基取代的環(huán)烷基，(2)萘基，(3)具有選自氮原子、氧原子及硫原子的1～4個(gè)雜原子的5或6元單環(huán)雜環(huán)基，或(4)式
表示的基團(tuán)，且R6為鹵原子、低級(jí)烷基、鹵代低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、氰基或硝基的化合物。尤其合適的化合物是R1為低級(jí)烷基或環(huán)烷基低級(jí)烷基，R10為低級(jí)烷基、鹵代低級(jí)烷基、羥基低級(jí)烷基、低級(jí)烷酰硫代基低級(jí)烷基、羥基亞氨基低級(jí)烷基、環(huán)烷基或低級(jí)烷?；?，R3及R4都為氫原子，R5為可被低級(jí)烷基取代的環(huán)烷基或式
表示的基團(tuán)，R6為鹵原子、低級(jí)烷基或硝基的化合物。
以下例舉了特別合適的化合物。
4-環(huán)己基-1-乙基-7-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-(1-羥基乙基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、4-(3-氯苯基)-7-環(huán)丙基-1-乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、1-乙基-7-甲基-4-(3-甲基環(huán)己基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、1，7-二乙基-4-(3-甲基環(huán)己基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、1-環(huán)丙基甲基-7-甲基-4-(3-甲基苯基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、4-環(huán)己基-1，7-二乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-羥基亞氨基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、7-(1-乙酰硫代乙基)-4-(3-氯苯基)-1-乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮或1，7-二乙基-4-(3-氯苯基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-硫酮。
本發(fā)明還包括化合物(I)及其制藥學(xué)上允許的鹽，尤其是化合物(III)及其制藥學(xué)上允許的鹽和制藥學(xué)上允許的載體組成的醫(yī)藥組合物。該醫(yī)藥組合物的實(shí)施狀態(tài)包括含有化合物(I)、尤其是化合物(III)及其制藥學(xué)上允許的鹽的IV型PDE抑制劑，特別是IV型PDE引起的呼吸器官疾病、尤其是支氣管氣喘的預(yù)防·治療劑。
本發(fā)明還包括含有化合物(II)及其制藥學(xué)上允許的鹽的IV型PDE抑制劑，特別是IV型PDE引起的呼吸器官疾病、尤其是支氣管氣喘的預(yù)防·治療劑。
此外，本發(fā)明還包括化合物(I)、尤其是化合物(II)或化合物(III)以及它們?cè)谥扑帉W(xué)上允許的鹽在制造IV型PDE亢進(jìn)疾病、特別是呼吸器官疾病、尤其是支氣管氣喘的預(yù)防或治療劑上的應(yīng)用，或者向患有該疾病的病人或可能患病的患者提供該化合物有效劑量的該疾病的預(yù)防·治療方法。
以下，對(duì)本發(fā)明化合物進(jìn)行更加詳細(xì)的說(shuō)明。
本說(shuō)明書(shū)中對(duì)通式的定義沒(méi)有特別的限定，所謂[低級(jí)]是指碳原子數(shù)為1～6個(gè)的直鏈狀或支鏈狀碳鏈。具體是指甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、新戊基、叔戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、1，2-二甲基丙基、己基、異己基、1-甲基戊基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、1，1-二甲基丁基、1，2-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、2，3-二甲基丁基、3，3-二甲基丁基、1-乙基丁基、2-乙基丁基、1，1，2-三甲基丙基、1，2，2-三甲基丙基、1-乙基-1-甲基丙基、1-乙基-2-甲基丙基等直鏈或支鏈狀C1-6的烷基。這些基團(tuán)中，較好的是甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基等C1-4的烷基，尤其合適的是甲基、乙基、丙基、異丙基這些C1-3的烷基。其中，作為R1的低級(jí)烷基是C1-4的烷基，特別合適的是C2-3的烷基，作為R2的低級(jí)烷基是C1-3的烷基，特別好的是甲基、乙基。是指甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、異戊氧基、叔戊氧基、新戊氧基、2-甲基丁氧基、1，2-二甲基丙氧基、1-乙基丙氧基、己氧基等直鏈或支鏈狀C1-6的烷氧基，較好的是甲氧基和乙氧基。是指硫羥基的氫原子被上述低級(jí)烷基取代的基團(tuán)，具體是指甲基硫代基、乙基硫代基、丙基硫代基、異丙基硫代基、丁基硫代基、異丁基硫代基、仲丁基硫代基、叔丁基硫代基、戊基硫代基、異戊基硫代基、新戊基硫代基、叔戊基硫代基、2-甲基丁基硫代基、1，2-二甲基丙基硫代基、1-乙基丙基硫代基、己基硫代基等直鏈或支鏈狀C1-6的烷基硫代基，較好的是甲基硫代基、乙基硫代基。具體是指甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁?；?、異丁?；?、戊?；?、異戊?；?、三甲基乙酰基等直鏈或支鏈狀C1-6的烷?；?，特別合適的是甲?；⒁阴；⒈；?。是指由醇和低級(jí)羧酸形成的酯形式的基團(tuán)，具體是指甲酰氧基、乙酰氧基、丙酰氧基、丁酰氧基、異丁酰氧基、戊酰氧基、三甲基乙酰氧基等直鏈或支鏈狀C1-6的烷酰氧基。是指由硫醇和低級(jí)羧酸形成的硫代酯形成的基團(tuán)，具體是指甲酰硫代基、乙酰硫代基、丙酰硫代基、丁酰硫代基、異丁酰硫代基、戊酰硫代基、新戊酰硫代基等直鏈或支鏈狀C1-6的烷酰硫代基。是指碳原子數(shù)為3～8個(gè)的環(huán)烷基，具體是指環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基。作為R1的[環(huán)烷基低級(jí)烷基]中的環(huán)烷基及R2的環(huán)烷基，特別好的是環(huán)丙基。作為R5的[可被取代的環(huán)烷基]中的環(huán)烷基，特別好的是環(huán)己基。是指芳香族烴基，較好的是碳原子數(shù)為6～14的芳基，具體是指苯基、甲苯基、二甲苯基、聯(lián)苯基、萘基、茚基、蒽基、菲基，更好的是苯基或萘基，特別好的是苯基。是指氟原子、氯原子、溴原子和碘原子，作為環(huán)的取代基是指氯原子和溴原子，作為烷基鏈的取代基，較好的是氟原子、氯原子、溴原子。
前述R1、R2、R6或R10，尤其是R2或R10的被取代的[低級(jí)烷基]是指被1～4個(gè)，尤其是1～3個(gè)各種取代基取代的低級(jí)烷基，這些取代基包括鹵代基、羥基、巰基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷基硫代基、低級(jí)烷酰氧基、低級(jí)烷?；虼?、低級(jí)烷酰基、羥基亞氨基、低級(jí)烷氧基亞氨基、環(huán)烷基。構(gòu)成[鹵代基]的鹵原子、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷基硫代基、低級(jí)烷酰氧基、低級(jí)烷酰基硫代基、低級(jí)烷酰基、環(huán)烷基如前所述。是指甲氧基亞氨基、乙氧基亞氨基、丙氧基亞氨基、異丙氧基亞氨基、丁氧基亞氨基、異丁氧基亞氨基、叔丁氧基亞氨基等直鏈或支鏈狀C1-6的烷氧基亞氨基。
所以，取代低級(jí)烷基的[鹵代低級(jí)烷基]是指三氟甲基、氯甲基、溴甲基、2-氯乙基、1-氯乙基、2-溴乙基、1-溴乙基等，[羥基低級(jí)烷基]是指羥甲基、2-羥乙基、1-羥乙基等，[巰基低級(jí)烷基]是指巰基甲基、2-巰基乙基、1-巰基乙基等，[低級(jí)烷氧基低級(jí)烷基]是指甲氧基甲基、乙氧基甲基、2-甲氧基乙基、1-甲氧基乙基、二甲氧基乙基等，[低級(jí)烷基硫代低級(jí)烷基]是指甲基硫代甲基、乙基硫代甲基、2-甲基硫代乙基、1-甲基硫代乙基等，[低級(jí)烷酰氧基低級(jí)烷基]是指乙酰氧基甲基、2-乙酰氧基乙基、1-乙酰氧基乙基等，[低級(jí)烷酰硫代低級(jí)烷基]是指乙酰硫代甲基、2-乙酰硫代乙基、1-乙酰硫代乙基等，[低級(jí)烷?；图?jí)烷基]是指甲酰甲基、乙酰甲基、2-羰基丁基等，[羥基亞氨基低級(jí)烷基]是指羥基亞氨基甲基、2-羥基亞氨基乙基、1-羥基亞氨基乙基等，[低級(jí)烷氧基亞氨基低級(jí)烷基]是指甲氧基亞氨基甲基、乙氧基亞氨基甲基等，[環(huán)烷基低級(jí)烷基]是指環(huán)丙基甲基、環(huán)己基甲基、2-環(huán)丙基乙基等。具體是指呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、三唑基、噁二唑基、噻二唑基、四唑基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基等單環(huán)雜環(huán)基，這些單環(huán)雜環(huán)基還可與苯環(huán)進(jìn)行稠合，它們的稠合環(huán)包括吲哚基、吲唑基、苯并呋喃基、異苯并呋喃基、苯并噻吩基、異吲哚基、異喹啉基、苯并二氫吡喃基、喹啉基、喹唑啉基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并三唑基、苯并噁二唑基、2，3-二氮雜萘基、喹喔啉基、噌啉基等。與這些稠合環(huán)的吡啶并[2，3-d]嘧啶環(huán)的4位相連的鍵可以出自雜環(huán)上的碳原子、氮原子或苯環(huán)上的碳原子中的任1個(gè)。較好的是呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基，更好的是噻吩基、噻唑基和吡啶基。
R5為環(huán)烷基、萘基和雜環(huán)基時(shí)可被取代的取代基的數(shù)目不限于1個(gè)，較好的是1～3個(gè)。
本發(fā)明的化合物還包括形成的鹽。本發(fā)明還包括化合物(I)，尤其是化合物(II)及化合物(III)的制藥學(xué)上允許的鹽，所謂的鹽是指與鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、硝酸、磷酸等無(wú)機(jī)酸，甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、異丁酸、吉草酸、異吉草酸、己酸、乙二酸、丙二酸、丁二酸、富馬酸、馬來(lái)酸、乳酸、檸檬酸、蘋(píng)果酸、酒石酸、碳酸、甲磺酸、乙磺酸、谷氨酸、天冬氨酸等有機(jī)酸形成的酸加成鹽。
當(dāng)本發(fā)明化合物中存在具有共軛雙鍵的環(huán)狀尿素或硫脲時(shí)，存在互變異構(gòu)體。而且，有時(shí)根據(jù)取代基種類(lèi)的不同，在具有手性碳時(shí)，存在光學(xué)異構(gòu)體，在具有環(huán)、羥基亞氨基和低級(jí)烷氧基亞氨基時(shí)，存在異構(gòu)體。本發(fā)明包括這些異構(gòu)體的單離體或它們的混合物。
此外，本發(fā)明化合物可根據(jù)理化性質(zhì)或制備條件的不同，被分離成水合物，與乙醇等的溶劑合物，或多晶形物質(zhì)。本發(fā)明包括這些水合物，與乙醇等的溶劑合物，以及各種多晶形物質(zhì)。
(制備方法)
利用以本發(fā)明化合物及其鹽的基本骨架或取代基的種類(lèi)為基礎(chǔ)的特征，選用適當(dāng)?shù)暮铣煞椒軌蛑频帽景l(fā)明的化合物及其鹽。以下對(duì)具有代表性的制備方法進(jìn)行說(shuō)明。
此外，能夠用適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基團(tuán)保護(hù)合成時(shí)的原料化合物或本發(fā)明化合物的官能團(tuán)來(lái)進(jìn)行反應(yīng)。例如，這些保護(hù)基團(tuán)可以是Greene及Wuts著的《ProtectiveGroups in Organic Synthesis》第2版記載的保護(hù)基團(tuán)，可根據(jù)反應(yīng)條件適當(dāng)選用。而且，使醛變?yōu)榭s醛，反應(yīng)后可以再轉(zhuǎn)變?yōu)槿┗?br> 制法1(環(huán)化)
(式中，R1、R2、R3、R4及R5如前所述。Y1及Z表示對(duì)本反應(yīng)有用的可離去基團(tuán)。)
本發(fā)明化合物中的X為羰基的化合物(Ia)通過(guò)使2-氨基吡啶基酮衍生物(IV)與通式(Va)或(Vb)表示的異氰酸酯或氨基甲酸酯衍生物反應(yīng)，并環(huán)化而制得。
作為可離去基團(tuán)的Y1包括氯磺?；塞u代磺?；腿谆坠柰榛热〈坠柰榛?。
作為可離去基團(tuán)的Z包括甲氧基、乙氧基等烷氧基和苯氧基等。
使用了異氰酸酯的反應(yīng)在二氯甲烷、二氯乙烷、氯仿等鹵代烴類(lèi)，苯、甲苯、二甲苯等芳香烴類(lèi)，乙醚、四氫呋喃、二噁烷等醚類(lèi)等對(duì)反應(yīng)惰性的溶劑中，在-78℃～0℃的冷卻條件下、冷卻到室溫條件下、室溫下或根據(jù)不同情況在室溫到加熱條件下進(jìn)行反應(yīng)。
進(jìn)行反應(yīng)時(shí)，比較好的狀態(tài)是使用等摩爾的化合物(IV)和異氰酸酯(IVa)，或其中一種過(guò)量，在適當(dāng)?shù)娜野?、二異丙基乙胺、N-甲基嗎啉、N，N-二甲基苯胺、吡啶、4-(N，N-二甲基氨基)吡啶、甲基吡啶、二甲基吡啶等堿的存在下使反應(yīng)順利進(jìn)行。
有時(shí)可用通式(Vb)表示的氨基甲酸酯衍生物代替異氰酸酯，這種情況下，在氯化鋅、氯化錫、四氯化鈦、三氟化硼·乙醚等路易斯酸存在下能使反應(yīng)順利進(jìn)行。
此外，作為本方法的副產(chǎn)品，有時(shí)能夠獲得6位具有鹵原子的化合物。
上述原料化合物(IV)能夠很容易地通過(guò)以下反應(yīng)式表示的記載在參考例中的制備方法獲得或以此為基準(zhǔn)合成而得。
(式中，R1、R2、R3、R4及R5如前所述，其他符號(hào)具有以下含義
R2′與R2相同，也可是被保護(hù)的R2基團(tuán)，
R3′與除了鹵原子之外的R3相同的基團(tuán)，
Y2、Y3及Y4相同或不同的鹵原子，
Z2及Z3對(duì)吡啶合成反應(yīng)有用的可離去基團(tuán)，
Ts對(duì)甲苯磺酰基。)
即，以3-?；?2-鹵代吡啶衍生物(7)為原料時(shí)，可使用R1取代的胺(8)進(jìn)行反應(yīng)的后述N-烷基化的一般方法，然后，如有必要除去保護(hù)基團(tuán)就可制得原料化合物(IV)。不除去保護(hù)基團(tuán)也適用于制法1。此外，以3-?；?2-(對(duì)甲苯磺酰氧基)吡啶衍生物(13)為原料時(shí)，也可通過(guò)使用R1取代的胺(8)進(jìn)行與前述同樣的反應(yīng)的N-烷基化(見(jiàn)后述)，制得原料化合物(IV)。以(14)的2-取代氨基吡啶腈為原料時(shí)，可通過(guò)適當(dāng)使用使原料化合物(14)與R5的鹵化物衍生而得的格利雅試劑(2)進(jìn)行反應(yīng)的從乙腈合成酮類(lèi)的方法的一般方法制得化合物(IV)。
而且，通過(guò)以相應(yīng)的腈(1)或羧酸(3)為原料，使其與上述格利雅試劑(2)反應(yīng)的方法，或者用一般的方法使3位上反應(yīng)性較高的2-鹵代吡啶衍生物(4)與R5的醛基(5)反應(yīng)所得的2-鹵代-3-取代羥基甲基吡啶衍生物(6)氧化的方法能夠獲得中間體(7)。
此外，使1-二乙氧基戊酮之類(lèi)的酮類(lèi)(9)與?；阴０?10)反應(yīng)所得的2-羰基吡啶基酮(11)與對(duì)甲苯磺酰鹵化物(12)反應(yīng)能夠合成中間體(13)。
制備這些原料化合物時(shí)，可根據(jù)目的化合物的R2、R3、R4等取代基的不同而選擇適宜的方法。而且，還可在適宜的反應(yīng)階段通過(guò)硝化等方法引入取代基。
制法2(取代基互相變換法)
本發(fā)明化合物能夠通過(guò)具有其他取代基的本發(fā)明化合物衍生而得。這種取代基互相變換法可通過(guò)一般的方法進(jìn)行。以下是其具有代表性的方法。
(a)硫化
(式中，R1、R2、R3、R4及R5如前所述。)
本發(fā)明化合物中，X為硫原子的化合物(Ib)可通過(guò)X為氧原子的本發(fā)明化合物(Ia)和五硫化磷或Lawesson試劑等的反應(yīng)而獲得。
本反應(yīng)在苯、甲苯、四氫呋喃、乙醚、二噁烷、二氯甲烷等對(duì)反應(yīng)惰性的有機(jī)溶劑中，化合物(Ia)和五硫化磷或Lawesson試劑等摩爾或其中一種過(guò)量，在室溫下，或根據(jù)不同的情況，在加熱條件下進(jìn)行。
(b)還原
(式中，R1、R3、R4、R5及X如前所述，R11表示氫原子或C1-5的烷基，A1表示單鍵或C1-5的亞烷基)
還原相應(yīng)的羰基化合物(Ic)能夠獲得羥基低級(jí)烷基化合物(Id)。
還原可采用由羰基化合物合成醇化合物的一般的還原方法進(jìn)行。還原反應(yīng)較好的是采用在乙醇等質(zhì)子溶劑中的硼氫化鈉，或在一般冷卻條件下，用乙醚、四氫呋喃等無(wú)活性溶劑中的氫化鋁鋰等金屬氫化物進(jìn)行處理。
(c)C-烷基化
(式中，R1、R3、R4、R5、X及Y3如前所述，R12表示C1-5的烷基)
2-(1-羥基低級(jí)烷基)取代化合物(If)可通過(guò)一般的方法使相應(yīng)的醛與低級(jí)烷基鹵代物和金屬鎂衍生而得的格利雅試劑(VI)進(jìn)行反應(yīng)而得。
反應(yīng)較好的是在一般冷卻條件下，在四氫呋喃、乙醚等無(wú)活性溶劑中進(jìn)行。
(d)氧化
(式中，R1、R3、R4、R5、X、R11及A1如前所述)
與(b)制法相反，使羥基化合物(Id)氧化能夠獲得相應(yīng)的羰基化合物(Ic)。
氧化反應(yīng)使用的是氧化羥基化合物，制得羰基化合物的一般方法，通常在苯、甲苯等無(wú)活性溶劑中與氧化劑一起加熱回流而進(jìn)行反應(yīng)。使用的較好的氧化劑包括二氧化錳、氯鉻酸吡啶鎓等。
(e)鹵化
i)側(cè)鏈的鹵化(1)
(式中，R1、R3、R4、R5、X、R11、Y2及A1如前所述)
鹵代低級(jí)烷基化合物(Ig)可通過(guò)一般的方法，用適當(dāng)?shù)柠u化劑處理相應(yīng)的羥基化合物(Id)而制得。
較好的是在苯、四氯化碳等對(duì)反應(yīng)無(wú)活性的溶劑中，或在無(wú)溶劑的條件下，使用亞硫酰氯、磷酰氯、三氯化磷、五氯化磷、鹽酸、氫溴酸等鹵化劑，加熱回流進(jìn)行反應(yīng)。
ii)側(cè)鏈的鹵化(2)
(式中，R1、R3、R4、R5、X、R11、R12及Y2如前所述)
鹵代低級(jí)烷基化合物(Ii)可用適當(dāng)?shù)柠u化劑處理相應(yīng)的烷基化合物(Ih)而制得。
較好的是在四氯化碳等對(duì)反應(yīng)無(wú)活性的溶劑中，使用氯氣、溴、N-溴琥珀酰亞胺等鹵化劑，如有必要在2，2′-偶氮二異丁腈、過(guò)氧化苯甲酰等催化劑存在下，加熱回流進(jìn)行反應(yīng)，而且，使用了N-溴琥珀酰亞胺的反應(yīng)在2，2′-偶氮二異丁腈、過(guò)氧化苯甲酰等催化劑存在下，即使在光照下也能夠進(jìn)行反應(yīng)。
(iii)環(huán)的鹵化
環(huán)的鹵化較好的是在原料化合物合成階段進(jìn)行。較好的是采用參考例所述的使用了磷酰氯、三氯化磷、五氯化磷、溴等的方法。
(f)?；?
(式中，R1、R3、R4、R5、X、R11及A1如前所述，Y5表示鹵原子或羥基，R13表示C1-5的烷基)
低級(jí)烷酰氧基低級(jí)烷基化合物(Ik)能夠很容易地通過(guò)相應(yīng)的羧酸(VII)或其酯、酸酐等反應(yīng)性衍生物和相應(yīng)的羧基化合物或鹵化物(Ij)的酯化反應(yīng)合成，該反應(yīng)可使用酯化的常用方法。
此外，低級(jí)烷酰硫代低級(jí)烷基化合物也能夠通過(guò)同樣的酯化反應(yīng)制得。
低級(jí)烷酰氧基低級(jí)烷基化合物也能夠通過(guò)同樣的方法使相應(yīng)的鹵代低級(jí)烷基化合物和相應(yīng)羧酸的堿金屬鹽反應(yīng)而制得。
(g)皂化
(式中，R1、R3、R4、R5、X、R11、R13及A1如前所述。)
與(f)制法相反，以酯類(lèi)化合物(Ik)作為原料，能夠合成相應(yīng)的羥基化合物(Id)?？赏ㄟ^(guò)氫氧化鈉等堿處理的常用方法制得。
(h)肟化
具有羥基或低級(jí)烷氧基亞氨基的本發(fā)明化合物可以相應(yīng)的醛或酮化合物為原料，通過(guò)該醛或酮化合物與羥胺或低級(jí)烷氧基胺反應(yīng)而制得。
反應(yīng)可通過(guò)常用方法進(jìn)行，即在甲醇、乙醇等與反應(yīng)無(wú)關(guān)的有機(jī)溶劑中，如有必要，在碳酸鈉、乙酸鈉等堿存在下，使反應(yīng)量或略過(guò)量的羥胺或低級(jí)烷氧基胺或它們的鹽在冷卻下、室溫下、或回流溫度下作用而進(jìn)行反應(yīng)。
制法3(N-烷化)
(式中，R1、R2、R3、R4及R5如前所述。Y6表示有利于本發(fā)明的可離去基團(tuán)。)
本制法是使化合物(VIII)和化合物(IX)進(jìn)行反應(yīng)而獲得本發(fā)明化合物的方法。
Y6表示可離去基團(tuán)，例如，碘原子、溴原子、氯原子等鹵原子，甲磺酰氧基、乙磺酰氧基等烷基磺酰氧基，苯磺酰氧基、甲苯(特別是對(duì)甲苯)磺酰氧基等芳基磺酰氧基等有機(jī)磺酸殘基等。
本發(fā)明可在苯、甲苯、乙醚、四氫呋喃、二噁烷、二甲基甲酰胺、二甲亞砜等與反應(yīng)無(wú)關(guān)的有機(jī)溶劑中，使用等摩爾或一方過(guò)量的化合物(VIII)和化合物(IX)，在堿存在下，在-78℃～0℃冷卻下、室溫下，或根據(jù)不同情況在加熱條件下進(jìn)行。所用堿包括氫化鈉、氫化鉀、二異丙胺基鋰、六甲基二硅氮基鋰、叔丁氧基鉀、甲氧基鈉等。此外，本反應(yīng)在甲醇、乙醇等醇類(lèi)溶劑中，使用醇鈉、醇鉀、氫氧化鈉、氫氧化鉀等堿也能夠進(jìn)行。
此外，如果使用的原料化合物(VIII)為1位堿金屬取代物，即使不用堿也能夠進(jìn)行反應(yīng)。
制得的本發(fā)明化合物可呈游離狀態(tài)，也可用常規(guī)方法對(duì)其進(jìn)行成鹽處理，對(duì)所成鹽進(jìn)行單離和精制。單離·精制使用的是萃取、濃縮、蒸餾、結(jié)晶化、過(guò)濾、重結(jié)晶、各種色譜法等通常的化學(xué)操作。
利用異構(gòu)體間的物理化學(xué)性質(zhì)差異，通過(guò)常用方法能夠單離各種異構(gòu)體。例如，利用外消旋拆分法(例如，轉(zhuǎn)變?yōu)榕c一般的光學(xué)活性酸(酒石酸)形成的非對(duì)映(立體)異構(gòu)體鹽的光學(xué)拆分法等)能夠轉(zhuǎn)變?yōu)榱Ⅲw化學(xué)上純粹的異構(gòu)體。此外，非對(duì)映(立體)異構(gòu)體的混合物可通過(guò)常用方法，例如，分級(jí)結(jié)晶法或色譜法等進(jìn)行分離。
具有光學(xué)活性的化合物也能夠通過(guò)使用適當(dāng)?shù)木哂泄鈱W(xué)活性的原料制得。
產(chǎn)業(yè)上利用的可能性
通式(I)表示的本發(fā)明化合物或其制藥學(xué)上允許的鹽具有良好的醫(yī)藥活性，特別是對(duì)IV型PDE具有良好的抑制活性，而且，這種活性對(duì)于IV型PDE具有選擇性。
所以，本發(fā)明化合物能夠用于與IV型PDE有關(guān)的各種疾病的預(yù)防或治療。這些疾病如下。
·呼吸器官疾病[例如，支氣管氣喘(包括特應(yīng)性氣喘)、慢性支氣管炎、肺炎性疾病、成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)等]，
·炎癥性疾病[例如，特應(yīng)性皮炎、結(jié)膜炎、尋麻疹、后天性免疫不全綜合征(AIDS)、形成瘢痕瘤、鼻炎、虹膜睫狀體炎、牙齦炎、牙周炎、牙槽膿溢、胃炎、潰瘍性大腸炎、克羅恩病、消化官潰瘍、食道炎、肌炎、腦炎(重癥肌無(wú)力癥、多發(fā)性硬化癥、神經(jīng)炎)、肝炎、形成瘢痕組織、腎炎(包括增生性腎炎)、腹膜炎、胸膜炎、鞏膜炎、硬皮癥、熱灼傷等]，
·全身或局部關(guān)節(jié)疾病[例如，變形性膝關(guān)節(jié)癥、通風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、慢性關(guān)節(jié)風(fēng)濕癥、惡性風(fēng)濕癥、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎等]，
·增生性疾病[例如，惡性腫瘤、白血病、增生性皮膚病(角化癥及各種皮膚炎癥)、結(jié)締組織疾病等]，
·與神經(jīng)機(jī)能遺傳有關(guān)的疾病[例如，與阿耳茨海默病及帕金森病等神經(jīng)變性疾病有關(guān)的學(xué)習(xí)·記憶及認(rèn)識(shí)障礙、多發(fā)性脊髓側(cè)索硬化癥、老年癡呆癥、肌肉萎縮性側(cè)索硬化癥、急性脫髓性神經(jīng)炎、肌肉營(yíng)養(yǎng)障礙等]，
·伴隨精神機(jī)能異常的疾病[例如，躁郁病、神經(jīng)分裂癥、焦慮癥、恐慌等]，
·伴隨臟器移植的炎癥[例如，再循環(huán)障礙、對(duì)宿主性移植片反應(yīng)等]，
·需要神經(jīng)或細(xì)胞保護(hù)的疾病[例如，心跳停止、脊髓損失、間歇性破行、缺血性疾病(例如，心絞痛、心肌梗塞、大腦中風(fēng)、頭部外傷等)]，
·與排尿有關(guān)的疾病[例如，尿崩癥、尿道炎、尿失禁、膀胱炎、過(guò)敏性膀胱、神經(jīng)性膀胱癥、尿毒癥、腎小管障礙、尿頻、尿閉等]，
·以糖尿病為首的內(nèi)分泌疾病[例如，糖尿病性視網(wǎng)膜癥、糖尿病性腎病、糖尿病性神經(jīng)癥、淀粉樣變性、胰腺炎、甲狀腺炎、肥胖、前列腺肥大等]，
·與腫瘤壞死因子(TNF)及其他的細(xì)胞分裂(IL-1、IL-6)有關(guān)的疾病[例如，牛皮癬、慢性關(guān)節(jié)風(fēng)濕病、潰瘍性大腸炎、克羅恩病、敗血癥、敗血癥性休克、腎炎、肝炎、感染(細(xì)菌及病毒)、循環(huán)不全(心力衰竭、動(dòng)脈硬化、心肌梗塞、大腦中風(fēng))等]，
·自身免疫疾病[例如，全身性紅斑狼瘡、萎縮性胃炎、甲狀腺疾病、腎小球腎炎、睪丸炎、腎上腺疾病、溶血性貧血、卵巢炎等]，
·循環(huán)器官疾病[例如，高血壓、心絞痛、心力衰竭、心肌炎、心外膜炎、心內(nèi)膜炎、心瓣炎等]，
·血管·血液類(lèi)疾病[例如，血管炎、動(dòng)脈瘤、血管內(nèi)膜癥、血栓炎、肉芽瘤、腦血管炎、動(dòng)脈硬化、血管外周炎、白血球減少癥、血小板減少癥、肉樣瘤病等]，
·與免疫變態(tài)反應(yīng)有關(guān)的疾病[例如，接觸性皮炎、血清癥、藥物過(guò)敏、Goodpasture綜合征、淋巴瘤、風(fēng)濕熱、艾滋病、過(guò)敏性休克等]，
·其他疾病[青光眼、痙攣性麻痹、陽(yáng)痿、伴隨疼痛的疾病(例如，挫傷、頭痛等)、頸肩腕綜合征、腎病、腎衰竭、肝衰竭、肥胖]，
本發(fā)明化合物作為呼吸器官疾病[例如，支氣管氣喘(包括特應(yīng)性氣喘)、慢性支氣管炎、肺炎性疾病、ARDS等]，炎癥性疾病[例如，特應(yīng)性皮炎、結(jié)膜炎、尋麻疹、艾滋病、形成瘢痕瘤、鼻炎、虹膜睫狀體炎、牙齦炎、牙周炎、牙槽膿溢、胃炎、潰瘍性大腸炎、克羅恩病、消化道潰瘍、食道炎、肌炎、腦炎(重癥肌無(wú)力癥、多發(fā)性硬化癥、神經(jīng)炎)、肝炎、形成瘢痕組織、腎炎(包括增生性腎炎)、腹膜炎、胸膜炎、鞏膜炎、硬皮癥、熱灼傷等]，與腫瘤壞死因子(TNF)及其他###(IL-1、IL-6)有關(guān)的疾病[例如，牛皮癬、慢性關(guān)節(jié)風(fēng)濕病、潰瘍性大腸炎、克羅恩病、敗血癥、敗血癥性休克、腎炎、肝炎、感染(細(xì)菌及病毒)、循環(huán)不全(心力衰竭、動(dòng)脈硬化、心肌梗塞、大腦中風(fēng))等]的預(yù)防或治療劑特別有效。
本發(fā)明化合物作為支氣管氣喘等呼吸器官疾病的良好預(yù)防·治療劑特別有效。
此外，本發(fā)明化合物與以往的磷酸二酯酶抑制劑相比，其催吐作用極弱，用于有必要進(jìn)行全身給藥的疾病的治療或預(yù)防特別有效。
本發(fā)明化合物的IV型及I、II、III、V型磷酸二酯酶抑制活性通過(guò)以下試驗(yàn)被確認(rèn)。
磷酸二酯酶抑制活性測(cè)定試驗(yàn)(體外)
(1)IV型磷酸二酯酶抑制活性測(cè)定法
為了評(píng)估抑制IV型磷酸二酯酶的本發(fā)明化合物的能力，進(jìn)行了以下試驗(yàn)。
1)在500ml經(jīng)過(guò)肝素處理的健康成人的外周血中添加葡聚糖(3％)生理鹽水200ml，在37℃恒溫箱中放置40分鐘，使紅血球沉淀?；厥占t血球沉淀后的上清液，離心1次后，使沉淀懸浮在緩沖液A(140mM的NaCl、5mM的KCl、5mM的葡萄糖、10mM的hepes，pH＝7.4)，并重疊在密度傾斜離心分離用液(Ficoll液)中，于室溫下，以450G離心40分鐘，分離出單核球部分和顆粒球部分。用緩沖液B(140mM的NaCl、5mM的KCl、1mM的CaCl2、1mM的MgCl2、5mM的葡萄糖、10mM的hepes，pH＝7.4)洗滌顆粒球部分1次后，將其懸浮在包含各種蛋白分解酶抑制劑(50μM的苯基甲磺酰氟、5μM的胃酶抑素A、40μM的亮肽素、20μM的抑肽酶、2mM的苯甲脒)的緩沖液C(20mM的Bis-Tris、5mM的二硫赤蘚糖醇、2mM的EGTA、50mM的乙酸鈉，pH＝6.5)中，然后，用Polytron及超聲波粉碎機(jī)粉碎細(xì)胞，通過(guò)超離心(4℃，100,000G，60分鐘)獲得可溶性部分。
2)在經(jīng)過(guò)緩沖液C平衡化的1.6×10cm Q瓊脂糖柱中填充所得的可溶性部分。然后，用300ml緩沖液C洗凈該柱，除去未結(jié)合的蛋白。用200ml含有0.05～1.25M乙酸鈉的線形梯度液的緩沖液C洗脫磷酸二酯酶，回收40個(gè)5.0ml部分。對(duì)各部分的cAMP及cGMP代謝磷酸二酯酶活性進(jìn)行檢查。各部分中沒(méi)有cGMP，但有cAMP的代謝活性，而且，利用10μM的環(huán)戊苯吡酮(rolipramIV型磷酸二酯酶的選擇性抑制劑)集中代謝活性消失了的部分，作為檢查IV型磷酸二酯酶抑制活性所用的儲(chǔ)存溶液。
3)使試驗(yàn)化合物在含有所希望的濃度的40mM tris-HCl(pH8.0)、5mMMgCl2、4mM 2-巰基乙醇、0.3μM cilostamide(III型磷酸二酯酶的選擇性抑制劑)、1μM cAMP、10nM 3H-cAMP及IV型磷酸二酯酶儲(chǔ)存溶液的反應(yīng)混合物中反應(yīng)10分鐘，反應(yīng)溫度為30℃。于90℃加熱反應(yīng)液，歷時(shí)1分鐘，然后冷卻，再添加1單位5′-核苷酸酶，于30℃反應(yīng)10分鐘，然后添加1ml甲醇，使反應(yīng)停止。將反應(yīng)液通過(guò)Dowex 1×8柱，吸附未分解物后，測(cè)定放射活性。
4)IC50為IV型磷酸二酯酶的代謝活性被抑制了50％時(shí)的試驗(yàn)化合物的濃度，計(jì)算各化合物的IC50。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果本發(fā)明化合物對(duì)IV型PDE的抑制活性的測(cè)定結(jié)果和美國(guó)專(zhuān)利中具體揭示的化合物或通過(guò)其他途徑合成的類(lèi)似比較化合物的結(jié)果如表1及表2所示。
表1
表2
比較化合物14-(2-氯苯基)-1-乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
mp134～135℃(AcOEt-己烷)
比較化合物2前述美國(guó)專(zhuān)利實(shí)施例5f的化合物
比較化合物34-(4-氯苯基)-1-乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
mp221～222℃(AcOEt-己烷)
比較化合物4前述美國(guó)專(zhuān)利實(shí)施例5e的化合物
比較化合物54-(3，4-二氯苯基)-1-乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
mp236～239℃(AcOEt-iPr2O)
比較化合物64-(3-氯苯基)-1-異丙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
mp169～171℃(AcOEt-iPr2O)
比較化合物74-(3-氯苯基)-1-乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
mp154～156℃(AcOEt-己烷)
比較化合物84-(3-甲基苯基)-1-乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
mp148～149℃(AcOEt-己烷)
從上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果可明顯看出本發(fā)明化合物對(duì)IV型PDE具有顯著的抑制活性。
尤其是，4-取代苯基-1-取代吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮型化合物中，4位的苯基的鄰位或?qū)ξ挥腥〈幕衔飳?duì)IV型PDE的抑制活性特別低。對(duì)位和間位雙取代的化合物同樣如此。對(duì)應(yīng)于此，只在間位具有取代基的化合物(比較化合物)比鄰位、對(duì)位或雙取代體的活性高一個(gè)數(shù)量級(jí)。而且，4位苯基的間位具有取代基，且7位導(dǎo)入了低級(jí)烷基的本發(fā)明化合物與只在間位具有取代基的比較化合物相比，其IV型PDE抑制活性更為顯著。
所以，就4-取代苯基-1-取代吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮型化合物的IV型PDE抑制活性而言，只在4位苯基的間位具有取代基，且7位具有低級(jí)烷基類(lèi)取代基的本發(fā)明化合物，特別是上述表2中的化合物[包括在本發(fā)明化合物(II)中]與美國(guó)專(zhuān)利中具體記載的化合物的潛在效果相比，前者更為顯著。
(2)對(duì)各種磷酸二酯酶同功酶抑制活性的測(cè)定方法為了評(píng)估本發(fā)明化合物對(duì)IV型磷酸二酯酶的選擇性，通過(guò)以下方法精制I型、II型、III型及V型磷酸二酯酶。
1)利用大鼠的心肌細(xì)胞精制含有各種磷酸二酯酶(I、II、III型)同功酶的溶液。在乙醚麻醉下打開(kāi)Wistar大鼠的胸腔，摘取其心臟。用含有肝素(1單位/ml)的生理鹽水回流，除去血液后，用剪子剪碎。將其懸浮在含有各種蛋白質(zhì)分解酶抑制劑(50μM的苯基甲磺酰氟、5μM的胃酶抑素A、40μM的亮肽素、20μM的抑肽酶、2mM的苯甲脒)的緩沖液A(20mM的Bis-Tris、5mM的二硫赤蘚糖醇、2mM的EGTA、50mM的乙酸鈉，pH＝6.5)中，然后，用Polytron及超聲波粉碎機(jī)粉碎細(xì)胞，通過(guò)超離心(4℃，100,000G，60分鐘)獲得可溶性部分。
2)按照以下方法由所得的可溶性部分調(diào)整含有各種磷酸二酯酶同功酶的溶液。在經(jīng)過(guò)緩沖液A平衡化的1.6×10.0cmQ瓊脂糖柱中填充所得的可溶性部分。然后，用300ml緩沖液A洗凈該柱，除去未結(jié)合的蛋白。用200ml含有0.05～1.25M乙酸鈉的線形梯度液的緩沖液A洗脫磷酸二酯酶，回收約40個(gè)含有各種濃度的乙酸鈉的5.0ml部分。對(duì)各部分的cAMP及cGMP代謝磷酸二酯酶活性進(jìn)行檢查。各部分中只對(duì)cAMP具有代謝活性，而且，利用0.1μM的cilostamide(III型磷酸二酯酶的選擇性抑制劑)將代謝活性消失的部分作為III型磷酸二酯酶。通過(guò)添加2μM的cGMP，將cAMP的代謝活性有所增強(qiáng)的部分作為II型磷酸二酯酶。此外，添加cGMP，cAMP的代謝活性沒(méi)有變化，通過(guò)添加2mM的CaCl2，將cAMP的代謝活性有所增強(qiáng)的部分作為I型磷酸二酯酶。分別回收各個(gè)部分，作為選擇性檢查的各種磷酸二酯酶(I型、II型、III型)儲(chǔ)存溶液使用。
3)用健康成人的外周血液調(diào)整含有V型磷酸二酯酶的溶液。在500ml經(jīng)過(guò)肝素處理的外周血液中添加200ml葡聚糖(3％)生理鹽水，然后，在37℃恒溫箱中放置40分鐘，使紅血球沉淀?；厥占t血球沉淀后的上清液，離心1次后，使沉淀懸浮在緩沖液B(140mM的NaCl、5mM的KCl、5mM的葡萄糖、10mM的hepes，pH＝7.4)，并重疊在密度傾斜離心分離用液(Ficoll液)中，于室溫下，以450G離心40分鐘，分離出單核球部分和顆粒球部分。用緩沖液C(140mM的NaCl、5mM的KCl、1mM的CaCl2、1mM的MgCl2、5mM的葡萄糖、10mM的hepes，pH＝7.4)洗滌顆粒球部分1次后，將其懸浮在包含各種蛋白分解酶抑制劑(40μM的亮肽素、5μM的胃酶抑素A、20μM的抑肽酶、50μM的苯基甲磺酰氟、2mM的苯甲脒)的緩沖液D(20mM的Bis-Tris、5mM的二硫赤蘚糖醇、2mM的EGTA、50mM的乙酸鈉，pH＝6.5)中，然后，用Polytron及超聲波粉碎機(jī)粉碎細(xì)胞，通過(guò)超離心(4℃，100,000G，60分鐘)獲得可溶性部分。
在經(jīng)過(guò)緩沖液D平衡化的1.6×10cm Q瓊脂糖柱中填充所得的可溶性部分。然后，用120ml緩沖液D洗凈該柱，除去未結(jié)合的蛋白。用300ml含有0.05～1.25M乙酸鈉的線形梯度液的緩沖液D洗脫磷酸二酯酶，回收5.0ml部分。對(duì)各部分的cAMP及cGMP代謝磷酸二酯酶活性進(jìn)行檢查。集中各部分中只對(duì)cGMP具有代謝活性的部分，作為檢查V型磷酸二酯酶的儲(chǔ)存溶液使用。利用以上獲得的各種磷酸二酯酶同功酶的儲(chǔ)存溶液測(cè)定抑制活性。
1)使試驗(yàn)化合物在含有所希望濃度的40mM tris-HCl(pH8.0)、5mMMgCl2、4mM 2-巰基乙醇、10μM環(huán)戊苯吡酮(rolipram，IV型磷酸二酯酶的選擇性抑制劑)、1μM cAMP、10nM 3H-cAMP(V型磷酸二酯酶的情況下，分別將1μM cAMP、10nM 3H-cAMP換成1μM cGMP、100nM 3H-cGMP)及各種同功酶儲(chǔ)存溶液的反應(yīng)混合物中反應(yīng)10分鐘，反應(yīng)溫度為30℃。于90℃加熱反應(yīng)液，歷時(shí)1分鐘，然后冷卻，再添加1單位5′-核苷酸酶，于30℃反應(yīng)10分鐘，然后添加1ml甲醇，使反應(yīng)停止。將反應(yīng)液通過(guò)Dowex 1×8柱，吸附未代謝的cAMP或cGMP后，用液體閃爍計(jì)數(shù)器測(cè)定溶出液的放射活性
2)IC50為各種同功酶的代謝活性被抑制了50％時(shí)的試驗(yàn)化合物的濃度，計(jì)算各化合物的IC50。評(píng)估抑制活性的選擇性(IC50)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果通過(guò)上述測(cè)定方法可確認(rèn)對(duì)應(yīng)于其他PDE，大多數(shù)本發(fā)明化合物對(duì)IV型PDE具有良好的選擇性抑制活性。例如，實(shí)施例1、3、4、19及34的化合物對(duì)IV型PDE的抑制活性比對(duì)其他PDE的選擇性好1000倍以上。
(3)抗原誘發(fā)氣管內(nèi)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)抑制作用
1)使用通過(guò)白蛋白(5μg)及氫氧化鋁膠體(100mg)的腹腔內(nèi)處理(一周1次共3次)進(jìn)行了能動(dòng)敏化的雄性豚鼠。在H1-組胺拮抗劑和吡拉明(2mg/kg)的靜脈內(nèi)處理下，使豚鼠在30分鐘內(nèi)吸入0.5％白蛋白，并暴露在空氣中，從而引起氣管炎癥。
2)將試驗(yàn)化合物懸浮在0.5％甲基纖維素精制水中，在白蛋白暴露的30分鐘前或3小時(shí)后經(jīng)口給藥。而且，同樣給對(duì)照群服用溶劑(0.5％甲基纖維素精制水，3ml/kg)。白蛋白暴露24小時(shí)后，在尿烷(2g/kg，靜脈內(nèi)給藥)麻醉下，從腹部大動(dòng)脈放血致死，用生理鹽水(10ml×3次)洗凈肺泡。
3)用血細(xì)胞計(jì)算裝置(Celltac-α，日本光電)計(jì)數(shù)肺泡洗凈液中的總白血球數(shù)。而且，用Difquick(綠十字株式會(huì)社)染色涂抹在載玻片上的肺泡洗凈液中的白血球，通過(guò)鏡檢求出各白血球細(xì)胞比(嗜酸性細(xì)胞、單細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及中性白細(xì)胞)，再利用以下式子算出各白血球細(xì)胞的氣管內(nèi)浸潤(rùn)數(shù)。[各白血球細(xì)胞數(shù)(嗜酸性細(xì)胞、單細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及中性白細(xì)胞)]＝[總白血球數(shù)]×[各白血球細(xì)胞比(嗜酸性細(xì)胞、單細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及中性白細(xì)胞)]
4)由對(duì)應(yīng)于試驗(yàn)化合物各用量的對(duì)照群的總浸潤(rùn)白血球數(shù)抑制率求出ED50的值。此外，對(duì)各白血球細(xì)胞數(shù)(嗜酸性細(xì)胞、單細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及中性白細(xì)胞)的抑制作用可通過(guò)Dunnett′s測(cè)試的有效差(p＜0.05)來(lái)判定。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果通過(guò)上述測(cè)定方法可確認(rèn)本發(fā)明化合物對(duì)氣管內(nèi)炎癥細(xì)胞具有良好的抑制作用，可作為良好的支氣管哮喘治療劑使用。
包含以本發(fā)明化合物或1種或2種以上其鹽為有效成分的制劑可使用通常制劑化所用的載體、賦形劑及其他添加劑調(diào)制而成。
給藥形式可以是片劑、丸劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、溶液劑等的經(jīng)口給藥形式，或靜注、肌注等注射劑、栓劑、經(jīng)皮制劑、吸入劑或膀胱內(nèi)注入等非經(jīng)口給藥形式中的任何一種。給藥量應(yīng)考慮癥狀、給藥對(duì)象的年齡、性別等，根據(jù)不同的情況適當(dāng)決定，一般經(jīng)口給藥時(shí)，成人1天為0.001mg/kg到100mg/kg。這些藥物可一次服用，也可分2～4次服用。而且，根據(jù)不同的癥狀靜脈給藥時(shí)，一般成人1天為0.001mg/kg到10mg/kg，可以1次注射，也可分幾次注射。此外，采用吸入方式給藥時(shí)，一般成人1天為0.0001mg/kg到1mg/kg，可以1天1次吸入，也可分為幾次。采用涂布給藥時(shí)，1天的用量為0.0001mg/kg到1mg/kg，可1次給藥，也可分幾次給藥。
作為本發(fā)明的經(jīng)口給藥的固體組合物使用的是片劑、散劑和顆粒劑等。這些固體組合物中的一種或一種以上的活性物質(zhì)至少與一種無(wú)活性稀釋劑，例如，乳糖、甘露糖醇、葡萄糖、羥丙基纖維素、微晶纖維素、淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、硅酸鋁酸鎂混合。根據(jù)常用的方法，組合物中還可包含無(wú)活性稀釋劑以外的添加劑，例如，硬脂酸鎂等潤(rùn)滑劑，纖維素乙醇酸鈣等崩解劑，乳糖等穩(wěn)定劑，谷氨酸或天冬氨酸等助溶劑。如有必要，在片劑或丸劑外面還可包裹蔗糖、明膠、羥丙基纖維素、甲基纖維素鄰苯二甲酸羥丙酯等糖衣或胃溶性或腸溶性物質(zhì)的薄膜。
經(jīng)口給藥的液體組合物包括藥劑上允許的乳濁劑、溶液劑、混懸劑、糖漿劑、酏劑等，一般使用的無(wú)活性稀釋劑包括精制水和乙醇。組合物中除了無(wú)活性稀釋劑之外，還可包含濕潤(rùn)劑、懸浮劑等助劑，甜味劑，矯味劑，芳香劑和防腐劑。
作為非經(jīng)口給藥的注射劑包括無(wú)菌的水性或非水性溶液劑、混懸劑、乳濁劑。水性的溶液劑和混懸劑包括注射用蒸餾水及生理鹽水。非水性溶液劑和混懸劑包括丙二醇、聚乙二醇、橄欖油等植物油，乙醇等醇類(lèi)，吐溫80等。這些組合物中還可包含助溶劑(例如，谷氨酸、天冬氨酸)等助劑。這些組合物通過(guò)濾菌器過(guò)濾，與殺菌劑配合使用或通過(guò)光照來(lái)達(dá)到無(wú)菌化目的。這些組合物還可制成無(wú)菌固體組合物，在使用前用無(wú)菌水或無(wú)菌注射用溶劑溶解即可使用。
實(shí)施發(fā)明的最佳狀態(tài)
以下，在實(shí)施例的基礎(chǔ)上對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)的說(shuō)明。但本發(fā)明并不僅限于所述實(shí)施例。
本發(fā)明的原料化合物也包括新化合物。原料化合物的制法如參考例所示。
參考例1
加熱回流3-氰基-6-乙基-2(1H)-吡啶酮(36.2g，0.24mol)和磷酰氯(250ml)的混合物，歷時(shí)2小時(shí)。將反應(yīng)液減壓濃縮后，在殘?jiān)刑砑蛹妆?，減壓濃縮。用氯仿稀釋殘?jiān)?，再?N的氫氧化鈉水溶液洗凈。用氯仿萃取水層，合并氯仿層，用無(wú)水硫酸鎂干燥。濾去硫酸鎂之后減壓濃縮，殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷-乙酸乙酯)精制，獲得呈油狀物的2-氯-3-氰基-6-乙基吡啶(19.6g，49％)。
參考例2
在3-溴氯苯(22.1g，115mmol)的四氫呋喃(200ml)溶液中添加金屬鎂(2.72g，112mmol)，于室溫下攪拌。由于自然發(fā)熱，所以，一直要攪拌到發(fā)熱停止為止。將反應(yīng)液冷卻至-20℃，添加2-氯-3-氰基-6-乙基吡啶(9.33g，56mmol)，于室溫?cái)嚢?6小時(shí)。然后，在反應(yīng)液中添加飽和氯化銨水溶液，于室溫?cái)嚢?0分鐘后，添加1N的鹽酸，用乙酸乙酯萃取。用無(wú)水硫酸鎂干燥有機(jī)層后，濾去硫酸鎂，減壓濃縮。殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷-乙酸乙酯)精制，獲得呈淡黃色油狀物的2-氯-3-(3-氯苯甲?；?-6-乙基吡啶(3.48g，22％)。
參考例3
與參考例2同樣操作，獲得以下化合物。
3-(3-溴苯甲?；?-2-氯-6-乙基吡啶
參考例4
在3-溴氯苯(38g，200mmol)的四氫呋喃(400ml)溶液中添加金屬鎂(4.8g，200mmol)，于室溫下攪拌。由于自然發(fā)熱，所以，一直要攪拌到發(fā)熱停止為止。將反應(yīng)液冷卻至-40℃，添加2-氯-6-甲基煙酸(9.2g，53mmol)，于室溫?cái)嚢枰灰?。然后，在反?yīng)液中添加飽和氯化銨水溶液，用乙酸乙酯萃取。用無(wú)水硫酸鎂干燥有機(jī)層后，濾去硫酸鎂，減壓濃縮。殘?jiān)霉枘z柱色譜法(氯仿)精制，獲得呈油狀物的2-氯-3-(3-氯苯甲酰基)-6-甲基吡啶(6.25g，44％)。
參考例5
與參考例4同樣操作，獲得以下化合物。
3-(3-溴苯甲?；?-2-氯-6-甲基吡啶
參考例6
于100℃，在密封管中攪拌2-氯-3-(3-氯苯甲?；?-6-乙基吡啶(3.4g，12mmol)和70％的乙胺水溶液(15ml)的混合物，歷時(shí)4小時(shí)。將反應(yīng)液冷卻至室溫后，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中。在其中添加1N的鹽酸，使其成酸性，劇烈振蕩后，添加1N的氫氧化鈉水溶液，使反應(yīng)液變?yōu)閴A性。用氯仿萃取，用無(wú)水硫酸鎂干燥有機(jī)層后，濾去硫酸鎂，減壓濃縮。殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷-乙酸乙酯)精制，獲得呈黃色油狀物的3-(3-氯苯甲?；?-6-乙基-2-乙基氨基吡啶(2.6g，76％)。
與參考例6同樣操作，獲得以下參考例7～9的化合物。
參考例7
3-(3-溴苯甲?；?-6-乙基-2-乙基氨基吡啶
參考例8
3-(3-氯苯甲酰基)-2-乙基氨基-6-甲基吡啶
參考例9
3-(3-溴苯甲?；?-2-乙基氨基-6-甲基吡啶
參考例10
在3-溴甲苯(35.1g，200mmol)的四氫呋喃(300ml)溶液中添加金屬鎂(4.82g，200mmol)，于室溫下攪拌。由于自然發(fā)熱，所以，一直要攪拌到發(fā)熱停止為止。將反應(yīng)液冷卻至-40℃，添加2-氯-6-甲基煙酸(11.6g，68mmol)，于室溫?cái)嚢?6小時(shí)。然后，在反應(yīng)液中添加飽和氯化銨水溶液，用乙酸乙酯萃取。用無(wú)水硫酸鎂干燥有機(jī)層后，濾去硫酸鎂，減壓濃縮。殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷-乙酸乙酯)精制，獲得呈淡黃色油狀物的2-氯-6-甲基-3-(3-甲基苯甲酰基)吡啶(8.70g，52％)。
參考例11
金屬鎂(1.70g，70.0mmol)的四氫呋喃(200ml)的懸浮液中添加3-溴甲苯(12.5g，73.1mmol)，攪拌直到鎂片消失為止。將反應(yīng)液冷卻至-20℃，添加2-氯-3-氰基-6-乙基吡啶(10.6g，63.6mmol)，于室溫?cái)嚢?7小時(shí)。然后，在反應(yīng)液中添加飽和氯化銨水溶液和1N的鹽酸，在室溫下攪拌2小時(shí)后用乙酸乙酯萃取。用無(wú)水硫酸鎂干燥有機(jī)層后，濾去硫酸鎂，減壓濃縮。殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷-乙酸乙酯)精制，獲得呈黃色油狀物的2-氯-6-乙基-3-(3-甲基苯甲?；?吡啶(9.19g，56％)。
參考例12
于100℃，在密封管中攪拌2-氯-6-甲基-3-(3-甲基苯甲?；?吡啶(2.45g，10mmol)和70％的乙胺水溶液(10ml)的混合物，歷時(shí)4小時(shí)。將反應(yīng)液冷卻至室溫后，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中。在其中添加1N的鹽酸，使pH值變?yōu)?，劇烈振蕩后，添加1N的氫氧化鈉水溶液，使pH值變?yōu)?0，用氯仿萃取。用無(wú)水硫酸鎂干燥有機(jī)層后，濾去硫酸鎂，減壓濃縮。殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷-乙酸乙酯)精制，獲得呈黃色油狀物的2-乙基氨基-6-甲基-3-(3-甲基苯甲?；?吡啶(2.10g，83％)。
參考例13
與參考例12同樣操作，獲得以下化合物。
2-乙基氨基-6-乙基-3-(3-甲基苯甲?；?吡啶
參考例14
在-65℃以下，向正丁基鋰的1.6M己烷溶液(100ml，160mmol)的四氫呋喃(500ml)溶液中添加二異丙胺(23ml，175mmol)，加溫至-40℃。在-70℃以下，向反應(yīng)液中添加2-氯吡啶(17g，150mmol)，于-70℃以下攪拌1.5小時(shí)。在-70℃以下，向反應(yīng)液中添加環(huán)己烷甲醛(17g，151mmol)，在-70℃以下攪拌2小時(shí)。在反應(yīng)液中加入水，加溫至室溫，用乙酸乙酯萃取。用無(wú)水硫酸鎂干燥有機(jī)層后，減壓濃縮。殘?jiān)霉枘z柱色譜法(氯仿)精制，獲得2-氯-α-環(huán)己基-3-吡啶甲醇(17g，50％)。
參考例15
在氬氣氛圍中，向冷卻至-78℃的二異丙胺(5.52g，54.7mmol)的四氫呋喃(200ml)溶液中滴加正丁基鋰的1.6M己烷溶液(30ml)，攪拌30分鐘。然后，在反應(yīng)液中滴加2-氯吡啶(5.71g，50.3mmol)，攪拌90分鐘。再在反應(yīng)液中滴加2-噻吩甲醛(6.01g，53.7mmol)，攪拌30分鐘。在反應(yīng)液中加入飽和食鹽水，用氯仿萃取。用飽和食鹽水洗凈有機(jī)層后，用無(wú)水硫酸鈉干燥。過(guò)濾硫酸鈉后減壓蒸去溶劑，所得殘?jiān)霉枘z柱色譜法(氯仿)精制，獲得α-(2-氯吡啶-3-基)-2-噻吩甲醇(6.66g，27.5mmol，59％)。
與參考例15同樣操作，獲得以下參考例16～20的化合物。
參考例16
α-(2-氯吡啶-3-基)-3-噻吩甲醇
參考例17
α-(2-氯吡啶-3-基)-2-噻唑甲醇
參考例18
α-(2-氯吡啶-3-基)-2-吡啶甲醇
參考例19
α-(2-氯吡啶-3-基)-3-吡啶甲醇
參考例20
α-(2-氯吡啶-3-基)-4-吡啶甲醇
參考例21
將2-氯-6-甲基煙酸(3.43g，20mmol)的四氫呋喃(30ml)溶液冷卻至-40℃，在其中添加2.0M氯化環(huán)己基鎂的乙醚溶液(30ml)，于室溫下攪拌一夜。向反應(yīng)液中注入飽和氯化銨水溶液，用乙酸乙酯萃取。有機(jī)層用飽和食鹽水洗凈后，用無(wú)水硫酸鎂干燥。濾去硫酸鎂后，減壓濃縮，殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷-乙酸乙酯)精制，獲得呈褐色油狀物的2-氯-3-環(huán)己基羰基-6-甲基吡啶(650mg，14％)。
參考例22
在2-氯-α-環(huán)己基-3-吡啶甲醇(17.0g，75mmol)的二氯甲烷(200ml)溶液中添加氯鉻酸吡啶鎓(20.0g，93mmol)，于室溫下攪拌4小時(shí)。然后，再添加氯鉻酸吡啶鎓(10.0g，46mmol)，于室溫下攪拌2小時(shí)后，在反應(yīng)液中添加乙醚。濾去不溶物。減壓下蒸去溶劑，殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷-氯仿)精制，獲得呈油狀物的2-氯-3-環(huán)己基羰基吡啶(14.9g，88％)。
參考例23
在α-(2-氯吡啶-3-基)-2-噻吩甲醇(6.14g，27.2mmol)的甲苯(100ml)溶液中添加85％二氧化錳(25g，245mmol)，加熱回流2小時(shí)。用助濾劑過(guò)濾反應(yīng)溶液，減壓下濃縮濾液。所得殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷-氯仿)精制，獲得2-氯-3-(2-噻吩羰基)吡啶(5.32g，23.8mmol，87％)。
與參考例23同樣操作，獲得以下參考例24～28的化合物。
參考例24
2-氯-3-(3-噻吩羰基)吡啶
參考例25
2-氯-3-(2-噻唑羰基)吡啶
參考例26
2-氯-3-(2-吡啶羰基)吡啶
參考例27
2-氯-3-(3-吡啶羰基)吡啶
參考例28
2-氯-3-(4-吡啶羰基)吡啶
與參考例6同樣操作，獲得以下參考例29～36的化合物。
參考例29
3-環(huán)己基羰基-2-乙基氨基-6-甲基吡啶
參考例30
3-環(huán)己基羰基-2-乙基氨基吡啶
參考例31
2-乙基氨基-3-(2-噻吩羰基)吡啶
參考例32
2-乙基氨基-3-(3-噻吩羰基)吡啶
參考例33
2-乙基氨基-3-(2-噻唑羰基)吡啶
參考例34
2-乙基氨基-3-(2-吡啶羰基)吡啶
參考例35
2-乙基氨基-3-(3-吡啶羰基)吡啶
參考例36
2-乙基氨基-3-(4-吡啶羰基)吡啶
與參考例35同樣操作，獲得以下參考例37和38的化合物。
參考例37
2-氯-α-(3-氯苯基)-6-三氟甲基-3-吡啶甲醇
參考例38
α-(3-溴苯基)-2-氯-6-三氟甲基-3-吡啶甲醇
與參考例23同樣操作，獲得以下參考例39和40的化合物。
參考例39
2-氯-3-(3-氯苯甲?；?-6-三氟甲基吡啶
參考例40
3-(3-溴苯甲?；?-2-氯-6-三氟甲基吡啶
與參考例6同樣操作，獲得以下參考例41和42的化合物。
參考例41
3-(3-氯苯甲酰基)-2-乙基氨基-6-三氟甲基吡啶
參考例42
3-(3-溴苯甲?；?-2-乙基氨基-6-三氟甲基吡啶
參考例43
在400ml乙酸中溶解2-氨基-3-氰基-6-二甲氧基甲基吡啶39.6g(0.2mol)和乙醛12ml(0.2mol)而形成的溶液中添加三乙酰氧基硼氫化鈉45.5g(0.2mol)，于室溫下攪拌2.5小時(shí)。減壓濃縮反應(yīng)液后，用氯仿稀釋?zhuān)儆?N的氫氧化鈉水溶液洗凈。有機(jī)層用無(wú)水硫酸鎂干燥后，濾去硫酸鎂，減壓濃縮。殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷-乙酸乙酯)精制，獲得呈油狀物的3-氰基-2-乙基氨基-6-二甲氧基甲基吡啶33.9g。收率為77％。
參考例44
在四氫呋喃500ml中溶解3-溴氯苯146.7g(0.77mol)而形成的溶液中加入金屬鎂18.6g(0.76mol)，于室溫下攪拌。由于自然發(fā)熱，所以，需要一直攪拌到發(fā)熱停止為止。將反應(yīng)液冷卻至-20℃，添加3-氰基-2-乙基氨基-6-二甲氧基甲基吡啶33.9g(0.15mol)，加熱回流一夜。在反應(yīng)液中加入飽和氯化銨水溶液，用乙酸乙酯萃取。水洗有機(jī)層后，用無(wú)水硫酸鎂干燥。濾去硫酸鎂后，減壓蒸去溶劑，獲得3-(3-氯苯甲?；?-2-乙基氨基-6-二甲氧基甲基吡啶的粗品。用500ml四氫呋喃稀釋上述3-(3-氯苯甲?；?-2-乙基氨基-6-二甲氧基甲基吡啶的粗品，添加6N的鹽酸，于室溫下攪拌6小時(shí)。用氫氧化鈉水溶液將反應(yīng)液的pH值調(diào)整到10，再用乙酸乙酯萃取。有機(jī)層用無(wú)水硫酸鎂干燥后，濾去硫酸鎂，減壓濃縮。所得殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷-乙酸乙酯)精制，獲得3-(3-氯苯甲?；?-2-乙基氨基吡啶-6-甲醛。
參考例45
在250ml乙醇中溶解α-(3-氯苯甲酰基)乙酰胺19.76g(0.1mol)而形成的溶液中添加19.15g(0.11mol)1，1-二乙氧基-3-戊酮，加熱回流40小時(shí)。冷卻至室溫后向反應(yīng)液中注入水，再用氯仿萃取。用1N的鹽酸和飽和食鹽水洗凈有機(jī)層，再用無(wú)水硫酸鈉干燥后，濾去硫酸鎂，減壓濃縮。在殘?jiān)刑砑右颐?，濾取結(jié)晶，用乙醚洗凈，獲得18.50g 3-(3-氯苯甲?；?-6-乙基-2-吡啶酮的結(jié)晶。收率為71％。
與參考例45同樣操作，獲得參考例46和47的化合物。
參考例46
3-(3-氯苯甲?；?-6-苯基-2-吡啶酮
參考例47
3-(3-氯苯甲?；?-6-環(huán)丙基-2-吡啶酮
參考例48
在1000ml二氯乙烷中溶解95.8g(366mmol)3-(3-氯苯甲?；?-6-乙基-2-吡啶酮而形成的溶液中添加56.4ml(403mmol)三乙胺、4.52g(366mmol)二甲基氨基吡啶和76.7g(403mmol)對(duì)甲苯磺酰氯，于室溫下攪拌1小時(shí)。用水和1N的鹽酸飽和食鹽水洗凈反應(yīng)液，再用無(wú)水硫酸鎂干燥，濾去硫酸鎂，減壓濃縮。殘?jiān)靡宜嵋阴?己烷重結(jié)晶，獲得139.90g對(duì)甲苯磺酸3-(3-氯苯甲?；?-6-乙基-2-吡啶酯結(jié)晶。收率為91.9％。
與參考例48同樣操作，獲得以下參考例49和50的化合物。
參考例49
對(duì)甲苯磺酸3-(3-氯苯甲?；?-6-苯基-2-吡啶酯
參考例50
對(duì)甲苯磺酸3-(3-氯苯甲?；?-6-環(huán)丙基-2-吡啶酯
參考例51
在400ml甲苯中溶解26.20g(63mmol)對(duì)甲苯磺酸3-(3-氯苯甲?；?-6-乙基-2-吡啶酯而形成的溶液中添加50ml 70％的乙胺水溶液，加熱回流4小時(shí)，冷卻至室溫后，減壓濃縮反應(yīng)液，用乙醚稀釋后，依次用水和飽和碳酸氫鈉水溶液洗凈。有機(jī)層用無(wú)水硫酸鎂干燥后，濾去硫酸鎂，減壓蒸去溶劑，獲得呈油狀物的3-(3-氯苯甲?；?-6-乙基-2-乙基氨基吡啶19.50g。收率為100％。
與參考例51同樣操作，獲得以下參考例52和53的化合物。
參考例52
3-(3-氯苯甲?；?-2-乙基氨基-6-苯基吡啶
參考例53
3-(3-氯苯甲酰基)-6-環(huán)丙基-2-乙基氨基吡啶
與參考例45同樣操作，獲得以下參考例54和55的化合物。
參考例54
6-乙基-3-[(3-甲基環(huán)己基)羰基]-2-吡啶酮
參考例55
6-甲基-3-[(3-甲基環(huán)己基)羰基]-2-吡啶酮
參考例56
在100ml 1，2-二氯乙烷中溶解4.16g(17.9mmol)6-乙基-3-[(3-甲基環(huán)己基)羰基]-2-吡啶酮而形成的溶液中添加6.0ml(43mmol)三乙胺、600mg(492mmol)4-二甲基氨基吡啶和6.00g(31.6mmol)對(duì)甲苯磺酰氯，在油溫70℃下，加熱攪拌2小時(shí)。冷卻至室溫后，加水，用氯仿萃取。依次用1N的鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗凈有機(jī)層，再用無(wú)水硫酸鎂干燥，然后，濾去硫酸鎂，減壓濃縮，獲得7.80g對(duì)甲苯磺酸6-乙基-3-[(3-甲基環(huán)己基)羰基]-2-吡啶酯的粗品。將上述粗品溶于100ml甲苯中，在形成的溶液中加入20ml 70％的乙胺水溶液，加熱回流8小時(shí)。再添加20ml 70％的乙胺水溶液，加熱回流一夜。冷卻至室溫后，添加1N的鹽酸，將pH值調(diào)整到1，再攪拌15分鐘。然后，用1N的氫氧化鈉水溶液中和，再用氯仿萃取。用飽和食鹽水洗凈有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鈉干燥，濾去硫酸鈉，減壓濃縮。殘?jiān)霉枘z柱色譜法(乙酸乙酯-己烷)精制，獲得2.60g 6-乙基-2-乙基氨基-3-[(3-甲基環(huán)己基)羰基]吡啶。收率為56％。
參考例57
與參考例56同樣操作，獲得以下化合物。
6-甲基-2-乙基氨基-3-[(3-甲基環(huán)己基)羰基]吡啶
與參考例4同樣操作，獲得以下參考例58和59的化合物。
參考例58
2-氯-3-(3-氯苯甲?；?-6-甲基吡啶
參考例59
2-氯-6-甲基-3-(3-甲基苯甲?；?吡啶
與參考例6同樣操作，獲得以下參考例60～63的化合物。
參考例60
3-(3-氯苯甲酰基)-6-甲基-2-(丙基氨基)吡啶
參考例61
3-(3-氯苯甲?；?-2-(環(huán)丙基甲基氨基)-6-甲基吡啶
參考例62
6-甲基-2-(丙基氨基)-3-(3-甲基苯甲酰基)吡啶
參考例63
2-(環(huán)丙基甲基氨基)-6-甲基-3-(3-甲基苯甲?；?吡啶
參考例64
與參考例4同樣操作，獲得以下化合物。
3-苯甲?；?2-氯-6-甲基吡啶
參考例65
將3.00g(12.9mmol)3-苯甲酰基-2-氯-6-甲基吡啶的40ml濃硫酸溶液冷卻至5℃以下，在其中慢慢滴加1.0ml發(fā)煙硝酸，攪拌30分鐘。在反應(yīng)液中添加冰水，用氫氧化鈉水溶液中和后，用乙酸乙酯萃取。用飽和食鹽水洗凈有機(jī)層，再用無(wú)水硫酸鎂干燥。濾去硫酸鎂后，減壓蒸去溶劑，所得殘?jiān)靡宜嵋阴?二異丙醚重結(jié)晶，獲得2-氯-6-甲基-3-(3-硝基苯甲?；?吡啶1.81g(51％)。
參考例66
與參考例6同樣操作，獲得以下化合物。
2-乙基氨基-6-甲基-3-(3-硝基苯甲?；?吡啶
參考例67
與參考例45同樣操作，獲得以下化合物。
6-甲基-3-(1-萘基羰基)-2-吡啶酮
參考例68
與參考例48同樣操作，獲得以下化合物。
對(duì)甲苯磺酸6-甲基-3-(1-萘基羰基)-2-吡啶酯
參考例69
與參考例51同樣操作，獲得以下化合物。
2-乙基氨基-6-甲基-3-(1-萘基羰基)吡啶
實(shí)施例1
在冰冷卻下，向3-(3-氯苯甲?；?-6-乙基-2-乙基氨基吡啶(2.6g，9mmol)的四氫呋喃(50ml)溶液中添加N-羰基氨磺酰氯(0.8ml，9mmol)，在冰冷卻下攪拌1小時(shí)。依次在反應(yīng)液中添加水和飽和碳酸氫鈉水溶液，于室溫?cái)嚢?0分鐘。再添加1N的氫氧化鈉水溶液使反應(yīng)液的pH值調(diào)整到10，再用氯仿萃取。然后，用無(wú)水硫酸鎂干燥有機(jī)層，濾去硫酸鎂，減壓濃縮。殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷-乙酸乙酯)精制，獲得4-(3-氯苯基)-1，7-二乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(1.7g，60％)的結(jié)晶。
與實(shí)施例1同樣操作，獲得以下實(shí)施例2～8的化合物。
實(shí)施例2
4-(3-溴苯基)-1，7-二乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例3
4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例4
4-(3-溴苯基)-1-乙基-7-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例5
1-乙基-7-甲基-4-(3-甲基苯基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例6
1，7-二乙基-4-(3-甲基苯基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例7
4-環(huán)己基-1-乙基-7-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例8
4-環(huán)己基-1-乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例9
在冰冷卻下，向2-乙基氨基-3-(2-噻吩羰基)吡啶(1.01g，4.35mmol)的四氫呋喃(50ml)溶液中添加N-羰基氨磺酰氯(0.5ml，5.6mmol)，攪拌30分鐘。然后，在反應(yīng)液中加入水，用氯仿萃取。用飽和食鹽水洗凈有機(jī)層后，用無(wú)水硫酸鈉干燥。濾去硫酸鈉后，減壓濃縮，所得殘?jiān)霉枘z柱色譜法(氯仿-乙酸乙酯)精制，再用乙酸乙酯重結(jié)晶，獲得1-乙基-4-(2-噻吩基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(613mg，2.38mmol，55％)。
與實(shí)施例9同樣操作，獲得實(shí)施例10～16的化合物。
實(shí)施例10
1-乙基-4-(3-噻吩基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例11
1-乙基-4-(2-噻唑基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例12
1-乙基-4-(2-吡啶基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例13
1-乙基-4-(3-吡啶基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例14
1-乙基-4-(4-吡啶基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例15
4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-三氟甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例16
4-(3-溴苯基)-1-乙基-7-三氟甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例17
與實(shí)施例1同樣操作，獲得以下化合物。
4-(3-氯苯基)-1-乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮-7-甲醛
實(shí)施例18
在冰冷卻下，向1.16g(3.7mmol)4-(3-氯苯基)-1-乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮-7-甲醛和20ml乙醇的混合物中添加35mg(0.9mmol)硼氫化鈉，在冰冷卻下攪拌30分鐘。在反應(yīng)液中加入丙酮，減壓濃縮，在殘?jiān)刑砑铀?，再用氯仿萃取。用無(wú)水硫酸鎂干燥氯仿層，濾去硫酸鎂，減壓濃縮。殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷-乙酸乙酯-氯仿)精制后，再用乙腈-乙醇重結(jié)晶，獲得271mg 4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-羥基甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮。收率為23％。
實(shí)施例19
在冰冷卻下，在50ml四氫呋喃中溶解4.4g(14mmol)4-(3-氯苯基)-1-乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮-7-甲醛而形成的溶液中添加14ml(14mmol)1M的甲基溴化鎂，在冰冷卻下攪拌30分鐘后，再添加7ml(7mmol)1M的甲基溴化鎂，同樣在冰冷卻下攪拌30分鐘。然后，在反應(yīng)液中加入飽和氯化銨水溶液，再用氯仿萃取。用無(wú)水硫酸鎂干燥有機(jī)層后。濾去硫酸鎂，減壓濃縮。殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷-乙酸乙酯-氯仿)精制，獲得1.4g 4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-(1-羥基乙基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮。收率為30％。
實(shí)施例20
在20ml氯仿中溶解366mg(1.1mmol)4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-(1-羥基乙基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮而形成的溶液中添加1.00g二氧化錳，加熱回流1小時(shí)。在反應(yīng)液中添加1.00g二氧化錳并加熱回流1小時(shí)后，再添加500mg二氧化錳，并加熱回流1小時(shí)。濾去不溶物，殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷-乙酸乙酯-氯仿)精制，獲得303mg 7-乙酰基-4-(3-氯苯基)-1-乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮。收率為84％。
與實(shí)施例1同樣操作，獲得以下實(shí)施例21和22的化合物。
實(shí)施例21
4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-苯基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例22
4-(3-氯苯基)-7-環(huán)丙基-1-乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例23
在150ml四氯化碳中溶解15.0g(47.8mmol)的4-(3-氯苯基)-1，7-二乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮而形成的溶液中添加8.94g(50.2mmol)N-溴琥珀酰亞胺、200mg 2，2′-偶氮二異丁腈，加熱回流3小時(shí)。再添加1.28g(7.17mmol)N-溴琥珀酰亞胺、100mg 2，2′-偶氮二異丁腈，并加熱回流1小時(shí)。將反應(yīng)液冷卻至室溫后，濾去不溶物，加水，用四氯化碳萃取。再用飽和食鹽水洗凈有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鎂干燥。濾去硫酸鎂后，減壓濃縮，殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷-乙酸乙酯)精制，獲得11.5g 7-(1-溴乙基)-4-(3-氯苯基)-1-乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮的結(jié)晶。收率為61％。
實(shí)施例24
在20ml四氯化碳中溶解940mg(3mmol)的4-(3-氯苯基)-1，7-二乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮而形成的溶液中添加590mg(3.3mmol)N-溴琥珀酰亞胺、10mg 2，2′-偶氮二異丁腈，加熱回流5小時(shí)。在反應(yīng)液中添加210mg(1.2mmol)N-溴琥珀酰亞胺，并加熱回流一夜。濾去不溶物后，加水，用四氯化碳萃取。再用飽和食鹽水洗凈有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鎂干燥。濾去硫酸鎂后，減壓濃縮。在殘?jiān)屑尤?0ml甲醇和300mg乙酸鈉，加熱回流一夜。用氯仿稀釋反應(yīng)液后，依次用水和飽和食鹽水洗凈。有機(jī)層用無(wú)水硫酸鎂干燥后，濾去硫酸鎂，減壓濃縮。殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷-乙酸乙酯)精制，獲得520mg 7-(1-乙酰氧基乙基)-4-(3-氯苯基)-1-乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮的結(jié)晶。收率為47％。
實(shí)施例25
在6.78g(18.2mmol)7-(1-乙酰氧基乙基)-4-(3-氯苯基)-1-乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮中添加30ml甲醇和30ml1N的氫氧化鈉水溶液，于室溫?cái)嚢?0分鐘。在反應(yīng)液中添加1N的鹽酸中和后，用氯仿萃取。有機(jī)層用飽和食鹽水洗凈后用無(wú)水硫酸鎂干燥，濾去硫酸鎂后減壓濃縮。所得殘?jiān)霉枘z柱色譜法(氯仿)精制，獲得4.50g 4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-(1-羥基乙基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮的結(jié)晶。收率為75％。
與實(shí)施例1同樣操作，獲得以下實(shí)施例26和27的化合物。
實(shí)施例26
1-乙基-7-甲基-4-(3-甲基環(huán)己基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例27
1，7-二乙基-4-(3-甲基環(huán)己基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例28
在100ml 1，2-二氯乙烷中溶解2.00g(6.69mmol)4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶而形成的溶液中添加3.00g(13.5mmol)五硫化二磷，加熱回流6小時(shí)。冷卻至室溫后，添加飽和碳酸氫鈉水溶液，再用氯仿萃取。用飽和食鹽水洗凈有機(jī)層，再用無(wú)水硫酸鎂干燥后，濾去硫酸鎂，減壓濃縮。所得殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷-氯仿)精制后，用乙酸乙酯-異丙醚重結(jié)晶，獲得1.14g 4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-硫酮。收率為54％。
與實(shí)施例1同樣操作，獲得實(shí)施例29～34的化合物。
實(shí)施例29
4-(3-溴苯基)-6，7-二甲基-1-乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例30
4-(3-氯苯基)-7-甲基-1-丙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例31
4-(3-氯苯基)-1-環(huán)丙基甲基-7-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例32
7-甲基-4-(3-甲基苯基)-1-丙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例33
1-環(huán)丙基甲基-7-甲基-4-(3-甲基苯基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例34
4-環(huán)己基-1，7-二乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例35
作為實(shí)施例5的副產(chǎn)物，獲得以下化合物。
6-氯-1-乙基-7-甲基-4-(3-甲基苯基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例36
在10ml甲醇中溶解900mg(2.9mmol)4-(3-氯苯基)-1-乙基-2-羰基-1，2-二氫吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-甲醛而形成的溶液中添加420mg(6.0mmol)羥胺鹽酸鹽和550mg(6.7mmol)乙酸鈉，于室溫?cái)嚢枰灰?。用水和氯仿洗凈不溶物后，用二甲基甲酰?乙腈重結(jié)晶，獲得171mg 4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-羥基亞氨基甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(18％)。
實(shí)施例37
與實(shí)施例1同樣操作，獲得以下化合物。
1-乙基-7-甲基-4-(3-硝基苯基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例38
與實(shí)施例23同樣操作，獲得以下化合物。
7-溴甲基-4-(3-氯苯基)-1-乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例39
作為實(shí)施例1的副產(chǎn)物，獲得以下化合物。
6-氯-4-(3-氯苯基)-1，7-二乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例40
在16ml二甲基甲酰胺中溶解1.57g(40mmol)7-(1-溴乙基)-4-(3-氯苯基)-1-乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮而形成的溶液中添加0.54g(48mmol)硫代乙酸鉀，于室溫?cái)嚢?小時(shí)。在反應(yīng)液中加入乙酸乙酯后，用水和飽和食鹽水洗凈，再用無(wú)水硫酸鎂干燥。濾去硫酸鎂，減壓濃縮后，殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷-乙酸乙酯)精制，獲得1.13g 7-(1-乙?；虼一?-4-(3-氯苯基)-1-乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(73％)。
實(shí)施例41
與實(shí)施例28同樣操作，獲得以下化合物。
4-(3-氯苯基)-1，7-二乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-硫酮
實(shí)施例42
與實(shí)施例1同樣操作，獲得以下化合物。
1-乙基-7-甲基-4-(1-萘基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮
實(shí)施例43
在30ml甲醇中溶解1.62g(495mmol)7-乙酰基-4-(3-氯苯基)-1-乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮和30ml原甲酸甲酯而形成的溶液中添加催化劑量的Dowex-50W-X4，加熱回流一夜。冷卻至室溫后濾去不溶物，減壓蒸去溶劑。所得殘?jiān)霉枘z柱色譜法(甲苯-乙酸乙酯)精制后，用異丙醚重結(jié)晶，獲得1.27g 4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-(1，1-二甲氧基乙基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮(69％)。
上述參考例和實(shí)施例所得的化合物的物性值分別如表3及表4所示。
此外，表中的Rex.No.表示參考例編號(hào)；Ex.No.表示實(shí)施例編號(hào)；NMR表示以TMS為內(nèi)標(biāo)，參考例45～47以DMSO-d6為NMR用溶劑，其他為CDCl3，在室溫下用400MHz測(cè)得的核磁共振譜；mp表示的熔點(diǎn)；Anal.表示元素分析值；dec.表示分解；calcd.表示計(jì)算值；found表示實(shí)驗(yàn)值；Et表示乙基；Ac表示乙酰基；iPr表示異丙基。
表3
表3(續(xù))
表3(續(xù))
表3(續(xù))
表3(續(xù))
表3(續(xù))
表3(續(xù))
表3(續(xù))
表4
表4(續(xù))
表4(續(xù))
表4(續(xù))以下表5、表6、表7根據(jù)化合物類(lèi)型用表的形式表示了實(shí)施例所得的化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)。
表中，Ex.No.、Et、iPr及Ac如前所述，Me表示甲基，nPr表示正丙基，cPr表示環(huán)丙基，cHex表示環(huán)己基，Ph表示苯基，Naph表示萘基，Py表示吡啶基。
表5
表6
表7
除了上述實(shí)施例的化合物之外，以下的表8及表9表示本發(fā)明的另一些化合物。使用上述制造方法和實(shí)施例中記載的合成路線和方法，以及對(duì)本領(lǐng)域的一般技術(shù)人員來(lái)說(shuō)公知的方法或?qū)@些公知方法略加修改后的方法能夠制得這些化合物，并不需要特別的實(shí)驗(yàn)。
表8所示的化合物有的存在各種異構(gòu)體，本發(fā)明的化合物中包括這些異構(gòu)體的單離物及其混合物。表中的Me、Et、nPr、cPr、cHex、Ac、Ph、Naph、和Py如前所述。Compnd.No.表示化合物編號(hào)，cBu表示環(huán)丁基，cPe表示環(huán)戊基，cHep表示環(huán)庚基。
表8
表9
權(quán)利要求
1.吡啶并[2，3-d]嘧啶衍生物或其制藥學(xué)上允許的鹽，其特征在于，由以下通式(I)表示，
式中符號(hào)具有以下含義
X氧原子或硫原子；
R1低級(jí)烷基，環(huán)烷基低級(jí)烷基或環(huán)烷基；
R2氫原子，鹵原子，低級(jí)烷基，鹵代低級(jí)烷基，羥基低級(jí)烷基，巰基低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基低級(jí)烷基，低級(jí)烷基硫代低級(jí)烷基，低級(jí)烷酰氧基低級(jí)烷基，低級(jí)烷酰硫代低級(jí)烷基，低級(jí)烷?；图?jí)烷基，羥基亞氨基低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基亞氨基低級(jí)烷基，環(huán)烷基，芳基或低級(jí)烷?；?br> R3氫原子，鹵原子或低級(jí)烷基；
R4氫原子或低級(jí)烷基；
R5可被與R6相同的基團(tuán)取代的環(huán)烷基，可被與R6相同的基團(tuán)取代的萘基，既可被與R6相同的基團(tuán)取代、也可與苯環(huán)稠合的具有選自氮原子、氧原子及硫原子的1～4個(gè)雜原子的5或6元單環(huán)雜環(huán)基，或式
表示的基團(tuán)；
R6鹵原子，低級(jí)烷基，鹵代低級(jí)烷基，羥基，低級(jí)烷氧基，氰基或硝基；但是，R5為式
表示的基團(tuán)，R6為鹵原子、低級(jí)烷基或低級(jí)烷氧基，R1為低級(jí)烷基或環(huán)烷基，R3和R4都為氫原子，而且X為氧原子時(shí)，R2為氫原子以外的基團(tuán)。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物，其特征還在于，是由以下通式(II)表示的吡啶并[2，3-d]嘧啶衍生物及其制藥學(xué)上允許的鹽，
式中符號(hào)具有以下含義
R7甲基、乙基、丙基或異丙基，
R8甲基、乙基、丙基或異丙基，
R9氯原子、溴原子或甲基。
3.如權(quán)利要求2所述的化合物，其中的R8為甲基或乙基。
4.如權(quán)利要求3所述的化合物，其中R7為乙基或丙基，R8為權(quán)利要求3所述的基團(tuán)。
5.如權(quán)利要求4所述的化合物，包括4-(3-氯苯基)-1，7-二乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、4-(3-溴苯基)-1，7-二乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、4-(3-溴苯基)-1-乙基-7-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、1-乙基-7-甲基-4-(3-甲基苯基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮或1，7-二乙基-4-(3-甲基苯基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮。
6.如權(quán)利要求1所述的化合物，其特征還在于，是由以下通式(III)表示的吡啶并[2，3-d]嘧啶衍生物或其制藥學(xué)上允許的鹽，
式中，X、R1、R3、R4及R5如權(quán)利要求1所述，R10為氫原子、鹵原子、低級(jí)烷基、鹵代低級(jí)烷基、羥基低級(jí)烷基、巰基低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基低級(jí)烷基、低級(jí)烷基硫代低級(jí)烷基、低級(jí)烷酰氧基低級(jí)烷基、低級(jí)烷酰硫代基低級(jí)烷基、低級(jí)烷?；图?jí)烷基、羥基亞氨基低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基亞氨基低級(jí)烷基、環(huán)烷基、芳基或低級(jí)烷?；坏?，R5為式
表示的基團(tuán)，R6為鹵原子、低級(jí)烷基或低級(jí)烷氧基，R1為低級(jí)烷基或環(huán)烷基，R3及R4都為氫原子，X為氧原子時(shí)，R10為除了氫原子或低級(jí)烷基以外的基團(tuán)。
7.如權(quán)利要求6所述的化合物，其中R10為氫原子、低級(jí)烷基、鹵代低級(jí)烷基、羥基低級(jí)烷基、巰基低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基低級(jí)烷基、低級(jí)烷基硫代低級(jí)烷基、低級(jí)烷酰氧基低級(jí)烷基、低級(jí)烷酰硫代低級(jí)烷基、羥基亞氨基低級(jí)烷基、環(huán)烷基、芳基或低級(jí)烷?；?。
8.如權(quán)利要求7所述的化合物，其中R10為氫原子、低級(jí)烷基、鹵代低級(jí)烷基、羥基低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基低級(jí)烷基、低級(jí)烷酰氧基低級(jí)烷基、低級(jí)烷酰硫代低級(jí)烷基、羥基亞氨基低級(jí)烷基、環(huán)烷基、芳基或低級(jí)烷?；?br> 9.如權(quán)利要求8所述的化合物，其中R10為權(quán)利要求8所述的基團(tuán)；R4為氫原子；R5為(1)可被低級(jí)烷基取代的環(huán)烷基，(2)萘基，(3)具有選自氮原子、氧原子及硫原子的1～4個(gè)雜原子的5元或6元單雜環(huán)，或(4)式
表示的基團(tuán)；R6為鹵原子，低級(jí)烷基，鹵代低級(jí)烷基，低級(jí)烷氧基，氰基或硝基。
10.如權(quán)利要求9所述的化合物，其中R1為低級(jí)烷基或環(huán)烷基低級(jí)烷基，R10為低級(jí)烷基、鹵代低級(jí)烷基、羥基低級(jí)烷基、低級(jí)烷酰硫代低級(jí)烷基、羥基亞氨基低級(jí)烷基、環(huán)烷基或低級(jí)烷?；琑3及R4都為氫原子，R5為可被低級(jí)烷基取代的環(huán)烷基或式
表示的基團(tuán)，R6為鹵原子、低級(jí)烷基或硝基。
11.如權(quán)利要求10所述的化合物，包括4-環(huán)己基-1-乙基-7-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-(1-羥基乙基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、4-(3-氯苯基)-7-環(huán)丙基-1-乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、1-乙基-7-甲基-4-(3-甲基環(huán)己基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、1，7-二乙基-4-(3-甲基環(huán)己基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、1-環(huán)丙基甲基-7-甲基-4-(3-甲基苯基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、4-環(huán)己基-1，7-二乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、4-(3-氯苯基)-1-乙基-7-羥基亞氨基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮、7-(1-乙酰硫代乙基)-4-(3-氯苯基)-1-乙基吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮或1，7-二乙基-4-(3-氯苯基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-2(1H)-酮。
12.一種醫(yī)藥組合物，其特征在于，由權(quán)利要求1所述的吡啶并[2，3-d]嘧啶衍生物或其制藥學(xué)上允許的鹽和制藥學(xué)上允許的載體組成。
13.如權(quán)利要求12所述的醫(yī)藥組合物，其特征還在于，為IV型磷酸二酯酶抑制劑。
14.如權(quán)利要求13所述的醫(yī)藥組合物，其特征還在于，為與IV型磷酸二酯酶有關(guān)的呼吸器官疾病的預(yù)防或治療劑。
15.如權(quán)利要求14所述的醫(yī)藥組合物，其特征還在于，為支氣管哮喘的預(yù)防或治療劑。
16.如權(quán)利要求12所述的醫(yī)藥組合物，其特征還在于，由權(quán)利要求6～11的任一項(xiàng)所述的吡啶并[2，3-d]嘧啶衍生物或其制藥學(xué)上允許的鹽和制藥學(xué)上允許的載體組成。
17.如權(quán)利要求16所述的醫(yī)藥組合物，其特征還在于，為IV型磷酸二酯酶抑制劑。
18.如權(quán)利要求17所述的醫(yī)藥組合物，其特征還在于，為與IV型磷酸二酯酶有關(guān)的呼吸器官疾病的預(yù)防或治療劑。
19.如權(quán)利要求18所述的醫(yī)藥組合物，其特征還在于，為支氣管哮喘的預(yù)防或治療劑。
20.一種IV型磷酸二酯酶抑制劑，其特征在于，含有權(quán)利要求2～5的任一項(xiàng)所述的吡啶并[2，3-d]嘧啶衍生物或其制藥學(xué)上允許的鹽。
21.如權(quán)利要求20所述的藥物，其特征還在于，為與IV型磷酸二酯酶有關(guān)的呼吸器官疾病的預(yù)防或治療劑。
22.如權(quán)利要求21所述的藥物，其特征還在于，為支氣管哮喘的預(yù)防或治療劑。
23.權(quán)利要求1～11的任一項(xiàng)所述的吡啶并[2，3-d]嘧啶衍生物或其制藥學(xué)上允許的鹽在制造用于與IV型磷酸二酯酶活性亢進(jìn)有關(guān)的疾病的預(yù)防或治療的IV型磷酸二酯酶抑制劑上的應(yīng)用。
24.如權(quán)利要求23所述的用途，其特征還在于，與IV型磷酸二酯酶活性亢進(jìn)有關(guān)的疾病為呼吸器官疾病。
25.如權(quán)利要求24所述的用途，其特征還在于，與IV型磷酸二酯酶活性亢進(jìn)有關(guān)的疾病為支氣管哮喘。
26.與IV型磷酸二酯酶活性的亢進(jìn)有關(guān)的疾病的預(yù)防或治療方法，其特征在于，給予患有或可能患有與IV型磷酸二酯酶活性亢進(jìn)有關(guān)的疾病的患者預(yù)防或治療這種疾病有效量的權(quán)利要求1～11的任一項(xiàng)所述的吡啶并[2，3-d]嘧啶衍生物或其制藥學(xué)上允許的鹽。
27.如權(quán)利要求26所述的方法，其特征還在于，與IV型磷酸二酯酶活性亢進(jìn)有關(guān)的疾病為呼吸器官疾病。
28.如權(quán)利要求27所述的方法，其特征還在于，與IV型磷酸二酯酶活性亢進(jìn)有關(guān)的疾病為支氣管哮喘。
全文摘要
本發(fā)明涉及對(duì)Ⅳ型磷酸二酯酶活性具有抑制作用,作為藥物,特別是Ⅳ型磷酸二酯酶抑制劑,或與Ⅳ型磷酸二酯酶活性的亢進(jìn)有關(guān)的疾病,特別是呼吸器官疾病,例如,支氣管哮喘的預(yù)防、治療劑很有效的化合物(Ⅰ),或其制藥學(xué)上允許的鹽及其醫(yī)藥組合物。X:氧原子或硫原子;R1:低級(jí)烷基,環(huán)烷基低級(jí)烷基或環(huán)烷基;R2:氫原子,鹵原子,低級(jí)烷基,鹵代低級(jí)烷基,羥基低級(jí)烷基,巰基低級(jí)烷基,低級(jí)烷氧基低級(jí)烷基,低級(jí)烷基硫代低級(jí)烷基,低級(jí)烷酰氧基低級(jí)烷基,低級(jí)烷酰硫代低級(jí)烷基,低級(jí)烷?；图?jí)烷基,羥基亞氨基低級(jí)烷基,低級(jí)烷氧基亞氨基低級(jí)烷基,環(huán)烷基,芳基或低級(jí)烷?；?R3:氫原子,鹵原子或低級(jí)烷基;R4:氫原子或低級(jí)烷基;R5:可被與R6相同的基團(tuán)取代的環(huán)烷基,可被與R6相同的基團(tuán)取代的萘基,既可被與R6相同的基團(tuán)取代,也可與苯環(huán)稠合的具有選自氮原子、氧原子及硫原子的1～4個(gè)雜原子的5或6元單環(huán)雜環(huán)基,或式Ⅱ表示的基團(tuán);R6:鹵原子,低級(jí)烷基,鹵代低級(jí)烷基,羥基,低級(jí)烷氧基,氰基或硝基。
文檔編號(hào)C07D471/04GK1202171SQ9619838
公開(kāi)日1998年12月16日 申請(qǐng)日期1996年11月20日 優(yōu)先權(quán)日1995年11月21日
發(fā)明者高山和久, 久道弘幸, 巖田正洋, 久保田秀樹(shù), 青木源典 申請(qǐng)人:山之內(nèi)制藥株式會(huì)社