專利名稱：：5-或6-氨基-3-芳雜環(huán)取代喹諾酮衍生物的合成及其應用的制作方法
技術領域：
：5-或6-氨基-3-芳雜環(huán)取代的喹諾酮衍生物的合成，及其在制備抗腫瘤的藥物中的應用。
背景技術：
：喹諾酮類化合物為常見的抗菌藥。以喹諾酮類藥物的抗菌作用機制為基礎設計合成具有抗腫瘤作用的新型喹諾酮類化合物是近年來研究熱點之一。作用機制主要為①抑制拓撲異構酶II;②抗有絲分裂的細胞毒素;(D抗腫瘤轉移(與常規(guī)的細胞毒素藥物結合使用:)；④通過細胞毒性造成細胞凋亡。細菌DNA促旋酶是喹諾酮類藥物的靶酶，它是一種n型拓撲異構酶，與真核細胞的拓撲異構酶II功能相似，而且真核細胞的拓撲異構酶II的氨基酸序列有與DNA促旋酶同源的串聯(lián)區(qū)域；到目前為止人們已經(jīng)合成了數(shù)萬個喹諾酮類化合物，對其結構修飾、毒性以及構效關系有一定的了解，這成為研究喹諾酮類抗腫瘤藥物的基礎。近幾年不斷有具有抗腫瘤作用的新型喹諾酮類化合物的報道，其中7-氨基取代的二環(huán)喹諾酮、三環(huán)喹諾酮以及四環(huán)喹諾酮類衍生物均具有一定的抗腫瘤活性，3-羧基也不是活性所必需的。StrumbergDa/.I.y4w/7'ra/cro&^gentaC7jewo//ze/-,2002,46:2735.BrombergKD5/0cAe附/5f/7,2003,42:3393.尤啟冬等CN03132296.4，2004.02.11.但未見5-或6-氨基取代的喹諾酮類化合物的報道。
發(fā)明內容本發(fā)明要解決的技術問題是5-或6-氨基-3-位被苯并咪唑、苯并噁唑及苯并噻唑等芳雜環(huán)取代的喹諾酮類化合物的合成，同時提供其在制備抗腫瘤的藥物中的應用。本發(fā)明首先要合成5-或6-氨基取代的喹諾酮-3-甲酸，然后再與鄰苯二胺、鄰氨基苯酚、鄰氨基硫酚以及取代的鄰苯二胺、鄰氨基苯酚、鄰氨基硫酚反應制備一系列新的5-或6-氨基取代的喹諾酮3-位被苯并咪唑、苯并噁唑和苯并噻唑取代的化合物，這些化合物具有一定的抗腫瘤活性。本發(fā)明的技術方案為下述通式(I)化合物K8N(J)其中R4表示H、經(jīng)基以及取代的烴基。R3表示H、鹵素。Rs表示H、鹵素、硝基、氨基、含14個氮原子的四元七元雜環(huán)；以及取代的氨基、含14個氮原子的四元七元雜環(huán)。R^表示H、鹵素、硝基、氨基、含14個氮原子的四元七元雜環(huán)；以及取代的氨基、含14個氮原子的四元七元雜環(huán)。R7表示H、鹵素；R8表示H、鹵素、硝基、氨基、羥基；X表示O、S、NH。根據(jù)上述通式(I)化合物，其特征在于Ri、R3、R5、R6、R7或Rs代表的烴基指具有17個碳原子的直鏈或支鏈的烷(烴)基、或2~7個碳原子的直鏈或支鏈的烯基、或37個碳原子的環(huán)烷基。其中烷基可以是甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、新戊基、己基、庚基。優(yōu)選具有1~4個碳原子的直鏈或支鏈的垸基。其中烯基可以是乙烯基、丙烯基、烯丙基、丁烯基、異丁烯基、戊烯基、己烯基、庚烯基。優(yōu)選具有3~5個碳原子的直鏈或支鏈的烯基。其中環(huán)垸基可以是環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基。優(yōu)選具有36個碳原子的環(huán)垸基。根據(jù)上述通式(I)化合物，其特征在于R3、R5、R^、R7或Rs代表的鹵素為F、Cl、Br或I。優(yōu)選F和C1原子。根據(jù)前述通式(I)化合物，其特征在于Ri、Rs中取代的烴基，其取代基可以是鹵素、氨基、羥基、烷氧基、酯基和酰氨基。根據(jù)前述通式(I)化合物，其特征在于R5、R6代表的取代的含14個氮原子的四元七元雜環(huán)，取代基可以為鹵素、Cw的烷基、ds的酰基、Cw的烷氨基；優(yōu)選含有12個氮原子的未取代和取代的五元六元雜環(huán)。上文所指的氨基為NH2、R9NH、R40RuN。其中R9、R1()或Ru為上文所提及的烴基，R!oRu可以連接成環(huán)狀；優(yōu)選五元六元的環(huán)狀仲胺。前述任意一項的化合物在制備治療腫瘤的藥物中的應用。上述通式(I)化合物的制備方法，其特征在于該方法包括以下步驟a.制備這類化合物時首先需要合成下述通式(A)表示的取代的喹諾酮3-羧酸。我們先要制得各種取代的苯胺，然后與EMME進行縮合反應，縮合物可以不經(jīng)分離，直接加入二苯醚中進行環(huán)合反應，得到純度較高的環(huán)合物。然后對Nl-進行烴化反應后，水解可得到取代的喹諾酮3-羧酸。R5oR8R通式(A)b.上述通式(A)表示的取代的喹諾酮-3-甲酸與鄰苯二胺、鄰氨基苯酚、鄰氨基硫酚、取代的鄰苯二胺、鄰氨基苯酚或鄰氨基硫酚在多聚磷酸中縮合，得粗品。上述反應式中R,表示H、烴基以及取代的烴基。R3表示H、卣素。R5表示H、離素、硝基、氨基、含14個氮原子的四元七元雜環(huán)；以及取代的氨基、含14個氮原子的四元七元雜環(huán)。Re表示H、鹵素、硝基、氨基、含1~4個氮原子的四元七元雜環(huán)；以及取代的氨基、含14個氮原子的四元七元雜環(huán)。R7表示H、鹵素;Rs表示H、鹵素、硝基、氨基、羥基；X表示O、S、NH。c.將縮合反應所得產(chǎn)物經(jīng)柱層析或其他方法純化，得目標化合物。本發(fā)明涉及的通式(I)5-或6-氨基-3-芳雜環(huán)取代的喹諾酮類化合物的制備方法可由合成示意圖表示a.我們用各種氨基取代的苯胺為起始原料，與EMME進行縮合反應后，加入二苯醚中進行環(huán)合反應，可得到純度較高的環(huán)合物。然后對Nl-進行烴化反應，再水解可得到5-或6-氨基取代的喹諾酮3-羧酸。b.b.各種取代的喹諾酮-3-甲酸與鄰苯二胺、鄰氨基苯酚、鄰氨基硫酚、取代的鄰苯二胺、鄰氨基苯酚或鄰氨基硫酚在多聚磷酸中縮合，可得粗品(見合成示意圖)。c.將縮合反應所得產(chǎn)物經(jīng)柱層析(柱層析條件為青島海洋化工廠生產(chǎn)柱層析用硅膠，160~200目和200300目；展開劑乙酸乙酯和甲醇的混合液或乙酸乙酯和石油醚中加1%三乙胺)或其他方法純化，得目標化合物。合成示意圖上述反應式中R,表示H、烴基以及取代了的烴基。R3表示H、鹵素。Rs表示H、鹵素、硝基、氨基、含14個氮原子的四元七元雜環(huán)；以及取代了的氨基、含14個氮原子的四元七元雜環(huán)。R6表示H、鹵素、硝基、氨基、含14個氮原子的四元七元雜環(huán)；以及取代了的氨基、含14個氮原子的四元七元雜環(huán)。R7表示H、鹵素；R8表示H、鹵素、硝基、氨基、羥基；X表示O、S、NH。目前，抗腫瘤化合物的篩選按常規(guī)是以化合物的細胞毒活性來體現(xiàn)的。實驗數(shù)據(jù)表明本發(fā)明化合物對人口腔表皮樣癌細胞(KB)、人卵巢癌細胞2780系(A2780)、人肝癌細胞7402系(Bel7402)和大腸腺癌(HT-29)有一定的細胞毒作用。下面的實施例可使本專業(yè)技術人員更全面地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。具體實施例方式下述實施例中所用試劑均為市售。熔點用MEL-TEMPII熔點儀測定，溫度計未校正。元素分析用ElementarVarioELIII型元素分析儀測定；紅外光譜用NicoletImpact410型紅外光譜儀測定(KBr壓片)；！H-NMR用ACF-300.BRUKER核磁共振儀測定，TMS為內標；質譜用MarinerMassSpectrum禾QMAT-212型質譜儀測定；元素分析是用EIementaVarioELIII測定；柱層析所用硅膠為青島海洋化工廠生產(chǎn)(160~200目和200~300目)；薄層層析板采用青島海洋化工廠的硅膠GF254;薄層層析高效板為煙臺芝罘實驗化工廠生產(chǎn)的HSF-254型；紫外燈顯色。實施例1對嗎啉基硝基苯對氯硝基苯(16g,0.102mo1)、嗎啉(10g,0.115mo1)在吡啶(100ml)回流6h，冷卻，濾去不溶物，濾液減壓回收80%吡啶，倒入大量石油醚中，析出亮黃色固體，過濾，濾餅用石油醚洗滌至沒有吡啶的臭味。干燥，得產(chǎn)品17.5g，收率84.1%。EIMS(M+):208。mpl50-152。C。實施例2對嗎啉基苯胺上步產(chǎn)品(17g,0.082mo1)，水(200ml)加入到三頸瓶中，攪拌下滴加鹽酸至pH2，分批加入活化過的鐵粉(25g,0.45mo)，劇烈攪拌，于5CTC反應2h。濾去鐵泥等不溶物，濾液用氫氧化鈉溶液調至pH9，有固體生成；再次過濾。濾餅用乙酸乙酯提取多次，濾液用乙酸乙酯提取，合并乙酸乙酯提取液，無水硫酸鈉干燥，減壓除去乙酸乙酯，得淺灰色固體10g，收率68.2%。EIMS(M+):178。mpl33-135。C。實施例36-嗎啉基-4-氧代-1,4-二氫-3-喹啉羧酸乙酯對嗎啉基苯胺(10g,0.056mol)，乙氧甲叉丙二酸二乙酯(EMME)(12.5g,0.058mol)。加入到250ml三頸瓶中，快速攪拌下加熱到120~130°C，反應2h。蒸出反應生成的乙醇。再加入二苯醚70ml，加熱至回流，反應lh。冷卻至50'C以下，倒入大量的石油醚中，析出淺灰色固體，過濾，石油醚洗，干燥，得產(chǎn)品10.8g，收率63.9%。實施例41-乙基-6-嗎啉基-4-氧代-l,4-二氫-喹啉-3-羧酸乙酯上步產(chǎn)品(10.0g,0.033mol)、五水碳酸鉀(10g,0.073mol)、DMF(125ml)加入到四頸瓶中，攪拌加熱至70。C，在7080。C下，滴加溴乙烷(10ml，0.14mol)D后升溫至100110°C，保溫68h，反應完成后，減壓回收80X的DMF，冷卻至5(TC左右，加入冷水(200ml)，析出固體。過濾，水洗，得淺棕色固體。不需提純，可直接進行下一步反應。實施例5l-乙基-6-嗎啉基-4-氧代-l，4-二氫-3-喹啉羧酸上步產(chǎn)品和7%的氫氧化鈉溶液(50ml，0.088mol)加入到250ml圓底燒瓶中，加熱至回流，保溫30min，濾去不溶物，濾液冷至室溫，用濃鹽酸調至pH6，析出棕色固體，冷卻至室溫，過濾，水洗。得棕色粉末狀固體3.4g，兩步收率為34.1%。EIMS(M+):302。實施例6l-乙基-3-(2-苯并咪唑基)-6-嗎啉基-4-(lH)-喹諾酮(1)將l-乙基-6-嗎啉基-4-氧代-l,4-二氫-3-喹啉羧酸U.5g,5mmo1),鄰苯二胺(0.54g,5mmo1)和PPA(20ml)，加入50ml三頸瓶中，氮氣保護下升溫至13014(TC保溫到反應液呈均相，再升溫到18(TC反應4小時后，冷卻到IO(TC左右，將反應液在劇烈攪拌下緩慢傾入約100克碎冰中，用氫氧化鈉中和至pH7，析出大量類白色固體，抽濾，干燥，柱層析，得類白色粉末0.41g,收率21.9%，mp303305。C。IR(cm-1):3473,3219,2977,2821,2854,1616,1566,1530,1499,1449,1398,1318,1272,1225,1122,952,809,744;EIMS(M+):374;'HNMR(S,ppm,DMS0-d6):L44(t,3H，-CH3),3.26(m,4H,2*CH2-N)，3.81(m,4H，2*CH2-0)，4.56(q,2H,-CH2),7.39(m,2H,5'、6'-H),7.56—7.67(m,3H,4'、7、8-H),7.77(d,1H,5-H),7.84(d,1H,7'-H),9.15(s,1H,2-H),12.69(s,1H,N-H)。Formula:C22H22N402,MW374.41。Anal(C%,H%,N%)Calc:70.57,5.92，14.96;Found:70.60,5.93,14.93。實施例7l-乙基-3-(2-苯并噁唑基)-6-嗎啉基-4-(lH)-喹諾酮(2)其制備方法同實施例6。1-乙基-6-嗎啉基-4-氧代-l,4-二氫-3-喹啉羧酸(L2g，4mmo1),鄰氨基酚(0.43g,4mmol)和PPA(20ml)，反應溫度為185190°C。柱層析得淺黃色固體0.44g,收率23.5%,mp285287。C。IR(cm"):3457，3420，2958，2853，1608，1586,1500,1446,1378，1229,1120,1039,898,801,764;ESIMS(M+1):376;'HNMR(S,ppm,DMSO-d6):1.40(t,3H,-CH3),3.22(m，4H,2*CH2-N),3.79(m,4H，2*CH2-0)，4.47(q，2H，-CH2),7.36(m，2H，5'、6'-H)，7.56(d，m,5-H),7.70(m，3H,4'、7、8-H),7.78(d，1H，7'-H),8.89(s,1H,2-H)。Formula:C22H21N303，MW375.42。Anal(C%,H%,N%)Calc:70.38，5.64,11.19;Found:70.66，5.93,11.43。實施例8l-乙基-3-(2-苯并噻唑基)-6-嗎啉基4-(lH)-喹諾酮(3)其制備方法同實施例6。l-乙基-6-嗎啉基-4-氧代-l,4-二氫-3-喹啉羧酸(910mg,3mmo1),鄰氨基硫酚(380mg,3mmol)和PPA(20ml)，反應溫度為185190°C。柱層析得黃色結晶0.34g,收率29.0%,mp280282。C。IR(cm-1):3424,3054,2957，2854，1609,1586,1500,1445,1379,1351,1280，1229,1120,1095,898,801,764;EIMS(M+):391;)HNMR(S，ppm，DMSO-d6):1.45(t,3H，-CH3),3.27(m,4H,2*CH2-N),3.81(m,4H,2*CH2-0),4.60(q，2H,-CH2),7.36(m,1H)、7.49(m,1H),(5'、6'-H),7.75(d,1H,5鄰,7.63(dd,1H,7-H),7.87(d,1H，8-H),7.95(d,1H)、譜(d,1H,)(4'、7'-H),9.22(s,1H,2陽H)。Formula:C22H21N302S,MW391.49。Anal(C%,H%，N%)Calc:67.50，5.41,10.73;Found:67.47,5.375,10.52。實施例9對四氫吡咯烷基硝基苯制備方法同實施例1。對氯硝基苯(16g,0.102mol)、四氫吡咯烷(9g,0.127mol)，得產(chǎn)品14.5g，收率75.5%。EIMS(M+):192。mpl66168。C。實施例10對四氫吡咯烷基苯胺制備方法實施例2。上步產(chǎn)品(14g,0.073md)，鐵粉(20g,0.36mol)，得淺棕色油狀物7.5g，收率63.4%。EIMS(M+):162。實施例116-四氫吡咯烷基-4-氧代-l,4-二氫-3-喹啉羧酸乙酯制備方法同實施例3。對四氫吡咯院基苯胺(7g,0.043mol)，EMME(9.5g,0.054mol)。得產(chǎn)品7.5g，收率61.0%。EIMS(M+):286。實施例121-乙基-6-四氫吡咯垸基-4-氧代-l，4-二氫-喹啉-3-羧酸乙酯其制備方法同實施例4。上步產(chǎn)品(7.5g,0.026mol)、五水碳酸鉀(9g,0.065mol)、DMF(125ml)、溴乙烷(7ml,0.097mo1)。得淺棕色固體。不需提純，可直接進行下一步反應。實施例13l-乙基-6-四氫吡咯烷基-4-氧代-I，4-二氫-3-喹啉羧酸制備方法同實施例5。上步產(chǎn)品和7^的氫氧化鈉溶液(30ml，0.053mol)。得棕色粉末狀固體3.2g，兩步收率為42.7%。EIMS(M+):286。實施例14l畫乙基-3-(2-苯并咪唑基)-6-四氫吡咯垸基-4-(lH)-喹諾酮(4)其制備方法同實施例6。l-乙基-6-四氫吡咯烷基-4-氧代-l,4-二氫-3-喹啉羧酸(1.4g,4.9mmo1),鄰苯二胺(0.54g，5mol)和PPA(20ml)，反應溫度為180°C。柱層析得類白色結晶0.34g，收率19.4%,mp272275。IR(cm-'):3477,3415,1623,1603，1580,1494,1449,1368,1311,1272,1214,1152,806,764,726;EIMS(M+):358;!HNMR(S，ppm，DMSO-d6):1,47(t,3H,-CH3)，2.50(m，4H,2*CH2-)，3.30(m,4H,2*CH2-N),4.62(q，2H，-CH2)，7.39(m，1H)、7.51(m,1H,5'、6'-H),7.88(dd,1H,7-H),7.96(d，1H)，8.11(d，1H)(4'、7'-H)，8.01(d，1H，8-H)，8.33(d，1H,5鄰,9.33(s,1H，2-H)。Formula:C22H22N40,MW358.44。Anal(C%,H%,N%)Calc:73.72,6.19,15.63;Found:73.46,6.33,15.60。實施例15l-乙基-3-(2-苯并噁唑基)-6-四氫吡咯烷基-4-(lH)-喹諾酮(5)其制備方法同實施例6。l-乙基-6-四氫吡咯烷基-4-氧代-l，4-二氫-3-喹啉羧酸(0.86g,3mmo1),鄰氨基酚(0.33g,3mol)和PPA(20ml)，反應溫度為1851卯。C。柱層析得土色固體0.28g,收率26.0%,mp293296。C。IR(cm"):3385,2963,2837,1608,1561,1475,1374，1234,1186,1024,820,760;EIMS(M+):359;!麗MR(5,ppm,DMSO-d6):1.41(t,3H,-CH3),2.01(m,4H2*CH2-)，3359(m，4H,2*CH2-N),4.47(q,2H,-CH2),7.14(d,1H,8-H),7.29-7.37(m,3H,5、5'、6'-H),7.70—7.76(m,3H,7、4'、7'隱H),8.84(s,1H,2-H)。Formula:C22H21N302,MW359.42。Anal(C%，H%,N%)Calc:73.52,5.89,11.69;Found:73.57,5.715,11.57。實施例16l-乙基-3-(2-苯并噻唑基)-6-四氫吡咯烷基-4-(lH)-喹諾酮(6)其制備方法同實施例6。l-乙基-6-四氫吡咯烷基-4-氧代-l,4-二氫-3-喹啉羧酸(0.86g,3mmo1),鄰氨基硫酚(0.38g,3mmol)和PPA(20ml)，反應溫度為18519CTC。柱層析得黃色結晶0.32g,收率28.4%,mp260。C。IR(cm"):3459,3432,3061,2979,1623,1602,1580,1542,1493,1445,1368，1310，1271，1214,1086,806,763;EIMS(M+):375;i麗MR(S,ppm,DMSO-d6):1,46(t,3H,-CH3),2.03(m,4H,2*CH2-)，3.38(m,4H,2*CH2-N),4.58(q,2H，-CH2),7,18(d,1H,8-H),7.36(m,2H,5、5'-H),7.48(m,1H,6'-H),7.81(d,1H,7-H),7.93(d,1H)、8.08(d,1H)(4'、7'陽H),9.15(s,1H,2-H)。Formula:C22H21N3OS,MW375.49。Anal(C%,H%,N%)Calc:70.37,5.64,11.19;Found:70.30,5.38，11.37。實施例173-氯-4-嗎啉基硝基苯制備方法同實施例1。4-氟-3-氯硝基苯(18g,0.103mol)、嗎啉(llg,0.126mol)，得產(chǎn)品19.5g，收率78.2%。EIMS(M+):242。實施例183-氯-4-嗎啉基苯胺制備方法同實施例2。上步產(chǎn)品(19g,0.079mol)，鐵粉(25g,0.45mol)，得淺棕紅色固體10.8g，收率64.5%。EIMS(M+):212。mpl01-104。C。實施例197-氯-4-氧代-l,4-二氫-6-嗎啉基-3-喹啉羧酸乙酯制備方法同實施例3。3-氯-4-嗎啉基苯胺(10g,0.047mol)，EMME(10.5g，0.049mol)。得產(chǎn)品10.2g，收率64.4%。EIMS(M+):336。實施例20l-乙基-7-氯-4-氧代-I,4-二氫-6-嗎啉基-3-喹啉羧酸乙酯其制備方法同實施例4。上步產(chǎn)品(10g,0.030mol)、五水碳酸鉀(10g，0.072mol)、DMF(150ml)、溴乙烷(8ml，O.llmol)。得淺棕色固體。不需提純，可直接進行下一步反應。實施例21l-乙基-7-氯-4-氧代-l，4-二氫-6-嗎啉基-3-喹啉羧酸制備方法同實施例5。上步產(chǎn)品和7X的氫氧化鈉溶液(50ml，0.088mol)。得棕色粉末狀固體4,2g，兩步收率為41.5%。EIMS(M'):336。實施例22l-乙基-3-(2-苯并咪唑基)-7-氯-6-嗎啉基-4-(m)-喹諾酮(7)其制備方法同實施例6。l-乙基-7-氯-4-氧代-l，4-二氫-6-嗎啉基-3-喹啉羧酸(1.5g，4.5mmol):鄰苯二胺(0.49g,4.5mol)和PPA(20ml)，反應溫度為18(TC。柱層析得類白色固體0.35g,收率19.1%,mp287290。C。IR(cm力3474,3411,3312,2960,2922,2852，1627，1607，1572,1487,1451,1379,1312,1260，1221，1112,1090，1020，896,798,725;EIMS(M+):408;'HNMR(S，ppm,DMS0-d6):1.42(t，3H,-CH3),3.11(m，4H，2*CH2-N),3.82(m，4H,2*CH2-0)，4.59(q,2H,-CH2),7.16(m,2H,5'、6'-H),7.77(m,2H,4'、7'-H),8.05(s,1H,8-H)、8.11(s,1H,5-H)，9.20(s,1H,2-H),12.67(b,1H,N-H)。Formula:C22H21ClN402，MW408.88。Anal(C%,H%,N%)Calc:64.62,5.18,13.70;Found:64.58，4.91,13.66。實施例23l-乙基-3-(2-苯并噁唑基)-7-氯-6-嗎啉基-4-(lH)-喹諾酮(8)其制備方法同實施例6。1,乙基-7-氯-4-氧代-1,4-二氫-6-嗎啉基-3-喹啉羧酸(1.2g,3.6mmol),鄰氨基酚(0.39g,3.6mmol)和PPA(20ml)，反應溫度為185190°C。柱層析得類白色固體0.40g,收率27.2%，mp>300°C。IR(cm-1):3433,3051，2939,2861，1639,1601,1596，1549,1484,1446,1244,1224,1112,1002，892,749;ESIMS(M+1):410;'HNMR(S，ppm,DMSO-d6):1.40(t，3H,-CH3),3.09(m,4H,2*CH2-N)，3.80(m,4H,2*CH2-0),4.50(q,2H,-CH2),7.38(m,2H,5'、6'-H),7.74(m,2H,4'、7'-H),7.97(s,1H,8-H)、8.05(s,1H,5-H)，8.97(s,1H,2-H)。Fo匿la:C22H20ClN3O3,MW409.87。Anal(C%,H%，N%)Calc:64.47，4.92,10.25;Found:64.77,4.72,10.37。實施例24l-乙基-3-(2-苯并噻唑基)-7-氯-6-嗎啉基-4-(lH)-喹諾酮(9)其制備方法同實施例6。l-乙基-7-氯-4-氧代-l,4-二氫-6-嗎啉基-3-喹啉羧酸(0.85g,2.5mmol):鄰氨基硫酚(0.31g,2.5mmol)和PPA(20ml)，反應溫度為185~190°C。柱層析得黃色結晶0.28g，收率26.4%,mp235。C。IR(cm"):3454,3380,3054，2921,2851,1603,1567,1497,1444,1374，1307,1214,1110，1063,987,900,761,726;EIMS(M十)425;'HNMR(S,卯m,DMSO-d6):1.44(t,3H,-CH3),3.10(m,4H,2*CH2-N),3.82(m,4H,2*CH2-0),4.61(q,2H,-CH2),7.38(m,1H)、7.50(m:IH)，(5'、6'陽H),7.96(d,1H)、8.11(d,1H，)(4'、7'-H),8.03(s，1H,8-H)，8.12(s,1H，8-H),9,27(s,1H,2-H)。Formula:C22H2UC1N302S,MW425.93。Anal(C%，H%,N%)Calc:62.04，4.73,9.87;Found:61.85,4.66,10.06。實施例25l-乙基-3-(2-苯并噻唑基)-7-氯-6-氨基-4-(lH)-喹諾酮(10)實施例24中，柱層析后除了得到化合物(9)以外，還得到另一極性稍小的化合物EIMS(M^:355。初步推斷為哌啶環(huán)的分解產(chǎn)物l-乙基-3-(2-苯并噻唑基)-7-氯-6-氨基-4-(lH)-喹諾酮。實施例263-氯-4-哌啶基硝基苯制備方法同實施例l。4-氟-3-氯硝基苯(18g,0.103mol)、哌啶(llg,0.129mol)，得黃色結晶19.1g，收率77.3%。EIMS(M+):240。mp3841。C。實施例273-氯-4-哌啶基苯胺制備方法同實施例2。上步產(chǎn)品(19g,0.079mol)，鐵粉(25g,0.45mol)，得淺棕色油狀物10.4g，收率62.7%。EIMS(M+):210。實施例287-氯-4-氧代-1,4-二氫-6-哌啶基-3-喹啉羧酸乙酯制備方法同實施例3。3-氯-4-哌啶基苯胺(10g,0.048mo1)，EMME(llg,0.05mol)。得產(chǎn)品11.6g，收率72.4%。EIMS(M+)334。實施例29l-乙基-7-氯-4-氧代-l,4-二氫-6-哌啶基-3-喹啉羧酸乙酯其制備方法同實施例4。上步產(chǎn)品(llg,0.033mol)，五水碳酸鉀(10g,0.072mol)，DMF(150ml)，溴乙烷(8ml，0.1lmol)。得淺棕色固體。不需提純，可直接進行下一歩反應。實施例30l-乙基-7-氯-4-氧代-l,4-二氫-6-哌啶基-3-喹啉羧酸制備方法同實施例5。上步產(chǎn)品和7X的氫氧化鈉溶液(50ml，0.088mo1)。得棕色粉末狀固體4.5g，兩步收率為40.8%。EIMS(M—):334。mp266270。C。實施例311-乙基-3-(2-苯并咪唑基)-7-氯-6-哌啶基-4-(lH)-喹諾酮(11)其制備方法同實施例6。l-乙基-7-氯-4-氧代-l,4-二氫-6-哌啶基-3-喹啉羧酸(1.5g，4.5mmo1)，鄰苯二胺(0.49g，4.5mol)和PPA(20ml)，反應溫度為180°C。柱層析得類白色固體0.38g，收率20.8%,mp277。C。IR(cm"):3411，3312，3060,2968,2920,2854,1627，1572,1488，1451,1379,1313,1250,1222,1114,1086，1021,897,793,728;EIMS(M+):406;1HNMR(S,ppm,DMSO-d6):1.42(t,3H，-CH3),1,61(m,2H，CH2-),1.73(m,4H,2*CH2-)，3.04(m,4H,2*CH2-N),4.56(q，2H，-CH2),7.15(m,2H，5'、6'-H)，7.58(m,1H)、7.66(m,1H)(4'、7'-H)，8.04(s，1H,8-H)，8.06(s，1H，5-H)，9.18(s,1H,2-H)，12.63(s，1H，N-H)。Formula:C23H23C1N40,MW406.91。Anal(C%，H%,N%)Calc:67.89,5.70,13.77;Found:68.10,5.63,13.69。實施例32l-乙基-3-(2-苯并噁唑基)-7-氯-6-哌啶基-4-(lH)-喹諾酮(12)其制備方法同實施例6。1-乙基-7-氯-4-氧代-1,4-二氫-6-哌啶基-3-喹啉羧酸(1.2g，3.6mmol),鄰氨基酚(0.39g,3.6mmol)和PPA(20ml)，反應溫度為185190°C。柱層析得類白色固體0.35g,收率23.9%,mp244。C。IR(cm—3474,3413，2932,2850,1630,1583,1488,1450,1386,1239,1209,1109,1088,890，794，743;EIMS(M+):407;'HNMR(5,ppm,DMSO-d6):L40(t，3H,-CH3),1.60(m,2H,CH2-)，1.72(tn，4H，2*CH2-)，3.02(m,4H,2*CH2-N),4.49(q，2H，-CH2),7.39(m，2H,5'、6'-H),7.73(m，2H，4'、7'-H),7.96(s，1H)、8.01(s，IH)(5、8-H)，8.95(s，1H，2-H)。Formula:C23H22C1N302,MW407.89。Anal(C%,H%,N%)Calc:67.73,5.44,10.30;Found:67.62,5.41,10.40。實施例33l-乙基-3-(2-苯并噻唑基)-7-氯-6-哌啶基-4(lH)-喹諾酮(13)其制備方法同實施例1。卜乙基-7-氯-4-氧代-l,4-二氫-6-哌啶基-3-喹啉羧酸(0.85g,2.5mmol)，鄰氨基硫酚(0.31g,2.5mmol)和PPA(20ml)，反應溫度為185190°C。柱層析得黃色結晶0.27g,收率25.5%,mp284。C。IR(cm"):3418,3226，2935,2676,2599，1595,1488,1445,1392,1300,1262,1214,1171，1084,1034,813,756;EIMS(M+):423;i;HNMR(S,ppm,DMSO-d6):1.40(t,3H,-CH3),1.61(m,2H,CH2-)，1.73(m,4H,2*CH2-)，3.01(m,4H,2*CH2-N),3.09(q,2H，-CH2),7.38(m，1H)、7.48(m,IH)(5'、6'-H),7.85(s,1H,8-H),7.92(s,1H,5-H),7.96(m，1H)、8.11(m,1H)(4'、7'-H),9.17(s,1H,2-H)。Formula:C23H22C1N30S,MW423,96。Anal(C%,腦,闊Calc:65.16,5.23,9.91;Found:65.13,5.49,10.03。實施例34l-乙基-3-(2-苯并噻唑基)-7-氯-6-氨基-4-(lH)-喹諾酮(14)上述實施例中，柱層析同時得到另一極性稍小的化合物。EIMS(M+):355;1HNMR(S,ppm,DMSO-d6):1.43(t，3H，-CH3),4.54(q，2H,-CH2),1.62(b,NH),7.33(m,1H)、7.48(m，1H)(5'、6'-H),7.75(s,IH,8-H),7.93(s,IH,5-H),7.93(m,1H)、8.08(m,1H)(4'、7'-H),9.14(s,IH,2-H)。Formula:C18HI4C1N30S,MW355.84。Anal(C%,H%,N%)Cac:60.76,3.97，11.81;Found:60.62，4.14，11.54。推斷為哌啶環(huán)的分解產(chǎn)物。實施例354-哌啶基硝基苯制備方法同實施例l。對氯硝基苯(16g,0.102mo1)、哌啶(llg，0.129mo1)，得產(chǎn)品17.3g，收率82.3%。EIMS(M+):206。mpl02-105。C。實施例364-哌啶基苯胺制備方法同實施例2。上步產(chǎn)品(17g,0.083moi)，鐵粉(26g,0.46mol)，得淺棕紅色固體9.4g，收率64.3%。EIMS(M+):176。實施例374-氧代-l,4-二氫-6-哌啶基-3-喹啉羧酸乙酯制備方法同實施例3。4-哌啶基苯胺(9g，(X051mo1)，EMME(12g，0.056mol)。得產(chǎn)品10.7g，收率69.9%。EIMS(M+):300。實施例38l-乙基-4-氧代-l，4-二氫-6-哌啶基-3-喹啉羧酸乙酯其制備方法同實施例4。上步產(chǎn)品(10g,0.033mol)、五水碳酸鉀(10g，0.072mol)、DMF(150ml)、溴乙烷(8ml，O.llmol)。得淺棕色固體。不需提純，可直接進行下一步反應。實施例391-乙基-4-氧代-1,4-二氫-6-哌啶基-3-喹啉羧酸制備方法同實施例5。上步產(chǎn)品和7X的氫氧化鈉溶液(50ml，0.088mol)。得棕色粉末狀固體4.3g，兩步收率為43.4%。EIMS(M+):300。實施例40l-乙基-3-(2-苯并咪唑基)-6-哌啶基-4-(lH)-喹諾酮(15)其制備方法同實施例6。l-乙基-7-氯-4-氧代-l,4-二氫-6-哌啶基-3-喹啉羧酸(1.5g，5mmo1),鄰苯二胺(0.55g,5.1mol)和PPA(20ml)，反應溫度為18(TC。柱層析得淺棕色固體0.31g,收率16.7%,mp255258。C。IR;(cm1》3423,3383,3223，3190,2969,2934,2856,1618,1565,1498，1452，1390,1319,1274,1225,1123,1091,1023,947,802,739;EIMS(M+):372;!HNMR(5,ppm:DMSO-d6):1.44(t,3H,-CH3),1.61(m,2H,CH2-)，1.68(m,4H,2*CH2-)，3.31(m,4H,2*CH2-N),4.54(q,2H,-CH2),7.14(m,2H,5'、6'-H),7.58—7.60(m，3H，8、4'、7'-H),7.79(d，1H，5-H)，7.80(d,1H,7-H)，9.12(s,1H,2陽H),12.71(s,1H，N-H)。Formula:C23H24N40,MW372.46。Anal(C%,H0/o,N%)Calc:74.17,6.49，15.04;Found:74.33,6.505，14.96。實施例41l-乙基—3-(2-苯并噁唑基)-6-哌啶基-4-(lH)-喹諾酮(16)其制備方法同實施例6。l-乙基-7-氯-4-氧代-l，4-二氫-6-哌啶基-3-喹啉羧酸(1.2g,4mmo1),鄰氨基酚(0.44g,4mmol)和PPA(30ml)，反應溫度為185190°C。柱層析得類白色固體0.31g,收率20.8%，mp226228。C。IR(cm"):3434，3049,2928，2850，1640，1608,1537,1497，1450，1386,1243,1218,1125,1066,920,749;EIMS(M+):373;'HNMR(S,卯m,DMSO陽d6):1.42(t,3H,-CH3)，1.61(m,2H，CH2-)，1.72(m，4H,2*CH2-)，3.34(m,4H,2*CH2-N),4.49(q,2H,-CH2),7.38(m2H，5'、6'-H),7.65(m，1H,7畫H),7.73(m,2H,4'、7'-H),7.81(s,2H,5、8-H),8.92(s,1H,2-H)。Formula:C23H23N302,MW373.45。Anal(C%,H%,N%)Calc:73.97，6.21,11.25;Found:73.89,6.45,11.11。實施例42l-乙基-3-(2-苯并噻唑基)-6-哌啶基-4-(m)-喹諾酮(n)其制備方法同實施例6。l-乙基-4-氧代-l，4-二氫-6-哌啶基-3-喹啉羧酸(0.75g,2.5mmol)，鄰氨基硫酚(0.31g，2.5mmol)和PPA(20ml)，反應溫度為185190°C。柱層析得黃色結晶0.28g，收率28.8%，mp230236。C。IR(cm"):3459，3422，3052，2926，2850，1608，1585，1499,1452，1366，1341,1239,1216,1122，1088,1037,800,762;EIMS(M+):389;iHNMR(S,ppm,DMSO-d6):1.47(t,3H,-CH3),1.63(m,2H,CH2-)，L70(m,4H,2*CH2-)，3,34(m,4H,2*CH2-N),4.59(q,2H,-CH2),7.37(m，1H)、7.50(m,1H)(5'、6'-H),7.62(m,1H)、7.78(m，1H)(4'、7'-H),7.84(d,1H,7-H),7.95(d,1H,8-H),8.10(d,1H,5陽H)，9.21(s,1H,2-H)。Fo醒la:C23H23N3OS,MW389.51。Anal(C%,H%,N%)Calc:70.92,5.95,10.79;Found:70.74,5.98,10.53。實施例433-氯-4-四氫吡咯垸基硝基苯制備方法同對實施例l。4-氟-3-氯硝基苯(18g，0.103mo1)、四氫吡咯垸(9g,0.127mol)，得產(chǎn)品18.2g，收率78.2%。EIMS(M+):226。實施例423-氯-4-四氫吡咯烷基苯胺制備方法同實施例2。上步產(chǎn)品(18g,0.079mol),鐵粉(25g,0.45mol)，得淺棕紅色固體9.5g，收率61.1%。EIMS(M+):196。實施例437-氣_4-氧代-1,4-二氫-6-四氫吡咯烷基-3-喹啉羧酸乙酯制備方法同實施例3。3-氯-4-四氫吡咯垸基苯胺(9g,0.046mol)，EMME(10.5g,0.049mol)。得產(chǎn)品10.7g，收率72.5%。EIMS(M+):320。實施例44l-乙基-7-氯-4-氧代-l,4-二氫-6-四氫吡咯垸基-3-喹啉羧酸乙酯其制備方法同實施例4。上步產(chǎn)品(10g,O.(Blmol)、五水碳酸鉀(9g,0.065mol)、DMF(150ml)、溴乙烷(8ml，O.llmol)。得淺棕色固體。不需提純，可直接進行下一步反應。實施例45l-乙基-7-氯-4-氧代-l,4-二氫-6-四氫吡咯烷基-3-喹啉羧酸制備方法同實施例5。上步產(chǎn)品和7X的氫氧化鈉溶液(40ml，0.07mol)。得棕色粉末狀固體3.9g，兩步收率為39.2%。EIMS(M+):320。實施例46l-乙基-3-(2-苯并咪唑基)-7-氯-6-四氫吡咯烷基-4-(m)-喹諾酮(18)其制備方法同實施例6。l-乙基-7-氯-4-氧代-l,4-二氫-6-四氫吡咯烷基-3-喹啉羧酸(1.6g,5mmo1)，鄰苯二胺(0.54g,5mol)和PPA(30ml)，反應溫度為180°C。柱層析得淺褐色固體0.28g,收率14.3%,mp275278。C。IR(cm"):3424，3352,3070,2963,2919,2855，1704,1623,1599,1482,1450，1378,1251,1224,1112,1086,1025,980,883，820,759;EIMS(M+):392;HNMR(S,卯m,DMS0-d6):1.40(t,3H,-CH3),1.94(m,4H,2*CH2-)，3.41(m,4H,2*CH2-N),4.52(q,2H,-CH2)，7.11(m,2H,5'、6'-H),7.55(m,1H)、7.62(m，1H)(4'、7'-H),7.79(s,1H，8-H),7.96(s,1H,5-H)，9.10(s,1H,2-H),12.62(b,1H,N-H)。Formula:C22H21C1N40,MW392.88。Anal(C%,H%,N%)Calc:67.26,5.39,14.26;Found:67.18,5.38,14.51。實施例47l-乙基-3-(2-苯并噁唑基)-7-氯-6-四氫吡咯烷基-4-(lH)-喹諾酮(19)其制備方法同實施例6。l-乙基-7-氯-4-氧代-l，4-二氫-6-四氫吡咯烷基-3-喹啉羧酸(l.lg,3.4mmol)，鄰氨基酚(0.37g,3.4mmol)和PPA(30ml)，反應溫度為185190°C。柱層析得類白色固體0.32g,收率23.9%,mp24825rC。IR(cm"):3447,2966，2946,2850,1634,1602，1594,1489,1455,1388,1236,1110,1086,898,786,739;EIMS(M+):393;i麗MR(5,卯m,DMSO-d6):1.40(t,3H，-CH3)，1.95(m,4H,2*CH2-)，3.42(m,4H，2*CHrN),4.48(q,2H,-CH2)，7.37(m,2H,5'、6'-H),7.73(m,3H,8、4'、7'-H),7.93(s,1H,5-H),8.卯(s,1H,2-H)。Formula:C22H20ClN3O2,MW393.87。Anal(C%,H%，N%)Calc:67.09,5.12，10.67;Found:67,06,5.35,10.47。實施例47l-乙基-3-(2-苯并噻唑基)-7-氯-6-四氫吡咯烷基-4-(lH)-喹諾酮(20)其制備方法同實施例6。l-乙基-7-氯-4-氧代-l,4-二氫-6-四氫吡咯烷基-3-喹啉羧酸(0.96g,3mmo1)，鄰氨基硫酚(0.37g,3mmol)和PPA(20ml)，反應溫度為185190°C。柱層析得黃色結晶0.27g,收率22.0%,mp232234。C。IR(cm"):3478,3416,3060,2980,1602,1577，1497,1454,1372,1349,1219,1130，1086,1000,911,756;EIMS(M+):409;1HNMR(S,ppm,DMSO誦d6):1.44(t,3H,-CH3),1.97(m,4H,2*CH2-)，3.45(m,4H,2*CH2-N),4.59(q，2H,-CH2),7.36(m,1H)、7.50(m,IH)(5'、6'-H),7.78(s,1H，8墨H),8.00(s，1H，5-H),7.94(m,1H)、8.09(m，1H)(4'、7'-H),9.21(s,1H,2-H)。Formula:C22H20C1N3OS,MW409.93。Anal(C%，H%,N%)Calc:64.46,4.92，10.25;Found:64.23,4.77,10.51。實施例48l-乙基-3-(2-(5-氯苯并咪唑)基)-7-氯-6-嗎啉基-4-(lH)-喹諾酮(21)其制備方法同實施例6。l-乙基-7-氯-4-氧代-l，4-二氫-6-嗎啉基-3-喹啉羧酸(1.0g，3mmo1),4-氯-l,2-苯二胺(0.43g,3mol)和PPA(20ml)，反應溫度為180°C。柱層析得淺綠色固體0.23g,收率17.3%,mp308310。C。IR(cm"):3415,3305,3259,2965,2845,2360，1636,1564,1521,1468,1445,1392,1317,1279,1251,1174,1087,902,798,744;EIMS(M+):442;'HNMR(5,ppm,DMSO-d6):1.42(t，3H,-CH3),3.10(m,4H,2*CH2-N)，3.82(m,4H,2*CH2-0),4.58(q,2H，-CH2)，7.18(d，1H,4'-H)，7.58(m，1H)、7.69(m,1H)(6'、7'-H),8.05(s,1H，8-H)，8.11(s,1H,5-H),9.19(s,1H,2-H),12.79(s,1H，N-H)。Formula:C22H20Cl2N4O2,MW443.33。Anal(C%,H%,N%)Calc:59.60,4.55，12.64;Found:59.69,4.77,12.65。實施例49l-乙基-3-(2-(5-氯苯并咪唑)基)-6-嗎啉基-4(lH)-喹諾酮(22)其制備方法同實施例6。l-乙基-6-嗎啉基-4-氧代-l,4-二氫-3-喹啉羧酸(0.91g,3mmo1),4-氯-l,2-苯二胺(0.43g，3mol)和PPA(20ml)，反應溫度為180°C。柱層析得淺灰綠色固體0.21g,收率17.2%,mp256260。C。IR(cm"):3461,3329,2957,2923,2854，1616，1557,1523,1495,1452，1380,1305,1260,1224,1117,1088,1020,922,801，745;EIMS(M+):408;iHNMR(5,卯m,DMSO-d6):1.43(t,3H,-CH3)，3.26(m,4H,2*CH2-N)，3.81(m,4H,2*CH2-0),4.57(q,2H,-CH2),187.00(m,1H,4'-H),7.16(m,1H)、7.39(m,1H),(6'、7'-H),7.63(m,1H,7-H),7.73(m,1H,8-H),7.85(d,1H,5-H)，9.13(s,1H,2-H),12.83(s,1H,N-H)。Formula:C22H21C1N402,MW408.88。Anal(C%,H%,N%)Calc:64.62,5.18,13.70;Found:64.38,5.14,13.54。實施例50l-乙基-3-(2-(5-氯苯并咪唑)基)-6-哌啶基-4-(lH)-喹諾酮(23)其制備方法同實施例6。l-乙基-7-氯-4-氧代-l,4-二氫-6-哌啶基-3-喹啉羧酸(0.9g,3mmo1)，4-氯-l,2-苯二胺(0.43g,3mol)和PPA(20ml)，反應溫度為180°C。柱層析得土黃色固體0.23g,收率18.9,mp275278。C。IR(cm-'):3431,3300,2925,2854,1617,1557,1495,1459,1381,1305,1278,1230,1126,1055,921,801,704;EIMS(M+):406;'HNMR(S,卯m,DMSO-d6):L44(t,3H,-CH3),1.61(m,2H,CH2-)，1.69(m,4H,2*CHr),329(m,4H,2*CH2-N),4.53(q,2H,-CH2),7.16(m,1H,6'-H),7.587,63(m,3H,8、4'、7'-H),7.78(m,2H，5、7-H),9.10(s,1H,2-H),12.88(b,1H,NH)。Formula:C23H23C1N40,MW406.91。Anal(C%,H%,N%)Calc:67.89,5.70,13.77;Found:67.69,5.76,13.54。實施例51l-乙基-3-(2-(5-氯苯并咪唑)基)-7-氯-6-四氫吡咯垸基-4-(lH)-喹諾酮(24)其制備方法同實施例6。l-乙基-7-氯-4-氧代-l,4-二氫-6-四氫吡咯垸基-3-喹啉羧酸(0.96g,3mmo1)，4-氯-l,2-苯二胺(0.43g,3mol)和PPA(30ml)，反應溫度為180°C。柱層析得淺黃褐色結晶0.23g,收率18.0%,mp245。C。IR(cm"):3426,3328,2922,2853,1619,1566,1520,1487,1458,1389,1304,1225,1110,1087,1054,920,855,792,749;EIMS(M+):426;!麗MR(5，ppm，DMSO-d6):1.42(t,3H,-CH3),1.97(m,4H,2*CH2-)，3.44(m,4H,2*CH2-N)，4.55(q,2H,-CH2),7.16(m,1H,6'-H),7.58(m，2H,4'、7'-H),7.79(s,1H,8陽H)，7.96(s,1H,5-H),9.12(s，1H,2-H),12.83(b,1H,NH)。Formula:C22H20Cl2N4O,MW427.33。Anal(C%，H%,N%)Calc:61.83，4.72,13.11;Found:61.76，4.656,13.06。實施例52l-乙基-3-(2-苯并噻唑基)-6-氯-5-(4-甲基-l-哌嗪基)-4-(lH)-喹諾酮(25)其制備方法同實施例6。l-乙基-6-氯-4-氧代-l,4-二氫-5-(4-甲基-l-哌嗪基)-3-喹啉羧酸(1.05g,3mmo1),鄰氨基硫酚(0.38g,3mmol)和PPA(30ml)，反應溫度為185190°C。柱層析得灰綠色固體0.25g,收率19.0%,mp265270°C。IR(cm"):3454,2934,1618，1574,1494,1436,1136,751;EIMS(M+):438;'麗MR(5,ppm,DMSO-d6):1,42(t,3H,-CH3),2.25(t,3H,-CH3),2.50(m,4H,2*CH2-)，3.30(m，4H,2*CH2-)，4.53(q,2H,-CH2),7.38(m，1H)、7.50(m,1H)，(5'、6'-H),7.57(d,1H,8-H),7.80(d,IH,7-H)，7.95(m，1H)、8.07(m,1H)(2H,4'、7'-H),9.17(s,1H,2-H)。Formula:C23H23C1N40S,MW438.97。Anal(C%,H%,N%)Calc:62.93,5,28，12.76;Found:62.93,5.21,12.76。實施例53實施例中目標化合物的細胞毒活性數(shù)據(jù)。本測定按常規(guī)采用溴化四氮唑藍(MTT)法，即用胰酶消化腫瘤細胞，以含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液配制細胞懸液，濃度為10000細胞/ml，于96孔培養(yǎng)板內每孔接種100|^1(含10001200個腫瘤細胞/L)。給藥組加入含有不同濃度化合物，每藥設45個劑量組，每組至少設3個平行孔。對照組加入與化合物等體積的溶劑。置5%(202溫箱中于37'C培養(yǎng)，4天后棄去培養(yǎng)液，每孔加入200pl0.2%MTT溶液(RPMI1640配制)。37'C保溫4小時，棄去上清，每孔加入DMSO150pl溶解甲簪顆粒，輕度振蕩后，用酶標儀，在參考波長450nm、檢測波長570nm條件下測定光密度值(OD)。以溶劑對照處理的腫瘤細胞為對照組，計算藥物對腫瘤細胞生長的抑制率。以藥物濃度對數(shù)值對抑制率作線性回歸，得直線方程，從中求出藥物對癌細胞的半數(shù)抑制濃度(IC50)。篩選項目包括體外抗人口腔表皮樣癌細胞(KB)、人卵巢癌細胞2780系(A2780)、人肝癌細胞7402系(Bel7402)和大腸腺癌細胞(HT-29)。試劑來源MTT:溴化四氮唑藍(ThiazolylBlueTetrazolumBromide),Sigma公司進口；RPMI1640培養(yǎng)基GIBCO公司產(chǎn)品；胰酶(Trypsin):GIBCO公司產(chǎn)品DMSO:二甲基亞砜，北京化工廠生產(chǎn)；小牛血清軍區(qū)獸醫(yī)防治中心表1化合物對KB、A2780、Bd7402、HT-29細胞的生長抑制活性(1(:50)<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>3391>2.56〉2.56>2.56>2.564358>2.79〉2.79〉2.79>2.795359>2.79>2.79>2.79>2.796375〉2.67>2.67>2.67>2.677409>2.44〉2.44>2.44>2.448410>2.44>2.44>2.44>2.449426>2.35>2.35>2.35>2.3511407>2.46>2.46>2,46>2.4612408>2.46>2.46>2.46>2.4613424>2.34>2.34>2.34>2.3415372>2.69>2.69>2.69>2.6916373〉2.69>2.69〉2.69>2.6917389>2.57>2.57>2.574.0118393>2.54>2.54>2.54>2.5419394>2.54>2.54>2.54>2.5420410>2.44>2.44>2.44>2.4421443>2.26>2.26>2.26>2.2622409>2.44>2.44>2.44>2.4423407〉2.46>2.46>2.46>2.4624427>2.34>2.341.19>2.34254390.0320.048>2.280.19TPT4210.572.142.351.16上述實驗數(shù)據(jù)表明本發(fā)明化合物對人口腔表皮樣癌細胞(KB)、人卵巢癌細胞2780系(A2780)、人肝癌細胞7402系(Bel7402)和大腸腺癌細胞(HT-29)有一定的細胞毒作用。其中，化合物24和25的細胞毒活性與陽性對照藥拓撲替康相當。因為按常規(guī)抗腫瘤化合物的篩選是以化合物的細胞毒活性來體現(xiàn)的，所以本發(fā)明化合物具有抗腫瘤活性，可以與藥用載體混合，制備抗腫瘤藥物。權利要求1.下述通式(I)化合物其中R1表示H、烴基以及取代的烴基；R3表示H、鹵素；R5表示H、鹵素、硝基、氨基、含1～4個氮原子的四元～七元雜環(huán)；以及取代的氨基、含1～4個氮原子的四元～七元雜環(huán)；R6表示H、鹵素、硝基、氨基、含1～4個氮原子的四元～七元雜環(huán)；以及取代的氨基、含1～4個氮原子的四元～七元雜環(huán)；R7表示H、鹵素；R8表示H、鹵素、硝基、氨基、羥基；X表示O、S、NH。2、根據(jù)權利要求1所述通式(I)化合物其特征在于R、R3、R5、R6、R7或Rs代表的烴基指具有17個碳原子的直鏈或支鏈的垸(烴)基、或27個碳原子的直鏈或支鏈的烯基、或37個碳原子的環(huán)垸基；其中垸基可以是甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、新戊基、己基、庚基；優(yōu)選具有1~4個碳原子的直鏈或支鏈的垸基；其中烯基可以是乙烯基、丙烯基、烯丙基、丁烯基、異丁烯基、戊烯基、己烯基、庚烯基；優(yōu)選具有35個碳原子的直鏈或支鏈的烯基；其中環(huán)烷基可以是環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基；優(yōu)選具有36個碳原子的環(huán)垸基。3、根據(jù)權利要求1所述通式(I)化合物，其特征在于R3、R5、R6、R7或Rg代表的鹵素為F、Cl、Br或I;優(yōu)選F和C1原子。4、根據(jù)權利要求1所述通式(I)化合物，其特征在于R卜Rg中取代的烴基，其取代基可以是鹵素、氨基、羥基、烷氧基、酯基和酰氨基。5、根據(jù)權利要求1所述通式(I)化合物根，其特征在于R5、R6代表的取代的含14個氮原子的四元七元雜環(huán)，取代基可以為鹵素、C^的烷基、Cw的?；?、C^的垸氨基；優(yōu)選含有1~2個氮原于的未取代和取代的五元六元雜環(huán)。6、根據(jù)權利要求1所述通式(I)化合物上文所指的氨基為NH2、R9NH、R!oRuN;其中Rg、R,o或Ru為上文所提及的烴基，RujRn可以連接成環(huán)狀；優(yōu)選五元六元的環(huán)狀仲胺。7、權利要求前述任意一項的化合物的制備方法以及在腫瘤治療中的應用。全文摘要本發(fā)明公開了新的具有抗腫瘤活性的通式(I)5-或6-氨基-3-芳雜環(huán)取代的喹諾酮衍生物，以及該類衍生物的制備方法，及其在藥物制備的應用。文檔編號C07D401/00GK101445500SQ200810242750公開日2009年6月3日申請日期2008年12月30日優(yōu)先權日2008年12月30日發(fā)明者尤啟冬,李志裕,華王申請人:中國藥科大學