專(zhuān)利名稱(chēng)：制備紫杉醇的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及制備紫杉醇的方法。
紫杉醇是一種具有廣譜抗腫瘤活性的、源自天然的分子，其具有以下結(jié)構(gòu)式 該化合物最初是從短葉紫杉(Taxus brevifolia)的樹(shù)皮和其它天然資源中獲取的，并可按照科技和專(zhuān)利文獻(xiàn)中所描述的眾多方法通過(guò)半合成方法制備。
美國(guó)專(zhuān)利US 4,924,011公開(kāi)了一種紫杉醇的半合成方法，其中，將10-脫乙酰基漿果赤霉素III的C-7羥基用三烷基甲硅烷基保護(hù)，隨后將C-10乙酰化。將得到的中間體與(2R，3S)-N-苯甲?；?2-O-(1-乙氧基乙基)-3-苯基-異絲氨酸反應(yīng)并將得到的產(chǎn)物脫保護(hù)以得到紫杉醇。
WO93/06094公開(kāi)了使β-內(nèi)酰胺前體與7-O-三乙基甲硅烷基-漿果赤霉素III反應(yīng)、隨后用弱酸水解來(lái)制備紫杉醇的方法。
根據(jù)美國(guó)專(zhuān)利US 5,476,954的描述，紫杉醇是以在C-7位被2，2，2-三氯乙氧羰基(TROC)酯化的10-脫乙酰基漿果赤霉素III作為起始物質(zhì)進(jìn)行制備的。
根據(jù)美國(guó)專(zhuān)利US 5,917,062和美國(guó)專(zhuān)利US 6,020,507，用芐氧羰基(CBZ)或叔丁氧基羰基(Boc)保護(hù)C-7羥基，之后對(duì)C-10羥基進(jìn)行選擇性的乙?；?br> 從文獻(xiàn)中可以明顯看出紫杉醇半合成的一個(gè)關(guān)鍵的方面是選擇性地保護(hù)二萜部分(10-脫乙?；鶟{果赤霉素III骨架)上的羥基。C-7位的反應(yīng)活性最強(qiáng)，因此將其用隨后易于除去的基團(tuán)功能基化。最常用的基團(tuán)是三乙基甲硅烷基(TES)，其在合成中所涉及的其它羥基的酯化反應(yīng)條件下是穩(wěn)定的并可提供約85％的轉(zhuǎn)化收率。當(dāng)隨后在C-10位引入乙?；鶗r(shí)，收率大約為85％。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)了一種合成紫杉醇的新方法，與已知的方法相比，該新方法可提供較高的最終收率和其它優(yōu)點(diǎn)。
本發(fā)明的方法包括以下步驟a)保護(hù)10-脫乙?；鶟{果赤霉素III(10-DAB III)的7位和10位羥基， 其中R＝R’＝三氯乙?；?，或者R’＝乙?；⑶襌選自叔丁氧基羰基和三氯乙?；琤)用3-苯基-2-環(huán)氧丙酸將13位的羥基酯化， c)如果7位和10位的保護(hù)基都是三氯乙?；瑒t(1)除去7位和10位的保護(hù)基團(tuán)，(2)隨后在10位進(jìn)行選擇性的乙?；?3)用疊氮化鈉使環(huán)氧化物開(kāi)環(huán)；
或者，c’)如果R’＝乙?；⑶襌＝三氯乙?；?，則用疊氮化鈉使環(huán)氧化物開(kāi)環(huán)并同時(shí)使7位脫保護(hù)， d)將疊氮基還原為氨基，
e)進(jìn)行苯甲酰化生成終產(chǎn)物。
起始物質(zhì)是從歐洲紫杉(Taxus baccata)的葉子中提取的10-脫乙?；鶟{果赤霉素III(10-DAB III)。在第一步中，將10-DAB III的C-7和C-10羥基定量酯化。當(dāng)R＝R’＝三氯乙?；鶗r(shí)，使10-DAB III在三乙胺和催化量的4-二甲基氨基吡啶(DMAP)的存在下與三氯乙酰氯在二氯甲烷中反應(yīng)。當(dāng)R≠R’時(shí)，首先在鈰、鈧、鐿鹽，優(yōu)選CeCl3.7H2O的存在下用乙酸酐對(duì)10-DAB III進(jìn)行選擇性的乙?；?。隨后用叔-丁氧基羰基或三氯乙?；鶎?duì)得到的漿果赤霉素III的C-7位進(jìn)行保護(hù)?？梢酝ㄟ^(guò)使?jié){果赤霉素III在DMAP和乙基二異丙基胺的存在下與叔丁氧基焦碳酸酯反應(yīng)或者依照美國(guó)專(zhuān)利US 5,917,062中所述的方法進(jìn)行反應(yīng)引入叔丁氧基羰基。可以通過(guò)使?jié){果赤霉素III與三氯乙酰氯在吡啶中反應(yīng)將三氯乙?；胫?位。
在隨后的步驟b)中，在二環(huán)己基碳二亞胺、DMAP和對(duì)-甲苯磺酸的存在下，用3-苯基-2-環(huán)氧丙酸、優(yōu)選用其銨鹽在甲苯中將13位的羥基酯化，從而獲得(2R，3R)-3-苯基-2，3-環(huán)氧-丙酸漿果赤霉素III酯。
當(dāng)保護(hù)基團(tuán)R和R’都是三氯乙?；鶗r(shí)，可以使用Zheng等人在“Tetrahedron Lett.，1995，36，2001”和Datta等人在“J.Org.Chem.，1995，60，761”中所述的條件和試劑將它們除去。優(yōu)選使用兩個(gè)當(dāng)量的氫氧化銨除去兩個(gè)三氯乙酰基。然后，在鈰、鈧或鐿鹽，優(yōu)選CeCl3.7H2O的存在下，用乙酸酐選擇性地將脫保護(hù)了的化合物在10位乙?；?。
在文獻(xiàn)(Yamaguchi T.，Tetrahedron Letters 39，5575-78，1998)所報(bào)道的條件下，使得到的化合物在甲酸甲酯的存在下與疊氮化鈉在含水甲醇中發(fā)生反應(yīng)，生成相應(yīng)的疊氮化物。
或者，當(dāng)R＝三氯乙?；⑶襌’＝乙?；?d)時(shí)，將環(huán)氧乙烷與疊氮化鈉反應(yīng)生成在7位脫保護(hù)的相應(yīng)的疊氮化物，其相當(dāng)于步驟(c’)中所得到的化合物。
在隨后的步驟(d)中將疊氮化物還原為胺?？梢杂么呋瘹浠蛴肞Ph3進(jìn)行還原反應(yīng)。將所得產(chǎn)物的氨基在最后一步(e)中苯甲?；玫阶仙即?。可以在進(jìn)行還原反應(yīng)的同時(shí)用苯甲酸酐進(jìn)行苯甲?；磻?yīng)，或者在還原反應(yīng)之后使用化學(xué)計(jì)算量的苯甲酰氯在碳酸鉀的存在下將分離出來(lái)的還原產(chǎn)物苯甲?；?br> 以下實(shí)施例更為詳細(xì)地闡明了本發(fā)明。
實(shí)施例17-三氯乙?；?漿果赤霉素III的合成在25ml的圓底燒瓶中，將0.603g(1.03mmol，1.0當(dāng)量)漿果赤霉素III在磁力攪拌、25℃、氮?dú)猸h(huán)境下溶解于9.7ml無(wú)水吡啶中。向該澄清的淺黃色溶液中滴加138μl(1.23mmol，1.23當(dāng)量)三氯乙酰氯。加入完成30分鐘后，生成白色沉淀。在與上述相同的條件下，向反應(yīng)混懸液中再滴加120μl(1.07mmol，1當(dāng)量)三氯乙酰氯。20分鐘后，溶液呈黃褐色。通過(guò)TLC(SiO2，正己烷/乙酸乙酯，2∶3)觀察到起始物質(zhì)漿果赤霉素III幾乎已全部轉(zhuǎn)化。用二氯甲烷稀釋反應(yīng)混合物。將得到的溶液用CuSO4飽和溶液反復(fù)洗滌直至吡啶被完全除去(溶液不再呈藍(lán)色)。將有機(jī)相在真空下濃縮、用MgSO4干燥、過(guò)濾、蒸除溶劑，得到0.612g具有以下光譜特征的黃白色粉末(相當(dāng)于7-三氯乙?；鶟{果赤霉素III)1H NMR(400 MHz，CDCl3)δppm＝1.08(s，3H，Me)，1.13(s，3H，Me)，1.86(s，3H，Me)，1.97(ddd，1H，J1＝14.4 Hz，J2＝10.3 Hz，J3＝1.9 Hz，C6-H)，2.13(d，3H，J＝1，2Hz，Me)，2.15(s，3H，Me)，2.30(s，3H，Me)，2.32-2.28(m，2H，C14-H2)，2.68(ddd，1H，J1＝14.4 Hz，J2＝9.3 Hz，J3＝7.3 Hz，C6-H)，4.04(d，1H，J＝7.0 Hz，C3-H)，4.17(dd，1H，J1＝8.4 Hz，J2＝1.0 Hz，C20-H)，4.34(d，1H，J＝8.4 Hz，C20-H)，4.86(t，1H，J＝7.5 Hz，C13-H)，4.98(dd，1H，J1＝9.5 Hz，J2＝1.7 Hz，C5-H)，5.65(d，1H，J＝7.0 Hz，C2-H)，5.70(dd，1H，J1＝10.4 Hz，J2＝7.4 Hz，C7-H)，6.42(s，1H，C10-H)，7.52-7.46(m，2H，芳族)，7.62(m，1H，芳族)，8.10(m，2H，芳族)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δppm＝10.8，15.5，20.4，20.9，22.8，26.9，32.5，38.6，43.0，47.2，56.2，68.1，74.5，75.5，76.5，77.0，79.0，80.5，83.7，89.9，129.0，129.4，130.3，132.0，134.0，145.4，160.8，167.2，169.2，171.0，201.9。
實(shí)施例2(2’R，3’R)-7-三氯乙酰基-漿果赤霉素III-13-(3’-苯基-2’，3’-環(huán)氧丙酸酯)的合成將0.164g(1.00mmol，1當(dāng)量)新制備的3-苯基-2-環(huán)氧丙酸在0℃下溶解于30ml無(wú)水甲苯中。隨后在氮?dú)猸h(huán)境、0℃下加入0.5g(1mmol，0.68當(dāng)量)7-(三氯乙酰基)-漿果赤霉素III[7-(TCA)-漿果赤霉素III]。最后，依次加入二環(huán)己基碳二亞胺(DCC，0.21g，1.00mmol，1.0當(dāng)量)、4-二甲基氨基吡啶(DMAP，0.084g，0.68mmol，0.66當(dāng)量)和對(duì)甲苯磺酸(p-TSA，0.17g，0.10mmol，0.1當(dāng)量)。然后將溶液在磁力攪拌和氮?dú)饬飨录訜嶂?0℃。通過(guò)TLC(SiO2，正己烷/乙酸乙酯，3∶2)監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)程。第一個(gè)點(diǎn)(Rf＝0.28)對(duì)應(yīng)于7-(TCA)-漿果赤霉素III環(huán)氧酯。第二個(gè)點(diǎn)(Rf＝0.11)對(duì)應(yīng)于7-(TCA)-漿果赤霉素III。3個(gè)小時(shí)后，將混合物冷卻并過(guò)濾出懸浮的固體。用二氯甲烷洗滌沉淀的二環(huán)己基脲(DCU)。將合并的有機(jī)相濃縮至干。通過(guò)快速色譜法(SiO2，正己烷/乙酸乙酯，3∶2)將得到的粗品(0.919g)進(jìn)行色譜分離。得到0.100g(0.14mmol，20％)未反應(yīng)的7-TCA-漿果赤霉素III和0.435g(0.49mmol，73％)具有以下光譜特征的(2’R，3’R)-7-三氯乙酰基-漿果赤霉素III-13-(3’-苯基-2’，3’-環(huán)氧丙酸酯)1H NMR(400 MHz，CDCl3)δppm＝1.11(bs，6H，2Me)，1.25(bs，1H，OH)，1.76(d，3H，J＝1.2 Hz，Me)，1.84(s，3H，Me)，2.02-1.92(m，3H，C14-H2+C6-H)，2.13(s，3H，Me)，2.39(s，3H，Me)，2.69(ddd，1H，J1＝14.6 Hz，J2＝9.3 Hz，J3＝7.3 Hz，C6-H)，3.92(d，1H，J＝6.9 Hz，C3-H)，3.97(d，1H，J＝4.7 Hz，C2′-H)，4.15(dd，1H，J1＝8.4 Hz，J2＝1.0 Hz，C20-H)，4.31(d，1H，J＝8.3 Hz，C20-H)，4.33(d，1H，J＝4.7 Hz，C3′-H)，4.97(dd，1H，J1＝9.5 Hz，J2＝1.8 Hz，C5-H)，5.63(d，1H，J＝6.8 Hz，C2-H)，5.65(dd，1H，J1＝10.7Hz，J2＝7.33 Hz，C7-H)，6.02(dt，1H，J1＝8.8 Hz，J2＝1.8 Hz，C13-H)，7.45-7.30(m，5H，芳族)，6.34(s，1H，C10-H)，7.49(m，2H，芳族)，7.64(m，1H，芳族)，8.00(m，2H，芳族)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δppm＝10.8，14.9，20.8，21.0，22.5，26.5，32.4，35.7，43.2，46.7，56.0，56.1，57.9，70.9，74.5，74.8，76.4，76.7，79.0，80.6，83.6，89.8，126.8，128.7，128.9，129.2，129.3，130.2，132.6，133.0，134.1，141.3，160.7，166.3，167.1，169.1，170.1，201.3。
實(shí)施例3(2’R，3’R)-漿果赤霉素III-13-(3’-疊氮基-2’-羥基-3’-苯基-丙酸酯)的合成在裝備有磁力攪拌器的25ml單口圓底燒瓶中，將0.397g(0.45mmol，1當(dāng)量)(2'R，3’R)-7-三氯乙?；?漿果赤霉素III-13-(3’-苯基-2’，3’-環(huán)氧丙酸酯)于25℃下懸浮于10.0ml甲醇中。依次加入1.26ml水、1.26ml甲酸甲酯和0.735g(11.3mmol，25.0當(dāng)量)疊氮化鈉。將溫度升至50℃，通過(guò)TLC(SiO2，氯仿/乙酸乙酯/甲醇12.0∶2.0∶0.3)監(jiān)測(cè)反應(yīng)的進(jìn)程。觀察到起始物質(zhì)消失并同時(shí)生成Rf值分別為0.22和0.29的兩種產(chǎn)物。隨后證實(shí)Rf值為0.29的產(chǎn)物為最終產(chǎn)物，而Rf值為0.22的產(chǎn)物為生成的反應(yīng)中間體(2’R，3’R)-漿果赤霉素III-13-(3’-苯基-2’，3’-環(huán)氧丙酸酯)。隨著時(shí)間的推移，Rf值為0.29的產(chǎn)物增加而Rf值為0.22的產(chǎn)物減少。46小時(shí)后，反應(yīng)液呈黃褐色，并且其中有白色沉淀(未反應(yīng)的疊氮化鈉)。46小時(shí)后加入水使反應(yīng)停止，觀察到另兩個(gè)點(diǎn)，Rf值分別為0.38和0.13(未回收的分解產(chǎn)物)。將沉淀的乳白色固體過(guò)濾、用水洗滌然后用乙酸乙酯洗滌。得到兩相均澄清的兩相混合物。將兩相分離，用乙酸乙酯將水相萃取三次，將合并的有機(jī)相濃縮并用MgSO4干燥。將混合物過(guò)濾、蒸除溶劑得到0.335g黃白色粉末。通過(guò)快速色譜法(SiO2，氯仿/乙酸乙酯/甲醇12∶2∶0.3)將得到的粗品純化，得到0.279g(0.36mmol，80％，Rf＝0.22)(2’R，3’R)-漿果赤霉素III-13-(3’-疊氮基-2’-羥基-3’-苯基-丙酸酯)。
得到的化合物具有以下光譜特征
1H NMR(400 MHz，CDCl3)δppm＝1.14(s，3H，Me)，1.25(bs，4H，Me+OH)，1.67(s，3H，Me)，1.87(ddd，1H，J1＝13.9 Hz，J2＝11.1 Hz，J3＝2.5 Hz，C6-H)，1.93(d，3H，J＝0.8 Hz，Me)，2.08(d，2H，J＝8.8 Hz，C14-H2)，2.24(s，3H，Me)，2.26(s，3H，Me)，2.55(m，2H，C6-H+C7-OH)，3.28(d，1H，J＝8.4Hz，C2′-OH)，3.77(d，1H，J＝7.2 Hz，C3-H)，4.15(dd，IH，J1＝8.2 Hz，J2＝0.8 Hz，C20-H)，4.28(d，1H，J＝8.2 Hz，C20-H)，4.41(m，2H，C7-H+C2′-H)，4.93(dd，1H，J1＝9.6 Hz，J2＝2.0 Hz，C5-H)，4.96(d，1H，J＝4.4 Hz，C3′-H)，5.64(d，1H，J＝7.2 Hz，C2-H)，6.17(dt，1H，J1＝7.9 Hz，J2＝1.2 Hz，C13-H)，6.30(s，1H，C10-H)，7.46-7.32(m，5H，芳族)，7.46-7.32(m，5H，芳族)，7.50(m，2H，芳族)，7.63(m，1H，芳族)，8.06(m，2H，芳族)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δppm＝9.8，15.3，21.1，21.9，22.6，27.0，35.6，35.8，43.3，45.9，58.8，68.1，72.0，72.4，75.1，75.3，75.8，76.7，79.4，81.3，84.6，127.9，128.9，129.2，129.5，130.3，133.4，134.1，135.3，142.2，167.2，170.5，171.5，203.8。
實(shí)施例4N-脫苯甲酰基-紫杉醇的合成在25ml雙口圓底燒瓶中，將0.102g(0.13mmol，1.0當(dāng)量)(2’R，3’R)-7-羥基-漿果赤霉素III-13-(3’-疊氮基-2’-羥基-3’-苯基-丙酸酯)溶解于5.2ml新蒸餾的二氯甲烷中，向形成的淺黃色溶液中加入水(0.05ml)，然后加入0.071g(0.26mmol，2.0當(dāng)量)PPh3。使混合物在室溫、磁力攪拌下進(jìn)行反應(yīng)。16小時(shí)后用TLC(SiO2，氯仿/甲醇9∶1)監(jiān)測(cè)反應(yīng)的進(jìn)程。起始物質(zhì)(Rf＝0.61)已消失，觀察到Rf＝0.19的點(diǎn)。用氯仿稀釋混合物(淺黃色并有白色沉淀)以終止反應(yīng)。之后，用蒸餾水、然后用氯化鈉飽和溶液(鹽水)洗滌混合物。用MgSO4干燥亮黃色的有機(jī)相，然后過(guò)濾并蒸除溶劑。得到0.177g赭黃色油狀物。將粗品經(jīng)快速色譜法(SiO2，氯仿/甲醇9∶1)處理，得到0.074mg(0.10mmol，76％)N-脫苯甲?；?紫杉醇(淺黃色粉末)。
1H NMR(400 MHz，CDCl3)δppm＝1.07(s，3H，Me)，1.09(s，3H，Me)，1.38-1.22(bs，2H，2OH)，1.75(s，3H，Me)，1.88(s，3H，Me)，1.90(s，3H，Me)，1.93(s，3H，Me)，2.20-1.96(m，6H，C14-H2+C6-H，NH2+OH)，2.52(ddd，1H，J1＝15.7 Hz，J2＝9.5 Hz，J3＝5.9 Hz，C6-H)，3.88(d，1H，J＝7.2 Hz，C3-H)，4.10(d，1H，J＝4.0 Hz，C20-H)，4.17(d，1H，J＝4.0 Hz，C20-H)，4.22(d，1H，J＝8.0 Hz，C2′-H)，4.26(d，1H，J＝8.0 Hz，C3′-H)，4.56(dd，1H，J1＝11.6 Hz，J2＝6.9 Hz，C7-H)，4.84(d，1H，J＝8.8 Hz，C5-H)，5.83(d，1H，J＝7.2 Hz，C2-H)，6.25(t，1H，J＝8.0 Hz，C13-H)，6.51(s，1H，C10-H)，7.20-7.00(m，8H，芳族)，8.13(m，2H，芳族)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δppm＝9.8，15.2，21.1，22.0，22.7，27.0，30.0，35.4，35.8，43.3，45.9，58.7，71.3，72.3，75.2，75.8，76.6，79.3，81.2，84.6，127.2，128.5，128.9，129.0，129.4，130.3，133.1，134.1，142.6，167.1，170.4，171.5，173.2，203.9。
實(shí)施例5紫杉醇的合成在10ml的圓底燒瓶中，將0.031g(0.041mmol，1.0當(dāng)量)N-脫苯甲酰基-紫杉醇溶解于1.25ml乙酸乙酯中。向該澄清的黃色溶液中加入1.25ml碳酸氫鈉飽和水溶液。在強(qiáng)烈的磁力攪拌下，向形成的兩相混合物中滴加7.1ml(0.064mmol，1.5當(dāng)量)苯甲酰氯。通過(guò)TLC(SiO2，氯仿/甲醇9∶1)監(jiān)測(cè)反應(yīng)的進(jìn)程。起始物質(zhì)消失后，觀察到Rf＝0.50的單點(diǎn)。用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物。將有機(jī)相與水相分離，用乙酸乙酯萃取水相(萃取三次)。將合并的有機(jī)相用MgSO4干燥、過(guò)濾并濃縮。將粗品(0.037g)溶于二氯甲烷/乙醚的1∶1的混合物中，然后加入正戊烷以使紫杉醇沉淀(0.030g，0.035mmol，86％)，得到的紫杉醇具有文獻(xiàn)中所報(bào)道的光譜特征。
實(shí)施例6(2’R，3’R)-7，10-雙-三氯乙酰基-10-脫乙?；?漿果赤霉素III-13-(3’-苯基-2’，3’-環(huán)氧丙酸酯)的合成在100ml的圓底燒瓶中，將0.178g(1.09mmol，1.0當(dāng)量)新制備的3-苯基-2-環(huán)氧丙酸在0℃下溶解于30ml無(wú)水甲苯中。在氮?dú)猸h(huán)境、0℃下，將0.663g(0.79mmol，0.73當(dāng)量)7，10-雙-(三氯乙?；?-10-脫乙酰基漿果赤霉素III[7，10-雙-(TCA)-10-DAB III]懸浮在以上得到的溶液中。最后，依次加入二環(huán)己基碳二亞胺(DCC，0.224g，1.09mmol，1.0當(dāng)量)、4-二甲基氨基吡啶(DMAP，0.088g，0.72mmol，0.66當(dāng)量)和對(duì)甲苯磺酸(p-TSA，0.19g，0.11mmol，0.1當(dāng)量)。反應(yīng)在70℃、磁力攪拌和氮?dú)饬飨掠诙嘞嘀羞M(jìn)行。通過(guò)TLC(SiO2，正己烷/乙酸乙酯3∶2)監(jiān)測(cè)反應(yīng)的進(jìn)程。第一個(gè)點(diǎn)的Rf值為0.28，對(duì)應(yīng)于7，10-雙-(TCA)-10-DAB III環(huán)氧酯，第二個(gè)點(diǎn)的Rf值為0.15，對(duì)應(yīng)于7，10-雙-(TCA)-10-DAB III。3小時(shí)后，將混合物冷卻并過(guò)濾出懸浮的固體。用二氯甲烷洗滌深黃色的沉淀，剩余的白色固體為DCU。將合并的有機(jī)部分濃縮，所得到的固體經(jīng)快速色譜法(SiO2，正己烷/乙酸乙酯3∶2)處理得到0.63g(2’R，3’R)-7，10-雙-三氯乙?；?10-脫乙?；?漿果赤霉素III-13-(3’-苯基-2’，3’-環(huán)氧丙酸酯)。
1H NMR(400 MHz，CDCl3)δppm＝1.12(s，3H，Me)，1.14(s，3H，Me)，1.76-1.60(m，2H，C6-H+OH)，1.81(s，3H，Me)，1.88(s，3H，Me)，2.04-1.98(m，2H，C14-H)，2.41(s，3H，Me)，2.69(ddd，1H，J1＝14.5 Hz，J2＝9.3 Hz，J3＝7.3 Hz，C6-H)，3.89(d，1H，J＝7.2 Hz，C3-H)，3.98(d，1H，J＝4.0 Hz，C2′-H)，4.14(d，1H，J＝8.0 Hz，C20-H)，4.32(d，1H，J＝8.0 Hz，C20-H)，4.34(d，1H，J＝4.0 Hz，C3′-H)，4.97(d，1H，J＝7.6 Hz，C5-H)，5.70-5.62(m，2H，C7-H+C2-H)，6.05(dt，1H，J1＝8.4 Hz，J2＝1.0 Hz，C13-H)，7.52-7.30(m，7H，ArH)，6.39(s，1H，C10-H)，7.45(m，1H，ArH)，7.99(m，2H，ArH)；13CNMR(100 MHz，CDCl3)δppm＝10.9，15.1，20.8，22.6，26.3，32.5，35.6，43.1，46.7，55.9，56.5，58.0，70.8，74.2，76.4，78.6，78.9，80.5，83.5，89.5，89.6，126.8，128.8，129.0，129.1，129.4，130.2，131.5，132.5，134.2，143.3，160.6，161.1，166.3，167.0，170.3，199.5。
實(shí)施例7(2’R，3’R)-10-脫乙?；?漿果赤霉素III-13-(3’-苯基-2’，3’-環(huán)氧丙酸酯)的合成在25ml的圓底燒瓶中，將0.174g(0.18mmol，1.0當(dāng)量)(2’R，3’R)-7，10-雙(TCA)-10-DAB III-13-(3’-苯基-2’，3’-環(huán)氧丙酸酯)懸浮于3ml甲醇中。將形成的懸浮液冷卻至0℃，在強(qiáng)烈的磁力攪拌下向其中滴加0.24ml(0.36mmol，2.0當(dāng)量)1.57M的氨水溶液。使反應(yīng)于0℃下進(jìn)行15分鐘，期間懸浮液變?yōu)辄S綠色。此后，將混合物的溫度升至室溫，進(jìn)一步反應(yīng)5分鐘以使沉淀完全溶解，得到澄清的黃綠色溶液。通過(guò)TLC(SiO2，正己烷/乙酸乙酯3∶2)監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)原料化合物完全消失，在基線處有一個(gè)單點(diǎn)。用水稀釋反應(yīng)混合物，得到乳白色溶液，用乙酸乙酯從中萃取(萃取三次)有機(jī)相(加入有機(jī)溶劑后形成乳狀液，通過(guò)將NaCl溶解于其中破乳)。將合并的有機(jī)相用MgSO4干燥、過(guò)濾并蒸除溶劑。得到0.194g(2’R，3’R)-10-脫乙?；?漿果赤霉素III-13-(3’-苯基-2’，3’-環(huán)氧丙酸酯)的白色粉末。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δppm＝1.05(s，3H，Me)，1.09(s，3H，Me)，1.71(s，3H，Me)，1.72(d，3H，J＝1.2 Hz，Me)，1.83(m，1H，C6-H)，1.95(2H，d，J＝8.8 Hz，C14-H2)，2.34(s，3H，Me)，2.58(ddd，1H，J1＝14.6 Hz，J2＝9.9 Hz，J3＝6.9 Hz，C6-H)，3.85(d，1H，J＝7.3 Hz，C3-H)，3.95(d，1H，J＝4.4 Hz，C2′-H)，4.14(d，1H，J＝8.4 Hz，C20-H)，4.22(dd，1H，J1＝11.3 Hz，J2＝6.6Hz，C7-H)，4.27(d，1H，J＝8.4 Hz，C20-H)，4.31(d，1H，J＝4.4 Hz，C3′-H)，4.95(d，1H，J＝8.8 Hz，C5-H)，5.16(s，1H，C10-H)，5.59(d，1H，J＝7.3 Hz，C3-H)，5.99(dt，1H，(d，1H，J1＝8.8 Hz，J2＝1.2 Hz，C7-H)，7.30-7.50(m，7H，芳族)，7.60-7.70(m，1H，芳族)，7.90-8.00(m，2H，芳族)。
實(shí)施例8(2’R，3’R)-漿果赤霉素III-13-(3’-苯基-2’，3’-環(huán)氧丙酸酯)的合成將7.3mg CeCl3.7H2O和0.073ml乙酸酐加入到(2’R，3’R)-10-脫乙?；?漿果赤霉素III-13-(3’-苯基-2’，3’-環(huán)氧丙酸酯)(138mg)的3ml無(wú)水四氫呋喃溶液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，期間反應(yīng)混合物成為均相。加入1.0g冰，持續(xù)攪拌1小時(shí)。在真空下蒸除有機(jī)溶劑，將殘余物用5ml水稀釋。將生成的沉淀過(guò)濾并在真空下干燥18小時(shí)。得到的產(chǎn)物(白色粉末，130mg)具有以下特征1H NMR(400 MHz，CDCl3)δppm＝1.05(s，3H，Me)，1.09(s，3H，Me)，1.71(s，3H，Me)，1.72(d，3H，J＝1.2 Hz，Me)，1.83(m，1H，C6-H)，1.95(2H，d，J＝8.8 Hz，C14-H2)，2.34(s，3H，Me)，2.58(ddd，1H，J1＝14.6 Hz，J2＝9.9 Hz，J3＝6.9 Hz，C6-H)，3.85(d，1H，J＝7.3 Hz，C3-H)，3.95(d，1H，J＝4.4 Hz，C2′-H)，4.14(d，1H，J＝8.4 Hz，C20-H)，4.22(dd，1H，J1＝11.3 Hz，J2＝6.6Hz，C7-H)，4.27(d，1H，J＝8.4 Hz，C20-H)，4.31(d，1H，J＝4.4 Hz，C3′-H)，4.95(d，1H，J＝8.8 Hz，C5-H)，5.59(d，1H，J＝7.3 Hz，C3-H)，5.65(dd，1H，J1＝10.7 Hz，J2＝7.33 Hz，C7-H)，6.34(s，1H，C10-H)，7.30-7.50(m，7H，芳族)，7.60-7.70(m，1H，芳族)，7.90-8.00(m，2H，芳族)。
實(shí)施例9(2’R，3’R)-漿果赤霉素III-13-(3’-疊氮基-2’-羥基-3’-苯基-丙酸酯)的合成在裝備有磁力攪拌器的25ml單口圓底燒瓶中，將0.17g(0.45mmol，1當(dāng)量)(2’R，3’R)-漿果赤霉素III-13-(3’-苯基-2’，3’-環(huán)氧丙酸酯)于25℃下懸浮于5ml甲醇中。依次加入0.63ml水、0.23ml甲酸甲酯和0.36g(5.5mmol，12.5當(dāng)量)疊氮化鈉。將混合物加熱至50℃，通過(guò)TLC(SiO2，氯仿/乙酸乙酯/甲醇12.0∶2.0∶0.3)監(jiān)測(cè)反應(yīng)的進(jìn)程。46小時(shí)后反應(yīng)混合物呈黃褐色，并且在其中有白色沉淀(未反應(yīng)的疊氮化鈉)。加入水(10ml)，過(guò)濾出沉淀的乳白色固體，依次用水和乙酸乙酯洗滌。將兩相分離，水相用乙酸乙酯萃取三次，將合并的有機(jī)相濃縮并用MgSO4干燥，過(guò)濾并蒸除溶劑，得到0.20g黃白色粉末。通過(guò)快速色譜法(SiO2，氯仿/乙酸乙酯/甲醇12∶2∶0.3)將得到的粗品純化，得到0.140g(2’R，3’R)-漿果赤霉素III-13-(3’-疊氮基-2’-羥基-3’-苯基-丙酸酯)。
得到的化合物具有與實(shí)施例3中的化合物相同的光譜特征。
權(quán)利要求
1.制備紫杉醇的方法，其包括以下步驟a)保護(hù)10-脫乙?；鶟{果赤霉素III(10-DAB III)的7位和10位羥基， 其中R＝R’＝三氯乙?；?，或者R’＝乙酰基并且R選自叔丁氧基羰基和三氯乙?；?，b)用3-苯基-2-環(huán)氧丙酸將13位的羥基酯化， c)如果7位和10位的保護(hù)基都是三氯乙?；?，則(1)除去7位和10位的保護(hù)基團(tuán)，(2)隨后在10位進(jìn)行選擇性的乙?；?，(3)用疊氮化鈉使環(huán)氧化物開(kāi)環(huán)； 或者，c’)如果R’＝乙?；⑶襌＝三氯乙?；瑒t用疊氮化鈉使環(huán)氧化物開(kāi)環(huán)，同時(shí)使7位脫保護(hù)， d)將疊氮基還原為氨基， c)進(jìn)行苯甲?；玫浇K產(chǎn)物。
2.權(quán)利要求1的方法，其中，10-DAB III通過(guò)在三乙胺和催化量的4-二甲基氨基吡啶(DMAP)的存在下與三氯乙酰氯在二氯甲烷中反應(yīng)而使其7位和10位被三氯乙?；Ｗo(hù)。
3.權(quán)利要求1的方法，其中，通過(guò)將10-DAB III在鈰、鈧或鐿鹽的存在下與乙酸酐反應(yīng)首先使10位乙?；?，隨后將7位的羥基用叔丁氧基羰基或三氯乙?；Ｗo(hù)。
4.權(quán)利要求1的方法，其中，在二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)、DMAP和對(duì)甲苯磺酸的存在下，用苯基-2-環(huán)氧丙酸的銨鹽在甲苯中將13位的羥基酯化。
5.權(quán)利要求1的方法，其中，用氫氧化銨除去保護(hù)基R＝R’＝三氯乙?；?。
6.權(quán)利要求1的方法，其中，在甲酸甲酯的存在下，用疊氮化鈉在含水甲醇中使環(huán)氧化物開(kāi)環(huán)。
7.權(quán)利要求1的方法，其中，用催化氫化或用PPh3將疊氮化物還原為胺。
8.權(quán)利要求1的方法，其中，最后一步的苯甲?；怯帽郊姿狒c還原反應(yīng)同時(shí)進(jìn)行的，或在還原反應(yīng)之后在碳酸鉀的存在下用苯甲酰氯對(duì)分離出的還原產(chǎn)物進(jìn)行苯甲?；?br> 9.作為反應(yīng)中間體的以下化合物 其中R和R’如權(quán)利要求1中所定義或者為氫。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了從10－脫乙酰基漿果赤霉素III制備紫杉醇的方法。
文檔編號(hào)C07D407/12GK1509277SQ01820074
公開(kāi)日2004年6月30日 申請(qǐng)日期2001年12月3日 優(yōu)先權(quán)日2000年12月6日
發(fā)明者A·巴塔利亞, P·丹布羅索, A·圭里尼, E·邦巴爾代利, A·蓬迪羅利, A 巴塔利亞, 下蘩, 悸匏, 投, 錟 申請(qǐng)人:因德納有限公司