專利名稱：具有抗腫瘤活性的半合成紫杉烷的制作方法
具有紫杉烷(taxane)骨架的雙萜，特別是紫杉醇，已知對(duì)人類許多腫瘤有抗腫瘤活性。但是，在使用這些藥物時(shí)，特別是紫杉醇，由于產(chǎn)生不希望的副作用而導(dǎo)致使用上的缺點(diǎn)，而且由于這些抗腫瘤療法很快引起耐受性，因此，開發(fā)新的能減少這類臨床問題的分子是人們研究的熱點(diǎn)。WO93/02067(Nippon Steel，1993年2月4日)公開了例如10-α-乙?；仙即?，它從紫杉屬的白蛋白組織培養(yǎng)物中提取出來，具有顯著的細(xì)胞毒性。
本發(fā)明涉及半合成得到的新的紫杉烷骨架的衍生物，它們具有很強(qiáng)的抗腫瘤活性。本發(fā)明的衍生物具有通式(1) 它們可分成兩個(gè)系列a)在11，12位之間含有烯屬雙鍵和在10α-位為羥基或酰氧基的紫杉烷衍生物(式1a的紫杉烷)。 (1a)(R3＝H；R4＝OH或酰氧基)b)在11和12位的碳原子之間含有單鍵，在12位的甲基為α-取向的，且在10β位為羥基或酰氧基的紫杉烷衍生物(式1b的紫杉烷)。 (1b)(R3＝OH或酰氧基；R4＝H)在通式(1)的紫杉烷中，R1和R2可相同或不同，可以是C1-C8基，C2-C8鏈烯基，芳基(優(yōu)選苯基)或雜芳基。R2也可以是叔丁氧基。
在通式(1a)化合物中，R3是氫，R4是羥基或C2-C8酰氧基。
在通式(1b)化合物中，R3是羥基或C2-C8酰氧基，且R4是氫。
通式(1)的紫杉烷可通過使用適當(dāng)活化的異絲氨酸鏈作為酰化試劑在通式(2)的新合成子(syntones)的13-位酯化而制備，制備可按照半合成紫杉醇及其類似物的文獻(xiàn)中描述的方法進(jìn)行(參見，例如，EP-A-400971，1992，F(xiàn)r.Dem.86，10400；E.Didier等，TetrahedronLetters 35，2349，1994；E.Didier等，ibid.35，3063，1994)。
在通式(2)中 其中當(dāng)11，12位之間存在烯屬雙鍵時(shí)，R3是氫原子，R4和R5是羥基，C2-C8酰氧基，烷基甲硅烷氧基或2，2，2-三氯乙氧羰氧基；當(dāng)11，12位之間不存在烯屬雙鍵時(shí)，12-位的甲基是α-取向的，R4是氫原子，R3和R5是羥基，C2-C8酰氧基，烷基甲硅烷氧基或2，2，2-三氯乙氧羰氧基。
具體地講，通式(2a)的合成子用于合成通式(1a)的新的紫杉烷。另一方面，通式(2b)的合成子用于合成通式(1b)的新的紫杉烷。 在合成子(2a)中，在11和12位之間有烯屬雙鍵，在10α-位有C2-C8酰氧基或任意被保護(hù)的羥基。因此，在合成子(2a)中，R3是氫，R4和R5是羥基，酰氧基，烷基甲硅烷氧基(如三乙基甲硅烷氧基，O-TES)或2，2，2-三氯乙氧羰基氧基(O-CO-O-CH2CCl3，O-TROC)。 在合成子(2b)中，11-位和12-位的碳原子以單鍵相連，12-位的甲基是α-取向的，且在10α位有酰氧基或任意保護(hù)的羥基。因此，在合成子(2b)中，R4是氫，R3和R5是羥基，酰氧基，烷基甲硅烷氧基(如三乙基甲硅烷氧基，O-TES)或2，2，2-三氯乙氧羰基氧基(O-CO-O-CH2CCl3，O-TROC)。
在合成子(2)的13-位用異絲氨酸鏈酯化后，使用本領(lǐng)域的常規(guī)方法除去保護(hù)基，從而得到式(1)的新的紫杉烷。
10-脫乙酰基漿果赤霉素III(3)，可從漿果紫杉的葉子中分離得到(G.Chauvière et coll.，C.R.Acad.Sc.Ser.III，293；591)，是用于制備合成子(2a)和(2b)的唯一起始物。
文獻(xiàn)中未知的合成子(2a)可通過(反應(yīng)流程1)從(3)得到，它是通過用乙酸銅(II)氧化(3)的10-位，得到二酮(4)，然后在鈰(III)鹽存在下用硼氫化鈉還原得到。
所得產(chǎn)物(2a，R3＝H，R4＝R5＝OH)，它是(3)的10-位的差向異構(gòu)體，在7-位和10-位適當(dāng)進(jìn)行保護(hù)，并用于合成紫杉烷(1a)。
反應(yīng)流程1 在反應(yīng)流程1中得到的副產(chǎn)物是新的斷紫杉烷(secotaxane)(5)。
斷紫杉烷(5)可用于合成具有潛在抗腫瘤活性的其他紫杉烷。
本發(fā)明還涉及半合成制備的新的斷紫杉烷骨架的衍生物，它具有強(qiáng)的抗腫瘤活性。所述衍生物具有通式(5a)。 其中R1和R2，可以相同或不同，可以是C1-C20烷基，C2-C8鏈烯基，芳基(優(yōu)選苯基)或雜芳基。R2也可以是叔丁氧基。
通式(5a)的紫杉烷可通過使用適當(dāng)活化的異絲氨酸鏈作為酰化試劑在通式(5)化合物的13-位酯化而制備，如在半合成紫杉醇及其類似物的文獻(xiàn)中報(bào)道的(參見，例如EP-A-400，971；E.Didier等，Tetrahedron Letters 35，2349，1994；E.Didier等，ibid.35，3063，1994)?？砂磦鹘y(tǒng)方法，用合適的保護(hù)基將通式(5)化合物的羥基任意性地保護(hù)起來。
在化合物(5)的13-位用異絲氨酸鏈酯化后，使用文獻(xiàn)中的常規(guī)方法除去保護(hù)基，就可得到通式(5a)的斷紫杉烷。
合成子(2b)，在文獻(xiàn)中是未知的，也可從10-脫乙?；鶟{果赤霉素III(3)(反應(yīng)流程2)得到。已發(fā)現(xiàn)可通過用間氯過苯甲酸(MCPBA)氧化(3)，得到相應(yīng)的13-酮衍生物(6)。用三乙基甲硅烷基氯(TESCl)保護(hù)7-位羥基后，在鈰(III)鹽存在下用硼氫化鈉還原，由(6)得到合成子(2b)(R3＝OH，R4＝H，R5＝O-TES)，它可用于合成式(1b)的紫杉烷。在合成子(2b)中，12-位α-取向的甲基可通過使用核磁共振的研究推斷出來。
反應(yīng)流程2 根據(jù)本發(fā)明的產(chǎn)物對(duì)不同腫瘤細(xì)胞系的細(xì)胞毒性效果進(jìn)行篩選，其作用與紫杉醇相比較。表1顯示了IC50數(shù)據(jù)的比較，即對(duì)化合物13-[(2R，3S)-3-苯基-2-羥基-3-叔丁氧羰基氨基-丙?；鵠-10-表-10-脫乙?；鶟{果赤霉素III(1a，R1＝Ph，R2＝tBuO，R3＝H，R4＝OH)，13-[(2R，3S)-3-苯基-2-羥基-3-叔丁氧羰基氨基-丙?；鵠-10-脫乙?；?11，12-二氫漿果赤霉素III(1b，R1＝Ph，R2＝tBuO，R3＝OH，R4＝H)，13-[(2R，3S)-3-苯基-2-羥基-3-叔丁氧羰基氨基-丙?；鵠-C-斷-10-脫乙?；鶟{果赤霉素III(5a，R1＝Ph，R2＝tBuO)和1 3-[(2R，3S)-3-異丁基-2-羥基-3-己?；被?丙?；鵠-C-斷-10-脫乙?；鶟{果赤霉素III(5a，R1＝異丁基，R2＝戊基)的數(shù)據(jù)與紫杉醇中得到的數(shù)據(jù)進(jìn)行比較。
表1-紫杉烷1a(R1＝Ph，R2＝tBuO，R3＝H，R4＝OH)，1b(R1＝Ph，R2＝tBuO，R3＝OH，R4＝H)和紫杉醇對(duì)6種細(xì)胞系的IC50。
暴露時(shí)間 紫杉醇1a 1b(h) (R1＝Ph，R2＝tBuO，(R1＝Ph，R2＝tBuO，R3＝H，R4＝OH) R3＝OH，R4＝H)L1210(鼠白血病) 4857.0±3.0 46.0±2.1 32.0±0.1A121(人卵巢)723.7±0.3 2.8±0.31.6±0.2A549(人NSCLC) 725.4±0.5 6.9±0.32.1±0.3HT-29(人結(jié)腸) 726.0±0.6 3.4±0.13.6±0.4HCF7(人乳房)724.3±0.1 2.2±0.20.8±0.2HCF7-ADR(抗藥性的) 72395.0±8.7130.0±2.2 128.0±6.2標(biāo)準(zhǔn)條件培養(yǎng)基RPMI1640＋20mM HEPES＋2mM L-谷氨酰胺。
表1-續(xù)紫杉烷5a(R1＝Ph，R2＝tBuO)，5a(R1＝異丁基，R2＝戊基)和紫杉醇對(duì)6種細(xì)胞系的IC50。
暴露時(shí)間 紫杉醇 5a5a(h)(R1＝Ph， (R1＝異丁基，R2＝tBuO) R2＝戊基)L1210(鼠白血病) 4857.0±3.0 35±1.2 26±1.3A121(人卵巢)723.7±0.31.9±0.2 1.3±0.1A549(人NSCLC) 725.4±0.53.3±0.4 2.6±0.3HT-29(人結(jié)腸) 726.0±0.63.2±0.3 2.7±0.2HCF7(人乳房)724.3±0.11.5±0.2 1.1±0.2HCF7-ADR(抗藥性的) 72395.0±8.7 31.3±4.225.4±3.7標(biāo)準(zhǔn)條件培養(yǎng)基RPMI1640＋20mM HEPES＋2mM L-谷氨酰胺在異絲氨酸鏈上有不同取代基的化合物作用相似。這些化合物對(duì)于對(duì)其它抗腫瘤物質(zhì)如阿霉素和順鉑(cis-platiHum)有抗藥性的細(xì)胞系的作用比紫杉醇具有驚人的優(yōu)越性。在體內(nèi)模型中這些化合物與紫杉醇的不同更為明顯，如種植了人腫瘤細(xì)胞的無胸腺裸鼠。另外，我們還驚奇的發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的R2為烷基或鏈烯基的化合物完全無心臟毒性，不象紫杉醇和其已知的衍生物，因此，它們可有效地用于不能用紫杉醇和其已知衍生物治療的心臟病患者。
本發(fā)明的化合物適于與適當(dāng)?shù)乃幱弥苿┙Y(jié)合用于非腸道和口服給藥。對(duì)于靜脈內(nèi)給藥而言，主要使用聚乙氧基化蓖麻油和乙醇的混合物，或用天然磷脂酰膽堿制成的脂質(zhì)體制劑或天然磷脂與膽固醇的混合物。
下面的實(shí)施例將進(jìn)一步詳述本發(fā)明。實(shí)施例1 10-脫氫-10-脫乙酰基漿果赤霉素III(4)的制備。
將10g10-脫乙?；鶟{果赤霉素III(3)懸浮于350ml甲醇中，向其中加入Cu(OAc)265g。將懸浮液在室溫連續(xù)攪拌120小時(shí)。濾除鹽，溶液用100g硅膠色譜純化，用6∶4己烷/乙酸乙酯混合物洗脫。用里格羅因(ligroin)結(jié)晶，得到9.5g(4)化合物。M+為m/z542。實(shí)施例2制備10-脫乙?；?10-表漿果赤霉素III(2a，R3＝H，R4＝R5＝OH)和C-斷-10-脫乙?；鶟{果赤霉素III(5)。
向300mg(4)的5ml甲醇溶液中加入一當(dāng)量CeCl3·3H2O，室溫?cái)嚢?分鐘，然后加入80mg NaBH4。溶液用NH4Cl溶液處理，用乙酸乙酯萃取，并用硅膠色譜純化，用3∶7己烷/乙酸乙酯混合物洗脫。得到98mg(2a)(M+在m/z544)和120mg(5)(M+在m/z546)。10-脫乙?；?10-表漿果赤霉素III具有1H-NMR(CDCl3)如下H2，d5.68 J6.8；H3，d4.26J6.8；H5，d5.03 J7.1；H7/13，m4.76；H10，brs5.20；10 OH，brs3.44；H16，s1.14；H17，s1.68；H18，s2.22；H19，s1.13；H20a，d4.33；H20b，d4.18；Ac，s2.31；Bnz，br8.12 J8，brt7.60 J8，brt17.49 J8.實(shí)施例3制備10-脫乙?；?13-脫氫漿果赤霉素III(6)。
向1g10-脫乙?；鶟{果赤霉素III(3)在100mlCH2Cl2中的懸浮液中加入3g間氯過苯甲酸和1g乙酸鈉。將此懸浮液在室溫連續(xù)攪拌120小時(shí)，然后用5％Na2CO3水溶液稀釋。有機(jī)相用5％Na2CO3洗滌并蒸發(fā)至干，剩余物用硅膠色譜純化，用3∶7己烷/乙酸乙酯混合物洗脫。得到789mg(6)，M+在m/z542。實(shí)施例4制備10-脫乙酰基-11，12-二氫-7-三乙基甲硅烷基-漿果赤霉素III(2b，R3＝OH，R4＝H，R5＝O-TES)。
將1.6g(6)溶于二氯甲烷中并加入370mg4-二甲基氨基吡啶和2.5ml三乙基甲硅烷基氯。室溫保持2小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用二氯甲烷稀釋并用水洗滌。有機(jī)相濃縮至干。得到1.72g剩余物，用150ml95％乙醇溶解，并用9gNaBH4處理。3小時(shí)后混合物用NH4Cl溶液稀釋，產(chǎn)物用乙酸乙酯萃取。用硅膠色譜純化，使用7∶3己烷/乙酸乙酯洗脫，得到800mg(2b)(R3＝OH，R4＝H，R5＝O-TES)。實(shí)施例5制備11，12-二氫-7-TES-漿果赤霉素III(2b，R3＝OH，R4＝H，R5＝O-TES)和11，12-二氫漿果赤霉素III(2b，R3＝OAc，R4＝H，R5＝OH)將500mg10-脫乙?；?11，12-二氫-7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素III(2b，R3＝OH，R4＝H，R5＝O-TES)與3當(dāng)量的乙酰氯在無水吡啶中在0℃反應(yīng)6小時(shí)。反應(yīng)混合物用水稀釋并用二氯甲烷萃取。蒸發(fā)溶劑后，剩余物用丙酮/己烷結(jié)晶。得到510mg11，12-二氫-7-TES漿果赤霉素III，M+為m/z702III。將產(chǎn)物溶于甲醇并用稀HCl處理至完全脫甲硅基化。反應(yīng)混合物用水稀釋，用乙酸乙酯萃取，并用含水甲醇結(jié)晶。得到400mg11，12-二氫漿果赤霉素III，M+為m/z588。實(shí)施例6制備13-[(2R，3S)-3-苯基-2-羥基-3-叔丁氧羰基氨基-丙?；鵠-11，12-二氫漿果赤霉素III(1b，R2＝Ph，R2＝tBuO，R3＝OAc，R4＝H)。
將500mg11，12-二氫漿果赤霉素III(2b，R3＝OAc，R4＝H，R5＝O-TES)溶于20ml甲苯中，與0.45g(4S，5R)-N-叔丁氧羰基-2，2-二甲基-苯基-5-噁唑烷羧酸，二環(huán)己基碳化二亞胺(1.03eq)和N，N-二甲基氨基吡啶(0.2eq)在80℃反應(yīng)2小時(shí)。反應(yīng)混合物用水洗滌直至除去過量的反應(yīng)試劑，然后濃縮至干。剩余物用含1％甲酸的甲醇在室溫處理4小時(shí)。甲醇溶液用水稀釋，中和，并用乙酸乙酯萃取。有機(jī)相濃縮至干，剩余物用含1.5eq碳酸二叔丁基酯和碳酸氫鈉在15ml四氫呋喃中的溶液處理。反應(yīng)混合物用水稀釋，用乙酸乙酯萃取，將復(fù)合乙酸相(heteroacetic phase)濃縮至干。剩余物用鹽酸酸化的甲醇溶解以完成脫甲硅基化。溶液用水稀釋，用乙酸乙酯萃取。蒸發(fā)復(fù)合乙酸相得到的剩余物用硅膠色譜純化，1∶1丙酮/己烷混合物洗脫以除去反應(yīng)雜質(zhì)。得到580mg產(chǎn)物，M+為m/z851。實(shí)施例7制備13-[(2R，3S)-3-苯甲酰氨基-3-苯基-2-羥基丙?；鵠-11，12-二氫漿果赤霉素III(1b，R1＝R2＝Ph，R3＝OAc，R4＝H)。
將500mg11，12-二氫-7-TES-漿果赤霉素(2b，R3＝OAc，R4＝H，R5＝O-TES)溶于20ml甲苯，并與1.5g(4S，5R)-N-苯甲?；?2，2-二甲基-4-苯基-5-噁唑烷羧酸，二環(huán)己基碳化二亞胺(1.03eq)和N，N-二甲基氨基吡啶(0.2eq)在80℃反應(yīng)2小時(shí)。反應(yīng)混合物用水洗條直至除去過量的反應(yīng)試劑，然后濃縮至干。剩余物用含1％甲酸的甲醇在室溫處理4小時(shí)。甲醇溶液用水稀釋，中和，并用乙酸乙酯萃取。有機(jī)相濃縮至干，剩余物用鹽酸酸化的甲醇溶解以完成脫甲硅基化。溶液用水稀釋并用乙酸乙酯萃取。蒸發(fā)復(fù)合乙酸相得到的剩余物用硅膠色譜純化，1∶1丙酮/己烷混合物洗脫以除去反應(yīng)雜質(zhì)。得到530mg產(chǎn)物，M+為m/z855。實(shí)施例8制備13-[(2R，3S)-3-苯基-2-羥基-3-叔丁氧羰基氨基-丙?；鵠-10-表-10-脫乙?；鶟{果赤霉素III(1a，R2＝Ph，R2＝tBuO，R3＝H，R4＝OH)。
將500mg10-脫乙?；?1 0-表漿果赤霉素III(2a，R3＝H，R4＝R5＝OH)溶于15ml無水吡啶，并用三當(dāng)量三氯乙氧羰基氯(TROC-Cl)在80℃處理5分鐘，然后冷卻到室溫。加入1ml甲醇分解過量的TROC-Cl。溶液用冰水稀釋并用氯仿萃取，用稀鹽酸溶液洗滌有機(jī)相。有機(jī)相蒸發(fā)至干，剩余物用含三當(dāng)量(4S，5R)-N-叔丁氧羰基-2，2-二甲基-4-苯基-5-噁唑烷羰酸，3當(dāng)量二環(huán)己基碳化二亞胺和0.2當(dāng)量N，N-二甲基氨基吡啶的甲苯溶液在室溫處理24小時(shí)。反應(yīng)混合物用水洗滌，有機(jī)相在真空下蒸發(fā)至干，剩余物溶于甲醇，并用一當(dāng)量對(duì)甲苯磺酸處理48小時(shí)，之后用水稀釋，并用乙酸乙酯萃取。有機(jī)相在真空下蒸發(fā)，剩余物溶于1∶1的乙酸/乙酸乙酯混合物200ml中，并用11當(dāng)量鋅粉在30℃處理3小時(shí)。濾除固體物質(zhì)，溶液用水稀釋，用乙酸乙酯萃取并用硅膠色譜純化，用1∶4乙酸乙酯/己烷混合物洗脫。得到512mg產(chǎn)物(1a)，M+為m/z807。實(shí)施例9制備7，9-二(三乙基甲硅烷基)-C-斷-10-脫乙?；鶟{果赤霉素III向(5)(200mg，0.37mmol)在無水二甲基甲酰胺(DMF)(5ml)中的溶液中加入咪唑(75mg，1.11mmol，3eq.mol)和三乙基甲硅烷基氯(TES)(186ml，167.3mg，1.11mmol，3eq.mol)，反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?0分鐘。用TLC檢測(cè)反應(yīng)(3∶7己烷-乙酸乙酯，起始物的Rf為0.10，產(chǎn)物的Rf為0.80)。加入水和CeliteR終止反應(yīng)，過濾沉淀并用水洗滌以除去DMF，然后用CHCl3洗滌以取出產(chǎn)物。用柱色譜(9∶1己烷/乙酸乙酯洗脫硅烷醇，6∶4己烷/乙酸乙酯洗脫出產(chǎn)物)純化，得到146mg標(biāo)題化合物(51％)。實(shí)施例10制備13-[(2R，3S)-3-苯基-2-羥基-3-叔丁氧羰基氨基-丙酰基]-C-斷-10-脫乙?；鶟{果赤霉素III(5a，R1＝Ph，R2＝tBuO)。
向?qū)嵤├?的產(chǎn)物(126mg，0.16mmol)在無水甲苯(5ml)中的溶液中加入67.5mg二環(huán)己基碳化二亞胺(0.327mmol，2mol.eq.)，105mg(4S，5R)-N-Boc-2-(2，4-二甲氧苯基)-4-苯基-5-噁唑烷羧酸(0.327mmol，2mol.eq.)和5mg4-二甲基氨基吡啶?；旌衔镌?0℃加熱24小時(shí)，然后用飽和NaHCO3水溶液和乙酸乙酯稀釋。剩余物用柱色譜純化(8∶2己烷-乙酸乙酯)得到175mg 13-酯(95％)。剩余物用50ml甲醇/HCl(0.01％)溶解，且反應(yīng)混合物在室溫保留1小時(shí)。溶液堿化至pH5，并在真空下濃縮至于。剩余物用硅膠柱色譜純化，98∶2二氯甲烷-甲醇混合物洗脫。用乙酸乙酯結(jié)晶后，得到85mg標(biāo)題化合物。實(shí)施例11制備13-[(2R，3S)-3-異丁基-2-羥基-3-己酰氨基-丙?；鵠-C-斷-10-脫乙酰基漿果赤霉素III(5a，R1＝Ph，R2＝戊基)。
向?qū)嵤├?的產(chǎn)物(126mg，0.16mmol)在無水甲苯(5ml)中的溶液中加入67.5mg二環(huán)己基碳化二亞胺(0.327mmol，2mol.eq.)，140mg(4S，5R)-N-己酰基-2-(2，4-二甲氧苯基)-4-異丁基-5-噁唑烷羧酸(0.327mmol，2mol.eq )和5mg4-二甲基氨基吡啶?；旌衔镌?0℃加熱24小時(shí)，然后用飽和NaHCO3水溶液和乙酸乙酯稀釋。剩余物用柱色譜純化(8∶2己烷-乙酸乙酯)得到175mg 13-酯(95％)。剩余物用50ml甲醇/HCl(0.01％)溶解，且反應(yīng)混合物在室溫保留1小時(shí)。溶液堿化至pH5，并在真空下濃縮至干。剩余物用硅膠柱色譜純化，用98∶2二氯甲烷-甲醇混合物洗脫，用乙酸乙酯結(jié)晶后，得到88mg標(biāo)題化合物。
權(quán)利要求
1.一種作為中間體的通式(2)化合物 其中當(dāng)11，12位之間存在烯屬雙鍵時(shí)，R3是氫，R4和R5是羥基，C2-C8酰氧基，烷基甲硅烷氧基或2，2，2-三氯乙氧羰基氧基；當(dāng)11，12位之間不存在烯屬雙鍵時(shí)，12-位的甲基是α-取向的，R4是氫原子，R3和R5是羥基，C2-C8酰氧基，烷基甲硅烷氧基或2，2，-三氯乙氧羰基氧基。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的衍生物,它通過氧化和立體選擇性還原10－脫乙酰基漿果赤霉素Ⅲ,然后用不同取代的異絲氨酸鏈酯化制備紫杉醇類似物而得到。本發(fā)明的產(chǎn)物具有細(xì)胞毒性和抗腫瘤活性,且在適當(dāng)配制時(shí)可通過注射和/或口服給藥。
文檔編號(hào)C07D305/14GK1332163SQ0012905
公開日2002年1月23日 申請(qǐng)日期2000年9月29日 優(yōu)先權(quán)日1994年7月26日
發(fā)明者E·博姆巴德利, P·德貝里斯, B·加貝塔 申請(qǐng)人:因迪納有限公司