專利名稱：含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明的示范性實(shí)施方案涉及含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物及其制備 方法。
背景技術(shù)：
為了實(shí)施藥物的靜脈給藥，已經(jīng)研究了使用生物可降解聚合物的亞微米顆粒藥物 遞送體系(submicronic particulate drug delivery systems) 近來，己經(jīng) 艮道了使用 生物可降解聚合物的納米粒子體系和聚合膠束(polymeric micelle)體系是有用的技術(shù)體 系，其可以改變藥物的體內(nèi)分布以降低不良副作用，并可以提供改善的功效。此外，因?yàn)檫@ 樣的體系使靶向藥物遞送成為可能，它們可以實(shí)現(xiàn)對靶器官、靶組織或靶細(xì)胞的藥物控制 釋放。事實(shí)上，已知這樣的體系具有優(yōu)異的與體液的相容性，并改善難溶藥物的溶解能力和 藥物的生物利用度。近來，已報(bào)道了通過將藥物化學(xué)鍵合到包含親水鏈段與疏水鏈段的嵌段共聚物上 來制備嵌段共聚物膠束的方法。該嵌段共聚物是由親水鏈段(A)和疏水鏈段(B)聚合而得 到的A-B型二嵌段共聚物。在上述嵌段共聚物中，使用聚氧化乙烯作為親水鏈段(A)，并使 用聚氨基酸或疏水基團(tuán)鍵合的聚氨基酸作為疏水鏈段(B)。諸如阿霉素或吲哚美辛的藥物 可以被物理包封(encapsulated)在由所述嵌段共聚物形成的聚合膠束的核內(nèi)，所以該嵌 段共聚物膠束可用作藥物遞送體系。然而，由該嵌段共聚物形成的聚合膠束在體內(nèi)應(yīng)用的 情況下引起許多問題，這是因?yàn)槠洳荒茉隗w內(nèi)水解，而只能被酶降解，具有不良的生物相容 性，并且引起免疫反應(yīng)等等。因此，已做了很多嘗試以開發(fā)具有改善的生物可降解性和生物相容性的核_殼型 藥物遞送體系。例如，本領(lǐng)域技術(shù)人員已知包含聚亞烷基二醇作為親水聚合物和聚乳酸作為疏水 聚合物的二嵌段或多嵌段共聚物。更具體地，將丙烯酸衍生物與這樣的二嵌段或多嵌段共 聚物的端基鍵合以形成共聚物。使所得共聚物交聯(lián)以穩(wěn)定該聚合膠束。然而，制備這樣的 二嵌段或多嵌段共聚物的方法難以將交聯(lián)劑引入聚合物的A-B或A-B-A型二嵌段或三嵌段 共聚物的疏水鏈段，以通過交聯(lián)形成穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。此外，因?yàn)樵谏鲜龇椒ㄖ惺褂玫慕宦?lián)劑迄今 為止尚未應(yīng)用于人體，該交聯(lián)劑可能無法確保在人體內(nèi)的安全性。進(jìn)一步地，該交聯(lián)聚合物 不能在體內(nèi)降解，因此不能應(yīng)用于體內(nèi)用途。作為另一個(gè)例子，已知所謂的溶劑蒸發(fā)工藝作為制備聚合物膠束組合物的方法。 溶劑蒸發(fā)工藝可以作為大規(guī)模工藝應(yīng)用，通過該工藝可以將難溶于水的紫杉烷衍生物包封 在兩親嵌段共聚物膠束內(nèi)。然而，溶劑蒸發(fā)工藝的應(yīng)用在溶劑選擇方面受到限制，因?yàn)樵撊?劑應(yīng)該是紫杉烷和聚合物均可溶于其中的有機(jī)溶劑，并且應(yīng)該具有足夠低的沸點(diǎn)以至于其 可以通過蒸發(fā)而揮發(fā)。此外，該有機(jī)溶劑應(yīng)該是藥學(xué)上可接受的溶劑，其殘留對人體不具有 不良作用。進(jìn)一步地，溶劑蒸發(fā)工藝基本包括使試劑長時(shí)間暴露于高溫下的步驟，因此其可 能引起諸如藥學(xué)活性成分的降解或藥理效果的降低的問題。

發(fā)明內(nèi)容
技術(shù)問題因此，為了解決與相關(guān)領(lǐng)域有關(guān)的上述問題，提供了具有改善的穩(wěn)定性的含紫杉 烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物。還提供了通過簡化步驟在短時(shí)間內(nèi)制備含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物 的方法。技術(shù)方案一方面，提供了含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物，其包含紫杉烷、含有親水 嵌段和疏水嵌段的兩親嵌段共聚物，和重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑。另一方面，提供了制備含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物的方法，其包括 (a)將紫杉烷和兩親嵌段共聚物溶解在有機(jī)溶劑中；以及(b)向其中加入含有重量摩爾滲 透壓濃度調(diào)節(jié)劑的水溶液以形成聚合膠束。有益效果根據(jù)本文公開的一實(shí)施方案，含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物具有優(yōu)異的 穩(wěn)定性，所以其能夠防止藥物的快速釋放。此外，根據(jù)本文公開的另一實(shí)施方案，該組合物 的制備方法不需要除去有機(jī)溶劑的單獨(dú)步驟，由此使期望的藥理效果達(dá)到最佳，并減少制 備步驟數(shù)和制備時(shí)間。附圖簡述現(xiàn)在參考在以下給出的含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物及其制備方法的 某些示范性實(shí)施方案給出詳細(xì)描述，這些示范性實(shí)施方案僅僅通過例證方式給出因而并非 限制性的，并由


，其中圖1是制備例1中得到的二嵌段共聚物[mPEG-PLA]的1H NMR譜；并且圖2是制備例2中得到的二嵌段共聚物[mPEG-PLGA]的1H NMR譜。發(fā)明實(shí)施方式以下對各種實(shí)施方案做出詳細(xì)說明，在附圖中例證并在下文中描述其實(shí)施例。盡 管結(jié)合示范性實(shí)施方案對本發(fā)明進(jìn)行描述，但應(yīng)當(dāng)理解本說明書并非意圖為限制性的。根據(jù)本文公開的一實(shí)施方案，含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物可以包含紫 杉烷、含有親水嵌段和疏水嵌段的兩親嵌段共聚物，以及重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑。該含 紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物具有優(yōu)異的生物可降解性和生物相容性，并且提供具 有相對改善的穩(wěn)定性的聚合膠束結(jié)構(gòu)。在根據(jù)本文公開的一實(shí)施方案的組合物中，以該膠束組合物的總干重為基礎(chǔ)，紫 杉烷的含量可以是0. l_30wt%，并且含有親水嵌段和疏水嵌段的兩親嵌段共聚物的含量可 以是20-98wt%。此外，重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑的含量可以是基于該組合物總干重的 0. l-50wt%。紫杉烷可以是無水或水合狀態(tài)、或者無定形或結(jié)晶狀態(tài)。此外，紫杉烷可以是從天 然植物中提取的，或者可以是通過半合成或植物細(xì)胞培養(yǎng)得到的。在一實(shí)施方案中，紫杉烷 在該組合物中的含量可以是基于該組合物總干重的0. l-30wt%，特別是0. 5-15wt%，更特 別是 l-7wt%。
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在一實(shí)施方案中，紫杉烷包括紫杉醇、多西紫杉醇、7-表紫杉醇、t-乙?；仙即?(t-acetyl paclitaxel) UO-脫乙?；仙即?、10-脫乙酰基_7_表紫杉醇、7_木糖基紫杉 醇(7-xylosylpaclitaxel)、10_ 脫乙?；?~7~ 戊二酰紫杉醇(lO-desacetyl-7-glutarylp aclitaxel)、7_N，N- 二甲基甘氨酰紫杉醇(7_N，N-dimethylglycylpaclitaxel)、7_L_ 丙氨 酰紫杉醇(7-L-alanylpaclitaxel)或其混合物。具體地，可以使用紫杉醇或多西紫杉醇。在一實(shí)施方案中，該兩親嵌段共聚物可以包含以A-B、A-B-A或B_A_B結(jié)構(gòu)的形式 相互連接的親水嵌段(A)和疏水嵌段(B)。此外，該兩親嵌段共聚物可以在其水溶液狀態(tài)下 形成核_殼型聚合膠束，其中所述疏水嵌段形成核而所述親水嵌段形成殼。在一實(shí)施方案中，該兩親嵌段共聚物的親水嵌段(A)可以是聚乙二醇(PEG)或單 甲氧基聚乙二醇(mPEG)。具體地，其可以是mPEG。該親水嵌段(A)的重均分子量可以為 500-20, 000道爾頓，特別是1，000-5, 000道爾頓，更特別是1，000-2, 500道爾頓。該兩親嵌段共聚物的疏水嵌段(B)可以是非水溶性的生物可降解聚合物。在一實(shí) 施方案中，疏水嵌段(B)可以是聚乳酸(PLA)或聚乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)。在另一實(shí) 施方案中，該疏水嵌段(B)的重均分子量可以為500-20，000道爾頓，特別是1，000-5, 000 道爾頓，更特別地是1，000-2，500道爾頓。可以用脂肪酸基團(tuán)保護(hù)該疏水嵌段(B)的端羥 基，所述脂肪酸基團(tuán)的具體實(shí)例包括乙酸酯基、丙酸酯基、丁酸酯基、硬脂酸酯基、棕櫚酸酯 基等等。包含親水嵌段(A)和疏水嵌段(B)的兩親嵌段共聚物在該組合物中的含量可以是 基于該組合物的總干重的20-98wt%，特別是65-98wt%，更特別是80_98wt%。在另一實(shí)施方案中，親水嵌段(A)和疏水嵌段(B)可以以這樣的比例存在于兩親 嵌段共聚物中使得該共聚物包含基于共聚物重量的40-70wt%，特別是50-60wt%的親水 嵌段(A)。當(dāng)親水嵌段(A)的比例低于40%時(shí)，該聚合物具有不希望的低水溶性，導(dǎo)致難以 形成膠束。另一方面，當(dāng)親水嵌段(A)的比例高于70%時(shí)，該聚合物變得過于親水以至于不 能形成穩(wěn)定的聚合膠束，因此該組合物可能無法用作溶解紫杉烷的組合物。重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑的作用是改善含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合 物的穩(wěn)定性。具體地，重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑顯著地改善該組合物在其水溶液狀態(tài)下 的穩(wěn)定性。重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑的一種可能的作用機(jī)理如下。藥物在聚合膠束結(jié)構(gòu)中的包封程度與由聚合物的疏水嵌段在水溶液中形成的核 的部分成比例。此外，聚合膠束的穩(wěn)定性取決于該聚合膠束在水溶液中形成的動態(tài)平衡狀 態(tài)，即取決于聚合膠束狀態(tài)和溶解在水中的單聚體(unimer)狀態(tài)之間的平衡常數(shù)。盡管可以將大量的難溶藥物包封在聚合膠束結(jié)構(gòu)內(nèi)，但在包封藥物時(shí)，該聚合物 膠束的親水嵌段可能被大量的水分子包圍，因此水分子與親水嵌段之間的相互作用可能弱 化膠束的疏水嵌段之間的疏水作用，由此破壞膠束在動態(tài)平衡狀態(tài)下的穩(wěn)定。添加重量摩 爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑引起重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑與水之間的靜電吸引力，導(dǎo)致水分子 從該聚合膠束的親水嵌段脫離。因此，疏水嵌段之間的疏水作用(否則疏水嵌段會參與松 散的相互作用)相對增強(qiáng)，以致于可以形成穩(wěn)定的膠束結(jié)構(gòu)。此外，根據(jù)本文公開的一實(shí)施 方案，在組合物的制備期間不除去重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑，而將其保留在最終組合物 中。通過由重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑實(shí)現(xiàn)的穩(wěn)定效果，該含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠 束組合物具有優(yōu)異的穩(wěn)定性。該重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑是藥學(xué)上可接受的，并且可以選自任何重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑，只要其與血液接觸時(shí)不引起溶血。在一實(shí)施方案中，該重量摩爾滲透壓濃 度調(diào)節(jié)劑可以是電解質(zhì)，特別是無機(jī)鹽。優(yōu)選地，該重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑可以是選 自氯化鈉、氯化鈣、硫酸鈉和氯化鎂的至少一種。更具體地，該重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑 可以是氯化鈉或氯化鈣。特別地，該重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑可以是氯化鈉。在另一實(shí) 施方案中，該重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑在該組合物中的含量可以是基于組合物總干重的 0. l_50wt%，特別是 0. 5-20wt%，更特別是 I-IOwt %。另一方面，提供了包含該含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物的凍干組合物。該凍干組合物可以進(jìn)一步包含凍干助劑。在一實(shí)施方案中，該凍干助劑可以是選 自乳糖、甘露醇、山梨醇和蔗糖的至少一種。加入凍干助劑用于使凍干組合物維持餅狀。 此外，凍干助劑用于在凍干組合物復(fù)原期間，協(xié)助兩親嵌段共聚物膠束組合物在短時(shí)間內(nèi) 均勻地形成。在另一實(shí)施方案中，凍干助劑的用量可以是基于該凍干組合物的總干重的 l-90wt%，更特別是 10-60wt%。在一實(shí)施方案中，當(dāng)凍干組合物在水溶液中復(fù)原時(shí)，其可以包含基于該組合物總 干重的0. l_15wt%的紫杉烷。此外，在復(fù)原時(shí)，兩親嵌段共聚物可以以10-150mg/mL的濃度 存在，重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑可以以5-30mg/mL(特別是10-20mg/mL)的濃度存在，而 凍干助劑可以以1-lOOmg/mL的濃度存在。在另一實(shí)施方案中，凍干組合物在水溶液中的可 控膠束粒度可以在l-400nm，更特別在5-200nm的范圍內(nèi)，這取決于該共聚物的分子量。在一實(shí)施方案中，可以將含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物配制成水溶液、 散劑或片劑的形式。在另一實(shí)施方案中，該組合物可以是注射劑。例如，可以用注射用蒸餾 水、0. 9%生理鹽水、5%葡萄糖水溶液等復(fù)原該組合物。當(dāng)復(fù)原該組合物時(shí)，至少95%的紫 杉烷穩(wěn)定12小時(shí)或12小時(shí)以上而不沉淀。另一方面，提供了制備含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物的方法。根據(jù)本文公開的一實(shí)施方案，制備該含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物的方 法可以包括(a)將紫杉烷和兩親嵌段共聚物溶解于有機(jī)溶劑中；并且(b)向其中加入含有重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑的水溶液以形成聚合膠束。在另一實(shí)施方案中，該方法可以在步驟(b)之后進(jìn)一步包括(c)向聚合膠束中加入凍干助劑；并且(d)實(shí)施凍干。當(dāng)通過使用有機(jī)溶劑經(jīng)溶劑蒸發(fā)工藝用膠束組合物包封紫杉烷時(shí)，在組合物在注 射用水中復(fù)原并保持在室溫下之后，在含紫杉烷的膠束組合物中可能發(fā)生快速藥物沉淀。 這是因?yàn)樵谌軇┱舭l(fā)工藝中使用的有機(jī)溶劑殘留在組合物中。因此，根據(jù)本文公開方法的一實(shí)施方案，通過使用重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑和 最低量的有機(jī)溶劑可以防止藥物沉淀。為了將仍殘留在最終組合物中的有機(jī)溶劑的量降至 最低，需要將組合物在60°C或60°C以上的高溫下減壓干燥至少12小時(shí)。但是，這樣的減壓 高溫干燥條件可能引起藥物的降解。因此，根據(jù)本文公開的一實(shí)施方案，制備含紫杉烷的兩 親嵌段共聚物膠束組合物的方法使用最低量的有機(jī)溶劑，使得最終組合物可以直接進(jìn)行凍 干，而不需要除去有機(jī)溶劑的單獨(dú)步驟。根據(jù)本文公開的一實(shí)施方案，包含重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑并使用最低量的有
7機(jī)溶劑的含紫杉烷兩親嵌段共聚物膠束組合物可以提供凍干組合物，當(dāng)將該凍干組合物復(fù) 原成注射劑時(shí)，在12小時(shí)或12小時(shí)以上不發(fā)生紫杉烷的沉淀。在一實(shí)施方案中，步驟(a)的有機(jī)溶劑可以包含選自丙酮、乙醇、甲醇、乙酸乙酯、 乙腈、二氯甲烷、氯仿、乙酸和二氧雜環(huán)己烷的至少一種。該有機(jī)溶劑的用量可以為基于所 得膠束組合物重量的0. 5-30wt%，特別是0. 5-15wt%，更特別是I-IOwt%。當(dāng)有機(jī)溶劑的 用量低于0.5wt%時(shí)，可能難以溶解藥物。另一方面，當(dāng)有機(jī)溶劑的用量高于30wt%時(shí)，在 凍干組合物復(fù)原時(shí)可能發(fā)生藥物沉淀。在步驟(b)中，可以將含有重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑的水溶液的重量摩爾滲透 壓濃度調(diào)節(jié)為 30-15，000m0sm/kg,特別為 100-5，000m0sm/kg,更特別為 200-2，500m0sm/ kg。當(dāng)該水溶液的重量摩爾滲透壓濃度低于30m0sm/kg時(shí)，在組合物的制備期間可能發(fā)生 藥物沉淀。另一方面，當(dāng)該水溶液的重量摩爾滲透壓濃度高于15，000m0sm/kg時(shí)，該聚合物 中可能發(fā)生相分離。在一示范性實(shí)施方案中，該重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑可以是選自氯 化鈉、氯化鈣、硫酸鈉和氯化鎂的至少一種。此外，該重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑的用量可 以是基于膠束組合物總干重的0. l-50wt%。步驟(b)可以在25°C或25°C以下的溫度下實(shí) 施。在一實(shí)施方案中，制備含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物的方法可以進(jìn)一步 包括在實(shí)施凍干的步驟(d)之前，使用滅菌過濾器對步驟(C)中得到的聚合膠束水溶液進(jìn) 行滅菌。根據(jù)本文公開的一實(shí)施方案，含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物可以以水溶 液形式或散劑形式口服給藥或腸胃外給藥。腸胃外給藥包括通過血管內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、腹膜 內(nèi)、鼻、直腸、眼、肺或其它途徑給藥?？诜o藥包括以片劑或膠囊劑，或水溶液本身的形式 給藥。此外，根據(jù)本文公開的一實(shí)施方案，凍干組合物幾乎不引起多西紫杉醇在復(fù)原后 的組合物中的濃度隨時(shí)間的變化。然而，當(dāng)不添加重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑時(shí)，多西紫杉 醇的濃度在一小時(shí)后下降。下列實(shí)施例并非意圖為限制性的。制備例1 單甲氧基聚乙二醇-聚丙交酯(mPEG-PLA)嵌段共聚物(A_B型)的合 成首先，將5. Og的單甲氧基聚乙二醇(數(shù)均分子量2，000道爾頓)引入IOOmL的 二頸圓底燒瓶中，并且在減壓(ImmHg)和130°C下加熱3-4小時(shí)以從中除去水。接下來， 用氮?dú)獯祾咴摕?，并使用注射器向其中加入基于D-丙交酯和L-丙交酯重量的0. Iwt% (10. 13mg,25mmol)的辛酸亞錫(Sn (Oct) 2)作為反應(yīng)催化劑。將反應(yīng)混合物攪拌30分鐘， 然后使其在130°C下減壓(ImmHg) 1小時(shí)以除去溶解該催化劑的溶劑(甲苯)。然后，向其 中加入10. 13g的純化丙交酯，并且在130°C下將所得混合物加熱18小時(shí)。在加熱后，將所 得聚合物溶解在二氯甲烷中，并將其加入乙醚中以引起聚合物的沉淀。將所得的聚合物在 真空爐中干燥48小時(shí)。該共聚物單甲氧基聚乙二醇-聚丙交酯(mPEG-PLA)的數(shù)均分子量為2，000-1, 765 道爾頓。通過1H-NMR實(shí)施的該共聚物的分析揭示該共聚物是A-B型二嵌段共聚物(見圖 1)。
制各例2 單甲氧,某聚乙二醇-聚乳酸-乙醇酸共聚物(mPEG-PLGA)嵌段共聚物 (A-B型)的合成以與制備例1中相同的方式，通過在作為催化劑的辛酸亞錫的存在下，使單甲氧 基聚乙二醇(數(shù)均分子量5，000道爾頓)、丙交酯和乙交酯在120°C下反應(yīng)12小時(shí)而得到 嵌段共聚物。該嵌段共聚物單甲氧基聚乙二醇-聚乳酸-乙醇酸共聚物(mPEG-PLGA)的數(shù)均分 子量為5，000-4，000道爾頓，并且是A-B型共聚物。通過1H-NMR實(shí)施的該共聚物的分析揭 示該共聚物是A-B型二嵌段共聚物(見圖2)。實(shí)施仿ι 丨 ι -.^umm^mm^ mPEG-PLA ^^mmmw^mm^首先，在60°C下將760mg的制備例1中得到的兩親嵌段共聚物mPEG-PLA(數(shù)均分 子量2，000-1, 765道爾頓)完全溶解在0. 2mL的乙醇中以提供包含該共聚物的澄清的乙 醇溶液。將該乙醇溶液冷卻至25°C，并向其中加入20mg的多西紫杉醇，并攪拌所得溶液直 至多西紫杉醇完全溶解。接下來，在分別的容器中準(zhǔn)備各自含有0. 9wt %和1. Swt %的氯化鈉并具有 300m0sm/kg和600m0sm/kg的重量摩爾滲透壓濃度的水溶液。通過使用市售滲透計(jì) (Gonotech GmbH, 0SM0MAT030)測量該重量摩爾滲透壓濃度。將4mL的每一水溶液加入該 包含共聚物的乙醇溶液中，并將所得混合物在40°C下攪拌10分鐘以形成聚合膠束水溶液。然后，將IOOmg的D-甘露醇溶解在每一溶液中，通過孔徑為200nm的過濾器過濾 所得的溶液以除去未溶解的多西紫杉醇，然后凍干。使凍干的組合物經(jīng)歷以下的液相色譜以測定多西紫杉醇的含量。此外，通過動態(tài) 光散射(DLS)法測量粒度。結(jié)果顯示在下表1中。表1
液相餼譜1)色譜柱長度為250mm且內(nèi)徑為4. 6mm的不銹鋼柱，用粒徑為5μπι且孔徑為 300人的包覆有五氟苯基(pentafluorophenyΙ-coated)的顆粒填充。2)流動相乙腈甲醇水=26 32 420
3)流速1· 5mL/min4)載樣量20 μ L5)檢測器:UV吸收分光光度計(jì)(測量波長232nm)^mm 2. ^m^mmmmm HIPEG-PLA mm^mmmm^mm^r首先，在60°C下將IOOmg的制備例1中得到的兩親嵌段共聚物mPEG_PLA(數(shù)均分 子量2，000-1, 765道爾頓)完全溶解在0. ImL的乙醇中以提供包含該共聚物的澄清的乙 醇溶液。將該乙醇溶液冷卻至25°C，并向其中加入20mg的紫杉醇，并攪拌所得溶液直至紫 杉醇完全溶解。接下來，在分別的容器中準(zhǔn)備各自含有0. 9wt %和1. Swt %的氯化鈣并具有 230m0sm/kg和460m0sm/kg的重量摩爾滲透壓濃度的水溶液。將4mL的每一水溶液加入該 包含共聚物的乙醇溶液中，并將所得混合物在40°C下攪拌10分鐘以形成聚合膠束水溶液。然后，將39mg的D-甘露醇溶解在每一溶液中，然后通過孔徑為200nm的過濾器過 濾所得的溶液以除去未溶解的紫杉醇，然后凍干。使凍干的組合物經(jīng)歷如實(shí)施例1所述的液相色譜以測定紫杉醇的含量。此外，通 過DLS法測量粒度。結(jié)果顯示在下表2中。[表 2]
￥施例3 含有氯北#1和多西紫杉醇的mPEG-PLGA嵌段共勿膠束會目合物的制各首先，在50°C下將760mg的制備例2中得到的兩親嵌段共聚物mPEG-PLGA(數(shù)均分 子量5，000-4, 000道爾頓)完全溶解在0. 2mL的丙酮中以提供包含該共聚物的澄清的丙 酮溶液。將該丙酮溶液冷卻至25°C，并向其中加入40mg的多西紫杉醇，并攪拌所得溶液直
至多西紫杉醇完全溶解。接下來，將8mL的含有0. 9wt%的氯化鈉并具有300m0sm/kg的重量摩爾滲透壓濃 度的水溶液加入該包含共聚物并進(jìn)一步包含藥物的丙酮溶液中，并將所得混合物在25°C下 攪拌20分鐘以形成均勻溶液。一旦形成了均勻溶液，就將200mg的D-甘露醇溶解在該溶 液中以提供澄清的聚合膠束水溶液。最后，通過孔徑為200nm的過濾器過濾該聚合膠束水 溶液以除去未溶解的多西紫杉醇，然后凍干。使凍干的組合物經(jīng)歷如實(shí)施例1所描述的液相色譜以測定多西紫杉醇的含量。此 外，通過DLS法測量粒度。多西紫杉醇含量101. 3wt%。粒度35nm。t施徹丨4 含有氯北I丐和紫杉醇的mPEG-PLGA嵌段共勿膠束會目合物的制各首先，在50°C下將IOOmg的制備例2中得到的兩親嵌段共聚物mPEG_PLGA(數(shù)均分 子量5，000-4, 000道爾頓)完全溶解在0. 2mL的丙酮中以提供包含該共聚物的澄清的丙 酮溶液。將該丙酮溶液冷卻至25°C，并向其中加入40mg的紫杉醇，并攪拌所得溶液直至紫 杉醇完全溶解。接下來，將8mL的含有0. 9wt%的氯化鈣并具有230m0sm/kg的重量摩爾滲透壓濃 度的水溶液加入該包含共聚物并進(jìn)一步包含藥物的丙酮溶液中，并將所得混合物在25°C下 攪拌20分鐘以形成均勻溶液。一旦形成了均勻溶液，就將53mg的D-甘露醇溶解在該溶液 中以提供澄清的聚合膠束水溶液。最后，通過孔徑為200nm的過濾器過濾該聚合膠束水溶 液以除去未溶解的紫杉醇，然后凍干。使凍干的組合物經(jīng)歷高效液相色譜(HPLC)以測定多西紫杉醇的含量。此外，通過 DLS法測量粒度。多西紫杉醇含量101. Iwt %。粒度35nm。比較例1 不含無機(jī)鹽的mPEG-PLA嵌段共聚物膠束組合物的制備首先，在60°C下將760mg的制備例1中得到的兩親嵌段共聚物mPEG-PLA(數(shù)均分 子量2，000-1, 765道爾頓)完全溶解在0. 2mL的乙醇中以提供包含該共聚物的澄清的乙 醇溶液。將該乙醇溶液冷卻至25°C，并向其中加入20mg的多西紫杉醇，并攪拌所得溶液直 至多西紫杉醇完全溶解。接下來，將4mL的注射用蒸餾水(重量摩爾滲透壓濃度0m0sm/kg)加入包含該共 聚物的乙醇溶液中，并將所得混合物在40°C下攪拌10分鐘以形成均勻溶液。一旦形成了均 勻溶液，就將IOOmg的D-甘露醇溶解在該溶液中以提供澄清的聚合膠束水溶液。最后，通 過孔徑為200nm的過濾器過濾該聚合膠束水溶液以除去未溶解的多西紫杉醇，然后凍干。使凍干的組合物經(jīng)歷HPLC以測定多西紫杉醇的含量。此外，通過DLS法測量粒度。多西紫杉醇含量100. 3wt%。粒度l8nm。實(shí)驗(yàn)例1 穩(wěn)定性試驗(yàn)在水溶液在37°C下的穩(wěn)定性方面，將實(shí)施例1的包含氯化鈉的聚合膠束組合物與 比較例1的不含無機(jī)鹽的聚合膠束組合物相比較。
13
用注射用蒸餾水將實(shí)施例1和比較例1的凍干組合物各自稀釋至多西紫杉醇濃度 為lmg/mL。將每一稀釋溶液保持在37°C下，隨時(shí)間測量每一膠束結(jié)構(gòu)中所包含的多西紫杉 醇的濃度。結(jié)果顯示在下表3中。表3
從表3中的結(jié)果可以看出，實(shí)施例1的組合物即使在12小時(shí)后也不引起多西紫杉 醇的沉淀，而比較例1的組合物在12小時(shí)后顯示59%的多西紫杉醇沉淀量。從以上結(jié)果可 以看出，加入氯化鈉可以將膠束組合物的多西紫杉醇保持率提高約至少2倍。此外，還可以 看出較高的無機(jī)鹽與兩親嵌段共聚物的量的比例提供具有較高穩(wěn)定性的膠束組合物。參考示范性實(shí)施例給出詳細(xì)的描述。盡管如此，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解，可以在不 背離該含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物及其制備方法的原則和精神的情況下對這 些實(shí)施方案做出變化，該含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物及其制備方法的范圍由所 附權(quán)利要求及其等效物所限定。
1權(quán)利要求
含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物，其包含紫杉烷、含有親水嵌段(A)和疏水嵌段(B)的兩親嵌段共聚物，以及重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑。
2.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物包含 基于所述組合物總干重的0. l_30wt%的紫杉烷、20-98襯％的含有親水嵌段和疏水嵌段的 兩親嵌段共聚物，以及0. l_50wt%的重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑。
3.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述含有親水嵌段(A)和疏水嵌段(B)的兩親嵌 段共聚物是A-B、A-B-A或B-A-B型嵌段共聚物。
4.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述紫杉烷是紫杉醇、多西紫杉醇、7-表紫杉 醇、t-乙?；仙即?、10-脫乙?；仙即?、10-脫乙?；?7-表紫杉醇、7-木糖基紫杉醇、 10"脫乙?；?7-戊二酰紫杉醇、7-N，N- 二甲基甘氨酰紫杉醇、7-L-丙氨酰紫杉醇，或者其 混合物。
5.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述親水嵌段(A)具有500-20，000道爾頓的重均 分子量，并且所述疏水嵌段(B)具有500-20，000道爾頓的重均分子量。
6.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述親水嵌段(A)是聚乙二醇或單甲氧基聚乙二 醇，并且所述疏水嵌段(B)是聚乳酸(PLA)或聚乳酸和乙醇酸的共聚物(PLGA)。
7.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑是無機(jī)鹽。
8.如權(quán)利要求7所述的組合物，其中所述無機(jī)鹽是選自氯化鈉、氯化鈣、硫酸鈉和氯化 鎂的一種或多種。
9.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述兩親嵌段共聚物膠束組合物是進(jìn)一步包含凍 干助劑的凍干組合物。
10.如權(quán)利要求9所述的組合物，其中所述凍干組合物的特征在于當(dāng)用注射用蒸餾 水、0. 9%生理鹽水和5%葡萄糖水溶液復(fù)原所述組合物時(shí)，至少95%的紫杉烷穩(wěn)定12小時(shí) 而不沉淀。
11.如權(quán)利要求9所述的組合物，其中所述凍干助劑的用量是基于所述凍干組合物的 總干重的l_90wt%。
12.如權(quán)利要求9所述的組合物，其中所述凍干助劑是選自乳糖、甘露醇、山梨醇和蔗 糖的一種或多種。
13.制備含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物的方法，其包括將紫杉烷和兩親嵌段共聚物溶解在有機(jī)溶劑中以提供聚合物溶液；并且向所述聚合物溶液中加入包含重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑的水溶液以形成聚合膠束。
14.如權(quán)利要求13所述的方法，其在向所述聚合物溶液中加入包含重量摩爾滲透壓濃 度調(diào)節(jié)劑的水溶液以形成聚合膠束之后，進(jìn)一步包括向所述聚合膠束中加入凍干助劑；并且實(shí)施凍干。
15.如權(quán)利要求13所述的方法，其中所述有機(jī)溶劑是選自丙酮、乙醇、甲醇、乙酸乙酯、 乙腈、二氯甲烷、氯仿、乙酸和二氧雜環(huán)己烷的一種或多種。
16.如權(quán)利要求13所述的方法，其中所述有機(jī)溶劑的用量是基于所述膠束組合物重量 的 0. 5-30wt%。
17.如權(quán)利要求13所述的方法，其中所述水溶液具有30-15，OOOmOsm/kg的重量摩爾滲透壓濃度。
18.如權(quán)利要求13所述的方法，其中所述重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑是選自氯化鈉、 氯化鈣、硫酸鈉和氯化鎂的一種或多種。
全文摘要
記載了含紫杉烷的兩親嵌段共聚物膠束組合物，其包含紫杉烷、含有親水嵌段和疏水嵌段的兩親嵌段共聚物，以及重量摩爾滲透壓濃度調(diào)節(jié)劑。還記載了制備所述組合物的方法。所述組合物具有優(yōu)異的穩(wěn)定性，所以其可以防止藥物的快速釋放，并且可以改善期望的藥理效果。此外，所述方法使得所述組合物的高效制備成為可能。
文檔編號A61K31/785GK101910274SQ200880123622
公開日2010年12月8日 申請日期2008年10月13日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月31日
發(fā)明者徐敏孝, 李思元 申請人:株式會社三養(yǎng)社